RU2495688C1 - Способ лечения ишемии головного мозга в эксперименте - Google Patents
Способ лечения ишемии головного мозга в эксперименте Download PDFInfo
- Publication number
- RU2495688C1 RU2495688C1 RU2012112092/14A RU2012112092A RU2495688C1 RU 2495688 C1 RU2495688 C1 RU 2495688C1 RU 2012112092/14 A RU2012112092/14 A RU 2012112092/14A RU 2012112092 A RU2012112092 A RU 2012112092A RU 2495688 C1 RU2495688 C1 RU 2495688C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cerebral ischemia
- hours
- erythropoietin
- dose
- experiment
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для разработки приемов лечения ишемии головного мозга. Для этого моделируют ишемию головного мозга у крыс. Способ лечения включает трехкратное внутрибрюшинное введение рекомбинантного эритропоэтина человека. При этом первое, второе и третье его введение осуществляют соответственно через 3, 24 и 48 часов после действия, приведшего к возникновению ишемии головного мозга. Количество однократно вводимого эритропоэтина составляет 5000 МЕ/кг. Дополнительно, через 30-60 минут после введения первой дозы эритропоэтина осуществляют диффузное чрезкожное облучение очага ишемии в области его проекции инфракрасным лазерным излучением с длиной волны 970 нм мощностью 1 Вт, в течение 2-х минут, с расстояния 2-3 см от поверхности. Способ позволяет значительно повысить эффективности лечения ишемии головного мозга за счет выбранных режимов введения препарата и лазерного излучения. 8 пр.
Description
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для лечения смоделированной ишемии головного мозга биологического объекта.
Цереброваскулярные заболевания ишемического генеза имеют тенденцию к росту, омоложению, сопряжены с тяжелым клиническим течением, высокими показателями инвалидности и смертности. Поиск новых подходов к терапии ишемии головного мозга является одной из актуальных проблем экспериментальной и клинической неврологии.
Решению медико-социальных проблем, возникающих в связи с распространенностью ишемических заболеваний головного мозга, способствует изучение механизмов лечения заболевания на различных экспериментальных моделях.
Известен способ магнитолазерной терапии черепно-мозговой травмы, осуществляемый лазерными лучами с длиной волны 0,63 мкм и 0,89 мкм путем воздействия на лобную и височную доли с различными по глубине и площади проникновения лазерных лучей, далее на сонные артерии, паравертебрально на шейный отдел позвоночника, при этом лазерными лучами с длиной волны 0,89 мкм на частоте 80-1500 Гц, последовательно дважды изменяя глубину, используя сначала немагнитные зеркальные насадки с глубиной проникновения 2-4 см, а затем магнитные аксиальные насадки с глубиной проникновения 6-8 см и соответственно уменьшая площадь проникновения лучен контактно сканируют лобную долю, начиная от надбровных дуг до границы роста волос в течение 30-60 с, перемещают лучи и сканируют передневисочные области над скуловой костью вдоль границы роста волос и до ушных раковин в течение 30-60 с, с переходом лазерными лучами на точки пульсации сонных артерий на шее с двух сторон одновременно, удерживая контактно лазерные лучи с радиальными магнитными насадками с глубиной проникновения 4-6 см в этих точках в течение 2-4 мин, затем перемещают лазерные лучи с аксиальными магнитными насадками и паравертебрально сканируют в контактном режиме шейный отдел позвоночника на уровне С1-С7 позвонков в течение 2-4 мин, с последующим воздействием лазерными лучами с зеркальными насадками на область сосцевидных отростков с двух сторон одновременно контактно в течение 2-4 мин (см. патент RU №2156149, А61 N5/067, опубл. 20.09.2000 г.)
Задача, на решение которой направлен известный способ, является восстановление нормализации жизнедеятельности человека, утерянной в результате черепно-мозговой травмы, в максимально короткие сроки, снижение доз лекарственных препаратов, возможности широкого применения при лечении разной степени тяжести черепно-мозговой травмы в раннем периоде в условиях стационара, а также широкое использования метода в условиях поликлиники.
