RU2525337C2 - Multi-enzyme composition for production of leguminous crops seeds protein additives - Google Patents

Abstract

FIELD: food industry.

SUBSTANCE: invention relates to food industry and may be used for production of high quality leguminous crops seeds protein additives of food and fodder purpose. The multi-enzyme composition contains a complex of the following enzymes: cellulase, endo- and exo-β-glucanase, endo- and exoxylanase, endo- and exopolygalacturonase, α- and β-galactosidase, cellobiase, phytase, pectin- and pectate - lyase, protease. The composition has the ratio of activity units of the following controlled enzymes: cellulase, pectin lyase, endo- and exoxylanase, endopolygalacturonase, α-galactosidase and cellobiase being 1:(3.3-11.7):(2.7-7.4):(2.5-10.0):(0.12-0.33):(0.08-0.66), respectively.

EFFECT: proposed multi-enzyme composition ensures maximally possible removal of toxic alkaloids and oligosaccharides from the treated raw material by 92-98% and by 97-100%, respectively, with simultaneous decrease of the process duration, practically complete preservation of protein and decrease of raw cellulose level by 27-32% as well as increase of energy value of protein additives by 3-5%.

Description

Изобретение относится к пищевой промышленности и может быть использовано для получения белковых добавок высокого качества пищевого и кормового назначения из семян зернобобовых культур.The invention relates to the food industry and can be used to obtain high-quality protein supplements for food and feed purposes from the seeds of leguminous crops.

Одной из негативных мировых тенденций в области питания признано снижение потребления наиболее ценных в биологическом отношении пищевых продуктов, содержащих витамины, макро- и микроэлементы, полноценный белок, потребление которого снизилось на 15-22% от рекомендуемых норм [1, 2]. Наблюдается также острейший дефицит белка в кормопроизводстве, потребность в котором удовлетворяется только на 45-50%. В связи с этим приоритетной задачей здорового питания является повышение уровня обеспечения населения России полноценным белком, а также удовлетворение потребности с/х животных и птицы в кормовом белке высокого качества, что непосредственно влияет на здоровье нации.One of the negative global trends in nutrition is recognized as a decrease in the consumption of the most biologically valuable foods containing vitamins, macro- and microelements, high-grade protein, the consumption of which decreased by 15-22% of the recommended norms [1, 2]. There is also an acute protein deficiency in feed production, the need for which is satisfied only by 45-50%. In this regard, the priority task of healthy nutrition is to increase the level of providing the population of Russia with high-grade protein, as well as meeting the needs of agricultural animals and birds in high-quality feed protein, which directly affects the health of the nation.

Одним из основных путей решения этой проблемы в настоящее время является увеличение производства дешевого растительного белка за счет широкого использования семян зернобобовых, так как они являются наиболее ценными продовольственными и кормовыми культурами. По химическому составу и пищевой ценности эти культуры наиболее близки к источникам животного белка - молоку, мясу, рыбе [3]. Семена зернобобовых отличаются высоким содержанием белка - 27,8-61,0% [1, 2], причем по биологической и питательной ценности не уступают сое, и характеризуются хорошей сбалансированностью незаменимых аминокислот и достаточно высокой степенью усвояемости в организме человека и животных, семена также богаты витаминами, макро- и микроэлементами.One of the main ways to solve this problem at present is to increase the production of cheap vegetable protein due to the widespread use of leguminous seeds, as they are the most valuable food and feed crops. By chemical composition and nutritional value, these crops are closest to the sources of animal protein - milk, meat, fish [3]. Legumes are characterized by a high protein content - 27.8-61.0% [1, 2], and they are not inferior to soybeans in terms of biological and nutritional value, and are characterized by a good balance of essential amino acids and a fairly high degree of digestibility in humans and animals, seeds are also rich in vitamins, macro- and microelements.

Существенный дефицит белка при производстве различных продуктов питания и для кормовых целей покрывается преимущественно за счет переработки сои, но она не является широко возделываемой зернобобовой культурой в России, особенно в центральной ее части, и объем ее производства составляет менее 1% мирового. Среди зернобобовых культур особое внимание в последние годы уделяют люпину.A significant protein deficit in the production of various food products and for fodder purposes is mainly covered by soybean processing, but it is not a widely cultivated leguminous crop in Russia, especially in its central part, and its production volume is less than 1% of the world. Among legumes, in recent years, special attention has been paid to lupine.

Люпиновый белок, как и соевый, хорошо переваривается человеком и животными, обладает высокой биологической ценностью и имеет в своем составе все незаменимые аминокислоты, достаточно большое количество лизина, треонина и лейцина. Биологическая ценность (БЦ) люпина составляет, по одним данным, 60% [3], по другим - 67-78% [4], что превосходит чечевицу (БЦ - 48%), нут (51%), горох (43%) и практически мало уступает сое (БЦ - 80%). Все виды люпина имеют наименьшее количество ингибиторов протеаз, если в семенах сои содержится в среднем 29-32 г инактивированного трипсина на 1 кг, то в семенах люпина - 2,0-2,5 г, что характеризует их как более перспективное сырье для производства продуктов питания. По количеству наиболее ценных ненасыщенных жирных кислот (олеиновой, линолевой и линоленовой) и их общей сумме масло люпина превосходит по своему качеству масло гороха, а масло желтого люпина идентично соевому. Люпиновые масла исключительно богаты жирорастворимыми витаминами и провитаминами - токоферолами, стеролами и каратиноидами. Семена люпина богаты водорастворимыми витаминами группы B, особенно отличаются по количеству β - каротина и токоферолов [3].Lupine protein, like soy, is well digested by humans and animals, has a high biological value and contains all the essential amino acids, a fairly large amount of lysine, threonine and leucine. The biological value (BC) of lupine is, according to some sources, 60% [3], according to others - 67-78% [4], which is superior to lentils (BC - 48%), chickpeas (51%), peas (43%) and almost inferior to soy (BC - 80%). All types of lupine have the least amount of protease inhibitors, if soybean seeds contain an average of 29-32 g of inactivated trypsin per 1 kg, then lupine seeds contain 2.0-2.5 g, which characterizes them as a more promising raw material for food production nutrition. By the amount of the most valuable unsaturated fatty acids (oleic, linoleic and linolenic) and their total amount, lupine oil is superior in quality to pea oil, and yellow lupine oil is identical to soybean. Lupine oils are exceptionally rich in fat-soluble vitamins and provitamins - tocopherols, sterols and carotenoids. Lupine seeds are rich in water-soluble B vitamins, especially differing in the amount of β - carotene and tocopherols [3].

Большинство исследователей считает, что люпин относится к пищевой культуре, обладающей рядом преимуществ по сравнению с другими бобовыми растениями, в частности с соей, и может быть рекомендован для повышения биологической ценности продуктов во всех отраслях пищевой промышленности [3].Most researchers believe that lupine is a food crop that has several advantages over other leguminous plants, in particular soy, and can be recommended to increase the biological value of products in all sectors of the food industry [3].

Одним из основных факторов, ограничивающих использование семян зернобобовых культур, особенно люпина, являются токсичные алкалоиды, обуславливающие горький привкус сырья, присутствие неусвояемых олигосахаридов, которые не разрушаются в желудочно-кишечном тракте моногастричных животных из-за отсутствия соответствующих ферментов, вызывая нежелательные явления метеоризма, и не подверженных различным технологическим воздействиям, а также высокий уровень сырой клетчатки.One of the main factors limiting the use of leguminous seeds, especially lupine, is toxic alkaloids, which determine the bitter taste of raw materials, the presence of indigestible oligosaccharides, which are not destroyed in the gastrointestinal tract of monogastric animals due to the lack of appropriate enzymes, causing undesirable flatulence, and not subject to various technological influences, as well as a high level of crude fiber.

