RU2475481C1 - 2-nitroheterylthiocyanates for treatment of fungas infections, pharmaceutical composition and their application - Google Patents
2-nitroheterylthiocyanates for treatment of fungas infections, pharmaceutical composition and their application Download PDFInfo
- Publication number
- RU2475481C1 RU2475481C1 RU2012107786/04A RU2012107786A RU2475481C1 RU 2475481 C1 RU2475481 C1 RU 2475481C1 RU 2012107786/04 A RU2012107786/04 A RU 2012107786/04A RU 2012107786 A RU2012107786 A RU 2012107786A RU 2475481 C1 RU2475481 C1 RU 2475481C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- radical
- carbon atoms
- nitro
- saturated
- compound
- Prior art date
Links
- RYUGDVGQNGIOEZ-UHFFFAOYSA-N CC(NC(C1[N+]([O-])=O)Cl)NC1Cl Chemical compound CC(NC(C1[N+]([O-])=O)Cl)NC1Cl RYUGDVGQNGIOEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AAFJCCMUGMMEIQ-UHFFFAOYSA-N CC(NC(C1[N+]([O-])=O)N(C)C)NC1Cl Chemical compound CC(NC(C1[N+]([O-])=O)N(C)C)NC1Cl AAFJCCMUGMMEIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 0 CN(C)C(C1[N+]([O-])=O)NC(*)NC1N=C=S Chemical compound CN(C)C(C1[N+]([O-])=O)NC(*)NC1N=C=S 0.000 description 1
Abstract
Description
Изобретение относится к 2-нитрогетерилтиоцианатам, таким как производные 4-родано-5-нитропиримидины и 2-родано-3-нитропиридины, обладающим активностью в отношении грибковых инфекций человека, для предупреждения и лечения грибковых инфекций человека и животных.The invention relates to 2-nitroheterylthiocyanates, such as derivatives of 4-rhodo-5-nitropyrimidines and 2-rhodo-3-nitropyridines, having activity against human fungal infections, for the prevention and treatment of fungal infections in humans and animals.
Недостаточная эффективность современной противомикробной терапии обусловлена в значительной степени развитием резистентности у возбудителей к имеющимся лекарственным препаратам. Именно поэтому во всем мире проводится интенсивный поиск и разработка новых эффективных лекарственных соединений. Несмотря на все усилия, современный арсенал медицинских средств недостаточен и не позволяет проводить эффективное лечение многих заболеваний, в т.ч. грибковых инфекций. Особая трудность в лечении грибковых инфекций обусловлена сильным сходством грибов и млекопитающих как на биохимическом, так и на клеточном уровне. Данное обстоятельство значительно ограничивает потенциальный выбор мишеней, воздействие на которые позволяет эффективно подавлять рост возбудителей-грибов без одновременного пагубного воздействия на организм человека. Имеющиеся в настоящее время противогрибковые препараты - полиены и азолы, влияющие на главный компонент мембраны грибов - эргостерол, не обеспечивают должной избирательности действия. Они весьма токсичны, более того, многие штаммы возбудителей приобретают резистентность к препаратам группы азолов. На сегодняшний день механизмы, обеспечивающие реализацию антимикробного действия лекарственных препаратов, можно кратко сформулировать следующим образом: 1) влияние на синтез нуклеиновых кислот и белков, 2) воздействие на образование мукопептидов, нарушающее построение новой клеточной стенки, 3) повреждение плазматической мембраны микробов (J.M.Fostel, P.A.Lartey, Drug Disc. Today, 2000, 5, 25). Исходя из этого, к числу рациональных подходов к поиску противогрибковых средств следует отнести синтез гетероциклических соединений - в частности, аналогов оснований нуклеиновых кислот, содержащих в качестве функциональных групп фрагменты, содержащие серу. Эти группировки способны к взаимодействию с эндогенными нуклеофилами, такими как белки, аминокислоты, гликозидные фрагменты, тиолы, создавать дисульфидные мостики и вообще активно участвовать в образовании новых ковалентных и слабых (Н-связи, связи диполь-диполь и др.) связей с эндогенными системами.The lack of effectiveness of modern antimicrobial therapy is largely due to the development of resistance in pathogens to existing drugs. That is why an intensive search and development of new effective drug compounds is carried out all over the world. Despite all efforts, the modern arsenal of medical devices is insufficient and does not allow for the effective treatment of many diseases, including fungal infections. A particular difficulty in the treatment of fungal infections is due to the strong similarity of fungi and mammals at both the biochemical and cellular levels. This circumstance significantly limits the potential choice of targets, the impact on which allows you to effectively suppress the growth of fungal pathogens without simultaneously deleterious effects on the human body. Currently available antifungal drugs - polyenes and azoles, affecting the main component of the fungal membrane - ergosterol, do not provide proper selectivity of action. They are very toxic, moreover, many strains of pathogens become resistant to drugs of the azole group. To date, the mechanisms that ensure the antimicrobial effect of drugs can be summarized as follows: 1) the effect on the synthesis of nucleic acids and proteins, 2) the effect on the formation of mucopeptides, which disrupts the construction of a new cell wall, 3) damage to the plasma membrane of microbes (JMFostel , PALartey, Drug Disc. Today, 2000, 5, 25). Based on this, the rational approaches to the search for antifungal agents include the synthesis of heterocyclic compounds - in particular, analogues of nucleic acid bases containing fragments containing sulfur as functional groups. These groups are capable of interacting with endogenous nucleophiles, such as proteins, amino acids, glycosidic fragments, thiols, create disulfide bridges and generally actively participate in the formation of new covalent and weak (H-bonds, dipole-dipole bonds, etc.) bonds with endogenous systems .
Задача настоящего изобретения состояла в изыскании новых производных гетероциклических соединений, которые бы обладали высокой активностью в отношении грибковых инфекций, в том числе к штаммам, резистентным к существующим в настоящее время лекарственным препаратам (N.Berila, J.Subik. Epidemiol Mikrobiol Imunol. 2010, 59(2), 67-79; R. Di Santo, Nat. Prod. Rep., 2010, 27(7), 1084-98; R. Musiol, M.Serda, S.Hensel-Bielowka, J.Polanski. Curr. Med. Chem. 2010, 17(18), 1960-73)The objective of the present invention was to find new derivatives of heterocyclic compounds that would have high activity against fungal infections, including strains resistant to currently existing drugs (N. Berila, J. Subik. Epidemiol Mikrobiol Imunol. 2010, 59 (2), 67-79; R. Di Santo, Nat. Prod. Rep., 2010, 27 (7), 1084-98; R. Musiol, M. Serda, S. Hensel-Bielowka, J. Polanski. Curr. Med. Chem. 2010, 17 (18), 1960-73)
Результатом решения данной задачи явился синтез серии производных 4-родано-5-нитропиримидинов и 2-родано-3-нитропиридинов, содержащих в своем составе ортонитротиоцианатный фрагмент. Была исследована их активность в отношении патогенных грибковых инфекций с целью создания на их основе нового противогрибкового препарата.The result of solving this problem was the synthesis of a series of derivatives of 4-rhodo-5-nitropyrimidines and 2-rhodano-3-nitropyridines containing an orthonitrothiocyanate fragment. Their activity against pathogenic fungal infections was investigated in order to create a new antifungal drug based on them.
Согласно изобретению предлагаются новые соединения общей формулы (I):According to the invention, new compounds of the general formula (I) are provided:
где X=N или C-R3;where X = N or CR 3 ;
R1 означает протон, насыщенный или не насыщенный линейный алкокси радикал, имеющий 2-5 атомов углерода; циклоалкилокси радикал, имеющий до 6 атомов углерода; насыщенный линейный алкилмеркапто радикал, имеющий 1-3 атомов углерода; амино радикал, имеющий 1-10 атомов углерода, выбранный из насыщенного или не насыщенного линейного моно- или диалкиламино радикала или циклоалкиламино радикала, циклического амино радикала, при этом каждая из циклических групп может быть замещена 1-2 метильными группами; или бензиламиногруппу;R 1 means a proton, a saturated or unsaturated linear alkoxy radical having 2-5 carbon atoms; cycloalkyloxy radical having up to 6 carbon atoms; a saturated linear alkyl mercapto radical having 1 to 3 carbon atoms; an amino radical having 1-10 carbon atoms selected from a saturated or unsaturated linear mono- or dialkylamino radical or cycloalkylamino radical, a cyclic amino radical, wherein each of the cyclic groups may be substituted with 1-2 methyl groups; or a benzylamino group;
R2 означает протон, насыщенный или не насыщенный, линейный алкилрадикал, имеющий 1-5 атомов углерода, или циклический алифатический радикал, имеющий до 6 атомов углерода, трифторметил, стирил или метилмеркаптогруппу;R 2 means a proton, saturated or unsaturated, a linear alkyl radical having 1-5 carbon atoms, or a cyclic aliphatic radical having up to 6 carbon atoms, trifluoromethyl, styryl or methyl mercapto group;
R3 означает трифторметил, формил, ацетил, нитро, бензоил, цианогруппу или алкоксикарбонильный заместитель, имеющий 1-3 атомов углерода в алкоксигруппе,R 3 means trifluoromethyl, formyl, acetyl, nitro, benzoyl, a cyano group or an alkoxycarbonyl substituent having 1-3 carbon atoms in an alkoxy group,
за исключением следующих известных соединений 4-изопропил-амино-5-нитро-6-тиоцианопиримидин (Demina G.R. et al., PLoS One, 2009, 4(12), 8174), 4-азокано-5-нитро-6-тиоцианопиримидин (CA # 847188-01-6), 2-метилтио-4-метокси-5-нитро-6-тиоцианопиримидин (US 2007/0270433), 4-метокси-5-нитро-6-тиоцианопиримидин (RU 2312104 C1), 2-тиоцианато-3-нитропиридин (Ulrich H. Sci. Synth., 202, 11, 835), 4-тиоцианато-5-нитропиримидин и 2-этилмеркапто-4-тиоцианато-5-нитропиримидин (Takahashi Н., Torizo I. Che. Phar. Bull., 1958, 6, 334) и 3,5-динитро-2-тиоцианопиридин (Talik Z., Plazek E. Bulletin de'Academie Polonaise des Sciences, Serie des Sciences Chimiques, 1960, 8(5), 219).with the exception of the following known compounds 4-isopropyl-amino-5-nitro-6-thiocyanopyrimidine (Demina GR et al., PLoS One, 2009, 4 (12), 8174), 4-azocano-5-nitro-6-thiocyanopyrimidine ( CA # 847188-01-6), 2-methylthio-4-methoxy-5-nitro-6-thiocyanopyrimidine (US 2007/0270433), 4-methoxy-5-nitro-6-thiocyanopyrimidine (RU 2312104 C1), 2- thiocyanato-3-nitropyridine (Ulrich H. Sci. Synth., 202, 11, 835), 4-thiocyanato-5-nitropyrimidine and 2-ethyl mercapto-4-thiocyanato-5-nitropyrimidine (Takahashi N., Torizo I. Che. Phar. Bull., 1958, 6, 334) and 3,5-dinitro-2-thiocyanopyridine (Talik Z., Plazek E. Bulletin de'Academie Polonaise des Sciences, Serie des Sciences Chimiques, 1960, 8 (5), 219 )
Соединения, представленные общей формулой (I), способны образовывать аддитивные соли с кислотами. Соли с фармацевтически активными нетоксичными кислотами могут быть образованы обработкой соединения в виде оснований, представленных общей формулой (I), подходящими кислотами, выбранными из неорганических кислот, например: галоидводородной кислотой, хлористоводородной кислотой, бромистоводородной кислотой, серной кислотой, азотной или фосфорной кислотами; органических кислот, например: уксусной кислотой, гидроксиуксусной кислотой, пропионовой кислотой, молочной кислотой, пировиноградной кислотой, щавелевой кислотой, малоновой кислотой, малеиновой и фумаровой кислотами, яблочной, винной или лимонной кислотами.The compounds represented by general formula (I) are capable of forming acid addition salts. Salts with pharmaceutically active non-toxic acids can be formed by treating the compound in the form of bases represented by the general formula (I) with suitable acids selected from inorganic acids, for example: hydrohalic acid, hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric or phosphoric acids; organic acids, for example: acetic acid, hydroxyacetic acid, propionic acid, lactic acid, pyruvic acid, oxalic acid, malonic acid, maleic and fumaric acids, malic, tartaric or citric acids.
