RU2552529C1

RU2552529C1 - Vasopressor agent

Info

Publication number: RU2552529C1
Application number: RU2013152926/04A
Authority: RU
Inventors: Марина Владимировна Филимонова; Людмила Ивановна Шевченко; Виктория Михайловна Макарчук; Екатерина Александровна Чеснакова; Анатолий Фёдорович Цыб
Priority date: 2013-11-29
Filing date: 2013-11-29
Publication date: 2015-06-10

Abstract

FIELD: chemistry.

SUBSTANCE: invention refers to N, S-substituted isothiourea derivatives of the general formula (1) in the form of salts with pharmacologically acceptable acids as a NOS-inhibitory and vasopressor agent

wherein: n=1, 3, i.e. an acyl substitute represents cyclobutanoyl or cyclohexanoyl; R represents an alkyl group: C₂H₅, i-C₃H₇; HX represents a pharmacologically acceptable inorganic or organic acid: HCl, HBr, HI, hydrogen methyl sulphate, oxalic, succinic acids, etc.

EFFECT: extending the range of products of the vasopressor action.

6 cl, 7 tbl, 10 ex

Description

Изобретение относится к области удовлетворения жизненных потребностей человека, а именно к лекарственным средствам, которые могут найти применение в фармацевтической промышленности и медицине.The invention relates to the field of meeting the vital needs of a person, namely to medicines that can find application in the pharmaceutical industry and medicine.

Разработка новых эффективных средств и методов лечения гипотонии (состояний с пониженным артериальным давлением) остается актуальной задачей. Например, в странах Северной Америки только септический шок ежегодно развивается у 700 тысяч человек, что, несмотря на высокий уровень медицины этого континента, приводит к летальному исходу 30-50% таких больных (Ward Р.А., Bosmann М.A historical perspective on sepsis // Am. J. Pathol. 2012. v.181, N.1. p.2-7). Сложности терапии таких состояний связаны не только с их тяжестью, но и с недостатками имеющихся лекарственных средств.The development of new effective means and methods of treating hypotension (conditions with low blood pressure) remains an urgent task. For example, in North America, only septic shock develops annually in 700 thousand people, which, despite the high level of medicine on this continent, leads to the death of 30-50% of such patients (Ward R.A., Bosmann M.A. historical perspective on sepsis // Am. J. Pathol. 2012. v.181, N.1. p. 2-7). The difficulties in the treatment of such conditions are associated not only with their severity, but also with the shortcomings of available drugs.

В лечении гипотонии важную роль играют препараты, влияющие на артериальное давление путем повышения тонуса сосудов - вазопрессорные средства. В качестве таких препаратов в настоящее время применяются α₁-адреномиметики (норэпинефрин, допамин, эпинефрин, фенилэфрин, мидодрин и др.) и пептидные вазоконстрикторы (вазопрессин, терлипрессин, ангиотензин, октапрессин и др.) (Машковский М.Д. Лекарственные средства: в 2 т., 14-е изд. / М.: Новая Волна, 2002; Brunton L., Chabner В., Knollman В. Goodman & Gilman′s The Pharmacological Basis of Therapeutics / 12th ed. NY: McGraw Hill Professional, 2010, 1808 pp).In the treatment of hypotension, an important role is played by drugs that affect blood pressure by increasing vascular tone - vasopressor drugs. Α ₁ -adrenomimetics (norepinephrine, dopamine, epinephrine, phenylephrine, midodrin, etc.) and peptide vasoconstrictors (vasopressin, terlipressin, angiotensin, octapressin, etc.) are currently used as such drugs (Mashkovsky M.D. 2 vol., 14th ed. / M .: New Wave, 2002; Brunton L., Chabner B., Knollman W. Goodman & Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics / 12th ed. NY: McGraw Hill Professional, 2010, 1808 pp).

Общими недостатками этих препаратов является малая длительность действия и наличие у многих из них, особенно у адреномиметиков, побочных эффектов. Так, при применении адреномиметиков, наряду с повышением сосудистого тонуса, возможно развитие аритмий и метаболического ацидоза, возбуждение ЦНС, а в случае пептидных вазопрессоров - углубление ишемии миокарда (Delmas A., Leone М., Rousseau S. et al. Clinical review: Vasopressin and terlipressin in septic shock patients // Crit. Care. 2005. v.9, N.2. p.212-22; Boerma E.C., Ince C. The role of vasoactive agents in the resuscitation of microvascular perfusion and tissue oxygenation in critically ill patients // Intensive Care Med. 2010. v.36, N 12. p.2004-18; Ferquson-Myrthil N. Vasopressor use in adult patients // Cardiol. Rev. 2012. v.20, N.3. p.153-58).The common disadvantages of these drugs are the short duration of action and the presence of many side effects in many of them, especially in adrenergic agonists. Thus, with the use of adrenomimetics, along with an increase in vascular tone, the development of arrhythmias and metabolic acidosis, central nervous system excitation, and in the case of peptide vasopressors, deepening of myocardial ischemia (Delmas A., Leone M., Rousseau S. et al. Clinical review: Vasopressin and terlipressin in septic shock patients // Crit. Care. 2005. v.9, N.2. p. 212-22; Boerma EC, Ince C. The role of vasoactive agents in the resuscitation of microvascular perfusion and tissue oxygenation in critically ill patients // Intensive Care Med. 2010. v. 36, N 12. p. 2004-18; Ferquson-Myrthil N. Vasopressor use in adult patients // Cardiol. Rev. 2012. v.20, N.3. p .153-58).

По фармакологическим свойствам прототипом является препарат мезатон (фенилэфрин) - гидрохлорид 1-(м-оксифенил)-2-метиламиноэтанола (Машковский М.Д. Лекарственные средства: в 2 т., 14-е изд. М.: Новая Волна, 2002, T.1. С.233-234). Он вызывает сужение артериол и повышает артериальное давление, избирательно воздействуя на α₁-адренорецепторы.According to pharmacological properties, the prototype is the drug mesatone (phenylephrine) - 1- (m-hydroxyphenyl) -2-methylaminoethanol hydrochloride (Mashkovsky M.D. T.1. S.233-234). It causes a narrowing of arterioles and increases blood pressure, selectively acting on α ₁ -adrenoreceptors.

Недостатком мезатона, как и других вазопрессоров, является малая (не более 20 минут) продолжительность действия, что снижает его терапевтическую эффективность и значительно ограничивает возможность его применения, например, при оказании экстренной, неотложной помощи на догоспитальном этапе, а также в лечении тяжелых шоковых состояний (Авакян О.М. Фармакологическая регуляция функции адренорецепторов. / М.: Медицина, 1988. 256 с.; Волков В.Е., Волков С.В. Шок. Сепсис. Полиорганная дисфункция. / Чебоксары: ПБОЮЛ Наумов Л.А., 2009. 348 с.).The disadvantage of mesatone, like other vasopressors, is the short duration (not more than 20 minutes), which reduces its therapeutic effectiveness and significantly limits the possibility of its use, for example, in the provision of emergency, emergency care at the prehospital stage, as well as in the treatment of severe shock conditions (Avakyan O.M. Pharmacological regulation of the function of adrenergic receptors. / M .: Medicine, 1988. 256 s .; Volkov V.E., Volkov S.V. Shock. Sepsis. Multiple organ dysfunction. / Cheboksary: PBUYUL L. Naumov. , 2009.348 s.).

Технический результат предлагаемого изобретения заключается в создании новых вазопрессорных средств, обладающих значительно большей продолжительностью антигипотензивного действия, в сравнении с имеющимся прототипом, что позволяет существенно расширить возможности терапии гипотонических состояний, особенно при оказании неотложной медицинской помощи и лечении критических состояний.The technical result of the invention is to create new vasopressor drugs with a significantly longer duration of antihypertensive action, compared with the existing prototype, which can significantly expand the treatment of hypotonic conditions, especially when providing emergency medical care and treatment of critical conditions.

В последние десятилетия было показано, что тонус кровеносных сосудов зависит от активности синтеза оксида азота (NO) в эндотелии сосудов (Dudzinski D., Michel Т. Life history of eNOS: Partners and pathway // Cardiovasc. Res. 2007. v.75, N.2. p.247-60; Bian K., Doursout M.F., Murad F. Vascular system: role of nitric oxide in cardiovascular diseases // J. Clin. Hypertens. (Greenwich). 2008. v.10, N.4, p.304-10). В этой связи вазопрессорное действие можно ожидать у химических соединений, обладающих особым биохимическим свойством, а именно способностью ингибировать каталитическую активность NO-синтаз (NOS) - ферментов, синтезирующих оксид азота.In recent decades, it has been shown that the tone of blood vessels depends on the activity of the synthesis of nitric oxide (NO) in the vascular endothelium (Dudzinski D., Michel T. Life history of eNOS: Partners and pathway // Cardiovasc. Res. 2007. v.75, N.2. P. 247-60; Bian K., Doursout MF, Murad F. Vascular system: role of nitric oxide in cardiovascular diseases // J. Clin. Hypertens. (Greenwich). 2008. v.10, N. 4, p. 304-10). In this regard, a vasopressor effect can be expected in chemical compounds with a special biochemical property, namely, the ability to inhibit the catalytic activity of NO synthases (NOS) - enzymes that synthesize nitric oxide.

