RU2488629C1 - Device for electric stimulation of cells - Google Patents

Abstract

FIELD: electrical engineering.

SUBSTANCE: device contains a culture plate with basins and a cover. Mounted on the plate cover is a prototype board having electric buses and electrodes. The electrodes are designed so that to enable immersion into the culture medium for contacting the base at the basin bottom. Two electrodes are placed in each basin. Each electrode is cylindrical-shaped, its radius being no less than 0.1 mm and no more than 5 mm to ensure the required rigidity and contract ohmic resistance to the basin base when a potential is supplied to the conductive base placed at the basin bottom. Arranged in the plate cover are holes with a diameter not in excess of one and a half electrode diameter, intended to accommodate electrodes so that to ensure their free stroke and protection against penetration of external factors in the process of the cell growth. Each cylindrical electrode is mounted on the prototype board by means of an arm at an angle of 90°. The base of each basin may be designed in the form of a conductive percolate grid with mesh pitch not in excess of the size of a cell to be cultivated.

EFFECT: enhanced stimulating effect of electric field onto a single cell and uniform distribution of electric field lines within the basin bottom zone.

5 dwg

Description

Настоящее изобретение относится к области стимулирования роста клеток живых организмов, а точнее к устройствам электрического управления процессом роста клеток и тканей путем непосредственного приложения к тканям и клеткам электрического поля или тока. Настоящее изобретение относится к устройствам осуществления управления ростом клеток и тканей in vitro.The present invention relates to the field of stimulating the growth of cells of living organisms, and more specifically to devices for electrical control of the growth of cells and tissues by direct application to tissues and cells of an electric field or current. The present invention relates to devices for controlling cell and tissue growth in vitro.

Известны устройства электрической стимуляции (ЭС) роста клеток и тканей in vitro [1, 2, 3].Known devices for electrical stimulation (ES) of cell and tissue growth in vitro [1, 2, 3].

Известно устройство ЭС [1], содержащее набор электродов, размещенных на электродной плате, осуществляющей электрическое соединение с электродами, и слой защитного покрытия, отделяющего электродную плату от среды культивирования клеток. Особенностью устройства является локальное подведение ЭС к клеткам и тканям, находящимся в питательной среде, что понижает энергопотребление устройства, и позволяет более эффективно подводить напряжение или ток к культивируемым клеткам. Тем не менее, данная конструкция требует применения особых планшетов, и не может быть использована в традиционных культуральных планшетах (планшетках для роста культур клеток), что ограничивает область его применения при исследовании различных оснований для культивирования клеток.A known device ES [1], containing a set of electrodes placed on an electrode board that makes electrical connection with the electrodes, and a layer of protective coating separating the electrode board from the cell culture medium. A feature of the device is the local supply of ES to cells and tissues located in a nutrient medium, which reduces the power consumption of the device, and allows more efficient to supply voltage or current to cultured cells. However, this design requires the use of special tablets, and cannot be used in traditional culture tablets (tablets for the growth of cell cultures), which limits its scope in the study of various bases for cell culture.

Известно устройство ЭС [2], которое содержит набор из двух электродов различной геометрии, находящихся на противоположных сторонах лунки культурального планшета. При этом устройство отличается тем, что электрическое поле для ЭС клеток формируется на электродах, что снижает эффективность воздействия на одну клетку, а также приводит к неравномерному распределению линий электрического поля на дне лунки культурального планшета.A device ES [2], which contains a set of two electrodes of different geometries located on opposite sides of the wells of the culture plate. Moreover, the device is characterized in that an electric field for ES cells is formed on the electrodes, which reduces the efficiency of exposure to one cell, and also leads to an uneven distribution of electric field lines at the bottom of the well of the culture plate.

Тем не менее, даже использование электродов произвольной формы не позволяет проводить ЭС на поверхностях для культивирования клеток в стандартных культуральных планшетах с подведением потенциала непосредственно к каждой клетке.However, even the use of arbitrary-shaped electrodes does not allow ES to be carried out on cell culture surfaces in standard culture plates with potential applied directly to each cell.

