RU2545734C1 - Drug preparation for parkinson disease - Google Patents
Drug preparation for parkinson disease Download PDFInfo
- Publication number
- RU2545734C1 RU2545734C1 RU2014103180/15A RU2014103180A RU2545734C1 RU 2545734 C1 RU2545734 C1 RU 2545734C1 RU 2014103180/15 A RU2014103180/15 A RU 2014103180/15A RU 2014103180 A RU2014103180 A RU 2014103180A RU 2545734 C1 RU2545734 C1 RU 2545734C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- dopa
- drug
- plga
- lactic
- disease
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано для создания лекарственного препарата на основе биодеградирующих полимеров для лечения болезни Паркинсона.The invention relates to the pharmaceutical industry and can be used to create a drug based on biodegradable polymers for the treatment of Parkinson's disease.
Болезнь Паркинсона (БП) - хроническое прогрессирующее заболевание головного мозга, преимущественно связанное с дегенерацией дофаминергических нейронов черной субстанции и проявляющееся сочетанием гипокинезии с ригидностью, тремором покоя и постуральной неустойчивостью. БП - одно из наиболее частых неврологических заболеваний пожилого возраста: его распространенность среди лиц старше 65 лет достигает 2%. Распространенность БП составляет от 120 до 180 на 100 000 населения, заболеваемость - от 12 до 20 случаев на 100 000 населения в год [1, 2]. Прогноз условно неблагоприятный. Больные, не получающие лечения, в среднем теряют возможность обслуживать себя самостоятельно через 8 лет от начала заболевания, а через 10 лет становятся прикованными к постели [1]. Лица, принимающие адекватную терапию, становятся зависимыми от обслуживающих их лиц в среднем через 15 лет [1]. При относительно раннем развитии болезни Паркинсона быстрее всего прогрессируют симптомы нарушения двигательной активности, а при появлении первых симптомов заболевания у лиц 70 лет и старше на первый план выходят психические расстройства [3]. В последнее время среди больных паркинсонизмом все больше молодых людей. Очевидно, это связано с распространением наркотиков, в которых могут присутствовать токсичные для нейронов черного тела примеси. При болезни Паркинсона в стриатуме, одном из подкорковых отделов мозга, участвующем в координации двигательной активности и формировании эмоциональной реакции, понижено содержание нейромедиатора дофамина. Кроме того, поражаются структуры экстрапирамидной системы - базальные ядра и черное вещество, голубое пятно и другие [3]. Наиболее выраженные изменения отмечают в передних отделах черной субстанции. Характерные для болезни Паркинсона симптомы (клинические проявления) возникают при гибели 60-80% нейронов данного анатомического образования [4, 5].Parkinson's disease (PD) is a chronic progressive disease of the brain, mainly associated with the degeneration of dopaminergic neurons of the substantia nigra and manifested by a combination of hypokinesia with rigidity, resting tremor and postural instability. PD is one of the most common neurological diseases of the elderly: its prevalence among people over 65 reaches 2%. The prevalence of PD is from 120 to 180 per 100 000 population, the incidence is from 12 to 20 cases per 100 000 population per year [1, 2]. The forecast is conditionally unfavorable. Patients who do not receive treatment, on average, lose the opportunity to serve themselves independently after 8 years from the onset of the disease, and after 10 years they become bedridden [1]. Persons taking adequate therapy become dependent on their carers after an average of 15 years [1]. With a relatively early development of Parkinson's disease, the symptoms of impaired motor activity progress most quickly, and when the first symptoms of the disease appear in
Этиологическими факторами риска БП считаются старение, генетическая предрасположенность, воздействие факторов окружающей среды [4, 6, 7]. Патоморфологически нормальное старение сопровождается уменьшением числа нейронов черной субстанции и наличием в них телец Леви. Старению также сопутствуют нейрохимические изменения в стриатуме - снижение содержания дофамина и фермента тирозингидроксилазы, а также уменьшение числа дофаминовых рецепторов. С помощью позитронно-эмиссионной томографии доказано, что темпы дегенерации нейронов черной субстанции при болезни Паркинсона намного выше, чем при нормальном старении [6]. Около 15% людей с болезнью Паркинсона имеют семейный анамнез данного заболевания. Однако гены, ответственные за развитие болезни Паркинсона, не идентифицированы [6]. Причинами паркинсоноподобных проявлений также могут быть вирусная инфекция, опухоль, механические повреждения нейронов черного тела (травмы), воздействие факторов окружающей среды (пестициды, гербициды, соли тяжелых металлов) [8], хроническая цереброваскулярная недостаточность или употребление лекарств, вызывающих экстрапирамидные побочные эффекты [9]. Окислительная гипотеза возникновения БП отводит важную роль свободным радикалам, образующимся при окислительном метаболизме дофамина и влияющих на развитие и прогрессирование болезни Паркинсона. Увеличение содержания веществ, которые могут служить донорами электронов, в черном веществе, способствует образованию свободных радикалов [6]. Кроме того, при окислении дофамина под действием МАО образуется перекись водорода. Если перекись водорода не связывается с глутатионом, то происходит накопление весьма реакционно-способных гидроксильных радикалов, которые вступают в реакцию с липидами клеточных мембран, вызывая перекисное окисление липидов и гибель клеток черного вещества.The etiological risk factors for PD are considered aging, genetic predisposition, and environmental factors [4, 6, 7]. Pathomorphologically normal aging is accompanied by a decrease in the number of neurons of the substantia nigra and the presence of Levi bodies in them. Aging is also accompanied by neurochemical changes in the striatum - a decrease in the content of dopamine and the tyrosine hydroxylase enzyme, as well as a decrease in the number of dopamine receptors. Using positron emission tomography, it was proved that the rate of degeneration of neurons of the substantia nigra in Parkinson's disease is much higher than in normal aging [6]. About 15% of people with Parkinson's disease have a family history of the disease. However, the genes responsible for the development of Parkinson's disease are not identified [6]. Parkinson-like manifestations can also be caused by a viral infection, a tumor, mechanical damage to black body neurons (trauma), exposure to environmental factors (pesticides, herbicides, salts of heavy metals) [8], chronic cerebrovascular insufficiency or the use of drugs that cause extrapyramidal side effects [9 ]. The oxidative hypothesis of the onset of PD plays an important role in the free radicals formed during the oxidative metabolism of dopamine and affect the development and progression of Parkinson's disease. An increase in the content of substances that can serve as electron donors in the black substance promotes the formation of free radicals [6]. In addition, the oxidation of dopamine by MAO produces hydrogen peroxide. If hydrogen peroxide does not bind to glutathione, then there is an accumulation of highly reactive hydroxyl radicals that react with lipids of cell membranes, causing lipid peroxidation and cell death of the black substance.
Болезнь Паркинсона на вторую половину 2013 года является неизлечимой, все существующие методы лечения направлены на облегчение ее симптомов (симптоматическое лечение). К основным препаратам, устраняющим двигательные нарушения, относятся: 3,4-дигидрокси-L-фенилаланин - леводопа (чаще в комбинации с периферическими ингибиторами ДОФА-декарбоксилазы или реже с ингибиторами КОМТ), агонисты дофаминовых рецепторов и ингибиторы МАО-Б [10].Parkinson's disease in the second half of 2013 is incurable, all existing treatment methods are aimed at alleviating its symptoms (symptomatic treatment). The main drugs that eliminate motor disorders include: 3,4-dihydroxy-L-phenylalanine - levodopa (more often in combination with peripheral DOPA-decarboxylase inhibitors or less often with COMT inhibitors), dopamine receptor agonists and MAO-B inhibitors [10].
Спустя несколько десятилетий после своего появления препараты леводопы остаются самыми эффективными противопаркинсоническими средствами, в сравнении с которыми оценивается активность всех других средств [1, 11, 12]. Леводопа эффективна в отношении всех трех основных симптомов БП: гипокинезии, тремора, ригидности [1, 12]. Поскольку препараты леводопы остаются наиболее эффективным лечебным средством на всех стадиях БП, их назначают практически всем больным с этим заболеванием.Several decades after its appearance, levodopa drugs remain the most effective anti-Parkinsonian drugs, in comparison with which the activity of all other drugs is evaluated [1, 11, 12]. Levodopa is effective against all three main symptoms of PD: hypokinesia, tremor, rigidity [1, 12]. Since levodopa preparations remain the most effective therapeutic agent at all stages of PD, they are prescribed to almost all patients with this disease.
Леводопа (L-ДОФА) - аминокислота, непосредственный метаболический предшественник дофамина, которая в отличие от него способна с помощью переносчика проникать через гематоэнцефалический барьер и компенсировать дефицит дофамина в мозге, лежащий в основе многих клинических проявлений БП. Леводопа всасывается в проксимальном отделе тонкой кишки и захватывается окончаниями сохранившихся дофаминергических нигростриарных нейронов, подвергаясь в них декарбоксилированию, превращается в дофамин, который выделяется в синаптическую щель, поддерживая адекватное функциональное состояние нейронов полосатого тела и других базальных ганглиев [1, 11, 12]. Эффективность леводопа в отношении выработки дофамина и его биологическая доступность намного выше по сравнению с другими предшественниками дофамина - фенилаланином и тирозином. Большим преимуществом препаратов L-ДОФА является и тот факт, что использование их в терапевтических дозах не нарушает синтез эндогенного дофамина, а наоборот, усиливает его выработку [1].Levodopa (L-DOPA) is an amino acid, a direct metabolic precursor of dopamine, which, in contrast to it, is able to penetrate the blood-brain barrier and compensate for dopamine deficiency in the brain, which underlies many clinical manifestations of PD. Levodopa is absorbed in the proximal part of the small intestine and is captured by the ends of the preserved dopaminergic nigrostriatal neurons, decarboxylated in them, converted into dopamine, which is secreted into the synaptic cleft, maintaining an adequate functional state of the striatum neurons and other basal ganglia [1, 11, 12]. The effectiveness of levodopa in relation to the production of dopamine and its bioavailability is much higher compared to other dopamine precursors - phenylalanine and tyrosine. A great advantage of L-DOPA preparations is the fact that their use in therapeutic doses does not violate the synthesis of endogenous dopamine, but rather enhances its production [1].
