RU2462463C2 - Synthesis of epothiliones, intermediate products thereof, analogues and use thereof - Google Patents

Abstract

FIELD: chemistry.

SUBSTANCE: invention relates to a compound of formula

or a pharmaceutically acceptable salt thereof, in which R₁ denotes hydrogen or C_1-6alkyl; R₂ denotes isooxazolyl group, substituted with C_1-6alkyl; R_B denotes -CF₃, -CHF₂, -CH₂F, or C_1-6alkyl. The invention also relates to pharmaceutical compositions for treating cancer which contain the disclosed compounds.

EFFECT: obtaining novel compounds and a pharmaceutical compositions based on said compounds, which can be used in medicine for treating cancerous diseases.

15 cl, 77 dwg, 10 tbl, 13 ex

Description

Эпотилоны A и B (2a и 2b, схема 1) являются встречающимися в природе цитотоксическими макролидами, которые были выделены из разрушающей целлюлозу микобактерии Sorangium cellulosum (Höfle et al. Angew. Chem., Int. Ed. Engl. 1996, 35, 1567 и J. Antibiot. 1996, 49, 560; каждая из публикаций включена в данное описание в виде ссылки). Несмотря на огромное количество различных структур эпотилоны A и B имеют общий механизм действия, такой же, как механизм действия паклитаксела (Taxol®), который вовлечен в ингибирование роста опухолевых клеток в результате полимеризации тубулина и стабилизации сборки из микротрубочек (Bollag et al. Cancer Res. 1995, 55, 2325; включено в виде ссылки). Несмотря на свое бесспорное клиническое значение в качестве химиотерапевтического средства переднего края, Taxol® далек от идеального лекарственного средства. Его незначительная растворимость в воде делает необходимым прибегать к помощи наполнителей для композиции, таких как кремофоры, которые сами по себе создают риск и проблемы при работе с ними (Essayan et al. J. Allergy Clin. Immunol. 1996, 97, 42; публикация включена в данное описание в виде ссылки). Кроме того, Taxol® уязвим по отношению к дезактивации вследствие множественной лекарственной резистентности (MDR) (Giannakakou et al. J. Biol. Chem. 1997, 272, 17118; публикация включена в данное описание в виде ссылки). Однако также показано, что эпотилоны A и B сохраняют заметную эффективность против опухолевых MDR-клеток (Kowalski et al. Mol. Biol. Cell 1995, 6, 2137; публикация включена в данное описание в виде ссылки). Кроме того, повышенная растворимость в воде по сравнению с паклитакселом может быть полезна для возможности готовить композиции эпотилонов. В то время как встречающееся в природе соединение, эпотилон B (2b, EpoB на схеме 1) является эффективным представителем эпотилонового семейства природных продуктов, к сожалению, он обладает, по меньшей мере у мышей с ксенотрансплантатами, вызывающим беспокойство ограниченным терапевтическим индексом (Su et al. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1997, 36, 1093; Harris et al. J Org. Chem. 1999, 64, 8434; каждая публикация включена в данное описание в виде ссылки).Epothilones A and B (2a and 2b, Scheme 1) are naturally occurring cytotoxic macrolides that have been isolated from the cellulose-destroying mycobacterium Sorangium cellulosum (Höfle et al. Angew. Chem., Int. Ed. Engl. 1996, 35, 1567 and J. Antibiot. 1996, 49, 560; each of the publications is incorporated herein by reference). Despite the huge number of different structures, the epothilones A and B have a common mechanism of action, the same as the mechanism of action of paclitaxel (Taxol®), which is involved in inhibiting the growth of tumor cells as a result of tubulin polymerization and stabilization of microtubule assembly (Bollag et al. Cancer Res 1995, 55, 2325; incorporated by reference). Despite its undeniable clinical relevance as a leading edge chemotherapeutic agent, Taxol® is far from an ideal drug. Its insignificant solubility in water makes it necessary to resort to fillers for the composition, such as cremophores, which themselves pose a risk and problems when working with them (Essayan et al. J. Allergy Clin. Immunol. 1996, 97, 42; publication included in this description by reference). In addition, Taxol® is vulnerable to multi-drug resistance (MDR) deactivation (Giannakakou et al. J. Biol. Chem. 1997, 272, 17118; the publication is incorporated herein by reference). However, it has also been shown that epothilones A and B remain noticeably effective against tumor MDR cells (Kowalski et al. Mol. Biol. Cell 1995, 6, 2137; the publication is incorporated herein by reference). In addition, increased solubility in water compared with paclitaxel may be useful for the ability to prepare epothilone compositions. While the naturally occurring compound, epothilone B (2b, EpoB in Scheme 1) is an effective representative of the epothilone family of natural products, unfortunately it has, at least in mice with xenografts, a worrying limited therapeutic index (Su et al Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1997, 36, 1093; Harris et al. J Org. Chem. 1999, 64, 8434; each publication is incorporated herein by reference).

Имея в виду ограниченный терапевтический индекс EpoB, исследовали другие аналоги эпотилона, в частности 12,13-дезоксиэпотилоны, в отношении их способности давать улучшенный терапевтический профиль (см. патенты США №№ 6242469, 6284781, 6300355, 6369234, 6204388, 6316630; каждый из которых включен в данное описание в виде ссылки). Эксперименты in vivo, проведенные на различных мышиных моделях, показали, что 12,13-дезоксиэпотилон B (3b, dEpoB на схеме 2) обладает терапевтическим потенциалом против различных чувствительных и резистентных опухолей человека в ксенотрансплантатах мышей (Chou et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1998, 95, 9642 and 15798; публикация включена в данное описание в виде ссылки). Недавно терапевтическое преимущество указанных дезоксиэпотилонов по сравнению с другими противоопухолевыми агентами окончательно показано посредством сравнительных исследований (Chou et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2001, 98, 8113; публикация включена в данное описание в виде ссылки). Вследствие впечатляющего профиля in vivo dEpoB был далее подвергнут токсикологическим исследованиям на собаках и в настоящее время проходит испытания на человеке в качестве противоопухолевого лекарственного средства.Bearing in mind the limited therapeutic index of EpoB, other epothilone analogs, in particular 12,13-deoxyepotilones, were studied with respect to their ability to give an improved therapeutic profile (see US Pat. Nos. 6,242,469, 6,284,781, 6,300,355, 6,369,234, 6,204,388, 6,316,630; each of which is incorporated into this description by reference). In vivo experiments performed on various mouse models showed that 12,13-deoxyepothilone B (3b, dEpoB in Scheme 2) has therapeutic potential against various sensitive and resistant human tumors in mouse xenografts (Chou et al. Proc. Natl. Acad Sci. USA 1998, 95, 9642 and 15798; publication incorporated herein by reference). Recently, the therapeutic advantage of these deoxyepotilones compared to other antitumor agents has been conclusively shown through comparative studies (Chou et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2001, 98, 8113; the publication is incorporated herein by reference). Due to its impressive in vivo profile, dEpoB was further subjected to toxicological studies in dogs and is currently undergoing human trials as an antitumor drug.

В свете многообещающей терапевтической пользы 12,13-дезоксиэпотилонов может быть желательным исследовать дополнительные аналоги, а также дополнительные методики синтеза для синтеза существующих эпотилонов, дезоксиэпотилонов и их аналогов, а также их новых аналогов. В частности при наличии интереса к терапевтическому применению данного класса соединений может быть желательна разработка методик, способных обеспечивать значительные количества любых эпотилонов или дезоксиэпотилонов, описанных ранее или описанных в данной заявке, для клинических испытаний и для крупномасштабного получения.In the light of the promising therapeutic benefits of 12,13-deoxyepotilones, it may be desirable to investigate additional analogs as well as additional synthesis techniques for the synthesis of existing epothilones, deoxyepotilones and their analogues, as well as their new analogues. In particular, if there is interest in the therapeutic use of this class of compounds, it may be desirable to develop methods that can provide significant amounts of any epothilones or deoxyepothilones described previously or described in this application for clinical trials and for large-scale production.

Описание чертежейDescription of drawings

Фиг.1 представляет собой таблицу значений IC₅₀ для эпотилонов по отношению к росту клеток CCRF-CEM, CCRF-CEM/VBL и CCRF-CEM/таксол. Ингибирование роста клеток измеряли с помощью анализа на основе тетразония XTT после 72-часовой инкубации в течение роста клеток, как описано ранее (Scudiero et al. Cancer Res. 46: 4827-4833, 1988; публикация включена в данное описание в виде ссылки). Значения IC₅₀ определяли на основе взаимосвязи доза-эффект при шести или семи концентрациях каждого лекарственного средства, используя компьютерную программу (Chou et al. Adv. Enzyme Regul. 22: 27-55, 1984; Chou et al. CalcuSyn for Windows (Biosoft, Cambridge, UK), 1997; каждая из которых включена в данное описание в виде ссылки), как описано ранее (Chou et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95: 15798-15802, 1998; публикация включена в данное описание в виде ссылки).Figure 1 is a table of IC ₅₀ values for epothilones in relation to cell growth of CCRF-CEM, CCRF-CEM / VBL and CCRF-CEM / Taxol. Cell growth inhibition was measured using a tetrazonium XTT assay after 72-hour incubation during cell growth as previously described (Scudiero et al. Cancer Res. 46: 4827-4833, 1988; the publication is incorporated herein by reference). IC ₅₀ values were determined based on the dose-response relationship at six or seven concentrations of each drug using a computer program (Chou et al. Adv. Enzyme Regul. 22: 27-55, 1984; Chou et al. CalcuSyn for Windows (Biosoft, Cambridge, UK), 1997; each of which is incorporated herein by reference) as previously described (Chou et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95: 15798-15802, 1998; a publication is incorporated into this description by as a link).

Фиг.2 является ¹H-ЯМР-спектром транс-9,10-дегидро-12,13-дезоксиEpoB.Figure 2 is a ¹ H-NMR spectrum of trans-9,10-dehydro-12,13-deoxyEpoB.

Фиг.3 является ¹³C-ЯМР-спектром транс-9,10-дегидро-12,13-дезоксиEpoB.Figure 3 is a ¹³ C-NMR spectrum of trans-9,10-dehydro-12,13-deoxyEpoB.

На фиг.4 показана схема синтеза 11-R- и 14-R-эпотилонов с использованием метатезиса олефинов с замыканием цикла LACDAC, и иллюстрируются некоторые замещения, доступные в случае способов синтеза, которые проходят через 9,10-дегидроэпотилон.Figure 4 shows a synthesis scheme for 11-R and 14-R epothilones using the LACDAC ring olefin metathesis, and some substitutions available in the case of synthesis methods that pass through 9,10-dehydroepotilon are illustrated.

На фиг.5 представлены данные относительной цитотоксичности по отношению к лейкозным клеткам человека in vitro для ряда соединений и производных эпотилона, включая некоторые 9,10-дегидросоединения (например, соединение 7 на фиг.5A и соединение 88 и 89 на фиг.5B).Figure 5 presents the relative cytotoxicity against human leukemia cells in vitro for a number of compounds and derivatives of epothilone, including some 9,10-dehydro compounds (for example, compound 7 in Fig. 5A and compound 88 and 89 in Fig. 5B).

На фиг.6 изображена альтернативная методика синтеза для получения аналогов 9,10-дегидроэпотилона. На фиг.6A показана методика Макро-Стилле, методика сопряжения sp³-sp³ и методика β-Сузуки. На фиг.6B показана методика олефинирования Джулии, методика Вадсворт-Эммонса и методика Макро-Реформатского. На фиг.6C показана методика сочетания МакМурри и синтез аналога лактама.Figure 6 shows an alternative synthesis procedure for the preparation of analogues of 9,10-dehydroepotilon. 6A shows the Macro-Stille technique, the sp ³ -sp ³ conjugation technique, and the β-Suzuki technique. 6B shows the Julia olefination technique, the Wadsworth-Emmons technique, and the Macro-Reformed technique. 6C shows a McMurry coupling technique and synthesis of a lactam analogue.

На фиг.7 показаны различные аналоги 9,10-дегидро-12,13-дезоксиEpoB.7 shows various analogues of 9,10-dehydro-12,13-deoxyEpoB.

На фиг.8 показано терапевтическое действие 9,10-дегидро-dEpoB и dEpoB у мышей nude, несущих ксенотрансплантат карциномы молочной железы человека MX-1 (в/в-инфузия, Q2Dx3).FIG. 8 shows the therapeutic effect of 9,10-dehydro-dEpoB and dEpoB in nude mice bearing a MX-1 human mammary carcinoma xenograft (iv infusion, Q2Dx3).

На фиг.9 показана стабильность аналогов эпотилона в плазме мышей. Epo 1 означает 12,13-дезоксиEpoB, Epo 2 означает 26-F₃-12,13-дезоксиEpoB, Epo 3 означает (E)-9,10-дегидро-12,13-дезоксиEpoB и Epo 4 означает 26-F₃-(E)-9,10-дегидро-12,13-дезоксиEpoB.Figure 9 shows the stability of analogs of epothilone in the plasma of mice. Epo 1 means 12,13-deoxyEpoB, Epo 2 means 26-F ₃ -12,13-deoxyEpoB, Epo 3 means (E) -9,10-dehydro-12,13-deoxyEpoB and Epo 4 means 26-F ₃ - (E) -9,10-dehydro-12,13-deoxyEpoB.

На фиг.10 изображено терапевтическое действие аналогов эпотилона у мышей nude (голых), несущих ксенотрансплантат HCT-116 (в/в-инфузия, Q2Dx7, n=3). Стрелки указывают введение лекарственного средства. Epo 3 означает (E)-9,10-дегидро-12,13-дезоксиEpoB.Figure 10 shows the therapeutic effect of epothilone analogues in nude mice (nude) bearing the HCT-116 xenograft (iv infusion, Q2Dx7, n = 3). The arrows indicate the administration of the drug. Epo 3 means (E) -9,10-dehydro-12,13-deoxyEpoB.

На фиг.11 показаны эффективности различных аналогов эпотилона против роста опухолевых клеток in vitro и терапевтический индекс по сравнению с паклитакселом и винбластином.11 shows the efficacy of various epothilone analogs against tumor cell growth in vitro and the therapeutic index compared to paclitaxel and vinblastine.

Фиг.12 представляет собой таблицу, суммирующую действие dEpoB, таксола и 26-триF-9,10-deH-dEpoB против ксенотрансплантата MX-1 у мышей nude.12 is a table summarizing the effects of dEpoB, Taxol, and 26-triF-9,10-deH-dEpoB against the MX-1 xenograft in nude mice.

На фиг.13 показано терапевтическое действие 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB и 9,10-дегидро-EpoB на размер опухолей у мышей nude, несущих ксенотрансплантаты MX-1 (6-часовая в/в-инфузия, Q2Dx6 и Q2Dx9, соответственно).13 shows the therapeutic effect of 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB and 9,10-dehydro-EpoB on tumor size in nude mice bearing MX-1 xenografts (6-hour iv infusion, Q2Dx6 and Q2Dx9, respectively).

На фиг.14 показаны изменения массы тела мышей nude, несущих ксенотрансплантат опухоли карциномы молочной железы человека MX-1, после лечения 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB и 9,10-дегидро-EpoB (6-часовая инфузия, Q2Dx6 и Q2Dx9, соответственно).Fig. 14 shows body weight changes of nude mice bearing a xenograft of human breast carcinoma MX-1 tumor after treatment with 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB and 9,10-dehydro-EpoB (6-hour infusion, Q2Dx6 and Q2Dx9, respectively).

На фиг.15 показано терапевтическое действие 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB и 9,10-дегидроEpoB на размер опухолей у мышей nude, несущих ксенотрансплантаты MX-1 (6-часовая в/в-инфузия, Q2Dx6 и Q2Dx9, соответственно).15 shows the therapeutic effect of 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB and 9,10-dehydroEpoB on the size of tumors in nude mice bearing MX-1 xenografts (6-hour iv infusion, Q2Dx6 and Q2Dx9, respectively).

На фиг.16 показаны изменения массы тела у мышей nude, несущих ксенотрансплантат опухоли карциномы молочной железы человека MX-1, после лечения 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB и 9,10-дегидро-EpoB (6-часовая в/в-инфузия, Q2Dx6 и Q2Dx9, соответственно).FIG. 16 shows body weight changes in nude mice bearing xenograft of human breast carcinoma MX-1 tumor after treatment with 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB and 9,10-dehydro-EpoB (6-hour iv) B infusion, Q2Dx6 and Q2Dx9, respectively).

На фиг.17 показано терапевтическое действие 9,10-дегидро-dEpoB на размер опухолей у мышей nude, несущих ксенотрансплантаты HCT-116 (в/в-инфузия, Q2Dx7).17 shows the therapeutic effect of 9,10-dehydro-dEpoB on tumor size in nude mice bearing HCT-116 xenografts (iv infusion, Q2Dx7).

На фиг.18 показано действие 9,10-дегидро-dEpoB на размер опухолей у мышей nude, несущих ксенотрансплантаты карциномы ободочной кишки человека HCT-116 (в/в-инфузия, Q3Dx5).FIG. 18 shows the effect of 9,10-dehydro-dEpoB on tumor size in nude mice bearing xenografts of HCT-116 human colon carcinoma of the colon (iv infusion, Q3Dx5).

На фиг.19 показано действие 9,10-дегидро-dEpoB на размер опухолей у мышей nude, несущих ксенотрансплантаты A549/Taxol (6-часовая в/в-инфузия, Q3Dx7).19 shows the effect of 9,10-dehydro-dEpoB on tumor size in nude mice bearing A549 / Taxol xenografts (6-hour iv infusion, Q3Dx7).

На фиг.20 показаны изменения массы тела у мышей nude, несущих ксенотрансплантат A549/Taxol, обработанных 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB и 9,10-дегидро-dEpoB (6-часовая в/в-инфузия, Q3Dx7).20 shows body weight changes in nude mice bearing A549 / Taxol xenograft treated with 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB and 9,10-dehydro-dEpoB (6-hour iv infusion, Q3Dx7) .

На фиг.21 показано действие 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB и 9,10-дегидро-dEpoB на размер опухолей у мышей nude, несущих ксенотрансплантаты A549/Taxol (6-часовая в/в-инфузия, Q2Dx7).Figure 21 shows the effect of 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB and 9,10-dehydro-dEpoB on tumor size in nude mice bearing A549 / Taxol xenografts (6-hour iv infusion, Q2Dx7).

На фиг.22 показаны изменения массы тела мышей nude, несущих ксенотрансплантаты A549/Taxol, обработанных 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB и 9,10-дегидро-dEpoB (6-часовая в/в-инфузия, Q2Dx7).22 shows body weight changes of nude mice bearing A549 / Taxol xenografts treated with 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB and 9,10-dehydro-dEpoB (6-hour iv infusion, Q2Dx7).

На фиг.23 показано действие 9,10-дегидро-EpoB на размер опухолей у мышей nude, несущих ксенотрансплантаты опухоли HCT-116 карциномы ободочной кишки человека (6-часовая в/в-инфузия).Figure 23 shows the effect of 9,10-dehydro-EpoB on tumor size in nude mice bearing xenografts of human colon carcinoma HCT-116 tumor (6-hour iv infusion).

На фиг.24 показаны изменения массы тела у мышей nude, несущих ксенотрансплантат опухоли HCT-116 карциномы ободочной кишки человека, после лечения 9,10-дегидро-EpoB (6-часовая в/в-инфузия).24 shows body weight changes in nude mice bearing a xenograft of a human colon carcinoma HCT-116 tumor after treatment with 9,10-dehydro-EpoB (6-hour iv infusion).

На фиг.25 показано образование микротрубочек из тубулина в присутствии различных аналогов эпотилона при 37°C.On Fig shows the formation of microtubules from tubulin in the presence of various analogues of epothilone at 37 ° C.

На фиг.26 показано образование микротрубочек из тубулина в присутствии различных аналогов эпотилона при 4°C.On Fig shows the formation of microtubules from tubulin in the presence of various analogues of epothilone at 4 ° C.

На фиг.27 показано действие 9,10-дегидро-dEpoB и dEpoB на размер опухолей у мышей nude, несущих ксенотрансплантаты HCT-116 (в/в-инфузия, Q2Dx6).27 shows the effect of 9,10-dehydro-dEpoB and dEpoB on tumor size in nude mice bearing HCT-116 xenografts (iv infusion, Q2Dx6).

На фиг.28 показаны изменения массы тела у мышей nude, несущих ксенотрансплантаты HCT-116, после лечения 9,10-дегидро-dEpoB и dEpoB (в/в-инфузия, Q2Dx6).FIG. 28 shows changes in body weight in nude mice bearing HCT-116 xenografts after treatment with 9,10-dehydro-dEpoB and dEpoB (iv infusion, Q2Dx6).

На фиг.29 показано действие 9,10-дегидро-dEpoB на размер опухолей у мышей nude, несущих ксенотрансплантаты HCT-116 карциномы ободочной кишки человека (в/в-инфузия, Q3Dx4).Figure 29 shows the effect of 9,10-dehydro-dEpoB on tumor size in nude mice bearing HCT-116 xenografts of human colon carcinoma (iv infusion, Q3Dx4).

На фиг.30 показаны изменения массы тела мышей nude, несущих ксенотрансплантаты HCT-116 опухоли карциномы ободочной кишки человека, после лечения 9,10-дегидро-dEpoB (5 мг/кг, в/в-инфузия, X3Dx4).30 shows body weight changes of nude mice bearing xenografts of human colon carcinoma tumor HCT-116 after treatment with 9,10-dehydro-dEpoB (5 mg / kg, iv infusion, X3Dx4).

Фиг.31 представляет собой таблицу со значениями IC₅₀ для аналогов эпотилона по отношению к росту клеток CCRF-CEM.Fig is a table with IC ₅₀ values for epothilone analogues in relation to the growth of CCRF-CEM cells.

На фиг.32 показана метаболическая стабильность аналогов эпотилона in vitro.On Fig shows the metabolic stability of analogues of epothilone in vitro.

Фиг.33 представляет собой таблицу, детализирующую терапевтические эффекты различных аналогов эпотилона против ксенотрансплантатов опухолей человека у мышей в случае 6-часовой в/в-инфузии.Fig. 33 is a table detailing the therapeutic effects of various epothilone analogues against xenografts of human tumors in mice in the case of a 6-hour iv infusion.

На фиг.34 показано действие 9,10-дегидро-EpoB на размер опухолей у мышей nude, несущих ксенотрансплантат опухоли HCT-116 карциномы ободочной кишки человека (6-часовая в/в-инфузия, Q2Dx7).On Fig shows the effect of 9,10-dehydro-EpoB on the size of the tumors in nude mice bearing xenograft tumor HCT-116 human colon carcinoma of the colon (6-hour iv infusion, Q2Dx7).

На фиг.35 показаны изменения массы тела мышей nude, несущих ксенотрансплантаты опухоли HCT-116 карциномы ободочной кишки человека, после лечения 9,10-дегидро-EpoB и оксазол-EpoD (6-часовая инфузия, Q2Dx7).FIG. 35 shows body weight changes of nude mice bearing xenografts of human colon carcinoma HCT-116 tumor after treatment with 9,10-dehydro-EpoB and oxazole-EpoD (6-hour infusion, Q2Dx7).

На фиг.36 показано действие 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB и 9,10-дегидро-dEpoB на размер опухолей у мышей nude, несущих ксенотрансплантаты A549/Taxol (6-часовая в/в-инфузия, Q2Dx4).36 shows the effect of 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB and 9,10-dehydro-dEpoB on tumor size in nude mice bearing A549 / Taxol xenografts (6-hour iv infusion, Q2Dx4).

На фиг.37 показано действие 9,10-дегидро-dEpoB на размер опухолей у мышей nude, несущих ксенотрансплантаты A549/Taxol (6-часовая в/в-инфузия, Q3Dx3).37 shows the effect of 9,10-dehydro-dEpoB on tumor size in nude mice bearing A549 / Taxol xenografts (6-hour iv infusion, Q3Dx3).

На фиг.38 показана стабильность аналогов эпотилона в 20% плазме мышей/PBS.On Fig shows the stability of analogues of epothilone in 20% plasma of mice / PBS.

На фиг.39 показана стабильность аналогов эпотилона в 10% фракции S9 печени человека/PBS.On Fig shows the stability of analogues of epothilone in 10% fraction S9 of the human liver / PBS.

На фиг.40 показана хроматограмма стабильности EpoD в 10% печени человека S9/PBS.40 shows a chromatogram of the stability of EpoD in 10% human liver S9 / PBS.

На фиг.41 представлены таблицы, описывающие действие различных аналогов эпотилона на полимеризацию микротрубочек in vitro при 37°C в отсутствие GTP (A) и цитотоксичность различных аналогов эпотилона в линии клеток легкого человека A549 (B).On Fig presents tables describing the effect of various analogues of epothilone on the polymerization of microtubules in vitro at 37 ° C in the absence of GTP (A) and the cytotoxicity of various analogues of epothilone in human lung cell line A549 (B).

На фиг.42 показана стабилизация образования микротрубочек эпотилонами при 35°C и 4°C.On Fig shows the stabilization of the formation of microtubules by epothilones at 35 ° C and 4 ° C.

На фиг.43 показано терапевтическое действие 9,10-дегидро-dEpoB у мышей nude, несущих ксенотрансплантат карциномы молочной железы человека T (MX-1) (6-часовая инфузия, Q2Dx5).FIG. 43 shows the therapeutic effect of 9,10-dehydro-dEpoB in nude mice bearing a T (MX-1) human breast carcinoma xenograft (6-hour infusion, Q2Dx5).

На фиг.44 показано изменение массы тела мышей nude, несущих ксенотрансплантат карциномы молочной железы человека (MX-1), после лечения 9,10-дегидро-dEpoB (6-часовая инфузия, Q2Dx8).On Fig shows the change in body weight of nude mice bearing the xenograft of human breast carcinoma (MX-1), after treatment with 9,10-dehydro-dEpoB (6-hour infusion, Q2Dx8).

На фиг.45 показано изменение массы тела мышей nude, несущих ксенотрансплантат HCT-116, после лечения 9,10-дегидро-dEpoB (в/в-инфузия, Q2Dx7).On Fig shows the change in body weight of nude mice bearing the xenograft HCT-116, after treatment with 9,10-dehydro-dEpoB (iv infusion, Q2Dx7).

