RU2475745C1 - Method of predicting gastrointestinal diseases with syndrome of diarrhea in newborn calves - Google Patents

Method of predicting gastrointestinal diseases with syndrome of diarrhea in newborn calves Download PDF

Info

Publication number
RU2475745C1
RU2475745C1 RU2012114034/15A RU2012114034A RU2475745C1 RU 2475745 C1 RU2475745 C1 RU 2475745C1 RU 2012114034/15 A RU2012114034/15 A RU 2012114034/15A RU 2012114034 A RU2012114034 A RU 2012114034A RU 2475745 C1 RU2475745 C1 RU 2475745C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
cells
lymphocytes
neutrophils
apoptosis
blood
Prior art date
Application number
RU2012114034/15A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Андрей Александрович Блохин
Виталий Владимирович Исаев
Аркадий Иванович Молев
Original Assignee
Государственное научное учреждение Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РФ Российской академии сельскохозяйственных наук
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственное научное учреждение Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РФ Российской академии сельскохозяйственных наук filed Critical Государственное научное учреждение Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РФ Российской академии сельскохозяйственных наук
Priority to RU2012114034/15A priority Critical patent/RU2475745C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2475745C1 publication Critical patent/RU2475745C1/en

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

FIELD: veterinary medicine.
SUBSTANCE: method includes morphological analysis of blood by light microscopy method. Blood samples are collected in calves of three days of age. The number of neutrophils and lymphocytes in peripheral blood with the structural changes in conditions of spontaneous and mitogen induced apoptosis is counted. For values of spontaneous apoptosis of neutrophils >204.87x106 cells/L and lymphocytes >79.57x10 cells/L and mitogen induced apoptosis of neutrophils >603.6x10 cells/L and lymphocytes >419.07x10 cells/L a high risk of gastrointestinal diseases with the syndrome of diarrhea of various etiologies is predicted.
EFFECT: method enables to predict with high accuracy the risk of diseases.
1 tbl, 6 ex

Description

Изобретение относится к ветеринарной медицине, касается способа прогнозирования заболеваний у новорожденных телят и может быть использовано для ранней диагностики и прогнозирования течения желудочно-кишечных заболеваний с синдромом диареи.The invention relates to veterinary medicine, relates to a method for predicting diseases in newborn calves and can be used for early diagnosis and prediction of the course of gastrointestinal diseases with diarrhea syndrome.

Состояние теленка и окружающая среда находятся в неустойчивом равновесии и, если оно нарушается, то у новорожденных телят запускается весь комплекс патологических процессов, что находит свое проявление в развитии болезней аппарата пищеварения. В нозологическом профиле патологии крупного рогатого скота раннего постнатального периода болезни органов пищеварения составляют 28-65%, гибель телят может достигать 60-80%. На долю молодняка приходится 75-80% падежа по сравнению со взрослыми животными, что свидетельствует о необходимости ранней диагностики и своевременной и этиопатогенетически обоснованной профилактики этих заболеваний.The condition of the calf and the environment are in unstable equilibrium and, if it is disturbed, then the whole complex of pathological processes is launched in newborn calves, which finds its manifestation in the development of diseases of the digestive apparatus. In the nosological profile of the pathology of cattle of the early postnatal period, diseases of the digestive system account for 28-65%, death of calves can reach 60-80%. Young animals account for 75-80% of the deaths compared to adult animals, which indicates the need for early diagnosis and timely and etiopathogenetically substantiated prevention of these diseases.

Известны способы прогнозирования вероятного заболевания телят на основе физиологического состояния коров-матерей по показателям крови коров в сухостойном периоде (уровень общего белка, неорганического фосфора, кальция, щелочной резерв) [1] и по уровню метгемоглобина в крови сухостойных коров-матерей на последнем месяце стельности [2]. Однако при этом не учитываются разнообразие ответных реакций на неблагоприятные условия содержания и кормления, обусловленных генотипическими и фенотипическими особенностями организма теленка, а также взаимовлиянием факторов внешней среды.Known methods for predicting a likely disease of calves based on the physiological state of mother cows according to indicators of blood of cows in the dry period (total protein, inorganic phosphorus, calcium, alkaline reserve) [1] and the level of hemoglobin in the blood of dry mother cows in the last month of pregnancy [2]. However, this does not take into account the diversity of responses to adverse conditions of feeding and feeding, due to the genotypic and phenotypic characteristics of the calf organism, as well as the mutual influence of environmental factors.