Ранее авторами предлагаемого изобретения показано, что некоторые линейные и циклические N,S-дизамещенные изотиомочевины способны ингибировать NOS и проявляют вазопрессорное действие при различных гипотонических состояниях (Проскуряков С.Я., Кучеренко Н.Г., Филимонова М.В. и соавт. NO-ингибирующая и вазотропная активность некоторых соединений, содержащих тиоамидиновую группу. // Бюлл. экспер. биол. мед. 2002. т.134, №.10. С.393-96; Проскуряков С.Я., Филимонова М.В., Верховский Ю.Г. и соавт. Влияние ингибитора синтазы оксида азота, 2-АДТ на эндотоксин-индуцированные изменения гемодинамики и дыхания крыс // Бюлл. экспер. биол. мед. 2004. т.138, №.10. с.446-49; Филимонова М.В., Шевченко Л.И., Суринова В.И. и соавт. Влияние N-пропионил-S-изопропил-изотиомочевины на продукцию биогенного оксида азота (NO)и гемодинамические параметры животных при эндотоксическом шоке // Вопр. биол. мед. и фарм. химии. 2011. №.9. с.35-9; Филимонова М.В., Трофимова Т.П., Борисова Г.С. и соавт. Антигипотензивная активность N-2-ацетиламино-5,6-дигидро-4Н-1,3-тиазина. // Хим.-фарм. журнал. 2012. Т.46, №.3. С.39-41). Приобретенный нами опыт синтеза (Филимонова М.В., Шевченко Л.И., Макарчук В.М., Шевчук А.С., Лушникова Г.А. Вазоконстрикторное средство. Патент на изобретение № 2475479. 2013) позволил выявить группу соединений, обладающих более выгодными фармакологическими свойствами, чем мезатон и имеющиеся вазопрессорные препараты.Previously, the authors of the invention showed that some linear and cyclic N, S-disubstituted isothioureas are able to inhibit NOS and exhibit a vasopressor effect in various hypotonic conditions (Proskuryakov S.Ya., Kucherenko N.G., Filimonova M.V. et al. NO -inhibiting and vasotropic activity of some compounds containing a thioamidine group. // Bull. expert biol. honey. 2002. t.134, No. 10. S.393-96; Proskuryakov S.Ya., Filimonova M.V., Verkhovsky Yu.G. et al. Effect of nitric oxide synthase inhibitor, 2-ADT on endotoxin inducer bath changes in the hemodynamics and respiration of rats // Bull.Expert Biol.med. 2004. v.138, No. 10. p.446-49; Filimonova M.V., Shevchenko L.I., Surinova V.I. and et al. Effect of N-propionyl-S-isopropyl-isothiourea on the production of biogenic nitric oxide (NO) and hemodynamic parameters of animals with endotoxic shock // Issues of Biol. Medical and Pharmaceutical Chemistry. 2011. No. 9. p.35- 9; Filimonova M.V., Trofimova T.P., Borisova G.S. et al. Antihypertensive activity of N-2-acetylamino-5,6-dihydro-4H-1,3-thiazine. // Chem.-farm. Journal. 2012. V.46, No.3. S.39-41). The synthesis experience we acquired (Filimonova M.V., Shevchenko L.I., Makarchuk V.M., Shevchuk A.S., Lushnikova G.A. Vasoconstrictor agent. Patent for invention No. 2475479. 2013) revealed a group of compounds possessing more favorable pharmacological properties than mesatone and available vasopressor drugs.

Сущность изобретения заключается в синтезе новых N,S-замещенных производных изотиомочевин общей формулы (1) в виде солей с фармакологически приемлемыми кислотами и в использовании их в качестве ингибиторов NOS и вазопрессорных средств.The essence of the invention lies in the synthesis of new N, S-substituted derivatives of isothioureas of the general formula (1) in the form of salts with pharmacologically acceptable acids and in their use as inhibitors of NOS and vasopressor agents.

Термин "фармакологически приемлемые кислоты" охватывает все фармакологически приемлемые кислоты, как неорганические (например, хлористоводородную, бромистоводородную, фосфорную, серную и т.д.), так и органические (например, щавелевую, янтарную, винную, метилсерную, салициловую и т.д.).The term "pharmacologically acceptable acids" covers all pharmacologically acceptable acids, both inorganic (for example, hydrochloric, hydrobromic, phosphoric, sulfuric, etc.), and organic (for example, oxalic, succinic, tartaric, methylsulfuric, salicylic, etc. .).

Синтезированное средство проявляет выраженное и длительное вазопрессорное действие, обусловленное ингибированием каталитической активности NOS.The synthesized agent exhibits a pronounced and prolonged vasopressor effect due to inhibition of the catalytic activity of NOS.

Перечень фигур.Enumeration of figures.

Фиг.1. Структурная формула 1.Figure 1. Structural Formula 1.

, в которой: n=1, 3, то есть ацильный заместитель имеет циклическую углеводородную насыщенную группу с 4 или 6 кольцевыми атомами углерода, и представляет собой циклобутаноил и циклогексаноил;

in which: n = 1, 3, that is, the acyl substituent has a cyclic hydrocarbon saturated group with 4 or 6 ring carbon atoms, and is cyclobutanoyl and cyclohexanoyl;

R представляет собой алкильную группу: C₂H₅, i-C₃H₇;R represents an alkyl group: C ₂ H ₅ , iC ₃ H ₇ ;

HX представляет собой фармакологически приемлемую кислоту: HCl, HBr, HI, метилсерную, щавелевую, винную, янтарную и др., как указано выше.HX is a pharmacologically acceptable acid: HCl, HBr, HI, methyl sulphate, oxalic, tartaric, succinic, etc., as described above.

Фиг.2. Влияние мезатона в дозе 0,5 мг/кг на динамику систолического (АДс) и диастолического (АДд) артериального давления животных в состоянии тяжелого геморрагического шока: 1 - показатели АД_С контрольных животных (не получавших «лечения»), 2 - показатели АД_Д контрольных животных, 3 - показатели АД_С животных, получавших мезатон, 4 - показатели АД_Д животных, получивших мезатон.Figure 2. The effect of mesatone in a dose of 0.5 mg / kg on the dynamics of systolic (BP) and diastolic (BP) blood pressure of animals in a state of severe hemorrhagic shock: 1 - indicators of blood pressure _from control animals (not receiving "treatment"), 2 - indicators of blood pressure _D control animals, 3 - indicators of blood pressure _From animals treated with mesatone, 4 - indicators of blood pressure _{D of} animals treated with mesatone.

Фиг.3. Влияние соединения Т-1020 в дозе 10 мг/кг на динамику артериального давления животных в состоянии тяжелого геморрагического шока: 1 - показатели АД_С контрольных животных, 2 - показатели АД_Д контрольных животных, 5 - показатели АД_С животных, получавших Т-1020, 6 - показатели АД_Д животных, получавших Т-1020.Figure 3. Effect of compound T-1020 at 10 mg / kg on the dynamics of the animals blood pressure in a state of severe hemorrhagic shock: 1 - BP readings _to control animals, 2 - BP readings _D control animals 5 - indicators BP _C of animals receiving T-1020, 6 - indicators of blood pressure _D animals receiving T-1020.

Фиг.4. Влияние соединения Т-1049 в дозе 10 мг/кг на динамику артериального давления животных в состоянии тяжелого геморрагического шока: 1 - показатели АД_С контрольных животных, 2 - показатели АД_Д контрольных животных, 7 - показатели АД_С животных, получавших Т-1049, 8 - показатели АД_Д животных, получавших Т-1049.Figure 4. The effect of T-1049 compound in a dose of 10 mg / kg on the dynamics of the animals blood pressure in a state of severe hemorrhagic shock: 1 - BP readings _to control animals, 2 - BP readings _D control animals 7 - indicators BP _C of animals receiving T-1049, 8 - indicators of blood pressure _D animals receiving T-1049.

Фиг.5. Влияние соединения Т-1059 в дозе 10 мг/кг на динамику артериального давления животных в состоянии тяжелого геморрагического шока: 1 - показатели АД_С контрольных животных, 2 - показатели АД_Д контрольных животных, 9 - показатели АД_С животных, получавших Т-1059, 10 - показатели АД_Д животных, получавших Т-1059.Figure 5. The effect of T-1059 compound in a dose of 10 mg / kg on the dynamics of the animals blood pressure in a state of severe hemorrhagic shock: 1 - BP readings _to control animals, 2 - BP readings _D control animals 9 - indicators BP _C of animals receiving T-1059, 10 - indicators of blood pressure _D animals receiving T-1059.

Синтез солей N,S-замещенных изотиомочевин формулы (1)The synthesis of salts of N, S-substituted isothioureas of the formula (1)

Соединения формулы (1) согласно изобретению получают с использованием способов, известных в данной области науки и техники для получения сходных веществ. Основой получения соединений формулы (1) является реакция, заключающаяся в том, что тиомочевины формулы (ТМ), в которой n=1, 3,The compounds of formula (1) according to the invention are prepared using methods known in the art for the preparation of similar substances. The basis for obtaining compounds of formula (1) is the reaction, which consists in the fact that the thiourea of the formula (TM), in which n = 1, 3,

подвергаются реакции с эквивалентным количеством или избытком (до 200%) соответствующего алкилирующего агента формулы R-X (в которой R представляет собой алкильную группу C₂H₅ или i-C₃H₇; а X представляет уходящую группу, такую как галогенид, сульфат, алкилсульфонат, арилсульфонат, трифлат, алкилсульфат, алкилфосфат, диалкилфосфат, ацетат) в полярном инертном растворителе (таком, как диметилформамид, диметилсульфоксид, сульфолан, ацетон, ацетонитрил) при температуре от комнатной до температуры кипения реакционной смеси.they are reacted with an equivalent amount or excess (up to 200%) of the corresponding alkylating agent of formula RX (in which R represents an alkyl group C ₂ H ₅ or iC ₃ H ₇ ; and X represents a leaving group such as a halide, sulfate, alkyl sulfonate, arylsulfonate , triflate, alkyl sulfate, alkyl phosphate, dialkyl phosphate, acetate) in a polar inert solvent (such as dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, sulfolane, acetone, acetonitrile) at room temperature to the boiling point of the reaction mixture.

Промежуточные тиомочевины формулы (ТМ) (1-циклобутаноилтиомочевину и 1-циклогексаноилтиомочевину) получают ацилированием тиомочевины эквимолярным количеством соответствующего карбонилхлорида в растворе толуола.Intermediate thioureas of the formula (TM) (1-cyclobutanoylthiourea and 1-cyclohexanoylthiourea) are obtained by acylation of thiourea with an equimolar amount of the corresponding carbonyl chloride in toluene solution.

Структуры соединений и их чистота подтверждены данными химического, элементного и спектрального анализа. Контроль протекания реакции и чистоты полученных соединений осуществляют с помощью тонкослойной хроматографии на пластинах Silufol UV-254 в системе аммиак-хлороформ-изопропанол. Спектры ПМР получены на спектрометре Bruker DRX-500 при частоте 500 МГц. Примеры синтеза соединений формулы (1)The structures of the compounds and their purity are confirmed by the data of chemical, elemental and spectral analysis. The reaction progress and the purity of the obtained compounds are monitored by thin-layer chromatography on Silufol UV-254 plates in an ammonia-chloroform-isopropanol system. PMR spectra were obtained on a Bruker DRX-500 spectrometer at a frequency of 500 MHz. Examples of the synthesis of compounds of formula (1)

Пример 1. Синтез 1-циклобутаноил-2-изопропилизотиомочевины гидробромида (далее Т-1049).Example 1. Synthesis of 1-cyclobutanoyl-2-isopropylisothiourea hydrobromide (hereinafter T-1049).

Смесь 2,0 г (12,6 ммоль) 1-циклобутаноилтиомочевины, 3,0 г (25,2 ммоль) изопропилбромида и 8,0 мл сухого ацетонитрила в запаянной ампуле нагревали на кипящей водяной бане в течение 30 часов. Растворитель упаривали, остаток отфильтровывали и перекристаллизовывали из 4-метил-2-пентанона. Выход 1,0 г (39%). T_пл 118-120°C.A mixture of 2.0 g (12.6 mmol) of 1-cyclobutanoylthiourea, 3.0 g (25.2 mmol) of isopropyl bromide and 8.0 ml of dry acetonitrile in a sealed ampoule was heated in a boiling water bath for 30 hours. The solvent was evaporated, the residue was filtered off and recrystallized from 4-methyl-2-pentanone. Yield 1.0 g (39%). T _mp 118-120 ° C.