Соединения, представленные общей формулой (I), содержащие кислые протоны, могут также быть преобразованы в их фармацевтически активные аддитивные солевые формы с основаниями путем обработки подходящими органическими и неорганическими основаниями. Подходящие солевые формы включают, например, соли аммония, соли щелочных и щелочноземельных металлов, в частности соли натрия, калия, магния и кальция, соли с органическими основаниями, например гуанидином, триэтиламином, и соли с аминокислотами, например с аргинином или лизином.The compounds represented by the general formula (I) containing acidic protons can also be converted to their pharmaceutically active base addition salt forms by treatment with suitable organic and inorganic bases. Suitable salt forms include, for example, ammonium salts, alkali and alkaline earth metal salts, in particular sodium, potassium, magnesium and calcium salts, salts with organic bases, for example guanidine, triethylamine, and salts with amino acids, for example with arginine or lysine.
Используемый в рамках данного изобретения термин «аддитивная соль» включает различные сольваты, которые способны образовывать соединения общей формулой (I). Соединения могут в аморфном виде или в виде кристаллов.As used herein, the term “addition salt” includes various solvates that are capable of forming compounds of general formula (I). The compounds may be in amorphous form or in the form of crystals.
Изобретение также относится к применению соединений общей формулы (I)The invention also relates to the use of compounds of the general formula (I)
где значения X, R1, R2 указаны выше, включая известные соединения, указанные в дисклейме, или их фармацевтически приемлемых аддитивных солей с кислотой или основанием, возможно в кристаллическом виде, для получения фармацевтических композиций, обладающих активностью в отношении штаммов грибов, возбудителей грибковых инфекций, в том числе к штаммам, резистентным к существующим в настоящее время лекарственным препаратам.where the values of X, R 1 , R 2 are listed above, including the known compounds indicated in the disclaimer, or their pharmaceutically acceptable addition salts with an acid or base, possibly in crystalline form, to obtain pharmaceutical compositions having activity against fungal strains, fungal pathogens infections, including strains resistant to currently existing drugs.
Ранее не было известно использование известных соединений, указанных в дисклейме, по указанному назначению.Previously, the use of known compounds indicated in the disclaimer for the indicated purpose was not known.
Изобретение также относится к фармацевтической композиции, обладающей противогрибковой активностью, которая содержит в качестве активного компонента соединение общей формулы (I) или его фармацевтически приемлемую аддитивную соль с кислотой или основанием в фармакологически эффективном количестве, а также фармацевтически приемлемый носитель и вспомогательные добавки.The invention also relates to a pharmaceutical composition having antifungal activity, which contains, as an active component, a compound of general formula (I) or a pharmaceutically acceptable addition salt thereof with an acid or base in a pharmacologically effective amount, as well as a pharmaceutically acceptable carrier and excipients.
Фармацевтическая композиция может быть выполнена в форме, пригодной для энтерального, парентерального, ректального, вагинального введения, включая трансбукальные и сублингвальные формы введения, в форме, пригодной для инъекции. Примерами таких форм могут быть таблетки, капсулы, свечи, инъекции, помещенные в упаковку.The pharmaceutical composition may be in a form suitable for enteral, parenteral, rectal, vaginal administration, including trans buccal and sublingual administration forms, in a form suitable for injection. Examples of such forms may be tablets, capsules, suppositories, injections placed in a package.
Таким образом, изобретение может относиться к применению соединений настоящего изобретения, возможно в кристаллическом виде, или их фармацевтически приемлемых аддитивных солей с кислотами или основаниями или фармацевтической композиции для приготовления лекарственного средства для лечения и предупреждения грибковых инфекций.Thus, the invention may relate to the use of the compounds of the present invention, possibly in crystalline form, or their pharmaceutically acceptable acid or base addition salts or pharmaceutical composition for the preparation of a medicament for the treatment and prevention of fungal infections.
Изобретение также относится к применению соединений настоящего изобретения или их фармацевтически приемлемых аддитивных солей с кислотами или основаниями или фармацевтической композиции в эффективном количестве для лечения и предупреждения грибковых инфекций у людей и животных.The invention also relates to the use of the compounds of the present invention or their pharmaceutically acceptable acid or base addition salts or a pharmaceutical composition in an effective amount for the treatment and prevention of fungal infections in humans and animals.
Объектом изобретения является способ лечения или предупреждения грибковой инфекции у человека или животного, включающий введение или нанесение субъекту, который нуждается в указанном лечении, эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой аддитивной соли с кислотой или основанием или фармацевтической композиции в эффективном количестве.An object of the invention is a method of treating or preventing a fungal infection in a human or animal, comprising administering or administering to a subject in need of said treatment an effective amount of a compound or a pharmaceutically acceptable addition salt thereof with an acid or base or a pharmaceutical composition in an effective amount.
Термин «эффективное количество» означает количество активного ингредиента, которое при введении пациентам обеспечивает предупреждение, ослабление или устранение симптомов заболеваний, подлежащих профилактике или лечению.The term "effective amount" means an amount of an active ingredient that, when administered to patients, provides the prevention, amelioration, or elimination of symptoms of diseases to be prevented or treated.
Соединения или их фармацевтически приемлемые соли, фармацевтическая композиция на их основе в виде таблеток, капсул, инъекций, свечей и других готовых форм (см. ниже), могут быть использованы для лечения и предупреждения заболеваний или расстройств у людей и животных, вызванных штаммами возбудителей грибковых инфекций (микозов), в том числе резистентных к существующим в настоящее время лекарственным препаратам.The compounds or their pharmaceutically acceptable salts, a pharmaceutical composition based on them in the form of tablets, capsules, injections, suppositories and other formulations (see below), can be used to treat and prevent diseases or disorders in humans and animals caused by strains of fungal pathogens infections (mycoses), including those that are resistant to currently existing drugs.
Введение соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемой соли, фармацевтической композиции или лекарственного средства на их основе при лечении или профилактике людей или животных может осуществляться обычными методами, в том числе:The administration of the compounds of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof, pharmaceutical composition or a medicine based on them in the treatment or prophylaxis of humans or animals can be carried out by conventional methods, including:
- энтеральной формой введения, например, в форме таблеток, гранул, драже, шариков, порошков, капсул, суспензий, сиропов, эмульсий, ректальных свечей, включая трансбукальные и сублингвальные формы введения и др.;- an enteral administration form, for example, in the form of tablets, granules, dragees, spheres, powders, capsules, suspensions, syrups, emulsions, rectal suppositories, including transbuccal and sublingual administration forms, etc .;
- парентеральной формой введения в виде инъекционной формы введения, например, в форме растворов, эмульсий, суспензий, порошков и таблеток для получения растворов и имплантаций, лиофилизированных препаратов, вводимых в организм парентерально (подкожно, внутримышечно, внутривенно, внутриартериально, в различные полости) и др.; в виде неинъекционных форм введения, например, в форме суппозиториев для вагинального введения, аэрозоля, спрея, гелей, суспензий, эмульсий, линиментов, растворов, капель, пластырей, присыпок, порошков, пудр, примочек и др.- parenteral administration in the form of an injectable administration, for example, in the form of solutions, emulsions, suspensions, powders and tablets to obtain solutions and implants, lyophilized drugs administered parenterally (subcutaneously, intramuscularly, intravenously, intraarterially, into various cavities) and others; in the form of non-injection forms of administration, for example, in the form of suppositories for vaginal administration, aerosol, spray, gels, suspensions, emulsions, liniments, solutions, drops, plasters, powders, powders, powders, lotions, etc.
В качестве фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ в составе фармацевтической композиции согласно изобретению могут быть использованы любые фармацевтически приемлемые компоненты, которые совместимы с активным ингредиентом и не наносят вреда пациентам, традиционно используемые для приготовления лекарственных форм, например наполнители, связующие агенты, гранулирующие агенты, солюбилизирующие агенты, средства для скольжения, стабилизаторы, разбавители, адъюванты, консерванты, компоненты буферных систем, растворители, диспергирующие агенты, консерванты, смазывающие агенты, вкусовые добавки, загустители, пищевые красители, эмульгаторы, регуляторы пролонгированной доставки и др.As pharmaceutically acceptable excipients in the pharmaceutical composition according to the invention, any pharmaceutically acceptable components that are compatible with the active ingredient and do not harm patients, traditionally used for the preparation of dosage forms, for example fillers, binding agents, granulating agents, solubilizing agents, can be used. glidants, stabilizers, diluents, adjuvants, preservatives, components of buffer systems, solvents, di dispersing agents, preservatives, lubricants, flavoring agents, thickeners, food colors, emulsifiers, delayed delivery regulators, etc.
Фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами являются, например, лактоза, инозит, глюкоза, маннит, декстран, циклодекстрин, сорбит, крахмал и его модификации, сахароза, алюмосиликат магния, синтетический алюмосиликат, кристаллическая целлюлоза, карбоксиметилцеллюлоза натрия, гидроксипропилированный крахмал, карбоксиметилцеллюлоза кальция, ионообменные смолы, метилцеллюлоза, желатин, гуммиарабик, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, альгиновая кислота, альгинат натрия, безводная кремниевая кислота, стеарат магния, тальк, карбоксивиниловый полимер, оксид титана, эфир жирной кислоты и сорбита, натрия лаурилсульфат, глицерин, глицериновый эфир жирной кислоты, ланолин, глицерожелатин, полисорбат, макроголь, растительное масло, воск, парафины, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, вода, этанол, полиспирты, полиоксиэтиленгидрированное касторовое масло, хлорид натрия, гидроксид натрия, соляная кислота, двухосновный фосфат натрия, моноосновный фосфат натрия, лимонная кислота, глутаминовая кислота, бензиловый спирт, метил п-оксибензоат, этил п-оксибензоат и др.Pharmaceutically acceptable excipients are, for example, lactose, inositol, glucose, mannitol, dextran, cyclodextrin, sorbitol, starch and its modifications, sucrose, magnesium aluminosilicate, synthetic aluminosilicate, crystalline cellulose, sodium carboxymethyl cellulose, hydroxypropylated starch, carboxymethyl cellulose ion exchange methyl cellulose, gelatin, gum arabic, hydroxypropyl cellulose, hydroxypropyl methyl cellulose, polyvinyl pyrrolidone, polyvinyl alcohol, alginic acid, algin t of sodium, anhydrous silicic acid, magnesium stearate, talc, carboxyvinyl polymer, titanium oxide, fatty acid ester of sorbitol, sodium lauryl sulfate, glycerin, glycerol fatty acid ester, lanolin, glycerol gelatin, polysorbate, macrogol, vegetable oil, propylene glycol, wax, para , polyethylene glycol, water, ethanol, polyalcohols, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, sodium chloride, sodium hydroxide, hydrochloric acid, dibasic sodium phosphate, monobasic sodium phosphate, citric acid, glutamic acid, benz silt alcohol, methyl p-hydroxybenzoate, ethyl p-hydroxybenzoate, etc.
Фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами при получении фармацевтической композиции в форме суппозиториев являются, например, природные или отвержденные масла, например масло какао, воска, жиры, эфир глицерина и насыщенной жирной кислоты, глицерожелатин, макрогол, полужидкие или жидкие полиолы, триглицериды и др. Основа суппозиториев может включать также поверхностно-активное вещество или стабилизатор.Pharmaceutically acceptable excipients in the preparation of a pharmaceutical composition in the form of suppositories are, for example, natural or hardened oils, for example cocoa butter, waxes, fats, glycerol and saturated fatty acid esters, glycerogelatin, macrogol, semi-liquid or liquid polyols, triglycerides, etc. The suppository base may also include a surfactant or stabilizer.
Композиция по изобретению может содержать также такие компоненты; которые обеспечат быстрое продолжительное или замедленное высвобождение активного ингредиента после применения пациентами. Пролонгированное действие композиции может быть обеспечено с помощью агентов, замедляющих абсорбцию активного начала, например моностеарат алюминия и желатин.The composition of the invention may also contain such components; which will provide fast, sustained or delayed release of the active ingredient after use by patients. The prolonged action of the composition can be achieved using agents that slow down the absorption of the active principle, for example aluminum monostearate and gelatin.
Осуществление изобретенияThe implementation of the invention
Соединения по изобретению формулы (I) могут быть получены из соответствующего промежуточного соединения, содержащего подвижный атом галогена, по известной реакции нуклеофильного замещения, где в качестве нуклеофила выступает ион тиоцианата, и который может быть введен в реакцию в виде его натриевой, калиевой или аммониевой соли (схема 1). Реакция проходит в подходящем растворителе, например в низших спиртах, ацетоне, этилметилкетоне. Все радикалы имеют определения, как в формуле (I). Перемешивание может увеличить скорость реакции. Реакция может быть легко проведена при температуре в интервале от +10 до +100°С. Полученный продукт может быть очищен путем кристаллизации, например, из низших спиртов. При этом возможно получение различных кристаллических модификаций.The compounds of the invention of formula (I) can be obtained from the corresponding intermediate compound containing a mobile halogen atom, by the known nucleophilic substitution reaction, where the thiocyanate ion acts as the nucleophile, and which can be introduced into the reaction in the form of its sodium, potassium or ammonium salt (diagram 1). The reaction takes place in a suitable solvent, for example lower alcohols, acetone, ethyl methyl ketone. All radicals have definitions as in formula (I). Stirring may increase the reaction rate. The reaction can be easily carried out at a temperature in the range from +10 to + 100 ° C. The resulting product can be purified by crystallization, for example, from lower alcohols. In this case, it is possible to obtain various crystalline modifications.
Схема 1Scheme 1
Исходные и промежуточные соединения формулы (II) являются соединениями, которые либо коммерчески доступны, либо могут быть получены обычными широко известными методами, описанными в литературе.The starting and intermediate compounds of formula (II) are compounds that are either commercially available or can be obtained by conventional methods well known in the literature.
Ниже показаны примеры получения соединений по изобретению, которые не ограничивают рамки настоящего изобретения.The following are examples of the preparation of compounds of the invention that do not limit the scope of the present invention.
Пример 1.Example 1
4-Диметиламино-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 1)4-Dimethylamino-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 1)
Раствор 2 г (9 ммоль) 4,6-дихор-5-нитропиримидина (Girard F., Demaison С, Lee M.-G., Agrofoglio L. A. Tetrahedron, 54 (1998) 30, 8745-8952; Scharn Dirk, Germeroth Lothar, Schneider-Mergener Jens, Wenschuh Holger, J. Org. Chem., 66 (2001) N 2, 507-513) в 40 мл диоксана был обработан предварительно приготовленным раствором ацетата диметиламина, содержащего 2,9 мл водного 40% диметиламина (22 ммоль) и нейтрализованного уксусной кислотой до рН 7. Реакционную массу выдерживают 3 часа при комнатной температуре и медленно разбавляют 200 мл холодной воды. Выпавший осадок 4-диметиламино-5-нитро-6-хлорпиримидина отфильтровывают, промывают водой и используют на следующей стадии без дополнительной очистки.A solution of 2 g (9 mmol) of 4,6-dichor-5-nitropyrimidine (Girard F., Demaison C, Lee M.-G., Agrofoglio LA Tetrahedron, 54 (1998) 30, 8745-8952; Scharn Dirk, Germeroth Lothar , Schneider-Mergener Jens, Wenschuh Holger, J. Org. Chem., 66 (2001) N 2, 507-513) in 40 ml of dioxane was treated with a pre-prepared solution of dimethylamine acetate containing 2.9 ml of aqueous 40% dimethylamine (22 mmol) and neutralized with acetic acid to pH 7. The reaction mass is kept for 3 hours at room temperature and slowly diluted with 200 ml of cold water. The precipitated precipitate of 4-dimethylamino-5-nitro-6-chloropyrimidine is filtered off, washed with water and used in the next step without further purification.
Раствор 1,3 г (6,4 ммоль) 4-диметиламино-5-нитро-6-хлорпиримидина в 30 мл этанола был обработан 0,7 г (7 ммоль) тиоцианата калия при комнатной температуре. Реакционную массу кипятят в течении 4 часов, обрабатывают 0,1 г активированного угля и в горячем виде фильтруют. Фильтрат охлаждают и разбавляют 100 мл воды. Выпавший светло-желтый осадок 4-диметиламино-5-нитро-6-тиоцианатопиримидина (соединение 1) промывают холодной водой и перекристаллизовывают из этанола.A solution of 1.3 g (6.4 mmol) of 4-dimethylamino-5-nitro-6-chloropyrimidine in 30 ml of ethanol was treated with 0.7 g (7 mmol) of potassium thiocyanate at room temperature. The reaction mass is boiled for 4 hours, treated with 0.1 g of activated carbon and filtered hot. The filtrate is cooled and diluted with 100 ml of water. The precipitated light yellow precipitate of 4-dimethylamino-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 1) was washed with cold water and recrystallized from ethanol.
Выход: 78%.Yield: 78%.
Т пл.: 142-144°С (EtOH)Mp: 142-144 ° C (EtOH)
MS (m/z): 225 (М+)MS (m / z): 225 (M + )
lH NMR (DMSO-d6): δ 8.37 (1H, s, Н), 3.48 (6Н, s, N(CH3)) ppm l H NMR (DMSO-d 6 ): δ 8.37 (1H, s, H), 3.48 (6H, s, N (CH 3 )) ppm
Элементный анализ C7H7N5O2S:Elemental analysis of C 7 H 7 N 5 O 2 S:
Calc.: C, 37.33; Н, 3.13; N, 31.09Calc .: C, 37.33; H, 3.13; N, September 31
Found: С, 37.23; Н, 3.27; N, 29.97Found: C, 37.23; H, 3.27; N, 29.97
Пример 2.Example 2
4-Метиламино-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 2)4-methylamino-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 2)
Соединение 2 было синтезировано аналогично соединению 1, но с использованием в качестве амина 40% водного раствора метиламина.Compound 2 was synthesized analogously to compound 1, but using a 40% aqueous solution of methylamine as the amine.
Выход: 64%.Yield: 64%.
Т пл.: 187-189°С (EtOH)Mp: 187-189 ° C (EtOH)
MS (m/z): 211 (M+)MS (m / z): 211 (M + )
1H NMR (DMSO-d6): δ 13.03 (1H, broad s, NH), 8.22 (1H, s, H), 3.12 (3H, s, CH3) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 13.03 (1H, broad s, NH), 8.22 (1H, s, H), 3.12 (3H, s, CH 3 ) ppm
Элементный анализ C6H5C5O2S:Elemental analysis of C 6 H 5 C 5 O 2 S:
Calc.: С, 34.12; H, 2.39; N, 33.16Calc .: C, 34.12; H, 2.39; N, 33.16
Found: С, 34.31; H, 2.41; N, 33.15Found: C, 34.31; H, 2.41; N, 33.15
Пример 3.Example 3
4-Изопропиламино-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 3)4-Isopropylamino-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 3)
Соединение 3 было синтезировано по методу, описанному в Demina G.R. et al., PLoS One, 2009, 4(12), 8174, и его спектральные и аналитические характеристики соответствовали указанным в литературе.Compound 3 was synthesized according to the method described in Demina G.R. et al., PLoS One, 2009, 4 (12), 8174, and its spectral and analytical characteristics corresponded to those indicated in the literature.
Выход: 81%.Yield: 81%.
Т пл.: 151-153°С (EtOH)Mp: 151-153 ° C (EtOH)
MS (m/z): 239 (М+)MS (m / z): 239 (M + )
1H NMR (DMSO-d6): δ 13.16 (1Н, broad s, NH), 8.16 (1H, s, H), 4.86 (1H, m, CH), 1.37 (6H, s, 3CH3) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 13.16 (1H, broad s, NH), 8.16 (1H, s, H), 4.86 (1H, m, CH), 1.37 (6H, s, 3CH 3 ) ppm
Элементный анализ C6H5N5O2S:Elemental analysis of C 6 H 5 N 5 O 2 S:
Calc.: C, 40.16; H, 3.79; N, 29.27Calc .: C, 40.16; H, 3.79; N, 29.27
Found: C, 40.03; H, 3.88; N, 29.11Found: C, 40.03; H, 3.88; N, 11/29
Пример 4.Example 4
4-Гексагидрометиленимино-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 4)4-hexahydromethyleneimino-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 4)
Соединение 4 было синтезировано аналогично соединению 1, но с использованием в качестве амина приготовленного водного раствора гексагидрометиленимина.Compound 4 was synthesized analogously to compound 1, but using the prepared aqueous solution of hexahydromethyleneimine as an amine.
Выход: 48%.Yield: 48%.
Т пл.: 107-109°С (этилацетат)Mp: 107-109 ° C (ethyl acetate)
MS (m/z): 279 (М+)MS (m / z): 279 (M + )
1H NMR (DMSO-d6): δ 8.32 (1H, s, H), 3,85 (4H, m, N(CH2)2), 1.95 (4H, m, 2CH2), 1.57 (4H, m, CH2CH2) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 8.32 (1H, s, H), 3.85 (4H, m, N (CH 2 ) 2 ), 1.95 (4H, m, 2CH 2 ), 1.57 (4H, m, CH 2 CH 2 ) ppm
Элементный анализ C11H13N5O2S:Elemental analysis of C 11 H 13 N 5 O 2 S:
Calc.: C, 47.30; H, 4.69; N, 25.07Calc .: C, 47.30; H, 4.69; N, July 25
Found: C, 47.18; H, 4.53; N, 24.92Found: C, 47.18; H, 4.53; N, 24.92
Пример 5.Example 5
4-N-азокан-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 5)4-N-azocan-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 5)
Соединение 5 было синтезировано аналогично соединению 1, но с использованием в качестве амина приготовленного водного раствора азокана.Compound 5 was synthesized analogously to compound 1, but using the prepared azocane aqueous solution as an amine.
Выход: 76%.Yield: 76%.
