RU2526799C2 - Фармацевтическая композиция и способ получения противовирусных фракций (антивирус-с) - Google Patents
Фармацевтическая композиция и способ получения противовирусных фракций (антивирус-с) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2526799C2 RU2526799C2 RU2012137892/15A RU2012137892A RU2526799C2 RU 2526799 C2 RU2526799 C2 RU 2526799C2 RU 2012137892/15 A RU2012137892/15 A RU 2012137892/15A RU 2012137892 A RU2012137892 A RU 2012137892A RU 2526799 C2 RU2526799 C2 RU 2526799C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- hepatitis
- pharmaceutical composition
- serum
- fractions
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
(57) Группа изобретений относится к области медицины и предназначено для защиты клеток от цитопатогенного действия вируса гепатита С. Заявлена фармацевтическая композиция, обладающая противовирусным действием в отношении вируса гепатита C и способ ее получения. Проводят электростимуляцию головы бройлерных кур в режиме 100-120 B 3-4 A в течение 3-4 с. Забирают кровь и инкубируют её при 4-8°C в течение 18-24 часов. Осуществляют отбор сыворотки. Отобранную сыворотку фильтруют через фильтр с диаметром пор 10 нм, лиофилизируют и облучают в линейном ускорителе электронов (ЛУЭ) в режиме 10-40 кГр. Использование заявленной группы изобретений ээфективно для защиты клеток СПЭВ от цитопатогенного действия вируса гепатита С. 2 н. п. ф-лы, 2 табл., 1пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение.
Предлагаемое изобретение относится к медицине, может быть использовано для получения биологически активных фракций из сыворотки крови кур, полезной при вирусных заболеваниях и расстройствах в организме человека и животных.
Уровень техники.
Широко известны способы получения биологически активной сыворотки крови, основанные на взятии крови у доноров и животных, инкубации, отделении с последующим консервированием. Способы предполагают получение сыворотки крови, повышающей устойчивость организма к таким экзогенным и эндогенным факторам, как атмосферное давление, температура, сила тяжести, свет и т.п., а также голод, жажда, сонная и половая потребности и т.п. (Патент Японии №2123287, EP 0542303 A2, Патенты России №2096041, 2120301, 2236238, 2302237).
Биологически активные фракции получают из сыворотки крови птиц, предварительно введенных в электрошок II-III степени, и подвергают гамма-обработке с использованием Co60 (Патент 2236238, 2302238 РФ) и ЛУЭ (Патент №2426548 РФ).
Задачей данного изобретения было получение антивирусных фракций по отношению к вирусу гепатита C (ВГС) из электрошоковой сыворотки крови кур и облученных в линейном ускорителе электронов (ЛУЭ).
Краткое изложение сущности изобретения.
Оказалось, что, если электрошоковую сыворотку крови птиц облучить в ЛУЭ в интервале 10-40 кГр, то можно получать биологически активные пептидные фракции, обладающие антивирусной активностью (будут раскрыты далее), которые полезны при вирусе гепатита C пациента (будут раскрыты далее).
Таким образом, целью настоящего изобретения является разработка нового способа получения антивирусных пептидных фракций.
Еще одной целью настоящего изобретения является разработка лекарственной формы новых биологически активных фракций. Изобретение предполагает разные лекарственные формы: в том числе для перорального, парентерального, назального, буккального, в виде суппозиториев и т.п. введения.
В изобретении предусматривается использование подходящих физиологически приемлемых носителей (таких как дистиллированная вода, физиологический раствор), наполнителей (например, масло какао, витепсол) биологически активных фракций. Биологически активные пептидные фракции могут применяться как самостоятельно, так и в сочетании с другими лечебными средствами.
Дополнительной целью изобретения является фармацевтическая композиция, в которой активным началом являются фракции согласно настоящему изобретению. При этом фармацевтическая композиция должна содержать активный ингредиент в количестве, достаточном для оказания благоприятного воздействия на организм пациента, т.е содержать его в эффективном количестве.
Еще одной целью изобретения является определение эффективной дозы пептидных фракций согласно данному изобретению. Полагается, что доза находится в интервале от 0,67 мг/мл до 5,0 мг/мл клеток пациента. Очевидно, что конкретная доза будет определяться лечащим врачом в зависимости от состояния пациента, его возраста, веса и курса лечения.