На фиг.46 показано терапевтическое действие 9,10-дегидро-dEpoF, dEpoB и таксола на размер опухолей у мышей nude, несущих ксенотрансплантат опухоли карциномы молочной железы человека (MX-1) (6-часовая в/в-инфузия, Q2Dx6).On Fig shows the therapeutic effect of 9,10-dehydro-dEpoF, dEpoB and taxol on the size of the tumors in nude mice bearing xenograft tumors of human breast carcinoma (MX-1) (6-hour iv infusion, Q2Dx6).

На фиг.47 показаны изменения массы тела мышей nude, несущих ксенотрансплантат опухоли карциномы молочной железы человека (MX-1), после лечения 9,10-дегидро-dEpoF, dEpoB и таксолом (6-часовая инфузия, Q2Dx6).FIG. 47 shows body weight changes of nude mice bearing a xenograft of a human breast carcinoma tumor (MX-1) after treatment with 9,10-dehydro-dEpoF, dEpoB and taxol (6-hour infusion, Q2Dx6).

На фиг.48 показано терапевтическое действие 9,10-дегидро-dEpoF и dEpoB у мышей nude, несущих ксенотрансплантат HCT-116 карциномы ободочной кишки человека (6-часовая инфузия, Q2Dx8).On Fig shows the therapeutic effect of 9,10-dehydro-dEpoF and dEpoB in nude mice bearing xenograft HCT-116 human colon carcinoma of the colon (6-hour infusion, Q2Dx8).

На фиг.49 показаны изменения массы тела мышей nude, несущих ксенотрансплантат HCT-116, после лечения 9,10-дегидро-dEpoF и dEpoB (6-часовая инфузия, Q2Dx8).On Fig shows the changes in body weight of nude mice bearing the xenograft HCT-116, after treatment with 9,10-dehydro-dEpoF and dEpoB (6-hour infusion, Q2Dx8).

На фиг.50 показано терапевтическое действие 9,10-дегидро-dEpoF и dEpoB у мышей nude, несущих ксенотрансплантат резистентной к таксолу карциномы легкого человека (A549/Taxol) (6-часовая инфузия, Q2Dx5).Fig. 50 shows the therapeutic effect of 9,10-dehydro-dEpoF and dEpoB in nude mice bearing a taxol resistant taxol carcinoma of a human lung (A549 / Taxol) (6-hour infusion, Q2Dx5).

На фиг.51 показаны изменения массы тела мышей nude, несущих ксенотрансплантат резистентной к таксолу карциномы легкого человека (A549/Taxol), после лечения 9,10-дегидро-dEpoF и dEpoB (6-часовая инфузия, Q2Dx5).Figure 51 shows the body weight changes of nude mice bearing a taxol-resistant human lung carcinoma xenograft (A549 / Taxol) after treatment with 9,10-dehydro-dEpoF and dEpoB (6-hour infusion, Q2Dx5).

Фиг.52 представляет собой таблицу сравнения эффективности различных аналогов эпотилона по отношению к ингибированию опухолевого роста in vitro и относительному терапевтическому индексу.Fig. 52 is a table comparing the efficacy of various epothilone analogs with respect to in vitro tumor growth inhibition and relative therapeutic index.

На фиг.53 показано терапевтическое действие 9,10-дегидро-dEpoB у мышей nude, несущих ксенотрансплантат MX-1 (Q3Dx9, 6-часовая в/в-инфузия).On Fig shows the therapeutic effect of 9,10-dehydro-dEpoB in nude mice bearing xenograft MX-1 (Q3Dx9, 6-hour iv infusion).

На фиг.54 показаны изменения массы тела мышей nude, несущих ксенотрансплантат MX-1, после лечения 9,10-дегидро-dEpoB (Q3Dx9, 6-часовая в/в-инфузия).On Fig shows the changes in body weight of nude mice bearing xenograft MX-1, after treatment with 9,10-dehydro-dEpoB (Q3Dx9, 6-hour intravenous infusion).

На фиг.55 показано терапевтическое действие 9,10-дегидроэпотилона B у мышей nude, несущих ксенотрансплантат MX-1 (Q3Dx9, 6-часовая инфузия).55 shows the therapeutic effect of 9,10-dehydroepotilon B in nude mice bearing the MX-1 xenograft (Q3Dx9, 6-hour infusion).

На фиг.56 показаны изменения массы тела мышей nude, несущих ксенотрансплантат MX-1, после лечения 9,10-дегидроэпотилоном B (Q3Dx9, 6-часовая в/в-инфузия).On Fig shows the changes in body weight of nude mice bearing the xenograft MX-1, after treatment with 9,10-dehydroepotilone B (Q3Dx9, 6-hour iv infusion).

На фиг.57 показано терапевтическое действие низких доз 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB у мышей nude, несущих ксенотрансплантат MX-1 (6-часовая в/в-инфузия, Q2Dx12).Fig. 57 shows the therapeutic effect of low doses of 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB in nude mice bearing MX-1 xenograft (6-hour iv infusion, Q2Dx12).

На фиг.58 показаны изменения массы тела мышей nude, несущих ксенотрансплантат MX-1, после лечения низкими дозами 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB (6-часовая в/в-инфузия, Q2Dx12).On Fig shows the changes in body weight of nude mice bearing xenograft MX-1, after treatment with low doses of 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB (6-hour iv infusion, Q2Dx12).

На фиг.59 показано химиотерапевтическое действие аналогов эпотилона против ксенотрансплантатов опухолей человека у мышей nude. Ткань опухоли (40-50 мг) имплантировали п/к в день 0. Лечение начинали, когда размер опухоли достигал примерно 100 мм³ или больше, как указано. Все обработки, которые указаны стрелками, проводили с помощью 6-часовой в/в-инфузии через хвостовую вену, используя миникатетер и программируемый насос, как описано ранее (Su, D.-S. et al, Angew. Chem. Int. Ed. 1997, 36, 2093; Chou, T. C. et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998, 95, 15798; каждая публикация включена в данное описание в виде ссылки). Каждая группа дозирования состояла из четырех или более мышей. Массой тела называли суммарную массу тела минус массу опухоли, полагая, что 1 мм³ опухоли равен 1 мг опухолевой ткани. A. Ксенотрансплантат карциномы молочной железы MX-1, обработанный низкими дозами 25-трифтор-(E)-9,10-дегидро-12,13-дезоксиEpoB (10 мг/кг) при сравнении с обработками в таблице 1 (20 мг/кг и 30 мг/кг). B. Крупные ксенотрансплантаты MX-1 (500 мм³) обрабатывали 25-трифтор-(E)-9,10-дегидро-12,13-дезоксиEpoB (25 мг/кг) и dEpoB (30 мг/кг). C. Медленно растущий ксенотрансплантат карциномы легкого A549, обработанный 25-трифтор-(E)-9,10-дегидро-12,13-дезоксиEpoB (25 мг/кг) и dEpoB (30 мг/кг). D. Ксенотрансплантат A549/Taxol (44-кратная резистентность к паклитакселу in vitro), обработанный 25-трифтор-(E)-9,10-дегидро-12,13-дезоксиEpoB (20 мг/кг) и (E)-9,10-дегидро-12,13-дезоксиEpoB (4 мг/кг). Обработка deH-dEpoB на 28 день была пропущена вследствие заметного и быстрого снижения массы тела.On Fig shows the chemotherapeutic effect of epothilone analogues against xenografts of human tumors in nude mice. Tumor tissue (40-50 mg) was implanted sc daily on day 0. Treatment was started when the tumor size reached about 100 mm ³ or more, as indicated. All treatments indicated by arrows were performed using a 6-hour iv infusion through the tail vein using a mini-catheter and a programmable pump as previously described (Su, D.-S. et al, Angew. Chem. Int. Ed. 1997, 36, 2093; Chou, TC et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998, 95, 15798; each publication is incorporated herein by reference). Each dosing group consisted of four or more mice. The body mass was called the total body mass minus the mass of the tumor, assuming that 1 mm ^{3 of the} tumor is equal to 1 mg of tumor tissue. A. MX-1 breast carcinoma xenograft treated with low doses of 25-trifluoro- (E) -9,10-dehydro-12,13-deoxyEpoB (10 mg / kg) when compared with the treatments in table 1 (20 mg / kg and 30 mg / kg). B. Large xenografts MX-1 (500 mm ³ ) were treated with 25-trifluoro- (E) -9,10-dehydro-12,13-deoxyEpoB (25 mg / kg) and dEpoB (30 mg / kg). C. Slow-growing A549 lung carcinoma xenograft treated with 25-trifluoro- (E) -9,10-dehydro-12,13-deoxyEpoB (25 mg / kg) and dEpoB (30 mg / kg). D. A549 / Taxol xenograft (44-fold in vitro resistance to paclitaxel) treated with 25-trifluoro- (E) -9,10-dehydro-12,13-deoxyEpoB (20 mg / kg) and (E) -9, 10-dehydro-12,13-deoxyEpoB (4 mg / kg). Treatment with deH-dEpoB on day 28 was skipped due to a noticeable and rapid decrease in body weight.

На фиг.60 изображен синтез C-21-модифицированных 9,10-(E)-дегидроэпотилонов. На фиг.60A показан синтез 26-трифтор-21-метиламино-9,10-(E)-дегидро-12,13-дезоксиэпотилона B. Фиг.60B является схемой синтеза для получения 26-трифтор-21-амино-9,10-(E)-дегидро-12,13-дезоксиэпотилона B в качестве промежуточного продукта синтеза 26-трифтор-21-диметиламино-9,10-(E)-дегидро-12,13-дезоксиэпотилона B.On Fig depicts the synthesis of C-21-modified 9,10- (E) -dehydroepotilon. Fig. 60A shows the synthesis of 26-trifluoro-21-methylamino-9,10- (E) -dehydro-12,13-deoxyepothilone B. Fig. 60B is a synthesis scheme for producing 26-trifluoro-21-amino-9,10 - (E) -dehydro-12,13-deoxyepothilone B as an intermediate in the synthesis of 26-trifluoro-21-dimethylamino-9,10- (E) -dehydro-12,13-deoxyepothilone B.

Фиг.61 представляет собой таблицу со значениями IC₅₀ для C-21-модифицированных эпотилонов по отношению к линии опухолевых клеток CCRF-CEM и ее подлиний, резистентных к лекарственным средствам.Fig. 61 is a table with IC ₅₀ values for C-21-modified epothilones with respect to the tumor cell line CCRF-CEM and its drug resistant lines.

На фиг.62 показано терапевтическое действие 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB и таксола у мышей nude, несущих ксенотрансплантат T-клеточного лимфобластного лейкоза человека CCRF-CEM (6-часовая в/в-инфузия, Q2Dx8).62 shows the therapeutic effect of 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB and taxol in nude mice bearing a CCRF-CEM human T-cell lymphoblastic leukemia xenograft (6-hour iv infusion, Q2Dx8).

На фиг.63 показаны изменения массы тела у мышей nude, несущих ксенотрансплантат T-клеточного лимфобластного лейкоза человека CCRF-CEM, после лечения 25-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB и таксолом (6-часовая в/в-инфузия, Q2Dx8).63 shows body weight changes in nude mice bearing a CCRF-CEM human T-cell lymphoblastic leukemia xenograft after treatment with 25-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB and Taxol (6-hour iv infusion, Q2Dx8 )

На фиг.64 показано терапевтическое действие 26-трифтор-9, 10-дегидро-dEpoB и таксола у мышей nude, несущих ксенотрансплантат T-клеточного лимфобластного лейкоза человека CCRF-CEM/Taxol (резистентный к таксолу) (6-часовая в/в-инфузия, Q2Dx7, x5).On Fig shows the therapeutic effect of 26-trifluoro-9, 10-dehydro-dEpoB and taxol in nude mice bearing a CCRF-CEM / Taxol (taxol-resistant) T-cell lymphoblastic leukemia xenograft (6-hour iv) infusion, Q2Dx7, x5).

На фиг.65 показаны изменения массы тела у мышей nude, несущих ксенотрансплантат T-клеточного лимфобластного лейкоза человека CCRF-CEM/Taxol (резистентный к таксолу), после лечения 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB и таксолом (6-часовая в/в-инфузия, Q2Dx7, x5).65 shows body weight changes in nude mice bearing a CCRF-CEM / Taxol (taxol-resistant) human T-cell lymphoblastic leukemia xenograft after treatment with 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB and taxol (6 hours) iv infusion, Q2Dx7, x5).

На фиг.66 показано терапевтическое действие 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB и таксола у мышей nude, несущих ксенотрансплантат карциномы ободочной кишки человека HCT-116 (Q2Dx4, x2, 6-часовая в/в-инфузия).Fig. 66 shows the therapeutic effect of 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB and Taxol in nude mice bearing a HCT-116 human colon carcinoma xenograft (Q2Dx4, x2, 6-hour iv infusion).

На фиг.67 показаны изменения массы тела у мышей nude, несущих ксенотрансплантат карциномы ободочной кишки человека HCT-116, после лечения 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB и таксолом (Q2Dx4, x2, 6-часовая в/в-инфузия).Fig. 67 shows body weight changes in nude mice bearing the HCT-116 human colon carcinoma xenograft after treatment with 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB and Taxol (Q2Dx4, x2, 6-hour iv infusion )

На фиг.68 показано терапевтическое действие 9,10-дегидро-EpoB у мышей nude, несущих ксенотрансплантат MX-1 (6-часовая в/в-инфузия).On Fig shows the therapeutic effect of 9,10-dehydro-EpoB in nude mice bearing xenograft MX-1 (6-hour iv infusion).

На фиг.69 показаны изменения массы тела у мышей nude, несущих ксенотрансплантат карциномы молочной железы человека MX-1, после лечения 9,10-дегидро-EpoB (6-часовая инфузия в/в-инфузия).69 shows body weight changes in nude mice bearing the MX-1 human mammary carcinoma xenograft after treatment with 9,10-dehydro-EpoB (6-hour iv infusion).

На фиг.70 показано терапевтическое действие 9,10-дегидро-EpoB у мышей nude, несущих ксенотрансплантат T-клеточного лимфобластного лейкоза человека CCRF-CEM/Taxol (резистентный к таксолу) (6-часовая в/в-инфузия, Q3Dx5, x2).70 shows the therapeutic effect of 9,10-dehydro-EpoB in nude mice bearing a CCRF-CEM / Taxol (taxol-resistant) T-cell lymphoblastic leukemia xenograft (6-hour iv infusion, Q3Dx5, x2) .

На фиг.71 показаны изменения массы тела у мышей nude, несущих ксенотрансплантат T-клеточного лимфобластного лейкоза человека CCRF-CEM/Taxol (резистентный к таксолу), после лечения 9,10-дегидро-EpoB (6-часовая в/в-инфузия, Q3Dx5, x2).71 shows body weight changes in nude mice bearing a CCRF-CEM / Taxol (Taxol-resistant) human T-cell lymphoblastic leukemia xenograft after treatment with 9,10-dehydro-EpoB (6-hour iv infusion, Q3Dx5, x2).

На фиг.72 показано терапевтическое действие 26-трифтор-dEpoB и 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoF у мышей nude, несущих ксенотрансплантат карциномы молочной железы человека MX-1 (Q2Dx11, в/в-инъекция).72 shows the therapeutic effect of 26-trifluoro-dEpoB and 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoF in nude mice bearing the MX-1 human mammary carcinoma xenograft (Q2Dx11, iv injection).

На фиг.73 показаны изменения массы тела у мышей nude, несущих ксенотрансплантат карциномы молочной железы человека MX-1, после лечения 26-трифтор-dEpoB и 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoF (Q2Dx11, в/в-инъекция).73 shows body weight changes in nude mice bearing the MX-1 human mammary carcinoma xenograft after treatment with 26-trifluoro-dEpoB and 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoF (Q2Dx11, iv injection) .

На фиг.74 показано терапевтическое действие 9,10-дегидро-dEpoB у мышей nude, несущих ксенотрансплантат карциномы молочной железы человека MX-1 (Q3Dx9, 6-часовая в/в-инфузия).On Fig shows the therapeutic effect of 9,10-dehydro-dEpoB in nude mice bearing the x-transplant of human breast carcinoma MX-1 (Q3Dx9, 6-hour iv infusion).

На фиг.75 показаны изменения массы тела у мышей nude, несущих ксенотрансплантат карциномы молочной железы человека MX-1, после лечения 9,10-дегидро-dEpoB (Q3Dx9, 6-часовая в/в-инфузия).Fig. 75 shows body weight changes in nude mice bearing the MX-1 human breast carcinoma xenograft after treatment with 9,10-dehydro-dEpoB (Q3Dx9, 6-hour iv infusion).

На фиг.76 показано терапевтическое действие 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoF у мышей nude, несущих ксенотрансплантат карциномы легкого человека (MX-1) (6-часовая в/в-инфузия и в/в-инъекция).76 shows the therapeutic effect of 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoF in nude mice bearing a human lung carcinoma xenograft (MX-1) (6-hour iv infusion and iv injection).

На фиг.77 показаны изменения массы тела у мышей nude, несущих ксенотрансплантат MX-1, после лечения 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoF (6-часовая в/в-инфузия и в/в-инъекция).On Fig shows body weight changes in nude mice bearing the xenograft MX-1, after treatment with 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoF (6-hour intravenous infusion and intravenous injection).

ОпределенияDefinitions

Некоторые предлагаемые в данном изобретении соединения и определения конкретных функциональных групп также описаны более подробно ниже. В данном изобретении химические элементы идентифицированы в соответствии с Периодической таблицей элементов, CAS-версия, Handbook of Chemistry and Physics, 75^th Ed., внутренняя сторона обложки, и конкретные функциональные группы, как правило, определяют, как описано в данной заявке. Кроме того, общие принципы органической химии, а также конкретные функциональные остатки и химическая активность описаны в «Organic Chemistry», Thomas Sorrel, University Science Books, Sausalito: 1999, полное содержание которой включено в данное описание в виде ссылки. Кроме того, специалисту в данной области будет понятно, что в способах синтеза, которые приведены в данном описании, используется ряд защитных групп. Под термином «защитная группа», используемым в данном описании, подразумевается, что конкретный функциональный остаток, например O, S или N, временно блокируют, так чтобы реакция осуществлялась избирательно в другом химически активном сайте в многофункциональном соединении. В предпочтительных вариантах защитная группа избирательно взаимодействует, с хорошим выходом давая защищенный субстрат, который стабилен по отношению к намеченным реакциям; защитная группа должна избирательно удаляться с хорошим выходом легко доступными, предпочтительно нетоксичными реагентами, которые не воздействуют на другие функциональные группы; защитная группа образует легко отделяемое производное (более предпочтительно без образования новых стереогенных центров); и защитная группа имеет минимум дополнительной функциональности, чтобы избежать дополнительных реакционных сайтов. Как подробно изложено в данном описании, можно использовать защитные группы кислорода, серы, азота и углерода. Примеры защитных групп подробно указаны в данном описании, однако, будет понятно, что это не означает, что данное изобретение ограничивается указанными защитными группами; точнее множество дополнительных эквивалентных защитных групп можно легко идентифицировать, используя указанные выше критерии, и использовать в способе, предлагаемом в данном изобретении. Кроме того, ряд защитных групп описаны в «Protective Groups in Organic Synthesis» Third Ed. Greene, T. W. and Wuts, P.G., Eds., John Wiley and Sons, New York: 1999, полное содержание которой тем самым включено в виде ссылки.Some compounds and definitions of specific functional groups of the invention are also described in more detail below. In this invention, the chemical elements are identified in accordance with the Periodic Table of the Elements, CAS-version, Handbook of Chemistry and Physics, 75 ^th Ed., Inside cover, and specific functional groups are generally defined as described herein. In addition, the general principles of organic chemistry, as well as specific functional residues and chemical activity are described in Organic Chemistry, Thomas Sorrel, University Science Books, Sausalito: 1999, the entire contents of which are incorporated herein by reference. In addition, one of ordinary skill in the art will recognize that a number of protecting groups are used in the synthesis methods described herein. By the term “protecting group” as used herein, it is meant that a particular functional residue, for example O, S or N, is temporarily blocked so that the reaction is carried out selectively at another chemically active site in the multifunctional compound. In preferred embodiments, the protective group selectively interacts, with a good yield, giving a protected substrate that is stable with respect to the intended reactions; the protective group must be selectively removed in good yield with readily available, preferably non-toxic, reagents that do not affect other functional groups; the protective group forms an easily detachable derivative (more preferably without the formation of new stereogenic centers); and the protecting group has a minimum of additional functionality to avoid additional reaction sites. As described in detail in this description, you can use the protective group of oxygen, sulfur, nitrogen and carbon. Examples of protecting groups are detailed in this description, however, it will be understood that this does not mean that the invention is limited to said protecting groups; more precisely, many additional equivalent protective groups can be easily identified using the above criteria and used in the method proposed in this invention. In addition, a number of protective groups are described in "Protective Groups in Organic Synthesis" Third Ed. Greene, TW and Wuts, PG, Eds., John Wiley and Sons, New York: 1999, the entire contents of which are hereby incorporated by reference.

Будет понятно, что соединения, которые указаны в описании, могут быть замещены любым количеством заместителей или функциональных остатков. В общем, термин «замещенный», которому предшествует или не предшествует термин «необязательно», и заместители, входящие в формулы согласно данному изобретению, относятся к замене водородных радикалов в данной структуре радикалом определенного заместителя. В том случае, когда в какой-либо данной структуре могут быть замещены более одного положения более чем одним заместителем, выбранным из определенной группы, заместители во всех положениях могут быть либо одинаковыми, либо разными. В используемом в данном описании смысле предполагается, что термин «замещенный» включает в себя все допустимые заместители органических соединений. В широком аспекте допустимые заместители включают ациклические и циклические, разветвленные и неразветвленные, карбоциклические и гетероциклические, ароматические и неароматические заместители органических соединений. В настоящем изобретении гетероатомы, такие как азот, могут иметь водородные заместители и/или любые допустимые заместители органических соединений, описанных в данной публикации, которые удовлетворяют валентностям гетероатомов. Кроме того, подразумевается, что данное изобретение никоим образом не ограничено допустимыми заместителями органических соединений. Комбинациями заместителей и переменных, предполагаемых в данном изобретении, предпочтительно являются комбинации, которые приводят к образованию стабильных соединений, применимых для лечения, например, пролиферативных расстройств, включая, но не ограничивая указанным, злокачественную опухоль. Термин «стабильное», используемый в данном описании, предпочтительно относится к соединениям, которые обладают стабильностью, достаточной для того, чтобы обеспечить возможность производства, и которые сохраняют целостность соединения в течение периода времени, достаточного для его регистрации, и предпочтительно в течение периода времени, достаточного для его использования в целях, подробно указанных в данном описании.It will be understood that the compounds described herein may be substituted with any number of substituents or functional residues. In general, the term “substituted”, which is preceded or not preceded by the term “optionally”, and the substituents in the formulas of this invention refer to the replacement of hydrogen radicals in a given structure with a radical of a particular substituent. In the event that in any given structure more than one position may be substituted by more than one substituent selected from a particular group, the substituents in all positions may be either the same or different. As used herein, the term “substituted” is intended to include all acceptable substituents of organic compounds. In a broad aspect, acceptable substituents include acyclic and cyclic, branched and unbranched, carbocyclic and heterocyclic, aromatic and non-aromatic substituents of organic compounds. In the present invention, heteroatoms such as nitrogen may have hydrogen substituents and / or any permissible substituents of the organic compounds described in this publication that satisfy the valencies of the heteroatoms. In addition, it is understood that the invention is in no way limited to permissible substituents of organic compounds. Combinations of substituents and variables contemplated by this invention are preferably combinations that result in stable compounds useful for treating, for example, proliferative disorders, including, but not limited to, a malignant tumor. The term "stable", as used herein, preferably refers to compounds that are stable enough to allow production and that maintain the integrity of the compound for a period of time sufficient to register it, and preferably for a period of time, sufficient for its use for the purposes specified in detail in this description.

Термин «алифатический» в используемом в данном описании смысле включает в себя как насыщенные, так и ненасыщенные, с прямой цепью (т.е. неразветвленные), разветвленные, циклические или полициклические алифатические углеводороды, которые необязательно замещены одной или несколькими функциональными группами. Как будет понятно специалисту в данной области, в данном описании подразумевается, что термин «алифатический» включает, но не ограничен указанным, алкильный, алкенильный, алкинильный, циклоалкильный, циклоалкенильный и циклоалкинильный остатки. Таким образом, используемый в данном описании термин «алкил» включает неразветвленные, разветвленные и циклические алкильные группы. Аналогичное условие применимо к другим общим терминам, таким как «алкенил», «алкинил» и тому подобным. Кроме того, используемые в данном описании термины «алкил», «алкенил», «алкинил» и тому подобные охватывают как замещенные, так и незамещенные группы. В некоторых вариантах используемый в данном описании термин «низший алкил» используют для указания алкильных групп (циклических, ациклических, замещенных, незамещенных, разветвленных или неразветвленных), имеющих 1-6 атомов углерода.The term “aliphatic,” as used herein, includes both saturated and unsaturated, straight chain (ie, unbranched), branched, cyclic or polycyclic aliphatic hydrocarbons that are optionally substituted with one or more functional groups. As will be clear to a person skilled in the art, in this description it is understood that the term "aliphatic" includes, but is not limited to, alkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, cycloalkenyl and cycloalkynyl residues. Thus, as used herein, the term “alkyl” includes straight, branched and cyclic alkyl groups. A similar condition applies to other general terms, such as "alkenyl", "alkynyl" and the like. In addition, the terms “alkyl,” “alkenyl,” “alkynyl,” and the like, as used herein, encompass both substituted and unsubstituted groups. In some embodiments, the term “lower alkyl” as used herein is used to indicate alkyl groups (cyclic, acyclic, substituted, unsubstituted, branched or unbranched) having 1-6 carbon atoms.