Т пл.: 95-98°С (метанол)Mp: 95-98 ° C (methanol)
MS (m/z): 293 (М+)MS (m / z): 293 (M + )
1H NMR (DMSO-d6): δ 8.27 (1H, s, H), 3.91 (2H, broad s, N(CH2)2), 1.18-1.82 (10Н, broad m, 5CH2) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 8.27 (1H, s, H), 3.91 (2H, broad s, N (CH 2 ) 2 ), 1.18-1.82 (10H, broad m, 5CH 2 ) ppm
Элементный анализ C12H15N5O2S:Elemental analysis of C 12 H 15 N 5 O 2 S:
Calc.: С, 49.13; H, 5.15; N, 23.87Calc .: C, 49.13; H, 5.15; N, 23.87
Found: C, 49.01; H, 5.26; N, 23.94Found: C, 49.01; H, 5.26; N, 23.94
Пример 6.Example 6
4-(3,5-Диметилпиперидин-1-ил)-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 6)4- (3,5-Dimethylpiperidin-1-yl) -5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 6)
Соединение 6 было синтезировано аналогично соединению 1, но с использованием в качестве амина приготовленного водного раствора 3,5-диметилпиперидина.Compound 6 was synthesized analogously to compound 1, but using the prepared aqueous solution of 3,5-dimethylpiperidine as an amine.
Выход: 67%.Yield: 67%.
Т пл.: 123-125°С (метанол)Mp: 123-125 ° C (methanol)
MS (m/z): 293 (М+)MS (m / z): 293 (M + )
1Н NMR (DMSO-d6): δ 8.34 (1Н, s, Н), 3.97 и 3.02 (4Н, 2 broad m, N(CH2)2), 1.97 (2Н, m, 2СН), 1.21 (2Н, m, СН2), 0.88 (6Н, s, 2СН3) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 8.34 (1H, s, H), 3.97 and 3.02 (4H, 2 broad m, N (CH 2 ) 2 ), 1.97 (2H, m, 2CH), 1.21 (2H , m, CH 2 ), 0.88 (6H, s, 2CH 3 ) ppm
Элементный анализ C12H15N5O2S:Elemental analysis of C 12 H 15 N 5 O 2 S:
Calc.: С, 49.13; Н, 5.15; N, 23.87Calc .: C, 49.13; H, 5.15; N, 23.87
Found: С, 49.13; Н, 5.23; N, 23.97Found: C, 49.13; H, 5.23; N, 23.97
Пример 7.Example 7
4-(2-Метилпиперидин-1-ил)-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 6)4- (2-Methylpiperidin-1-yl) -5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 6)
Соединение 6 было синтезировано аналогично соединению 1, но с использованием в качестве амина приготовленного водного раствора 2-метилпиперидина.Compound 6 was synthesized analogously to compound 1, but using the prepared aqueous solution of 2-methylpiperidine as an amine.
Выход: 54%.Yield: 54%.
Т пл.: 158-160°С (этанол)Mp: 158-160 ° C (ethanol)
MS (m/z): 293 (М+)MS (m / z): 293 (M + )
1Н NMR (DMSO-d6): δ 8.21 (1Н, s, Н), 3,65 и 1,70 (9Н, two broad m, СН(СН2)4), 1.33 (3Н, s, СН3) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 8.21 (1H, s, H), 3.65 and 1.70 (9H, two broad m, CH (CH 2 ) 4 ), 1.33 (3H, s, CH 3 ) ppm
Элементный анализ C11H13N5O2S:Elemental analysis of C 11 H 13 N 5 O 2 S:
Calc.: С, 47.30; Н, 4.69; N, 25.07Calc .: C, 47.30; H, 4.69; N, July 25
Found: С, 47.11; Н, 4.54; N, 25.12Found: C, 47.11; H, 4.54; N, 12/25
Пример 8.Example 8
4-Диэтиламино-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 8)4-Diethylamino-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 8)
Соединение 8 было синтезировано аналогично соединению 1, но с использованием в качестве амина готового 40% водного раствора диэтиламина.Compound 8 was synthesized analogously to compound 1, but using a prepared 40% aqueous diethylamine solution as an amine.
Выход: 74%.Yield: 74%.
Т пл.: 114-116°С (метанол)Mp: 114-116 ° C (methanol)
MS (m/z): 253 (М+)MS (m / z): 253 (M + )
1Н NMR (DMSO-d6): δ 8.31 (1Н, s, Н), 3.46 (4Н, m, 2СН2), 1.01 (6Н, m, 2СН3) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 8.31 (1H, s, H), 3.46 (4H, m, 2CH 2 ), 1.01 (6H, m, 2CH 3 ) ppm
Элементный анализ C9H11N5O2S:Elemental analysis of C 9 H 11 N 5 O 2 S:
Calc.: С, 42.68; H, 4.38; N, 27.65Calc .: C, 42.68; H, 4.38; N, 27.65
Found: С, 42.60; H, 4.33; N, 27.74Found: C, 42.60; H, 4.33; N, 27.74
Пример 9.Example 9
4-N-Бензиламино-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 9)4-N-Benzylamino-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 9)
Соединение 9 было синтезировано аналогично соединению 1, но с использованием в качестве амина приготовленного водного раствора бензиламина.Compound 9 was synthesized analogously to compound 1, but using the prepared aqueous solution of benzylamine as an amine.
Выход: 43%.Yield: 43%.
Т пл.: 144-146°С (изопропанол)Mp: 144-146 ° C (isopropanol)
MS (m/z): 287 (М+)MS (m / z): 287 (M + )
1Н NMR (DMSO-d6): δ 8.38 (1Н, s, Н), 7.38-7.25 (5Н, m, Ph), 4.41 (2Н, s, СН2) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 8.38 (1H, s, H), 7.38-7.25 (5H, m, Ph), 4.41 (2H, s, CH 2 ) ppm
Элементный анализ C12H9N5O2S:Elemental analysis of C 12 H 9 N 5 O 2 S:
Calc.: С, 50.17; Н, 3.16; N, 24.38Calc .: C, 50.17; H, 3.16; N, 24.38
Found: С, 50.29; Н, 3.24; N, 24.29Found: C, 50.29; H, 3.24; N, 24.29
Пример 10.Example 10
4-(N-бензил-N-метиламино)-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 10)4- (N-benzyl-N-methylamino) -5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 10)
Соединение 10 было синтезировано аналогично соединению 1, но с использованием в качестве амина приготовленного водного раствора N-метил-N-бензиламина.Compound 10 was synthesized analogously to compound 1, but using the prepared aqueous solution of N-methyl-N-benzylamine as an amine.
Выход: 46%.Yield: 46%.
Т пл.: 127-129°С (этанол)Mp: 127-129 ° C (ethanol)
MS (m/z): 301 (М+)MS (m / z): 301 (M + )
1Н NMR (DMSO-d6): δ 8.31 (1Н, s, Н), 7.4-7.20 (5Н, m, Ph), 4.34 (2Н, s, CH2), 3.15 (3H, s, СН3) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 8.31 (1H, s, H), 7.4-7.20 (5H, m, Ph), 4.34 (2H, s, CH 2 ), 3.15 (3H, s, CH 3 ) ppm
Элементный анализ C13H11N5O2S:Elemental analysis of C 13 H 11 N 5 O 2 S:
Calc.: С, 51.82; Н, 3.68; N, 23.24Calc .: C, 51.82; H, 3.68; N, 23.24
Found: С, 51.76; H, 3.57; N, 23.19Found: C, 51.76; H, 3.57; N, 23.19
Пример 11.Example 11
4-N-метилциклогексиламино-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 11)4-N-methylcyclohexylamino-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 11)
Соединение 11 было синтезировано аналогично соединению 1, но с использованием в качестве амина приготовленного водного раствора N-метилциклогексиламина.Compound 11 was synthesized analogously to compound 1, but using the prepared aqueous solution of N-methylcyclohexylamine as the amine.
Выход: 34%.Yield: 34%.
Т пл.: 112-114°С (этанол)Mp: 112-114 ° C (ethanol)
MS (m/z): 293 (М+)MS (m / z): 293 (M + )
lH NMR (DMSO-d6): δ 8.32 (1H, s, CH), 3.64 (1H, m, CH), 3.12 (3H, s, CH3), 2.0-1.0 (10H, broad m, 5CH2) ppm l H NMR (DMSO-d 6 ): δ 8.32 (1H, s, CH), 3.64 (1H, m, CH), 3.12 (3H, s, CH 3 ), 2.0-1.0 (10H, broad m, 5CH 2 ) ppm
Элементный анализ C12H15N5O2S:Elemental analysis of C 12 H 15 N 5 O 2 S:
Calc.: С, 49.13; H, 5.15; N, 23.87Calc .: C, 49.13; H, 5.15; N, 23.87
Found: С, 49.17; H, 5.08; N, 23.84Found: C, 49.17; H, 5.08; N, 23.84
Пример 12.Example 12
Раствор 3,8 г (16,8 ммоль) 4,6-дихор-2-метил-5-нитропиримидина (Hurst Derek Т., J. Heterocycl. Chem., 32, 1995, 697-699) в 40 мл диоксана был обработан предварительно приготовленным раствором ацетата диметиламина, содержащего 5,1 мл водного 40% диметиламина (42 ммоль) и нейтрализованного уксусной кислотой до рН 7, при температуре реакционной массы не выше 15°С. Реакционную массу выдерживают 3 часа при комнатной температуре и медленно разбавляют 200 мл холодной воды. Выпавший осадок 4-диметиламино-2-метил-5-нитро-6-хлорпиримидина отфильтровывают, промывают водой и используют на следующей стадии без дополнительной очистки.A solution of 3.8 g (16.8 mmol) of 4,6-dichor-2-methyl-5-nitropyrimidine (Hurst Derek T., J. Heterocycl. Chem., 32, 1995, 697-699) in 40 ml of dioxane was treated with a pre-prepared solution of dimethylamine acetate containing 5.1 ml of aqueous 40% dimethylamine (42 mmol) and neutralized with acetic acid to pH 7, at a temperature of the reaction mass not higher than 15 ° C. The reaction mass is kept for 3 hours at room temperature and slowly diluted with 200 ml of cold water. The precipitated precipitate of 4-dimethylamino-2-methyl-5-nitro-6-chloropyrimidine is filtered off, washed with water and used in the next step without further purification.
Раствор 2,7 г (12,5 ммоль) 4-диметиламино-2-метил-5-нитро-6-хлорпиримидина в 30 мл этанола был обработан 1,3 г (13 ммоль) тиоцианата калия при комнатной температуре. Реакционную массу кипятят в течение 4 часов, обрабатывают 0,1 г активированного угля и в горячем виде фильтруют. Фильтрат охлаждают и разбавляют 100 мл воды. Выпавший светло-желтый осадок 4-диметиламино-2-метил-5-нитро-6-тиоцианатопиримидина (соединение 12) промывают холодной водой и перекристаллизовывают из этанола.A solution of 2.7 g (12.5 mmol) of 4-dimethylamino-2-methyl-5-nitro-6-chloropyrimidine in 30 ml of ethanol was treated with 1.3 g (13 mmol) of potassium thiocyanate at room temperature. The reaction mass is boiled for 4 hours, treated with 0.1 g of activated carbon and filtered while hot. The filtrate is cooled and diluted with 100 ml of water. The precipitated light yellow precipitate of 4-dimethylamino-2-methyl-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 12) was washed with cold water and recrystallized from ethanol.
Выход: 86%.Yield: 86%.