Наиболее близким по технической сущности к заявленному изобретению является устройство ЭС [3], содержащее культуральный планшет, набор химически и биологически инертных электродов для размещения над культуральным планшетом, расположенных на противоположных сторонах каждой лунки, каждый из электродов в которой плоский и вытянут вдоль лунки. По сравнению с описанными выше конструкциями устройств ЭС [1, 2] данное устройство может быть использовано в стандартных многолуночных культуральных планшетах, при этом в каждую лунку планшета может быть введен одновременно потенциал ЭС. Однако, как и описанные выше устройства ЭС [1,2], оно не обладает достаточной локализацией электрического поля вблизи клеток и требует приложения высоких напряжений для доставки потенциала ЭС через среду для культивирования к клеткам, что повышает его энергопотребление. Это обусловлено, в первую очередь, большим расстоянием между электродами.The closest in technical essence to the claimed invention is an ES device [3] containing a culture plate, a set of chemically and biologically inert electrodes for placement above the culture plate, located on opposite sides of each well, each of which is flat and extended along the well. Compared with the designs of ES devices described above [1, 2], this device can be used in standard multi-well culture plates, and the ES potential can be introduced simultaneously into each well of the tablet. However, like the ES device described above [1,2], it does not have sufficient localization of the electric field near the cells and requires the application of high voltages to deliver the ES potential through the culture medium to the cells, which increases its energy consumption. This is primarily due to the large distance between the electrodes.

Задачей предлагаемого изобретения является повышение локальности передаваемого потенциала к клетке и снижение потребляемой мощности, за счет организации системы электродов, непосредственно передающих потенциал ЭС клеткам через электропроводящее основание. Технический результат заявленного изобретения заключается в повышении эффективности стимулирующего воздействия электрического поля на одну клетку и равномерном распределении линий электрического поля в зоне дна лунки.The objective of the invention is to increase the locality of the transmitted potential to the cell and reduce power consumption, by organizing a system of electrodes that directly transmit the potential of ES cells through an electrically conductive base. The technical result of the claimed invention is to increase the efficiency of the stimulating effect of the electric field on one cell and the uniform distribution of electric field lines in the bottom zone of the hole.

Для достижения поставленной задачи в устройство ЭС, содержащее многолуночный культуральный планшет и макетную плату с внешними выводами, прикрепленную к крышке планшета, введен набор электродов, размещенных на крышке планшета, которые погружаются в питательную среду до контакта с основанием на дне лунки, причем на каждую лунку приходится два электрода располагающегося на одной линии, проходящей через центр планшета и находящиеся на не менее, чем на половине радиуса от центра и отличающийся тем, что каждый электрод является цилиндрическим, диаметр которого является минимально необходимым для обеспечения подвода потенциала к проводящему основанию, располагающемуся на дне лунки. Электроды соединены с макетной платой для подведения внешних электрических импульсов при этом из каждой пары электродов, один соединен с одной электрической шиной, второй - со второй электрической шиной на макетной плате, располагающейся на крышке стандартного культурального планшета, обеспечивая подведение соответствующей разности потенциалов, при этом контакт электродов с шиной на макетной плате осуществляется через отверстие в крышке планшета диаметром, не превышающем полутора диаметров электрода, что обеспечивает свободу хода электрода и защиту от проникновения внешних факторов в процессе роста клеток.To achieve this objective, a set of electrodes placed on the cover of the tablet, which are immersed in a nutrient medium before contact with the base at the bottom of the hole, is introduced into the ES device containing a multi-well culture plate and a breadboard with external terminals attached to the cover of the well two electrodes are located on one line passing through the center of the tablet and located at least half the radius from the center and characterized in that each electrode is cylindrical them, the diameter of which is the minimum necessary to ensure the supply of potential to a conductive base located at the bottom of the hole. The electrodes are connected to the breadboard for supplying external electrical impulses in this case, from each pair of electrodes, one is connected to one electric bus, the second to the second electric bus on the breadboard located on the cover of a standard culture tablet, ensuring the supply of the corresponding potential difference, while the contact electrodes with a bus on the breadboard are through a hole in the lid of the tablet with a diameter not exceeding one and a half diameters of the electrode, which ensures freedom of movement ektroda and protection against the penetration of external factors during cell growth.

Благодаря свободному ходу электродов на дно лунки может быть помещено электропроводящее основание с латеральными размерами, не менее чем расстояние между электродами, к которому может быть подведен электрический сигнал непосредственно в процессе культивирования клеток на проводящем основании.Due to the free passage of the electrodes, an electrically conductive base with lateral dimensions can be placed on the bottom of the well, not less than the distance between the electrodes, to which an electrical signal can be supplied directly during cell cultivation on the conductive base.

