RU2529367C1 - Method of increasing sensitivity of microorganisms to antimicrobial agents - Google Patents

Method of increasing sensitivity of microorganisms to antimicrobial agents Download PDF

Info

Publication number
RU2529367C1
RU2529367C1 RU2013118376/10A RU2013118376A RU2529367C1 RU 2529367 C1 RU2529367 C1 RU 2529367C1 RU 2013118376/10 A RU2013118376/10 A RU 2013118376/10A RU 2013118376 A RU2013118376 A RU 2013118376A RU 2529367 C1 RU2529367 C1 RU 2529367C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
suspension
microorganisms
edta
solution
prepared
Prior art date
Application number
RU2013118376/10A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Ирина Александровна Мамонова
Ирина Владимировна Бабушкина
Екатерина Вячеславовна Гладкова
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Саратовский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "СарНИИТО" Минздрава России)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Саратовский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "СарНИИТО" Минздрава России) filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Саратовский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "СарНИИТО" Минздрава России)
Priority to RU2013118376/10A priority Critical patent/RU2529367C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2529367C1 publication Critical patent/RU2529367C1/en

Links

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: biotechnology.
SUBSTANCE: two suspensions are prepared. Clinical polyantibiotic-resistant strains Escherichia coli are added to an isotonic solution of NaCl to achieve the concentration of 30-40 thousand CFU/ml. Copper nanoparticles are added to the solution of NaCl to achieve the concentration of 0.01-0.05 mg/ml. The suspension of ethylenediaminetetraacetic acid - EDTA is prepared by its dilution in distilled water at the rate of 0.1-0.2:1, respectively. NaOH is added to the prepared suspension to obtain the solution of EDTA with pH=7.6-8. The prepared suspensions are connected with the solution of EDTA in the following ratios by wt %: suspension of copper nanoparticles - 70-85, suspension of microorganisms - 10-20, EDTA - 5.10. It is incubated in the shaker at 100-150 rev/min and a temperature of 36-38°C for 40-60 minutes. The resulting biomass is inoculated on the solid nutrient medium with the volume of 20-25 ml in the amount of 0.1-0.12 ml. It is incubated in the thermostat at a temperature of 36-38°C for 18-24 hours. The sensitivity of E.coli strains to antibiotics is determined.
EFFECT: invention enables to increase the sensitivity of the said bacterial strains to antibiotics gentamicin and ampicillin.
2 tbl, 2 cl, 1 ex

Description

Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии. Данное техническое решение может быть использовано для преодоления антибиотикоустойчивости микроорганизмов и повышения эффективности антибактериальной терапии.The invention relates to medicine, namely to microbiology. This technical solution can be used to overcome the antibiotic resistance of microorganisms and increase the effectiveness of antibiotic therapy.

Несмотря на непрерывный интенсивный поток и разработку новых антибактериальных препаратов, проблема борьбы с инфекционно-воспалительными заболеваниями остается одной из наиболее сложных и актуальных проблем для врачей во всем мире. Применение антибиотиков в медицине способствует появлению и распространению лекарственной устойчивости [Палий Г.К., Палий И.Г. Характеристика антибиотикочувствительности возбудителей инфекционно-воспалительных заболеваний // сайт: http://www.provisor.com.ua/archive/2000/N12/antibact.php].Despite the continuous intensive flow and development of new antibacterial drugs, the problem of combating infectious and inflammatory diseases remains one of the most difficult and relevant problems for doctors around the world. The use of antibiotics in medicine contributes to the emergence and spread of drug resistance [Paly G.K., Paly I.G. Characterization of the antibiotic sensitivity of infectious and inflammatory pathogens // website: http://www.provisor.com.ua/archive/2000/N12/antibact.php].

Известны способы повышения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам путем воздействия различных средств и химических препаратов, протеолитических бактериальных ферментов, ферментов животного происхождения. Одними из таких средств являются различные минеральные воды [патенты RU на изобретения №2207863, 2230563, 2246541, 2255746, заявка RU на изобретение №2003103843].Known methods for increasing the sensitivity of microorganisms to antibiotics by exposure to various drugs and chemicals, proteolytic bacterial enzymes, enzymes of animal origin. One of such means is various mineral waters [RU patents for inventions No. 2207863, 2230563, 2246541, 2255746, RU application for invention No. 2003103843].