Однако, известный способ достаточно сложен.
Известен способ лечения ишемии, в том числе и на экспериментальных объектах, выбранный в качестве ближайшего аналога, заключающийся во введении биологическому объекту терапевтической дозы эффективного количества эритропоэтина, где первую дозу эритропоэтина вводят после 6 часов после наступления случая ишемии, последующую вторую дозу эритропоэтина вводят в течение от 8 до 24 часов после первой дозы, третью дозу вводят в течение 20-60 часов после наступления случая ишемии и, где каждую вводимую дозу эритропоэтина выбирают из диапазона от 2500 до 5000 МЕ/кг (см. патент №2341284, М.кл. А61К 38/18; А61Р 9/10, опубл. 20.12.2008 г.).
В известном способе используются разнообразные пути введения эритропоэтина, в частности, внутривенно, подкожно, внутримышечно или интраперитонеально.
Однако, как указывают сами создатели известного способа, ни время введения первой дозы рекомбинантного эритропоэтина человека - через 6 часов после наступления случая ишемии, ни его доза в количестве 5000 МЕ/кг, не способствует значительному уменьшению размера инфаркта и не приводят к увеличению функциональной оценки процесса восстановления субъекта после случая ишемии, данная оценка для указанной выше дозы и времени составляет 46%, что свидетельствует о недостаточной эффективности известного способа лечения.
Таким образом, техническим результатом, на решение которого направлено заявляемое изобретение, является значительное повышение эффективности способа лечения ишемии головного мозга в эксперименте.
Указанный технический результат достигается тем, что в способе лечения ишемии головного мозга в эксперименте, включающем трехкратное введение внутрибрюшинно рекомбинантного эритропоэтина, при котором второе и третье его введение осуществляют соответственно через 24 и 48 часов после действия, приведшего к возникновению ишемии головного мозга, при этом количество однократно вводимого рекомбинантного эритропоэтина человека составляет 5000 МЕ/кг, согласно изобретению, дополнительно, первую дозу данного препарата вводят через 3 часа после действия, приведшего к возникновению ишемии головного мозга и, дополнительно, через 30-60 минут после введения первой дозы рекомбинантного эритропоэтина человека осуществляют диффузное чрескожное облучение проекции головного мозга биологического объекта, в области локализации ишемии, инфракрасным лазерным излучением с длиной волны 970 нм мощностью 1 Вт, в течение 2-х минут с расстояния 2-3 см от поверхности.
Заявителем экспериментально установлено, что именно более ранний срок начала введения первой дозы рекомбинантного эритропоэтина человека, осуществление диффузного чрезкожного облучения очага ишемии в области его проекции на головном мозге крысы инфракрасным лазерным излучением позволяет в значительной степени повысить эффективность лечения ишемии головного мозга.
При этом, заявителем экспериментально установлено, что наиболее предпочтительным сроком введения первой дозы рекомбинантного эритропоэтина человека являются срок через 3 часа после действия, приведшего к возникновению ишемии, а наиболее предпочтительными параметрами лазерного излучения при этом являются использование инфракрасного лазерного излучения с длиной волны 970 нм мощностью 1 Вт, и осуществление воздействия в течение 2-х минут с расстояния 2-3 см от поверхности.
Способ осуществляется следующим образом.
Эксперимент проводился на 75 беспородных разнополых половозрелых крысах весом 200 грамм. Животных содержали в условиях смешанного освещения, постоянного доступа к стандартному комбинированному корму и воде в индивидуальных клетках.