Подробное раскрытие изобретения.
Далее изобретение подробно раскрывается в предпочтительных вариантах конкретного выполнения, при этом приводимые примеры активных пептидных фракций, фармацевтических композиций, лекарственных форм не должны стать основанием для ограничения притязаний, а предназначены исключительно лишь для демонстрации осуществимости изобретения и реализации указанного (ных) назначения (ий). Каждый специалист в данной области, безусловно, убедится, что могут быть предложены многочисленные модификации приводимых вариантов выполнения изобретения, которые попадают под притязания, отраженные далее в формуле изобретения.
Получение фармацевтической композиции.
Для получения фармацевтической композиции использовали кровь птиц (кур), взятую через 3-4 с после электростимуляции головы в течение 3-4 с током напряжением 100-120 B и 3-4 A. Кровь собирали самотеком в полиэтиленовые флаконы после перерезки сонных артерий и вен и инкубировали при температуре 4-8°C в течение 18-24 ч, сыворотку отсасывали, фильтровали через фильтр 10 нм, лиофилизировали и облучали, например, в двух режимах, отражающих крайние значения заявленного интервала: 10 кГр (фармацевтическая композиция A-10) и 40 кГр (фармацевтическая композиция A-40).
Материал и методы.
Были получены две фармацевтические композиции в виде сухого порошка, растворимого в воде. Делали навески по 10 мг каждой композиции и растворяли в 1,0 мл трижды дистиллированной воды, после чего исходную концентрацию разводили в питательной среде 199 до концентраций от 10,0 мг до 0,15 мг в мл. Эти концентрации использовали дли изучения цитотоксического и противовирусного действия в отношении инфекции, вызванной вирусом гепатита С. Фармацевтическую композицию добавляли в момент заражения клеток вирусом при изучении противовирусной активности.
Вирус. Для изучения противовирусной активности фармацевтических композиций использовали цитопатогенный для культур клеток почки эмбриона свиньи (СПЭВ) вариант вируса гепатита C, изолированный нами из сыворотки крови больного хроническим гепатитом С. Вирусосодержащий материал представлял собой культуральную жидкость, собранную из зараженных вирусом гепатита C культур клеток СПЭВ на высоте развития цитопатических проявлений. Исходный титр вируса - 7,51 g ТЦЦ50/100 мкл.
В опытах использовали дозу вируса гепатита C, равную 10,0 и 1,0 ТЦД50.
Культуры клеток. Исследования противовирусной активности препарата проводили в чувствительных для репликации вируса гепатита C культурах клеток СПЭВ, выращенных в виде однодневного монослоя клеток в 24-луночных панелях на среде 199 с добавлением 7% сыворотки крупного рогатого скота, пенициллина и стрептомицина по 100 ЕД/мл.
Определение цитотоксических свойств фармацевтической композиции.
Фармацевтические композиции (A-10 и A-40) в концентрациях от 10 мг/мл до 0,15 мг/мл добавляли в питательную среду культур клеток СПЭВ, после чего на протяжении 4-х суток наблюдали за жизнеспособностью и пролиферативной активностью клеток. Учет результатов проводили по регистрации % жизнеспособных клеток и их пролиферативной активности.
Полученные результаты представлены в табл.1, 2.
Изучение цитотоксических свойств фармацевтических композиций для культур клеток СПЭВ показало (данные табл.1), что в концентрациях от 10,0 мг/мл до 0,15 мг/мл обе фармацевтические композиции не обладают цитотоксическими для данного вида клеток свойствами. Поэтому в исследованиях по изучению противовирусной активности использовали концентрации от 5,0 мг/мл до 0,15 мг в мл (не токсичные для клеток).
При использовании низкой дозы вируса гепатита C для заражения клеток СПЭВ (1,0 ТЦЦ50) был отмечен противовирусный эффект обеих фармацевтических композиций. Максимальный противовирусный эффект был отмечен при использовании композиции, подвергнутой облучению в дозе 10 кГр. Обработка инфицированных клеток СПЭВ приводила к 100% защите при использовании фармацевтических композиций в концентрациях от 0,67 мг/мл до 5,0 мг/мл.
Противовирусный эффект был обнаружен и у фармацевтической композиции, обработанной в режиме 40 кГр.