Однако повышение чувствительности при использовании данных средств крайне незначительно, не обладает статистической достоверностью и не достигает того уровня, который при использовании дискодиффузионного метода позволяет считать штамм чувствительным к данному антибиотику. Изменения количественных показателей чувствительности штаммов колеблются в пределах погрешности.However, the increase in sensitivity when using these agents is extremely insignificant, does not have statistical reliability and does not reach the level that when using the disk diffusion method allows the strain to be considered sensitive to this antibiotic. Changes in the quantitative indicators of the sensitivity of the strains vary within the margin of error.

Известен также «Способ повышения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам» [патент RU на изобретение №2052198], основанный на воздействии препарата бактериального происхождения. В качестве активного вещества, оказывающего одновременно бактерицидное, противоспалительное и иммуностимулирующее действие, используют водный раствор пиластина. In vitro используют пиластин в конечной концентрации 0,1-0,4%, при этом осуществляют инкубацию микроорганизмов с пиластином в течение трех дней. Пиластин местно используют в течение трех дней в концентрации 0,01-0,04%.Also known is the "Method of increasing the sensitivity of microorganisms to antibiotics" [RU patent for the invention No. 2052198], based on the effect of a preparation of bacterial origin. As an active substance that has both bactericidal, anti-inflammatory and immunostimulating effects, use an aqueous solution of pilastine. In vitro, pilastine is used in a final concentration of 0.1-0.4%, while the microorganisms are incubated with pilastine for three days. Pilastine is topically used for three days at a concentration of 0.01-0.04%.

Однако использование пиластина может привести к развитию аллергических реакций. Данный препарат противопоказан при гиперчувствительности и нарушениях целостности кожи, что затрудняет его применение при местном лечении раневой инфекции (инструкция по применению; http://healthoffice.ru/content/pilastin). Кроме того, применение данного способа требует продолжительного времени воздействия препаратом, а именно в течение 3-х суток, что удлиняет сроки достижения необходимого эффекта.However, the use of pilastine can lead to the development of allergic reactions. This drug is contraindicated in case of hypersensitivity and impaired skin integrity, which complicates its use in the local treatment of wound infections (instructions for use; http://healthoffice.ru/content/pilastin). In addition, the use of this method requires a long time of exposure to the drug, namely within 3 days, which lengthens the time needed to achieve the desired effect.

Известен также способ повышения антибиотикочувствительности микроорганизмов [патент RU на изобретение №2053773], заключающийся в проведении последовательной или одновременной с антибиотиками обработки антибиотикорезистентных штаммов микроорганизмов 2,5-5 мг/л растворами серебра, полученными электролитическим методом и доведенными до изотоничности добавлением хлористого натрия.There is also a method of increasing the antibiotic sensitivity of microorganisms [RU patent No. 2053773], which consists in treating antibiotic-resistant strains of microorganisms sequentially or simultaneously with antibiotics with 2.5-5 mg / L silver solutions obtained by the electrolytic method and brought to isotonicity by adding sodium chloride.

Однако данный способ предполагает использование в качестве сырья серебра, которое является более дорогостоящим материалом, по сравнению с медью. Кроме того, данный способ предполагает совместное действие серебра и антибиотиков, что не всегда эффективно при лечении раневой инфекции, вызванной антибиотикорезистентными штаммами микроорганизмов, так как в клинической практике требуется различные методы введения антибактериальных препаратов (парентеральный, пероральные и т.д.), а не только местные.However, this method involves the use of silver as a raw material, which is a more expensive material compared to copper. In addition, this method involves the combined action of silver and antibiotics, which is not always effective in the treatment of wound infections caused by antibiotic-resistant strains of microorganisms, since in clinical practice various methods of administering antibacterial drugs (parenteral, oral, etc.) are required, but not only local.

Наиболее близким аналогом к заявляемому изобретению является способ повышения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам [Изучение влияния наночастиц металлов на чувствительность к антибиотикам клинических штаммов микроорганизмов / И.В. Бабушкина [и др.]//Вестник новых медицинских технологий. 2011. Т. XVIII, №2. С.511-513], заключающийся в воздействии на микроорганизмы суспензией наночастиц меди, железа, цинка и их сплавом в концентрации 0,01 мг/мл в течение 30 минут.The closest analogue to the claimed invention is a method of increasing the sensitivity of microorganisms to antibiotics [Study of the influence of metal nanoparticles on sensitivity to antibiotic clinical strains of microorganisms / I.V. Babushkina [et al.] // Bulletin of new medical technologies. 2011. T. XVIII, No. 2. S.511-513], which consists in exposing the microorganisms to a suspension of copper, iron, zinc nanoparticles and their alloy at a concentration of 0.01 mg / ml for 30 minutes.