В целях устранения "антипитательных" факторов существуют различные способы обработки семян зернобобовых культур, к которым относятся: замачивание, запаривание, экструдирование, автоклавирование, тостирование, экстракция органическими растворителями, воздействие постоянным электрическим током, использование приемов ультрафильтрации, экстрагирование сатурированной водой при давлении выше атмосферного [5-11].In order to eliminate the "anti-nutritional" factors, there are various ways of treating seeds of leguminous crops, which include: soaking, steaming, extruding, autoclaving, toasting, extraction with organic solvents, exposure to direct electric current, the use of ultrafiltration techniques, extraction with saturated water at a pressure above atmospheric [ 5-11].

Проведя анализ результатов исследований, было установлено, что, используя разные виды обработки, можно улучшить показатели питательности бобовых культур. Так, после термохимического воздействия содержание переваримой энергии в зерне бобовых культур увеличивается до 15%, доступность аминокислот повышается с 79 до 89%. Воздействие, например, на кормовой горох электромагнитным полем (СВЧ, 20°C) повышает в нем переваримость протеина и доступность аминокислот на 2 -3%. Обработка зерна люпина на экструдере ПЭК-125-8 является эффективным способом повышения его питательной ценности, не уступающей соевому шроту. Сдерживающим фактором использования сырых соевых бобов в кормопроизводстве является высокое содержание ингибиторов трипсина и химотрипсина, которые практически блокируют пищеварительные процессы в организме. Для снижения в них ингибиторов протеаз используют тостирование, экструдирование, СВЧ и др. [12]. В последние годы увеличение потребления белка из семян зернобобовых культур решается двумя путями: проводится селекционная работа специалистов по выведению сортов люпина с пониженным содержанием алкалоидов, но достигнутые результаты пока не соответствуют требованиям по наличию в них хинолизидов. В ряде литературных источников и Рекомендациях приводятся различные значения допустимых суммарных количеств алкалоидов для использования в пищевых продуктах: не более 0,1% [13], не более 0,02% [14], 0,017-0,038% [15], не более 0,04 [16], менее 0,025% [17], и кормах: 0,008% [18], 0,1-0,3% [17], не более 0,025% [19], не более 0,028% [20], 0,05-0,5% [21], не более 0,05% [22], 0,03-0,07% [23]. Ряд авторов обращает особое внимание на необходимость конкретизации требований к допустимому содержанию алкалоидов в семенах люпина, предназначенных для использования в продовольственных и кормовых целях [24, 25]. Представляется более рациональным и перспективным другое направление, связанное с удалением алкалоидов, неусвояемых олигосахаридов, а также снижением уровня клетчатки в семенах зернобобовых культур за счет использования ферментных препаратов целенаправленного действия, что будет способствовать повышению их питательности и биологической ценности и более широкому использованию семян зернобобовых культур для получения белковых добавок пищевого и кормового назначения.After analyzing the research results, it was found that using different types of processing, it is possible to improve the nutritional indicators of legumes. So, after thermochemical exposure, the content of digestible energy in the grain of legumes increases to 15%, the availability of amino acids increases from 79 to 89%. Exposure, for example, to fodder peas with an electromagnetic field (microwave, 20 ° C) increases protein digestibility and the availability of amino acids in it by 2-3%. Processing lupine grain on an extruder PEC-125-8 is an effective way to increase its nutritional value, not inferior to soybean meal. A limiting factor in the use of raw soybeans in feed production is the high content of trypsin and chymotrypsin inhibitors, which practically block the digestive processes in the body. To reduce protease inhibitors in them, toasting, extrusion, microwave, and others are used [12]. In recent years, an increase in protein intake from leguminous seeds has been solved in two ways: breeding work has been carried out by specialists in the cultivation of lupine varieties with a low content of alkaloids, but the results achieved so far do not meet the requirements for the presence of quinolysides in them. A number of literary sources and Recommendations provide various values of permissible total amounts of alkaloids for use in food products: not more than 0.1% [13], not more than 0.02% [14], 0.017-0.038% [15], not more than 0 04 [16], less than 0.025% [17], and feed: 0.008% [18], 0.1-0.3% [17], not more than 0.025% [19], not more than 0.028% [20], 0.05-0.5% [21], not more than 0.05% [22], 0.03-0.07% [23]. A number of authors draw particular attention to the need to specify the requirements for the permissible alkaloids in lupine seeds intended for use in food and feed purposes [24, 25]. It seems more rational and promising another direction related to the removal of alkaloids, non-digestible oligosaccharides, as well as a decrease in fiber in the seeds of legumes due to the use of targeted enzyme preparations, which will increase their nutritional value and biological value and the wider use of seeds of legumes for obtaining protein supplements for food and feed purposes.

Показана возможность снижения концентрации "антипитательных" веществ в зерне гороха, люпина и чечевицы в процессе проведения ферментативной обработки сырья с использованием мультиэнзимной добавки МЭД-4 в дозе 0,1% (св. семян) [26]. Размолотое зерно увлажняли (гидромодуль 2:1) и помещали в термостат при температуре 60°C при тщательном перемешивании, добавляли препарат МЭД-4 и проводили ферментативную обработку в течение 3-х часов, смесь перемешивали через каждые 15 минут. После окончания ферментации отбирали средние пробы для определения содержания ингибиторов трипсина (АТФ), химотрипсина (АХТФ) и алкалоидов. Установлено, что ферментативная обработка сырья снижает уровень АТФ в горохе на 42,2%, АХТФ - на 17,75%; в люпине - на 20,17 и на 16,87%, в чечевице уровень АТФ составил 43,14% и 17,48% соответственно. Содержание алкалоидов в люпине до ферментативной обработки составило 0,084 г/кг, после ферментативной обработки - 0,080, то есть содержание алкалоидов оказалось практически на одном уровне. Вероятно, отсутствие соответствующих ферментов в препарате МЭД-4 не позволило более эффективно воздействовать на удаление токсичных алкалоидов.The possibility of reducing the concentration of “anti-nutritional” substances in pea, lupine and lentil grains during the enzymatic processing of raw materials using the multi-enzyme supplement MED-4 at a dose of 0.1% (holy seeds) has been shown [26]. The milled grain was moistened (hydromodule 2: 1) and placed in a thermostat at a temperature of 60 ° C with thorough stirring, the drug MED-4 was added and enzymatic treatment was carried out for 3 hours, the mixture was stirred every 15 minutes. After the end of fermentation, medium samples were taken to determine the content of trypsin inhibitors (ATP), chymotrypsin (ACTH) and alkaloids. It was found that the enzymatic processing of raw materials reduces the level of ATP in peas by 42.2%, AHTP - by 17.75%; in lupine - by 20.17 and by 16.87%, in lentils the ATP level was 43.14% and 17.48%, respectively. The content of alkaloids in lupine before enzymatic treatment was 0.084 g / kg, after enzymatic treatment - 0.080, that is, the content of alkaloids was almost at the same level. It is likely that the absence of the corresponding enzymes in the MED-4 preparation did not allow a more effective effect on the removal of toxic alkaloids.

Известен способ устранения горького вкуса и аромата, свойственных муке семян зернобобовых культур (горох, кормовые бобы, люпин), а также снижения содержания олигосахаридов, заключающийся в замачивании муки семян зернобобовых в воде при температуре 20-50°C (гидромодуль от 1:2 до 1:5) в течение 10-50 минут, подкислении суспензии до pH 3,2-5,0 пищевой кислотой и введении в нее пепсина или пектофоетидина. Продолжительность обработки - 40-90 минут при 20-50°C. После доведения величины pH до нейтрального значения (6-8) суспензию выдерживали в течение 3-8 часов при комнатной температуре, после чего ее подвергали распылительной сушке или непосредственно вводили в рецептуру пищевого продукта с последующей термической обработкой [27].There is a method of eliminating the bitter taste and aroma inherent in the flour of seeds of leguminous crops (peas, fodder beans, lupins), as well as reducing the content of oligosaccharides, which consists in soaking the flour of seeds of leguminous plants in water at a temperature of 20-50 ° C (hydromodule from 1: 2 to 1: 5) for 10-50 minutes, acidifying the suspension to pH 3.2-5.0 with food acid and introducing pepsin or pectofoetidine into it. The processing time is 40-90 minutes at 20-50 ° C. After adjusting the pH to a neutral value (6–8), the suspension was kept for 3–8 hours at room temperature, after which it was spray dried or directly introduced into the food product formulation followed by heat treatment [27].