В наши дни леводопа - основной, но далеко не идеальный препарат для лечения болезни Паркинсона. К недостаткам следует отнести относительно низкую биодоступность препарата, колебания степени абсорбции препарата в желудочно-кишечном тракте, особенно при нарушении моторных функций кишечника, и короткий период полураспада в плазме крови (T1/2 до 3 ч). Он проникает не только в мозг, но и в другие органы проходит не хуже. В результате этих процессов часто больше 50% лекарства теряется, не достигая клеток - мишеней. Поэтому, чтобы создать нужную концентрацию в капиллярах мозга, требуются огромные дозы (начальная доза 0,25 г в день, которую при необходимости увеличивают до 4-5 г, а при хорошей переносимости суточная доза достигает 6 г). При развитии побочных явлений уменьшают дозу или прекращают прием препарата [11].Nowadays, levodopa is the main, but far from ideal, treatment for Parkinson's disease. The disadvantages include the relatively low bioavailability of the drug, fluctuations in the degree of absorption of the drug in the gastrointestinal tract, especially with impaired intestinal motor function, and a short half-life in blood plasma (T 1/2 to 3 hours). It penetrates not only the brain, but also passes into other organs no worse. As a result of these processes, often more than 50% of the drug is lost without reaching the target cells. Therefore, to create the desired concentration in the capillaries of the brain, huge doses are required (the initial dose of 0.25 g per day, which, if necessary, is increased to 4-5 g, and with good tolerance, the daily dose reaches 6 g). With the development of side effects, reduce the dose or stop taking the drug [11].
Важное значение имеют еще две особенности леводопы. Во-первых, препарат обеспечивает наиболее гарантированный эффект при БП: оказывает лечебное действие более чем у 95% пациентов [6]. Соответственно положительная реакция на препараты леводопы - важный критерий диагностики этого заболевания. При БП леводопа дает положительный эффект в течение всего срока ее назначения: от самых ранних до финальных стадий болезни. Более того, величина лечебного эффекта в течение всех лет применения леводопы остается почти неизменной [6].Two more features of levodopa are important. Firstly, the drug provides the most guaranteed effect in PD: it has a therapeutic effect in more than 95% of patients [6]. Accordingly, a positive reaction to levodopa preparations is an important criterion for the diagnosis of this disease. With PD, levodopa gives a positive effect during the entire period of its appointment: from the earliest to the final stages of the disease. Moreover, the magnitude of the therapeutic effect during all years of the use of levodopa remains almost unchanged [6].
В результате уменьшения нигростриарных терминалей нейронов в стриатуме утрачивается их "буферная" функция - способность накапливать и плавно высвобождать дофамин, образуемый из экзогенной леводопы. В сохранившихся нейронах ускоряется кругооборот дофамина - клетки быстрее высвобождают, а не накапливают дофамин в везикулах. Леводопа все в большей степени перерабатывается в дофамин в соседних глиальных и недофаминергических (например, серотонинергических) нейронах, в которых содержится ДОФА-декарбоксилаза, но отсутствует механизм, регулирующий выброс и обратный захват дофамина, что приводит к массивному неконтролируемому высвобождению дофамина вскоре после приема очередной дозы. Вновь синтезированный дофамин проникает в межклеточное пространство и диффундирует в синаптические щели. В результате концентрация дофамина в синапсе попадает в зависимость от колебаний уровня леводопы в крови и резко меняется в широких пределах. Вскоре после приема очередной дозы она резко повышается, а затем быстро падает. В результате стимуляция дофаминовых рецепторов из тонической превращается в пульсирующую, нефизиологическую, что в свою очередь изменяет функциональное состояние рецепторного аппарата и стриарных нейронов [13, 14].As a result of a decrease in the nigrostriatal terminals of neurons in the striatum, their "buffer" function is lost - the ability to accumulate and smoothly release dopamine formed from exogenous levodopa. In surviving neurons, the dopamine cycle accelerates - cells release faster, rather than accumulate dopamine in the vesicles. Levodopa is increasingly being converted to dopamine in neighboring glial and nedopaminergic (e.g. serotonergic) neurons that contain DOPA decarboxylase, but lack a mechanism to regulate the release and reuptake of dopamine, which leads to massive uncontrolled release of dopamine shortly after taking the next dose . The newly synthesized dopamine penetrates into the intercellular space and diffuses into the synaptic clefts. As a result, the concentration of dopamine in the synapse becomes dependent on fluctuations in the level of levodopa in the blood and changes dramatically over a wide range. Soon after taking the next dose, it rises sharply, and then quickly drops. As a result, stimulation of dopamine receptors from the tonic one turns into a pulsating, non-physiological one, which in turn changes the functional state of the receptor apparatus and striatal neurons [13, 14].
Таким образом, можно выделить пресинаптические механизмы развития флюктуаций (критическое снижение количества нигростриарных терминалей) и постсинаптические механизмы, инициируемые пульсирующей стимуляцией дофаминовых рецепторов. Постсинаптические механизмы могут быть связаны с изменением чувствительности дофаминовых рецепторов или опосредованы внутриклеточными сигнальными системами, контролирующими состояние генов и продукцию белков в проекционных нейронах стриатума [13].Thus, presynaptic mechanisms for the development of fluctuations (a critical decrease in the number of nigrostriatal terminals) and postsynaptic mechanisms initiated by pulsating stimulation of dopamine receptors can be distinguished. Postsynaptic mechanisms may be associated with changes in the sensitivity of dopamine receptors or mediated by intracellular signaling systems that control the state of genes and protein production in projection neurons of the striatum [13].
Одним из подходов устранения вышеперечисленных недостатков препарата, а также снижения возможных побочных эффектов и увеличения эффективности и оптимизации метаболизма является изменение лекарственной формы препарата леводопа, способной обеспечить снижение дозы, необходимой для достижения заданного эффекта, с помощью контролируемого высвобождения и оптимизации биораспределения.One of the approaches to eliminating the above disadvantages of the drug, as well as reducing possible side effects and increasing the efficiency and optimization of metabolism, is to change the dosage form of the drug levodopa, which can provide a dose reduction necessary to achieve the desired effect using controlled release and optimization of biodistribution.
Ранее В.И. Швецом и др. [15, 16] была показана перспективность использования липосом (фосфолипидных пузырьков) для защиты L-ДОФА от деструктивного действия ферментов. Эти микросферы (размером от 25 нм до 1 мкм) служили своеобразным контейнером для препарата, защищая его от преждевременного декарбоксилирования и не допуская быстрого падения концентрации активного вещества в крови, в результате чего была повышена эффективность действия препарата более чем в 10 раз по сравнению с его раствором. Большая активность липосомального L-ДОФА объяснялась также легкостью проникновения этой лекарственной формы через гематоэнцефалический барьер. Этими опытами была показана принципиальная перспективность использования ДОФА в виде наносомальной лекарственной формы для лечения болезни Паркинсона.Earlier V.I. Shvets et al. [15, 16] showed the promise of using liposomes (phospholipid vesicles) to protect L-DOPA from the destructive effect of enzymes. These microspheres (ranging in size from 25 nm to 1 μm) served as a kind of container for the drug, protecting it from premature decarboxylation and preventing a rapid drop in the concentration of the active substance in the blood, as a result of which the effectiveness of the drug was increased by more than 10 times compared to its solution. The high activity of liposomal L-DOPA was also explained by the ease of penetration of this dosage form through the blood-brain barrier. These experiments showed the fundamental promise of using DOPA in the form of a nanosomal dosage form for the treatment of Parkinson's disease.
Следует отметить, что использование липосомальных лекарственных форм обеспечивает также пролонгированность действия препаратов и снижение их токсичности. В работе During M.J. и др. было показано, что липосомы с включенным ДОФА, имплантированные в частично денервируемый стриатум крыс, проявляли пролонгированный эффект в течение 40 дней. Малые одноламеллярные везикулы были получены озвучиванием липосомальной дисперсии. Результаты этих исследований свидетельствовали о частичном восстановлении дефицита дофамина у животных с апоморфин-индуцированной моделью БП [17].It should be noted that the use of liposomal dosage forms also ensures a prolonged action of drugs and a decrease in their toxicity. In During M.J. et al. it was shown that DOPA-incorporated liposomes implanted in a partially denervated striatum of rats showed a prolonged effect for 40 days. Small unilamellar vesicles were obtained by scoring liposome dispersion. The results of these studies indicated a partial restoration of dopamine deficiency in animals with an apomorphine-induced PD model [17].
К существенным недостаткам липосомальных препаратов следует отнести высокую стоимость используемых фосфолипидов, а также их низкую стабильность при хранении.Significant disadvantages of liposomal preparations include the high cost of the phospholipids used, as well as their low storage stability.
