RU2464045C1 - Способ лечения диффузного поражения миокарда - Google Patents
Способ лечения диффузного поражения миокарда Download PDFInfo
- Publication number
- RU2464045C1 RU2464045C1 RU2011114447/14A RU2011114447A RU2464045C1 RU 2464045 C1 RU2464045 C1 RU 2464045C1 RU 2011114447/14 A RU2011114447/14 A RU 2011114447/14A RU 2011114447 A RU2011114447 A RU 2011114447A RU 2464045 C1 RU2464045 C1 RU 2464045C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- myocardium
- mln cells
- ensured
- million cells
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии и кардиохирургии, и может быть использовано при лечении диффузного поражения миокарда. Для этого осуществляют забор клеток мононуклеарной фракции костного мозга в количестве 10 миллионов клеток. При этом 5 миллионов клеток вводят путем пункции аорты между устьем коронарных артерий и местом ее кратковременного пережатия в восходящем участке до отхождения общей сонной артерии. Оставшиеся 5 миллионов клеток вводят посредством двух инъекций. Первые 2,5 миллиона клеток вводят в верхушку миокарда левого желудочка, а вторые 2,5 миллиона клеток в боковую стенку миокарда левого желудочка. Способ позволяет обеспечить восстановление функции поврежденного миокарда за счет увеличения площади микроциркуляторного русла в ишемизированном участке мышечной ткани вследствие формирования местных долговременных очагов ангиогенеза в результате максимального накопления клеток в первый час после трансплантации и минимального выхода их из миокарда в первые 20 часов при их комбинированном введении. 3 табл.
Description
Изобретение относится к области медицины, в частности сердечно-сосудистой хирургии, и может быть использовано для лечения диффузного поражения миокарда (кардиомиопатии).
Кардиомиопатия - это группа заболеваний, при которых в первую очередь страдает мышца сердца и которые проявляются нарушением функции сердечной мышцы.
Известны три вида кардиомиопатии: дилатационная, гипертрофическая, рестриктивная. У них разные клинические проявления, разный прогноз, но они имеют общие признаки, позволяющие их объединить под общим названием.
Известны попытки лечения заболевания с использованием медикаментозных средств.
В патенте США 4939224 обсуждаются различные биологические активности VIP, в том числе расслабление гладкой мускулатуры, индукция вазодилятации, стимуляция интерстициальной секреции воды и электролитов, нейрорегуляция, стимуляция выработки сока поджелудочной железы и ингибирование секреции желудочной кислоты. Однако существуют пагубные побочные эффекты, включающие в себя гипотензию, тахикардию и гиперемию.
Известен способ хирургического лечения кардиомиопатии (патент на изобретение РФ №2253373, A61B 17/00), согласно которому у больных с гипертрофической необструктивной кардиомиопатией иссекают зону максимальной гипертрофии; иссечение выполняют соответственно уровню максимального выпячивания межжелудочковой перегородки (МЖП) в полость левого желудочка из полости правого желудочка. Иссекают атипичные трабекулы между МЖП и передней стенкой правого желудочка.
Известен способ прогнозирования осложнений и летального исхода у больных с сердечной недостаточностью (Ольбинская Л.И., Соломахина Н.И., Каплунова В.Ю; М. - 2002 / Патент на изобретение РФ №2191544), свидетельствующий о тяжести рассматриваемого заболевания.
Известен способ лечения диффузно пораженного миокарда посредством интракоронарного введения клеток (мононуклеарной фракции костного мозга, гладкомышечных, мезенхимальных и др.), как индукторов репаративной регенерации миокарда (Suzuki K., Murtuza B., Suzuki N. Circulation. 2001; 104 (suppl 1): 1-213-1-217; Stamm C., Westphal B., Kleine H. Lancet. 2003; 361, Issue 9351: 45-46; Волковская И.В. Возможности клеточных технологий при лечении сердечной недостаточности. Автореф…к.м.н. М., 2006. - 26 с.). Однако авторы, как правило, ограничиваются оценкой конечного результата - сократимости миокарда, - упуская попытку поиска путей доставки в миокард максимального числа клеток.