В некоторых вариантах алкильные, алкенильные и алкинильные группы, используемые в изобретении, содержат 1-20 алифатических атомов углерода. В некоторых других вариантах алкильные, алкенильные и алкинильные группы, используемые в изобретении, содержат 1-10 алифатических атомов углерода. В других вариантах алкильные, алкенильные и алкинильные группы, используемые в изобретении, содержат 1-8 алифатических атомов углерода. В следующих вариантах алкильные, алкенильные и алкинильные группы, используемые в изобретении, содержат 1-6 алифатических атомов углерода. Кроме того, в других вариантах алкильные, алкенильные и алкинильные группы, используемые в изобретении, содержат 1-4 атома углерода. Таким образом, иллюстративные алифатические группы включают, но не ограничены указанным, например, остатки метила, этила, н-пропила, изопропила, циклопропила, -CH₂-циклопропила, аллила, н-бутила, втор-бутила, изобутила, трет-бутила, циклобутила, -CH₂-циклобутила, н-пентила, втор-пентила, изопентила, трет-пентила, циклопентила, -CH₂-циклопентила, н-гексила, втор-гексила, циклогексила, -CH₂-циклогексила и тому подобные, которые к тому же могут нести один или несколько заместителей. Алкенильные группы включают, но не ограничены указанным, например, этенил, пропенил, бутенил, 1-метил-2-бутен-1-ил и тому подобное. Типичные алкинильные группы включают, но не ограничены указанным, этинил, 2-пропинил (пропаргил), 1-пропинил и тому подобные.In some embodiments, the alkyl, alkenyl and alkynyl groups used in the invention contain 1-20 aliphatic carbon atoms. In some other embodiments, the alkyl, alkenyl and alkynyl groups used in the invention contain 1-10 aliphatic carbon atoms. In other embodiments, the alkyl, alkenyl and alkynyl groups used in the invention contain 1-8 aliphatic carbon atoms. In the following embodiments, the alkyl, alkenyl and alkynyl groups used in the invention contain 1-6 aliphatic carbon atoms. In addition, in other embodiments, the alkyl, alkenyl and alkynyl groups used in the invention contain 1-4 carbon atoms. Thus, illustrative aliphatic groups include, but are not limited to, for example, residues of methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, cyclopropyl, -CH ₂ -cyclopropyl, allyl, n-butyl, sec-butyl, isobutyl, tert-butyl, cyclobutyl, -CH ₂ -cyclobutyl, n-pentyl, sec-pentyl, isopentyl, tert-pentyl, cyclopentyl, -CH ₂ -cyclopentyl, n-hexyl, sec-hexyl, cyclohexyl, -CH ₂ -cyclohexyl and the like, which in addition, one or more substituents may be carried. Alkenyl groups include, but are not limited to, for example, ethenyl, propenyl, butenyl, 1-methyl-2-buten-1-yl and the like. Typical alkynyl groups include, but are not limited to, ethynyl, 2-propynyl (propargyl), 1-propynyl, and the like.

Термин «алкоксигруппа» или «тиоалкил», используемый в данном описании, относится к алкильной группе, которая определена ранее, связанной с остатком родительской молекулы через атом кислорода или через атом серы. В некоторых вариантах алкильная группа содержит 1-20 алифатических атомов углерода. В некоторых других вариантах алкильная группа содержит 1-10 алифатических атомов углерода. В других вариантах алкильные, алкенильные и алкинильные группы, используемые в изобретении, содержат 1-8 алифатических атомов углерода. В следующих вариантах алкильная группа содержит 1-6 алифатических атомов углерода. В других вариантах алкильная группа содержит 1-4 алифатических атома углерода. Примеры алкоксигрупп включают, но не ограничены указанным, метокси-, этокси-, пропокси-, изопропокси-, н-бутокси-, трет-бутокси, неопентокси- и н-гексоксигруппу. Примеры тиоалкила включают, но не ограничены указанным, метилтио-, этилтио-, пропилтио-, изопропилтио-, н-бутилтиогруппу и тому подобные.The term “alkoxy group” or “thioalkyl,” as used herein, refers to an alkyl group, as previously defined, linked to the remainder of the parent molecule through an oxygen atom or through a sulfur atom. In some embodiments, the alkyl group contains 1-20 aliphatic carbon atoms. In some other embodiments, the alkyl group contains 1-10 aliphatic carbon atoms. In other embodiments, the alkyl, alkenyl and alkynyl groups used in the invention contain 1-8 aliphatic carbon atoms. In the following embodiments, the alkyl group contains 1-6 aliphatic carbon atoms. In other embodiments, the alkyl group contains 1-4 aliphatic carbon atoms. Examples of alkoxy groups include, but are not limited to, methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy, n-butoxy, tert-butoxy, neopentoxy and n-hexoxy. Examples of thioalkyl include, but are not limited to, methylthio, ethylthio, propylthio, isopropylthio, n-butylthio and the like.

Термин «алкиламиногруппа» относится к группе, имеющей структуру -NHR', где R' означает алкил, который определен в данном описании. В некоторых вариантах алкильная группа содержит 1-20 алифатических атомов углерода. В некоторых других вариантах алкильная группа содержит 1-10 алифатических атомов углерода. В других вариантах алкильные, алкенильные и алкинильные группы, используемые в изобретении, содержат 1-8 алифатических атомов углерода. В следующих вариантах алкильная группа содержит 1-6 алифатических атомов углерода. В других вариантах алкильная группа содержит 1-4 алифатических атомов углерода. Примеры алкиламиногрупп включают, но не ограничены, метиламино-, этиламино-, изо-пропиламиногруппой и тому подобными.The term “alkylamino group” refers to a group having the structure —NHR ′, where R ′ is alkyl, as defined herein. In some embodiments, the alkyl group contains 1-20 aliphatic carbon atoms. In some other embodiments, the alkyl group contains 1-10 aliphatic carbon atoms. In other embodiments, the alkyl, alkenyl and alkynyl groups used in the invention contain 1-8 aliphatic carbon atoms. In the following embodiments, the alkyl group contains 1-6 aliphatic carbon atoms. In other embodiments, the alkyl group contains 1-4 aliphatic carbon atoms. Examples of alkylamino groups include, but are not limited to, methylamino, ethylamino, iso-propylamino and the like.

Некоторые примеры заместителей описанных выше алифатических (и других) остатков соединений, предлагаемых в изобретении, включают, но не ограничены указанным, алифатическую группу; гетероалифатическую группу; арил; гетероарил; арилалкил; гетероарилалкил; алкоксигруппу; арилоксигруппу; гетероалкоксигруппу; гетероарилоксигруппу; алкилтиогруппу; арилтиогруппу; гетероалкилтиогруппу; гетероарилтиогруппу; F; Cl; Br; I; -OH; -NO₂; -CN; -CF₃; -CH₂CF₃; -CHCl₂; -CH₂OH; -CH₂CH₂OH; -CH₂NH₂; -CH₂SO₂CH₃; -C(O)R_X; -CO₂(R_X); -CON(R_X)₂; -OC(O)R_X; -OCO₂R_X; -OCON(R_X)₂; -N(R_X)₂; -S(O)₂R_X; -NR_X(CO)R_X, где в каждом случае R_X независимо включает, но не ограничен указанным, алифатическую группу, гетероалифатическую группу, арил, гетероарил, арилалкил или гетероарилалкил, где любой из алифатических, гетероалифатических, арилалкильных или гетероарилалкильных заместителей, описанных выше и в данном случае, может быть замещенным или незамещенным, разветвленным или неразветвленным, циклическим или ациклическим, и где любой из арильных или гетероарильных заместителей, описанных выше и в данном случае, может быть замещенным или незамещенным. Дополнительные примеры обычно применимых заместителей иллюстрированы конкретными вариантами, показанными в примерах, которые приведены в данном описании.Some examples of substituents of the above aliphatic (and other) residues of the compounds of the invention include, but are not limited to, an aliphatic group; heteroaliphatic group; aryl; heteroaryl; arylalkyl; heteroarylalkyl; alkoxy group; aryloxy group; heteroalkoxy; heteroaryloxy group; alkylthio group; arylthio group; heteroalkylthio group; heteroarylthio; F; Cl; Br; I; -OH; -NO ₂ ; -CN; -CF ₃ ; -CH ₂ CF ₃ ; -CHCl ₂ ; -CH ₂ OH; -CH ₂ CH ₂ OH; -CH ₂ NH ₂ ; -CH ₂ SO ₂ CH ₃ ; -C (O) R _X ; -CO ₂ (R _X ); -CON (R _X ) ₂ ; -OC (O) R _X ; -OCO ₂ R _X ; -OCON (R _X ) ₂ ; -N (R _X ) ₂ ; -S (O) ₂ R _X ; —NR _X (CO) R _X , where in each case R _X independently includes, but is not limited to, an aliphatic group, a heteroaliphatic group, aryl, heteroaryl, arylalkyl or heteroarylalkyl, where any of aliphatic, heteroaliphatic, arylalkyl or heteroarylalkyl substituents, above and in this case, may be substituted or unsubstituted, branched or unbranched, cyclic or acyclic, and where any of the aryl or heteroaryl substituents described above and in this case may be substituted or not schennym. Additional examples of commonly used substituents are illustrated by the specific options shown in the examples that are given in this description.

Термины «арил» и «гетероарил», используемые в данном описании, относятся к стабильным моно- или полициклическим, гетероциклическим, полициклическим и полигетероциклическим ненасыщенным остаткам, имеющим предпочтительно 3-14 атомов углерода, каждый из которых может быть замещенным или незамещенным. Заместители включают без ограничения любой из ранее упомянутых заместителей, т.е. заместителей, перечисленных для алифатических остатков или для других остатков, которые описаны в данной публикации, которые приводят к образованию стабильного соединения. В некоторых вариантах осуществления данного изобретения «арил» относится к моно- или бициклической карбоциклической кольцевой системе, имеющей одно или два ароматических кольца, включая, но не ограничиваясь указанным, фенил, нафтил, тетрагидронафтил, индалил, инденил и тому подобное. В некоторых вариантах осуществления данного изобретения термин «гетероарил», используемый в данном описании, относится к циклическому ароматическому радикалу, имеющему от пяти до десяти атомов в цикле, из которых один атом в цикле выбран из S, O и N; ноль, один или два атома в цикле являются дополнительными гетероатомами, независимо выбранными из S, O и N; и остальные атомы в цикле являются атомами углерода, при этом радикал связан с остальной частью молекулы посредством любого атома в цикле, например, такой как пиридил, пиразинил, пиримидинил, пирролил, пиразолил, имидазолил, тиазолил, оксазолил, изооксазолил, тиадиазолил, оксадиазолил, тиофенил, фуранил, хинолинил, изохинолинил и тому подобное.The terms “aryl” and “heteroaryl”, as used herein, refer to stable mono- or polycyclic, heterocyclic, polycyclic and polyheterocyclic unsaturated residues having preferably 3-14 carbon atoms, each of which may be substituted or unsubstituted. Substituents include without limitation any of the previously mentioned substituents, i.e. substituents listed for aliphatic residues or for other residues that are described in this publication, which lead to the formation of a stable compound. In some embodiments of the invention, “aryl” refers to a mono- or bicyclic carbocyclic ring system having one or two aromatic rings, including, but not limited to, phenyl, naphthyl, tetrahydronaphthyl, indalyl, indenyl, and the like. In some embodiments, the term “heteroaryl,” as used herein, refers to a cyclic aromatic radical having from five to ten atoms in a ring, of which one atom in a ring is selected from S, O and N; zero, one or two atoms in the cycle are additional heteroatoms independently selected from S, O and N; and the remaining atoms in the cycle are carbon atoms, and the radical is bonded to the rest of the molecule via any atom in the cycle, for example, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyrrolyl, pyrazolyl, imidazolyl, thiazolyl, oxazolyl, isoxoxazolyl, thiadiazolyl, oxadiazolyl, thiophenyl , furanyl, quinolinyl, isoquinolinyl and the like.

Будет понятно, что арильные и гетероарильные группы (включая бициклические арильные группы) могут быть незамещенными или замещенными, при этом замещение включает замену в них одного, двух или трех атомов водорода независимо любым одним или несколькими из следующих остатков, включая без ограничения: алифатическую группу; гетероалифатическую группу; арил; гетероарил; арилалкил; гетероарилалкил; алкоксигруппу; арилоксигруппу; гетероалкоксигруппу; гетероарилоксигруппу; алкилтиогруппу; арилтиогруппу; гетероалкилтиогруппу; гетероарилтиогруппу; F; Cl; Br; I; -OH; -NO₂; -CN; -CF₃; -CH₂CF₃; -CHCl₂; -CH₂OH; -CH₂CH₂OH; -CH₂NH₂; -CH₂SO₂CH₃; -C(O)R_X; -CO₂(R_X); -CON(R_X)₂; -OC(O)R_X; -OCO₂R_X; -OCON(R_X)₂; -N(R_X)₂; -S(O)₂R_X; -NR_X(CO)R_X, где в каждом случае R_X независимо включает, но не ограничен указанным, алифатическую группу, гетероалифатическую группу, арил, гетероарил, арилалкил или гетероарилалкил, где любой из алифатических, гетероалифатических, арилалкильных или гетероарилалкильных заместителей, описанных выше и в данном случае, может быть замещенным или незамещенным, разветвленным или неразветвленным, циклическим или ациклическим, и где любой из арильных или гетероарильных заместителей, описанных выше и в данном случае, может быть замещенным или незамещенным. Дополнительные примеры обычно применимых заместителей иллюстрированы конкретными вариантами, показанными в примерах, которые приведены в данном описании.It will be understood that aryl and heteroaryl groups (including bicyclic aryl groups) may be unsubstituted or substituted, wherein substitution includes the substitution of one, two or three hydrogen atoms in them independently by any one or more of the following residues, including without limitation: an aliphatic group; heteroaliphatic group; aryl; heteroaryl; arylalkyl; heteroarylalkyl; alkoxy group; aryloxy group; heteroalkoxy; heteroaryloxy group; alkylthio group; arylthio group; heteroalkylthio group; heteroarylthio; F; Cl; Br; I; -OH; -NO ₂ ; -CN; -CF ₃ ; -CH ₂ CF ₃ ; -CHCl ₂ ; -CH ₂ OH; -CH ₂ CH ₂ OH; -CH ₂ NH ₂ ; -CH ₂ SO ₂ CH ₃ ; -C (O) R _X ; -CO ₂ (R _X ); -CON (R _X ) ₂ ; -OC (O) R _X ; -OCO ₂ R _X ; -OCON (R _X ) ₂ ; -N (R _X ) ₂ ; -S (O) ₂ R _X ; —NR _X (CO) R _X , where in each case R _X independently includes, but is not limited to, an aliphatic group, a heteroaliphatic group, aryl, heteroaryl, arylalkyl or heteroarylalkyl, where any of aliphatic, heteroaliphatic, arylalkyl or heteroarylalkyl substituents, above and in this case, may be substituted or unsubstituted, branched or unbranched, cyclic or acyclic, and where any of the aryl or heteroaryl substituents described above and in this case may be substituted or not schennym. Additional examples of commonly used substituents are illustrated by the specific options shown in the examples that are given in this description.

Термин «циклоалкил», используемый в данном описании, в частности, относится к группам, имеющим от трех до семи, предпочтительно от трех до десяти атомов углерода. Подходящие циклоалкилы включают, но не ограничены указанным, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и тому подобное, которые, как и в случае других алифатических, гетероалифатических или гетероциклических остатков, могут быть необязательно замещены заместителями, включая без ограничения алифатическую группу; гетероалифатическую группу; арил; гетероарил; арилалкил; гетероарилалкил; алкоксигруппу; арилоксигруппу; гетероалкоксигруппу; гетероарилоксигруппу; алкилтиогруппу; арилтиогруппу; гетероалкилтиогруппу; гетероарилтиогруппу; F; Cl; Br; I; -OH; -NO₂; -CN; -CF₃; -CH₂CF₃; -CHCl₂; -CH₂OH; -CH₂CH₂OH; -CH₂NH₂; -CH₂SO₂CH₃; -C(O)R_X; -CO₂(R_X); -CON(R_X)₂; -OC(O)R_X; -OCO₂R_X; -OCON(R_X)₂; -N(R_X)₂; -S(O)₂R_X; -NR_X(CO)R_X, где в каждом случае R_X независимо включает, но не ограничен указанным, алифатическую группу, гетероалифатическую группу, арил, гетероарил, арилалкил или гетероарилалкил, где любой из алифатических, гетероалифатических, арилалкильных или гетероарилалкильных заместителей, описанных выше и в данном случае, может быть замещенным или незамещенным, разветвленным или неразветвленным, циклическим или ациклическим, и где любой из арильных или гетероарильных заместителей, описанных выше и в данном случае, может быть замещенным или незамещенным. Дополнительные примеры обычно применимых заместителей иллюстрированы конкретными вариантами, показанными в примерах, которые приведены в данном описании.The term "cycloalkyl" as used herein, in particular, refers to groups having from three to seven, preferably from three to ten carbon atoms. Suitable cycloalkyls include, but are not limited to, cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl and the like, which, as with other aliphatic, heteroaliphatic or heterocyclic residues, may optionally be substituted with substituents, including without limitation, an aliphatic group; heteroaliphatic group; aryl; heteroaryl; arylalkyl; heteroarylalkyl; alkoxy group; aryloxy group; heteroalkoxy; heteroaryloxy group; alkylthio group; arylthio group; heteroalkylthio group; heteroarylthio; F; Cl; Br; I; -OH; -NO ₂ ; -CN; -CF ₃ ; -CH ₂ CF ₃ ; -CHCl ₂ ; -CH ₂ OH; -CH ₂ CH ₂ OH; -CH ₂ NH ₂ ; -CH ₂ SO ₂ CH ₃ ; -C (O) R _X ; -CO ₂ (R _X ); -CON (R _X ) ₂ ; -OC (O) R _X ; -OCO ₂ R _X ; -OCON (R _X ) ₂ ; -N (R _X ) ₂ ; -S (O) ₂ R _X ; —NR _X (CO) R _X , where in each case R _X independently includes, but is not limited to, an aliphatic group, a heteroaliphatic group, an aryl, heteroaryl, arylalkyl or heteroarylalkyl, where any of aliphatic, heteroaliphatic, arylalkyl or heteroarylalkyl substituents, above and in this case, may be substituted or unsubstituted, branched or unbranched, cyclic or acyclic, and where any of the aryl or heteroaryl substituents described above and in this case may be substituted or not schennym. Additional examples of commonly used substituents are illustrated by the specific options shown in the examples that are given in this description.

Термин «гетероалифатический», используемый в данном описании, относится к алифатическим остаткам, которые содержат один или несколько атомов кислорода, серы, азота, фосфора или кремния, например, вместо атомов углерода. Гетероалифатические остатки могут быть разветвленными, неразветвленными, циклическими или ациклическими и включают насыщенные и ненасыщенные гетероциклы, такие как морфолиногруппу, пирролидинил и т.д. В некоторых вариантах гетероалифатические остатки замещены независимой заменой в них одного или нескольких атомов водорода одним или несколькими остатками, включая без ограничения алифатическую группу; гетероалифатическую группу; арил; гетероарил; арилалкил; гетероарилалкил; алкоксигруппу; арилоксигруппу; гетероалкоксигруппу; гетероарилоксигруппу; алкилтиогруппу; арилтиогруппу; гетероалкилтиогруппу; гетероарилтиогруппу; F; Cl; Br; I; -OH; -NO₂; -CN; -CF₃; -CH₂CF₃; -CHCl₂; -CH₂OH; -CH₂CH₂OH; -CH₂NH₂; -CH₂SO₂CH₃; -C(O)R_X; -CO₂(R_X); -CON(R_X)₂; -OC(O)R_X; -OCO₂R_X; -OCON(R_X)₂; -N(R_X)₂; -S(O)₂R_X; -NR_X(CO)R_X, где в каждом случае R_X независимо включает, но не ограничен указанным, алифатическую группу, гетероалифатическую группу, арил, гетероарил, арилалкил или гетероарилалкил, где любой из алифатических, гетероалифатических, арилалкильных или гетероарилалкильных заместителей, описанных выше и в данном случае, может быть замещенным или незамещенным, разветвленным или неразветвленным, циклическим или ациклическим, и где любой из арильных или гетероарильных заместителей, описанных выше и в данном случае, может быть замещенным или незамещенным. Дополнительные примеры обычно применимых заместителей иллюстрированы конкретными вариантами, показанными в примерах, которые приведены в данном описании.The term “heteroaliphatic,” as used herein, refers to aliphatic residues that contain one or more oxygen, sulfur, nitrogen, phosphorus or silicon atoms, for example, instead of carbon atoms. Heteroaliphatic residues may be branched, unbranched, cyclic or acyclic and include saturated and unsaturated heterocycles, such as morpholino group, pyrrolidinyl, etc. In some embodiments, the heteroaliphatic residues are substituted by the independent replacement of one or more hydrogen atoms in them by one or more residues, including without limitation an aliphatic group; heteroaliphatic group; aryl; heteroaryl; arylalkyl; heteroarylalkyl; alkoxy group; aryloxy group; heteroalkoxy; heteroaryloxy group; alkylthio group; arylthio group; heteroalkylthio group; heteroarylthio; F; Cl; Br; I; -OH; -NO ₂ ; -CN; -CF ₃ ; -CH ₂ CF ₃ ; -CHCl ₂ ; -CH ₂ OH; -CH ₂ CH ₂ OH; -CH ₂ NH ₂ ; -CH ₂ SO ₂ CH ₃ ; -C (O) R _X ; -CO ₂ (R _X ); -CON (R _X ) ₂ ; -OC (O) R _X ; -OCO ₂ R _X ; -OCON (R _X ) ₂ ; -N (R _X ) ₂ ; -S (O) ₂ R _X ; —NR _X (CO) R _X , where in each case R _X independently includes, but is not limited to, an aliphatic group, a heteroaliphatic group, aryl, heteroaryl, arylalkyl or heteroarylalkyl, where any of aliphatic, heteroaliphatic, arylalkyl or heteroarylalkyl substituents, above and in this case, may be substituted or unsubstituted, branched or unbranched, cyclic or acyclic, and where any of the aryl or heteroaryl substituents described above and in this case may be substituted or not schennym. Additional examples of commonly used substituents are illustrated by the specific options shown in the examples that are given in this description.

Термин «галоген», используемый в данном описании, относится к атому, выбранному из фтора, хлора, брома и йода.The term “halogen” as used herein refers to an atom selected from fluoro, chloro, bromo and iodo.

Термин «галогеналкил» означает алкильную группу, которая определена выше, имеющую один, два или три связанных с ней атомов галогена, примерами которой являются такие группы, как хлорметил, бромэтил, трифторметил и тому подобные.The term “haloalkyl” means an alkyl group, as defined above, having one, two or three associated halogen atoms, examples of which are groups such as chloromethyl, bromoethyl, trifluoromethyl and the like.

Термин «гетероциклоалкил» или «гетероцикл», используемый в данном описании, относится к неароматическому 5-, 6- или 7-членному циклу или полициклической группе, включая без ограничения би- или трициклическую группу, содержащую конденсированные шестичленные циклы, имеющие от одного до трех гетероатомов, независимо выбранных из кислорода, серы и азота, где (i) каждый 5-членный цикл имеет от 0 до 1 двойной связи и каждый 6-членный цикл имеет от 0 до 2 двойных связей, (ii) гетероатомы азота и серы необязательно могут быть окислены, (iii) гетероатом азота необязательно может быть четвертичным и (iv) любое из указанных выше гетероциклических колец может быть слито с бензольным кольцом. Типичные гетероциклы включают, но не ограничены указанным, пирролидинил, пиразолинил, пиразолидинил, имидазолинил, имидазолидинил, пиперидинил, пиперазинил, оксазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, тиазолидинил, изотиазолидинил и тетрагидрофурил. В некоторых вариантах используется термин «замещенная гетероциклоалкильная или гетероциклическая» группа и используемый в данном описании термин относится к гетероциклоалкильной или гетероциклической группе, которая определена выше, с замещением в ней одного, двух или трех атомов водорода без ограничения алифатической группой; гетероалифатической группой; арилом; гетероарилом; арилалкилом; гетероарилалкилом; алкоксигруппой; арилоксигруппой; гетероалкоксигруппой; гетероарилоксигруппой; алкилтиогруппой; арилтиогруппой; гетероалкилтиогруппой; гетероарилтиогруппой; F; Cl; Br; I; -OH; -NO₂; -CN; -CF₃; -CH₂CF₃; -CHCl₂; -CH₂OH; -CH₂CH₂OH; -CH₂NH₂; -CH₂SO₂CH₃; -C(O)R_x; -CO₂(R_x); -CON(R_x)₂; -OC(O)R_x; -OCO₂R_x; -OCON(R_x)₂; -N(R_x)₂; -S(O)₂R_x; -NR_x(CO)R_x, где в каждом случае R_x независимо включает, но не ограничен указанным, алифатическую группу, гетероалифатическую группу, арил, гетероарил, арилалкил или гетероарилалкил, где любой из алифатических, гетероалифатических, арилалкильных или гетероарилалкильных заместителей, описанных выше и в данном случае, может быть замещенным или незамещенным, разветвленным или неразветвленным, циклическим или ациклическим, и где любой из арильных или гетероарильных заместителей, описанных выше и в данном случае, может быть замещенным или незамещенным. Дополнительные примеры обычно используемых заместителей иллюстрированы конкретными вариантами, показанными в примерах, которые приведены в данном описании.The term “heterocycloalkyl” or “heterocycle”, as used herein, refers to a non-aromatic 5-, 6- or 7-membered ring or polycyclic group, including, without limitation, a bi- or tricyclic group containing fused six-membered rings having from one to three heteroatoms independently selected from oxygen, sulfur and nitrogen, where (i) each 5-membered ring has from 0 to 1 double bonds and each 6-membered ring has from 0 to 2 double bonds, (ii) nitrogen and sulfur heteroatoms may optionally be oxidized, (iii) a nitrogen heteroatom n may optionally be quaternary and (iv) any of the above heterocyclic rings may be fused to a benzene ring. Typical heterocycles include, but are not limited to, pyrrolidinyl, pyrazolinyl, pyrazolidinyl, imidazolinyl, imidazolidinyl, piperidinyl, piperazinyl, oxazolidinyl, isoxazolidinyl, morpholinyl, thiazolidinyl, isothiazolidinyl. In some embodiments, the term “substituted heterocycloalkyl or heterocyclic” group is used and the term used in this description refers to a heterocycloalkyl or heterocyclic group as defined above with substitution of one, two or three hydrogen atoms in it without limitation to an aliphatic group; heteroaliphatic group; aryl; heteroaryl; arylalkyl; heteroarylalkyl; alkoxy group; aryloxy group; heteroalkoxy; heteroaryloxy; alkylthio group; arylthio group; heteroalkylthio; heteroarylthio; F; Cl; Br; I; -OH; -NO ₂ ; -CN; -CF ₃ ; -CH ₂ CF ₃ ; -CHCl ₂ ; -CH ₂ OH; -CH ₂ CH ₂ OH; -CH ₂ NH ₂ ; -CH ₂ SO ₂ CH ₃ ; -C (O) R _x ; -CO ₂ (R _x ); -CON (R _x ) ₂ ; -OC (O) R _x ; -OCO ₂ R _x ; -OCON (R _x ) ₂ ; -N (R _x ) ₂ ; -S (O) ₂ R _x ; —NR _x (CO) R _x , where in each case R _x independently includes, but is not limited to, an aliphatic group, a heteroaliphatic group, an aryl, heteroaryl, arylalkyl or heteroarylalkyl, where any of aliphatic, heteroaliphatic, arylalkyl or heteroarylalkyl substituents, above and in this case, may be substituted or unsubstituted, branched or unbranched, cyclic or acyclic, and where any of the aryl or heteroaryl substituents described above and in this case, may be substituted or not schennym. Additional examples of commonly used substituents are illustrated by the specific options shown in the examples that are described in this description.