Известен также способ прогнозирования риска развития патологического процесса по результатам оценки иммунного статуса. При оценке иммунного статуса выявляют дефекты в фагоцитозе (определяют абсолютное число нейтрофилов и моноцитов, оценивают функциональное состояние фагоцитов), клеточном (определяют абсолютное и относительное количество лимфоцитов в периферической крови, процент и абсолютное число Т-лимфоцитов, пролиферативный ответ на основные Т-митогены) и гуморальном (определяют количество основных классов иммуноглобулинов IgG, IgM, IgA в сыворотке крови, процента и абсолютного количества В-лимфоцитов) [3]. Основными недостатками способа является необходимость проведения комплекса исследований, низкая стандартизация вследствие субъективной оценки результатов, отсутствие точных значений и низкая вероятность прогноза.There is also a method for predicting the risk of developing a pathological process according to the results of an assessment of the immune status. When assessing the immune status, defects in phagocytosis are detected (the absolute number of neutrophils and monocytes is determined, the functional state of phagocytes is assessed), cellular (the absolute and relative number of lymphocytes in the peripheral blood, the percentage and absolute number of T-lymphocytes, proliferative response to the main T-mitogens are determined) and humoral (determine the amount of the main classes of immunoglobulins IgG, IgM, IgA in blood serum, percentage and absolute number of B-lymphocytes) [3]. The main disadvantages of the method is the need for a complex of studies, low standardization due to subjective assessment of the results, the lack of accurate values and low probability of prediction.

Цель изобретения - повышение точности и достоверности прогнозирования за счет исключения субъективности в оценке результатов.The purpose of the invention is to increase the accuracy and reliability of forecasting by eliminating subjectivity in evaluating the results.

Поставленная цель достигается способом прогнозирования желудочно-кишечных болезней у новорожденных телят по показателям апоптоза клеток периферической крови.This goal is achieved by a method for predicting gastrointestinal diseases in newborn calves in terms of apoptosis of peripheral blood cells.

Апоптоз - форма гибели клетки, проявляющаяся в уменьшении ее размера, конденсации и фрагментации хроматина, уплотнении наружной и ци-топлазматических мембран без выхода содержания клетки в окружающую среду. Биологическое значение апоптоза заключается в поддержании внутреннего гомеостаза организма на клеточном, тканевом и системном уровнях. Первые события, связанные с осуществлением апоптоза, начинаются в ядре. К ним относятся конденсация хроматина с формированием скоплений, прилежащих к ядерной мембране, и проявление вдавлений ядерной мембраны, приводящих к фрагментации ядра и образованию апоптотических телец внеклеточных фрагментов ядра, окруженных мембраной. В цитоплазме происходит конденсация и сморщивание гранул. От поверхности апоптотической клетки отщепляются небольшие везикулы, наполненные содержимым цитоплазмы (митохондрии, рибосомы и др.) и окруженные мембранным липидным бислоем. Клетка постепенно уменьшается в объеме, округляется и теряет межклеточные контакты. Апоптотические клетки и их фрагменты (апоптотические тельца, везикулы) поглощаются макрофагами, нейтрофилами. Пусковыми факторами апоптоза могут быть как внешние (внеклеточные) факторы, так и внутриклеточные сигналы. При различных патологических процессах в организме могут наблюдаться как ускорение (нейродегенеративные заболевания, токсические заболевания печени, гипо- и апластическая анемия, миелодисплазии), так и замедление (опухолевые заболевания, аутоиммунные заболевания, вирусные инфекции, вызываемые вирусами группы герпеса и аденовирусами) апоптоза [4]. Наиболее информативным методом изучения апоптоза является оценка структурных изменений клеток с помощью светового микроскопа.Apoptosis is a form of cell death, manifested in a decrease in its size, condensation and fragmentation of chromatin, compaction of the outer and cytoplasmic membranes without leaving the cell content in the environment. The biological significance of apoptosis is to maintain the body’s internal homeostasis at the cellular, tissue and systemic levels. The first events associated with the implementation of apoptosis begin in the nucleus. These include condensation of chromatin with the formation of clusters adjacent to the nuclear membrane, and the manifestation of impressions of the nuclear membrane, leading to fragmentation of the nucleus and the formation of apoptotic bodies of extracellular nuclear fragments surrounded by a membrane. In the cytoplasm, condensation and wrinkling of granules occurs. Small vesicles, filled with the contents of the cytoplasm (mitochondria, ribosomes, etc.) and surrounded by a membrane lipid bilayer, are cleaved from the surface of the apoptotic cell. The cell gradually decreases in volume, rounds off and loses intercellular contacts. Apoptotic cells and their fragments (apoptotic bodies, vesicles) are absorbed by macrophages, neutrophils. Trigger factors for apoptosis can be both external (extracellular) factors and intracellular signals. With various pathological processes in the body, acceleration (neurodegenerative diseases, toxic liver diseases, hypo- and aplastic anemia, myelodysplasias) and slowdown (tumor diseases, autoimmune diseases, viral infections caused by herpes viruses and adenoviruses) of apoptosis can be observed [4 ]. The most informative method for studying apoptosis is to evaluate structural changes in cells using a light microscope.

Способ осуществляется следующим образом.The method is as follows.