Основным недостатком данного способа является узкая направленность действия используемых ферментов (пепсин или пектофоетидин). На наш взгляд, для того чтобы обеспечить разрушение α-галактоолигосахаридов и клетчатки в получаемой белковой добавке, необходимо при обработке муки из семян зернобобовых культур использование соответствующих ферментов - α-галактозидазы и комплекса целлюлаз. Кроме того, данный способ обработки приемлем только для муки и не пригоден для семян зернобобовых культур.The main disadvantage of this method is the narrow focus of the enzymes used (pepsin or pectofoetidine). In our opinion, in order to ensure the destruction of α-galactooligosaccharides and fiber in the resulting protein supplement, it is necessary to use the corresponding enzymes α-galactosidase and cellulase complex when processing flour from seeds of leguminous crops. In addition, this processing method is acceptable only for flour and is not suitable for seeds of leguminous crops.

Известен способ получения пищевого продукта из семян зернобобового сырья, характеризующийся тем, что в качестве сырья используют семена люпина, или гороха, или чечевицы, или фасоли, который заключается в замачивании и проращивании семян в течение 24 -26 часов, последующей обработке их раствором смеси ферментов, содержащих эндо- и экзо-β-глюканазы, ксиланазу, целлюлазу, гемицеллюлазу, протеазу, целлобиазу; смесь используют в количестве 0,18-0,20% от массы сырья при массовом соотношении семян и раствора от 1:1,5 до 1:8,0. После ферментации семена промывают проточной водой с величиной pH 7,2 при температуре 20-30°C с последующей сушкой (конвективной или инфракрасной). Далее проводят экструдирование полученной массы при 90°C в течение 3 секунд, или при температуре 140°C и давлении 10 мПа в течение 3 секунд, или при 130°C и 11 мПа в течение 5 секунд [28].A known method of obtaining a food product from seeds of leguminous raw materials, characterized in that the raw materials use the seeds of lupine, or peas, or lentils, or beans, which consists in soaking and germinating the seeds for 24 -26 hours, followed by processing them with a solution of a mixture of enzymes containing endo- and exo-β-glucanases, xylanase, cellulase, hemicellulase, protease, cellobiase; the mixture is used in an amount of 0.18-0.20% by weight of the raw material with a mass ratio of seeds and solution from 1: 1.5 to 1: 8.0. After fermentation, the seeds are washed with running water with a pH of 7.2 at a temperature of 20-30 ° C, followed by drying (convective or infrared). Next, the resulting mass is extruded at 90 ° C for 3 seconds, or at a temperature of 140 ° C and a pressure of 10 MPa for 3 seconds, or at 130 ° C and 11 MPa for 5 seconds [28].

Основным недостатком указанного способа, на наш взгляд, является отсутствие в материалах патента сведений о соотношении единиц активности перечисленных ферментов, входящих в смесь, которую используют при обработке сырья. Кроме того, в смеси ферментов отсутствует α-галактозидаза, ответственная за разрушение неусвояемых олигосахаридов, что не позволяет согласиться с утверждением авторов о ферментативном их разрушении. Необходимо также отметить, что при условии обоснованно сбалансированного соотношения ферментов в смеси ее доза при обработке сырья может быть снижена практически в два раза.The main disadvantage of this method, in our opinion, is the lack of information in the patent materials on the ratio of the activity units of the listed enzymes included in the mixture, which is used in the processing of raw materials. In addition, the mixture of enzymes lacks α-galactosidase, which is responsible for the destruction of non-digestible oligosaccharides, which does not agree with the authors' assertion about their enzymatic destruction. It should also be noted that under the condition of a reasonably balanced ratio of enzymes in the mixture, its dose during processing of raw materials can be almost halved.

Известен способ получения кормового продукта из люпиновых семян, характеризующийся двукратным замачиванием в воде: процессы первого и второго замачивания проводят при температуре 40-80°C в течение 3-5 часов (1), второго - в течение 2-5 часов. Кроме воды, для замачивания может быть использован буферный раствор с величиной pH 3-7 для поддержания оптимальной ферментативной активности и для улучшения растворимости алкалоидов в водной среде. Для подкисления среды может быть использован разбавленный раствор слабой уксусной кислоты. Последующий процесс ферментативной обработки сырья может быть повторен два раза, что определяют по содержанию удаляемых алкалоидов в жидкой среде предыдущей обработки. В некоторых случаях замачивание семян люпина проводят с одновременным использованием ферментов. Для ферментативной обработки применяют или индивидуальные ферментные препараты, или смеси ферментных препаратов, обладающих целлюлазной, гемицеллюлазной, ксиланазной, пектолитической, α-галактозидазной активностями в дозе 0,1-0,5% от массы сухих семян. Установлено, что при двухстадийном замачивании и двойной ферментативной обработке количество алкалоидов в сырье в среднем уменьшается на 90% от исходного, белка - на 8-9% от исходного количества, α-галактоолигосахаридов (рафиноза, стахиоза, вербаскоза) уменьшается на 90-99% [29].A known method of obtaining a feed product from lupine seeds, characterized by double soaking in water: the processes of the first and second soaking is carried out at a temperature of 40-80 ° C for 3-5 hours (1), the second - for 2-5 hours. In addition to water, a buffer solution with a pH value of 3-7 can be used for soaking to maintain optimal enzymatic activity and to improve the solubility of alkaloids in an aqueous medium. A dilute solution of weak acetic acid can be used to acidify the medium. The subsequent process of enzymatic processing of raw materials can be repeated two times, which is determined by the content of the removed alkaloids in the liquid medium of the previous processing. In some cases, the soaking of lupine seeds is carried out with the simultaneous use of enzymes. For enzymatic treatment, either individual enzyme preparations or mixtures of enzyme preparations with cellulase, hemicellulase, xylanase, pectolytic, α-galactosidase activities in a dose of 0.1-0.5% by weight of dry seeds are used. It was found that with two-stage soaking and double enzymatic treatment, the amount of alkaloids in the raw material decreases on average by 90% of the initial one, protein - by 8-9% of the initial amount, α-galactooligosaccharides (raffinose, stachyosis, verbascosis) decrease by 90-99% [29].

При рассмотрении материалов данного патента следует отметить, что ему также присущи те же недостатки, что и предыдущему, касающиеся отсутствия данных по соотношению единиц активности ферментов в используемой смеси, что затрудняет оценку целесообразности введения каждого из ферментов в ее комплекс, для обработки сырья. Кроме того, основываясь на биохимическом составе обрабатывемого сырья и присущих ему "антипитательных" факторов, необходимо отметить, что использование в технологическом процессе получения белковой кормовой добавки индивидусшьных ферментных препаратов, которые авторы называют "мультиферментными", по определению, не корректно и мало эффективно, так как индивидуальные препараты, как правило, стандартизуют по основному ферменту, а наличие сопутствующих в одном и том препарате, в зависимости от условий культивирования, имеет значительные колебания величин активности. В связи с этим использование индивидуальных ферментов в процессах ферментативной обработки сырья не позволяет получить стабильные результаты по эффективности вследствие несбалансированности таких ферментных систем, что и определило завышенные дозы препаратов. Причем доза введения ферментных препаратов в одном случае составляет 0,1-0,5% от массы сухих семян, в другом - 0,5% от веса люпина при условии дозировки препарата по содержанию в нем белка. И в том, и в другом случаях высокие дозы ферментных препаратов при обработке сырья, на наш взгляд, не являются оправданными, тем более что перед ферментативной обработкой с семян люпина удаляют оболочку.When considering the materials of this patent, it should be noted that it also has the same disadvantages as the previous one, regarding the lack of data on the ratio of units of enzyme activity in the mixture used, which makes it difficult to assess the feasibility of introducing each of the enzymes into its complex for processing raw materials. In addition, based on the biochemical composition of the processed raw materials and its inherent “anti-nutritional” factors, it should be noted that the use of individual enzyme preparations, which the authors call “multi-enzyme”, by definition, is not correct and ineffective in the technological process of obtaining protein feed additives as individual preparations, as a rule, standardize for the main enzyme, and the presence of concomitant in the same preparation, depending on the cultivation conditions, has significant fluctuations in activity values. In this regard, the use of individual enzymes in the processes of enzymatic processing of raw materials does not allow to obtain stable results in terms of efficiency due to the imbalance of such enzyme systems, which determined excessive doses of the preparations. Moreover, the dose of the introduction of enzyme preparations in one case is 0.1-0.5% by weight of dry seeds, in the other - 0.5% by weight of lupine, provided the dosage of the drug is based on the protein content in it. In both cases, in our opinion, high doses of enzyme preparations during processing of raw materials are not justified, especially since the membrane is removed from the lupine seeds before enzymatic treatment.