Термин «меченое», используемый в данном описании, означает, что соединение имеет, по меньшей мере, один связанный элемент, изотоп или химическое соединение, делающее возможной регистрацию соединения. В общем, метки можно отнести к трем классам: a) изотопные метки, которые могут быть радиоактивными или тяжелыми изотопами, включая, но, не ограничиваясь указанным, ²H, ³H, ³²P, ³⁵S, ⁶⁷Ga, ^99mTc (Tc-99m), ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁵I, ¹⁶⁹Yb и ¹⁸⁶Re; b) иммунные метки, которые могут быть антителами или антигенами; и c) окрашенные или флуоресцирующие красители. Будет понятно, что метки могут быть включены в соединение в любом положении, которое не препятствует биологической активности или признаку соединения, которое регистрируют. В некоторых вариантах осуществления изобретения используют фотоаффинное мечение для прямого определения межмолекулярных взаимодействий в биологических системах (например, чтобы исследовать сайт связывания эпотилона в димере тубулина). Можно использовать множество фотофоров, большинство которых основано на фотопревращении диазосоединений, азидов или диазиринов в нитрены или карбены (см. Bayley, H., Photogenerated Reagents in Biochemistry and Molecular Biology (1983), Elsevier, Amsterdam.), полное содержание публикации включено в данное описание в виде ссылки. В некоторых вариантах осуществления изобретения используемыми фотоаффинными метками являются орто-, мета- и пара-азидобензоилы, замещенные одним или несколькими остатками галогена, включая, но не ограничиваясь указанным, 4-азидо-2,3,5,6-тетрафторбензойную кислоту.The term "labeled", as used herein, means that the compound has at least one associated element, isotope or chemical compound, making it possible to register the compound. In general, labels can be classified into three classes: a) isotopic labels, which can be radioactive or heavy isotopes, including, but not limited to, ² H, ³ H, ³² P, ³⁵ S, ⁶⁷ Ga, ^99m Tc (Tc -99m), ¹¹¹ In, ¹²³ I, ¹²⁵ I, ¹⁶⁹ Yb and ¹⁸⁶ Re; b) immune labels, which may be antibodies or antigens; and c) stained or fluorescent dyes. It will be understood that labels can be included in the compound at any position that does not interfere with the biological activity or feature of the compound that is being recorded. In some embodiments, photoaffinity labeling is used to directly determine intermolecular interactions in biological systems (for example, to investigate the epothilone binding site in a tubulin dimer). You can use many photophores, most of which are based on the photoconversion of diazocompounds, azides or diazirins into nitrenes or carbenes (see Bayley, H., Photogenerated Reagents in Biochemistry and Molecular Biology (1983), Elsevier, Amsterdam.), The full contents of the publication are included in this description by reference. In some embodiments, the photoaffinity tags used are ortho, meta, and para-azidobenzoyl substituted with one or more halogen residues, including, but not limited to, 4-azido-2,3,5,6-tetrafluorobenzoic acid.

«Полимер»: Термин «полимер», используемый в данном описании, относится к композиции, содержащей цепи, которые могут быть открытыми, замкнутыми, линейными, разветвленными или сшитыми из повторяющихся единиц (мономеров), которые могут быть одинаковыми или разными. Будет понятно, что в некоторых вариантах термин «полимер» относится к биополимерам, которые, как подразумевается, относятся к природным полимерным материалам, или основанным на таких материалах, найденных в природе, включая, но не ограничиваясь указанным, нуклеиновые кислоты, пептиды и их миметики. В некоторых других вариантах термин «полимер» относится к синтетическим полимерам, таким как биоразлагаемые полимеры или другие полимерные материалы. Будет понятно, что полимерные твердые носители также включены в полимеры, предлагаемые в данном изобретении. Предлагаемые в изобретении соединения могут быть связаны с полимерными носителями и, следовательно, некоторые синтетические модификации могут осуществляться на твердой фазе. Используемый в данном описании термин «твердый носитель» включает, но не ограничен указанным, гранулы, диски, капилляры, полые волокна, иглы, штыри, твердые волокна, целлюлозные шарики, пористые стеклянные шарики, силикагели, полистироловые шарики, необязательно сшитые с дивинилбензолом, шарики из привитых сополимеров, полиакриламидные шарики, латексные шарики, диметилакриламидные шарики, необязательно перекрестно сшитые с N-N'-бис-акрилоилэтилендиамином, и стеклянные частицы, покрытые гидрофобным полимером. Специалисту в данной области будет понятно, что выбор конкретного твердого носителя будет ограничен совместимостью носителя с используемыми химическими реакциями. Примером твердого носителя является аминосмола Tentagel, композиция 1) полистироловых шариков, перекрестно сшитых с дивинилбензолом, и 2) ПЭГ (полиэтиленгликоль). Tentagel является особенно применимым твердым носителем, так как он обеспечивает универсальную поддержку для использования в анализах на шарикам и без шариков, а также прекрасно набухает в растворителях в диапазоне от толуола до воды."Polymer": The term "polymer", as used herein, refers to a composition containing chains that can be open, closed, linear, branched or crosslinked from repeating units (monomers) that can be the same or different. It will be understood that in some embodiments, the term “polymer” refers to biopolymers, which are intended to refer to natural polymeric materials, or based on such materials found in nature, including, but not limited to, nucleic acids, peptides and their mimetics . In some other embodiments, the term “polymer” refers to synthetic polymers, such as biodegradable polymers or other polymeric materials. It will be understood that polymeric solid carriers are also included in the polymers of this invention. The compounds of the invention may be coupled to polymer carriers and, therefore, some synthetic modifications may be carried out on a solid phase. As used herein, the term “solid support” includes, but is not limited to, granules, discs, capillaries, hollow fibers, needles, pins, solid fibers, cellulose beads, porous glass beads, silica gels, polystyrene beads, optionally crosslinked with divinyl benzene, beads grafted copolymers, polyacrylamide beads, latex beads, dimethyl acrylamide beads, optionally cross-linked with N-N'-bis-acryloylethylenediamine, and glass particles coated with a hydrophobic polymer. One skilled in the art will understand that the choice of a particular solid support will be limited by the compatibility of the support with the chemical reactions used. An example of a solid support is the Tentagel amino resin, composition 1) polystyrene beads cross-linked with divinylbenzene, and 2) PEG (polyethylene glycol). Tentagel is a particularly applicable solid carrier, as it provides universal support for use in ball and no-ball analyzes, and also swells beautifully in solvents ranging from toluene to water.

Описание некоторых вариантов осуществления изобретенияDescription of some embodiments of the invention

Признавая необходимость в разработке новых и эффективных способов терапии злокачественных опухолей, в данном изобретении предлагаются новые методики синтеза, открывающих доступ к макроциклам, обладающим широким диапазоном биологической и фармакологической активности, а также новые соединения с такой активностью, новые терапевтические композиции и способы применения таких соединения и композиций.Recognizing the need to develop new and effective methods for the treatment of malignant tumors, this invention proposes new synthesis methods that provide access to macrocycles with a wide range of biological and pharmacological activity, as well as new compounds with such activity, new therapeutic compositions and methods of using such compounds and compositions.

В некоторых вариантах предлагаемые в изобретении соединения применимы при лечении злокачественной опухоли. Некоторые предлагаемые в изобретении соединения оказывают цитотоксическое или ингибирующее рост действие на линии клеток злокачественных опухолей, проявляют способность полимеризовать тубулин и стабилизировать конструкции из микротрубочек и/или приводят к сокращению или исчезновению опухолей в моделях ксенотрансплантатов клеток злокачественной опухоли. В некоторых вариантах соединения могут иметь сниженные или минимальные побочные эффекты, включая токсичность по отношению к жизненно важных органам, тошноту, рвоту, диарею, аллопецию, потерю массы, увеличение массы, токсичность для печени, кожные нарушения и т.д. Соединения также легче могут быть приготовлены в виде композиций вследствие повышенной растворимости в воде, пониженной токсичности, увеличенному терапевтическому диапазону, повышенной эффективности и т.д.In some embodiments, the compounds of the invention are useful in the treatment of a cancer. Some of the compounds of the invention exert a cytotoxic or growth inhibitory effect on the cell line of malignant tumors, exhibit the ability to polymerize tubulin and stabilize microtubule constructs and / or lead to the reduction or disappearance of tumors in cancer cell xenograft models. In some embodiments, the compounds may have reduced or minimal side effects, including toxicity to vital organs, nausea, vomiting, diarrhea, allopecia, weight loss, weight gain, liver toxicity, skin disorders, etc. Compounds can also be more easily prepared in the form of compositions due to increased solubility in water, reduced toxicity, increased therapeutic range, increased effectiveness, etc.

Общее описание предлагаемых в изобретении соединенийGeneral description of the compounds of the invention

Соединения настоящего изобретения включают соединения общей формулы (0) и (0'), которые дополнительно определены ниже:Compounds of the present invention include compounds of General formula (0) and (0 '), which are further defined below:

в которых R₀ означает замещенный или незамещенный арильный, гетероарильный, арилалкильный, арилалкенильный, арилалкинильный, гетероарилалкильный, гетероарилалкенильный или гетероарилалкинильный остаток; в некоторых вариантах R₀ означает арилалкильный, арилалкенильный, гетероарилалкильный или гетероарилалкенильный остаток; в других вариантах R₀ означает гетероарилалкенильный остаток; в некоторых вариантах R₀ означает гетероарилалкильный остаток; в других вариантах R₀ означает 5-7-членный арильный или гетероарильный остаток; в других вариантах R₀ означает 8-12-членный бициклический арильный или гетероарильный остаток; в следующих вариантах R₀ означает бициклический остаток, в котором фенильный цикл конденсирован с гетероарильным или арильным остатком; в других вариантах R₀ означает бициклический остаток, в котором фенильное кольцо конденсировано с остатком тиазола, оксазола или имидазола; в других вариантах R₀ означает замещенный или незамещенный фенильный остаток;in which R ₀ means a substituted or unsubstituted aryl, heteroaryl, arylalkyl, arylalkenyl, arylalkynyl, heteroarylalkyl, heteroarylalkenyl or heteroarylalkynyl radical; in some embodiments, R ₀ is an arylalkyl, arylalkenyl, heteroarylalkyl or heteroarylalkenyl radical; in other embodiments, R ₀ means a heteroarylalkenyl residue; in some embodiments, R ₀ is a heteroarylalkyl radical; in other embodiments, R ₀ means a 5-7 membered aryl or heteroaryl residue; in other embodiments, R ₀ means an 8-12 membered bicyclic aryl or heteroaryl residue; in the following embodiments, R ₀ means a bicyclic residue in which the phenyl ring is fused to a heteroaryl or aryl residue; in other embodiments, R ₀ means a bicyclic residue in which the phenyl ring is fused to the residue of thiazole, oxazole or imidazole; in other embodiments, R ₀ means a substituted or unsubstituted phenyl residue;

R₃ и R₄ каждый независимо означают водород; или замещенный или незамещенный, линейный или разветвленный, циклический или ациклический алифатический, гетероалифатический радикал, арильный, гетероарильный, арилалкильный или гетероарилалкильный остаток, необязательно замещенные одним или несколькими группами из гидроксила, защищенного гидроксила, алкоксигруппы, карбоксигруппы, карбоксальдегида, линейного или разветвленного алкила или циклического ацеталя, фтора, аминогруппы, защищенной аминогруппы, аминогруппы, замещенной одним или двумя алкильными или арильными остатками, N-гидроксиминогруппой или N-алкоксииминогруппой; в некоторых вариантах R₃ и R₄ каждый независимо означают водород, фтор или низший алкил; в других вариантах R₃ и R₄ каждый независимо означают водород или метил; в других вариантах R₃ означает метил, а R₄ означает водород;R ₃ and R ₄ each independently mean hydrogen; or a substituted or unsubstituted, linear or branched, cyclic or acyclic aliphatic, heteroaliphatic radical, an aryl, heteroaryl, arylalkyl or heteroarylalkyl radical, optionally substituted by one or more groups from a hydroxyl, a protected hydroxyl, alkoxy, carboxy, linear or cycloalkyl cycloalkyl acetal, fluorine, amino group, protected amino group, amino group substituted by one or two alkyl or aryl residues, N-g an hydroxyimino group or an N-alkoxyimino group; in some embodiments, R ₃ and R ₄ each independently mean hydrogen, fluoro or lower alkyl; in other embodiments, R ₃ and R ₄ each independently is hydrogen or methyl; in other embodiments, R ₃ means methyl, and R ₄ means hydrogen;

R₅ и R₆ каждый независимо означают водород или защитную группу; в некоторых вариантах R₅ и R₆ оба означают водород;R ₅ and R ₆ each independently mean hydrogen or a protective group; in some embodiments, R ₅ and R _{6 are} both hydrogen;

X означает O, S, C(R₇)₂ или NR₇, где в каждом случае R₇ независимо означает водород или низший алкил; в некоторых вариантах X означает O; в других вариантах X означает NH;X is O, S, C (R ₇ ) ₂ or NR ₇ , where in each case R _{7 is} independently hydrogen or lower alkyl; in some embodiments, X is O; in other embodiments, X is NH;

Y означает O, S, NH, C(R₇)₂, CH₂, N(R₇) или NH, где в каждом случае независимо R₇ означает водород или низший алкил; в некоторых вариантах Y означает O; в других вариантах Y означает NH; в других вариантах Y означает CH₂;Y is O, S, NH, C (R ₇ ) ₂ , CH ₂ , N (R ₇ ) or NH, where in each case, independently R ₇ is hydrogen or lower alkyl; in some embodiments, Y is O; in other embodiments, Y is NH; in other embodiments, Y is CH ₂ ;

каждый R₈ независимо означает водород; галоген, гидроксил, алкоксигруппу, аминогруппу, диалкиламиногруппу, алкиламиногруппу, фтор, цианогруппу или замещенный или незамещенный, линейный или разветвленный, циклический или ациклический алифатический, гетероалифатический радикал, арильный, гетероарильный, арилалкильный, арилалкенильный, арилалкинильный или гетероарилалкильный, гетероарилалкенильный, гетероарилалкинильный остаток, необязательно замещенные одним или несколькими заместителями из гидроксила, защищенного гидроксила, алкоксигруппы, карбоксигруппы, карбоксальдегида, линейного или разветвленного алкила или циклического ацеталя, фтора, аминогруппы, защищенной аминогруппы, аминогруппы, замещенной одним или двумя алкильными или арильными остатками, N-гидроксиминогруппой или N-алкоксииминогруппой; в некоторых вариантах R₈ означает водород; в других вариантах R₈ означает гидроксил; в других вариантах R₈ означает фтор; в следующих вариантах R₈ означает низший алкил, такой как метил; в других вариантах R₈ означает -CF₃, -CF₂H или -CFH₂; в других вариантах R₈ означает перфторированную или фторированную алкильную группу; в других вариантах R₈ означает галогенированную или пергалогенированную алкильную группу;each R ₈ independently means hydrogen; halogen, hydroxyl, alkoxy group, amino group, dialkylamino group, alkylamino group, fluorine, cyano group or substituted or unsubstituted, linear or branched, cyclic or acyclic aliphatic, heteroaliphatic radical, aryl, heteroaryl, arylalkyl, aryl, aryl, aryl, aryl, aryl substituted by one or more substituents of hydroxyl, protected hydroxyl, alkoxy, carboxy, carboxal egida, linear or branched alkyl or cyclic acetal, fluorine, amino, protected amino, amino substituted by one or two alkyl or aryl moieties, N-gidroksiminogruppoy or N-alkoxyimino; in some embodiments, R ₈ is hydrogen; in other embodiments, R ₈ is hydroxyl; in other embodiments, R ₈ means fluorine; in the following embodiments, R ₈ means lower alkyl, such as methyl; in other embodiments, R ₈ is —CF ₃ , —CF ₂ H or —CFH ₂ ; in other embodiments, R ₈ is a perfluorinated or fluorinated alkyl group; in other embodiments, R ₈ means a halogenated or perhalogenated alkyl group;

R₉ и R₁₀ каждый независимо означают водород; или замещенный, или незамещенный, линейный или разветвленный, циклический или ациклический алифатический, гетероалифатический радикал, арильный, гетероарильный, арильный, арилалкильный, арилалкенильный, арилалкинильный, гетероарилалкильный, гетероарилалкенильный или гетероарилалкинильный остаток, необязательно замещенные одним или несколькими заместителями из гидроксила, защищенного гидроксила, алкоксигруппы, карбоксигруппы, карбоксальдегида, линейного или разветвленного алкила или циклического ацеталя, фтора, аминогруппы, защищенной аминогруппы, аминогруппы, замещенный одним или двумя алкильными или арильными остатками, N-гидроксиминогруппой или N-алкоксииминогруппой; в некоторых вариантах один из R₉ и R₁₀ означает метил; в других вариантах оба R₉ и R₁₀ означают метил; в других вариантах один из R₉ и R₁₀ означает метил, а другой означает водород; в других вариантах оба R₉ и R₁₀ означают водород;R ₉ and R ₁₀ each independently mean hydrogen; or a substituted, or unsubstituted, linear or branched, cyclic or acyclic aliphatic, heteroaliphatic radical, aryl, heteroaryl, aryl, arylalkyl, arylalkenyl, arylalkyl, heteroarylalkyl, substituted heteroalkyl, heteroalkyl, substituted heteroaryl , carboxy, carboxaldehyde, linear or branched alkyl or cyclic acetal, fluoro, amino, protecting ennoy amino, amino substituted by one or two alkyl or aryl moieties, N-gidroksiminogruppoy or N-alkoxyimino; in some embodiments, one of R ₉ and R ₁₀ means methyl; in other embodiments, both R ₉ and R _{10 are} methyl; in other embodiments, one of R ₉ and R ₁₀ means methyl, and the other means hydrogen; in other embodiments, both R ₉ and R _{10 are} hydrogen;

R_B независимо для каждого случая означает водород; галоген; -OR_B'; -SR_B'; -N(R_B')₂; -C(O)OR_B'; -C(O)R_B'; -CONHR_B'; -O(C=O)R_B'; -O(C=O)OR_B'; -NR_B'(C=O)R_B'; N₃; N₂R_B'; циклический ацеталь; или циклический или ациклический, линейный или разветвленный алифатический, гетероалифатический радикал, арил или гетероарил, необязательно замещенные одной или несколькими группами из водорода; галогена; -OR_B'; -SR_B'; -N(R_B')₂; -C(O)OR_B'; -C(O)R_B'; -CONHR_B'; -O(C=O)R_B'; -O(C=O)OR_B'; -NR_B'(C=O)R_B'; N₃; N₂R_B'; циклического ацеталя; или циклического или ациклического, линейного или разветвленного замещенного или незамещенного алифатического, гетероалифатического радикала, арильного или гетероарильного остатка; или является эпотилоном, дезоксиэпотилоном или их аналогами; или является полимером; углеводом; фотоаффинной меткой; или радиоактивной меткой; в некоторых вариантах R_B означает водород,

, метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, циклопропил, циклобутил, циклопентил или циклогексил, каждый незамещен или необязательно замещен встречающимися один или несколько раз группами галогена, -OH, -OR_B', NH₂ или N(R_B')₂ или их комбинациями, где в каждом случае независимо R_B' означает водород, алкил, арил или защитную группу, в других вариантах R_B означает водород, метил или этил, в других вариантах R_B означает метил, в других вариантах -CY₃, -CHY₂, -CH₂Y, где Y означает F, Br, Cl, I, OR_B', NHR_B', N(R_B')₂ или SR_B'; в других вариантах R_B означает -CF₃, -CH₂F или CHF₂; в других вариантах R_B означает перфторированную или фторированную алкильную группу; в других вариантах R_B означает галогенированную или пергалогенированную алкильную группу; в каждом случае R_B независимо означает водород; защитную группу; линейный или разветвленный, замещенный или незамещенный, циклический или ациклический, алифатический, гетероалифатический радикал, арильный, гетероарильный, арилалкильный, арилалкенильный, арилалкинильный, гетероарилалкильный, гетероарилалкенильный или гетероарилалкинильный остаток;R _B independently for each case means hydrogen; halogen; -OR _{B '} ; -SR _{B '} ; -N (R _{B '} ) ₂ ; -C (O) OR _{B '} ; -C (O) R _{B '} ; -CONHR _{B '} ; -O (C = O) R _{B '} ; -O (C = O) OR _{B '} ; -NR _{B '} (C = O) R _B' ; N ₃ ; N ₂ R _{B '} ; cyclic acetal; or a cyclic or acyclic, linear or branched aliphatic, heteroaliphatic radical, aryl or heteroaryl, optionally substituted with one or more groups of hydrogen; halogen; -OR _{B '} ; -SR _{B '} ; -N (R _{B '} ) ₂ ; -C (O) OR _{B '} ; -C (O) R _{B '} ; -CONHR _{B '} ; -O (C = O) R _{B '} ; -O (C = O) OR _{B '} ; -NR _{B '} (C = O) R _B' ; N ₃ ; N ₂ R _{B '} ; cyclic acetal; or a cyclic or acyclic, linear or branched substituted or unsubstituted aliphatic, heteroaliphatic radical, an aryl or heteroaryl residue; or is epothilone, deoxyepotilone or their analogs; or is a polymer; carbohydrate; photo affinity tag; or a radioactive tag; in some embodiments, R _B means hydrogen,

, methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl, cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl or cyclohexyl are each unsubstituted or optionally substituted once or several times by halogen groups, —OH, —OR _{B ′} , NH ₂ or N (R _{B ′} ) ₂ or combinations thereof, where in each case independently R _{B ′} is hydrogen, alkyl, aryl or a protective group, in other embodiments R _B is hydrogen, methyl or ethyl, in other embodiments R _B is methyl, in other embodiments —CY ₃ , —CHY ₂ , —CH ₂ Y, where Y is F, Br, Cl, I, OR _{B ′} , NHR _{B ′} , N (R _{B ′} ) ₂ or SR _{B ′} ; in other embodiments, R _B is —CF ₃ , —CH ₂ F, or CHF ₂ ; in other embodiments, R _B is a perfluorinated or fluorinated alkyl group; in other embodiments, R _B means a halogenated or perhalogenated alkyl group; in each case, R _B independently means hydrogen; a protective group; a linear or branched, substituted or unsubstituted, cyclic or acyclic, aliphatic, heteroaliphatic radical, aryl, heteroaryl, arylalkyl, arylalkenyl, arylalkynyl, heteroarylalkyl, heteroarylalkenyl or heteroarylalkyl;

m равно 1, 2, 3 или 4, m равно 1 или 2 в некоторых вариантах, m равно 1 в других вариантах;m is 1, 2, 3 or 4, m is 1 or 2 in some embodiments, m is 1 in other embodiments;

и их фармацевтически приемлемые производные.and their pharmaceutically acceptable derivatives.