Эффективность лечения патологии миокарда определяется в том числе количеством вводимых мононуклеарных клеток костного мозга (Крылов А.П. и др. Цитокины и аутологичные мононуклеарные клетки костного мозга в процессах восстановительной регенерации при инфаркте миокарда, реферат, Кардиоваскулярная терапия и профилактика, 2007, №5, стр.79-84).
В качестве прототипа мы выбрали описанный Suzuki N. еt al., 2001, способ введения клеток в диффузно пораженный миокард крыс через устья коронарных артерий с помощью специальных катетеров. Автор показал, что лечебный эффект может быть достигнут путем введения максимального числа клеток. В то же время он показал, что гибель животных наступает после введения 10 млн клеток.
Цель изобретения - повысить безопасность и эффективность данной терапии.
Цель достигается тем, что 10 млн клеток мононуклеарной фракции костного мозга вводят в область пораженного миокарда комбинированным способом - внутрикоронарно-внутримиокардиальным; половину клеточного продукта - 5 млн клеток - вводят путем пункции аорты между устьем коронарных артерий и местом ее кратковременного пережатия в восходящем участке до отхождения общей сонной артерии; вторую половину клеточного продукта (5 млн клеток) вводят двумя инъекциями по 2,5 млн клеток в каждой в верхушку и боковую стенку миокарда левого желудочка.
В табл.1 представлено распределение экспериментальных животных по группам.
В табл.2 представлена динамика содержания меченных 99м-Тс-ГМПАО клеток в тканях поврежденного миокарда после начала терапии.
В табл.3 представлены физиологические показатели сердечной деятельности в контрольной и опытной группах.
Способ реализуется следующим образом.
Диффузное поражение миокарда было смодулировано по методике, предложенной Сузуки (Suzuki K., Murtuza B., Suzuki N. Circulation. 2001; 104 (suppl 1): 1-213-1-217), предложившим использовать рубомицин при высоких концентрациях в качестве индуктора гибели кардиомиоцитов.
У самки породы крыс Вистар массой 250 г из питомника «Рапполово» АМН с предварительно смоделированным диффузным поражением миокарда под общим наркозом выделена аорта. Через стенку аорты между устьем коронарных артерий и местом ее кратковременного пережатия в восходящем участке перед отхождением общей сонной артерии введено путем пункции 5 млн клеток. 2,5 млн клеток введено в верхушку миокарда; 2,5 млн клеток введено в боковую стенку миокарда левого желудочка.
Данный способ клеточной терапии диффузного поражения миокарда, судя по доступной нам литературе, предложен впервые и обладает рядом достоинств.
Во-первых, он безопасен. Летальных исходов в течение 30 дней наблюдения после трансплантации 10 млн клеток не было.
Во-вторых, он позволяет ввести в диффузно пораженный миокард 10 млн клеток, то есть абсолютно летальную дозу при чисто внутрикоронарном введении.
В-третьих, выход из миокарда клеток, введенных данным методом, достоверно ниже по сравнению с его составляющими: чисто внутрикоронарным и внутримиокардиальным введениями, исходя из проведенных нами сравнительных исследований с трансплантацией меченных технецием клеток.
В-четвертых, увеличение фракции выброса, ударного объема сердца, диастолического размера левого желудочка и сниженного систолического размера достоверно лучше у животных-реципиентов клеток, доставленных комбинированным путем, чем посредством внутрикоронарного или внутримиокардиального.