Как указывалось выше, альтернативой липосомальным препаратам являются формы лекарственных веществ на основе биосовместимых, биодеградирующих полимеров, например на основе сополимеров молочной и гликолевой кислот. Данные лекарственные формы представляют полимерные частицы микронных и субмикронных размеров с включенным активным соединением и стабилизированные от агрегации поверхностно-активным веществом (ПАВ). В состав композиции входит также криопротектор, необходимый для сублимационной сушки препарата.As mentioned above, an alternative to liposomal drugs is the form of drugs based on biocompatible, biodegradable polymers, for example, based on copolymers of lactic and glycolic acids. These dosage forms represent polymer particles of micron and submicron sizes with an active compound incorporated and stabilized against aggregation by a surface-active substance (surfactant). The composition also includes a cryoprotectant, necessary for freeze-drying the drug.
Предпринималась попытка включения ДОФА и дофамина в микросферы сформированные из полиамидного полимера [18]. Однако изучение кинетики высвобождения вещества из полимерных частиц в опытах in vitro показала бесперспективность их дальнейшего использования.An attempt was made to incorporate DOPA and dopamine into microspheres formed from a polyamide polymer [18]. However, the study of the kinetics of the release of substances from polymer particles in in vitro experiments showed the futility of their further use.
Известен способ [19] получения препарата на основе L-ДОФА в составе полимерных частиц, образованных сополимером молочной и гликолевой кислот. В качестве стабилизатора эмульсии используется поливиниловый спирт. Для получения частиц выбран метод двойных эмульсий, в отличие от использованного модифицированнного метода простых эмульсий.A known method [19] of obtaining a preparation based on L-DOPA in the composition of polymer particles formed by a copolymer of lactic and glycolic acids. Polyvinyl alcohol is used as an emulsion stabilizer. To obtain particles, the double emulsion method was chosen, in contrast to the modified simple emulsion method used.
Известна композиция сухого порошка [RU 2484823, C2, A61K 31/485, A61K 9/14, A61K 9/16, A61K 9/12, A61K 9/72, A61P 25/16, 20.06.2013], содержащая апоморфин, для введения посредством легочной ингаляции, для лечения патологических состояний центральной нервной системы, включая болезнь Паркинсона, содержащая апоморфин и стеарат магния, при этом включает номинальную дозу апоморфина примерно от 3 мг до 10 мг и обеспечивает дозу фракции мелких частиц (FPF), составляющую примерно от 2 до 6 мг при введении.A known dry powder composition [RU 2484823, C2, A61K 31/485, A61K 9/14, A61K 9/16, A61K 9/12, A61K 9/72, A61P 25/16, 06/20/2013] containing apomorphine, for administration through pulmonary inhalation, for the treatment of pathological conditions of the central nervous system, including Parkinson's disease, containing apomorphine and magnesium stearate, while it includes a nominal dose of apomorphine from about 3 mg to 10 mg and provides a dose of a fraction of fine particles (FPF) of about 2 to 6 mg when administered.
Недостатком композиции является относительно низкая эффективность лечения.The disadvantage of the composition is the relatively low treatment effectiveness.
Наиболее близкой фармацевтической композицией к предложенной является фармацевтическая композиция [RU 2440100, C2, A61K 9/20, A61K 31/198, A61K 47/12, A61P 25/16, 20.01.2012], содержащая пищевую кислоту или комбинацию пищевых кислот, обеспечивающую pH композиции в диапазоне 5,5-6,5, и фармакологически эффективное количество микронизированного L-ДОФА в качестве активного ингредиента, в которой активный ингредиент присутствует в виде частиц на поверхности более крупных частиц носителя.The closest pharmaceutical composition to the proposed one is the pharmaceutical composition [RU 2440100, C2, A61K 9/20, A61K 31/198, A61K 47/12, A61P 25/16, 01/20/2012] containing food acid or a combination of food acids that provide pH compositions in the range of 5.5-6.5; and a pharmacologically effective amount of micronized L-DOPA as an active ingredient in which the active ingredient is present in particulate form on the surface of larger carrier particles.
Эта композиция используется для лечения болезни Паркинсона пациентом, страдающим или склонным к такому заболеванию. Лечение направлено на устранение двигательных флуктуаций у больных, принимающих L-ДОФА для лечения болезни Паркинсона.This composition is used to treat Parkinson's disease by a patient suffering from or prone to such a disease. The treatment is aimed at eliminating motor fluctuations in patients taking L-DOPA for the treatment of Parkinson's disease.
Недостатком композиции является относительно низкая эффективность лечения.The disadvantage of the composition is the relatively low effectiveness of the treatment.
Задачей, на решение которой направлено настоящее изобретение, является повышение эффективности лечения болезни Паркинсона.The problem to which the present invention is directed, is to increase the effectiveness of the treatment of Parkinson's disease.
Требуемый технический результат заключается в создании фармацевтической композиции, повышающей эффективность лечения болезни Паркинсона при меньших дозах, и тем самым снижать риск возникновения и степень токсических эффектов, с одновременным достижением эффекта пролонгации действия, снижения кратности приема при лечении.The required technical result is to create a pharmaceutical composition that increases the effectiveness of the treatment of Parkinson's disease at lower doses, and thereby reduce the risk of occurrence and the degree of toxic effects, while achieving the effect of prolonging the action, reducing the frequency of administration during treatment.
Поставленная задача решается, а требуемый технический результат достигается тем, что, предложен лекарственный препарат ДОФА-ПК на основе микронизированного L-ДОФА (3-гидрокси-L-тирозина) в качестве активного ингредиента, согласно изобретению, он представляет собой стабильные частицы, содержащие или сополимер молочной и гликолевой кислот 50/50 (PLGA 50/50), или сополимер молочной и гликолевой кислот 75/25 (PLGA 75/25), или сополимер молочной и гликолевой кислот 50/50 с карбоксильной группой (PLGA-COOH 50/50), или полимер молочной кислоты (PLA), D-маннитол, а также или поливиниловый спирт (ПВС), или Твин-80 при следующем соотношении компонентов, масс.%:The problem is solved, and the required technical result is achieved by the fact that the proposed drug DOPA-PK based on micronized L-DOPA (3-hydroxy-L-tyrosine) as an active ingredient, according to the invention, it is a stable particle containing or a copolymer of lactic and
Кроме того, требуемый технический результат достигается тем, что используют стабильные частицы субмикронного размера от 100 до 400 нм.In addition, the required technical result is achieved by using stable particles of submicron size from 100 to 400 nm.
В предложенной фармацевтической композиции в качестве активного ингредиента используют L-ДОФА (3-гидрокси-L-тирозина), в качестве биодеградируемого полимера используют сополимер молочной и гликолевой кислот 50/50 (PLGA 50/50), или сополимер молочной и гликолевой кислот 75/25 (PLGA 75/25), или сополимер молочной и гликолевой кислот 50/50 с карбоксильной группой (PLGA-COOH 50/50), или полимер молочной кислоты (PLA), в качестве криопротектора используют D-маннитол, а в качестве поверхностно-активного вещества используют или поливиниловый спирт, или Твин-80.In the proposed pharmaceutical composition, L-DOPA (3-hydroxy-L-tyrosine) is used as the active ingredient, a 50/50 lactic and glycolic acid copolymer (
На чертежах представлены:The drawings show:
на фиг.1 - графики эффективности ДОФА-ПК при хроническом назальном введении в дозе 0,35 мг/кг (по L-ДОФА), в сравнении со стандартным препаратом L-ДОФА в той же дозе;figure 1 - graphs of the effectiveness of DOPA-PC with chronic nasal administration at a dose of 0.35 mg / kg (L-DOPA), in comparison with the standard preparation of L-DOPA in the same dose;
на фиг.2 - пролонгированный эффект ДОФА-ПК при хроническом ежедневном введении (результаты теста через 0,5 и 24 часа после назального введения препарата в дозе 0,35 мг/кг (по L-ДОФА) крысам Wistar с моделью БП.figure 2 - prolonged effect of DOPA-PC with chronic daily administration (test results after 0.5 and 24 hours after nasal administration of the drug at a dose of 0.35 mg / kg (L-DOPA) to Wistar rats with a BP model.
на фиг.3 - результаты исследования поведения животных с БП в тесте «открытое поле» после введения ДОФА-ПК в дозе 0.35 мг/кг - исследование количества стоек (фиг.3, А), количества актов груминга (фиг.3, Б);figure 3 - the results of a study of the behavior of animals with BP in the test "open field" after the introduction of DOPA-PC at a dose of 0.35 mg / kg - a study of the number of racks (Fig.3, A), the number of grooming acts (Fig.3, B) ;
на фиг.4 - сравнительная эффективность желудочного ведения ДОФА-ПК в дозе 20 мг/кг (фиг.4, А) и назального ведения ДОФА-ПК в дозе 1 мг/кг (фиг.4, Б) здоровым крысам линии Wistar в условиях динамической нагрузки в тесте «плавание с отягощением».figure 4 - the comparative effectiveness of gastric management of DOPA-PK at a dose of 20 mg / kg (Fig. 4, A) and nasal administration of DOPA-PK at a dose of 1 mg / kg (Fig. 4, B) to healthy Wistar rats under conditions dynamic load in the test "swimming with weights."
Предлагаемое изобретение иллюстрируется нижеследующими примерами.The invention is illustrated by the following examples.
Пример 1. Получение полимерных частиц с включенным в них L-ДОФА.Example 1. Obtaining polymer particles with included L-DOPA.