Спектр ПМР (DMSO-d₆, δ): 1,3 (т, 6H); 1,95 (к, 2H); 2,2 (м, 4H); 3,8 (с, 1H); 4,1 (к, 1H); 10,9 (ш, 3H).PMR spectrum (DMSO-d ₆ , δ): 1.3 (t, 6H); 1.95 (q, 2H); 2.2 (m, 4H); 3.8 (s, 1H); 4.1 (q, 1H); 10.9 (w, 3H).

Вычислено, %: C 38,43; H 6,09; N 9,96.Calculated,%: C 38.43; H 6.09; N, 9.96.

Найдено, %: C 38,52; H 6,27; N 10,14.Found,%: C 38.52; H 6.27; N, 10.14.

Пример 2. Синтез 1-циклобутаноил-2-этилизотиомочевины гидробромида (далее Т-1020).Example 2. Synthesis of 1-cyclobutanoyl-2-ethylisothiourea hydrobromide (hereinafter T-1020).

Смесь 2,0 г (12,6 ммоль) 1-циклобутаноилтиомочевины, 2,8 г (26 ммоль) этилбромида и 7 мл сухого ацетонитрила в запаянной ампуле нагревали на кипящей водяной бане в течение 15 часов. Растворитель упаривали, остаток отфильтровывали и дважды перекристаллизовывали из 4-метил-2-пентанона. Выход 2,5 г (73,5%). T_пл 120-123°C.A mixture of 2.0 g (12.6 mmol) of 1-cyclobutanoylthiourea, 2.8 g (26 mmol) of ethyl bromide and 7 ml of dry acetonitrile in a sealed ampoule was heated in a boiling water bath for 15 hours. The solvent was evaporated, the residue was filtered off and recrystallized twice from 4-methyl-2-pentanone. Yield 2.5 g (73.5%). T _mp 120-123 ° C.

Спектр ПМР (DMSO-d₆, δ): 1,3 (т, 3H); 1,95 (к, 2H); 3,28 (к, 2H); 3,38(м, 1H); 11,0 (ш, 3H).PMR spectrum (DMSO-d ₆ , δ): 1.3 (t, 3H); 1.95 (q, 2H); 3.28 (q, 2H); 3.38 (m, 1H); 11.0 (w, 3H).

Вычислено, %: C 35,96; H 5,66; N 10,48.Calculated,%: C 35.96; H 5.66; N, 10.48.

Найдено, %: C 36,19; H 5,78; N 10,48.Found,%: C 36.19; H 5.78; N, 10.48.

Пример 3. Синтез 1-циклогексаноил-2-этилизотиомочевины гидробромида (далее Т-1059).Example 3. Synthesis of 1-cyclohexanoyl-2-ethylisothiourea hydrobromide (hereinafter T-1059).

Смесь 3,7 г (20 ммоль) 1-циклогексаноилтиомочевины, 4,4 г (40 ммоль) этилбромида и 10 мл сухого ацетонитрила нагревали на кипящей водяной бане в запаянной ампуле в течение 20 часов. Осадок отфильтровывали и дважды перекристаллизовали из 4-метил-2-пентанона. Выход 2,8 г (48,5%). T_пл 123-125°C.A mixture of 3.7 g (20 mmol) of 1-cyclohexanoylthiourea, 4.4 g (40 mmol) of ethyl bromide and 10 ml of dry acetonitrile was heated in a sealed ampoule in a boiling water bath for 20 hours. The precipitate was filtered off and recrystallized twice from 4-methyl-2-pentanone. Yield 2.8 g (48.5%). T _mp 123-125 ° C.

Спектр ПМР (DMSO-d₆, δ): 1,3 (м, 9H); 1,62-1,84 (м, 5H); 3,65 (м, 1H); 10,8 (ш, 3H).PMR spectrum (DMSO-d ₆ , δ): 1.3 (m, 9H); 1.62-1.84 (m, 5H); 3.65 (m, 1H); 10.8 (w, 3H).

Вычислено, %: C 40,68; H 6,49; N 9,5. C₁₀H₁₉BrN₂OS.Calculated,%: C 40.68; H 6.49; N, 9.5. C ₁₀ H ₁₉ BrN ₂ OS.

Найдено, %: C 40,6; H 6,56; N 9,44.Found,%: C 40.6; H 6.56; N, 9.44.

Пример 4. Синтез 1-циклогексаноил-2-изопропилизотиомочевины гидробромида (далее Т-1064).Example 4. Synthesis of 1-cyclohexanoyl-2-isopropylisothiourea hydrobromide (hereinafter T-1064).

Смесь 3,7 г (20 ммоль) 1-циклогексаноилтиомочевины, 4,8 г (40 ммоль) изопропилбромида и 10 мл сухого ацетонитрила нагревали на кипящей водяной бане в запаянной ампуле в течение 70 часов. Осадок отфильтровали, промывали большим объемом эфира и перекристаллизовали из 4-метил-2-пентанона. Выход 2,0 г (36%). T_пл 163-165°C.A mixture of 3.7 g (20 mmol) of 1-cyclohexanoylthiourea, 4.8 g (40 mmol) of isopropyl bromide and 10 ml of dry acetonitrile was heated on a boiling water bath in a sealed ampoule for 70 hours. The precipitate was filtered off, washed with a large volume of ether and recrystallized from 4-methyl-2-pentanone. Yield 2.0 g (36%). T _pl, 163-165 ° C.

Спектр ПМР (DMSO-d₆, δ): 1,3 (м, 11H); 1,63-1,84 (м, 5H); 4,1 (к, 1H); 10,9 (ш, 3H).PMR spectrum (DMSO-d ₆ , δ): 1.3 (m, 11H); 1.63-1.84 (m, 5H); 4.1 (q, 1H); 10.9 (w, 3H).

Вычислено, %: C 42,71; H 6,84; N 9,05. C₁₁H₂₁BrN₂OS.Calculated,%: C 42.71; H 6.84; N, 9.05. C ₁₁ H ₂₁ BrN ₂ OS.

Найдено, %: C 42,77; H 7,0; N 9,06.Found,%: C 42.77; H 7.0; N, 9.06.

Другим аспектом изобретения является наличие у соединений формулы (1) способности ингибировать каталитическую активность NO-синтаз (NOS) - ферментов, синтезирующих в биологических тканях оксид азота, что подтверждено результатами биологических исследований.Another aspect of the invention is the presence in the compounds of formula (1) of the ability to inhibit the catalytic activity of NO synthases (NOS), enzymes that synthesize nitric oxide in biological tissues, which is confirmed by the results of biological studies.

Пример 5. Оценку NOS-ингибирующей активности соединений формулы (1), представленных в примерах 1, 2, 3 и 4, проводили в опытах in vitro на изолированных изоформах NOS радиометрическим методом по скорости накопления [³H]-L-цитруллина (van Eijk Н.М., Luiking Y.C., Deutz N.E. Method using stable isotopes to measure nitric oxide synthesis in the L-arginine/NO pathway in health and disease // J. Chromatogr. В Analyt. Technol. Biomed. Life Sci. 2007. v.851, N.1-2. p.172-85). При этом использовали рекомбинантные изоформы NOS человека (Alexis Biochemicals) и набор реагентов NOSdetect Assay Kit (Alexis Biochemicals). Измерения проводились на радиометрическом комплексе Wollac-1414 (Vinspectral).Example 5. The evaluation of the NOS-inhibitory activity of the compounds of formula (1) presented in examples 1, 2, 3 and 4 was carried out in vitro experiments on isolated NOS isoforms by radiometric method according to the accumulation rate of [ ³ H] -L-citrulline (van Eijk N.M., Luiking YC, Deutz NE Method using stable isotopes to measure nitric oxide synthesis in the L-arginine / NO pathway in health and disease // J. Chromatogr. In Analyt. Technol. Biomed. Life Sci. 2007. v .851, N.1-2. P.172-85). In this case, recombinant isoforms of human NOS (Alexis Biochemicals) and a set of reagents NOSdetect Assay Kit (Alexis Biochemicals) were used. The measurements were carried out on a radiometric complex Wollac-1414 (Vinspectral).

Результаты исследований свидетельствуют, что все заявленные соединения проявляют способность к ингибированию NOS. Причем, как показано в таблице 1, полученные соединения обладают значительной избирательностью (селективностью) действия к индуцибельной (iNOS) и эндотелиальной (eNOS) изоформам, подавляя их в 8-20 раз активнее, чем нейрональную изоформу (nNOS).The results of the studies indicate that all of the claimed compounds exhibit the ability to inhibit NOS. Moreover, as shown in Table 1, the obtained compounds have significant selectivity (selectivity) for inducible (iNOS) and endothelial (eNOS) isoforms, suppressing them 8-20 times more actively than the neuronal isoform (nNOS).

Селективность соединений формулы (1) является существенной для достижения технического результата предлагаемого изобретения, поскольку обеспечивает у заявленных соединений высокую вазопрессорную активность и минимальные риски побочных эффектов (вызванных подавлением nNOS), таких как повышенная возбудимость миокарда, гипертонус скелетной мускулатуры, нарушения со стороны ЦНС (Bian K. et al. Vascular system: role of nitric oxide in cardiovascular diseases // J. Clin. Hypertens. (Greenwich). 2008. v.10, N.4. p.304-10; Alderton W.K. et al. Nitric oxide synthases: structure, function and inhibition // Biochem. J. 2001. v.357, Pt.3. p.593-615).The selectivity of the compounds of formula (1) is essential to achieve the technical result of the present invention, since it provides high vasopressor activity and minimal risks of side effects (caused by nNOS suppression), such as increased myocardial excitability, skeletal muscle hypertonia, disorders of the central nervous system (Bian K. et al. Vascular system: role of nitric oxide in cardiovascular diseases // J. Clin. Hypertens. (Greenwich). 2008. v.10, N.4. P. 304-10; Alderton WK et al. Nitric oxide synthases: structure, function and inhibition // Biochem. J. 2001. v.357, Pt.3. p.593-615).

Таблица 1Table 1 Концентрации соединений формулы (1), ингибирующие на 50% активность различных изоформ NOSConcentrations of compounds of formula (1) inhibiting 50% activity of various NOS isoforms СоединениеCompound nNOSnNOS iNOSiNOS eNOSeNOS мкмольmicromole мг/лmg / l мкмольmicromole мг/лmg / l мкмольmicromole мг/лmg / l Т-1020T-1020 3232 8,58.5 2,72.7 0,70.7 3,83.8 1,01,0 Т-1049T-1049 3838 10,710.7 2,52,5 0,70.7 3,13,1 0,90.9 Т-1059T-1059 3737 10,910.9 1,81.8 0,50.5 2,32,3 0,70.7 Т-1064T-1064 4141 12,712.7 4,74.7 1,51,5 6,56.5 2,02.0

Необходимым условием достижения технического результата данного изобретения является определение токсических свойств соединений формулы (1).A necessary condition for achieving the technical result of this invention is the determination of the toxic properties of the compounds of formula (1).