Соединения, предлагаемые в изобретении, включают соединения общей формулы (I) или (I'), которые дополнительно определены ниже:Compounds of the invention include compounds of general formula (I) or (I '), which are further defined below:

в которых R₁ означает водород или низший алкил; в некоторых вариантах R₁ означает метил; в некоторых вариантах R₁ означает -CF₃, -CF₂H или CH₂F; в других вариантах R₁ означает перфторированную или фторированную алкильную группу; в других вариантах R₁ означает галогенированную или пергалогенированную алкильную группу;in which R ₁ means hydrogen or lower alkyl; in some embodiments, R ₁ means methyl; in some embodiments, R ₁ is —CF ₃ , —CF ₂ H or CH ₂ F; in other embodiments, R ₁ means perfluorinated or fluorinated alkyl group; in other embodiments, R ₁ means a halogenated or perhalogenated alkyl group;

R₂ означает замещенный или незамещенный арильный, гетероарильный, арилалкильный или гетероарилалкильный остаток; в некоторых вариантах R₂ означает замещенный или незамещенный оксазол; в других вариантах R₂ означает замещенный или незамещенный тиазол;R ₂ means a substituted or unsubstituted aryl, heteroaryl, arylalkyl or heteroarylalkyl residue; in some embodiments, R ₂ means substituted or unsubstituted oxazole; in other embodiments, R ₂ means substituted or unsubstituted thiazole;

R₃ и R₄ каждый независимо означает водород; или замещенный или незамещенный, линейный или разветвленный, циклический или ациклический алифатический, гетероалифатический радикал, арильный, гетероарильный, арилалкильный или гетероарилалкильный остаток, необязательно замещенные одной или несколькими группами из гидроксила, защищенного гидроксила, алкоксигруппы, карбоксигруппы, карбоксальдегида, линейного или разветвленного алкила или циклического ацеталя, фтора, аминогруппы, защищенной аминогруппы, аминогруппы, замещенной одним или двумя алкильными или арильными остатками, N-гидроксиминогруппы или N-алкоксииминогруппы; в некоторых вариантах R₃ и R₄ каждый независимо означают водород, фтор или низший алкил; в других вариантах R₃ и R₄ каждый независимо означают водород или метил; в следующих вариантах R₃ означает метил, а R₄ означает водород;R ₃ and R ₄ each independently mean hydrogen; or a substituted or unsubstituted, linear or branched, cyclic or acyclic aliphatic, heteroaliphatic radical, an aryl, heteroaryl, arylalkyl or heteroarylalkyl radical, optionally substituted by one or more groups of hydroxyl, protected hydroxyl, alkoxy, carboxy, linear or cycloalkyl acetal, fluorine, amino group, protected amino group, amino group substituted by one or two alkyl or aryl residues, N-g idroximino or N-alkoxyimino; in some embodiments, R ₃ and R ₄ each independently mean hydrogen, fluoro or lower alkyl; in other embodiments, R ₃ and R ₄ each independently is hydrogen or methyl; in the following embodiments, R ₃ means methyl, and R ₄ means hydrogen;

R₅ и R₆ каждый независимо означают водород или защитную группу; в некоторых вариантах R₅ и R₆ оба означают водород;R ₅ and R ₆ each independently mean hydrogen or a protective group; in some embodiments, R ₅ and R _{6 are} both hydrogen;

X означает O, S, C(R₇)₂ или NR₇, где в каждом случае R₇ независимо означает водород или низший алкил; в некоторых вариантах X означает O; в других вариантах X означает NH;X is O, S, C (R ₇ ) ₂ or NR ₇ , where in each case R _{7 is} independently hydrogen or lower alkyl; in some embodiments, X is O; in other embodiments, X is NH;

R_B независимо для каждого случая означает водород; галоген; -OR_B'; -SR_B'; -N(R_B')₂; -C(O)OR_B'; -C(O)R_B'; -CONHR_B'; -O(C=O)R_B'; -O(C=O)OR_B'; -NR_B'(C=O)R_B'; N₃; N₂R_B'; циклический ацеталь; или циклический или aциклический, линейный или разветвленный алифатический, гетероалифатический радиал, арил или гетероарил, необязательно замещенные одной или несколькими группами из водорода; галогена; -OR_B'; -SR_B'; -N(R_B')₂; -C(O)OR_B'; -C(O)R_B'; -CONHR_B'; -O(C=O)R_B'; -O(C=O)OR_B'; -NR_B'(C=O)R_B'; N₃; N₂R_B'; циклического ацеталя; или циклического или ациклического, линейного или разветвленного замещенного или незамещенного алифатического, гетероалифатического радикала, арильного или гетероарильного остатка; или является эпотилоном, дезоксиэпотилоном или их аналогами; или является полимером; углеводом; фотоаффинной меткой; или радиоактивной меткой; в некоторых вариантах R_B означает водород,

, метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, циклопропил, циклобутил, циклопентил или циклогексил, каждый из которых незамещен или необязательно замещен встречающимися один или несколько раз группами галогена, -OH, -OR_B', NH₂ или N(R_B')₂ или любыми их комбинациями, где в каждом случае независимо R_B' означает водород, алкил, арил или защитную группу, в других вариантах R_B означает водород, метил или этил, в других вариантах R_B означает метил, в других вариантах R_B означает -CF₃, -CH₂F или CHF₂; R _B independently for each case means hydrogen; halogen; -OR _{B '} ; -SR _{B '} ; -N (R _{B '} ) ₂ ; -C (O) OR _{B '} ; -C (O) R _{B '} ; -CONHR _{B '} ; -O (C = O) R _{B '} ; -O (C = O) OR _{B '} ; -NR _{B '} (C = O) R _B' ; N ₃ ; N ₂ R _{B '} ; cyclic acetal; or cyclic or acyclic, linear or branched aliphatic, heteroaliphatic radial, aryl or heteroaryl, optionally substituted with one or more groups of hydrogen; halogen; -OR _{B '} ; -SR _{B '} ; -N (R _{B '} ) ₂ ; -C (O) OR _{B '} ; -C (O) R _{B '} ; -CONHR _{B '} ; -O (C = O) R _{B '} ; -O (C = O) OR _{B '} ; -NR _{B '} (C = O) R _B' ; N ₃ ; N ₂ R _{B '} ; cyclic acetal; or a cyclic or acyclic, linear or branched substituted or unsubstituted aliphatic, heteroaliphatic radical, an aryl or heteroaryl residue; or is epothilone, deoxyepotilone or their analogs; or is a polymer; carbohydrate; photo affinity tag; or a radioactive tag; in some embodiments, R _B means hydrogen,

, methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl, cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl or cyclohexyl, each of which is unsubstituted or optionally substituted with one or more halogen groups, -OH, -OR _{B '} , NH ₂ or N (R _{B '} ) ₂ or any combination thereof, where in each case independently R _B' is hydrogen, alkyl, aryl or a protective group, in other embodiments, R _B is hydrogen, methyl or ethyl, in other embodiments, R _B is methyl, in other embodiments R _B is —CF ₃ , —CH ₂ F or CHF ₂ ;

и их фармацевтически приемлемые производные.and their pharmaceutically acceptable derivatives.

В некоторых вариантах соединения, предлагаемые в изобретении, включают соединения общей формулы (II) или (II'), имеющие стереохимию, определенную, как показано:In some embodiments, the compounds of the invention include compounds of the general formula (II) or (II ′) having stereochemistry defined as shown:

где X, R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R_B и X имеют значения, определенные выше.where X, R ₁ , R ₂ , R ₃ , R ₄ , R ₅ , R ₆ , R _B and X are as defined above.

В некоторых вариантах X означает O. В других вариантах X означает NH. В других вариантах X означает CH₂.In some embodiments, X is O. In other embodiments, X is NH. In other embodiments, X is CH ₂ .

В некоторых вариантах R₂ означает замещенный или незамещенный тиазол. В некоторых вариантах R₂ означает 2-метилтиазо-4-ил. В других вариантах R₂ означает 2-гидроксилметилтиазо-4-ил. В других вариантах R₂ означает 2-аминометилтиазо-4-ил. В других вариантах R₂ означает 2-тиолметилтиазо-4-ил.In some embodiments, R ₂ means substituted or unsubstituted thiazole. In some embodiments, R ₂ means 2-methylthiazo-4-yl. In other embodiments, R ₂ is 2-hydroxylmethylthiazo-4-yl. In other embodiments, R ₂ is 2-aminomethylthiazo-4-yl. In other embodiments, R ₂ means 2-thiolmethylthiazo-4-yl.

В некоторых вариантах R₂ означает замещенный или незамещенный оксазол. В некоторых вариантах R₂ означает 2-метилоксазо-4-ил. В других вариантах R₂ означает 2-гидроксилметилоксазо-4-ил. В других вариантах R₂ означает 2-аминометилоксазо-4-ил. В других вариантах R₂ означает 2-тиолметилоксазо-4-ил.In some embodiments, R ₂ means substituted or unsubstituted oxazole. In some embodiments, R ₂ means 2-methyloxazo-4-yl. In other embodiments, R ₂ is 2-hydroxylmethyloxazo-4-yl. In other embodiments, R ₂ is 2-aminomethyloxazo-4-yl. In other embodiments, R ₂ means 2-thiolmethyloxazo-4-yl.

В некоторых вариантах R_B означает водород, метил, этил, -CF₃, -CH₂F, -CF₂H. В некоторых вариантах R_B означает метил. В других вариантах R_B означает -CF₃. В некоторых вариантах R_B означает водород. В других вариантах R_B означает этил.In some embodiments, R _B is hydrogen, methyl, ethyl, —CF ₃ , —CH ₂ F, —CF ₂ H. In some embodiments, R _B is methyl. In other embodiments, R _B is —CF ₃ . In some embodiments, R _B is hydrogen. In other embodiments, R _B is ethyl.

Некоторые предпочтительные соединения включают, например:Some preferred compounds include, for example:

Соединения, предлагаемые в данном изобретении, включают соединения, конкретно указанные выше и описанные в данной публикации, и они частично иллюстрированы различными классами, подродами и видами, раскрытыми в других местах данного описания.The compounds of this invention include those specifically described above and described in this publication, and are partially illustrated by the various classes, subgenera and species disclosed elsewhere in this specification.

Специалисту в данной области будет понятно, что в соединениях настоящего изобретения могут существовать асимметричные центры. Таким образом, предлагаемые соединения и их фармацевтические композиции могут находиться в форме отдельного энантиомера, диастереомера или геометрического изомера, или могут быть в форме смеси стереоизомеров. В некоторых вариантах предлагаемые в изобретении соединения являются энантиомерно чистыми соединениями. В некоторых других вариантах предлагаются смеси стереоизомеров или диастереоизомеров.One skilled in the art will recognize that asymmetric centers may exist in the compounds of the present invention. Thus, the proposed compounds and their pharmaceutical compositions may be in the form of a single enantiomer, diastereomer or geometric isomer, or may be in the form of a mixture of stereoisomers. In some embodiments, the compounds of the invention are enantiomerically pure compounds. In some other embodiments, mixtures of stereoisomers or diastereoisomers are provided.

Будет понятно, что некоторые из вышеуказанных классов и подклассов соединений могут существовать в различных изомерных формах. Изобретение включает соединения в виде отдельных изомеров, по существу не содержащих других изомеров, и альтернативно в виде смесей различных изомеров, например, рацемических смесей стереоизомеров. Кроме того, изобретение включает как (Z)-, так и (E)-изомеры по отношению к двойной связи, если не оговорено особо. Таким образом, предлагаемые в изобретении соединения, обычно изображаемые структурами (0), (0'), (I), (I'), (II) и (II') включают такие структуры, в которых двойные связи имеют конфигурацию (Z) или (E). В некоторых предпочтительных вариантах двойная связь в положении C12-C13 находится в цис- или Z-конфигурации. В некоторых вариантах двойная связь в положении C9-C10 находится в транс- или E-конфигурации. В других вариантах двойная связь в положении C12-C13 находится в цис- или Z-конфигурации, а двойная связь в положении C9-C10 находится в транс- или E-конфигурации. Изобретение также охватывает таутомеры конкретных соединений, которые описаны выше.It will be understood that some of the above classes and subclasses of compounds may exist in various isomeric forms. The invention includes compounds in the form of individual isomers, essentially free of other isomers, and alternatively in the form of mixtures of various isomers, for example, racemic mixtures of stereoisomers. In addition, the invention includes both (Z) - and (E) -isomers with respect to a double bond, unless otherwise specified. Thus, the compounds of the invention typically represented by structures (0), (0 '), (I), (I'), (II) and (II ') include structures in which the double bonds have the configuration (Z) or (E). In some preferred embodiments, the double bond at position C12-C13 is in the cis or Z configuration. In some embodiments, the double bond at position C9-C10 is in a trans or E configuration. In other embodiments, the double bond at position C12-C13 is in the cis or Z configuration, and the double bond at position C9-C10 is in the trans or E configuration. The invention also encompasses tautomers of specific compounds as described above.

Кроме того, данное изобретение относится к фармацевтически приемлемым производным предлагаемых в изобретении соединений и способам лечения субъекта с использованием данных соединений, из фармацевтических композиций или любого из указанного в комбинации с одним или несколькими дополнительными терапевтическими средствами. Термин «фармацевтически приемлемое производное», используемый в данном описании, означает любую фармацевтически приемлемую соль, сложный эфир или соль сложного эфира заявленного соединения или любой другой аддукт или производное, которое при введении пациенту способно давать (прямо или опосредованно) соединение, которое во всех других отношениях описано в данной публикации, или его метаболит или остаток. Таким образом, фармацевтически приемлемые производные наряду с прочим включают пролекарства. Пролекарство представляет собой производное соединения обычно с пониженной в значительной степени фармакологической активностью, которое содержит дополнительный остаток, который поддается удалению in vivo, давая исходную молекулу в виде фармакологически активной формы. Примером пролекарства является сложный эфир, который расщепляется in vivo, давая желаемое соединение. Пролекарства ряда соединений и вещества и способы для дериватизации исходного соединения, чтобы создать пролекарства, известны и могут быть адаптированы для данного изобретения. Некоторые примеры фармацевтических композиций и фармацевтически приемлемые производные будут более подробно обсуждаться в данном описании ниже.In addition, this invention relates to pharmaceutically acceptable derivatives of the compounds of the invention and methods for treating a subject using these compounds, from pharmaceutical compositions or any of the aforementioned in combination with one or more additional therapeutic agents. The term “pharmaceutically acceptable derivative”, as used herein, means any pharmaceutically acceptable salt, ester or ester salt of the claimed compound or any other adduct or derivative which, when administered to a patient, is capable of producing (directly or indirectly) a compound which in all other The relationship described in this publication, or its metabolite or residue. Thus, pharmaceutically acceptable derivatives, among others, include prodrugs. A prodrug is a derivative of a compound usually with substantially reduced pharmacological activity, which contains an additional residue that can be removed in vivo to give the parent molecule as a pharmacologically active form. An example of a prodrug is an ester that cleaves in vivo to give the desired compound. Prodrugs of a number of compounds and substances and methods for derivatizing the parent compound to create prodrugs are known and can be adapted for this invention. Some examples of pharmaceutical compositions and pharmaceutically acceptable derivatives will be discussed in more detail herein below.

Соединения, предлагаемые в изобретении, которые представляют особый интерес, включают соединения, которые:Compounds of the invention that are of particular interest include compounds that:

- оказывают цитотоксическое и ингибирующее рост действие на линии клеток злокачественных опухолей, поддерживаемые in vitro, или в исследованиях на животных с использованием приемлемой для научной цели модели ксенотрансплантата клеток злокачественной опухоли;- have a cytotoxic and growth inhibitory effect on cancer cell lines maintained in vitro, or in animal studies using a cancer cell xenograft model acceptable for scientific purposes;

- проявляют способность полимеризовать тубулин и стабилизировать конструкции, собранные из микротрубочек;- show the ability to polymerize tubulin and stabilize structures assembled from microtubules;

- проявляют минимальный уровень токсичности по отношению к жизненно важным органам;- exhibit a minimal level of toxicity in relation to vital organs;

- приводят к исчезновению опухолей в приемлемых для научной цели моделях ксенотрансплантатов клеток злокачественных опухолей;- lead to the disappearance of tumors in acceptable for scientific purposes models of xenografts of malignant tumor cells;

- приводят к уменьшению опухолей в приемлемых для научной цели моделях ксенотрансплантатов клеток злокачественных опухолей;- lead to a decrease in tumors in acceptable for scientific purposes models of xenografts of malignant tumor cells;

- приводят к исчезновению опухолей в приемлемых для научной цели моделях ксенотрансплантатов клеток злокачественных опухолей и отсроченному рецидиву/или отсутствию рецидива опухоли после прекращения лечения;- lead to the disappearance of tumors in acceptable for scientific purposes models of xenografts of cells of malignant tumors and delayed relapse / or the absence of tumor recurrence after discontinuation of treatment;

- дают временные и обратимые снижения массы тела и оказывают терапевтическое действие в приемлемых для научной цели моделях ксенотрансплантатов клеток злокачественных опухолей; - give temporary and reversible weight loss and have a therapeutic effect in acceptable for scientific purposes models of xenografts of malignant tumor cells;

- проявляют повышенную растворимость в воде по сравнению с эпотилонами A, B, C или D или паклитакселом, или дополнительно, или альтернативно имеют растворимость, достаточную для приготовления в идее композиций в водной среде с использованием уменьшенной доли кремофора; и/или- exhibit increased solubility in water compared to epothilones A, B, C or D or paclitaxel, or additionally, or alternatively, have a solubility sufficient to prepare in the idea of compositions in an aqueous medium using a reduced proportion of cremophor; and / or

- демонстрируют терапевтический профиль (например, оптимальную безопасность и лечебное действие), которые лучше, чем профиль эпотилона B, эпотилона D или паклитаксела.- demonstrate a therapeutic profile (eg, optimal safety and therapeutic effect) that are better than the profile of epothilone B, epothilone D or paclitaxel.

Множество аналогов эпотилона, которые описаны выше, получены, охарактеризованы и тестированы, как указано в примерах в данном описании. Обнаружено, что аналоги 9,10-дегидроэпотилона применимы для лечения злокачественной опухоли, и, в частности, получены соединения и обнаружено, что они обладают одним или несколькими характерными признаками, перечисленными выше.Many of the analogues of epothilone, which are described above, are obtained, characterized and tested, as described in the examples in this description. It was found that analogues of 9,10-dehydroepotilone are applicable for the treatment of malignant tumors, and, in particular, the compounds were obtained and it was found that they have one or more of the characteristic features listed above.

Методика синтезаSynthesis Method

Синтез некоторых эпотилонов, дезоксиэпотилонов и их аналогов описан ранее (см. патенты США 6242469, 6284781, 6300355, 6204388, 6316630 и 6369234; заявки на выдачу патентов США 09/797027, 09/796959 и 10/236135; и публикации PCT № WO 99/01124, WO 99/43653, и WO 01/64650, полное содержание которых включено в данное описание в виде ссылки). Зная о необходимости усовершенствованных или дополнительных методик синтеза для эффективного образования эпотилонов, дезоксиэпотилонов и их аналогов в больших количествах, в данном изобретении предлагается эффективный и модульный способ синтеза эпотилонов, дезоксиэпотилонов и их аналогов. Хотя синтез некоторых приведенных в качестве примеров соединений описан в иллюстративных примерах в данном описании, будет понятно, что данный способ, в общем, применим к получению аналогов и конъюгатов, обсуждаемых выше, для каждого из классов и подклассов, приведенных в данном описании.The synthesis of certain epothilones, deoxyepotilones and their analogues has been previously described (see US Pat. Nos. 6,242,469, 6,287,781, 6,300,355, 6,204,388, 6,316,630 and 6,369,234; U.S. Patent Applications 09/797027, 09/796959 and 10/236135; and PCT Publication No. WO 99 / 01124, WO 99/43653, and WO 01/64650, the entire contents of which are incorporated herein by reference). Knowing the need for improved or additional synthesis techniques for the efficient formation of epothilones, deoxyepotilones and their analogues in large quantities, this invention provides an effective and modular method for the synthesis of epothilones, deoxyepotilones and their analogues. Although the synthesis of some exemplary compounds described in the illustrative examples in this description, it will be understood that this method is generally applicable to the production of analogues and conjugates discussed above for each of the classes and subclasses described in this description.

В частности, соединения 9,10-дегидроэпотилонов, предлагаемые в данном изобретении, могут быть получены множеством способов с использованием методик синтеза, применимых при синтезе эпотилонов. В некоторых вариантах соединения получают с использованием конвергентного пути синтеза. Например, эпотилон можно синтезировать, получая два или три промежуточных продукта, которые соединяют вместе, получая требуемое соединение. В одном варианте одним из промежуточных продуктов является ацильная часть, содержащая атомы углерода 1-9, а другой промежуточный продукт содержит атомы углерода 10-15 и также может содержать боковую цепь тиазола. Указанные две примерно равные части эпотилона могут быть соединены вместе сначала с использованием реакции этерификации между C-1 и кислородом у C-15. Затем макроцикл может быть замкнут с использованием реакции образования связи углерод-углерод, такой как реакция сочетания Сузуки или реакции метатезиса с замыканием цикла. В одном варианте конечную стадию замыкания цикла осуществляют с использованием реакции метатезиса с замыканием цикла с образованием 9,10-двойной связи и замыканием макроцикла. Реакцию метатезиса с замыканием цикла осуществляют с использованием металлоорганического катализатора, такого как катализатор Груббса, как показано на схеме 8 ниже. В некоторых вариантах 9,10-двойную связь восстанавливают или окисляют, или 9,10-двойную связь можно дополнительно функционализировать, чтобы получить дополнительные производные эпотилона.In particular, the compounds of 9,10-dehydroepothilon proposed in this invention can be obtained in a variety of ways using synthesis methods applicable in the synthesis of epothilones. In some embodiments, compounds are prepared using a convergent synthesis pathway. For example, epothilone can be synthesized to produce two or three intermediates that are combined together to give the desired compound. In one embodiment, one of the intermediate products is the acyl moiety containing carbon atoms 1-9, and the other intermediate product contains carbon atoms 10-15 and may also contain a thiazole side chain. These two approximately equal parts of epothilone can be joined together first using the esterification reaction between C-1 and oxygen at C-15. Then, the macrocycle can be closed using a carbon-carbon bond formation reaction, such as a Suzuki coupling reaction or a ring closure metathesis reaction. In one embodiment, the final stage of loop closure is carried out using a metathesis reaction with loop closure to form a 9,10-double bond and macrocycle closure. The loop closure metathesis reaction is carried out using an organometallic catalyst, such as a Grubbs catalyst, as shown in Scheme 8 below. In some embodiments, the 9,10-double bond is reduced or oxidized, or the 9,10-double bond can be further functionalized to provide additional epothilone derivatives.

В других вариантах конечную стадию замыкания цикла осуществляют, используя реакцию метатезиса с замыканием цикла, чтобы образовать 12,13-двойную связь и замкнуть макроцикл. В некоторых вариантах 12,13-двойную связь восстанавливают или окисляют. В других вариантах используют реакцию макроальдолизации или макролактонизации, чтобы образовать макроцикл.In other embodiments, the final stage of loop closure is carried out using the metathesis reaction with loop closure to form a 12.13-double bond and close the macrocycle. In some embodiments, the 12.13-double bond is reduced or oxidized. In other embodiments, a macroaldolization or macrolactonization reaction is used to form a macrocycle.

Некоторые приведенные в качестве примеров реакции синтезы предлагаемых в изобретении соединений представлены на фигурах и в примерах. Как может быть понятно специалисту, можно получить множество аналогов и производных, используя описанные в данной публикации способы синтеза. Например, можно осуществить много стадий синтеза с разными защитными группами или разными заместителями в 16-членном цикле.Some of the syntheses of the compounds of the invention provided as examples of the reaction are shown in the figures and examples. As can be understood by one skilled in the art, many analogs and derivatives can be prepared using the synthetic methods described in this publication. For example, many synthesis steps can be carried out with different protecting groups or different substituents in a 16-membered ring.

Фармацевтические композицииPharmaceutical Compositions

Данное изобретение также относится к фармацевтическому препарату, содержащему, по меньшей мере, одно соединение, описанное выше, или его фармацевтически приемлемое производное, и данные соединения способны ингибировать рост или убивать клетки злокачественной опухоли и в некоторых представляющих особый интерес вариантах способны ингибировать рост или убивать клетки злокачественной опухоли с множественной лекарственной резистентностью. В некоторых вариантах фармацевтический препарат также содержит солюбилизирующий или эмульгирующий агент, такой как кремофор (полиоксил 35 касторового масла) или солютол (12-гидроксистеарат полиэтиленгликоля 660).The present invention also relates to a pharmaceutical preparation containing at least one compound described above or a pharmaceutically acceptable derivative thereof, and these compounds are capable of inhibiting the growth or killing of cancer cells, and in some embodiments of particular interest are capable of inhibiting growth or killing of cells malignant tumor with multidrug resistance. In some embodiments, the pharmaceutical preparation also contains a solubilizing or emulsifying agent, such as cremophor (castor oil polyoxyl 35) or solutol (polyethylene glycol 1260-hydroxystearate 660).

Как обсуждалось выше, данное изобретение относится к новым соединениям, обладающим противоопухолевой и антипролиферативной активностью, и таким образом, предлагаемые в изобретении соединения применимы для лечения злокачественной опухоли. Соответственно в другом аспекте данного изобретения предлагаются фармацевтические композиции, при этом указанные композиции содержат любое из соединений, описанных в данной заявке, и необязательно содержат фармацевтически приемлемый носитель. В некоторых вариантах указанные композиции необязательно дополнительно содержат одно или несколько дополнительных терапевтических средств. В некоторых других вариантах дополнительным терапевтическим средством является противораковой средство, которое более подробно обсуждается в данном описании.As discussed above, the present invention relates to new compounds having antitumor and antiproliferative activity, and thus, the compounds of the invention are useful for treating a malignant tumor. Accordingly, in another aspect of the present invention, pharmaceutical compositions are provided, wherein said compositions comprise any of the compounds described herein and optionally comprise a pharmaceutically acceptable carrier. In some embodiments, said compositions optionally further comprise one or more additional therapeutic agents. In some other embodiments, an additional therapeutic agent is an anticancer agent, which is discussed in more detail herein.

Некоторые соединения данного изобретения, пригодные для лечения, могут существовать в свободной форме, или в соответствующих случаях в виде их фармацевтически приемлемого производного. Согласно данному изобретению фармацевтически приемлемое производное включает, но не ограничено указанным, фармацевтически приемлемые соли, сложные эфиры, соли таких сложных эфиров или любой другой аддукт или производное, которое при введении нуждающемуся в этом пациенту способно давать, прямо или опосредованно, соединение, которое в другом отношении описано в данной публикации, или его метаболит или остаток, например, пролекарство.Some compounds of the present invention suitable for treatment may exist in free form, or, where appropriate, as a pharmaceutically acceptable derivative thereof. According to this invention, a pharmaceutically acceptable derivative includes, but is not limited to, pharmaceutically acceptable salts, esters, salts of such esters or any other adduct or derivative which, when administered to a patient in need thereof, is capable of producing, directly or indirectly, a compound that is in another the relation described in this publication, or its metabolite or residue, for example, a prodrug.

Используемый в данном описании термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к таким солям, которые на основании обоснованного медицинского заключения подходят для применения в контакте с тканями человека и более низкоорганизованных животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции и тому подобного и соответствуют разумному соотношению польза/риск. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в данной области. Например, S. M. Berge, et al. подробно описывают фармацевтически приемлемые соли в J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19 (1977), включенном в данное описание в виде ссылки. Соли могут быть получены in situ в ходе конечного выделения и очистки соединения согласно изобретению или отдельно в результате взаимодействия функции свободного основания с подходящей органической кислотой. Примерами фармацевтически приемлемых нетоксичных кислотно-аддитивных солей являются соли аминогруппы, образованные с неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и перхлорная кислота, или с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота или малоновая кислота, или с использованием других способов, применяемых в данной области, таких как ионный обмен. Другие фармацевтически приемлемые соли включают такие соли, как адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формиат, фумарат, глюкогептонат, глицерофосфат, глюконат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидройодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, пара-толуолсульфонат, ундеканоат, валерат и тому подобные. Типичные соли щелочных или щелочноземельных металлов включают соли натрия, лития, калия, кальция, магния и тому подобные. Следующие фармацевтически приемлемые соли включают в подходящем случае нетоксичные катионы аммония, четвертичного аммония и амина, образованные с использованием противоионов, такие как галогенид, гидроксид, карбоксилат, сульфат, фосфат, нитрат, низший алкилсульфонат и арилсульфонат.As used herein, the term “pharmaceutically acceptable salt” refers to those salts which, based on sound medical evidence, are suitable for use in contact with tissues of humans and lower organisms without excessive toxicity, irritation, allergic reaction and the like, and correspond to a reasonable benefit / risk. Pharmaceutically acceptable salts are well known in the art. For example, S. M. Berge, et al. pharmaceutically acceptable salts are described in detail in J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19 (1977), incorporated herein by reference. Salts can be prepared in situ during the final isolation and purification of the compound of the invention, or separately by reacting the free base function with a suitable organic acid. Examples of pharmaceutically acceptable non-toxic acid addition salts are amino group salts formed with inorganic acids such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, phosphoric acid, sulfuric acid and perchloric acid, or with organic acids such as acetic acid, oxalic acid, maleic acid, tartaric acid, citric acid, succinic acid or malonic acid, or using other methods used in the art, such as ion exchange. Other pharmaceutically acceptable salts include salts such as adipate, alginate, ascorbate, aspartate, benzenesulfonate, benzoate, bisulfate, borate, butyrate, camphorite, camphorsulfonate, citrate, cyclopentane propionate, digluconate, dodecyl sulfate, ethanesulfonate, formate glucose phosphate, glucose phosphate, , hemisulfate, heptanoate, hexanoate, hydroiodide, 2-hydroxyethanesulfonate, lactobionate, lactate, laurate, lauryl sulfate, malate, maleate, malonate, methanesulfonate, 2-naphthalene sulfonate, nicotinate, nitrate, oleate, oxalate, papmit INAT, persulfate, 3-phenylpropionate, phosphate, picrate, pivalate, propionate, stearate, succinate, sulfate, tartrate, thiocyanate, p-toluenesulfonate, undecanoate, valerate, and the like. Typical alkali or alkaline earth metal salts include sodium, lithium, potassium, calcium, magnesium, and the like. The following pharmaceutically acceptable salts include suitably non-toxic ammonium, quaternary ammonium and amine cations formed using counterions such as halide, hydroxide, carboxylate, sulfate, phosphate, nitrate, lower alkyl sulfonate and arylsulfonate.