При использовании высокой дозы вируса гепатита C для заражения клеток (10,0 ТЦД50) были зарегистрированы следующие результаты: полной защиты зараженных клеток от цитопатогенного действия вируса гепатита C не наблюдали. Обнаружено, что обработка клеток СПЭВ сразу же после адсорбции вируса приводила к 85%-й (фармацевтическая композиция A-10) и 50%-й (фармацевтическая композиция A-40) защите зараженных клеток от патогенного действия вируса при использовании их в концентрациях 2,5 и 1,25 мг/мл соответственно.
Заключение.
Изучение противовирусной активности полученных фармацевтических композиций в отношении инфекции, вызванной цитопатогенным вариантом вируса гепатита C в культурах клеток СПЭВ, показало:
1. Для полученных фармацевтических композиций в используемых концентрациях не обнаружены цитотоксические свойства для культур клеток СПЭВ (способности вызывать гибель незараженных клеток).
2. Фармацевтические композиции в используемых концентрациях характеризуются положительным противовирусным эффектом в отношении инфекции, вызванной вирусом гепатита C в культурах клеток СПЭВ, в разных концентрациях они способны защитить 100% клеток от литического действия вируса гепатита C.
3. Максимальной способностью защищать клетки СПЭВ от цитопатогенного действия вируса гепатита C обладала фармацевтическая композиция A-10, при ее сохранении и у композиции A-40 хотя и в меньшем значении. Диапазон концентраций фармацевтических композиций, приводивших к 100% защите клеток, составлял от 5,0 до 0,67 мг/мл.
| Табл.1 | ||||||||
| Цитотоксические свойства разных концентраций фармацевтических композиций для культур клеток СПЭВ. | ||||||||
| Доза облучения | Концентрации фарм. композиций (мг/мл), % погибших клеток в монослое | |||||||
| 10 | 5 | 2,5 | 1,25 | 0,67 | 0,31 | 0,15 | контроль | |
| 10 кГр | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 40 кГр | ± | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Приведенные в табл.2 данные свидетельствуют о противовирусной активности фармацевтических композиций в культурах клеток СПЭВ при использовании как различных концентраций фармацевтических композиций, так и разных доз вируса, используемых для поражения клеток.
| Табл.2 | ||||||||
| Противовирусное действие фармацевтических композиций в отношении инфекции, вызванной вирусом гепатита C в культурах клеток СПЭВ. | ||||||||
| Доза облучения | Доза инфекции (ТЦД50) | Концентрации фарм. композиций (мг/мл), % погибших клеток в монослое) | ||||||
| 5 | 2,5 | 1,25 | 0,67 | 031 | 0,15 | контроль | ||
| 10 кГр | 10,0 | 75 | 15 | 50 | 100 | 75 | 75 | 100 |
| 1,0 | 75 | 0 | 0 | 0 | 75 | 0 | 90 | |
| 40 кГр | 10,0 | 100 | 75 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| 1,0 | 75 | 0 | 0 | 75 | 0 | 75 | 100 | |
Claims (2)
1. Способ получения фармацевтической композиции, обладающей противовирусным действием в отношении вируса гепатита C, при котором проводят электростимуляцию головы бройлерных кур в режиме 100-120 B 3-4 A в течение 3-4 с, забирают кровь, инкубируют при 4-8°C в течение 18-24 часов, осуществляют отбор сыворотки, отобранную сыворотку фильтруют через фильтр с диаметром пор 10 нм, лиофилизируют и облучают в линейном ускорителе электронов (ЛУЭ) в режиме: 10-40 кГр.