Т пл.: 159-161°С (этанол)Mp: 159-161 ° C (ethanol)
MS (m/z): 239 (М+)MS (m / z): 239 (M + )
1Н NMR (DMSO-d6): δ 3.48 (6Н, s, 2СН3), 2.36 (3Н, s, СН3) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 3.48 (6H, s, 2CH 3 ), 2.36 (3H, s, CH 3 ) ppm
Элементный анализ C8H9N5O2S:Elemental analysis of C 8 H 9 N 5 O 2 S:
Calc.: С, 40.16; Н, 3.79; N, 29.27Calc .: C, 40.16; H, 3.79; N, 29.27
Found: С, 40.26; Н, 3.88; N, 29.34Found: C, 40.26; H, 3.88; N, 29.34
Пример 13.Example 13
4-Амино-2-метил-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 13)4-amino-2-methyl-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 13)
Соединение 13 было синтезировано аналогично соединению 12, но с использованием в качестве амина готового 25% водного раствора аммиака.Compound 13 was synthesized analogously to compound 12, but using a prepared 25% aqueous ammonia solution as an amine.
Выход: 39%.Yield: 39%.
Т пл.: 209-212°С (этанол)Mp: 209-212 ° C (ethanol)
MS (m/z): 211 (М+)MS (m / z): 211 (M + )
1Н NMR (DMSO-d6): δ 8.19 (2Н, broad s, NH2), 2.43 (3Н, s, СН3) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 8.19 (2H, broad s, NH 2 ), 2.43 (3H, s, CH 3 ) ppm
Элементный анализ C6H5N5O2S:Elemental analysis of C 6 H 5 N 5 O 2 S:
Calc.: С, 34.12; Н, 2.39; N 33.16Calc .: C, 34.12; H, 2.39; N 33.16
Found: С, 34.25; Н, 2.47; N, 33.04Found: C, 34.25; H, 2.47; N, 33.04
Пример 14.Example 14
4-Метиламино-2-метил-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 14)4-Methylamino-2-methyl-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 14)
Соединение 14 было синтезировано аналогично соединению 12, но с использованием в качестве амина готового 40% водного раствора метиламина.Compound 14 was synthesized analogously to compound 12, but using a prepared 40% aqueous methylamine solution as an amine.
Выход: 76%.Yield: 76%.
Т пл.: 200-202°С (метанол)Mp: 200-202 ° C (methanol)
MS (m/z): 225 (М+)MS (m / z): 225 (M + )
1Н NMR (DMSO-d6): δ 3.12 (3Н, s, СН3), 2.35 (3Н, s, СН3) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 3.12 (3H, s, CH 3 ), 2.35 (3H, s, CH 3 ) ppm
Элементный анализ C6H5N5O2S:Elemental analysis of C 6 H 5 N 5 O 2 S:
Calc.: С, 37.33; Н, 3.13; N, 31.09Calc .: C, 37.33; H, 3.13; N, September 31
Found: С, 37.21; Н, 3.27; N, 31.22Found: C, 37.21; H, 3.27; N, 31.22
Пример 15.Example 15
4-Пирролидино-2-метил-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 15)4-pyrrolidino-2-methyl-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 15)
Соединение 15 было синтезировано аналогично соединению 12, но с использованием в качестве амина приготовленного водного раствора пирролидина.Compound 15 was synthesized analogously to compound 12, but using the prepared aqueous pyrrolidine solution as an amine.
Выход: 68%.Yield: 68%.
Т пл.: 142-144°С (метанол)Mp: 142-144 ° C (methanol)
MS (m/z): 265 (М+)MS (m / z): 265 (M + )
1H NMR (DMSO-d6): δ 3.50 (4Н, m, N(CH2)2), 2.41 (3Н, s, СН3), 1.91 (4Н, m, СН2СН2) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 3.50 (4H, m, N (CH 2 ) 2 ), 2.41 (3H, s, CH 3 ), 1.91 (4H, m, CH 2 CH 2 ) ppm
Элементный анализ C10H11N5O2S:Elemental analysis of C 10 H 11 N 5 O 2 S:
Calc.: С, 45.27; Н, 4.18; N, 26.40Calc .: C, 45.27; H, 4.18; N, 26.40
Found: С, 45.29; Н, 4.34; N, 26.43Found: C, 45.29; H, 4.34; N, 26.43
Пример 16.Example 16
4-Диэтиламино-2-метил-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 16)4-Diethylamino-2-methyl-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 16)
Соединение 16 было синтезировано аналогично соединению 12, но с использованием в качестве амина готового 40% водного раствора диэтиламина.Compound 16 was synthesized analogously to compound 12, but using a prepared 40% aqueous diethylamine solution as an amine.
Выход: 53%.Yield: 53%.
Т пл.: 69-70°С (метанол)Mp: 69-70 ° C (methanol)
MS (m/z): 267 (М+)MS (m / z): 267 (M + )
1Н NMR (DMSO-d6): δ 3.44 (4Н, m, N(CH2)2), 2.56 (3Н, s, СН3), 1.10 (6Н, m, 2СН3) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 3.44 (4H, m, N (CH 2 ) 2 ), 2.56 (3H, s, CH 3 ), 1.10 (6H, m, 2CH 3 ) ppm
Элементный анализ C10H11N5O2S:Elemental analysis of C 10 H 11 N 5 O 2 S:
Calc.: С, 44.93; Н, 4.90; N, 26.20Calc .: C, 44.93; H, 4.90; N, 26.20
Found: С, 45.08; Н, 4.93; N, 26.32Found: C, 45.08; H, 4.93; N, 26.32
Пример 17.Example 17
Раствор 4,0 г (19,2 ммоль) 4,6-дихор-2-метил-5-нитропиримидина (Hurst Derek Т., J. Heterocycl. Chem., 32, 1995, 697-699) в 40 мл безводного этанола был обработан 20 мл предварительно приготовленного раствора этилата натрия (из 0,4 г (19,2 ммоль) металлического натрия и 20 мл безводного этанола) при температуре реакционной массы не выше 0°С. После прибавления всего объема метилата натрия реакционную массу выдерживают 2 часа при комнатной температуре и медленно разбавляют 200 мл холодной воды. Выпавший осадок 4-этокси-2-метил-5-нитро-6-хлорпиримидина отфильтровывают, промывают водой и перекристаллизовывают из бензола.A solution of 4.0 g (19.2 mmol) of 4,6-dichor-2-methyl-5-nitropyrimidine (Hurst Derek T., J. Heterocycl. Chem., 32, 1995, 697-699) in 40 ml of anhydrous ethanol 20 ml of a previously prepared solution of sodium ethylate (from 0.4 g (19.2 mmol) of sodium metal and 20 ml of anhydrous ethanol) were treated at a temperature of the reaction mass not higher than 0 ° C. After adding the entire volume of sodium methylate, the reaction mass is kept for 2 hours at room temperature and slowly diluted with 200 ml of cold water. The precipitate of 4-ethoxy-2-methyl-5-nitro-6-chloropyrimidine was filtered off, washed with water and recrystallized from benzene.
Раствор 3,2 г (14,7 ммоль) 4-этокси-2-метил-5-нитро-6-хлорпиримидина в 30 мл этанола был обработан 1,5 г (15 ммоль) тиоцианата калия при комнатной температуре. Реакционную массу кипятят в течение 4 часов, обрабатывают 0,1 г активированного угля и в горячем виде фильтруют. Фильтрат охлаждают и разбавляют 100 мл воды. Выпавший белый осадок 4-этокси-2-метил-5-нитро-6-тиоцианатопиримидина (соединение 17) промывают холодной водой и перекристаллизовывают из этанола.A solution of 3.2 g (14.7 mmol) of 4-ethoxy-2-methyl-5-nitro-6-chloropyrimidine in 30 ml of ethanol was treated with 1.5 g (15 mmol) of potassium thiocyanate at room temperature. The reaction mass is boiled for 4 hours, treated with 0.1 g of activated carbon and filtered while hot. The filtrate is cooled and diluted with 100 ml of water. The white precipitate of 4-ethoxy-2-methyl-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 17) was washed with cold water and recrystallized from ethanol.
Выход: 42%.Yield: 42%.
Т пл.: 60-62°С (этанол)Mp: 60-62 ° C (ethanol)
MS (m/z): 240 (М+)MS (m / z): 240 (M + )
1Н NMR (DMSO-d6): δ 4.64 (2Н, q, СН2), 2.66 (3Н, s, СН3), 1.43 (3Н, t, СН3) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 4.64 (2H, q, CH 2 ), 2.66 (3H, s, CH 3 ), 1.43 (3H, t, CH 3 ) ppm
Элементный анализ C8H8N4O3S:Elemental analysis of C 8 H 8 N 4 O 3 S:
Calc.: С, 40.00; Н, 3.36; N, 23.32Calc .: C, 40.00; H, 3.36; N, 23.32
Found: С, 39.93; Н, 3.46; N, 23.31Found: C, 39.93; H, 3.46; N, 23.31
Пример 18.Example 18
4-Пропокси-2-метил-5-нитро-6-тиоцианатопиримидин (соединение 18)4-Propoxy-2-methyl-5-nitro-6-thiocyanatopyrimidine (compound 18)
Соединение 18 было синтезировано аналогично соединению 17, но с использованием на всех этапах н-пропилового спирта взамен этанола.Compound 18 was synthesized analogously to compound 17, but using n-propyl alcohol at all stages instead of ethanol.
Выход: 26%.Yield: 26%.
Т пл.: 50-52°С (метанол)Mp: 50-52 ° C (methanol)
MS (m/z): 254 (М+)MS (m / z): 254 (M + )
1Н NMR (DMSO-d6): δ 4.32 (2Н, t, ОСН2), 2.58 (3Н, s, СН3), 1.77 (2Н, m, СН2), 1.17 (3Н, t, СН3) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 4.32 (2H, t, OCH 2 ), 2.58 (3H, s, CH 3 ), 1.77 (2H, m, CH 2 ), 1.17 (3H, t, CH 3 ) ppm
Элементный анализ C9H10N4O3S:Elemental analysis of C 9 H 10 N 4 O 3 S:
Calc.: С, 42.51; Н, 3.96; N, 23.03Calc .: C, 42.51; H, 3.96; N, 23.03
Found: С, 42.45; H, 3.89; N, 23.09Found: C, 42.45; H, 3.89; N, September 23
Пример 19.Example 19
3,5-Динитро-2-тиоцианатопиридин (соединение 18)3,5-dinitro-2-thiocyanatopyridine (compound 18)
Соединение 19 было получено по известной методике Talik Z., Plazek Е. Roczniki Chemii (1960), 34, 165-75 в соответствии со следующей процедурой: раствор 2,0 г (9,8 ммоль) коммерчески доступного 3,5-динитро-2-хлорпиридина в смеси 20 мл этанола и 20 мл ацетона был обработан 1,1 г (11 ммоль) тиоцианата калия при комнатной температуре. Реакционную массу кипятят в течение 8 часов, обрабатывают 0,1 г активированного угля и в горячем виде фильтруют. Фильтрат охлаждают и разбавляют 100 мл воды.Compound 19 was obtained according to the known method of Talik Z., Plazek E. Roczniki Chemii (1960), 34, 165-75 in accordance with the following procedure: a solution of 2.0 g (9.8 mmol) of commercially available 3,5-dinitro 2-chloropyridine in a mixture of 20 ml of ethanol and 20 ml of acetone was treated with 1.1 g (11 mmol) of potassium thiocyanate at room temperature. The reaction mass is boiled for 8 hours, treated with 0.1 g of activated carbon and filtered while hot. The filtrate is cooled and diluted with 100 ml of water.
Выход: 55%.Yield: 55%.