Кроме того, используемый в данном описании термин «фармацевтически приемлемый сложный эфир» относится к сложным эфирам, которые гидролизуются in vivo и включают эфиры, которые легко распадаются в организме человека, при этом остается исходное соединение или его соль. Подходящие сложноэфирные группы включают, например, группы, полученные из фармацевтически приемлемых алифатических карбоновых кислот, особенно алкановых, алкеновых, циклоалкановых кислот и алкандикислот, в которых алкильный или алкенильный остаток преимущественно имеет не более 6 атомов углерода. Примеры конкретных сложных эфиров включают формиаты, ацетаты, пропионаты, бутираты, акрилаты и этилсукцинаты.In addition, as used herein, the term “pharmaceutically acceptable ester” refers to esters that hydrolyze in vivo and include esters that readily decompose in the human body, leaving the original compound or its salt. Suitable ester groups include, for example, groups derived from pharmaceutically acceptable aliphatic carboxylic acids, especially alkanoic, alkene, cycloalkanoic acids and alkanolic acids, in which the alkyl or alkenyl radical preferably has no more than 6 carbon atoms. Examples of specific esters include formates, acetates, propionates, butyrates, acrylates and ethyl succinates.

Кроме того, термин «фармацевтически приемлемые пролекарства», используемый в данном описании, относится к таким пролекарствам соединений, предлагаемых в данном изобретении, которые на основании обоснованного медицинского заключения подходят для применения в контакте с тканями человека и более низкоорганизованных животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции и тому подобного, соответствуют разумному соотношению польза/риск и эффективны в случае их предполагаемого применения, а также в том случае, когда это возможно, цвиттерионные формы соединений, предлагаемый в изобретении. Термин «пролекарство» относится к соединениям, которые быстро превращаются in vivo, давая исходное соединение указанных выше формул, например, в результате гидролиза в крови. Исчерпывающее обсуждение представлено в T. Higuchi and V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol.14 of the A. C. S. Symposium Series, и в Edward B. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, обе публикации включены в данное описание в виде ссылки.In addition, the term "pharmaceutically acceptable prodrugs" as used herein refers to those prodrugs of the compounds of this invention which, based on a sound medical opinion, are suitable for use in contact with human tissues and lower organisms without excessive toxicity, irritation, allergic reactions and the like, correspond to a reasonable benefit / risk ratio and are effective in the case of their intended use, as well as in the case when POSSIBILITY zwitterionic forms of the compounds according to the invention. The term "prodrug" refers to compounds that are rapidly converted in vivo, giving the starting compound of the above formulas, for example, by hydrolysis in the blood. A comprehensive discussion is presented in T. Higuchi and V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14 of the ACS Symposium Series, and in Edward B. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, both publications are incorporated herein by reference.

Как описано выше, фармацевтические композиции, предлагаемые в данном изобретении, дополнительно содержат фармацевтически приемлемый носитель, включающий какой-либо и все растворители, разбавители или другие жидкие наполнители, вспомогательные вещества для образования дисперсий или суспензий, поверхностно-активные агенты, агенты, обеспечивающие изотоничность раствора, загустители или эмульгаторы, консерванты, твердые связующие вещества, смазывающие вещества и тому подобные, которые подходят для конкретной требуемой дозированной форме. В Remington's Pharmaceutical Sciences, Fifteenth Edition, E.W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1975) описаны различные носители, используемые для приготовления фармацевтических композиций, и известные способы их получения. За исключением случаев, когда любая обычная среда носителя несовместима с противоопухолевым соединением согласно изобретению, например, оказывая какое-либо нежелательное биологическое действие или иным образом взаимодействуя с каким-либо другим соединением(ями) фармацевтической композиции с нежелательным эффектом, ее применение рассматривается в объеме данного изобретения. Некоторые примеры веществ, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают, но не ограничены указанным, сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлоза и ее производные, такие как натрий-карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; порошкообразная трагакантовая камедь; солод; желатин; тальк; кремофор; солютол; эксципиенты, такие как масло какао, воски для суппозиториев; масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло; сафлоровое масло; кунжутное масло; оливковое масло; кукурузное масло и соевое масло; гликоли, такие как пропиленгликоль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; буферные средства, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; альгиновая кислота; апирогенная вода; изотоничный физиологический раствор; раствор Рингера; этиловый спирт и фосфатные буферные растворы, а также другие нетоксичные совместимые смазывающие вещества, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, а также красители, агенты, способствующие высвобождению, покрывающие агенты, подсластители, корригенты отдушки, консерванты и антиоксиданты также могут присутствовать в композиции в соответствии с решением специалиста, готовящего композицию.As described above, the pharmaceutical compositions of this invention further comprise a pharmaceutically acceptable carrier, including any and all solvents, diluents or other liquid excipients, dispersion or suspension excipients, surface active agents, isotonicity agents of the solution , thickeners or emulsifiers, preservatives, solid binders, lubricants and the like, which are suitable for the particular dosage form required IU. In Remington's Pharmaceutical Sciences, Fifteenth Edition, E.W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1975) describes various carriers used for the preparation of pharmaceutical compositions and known methods for their preparation. Unless any conventional carrier medium is incompatible with the antitumor compound of the invention, for example, exerting any undesirable biological effect or otherwise interacting with any other compound (s) of the pharmaceutical composition with an undesired effect, its use is contemplated within the scope of this inventions. Some examples of substances that can serve as pharmaceutically acceptable carriers include, but are not limited to, sugars, such as lactose, glucose, and sucrose; starches such as corn starch and potato starch; cellulose and its derivatives, such as sodium carboxymethyl cellulose, ethyl cellulose and cellulose acetate; powdered tragacanth gum; malt; gelatin; talc; cremophor; solutol; excipients, such as cocoa butter, suppository waxes; oils such as peanut butter, cottonseed oil; safflower oil; Sesame oil; olive oil; corn oil and soybean oil; glycols such as propylene glycol; esters such as ethyl oleate and ethyl laurate; agar; buffering agents such as magnesium hydroxide and aluminum hydroxide; alginic acid; pyrogen-free water; isotonic saline; ringer's solution; ethyl alcohol and phosphate buffers, as well as other non-toxic compatible lubricants such as sodium lauryl sulfate and magnesium stearate, as well as colorants, release agents, coating agents, sweeteners, flavoring agents, preservatives and antioxidants may also be present in the composition in accordance with with the decision of the specialist preparing the composition.

Применения соединений и фармацевтических композицийThe use of compounds and pharmaceutical compositions

Изобретение, кроме того, относится к способу ингибирования роста опухолей и/или метастазирования опухолей. В некоторых представляющих особый интерес вариантах изобретение относится к способу лечения злокачественных опухолей посредством ингибирования роста опухолей и/или метастазирования опухолей в случае клеток злокачественной опухоли с множественной лекарственной резистентностью. Способ заключается во введении терапевтически эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемого производного нуждающемуся в этом субъекту (включая, но не ограничиваясь указанным, человека или животного). В некоторых вариантах, особенно в случае лечения злокачественных опухолей, содержащих злокачественные клетки с множественной лекарственной резистентностью, терапевтически эффективным количеством является количество, достаточное для того, чтобы убивать или ингибировать рост линий клеток злокачественной опухоли с множественной лекарственной резистентностью. В некоторых вариантах предлагаемые в изобретении соединения применимы для лечения солидных опухолей.The invention further relates to a method for inhibiting tumor growth and / or tumor metastasis. In some embodiments of particular interest, the invention relates to a method for treating malignant tumors by inhibiting tumor growth and / or metastasizing tumors in the case of multidrug-resistant cancer cells. The method comprises administering a therapeutically effective amount of a compound or a pharmaceutically acceptable derivative thereof to a subject in need thereof (including, but not limited to, a human or animal). In some embodiments, especially in the case of treatment of malignant tumors containing multidrug resistance malignant cells, a therapeutically effective amount is an amount sufficient to kill or inhibit the growth of multidrug resistance malignant tumor cell lines. In some embodiments, the compounds of the invention are useful in the treatment of solid tumors.

Соединения и фармацевтические композиции, предлагаемые в данном изобретении, можно использовать для лечения и профилактики какого-либо заболевания или состояний, включающих пролиферативные заболевания (например, злокачественная опухоль), аутоиммунные заболевания (например, ревматоидный артрит) и инфекции (например, бактериальные, грибковые и т.д.). Соединения и фармацевтические композиции можно вводить животным, предпочтительно млекопитающим (например, одомашненным животным, кошкам, собакам, мышам, крысам) и более предпочтительно человеку. Можно использовать любой способ введения для доставки соединения фармацевтических композиции животному. В некоторых вариантах соединение или фармацевтическую композицию вводят парентерально.The compounds and pharmaceutical compositions of this invention can be used to treat and prevent any disease or condition, including proliferative diseases (e.g., cancer), autoimmune diseases (e.g., rheumatoid arthritis) and infections (e.g., bacterial, fungal and etc.). The compounds and pharmaceutical compositions can be administered to animals, preferably mammals (e.g., domesticated animals, cats, dogs, mice, rats), and more preferably to humans. Any route of administration may be used to deliver the compound of the pharmaceutical composition to the animal. In some embodiments, the compound or pharmaceutical composition is administered parenterally.

В еще одном аспекте, согласно способам лечения, предлагаемым в данном изобретении, опухолевые клетки убивают или ингибируют их рост в результате контакта опухолевых клеток с предлагаемым соединением или композицией, которые описаны в данной публикации. Таким образом, в еще одном аспекте изобретения предлагается способ лечения злокачественной опухоли, включающий введение терапевтически эффективного количества предлагаемого в изобретении соединения или фармацевтической композиции, содержащей предлагаемое в изобретении соединение, нуждающемуся в этом субъекту в таких количествах и в течение такого периода времени, которое необходимо для достижения требуемого результата. В некоторых вариантах осуществления данного изобретения «терапевтически эффективное количество» предлагаемого в изобретении соединения или фармацевтической композиции представляет собой такое количество, которое эффективно для убивания или ингибирования роста опухолевых клеток. Соединения и композиции согласно способу, предлагаемому в данном изобретении, можно вводить с использованием любого количества и любого пути введения, эффективного для убивания или ингибирования опухолевых клеток. Таким образом, выражение «количество, эффективное для убивания или ингибирования роста опухолевых клеток», используемое в данном описании, относится к количеству агента, достаточного для того, чтобы убить или ингибировать рост опухолевых клеток. Точное требуемое количество будет варьировать в зависимости от вида, возраста и общего состояния субъекта, тяжести инфекции, конкретного противоопухолевого агента, способа его введения и тому подобного. Противоопухолевые соединения, предлагаемые в изобретении, предпочтительно готовят в дозированной лекарственной форме для простоты введения и постоянства дозы. Выражение «дозированная лекарственная форма», используемое в данном описании, относится к физически дискретной единице противоопухолевого агента, подходящей для пациента, подвергаемого лечению. Однако будет понятно, что относительно суммарного суточное применения соединений и композиций, предлагаемых в данном изобретении, решение будет выносить лечащий врач на основании обоснованного медицинского заключения. Конкретный уровень терапевтически эффективной дозы для любого конкретного пациента или организма будет зависеть от множества факторов, включая заболевание, подвергаемое лечению, и тяжесть нарушения; активность конкретного используемого соединения; конкретную используемую композицию; возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и диету пациента; время введения, путь введения и скорость экскреции конкретного используемого соединения; продолжительность лечения; лекарственные средства, используемые в комбинации или одновременно с конкретным используемым соединением; и тому подобные факторы, хорошо известные в области медицины.In yet another aspect, according to the treatment methods of the invention, the tumor cells kill or inhibit their growth by contacting the tumor cells with the compound or composition of the invention as described in this publication. Thus, in another aspect of the invention, there is provided a method of treating a malignant tumor, comprising administering a therapeutically effective amount of a compound of the invention or a pharmaceutical composition comprising a compound of the invention to a subject in need of such a quantity and for such a period of time as is necessary for achieve the desired result. In some embodiments of the invention, a “therapeutically effective amount” of a compound or pharmaceutical composition of the invention is that amount which is effective for killing or inhibiting the growth of tumor cells. Compounds and compositions according to the method of the invention may be administered using any amount and any route of administration effective to kill or inhibit tumor cells. Thus, the expression “amount effective to kill or inhibit the growth of tumor cells”, as used herein, refers to the amount of agent sufficient to kill or inhibit the growth of tumor cells. The exact amount required will vary depending on the type, age and general condition of the subject, the severity of the infection, the specific antitumor agent, the route of administration, and the like. The antitumor compounds of the invention are preferably formulated in a dosage form for ease of administration and constant dosage. The expression "dosage form", as used herein, refers to a physically discrete unit of an antitumor agent suitable for the patient being treated. However, it will be clear that regarding the total daily use of the compounds and compositions proposed in this invention, the decision will be made by the attending physician based on a sound medical opinion. The specific level of therapeutically effective dose for any particular patient or organism will depend on many factors, including the disease being treated and the severity of the disorder; the activity of the particular compound used; specific composition used; age, body weight, general health, gender and diet of the patient; time of administration, route of administration and rate of excretion of the particular compound used; duration of treatment; drugs used in combination or simultaneously with the particular compound used; and similar factors well known in the medical field.

Кроме того, после приготовления состава с подходящим фармацевтически приемлемым носителем в требуемой дозе фармацевтические композиции, предлагаемые в данном изобретении, можно вводить человеку и другим животным перорально, ректально, парентерально, интрацистернально, интравагинально, внутрибрюшинно, местно (в виде порошков, мазей или капель), буккально, в виде перорального или назального спрея и тому подобного, в зависимости от тяжести инфекции, подвергаемой лечению. В некоторых вариантах осуществления изобретения предлагаемые соединения, которые описаны в данной публикации, готовят путем конъюгирования с растворимыми в воде хелаторами или растворимыми в воде полимерами, такими как полиэтиленгликоль, как поли(1-глутаминовая кислота) или поли(1-аспарагиновая кислота), которые описаны в патенте США 5977163, полное содержание которого включено в данное описание в виде ссылки. В некоторых вариантах предлагаемые в изобретении соединения можно вводить перорально или парентерально в дозе, достаточной для доставки примерно от 0,001 мг/кг до 100 мг/кг, примерно от 0,01 мг/кг до 50 мг/кг, предпочтительно примерно от 0,1 мг/кг до 40 мг/кг, предпочтительно примерно от 0,5 мг/кг до 30 мг/кг, примерно от 0,01 мг/кг до 10 мг/кг, примерно от 0,1 мг/кг до 10 мг/кг и более предпочтительно примерно от 1 мг/кг до 25 мг/кг массы тела субъекта в сутки, один или несколько раз в сутки, чтобы получить требуемый терапевтический эффект. Требуемая доза может доставляться через день, каждые три дня, каждую неделю, каждые две недели, каждые три недели или каждые четыре недели. В некоторых вариантах требуемая доза может доставляться с использованием многократных введений (например, два, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять или десять).In addition, after preparing the composition with a suitable pharmaceutically acceptable carrier in the required dose, the pharmaceutical compositions of this invention can be administered to humans and other animals orally, rectally, parenterally, intracisternally, intravaginally, intraperitoneally, topically (in the form of powders, ointments or drops) , buccally, in the form of an oral or nasal spray and the like, depending on the severity of the infection being treated. In some embodiments, the inventive compounds described herein are prepared by conjugation with water soluble chelators or water soluble polymers such as polyethylene glycol such as poly (1-glutamic acid) or poly (1-aspartic acid), which described in US patent 5977163, the full contents of which are incorporated into this description by reference. In some embodiments, the compounds of the invention can be administered orally or parenterally in a dose sufficient to deliver from about 0.001 mg / kg to 100 mg / kg, from about 0.01 mg / kg to 50 mg / kg, preferably from about 0.1 mg / kg to 40 mg / kg, preferably from about 0.5 mg / kg to 30 mg / kg, from about 0.01 mg / kg to 10 mg / kg, from about 0.1 mg / kg to 10 mg / kg and more preferably from about 1 mg / kg to 25 mg / kg of body weight of the subject per day, one or more times a day, to obtain the desired therapeutic effect. The required dose can be delivered every other day, every three days, every week, every two weeks, every three weeks or every four weeks. In some embodiments, the desired dose may be delivered using multiple administrations (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, or ten).

Жидкие дозированные формы для перорального введения включают, но не ограничены указанным, фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активным соединениям жидкие дозированные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное масла, масло из зародышей пшеницы, оливковое, касторовое и кунжутное масла), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры сорбитана и жирных кислот и их смеси. Кроме инертных разбавителей, пероральные композиции также содержат адъюванты, такие как увлажнители, эмульгаторы и суспендирующие агенты, подсластители, корригенты и отдушки.Liquid dosage forms for oral administration include, but are not limited to, pharmaceutically acceptable emulsions, microemulsions, solutions, suspensions, syrups and elixirs. In addition to the active compounds, liquid dosage forms may contain inert diluents commonly used in the art, such as, for example, water or other solvents, solubilizing agents and emulsifiers, such as ethyl alcohol, isopropyl alcohol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate , propylene glycol, 1,3-butylene glycol, dimethylformamide, oils (in particular cottonseed, peanut, corn oil, wheat germ oil, olive, castor and sesame oils), glycerin, tetrahydrofurf Ryl alcohol, polyethylene glycols and esters of sorbitan and fatty acids and mixtures thereof. In addition to inert diluents, oral compositions also contain adjuvants, such as humectants, emulsifiers and suspending agents, sweeteners, flavoring agents and perfumes.

Инъекционные препараты, например, стерильные инъекционные водные или масляные суспензии, могут быть приготовлены согласно известной области техники с использованием подходящих диспергирующих и увлажняющих агентов и суспендирующих агентов. Стерильный инъекционный препарат также может представлять собой стерильный инъекционный раствор, суспензию или эмульсию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например в виде раствора в 1,3-бутандиоле. К приемлемым наполнителям и растворителям, которые могут быть использованы, относятся вода, раствор Рингера, U.S.P. и изотоничный раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспензионной среды обычно используют стерильные нелетучие масла. Для такой цели можно использовать любое мягкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, для получения инъекционных препаратов используют жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.Injectable preparations, for example, sterile injectable aqueous or oily suspensions, can be prepared according to the known art using suitable dispersing and moisturizing agents and suspending agents. The sterile injectable preparation may also be a sterile injectable solution, suspension or emulsion in a non-toxic parenterally acceptable diluent or solvent, for example, as a solution in 1,3-butanediol. Suitable excipients and solvents that may be used include water, Ringer's solution, U.S.P. and isotonic sodium chloride solution. In addition, sterile fixed oils are usually used as a solvent or suspension medium. For this purpose, any bland fixed oil may be employed including synthetic mono- or diglycerides. In addition, fatty acids such as oleic acid are used to prepare injectable preparations.

Инъекционные препараты можно стерилизовать, например, фильтрованием через фильтр, удерживающий бактерии, или внесением стерилизующих агентов в форму стерильных твердых композиций, которые можно растворять или диспергировать в стерильной воде или другой стерильной инъекционной среде перед использованием.Injectable preparations can be sterilized, for example, by filtration through a bacteria-retaining filter, or by incorporating sterilizing agents in the form of sterile solid compositions that can be dissolved or dispersed in sterile water or other sterile injectable medium before use.

Чтобы продлить действие лекарственного средства, часто желательно замедлить всасывание лекарственного средства, доставленного посредством подкожной или внутримышечной инъекции. Это можно осуществить, используя жидкую суспензию кристаллического или аморфного вещества с плохой растворимостью в воде. Степень всасывания лекарственного средства в таком случае зависит от степени его растворения, которое в свою очередь может зависеть от размера кристаллов и кристаллической формы. Альтернативно замедленное всасывание парентерально введенной формы лекарственного средства достигается растворением или суспендированием лекарственного средства в масляном наполнителе. Инъекционные формы замедленного всасывания готовят путем образования матриц для микроинкапсулирования лекарственных средств в биоразлагаемые полимеры, такие как полилактид-полигликолид. В зависимости от соотношения лекарственного средства к полимеру и природы конкретного используемого полимера скорость высвобождения лекарственного средства можно регулировать. Примеры других биоразлагаемых полимеров включают сложные поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Инъекционные препараты замедленного всасывания также готовят улавливанием лекарственного средства в липосомах или микроэмульсиях, которые совместимы с тканями организма.To prolong the effect of the drug, it is often desirable to slow the absorption of the drug delivered by subcutaneous or intramuscular injection. This can be done using a liquid suspension of a crystalline or amorphous substance with poor solubility in water. The degree of absorption of the drug in this case depends on the degree of dissolution, which in turn may depend on the size of the crystals and crystalline form. Alternatively, delayed absorption of a parenterally administered drug form is achieved by dissolving or suspending the drug in an oil vehicle. Injection forms of delayed absorption are prepared by forming matrices for microencapsulation of drugs in biodegradable polymers such as polylactide-polyglycolide. Depending on the ratio of drug to polymer and the nature of the particular polymer used, the rate of release of the drug can be controlled. Examples of other biodegradable polymers include poly (orthoesters) and poly (anhydrides). Slow-injection injection preparations are also prepared by trapping the drug in liposomes or microemulsions that are compatible with body tissues.

Композиции для ректального или вагинального введения предпочтительно представляют собой суппозитории, которые могут быть приготовлены смешиванием соединений, предлагаемых в данном изобретении, с подходящими нераздражающими эксципиентами или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или воск для суппозиториев, которые являются твердыми при температуре окружающей среды, но жидкими при температуре тела и поэтому плавятся в прямой кишке или вагинальной полости и высвобождают активное соединение.Compositions for rectal or vaginal administration are preferably suppositories that can be prepared by mixing the compounds of this invention with suitable non-irritating excipients or carriers, such as cocoa butter, polyethylene glycol or suppository wax, which are solid at ambient temperature, but liquid at body temperature and therefore melt in the rectum or vaginal cavity and release the active compound.

Твердые дозированные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых дозированных формах активное соединение смешивают, по меньшей мере, с одним инертным фармацевтически приемлемым эксципиентом или носителем, таким как цитрат натрия или фосфат дикальция и/или a) наполнителями или сухими разбавителями, такими как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота, b) связующими веществами, такими, например, как карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидинон, сахароза и аравийская камедь, c) смачивающими средствами, такими как глицерин, d) дезинтегрирующими агентами, такими как агар-агар, карбонат кальция, картофельный крахмал или крахмал из тапиоки, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия, e) замедляющими растворение агентов, такими как парафин, f) ускорителями всасывания, такими как соединения четвертичного аммония, g) увлажнителями, такими как, например, цетиловый спирт и глицеринмоностеарат, h) абсорбентами, такими как каолин и бентонитовая глина, и i) смазывающими веществами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия и их смесями. В случае капсул, таблеток и пилюль дозированная форма также может содержать буферные агенты.Solid dosage forms for oral administration include capsules, tablets, pills, powders and granules. In such solid dosage forms, the active compound is mixed with at least one inert pharmaceutically acceptable excipient or carrier, such as sodium citrate or dicalcium phosphate and / or a) excipients or dry diluents such as starches, lactose, sucrose, glucose, mannitol and silicic acid, b) binders, such as carboxymethyl cellulose, alginates, gelatin, polyvinylpyrrolidinone, sucrose and gum arabic, c) wetting agents such as glycerin, d) disintegrating agents ntami, such as agar-agar, calcium carbonate, potato starch or tapioca starch, alginic acid, some silicates and sodium carbonate, e) inhibiting the dissolution of agents, such as paraffin, f) absorption accelerators, such as quaternary ammonium compounds, g) humectants, such as, for example, cetyl alcohol and glycerol monostearate, h) absorbents, such as kaolin and bentonite clay, and i) lubricants, such as talc, calcium stearate, magnesium stearate, solid polyethylene glycols, sodium lauryl sulfate and their mixtures. In the case of capsules, tablets and pills, the dosage form may also contain buffering agents.

Твердые композиции сходного типа также могут быть использованы в качестве наполнителей в мягких и твердых желатиновых капсулах с использованием таких эксципиентов, как лактоза или молочный сахар, а также полиэтиленгликоли с высокой молекулярной массой и тому подобное. Твердые дозированные формы таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул можно приготовить с покрытиями и оболочками, такими как кишечнорастворимые покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области приготовления фармацевтических композиций. Они необязательно могут содержать контрастные агенты и также могут иметь такой состав, что они высвобождают активный ингредиент(ы) только или предпочтительно в определенной части кишечного тракта необязательно замедленным образом. Примеры инкапсулирующих композиций, которые могут быть использованы, включают полимерные вещества и воски. Твердые композиции сходного типа также можно использовать в качестве наполнителей в мягких и твердых заполняемых желатиновых капсулах с использованием таких эксципиентов как лактоза или молочный сахар, а также полиэтиленгликоли с высокой молекулярной массой и тому подобное.Solid compositions of a similar type can also be used as fillers in soft and hard gelatin capsules using excipients such as lactose or milk sugar, as well as high molecular weight polyethylene glycols and the like. Solid dosage forms of tablets, dragees, capsules, pills and granules can be prepared with coatings and shells, such as enteric coatings and other coatings well known in the art of preparing pharmaceutical compositions. They may optionally contain contrast agents and may also be of such a composition that they release the active ingredient (s) only or preferably in a certain part of the intestinal tract in an optionally delayed manner. Examples of encapsulating compositions that may be used include polymeric substances and waxes. Solid compositions of a similar type can also be used as fillers in soft and hard filled gelatin capsules using excipients such as lactose or milk sugar, as well as high molecular weight polyethylene glycols and the like.