Пример 6. Токсичность соединений (1) исследована на беспородных белых мышах-самцах массой 21-23 г по стандартному тесту острой токсичности при однократном введении. Вещества растворяли в физиологическом растворе и вводили внутрибрюшинно. Срок наблюдения за опытными животными составлял 14 суток. Оценку показателей токсичности проводили по методу Литчфильда-Уилкоксона (Litchfild J.T., Wilcoxon F.A. Asimplified method of evaluating dose effect experiments // J. Pharm. Exp. Ther. 1947. v.95. p.99-113). Результаты исследований показали, что LD₅₀ соединений формулы (1) составляет 400-700 мг/кг (Табл.2).Example 6. The toxicity of compounds (1) was studied on outbred white male mice weighing 21-23 g according to the standard acute toxicity test with a single injection. The substances were dissolved in physiological saline and administered intraperitoneally. The observation period for the experimental animals was 14 days. Assessment of toxicity was carried out according to the Litchfield-Wilcoxon method (Litchfild JT, Wilcoxon FA Asimplified method of evaluating dose effect experiments // J. Pharm. Exp. Ther. 1947. v.95. P.99-113). The research results showed that the LD _{50 of the} compounds of formula (1) is 400-700 mg / kg (Table 2).

Таблица 2table 2 Показатели острой токсичности соединений формулы (1).Indicators of acute toxicity of the compounds of formula (1). Химическое соединениеChemical compound LD₅₀ (LD₁₆÷LD₈₄), мг/кгLD ₅₀ (LD ₁₆ ÷ LD ₈₄ ), mg / kg Т-1020T-1020 542 (136÷1150)542 (136 ÷ 1150) Т-1049T-1049 708 (528÷868)708 (528 ÷ 868) Т-1059T-1059 380 (246÷475)380 (246 ÷ 475) Т-1064T-1064 650 (324÷962)650 (324 ÷ 962)

В соответствии с классификацией токсичности химических веществ соединения общей формулы (1) относятся к классам умеренно токсичных и малотоксичных. Более того, токсичность заявленных соединений существенно ниже, чем у адреномиметиков, используемых в терапии гипотонических состояний (например, при данном способе введения LD₅₀ мезатона составляет 191 мг/кг). Кроме того, сопоставление диапазона токсических и NOS-ингибирующих доз (представленных в Табл.1) свидетельствует о том, что исследуемые вещества способны обеспечивать высокое подавление активности eNOS и iNOS, необходимое для развития вазопрессорного эффекта, уже при дозах, в 50-100 раз ниже минимальных летальных доз (LD₁₆).In accordance with the classification of toxicity of chemicals, the compounds of general formula (1) belong to the classes of moderately toxic and low toxicity. Moreover, the toxicity of the claimed compounds is significantly lower than that of adrenergic agonists used in the treatment of hypotonic conditions (for example, with this method of administration, LD _{50 of} mesatone is 191 mg / kg). In addition, a comparison of the range of toxic and NOS-inhibiting doses (presented in Table 1) indicates that the test substances are capable of providing a high suppression of the eNOS and iNOS activity necessary for the development of a vasopressor effect, even at doses 50-100 times lower minimum lethal doses (LD ₁₆ ).

Для изучения вазопрессорных свойств заявленных соединений использована экспериментальная модель геморрагического шока, вызываемая острой, массивной кровопотерей (47-50% объема циркулирующей крови в течение 5-8 минут), сходная по своему течению с тяжелыми клиническими формами гипотонии.To study the vasopressor properties of the claimed compounds, we used an experimental model of hemorrhagic shock caused by acute, massive blood loss (47-50% of the circulating blood volume for 5-8 minutes), similar in its course to severe clinical forms of hypotension.

Исследования проведены на самцах крыс линии Wistar массой 300-400 г. Перед оперативным вмешательством животное наркотизировали тиопенталом натрия (60 мг/кг, в/б). Далее устанавливали трахеостому, катетеризировали яремную вену и обе сонные артерии, подключали инвазивный датчик артериального давления, электроды регистрации ЭКГ. Внутривенно вводили гепарин 100 ед. После стабилизации состояния животного с помощью полиграфа RM-6000 (Nihon Kohden) регистрировали исходные показатели частоты сердечных сокращений (ЧСС), дыхательных движений (ЧДД), систолического и диастолического артериального давления (АД_С, АД_Д) в левой сонной артерии. Для создания тяжелого геморрагического шока из правой сонной артерии производили забор крови в объеме 2,5 мл на 100 г массы животного. По окончании кровопотери повторяли регистрацию показателей внешнего дыхания и центральной гемодинамики. Затем животным опытных групп внутрибрюшинно вводили одно из исследуемых соединений в виде раствора - из расчета 0,1 мл на 100 г массы тела. Мониторинг физиологических показателей продолжали в течение последующих 120 минут.The studies were performed on male Wistar rats weighing 300-400 g. Before surgery, the animal was anesthetized with sodium thiopental (60 mg / kg, ip). Then a tracheostomy was installed, a jugular vein and both carotid arteries were catheterized, an invasive blood pressure sensor, ECG recording electrodes were connected. 100 units of heparin were administered intravenously. After stabilization condition of the animal via RM-6000 polygraph (Nihon Kohden) baseline recorded heart rate (HR), respiratory rate (RR), systolic and diastolic blood pressure (BP _C and BP _D) in the left carotid artery. To create severe hemorrhagic shock from the right carotid artery, blood was taken in a volume of 2.5 ml per 100 g of animal mass. At the end of the blood loss, the registration of external respiration and central hemodynamics was repeated. Then the animals of the experimental groups were intraperitoneally injected with one of the test compounds in the form of a solution - at the rate of 0.1 ml per 100 g of body weight. Monitoring of physiological parameters was continued for the next 120 minutes.

Используемая в данной модели острая кровопотеря приводит к развитию тяжелой степени шока (Табл.3) и при отсутствии лечения сопровождается гибелью многих опытных животных уже в течение первых двух часов (Саркисов Д.С., Ремезов П.И. Воспроизведение болезней человека в эксперименте / Под ред. А.А. Вишневского, М.: 1960. 780 с.).The acute blood loss used in this model leads to the development of a severe degree of shock (Table 3) and, in the absence of treatment, is accompanied by the death of many experimental animals within the first two hours (Sarkisov D.S., Remezov P.I. Reproduction of human diseases in the experiment / Edited by A.A. Vishnevsky, Moscow: 1960.780 s.).

Как показано в Табл.3, к окончанию кровопотери у опытных животных наблюдалось крайне выраженное падение артериального давления: АД_С снижалось более чем в 3 раза (с 186,3±3,5 до 56,7±6,9), АД_Д - почти в 5 раз (от 132,9±2,3 до 28,1±9,0). В течение первых 60-70 минут тяжесть гипотонии частично снижалась за счет компенсаторного повышения тонуса сосудов и ЧСС. Однако существенной компенсации дефицита кровотока не происходило, и глубокая гипотония в дальнейшем приводила к нарушению насосной функции сердца, что становилось причиной гибели многих опытных животных. Из 11 контрольных животных 5 особей (45%) погибли к 120 минуте наблюдения.As shown in Table 3, the end of blood loss in the experimental animals was observed very marked drop in blood pressure: blood pressure _With decreased by more than 3-fold (from 186.3 ± 3.5 to 56,7 ± 6,9), _D BP - almost 5 times (from 132.9 ± 2.3 to 28.1 ± 9.0). During the first 60-70 minutes, the severity of hypotension was partially reduced due to a compensatory increase in vascular tone and heart rate. However, significant compensation for blood flow deficiency did not occur, and deep hypotension subsequently led to impaired pumping function of the heart, which caused the death of many experimental animals. Of 11 control animals, 5 individuals (45%) died by 120 minutes of observation.

Таблица 3Table 3 Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных животных после тяжелой острой кровопотери (группа контроля; n=11)Hemodynamics and respiration of anesthetized animals after severe acute blood loss (control group; n = 11) Время после кровопотериTime after blood loss АД_С, мм рт. ст. _With BP, mm Hg. Art. АД_Д, мм рт. ст.HELL _D , mmHg Art. ЧСС, уд.минHeart rate, beats.min ЧДД, дв/минNPV, dv / min ИсходноOriginally 186,3±3,5186.3 ± 3.5 132,9±2,3132.9 ± 2.3 413,1±10,4413.1 ± 10.4 62,4±4,962.4 ± 4.9 КровопотеряBlood loss 56,7±6,956.7 ± 6.9 28,1±9,028.1 ± 9.0 348,1±10,0348.1 ± 10.0 74,1±8,274.1 ± 8.2 2 минуты2 minutes 59,7±6,959.7 ± 6.9 27,9±9,027.9 ± 9.0 5 минут5 minutes 65,2±6,965.2 ± 6.9 27,0±6,727.0 ± 6.7 355,3±12,2355.3 ± 12.2 73,8±8,473.8 ± 8.4 10 минут10 minutes 67,4±4,967.4 ± 4.9 31,1±5,031.1 ± 5.0 359,5±12,9359.5 ± 12.9 73,4±8,773.4 ± 8.7 20 минут20 minutes 76,4±8,076.4 ± 8.0 42,9±8,342.9 ± 8.3 358,7±13,3358.7 ± 13.3 68,6±7,768.6 ± 7.7 30 минут30 minutes 88,4±10,088.4 ± 10.0 53,5±9,453.5 ± 9.4 372,2±17,1372.2 ± 17.1 68,5±7,868.5 ± 7.8 40 минут40 minutes 96,8±10,196.8 ± 10.1 57,7±9,657.7 ± 9.6 383,2±14,3383.2 ± 14.3 62,4±6,762.4 ± 6.7 50 минут50 minutes 101,3±8,4101.3 ± 8.4 58,5±7,658.5 ± 7.6 387,9±11,9387.9 ± 11.9 67,4±7,767.4 ± 7.7 60 минут60 minutes 108,3±6,9108.3 ± 6.9 62,9±6,362.9 ± 6.3 402,7±11,5402.7 ± 11.5 67,7±7,867.7 ± 7.8 70 минут70 minutes 113,0±5,5113.0 ± 5.5 65,5±5,165.5 ± 5.1 416,3±8,4416.3 ± 8.4 69,3±7,369.3 ± 7.3 80 минут80 minutes 116,7±5,5116.7 ± 5.5 67,5±5,067.5 ± 5.0 429,3±8,9429.3 ± 8.9 69,4±5,269.4 ± 5.2 90 минут90 minutes 117,1±4,7117.1 ± 4.7 67,3±4,167.3 ± 4.1 434,2±9,4434.2 ± 9.4 70,8±6,370.8 ± 6.3 100 минут100 minutes 118,0±5,9118.0 ± 5.9 67,5±6,167.5 ± 6.1 439,4±9,7439.4 ± 9.7 68,3±7,468.3 ± 7.4 110 минут110 minutes 118,9±6,5118.9 ± 6.5 68,5±6,368.5 ± 6.3 440,3±8,8440.3 ± 8.8 68,5±6,968.5 ± 6.9 120 минут120 minutes 119,8±7,9119.8 ± 7.9 68,8±7,768.8 ± 7.7 439,1±8,5439.1 ± 8.5 68,9±6,768.9 ± 6.7

Пример 7. Для получения объективной оценки вазопрессорных свойств заявленных соединений на данной модели геморрагического шока исследованы терапевтические возможности препарата-прототипа - α₁-адреномиметика мезатон. Опытным животным мезатон вводили внутрибрюшинно в высокой дозе (0,5 мг/кг) сразу по окончании кровопотери.Example 7. To obtain an objective assessment of the vasopressor properties of the claimed compounds in this model of hemorrhagic shock, the therapeutic possibilities of the prototype drug, α ₁ -adrenomimetic mesatone, were investigated. Mesatone was administered intraperitoneally to experimental animals at a high dose (0.5 mg / kg) immediately after the loss of blood.