Однако предлагаемый способ эффективен в отношении штаммов Pseudomonas aeruginosa и предполагает восстановление чувствительности только к одному из антибиотиков группы цефапоспоринов - цефтазидиму.However, the proposed method is effective against strains of Pseudomonas aeruginosa and involves the restoration of sensitivity to only one of the antibiotics of the cefaposporin group - ceftazidime.

Задачей заявляемого изобретения является обеспечение значимого увеличения количественных значений антибиотикочувствительности микроорганизмов и возможность повышения чувствительности к широко применяемым в мире дешевым антибиотикам, в частности к гентамицину и ампицилину.The objective of the invention is to provide a significant increase in the quantitative values of the antibiotic sensitivity of microorganisms and the ability to increase sensitivity to widely used cheap antibiotics in the world, in particular to gentamicin and ampicillin.

Сущность заявляемого изобретения характеризуется тем, что готовят две взвеси путем добавления в изотонический раствор NaCl: наночастиц меди до достижения их концентрации 0,01-0,05 мг/мл и микроорганизмов до достижения их концентрации 30-40 тыс. КОЕ/мл; приготавливают суспензию этилендиаминтетрауксусной кислоты ЭДТА путем ее разведения в дистиллированной воде из расчета 0,1-0,2:1 соответственно, добавляют в данную суспензию NaOH до получения раствора ЭДТА с рН=7,6-8; соединяют приготовленные взвеси и раствор ЭДТА в следующих соотношениях, мас.%:The essence of the claimed invention is characterized in that two suspensions are prepared by adding NaCl to an isotonic solution: copper nanoparticles until their concentration reaches 0.01-0.05 mg / ml and microorganisms reach their concentration of 30-40 thousand CFU / ml; prepare a suspension of ethylenediaminetetraacetic acid EDTA by diluting it in distilled water at a rate of 0.1-0.2: 1, respectively, add NaOH to this suspension to obtain an EDTA solution with pH = 7.6-8; combine the prepared suspension and a solution of EDTA in the following proportions, wt.%:

взвесь наночастиц меди - 70-85,suspension of copper nanoparticles - 70-85,

взвесь микроорганизмов - 10-20,suspension of microorganisms - 10-20,

раствор ЭДТА - 5-10,EDTA solution - 5-10,

и инкубируют в шейкере при 100-150 об/мин и температуре 36-38°C в течение 40-60 минут; высевают полученную биомассу на твердую питательную среду объемом 20-25 мл в количестве 0,1-0,12 мл и инкубируют в термостате при температуре 36-38°C в течение 18-24 часов, при этом в качестве микроорганизмов используют клинические полиантибиотикорезистентные штаммы Escherichia coli (Е. coli).and incubated in a shaker at 100-150 rpm and a temperature of 36-38 ° C for 40-60 minutes; The resulting biomass is plated on a solid nutrient medium of 20–25 ml in an amount of 0.1–0.12 ml and incubated in an incubator at a temperature of 36–38 ° C for 18–24 hours, while clinical polyantibiotic-resistant Escherichia strains are used as microorganisms coli (E. coli).

Заявляется также способ с вышеописанными признаками, в котором в качестве твердой питательной среды используют мясопептонный агар.A method is also claimed with the above features, in which meat-peptone agar is used as a solid nutrient medium.

Технический результат заявляемого изобретения.The technical result of the claimed invention.