Смесь, состоящую из раствора 500±5.0 мг PLGA 50/50 в 3.0±0.1 мл хлороформа и 100±0,5 мг L-ДОФА, интенсивно перемешивают в течение 30 мин на магнитной мешалке, после чего добавляют по каплям 15±0.5 мл 1% раствора поливинилового спирта, насыщенного L-ДОФА. Полученную эмульсию перемешивают на магнитной мешалке еще 30 минут и гомогенизируют при 24000 об/мин на гомогенизаторе Ultra-Turrax Т-25 (IКА®, ФРГ) 3 раза по 60 сек с перерывами в 1 минуту.A mixture consisting of a solution of 500 ± 5.0
Полученную эмульсию помещают в круглодонную колбу, которую соединяют с роторным испарителем. Упаривание хлороформа проводят при небольшом вакууме и температуре воды в бане ≈35°C. Полученный коллоидный раствор помещают в пробирки для центрифугирования. Частицы осаждают при 13 000 об/мин 15 мин при 4°C. Отбирают надосадочную жидкость, осадок суспендируют в 10 мл ± 30 мкл дистиллированной воды и фильтруют через стеклянный фильтр (диаметр пор 40-100 мкм). После фильтрования в круглодонную колбу с фильтратом добавляют 50±0,2 мг D-маннитола и растворяют его. Коллоидный раствор замораживают и высушивают на сублимационной сушке в течение 24 часов. Проводят необходимые анализы препарата.The resulting emulsion is placed in a round bottom flask, which is connected to a rotary evaporator. Evaporation of chloroform is carried out under a small vacuum and a water temperature in the bath ≈35 ° C. The resulting colloidal solution is placed in centrifugation tubes. Particles precipitated at 13,000 rpm for 15 minutes at 4 ° C. The supernatant is taken, the precipitate is suspended in 10 ml ± 30 μl of distilled water and filtered through a glass filter (pore diameter 40-100 μm). After filtration, 50 ± 0.2 mg of D-mannitol is added to the round bottom flask with the filtrate and dissolved. The colloidal solution is frozen and freeze-dried for 24 hours. Perform the necessary analyzes of the drug.
Оптимальный состав, масс.%The optimal composition, wt.%
Пример 2. Определение размера частиц - ДОФА-ПК Example 2. Determination of particle size - DOPA-PC
Определение размеров частиц проводят методом автокорреляционной спектроскопии. Для анализа используют субмикронный лазерный спектрометр Coulter N4MD фирмы Coulter Electronics (США). Алгоритм измерений основан на программе CONTIN. Навеску композиции препарата 5÷5.5 мг смешивают с 5 мл дистиллированной воды и суспендируют несколько минут путем встряхивания. Полученный коллоидный раствор переносят в специальную кювету и проводят измерение. Озвучивание образца не проводят. Размер частиц составляет 300÷400 нм. Таким образом, из вышеизложенного следует, что:Particle size is determined by autocorrelation spectroscopy. For analysis, a Coulter N4MD submicron laser spectrometer from Coulter Electronics (USA) is used. The measurement algorithm is based on the CONTIN program. A portion of the composition of the drug 5 ÷ 5.5 mg is mixed with 5 ml of distilled water and suspended for several minutes by shaking. The resulting colloidal solution is transferred to a special cuvette and a measurement is performed. Sounding of the sample is not carried out. The particle size is 300 ÷ 400 nm. Thus, from the foregoing, it follows that:
1. Лучшим из исследованных ПАВ является 1.0% водный раствор ПВС;1. The best surfactant studied is a 1.0% aqueous solution of PVA;
2. Оптимальный режим эмульгирования: 24 тыс.об/мин, 3 раза по 1 мин, с интервалами по 1 мин;2. The optimal emulsification mode: 24 thousand rpm, 3 times for 1 min, at intervals of 1 min;
3. Оптимальное объемное соотношение органической и водной фаз составляет 1:5.3. The optimal volumetric ratio of organic and aqueous phases is 1: 5.
Пример 3. Изучение фармакологической эффективности лекарственного средства ДОФА-ПК на крысах с моделью болезни Паркинсона.Example 3. The study of the pharmacological effectiveness of the drug DOPA-PK in rats with a model of Parkinson's disease.
Эффективность терапии исследовали на 40 крысах-самцах линии Wistar (m=335±28r) с фармакологически индуцированной моделью болезни Паркинсона.The efficacy of the therapy was studied in 40 Wistar male rats (m = 335 ± 28r) with a pharmacologically induced Parkinson's disease model.
а) Получение модельных крыс с БП.a) Obtaining model rats with BP.
Для разрушения компактной части черной субстанции была выбрана стандартная методика с использованием нейротоксина 6-OHDA (6- гидроксидофамин) [2, 20], который, имея структуру, сходную с дофамином, демонстрирует высокое сродство с мембранным переносчиком дофамина (DAT) и захватывается дофаминергическими нейронами. В клетке 6-OHDA подвергается окислению с образованием токсичных продуктов - хинонов и активных форм кислорода, повреждающих клетку. Токсин вводили в правое полушарие животныхри помощи стереотаксической установки по координатам AP -4.4; L -1,2; H 7,8, трем группам крыс (n=30). Операцию проводили под общим наркозом. Для этого крысам внутрибрюшинно вводили хлоралгидрат в дозе 400 мг/кг, растворенный в физрастворе (100 мг/мл). Наркотизированной крысе сбривали шерсть на верхней части черепа, затем вводили подкожно 0,3-0,5 мл 2% р-ра новокаина в качестве местной анестезии. Кожу черепа разрезали и растягивали так, чтобы были видны черепные швы. Надкостницу не удаляли. Животное помещали в стереотаксическую установку, фиксировали голову. В манипулятор вставляли иглу и отмеряли координаты от брегмы (пересечения сагиттального и коронарного швов черепа). При помощи иглы шприца сверлили отверстие в черепе, затем иглу меняли на канюлю, заполненную раствором 6-OHDA в дегазованном физрастворе (4 мкг/мкл). Иглу канюли погружали в мозг на необходимую глубину, затем при помощи гамильтоновского шприца на 10 мкл, присоединенного к канюле, вводили 2,5 мкл (10 мкг/крысу) раствора токсина со скоростью 1 мкл/мин. После введения иглу оставляли в мозге еще на 5 минут для предотвращения рефлюкса (обратного вытекания препарата). Контрольным животным вместо раствора токсина вводили дегазованный физраствор. После операции разрез на черепе зашивали, рану обеззараживали левомеколем и фукорцином.To destroy the compact part of the substantia nigra, a standard technique was chosen using neurotoxin 6-OHDA (6-hydroxydopamine) [2, 20], which, having a structure similar to dopamine, shows high affinity for the dopamine membrane carrier (DAT) and is captured by dopaminergic neurons . In a cell, 6-OHDA undergoes oxidation with the formation of toxic products - quinones and reactive oxygen species that damage the cell. The toxin was introduced into the right hemisphere of animals using a stereotactic setup at coordinates AP -4.4; L -1.2; H 7.8, three groups of rats (n = 30). The operation was performed under general anesthesia. To do this, rats were intraperitoneally injected with chloral hydrate at a dose of 400 mg / kg dissolved in saline (100 mg / ml). An anesthetized rat was shaved off the hair on the upper part of the skull, then 0.3-0.5 ml of 2% novocaine solution was injected subcutaneously as local anesthesia. The skin of the skull was cut and stretched so that cranial sutures were visible. The periosteum was not removed. The animal was placed in a stereotactic installation, the head was fixed. A needle was inserted into the manipulator and the coordinates from the bregma (intersection of the sagittal and coronary sutures of the skull) were measured. A hole was drilled in the skull using a syringe needle, then the needle was replaced with a cannula filled with a solution of 6-OHDA in degassed saline (4 μg / μl). The cannula needle was immersed in the brain to the required depth, then using a 10 μl Hamiltonian syringe attached to the cannula, 2.5 μl (10 μg / rat) of the toxin solution was injected at a rate of 1 μl / min. After administration, the needle was left in the brain for another 5 minutes to prevent reflux (backflow of the drug). Instead of a toxin solution, control animals were injected with degassed saline. After the operation, the incision in the skull was sutured, the wound was disinfected with levomecol and fucorcin.
б) Подтверждение нейродегенерацииb) Confirmation of neurodegeneration
Развитие нейродегенеративного процесса подтверждали через три недели после введения токсина, регистрируя односторонние вращения крыс в ответ на введение апоморфина. Апоморфин вводили внутрибрюшинно, в дозе 1,6 мг/кг (раствор 0,4 мг/мл). Через 10 минут крысу помещали в стеклянный цилиндр радиусом 30 см и высотой 40 см. В течение последующих 10 минут регистрировали количество полных оборотов, совершенных крысой с поврежденной черной субстанции, в противоположную сторону относительно стороны введения токсина, в отличие от нормального контроля [21,2].The development of the neurodegenerative process was confirmed three weeks after the introduction of the toxin, registering unilateral rotation of rats in response to the administration of apomorphine. Apomorphine was administered intraperitoneally at a dose of 1.6 mg / kg (0.4 mg / ml solution). After 10 minutes, the rat was placed in a glass cylinder with a radius of 30 cm and a height of 40 cm. Over the next 10 minutes, the number of complete revolutions made by the rat with the damaged black substance was recorded in the opposite direction relative to the side of the toxin, in contrast to the normal control [21,2 ].
в) Исследование эффективности ДОФА-ПК.c) Study of the effectiveness of DOPA-PC.