2. Фармацевтическая композиция, обладающая противовирусным действием в отношении вируса гепатита C, полученная способом по п.1.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012137892/15A RU2526799C2 (ru) | 2012-09-06 | 2012-09-06 | Фармацевтическая композиция и способ получения противовирусных фракций (антивирус-с) |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012137892/15A RU2526799C2 (ru) | 2012-09-06 | 2012-09-06 | Фармацевтическая композиция и способ получения противовирусных фракций (антивирус-с) |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2012137892A RU2012137892A (ru) | 2013-02-20 |
| RU2526799C2 true RU2526799C2 (ru) | 2014-08-27 |
Family
ID=49119864
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012137892/15A RU2526799C2 (ru) | 2012-09-06 | 2012-09-06 | Фармацевтическая композиция и способ получения противовирусных фракций (антивирус-с) |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2526799C2 (ru) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019074886A1 (en) | 2017-10-09 | 2019-04-18 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | LYOPHILIZATION CONTAINER AND METHOD OF USE |
| US11609043B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-03-21 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization container fill fixture, system and method of use |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2236238C2 (ru) * | 2000-02-29 | 2004-09-20 | Шестаков Виталий Александрович | Способ получения биологически активной субстанции из сыворотки крови |
| WO2008133759A2 (en) * | 2007-01-10 | 2008-11-06 | The Scripps Research Institute | Antiviral peptides |
| RU2454221C2 (ru) * | 2010-07-06 | 2012-06-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Завод Медсинтез" | Способ получения лиофилизированного противовирусного средства |
-
2012
- 2012-09-06 RU RU2012137892/15A patent/RU2526799C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2236238C2 (ru) * | 2000-02-29 | 2004-09-20 | Шестаков Виталий Александрович | Способ получения биологически активной субстанции из сыворотки крови |
| WO2008133759A2 (en) * | 2007-01-10 | 2008-11-06 | The Scripps Research Institute | Antiviral peptides |
| RU2454221C2 (ru) * | 2010-07-06 | 2012-06-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Завод Медсинтез" | Способ получения лиофилизированного противовирусного средства |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2012137892A (ru) | 2013-02-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Silin et al. | Synthetic and natural immunomodulators acting as interferon inducers | |
| Kim et al. | Blockage of indoleamine 2, 3-dioxygenase regulates Japanese encephalitis via enhancement of type I/II IFN innate and adaptive T-cell responses | |
| JP2021176862A (ja) | デングウイルス及び樹状細胞による併用療法のための組成物及び方法 | |
| CA2649290C (en) | Allogeneic cell therapy for treatment of opportunistic infection | |
| CN101057971A (zh) | 一种用于防治畜禽病毒性传染病的药物 | |
| CN113082049A (zh) | 碘化钾或含有碘化钾的组合物用于预防或治疗非洲猪瘟的新用途 | |
| Rehman et al. | Interaction of infectious bursal disease virus with the immune system of poultry | |
| WO2010053350A1 (en) | Inhibition of viral infection and replication by mesenchymal stem cells (msc) and msc-derived products | |
| RU2526799C2 (ru) | Фармацевтическая композиция и способ получения противовирусных фракций (антивирус-с) | |
| Jayati et al. | In vitro antiviral potential of Ocimum sanctum leaves extract against New Castle Disease Virus of poultry | |
| Al-Shammary et al. | Newcastle disease virus (NDV) Iraqi strain AD2141 induces DNA damage and FasL in cancer cell lines | |
| KR101596344B1 (ko) | 정제봉독을 이용한 동물의 바이러스성 질환의 예방 및/또는 치료용 조성물 | |
| MXPA06013050A (es) | Composiciones a base de compuestos inmunoreguladores para el tratamiento o prevencion de infecciones virales respiratorias. | |
| Bandyopadhyay et al. | Suckling mice of “Belladonna 200” fed mothers evade virulent Nakayama strain Japanese encephalitis virus infection | |
| KR101782847B1 (ko) | 지구자 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 조성물 | |
| Webb et al. | Argentine and Bolivian hemorrhagic fevers (South American hemorrhagic fevers) | |
| CN111686107B (zh) | 化合物plx51107用于制备预防或治疗非洲猪瘟药物的新用途 | |
| Liu et al. | Adoptive transfer of macrophages from adult mice reduces mortality in mice infected with human enterovirus 71 | |
| KR101762608B1 (ko) | 지구자 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 조성물 | |
| Williams et al. | Rejection of reovirus-treated L1210 leukemia cells by mice | |
| CN107854499A (zh) | 诃子在制备抑制和杀灭牛病毒性腹泻病毒bvdv药物中的应用 | |
| Arnaudov | Immunotherapy with dialyzable leukocyte extracts containing transfer factor | |
| CN104042621A (zh) | 穿心莲内酯及其衍生物在制备防治手足口病药物中的用途 | |
| CN112972389A (zh) | 甘草酸纳米颗粒的合成及其在新型冠状病毒肺炎中的联合治疗应用 | |
| EA012342B1 (ru) | Лечение или предупреждение геморрагических вирусных инфекций с помощью иммуномодулирующих соединений |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150907 |