Подсчитывают количество нейтрофилов и лимфоцитов периферической крови телят 3-дневного возраста в условиях спонтанного и митогениндуцированного апоптоза методом световой микроскопии и при значениях спонтанного апоптоза нейтрофилов >204,87×106 кл./л и лимфоцитов >79,57×106 кл./л и митогениндуцированного апоптоза нейтрофилов >603,6×106 кл./л и лимфоцитов >419,07×106 кл./л прогнозируют высокий риск развития желудочно-кишечных заболеваний.Count the number of neutrophils and lymphocytes in the peripheral blood of 3-day old calves under conditions of spontaneous and mitogen-induced apoptosis using light microscopy and at values of spontaneous apoptosis of neutrophils> 204.87 × 10 6 cells / l and lymphocytes> 79.57 × 10 6 cells / L and mitogen-induced neutrophil apoptosis> 603.6 × 10 6 cells / L and lymphocytes> 419.07 × 10 6 cells / L predict a high risk of developing gastrointestinal diseases.

Сущность способа поясняется примерами.The essence of the method is illustrated by examples.

Пример 1. В условиях хозяйства, благополучного по желудочно-кишечным болезням новорожденных телят, у теленка 3-дневного возраста брали кровь для прогнозирования желудочно-кишечных болезней по структурным изменениям основных популяций лейкоцитов - нейтрофилов и лимфоцитов. Уровень апоптоза определяли путем оценки структурных изменений основных популяций лейкоцитов - нейтрофилов и лимфоцитов - с помощью иммерсионной системы светового микроскопа по показателям спонтанного и митогениндуцированного апоптоза. В первом случае готовили мазки и окрашивали их по Филипсону. Во втором случае для индукции апоптоза в качестве митогена использовали 1 млрд. суточную культуру St. aureus (золотистого стафилококка). К 0,05 мл крови добавляли 0,025 мл бактериальной суспензии. Клетки крови с культурой инкубировали в термостате при 37,0°С в течение 4 часов при периодическом помешивании. Затем готовили мазки и окрашивали аналогично, как при исследовании спонтанного апоптоза. Под иммерсией подсчитывали количество клеток с морфологическими признаками апоптоза (фрагментация ядра) в процентах от доли нейтрофилов и лимфоцитов в общей лейкограмме. Популяции лейкоцитов дифференцировали на основании их тинкториальных свойств (темно-фиолетовая, в отдельных случаях, черная окраска фрагментов ядер лимфоцитов, темно-вишневая окраска фрагментов ядер нейтрофилов). Показатели составили: спонтанный апоптоз нейтрофилов - 313,4×106 кл./л, лимфоцитов - 111,3×106 кл./л, митогениндуцированный апоптоз нейтрофилов - 800,4×106 кл./л, лимфоцитов - 470,13×106 кл./л. Прогноз неблагоприятный. На 4 сутки у теленка отмечали клинические признаки расстройства пищеварения, характеризовавшиеся как диспепсия (диарея, feces разжижен, желтоватого цвета, имел кислый запах, содержал пузырьки газа). Аппетит у теленка отсутствовал, имели место быть сухость и бледность окраски видимых слизистых оболочек, пульс был учащен, тоны сердца глухие, дыхание учащено.Example 1. In a farm that is safe for gastrointestinal diseases of newborn calves, a 3-day-old calf was bled to predict gastrointestinal diseases by structural changes in the main leukocyte populations — neutrophils and lymphocytes. The level of apoptosis was determined by assessing the structural changes in the main leukocyte populations — neutrophils and lymphocytes — using an immersion light microscope system according to the indicators of spontaneous and mitogen-induced apoptosis. In the first case, smears were prepared and stained according to Philipson. In the second case, 1 billion diurnal St. culture was used as the mitogen for the induction of apoptosis. aureus (Staphylococcus aureus). To 0.05 ml of blood was added 0.025 ml of bacterial suspension. Blood cells with culture were incubated in an incubator at 37.0 ° C for 4 hours with periodic stirring. Then smears were prepared and stained in the same way as in the study of spontaneous apoptosis. Under immersion, the number of cells with morphological signs of apoptosis (nuclear fragmentation) as a percentage of the proportion of neutrophils and lymphocytes in the total leukogram was calculated. White blood cell populations were differentiated based on their tinctorial properties (dark violet, in some cases, black staining of fragments of lymphocyte nuclei, dark cherry staining of fragments of neutrophil nuclei). The indices were: spontaneous neutrophil apoptosis - 313.4 × 10 6 cells / l, lymphocytes - 111.3 × 10 6 cells / l, mitogen-induced neutrophil apoptosis - 800.4 × 10 6 cells / l, lymphocytes - 470, 13 × 10 6 cells / l The forecast is unfavorable. On day 4, the calf noted clinical signs of digestive upset, characterized as dyspepsia (diarrhea, feces diluted, yellowish, had an acidic smell, contained gas bubbles). The calf had no appetite, there was a dryness and pallor of the color of visible mucous membranes, the pulse was quickened, heart sounds were deaf, breathing was quickened.