В качестве препарата сравнения использовали субстанцию L-ДОФА. Препарат ДОФА-ПК и препарат сравнения L-ДОФА вводили хронически, ежедневно, интраназально в дозе 0.35 мг/кг (по L-ДОФА) (0,12 мг/крысу в 1% растворе аскорбиновой кислоты, в объеме - 20 мкл/ноздрю). Для контрольных введений использовался 1% раствор аскорбиновой кислоты с pH 7,0 в стерильной воде для инъекций. Препараты готовили непосредственно перед введением - L-ДОФА растворяли в 1% растворе аскорбиновой кислоты из расчета 3,2 мг/мл, после чего pH доводили до 7. Частицы, с включением препарата 11±1,5%, суспендировали в растворителе в количестве, необходимом для получения концентрации по L-ДОФА - 3,2 мг/мл. Раствор аскорбиновой кислоты готовили раз в неделю и хранили при температуре +4°C.As a comparison drug used the substance L-DOPA. The DOPA-PK preparation and the L-DOPA comparison drug were administered chronically, daily, intranasally at a dose of 0.35 mg / kg (according to L-DOPA) (0.12 mg / rat in 1% ascorbic acid solution, in a volume of 20 μl / nostril) . For control injections, a 1% solution of ascorbic acid with a pH of 7.0 in sterile water for injection was used. Preparations were prepared immediately before administration - L-DOPA was dissolved in a 1% ascorbic acid solution at the rate of 3.2 mg / ml, after which the pH was adjusted to 7. Particles, with the inclusion of the drug 11 ± 1.5%, were suspended in the solvent in an amount necessary to obtain a concentration of L-DOPA - 3.2 mg / ml A solution of ascorbic acid was prepared once a week and stored at a temperature of + 4 ° C.
Эффективность препарата ДОФА-ПК выявляли по улучшению координации движений у животных с моделью БП при выполнении стандартных тестов для исследования поведения животных. Полученные результаты сравнивали с действием стандартного препарата L-ДОФА в той же дозе, а также со здоровыми животными и контролем с БП, не получавшим терапию.The efficacy of the DOPA-PK preparation was revealed by improving the coordination of movements in animals with the BP model when performing standard tests to study animal behavior. The results were compared with the action of the standard preparation L-DOPA in the same dose, as well as with healthy animals and control with PD who did not receive therapy.
г) Используемые тестыd) Used tests
Животных тестировали через 30 мин после введения препарата. Для оценки координации движений, моторных функций, поведенческой и исследовательской активности животных, а также уровня тревожности были проведены следующие тесты.Animals were tested 30 minutes after drug administration. To assess the coordination of movements, motor functions, behavioral and research activity of animals, as well as the level of anxiety, the following tests were carried out.
Постановка конечности. Данный тест использовали для еженедельной оценки координации движений животных с односторонне разрушенной черной субстанцией. Животное держали одной рукой под живот, другой, по необходимости, придерживали за хвост. Животное держали параллельно краю лабораторного стола, ниже его поверхности. Затем медленно поднимали таким образом, чтобы вибриссы (усы) касались края стола, а в конечной точке подъема передняя лапа соответствующей стороны тела была выше края столешницы. Критерием правильного выполнения попытки считали постановку передней конечности ближней к столу стороны тела на поверхность стола. Испытание повторяли 10 раз для каждой стороны, занося в протокол количество успешных попыток [20].Setting limbs. This test was used to weekly evaluate the coordination of animal movements with one-sidedly destroyed black substance. The animal was held with one hand under the stomach, the other, if necessary, held by the tail. The animal was kept parallel to the edge of the laboratory bench, below its surface. Then slowly lifted so that the vibrissa (mustache) touched the edge of the table, and at the end point of the lift, the front paw of the corresponding side of the body was higher than the edge of the countertop. The criterion for the correct execution of the attempt was considered to be the setting of the front limb of the side of the body closest to the table on the table surface. The test was repeated 10 times for each side, recording the number of successful attempts in the protocol [20].
Открытое поле. Данный тест использовали для оценки возможных последствий хронического введения препаратов на двигательную и исследовательскую активность экспериментальных животных в условиях свободного поведения. Тест проводили дважды - до начала введения препаратов и через 6 недель введения. Животное помещали в центр поля квадратной, равномерно освещенной красной лампой площадки, размером 80×80 см, огороженной непрозрачными стенками высотой 30 см и горизонтальной поверхностью, расчерченной на квадраты со стороной 20 см.Open field. This test was used to assess the possible consequences of chronic drug administration on the motor and research activity of experimental animals under conditions of free behavior. The test was performed twice - before the introduction of drugs and after 6 weeks of administration. The animal was placed in the center of the field with a square, uniformly illuminated red lamp of a platform measuring 80 × 80 cm, fenced with opaque walls 30 cm high and a horizontal surface, drawn into squares with a side of 20 cm.
Экспериментаторы фиксировали поведенческую активность животного в течение 2-х минут. Регистрировали следующие параметры: горизонтальную активность животных (количество пройденных квадратов); количество выходов в центр "открытого поля" (центральный квадрат, 20×20 см); вертикальную активность (количество стоек); количество актов груминга.The experimenters recorded the animal’s behavioral activity for 2 minutes. The following parameters were recorded: horizontal animal activity (number of squares traveled); the number of exits to the center of the "open field" (central square, 20 × 20 cm); vertical activity (number of racks); number of grooming acts.
Груминг - это активное поведение животных, направленное на поверхность тела, т.е. умывание, лизание, чистка гениталий, почесывание. Усиление груминга наблюдается у грызунов при помещении в стрессогенную ситуацию и возникает у животных при высокой эмоциональной напряженности.Grooming is an active behavior of animals aimed at the surface of the body, i.e. washing, licking, cleansing the genitals, scratching. Strengthening of grooming is observed in rodents when placed in a stressful situation and occurs in animals with high emotional tension.
К началу введения препаратов результаты групп животных с БП не различались по эффективности выполнения теста «постановка конечности» и эффективность составляла 81±15% выполнения теста от значений здорового контроля.By the beginning of drug administration, the results of groups of animals with PD did not differ in the efficiency of the test “setting the limbs” and the efficiency was 81 ± 15% of the test from the values of the healthy control.
Ежедневное назальное введение ДОФА-ПК в дозе 0,35 мг/кг (по L-ДОФА) привело к достоверному улучшению показателей координации движений в тесте «постановка конечности» в группе животных с БП. При этом эффективность действия полимерной композиции ДОФА-ПК увеличивалась со второго дня введения препарата в течение двух недель и сохранялась неизменной на протяжении всего эксперимента - 17 недель введения и через неделю после отмены препарата. К 22-му дню эксперимента, через 30 мин после введения препаратов, показатели координации в тесте «постановка конечности» в группе животных с ДОФА-ПК составили 94±12%, в группе с L-ДОФА - 68±7% и для группы контрольных животных с БП - 58±15%, от значений здорового контроля. К 120 дню введения показатель координации животных в группе с ДОФА-ПК составил 94±10% (p<0,05) по сравнению с L-ДОФА - 62±13% и контролем БП - 51±28%. Стандартный препарат сравнения - L-ДОФА был достоверно эффективен только после однократного введения - 91±8% (p<0,05). Через неделю после отмены препаратов, значения эффективности выполнения теста для исследованных групп с ДОФА-ПК, L-ДОФА и контроля БП составили 77±15% (p<0,05), 60±15% и 47±29%, соответственно.The daily nasal administration of DOPA-PK at a dose of 0.35 mg / kg (according to L-DOPA) led to a significant improvement in the indicators of coordination of movements in the test "setting limbs" in the group of animals with PD. Moreover, the effectiveness of the polymer composition DOPA-PK increased from the second day of administration of the drug for two weeks and remained unchanged throughout the experiment - 17 weeks of administration and a week after discontinuation of the drug. By the 22nd day of the experiment, 30 minutes after the administration of the preparations, the coordination indices in the test “setting the limbs” in the group of animals with DOPA-PK were 94 ± 12%, in the group with L-DOPA - 68 ± 7% and for the control group animals with PD - 58 ± 15% of the values of healthy control. By the 120th day of administration, the coordination index of animals in the group with DOPA-PK was 94 ± 10% (p <0.05) compared with L-DOPA - 62 ± 13% and the control of BP - 51 ± 28%. The standard reference drug, L-DOPA, was reliably effective only after a single injection — 91 ± 8% (p <0.05). One week after drug withdrawal, the test performance for the studied groups with DOPA-PC, L-DOPA and BP control was 77 ± 15% (p <0.05), 60 ± 15% and 47 ± 29%, respectively.
Комментарий к фиг.1.Commentary on Fig. 1.
Необходимо также отметить, что эффективность действия ДОФА-ПК через 30 мин и через 24 часа после его введения в тесте «постановка конечности» при назальном введении отличалась незначительно. Эти результаты свидетельствуют о пролонгированном эффекте ДОФА-ПК, который сохраняется в течение 24 часов после введения препарата в наноформе.It should also be noted that the effectiveness of DOPA-PC after 30 minutes and 24 hours after its administration in the test "setting limbs" with nasal administration differed slightly. These results indicate the prolonged effect of DOPA-PK, which persists for 24 hours after administration of the drug in nanoform.
Комментарий к фиг.2.Commentary on FIG.
Исследование влияния препарата ДОФА-ПК на поведение животных в тесте «открытое поле» проводили дважды. До начала введения (0 день) и на 42 день (6 нед.) введения препарата. Наиболее информативными были следующие регистрируемые параметры: вертикальная активность (количество стоек) и количество актов груминга. В то время как горизонтальная активность и количество выходов в центр "открытого поля" не изменялись в ходе эксперимента и не отличались между группами. Этот факт позволяет утверждать, что процесс развития односторонней нейродегенерации не оказывает существенного влияния на исследуемые показатели, поскольку животные из группы контроля БП ни по одному из исследованных параметров не отличаются от интактного (здорового) контроля.The study of the effect of the drug DOPA-PC on the behavior of animals in the test "open field" was carried out twice. Before the introduction (0 day) and on day 42 (6 weeks) of the drug. The most informative were the following recorded parameters: vertical activity (number of racks) and the number of grooming acts. While the horizontal activity and the number of exits to the center of the “open field” did not change during the experiment and did not differ between groups. This fact suggests that the development of unilateral neurodegeneration does not significantly affect the studied parameters, since the animals from the BP control group do not differ in any of the studied parameters from the intact (healthy) control.