Т пл.: 160-62°С (этанол)Mp: 160-62 ° C (ethanol)
MS (m/z): 226 (М+)MS (m / z): 226 (M + )
1Н NMR (DMSO-d6): δ 9.42 и 9.15 (two 1H, two s, 2CH) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 9.42 and 9.15 (two 1H, two s, 2CH) ppm
Элементный анализ C8H8N4O3S:Elemental analysis of C 8 H 8 N 4 O 3 S:
Calc.: С, 31.86; H, 0.89; N, 24.77Calc .: C, 31.86; H, 0.89; N, 24.77
Found: C, 31.71; H, 1.01; N, 24.70Found: C, 31.71; H, 1.01; N, 24.70
Пример 20.Example 20
5-Метил-3-нитро-2-тиоцианатопиридин (соединение 20)5-Methyl-3-nitro-2-thiocyanatopyridine (compound 20)
Соединение 20 было синтезировано аналогично соединению 19, исходя из коммерчески доступного 5-метил-3-нитро-2-хлорпиридина.Compound 20 was synthesized analogously to compound 19, starting from the commercially available 5-methyl-3-nitro-2-chloropyridine.
Выход: 53%.Yield: 53%.
Т пл.: 135-139°С (метанол)Mp: 135-139 ° C (methanol)
MS (m/z): 195 (M+)MS (m / z): 195 (M + )
1H NMR (DMSO-d6): δ 8.37 и 8.08 (two 1H, two s, 2CH), 2.43 (3H, s, CH3) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 8.37 and 8.08 (two 1H, two s, 2CH), 2.43 (3H, s, CH 3 ) ppm
Элементный анализ C7H5N3O2S:Elemental analysis of C 7 H 5 N 3 O 2 S:
Calc.: С, 43.07; H, 2.58; N, 21.53Calc .: C, 43.07; H, 2.58; N, 21.53
Found: С, 43.21; H, 2.52; N, 21.70Found: C, 43.21; H, 2.52; N, 21.70
Пример 21.Example 21
6-Метокси-3-нитро-2-тиоцианатопиридин (соединение 21)6-Methoxy-3-nitro-2-thiocyanatopyridine (compound 21)
Соединение 21 было синтезировано аналогично соединению 19, исходя из коммерчески доступного 6-метокси-3-нитро-2-хлорпиридина.Compound 21 was synthesized analogously to compound 19, starting from the commercially available 6-methoxy-3-nitro-2-chloropyridine.
Выход: 42%.Yield: 42%.
Т пл.: 121-123°С (метанол)Mp: 121-123 ° C (methanol)
MS (m/z): 211 (М+)MS (m / z): 211 (M + )
1Н NMR (DMSO-d6): δ 8.41 (1Н, d, СН), 6.89 (1Н, d, СН), 3.91 (3Н, s, СН3) ppm 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 8.41 (1H, d, CH), 6.89 (1H, d, CH), 3.91 (3H, s, CH 3 ) ppm
Элементный анализ C7H5N3O3S:Elemental analysis of C 7 H 5 N 3 O 3 S:
Calc.: С, 39.81; Н, 2.39; N, 19.90Calc .: C, 39.81; H, 2.39; N, 19.90
Found: С, 39.68; Н, 2.47; N, 19.92Found: C, 39.68; H, 2.47; N, 19.92
Описание противогрибковой активности соединений по изобретению.Description of the antifungal activity of the compounds of the invention.
1. Активность соединений общей формулы (I) в отношении патогенных грибов и дрожжей.1. The activity of compounds of General formula (I) against pathogenic fungi and yeast.
Полученные соединения общей формулы (I) показали заметную активность в отношении патогенных грибов и дрожжей, а также в отношении клинически изолированных штаммов грибов, в том числе чувствительных к флуконазолу, а также в отношении резистентных к противогрибковым препаратам культур.The obtained compounds of general formula (I) showed marked activity against pathogenic fungi and yeast, as well as against clinically isolated strains of fungi, including those sensitive to fluconazole, as well as against antifungal resistant cultures.
Активность испытуемых соединений определяли методом двукратных серийных разведений (микрометодом) в жидкой питательной среде с выявлением минимальной подавляющей концентрации (МПК) в отношении различных лабораторных и клинических штаммов грибов [National Committee for Clinical Laboratory Standards. 1997. Reference method for broth dilution antifungal susceptibility testing of yeasts. Approved standard M27-A. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Wayne, PA, USA.; National Committee for Clinical Laboratory Standards. 2002. Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Conidium-Forming Filamentous Fungi: Approved Standard M38-A. NCCLS, Wayne, PA, USA].The activity of the test compounds was determined by the method of double serial dilutions (micromethod) in a liquid nutrient medium with the detection of the minimum inhibitory concentration (MIC) for various laboratory and clinical strains of fungi [National Committee for Clinical Laboratory Standards. 1997. Reference method for broth dilution antifungal susceptibility testing of yeasts. Approved standard M27-A. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Wayne, PA, USA .; National Committee for Clinical Laboratory Standards. 2002. Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Conidium-Forming Filamentous Fungi: Approved Standard M38-A. NCCLS, Wayne, PA, USA].
Для приготовления инокулята использовали суспензию клеток дрожжей и суспензию спор грибов в стерильном физиологическом растворе (0,85% NaCl). Плотность суспензий контролировали спектрофотометрически. Для получения инокулята исходные суспензии дрожжей и спор грибов разводили стандартной средой (RPMI 1640). Конечная концентрация клеток в опыте составляла (1-5)×103 клеток/мл для дрожжей и (0,4-5)×104 клеток/мл для грибов. Количество клеток в инокуляте проверяли путем высева на агар Сабуро и подсчета выросших колоний. Тестируемые вещества растворяли в диметилсульфоксиде (DMSO) с начальной концентрацией 1600 мкг/мл и в том же растворителе готовили серии разведений от 1600 до 3,13 мкг/мл. Для постановки эксперимента полученные растворы разводили в 50 раз в стандартной используемой для опыта среде RPMI 1640. Все растворы тестируемых препаратов готовили непосредственно перед использованием.To prepare the inoculum, a suspension of yeast cells and a suspension of fungal spores in sterile physiological saline (0.85% NaCl) were used. The density of the suspensions was controlled spectrophotometrically. To obtain the inoculum, the initial suspension of yeast and fungal spores was diluted with standard medium (RPMI 1640). The final cell concentration in the experiment was (1-5) × 10 3 cells / ml for yeast and (0.4-5) × 10 4 cells / ml for fungi. The number of cells in the inoculum was checked by plating on Saburo agar and counting the grown colonies. Test substances were dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO) with an initial concentration of 1600 μg / ml, and a series of dilutions of 1600 to 3.13 μg / ml were prepared in the same solvent. For the experimental setup, the resulting solutions were diluted 50 times in standard RPMI 1640 medium used for the experiment. All solutions of the tested preparations were prepared immediately before use.
Эксперименты проводили в стерильных 96-луночных плоскодонных планшетах в среде RPMI 1640 в лунках, содержащих 200 мкл питательной среды. Конечная концентрация препаратов в опыте после внесения микробных инокулятов составляла от 16 до 0,03 мкг/мл при концентрации растворителя (DMSO) 1%. Каждый препарат в эксперименте присутствовал не менее чем в трех повторах. В панель эксперимента в качестве контроля были включены лунки, не содержащие тестируемых препаратов.The experiments were performed in sterile 96-well flat-bottomed plates in RPMI 1640 medium in wells containing 200 μl of culture medium. The final concentration of drugs in the experiment after the introduction of microbial inoculum ranged from 16 to 0.03 μg / ml with a solvent concentration (DMSO) of 1%. Each drug in the experiment was present in at least three repetitions. Wells that did not contain the test drugs were included in the experiment panel as a control.
Планшеты инкубировали при 35°С (Candida albicans и грибы) или 25°С (Cryptococcus humicolus) без встряхивания. Оценку роста культур проводили визуально, применяя 4-ступенчатую шкалу: 0=оптическая прозрачность, полное отсутствие роста, 1=слабый рост (25% от уровня контроля), 2=существенное подавление роста (50% от уровня контроля), 3=слабое подавление роста (75% от уровня контроля), 4=отсутствие подавления роста. Минимальную подавляющую концентрацию (МПК) противогрибковых препаратов считывали при 24 час культивирования для Candida albicans и Cryptococcus humicolus и 48 час культивирования для Aspergillus niger и Fusarium oxysporum.The plates were incubated at 35 ° C (Candida albicans and fungi) or 25 ° C (Cryptococcus humicolus) without shaking. Crop growth was assessed visually using a 4-step scale: 0 = optical transparency, complete lack of growth, 1 = weak growth (25% of the control level), 2 = significant growth inhibition (50% of the control level), 3 = weak suppression growth (75% of the control level), 4 = no growth inhibition. The minimum inhibitory concentration (MIC) of antifungal drugs was read at 24 hours of cultivation for Candida albicans and Cryptococcus humicolus and 48 hours of cultivation for Aspergillus niger and Fusarium oxysporum.
МПК определяли как минимальную концентрацию препарата, полностью предотвращающую рост тест-организма (шкала роста=0).BMD was defined as the minimum concentration of the drug, completely preventing the growth of the test organism (growth scale = 0).
В результате проведенного эксперимента изучена способность соединений общей формулы (I) производных группы 2-нитроарилтиоцианатов к подавлению роста патогенных грибов и дрожжей и выявлены значения их МПК (табл.1).As a result of the experiment, the ability of compounds of the general formula (I) of the derivatives of the 2-nitroarylthiocyanate group to inhibit the growth of pathogenic fungi and yeast was studied and the values of their BMD were revealed (Table 1).
humicolus АТСС 9949Candida
humicolus ATCC 9949
2. Активность соединений общей формулы (I) в отношении клинически изолированных резистентных штаммов дрожжей, лабораторных штаммов грибов.2. The activity of the compounds of General formula (I) in relation to clinically isolated resistant strains of yeast, laboratory strains of fungi.
Для определения активности соединений общей формулы (I) в отношении клинически изолированных мультирезистентных штаммов патогенных грибов и дрожжей использовались тест-культуры грибов из РКПГ - диморфных (в дрожжевой фазе, Y): Candida albicans, штамм 1244, С.albicans, штамм 1242, С.tropicalis, штамм 531, С.krusei, штамм 526, С.parapsilosis, штамм 897, С.guilliermondii, штамм 594, С.glabrata, штамм 1188; нитчатых (F): Aspergillus fumigatus, штамм 1248, A. niger, штамм 1249, A. flavus, штамм 1247. Все тест-культуры являются клиническими изолятами от соответствующих больных, изоляты патогенов сохраняются в Российской коллекции патогенных грибов при НИИ медицинской микологии им. П.Н.Кашкина СПб МАПО.To determine the activity of the compounds of general formula (I) in relation to clinically isolated multi-resistant strains of pathogenic fungi and yeast, we used test cultures of fungi from RCP - dimorphic (in the yeast phase, Y): Candida albicans, strain 1244, C. albicans, strain 1242, C .tropicalis strain 531, C. krusei, strain 526, C. parapsilosis, strain 897, C. guilliermondii, strain 594, C. glabrata, strain 1188; filamentous (F): Aspergillus fumigatus, strain 1248, A. niger, strain 1249, A. flavus, strain 1247. All test cultures are clinical isolates from the corresponding patients, pathogen isolates are stored in the Russian collection of pathogenic fungi at the Scientific Research Institute of Medical Mycology named after P.N. Kashkina St. Petersburg MAPO.