Известен способ получения белкового концентрата из семян люпина. Зерна люпина размалывают и просеивают через сито с диаметром отверстий не более 100 мкм и проводят ферментативный гидролиз сырья. Для этого готовят водную суспензию муки в соотношении 1:7 и вносят α-амилазу (амилосубтилин) и глюкоамилазу (глюкаваморин) при дозе 2,4 ед. АС/г и 2,8 ед. ГлА/г крахмала муки. Общая продолжительность гидролиза при температуре 37°C составляет 3 часа. После окончания процесса гидролиза смесь центрифугируют, декантируют и осаждают белок в изоэлектрической точке (pH 3,0-3,2) раствором уксусной кислоты с массовой долей 35%. После осаждения белков смесь повторно центрифугируют. Белковую пасту трижды промывают водой для полного удаления уксусной кислоты, далее центрифугируют и сушат. По информации авторов, полученный концентрат из семян люпина имеет высокую биологическую ценность, улучшенные функционально-технические свойства и может быть использован в различных отраслях пищевой промышленности, в т.ч. мясной, с целью обогащения получаемых продуктов полноценным белком [30].A known method of producing protein concentrate from lupine seeds. The lupine grains are ground and sieved through a sieve with a hole diameter of not more than 100 μm and enzymatic hydrolysis of the feed is carried out. To do this, prepare an aqueous suspension of flour in a ratio of 1: 7 and add α-amylase (amylosubtilin) and glucoamylase (glucavamorin) at a dose of 2.4 units. AC / g and 2.8 u GLA / g flour starch. The total duration of hydrolysis at 37 ° C is 3 hours. After the hydrolysis process is completed, the mixture is centrifuged, decanted and the protein is precipitated at the isoelectric point (pH 3.0-3.2) with an acetic acid solution with a mass fraction of 35%. After protein precipitation, the mixture is re-centrifuged. The protein paste is washed three times with water to completely remove acetic acid, then centrifuged and dried. According to the authors, the obtained concentrate from lupine seeds has high biological value, improved functional and technical properties and can be used in various sectors of the food industry, including meat, in order to enrich the resulting products with a complete protein [30].

При рассмотрении данной публикации следует отметить, что предложенный способ обработки возможен только для муки и не пригоден для семян зернобобовых культур. Кроме того, на наш взгляд, использование α-амилазы и глюкоамилазы в данном процессе мало эффективно, так как люпин не относится к крахмалосодержащим культурам и удаление крахмала не является первоочередной задачей в аспекте переработки семян зернобобовых культур.When considering this publication, it should be noted that the proposed processing method is possible only for flour and is not suitable for seeds of leguminous crops. In addition, in our opinion, the use of α-amylase and glucoamylase in this process is not very effective, since lupine is not a starch-containing crop and the removal of starch is not a priority in the aspect of processing leguminous seeds.

Анализируя представленные материалы, следует отметить, что предлагаемые способы ферментативной обработки семян зернобобовых культур с целью получения пищевых и кормовых белковых добавок заслуживают внимания, но практической реализации, по ряду причин, не имеют. В патентах приводятся сведения о возможности использования многих ферментов, для большей части которых до настоящего времени в РФ не разработаны технологические процессы их получения, в том числе целевых мультиэнзимных препаратов, в которых должны быть установлены соотношения единиц активности ферментов, необходимых для оптимального разрушения компонентов сырья, в первую очередь "антипитательных" факторов. Кроме того, вследствие несбалансированности ферментного состава предлагаемых в патентных материалах препаратов необоснованно завышены их дозы для обработки сырья. Все это затрудняет достижение поставленной цели - увеличение производства белковых добавок пищевого и кормового назначения высокого качества, при одновременной рентабельности их производства.Analyzing the materials presented, it should be noted that the proposed methods of enzymatic treatment of seeds of leguminous crops in order to obtain food and feed protein supplements deserve attention, but for a number of reasons they have no practical implementation. The patents provide information on the possibility of using many enzymes, for the most part of which the technological processes for their preparation have not yet been developed in the Russian Federation, including targeted multi-enzyme preparations, in which the ratio of the units of enzyme activity necessary for the optimal destruction of raw material components should be established, primarily “anti-nutritional” factors. In addition, due to the imbalance in the enzyme composition of the preparations proposed in the patent materials, their doses for processing raw materials are unreasonably high. All this makes it difficult to achieve the goal - an increase in the production of protein additives of food and feed for high quality, while at the same time the profitability of their production.

Известна мультиэнзимная композиция [31], предназначенная для использования в технологии получения белковых добавок пищевого и кормового назначения из семян зернобобовых культур, принципиально отличающаяся от рассмотренных выше изобретений, так как представляет собой контролируемую по соотношению единиц активностей систему ферментов, которые необходимы для обеспечения стабильных результатов при достижении поставленной цели, а именно: по целлюлазе, пектин-лиазе, эндо- и экзоксиланазе как 1:(11.7-3,3):(7,3-2,7) и по α-галактозидазе, эндополигалактуроназе и пектинлиазе - 1:(8,3-13,3):(58,0-22,2) соответственно (заявка РФ №2008125308/13, приоритет от 25.06.2008). Данная мультиэнзимная композиция обеспечивает удаление из обрабатываемого сырья алкалоидов на 90-95%, олигосахаридов (рафиноза, стахиоза, вербаскоза) - на 95-99%, а также конверсию белка - на 5-6% и клетчатки - на 25-28%.Known multi-enzyme composition [31], intended for use in the technology of protein supplements for food and feed purposes from seeds of legumes, fundamentally different from the above inventions, as it is a system of enzymes that is controlled by the ratio of activity units, which are necessary to ensure stable results when the achievement of the goal, namely: for cellulase, pectin lyase, endo- and exoxylanase as 1: (11.7-3.3) :( 7.3-2.7) and for α-galactosidase, endopoligalac turonase and pectinliase - 1: (8.3-13.3) :( 58.0-22.2), respectively (RF application No. 2008125308/13, priority date 25.06.2008). This multi-enzyme composition ensures the removal of alkaloids from processed raw materials by 90-95%, oligosaccharides (raffinose, stachyose, verbascosis) by 95-99%, as well as protein conversion by 5-6% and fiber by 25-28%.

Однако, на наш взгляд, упомянутая мультиэнзимная композиция имеет недостатки, прежде всего, низкий уровень ферментов эндополигалактуроназы и α-галактозидазы, действие которых должно быть направлено на максимально быстрое разрушение негативных факторов обрабатываемого сырья (пектиновые вещества, олигосахариды и др.), так как комплекс этих ферментов способствует повышению доступности субстрата к действию целлюлаз. Кроме того, отсутствие в мультисистеме заявленных соотношений активности целлобиазы к активностям контролируемых ферментов, разрушающей полупродукты гидролиза целлюлозы (целлобиоза) до глюкозы, не позволяет получить максимально возможное количество глюкозы в конечном продукте, так как увеличение ее количества способствует повышению качества люпинового гидролизата.However, in our opinion, the mentioned multi-enzyme composition has drawbacks, primarily, the low level of endopoligalacturonase and α-galactosidase enzymes, the action of which should be aimed at the most rapid destruction of the negative factors of the processed raw materials (pectin substances, oligosaccharides, etc.), since the complex these enzymes helps to increase the availability of the substrate to the action of cellulases. In addition, the absence in the multisystem of the stated ratios of the activity of cellobiase to the activity of controlled enzymes, which destroys intermediates of cellulose hydrolysis (cellobiosis) to glucose, does not allow to obtain the maximum possible amount of glucose in the final product, since an increase in its quantity contributes to an increase in the quality of the lupine hydrolyzate.