Результаты исследований показали (Табл.4, Фиг.2), что введение мезатона животным в состоянии тяжелого геморрагического шока сопровождалось быстрым повышением артериального давления. Через 5 минут после инъекции показатели АД_С и АД_Д у опытных животных были достоверно выше, чем в контроле. Максимальный эффект развивался к 10 минуте, при этом степень повышения АД_С составляла 25-40%, АД_Д - 65-75% относительно соответствующих показателей контрольных животных. Однако достоверное влияние мезатона наблюдалось в течение короткого периода - с 5 по 20 минуту после инъекции. С 30 минуты и до конца срока наблюдения все контролируемые показатели у опытных и контрольных животных были статистически неразличимы. Таким образом, при использованном способе введения мезатона длительность вазопрессорного действия составляет около 20 минут. Непродолжительное и относительно слабое улучшение гемодинамических показателей под влиянием мезатона в этом опыте, по существу, не повлияло на течение шока - летальность в этой группе составила 50% в течение 120 минут наблюдения.The research results showed (Table 4, Figure 2) that the introduction of mesatone in animals in a state of severe hemorrhagic shock was accompanied by a rapid increase in blood pressure. 5 minutes after injection parameters BP _C and BP _D in the experimental animals were significantly higher than in the controls. The maximum effect developed for 10 minutes, the degree of increase in blood pressure was 25-40% _C, BP _D - 65-75% relative to the corresponding indices of control animals. However, a significant effect of mesatone was observed for a short period - from 5 to 20 minutes after injection. From 30 minutes to the end of the observation period, all controlled parameters in the experimental and control animals were statistically indistinguishable. Thus, with the used method of introducing mesatone, the duration of the vasopressor action is about 20 minutes. The short and relatively weak improvement in hemodynamic parameters under the influence of the mesatone in this experiment did not essentially affect the course of the shock - mortality in this group was 50% within 120 minutes of observation.

Таблица 4Table 4 Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных животных после тяжелой острой кровопотери при воздействии мезатона в дозе 0,5 мг/кг (n=8)Hemodynamics and respiration of anesthetized animals after severe acute blood loss when exposed to mesatone at a dose of 0.5 mg / kg (n = 8) Время после кровопотери/ инъекцииTime after blood loss / injection АД_С, мм рт. ст. _With BP, mm Hg. Art. АД_Д, мм рт. ст.HELL _D , mmHg Art. ЧСС, уд./минHeart rate, bpm ЧДД, дв/минNPV, dv / min ИсходноOriginally 181,9±3,8181.9 ± 3.8 128,2±5,9128.2 ± 5.9 434,1±11,5434.1 ± 11.5 66,3±5,766.3 ± 5.7 Кровопотеря/ ИнъекцияBlood loss / injection 55,9±4,055.9 ± 4.0 26,4±3,726.4 ± 3.7 364,4±12,9364.4 ± 12.9 70,3±8,570.3 ± 8.5 2 минуты2 minutes 70,5±4,270.5 ± 4.2 37,5±5,137.5 ± 5.1 5 минут5 minutes 80,5±4,5^* 80.5 ± 4.5 ^* 43,7±5,4^* 43.7 ± 5.4 ^* 362,6±10,0362.6 ± 10.0 72,2±8,172.2 ± 8.1 10 минут10 minutes 96,0±6,8^* 96.0 ± 6.8 ^* 58,7±7,9^* 58.7 ± 7.9 ^* 369,5±9,7369.5 ± 9.7 70,5±8,970.5 ± 8.9 20 минут20 minutes 107,9±11,1*107.9 ± 11.1 * 67,3±10,6^* 67.3 ± 10.6 ^* 365,8±5,1365.8 ± 5.1 69,6±7,969.6 ± 7.9 30 минут30 minutes 112,0±11,9112.0 ± 11.9 71,6±13,171.6 ± 13.1 372,1±9,8372.1 ± 9.8 69,3±6,869.3 ± 6.8 40 минут40 minutes 114,1±13,6114.1 ± 13.6 71,3±14,371.3 ± 14.3 378,7±7,4378.7 ± 7.4 66,1±6,366.1 ± 6.3 50 минут50 minutes 115,3±13,2115.3 ± 13.2 70,6±14,470.6 ± 14.4 387,9±8,2387.9 ± 8.2 69,2±7,669.2 ± 7.6 60 минут60 minutes 115,4±14,6115.4 ± 14.6 67,9±14,667.9 ± 14.6 381,1±9,5381.1 ± 9.5 69,7±7,069.7 ± 7.0 70 минут70 minutes 122,2±5,4122.2 ± 5.4 73,7±6,573.7 ± 6.5 391,0±15,7391.0 ± 15.7 68,8±7,968.8 ± 7.9 80 минут80 minutes 130,3±12,3130.3 ± 12.3 80,7±13,880.7 ± 13.8 395,9±18,0395.9 ± 18.0 67,9±7,267.9 ± 7.2 90 минут90 minutes 123,2±12,1123.2 ± 12.1 73,2±11,973.2 ± 11.9 380,3±24,5380.3 ± 24.5 68,3±6,768.3 ± 6.7 100 минут100 minutes 122,1±12,5122.1 ± 12.5 73,7±10,573.7 ± 10.5 397,3±27,1397.3 ± 27.1 69,2±7,369.2 ± 7.3 110 минут110 minutes 124,7±11,8124.7 ± 11.8 75,5±11,775.5 ± 11.7 399,6±24,5399.6 ± 24.5 68,5±6,968.5 ± 6.9 120 минут120 minutes 125,2±12,2125.2 ± 12.2 76,3±12,376.3 ± 12.3 408,2±20,3408.2 ± 20.3 68,7±6,668.7 ± 6.6 * - статистически достоверное различие (p<0,05) с контрольной группой (Табл.3) по непараметрическому Q-критерию Данна множественных сравнений.* - statistically significant difference (p <0.05) with the control group (Table 3) according to the nonparametric Q-criterion of Dunn multiple comparisons.

Пример 8. Иная картина течения шока наблюдалась при применении соединений формулы (1). Введение опытным животным в состоянии тяжелого геморрагического шока соединения Т-1020 в дозе 10 мг/кг (в 14 меньше раз LD₁₆ и в 50 раз меньше LD₅₀) вызывало стремительный рост артериального давления (Табл.5, Фиг.3).Example 8. A different picture of the course of shock was observed with the use of compounds of formula (1). The introduction of experimental animals in a state of severe hemorrhagic shock of the compound T-1020 at a dose of 10 mg / kg (14 times less than LD ₁₆ and 50 times less than LD ₅₀ ) caused a rapid increase in blood pressure (Table 5, Figure 3).

Из табл. 5 видно, что уже на 2 минуте после инъекции показатели АД_С и АД_Д у опытных животных были достоверно выше, чем в контроле. Полностью вазопрессорный эффект Т-1020 развивался примерно к 20 минуте, при этом степень подъема давления была существенно выше, чем при действии мезатона - АД_С возрастало на 100-120%, а АД_Д - на 200-220% относительно показателей контрольных животных. Длительность антигипотонического действия соединения Т-1020 также в 5-6 раз превышала длительность действия мезатона. Эффект начинал ослабевать только с 100 минуты, и статистически значимое влияние Т-1020 на артериальное давление сохранялось до 110 минуты эксперимента. Длительное и мощное повышение артериального давления при действии Т-1020 стабилизировало гемодинамику и качественно изменяло течение шока - на протяжении 120 минут наблюдения. Ни одно из 8 опытных животных, получивших Т-1020, несмотря на тяжелую кровопотерю, не погибло.From the table. 5 shows that already at 2 minutes post-injection parameters BP _C and BP _D in the experimental animals were significantly higher than in the controls. The completely vasopressor effect of T-1020 developed by about 20 minutes, while the degree of pressure increase was significantly higher than that under the action of the mesatone - AD _C increased by 100-120%, and AD _D - by 200-220% relative to the control animals. The duration of the antihypotonic effect of the T-1020 compound was also 5-6 times longer than the duration of the action of mesatone. The effect began to weaken from only 100 minutes, and the statistically significant effect of T-1020 on blood pressure persisted until 110 minutes of the experiment. A prolonged and powerful increase in blood pressure under the action of T-1020 stabilized hemodynamics and qualitatively changed the course of shock - during 120 minutes of observation. None of the 8 experimental animals that received T-1020, despite heavy blood loss, did not die.