Пример 2. В условиях хозяйства, благополучного по желудочно-кишечным болезням новорожденных телят, у теленка 3-дневного возраста брали кровь для прогнозирования желудочно-кишечных болезней по структурным изменениям основных популяций лейкоцитов - нейтрофилов и лимфоцитов, как в примере 1. Показатели составили: спонтанный апоптоз нейтрофилов - 317,72×106 кл./л, лимфоцитов - 110,0×106 кл./л, митогениндуцированный апоптоз нейтрофилов - 898,3×106 кл./л, лимфоцитов - 483,6×106 кл./л. Прогноз неблагоприятный. На 5 сутки у теленка отмечали клинические признаки токсической диспепсии (постоянный профузный понос, feces разжижен, серого цвета с примесью слизи, зловонный). У теленка отсутствовал аппетит, наблюдалась адинамия.Example 2. In a farm that is safe for gastrointestinal diseases of newborn calves, blood was taken from a 3-day-old calf to predict gastrointestinal diseases by structural changes in the main leukocyte populations - neutrophils and lymphocytes, as in example 1. The indicators were: spontaneous apoptosis of neutrophils - 317.72 × 10 6 cells / l, lymphocytes - 110.0 × 10 6 cells / l, mitogen-induced apoptosis of neutrophils - 898.3 × 10 6 cells / l, lymphocytes - 483.6 × 10 6 cells / l The forecast is unfavorable. On day 5, the calf noted clinical signs of toxic dyspepsia (persistent profuse diarrhea, feces liquefied, gray with mucus, fetid). The calf lacked appetite, adynamia was observed.

Пример 3. В условиях хозяйства, неблагополучного по желудочно-кишечным болезням новорожденных телят, у теленка 3-дневного возраста брали кровь для прогнозирования желудочно-кишечных болезней по структурным изменениям основных популяций лейкоцитов - нейтрофилов и лимфоцитов, как в примере 1. Показатели составили: спонтанный апоптоз нейтрофилов - 322,1×106 кл./л, лимфоцитов - 115,9×106 кл./л, митогениндуцированный апоптоз нейтрофилов - 921,5×106 кл./л, лимфоцитов - 484,7×106 кл./л. Прогнозировали риск развития желудочно-кишечных заболеваний. На 4 сутки у теленка отмечены клинические признаки расстройства функции пищеварения (профузный понос, feces водянистый, с обилием слизи и следами крови). Диагноз - ротавирусная инфекция.Example 3. In a farm that is not healthy for gastrointestinal diseases of newborn calves, a 3-day-old calf was bled to predict gastrointestinal diseases by structural changes in the main leukocyte populations - neutrophils and lymphocytes, as in example 1. The indicators were: spontaneous apoptosis of neutrophils - 322.1 × 10 6 cells / l, lymphocytes - 115.9 × 10 6 cells / l, mitogen-induced apoptosis of neutrophils - 921.5 × 10 6 cells / l, lymphocytes - 484.7 × 10 6 cells / l They predicted the risk of developing gastrointestinal diseases. On day 4, the calf showed clinical signs of digestive upset (profuse diarrhea, watery feces, with an abundance of mucus and traces of blood). The diagnosis is rotavirus infection.

Пример 4. В условиях хозяйства, неблагополучного по желудочно-кишечным болезням новорожденных телят, у теленка 3-дневного возраста брали кровь для прогнозирования желудочно-кишечных болезней по структурным изменениям основных популяций лейкоцитов - нейтрофилов и лимфоцитов, как в примере 1. Показатели составили: спонтанный апоптоз нейтрофилов - 315,99×106 кл./л, лимфоцитов - 118,5×106 кл./л, митогениндуцированный апоптоз нейтрофилов - 1105,0×106 кл./л, лимфоцитов - 513,49×106 кл./л. Прогнозировали риск развития желудочно-кишечных заболеваний с тяжелым течением. На 4 сутки у теленка отмечали понижение аппетита, угнетение общего состояния, малоподвижность. Фекалии при этом водянистые с желтыми комочками, кислого запаха. Температура тела в пределах физиологической нормы. На 2 и 3 день болезни фекалии приобрели грязно-желтый цвет, с примесью крови. Отмечали западение глаз и общую дегидратацию организма. Диагноз: микстинфекция, обусловленная ассоциацией ротавируса и Е. coli. Заболевание протекало тяжело.Example 4. In a farm that is not healthy for gastrointestinal diseases of newborn calves, blood was taken from a 3-day-old calf to predict gastrointestinal diseases by structural changes in the main leukocyte populations - neutrophils and lymphocytes, as in example 1. The indicators were: spontaneous apoptosis of neutrophils - 315.99 × 10 6 cells / l, lymphocytes - 118.5 × 10 6 cells / l, mitogen-induced apoptosis of neutrophils - 1105.0 × 10 6 cells / l, lymphocytes - 513.49 × 10 6 cells / l The risk of developing gastrointestinal diseases with a severe course was predicted. On day 4, the calf noted a decrease in appetite, depression of the general condition, and lack of mobility. Feces in this case are watery with yellow lumps, sour smell. Body temperature within the physiological norm. On the 2nd and 3rd day of illness, feces acquired a dirty yellow color, with an admixture of blood. Observed retraction of the eyes and general dehydration of the body. Diagnosis: mixed infection due to the association of rotavirus and E. coli. The disease was severe.