Следует также отметить, что в доступной научно-технической литературе и патентных материалах выявлен единственный патент на мультисистему, которая выбрана в качестве ближайшего аналога к заявляемой мультиэнзимной композиции [31].It should also be noted that in the available scientific and technical literature and patent materials revealed the only patent for a multisystem, which is selected as the closest analogue to the claimed multi-enzyme composition [31].

Техническая задача состоит в разработке технологии получения новой мультиэнзимной композиции для производства белковых добавок пищевого и кормового назначения из семян зернобобовых культур, обеспечивающей повышение их питательной и биологической ценности за счет максимально возможного удаления "антипитательных" и негативных факторов из обрабатываемого сырья, что позволяет повысить качество готовой продукции с целью замены соевого белка, используемого в производстве пищевой и комбикормовой продукции, на белковые добавки из зернобобовых культур.The technical task is to develop a technology for the production of a new multi-enzyme composition for the production of protein additives for food and feed purposes from the seeds of leguminous crops, providing an increase in their nutritional and biological value due to the maximum possible removal of "anti-nutritional" and negative factors from processed raw materials, which allows to improve the quality of the finished products with the aim of replacing soy protein used in the production of food and animal feed with protein additives from grain bovyh cultures.

Технический результат заявляемого изобретения заключается в реализации мультиэнзимной композиции, обеспечивающей максимально возможное удаление из обрабатываемого сырья, при одновременном сокращении продолжительности процесса гидролиза, токсичных алкалоидов на 92-98%, олигосахаридов (рафиноза, стахиоза, вербаскоза) - на 97-100%, практически полную сохранность белка и снижение уровня сырой клетчатки - на 27-32%, а также повышение на 3-5% энергетической ценности белковых добавок, что позволит заменить закупаемый, в основном, по импорту более дорогой соевый белок, в производстве пищевых продуктов и обеспечить кормопроизводство растительными белковыми кормами высокого качества при повышении норм ввода их в комбикормовую продукцию с 10 до 20% (моногастричные животные), а также повысить усвояемость протеина и доступность аминокислот на 5-13% и уровень обменной энергии рационов, содержащих люпин, на 8-14%.The technical result of the claimed invention is the implementation of a multi-enzyme composition that provides the maximum possible removal from the processed raw materials, while reducing the duration of the hydrolysis process, toxic alkaloids by 92-98%, oligosaccharides (raffinose, stachyose, verbascosis) - by 97-100%, almost complete protein preservation and a decrease in crude fiber levels - by 27-32%, as well as an increase of 3-5% in the energy value of protein supplements, which will replace the purchased, mainly by import, more expensive soy protein in food production and provide high-quality vegetable protein feed production while increasing their input standards in animal feed from 10 to 20% (monogastric animals), as well as increase the digestibility of protein and the availability of amino acids by 5-13% and the level of metabolism the energy of diets containing lupine, 8-14%.

Причем данные результаты установлены при использовании мультиэнзимной композиции для получения белковых добавок в технологическом процессе продолжительностью 45-90 минут и дозах внесения 0,035-0,075% (от массы обрабатываемого сырья), что существенно отличается от режимов, указанных в ближайшем аналоге - 60-120 минут и 0,04-0,09% соответственно.Moreover, these results were established when using a multi-enzyme composition to obtain protein supplements in a technological process lasting 45-90 minutes and application doses of 0.035-0.075% (by weight of processed raw materials), which differs significantly from the regimes indicated in the closest analogue - 60-120 minutes and 0.04-0.09%, respectively.

Многокомпонентная система ферментов заявляемой мультиэнзимной композиции позволяет интенсифицировать технологический процесс получения белковых добавок пищевого и кормового назначения и тем самым сократить затраты на их производство и повысить качество конечного продукта.The multi-component system of enzymes of the claimed multi-enzyme composition allows to intensify the technological process of obtaining protein additives for food and feed purposes and thereby reduce the cost of their production and improve the quality of the final product.

Для устранения недостатков ближайшего аналога по соотношению ферментов в мультисистеме повышены уровни эндополигалактуроназы (в 1,5% раза) и α-галактозидазы (на 16%), которые совместно с целлюлазой способствуют более эффективному разрушению "антипитательных" и негативных факторов обрабатываемого сырья и удалению токсичных алкалоидов. Введение целлобиазы, контролируемой по активности и соотношению с активностями других ферментов, обусловлено необходимостью разрушения целлюлозы до конечного продукта - глюкозы, которая, в основном, образуется в результате действия целлобиазы на промежуточный продукт деструкции целлюлозы целлобиозу. Это позволяет не только повысить качество готовой продукции, но и сократить продолжительность обработки сырья, снизить дозы введения мультиэнзимной композиции и тем самым повысить рентабельность технологического процесса получения белковых добавок пищевого и кормового назначения из семян зернобобовых культур.To eliminate the shortcomings of the closest analogue in terms of the ratio of enzymes in the multisystem, the levels of endopoligalacturonase (by 1.5%) and α-galactosidase (by 16%) are increased, which together with cellulase contribute to more efficient destruction of the "anti-nutritional" and negative factors of the processed raw materials and the removal of toxic alkaloids. The introduction of cellobiase, controlled by the activity and ratio with the activities of other enzymes, is due to the need to destroy cellulose to the final product - glucose, which is mainly formed as a result of the action of cellobiase on the intermediate cellulose degradation product of cellobiose. This allows not only to improve the quality of finished products, but also to reduce the duration of processing of raw materials, reduce the dose of the introduction of the multi-enzyme composition and thereby increase the profitability of the technological process for producing protein additives of food and feed purposes from the seeds of leguminous crops.

Указанный технический результат достигается созданием мультиэнзимной композиции, характеризующейся тем, что содержит комплекс ферментов - целлюлазу, эндо- и экзо-β-глюканазы, эндо- и экзоксиланазы, эндо- и экзополигалактуроиазы, α- и β-галактозидазы, целлобиазу, фитазу, пектин- и пектатлиазы, протеазу, при этом композиция имеет соотношение единиц активности по контролируемым ферментам - целлюлазе, пектин-лиазе, эндо- и экзоксиланазе, эндополигалактуроназе, α-галактозидазе и целлобиазе как 1:(3,3-11,7):(2,7-7,4):(2,5-10,0):(0,12-0,33):(0,08-0,66) соответственно.The specified technical result is achieved by creating a multi-enzyme composition, characterized in that it contains a complex of enzymes - cellulase, endo- and exo-β-glucanase, endo- and exoxylanase, endo- and exopoligalacturoiases, α- and β-galactosidases, cellobiase, phytase, pectin- and pectatliases, a protease, and the composition has a ratio of activity units for controlled enzymes - cellulase, pectin lyase, endo- and exoxylanase, endopoligalacturonase, α-galactosidase and cellobiase as 1: (3.3-11.7) :( 2, 7-7.4) :( 2.5-10.0) :( 0.12-0.33) :( 0.08-0.66), respectively.

Для получения мультиэнзимной композиции могут быть использованы очищенные базовые концентраты гидролитических и лиазных ферментов, продуцируемых грибными и бактериальными микроорганизмами.To obtain a multi-enzyme composition, purified base concentrates of hydrolytic and lyase enzymes produced by fungal and bacterial microorganisms can be used.

Базовые концентраты содержат ведущие и сопутствующие ферменты, причем наличие единиц активности ферментов определяют действующими методами в каждом из базовых концентратов и учитывают при разработке композиции с заявляемыми соотношениями.Base concentrates contain leading and concomitant enzymes, and the presence of enzyme activity units is determined by the existing methods in each of the base concentrates and taken into account when developing a composition with the claimed ratios.