Максимальный положительный эффект достигается, если основание и электроды формируют при соприкосновении омический контакт, то есть контакт, сопротивление которого не превышает 100 Ом. Тогда основное падение напряжения происходит на электропроводящем основании, а не в среде для культивирования, что позволяет минимизировать прикладываемые напряжения для ЭС клеток, расположенных на электропроводящем основании.The maximum positive effect is achieved if the base and electrodes form an ohmic contact upon contact, that is, a contact whose resistance does not exceed 100 Ohms. Then the main voltage drop occurs on the electrically conductive base, and not in the medium for cultivation, which minimizes the applied voltage for ES cells located on the electrically conductive base.

Изобретение иллюстрируется графическими материалами, где изображено:The invention is illustrated by graphic materials, which depict:

Фиг.1 - схема устройства подведения ЭС через проводящие цилиндрические электроды, находящиеся в контакте с проводящим основанием в лунке культурального планшета, где:Figure 1 is a diagram of a device for supplying ES through conductive cylindrical electrodes in contact with a conductive base in the well of a culture plate, where:

1 - цилиндрические электроды, 2 - лунка, 3 - проводящее основание, 4 - макетная плата, 5 - электрические шины, 6 - отверстие для цилиндрического электрода. 1 - cylindrical electrodes, 2 - hole, 3 - conductive base, 4 - breadboard, 5 - busbars, 6 - hole for a cylindrical electrode.

Фиг.2 - вид зависимости жесткости электрода и контактного сопротивления со средой от радиуса электрода.Figure 2 is a view of the dependence of the stiffness of the electrode and contact resistance with the medium on the radius of the electrode.

Фиг.3 - конструктивная схема 6 луночного планшета с цилиндрическими электродами, где:Figure 3 is a structural diagram of 6 well plate with cylindrical electrodes, where:

1-6 - луночный планшет, 2 - крышка 6 - луночного планшета, 3 - макетная плата на верхней стороне крышки, 4 - цилиндрические электроды диаметром 0,3 мм, 5 - электрическое соединение для передачи сигнала от внешнего источника. 1-6 - a well plate, 2 - a cover of a 6 - well plate, 3 - a breadboard on the top side of the cover, 4 - cylindrical electrodes with a diameter of 0.3 mm, 5 - an electrical connection for transmitting a signal from an external source.

Фиг.4. - микрофотография фибробластов эмбриона человека (ФЭЧ) на проводящем основании после культивирования в течение 48 часов при приложенных импульсах напряжения 10 мВ (а) и 200 мв (б), где:Figure 4. - micrograph of human embryo fibroblasts (PEF) on a conductive base after cultivation for 48 hours with applied voltage pulses of 10 mV (a) and 200 mV (b), where:

1 - покровное стекло, покрытое проводящей пленкой углеродных нанотрубок, 2 - золотые контактные площадки, 3 - клетки ФЭЧ.1 - cover glass coated with a conductive film of carbon nanotubes, 2 - gold contact pads, 3 - cells of the PEC.

Фиг 5. Зависимость коэффициента пролиферации клеток ФЭЧ, измеренного по методу МТТ на длине волны 492 нм, от приложенных к электродам импульсов напряжений.Fig 5. The dependence of the proliferation coefficient of cells of the PEC, measured according to the MTT method at a wavelength of 492 nm, from voltage pulses applied to the electrodes.

Устройство ЭС согласно изобретению содержит (Фиг.1) культуральный планшет, содержащий, по крайней мере, одну лунку, над каждой лункой помещаются два цилиндрических электрода 1, соединенные через отверстие 6 в крышке стандартного культурального планшета с электрическими шинами 5, нанесенными на макетную плату. При этом электроды образуют контакт с проводящим основанием на дне лунки, на котором происходит ЭС культивирование клеток и тканей.The ES device according to the invention contains (FIG. 1) a culture plate containing at least one well, two cylindrical electrodes 1 are placed above each well, connected through an opening 6 in the lid of a standard culture plate with electric buses 5 applied to the breadboard. In this case, the electrodes form contact with the conductive base at the bottom of the well, on which ES cultivation of cells and tissues takes place.

Диаметр электрода рассчитывается из двух условий: диаметр электродов должен быть достаточным для обеспечения упругого контакта одного конца электрода с проводящим основанием в лунке при прогибе электрода не более 10% от длины участка электрода в лунке, с другой стороны - площадь контакта поверхности электрода с окружающей средой должна быть минимальной для обеспечения минимальных утечек тока через среду для культивирования.The diameter of the electrode is calculated from two conditions: the diameter of the electrodes should be sufficient to ensure elastic contact of one end of the electrode with the conductive base in the hole when the electrode deflection is not more than 10% of the length of the electrode section in the hole, on the other hand, the contact surface area of the electrode with the environment should be minimal to ensure minimal leakage current through the culture medium.