В то же время введение препарата ДОФА-ПК приводило к достоверному увеличению числа стоек и уменьшению числа актов груминга, что свидетельствует об увеличении исследовательской активности, снижении уровня тревожности и уменьшении времени принятия решений.At the same time, the introduction of the drug DOPA-PC led to a significant increase in the number of racks and a decrease in the number of grooming acts, which indicates an increase in research activity, a decrease in the level of anxiety and a decrease in decision-making time.
Комментарий к фиг.3.Commentary on Fig. 3.
Таким образом, включение L-ДОФА в полимерные частицы достоверно повышает эффективность препарата в сравнении с действием той же дозы стандартного препарата. Доказан пролонгированный эффект в течение 24 часов при ежедневном введении ДОФА-ПК на животных с моделью БП. Кроме того, назальное введение L-ДОФА в составе ПЛГА позволяет значительно снизить эффективную суточную дозу препарата - в 57 раз для животных с БП и, соответственно, кумулятивную дозу препарата.Thus, the inclusion of L-DOPA in polymer particles significantly increases the effectiveness of the drug in comparison with the action of the same dose of a standard drug. Proven prolonged effect for 24 hours with the daily introduction of DOPA-PC in animals with a PD model. In addition, the nasal administration of L-DOPA as part of PGA makes it possible to significantly reduce the effective daily dose of the drug - by 57 times for animals with PD and, accordingly, the cumulative dose of the drug.
Комментарий к фиг.4.Commentary on Fig. 4.
Значимым эффектом ДОФА-ПК является быстрое восстановление моторных функций у больных животных (в течение 1-2-х недель) с сохранением эффекта в течение 17 исследованных недель без увеличения суточной дозы препарата и через неделю после отмены введения препарата, что имеет важное практическое значение. Перечисленные преимущества позволяют снизить побочное действие L-ДОФА. Важно отметить, что эффективность препарата ДОФА-ПК достигается в отсутствие ингибиторов дофадекарбокилазы, применяемых при стандартном лечении препаратами L-ДОФА, что также позволяет снизить риск возникновения побочных эффектов и свидетельствует о принципиально новом свойстве препарата ДОФА-ПК, позволяющем доставлять лекарственное средство в орган-мишень наиболее эффективно.A significant effect of DOPA-PC is the rapid restoration of motor functions in sick animals (within 1-2 weeks) with the effect remaining for 17 weeks studied without increasing the daily dose of the drug and a week after drug withdrawal, which is of great practical importance. These benefits can reduce the side effects of L-DOPA. It is important to note that the effectiveness of the drug DOPA-PK is achieved in the absence of dopadecarbocylase inhibitors used in standard treatment with L-DOPA drugs, which also reduces the risk of side effects and indicates a fundamentally new property of the drug DOPA-PK, which allows the drug to be delivered to the organ the target is most effective.
Пример 4. Изучение токсичности лекарственного средства ДОФА-ПК для лечения болезни Паркинсона на крысах при однократном введении.Example 4. The study of the toxicity of the drug DOPA-PC for the treatment of Parkinson's disease in rats with a single injection.
Оценка степени токсических реакций на введение препарата ДОФА-ПК и препарата сравнения L-ДОФА, осуществлялась при интраназальном способе введения препарата на белых мышах линии Balb\c и крысах-самцах линии Wistar.Assessment of the degree of toxic reactions to the administration of the DOPA-PK preparation and the L-DOPA comparison drug was carried out with the intranasal method of administration of the drug on white Balb \ c mice and Wistar male rats.
Общая продолжительность наблюдений за животными после введения препаратов и контрольных веществ (пустые частицы и растворитель) составляла 14 дней, в первый день животные находились под непрерывным наблюдением.The total duration of observation of animals after administration of drugs and control substances (empty particles and solvent) was 14 days, on the first day the animals were under continuous observation.
Препарат сравнения вводили в дозе 1 мг/кг, ДОФА-ПК - в концентрации 10 мг/кг (по L-ДОФА) каждые 5 минут, в каждую ноздрю по 20 мкл, в течение 5 часов. Животным контрольных групп вводили пустые наночастицы в 1% р-ре аскорбиновой кислоты, в стерильной воде для инъекций (pH 7,0) в объеме, соответствующем объему препарата ДОФА-ПК.The comparison drug was administered at a dose of 1 mg / kg, DOPA-PK at a concentration of 10 mg / kg (L-DOPA) every 5 minutes, 20 μl in each nostril for 5 hours. The animals of the control groups were injected with empty nanoparticles in 1% ascorbic acid solution in sterile water for injection (pH 7.0) in a volume corresponding to the volume of the DOPA-PK preparation.
Выявлено, что введение препаратов не сопровождалось летальностью. Введение 540 мг/кг ДОФА-ПК мышам линии Balb/c массой 19-21 г не вызывало никаких признаков токсического проявления. Состояние животных не отличалось от состояния животных контрольных групп. Все поведенческие реакции на провоцирующие воздействия: тактильный, звуковой и световой раздражители сохранялись. Нарушений мышечного тонуса, проявлений судорожной активности не наблюдалось.It was revealed that the introduction of drugs was not accompanied by mortality. Administration of 540 mg / kg DOPA-PK to Balb / c mice weighing 19-21 g did not cause any signs of toxicity. The condition of the animals did not differ from the state of the animals of the control groups. All behavioral reactions to provocative effects: tactile, sound and light stimuli persisted. Violations of muscle tone, manifestations of convulsive activity were not observed.
Введение 168 мг/кг раствора препарата сравнения L-ДОФА привело к появлению признаков токсичности. У животных наблюдалось снижение спонтанной двигательной активности, кратковременное затруднение дыхания (дыхательные движения редкие, спастические), пилоэрекция, развивались кратковременные клонико-тонические судороги. Провоцирующие воздействия: тактильные, звуковой и световой раздражители, а также воздействие воздушной струей вызывали судорожную реакцию, нехарактерную двигательную реакцию (неуверенная походка, заваливание набок). Через 2-3 часа от момента последнего введения уровень спонтанной двигательной активности восстанавливался. И последующее наблюдение за животными в течение последующих 14 дней не обнаружило каких-либо изменений поведения животных.The administration of 168 mg / kg of a solution of the L-DOPA comparison drug led to signs of toxicity. In animals, there was a decrease in spontaneous motor activity, short-term difficulty in breathing (rare, spastic respiratory movements), piloerection, short-term clonic-tonic convulsions developed. Provocative effects: tactile, sound and light stimuli, as well as exposure to an air stream, caused a convulsive reaction, an uncharacteristic motor reaction (insecure gait, flanking to one side). After 2-3 hours from the moment of the last injection, the level of spontaneous motor activity was restored. And subsequent observation of the animals over the next 14 days did not reveal any changes in animal behavior.
Введение ДОФА-ПК и препарата сравнения L-ДОФА крысам линии Wistar массой 250 г проводили по той же схеме - в течение 5 часов. Наблюдения за животными выявили признаки интоксикации в группе животных, получавших L-ДОФА, после введения 75 мг/кг. При введении вдвое большего количества ДОФА-ПК (по L-ДОФА) - 150 мг/кг, не приводило к появлению каких-либо видимых признаков токсического действия препарата в течение первого дня и последующих 14 дней после введения препарата.The introduction of DOPA-PK and the comparison drug L-DOPA to Wistar rats weighing 250 g was carried out according to the same scheme - for 5 hours. Observations of animals revealed signs of intoxication in the group of animals treated with L-DOPA after administration of 75 mg / kg. With the introduction of twice as much DOPA-PK (according to L-DOPA) - 150 mg / kg, it did not lead to the appearance of any visible signs of the toxic effect of the drug during the first day and the next 14 days after drug administration.
Таким образом, при изучении острой токсичности установлено, что интраназальное (многократное через короткие промежутки времени) введение композиции ДОФА-ПК, в максимально возможном для вида объеме и дозе не сопровождалось летальными исходами испытуемых животных. Наивысшая суммарная доза ДОФА-ПК, достигнутая при многократном интраназальном введении, составила соответственно: на мышах линии Balb/c - 540 мг/кг (по 10 мкл, в каждую ноздрю, каждые 5 мин); на крысах Wistar - 150 мг/кг (по 20 мкл, в каждую ноздрю, каждые 5 мин). Интраназальное введение по той же схеме L-ДОФА также не сопровождалось летальностью испытуемых животных, но проходящие токсические проявления обнаружились при достоверно меньших дозах и были более выражены, чем при действии «ДОФА-ПК». Наблюдалась хорошая переносимость исследуемого средства. Летальных исходов или выраженных проявлений токсических эффектов в момент введения и на протяжении 14 дней наблюдений не отмечалось. Препарат не оказывал раздражающего действия в месте введения.Thus, when studying acute toxicity, it was found that the intranasal (repeated at short intervals) administration of the DOPA-PK composition, to the maximum extent and dose possible for the species, was not accompanied by lethal outcomes of the test animals. The highest total dose of DOPA-PK achieved with repeated intranasal administration was, respectively: on Balb / c mice - 540 mg / kg (10 μl, in each nostril, every 5 min); on Wistar rats, 150 mg / kg (20 μl, in each nostril, every 5 min). Intranasal administration according to the same L-DOPA regimen was also not accompanied by lethality of the tested animals, but passing toxic manifestations were detected at significantly lower doses and were more pronounced than under the action of "DOPA-PK". Good tolerability of the test agent was observed. Lethal outcomes or severe manifestations of toxic effects at the time of administration and during the 14 days of observation were not observed. The drug did not irritate at the injection site.