Питательные среды: агаризованная и жидкая питательная среда Сабуро. Растворители и суспензионные среды: вода дистиллированная, диметилсульфоксид (ДМСО), раствор буферный фосфатный. Определение противогрибковой активности указанных выше субстанций проводили макрометодом (ГФХI, вып.2, 2002) при последовательных двукратных разведениях. Взвеси дрожжевых организмов рода Candida приготавливали из двухсуточных культур, выросших при 37°С на агаре Сабуро в пробирках. Культуры смывали раствором буферным фосфатным, густоту взвесей доводили до 10 Ед по стандарту мутности. Приготовленную взвесь тест-культуры разводили в 100 раз тем же раствором буферным фосфатным и в каждую пробирку рядов разведений испытуемых веществ в жидкой среде Сабуро вносили по 0,1 мл (2 капли) рабочей взвеси суспензии клеток. Культуры нитчатых грибов выращивали в течение 2-3 дней при 37°С на агаре Сабуро в пробирках, затем клеточную массу собирали с поверхности агара, помещали в стерильную пробирку и растирали, постепенно добавляя раствор буферный фосфатный до густоты рабочих взвесей 5 Ед по стандарту мутности. Количество вносимой рабочей взвеси в каждую пробирку ряда также было 0,1 мл.Culture media: Saburo agar and liquid culture media. Solvents and suspension media: distilled water, dimethyl sulfoxide (DMSO), phosphate buffered saline. The antifungal activity of the above substances was determined by the macro method (GFHI, issue 2, 2002) at successive two-fold dilutions. Suspensions of yeast species of the genus Candida were prepared from two day old cultures grown at 37 ° C on Saburo agar in test tubes. The cultures were washed off with a phosphate buffered saline solution, the density of the suspensions was adjusted to 10 Units according to the turbidity standard. The prepared suspension of the test culture was diluted 100 times with the same phosphate buffered solution, and 0.1 ml (2 drops) of the working suspension of the cell suspension was added to each tube of the dilution series of the test substances in a liquid medium. Filamentous fungal cultures were grown for 2–3 days at 37 ° С on Saburo agar in test tubes, then the cell mass was collected from the surface of the agar, placed in a sterile tube and ground, gradually adding a phosphate buffered solution to a density of working suspensions of 5 Units according to the turbidity standard. The amount of working suspension added to each row tube was also 0.1 ml.
В каждом опыте ставили контроли:In each experiment, controls were set:
1) культуры тест-организма (1 мл питательной среды +0,1 мл рабочей взвеси микромицета; здесь отсутствовала испытуемая субстанция);1) culture of the test organism (1 ml of culture medium +0.1 ml of working suspension of micromycete; there was no test substance here);
2) питательной среды (1 мл среды без культуры и без субстанции);2) nutrient medium (1 ml of medium without culture and without substance);
3) испытуемой субстанции (0,9 мл питательной среды +0,1 мл исходного разведения испытуемой субстанции, то есть в 1 мл содержалось 100 мкг данной субстанции).3) the test substance (0.9 ml of culture medium +0.1 ml of the initial dilution of the test substance, that is, 100 μg of this substance was contained in 1 ml).
Все ряды подготовленных в пробирках разведений с тест-культурами и контрольные выдерживали при температуре 37°С до появления роста гриба в первом контроле. Минимальной фунгистатической концентрацией антимикотика принято считать разведение в той последней пробирке, в которой визуально не наблюдают рост микромицета. Например, рост отсутствует в 1-9-й пробирках, и в последней из них разведение будет 214×104 (2140000) раз, когда концентрация субстанции снижалась до 0,39 мкг/мл, в оставшихся пяти пробирках рост культуры был почти (или равно) такой же, как в первом контроле. Тогда указанная концентрация 0,39 мкг/мл и есть фунгистатический титр (или концентрация).All series of dilutions prepared in test tubes with test cultures and control were kept at a temperature of 37 ° C until the growth of the fungus in the first control. The minimum fungistatic concentration of antimycotics is considered to be dilution in the last tube in which micromycete growth is not visually observed. For example, there is no growth in the 1st through 9th tubes, and in the last of them the dilution will be 214 × 10 4 (2140000) times when the concentration of the substance decreased to 0.39 μg / ml, in the remaining five tubes the growth was almost (or equal) the same as in the first control. Then the indicated concentration of 0.39 μg / ml is the fungistatic titer (or concentration).
При необходимости определения цидного действия антимикотика делают высев штрихами микробиологической петлей на секторы агаризованной среды Сабуро в чашках Петри из каждой пробирки, в которой визуально не отмечен рост культуры, и из первой контрольной пробирки. После этого чашки с секторальными высевами оставляют в термостате при необходимой температуре на срок до появления роста колоний в контрольном секторе. Если высевы оказались также позитивными, например из 7-9-й пробирок, то это означает, что фунгицидное действие проявляется при концентрации антимикотика 3,14 мкг/мл.If it is necessary to determine the cid effect of the antimycotics, microbial loops are sown with strokes on the sectors of the Saburo agar medium in Petri dishes from each tube in which culture growth is not visually observed, and from the first control tube. After this, cups with sectoral seeding are left in the thermostat at the required temperature for the period until the growth of colonies in the control sector. If the seeds were also positive, for example, from the 7th-9th test tubes, this means that the fungicidal effect is manifested when the antimycotic concentration is 3.14 μg / ml.
Ниже приводятся примеры получения фармацевтических композиций в виде различных форм, пригодных для использования в качестве лекарственного средства.The following are examples of the preparation of pharmaceutical compositions in the form of various forms suitable for use as a medicine.
Пример А. Приготовление таблеток, содержащих 50-500 мг активного ингредиента. Активный ингредиент смешивают с 1600 мг крахмала, 1600 мг измельченной лактозы, 400 мг талька и спрессовывают в брусок. Полученный брусок измельчают в гранулы и просеивают через сита, собирая гранулы размером 14-16 меш. Полученные гранулы таблетируют в подходящую форму таблетки весом 560 мг каждая.Example A. Preparation of tablets containing 50-500 mg of active ingredient. The active ingredient is mixed with 1600 mg of starch, 1600 mg of crushed lactose, 400 mg of talc and pressed into a block. The resulting bar is crushed into granules and sieved through sieves, collecting granules with a size of 14-16 mesh. The granules obtained are tabletted into a suitable tablet form weighing 560 mg each.
Пример Б. Капсулы, содержащие 50-500 мг активного ингредиента согласно изобретению, получают тщательным смешиванием активного соединения с порошком лактозы в соотношении 2:1. Полученную порошкоообразную смесь упаковывают по 300 мг в желатиновые капсулы подходящего размера.Example B. Capsules containing 50-500 mg of the active ingredient according to the invention are prepared by thoroughly mixing the active compound with lactose powder in a ratio of 2: 1. The resulting powdery mixture is packaged in 300 mg in a suitable size gelatin capsule.
Пример В. Инъекционные композиции для внутримышечных, внутрибрюшинных или подкожных инъекций могут быть приготовлены смешиванием 50-500 мг активного соединения с 300 мг хлорбутанола, 2 мл пропиленгликоля и 100 мл инъекционной воды. Полученный раствор фильтруют и помещают по 1 мл в ампулы, которые запаивают и стерилизуют в автоклаве.Example B. Injectable compositions for intramuscular, intraperitoneal or subcutaneous injection can be prepared by mixing 50-500 mg of the active compound with 300 mg of chlorobutanol, 2 ml of propylene glycol and 100 ml of injection water. The resulting solution is filtered and placed in 1 ml ampoules, which are sealed and sterilized in an autoclave.
Пример Г. Свечи могут быть изготовлены следующим образом: активное вещество расплавляют в небольшом количестве свечной основы. Получившийся расплав тщательно перемешивают с необходимым количеством основы, разогретой до (35-80)°С. Полученную смесь гомогенизируют. Готовую смесь в растопленном состоянии используют для изготовления свечей.Example D. Candles can be made as follows: the active substance is melted in a small amount of a candle base. The resulting melt is thoroughly mixed with the required amount of base, heated to (35-80) ° C. The resulting mixture is homogenized. The finished mixture in the melted state is used for the manufacture of candles.
Claims (8)
где X=N или C-R3,
R1 означает протон, насыщенный или ненасыщенный линейный алкокси радикал, имеющий 2-5 атомов углерода; циклоалкилокси радикал, имеющий до 6 атомов углерода; насыщенный линейный алкилмеркапто радикал, имеющий 1-3 атомов углерода; амино радикал, имеющий 1-10 атомов углерода, выбранный из насыщенного или ненасыщенного линейного моно- или диалкиламино радикала, или циклоалкиламино радикала, циклического амино радикала, при этом каждая из циклических групп может быть замещена 1-2 метильными группами; или бензиламиногруппу;
R2 означает протон, насыщенный или ненасыщенный, линейный алкилрадикал, имеющий 1-5 атомов углерода, или циклический алифатический радикал, имеющий до 6 атомов углерода, трифторметил, стирил или метилмеркаптогруппу;
R3 означает трифторметил, формил, ацетил, нитро, бензоил, цианогруппу или алкоксикарбонильный заместитель, имеющий 1-3 атомов углерода в алкоксигруппе, возможно в кристаллическом виде, или их фармацевтически приемлемые аддитивные соли с кислотами или основаниями, возможно в кристаллическом виде,
за исключением следующих соединений 4-изопропил-амино-5-нитро-6-тиоцианопиримидина, 4-азокано-5-нитро-6-тиоцианопиримидина, 2-метилтио-4-метокси-5-нитро-6-тиоциано-пиримидина,4-метокси-5-нитро-6-тиоциано-пиримидина, 2-тиоцианато-3-нитропиридина, 4-тиоцианато-5-нитропиримидина, 2-этилмеркапто-4-тиоцианато-5-нитропиримидина, 3,5-динитро-2-тиоцианопиридина, 4-тиоциано-5-нитро-6-(диметиламино)-пиримидина и 4-тиоциано-5-нитро-6-(3,5-диметил-1-пиперидинил)-пиримидина.1. Compounds of General Formula (I)
where X = N or CR 3 ,
R 1 means a proton, a saturated or unsaturated linear alkoxy radical having 2-5 carbon atoms; cycloalkyloxy radical having up to 6 carbon atoms; a saturated linear alkyl mercapto radical having 1-3 carbon atoms; an amino radical having 1-10 carbon atoms selected from a saturated or unsaturated linear mono- or dialkylamino radical, or a cycloalkylamino radical, a cyclic amino radical, wherein each of the cyclic groups may be substituted with 1-2 methyl groups; or a benzylamino group;
R 2 means a proton, a saturated or unsaturated, linear alkyl radical having 1-5 carbon atoms, or a cyclic aliphatic radical having up to 6 carbon atoms, trifluoromethyl, styryl or methyl mercapto group;
R 3 means trifluoromethyl, formyl, acetyl, nitro, benzoyl, cyano or alkoxycarbonyl substituent having 1-3 carbon atoms in alkoxy, possibly in crystalline form, or their pharmaceutically acceptable addition salts with acids or bases, possibly in crystalline form,
except for the following compounds of 4-isopropyl-amino-5-nitro-6-thiocyanopyrimidine, 4-azocano-5-nitro-6-thiocyanopyrimidine, 2-methylthio-4-methoxy-5-nitro-6-thiocyanopyrimidine, 4- methoxy-5-nitro-6-thiocyanopyrimidine, 2-thiocyanato-3-nitropyridine, 4-thiocyanato-5-nitropyrimidine, 2-ethylmercapto-4-thiocyanato-5-nitropyrimidine, 3,5-dinitro-2-thiocyanopyridine 4-thiocyano-5-nitro-6- (dimethylamino) pyrimidine and 4-thiociano-5-nitro-6- (3,5-dimethyl-1-piperidinyl) pyrimidine.