Пример 5. В условиях хозяйства, неблагополучного по желудочно-кишечным болезням новорожденных телят, у теленка 3-дневного возраста брали кровь для прогнозирования желудочно-кишечных болезней по структурным изменениям основных популяций лейкоцитов - нейтрофилов и лимфоцитов, как в примере 1. Показатели составили: спонтанный апоптоз нейтрофилов - 461,7×106 кл./л, лимфоцитов - 153,9×106 кл./л, митогениндуцированный апоптоз нейтрофилов - 1385,1×106 кл./л, лимфоцитов - 564,3×106 кл./л. Прогнозировали риск развития желудочно-кишечных заболеваний с тяжелым течением. На 4 сутки у теленка отмечали первые признаки диареи: эрозии на носовом зеркале, признаки незначительного угнетения и диареи. Фекалии серого цвета, водянистые, с пузырьками газа. Через сутки после появления первых признаков признаки обезвоживания приобрели ярко выраженный характер. Эрозии на носовом зеркальце сохранялись. Температура тела повышалась до 39,5°С. Через двое суток от начала заболевания в фекалиях телят появилась примесь крови, слизи и пузырьков зловонных газов, резко нарастали признаки дегидратации организма и токсикоза, температура тела повышалась до 40,5-41,5°С. Теленок лежал, был не в состоянии самостоятельно подняться. Диагноз: микстинфекция, обусловленная ассоциацией вируса диареи КРС, ротавируса и Е. coli. Заболевание протекало тяжело, теленок погиб.Example 5. In a farm that is not healthy for gastrointestinal diseases of newborn calves, blood was taken from a 3-day-old calf to predict gastrointestinal diseases by structural changes in the main leukocyte populations - neutrophils and lymphocytes, as in example 1. The indicators were: spontaneous apoptosis of neutrophils - 461.7 × 10 6 cells / liter, lymphocytes - 153.9 × 10 6 cells / liter, mitogen-induced apoptosis of neutrophils - 1385.1 × 10 6 cells / liter, lymphocytes - 564.3 × 10 6 cells / l The risk of developing gastrointestinal diseases with a severe course was predicted. On day 4, the calf noted the first signs of diarrhea: erosion on the nasal mirror, signs of slight depression and diarrhea. The feces are gray, watery, with gas bubbles. A day after the first signs appeared, the signs of dehydration became pronounced. Erosion on the nose mirror persisted. Body temperature increased to 39.5 ° C. Two days after the onset of the disease, an admixture of blood, mucus, and fetid gas bubbles appeared in the feces of the calves, signs of dehydration of the body and toxicosis sharply increased, body temperature increased to 40.5-41.5 ° С. The calf was lying, was not able to independently rise. Diagnosis: mixed infection due to the association of cattle diarrhea virus, rotavirus and E. coli. The disease was severe, the calf died.

Пример 6. В условиях хозяйства, благополучного по желудочно-кишечным болезням новорожденных телят, у теленка 3-дневного возраста брали кровь для прогнозирования желудочно-кишечных болезней по структурным изменениям основных популяций лейкоцитов - нейтрофилов и лимфоцитов, как в примере 1. Показатели составили: спонтанный апоптоз нейтрофилов - 100,44×106 кл./л, лимфоцитов - 77,44×106 кл./л, митогениндуцированный апоптоз нейтрофилов - 360,5×106 кл./л, лимфоцитов - 220,25×106 кл./л. Прогноз благоприятный. Клинические наблюдения за теленком в течение 10 дней не выявили нарушений функции пищеварения. Параллельно изучали состояние иммунобиохимического гомеостаза по показателям общего белка (определяли рефрактометрическим методом), глюкозы (определяли ортотолуидиновым методом), общих липидов (определяли по Криницкому А.Ф. в модификации Волгина В.И.), иммуноглобулинов (определяли цинк-сульфатным тестом), бактерицидной активности сыворотки крови (определяли по Смирновой О.В. и Кузьминой Т.А), лизоцимной активности сыворотки крови (определяли по Дорофейчук В.Г.), фагоцитарной активности лейкоцитов (определяли по Плященко С.И., Сидорову В.Г.), Т- и В-лимфоцитов (определяли по Маянскому А.Н., Рассанову С.П.), гемоглобина (определяли гемиглобинцианидным методом), кальция общего (определяли унифицированным колориметрическим методом), фосфора неорганического (определяли молибдатным UV-методом), эритроцитов (определяли турбидиметрическим методом), лейкоцитов (определяли методом подсчета в камере Горяева). Результаты представлены в таблице.Example 6. In a farm that is safe for gastrointestinal diseases of newborn calves, blood was taken from a 3-day-old calf to predict gastrointestinal diseases by structural changes in the main leukocyte populations - neutrophils and lymphocytes, as in example 1. The indicators were: spontaneous apoptosis of neutrophils - 100.44 × 10 6 cells / l, lymphocytes - 77.44 × 10 6 cells / l, mitogen-induced apoptosis of neutrophils - 360.5 × 10 6 cells / l, lymphocytes - 220.25 × 10 6 cells / l The forecast is favorable. Clinical observations of the calf for 10 days did not reveal digestive dysfunction. In parallel, we studied the state of immunobiochemical homeostasis by indicators of total protein (determined by the refractometric method), glucose (determined by the ortotoluidine method), total lipids (determined by Krinitsky AF in the modification of Volgin V.I.), immunoglobulins (determined by zinc-sulfate test), bactericidal activity of blood serum (determined by O.S. Smirnova and T.A. Kuzmina), serum lysozyme activity (determined by V.G. Dorofeychuk), leukocyte phagocytic activity (determined by S.I. Plyashchenko, V.G. Sidorov. ) , T- and B-lymphocytes (determined by A. Mayansky, S. Rassanov), hemoglobin (determined by the hemiglobin cyanide method), total calcium (determined by the unified colorimetric method), inorganic phosphorus (determined by the UV molybdate method), erythrocytes (determined by the turbidimetric method), white blood cells (determined by the method of counting in the Goryaev chamber). The results are presented in the table.