В макроскопическом исследовании органов и морфометрическом анализе, при патоморфологических исследованиях не обнаружено достоверных изменений в отобранных органах и тканях животных получавших испытуемую композицию ДОФА-ПК, относительно соответствующих органов и тканей у животных контрольной группы и препарата сравнения L-ДОФА.In a macroscopic examination of organs and morphometric analysis, in pathomorphological studies, no significant changes were found in the selected organs and tissues of animals receiving the tested DOPA-PK composition relative to the corresponding organs and tissues in animals of the control group and the L-DOPA comparison drug.
Таким образом, препарат - ДОФА-ПК в условиях подострого эксперимента при и/н введении крысам 20 мг/кг и 50 мг/кг (по действующему веществу) не вызывал летальных исходов, не оказывал выраженного токсического действия. Наблюдалась хорошая переносимость исследуемого лекарственного средства. Полученные данные свидетельствуют о безопасности назального применения ДОФА-ПК.Thus, the drug - DOPA-PK in the conditions of a subacute experiment with i / n administration to rats of 20 mg / kg and 50 mg / kg (according to the active substance) did not cause deaths, did not have a pronounced toxic effect. Good tolerability of the study drug was observed. The data obtained indicate the safety of the nasal use of DOPA-PC.
Таким образом, новый технический результат достигается по совокупности всех существующих признаков предложенной фармацевтической композиции на основе L-ДОФА, позволяющей достигать положительного фармакологического действия при меньших дозах и тем самым снижать риск и степень возникновения токсических эффектов, с одновременным достижением эффекта пролонгации действия, снижения кратности приема при лечении и новом способе введения.Thus, a new technical result is achieved by the totality of all the existing features of the proposed pharmaceutical composition based on L-DOPA, which allows to achieve a positive pharmacological effect at lower doses and thereby reduce the risk and degree of toxic effects, while achieving the effect of prolonging the action, reducing the frequency of administration with treatment and a new method of administration.
Технический результат изобретения достигается путем включения в новую фармацевтическую композицию, построенную на основе L-ДОФА, коммерчески доступных биодеградируемых полимеров, разрешенных к медицинскому применению. В качестве такового используется сополимер гликолевой и молочной кислот (ПЛГА) с молекулярной массой от 10 до 300 кДа и молярным соотношением остатков молочной и гликолевой кислот 50/50%. Для получения стабильной лекарственной формы, применяется также поверхностно-активное вещество - поливиниловый спирт и криопротектор-D-маннитол. Предлагаемую фармацевтическую композицию получают модифицированным методом простого (однократного) эмульгирования (вода/масло).The technical result of the invention is achieved by the inclusion in a new pharmaceutical composition, built on the basis of L-DOPA, commercially available biodegradable polymers that are approved for medical use. As such, a glycolic and lactic acid copolymer (PLGA) with a molecular weight of 10 to 300 kDa and a molar ratio of lactic and glycolic acid residues of 50/50% is used. To obtain a stable dosage form, a surfactant is also used - polyvinyl alcohol and cryoprotectant-D-mannitol. The proposed pharmaceutical composition is obtained by a modified method of simple (single) emulsification (water / oil).
Список использованных источников.List of sources used.
1. Poewe W. The natural history of Parkinson′s disease // J Neurol. - 2006. - T. 253. - C. 7:VII2-6. - PMID 17131223.1. Poewe W. The natural history of Parkinson's disease // J Neurol. - 2006. - T. 253. - C. 7: VII2-6. - PMID 17131223.
2. Dabbeni-Sala F., Di S., Franceschini… D. Melatonin protects against 6-OHDA-induced neurotoxicity in rats: a role for mitochondrial complex I activity. //The FASEB Journal. 2001.10.1096/fj.00-0129com.2. Dabbeni-Sala F., Di S., Franceschini ... D. Melatonin protects against 6-OHDA-induced neurotoxicity in rats: a role for mitochondrial complex I activity. // The FASEB Journal. 2001.10.1096 / fj.00-0129com.
3. Obeso J.A., Rodriguez-Oroz M.C., Benitez-Temino В., Blesa F.J., Guridi J., Marin C., Rodriguez M. Functional organization of the basal ganglia: therapeutic implications for Parkinson′s disease // Mov. Disord. - 2008. - T. 23. - № Suppl 3. - C. S548-59. - PMID 18781672.3. Obeso J.A., Rodriguez-Oroz M.C., Benitez-Temino B., Blesa F.J., Guridi J., Marin C., Rodriguez M. Functional organization of the basal ganglia: therapeutic implications for Parkinson's disease // Mov. Disord - 2008. - T. 23. - No. Suppl 3. - C. S548-59. - PMID 18781672.
4. Robert A Hauser, MD, MBA; Chief Editor: Selim R Benbadis, MD Parkinson Disease. Etiology (англ.). Medscape (Jun 20, 2011). Архивировано из первоисточника 24 августа 2011. Проверено 5 июля 2011.4. Robert A Hauser, MD, MBA; Chief Editor: Selim R Benbadis, MD Parkinson Disease. Etiology. Medscape (
5. Davie С.A. A review of Parkinson′s disease // Br Med Bull. - 2008. - T. 86. - C. 109-127. - PMID 18398010.5. Davie S.A. A review of Parkinson′s disease // Br Med Bull. - 2008. - T. 86. - C. 109-127. - PMID 18398010.
6. Яхно H.H., Штульман Д.P. Болезни нервной системы. - М.: Медицина, 2001. - Т. 2. - С.76-95. - 744 с.- ISBN 5-225-04540-56. Yakhno H.H., Shtulman D.P. Diseases of the nervous system. - M .: Medicine, 2001. - T. 2. - S.76-95. - 744 s. - ISBN 5-225-04540-5
7. Гусев Е.И., Коновалов А.Н. и др. Неврология. Национальное руководство. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 2116 с. - ISBN 978-5-9704-0665-67. Gusev E.I., Konovalov A.N. and other Neurology. National leadership. - M.: GEOTAR-Media, 2009 .-- 2116 p. - ISBN 978-5-9704-0665-6
8. «Ф.Хоффманн-Ля Рош Лтд.» (Базель, Швейцария). «Morbus Parkinson и ее лечение», Москва, 2000.8. “F. Hoffmann-La Roche Ltd.” (Basel, Switzerland). "Morbus Parkinson and its treatment", Moscow, 2000.
9. Tysnes OB, VilmingST.. «Atypical parkinsonism.». PMID 18846125.9. Tysnes OB, VilmingST .. "Atypical parkinsonism.". PMID 18846125.
10. Symptomatic pharmacological therapy in Parkinson′s disease // Parkinson′s Disease / The National Collaborating Centre for Chronic Conditions. - London: Royal College of Physicians, 2006. - P. 59-100. - ISBN 1-86016-283-5.10. Symptomatic pharmacological therapy in Parkinson’s disease // Parkinson’s Disease / The National Collaborating Center for Chronic Conditions. - London: Royal College of Physicians, 2006 .-- P. 59-100. - ISBN 1-86016-283-5.
11. Машковский M.Д. Противопаркинсонические дофаминергические препараты // Лекарственные средства. - 14-е изд., перераб., испр. и доп.- М.:: ООО "Издательство Новая Волна", 2002. - Т. 1. - С.140-144. - 540 с.- ISBN 5-7864-0128-6.11. Mashkovsky M.D. Anti-Parkinsonian dopaminergic drugs // Medicines. - 14th ed., Rev., Rev. and additional - M. :: LLC "New Wave Publishing House", 2002. - T. 1. - S.140-144. - 540 s. - ISBN 5-7864-0128-6.
12. Rowland, Lewis P. Rowland, Timothy A. Pedley. Merritt′s Neurology. - Lippincott Williams & Wilkins, 2009. - 1216 c. - ISBN 9780781791861.12. Rowland, Lewis P. Rowland, Timothy A. Pedley. Merritt′s Neurology. - Lippincott Williams & Wilkins, 2009 .-- 1216 c. - ISBN 9780781791861.
13. Cenci M., Lee C., Björklund A. L-DOPA-induced dyskinesia in the rat is associated with striatal overexpression of prodynorphin and glutamic acid decarboxylase mRNA. // Eur J Neurosci. 1998 Aug;10(8):2694-706, 1998.10.1046/j.1460-9568.1998.00285.x.13. Cenci M., Lee C., Björklund A. L-DOPA-induced dyskinesia in the rat is associated with striatal overexpression of prodynorphin and glutamic acid decarboxylase mRNA. // Eur J Neurosci. 1998 Aug; 10 (8): 2694-706, 1998.10.1046 / j.1460-9568.1998.00285.x.
14. Hanna S.L., Daniella R., Ohlin К.E., Martin L., Cenci M.A. The "motor complication syndrome" in rats with 6-OHDA lesions treated chronically with 1-DOPA: Relation to dose and route of administration. // Behavioural Brain Research. 2007. V. 177.14. Hanna S.L., Daniella R., Ohlin K.E., Martin L., Cenci M.A. The "motor complication syndrome" in rats with 6-OHDA lesions treated chronically with 1-DOPA: Relation to dose and route of administration. // Behavioural Brain Research. 2007.V. 177.