Клеточная терапия имеет ряд преимуществ перед гено- и пептидной терапией. Во-первых, своей физиологичностью, ибо только клетка обладает уникальным сбалансированным уровнем генной экспрессии и оптимальным для очага альтерации уровнем секреции факторов роста. Во-вторых, отсутствием при аутологичной трансплантации риска иммунных реакций, нередких при введении генных конструкций и рекомбинантных факторов роста (Берсенев А.В. Клеточная трансплантология: История, современное состояние и перспективы. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. 2005; 1: 49-56).
Известна клеточная терапия критической ишемии мононуклеарной фракцией аутологичного костного мозга, как наиболее часто используемого клеточного материала (Tateishi-Yuyama Е. et al. Therapeutic angiogenesis for patients with limb ischaemia by autologous transplantation of bone-marrow cells: a pilot study and a randomized trial. Lancet. 2002; 360: 427-35; Teiji O. Treatment for limb ulcer with severe icshtmia: therapeutic angiogenesis by autologous transplantation of bone-marrow. Wound Repair Regen. 2004; 12). Она также не лишена недостатков. Наравне с положительными результатами описаны отрицательные (усиление болей) результаты или отсутствие динамики (Tateishi-Yuyama Е. et al. Therapeutic angiogenesis for patients with limb ischaemia by autologous transplantation of bone-marrow cells: a pilot study and a randomized trial. Lancet. 2002; 360: 427-35; Teiji О. Treatment for limb ulcer with severe icshtmia: therapeutic angiogenesis by autologous transplantation of bone-marrow. Wound Repair Regen. 2004; 12).
Мы предположили, что отсутствие в ряде случаев эффекта клеточной терапии ишемии предопределено методом доставки клеточного материала. Как правило, клетки доставляются посредством множественных (не менее 40) инъекций в ишемизированные мышцы. Столь избирательный метод введения клеток может таить в себе два эффекта, ограничивающих его эффективность. Во-первых, ограничение артериогенеза, инициируемого моноцитами вне зоны ишемии (Simons М., Ware A. Therapeutic angiogenesis in cardiovascular disease. Nat. Rev. Drug Disc. 2003: 11(2); 863-72). Во-вторых, ограничение VEGF зависимой пролиферации эндотелиоцитов и трансплантированных их предшественников (обеспечивающих ангио- и васкулоенез), детерминированной рН среды и концентрацией фактора роста, определяемой состоянием мышечных клеток (очага), его секретирующих. Мы провели сравнительную оценку разных методов доставки клеток с целью повышения эффективности клеточной терапии.
Материал и методы исследования
Животные в зависимости от метода введения клеток были разделены на три подгруппы (табл.1). Крысам первой подгруппы клетки вводили внутримышечно (10 инъекций × 20 мкл), второй - внутриартериально (в центральный конец лигирозанной артерии, 200 мкл), третьей - внутримышечно (5 инъекций × 20 мкл) и внутриартериально (100 мкл). Животных контрольной группы подвергали аналогичным вмешательствам, исключая введение клеток. Им вводили забуференный 0,95% раствор натрия хлорида методами и в объемах, аналогичных таковым в опытной группе.
В динамике (10, 20, 30 сутки) после трансплантации клеток (введения 0,9% раствора натрия хлорида) у 4 животных каждой подгруппы опытной и контрольной групп проводили ангиографию для визуализации кровотока в поврежденном участке и после забоя забирали подвергшуюся воздействию ткань для гистологического исследования удельной площади микроциркуляторного русла в ее мышцах.
Результаты собственных исследований
Динамический анализ состояния удельной площади микроциркуляторного русла животных контрольной и опытной групп позволяет отметить два принципиальных факта. Первый - это отсутствие динамики избранного показателя у всех животных контрольной группы. Второй - достоверное увеличение площади микроциркуляторного русла у крыс опытной группы, то есть получивших клеточную терапию (табл.1).