Поставленная ранее задача достигается путем использования в способе определенных компонентов, их процентных соотношений и разработанных авторами технических параметров проводимых при осуществлении данного способа манипуляций. Наночастицы меди обеспечивают элиминацию внехромосомного генетического материала - плазмидной ДНК, несущей гены антибиотикорезистентности. Таким образом, применение именно наночастиц меди позволяет полностью разрушить плазмидные ДНК, что обеспечивает значимое увеличение количественных значений чувствительности к обозначенным ранее антибиотикам - гентамицину и ампицилину. Последние широко применимы в мире, дешевы и на данный момент времени отмечается большой процент микроорганизмов с устойчивостью к ним. Использование ЭДТА обеспечивает повышение проницаемости мембраны бактериальной клетки для наночастиц металлов, облегчение проникновения наночастиц меди к генетическому материалу бактериальной клетки и осуществление изменений в нем, обеспечивающих повышение антибиотикочувствительности штаммов.The task set earlier is achieved by using certain components in the method, their percentage ratios and the technical parameters developed by the authors of the manipulations carried out during the implementation of this method. Copper nanoparticles provide the elimination of extrachromosomal genetic material - plasmid DNA, carrying the antibiotic resistance genes. Thus, the use of precisely copper nanoparticles can completely destroy plasmid DNA, which provides a significant increase in the quantitative values of sensitivity to previously indicated antibiotics - gentamicin and ampicillin. The latter are widely applicable in the world, cheap, and at the moment there is a large percentage of microorganisms with resistance to them. The use of EDTA provides an increase in the permeability of the bacterial cell membrane for metal nanoparticles, facilitates the penetration of copper nanoparticles to the genetic material of the bacterial cell, and makes changes in it to increase the antibiotic sensitivity of the strains.

Способ повышения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам осуществляют следующим образом. Готовят взвеси. Для этого добавляют в изотонический раствор NaCl в отдельных емкостях наночастицы меди до достижения их концентрации во взвеси 0,01-0,05 мг/мл и микроорганизмы - клинические полиантибиотикорезистентные штаммы Е. coli до достижения их концентрации 30-40 тыс. КОЕ/мл. Приготавливают суспензию ЭДТА путем ее разведения в дистиллированной воде из расчета 0,1-0,2:1 соответственно. Под контролем рН-метра добавляют в полученную суспензию NaOH до получения раствора ЭДТА с рН=7,6-8 при постоянном перемешивании. Затем соединяют приготовленные взвеси и раствор ЭДТА в следующих соотношениях: 70-85% взвеси наночастиц меди, 10-20% взвеси микроорганизмов и 5-10% раствора ЭДТА. Полученную смесь инкубируют при температуре 36-38°C и 100-150 об/мин в течение 40-60 минут. Высевают полученную биомассу на твердую питательную среду объемом 20-25 мл в количестве 0,1-0,12 мл и инкубируют в термостате при температуре 36-38°C в течение 18-24 часов. В большинстве случаев в качестве твердой питательной среды используют мясопептонный агар.A method of increasing the sensitivity of microorganisms to antimicrobial agents is as follows. Prepare suspensions. For this, copper nanoparticles are added to the isotonic NaCl solution in separate containers until their concentration in suspension is 0.01-0.05 mg / ml and microorganisms are clinical polyantibiotic resistant E. coli strains until their concentration reaches 30-40 thousand CFU / ml. A suspension of EDTA is prepared by diluting it in distilled water at a rate of 0.1-0.2: 1, respectively. Under the control of a pH meter, NaOH is added to the resulting suspension to obtain an EDTA solution with pH = 7.6-8 with constant stirring. Then the prepared suspension and EDTA solution are combined in the following proportions: 70-85% suspension of copper nanoparticles, 10-20% suspension of microorganisms and 5-10% EDTA solution. The resulting mixture is incubated at a temperature of 36-38 ° C and 100-150 rpm for 40-60 minutes. The resulting biomass is sown on a solid nutrient medium with a volume of 20-25 ml in an amount of 0.1-0.12 ml and incubated in an incubator at a temperature of 36-38 ° C for 18-24 hours. In most cases, meat-peptone agar is used as a solid nutrient medium.

Пример.Example.