Таблица 5.Table 5. Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных животных после тяжелой острой кровопотери при воздействии соединения Т-1020 в дозе 10 мг/кг (n=8)Hemodynamics and respiration of anesthetized animals after severe acute blood loss when exposed to compound T-1020 at a dose of 10 mg / kg (n = 8) Время после кровопотери/ инъекцииTime after blood loss / injection АД_С, мм рт. ст. _With BP, mm Hg. Art. АД_Д, мм рт. ст.HELL _D , mmHg Art. ЧСС, уд./минHeart rate, bpm ЧДД, дв/минNPV, dv / min ИсходноOriginally 184,5±2,8184.5 ± 2.8 130,3±1,9130.3 ± 1.9 429,8±9,1429.8 ± 9.1 66,3±5,766.3 ± 5.7 Кровопотеря/ИнъекцияBlood loss / injection 55,1±1,355.1 ± 1.3 26,1±1,826.1 ± 1.8 348,1±9,9348.1 ± 9.9 70,3±8,570.3 ± 8.5 2 минуты2 minutes 79,1±5,0^* 79.1 ± 5.0 ^* 53,5±5,7^* 53.5 ± 5.7 ^* 5 минут5 minutes 92,1±8,2^* 92.1 ± 8.2 ^* 68,2±8,3^{* m} 68.2 ± 8.3 ^{* m} 371,9±10,1371.9 ± 10.1 72,2±8,172.2 ± 8.1 10 минут10 minutes 118,9±7,5^* 118.9 ± 7.5 ^* 94,7±6,8^{* m} 94.7 ± 6.8 ^{* m} 397,5±10,7^* 397.5 ± 10.7 ^* 70,5±8,970.5 ± 8.9 20 минут20 minutes 175,5±15,3^{* m} 175.5 ± 15.3 ^{* m} 134,0±7,8^{* m} 134.0 ± 7.8 ^{* m} 404,4±12,8^* 404.4 ± 12.8 ^* 69,6±7,969.6 ± 7.9 30 минут30 minutes 177,9±7,3^{* m} 177.9 ± 7.3 ^{* m} 140,0±4,6^{* m} 140.0 ± 4.6 ^{* m} 407,9±10,7407.9 ± 10.7 69,3±6,869.3 ± 6.8 40 минут40 minutes 181,5±7,6^{* m} 181.5 ± 7.6 ^{* m} 143,5±3,9^{* m} 143.5 ± 3.9 ^{* m} 410,9±14,4410.9 ± 14.4 66,1±6,366.1 ± 6.3 50 минут50 minutes 168,7±7,6^{* m} 168.7 ± 7.6 ^{* m} 134,7±4,5^{* m} 134.7 ± 4.5 ^{* m} 414,8±13,9414.8 ± 13.9 69,2±7,669.2 ± 7.6 60 минут60 minutes 166,4±5,9^{* m} 166.4 ± 5.9 ^{* m} 134,0±4,2^{* m} 134.0 ± 4.2 ^{* m} 417,9±16,2417.9 ± 16.2 69,7±7,069.7 ± 7.0 70 минут70 minutes 171,9±7,5^{* m} 171.9 ± 7.5 ^{* m} 135,5±4,2^{* m} 135.5 ± 4.2 ^{* m} 433,8±18,0433.8 ± 18.0 68,8±7,968.8 ± 7.9 80 минут80 minutes 155,6±5,5^{* m} 155.6 ± 5.5 ^{* m} 125,5±4,7^{* m} 125.5 ± 4.7 ^{* m} 422,6±18,1422.6 ± 18.1 67,9±7,267.9 ± 7.2 90 минут90 minutes 162,4±6,6^* 162.4 ± 6.6 ^* 131,4±5,1^{* m} 131.4 ± 5.1 ^{* m} 448,0±20,9448.0 ± 20.9 68,3±6,768.3 ± 6.7 100 минут100 minutes 157,8±7,4^{* m} 157.8 ± 7.4 ^{* m} 124,5±4,5^{* m} 124.5 ± 4.5 ^{* m} 419,4±16,3419.4 ± 16.3 69,2±7,369.2 ± 7.3 110 минут110 minutes 146,3±10,0^* 146.3 ± 10.0 ^* 114,8±8,4^{* m} 114.8 ± 8.4 ^{* m} 439,2±19,5439.2 ± 19.5 68,5±6,968.5 ± 6.9 120 минут120 minutes 138,1±10,5138.1 ± 10.5 106,3±10,0^{* m} 106.3 ± 10.0 ^{* m} 449,9±15,8449.9 ± 15.8 68,7±6,668.7 ± 6.6 * - статистически достоверное различие (p<0,05) с контрольной группой (Табл.3) по непараметрическому Q-критерию Данна множественных сравнений;* - statistically significant difference (p <0.05) with the control group (Table 3) according to the nonparametric Q-criterion of Dunn multiple comparisons; ^m - статистически достоверное различие (p<0,05) с группой, получавшей мезатон (Табл.4), по непараметрическому Q-критерию Данна множественных сравнений. ^m is a statistically significant difference (p <0.05) with the group receiving mesatone (Table 4), according to the nonparametric Dunn Q-test of multiple comparisons.

Пример 9. Введение опытным животным в состоянии тяжелого геморрагического шока соединения Т-1049 в дозе 10 мг/кг (в 50 раз меньше LD₁₆ и в 70 раз меньше LD₅₀) также вызывало быстрый рост артериального давления (Табл.6, Фиг.4).Example 9. The introduction of experimental animals in a state of severe hemorrhagic shock compounds T-1049 at a dose of 10 mg / kg (50 times less than LD ₁₆ and 70 times less than LD ₅₀ ) also caused a rapid increase in blood pressure (Table 6, Figure 4 )

Динамика развития эффекта была подобна действию соединения Т-1020: к 10 минуте АД_С возрастало на 100%, а АД_Д - на 220% относительно показателей контроля. Продолжительность вазопрессорного действия соединения Т-1049 более чем в 5 раз превышала длительность действия мезатона. Эффект начинал ослабевать только со 110 минуты, тем не менее, достоверное влияние на артериальное давление опытных животных сохранялось до конца эксперимента. Причем длительная стабилизация давления под влиянием Т-1049 предотвращала развитие компенсаторной тахикардии, ярко выраженной у контрольных животных на поздних сроках наблюдения. Подобно Т-1020, соединение Т-1049 в этих опытах обеспечивало 100% противошоковую защиту - в течение 120 минут наблюдения ни одно опытное животное, получившее Т-1049, не погибло.The dynamics of the development of the effect was similar to the action of compound T-1020: by 10 minutes, AD _C increased by 100%, and AD _D by 220% relative to the control indices. The duration of the vasopressor action of the T-1049 compound was more than 5 times the duration of the action of mesatone. The effect began to weaken only from 110 minutes, however, a significant effect on the blood pressure of the experimental animals remained until the end of the experiment. Moreover, long-term pressure stabilization under the influence of T-1049 prevented the development of compensatory tachycardia, pronounced in control animals in the late stages of observation. Like T-1020, the T-1049 compound in these experiments provided 100% anti-shock protection - during the 120 minutes of observation, no experimental animals that received T-1049 died.

Таблица 6Table 6 Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных животных после тяжелой острой кровопотери при воздействии соединения Т-1049 в дозе 10 мг/кг (n=4)Hemodynamics and respiration of anesthetized animals after severe acute blood loss when exposed to compound T-1049 at a dose of 10 mg / kg (n = 4) Время после кровопотери/ инъекцииTime after blood loss / injection АД_С, мм рт. ст. _With BP, mm Hg. Art. АД_Д, мм рт. ст.HELL _D , mmHg Art. ЧСС, уд./минHeart rate, bpm ЧДД, дв/минNPV, dv / min ИсходноOriginally 185,5±3,7185.5 ± 3.7 126,3±4,3126.3 ± 4.3 414,3±8,6414.3 ± 8.6 72,3±5,872.3 ± 5.8 Кровопотеря/ ИнъекцияBlood loss / injection 52,8±3,552.8 ± 3.5 31,3±4,831.3 ± 4.8 366,0±32,5366.0 ± 32.5 60,5±5,960.5 ± 5.9 2 минуты2 minutes 77,3±7,377.3 ± 7.3 53,5±8,1^* 53.5 ± 8.1 ^* 5 минут5 minutes 101,5±14,1^* 101.5 ± 14.1 ^* 78,8±14,8^{* m} 78.8 ± 14.8 ^{* m} 394,0±33,0394.0 ± 33.0 67,5±6,967.5 ± 6.9 10 минут10 minutes 134,0±21,6^* 134.0 ± 21.6 ^* 108,5±20,2^{* m} 108.5 ± 20.2 ^{* m} 406,0±37,6406.0 ± 37.6 63,1±5,563.1 ± 5.5 20 минут20 minutes 133,5±20,6^* 133.5 ± 20.6 ^* 108,5±18,3^{* m} 108.5 ± 18.3 ^{* m} 389,0±27,3389.0 ± 27.3 65,3±7,165.3 ± 7.1 30 минут30 minutes 150,3±16,8^{* m} 150.3 ± 16.8 ^{* m} 122,5±12,5^{* m} 122.5 ± 12.5 ^{* m} 401,3±21,5401.3 ± 21.5 79,5±7,079.5 ± 7.0 40 минут40 minutes 163,3±5,8 ^{* m} 163.3 ± 5.8 ^{* m} 132,5±4,5^{* m} 132.5 ± 4.5 ^{* m} 391,3±13,7391.3 ± 13.7 77,3±7,977.3 ± 7.9 50 минут50 minutes 160,0±5,9^{* m} 160.0 ± 5.9 ^{* m} 129,0±5,4^{* m} 129.0 ± 5.4 ^{* m} 381,5±8,5381.5 ± 8.5 68,4±5,968.4 ± 5.9 60 минут60 minutes 163,8±7,6^{* m} 163.8 ± 7.6 ^{* m} 132,5±5,0^{* m} 132.5 ± 5.0 ^{* m} 403,0±14,3403.0 ± 14.3 71,5±6,171.5 ± 6.1 70 минут70 minutes 157,8±7,6^{* m} 157.8 ± 7.6 ^{* m} 127,0±7,5^{* m} 127.0 ± 7.5 ^{* m} 401,3±15,6401.3 ± 15.6 78,8±9,278.8 ± 9.2 80 минут80 minutes 158,3±9,3^{* m} 158.3 ± 9.3 ^{* m} 126,8±7,3^{* m} 126.8 ± 7.3 ^{* m} 391,5±19,3391.5 ± 19.3 75,0±9,375.0 ± 9.3 90 минут90 minutes 146,3±14,1^{* m} 146.3 ± 14.1 ^{* m} 120,8±13,2^{* m} 120.8 ± 13.2 ^{* m} 395,3±14,5^* 395.3 ± 14.5 ^* 78,0±10,478.0 ± 10.4 100 минут100 minutes 147,3±4,9^{* m} 147.3 ± 4.9 ^{* m} 119,3±2,9^{* m} 119.3 ± 2.9 ^{* m} 386,0±13,5^* 386.0 ± 13.5 ^* 75,8±10,575.8 ± 10.5 110 минут110 minutes 151,5±5,0^{* m} 151.5 ± 5.0 ^{* m} 121,8±2,9^{* m} 121.8 ± 2.9 ^{* m} 382,5±6,6^* 382.5 ± 6.6 ^* 74,1±10,574.1 ± 10.5 120 минут120 minutes 140,8±8,0^* 140.8 ± 8.0 ^* 111,0±6,9^{* m} 111.0 ± 6.9 ^{* m} 373,8±2,4^* 373.8 ± 2.4 ^* 74,3±9,674.3 ± 9.6 * - статистически достоверное различие (p<0,05) с контрольной группой (Табл.3) по непараметрическому Q-критерию Данна множественных сравнений;* - statistically significant difference (p <0.05) with the control group (Table 3) according to the nonparametric Q-criterion of Dunn multiple comparisons; ^m - статистически достоверное различие (p<0,05) с группой, получавшей мезатон (Табл.4), по непараметрическому Q-критерию Данна множественных сравнений. ^m is a statistically significant difference (p <0.05) with the group receiving mesatone (Table 4), according to the nonparametric Dunn Q-test of multiple comparisons.