Принципиально отметить, что эффект клеточной терапии, как по скорости его развития, так и конечному результату, зависит от метода введения клеток. В этом контексте заслуживает внимания комбинированный метод доставки клеточного материала. Он выгодно отличается от обычно предпочитаемого чисто внутримышечного введения клеток, прежде всего, что принципиально важно, по скорости нарастания площади микроциркуляторного русла, не уступая по конечному результату и даже несколько превышая таковой в сравниваемой подгруппе животных.
Результаты наблюдений свидетельствуют о том, что экспериментальная ишемия не способна индуцировать ангиогенез в ближайшие 30 суток после ее моделирования. Трансплантация клеток мононуклеарной фракции инициирует ангиогенез, способствуя увеличению площади микроциркуляторного русла в ишемизированном участке мышечной ткани в 2,5-3,5 раза. Скорость нарастания микроциркуляторного русла и конечный эффект трансплантации клеток зависят от метода доставки клеточного материала. Оптимальным вариантом доставки клеток, как по критерию скорости ангиогенеза, так и его конечному уровню, является комбинированный метод введения клеток. Он объединяет в себе выгодные стороны внутримышечной и внутриартериальной доставки клеточного продукта. Его «внутримышечная» составляющая обеспечивает, очевидно, формирование относительно местных долговременных очагов ангиогенеза, а «внутриартериальная» - региональных малоклеточных, быстросозревающих.
Для доказательства возможности промышленного использования способа были проведены наблюдения динамики содержания меченных 99м-Тс-ГМПАО клеток в тканях поврежденного миокарда после начала терапии.
Полученные результаты представлены в таблице 2.
Визуализация клеток, меченных технецием и трансплантированных в миокард разными путями, показывает не только их максимальное накопление при комбинированном введении в первый час после трансплантации, но и минимальный выход из миокарда в первые 20 часов по сравнению с интракардиальным и интракоронарным способами доставки клеток. Последнее обстоятельство, очевидно, и объясняет максимальное нарастание фракции выброса и иных показателей функции сердца в группе животных, получивших клетки комбинированным способом.
Минимальные потери трансплантированных комбинированным способом клеток, видимо, объясняются миграцией в миокард той части клеток, трансплантированных интракоронарно, которая на первом этапе фиксировалась на высоком эндотелии посткапиллярных венул, а на втором этапе по градиенту хемоаттрактант SDF-1 (stromal differention factor), создаваемому клетками, введенными в миокард, мигрировала в него.
Данные таблицы 3 свидетельствуют о восстановлении функции поврежденного миокарда. Заметно улучшилась фракция выброса миокарда, повысились ударный объем, конечный диастолический и систолический размер, фракция ускорения.
Все сказанное позволяет констатировать достаточную эффективность предлагаемого способа в терапии диффузного поражения миокарда.
Таблица 1 | |||
Группы животных (и число в группе) | Подгруппы животных и число в подгруппе | ||
внутримышечное введение | внутриартериальное введение | комбинированное введение | |
Контрольная (36) | 12 | 12 | 12 |
Опытная (36) | 12 | 12 | 12 |
р<0,05 |
Таблица 2 | |||
Группы по путям | Содержание меченных 99м-Тс-ГМПАО клеток | ||
введения | Через 1 час | Через 20 часов | Δ |
Интракардиально | 0,0872±0,01 | 0,0635±0,01 | 0,0237± |
Интракоронарно | 0,0809±0,01 | 0,0642±0,01 | 0,0167± |
Комбинированно | 0,0925±0,01 | 0,0787±0,01 | 0,0138± |
р<0,05 |
Таблица 3 | |||||||
Группы и подгруппы животных | Показатели | ||||||