где X=N или C-R3,
R1 означает протон, насыщенный или ненасыщенный линейный алкокси радикал, имеющий 1-5 атомов углерода; циклоалкилокси радикал, имеющий до 6 атомов углерода; насыщенный линейный алкилмеркапто радикал, имеющий 1-3 атомов углерода; амино радикал, имеющий 1-10 атомов углерода, выбранный из насыщенного или ненасыщенного линейного моно- или диалкиламино радикала, или циклоалкиламино радикала, циклического амино радикала, при этом каждая из циклических групп может быть замещена 1-2 метильными группами; или бензиламиногруппу;
R2 означает протон, насыщенный или ненасыщенный, линейный алкилрадикал, имеющий 1-5 атомов углерода, или циклический алифатический радикал, имеющий до 6 атомов углерода, трифторметил, стирил или метилмеркаптогруппу;
R3 означает трифторметил, формил, ацетил, нитро, бензоил, цианогруппу или алкоксикарбонильный заместитель, имеющий 1-3 атомов углерода в алкоксигруппе, возможно в кристаллическом виде, или их фармацевтически приемлемых аддитивных солей с кислотами или основаниями,
для получения фармацевтических композиций, обладающих активностью в отношении штаммов грибов, возбудителей грибковых инфекций.2. The use of compounds of General formula (I):
where X = N or CR 3 ,
R 1 means a proton, a saturated or unsaturated linear alkoxy radical having 1-5 carbon atoms; cycloalkyloxy radical having up to 6 carbon atoms; a saturated linear alkyl mercapto radical having 1 to 3 carbon atoms; an amino radical having 1-10 carbon atoms selected from a saturated or unsaturated linear mono- or dialkylamino radical, or a cycloalkylamino radical, a cyclic amino radical, wherein each of the cyclic groups may be substituted with 1-2 methyl groups; or a benzylamino group;
R 2 means a proton, a saturated or unsaturated, linear alkyl radical having 1-5 carbon atoms, or a cyclic aliphatic radical having up to 6 carbon atoms, trifluoromethyl, styryl or methyl mercapto group;
R 3 means trifluoromethyl, formyl, acetyl, nitro, benzoyl, a cyano group or an alkoxycarbonyl substituent having 1-3 carbon atoms in the alkoxy group, possibly in crystalline form, or their pharmaceutically acceptable addition salts with acids or bases,
to obtain pharmaceutical compositions having activity against strains of fungi, pathogens of fungal infections.
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012107786/04A RU2475481C1 (en) | 2012-03-01 | 2012-03-01 | 2-nitroheterylthiocyanates for treatment of fungas infections, pharmaceutical composition and their application |
| EA201391552A EA201391552A1 (en) | 2012-03-01 | 2013-02-27 | 2-NITROHETERILTHIOCYANATES FOR THE TREATMENT OF FUNGAL INFECTIONS, PHARMACEUTICAL COMPOSITION AND THEIR APPLICATION |
| PCT/RU2013/000156 WO2013129973A1 (en) | 2012-03-01 | 2013-02-27 | 2-nitroheterylthiocyanates for treating fungal infections, pharmaceutical composition and use thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012107786/04A RU2475481C1 (en) | 2012-03-01 | 2012-03-01 | 2-nitroheterylthiocyanates for treatment of fungas infections, pharmaceutical composition and their application |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012107786/04A Previously-Filed-Application RU2475481C1 (en) | 2012-03-01 | 2012-03-01 | 2-nitroheterylthiocyanates for treatment of fungas infections, pharmaceutical composition and their application |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012107786/04A Previously-Filed-Application RU2475481C1 (en) | 2012-03-01 | 2012-03-01 | 2-nitroheterylthiocyanates for treatment of fungas infections, pharmaceutical composition and their application |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2475481C1 true RU2475481C1 (en) | 2013-02-20 |
Family
ID=49120960
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012107786/04A RU2475481C1 (en) | 2012-03-01 | 2012-03-01 | 2-nitroheterylthiocyanates for treatment of fungas infections, pharmaceutical composition and their application |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2475481C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2504541C1 (en) * | 2012-12-26 | 2014-01-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Метаген" | 2-nitroheterylthiocyanates for treating fungal infections, pharmaceutical composition for local application |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20070270433A1 (en) * | 2006-05-18 | 2007-11-22 | Brinkman John A | Thiazolo-pyrimidine/pyridine urea derivatives |
| RU2312104C1 (en) * | 2006-04-27 | 2007-12-10 | Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева (РХТУ им. Д.И. Менделеева) | 4-methoxy-5-nitro-6-thiocyanopyrimidine possessing fungicide activity and method for its preparing |
-
2012
- 2012-03-01 RU RU2012107786/04A patent/RU2475481C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2312104C1 (en) * | 2006-04-27 | 2007-12-10 | Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева (РХТУ им. Д.И. Менделеева) | 4-methoxy-5-nitro-6-thiocyanopyrimidine possessing fungicide activity and method for its preparing |
| US20070270433A1 (en) * | 2006-05-18 | 2007-11-22 | Brinkman John A | Thiazolo-pyrimidine/pyridine urea derivatives |
Non-Patent Citations (11)
| Title |
|---|
| DEMINA GALINA R. et al. "Finding of the low molecular weight inhibitors of resuscitation promoting factor enzymatic and resuscitation activity". PLoS One, 2009, 4(12), No pp. given (English) * |
| Online! ACS on STN ACS on STN 60:52653 Original Reference No. 60:9241c-f * |
| Online! ACS on STN: ULRICH H. "Product class 18: benzothiazoles and related compounds". Science of Synthesis, 2002, 11, 835-912 (English). * |
| Online! ACS on STN: ULRICH H. "Product class 18: benzothiazoles and related compounds". Science of Synthesis, 2002, 11, 835-912 (English). Online! ACS on STN:53:7083 Original Reference No. 53:1359b-h TAKAHASHI, TORIZO et al. "Pyrimidine derivatives. I.Synthesis of thiazolo[5,4-d]-pyrimidines and related compounds". Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 1958, 6, 334-8 (Unavailable). Online! ACS on STN ACS on STN 60:52653 Original Reference No. 60:9241c-f TALIK, Z. et al. "2-Chloro-3,5-dinitropyridine. I. Exchange reactions of the chlorine atom". Bulletin de l'Academie Polonaise des Sciences, Serie des Sciences Chimiques, 1960, 8(5), 219-22 (German). * |
| Online! ACS on STN: соединение с RN 1177597-88-4 и датой Entered STN: 30 Aug 2009: * |
| Online! ACS on STN: соединение с RN 1177597-88-4 и датой Entered STN: 30 Aug 2009: Online! ACS on STN: соединение с RN 352548-98-2, датой Entered STN: 24 Aug 2001. DEMINA GALINA R. et al. "Finding of the low molecular weight inhibitors of resuscitation promoting factor enzymatic and resuscitation activity". PLoS One, 2009, 4(12), No pp. given (English)(Online! WWW.plosone.org.). * |
| Online! ACS on STN: соединение с RN 352548-98-2, датой Entered STN: 24 Aug 2001. * |
| Online! ACS on STN:53:7083 Original Reference No. 53:1359b-h * |
| Online! ACS on STN:LACK, NATHAN A. et al." Targeting the Binding Function 3 (BF3) Site of the Human Androgen Receptor through Virtual Screening". * |
| TAKAHASHI, TORIZO et al. "Pyrimidine derivatives. I.Synthesis of thiazolo[5,4-d]-pyrimidines and related compounds". Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 1958, 6, 334-8 (Unavailable). * |
| TALIK, Z. et al. "2-Chloro-3,5-dinitropyridine. I. Exchange reactions of the chlorine atom". Bulletin de l'Academie Polonaise des Sciences, Serie des Sciences Chimiques, 1960, 8(5), 219-22 (German). * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2504541C1 (en) * | 2012-12-26 | 2014-01-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Метаген" | 2-nitroheterylthiocyanates for treating fungal infections, pharmaceutical composition for local application |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO2013052263A2 (en) | Antifungal compounds | |
| JP2019505533A (en) | TLR7 agonist crystal form A, its preparation and use | |
| JP2019504103A (en) | TLR7 agonist trifluoroacetate salt and its crystalline form B, preparation method and use | |
| EP2780332A1 (en) | Morpholinyl benzotriazine for use in cancer therapy | |
| KR20170023184A (en) | Substituted 2-thioxo-imidazolidin-4-ones and spiro analogues thereof, active anti-cancer ingredient, pharmaceutical composition, medicinal preparation, method for treating prostate cancer | |
| EP2826780A1 (en) | Thieno[2,3-d]pyridazine derivatives and therapeutic use thereof for protein kinase inhibition | |
| JP5404607B2 (en) | Aniline derivative having anti-RNA virus action | |
| KR101902567B1 (en) | Fluorosubstituted (3R,4R,5S)-5-guanidino-4-acetamido-3-(pentan-3-yloxy)cyclohexene-1- carboxylic acids, their esters and use thereof | |
| EP4015508A1 (en) | Methods for preparing substituted 5,6-dihydro-6-phenylbenzo[f]isoquinolin-2-amine | |
| JP6930060B2 (en) | Novel dihydropyranopyrimidinone derivatives and their uses {Novell dihydropyranopylidinone derivatives, and use thetheof} | |
| RU2475481C1 (en) | 2-nitroheterylthiocyanates for treatment of fungas infections, pharmaceutical composition and their application | |
| US7674792B2 (en) | 5(Z)-5-(6-quinoxalinylmethylidene)-2-[2,6-dichlorophenyl)amino]-1,3-thiazol-4(5H)-one | |
| JPH0141616B2 (en) | ||
| US9452158B2 (en) | R-7-(3-aminomethyl-4-methoxyimino-3-methyl-pyrrolidin-1-yl)-1-cyclopropyl-6-fluoro-4-oxo-1 acid and L-aspartic acid salt, process for the preparation thereof and pharmaceutical composition comprising the same for antimicrobial | |
| RU2487132C1 (en) | Cyclic 5-nitropyridin-2-yl-thioalkenyl-4-dithiocarbamate derivatives having antifungal activity and use thereof | |
| CN110981888B (en) | N-aryl dithiopyrryl ketonuria and amino ester derivatives, preparation and application thereof | |
| AU774981B2 (en) | Thiazolopyrimidines useful as TNFalpha inhibitors | |
| US9682997B2 (en) | Pharmaceutical formulations containing 3-(4-cinnamyl-l-piperazinyl) amino derivatives of 3-formylrifamycin SV and 3-formylrifamycin S and a process of their preparation | |
| JP5756096B2 (en) | Guanine riboswitch binding compounds and their use as antibiotics | |
| WO2013129973A1 (en) | 2-nitroheterylthiocyanates for treating fungal infections, pharmaceutical composition and use thereof | |
| WO2020221894A1 (en) | Antiviral compounds | |
| EP1686990B1 (en) | 2-guanidinylimidazolidinedione compounds and methods of making and using thereof | |
| CS221527B2 (en) | Method of preparation of n-/1-methyl-2-pyrrolidinylmethyl/2,3-dimethoxy-5-methylsulphamoylbenzamide | |
| RU2504541C1 (en) | 2-nitroheterylthiocyanates for treating fungal infections, pharmaceutical composition for local application | |
| US20040142882A1 (en) | Use of glycyrrhizin and its derivatives as RANTES inducers |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TK4A | Correction to the publication in the bulletin (patent) |
Free format text: AMENDMENT TO CHAPTER -FG4A- IN JOURNAL: 5-2013 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160302 |