Моделирование ишемии головного мозга осуществляли по методике, которая заключается в следующем. Для получения ишемии в полушариях головного мозга одновременно производят воздействия двух родов: с одной стороны, выключают обе общие сонные артерии, а с другой - искусственно понижают общее артериальное давление до такого низкого уровня, когда сохраняется лишь минимальное кровоснабжение продолговатого мозга для поддержания деятельности вазомоторного и дыхательного центров, при этом коллатеральное кровообращение в мозге восстановиться не может. Операцию производят следующим образом. На шее разрез кожи делают по сагиттальной линии. В трахею вводят трахеотомическую трубку. Под обе общие сонные артерии подводят толстые шелковые нити, позволяющие в дальнейшем осуществлять их выключение. Для понижения общего артериального давления какая-либо крупная артерия должна быть соединена с системой компенсатора (Г.И. Мчедишвилли, 1968). С этой целью стеклянную или полиэтиленовую канюлю вводят в одну из общих сонных артерий в торакальном направлении после ее перевязки. Предварительное выключение одной из общих сонных артерий обычно не нарушает кровоснабжения мозга благодаря наличию широких анастомозов в области виллизиева круга. Канюля может быть введена и в одну из подвздошных артерий. Кожный разрез делают в области паха по ходу артерии с таким расчетом, чтобы все манипуляции на артерии были проведены экстраперитонеально.
После моделирования ишемии головного мозга 70 животным (крысам) через 3 часа внутрибрюшинно вводили рекомбинантный эритропоэтин человека (ЭПОКРИН 2000 ME) из расчета 5000 ME на 1 кг животного по международному протоколу. Через 30-60 минут после первого введения рекомбинантного эритропоэтина человека проведено диффузное чрезкожное облучение очага ишемии в области его проекции на головном мозге крысы (область операции) инфракрасным лазером с длиной волны 970 нм, мощностью 1 Вт. Время экспозиции 2 минуты с расстояния 2-3 см от поверхности головы.
Введение рекомбинантного эритропоэтина человека проводили трехкратно каждому животному внутрибрюшинно через 3 часа, 24 часа и 48 часов после действия, приведшего к возникновению ишемии головного мозга (после моделирования ишемии в полушарии). Количество однократно вводимого рекомбинантного эритропоэтина человека составляет 5000 МЕ/кг.
Контрольную группу животных составляли животные, которым осуществлялось только трехкратное введение рекомбинаторного эритропоэтина по 1000 ME каждому животному внутрибрюшинно через 2-4 часа, 24 часа и 48 часов. Контрольной группе животных не осуществляли диффузное чрезкожное облучение очага ишемии в области его проекции на головном мозге крысы.
Выведение животных из эксперимента осуществляли на 7-е, 14-е и 30-е сутки.
У животных, выведенных из эксперимента, вскрывалась полость черепа, головной мозг извлекался полностью. Выборка материалов осуществлялась с тщательным осмотром препаратов, проводился дополнительный контроль соответствия трепанационного отверстия в черепе относительно области воздействия на головной мозг, регистрировались изменение окраски, консистенция головного мозга, размеры его и очагов воздействия. Препараты маркировались и фиксировались в 10% растворе формалина.
При макроскопическом исследовании делались параллельные фронтальные срезы головного мозга с последующей заливкой в парафин. С парафиновых блоков приготавливались серийные срезы, которые окрашивали гематоксилином и эозином для обзорной микроскопии. Для оценки изменения миелиновых волокон использовалась окраска по методу Бильшовского.
Исследования проводились на микроскопе «Leica DMRXA» (Германия).
Морфологическое исследование проводилось с помощью компьютерной программы анализа изображения «ДиаМорф Cito-W», Россия, Москва.
Для объективизации параметров морфологических изменений, кроме описательных, использовались следующие счетные признаки:
- размеры очага поражения (в мкм с пересчетом в мм);
- площадь очага в зоне воздействия (в мм2).