15. Борисова H.B., Каплун А.П., Богомолов O.B., Григорьев В.Б., Юрасов В.В., Никушкин Е.В., Крыжановский Г.Н., Швец В.И. Физико-химические свойства липосомальных форм L-3,4-дигидpoкcифeнилaлaнинa (DOPA) и ДОФАМИНА // Биоорганическая химия 1996. - Т.22. - №10, 11. - С.846-851.15. Borisova H.B., Kaplun A.P., Bogomolov O.B., Grigoryev VB, Yurasov V.V., Nikushkin E.V., Kryzhanovsky G.N., Shvets V.I. Physico-chemical properties of liposomal forms of L-3,4-dihydroxyphenylalanine (DOPA) and DOPAMINE // Bioorganic chemistry 1996. - V. 22. - No. 10, 11. - P.846-851.
16. Борисова Н.В., Жигальцев И.В., Богомолов О.В., Каплун А.П., Юрасов В.В., Кучеряну В.Т., Никушкин Е.В., Крыжановский Г.Н., Швец В.И. Окисление в липосомах из яичного фосфатидилхолина, нагруженных L-3,4-дигидроксифенилаланином (DOPA) и ДОПАМИНОМ: взаимное влияние компонентов // Биоорганическая химия 1997. - Т.23. - №4. - С.284-289.16. Borisova N.V., Zhigaltsev I.V., Bogomolov O.V., Kaplun A.P., Yurasov V.V., Kucheryanu V.T., Nikushkin E.V., Kryzhanovsky G.N., Shvets V.I. Oxidation in liposomes from egg phosphatidylcholine loaded with L-3,4-dihydroxyphenylalanine (DOPA) and DOPAMIN: the mutual influence of the components // Bioorganic chemistry 1997. - V. 23. - No. 4. - S.284-289.
17. During M.J., Freese A., Deutch A.Y., Kibat P.G., Sabel B.A., Langer R., Roth R.H. Biochemical and behavioral recovery in a rodent model of Parkinson′s disease following stereotactic implantation of dopamine-contatining liposomes//Exper. Neurol. 1992. V115. P.193-199.17. During M.J., Freese A., Deutch A.Y., Kibat P.G., Sabel B.A., Langer R., Roth R.H. Biochemical and behavioral recovery in a rodent model of Parkinson’s disease following stereotactic implantation of dopamine-contatining liposomes // Exper. Neurol. 1992. V115. P.193-199.
18. McRae-Degueurce A., Hjorth S., Dillon D.L., et. al. Implantable microencapsulated dopamine (DA): A new method for slow-release DA delivery into brain tissue//Neurosci. Lett. 1988. №92. P.303-309.18. McRae-Degueurce A., Hjorth S., Dillon D.L., et. al. Implantable microencapsulated dopamine (DA): A new method for slow-release DA delivery into brain tissue // Neurosci. Lett. 1988. No. 92. P.303-309.
19. Yong Z.Z., Raid G.A., Victor C., Jingyuan Optimization of PLGA nanoparticles formulation containing L-DOPA by applying the central composite design// Drug Development and Industrial Pharmacy, 2013, 39 (2), P.321-330.19. Yong Z.Z., Raid G.A., Victor C., Jingyuan Optimization of PLGA nanoparticles formulation containing L-DOPA by applying the central composite design // Drug Development and Industrial Pharmacy, 2013, 39 (2), P.321-330.
20. Bartus R.T. A Pulmonary Formulation of L-Dopa Enhances Its Effectiveness in a Rat Model of Parkinson′s Disease. // Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 2004. V. 310.20. Bartus R.T. A Pulmonary Formulation of L-Dopa Enhances Its Effectiveness in a Rat Model of Parkinson’s Disease. // Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 2004.V. 310.
21. Carman L., Gage F., Shults C. Partial lesion of the substantia nigra: relation between extent of lesion and rotational behavior. // Brain research. 1991.21. Carman L., Gage F., Shults C. Partial lesion of the substantia nigra: relation between extent of lesion and rotational behavior. // Brain research. 1991.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014103180/15A RU2545734C1 (en) | 2014-01-31 | 2014-01-31 | Drug preparation for parkinson disease |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014103180/15A RU2545734C1 (en) | 2014-01-31 | 2014-01-31 | Drug preparation for parkinson disease |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2545734C1 true RU2545734C1 (en) | 2015-04-10 |
Family
ID=53295562
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014103180/15A RU2545734C1 (en) | 2014-01-31 | 2014-01-31 | Drug preparation for parkinson disease |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2545734C1 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2697411C2 (en) * | 2017-10-11 | 2019-08-14 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский университет) | Composition for treating parkinson's disease |
| EP3735298A4 (en) * | 2018-01-05 | 2021-10-06 | Impel Neuropharma Inc. | Intranasal delivery of levodopa powder by precision olfactory device |
| US11517548B2 (en) | 2018-07-19 | 2022-12-06 | Impel Pharmaceuticals Inc. | Respiratory tract delivery of levodopa and DOPA decarboxylase inhibitor for treatment of Parkinson's Disease |
| EP3955910A4 (en) * | 2019-04-19 | 2023-01-25 | Hoffman Technologies LLC. | Sustained release formulations |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101810586A (en) * | 2010-04-29 | 2010-08-25 | 上海交通大学 | L-dopa methyl ester sustained-release microsphere composite and preparation method thereof |
-
2014
- 2014-01-31 RU RU2014103180/15A patent/RU2545734C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101810586A (en) * | 2010-04-29 | 2010-08-25 | 上海交通大学 | L-dopa methyl ester sustained-release microsphere composite and preparation method thereof |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| I.G. Kondrasheva et al / Efficacy and Safety of Nasal Administration of "Nano-L-DOPA" Based on PLGA Nanoparticles / Engineering / 2012, Vol.5, pages 27-29. * |
| RANJITH K AVERINENI et al / PLGA 50:50 nanoparticles of paclitaxel: Development, in vitro anti-tumor activity in BT-549 cells and in vivo evaluation / Bull. Mater. Sci. / June 2012, Vol.35, N3, pages 319"326. CAI Yunpeng et al / Research of LDME and benserazide compound microspheres for parkinson’s disease therapy / School of Pharmacy / 2012, N2011-061, pages 1-11 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2697411C2 (en) * | 2017-10-11 | 2019-08-14 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский университет) | Composition for treating parkinson's disease |
| EP3735298A4 (en) * | 2018-01-05 | 2021-10-06 | Impel Neuropharma Inc. | Intranasal delivery of levodopa powder by precision olfactory device |
| US11517548B2 (en) | 2018-07-19 | 2022-12-06 | Impel Pharmaceuticals Inc. | Respiratory tract delivery of levodopa and DOPA decarboxylase inhibitor for treatment of Parkinson's Disease |
| US11690819B2 (en) | 2018-07-19 | 2023-07-04 | Impel Pharmaceuticals Inc. | Respiratory tract delivery of levodopa and DOPA decarboxylase inhibitor for treatment of Parkinson's disease |
| EP3955910A4 (en) * | 2019-04-19 | 2023-01-25 | Hoffman Technologies LLC. | Sustained release formulations |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhou et al. | Intelligently thermoresponsive flower-like hollow nano-ruthenium system for sustained release of nerve growth factor to inhibit hyperphosphorylation of tau and neuronal damage for the treatment of Alzheimer's disease | |
| JP6289460B2 (en) | Nicotinamide riboside for treating hearing loss | |
| JP6837486B2 (en) | How to Prevent and / or Treat Age-Related Cognitive Disorders and Neuroinflammation | |
| RU2545734C1 (en) | Drug preparation for parkinson disease | |
| KR20140041457A (en) | New compositions for treating neurological disorders | |
| US20200325148A1 (en) | Compositions and methods of treatment for neurological disorders comprising motor neuron diseases | |
| US20200339591A1 (en) | Compositions and methods of treatment for neurological disorders comprising a dementia | |
| US10154968B2 (en) | Buprenorphine nanoparticle composition and methods thereof | |
| EP3687528A1 (en) | Compositions and methods for modulating hair growth | |
| KR20060024343A (en) | Medical drug containing fine particle of noble metal | |
| CN109562140A (en) | For inner ear sensory hair cell regeneration/replacement conjoint therapy | |
| BR112020020318A2 (en) | COMPOSITIONS FOR SKIN TREATMENT | |
| Yan et al. | Functionalized curcumin/ginsenoside Rb1 dual-loaded liposomes: Targeting the blood-brain barrier and improving pathological features associated in APP/PS-1 mice | |
| WO2020132378A2 (en) | Compositions and methods of treatment for neurological disorders comprising depression | |
| US20240238383A1 (en) | Anti-oxidant containing particles and methods of use | |
| ES2729208T3 (en) | Baclofen and acamprosate-based therapy of macular degeneration disorders | |
| US9649337B2 (en) | Cerium oxide nanoparticles for the treatment and prevention of stroke and cardiovascular disease | |
| CN108366976A (en) | The composition on the gluconate basis as newborn's anticonvulsive drug | |
| Wang et al. | Swimming short fibrous nasal drops achieving intraventricular administration | |
| RU2676100C1 (en) | Application of the piperazin derivatives for treatment of the alzheimer's disease and the alzheimer's type dementia with disturbed ventricular calcium signaling | |
| US20150037399A1 (en) | Novel use of pipoxolan and its pharmaceutical composition | |
| JP2017002043A (en) | Medicine for treating or preventing nerve injury | |
| WO2020027701A1 (en) | Pharmaceutical composition intended for treating skin burn injuries | |
| Cao et al. | Neuroprotection Role of Vitamin C by Upregulating Glutamate Transporter-1 in Auditory Cortex of Noise-Induced Tinnitus Animal Model | |
| TW202345790A (en) | Pharmaceutical use of n-butylidenephthalide |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200201 |