Известно, что жесткость электрода в виде стержня К определяется его механическими свойствами и геометрическими размерами согласно выражению:It is known that the stiffness of the electrode in the form of a rod K is determined by its mechanical properties and geometric dimensions according to the expression:

$$K=\frac{E}{l}\pi r^2,$$

$$K=\frac{E}{\mathrm{<figure-callout\; id="2"\; label="l\; \pi \; r"\; filenames="00000005.png,00000006.png"\; state="\{\{state\}\}">l\; </figure-callout>}}\pi r^{}{}^2,$$

где Е - модуль Юнга, l - длина стержня, r - радиус стержня.where E is Young's modulus, l is the length of the rod, r is the radius of the rod.

В приближении, что все напряжение падает на контактной области поверхности электрода и среды для культивирования, выражение для сопротивления R принимает следующий вид:In the approximation that all the voltage drops on the contact region of the electrode surface and the culture medium, the expression for the resistance R takes the following form:

$$P=\frac{pl}{\pi r^2},$$

$$P=\frac{p\mathrm{<figure-callout\; id="2"\; label="l\; \pi \; r"\; filenames="00000005.png,00000006.png"\; state="\{\{state\}\}">l\; </figure-callout>}}{\pi r^{}},$$

где ρ - удельное сопротивление электрода, l - длина стержня, r - радиус стержня.where ρ is the resistivity of the electrode, l is the length of the rod, r is the radius of the rod.

Согласно изобретению, сопротивление контактной области со средой должно быть максимальным, для обеспечения прохождения тока непосредственно через проводящее основание к клеткам, при этом жесткость должна быть достаточна высокая, для обеспечения омического контакта конца электрода с проводящим основанием. Согласно Фиг.2 сопротивление будет максимальным при уменьшении радиуса, тогда как жесткость увеличивается с увеличением радиуса электрода. Таким образом, следует искать оптимальное значение радиуса для конкретного материала электрода. С учетом того, что зависимость изменения сопротивления от радиуса уменьшается быстрее, чем увеличивается жесткость, то радиус должен быть выбран в области низких значений. В заявленном изобретении радиус цилиндрического электрода может быть не менее 0,1 мм и не более 5 мм.According to the invention, the resistance of the contact area with the medium should be maximum, to ensure the passage of current directly through the conductive base to the cells, while the stiffness should be high enough to ensure ohmic contact of the end of the electrode with the conductive base. According to figure 2, the resistance will be maximum with decreasing radius, while the rigidity increases with increasing radius of the electrode. Thus, the optimum radius value for a particular electrode material should be sought. Given the fact that the dependence of the change in resistance on the radius decreases faster than the stiffness increases, the radius should be chosen in the region of low values. In the claimed invention, the radius of the cylindrical electrode may be at least 0.1 mm and not more than 5 mm.

Электрические потенциалы в виде постоянного напряжения, переменного, импульсного или сигнала любой другой формы подаются на два электрода, находящихся в лунке. При этом электроды выполнены или покрыты из химически и биологически инертного материала, обладающего высокой электропроводностью. При этом диаметр электродов выбирается из условия обеспечения их жесткости для формирования контакта с основанием: то есть, при контакте с основанием электроды должны испытывать только упругую деформацию. Материал электродов может быть платина, золото, нержавеющая сталь, или другие биосовместимые сплавы, покрытые золотом или платиной.Electric potentials in the form of a constant voltage, alternating, pulsed, or signal of any other form are applied to two electrodes located in the well. In this case, the electrodes are made or coated of chemically and biologically inert material having high electrical conductivity. In this case, the diameter of the electrodes is selected from the condition of ensuring their rigidity to form contact with the base: that is, upon contact with the base, the electrodes should only experience elastic deformation. The electrode material may be platinum, gold, stainless steel, or other biocompatible alloys coated with gold or platinum.

Материал проводящего основания может быть выполнен из любого биологически инертного и химически стойкого проводящего материала, например золото, платина, оксид титана, легированный оловом, пленка нанотрубок, графенов.The material of the conductive base can be made of any biologically inert and chemically stable conductive material, for example, gold, platinum, tin alloyed titanium oxide, a film of nanotubes, graphenes.