Выделили от больных с гнойными осложнениями травматолого-ортопедического профиля 10 клинических штаммов Е. coli с устойчивостью к ампилициллину и гентамицину. Штаммы микроорганизмов культивировали на мясопептонном агаре в термостате в течение 24 часов при температуре 37°C. Затем приготовили 10 пробирок, содержащих по 0,85 мл взвеси наночастиц меди с концентрацией 0,01 мг/мл в изотоническом растворе NaCl; 10 пробирок, содержащих 0,85 мл изотонического раствора NaCl; 20 пробирок, содержащих по 0,1 мл взвеси ранее выделенных микроорганизмов с концентрацией 30 тыс. КОЕ/мл в изотоническом растворе NaCl по две на каждый штамм. Подготовили также по описанному выше способу 1 мл раствора ЭДТА с рН=8. Соединили содержимое пробирок таким образом, что получили 10 пробирок со смесью взвеси каждого из микроорганизмов с взвесью наночастиц меди (опытная группа) и 10 пробирок со смесью взвеси каждого из микроорганизмов с изотоническим раствором (группа сравнения). Добавили в каждую из 20 полученных пробирок по 0,05 мл заранее приготовленного раствора ЭДТА. Инкубировали полученные смеси в шейкере в течение 30 минут при 100 об/мин и температуре 37°C. После высевали на отдельные чашки с мясопептонным агаром по 0,1 мл каждой из полученной биомассы и инкубировали при температуре 37°C в течение 24 часов. По окончании срока инкубации производили изучение чувствительности выросших штаммов микроорганизмов к антимикробным препаратам - гентамицину, ампициллину диско-диффузионным методом в соответствии с МУК 4.2.1890-04 «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам».10 clinical E. coli strains with resistance to ampilicillin and gentamicin were isolated from patients with purulent complications of a traumatologic and orthopedic profile. Microorganism strains were cultured on meat peptone agar in a thermostat for 24 hours at a temperature of 37 ° C. Then, 10 test tubes were prepared, each containing 0.85 ml of a suspension of copper nanoparticles with a concentration of 0.01 mg / ml in an isotonic NaCl solution; 10 tubes containing 0.85 ml of isotonic NaCl solution; 20 tubes containing 0.1 ml of a suspension of previously isolated microorganisms with a concentration of 30 thousand CFU / ml in isotonic NaCl solution, two for each strain. Also prepared according to the method described above, 1 ml of EDTA solution with pH = 8. The contents of the tubes were combined so that 10 tubes with a suspension mixture of each of the microorganisms with a suspension of copper nanoparticles (experimental group) and 10 tubes with a suspension mixture of each of the microorganisms with an isotonic solution (comparison group) were obtained. 0.05 ml of a previously prepared EDTA solution was added to each of the 20 tubes obtained. The resulting mixtures were incubated in a shaker for 30 minutes at 100 rpm and a temperature of 37 ° C. Then, 0.1 ml of each of the obtained biomass was plated on separate plates with meat-peptone agar and incubated at 37 ° C for 24 hours. At the end of the incubation period, we studied the sensitivity of the grown strains of microorganisms to antimicrobial agents - gentamicin, ampicillin by the disk diffusion method in accordance with MUK 4.2.1890-04 "Determination of the sensitivity of microorganisms to antibacterial drugs."

В результате проведенных исследований было установлено следующее.As a result of the research, the following was established.

Антибиотикочувствительность клинических штаммов Е. coli составила:The antibiotic sensitivity of the clinical E. coli strains was:

АнтибиотикиAntibiotics Диаметр зоны задержки роста Е. coli, ммThe diameter of the zone of growth inhibition E. coli, mm ГентамицинGentamicin 6,2±1,36.2 ± 1.3 АмпициллинAmpicillin 9,0±1,79.0 ± 1.7

Динамика изменения антибиотикочувствительности клинических штаммов Escherichia coli:Dynamics of changes in the antibiotic sensitivity of clinical strains of Escherichia coli:

АнтибиотикиAntibiotics Диаметр зоны задержки роста Е. coli, ммThe diameter of the zone of growth inhibition E. coli, mm Инкубация с изотоническим растворомIsotonic Incubation Инкубация со взвесью наночастиц меди и раствором ЭДТАIncubation with a suspension of copper nanoparticles and EDTA solution ГентамицинGentamicin 6,7±1,46.7 ± 1.4 15,1±1,1*15.1 ± 1.1 * АмпициллинAmpicillin 9,1±1,49.1 ± 1.4 18,1±0,5*18.1 ± 0.5 * Примечание: *р<0,001, где р - уровень достоверности различий показателей по отношению к группе сравнения.Note: * p <0.001, where p is the level of significance of differences in indicators relative to the comparison group.