Статистическая обработка цифровых данных проводилась методом вариационной статистики с определением среднеквадратичного отклонения δ, средней ошибки сравниваемых величин M1, M2, коэффициента достоверности t и доверительной вероятности p с помощью программы Excel 8.0 из пакета Microsoft Office 97. Различия считали достоверными при p<0,05.
В группе животных с моделью ишемии головного мозга с введением рекомбинантного эритропоэтина человека по стандартному протоколу и с накожным лазерным облучением инфракрасным лазером по протоколу отмечено образование глиомезенхимального рубца на 14 сутки с момента образования ишемии и образование кисты на 30 сутки.
У контрольной группы животных отмечено образование глиомезенхимального рубца в области некроза на 7-е сутки с момента моделирования ишемии и образование кисты на 14 сутки.
При совместном действии лазерного излучения с заявленными параметрами и введением рекомбинантного эритропоэтина человека, отмечено значительное уменьшение размера очага по сравнению с контрольной группой. Морфологически отмечено более интенсивное развитие неоангиогенеза в глиомезенхимальном рубце, несмотря на более длительное по времени формирование рубца.
Пример 1. Биологический объект: крыса вес 210 грамм. Первую дозу рекомбинантного эритропоэтина человека в количестве 5000 МЕ/кг вводили внутрибрюшинно через 3 часа после начала моделирования ишемии. Вторую дозу вводят через 24 часа, третью - через 48 часов. Через 30 минут после первого введения рекомбинантного эритропоэтина человека осуществляли диффузное чрезкожное облучение очага ишемии в области его проекции на головного мозга крысы инфракрасным лазерным излучением. Режимы лазерного воздействия: длина волны 970 нм, мощность 1 Вт, экспозиция 2 минуты. Расстояние 2 см. Животное выведено из эксперимента через 7 суток. Образование глиомезенхимального рубца и кист не отмечено.
Пример 2. Биологический объект: крыса 200 гр. Описание эксперимента соответствует примеру №1. Животное выведено из эксперимента на 14 сутки. Отмечено образование рубцовой ткани.
Пример 3. Биологический объект: крыса 200 гр. Описание эксперимента соответствует примеру №1. Животное выведено из эксперимента на 30 сутки. Отмечено образование рубцовой ткани и кист.
Отмечено уменьшение размера очага. Морфологически отмечено более интенсивное развитие неоангиогенеза в рубцовой ткани.
Пример 4. Биологический объект: крыса вес 212 грамм. Первую дозу рекомбинантного эритропоэтина человека в количестве 5000 МЕ/кг вводили внутрибрюшинно через 3 часа после начала моделирования ишемии. Вторую дозу вводят через 24 часа, третью - через 48 часов. Через 60 минут после первого введения рекомбинантного эритропоэтина человека осуществляли диффузное чрезкожное облучение очага ишемии в области его проекции на головном мозге крысы инфракрасным лазерным излучением. Режимы лазерного воздействия: длина волны 970 нм, мощность 1 Вт, экспозиция 2 минуты. Расстояние 3 см. Животное выведено из эксперимента через 7 сутки. Образование глиомезенхимального рубца и кист не отмечено.
Пример 5. Биологический объект: крыса 200 гр. Описание эксперимента соответствует примеру №4. Животное выведено из эксперимента на 14 сутки. Отмечено образование глиомезенхимального рубца.
Пример 6. Биологический объект: крыса 200 гр. Описание эксперимента соответствует примеру №4. Животное выведено из эксперимента на 30 сутки. Отмечено образование кист. Отмечено уменьшение размера очага. Морфологически отмечено более интенсивное развитие неоангиогенеза в ткани глиомезенхимального рубца.
Пример 7. Контрольная группа. Биологический объект: крыса вес 210 грамм. Первую дозу рекомбинантного эритропоэтина человека в количестве 5000 МЕ/кг вводили внутрибрюшинно через 3 часа после начала моделирования ишемии. Вторую дозу вводят через 24 часа, третью - через 48 часов. Животное выведено из эксперимента 7 сутки. Отмечено образование рубцовой ткани. Размер очага по сравнению с основной группой практически не уменьшился. Морфологически отмечено слабое развитие неоангиогенеза в глиомезенхимальным рубце.