Пример 10. В ряду соединений формулы (1) наиболее мощное вазопрессорное действие продемонстрировало производное Т-1059. Введение опытным животным в состоянии тяжелого геморрагического шока соединения Т-1059 в дозе 10 мг/кг (в 25 раз меньше LD₁₆ и в 38 раз меньше LD₅₀) также вызывало резкий подъем артериального давления (Табл.7, Фиг.5).Example 10. Among the compounds of formula (1), the most potent vasopressor effect was demonstrated by the derivative T-1059. The introduction of experimental animals in a state of severe hemorrhagic shock of compound T-1059 at a dose of 10 mg / kg (25 times less than LD ₁₆ and 38 times less than LD ₅₀ ) also caused a sharp increase in blood pressure (Table 7, Figure 5).

Начальная динамика вазопрессорного действия Т-1059 была аналогична действию Т-1049, но степень подъема давления была существенно выше - к 20 минуте АД_С возрастало на 140%, а АД_Д - на 250% относительно показателей контроля. Продолжительность действия соединения Т-1059 также более чем в 5 раз превышала длительность действия мезатона - достоверное вазопрессорное действие наблюдалось со 2 минуты от инъекции и до конца срока наблюдения. Как показано на Фиг.4, в результате мощного прессорного действия Т-1059 показатели АД животных, потерявших 50% циркулирующей крови, поднимались до уровня АД здоровых животных и поддерживались на этом уровне до конца эксперимента. Длительная стабилизация гемодинамических показателей под влиянием Т-1059 также обеспечивала 100% противошоковую защиту - в течение 120 минут наблюдения не погибло ни одно опытное животное.Starting Dynamics vasopressor action of T-1059 was similar to the action of T-1049, but the degree of pressure rise was significantly higher - to _C 20 minute AD increased by 140%, and BP _D - 250% of control parameters. The duration of action of the T-1059 compound was also more than 5 times longer than the duration of the action of mesatone — a significant vasopressor effect was observed from 2 minutes from the injection to the end of the observation period. As shown in FIG. 4, as a result of the powerful pressor action of T-1059, blood pressure indicators of animals that lost 50% of the circulating blood rose to the blood pressure level of healthy animals and were maintained at this level until the end of the experiment. Long-term stabilization of hemodynamic parameters under the influence of T-1059 also provided 100% anti-shock protection - not a single experimental animal died within 120 minutes of observation.

Таблица 7Table 7 Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных животных после тяжелой острой кровопотери при воздействии соединения Т-1059 в дозе 10 мг/кг (n=6)Hemodynamics and respiration of anesthetized animals after severe acute blood loss when exposed to compound T-1059 at a dose of 10 mg / kg (n = 6) Время после кровопотери/ инъекцииTime after blood loss / injection АД_С, ммрт. ст.HELL _C , mmrt. Art. АД_Д, мм рт. ст.HELL _D , mmHg Art. ЧСС, уд./минHeart rate, bpm ЧДД, дв/минNPV, dv / min ИсходноOriginally 179,2±3,6179.2 ± 3.6 124,8±3,1124.8 ± 3.1 409,0±8,2409.0 ± 8.2 63,3±4,563.3 ± 4.5 Кровопотеря/ИнъекцияBlood loss / injection 44,5±3,544.5 ± 3.5 18,3±2,818.3 ± 2.8 348,7±11,2348.7 ± 11.2 63,3±5,563.3 ± 5.5 2 минуты2 minutes 63,5±5,063.5 ± 5.0 37,0±4,6^* 37.0 ± 4.6 ^* 5 минут5 minutes 86,7±7,2^* 86.7 ± 7.2 ^* 59,0±8,7^* 59.0 ± 8.7 ^* 367,3±17,0367.3 ± 17.0 66,3±5,666.3 ± 5.6 10 минут10 minutes 141,2±12,8^{* m} 141.2 ± 12.8 ^{* m} 107,8±9,4^{* m} 107.8 ± 9.4 ^{* m} 389,3±16,0389.3 ± 16.0 58,0±4,158.0 ± 4.1 20 минут20 minutes 181,5±9,3^{* m} 181.5 ± 9.3 ^{* m} 136,7±5,9^{* m} 136.7 ± 5.9 ^{* m} 416,6±16,3^* 416.6 ± 16.3 ^* 63,0±8,963.0 ± 8.9 30 минут30 minutes 166,8±11,8^{* m} 166.8 ± 11.8 ^{* m} 127,5±7,5^{* m} 127.5 ± 7.5 ^{* m} 404,3±16,7404.3 ± 16.7 59,7±5,959.7 ± 5.9 40 минут40 minutes 157,5±20,9^{* m} 157.5 ± 20.9 ^{* m} 113,5±15,9^{* m} 113.5 ± 15.9 ^{* m} 384,5±15,0384.5 ± 15.0 58,7±5,358.7 ± 5.3 50 минут50 minutes 160,2±19,6^{* m} 160.2 ± 19.6 ^{* m} 117,3±12,4^{* m} 117.3 ± 12.4 ^{* m} 377,8±17,3377.8 ± 17.3 58,0±5,258.0 ± 5.2 60 минут60 minutes 174,5±17,4^{* m} 174.5 ± 17.4 ^{* m} 128,8±10,0^{* m} 128.8 ± 10.0 ^{* m} 389,0±19,2389.0 ± 19.2 62,7±6,262.7 ± 6.2 70 минут70 minutes 187,5±6,4 ^{* m} 187.5 ± 6.4 ^{* m} 141,8±4,8^{* m} 141.8 ± 4.8 ^{* m} 409,8±16,5409.8 ± 16.5 58,7±5,958.7 ± 5.9 80 минут80 minutes 189,7±12,2^{* m} 189.7 ± 12.2 ^{* m} 137,5±7,6^{* m} 137.5 ± 7.6 ^{* m} 396,7±14,3^* 396.7 ± 14.3 ^* 59,0±5,859.0 ± 5.8 90 минут90 minutes 188,3±11,9^{* m} 188.3 ± 11.9 ^{* m} 138,8±5,3^{* m} 138.8 ± 5.3 ^{* m} 399,5±15,1^* 399.5 ± 15.1 ^* 63,7±5,563.7 ± 5.5 100 минут100 minutes 169,8±18,9^{* m} 169.8 ± 18.9 ^{* m} 124,8±16,0^{* m} 124.8 ± 16.0 ^{* m} 396,7±16,6^* 396.7 ± 16.6 ^* 65,7±6,565.7 ± 6.5 110 минут110 minutes 180,2±10,1^{* m} 180.2 ± 10.1 ^{* m} 132,2±8,9^{* m} 132.2 ± 8.9 ^{* m} 399,2±16,1^* 399.2 ± 16.1 ^* 62,7±5,162.7 ± 5.1 120 минут120 minutes 173,7±6,2^{* m} 173.7 ± 6.2 ^{* m} 130,3±6,1^{* m} 130.3 ± 6.1 ^{* m} 397,0±17,8^* 397.0 ± 17.8 ^* 63,0±6,463.0 ± 6.4 * - статистически достоверное различие (p<0,05) с контрольной группой (Табл.3) по непараметрическому Q-критерию Данна множественных сравнений;* - statistically significant difference (p <0.05) with the control group (Table 3) according to the nonparametric Q-criterion of Dunn multiple comparisons; ^m - статистически достоверное различие (p<0,05) с группой, получавшей мезатон (Табл.4), по непараметрическому Q-критерию Данна множественных сравнений. ^m is a statistically significant difference (p <0.05) with the group receiving mesatone (Table 4), according to the nonparametric Dunn Q-test of multiple comparisons.

Примеры 7-10 демонстрируют не просто значительное преимущество, а качественное превосходство заявленных соединений над адреномиметическим препаратом по прототипу, поскольку доказывают способность соединений формулы (1) оказывать эффективную помощь при шоковых состояниях (травматических, геморрагических) на догоспитальном этапе, чего нельзя добиться мезатоном и другими вазопрессорными средствами, используемыми в настоящее время.Examples 7-10 demonstrate not just a significant advantage, but the qualitative superiority of the claimed compounds over the adrenomimetic drug according to the prototype, since they prove the ability of the compounds of formula (1) to provide effective assistance in shock conditions (traumatic, hemorrhagic) at the prehospital stage, which cannot be achieved by mesatone and others vasopressor drugs currently used.

Доказательство достижения заявленного результатаProof of achievement of the claimed result

В результате исследований новых производных изотиомочевины впервые синтезированы и охарактеризованы соединения общей формулы (1), обладающие способностью к избирательному ингибированию каталитической активности eNOS и iNOS - тех изоформ NOS, активность которых ведет к развитию гипотонии. Благодаря этой способности заявляемые соединения обладают выраженными вазопрессорными свойствами с минимальными рисками нежелательных эффектов. Соединения формулы (1) являются умеренно токсичными, причем их токсичность в 2 раза ниже, чем у широко используемого вазопрессора адреномиметического действия - препарата мезатон.As a result of studies of new derivatives of isothiourea, compounds of the general formula (1) were first synthesized and characterized, which are capable of selectively inhibiting the catalytic activity of eNOS and iNOS, those NOS isoforms whose activity leads to the development of hypotension. Due to this ability, the claimed compounds possess pronounced vasopressor properties with minimal risks of undesirable effects. The compounds of formula (1) are moderately toxic, and their toxicity is 2 times lower than that of the widely used adrenomimetic vasopressor drug mesaton.