Фракция выброса | Ударный объем (мл) | Конечный диастолический размер (см) | Конечный систолический размер (см) | Фракция укорочения, % | Частота сердечных сокращений | ||
Контрольная | 44±4 | 0,1± | 0,46±0,02 | 0,37±0,01 | 18,6±2 | 465±10 | |
Опытные | |||||||
Интракард. введение | 65±3 | 0,2± | 0,55±0,03 | 0,34±0,02 | 30±2 | 493±8 | |
Интракорнарное введение | 62±3 | 0,15± | 0,49±0,01 | 0,34±0,01 | 29±1 | 480±9 | |
Комбинир. введение | 71,5±4 | 0,3± | 0,55±0,02 | 0,35±0,01 | 35±2 | 490±10 | |
р<0,05 |
Claims (1)
- Способ лечения диффузного поражения миокарда путем введения 10 млн клеток мононуклеарной фракции костного мозга, отличающийся тем, что клетки мононуклеарной фракции костного мозга вводят комбинированным способом - внутрикоронарно-внутримиокардиальным; половину клеточного продукта - 5 млн клеток - вводят путем пункции аорты между устьем коронарных артерий и местом ее кратковременного пережатия в восходящем участке до отхождения общей сонной артерии; вторую половину клеточного продукта (5 млн клеток) вводят двумя инъекциями по 2,5 млн клеток в каждой - в верхушку и боковую стенку миокарда левого желудочка.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2011114447/14A RU2464045C1 (ru) | 2011-04-13 | 2011-04-13 | Способ лечения диффузного поражения миокарда |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2011114447/14A RU2464045C1 (ru) | 2011-04-13 | 2011-04-13 | Способ лечения диффузного поражения миокарда |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2464045C1 true RU2464045C1 (ru) | 2012-10-20 |
Family
ID=47145308
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011114447/14A RU2464045C1 (ru) | 2011-04-13 | 2011-04-13 | Способ лечения диффузного поражения миокарда |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2464045C1 (ru) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2237440C2 (ru) * | 2002-11-06 | 2004-10-10 | ГУ Новосибирский научно-исследовательский институт патологии кровообращения им. акад. Е.Н. Мешалкина | Способ имплантации стволовых клеток в миокард в эксперименте |
RU2284190C1 (ru) * | 2005-06-14 | 2006-09-27 | Дмитрий Дмитриевич Генкин | Способ лечения ишемической болезни сердца, или инфаркта миокарда и его последствий, или ишемии мозга, вызванной атеросклерозом или острым нарушением мозгового кровообращения, и ее последствий, или ишемии нижних конечностей, вызванной атеросклерозом |
RU2295964C1 (ru) * | 2005-07-20 | 2007-03-27 | Владимир Эдуардович Гужин | Способ лечения ишемических изменений тканей |
-
2011
- 2011-04-13 RU RU2011114447/14A patent/RU2464045C1/ru active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2237440C2 (ru) * | 2002-11-06 | 2004-10-10 | ГУ Новосибирский научно-исследовательский институт патологии кровообращения им. акад. Е.Н. Мешалкина | Способ имплантации стволовых клеток в миокард в эксперименте |
RU2284190C1 (ru) * | 2005-06-14 | 2006-09-27 | Дмитрий Дмитриевич Генкин | Способ лечения ишемической болезни сердца, или инфаркта миокарда и его последствий, или ишемии мозга, вызванной атеросклерозом или острым нарушением мозгового кровообращения, и ее последствий, или ишемии нижних конечностей, вызванной атеросклерозом |
RU2295964C1 (ru) * | 2005-07-20 | 2007-03-27 | Владимир Эдуардович Гужин | Способ лечения ишемических изменений тканей |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
SUZUKI K. et al. Cell transplantation for the treatment of acute myocardial infarction using vascular endothelial growth factor-expressing skeletal myoblasts. Circulation. 2001 Sep 18; 104 (12 Suppl 1): I207-12., реферат, Найдено из Интернет на сайте: http://www.ncbi.nlm. nih.gov/pubmed/11568057. * |