В связи с вышеуказанными количественными параметрами, было отмечено следующее. У микроорганизмов в группе сравнения не было выявлено статистически достоверного изменения зоны задержки роста в отношении ампициллина и гентамицина. У микроорганизмов опытной группы наблюдалось статистически достоверное увеличение зоны задержки роста в отношении изучаемых антибиотиков. В соответствии с МУК 4.2.1890-04 «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам» антибиотикорезистентные клинические штаммы Е. coli в опытной группе значительно повысили чувствительность к антибиотикам, в частности к гентамицину и ампициллину, являющимся препаратами выбора для лечения инфекций, вызванных штаммами Е. coli.In connection with the above quantitative parameters, the following was noted. In microorganisms in the comparison group, there was no statistically significant change in the growth inhibition zone in relation to ampicillin and gentamicin. The microorganisms of the experimental group showed a statistically significant increase in the zone of growth inhibition in relation to the studied antibiotics. In accordance with MUK 4.2.1890-04 "Determination of the sensitivity of microorganisms to antibacterial drugs" antibiotic-resistant clinical strains of E. coli in the experimental group significantly increased their sensitivity to antibiotics, in particular to gentamicin and ampicillin, which are the drugs of choice for the treatment of infections caused by strains E. coli.

Claims (2)

1. Способ повышения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам, характеризующийся тем, что готовят две взвеси путем добавления в изотонический раствор NaCl: наночастиц меди до достижения их концентрации 0,01-0,05 мг/мл и микроорганизмов до достижения их концентрации 30-40 тыс. КОЕ/мл; приготавливают суспензию этилендиаминтетрауксусной кислоты ЭДТА путем ее разведения в дистиллированной воде из расчета 0,1-0,2:1 соответственно, добавляют в данную суспензию NaOH до получения раствора ЭДТА с рН=7,6-8; соединяют приготовленные взвеси и раствор ЭДТА в следующих соотношениях, мас.%:
взвесь наночастиц меди - 70-85,
взвесь микроорганизмов - 10-20,
раствор ЭДТА - 5-10,
и инкубируют в шейкере при 100-150 об/мин и температуре 36-38°C в течение 40-60 мин; высевают полученную биомассу на твердую питательную среду объемом 20-25 мл в количестве 0,1-0,12 мл и инкубируют в термостате при температуре 36-38°C в течение 18-24 ч, при этом в качестве микроорганизмов используют клинические полиантибиотикорезистентные штаммы Escherichia coli.
1. A method of increasing the sensitivity of microorganisms to antimicrobial agents, characterized in that two suspensions are prepared by adding NaCl to an isotonic solution: copper nanoparticles to reach a concentration of 0.01-0.05 mg / ml and microorganisms to reach a concentration of 30-40 thousand CFU / ml; prepare a suspension of ethylenediaminetetraacetic acid EDTA by diluting it in distilled water at a rate of 0.1-0.2: 1, respectively, add NaOH to this suspension to obtain an EDTA solution with pH = 7.6-8; combine the prepared suspension and a solution of EDTA in the following proportions, wt.%:
suspension of copper nanoparticles - 70-85,
suspension of microorganisms - 10-20,
EDTA solution - 5-10,
and incubated in a shaker at 100-150 rpm and a temperature of 36-38 ° C for 40-60 minutes; The resulting biomass is plated on a solid nutrient medium of 20–25 ml in an amount of 0.1–0.12 ml and incubated in a thermostat at a temperature of 36–38 ° C for 18–24 h, while clinical micro-antibiotic-resistant Escherichia strains are used as microorganisms coli.
2. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в качестве твердой питательной среды используют мясопептонный агар. 2. The method according to claim 1, characterized in that as a solid nutrient medium using meat peptone agar.
RU2013118376/10A 2013-04-19 2013-04-19 Method of increasing sensitivity of microorganisms to antimicrobial agents RU2529367C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2013118376/10A RU2529367C1 (en) 2013-04-19 2013-04-19 Method of increasing sensitivity of microorganisms to antimicrobial agents

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2013118376/10A RU2529367C1 (en) 2013-04-19 2013-04-19 Method of increasing sensitivity of microorganisms to antimicrobial agents

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2529367C1 true RU2529367C1 (en) 2014-09-27

Family

ID=51656662

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2013118376/10A RU2529367C1 (en) 2013-04-19 2013-04-19 Method of increasing sensitivity of microorganisms to antimicrobial agents

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2529367C1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2647761C2 (en) * 2016-02-24 2018-03-20 Александр Николаевич Швыдков Method for investigation of increased antibiotic sensitivity of conditionally pathogenic microflora in vitro by lactic feed additive containing lactobacillus acidophilus la-5 microorganisms culture
RU2688165C1 (en) * 2018-07-02 2019-05-20 Федеральное казенное учреждение здравоохранения "Ростовский-на-Дону ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Method for increasing sensitivity of cholera vibrios to antibacterial preparations