ТаблицаTable Показатели иммунного статуса новорожденного теленка 3-дневного возраста3-day-old newborn calf immune status indicators ПоказателиIndicators ЗначениеValue Спонтанный апоптозSpontaneous apoptosis Абсолютное количество нейтрофилов с признаками апоптоза, 106 кл./лThe absolute number of neutrophils with signs of apoptosis, 10 6 cells / l 100,44100.44 Абсолютное количество лимфоцитов с фрагментированным ядром, 106 кл./лThe absolute number of lymphocytes with a fragmented nucleus, 10 6 cells / l 77,4477.44 Митогениндуцированный апоптозMitogen-induced apoptosis Абсолютное количество нейтрофилов с признаками апоптоза, 106 кл./лThe absolute number of neutrophils with signs of apoptosis, 10 6 cells / l 360,5360.5 Абсолютное количество лимфоцитов с фрагментированным ядром, 106 кл./лThe absolute number of lymphocytes with a fragmented nucleus, 10 6 cells / l 220,25220.25 Иммунобиохимические исследованияImmunobiochemical studies Общий белок сыворотки крови, г/лTotal serum protein, g / l 49,649.6 Глюкоза, ммоль/лGlucose, mmol / L 3,723.72 Общие липиды, г/лTotal lipids, g / l 3,13,1 Кальций общий, мг%Total calcium, mg% 9,689.68 Фосфор неорганический, мг%Inorganic phosphorus, mg% 7,777.77 Общие иммуноглобулины, мг/млTotal immunoglobulins, mg / ml 21,221,2 Бактерицидная активность сыворотки крови, %Bactericidal activity of blood serum,% 85,485,4 Лизоцимная активность сыворотки крови, %Lysozyme activity of blood serum,% 1,71.7 Фагоцитарная активность лейкоцитов крови, %Phagocytic activity of blood leukocytes,% 64,264,2 Т-лимфоциты, %T-lymphocytes,% 34,434,4 В-лимфоциты, %B-lymphocytes,% 11,411,4 Гемоглобин, г/лHemoglobin, g / l 96,796.7 Эритроциты, 1012Red blood cells, 10 12 / L 5,85.8 Лейкоциты, 109White blood cells, 10 9 / L 9,359.35

Как видно из таблицы, у клинически здорового теленка отмечены нарушения метаболического статуса, характеризовавшиеся снижением по отношению к минимальным нормативным пределам для данной возрастной категории уровня общего белка сыворотки крови на 9,81%, глюкозы - на 7,0%, общих липидов - на 11,42%, нарушением кальциево-фосфорного соотношения из-за снижения уровня общего кальция на 6,92% и повышения уровня неорганического фосфора на 14,26%. Также выявлены отклонения от нормативов в показателях гуморального звена иммунной системы и общей резистентности организма, что проявилось снижением содержания общих иммуноглобулинов на 15,2%, бактерицидной активности сыворотки крови на 4,04% и лизоцимной активности сыворотки крови на 15,0%. На основе выявленной негативной динамики метаболического статуса и снижения общей резистентности организма теленка можно было бы прогнозировать вероятное заболевание. Однако показатели апоптоза нейтрофилов и лимфоцитов периферической крови теленка свидетельствовали об обратном и предопределяли благоприятный прогноз, что подтвердили клинические наблюдения.As can be seen from the table, in a clinically healthy calf metabolic status was noted, characterized by a decrease in relation to the minimum regulatory limits for this age category of the level of total serum protein by 9.81%, glucose - by 7.0%, total lipids - by 11 , 42%, a violation of the calcium-phosphorus ratio due to a decrease in the level of total calcium by 6.92% and an increase in the level of inorganic phosphorus by 14.26%. Deviations from the standards in terms of the humoral link of the immune system and the overall resistance of the body were also revealed, which was manifested by a decrease in the content of total immunoglobulins by 15.2%, bactericidal activity of blood serum by 4.04% and lysozyme activity of blood serum by 15.0%. Based on the identified negative dynamics of metabolic status and a decrease in the overall resistance of the calf organism, a probable disease could be predicted. However, apoptosis indices of neutrophils and lymphocytes of the peripheral blood of the calf indicated the opposite and predetermined a favorable prognosis, which was confirmed by clinical observations.