Для обеспечения заявляемых соотношений используют базовые концентраты ферментов с минимально допустимыми значениями единиц активности, а именно: целлюлазы - 1800 ед./г, ксиланазы - 6000 ед./г, эндополигалактуроназы - 3000 ед./г, пектинлиазы - 20000 ед./г и α-галактозидазы - 160 ед./г и целлобиазы - 350 ед/г.To ensure the claimed ratios, basic enzyme concentrates are used with the minimum acceptable units of activity, namely: cellulase - 1800 units / g, xylanase - 6000 units / g, endopoligalacturonase - 3000 units / g, pectin lyase - 20,000 units / g and α-galactosidase - 160 units / g and cellobiase - 350 units / g.

В процессе получения мультиэнзимной композиции базовые концентраты вводят с учетом насыпных масс и массовых долей каждого из компонентов для достижения распределяемости ферментов в общей массе мультиэнзимной композиции на уровне 95-105% от расчетных величин единиц активности.In the process of obtaining a multi-enzyme composition, basic concentrates are introduced taking into account the bulk density and mass fractions of each component to achieve the distributability of enzymes in the total mass of the multi-enzyme composition at the level of 95-105% of the calculated values of the activity units.

Рабочая зона действия комплекса ферментов находится в пределах pH 4,0-7,5 и диапазоне температуры - 30-50 C°, оптимальная продолжительность гидролиза обрабатываемого сырья составляет 45-90 минут. Норма ввода мультиэнзимной композиции при переработке семян зернобобовых культур составляет 0,035-0,075% от массы сырья. Кроме того, мультиэнзимную композицию используют в составе комбикормовой продукции, с содержанием необработанных семян люпина до 20%, при норме ввода ее до 0,1%.The working range of the enzyme complex is in the range of pH 4.0-7.5 and a temperature range of 30-50 C °, the optimal duration of hydrolysis of the processed raw materials is 45-90 minutes. The input rate of the multi-enzyme composition during the processing of seeds of leguminous crops is 0.035-0.075% of the mass of raw materials. In addition, the multi-enzyme composition is used as part of feed production, with the content of untreated lupine seeds up to 20%, with a norm of input of up to 0.1%.

Предлагаемая мультиэнзимная композиция обеспечивает максимально возможное удаление из обрабатываемого сырья, при одновременном сокращении продолжительности процесса, токсичных алкалоидов на 92-98%, олигосахаридов (рафиноза, стахиоза, вербаскоза) - на 97-100%, практически полную сохранность белка и снижение уровня сырой клетчатки -на 27-32%, а также повышение на 3-5% энергетической ценности белковых добавок, что позволит заменить закупаемый, в основном, по импорту более дорогой соевый белок в производстве пищевых продуктов и обеспечить кормопроизводство растительными белковыми кормами высокого качества при повышении норм ввода их в комбикормовую продукцию с 10 до 20% (моногастричные животные), а также повысить усвояемость протеина и доступность аминокислот на 5-13% и уровень обменной энергии рационов, содержащих люпин, на 8-14%.The proposed multi-enzyme composition provides the maximum possible removal from the processed raw materials, while reducing the duration of the process, toxic alkaloids by 92-98%, oligosaccharides (raffinose, stachyosis, verbascosis) - by 97-100%, almost complete preservation of protein and a decrease in crude fiber - by 27-32%, as well as an increase of 3-5% in the energy value of protein supplements, which will replace the more expensive soy protein purchased mainly for import in food production and provide feed administration of high-quality vegetable protein feeds with an increase in the norms of their input into animal feed from 10 to 20% (monogastric animals), as well as to increase the digestibility of protein and the availability of amino acids by 5-13% and the metabolic energy level of diets containing lupine by 8-14 %

Список литературыBibliography

1. Браудо Е.Е., Даниленко А.Н., Елисеева Л.Г., Махотина И.А. Повышение питательной ценности белков люпина методом ограниченного ферментативного гидролиза // Известия высших учебных заведений: Пищевая технология. - 2006. - С.69-70.1. Braudo E.E., Danilenko A.N., Eliseeva L.G., Mahotina I.A. Increasing the nutritional value of lupine proteins by limited enzymatic hydrolysis // Bulletin of Higher Education: Food Technology. - 2006. - P.69-70.

2. Музалевская Р.С., Батурина Н.А. Химический состав люпина и его возможность использования на пищевые цели // 6-й международный симпозиум "Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования". - М. - Пущино - 2005. - Т.III. - С.380-382.2. Muzalevskaya R.S., Baturina N.A. The chemical composition of lupine and its ability to be used for food purposes // 6th international symposium "New and unconventional plants and prospects for their use." - M. - Pushchino - 2005. - T.III. - S.380-382.

3. Пащенко Л.П., Черных И.П., Пащенко В.Л. Семена люпина - перспективный белковый обогатитель продуктов питания // Современные наукоемкие технологии - 2006. - №6. - С.54.3. Pashchenko L.P., Chernykh I.P., Pashchenko V.L. Lupine seeds - a promising protein fortifier of food products // Modern high technology - 2006. - №6. - S. 54.

4. Король В.Ф., Лахмоткина Г.Н. // htpp://www.sfera.fm/proizvodstvo Korma\is ispolsouanie-Lyupina-v-kormovyh-celyah.html.4. King V.F., Lakhmotkina G.N. // htpp: //www.sfera.fm/proizvodstvo Korma \ is ispolsouanie-Lyupina-v-kormovyh-celyah.html.

5. Василюк Я.В., Никитюк O.B., Дадашко В.В. Повышение эффективности рационов бройлеров с высоким содержанием кормового люпина //Ученые записки Витебской ордена «Знак почета» государственной академии ветеринарной медицины. - Витебск-1999. - Том 35. - Ч.II. - С.120-122.5. Vasilyuk Y. V., Nikityuk O.B., Dadashko VV Improving the efficiency of broiler diets with a high content of fodder lupine // Scientific notes of the Vitebsk Order "Badge of Honor" of the State Academy of Veterinary Medicine. - Vitebsk-1999. - Volume 35. - Part II. - S. 120-122.

6. Мамаева М.В. Питательная ценность зерна узколистного люпина и его использование при выращивании цыплят-бройлеров: Автореф.… дис.… канд. с.-х. наук: 16.05.07. - М., - 2007.- 16 с.6. Mamaev M.V. The nutritional value of the grain of narrow-leaved lupine and its use in the cultivation of broiler chickens: Abstract ... dis. ... cand. S.-kh. Sciences: 05.16.07. - M., - 2007.- 16 p.

7. Патент 2110930 RU, МКИ⁶ A23L 1/21. Способ очистки сельскохозяйственной продукции от алкалоидов / Костюченко В.И. (RU). - №96110621/131998. Заявлено 28.05.96. Опубл. 20.05.98.7. Patent 2110930 RU, MKI ⁶ A23L 1/21. The method of cleaning agricultural products from alkaloids / Kostyuchenko V.I. (RU). - No. 96110621/131998. Declared May 28, 1996. Publ. 05/20/98.

8. Заявка 2000122912 RU, МКИ⁷ A23J 1/14, A23L 1/20. Способ производства белкового продукта / Самохин С.Б., Молоков Ю. Г., Сивков О.В. Заявлено 04.09.2000. Опубл. 27.12.2002.8. Application 2000122912 RU, MKI ⁷ A23J 1/14, A23L 1/20. Method for the production of protein product / Samokhin S.B., Molokov Yu.G., Sivkov O.V. Declared 04.09.2000. Publ. 12/27/2002.

9. Заявка 2006130362 RU, МКИ⁷ A23J 1/14, A23L 1/20. Способ получения концентрата люпинового пастообразного / Юрченко Н.A. (RU), Мотовилов К.Я. (RU), Мотовилов О.К. (RU). Заявлено 22.08.2006. Опубл. 27.02. 2008.9. Application 2006130362 RU, MKI ⁷ A23J 1/14, A23L 1/20. A method of obtaining a lupine paste-like concentrate / Yurchenko N.A. (RU), Motovilov K.Ya. (RU), Motovilov O.K. (RU). Stated August 22, 2006. Publ. 02.27. 2008.