Цилиндрический электрод может быть закреплен на макетной плате под плечом 90°, обеспечивая свободный ход электрода по вертикали на расстояние не менее 10% от высоты электрода, обеспечивая пружинный контакт к проводящему основанию на дне лунки планшета.The cylindrical electrode can be mounted on a breadboard under the shoulder 90 °, providing free vertical movement of the electrode at a distance of at least 10% of the electrode height, providing spring contact to the conductive base at the bottom of the well of the tablet.

Максимальная эффективность устройство достигается когда все напряжение прикладываемое к электродам линейно падает на проводящем основании, при этом максимальная локализация электрического поля достигается в случае, если основание выполнено в виде перколированной сетки с шагом ячеек не более, чем размер одной культивируемой клетки.The maximum efficiency of the device is achieved when all the voltage applied to the electrodes linearly drops on the conductive base, while the maximum localization of the electric field is achieved if the base is made in the form of a percolated grid with a cell pitch of no more than the size of one cultured cell.

Пример конкретного исполненияConcrete example

В качестве примера конкретного исполнения изобретения был выбран стандартный 6-луночный планшет с диаметром каждой лунки 3,5 см и глубиной 1 см (Фиг.3). В крышке планшета формировались по два отверстия над каждой лункой. Диаметр отверстия составлял 0,5 мм. На крышке располагалась макетная плата со сформированной системой разводных шин. К каждой шине над каждой лункой припаивалось по одному электроду диаметром 0,3 мм из биосовместимого сплава 40КХНМ-ВИ со сформированным золотым покрытием толщиной не менее 1 мкм. Электрод общей длиной не более 5 см, изгибался под углом не более 100° и не менее 80° к основанию, так что рабочая часть электрода помещалась через отверстие в крышке перпендикулярно к основанию лунки, касаясь ее своим концом. Оставшаяся часть располагалась горизонтально к макетной плате и припаивалась другим концом к подводящей шине. При этом длина участка электрода между отверстием, в которое входит электрод и местом припоя составляет не менее 1 см для обеспечения свободного хода электрода по вертикали в диапазоне не белее 1 мм.As an example of a specific embodiment of the invention, a standard 6-well plate was selected with a diameter of each well of 3.5 cm and a depth of 1 cm (Figure 3). Two holes above each well were formed in the lid of the plate. The hole diameter was 0.5 mm. On the lid there was a breadboard with a formed system of adjustable tires. Each busbar above each well was soldered with one electrode with a diameter of 0.3 mm from a 40KKHNM-VI biocompatible alloy with a formed gold coating with a thickness of at least 1 μm. The electrode with a total length of not more than 5 cm was bent at an angle of not more than 100 ° and not less than 80 ° to the base, so that the working part of the electrode was placed through the hole in the lid perpendicular to the base of the hole, touching it with its end. The remainder was positioned horizontally to the breadboard and soldered with the other end to the supply bus. In this case, the length of the electrode section between the hole into which the electrode enters and the place of solder is at least 1 cm in order to ensure free vertical movement of the electrode in a range no more than 1 mm.

На дне лунки размещалась электропроводящая подложка, выполненная из основания в виде покровного стекла размером 24×24 мм², системы золотых контактных площадок по краям покровного стекла длиной 24 мм и шириной не менее 10 мм. Между золотыми электродами формировалась тонкая пленка из углеродных нанотрубок. Сопротивление между электродом и золотой контактной площадкой составляло не более 100 Ом.At the bottom of the well was placed an electrically conductive substrate made of a base in the form of a coverslip with a size of 24 × 24 mm ² , a system of gold contact pads along the edges of the coverslip with a length of 24 mm and a width of at least 10 mm. A thin film of carbon nanotubes was formed between the gold electrodes. The resistance between the electrode and the gold pad was no more than 100 ohms.

Клетки фибробласта эмбриона человека (ФЭЧ) культивировали на модифицированных с помощью углеродных нанотрубок покровных стеклах с подведенными электродами, находящихся в 6-луночных планшетах в среде Игла с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки. Культивирование и ЭС клеток проводились в СО₂ термостате при 37°С, 5% СО₂ в течение 72 часов без антибиотиков.Human embryo fibroblast cells (PEF) were cultured on carbon nanotube-modified glass coverslips with electrodes placed in 6-well plates in Eagle's medium supplemented with 10% fetal calf serum. Cultivation and ES cells were carried out in a CO ₂ thermostat at 37 ° C, 5% CO ₂ for 72 hours without antibiotics.