Показатели крови, как одной из физиологических систем, являются интеграционным индикатором функционирования организма. Точность и достоверность прогнозирования по структурным изменениям основных популяций лейкоцитов - нейтрофилов и лимфоцитов - объясняется тем, что апоптоз как процесс, активность которого зависит от интенсивности внешних воздействий, активно участвует в процессах адаптации организма. Адаптация - сложный и многогранный процесс, эффективность которого зависит, в первую очередь, от соотношения воздействия факторов окружающей среды и ответной реакции нервной, эндокринной и иммунной систем организма на такое воздействие. Поддерживая адекватный пул функционально активных клеток системы иммунного надзора, апоптоз обеспечивает гомеостаз организма, купируя тем самым развитие заболеваний, имеющих в своей патогенетической основе дисфункцию иммунной системы. Проведенные исследования подтвердили, что показатели апоптоза позволяют прогнозировать индивидуальную вероятность благоприятного адаптационного исхода в процессе раннего онтогенеза новорожденного животного.Blood counts, as one of the physiological systems, are an integration indicator of the functioning of the body. The accuracy and reliability of prediction of structural changes in the main leukocyte populations - neutrophils and lymphocytes - is explained by the fact that apoptosis as a process, the activity of which depends on the intensity of external influences, is actively involved in the body's adaptation processes. Adaptation is a complex and multifaceted process, the effectiveness of which depends, first of all, on the ratio of the influence of environmental factors and the response of the nervous, endocrine and immune systems of the body to such an effect. Maintaining an adequate pool of functionally active cells of the immune surveillance system, apoptosis provides homeostasis of the body, thereby stopping the development of diseases that have a dysfunction of the immune system in their pathogenetic basis. Studies have confirmed that apoptosis indices allow predicting the individual probability of a favorable adaptive outcome in the process of early ontogenesis of a newborn animal.

Источники информацииInformation sources

1. Информационный листок №29-96, 1994.1. Information leaflet No. 29-96, 1994.

2. Патент РФ №2057485 C1, МПК A61B 10/00, A01K 67/02, 1996.2. RF patent No. 2057485 C1, IPC A61B 10/00, A01K 67/02, 1996.

3. Федоров Ю.Н. Иммунологический мониторинг в ветеринарии / Ю.Н.Федоров // С.-х. биология. - 2004. - №2. - С.3-9.3. Fedorov Yu.N. Immunological monitoring in veterinary medicine / Yu.N. Fedorov // S.-kh. biology. - 2004. - No. 2. - C.3-9.

4. А.А.Ярилин. Апоптоз: природа феномена и его роль в норме и патологии // Актуальные проблемы патофизиологии / Под ред. Б.Б.Мороза - М.: Медицина, 2001. - С.13-56.4. A.A. Yarilin. Apoptosis: the nature of the phenomenon and its role in the norm and pathology // Actual problems of pathophysiology / Ed. B. B. Moroz - M .: Medicine, 2001. - P.13-56.

Claims (1)

Способ прогнозирования желудочно-кишечных заболеваний с синдромом диареи у новорожденных телят, включающий морфологический анализ крови методом световой микроскопии, отличающийся тем, что пробы крови берут у телят 3-дневного возраста, подсчитывают количество нейтрофилов и лимфоцитов периферической крови со структурными изменениями в условиях спонтанного и митогениндуцированного апоптоза и при значениях спонтанного апоптоза нейтрофилов >204,87·106 кл./л и лимфоцитов >79,57·106 кл./л и митогениндуцированного апоптоза нейтрофилов >603,6·106 кл./л и лимфоцитов >419,07·106 кл./л прогнозируют высокий риск развития желудочно-кишечных заболеваний с синдромом диареи различной этиологии. A method for predicting gastrointestinal diseases with diarrhea syndrome in newborn calves, including morphological blood analysis by light microscopy, characterized in that blood samples are taken from 3-day-old calves, counting the number of peripheral blood neutrophils and lymphocytes with structural changes in conditions of spontaneous and mitogen-induced apoptosis and with values of spontaneous apoptosis of neutrophils> 204.87 · 10 6 cells / l and lymphocytes> 79.57 · 10 6 cells / l and mitogen-induced apoptosis of neutrophils> 603.6 · 10 6 cells / l and lymphocytes> 419.07 · 10 6 cells / l predict a high risk of developing gastrointestinal diseases with diarrhea syndrome of various etiologies.
RU2012114034/15A 2012-04-10 2012-04-10 Method of predicting gastrointestinal diseases with syndrome of diarrhea in newborn calves RU2475745C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012114034/15A RU2475745C1 (en) 2012-04-10 2012-04-10 Method of predicting gastrointestinal diseases with syndrome of diarrhea in newborn calves