Активные соединения также могут быть в микроинкапсулированной форме с одним или несколькими эксципиентами, которые указаны выше. Твердые дозированные формы таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул можно приготовить с покрытиями и оболочками, такими как кишечнорастворимые покрытия, покрытия для контролируемого высвобождения и другие покрытия, хорошо известные в области приготовления фармацевтических композиций. В таких твердых дозированных формах активное соединение может быть смешано по меньшей мере с одним инертным разбавителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие дозированные формы могут также содержать, и это является обычной практикой, дополнительные вещества, отличные от инертных разбавителей, например, смазывающие вещества для таблетирования и другие вспомогательные средства для таблетирования, такие как стеарат магния и микрокристаллическая целлюлоза. В случае капсул, таблеток и пилюль дозированные формы также могут содержать буферные агенты. Они необязательно могут содержать контрастные агенты и также могут иметь такой состав, что они высвобождают активный ингредиент(ы) только или предпочтительно в определенной части кишечного тракта необязательно замедленным образом. Примеры инкапсулирующих композиций, которые могут быть использованы, включают полимерные вещества и воски.The active compounds may also be in microencapsulated form with one or more excipients as described above. Solid dosage forms of tablets, dragees, capsules, pills and granules can be prepared with coatings and coatings, such as enteric coatings, controlled release coatings and other coatings well known in the art of pharmaceutical formulations. In such solid dosage forms, the active compound may be mixed with at least one inert diluent, such as sucrose, lactose or starch. Such dosage forms may also contain, and it is common practice, additional substances other than inert diluents, for example, tabletting lubricants and other tabletting aids, such as magnesium stearate and microcrystalline cellulose. In the case of capsules, tablets and pills, the dosage forms may also contain buffering agents. They may optionally contain contrast agents and may also be of such a composition that they release the active ingredient (s) only or preferably in a certain part of the intestinal tract in an optionally delayed manner. Examples of encapsulating compositions that may be used include polymeric substances and waxes.

Дозированные формы для местного или трансдермального введения соединения, предлагаемого в данном изобретении, включают мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, порошки, растворы, спреи, ингаляторы или пластыри. Активное соединение смешивают в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и любыми необходимыми консервантами или буферами, которые могут требоваться. Офтальмический препарат, ушные капли и глазные капли также считаются входящими в объем данного изобретения. Кроме того, данное изобретение охватывает применение трансдермальных пластырей, которые имеют дополнительное преимущество, обеспечивая контролируемую доставку соединения в организм. Такие дозированные формы можно приготовить растворением или диспергированием соединения в подходящей среде. Также можно использовать усилители всасывания, чтобы увеличить поток соединения через кожу. Скорость можно контролировать либо снабжая контролирующей скорость мембраной, либо диспергируя соединение в полимерном матриксе или геле.Dosage forms for topical or transdermal administration of a compound of the invention include ointments, pastes, creams, lotions, gels, powders, solutions, sprays, inhalers or patches. The active compound is mixed under sterile conditions with a pharmaceutically acceptable carrier and any necessary preservatives or buffers that may be required. An ophthalmic preparation, ear drops and eye drops are also considered to be included in the scope of this invention. In addition, this invention encompasses the use of transdermal patches, which have the added benefit of providing controlled delivery of the compound to the body. Such dosage forms can be prepared by dissolving or dispersing the compound in a suitable medium. Suction enhancers can also be used to increase the flow of the compound through the skin. The speed can be controlled either by providing a speed-controlling membrane or dispersing the compound in a polymer matrix or gel.

Как обсуждалось выше, соединения, предлагаемые в данном изобретении, применимы в качестве противоопухолевых агентов и таким образом могут быть применимы при лечении злокачественной опухоли посредством осуществления гибели опухолевых клеток или ингибирования роста опухолевых клеток. В общем предлагаемые в изобретении противоопухолевые агенты применимы при лечении злокачественных опухолей и других пролиферативных расстройств, включая без ограничения рак молочной железы, рак головного мозга, рак кожи, рак шейки матки, рак ободочной и прямой кишки, лейкоз, рак легкого, меланому, множественную миелому, неходжкинскую лимфому, рак яичников, рак поджелудочной железы, рак простаты и рак желудка, при этом названы только некоторые. В некоторых вариантах противоопухолевые агенты согласно изобретению активны против лейкозных клеток и клеток меланомы и, следовательно, применимы для лечения лейкозов (например, миелоидного, лимфоцитарного, промиелоцитарного, миелоцитарного и лимфобластного лейкозов, либо в острой, либо в хронической формах) и злокачественных меланом. В других вариантах противоопухолевые агенты согласно изобретению активны против солидных опухолей, а также убивают и/или ингибируют рост клеток с множественной лекарственной резистентностью (MDR-клеток). В некоторых вариантах противоопухолевые агенты согласно изобретению активны против злокачественных опухолей, которые резистентны к другим известным противораковым агентам или которые, как было обнаружено, не отвечают клинически на другие известные противораковые агенты. В других вариантах противоопухолевые агенты согласно изобретению активны против злокачественных опухолей, которые резистентны к другим противораковым стабилизирующим микротрубочки агентам (например, паклитакселу).As discussed above, the compounds of this invention are useful as antitumor agents and thus may be useful in treating a cancer by effecting the death of tumor cells or inhibiting the growth of tumor cells. In general, the antitumor agents of the invention are useful in the treatment of malignant tumors and other proliferative disorders, including but not limited to breast cancer, brain cancer, skin cancer, cervical cancer, colorectal cancer, leukemia, lung cancer, melanoma, multiple myeloma , non-Hodgkin's lymphoma, ovarian cancer, pancreatic cancer, prostate cancer and stomach cancer, with only a few named. In some embodiments, the antitumor agents of the invention are active against leukemia and melanoma cells, and are therefore useful for treating leukemia (e.g., myeloid, lymphocytic, promyelocytic, myelocytic, and lymphoblastic leukemia, either in acute or chronic forms) and malignant melanomas. In other embodiments, the antitumor agents of the invention are active against solid tumors and also kill and / or inhibit the growth of multidrug resistance cells (MDR cells). In some embodiments, the antitumor agents of the invention are active against malignant tumors that are resistant to other known anticancer agents or which have been found to not respond clinically to other known anticancer agents. In other embodiments, the antitumor agents of the invention are active against malignant tumors that are resistant to other anti-cancer microtubule stabilizing agents (e.g., paclitaxel).

Также будет понятно, что соединения и фармацевтические композиции, предлагаемые в данном изобретении, можно использовать в комбинированной терапии, то есть соединения и фармацевтические композиции можно вводить одновременно, перед или после одного или несколько других требуемых терапевтических средств или медицинских процедур. Для конкретной комбинации терапевтических способов (терапевтических средств или процедур), используемых в комбинированной схеме, во внимание будет принята совместимость требуемых терапевтических средств и/или процедур и требуемый терапевтический эффект, который необходимо достичь. Также будет понятно, что применяемые терапевтические способы могут достигать требуемого эффекта в отношении того же самого расстройства (например, предлагаемое в изобретении соединение можно вводить одновременно с другим противоопухолевым агентом) или они могут достигать других эффектов (например, контроль каких-либо вредных эффектов).It will also be understood that the compounds and pharmaceutical compositions of this invention can be used in combination therapy, that is, the compounds and pharmaceutical compositions can be administered simultaneously, before or after one or more other desired therapeutic agents or medical procedures. For the particular combination of therapeutic methods (therapeutic agents or procedures) used in the combination regimen, the compatibility of the required therapeutic agents and / or procedures and the desired therapeutic effect to be achieved will be taken into account. It will also be understood that the therapeutic methods used can achieve the desired effect in relation to the same disorder (for example, the compound of the invention can be administered simultaneously with another antitumor agent) or they can achieve other effects (for example, control of any harmful effects).

Например, другие способы терапии или противоопухолевые агенты, которые можно использовать в комбинации с предлагаемыми в данном изобретении противоопухолевыми агентами, включают хирургию, лучевую терапию (лишь немногими примерами являются гамма-излучение, лучевая терапия пучком нейтронов, лучевая терапия электронным пучком, протонная терапия, брахитерапия и системные радиоактивные изотопы, при этом указаны только некоторые), эндокринную терапию, модификаторы биологического ответа (интерфероны, интерлейкины и фактор некроза опухолей (TNF), при этом указаны только некоторые), гипертермию и криотерапию, агенты для ослабления каких-либо вредных эффектов (например, противорвотные средства) и другие одобренные химиотерапевтические средства, включая, но не ограничиваясь указанным, алкилирующие лекарственные средства (мехлорэтамин, хлорамбуцил, циклофосфамид, мелфалан, ифосамид), антиметаболиты (метотрексат), антагонисты пурина и антагонисты пиримидина (6-меркаптопурин, 5-фторурацил, цитарабил, гемцитабин), яды веретена деления (винбластин, винкристин, винорелбин, паклитаксел, доцетаксел), подофиллотоксины (этопозид, иринотекан, топотекан), антибиотики (доксорубицин, блеомицин, митомицин), нитрозомочевины (кармустин, ломустин), неорганические ионы (цисплатин, карбоплатин), ферменты (аспарагиназа) и гормоны (тамоксифен, леупролид, флутамид и мегестрол), при этом названы только некоторые. Для более полного обсуждения усовершенствованных способов терапии злокачественных опухолей см. , список одобренных FDA лекарственных средств для онкологии в , и в Merck Manual, Seventeenth Ed. 1999, полное содержание которых включено в данное описание в виде ссылки.For example, other methods of therapy or antitumor agents that can be used in combination with the antitumor agents of this invention include surgery, radiation therapy (only a few examples are gamma radiation, neutron beam radiation, electron beam radiation, proton therapy, brachytherapy and systemic radioactive isotopes, with only a few indicated), endocrine therapy, biological response modifiers (interferons, interleukins and tumor necrosis factor (TNF), only a few are indicated), hyperthermia and cryotherapy, agents to attenuate any harmful effects (e.g. antiemetics) and other approved chemotherapeutic agents, including but not limited to alkylating drugs (mechlorethamine, chlorambucil, cyclophosphamide, melphalan, ifosamide), antimetabolites (methotrexate), purine antagonists and pyrimidine antagonists (6-mercaptopurine, 5-fluorouracil, cytarabil, gemcitabine), fission spindle poisons (vinblastine, vincristin, vincristin, vinquinel, vinquinel, vinquinel, vinquinel, vinquinel, vinquinel , docetaxel), podophyllotoxins (etoposide, irinotecan, topotecan), antibiotics (doxorubicin, bleomycin, mitomycin), nitrosoureas (carmustine, lomustine), inorganic ions (cisplatin, carboplatin), enzymes (asparafenulamide and tamolupinide) megestrol), while only a few are named. For a more complete discussion of improved therapies for cancer, see the FDA's list of approved oncology drugs in, and in Merck Manual, Seventeenth Ed. 1999, the entire contents of which are incorporated herein by reference.

В следующем аспекте данное изобретение также относится к фармацевтическому комплекту или набору, содержащему один или несколько емкостей, заполненных одним или несколькими ингредиентами фармацевтических композиций согласно изобретению, и в некоторых вариантах он содержит дополнительное одобренное терапевтическое средство для применения в комбинированной терапии. Необязательно к такой емкости(ям) может прилагаться листок в форме, установленной государственным органом, регламентирующим производство, применение или продажу фармацевтических продуктов, и в данном листке отражено разрешение органом производства, применения или продажи для введения человеку.In a further aspect, the invention also relates to a pharmaceutical kit or kit containing one or more containers filled with one or more ingredients of the pharmaceutical compositions of the invention, and in some embodiments, it contains an additional approved therapeutic agent for use in combination therapy. Optionally, such a container (s) may be accompanied by a leaflet in the form established by the state body regulating the production, use or sale of pharmaceutical products, and this leaflet reflects the permission of the body of manufacture, use or sale for administration to a person.

ЭквивалентыEquivalents

Типичные примеры, которые следуют далее, предназначены для того, чтобы помочь иллюстрировать изобретение, и не предназначены для ограничения объема изобретения, и не должны считаться таковыми. Действительно, различные модификации изобретения и многие дополнительные варианты его осуществления, кроме тех, которые показаны и описаны в данной публикации, будут очевидны для специалистов в данной области на основании полного содержания данного документа, включая примеры, которые следуют далее, и ссылки на научную и патентную литературу, цитированные в данном описании. Кроме того, должно быть понятно, что содержание указанных цитированных публикаций включено в данное описание в виде ссылки, чтобы помочь проиллюстрировать состояние уровня техники. Следующие примеры содержат важную дополнительную информацию, иллюстративные примеры и руководство, которые могут быть адаптированы по отношению к практике данного изобретения в различных вариантах его осуществления и его эквивалентах.Typical examples that follow are intended to help illustrate the invention, and are not intended to limit the scope of the invention, and should not be construed as such. Indeed, various modifications of the invention and many additional options for its implementation, other than those shown and described in this publication, will be obvious to specialists in this field based on the full content of this document, including the examples that follow, and references to scientific and patent the literature cited in this description. In addition, it should be understood that the contents of these cited publications are incorporated into this description by reference to help illustrate the state of the art. The following examples contain important additional information, illustrative examples and guidance that can be adapted with respect to the practice of the present invention in various embodiments and its equivalents.

Иллюстративные примерыIllustrative examples

Пример 1Example 1

Синтез 9,10-дегидро-12,13-дезоксиэпотилоновSynthesis of 9,10-dehydro-12,13-deoxyepothilones

В данном примере описан синтез транс-9,10-дегидро-12,13-дезоксиэпотилона B, 26-трифтор-транс-9,10-дегидро-12,13-дезоксиэпотилона B, 26-трифтор-12,13-дезоксиэпотилона B и 12,13-дезоксиэпотилона B и биологическое тестирование указанных соединений.This example describes the synthesis of trans-9,10-dehydro-12,13-deoxyepotilone B, 26-trifluoro-trans-9,10-dehydro-12,13-deoxyepotilone B, 26-trifluoro-12,13-deoxyepotilone B and 12,13-deoxyepotilon B and biological testing of these compounds.

Фторированные производные эпотилонов получали и тестировали, учитывая повышенную фармакокинетику и химиотерапевтические показатели других медицинских средств с заместителями в виде фтора (Ojima, I.; Inoue, T.; Chakravarty, S.; J. Fluorine Chem. 1999, 97; Newman, R. A.; Yang, J.; Finlay, M. R. V.; Cabral, F., Vourloumis, D.; Stephens, L. C.; Troncoso, P.; Wu, X.; Logothetis, C. J.; Nicolaou, K. C.; Navone, N. M. Cancer Chemother. Pharmacol. 2001, 48, 319-326; каждая публикация включена в данное описание в виде ссылки).Fluorinated derivatives of epothilones were obtained and tested, taking into account the increased pharmacokinetics and chemotherapeutic parameters of other medicines with fluorine substitutes (Ojima, I .; Inoue, T .; Chakravarty, S .; J. Fluorine Chem. 1999, 97; Newman, RA; Yang, J .; Finlay, MRV; Cabral, F., Vourloumis, D .; Stephens, LC; Troncoso, P .; Wu, X .; Logothetis, CJ; Nicolaou, KC; Navone, NM Cancer Chemother. Pharmacol. 2001 , 48, 319-326; each publication is incorporated herein by reference).

Чтобы получить соединение 2, авторы стремились использовать преимущество высококонвергентного пути, недавно описанного в публикации лаборатории авторов изобретения для синтеза эпотилона 490 (6, дегидродезокси-Epo B) как пути к dEpoB (1, схема 3) (Biswas, K., Lin, H., Njardarson, T., Chappell, M.D., Chou, T. C., Guan, Y., Tong, W.P., He, L., Horwitz, S.B., Danishefsky, S. J. J. Am. Chem. Soc. 2002, 124 (33); 9825-9832; Rivkin, A., Njardarson, J. T., Biswas, K., Chou, T. C., Danishefsky, S. J. J. Org. Chem. 2002, 67, 7737-7740; каждая публикация включена в данное описание в виде ссылки). В случае данного синтеза авторы вводили фланкирующую винильную группу в соединение 4 посредством стереоспецифичного сочетания Стилле предшественника винилйодида 3 с три-н-бутилвинилстаннаном. Метатезис с замыканием цикла с последующим удалением защиты приводил к 6, который затем превращали в dEpoB (1) посредством региоселективного восстановления диимидом.To obtain compound 2, the authors sought to take advantage of the highly convergent pathway recently described in the publication of the laboratory of the inventors for the synthesis of epothilone 490 (6, dehydrodeoxy-Epo B) as a pathway to dEpoB (1, Scheme 3) (Biswas, K., Lin, H ., Njardarson, T., Chappell, MD, Chou, TC, Guan, Y., Tong, WP, He, L., Horwitz, SB, Danishefsky, SJJ Am. Chem. Soc. 2002, 124 (33); 9825 -9832; Rivkin, A., Njardarson, JT, Biswas, K., Chou, TC, Danishefsky, SJJ Org. Chem. 2002, 67, 7737-7740; each publication is incorporated herein by reference). In the case of this synthesis, the authors introduced a flanking vinyl group into compound 4 by means of a stereospecific combination of the Stille precursor of vinyl iodide 3 with tri-n-butyl vinyl stannane. Closed loop metathesis followed by deprotection resulted in 6, which was then converted to dEpoB (1) by regioselective reduction with diimide.

Сначала внимание было направлено на синтез 15 (схема 4). Алкилирование енолята лития 7, о котором сообщалось ранее (Chappell, M. D.; Stachel, S. J.; Lee, C. B.; Danishefsky, S. J. Org. Lett. 2000, 2 (11), 1633-1636; включено в данное описание в виде ссылки), йодидом 8 (синтезированным из известного спирта 16 с использованием TMSI в метиленхлориде) давало 9 с выходом 78% и высокой диастереоселективностью (>25:1 de). Соединение 9 в три стадии превращали в соединение 10, как показано. Попытки осуществить присоединение бромида метилмагния к связи амида Вейнреба 10 были неудачными. Нарушение данной реакции объяснялось присутствием связи йодалкена. Однако авторы смогли осуществить свою цель изменением порядка указанных двух стадий образования связи C-C. Таким образом, после взаимодействия 10 с винилтрибутилоловом в условиях Стилле может следовать присоединение реактива Гриньяра, содержащего метил, с получением требуемого кетона 11. Конденсация кетона 11 с фосфиноксидом 12 с последующим удалением защиты триэтилсилилового эфира давала фрагмент 13 с хорошим выходом. Этерификация полученного в результате 13 C1-C10-фрагментом кислоты 14 (Biswas, K.; Lin, H.; Njardarson, J. T.; Chappell, M. D., Chou, T. C., Guan, Y.; Tong, W. P., He, L.; Horwitz, S. B., Danishefsky, S. J. J. Am. Chem. Soc. 2002, 124 (33); 9825-9832; Rivkin, A.; Njardarson, J. T.; Biswas, K.; Chou, T. C.; Danishefsky, S. J. J. Org. Chem. 2002, 67, 7737-7740; публикации включены в данное описание в виде ссылки) давала требуемое соединение 15 с выходом 75% (схема 4).At first, attention was directed to synthesis 15 (Scheme 4). Alkylation of previously reported lithium enolate 7 (Chappell, MD; Stachel, SJ; Lee, CB; Danishefsky, SJ Org. Lett. 2000, 2 (11), 1633-1636; incorporated herein by reference), with iodide 8 (synthesized from known alcohol 16 using TMSI in methylene chloride) gave 9 in 78% yield and high diastereoselectivity (> 25: 1 de). Compound 9 in three stages was converted to compound 10, as shown. Attempts to attach methylmagnesium bromide to the Weinreb amide 10 bond were unsuccessful. Violation of this reaction was explained by the presence of iodalkene bonds. However, the authors were able to achieve their goal by changing the order of these two stages of the formation of C-C bonds. Thus, after the interaction of 10 with vinyl tributyltin under Stille conditions, the addition of a Grignard reagent containing methyl may follow to obtain the desired ketone 11. Condensation of the ketone 11 with phosphine oxide 12 followed by deprotection of triethylsilyl ether gave fragment 13 in good yield. The esterification of the resulting 13 with a C1-C10 fragment of acid 14 (Biswas, K .; Lin, H .; Njardarson, JT; Chappell, MD, Chou, TC, Guan, Y .; Tong, WP, He, L .; Horwitz , SB, Danishefsky, SJJ Am. Chem. Soc. 2002, 124 (33); 9825-9832; Rivkin, A .; Njardarson, JT; Biswas, K .; Chou, TC; Danishefsky, SJJ Org. Chem. 2002, 67, 7737-7740; publications incorporated by reference) gave the desired compound 15 in 75% yield (Scheme 4).

К сожалению, попытки осуществить реакцию метатезиса с замыканием цикла 15 с использованием катализатора Груббса второго поколения (Обзоры: Grubbs, R. H.; Miller, S. J.; Fu, G. C. Acc. Chem. Res. 1995, 28, 446; Trnka, Т. M.; Grubbs, R. H. Acc. Chem. Res. 2001, 34, 18; Alkene Metathesis in Organic Chemistry Ed.: Fürstner, A.; Springer, Berlin, 1998; Fürstner, A. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 2000, 39, 3012; Schrock, R. R. Top. Organomet. Chem. 1998, 1, 1; каждый из которых включен в данное описание в виде ссылки) в метиленхлориде приводили в основном к явной димеризации исходного вещества (уравнение 1). Учитывая тот факт, что RCM работает довольно хорошо в сходных условиях 5 → 6, авторы, естественно, отнесли неудачу в случае 15 к присутствию трифторметильной группы у C₁₂.Unfortunately, attempts to carry out a metathesis reaction with loop closure 15 using the second generation Grubbs catalyst (Reviews: Grubbs, RH; Miller, SJ; Fu, GC Acc. Chem. Res. 1995, 28, 446; Trnka, T. M .; Grubbs, RH Acc. Chem. Res. 2001, 34, 18; Alkene Metathesis in Organic Chemistry Ed .: Fürstner, A .; Springer, Berlin, 1998; Fürstner, A. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 2000, 39, 3012; Schrock, RR Top. Organomet. Chem. 1998, 1, 1; each of which is incorporated herein by reference) in methylene chloride mainly led to the explicit dimerization of the starting material (Equation 1). Given the fact that RCM works quite well under similar conditions of 5 → 6, the authors naturally attributed the failure in case 15 to the presence of a trifluoromethyl group in C ₁₂ .

Была выдвинута гипотеза, что вредное влияние постоянного 26-трифтор-заместителя на требуемую реакцию может быть ослаблено добавлением углеродного спейсера между реакционным центром RCM и трифторметильной группой. Соответственно авторы предприняли синтез 19 (уравнение 2) посредством метатезиса с замыканием цикла соединения 18, которое может представлять трифторметильную группу в контексте 17-членного цикла, содержащего добавленный (1,4)-диен.It has been hypothesized that the detrimental effect of the constant 26-trifluoro substituent on the desired reaction can be attenuated by the addition of a carbon spacer between the RCM reaction center and the trifluoromethyl group. Accordingly, the authors undertook synthesis 19 (Equation 2) by a ring-closing metathesis of compound 18, which may represent a trifluoromethyl group in the context of a 17-membered ring containing added (1,4) -diene.

Программа синтеза, направленная на 19, начиналась с получения соединения 21, которое соответствует O-алкильной части предлагаемого авторами субстрата RCM (схема 5). Авторы начинали с аллилирования 10, на этот раз в условиях радикальной реакции, как показано (Keck, G. E.; Yates, J. B. J. Am. Chem. Soc. 1982, 104, 5829; обзор: Curran, D. P. Synthesis 1988, Part 1, pp.417-439; Part 2, p.489; каждая публикация включена в данное описание в виде ссылки). После указанного превращения следовало взаимодействие алкилированного продукта с бромидом метилмагния, таким образом давая требуемый кетон 20. Конденсация данного соединения с фосфиноксидом 12 с последующим удалением защиты функции триэтилсилилового эфира давала 21 с хорошим выходом.The synthesis program aimed at 19 began with the preparation of compound 21, which corresponds to the O-alkyl part of the RCM substrate proposed by the authors (Scheme 5). The authors began with 10 allylation, this time under a radical reaction, as shown (Keck, GE; Yates, JBJ Am. Chem. Soc. 1982, 104, 5829; review: Curran, DP Synthesis 1988, Part 1, pp.417 -439; Part 2, p. 489; each publication is incorporated herein by reference). After this conversion, the alkylated product was reacted with methyl magnesium bromide, thus giving the desired ketone 20. Condensation of this compound with phosphine oxide 12, followed by deprotection of triethylsilyl ether function, gave 21 in good yield.

Этерификация 21 C1-C10-кислотным фрагментом 14 давала предлагаемый предшественник RCM 18 с выходом 75% (схема 6). В данном случае реакция метатезиса с замыканием цикла 18 могла быть успешно осуществлена с использованием катализатора Груббса второго поколения в метиленхлориде. Как и в случае превращения 5 → 6, реакция давала исключительно транс-изомер 22 с выходом 57%. Наконец, восстановительное отщепление защитной группы трихлорэтоксикарбонила с использованием цинка и уксусной кислоты с последующим удалением защиты TES-эфира HF-пиридином давало требуемое соединение 19, содержащее трифторметильную функцию у C₁₂, хотя и в контексте ряда 17-членных циклов.The esterification of 21 with a C1-C10 acid moiety 14 gave the proposed precursor RCM 18 in 75% yield (Scheme 6). In this case, the metathesis reaction with the closure of cycle 18 could be successfully carried out using the second-generation Grubbs catalyst in methylene chloride. As in the case of the 5 → 6 transformation, the reaction gave exclusively the trans isomer 22 with a yield of 57%. Finally, the reductive cleavage of the trichloroethoxycarbonyl protecting group using zinc and acetic acid followed by deprotection of the TES ester with HF-pyridine afforded the desired compound 19 containing trifluoromethyl function at C ₁₂ , although in the context of a series of 17 membered rings.

Синтетическое соединение 19 оценивали в отношении его цитотоксической активности. Как показано в таблице 1-1 ниже, прямое сравнение [17]ddEpoB (23), о котором сообщалось ранее, с 27-F₃-[17]ddEpoB (19) показало, что новое перфторированное соединение обладало сравнительно высокой цитотоксической эффективностью.Synthetic compound 19 was evaluated for its cytotoxic activity. As shown in Table 1-1 below, a direct comparison of [17] ddEpoB (23) previously reported with 27-F ₃ - [17] ddEpoB (19) showed that the new perfluorinated compound had relatively high cytotoxic efficacy.