Через электроды к проводящему основанию подводилась разность потенциалов от 10 мВ до 5 В. После 24 часов инкубации без приложенного напряжения подавался сигнал из 5 импульсов с длиной одного импульса 5 мсек, расстоянием между импульсами 5 мсек и периодом между сериями импульсов 1 сек в течение 48 часов.A potential difference of 10 mV to 5 V was applied to the conductive base through the electrodes. After 24 hours of incubation without an applied voltage, a signal of 5 pulses with a pulse length of 5 ms, a pulse spacing of 5 ms and a period between pulse trains of 1 second for 48 hours was applied. .

Результат использования изобретения в виде конкретного исполнения приведен на Фиг.4 и Фиг.5. Результаты демонстрируют, что благодаря предложенной конструкции изобретения клеточная пролиферация начинает изменяться уже - при напряжениях 50 мВ, при напряжении 200 MB и выше наблюдается пространственная ориентация клеточного монослоя на проводящем основании. При этом максимальное увеличение пролиферации наблюдается при разности потенциалов 100 мВ, что соответствует потребляемой мощности ~1 мкВт. Таким образом, предложенная контракция приводит к локальности передаваемого потенциала непосредственно к каждой клетке и снижению потребляемой мощности в процессе ЭС роста клетокThe result of using the invention in the form of a specific embodiment is shown in FIG. 4 and FIG. 5. The results demonstrate that, thanks to the proposed design of the invention, cell proliferation begins to change already - at voltages of 50 mV, at a voltage of 200 MB and above, the spatial orientation of the cell monolayer on a conductive base is observed. Moreover, the maximum increase in proliferation is observed at a potential difference of 100 mV, which corresponds to a power consumption of ~ 1 μW. Thus, the proposed contraction leads to the locality of the transmitted potential directly to each cell and a decrease in power consumption during ES cell growth

Источники информацииInformation sources

1. Патент США 6032062.1. US patent 6032062.

2. Патент США 20090170178.2. US patent 20090170178.

3. Патент США 7148059.3. US patent 7148059.

Claims (1)

Устройство для электрической стимуляции клеток, содержащее культуральный планшет, имеющий крышку и, по крайней мере, одну лунку для размещения в ней культуральной среды клеток, расположенные на крышке планшета макетную плату, имеющую электрические шины, электроды, выполненные с возможностью погружения в культуральную среду до контакта с основанием на дне лунки, причем на каждую лунку размещено по два электрода, расположенных на одной линии, проходящей через центр планшета, и находящиеся на расстоянии не менее чем на половине радиуса от центра, электроды соединены электрически через макетную плату с внешними выводами для подведения электрических импульсов, при этом из каждой пары электродов один соединен с одной электрической шиной, второй - со второй электрической шиной для подвода соответствующей разности потенциалов, каждый электрод выполнен цилиндрическим, радиус которого равен не менее 0,1 мм и не более 5 мм для обеспечения требуемой жесткости и контактного омического сопротивления с основанием лунки при подводе потенциала к проводящему основанию, размещенному на дне лунки, при этом в крышке планшета выполнены отверстия диаметром, не превышающим полутора диаметров электрода, для размещения в них электродов с возможностью обеспечения свободного хода электродов и защиты от проникновения внешних факторов в процессе роста клеток, причем каждый цилиндрический электрод закреплен на макетной плате посредством плеча под углом 90°, основание каждой лунки может быть выполнено в виде проводящей перколированной сетки с шагом ячейки, не превышающим размера одной культивируемой клетки. Device for electrical cell stimulation, containing a culture plate having a lid and at least one well for placement of the cell culture medium therein, a breadboard located on the lid of the tablet having electric buses, electrodes made to be immersed in the culture medium before contact with a base at the bottom of the hole, with two electrodes placed on each hole located on the same line passing through the center of the tablet and located at a distance of at least half the radius from In the center, the electrodes are connected electrically through a breadboard to external terminals for supplying electrical pulses, while one of each pair of electrodes is connected to one electric bus, the second to the second electric bus to supply the corresponding potential difference, each electrode is cylindrical, the radius of which is not equal to less than 0.1 mm and not more than 5 mm to provide the required stiffness and contact ohmic resistance with the base of the hole when supplying the potential to a conductive base placed on not holes, while in the lid of the tablet holes are made with a diameter not exceeding one and a half diameters of the electrode, for placement of electrodes in them with the possibility of providing free travel of the electrodes and protection against penetration of external factors during cell growth, each cylindrical electrode mounted on a breadboard by means of a shoulder at an angle of 90 °, the base of each well can be made in the form of a conductive percolated mesh with a cell pitch not exceeding the size of one cultured cell.

Images