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012114034/15A RU2475745C1 (en) 2012-04-10 2012-04-10 Method of predicting gastrointestinal diseases with syndrome of diarrhea in newborn calves

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2475745C1 true RU2475745C1 (en) 2013-02-20

Family

ID=49121088

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012114034/15A RU2475745C1 (en) 2012-04-10 2012-04-10 Method of predicting gastrointestinal diseases with syndrome of diarrhea in newborn calves

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2475745C1 (en)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1666072A1 (en) * 1989-01-18 1991-07-30 Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РСФСР Method for prognostication of gastroenteric diseases in newborn calves
RU2057485C1 (en) * 1994-04-05 1996-04-10 Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РФ Method for predicting neonatal calves health state
WO2002037119A2 (en) * 2000-10-31 2002-05-10 Roslin Institute (Edinburgh) Method of diagnosing a transmissible spongiform encephalopathy

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1666072A1 (en) * 1989-01-18 1991-07-30 Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РСФСР Method for prognostication of gastroenteric diseases in newborn calves
RU2057485C1 (en) * 1994-04-05 1996-04-10 Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РФ Method for predicting neonatal calves health state
WO2002037119A2 (en) * 2000-10-31 2002-05-10 Roslin Institute (Edinburgh) Method of diagnosing a transmissible spongiform encephalopathy

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Yamashita et al. Selenoneine, a novel selenium-containing compound, mediates detoxification mechanisms against methylmercury accumulation and toxicity in zebrafish embryo
Kojouri et al. The effects of oral consumption of selenium nanoparticles on chemotactic and respiratory burst activities of neutrophils in comparison with sodium selenite in sheep
Xu et al. Redox properties of tryptophan metabolism and the concept of tryptophan use in pregnancy
Irizar et al. Optimization of NRU assay in primary cultures of Eisenia fetida for metal toxicity assessment
Sousa et al. Sex differences in offspring neurodevelopment, cognitive performance and microglia morphology associated with maternal diabetes: Putative targets for insulin therapy
Willekens et al. Impact of zinc transport mechanisms on embryonic and brain development
Batra et al. A higher abundance of O-linked glycans confers a selective advantage to high fertile buffalo spermatozoa for immune-evasion from neutrophils
Yeste et al. Blocking NHE channels reduces the ability of in vitro capacitated mammalian sperm to respond to progesterone stimulus
Tvrdá et al. The impact of bacteriocenoses on sperm vitality, immunological and oxidative characteristics of ram ejaculates: does the breed play a role?
Sampaio et al. Impact of acute undernutrition on growth, ileal morphology and nutrient transport in a murine model
Sharaf et al. The supplementation of bee bread methanolic extract to egg yolk or soybean lecithin extenders can improve the quality of cryopreserved ram semen
Nemati et al. The effect of cerium oxide during pregnancy on the development of the testicular tissue of newborn NMRI mice
RU2475745C1 (en) Method of predicting gastrointestinal diseases with syndrome of diarrhea in newborn calves
Wang et al. Perinatal iodine deficiency and hypothyroidism increase cell apoptosis and alter doublecortin and reelin protein expressions in rat cerebellum
Ďuračka et al. Staphylococcus-induced bacteriospermia in vitro: consequences on the bovine spermatozoa quality, extracellular calcium and magnesium content
Kashem et al. Exposure of rat neural stem cells to ethanol affects cell numbers and alters expression of 28 proteins
Phipps et al. Genotoxicity and neonatal subchronic toxicity assessment of a novel mixture of the human‐identical milk oligosaccharides lacto‐N‐fucopentaose I and 2′‐fucosyllactose
Kędzierski et al. Bee pollen supplementation to aged horses influences several blood parameters
Siddiqui et al. Association of dopamine DA-D2 receptor in rotenone-induced cytotoxicity in PC12 cells
RU2699719C1 (en) Method for quality assessing daily young poultry
RU2737336C1 (en) Method for determining immunological reactivity of animals
Bucci et al. Detection and localization of GLUTs 1, 2, 3 and 5 in donkey spermatozoa
RU2419093C1 (en) Method to forecast development of toxic form of dyspepsia in newborn calves with initial symptoms of dyspepsia
Fasoli et al. Urinary reference values and first insight into the urinary proteome of captive giraffes
Taiwo et al. Investigations into the teratogenic potentials of lead in pregnant rabbit

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20140411