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2053773C1 (en) * 1992-12-25 1996-02-10 Авакимян Сергей Борисович Method of microflora inhibition
WO2009095258A1 (en) * 2008-02-01 2009-08-06 Loop Diagnostics Gmbh Identification of antibiotic resistance using labelled antibiotics

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2053773C1 (en) * 1992-12-25 1996-02-10 Авакимян Сергей Борисович Method of microflora inhibition
WO2009095258A1 (en) * 2008-02-01 2009-08-06 Loop Diagnostics Gmbh Identification of antibiotic resistance using labelled antibiotics

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
БАБУШКИНА И.В. Влияние наночастиц металлов на плазмидную ДНК энтеробактерий. // Вестник новых медицинских технологий. т.18, N2, 2011, с. 511-513; . ФАРБЕРОВА Е.А. и др. Изучение влияния ЭДТА на рост и развитие культур микроорганизмов. Пермский национальный исследовательский политехнический университет. 20.06.2012г, с.169-177. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. Методические указания. МУК 4.2.1890-04 (Утверждено глав. гос. сан. врач РФ Г.Г.ОНИЩЕНКО 4 марта 2004 года), по состоянию на июль 2011 г, с.170-171. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2647761C2 (en) * 2016-02-24 2018-03-20 Александр Николаевич Швыдков Method for investigation of increased antibiotic sensitivity of conditionally pathogenic microflora in vitro by lactic feed additive containing lactobacillus acidophilus la-5 microorganisms culture
RU2688165C1 (en) * 2018-07-02 2019-05-20 Федеральное казенное учреждение здравоохранения "Ростовский-на-Дону ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Method for increasing sensitivity of cholera vibrios to antibacterial preparations

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Flores-Treviño et al. Stenotrophomonas maltophilia biofilm: its role in infectious diseases
Evans et al. Susceptibility of bacterial biofilms to tobramycin: role of specific growth rate and phase in the division cycle
Briozzo et al. Antimicrobial activity of clove oil dispersed in a concentrated sugar solution
JP6442015B2 (en) Antimicrobial agents containing hypochlorous acid
Gnanadhas et al. Chronic lung infection by Pseudomonas aeruginosa biofilm is cured by L-Methionine in combination with antibiotic therapy
Rubini et al. Chitosan coated catheters alleviates mixed species biofilms of Staphylococcus epidermidis and Candida albicans
Manoharan et al. Antibacterial and photocatalytic activities of 5-nitroindole capped bimetal nanoparticles against multidrug resistant bacteria
Kubyshkin et al. Antimicrobial effects of silver nanoparticles stabilized in solution by sodium alginate
Wernicki et al. Antimicrobial properties of gold, silver, copper and platinum nanoparticles against selected microorganisms isolated from cases of mastitis in cattle
BR112013026491B1 (en) INTRAMAMMARY INFUSION RELEASE DEVICE
Vahedi et al. Evaluation of anti-bacterial effects of nickel nanoparticles on biofilm production by Staphylococcus epidermidis
Nagant et al. Interaction between tobramycin and CSA-13 on clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa in a model of young and mature biofilms
CN114053473B (en) Preparation method and application of ferroferric oxide composite nano-enzyme antibacterial agent
RU2529367C1 (en) Method of increasing sensitivity of microorganisms to antimicrobial agents
Popova et al. IN VITRO ANTIMICROBIAL ACTIVITY OF COLLOIDAL NANO SILVER.
CN111588723B (en) Gynecological disinfectant and preparation method thereof
CN113016798A (en) Low-temperature bactericide
Popova et al. Investigation of the Action of the Anolyte after Different Storage Times on the Gram-negative Bacteria
Zaki et al. Enhanced antibacterial and anti-biofilm activities of biosynthesized silver nanoparticles against pathogenic bacteria
Pogorelov et al. Modeling, formation, destruction and scanning electron microscopy of biofilms
Ponomarenko et al. Research of the influence of disinfectants on the rate of absorption of oxygen by cells of escherichia coli and staphylococcus aureus bacteria
CN111328811A (en) Low-concentration alcohol sterilization disinfectant and application thereof
Bharti et al. Study of the antimicrobial effect of the silver nanoparticles against biofilm producing Staphylococcus aureus strains
CN113198008B (en) Disinfectant and preparation method and application thereof
Alam Comparative Time-Kill Assessment of Cationic Antimicrobial Peptide and Fluoroquinolone against Gram-Negative Bacteria

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20150420