Пример 8. Контрольная группа. Биологический объект: крыса 200 гр. Описание эксперимента соответствует примеру №7. Животное выведено из эксперимента на 14 сутки. Отмечено образование кист. Размер очага по сравнению с основной группой уменьшился незначительно. Морфологически отмечено более слабое развитие неоангиогенеза в глиомезенхимальном рубце по сравнению с основной группой.
Claims (1)
- Способ лечения ишемии головного мозга в эксперименте, включающий трехкратное введение внутрибрюшинно рекомбинантного эритропоэтина, при котором второе и третье его введение осуществляют соответственно через 24 и 48 ч после действия, приведшего к возникновению ишемии головного мозга, при этом количество однократно вводимого рекомбинантного эритропоэтина человека составляет 5000 МЕ/кг, отличающийся тем, что первую дозу данного препарата вводят через 3 ч после действия, приведшего к возникновению ишемии головного мозга и, дополнительно, через 30-60 мин после введения первой дозы рекомбинантного эритропоэтина человека осуществляют диффузное чрескожное облучение очага ишемии в области его проекции на головном мозге крысы инфракрасным лазерным излучением с длиной волны 970 нм мощностью 1 Вт, в течение 2-х мин, с расстояния 2-3 см от поверхности.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012112092/14A RU2495688C1 (ru) | 2012-03-28 | 2012-03-28 | Способ лечения ишемии головного мозга в эксперименте |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012112092/14A RU2495688C1 (ru) | 2012-03-28 | 2012-03-28 | Способ лечения ишемии головного мозга в эксперименте |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2495688C1 true RU2495688C1 (ru) | 2013-10-20 |
Family
ID=49357109
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012112092/14A RU2495688C1 (ru) | 2012-03-28 | 2012-03-28 | Способ лечения ишемии головного мозга в эксперименте |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2495688C1 (ru) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050203595A1 (en) * | 1998-06-02 | 2005-09-15 | Amir Oron | Ischemia laser treatment |
| RU2275195C2 (ru) * | 2003-06-19 | 2006-04-27 | Наталья Борисовна Кармен | Средство для защиты головного мозга от гипоксически-ишемического повреждения |
| US7345019B1 (en) * | 1999-04-13 | 2008-03-18 | The Kenneth S. Warren Institute, Inc. | Modulation of excitable tissue function by peripherally administered erythropoietin |
| RU2341284C2 (ru) * | 2003-03-27 | 2008-12-20 | Янссен Фармацевтика Нв | Применение эритропоэтина в восстановлении после инсульта |
| JP2011079860A (ja) * | 1998-12-14 | 2011-04-21 | Hannelore Ehrenreich | 脳虚血の処置法及び脳虚血の処置のためのエリスロポエチン又はエリスロポエチン誘導体類の使用 |
-
2012
- 2012-03-28 RU RU2012112092/14A patent/RU2495688C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050203595A1 (en) * | 1998-06-02 | 2005-09-15 | Amir Oron | Ischemia laser treatment |
| JP2011079860A (ja) * | 1998-12-14 | 2011-04-21 | Hannelore Ehrenreich | 脳虚血の処置法及び脳虚血の処置のためのエリスロポエチン又はエリスロポエチン誘導体類の使用 |
| US7345019B1 (en) * | 1999-04-13 | 2008-03-18 | The Kenneth S. Warren Institute, Inc. | Modulation of excitable tissue function by peripherally administered erythropoietin |
| RU2341284C2 (ru) * | 2003-03-27 | 2008-12-20 | Янссен Фармацевтика Нв | Применение эритропоэтина в восстановлении после инсульта |