10. Патент 2059388 RU, МКИ⁶ A23L 1/20, A23J 1/14. Способ получения полуфабриката из люпина для продуктов питания / Головченко В.И. (UA), Кучеренко В.Г. (UA), Кучеренко Н.И. (UA), Головченко О.В. (UA), Седлецкий М.А. (UA). - №5040757/13. Заявлено 29.04.92. Опубл. 10.05.96.10. Patent 2059388 RU, MKI ⁶ A23L 1/20, A23J 1/14. A method of obtaining a semi-finished product from lupine for food / Golovchenko V.I. (UA), Kucherenko V.G. (UA), Kucherenko N.I. (UA), Golovchenko O.V. (UA), Siedletsky M.A. (UA). - No. 5040757/13. Stated April 29, 1992. Publ. 05/10/96.

11. Патент 92008943 RU, МКИ⁶ А 23 J 1/14. Способ производства белка из семян люпина / Квасенков O.H.(RU), Загибалов А.Ф. (UA), Касьянов Г.И. (RU), Бабков И.И. (UA), Дроздов А.И. (UA). - Заявлено 27.11.92. Опубл. 27.03.95.11. Patent 92008943 RU, MKI ⁶ A 23 J 1/14. Method for the production of protein from lupine seeds / Kvasenok OH (RU), Zagibalov AF (UA), Kasyanov G.I. (RU), Babkov I.I. (UA), Drozdov A.I. (UA). - Declared 11/27/92. Publ. 03/27/95.

12. Егоров И.А., Топорков Н.И. Нетрадиционные корма в птицеводстве // Отраслевой портал WebPticeprom - 17.04.2012.12. Egorov I.A., Toporkov N.I. Unconventional feed in poultry // Industry portal WebPticeprom - 04.17.2012.

13. Лисицын А.Н., Андреев Н.В., Григорьева В.Н. Люпин - многоцелевое сырье для пищевой и перерабатывающей промышленности // Состояние и перспективы развития люпиносеяния в XXI веке: Тез. докл. Междун. научно-практич. конф., 17-19 июля 2001 г. - Брянск, 2001. - С.175-177.13. Lisitsyn A.N., Andreev N.V., Grigoryeva V.N. Lupine - multipurpose raw materials for food and processing industry // State and prospects of development of lupine sowing in the XXI century: Abstracts. doc. Int. scientific and practical Conf., July 17-19, 2001 - Bryansk, 2001. - S.175-177.

14. Король В. Ф. Оценка требований, предъявляемых к продовольственному люпину, и разработка показателей его пищевой безопасности // Проблемы дефицита растительного белка и пути его преодоления: Матер. Междунар. конф., 13-15 июля 2006 г. - Минск: Белорусская наука, 2006. - С.113-117.14. King V. F. Evaluation of the requirements for food lupine, and the development of indicators of its food safety // Problems of vegetable protein deficiency and ways to overcome it: Mater. Int. Conf., July 13-15, 2006 - Minsk: Belarusian Science, 2006. - S.113-117.

15. Красильников В.Н., Панкина И.А. Исследование химического состава и технологических свойств семян люпина узколистного с целью создания комбинированных продуктов питания // Проблемы дефицита растительного белка и пути его преодоления: Матер. Междун. конф., 13-15 июля 2006 г. - Минск: Белорусская наука, 2006. - С.119-123.15. Krasilnikov V.N., Pankina I.A. The study of the chemical composition and technological properties of narrow-leafed lupine seeds in order to create combined foods // Problems of vegetable protein deficiency and ways to overcome it: Mater. Int. Conf., July 13-15, 2006 - Minsk: Belarusian Science, 2006. - S.119-123.

16. Lupin - anutritional update. // Milling Feed and Fertiliser. - 1985. - 168. - N 2. - PP.18, 20, 22.16. Lupin - anutritional update. // Milling Feed and Fertiliser. - 1985. - 168. - N 2. - PP.18, 20, 22.

17. Антипитательные вещества зернобобовых, зерновых, масличных капустных культур и методы их определения (Методические указания) / Фицев. А.И., Коровина Л.М., Леонидова Т.В., Бражникова Т.С. // М.: ГНУ ВНИИкормов им. Р.В.Вильямса РАМН, ФГУ «Российский центр сельскохозяйственного консультирования», 2007. - С.9-11.17. Anti-nutritional substances of legumes, grains, oilseed cabbage crops and methods for their determination (Methodical instructions) / Fitz. A.I., Korovina L.M., Leonidova T.V., Brazhnikova T.S. // M .: GNU VNIIkormov them. R.V. Williams RAMS, Federal State Institution “Russian Center for Agricultural Consulting”, 2007. - S.9-11.

18. Рекомендации по кормлению сельскохозяйственной птицы / РАСХН, МНТЦ «Племптица», ВНИТИП. // М. обл., Сергиев Посад: ВНИТИП, 2006. - С.117.18. Recommendations for feeding poultry / RAAS, ISTC “Pleptica”, VNITIP. // M. region., Sergiev Posad: VNITIP, 2006. - P.117.

19. Рекомендации по кормлению сельскохозяйственной птицы /РАСХН, МНТЦ «Племптица», ВНИТИП. // М. обл., Сергиев Посад: ВНИТИП, 2006. - С.117.19. Recommendations for feeding poultry / RAAS, ISTC “Pleptica”, VNITIP. // M. region., Sergiev Posad: VNITIP, 2006. - P.117.

20. Gladstones J., Fisher Н., Tarr A. Danja narrow-leafed lupin // South Perth. - 1987. - 2 p. / Farmnote-Western Austral, dep. of agriculture.20. Gladstones J., Fisher N., Tarr A. Danja narrow-leafed lupin // South Perth. - 1987. - 2 p. / Farmnote-Western Austral, dep. of agriculture.

21. Солодюк H.B., Левченко Т. M., Кучеренко Н.М. Выявление комплементарного эффекта взаимодействия генов по признаку алкалоидности кормовых сортов люпина // Состояние и перспективы развития люпиносеяния в XXI веке: Тез. докл. Междун. научно-практич. конф., 17-19 июля 2001 г. - Брянск, 2001. - С.41-44.21. Solodyuk H.B., Levchenko T. M., Kucherenko N.M. Identification of the complementary effect of gene interaction on the basis of alkaloidity of fodder varieties of lupine // Status and prospects of development of lupine-sowing in the XXI century: Abstract. doc. Int. scientific and practical Conf., July 17-19, 2001 - Bryansk, 2001. - P. 41-44.

22. Рот-Мейер Дора А., Пауликс Б. Использование люпина в кормлении скота // Сейбит.- 2006. - С.4-8.22. Roth-Meyer Dora A., Paulix B. The use of lupine in feeding livestock // Seybit.- 2006. - P.4-8.

23. Перов А. Переработка семян люпина // Комбикорма. - 2008. - №1. - С.50.23. Perov A. Processing of lupine seeds // Compound feed. - 2008. - No. 1. - S.50.

24. Potkanski A. Niektore aspekty wykorzystania nasion roslin straczkowyca w zywieniu zwierzat // Roczn. Acad. Roln. w Poznain. - 1986. - 168. - s.51-58.24. Potkanski A. Niektore aspekty wykorzystania nasion roslin straczkowyca w zywieniu zwierzat // Roczn. Acad. Roln. w Poznain. - 1986. - 168. - s. 51-58.

25. Елисеева Л.Г., Махотина И.А., Рудась П.Г., Браудо Е.Е., Евдокимова О.В. Качество и безопасность белковых препаратов семян люпина // Безопасность питания:: элемент оценки качества жизни семьи: Тез. докл. конф. Коломна, 2008. - С.51-52.25. Eliseeva L.G., Mahotina I.A., Rudas P.G., Braudo E.E., Evdokimova O.V. Quality and safety of protein preparations of lupine seeds // Food safety :: element of assessing the quality of family life: Abstract. doc. conf. Kolomna, 2008 .-- P.51-52.

26. Шакиров Ш.К. / Шакиров Ш.К. и др. Влияние ферментативной обработки на антипитательные факторы зерна бобовых культур // Матер. отчетной сессии молодых ученых Тат. НИИ с/х. - Казань, 2003. - С.176-180.26. Shakirov Sh.K. / Shakirov Sh.K. et al. Effect of enzymatic processing on anti-nutritional factors of legume crops // Mater. reporting session of young scientists Tat. Research institutes with agricultural. - Kazan, 2003. - S.176-180.