Изучение вазопрессорных свойств соединений формулы (1) проведено на воспроизводящей тяжелую клиническую форму гипотонии экспериментальной модели шока при острой, массивной кровопотере. Результаты исследований свидетельствуют, что однократное введение животным в состоянии тяжелого шока (АД на уровне 55/25) соединений формулы (1) в заведомо нетоксичной дозе 10 мг/кг (1/50-1/14 LD₁₆) сопровождается мощным и длительным вазопрессорным действием. Эффект развивается с первых минут после инъекции, без видимых изменений в состоянии животных. Через 10-20 минут значения АД_С повышаются на 100-140%, а АД_Д - на 200-250% от уровня контрольных животных, не получавших «лечения», и соответствуют 90-100% от показателей до кровотечения. Стабилизация АД под влиянием соединений формулы (1) весьма длительная - вазопрессорный эффект соединений Т-1020 и Т-1049 начинает ослабевать лишь на 100-110 минуте после инъекции, а соединения Т-1059 не ослабевает и через 120 минут. Стойкое улучшение гемодинамики качественно изменяет течение шока -в течение 120 минут наблюдения ни одно из животных, получивших заявленные соединения, несмотря на тяжелую кровопотерю (1/2 объема циркулирующей крови), не погибло, в то время как в контроле летальность к этому сроку достигает 45%.The study of the vasopressor properties of the compounds of formula (1) was carried out on an experimental model of shock reproducing severe clinical form of hypotension in acute, massive blood loss. The results of the studies indicate that a single administration to animals in a state of severe shock (blood pressure at 55/25) of compounds of formula (1) in a known non-toxic dose of 10 mg / kg (1 / 50-1 / 14 LD ₁₆ ) is accompanied by a powerful and prolonged vasopressor effect . The effect develops from the first minutes after the injection, without visible changes in the condition of the animals. After 10-20 minutes BP values _C are increased by 100-140% and BP _D - by 200-250% compared to control animals not receiving "treatment", and correspond to 90-100% of the figures to bleeding. The stabilization of blood pressure under the influence of compounds of formula (1) is very long - the vasopressor effect of compounds T-1020 and T-1049 begins to weaken only 100-110 minutes after injection, and the compounds T-1059 does not weaken after 120 minutes. A persistent improvement in hemodynamics qualitatively changes the course of shock - during 120 minutes of observation, none of the animals that received the claimed compounds, despite heavy blood loss (1/2 of the volume of circulating blood), did not die, while in the control mortality by this time reaches 45 %

В этих исследованиях соединения формулы (1) демонстрируют значительное превосходство над мезатоном. Хотя этот препарат является одним из наиболее длительно действующих α₁-адреномиметиков, однократная инъекция мезатона в высокой дозе (0,5 мг/кг) вызывает вазопрессорный эффект у животных не более чем на 20 минут, а степень подъема АД при этом в 1,5-2 раза слабее, чем при действии заявленных соединений. Непродолжительное и относительно слабое улучшение гемодинамики при действии мезатона, по существу, не влияет на течение шока - к 120 минуте наблюдения летальность в этой группе животных достигла 50%.In these studies, the compounds of formula (1) show significant superiority over mesatone. Although this drug is one of the most long-acting α ₁ -adrenomimetics, a single injection of mesatone in a high dose (0.5 mg / kg) causes a vasopressor effect in animals for no more than 20 minutes, and the degree of blood pressure rise is 1.5 -2 times weaker than with the claimed compounds. A short and relatively weak improvement in hemodynamics under the action of mesatone does not essentially affect the course of shock - by 120 minutes of observation, mortality in this group of animals reached 50%.

Известно, что наиболее эффективным путем лечения геморрагического шока является экстренное возмещение потерянного объема донорской кровью или кровезаменителями. Однако эти мероприятия далеко не всегда доступны, особенно вне клинических условий. Поэтому следует подчеркнуть, что длительная и мощная «противошоковая» защита, обеспечиваемая в данных исследованиях однократными инъекциями заявленных соединений, наглядно демонстрирует их качественное преимущество - способность оказывать эффективную помощь при шоковых состояниях (по крайней мере, при травматических и геморрагических) на догоспитальном этапе, чего нельзя добиться вазопрессорными средствами, используемыми в настоящее время. Это создает новые возможности в лечении острых и, возможно, хронических артериальных гипотензий, а также в случаях неотложной и скорой помощи, и в терапии критических состояний.It is known that the most effective way to treat hemorrhagic shock is an emergency compensation of the lost volume by donor blood or blood substitutes. However, these activities are far from always available, especially outside the clinical setting. Therefore, it should be emphasized that the long-term and powerful "anti-shock" protection provided in these studies by single injections of the claimed compounds clearly demonstrates their qualitative advantage - the ability to provide effective assistance in case of shock conditions (at least in traumatic and hemorrhagic) at the prehospital stage, which cannot be achieved with vasopressor drugs currently used. This creates new opportunities in the treatment of acute and possibly chronic arterial hypotension, as well as in cases of emergency and first aid, and in the treatment of critical conditions.

В этой связи у авторов есть основания предложить в качестве еще одного аспекта данного изобретения новое вазопрессорное средство, содержащее в качестве действующего вещества соединение формулы (1). Новое вазопрессорное средство целесообразно иметь в нескольких лекарственных формах, удобных к применению в различных случаях: в виде твердой лекарственной формы с дозой действующего вещества 5-30 мг, в виде инъекционного раствора, содержащего 1-10% действующего вещества, в виде инфузионного раствора, содержащего 0,01-0,1% действующего вещества. Новое средство может применяться для лечения гипотонических состояний самостоятельно при дозировке, обеспечивающей дозу действующего вещества 0,1-20 мг/кг или в составе фармацевтической композиции, обеспечивающей дозу действующего вещества 0,1-20 мг/кг. Новое средство может использоваться для повышения артериального давления при острой артериальной гипотонии, вызванной травмами, ранениями, ожогами, отравлениями, кровотечениями, хирургическими вмешательствами. Причем способность соединений формулы (1) реализовать вазопрессорное действие, минуя α₁-адернорецепторы, позволяет ожидать у предложенного средства терапевтическую эффективность при гипотониях, развившихся на фоне перидуральной анестезии, при передозировке ганглиоблокаторов, α-адреноблокаторов, нейролептиков, анестетиков, при рефрактерных стадиях шока и других состояниях, когда адреномиметики неэффективны или противопоказаны.In this regard, the authors have reason to propose, as another aspect of the present invention, a new vasopressor agent containing, as an active substance, a compound of formula (1). It is advisable to have a new vasopressor agent in several dosage forms that are convenient for use in various cases: in the form of a solid dosage form with a dose of the active substance 5-30 mg, in the form of an injection solution containing 1-10% of the active substance, in the form of an infusion solution containing 0.01-0.1% of the active substance. The new tool can be used to treat hypotonic conditions on their own at a dosage that provides a dose of the active substance of 0.1-20 mg / kg or as part of a pharmaceutical composition that provides a dose of the active substance of 0.1-20 mg / kg. The new tool can be used to increase blood pressure in acute arterial hypotension caused by injuries, injuries, burns, poisoning, bleeding, and surgical interventions. Moreover, the ability of the compounds of formula (1) to realize a vasopressor effect, bypassing α ₁ -addernoreceptors, allows one to expect therapeutic efficacy of the proposed agent for hypotension developed against the background of epidural anesthesia, with an overdose of ganglion blockers, α-blockers, antipsychotics, anesthetics, and refractory stages of shock and other conditions when adrenergic agonists are ineffective or contraindicated.

Заявляемое средство может быть использовано в виде твердой или жидкой лекарственной формы, содержащей в качестве действующего вещества соединение формулы (1), применяемое самостоятельно или в составе фармацевтической композиции для лечения гипотонических состояний. Такое вазопрессорное средство создает новые возможности в лечении острых и, возможно, хронических артериальных гипотензий, а также в случаях неотложной и скорой помощи, и при лечении критических состояний.The inventive tool can be used in the form of a solid or liquid dosage form containing, as an active substance, a compound of formula (1), used alone or as part of a pharmaceutical composition for the treatment of hypotonic conditions. Such a vasopressor agent creates new opportunities in the treatment of acute and possibly chronic arterial hypotension, as well as in cases of emergency and emergency care, and in the treatment of critical conditions.

Новое вазопрессорное средство может использоваться для повышения артериального давления при острой артериальной гипотонии, вызванной травмами, ранениями, ожогами, отравлениями, кровотечениями, хирургическими вмешательствами. Полный спектр фармакологических возможностей предложенного вазопрессорного средства, безусловно, может быть оценен только при дальнейших детальных исследованиях. Тем не менее, способность соединений формулы (1) реализовать вазопрессорное действие, минуя α₁-адернорецепторы, позволяет ожидать у предложенного средства терапевтическую эффективность при гипотониях, развившихся на фоне перидуральной анестезии, при передозировке ганглиоблокаторов, α-адреноблокаторов, нейролептиков, анестетиков, при рефрактерных стадиях шока и других состояниях, когда адреномиметики неэффективны или противопоказаны.The new vasopressor agent can be used to increase blood pressure in acute arterial hypotension caused by injuries, injuries, burns, poisoning, bleeding, and surgical interventions. The full range of pharmacological possibilities of the proposed vasopressor agent, of course, can only be evaluated with further detailed studies. Nevertheless, the ability of the compounds of formula (1) to realize a vasopressor effect, bypassing α ₁ -addernoreceptors, allows one to expect therapeutic efficacy in the proposed agent for hypotension that develops against the background of epidural anesthesia, with an overdose of ganglion blockers, α-blockers, antipsychotics, anesthetics, and refractory stages of shock and other conditions when adrenergic agonists are ineffective or contraindicated.

Claims

1. N, S-замещенные производные изотиомочевины общей формулы (1) в виде солей с фармакологически приемлемыми кислотами в качестве NOS-ингибирующего и вазопрессорного средства:

в которой:
n=1, 3, то есть ацильный заместитель представляет собой циклобутаноил или циклогексаноил;
R - представляет собой алкильную группу: С₂Н₅, i-С₃Н₇;
НХ - представляет собой фармакологически приемлемую неорганическую или органическую кислоту: HCl, HBr, HI, метилсерную, щавелевую, янтарную и др.1. N, S-substituted isothiourea derivatives of the general formula (1) in the form of salts with pharmacologically acceptable acids as an NOS-inhibiting and vasopressor agent:

wherein:
n = 1, 3, that is, the acyl substituent is cyclobutanoyl or cyclohexanoyl;
R - represents an alkyl group: C ₂ H ₅ , i-C ₃ H ₇ ;
HX - is a pharmacologically acceptable inorganic or organic acid: HCl, HBr, HI, methylsulfuric, oxalic, succinic, etc.

2. Соединение формулы (1) по п. 1, отличающееся тем, что обладает способностью ингибировать каталитическую активность NO-синтаз.2. The compound of formula (1) according to claim 1, characterized in that it has the ability to inhibit the catalytic activity of NO synthases.

3. Соединение формулы (1) по п. 1, отличающееся тем, что обладает вазопрессорным действием, проявляющимся повышением тонуса сосудов и подъемом артериального давления при гипотонических состояниях.3. The compound of formula (1) according to claim 1, characterized in that it has a vasopressor effect, manifested by an increase in vascular tone and an increase in blood pressure in hypotonic conditions.

4. Соединение формулы (1) по пп. 1 и 3 для получения фармацевтической композиции в виде твердых лекарственных форм при дозе действующего вещества 5-30 мг для лечения гипотонических состояний.4. The compound of formula (1) according to claims. 1 and 3 to obtain a pharmaceutical composition in the form of solid dosage forms at a dose of the active substance of 5-30 mg for the treatment of hypotonic conditions.

5. Соединение формулы (1) по пп. 1 и 3 для получения фармацевтической композиции в виде инъекционного раствора, содержащего 1-10% действующего вещества, для лечения неотложных состояний.5. The compound of formula (1) according to claims. 1 and 3 to obtain a pharmaceutical composition in the form of an injection solution containing 1-10% of the active substance for the treatment of emergency conditions.

6. Соединение формулы (1) по пп. 1 и 3 для получения фармацевтической композиции в виде инфузионного раствора, содержащего 0,01-0,1% действующего вещества, для лечения неотложных состояний. 6. The compound of formula (1) according to claims. 1 and 3 to obtain a pharmaceutical composition in the form of an infusion solution containing 0.01-0.1% of the active substance for the treatment of emergency conditions.