| RU2275195C2 (ru) * | 2003-06-19 | 2006-04-27 | Наталья Борисовна Кармен | Средство для защиты головного мозга от гипоксически-ишемического повреждения |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| LI Y, et al. Erythropoietin-induced neurovascular protection, angiogenesis, and cerebral blood flow restoration after focal ischemia in mice. J Cereb Blood Flow Metab. 2007 May; 27(5):1043-54. * |
| БОЯДЖЯН В.Г. Протекторное действие низкоэнергетического He-Ne лазера на фосфолипидный спектр головного мозга при его ишемии и реперфузии. Нейрохимия, 1997, т.14, No.2, с.187-192. * |
| БОЯДЖЯН В.Г. Протекторное действие низкоэнергетического He-Ne лазера на фосфолипидный спектр головного мозга при его ишемии и реперфузии. Нейрохимия, 1997, т.14, №2, с.187-192. LI Y, et al. Erythropoietin-induced neurovascular protection, angiogenesis, and cerebral blood flow restoration after focal ischemia in mice. J Cereb Blood Flow Metab. 2007 May; 27(5):1043-54. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Somaa et al. | Peptide-based scaffolds support human cortical progenitor graft integration to reduce atrophy and promote functional repair in a model of stroke | |
| EP2663281B1 (en) | Corneal delivery of cross-linking agents by iontophoresis for the treatment of keratoconus and related ophthalmic compositions | |
| WO2024041330A1 (zh) | Ly2922470在制备预防或治疗脑血管疾病或组织缺血再灌注损伤药物中的应用 | |
| JP6642892B2 (ja) | ジメチルアミノミケリオリドを含む肺線維化の治療薬 | |
| RU2495688C1 (ru) | Способ лечения ишемии головного мозга в эксперименте | |
| RU2766083C1 (ru) | Биологически активная субстанция в виде биорегуляторной композиции, обладающая поддерживающим и восстановительным действием на ткани и органы, и фармакологическая композиция | |
| RU2611397C1 (ru) | Способ регенерации и омоложения кожи (варианты) | |
| RU2496513C1 (ru) | Способ лечения ишемии спинного мозга в эксперименте | |
| RU2651767C1 (ru) | Способ лечения невралгии тройничного нерва | |
| CN115551495A (zh) | 管理损伤后面部挛缩的治疗策略 | |
| RU2399100C1 (ru) | Способ создания модели частичной атрофии зрительного нерва | |
| RU2701178C1 (ru) | Способ ускорения заживления роговицы при ее механических травмах | |
| RU2706715C1 (ru) | Применение раствора оксиэтиламмония метилфеноксиацетата | |
| RU2704354C1 (ru) | Способ предупреждения развития помутнения роговицы при ее механических травмах | |
| RU2700941C1 (ru) | Способ предупреждения развития помутнения роговицы при ее механических травмах | |
| RU2700589C1 (ru) | Способ ускорения заживления роговицы при ее механических травмах | |
| JP2011506413A (ja) | 瘢痕化阻害の方法 | |
| RU2703302C1 (ru) | Применение раствора оксиэтиламмония метилфеноксиацетата | |
| WO2023241716A1 (zh) | 一种诱导哺乳动物原位再生的方法及其应用 | |
| WO2023241717A1 (zh) | 促进哺乳动物器官再生修复的物质及其应用 | |
| RU2637622C1 (ru) | Способ обеспечения доступа к лобной кости при лечении изолированных повреждений крыши орбиты, верхнего края орбиты, лба | |
| RU2677327C1 (ru) | Композиция для стимуляции репаративной регенерации эпителиальной, нервной и костной тканей | |
| RU2611951C1 (ru) | Способ стабилизации кератоконуса терапевтическими средствами | |
| US20110152189A1 (en) | Methods for the inhibition of scarring | |
| TW202320806A (zh) | 異野漆樹苷及其衍生物用於促進神經修復的用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140329 |