27. Патент 2207012 RU, МКИ⁷ A23L 1/20, A23J 3/00. Способ устранения горького вкуса и аромата, свойственных муке семян зернобобовых, а также снижения содержания в муке семян зернобобовых олигосахаридов / Браудо Е.Е., Даниленко А.Н., Дианова В.Т., Кроха Н.Г. - №2001103866 (13). Заявлено 13.02.2001. Опубл. 27.06.2003.27. Patent 2207012 RU, MKI ⁷ A23L 1/20, A23J 3/00. The way to eliminate the bitter taste and aroma inherent in the flour of leguminous seeds, as well as to reduce the content of leguminous oligosaccharides in the flour / Braudo E.E., Danilenko AN, Dianova VT, Kroha NG - No. 2001103866 (13). Stated February 13, 2001. Publ. 06/27/2003.

28. Патент 2287295 RU, МПК A23L 1/20. Способ получения пищевого продукта из зернобобовых культур / Король В.Ф. (RU), Гаврилин М.В. (RU), Кялов В.P. (RU). - №2004119811/13. Заявл. 28.04.2004. Опубл. 20.11.2006. Бюл. №32.28. Patent 2287295 RU, IPC A23L 1/20. A method of obtaining a food product from legumes / King V.F. (RU), Gavrilin M.V. (RU), Kyalov V.P. (RU). - No. 2004119811/13. Claim 04/28/2004. Publ. 11/20/2006. Bull. Number 32.

29. Патент 2288590 RU, МПК A23K 1/14, A23J 1/14, A23J 3/34. Способ получения кормового продукта из люпиновых семян / Гришутин С.Г. (RU), Синицын А.П. (RU), Савинцев И.В. (RU), Попов В.О. (RU). - №2005127969/13. Заявлено 08.09.2005. Опубл. 10.12.2006. Бюл. №34.29. Patent 2288590 RU, IPC A23K 1/14, A23J 1/14, A23J 3/34. A method of obtaining a feed product from lupine seeds / Grishutin S.G. (RU), Sinitsyn A.P. (RU), Savintsev I.V. (RU), Popov V.O. (RU). - No. 2005127969/13. Declared September 8, 2005. Publ. 12/10/2006. Bull. Number 34.

30. Кравцова И.С., Руднева И.В., Антипова Л.В., Богатырева Ж.И. Способ получения белкового концентрата из семян люпина // Матер, научн. конфер. "Студенческий научный форум" (pdf) - 15-20.02.2009.30. Kravtsova I.S., Rudneva I.V., Antipova L.V., Bogatyreva Zh.I. A method of obtaining a protein concentrate from lupine seeds // Mater, scientific. confer. "Student Scientific Forum" (pdf) - February 15-20, 2009.

31. Заявка 2008125308/13 RU, МКИ⁷ A23L 1/20, A23L 1/211. Мультиэнзимная композиция для получения белковых добавок из семян зернобобовых культур. / Удалова Э.В. (RU), Бравова Г.Б. (RU)., Кялов В.Р. (RU)., Король В.Ф. (RU). Заявлено 25.06.2008.31. Application 2008125308/13 RU, MKI ⁷ A23L 1/20, A23L 1/211. A multi-enzyme composition for producing protein supplements from leguminous seeds. / Udalova E.V. (RU), Bravova G.B. (RU)., Kyalov V.R. (RU)., King V.F. (RU). Declared June 25, 2008.

Claims (7)

1. Мультиэнзимная композиция для получения белковых добавок пищевого и кормового назначения из семян зернобобовых культур, характеризующаяся тем, что содержит комплекс ферментов - целлюлазу, эндо- и экзо-β-глюканазы, эндо- и экзоксиланазы, эндо- и экзополигалактуроназы, α- и β-галактозидазы, целлобиазу, фитазу, пектин- и пектат-лиазы, протеазу, при этом композиция имеет соотношение единиц активности по контролируемым ферментам - целлюлазе, пектин-лиазе, эндо- и экзоксиланазе, эндополигалактуроназе, α-галактозидазе и целлобиазе как 1:(3,3-11,7):(2,7-7,4):(2,5-10,0):(0,12-0,33):(0,08-0,66) соответственно.1. A multi-enzyme composition for the production of protein supplements for food and feed purposes from the seeds of legumes, characterized in that it contains a complex of enzymes - cellulase, endo- and exo-β-glucanase, endo- and exoxylanases, endo- and exopoligalacturonases, α- and β β-galactosidase, cellobiasis, phytase, pectin- and pectate lyases, protease, and the composition has a ratio of activity units for controlled enzymes — cellulase, pectin-lyase, endo- and exoxylanase, endopoligalacturonase, α-galactosidase and cellobiasis (1 , 3-11.7) :( 2.7-7 , 4) :( 2.5-10.0) :( 0.12-0.33) :( 0.08-0.66), respectively. 2. Мультиэнзимная композиция по п.1, отличающаяся тем, что для ее получения используются очищенные базовые концентраты гидролитических и лиазных ферментов, продуцируемых грибными и бактериальными микроорганизмами.2. The multi-enzyme composition according to claim 1, characterized in that for its production, purified basic concentrates of hydrolytic and lysis enzymes produced by fungal and bacterial microorganisms are used. 3. Мультиэнзимная композиция по п.2, отличающаяся тем, что базовые концентраты содержат ведущие и сопутствующие ферменты, причем наличие единиц активности ферментов определяют действующими методами в каждом из базовых концентратов и учитывают при разработке композиции с заявляемыми соотношениями.3. The multi-enzyme composition according to claim 2, characterized in that the base concentrates contain leading and concomitant enzymes, and the presence of enzyme activity units is determined by the existing methods in each of the base concentrates and taken into account when developing a composition with the claimed ratios. 4. Мультиэнзимная композиция по п.3, отличающаяся тем, что для обеспечения заявляемых соотношений используют базовые концентраты ферментов с минимально допустимыми значениями единиц активности, а именно: целлюлазы - 1800 ед./г, ксиланазы - 6000 ед./г, эндополигалактуроназы - 3000 ед./г, пектин-лиазы - 20000 ед./г, α-галактозидазы - 160 ед./г и целлобиазы - 350 ед./г.4. The multi-enzyme composition according to claim 3, characterized in that to ensure the claimed ratios, basic enzyme concentrates are used with the minimum acceptable units of activity, namely: cellulase - 1800 units / g, xylanase - 6000 units / g, endopoligalacturonase - 3000 units / g, pectin lyases - 20,000 units / g, α-galactosidase - 160 units / g and cellobiase - 350 units / g. 5. Мультиэнзимная композиция по п.2, отличающаяся тем, что в процессе ее получения базовые концентраты вводят с учетом насыпных масс и массовых долей каждого из компонентов.5. The multi-enzyme composition according to claim 2, characterized in that in the process of its preparation, the basic concentrates are administered taking into account the bulk masses and mass fractions of each of the components. 6. Мультиэнзимная композиция по п.1, отличающаяся тем, что рабочая зона действия комплекса ферментов находится в пределах pH 4,0-7,5 и диапазоне температуры - 30-50 C°, оптимальная продолжительность гидролиза обрабатываемого сырья составляет 45-90 минут.6. The multi-enzyme composition according to claim 1, characterized in that the working area of the enzyme complex is in the range of pH 4.0-7.5 and a temperature range of 30-50 C °, the optimal duration of hydrolysis of the processed feed is 45-90 minutes. 7. Мультиэнзимная композиция по п.1, отличающаяся тем, что для получения белковых добавок пищевого и кормового назначения норма ввода ее при переработке семян зернобобовых культур составляет 0,035-0,075% от массы сырья. 7. The multi-enzyme composition according to claim 1, characterized in that for the production of protein additives for food and feed purposes, the rate of its input in the processing of seeds of leguminous crops is 0.035-0.075% by weight of the raw material.