ВОЖОВСКАЯ И.В. Возможности клеточных технологий при лечении сердечной недостаточности.: Автореферат дисс. к.м.н. - М., 2006, с.7-21. ШАХОВ В.П. и др. Монография «Стволовые клетки и кардиомиогенез в норме и патологии». Раздел «Кардиомиопластика острого инфаркта миокарда с помощью МСК, выделенных из костного мозга». - Томск: Изд-во STT, 2004, с.125-134. ФОМИЧЕВ А.В. Клинико-морфологическая оценка метода трансмиокардиальной лазерной реваскуляризации в сочетании с имплантацией мононуклеарной фракции аутологичного костного мозга в хирургии ИБС (клинико-экспериментальное исследование): Автореферат дисс. к.м.н. - Новосибирск, 2009, с.11-23. ВИЛЬЯНИНОВ В.Н. и др. Получение и клиническое применение аутологичных гемокомпонентов в кардиохирургии. Актуальные проблемы сердечно-сосудистой, легочной и абдоминальной хирургии. Изд-во СПбГМУ, 1999, с.164. БОКЕРИЯ Л.А. и др. Первый опыт использования аутологичных клеток костного мозга при лечении сердечной недостаточности ишемического генеза и острого ин * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Kawamoto et al. | Synergistic effect of bone marrow mobilization and vascular endothelial growth factor-2 gene therapy in myocardial ischemia | |
KR102146815B1 (ko) | Hmgb1 단편을 이용한 신규 심근경색의 치료법 | |
US20100280493A1 (en) | Methods and Systems for Treating Injured Cardiac Tissue | |
CN110494154B (zh) | 心肌病、陈旧性心肌梗塞及慢性心力衰竭的治疗剂 | |
Vu et al. | An autologous platelet-rich plasma hydrogel compound restores left ventricular structure, function and ameliorates adverse remodeling in a minimally invasive large animal myocardial restoration model: a translational approach: Vu and Pal “Myocardial Repair: PRP, Hydrogel and Supplements” | |
Tang et al. | The enhancement of endothelial cell therapy for angiogenesis in hindlimb ischemia using hyaluronan | |
Liu et al. | Transplantation of parthenogenetic embryonic stem cells ameliorates cardiac dysfunction and remodelling after myocardial infarction | |
JP2020529992A (ja) | 心外傷後の心機能を増強することができる皮質骨幹細胞由来のエキソソーム | |
AU767402B2 (en) | Intramyocardial injection of autologous bone marrow | |
Guo et al. | Regeneration of the heart: from molecular mechanisms to clinical therapeutics | |
US20100034794A1 (en) | Endothelial progenitor cell compositions and neovascularization | |
JP2009530412A (ja) | 損傷心臓組織治療の方法と方式 | |
RU2464045C1 (ru) | Способ лечения диффузного поражения миокарда | |
WO2009052211A1 (en) | Compositions and methods for enhancing lymphangiogenesis | |
von Wattenwyl et al. | Scaffold-Based Transplantation of Vascular Endothelial Growth Factor—Overexpressing Stem Cells Leads to Neovascularization in Ischemic Myocardium but Did Not Show a Functional Regenerative Effect | |
RU2795320C2 (ru) | Терапевтическое средство для лечения кардиомиопатии, перенесенного инфаркта миокарда и хронической сердечной недостаточности | |
US20200330521A1 (en) | Methods and compositions to enhance arteriogenesis | |
RU2822010C1 (ru) | Способ терапии сердечно-сосудистого заболевания | |
US9844514B2 (en) | Methods for treating an established myocardial infarction | |
Espinel et al. | Cell therapy in the treatment of bronchiolitis obliterans in a murine model | |
Dotson et al. | Relationship of aging and cardiac IL-10 | |
Thompson et al. | Biointerventional cardiology: the future interface of interventional cardiovascular medicine and bioengineering | |
Farge | Mesenchymal Stromal Cells for Systemic Sclerosis | |
WO2015006510A1 (en) | Methods for treating an established myocardial infarction | |
Bilewska et al. | Stem cell therapy for single ventricle congenital heart disease–current state and future directions |