Таблица 1-1Table 1-1
Цитотоксичность in vitro (ICIn vitro cytotoxicity (IC _50fifty ) по отношению к линиям опухолевых клеток) in relation to tumor cell lines ^аbut СоединениеCompound ССRF-CEMCCRF-CEM
(IC(IC _50fifty (мкМ) (μm) ^аbut )) ССRF-CEM/VBLCCRF-CEM / VBL
(IC(IC _50fifty (мкМ) (μm) ^аbut )) 27-F₃-[17]ddEpoB (19)27-F ₃ - [17] ddEpoB (19) 0,0680,068 0,1910.191 [17]ddEpoB (23)[17] ddEpoB (23) 0,0400,040 0,1260,126 [16]ddEpoB (6)[16] ddEpoB (6) 0,0200,020 0,0680,068 ^a XTT-анализ после 72 час ингибирования. CCRF-CEM является линией клеток T-клеточного острого лимфобластного лейкоза человека. Все линии клеток CCRF-CEM/_VBL100, CCRF-CEM/_VM1 и CCRF-CEM/_Taxol сверхэкспрессируют P-гликопротеин и проявляют фенотип множественной лекарственной резистентности к онколитикам, связанным с MDR (Ojima, I.; Inoue, T.; Chakravarty, S.; J. Fluorine Chem. 1999, 97; Newman, R. A.; Yang, J.; Finlay, M.R.V.; Cabral, F., Vourloumis, D.; Stephens, L. C.; Troncoso, P.; Wu, X.; Logothetis, C. J.; Nicolaou, K. C.; Navone, N. M. Cancer Chemother. Pharmacol. 2001, 48, 319-326; каждая публикация включена в данное описание в виде ссылки). ^a XTT analysis after 72 hours of inhibition. CCRF-CEM is a cell line of human T-cell acute lymphoblastic leukemia. All CCRF-CEM / _VBL100 , CCRF-CEM / _VM1, and CCRF-CEM / _{Taxol cell lines} overexpress P-glycoprotein and exhibit a multidrug resistance phenotype for MDR-related oncolytics (Ojima, I .; Inoue, T .; Chakravarty, S .; .; J. Fluorine Chem. 1999, 97; Newman, RA; Yang, J .; Finlay, MRV; Cabral, F., Vourloumis, D .; Stephens, LC; Troncoso, P .; Wu, X .; Logothetis, CJ; Nicolaou, KC; Navone, NM Cancer Chemother. Pharmacol. 2001, 48, 319-326; each publication is incorporated herein by reference).

Хотя трифторметильное изостерное замещение мало влияет на общую цитотоксическую активность, предварительные данные исследований метаболической деградации в плазме мышей показали, что 19 является заметно более стабильным, чем исходное соединение 23. Экспозиция эпотилонов 19 и 23 с плазмой мышей nude и человека приводила к деградации 23 в течение 30 минут, тогда как эпотилон 19 оставался по большей части интактным. Так как фармакокинетические проблемы, вероятно, имеют решающее значение при реальном применении эпотилонового агента в качестве лекарственного средства, авторы считают данные наблюдения довольно обнадеживающими.Although trifluoromethyl isostere substitution has little effect on overall cytotoxic activity, preliminary data from studies on metabolic degradation in plasma of mice showed that 19 is noticeably more stable than the original compound 23. Exposure of epothilones 19 and 23 to the plasma of nude and human mice led to degradation of 23 during 30 minutes, while epothilone 19 remained mostly intact. Since pharmacokinetic problems are likely to be crucial in the actual use of the epothilone agent as a drug, the authors consider these observations to be quite encouraging.

Синтез 26-F₃-dEpoB (2) может быть осуществлен посредством высококонвергентной методики, родственной методике, используемой при синтезе 27-F₃-[17]ddEpoB (19). Таким образом, фрагменты сходной сложности могут служить в качестве ключевых строительных блоков (схема 7). Авторы предполагали, что ацильный участок 25 может служить в качестве полипропионатного домена и алкильный участок 21 или 24 может быть получен, как описано ранее во введении. Объединение двух фрагментов 21 (24) и 25 может быть инициировано посредством этерификации и завершено в результате последующего метатезиса с замыканием цикла. Наконец, отщепление защитных групп может привести к требуемым аналогам 28 и 29. Хемоселективное восстановление 9,10-олефина 28 и 29 может давать dEpoB (1) и требуемый 26-F₃-12,13-дезоксиEpoB (2).The synthesis of 26-F ₃ -dEpoB (2) can be carried out by means of a highly convergent technique similar to that used in the synthesis of 27-F ₃ - [17] ddEpoB (19). Thus, fragments of similar complexity can serve as key building blocks (Figure 7). The authors suggested that the acyl region 25 can serve as a polypropionate domain and the alkyl region 21 or 24 can be obtained as described previously in the introduction. The combination of the two fragments 21 (24) and 25 can be initiated by esterification and completed as a result of the subsequent metathesis with the closure of the cycle. Finally, cleavage of the protecting groups can lead to the desired analogues 28 and 29. The chemoselective reduction of 9,10-olefin 28 and 29 can give dEpoB (1) and the desired 26-F ₃ -12,13-deoxyEpoB (2).

Синтез 1 и 2 начинался с получения ацильного участка 25. Кетон 30, о котором сообщалось ранее, подвергали альдольной реакции с легкодоступным альдегидом 31. После депротонирования и реакции «литий»-30 с 31, мягкая конденсация приводила к смеси 5,3:1 альдольных продуктов 32 и 33. Основной диастереоизомер 32 легко отделяли флэш-хроматографией и защищали как TBS-силиловый эфир. Гидролиз диизопропилацетальной группы в условиях кислотного катализа давал кетоальдегид 34, определяя стадию второй альдольной реакции. Следуя применяемому ранее на практике способу на основе «титана»-сложного трет-бутилового эфира с использованием нового альдегида 34 в качестве партнера в связывании, получали требуемый альдольный продукт 35 с высокой диастереоселективностью (dr>20:1) и выходом (86%). После защиты C3-спирта 35 TES-силильной следовало удаление защиты бензилового эфира. Окисление полученной в результате первичной гидроксигруппы давало соответствующий альдегид, который затем превращали конечный олефин посредством реакции Виттига, получая 36 с высоким выходом. Наконец, гидролиз сложного трет-бутилового эфира 36 с использованием TESOTf давал ацильный участок 25 (82%) наряду с побочным продуктом 37 (14%), который превращали в ацильный участок 38 с высоким выходом. Спектральные и хроматографические свойства 38 были идентичны свойствам ранее полученного вещества на основе других программ в лаборатории д-ра Sinha (Scripps).Synthesis of 1 and 2 began with the preparation of the acyl region 25. Ketone 30, previously reported, was subjected to an aldol reaction with readily available aldehyde 31. After deprotonation and the reaction of lithium -30 with 31, mild condensation led to a 5.3: 1 mixture of aldol products 32 and 33. The main diastereoisomer 32 was readily separated by flash chromatography and protected as TBS silyl ether. Hydrolysis of the diisopropyl acetal group under acid catalysis gave ketoaldehyde 34, determining the stage of the second aldol reaction. Following the previously used in practice method based on the titanium complex tert-butyl ether using the new aldehyde 34 as a binding partner, the desired aldol product 35 was obtained with high diastereoselectivity (dr> 20: 1) and yield (86%). After protecting the C3 alcohol with 35 TES-silyl, deprotection of the benzyl ester followed. Oxidation of the resulting primary hydroxy group afforded the corresponding aldehyde, which was then converted to the final olefin by the Wittig reaction, resulting in 36 in high yield. Finally, hydrolysis of tert-butyl ester 36 using TESOTf gave the acyl region 25 (82%) along with by-product 37 (14%), which was converted to the acyl region 38 in high yield. The spectral and chromatographic properties 38 were identical to the properties of the previously obtained substance based on other programs in the laboratory of Dr. Sinha (Scripps).

Этерификация аллиловых спиртов 21 и 24 C₁-C₉-кислотным фрагментом 25 давала соответствующие предшественники RCM-циклизации 26 и 27, соответственно (схема 9).The esterification of allylic alcohols 21 and 24 with a C ₁ -C ₉ acidic moiety 25 gave the corresponding precursors of RCM cyclization 26 and 27, respectively (Scheme 9).

Затем проводили реакции метатезиса с замыканием цикла 26, 27 и 54, используя катализатор Груббса второго поколения в толуоле, которая давала, как и в более раннем исследовании авторов, исключительно транс-изомер 39a, 40a и 55 наряду с соответствующими побочными продуктами 39b, 40b и 56. Наконец, удаление защиты силиловых эфиров с использованием HF-пиридина приводила к требуемым соединениям 28, 29 и 57. Спектральные и хроматографические свойства 28 не были идентичными свойствам ранее полученного вещества на основе программы по эпотилонам в лаборатории д-ра James D. White (Oregon State University). Д-р James D. White, полагая, что он синтезировал 28, однако, вместо этого непреднамеренно он получил 12,13E-изомер 41, что может объяснить плохую биологическую активность, которую он наблюдал. Следовательно, авторы изобретения первыми синтезировали 28 и тестировали данное соединение в отношении его противоопухолевой активности.Then metathesis reactions with cycle closure 26, 27 and 54 were carried out using the second generation Grubbs catalyst in toluene, which, as in the earlier study of the authors, yielded exclusively the trans isomer 39a, 40a and 55 along with the corresponding by-products 39b, 40b and 56. Finally, deprotection of silyl ethers using HF-pyridine led to the desired compounds 28, 29 and 57. The spectral and chromatographic properties of 28 were not identical to the properties of the previously obtained substance based on the program for epothilones in the laboratory of Dr. James D. White (Oregon State University). Dr. James D. White, believing that he synthesized 28, however, instead, he inadvertently received the 12.13E-isomer 41, which may explain the poor biological activity that he observed. Therefore, the inventors were the first to synthesize 28 and test this compound for its antitumor activity.

Полностью синтетические 28, 29 и 2 оценивали по отношению к ряду типов клеток, чтобы определить их противоопухолевую эффективность. Как показано в таблице 1-2, все три соединения проявляли высокую цитотоксическую активность по отношению к множеству чувствительных и резистентных линий опухолевых клеток. Прямое сравнение 28 с dEpoB (1), о котором сообщалось ранее, показывает, что новое соединение обладает почти в три раза большей эффективностью.Fully synthetic 28, 29, and 2 were evaluated against a number of cell types to determine their antitumor efficacy. As shown in table 1-2, all three compounds showed high cytotoxic activity against many sensitive and resistant tumor cell lines. A direct comparison of 28 with dEpoB (1), which was reported earlier, shows that the new compound has almost three times greater efficiency.

Таблица 1-2Table 1-2
Цитотоксичность in vitro (ICIn vitro cytotoxicity (IC _50fifty ) по отношению к линиям опухолевых клеток) in relation to tumor cell lines ^аbut Линии опухолевых клетокTumor cell lines ICIC _50fifty (мкМ) (μm) ^аbut 2828 2929th dEpoB (I)dEpoB (I) 5757 CCRF-CEMCCRF-CEM 0,00140.0014 0,00350.0035 0,00360.0036 0,000510,00051 CCRF-CEM/VBL₁₀₀ CCRF-CEM / VBL ₁₀₀ 0,00650.0065 0,02100.0210 0,0140.014 0,01060,0106 CCRF-CEM/TaxolCCRF-CEM / Taxol 0,00170.0017 0,00570.0057 0,00570.0057 0,000730,00073 ^a XTT-анализ после 72 час ингибирования. CCRF-CEM является линией клеток T-клеточного острого лимфобластного лейкоза человека. Все линии клеток CCRF-CEM/_VBL100, CCRF-CEM/_VM1 и CCRF-CEM/_Taxol сверхэкспрессируют P-гликопротеин и проявляют фенотип множественной лекарственной резистентности к связанным с MDR онколитикам (Prié, G.; Thibonnet, J.; Abarbri, M.; Duchene, A.; Parrain, J. Synlett. 1998, 839; включена в данное описание в виде ссылки). ^a XTT analysis after 72 hours of inhibition. CCRF-CEM is a cell line of human T-cell acute lymphoblastic leukemia. All CCRF-CEM / _VBL100 , CCRF-CEM / _VM1 and CCRF-CEM / _{Taxol cell lines} overexpress P-glycoprotein and exhibit a multidrug resistance phenotype for MDR-related oncolytics (Prié, G .; Thibonnet, J .; Abarbri, M. ; Duchene, A .; Parrain, J. Synlett. 1998, 839; incorporated herein by reference).

Чтобы повысить общий выход синтеза 28, 29 и 2, авторы решили осуществить реакцию RCM в отсутствиe замещенного тиазолом олефина и, поступая таким образом, избежать образования нежелательного побочного продукта 39b и 40b. Удаление защиты силилового эфира 42 и 20, о которых сообщалось ранее, давало гидроксикетоны 43 и 44. Этерификация полученных в результате гидроксикетонов 43 и 44 C₁-C₉-кислотным фрагментом 25 давала соответствующие предшественники RCM-циклизации 45 и 46, соответственно (схема 10). Затем осуществляли реакцию метатезиса с замыканием цикла 45 и 46, используя катализатор Груббса второго поколения в толуоле, которая давала, как и в более раннем исследовании авторов, исключительно транс-изомер 47 и 48 с высокими выходами. Введение остатка триазола давало 39a, 40a и 55 с высоким выходом. Удаление защиты двух силиловых эфиров HF-пиридином приводило к 28 и 29. Наконец, селективное восстановление C9-C10-олефина давало соответствующие эпотилоны 1 и 2. Структура 28 была строго подтверждена по его превращению в 1 с высоким выходом. Общий синтез 1 был очень существенно упрощен по сравнению с ранее используемыми на практике способами. Таким образом, применение легкодоступного 31, получаемого из хирального пула, безусловно, является большим усовершенствованием по сравнению с тем случаем, когда полагаются на (S)-2-метил-4-пентеналь, синтез которого требует промежуточных хиральных вспомогательных веществ.To increase the overall synthesis yield of 28, 29, and 2, the authors decided to carry out the RCM reaction in the absence of a thiazole-substituted olefin and, thus, avoiding the formation of an undesirable by-product 39b and 40b. The deprotection of silyl ether 42 and 20 previously reported gave hydroxyketones 43 and 44. The esterification of the resulting hydroxyketones 43 and 44 with a C ₁ -C ₉ acidic moiety 25 gave the corresponding RCM cyclization precursors 45 and 46, respectively (Scheme 10 ) Then, a metathesis reaction with a cycle closure of 45 and 46 was carried out using a second-generation Grubbs catalyst in toluene, which, as in the earlier study of the authors, yielded exclusively the trans isomer 47 and 48 in high yields. The introduction of the triazole residue gave 39a, 40a and 55 in high yield. The deprotection of the two silyl ethers with HF-pyridine led to 28 and 29. Finally, the selective reduction of the C9-C10 olefin gave the corresponding epothilones 1 and 2. Structure 28 was strictly confirmed by its conversion to 1 in high yield. General synthesis 1 was very significantly simplified compared to previously used in practice methods. Thus, the use of readily available 31 obtained from the chiral pool is certainly a great improvement over the use of (S) -2-methyl-4-pentenal, the synthesis of which requires intermediate chiral adjuvants.

В случае соединения 28 при наличии строго подтвержденной структуры авторы были удивлены, обнаружив, что его спектральные свойства не совпадали со свойствами соединения, о котором сообщалось ранее, предположительно являющегося тем же самым соединением. Однако, обращаясь в прошлое, ясно, что соединение 28 ранее не было получено, в действительности целое семейство (E)-9,10-дегидроэпотилонов, указанных в данном описании, является новым классом соединений.In the case of compound 28 in the presence of a strictly confirmed structure, the authors were surprised to find that its spectral properties did not coincide with the properties of the compound previously reported, presumably the same compound. However, referring to the past, it is clear that compound 28 was not previously obtained, in fact, the whole family of (E) -9,10-dehydroepotilones indicated in this description is a new class of compounds.

Исследование синтетических аналогов (2, 28 и 29) в условиях культуры клеток показало более сильное ингибирующее действие на различные чувствительные и MDR-линии опухолевых клеток, чем действие, оказываемое вошедшим в клинику dEpoB (1) (таблица 1-3). Авторы отмечают, что Epo 3 (28) является первым соединением 12,13-дезоксиэпотилона, которое обладает в значительной степени повышенной цитотоксичностью по сравнению с цитотоксичностью dEpoB (1).The study of synthetic analogues (2, 28, and 29) under cell culture conditions showed a stronger inhibitory effect on various sensitive and MDR lines of tumor cells than the effect exerted by dEpoB (1), which entered the clinic (Table 1-3). The authors note that Epo 3 (28) is the first compound of 12,13-deoxyepotilone, which has a significantly increased cytotoxicity compared to the cytotoxicity of dEpoB (1).

Таблица 1-3Table 1-3
Цитотоксичность in vitro (ICIn vitro cytotoxicity (IC _50fifty ) по отношению к линиям опухолевых клеток) in relation to tumor cell lines ^aa СоединениеCompound ССRF-CEM(C)CCRF-CEM (C)
(мкМ)(μm) С/VBLC / VBL _{100one hundred}
(мкМ)(μm) С/Taxol (мкМ)C / Taxol (μM) Еро1 (1, dEpoB)EPO1 (1, dEpoB) 0,00360.0036 0,0160.016 0,00460.0046 Еро 2 (2)EPO 2 (2) 0,00410.0041 0,0800,080 0,0180.018 Еро 3 (28)EPO 3 (28) 0,00090,0009 0,00420.0042 0,00120.0012 Еро 4 (29)EPO 4 (29) 0,00350.0035 0,02100.0210 0,00570.0057 ^a XTT-анализ после 72 час ингибирования. CCRF-CEM является линией клеток T-клеточного острого лимфобластного лейкоза человека. Линия клеток CCRF-CEM/VBL₁₀₀ резистентна к винбластину, а CCRF-CEM/Taxol к таксолу. ^a XTT analysis after 72 hours of inhibition. CCRF-CEM is a cell line of human T-cell acute lymphoblastic leukemia. The CCRF-CEM / VBL ₁₀₀ cell line is resistant to vinblastine and CCRF-CEM / Taxol to taxol.

Заметное ингибирование клеточного роста, оказываемое эпотилонами 2, 28 и 29 (Epo 2-4) на ряд различных резистентных к лекарственным средствам опухолей, побудило к определению стабильности указанных новых (E)-9,10-представителей в плазме крови. Например, недавно описанный (E)-10,11-дегидро-dEpoB (в случае 1 с CH₃-группой у C-12) проявляет очень плохую стабильность в плазме по отношению к раскрытию лактона. Именно указанная нестабильность в плазме сдерживала продвижение (E)-10,11-дегидро-dEpoB. Напротив, при экспонировании 2, 28 и 29 (Epo 2-4) с плазмой мышей авторы наблюдали намного более медленную деградацию лекарственного средства по сравнению с dEpoB (1), в семь раз. Указанная стабильность представляет собой значительный прогресс с точки зрения доступности лекарственного средства, по сравнению с dEpoB (см. фиг.9).The marked inhibition of cell growth exerted by epothilones 2, 28 and 29 (Epo 2-4) on a number of different drug-resistant tumors led to the determination of the stability of these new (E) -9,10-representatives in blood plasma. For example, the recently described (E) -10,11-dehydro-dEpoB (in the case of 1 with a CH ₃ group in C-12) exhibits very poor plasma stability with respect to lactone opening. It was this instability in plasma that hindered the progress of (E) -10,11-dehydro-dEpoB. On the contrary, when exposing 2, 28 and 29 (Epo 2-4) with the plasma of mice, the authors observed a much slower degradation of the drug compared to dEpoB (1), seven times. The indicated stability represents significant progress in terms of drug availability compared to dEpoB (see FIG. 9).

Объединение данных о цитотоксичности и стабильности в плазме побудило авторов синтезировать значительные количества 28 (Epo 3), чтобы определить его эффективность in vivo у мышей nude, несущих ксенотрансплантаты опухолей человека. Эпотилон 28 (Epo 3) демонстрировал заметно повышенную эффективность в ингибировании роста имплантированных опухолей по сравнению с dEpoB (см. фиг.10). Повышенная эффективность и стабильность в плазме делает возможным очень существенное снижение дозы лекарственного средства (на порядок значений) в контексте ксенотрансплантатов в случае 28 (Epo3).The combination of cytotoxicity and plasma stability data led the authors to synthesize significant amounts of 28 (Epo 3) to determine its in vivo efficacy in nude mice bearing xenografts of human tumors. Epothilone 28 (Epo 3) showed a markedly increased efficiency in inhibiting the growth of implanted tumors compared to dEpoB (see FIG. 10). The increased efficiency and stability in plasma makes it possible to very significantly reduce the dose of the drug (by an order of magnitude) in the context of xenografts in case 28 (Epo3).

В более ранних исследованиях авторы обнаружили, что эпотилон B в виде 12,13-эпоксида значительно более цитотоксичен, чем его 12,13-дезоксианалог (dEpoB). Однако с точки зрения терапевтического индекса дезоксисоединение показалось авторам намного более обещающим. Недавно авторы сообщили о синтезе (E)-9,10-дегидро-12,13-дезоксиэпотилона B (28) с использованием стереоселективного метатезиса с замыканием цикла. Авторы показали, что внедрение E-9,10-ненасыщенности в контексте обычного Z-12,13-олефина (см. соединение 1) приводит к сильному увеличении эффективности in vitro. По существу это может быть перенесено на условия in vivo у мышей с ксенотранплантатами. Кроме того, соединение 28 обладает значительными фармацевтическими преимуществами по сравнению с dEpoB (1). Это дает возможность уменьшить уровни доз 28 по сравнению с 1 в экспериментах с ксенотрансплантатами, которые уменьшают на порядок значений.In earlier studies, the authors found that epothilone B in the form of 12,13-epoxide is significantly more cytotoxic than its 12,13-deoxyanalogue (dEpoB). However, from the point of view of the therapeutic index, the deoxy compound seemed to the authors much more promising. Recently, the authors reported the synthesis of (E) -9,10-dehydro-12,13-deoxyepothilone B (28) using a stereoselective loop closure metathesis. The authors showed that the introduction of E-9,10-unsaturation in the context of the usual Z-12,13-olefin (see compound 1) leads to a significant increase in efficiency in vitro. Essentially, this can be transferred to in vivo conditions in xenograft mice. In addition, compound 28 has significant pharmaceutical advantages over dEpoB (1). This makes it possible to reduce dose levels of 28 compared to 1 in xenograft experiments, which are reduced by an order of magnitude.

Соответственно авторам было интересно, может ли внедрение C9-C10-олефина в эпотилон B (51, EpoB) изменить его биологический профиль в том же направлении.Accordingly, the authors were interested in whether the incorporation of a C9-C10 olefin into epothilone B (51, EpoB) could change its biological profile in the same direction.

Эпоксидирование 28 2,2'-диметилдиоксираном (DMDO) происходило с высокой хемоселективностью у более замещенного C12-C13-олефина, давая с выходом 87% соотношение 1:2,6 (E)-9,10-дегидроэпотилона B (49) и его диастереомера (50). Стереохимию эпоксидов определяли селективным восстановлением диимидом C9-C10-двойных связей. Исследование спектральных свойств указанных продуктов выявило, что минорный продукт (49) является dEpoB. Предпочтение α-эпоксидирования в случае 28 совершенно не похоже на высоко стереоселективное эпоксидирование dEpoB, которое происходит с β-стороны, приводя к EpoB (Meng, D.; Bertinato, P.; Balog, A.; Su, D.-S.; Kamenecka, T.; Sorensen, E. J.; Danishefsky, S. J. J. Am. Chem. Soc. 1997, 119, 10073; включено в данное описание в виде ссылки).The epoxidation of 28 with 2,2'-dimethyldioxirane (DMDO) occurred with high chemoselectivity for the more substituted C12-C13 olefin, giving in 87% yield a ratio of 1: 2.6 (E) -9,10-dehydroepothilone B (49) and its diastereomer (50). The stereochemistry of epoxides was determined by the selective reduction of C9-C10 double bonds with diimide. A study of the spectral properties of these products revealed that the minor product (49) is dEpoB. The preference for α-epoxidation in case 28 is completely different from the highly stereoselective epoxidation of dEpoB, which occurs on the β-side, leading to EpoB (Meng, D .; Bertinato, P .; Balog, A .; Su, D.-S .; Kamenecka, T .; Sorensen, EJ; Danishefsky, SJJ Am. Chem. Soc. 1997, 119, 10073; incorporated herein by reference).

(E)-9,10-дегидроэпотилон B (51) оценивали по отношению к множеству разных типов клеток, чтобы определить их противоопухолевую эффективность. Как показано в таблице 1-4, (E)-9,10-дегидроэпотилон B (49) проявляет высокую цитотоксическую активность против множества чувствительных и резистентных линий опухолевых клеток. Прямое сравнение 49 и EpoB (51) показывает, что новый аналог обладает почти в 3 раза большей эффективностью, чем EpoB (51), что делает его одним из наиболее эффективных аналогов эпотилона, о которых сообщалось до настоящего времени. Интересно, что серия α-эпоксидов (50, 52) проявляет значительно меньшую активность, чем EpoB (51). На приведенном ниже графике показаны данные исследования in vivo соединения 49.(E) -9,10-dehydroepotilon B (51) was evaluated with respect to many different types of cells to determine their antitumor efficacy. As shown in Table 1-4, (E) -9,10-dehydroepotilon B (49) exhibits high cytotoxic activity against many sensitive and resistant tumor cell lines. A direct comparison of 49 and EpoB (51) shows that the new analog is almost 3 times more effective than EpoB (51), which makes it one of the most effective epothilone analogues that have been reported to date. Interestingly, the series of α-epoxides (50, 52) is much less active than EpoB (51). The graph below shows the in vivo study data of compound 49.

Таблица 1-4Table 1-4
Цитотоксичность in vitro (ICIn vitro cytotoxicity (IC _50fifty ) по отношению к линиям опухолевых клеток) in relation to tumor cell lines ^aa СоединениеCompound ССRF-CEMCCRF-CEM СCRF-CEM/VBLCRF-CEM / VBL СCRF-CEM/Taxol CRF-CEM / Taxol 1 dEpoB)1 dEpoB) 0,00360.0036 0,0160.016 0,00460.0046 2828 0,00090,0009 0,00420.0042 0,00120.0012 51 (EpoB)51 (EpoB) 0,000620,00062 0,00370.0037 0,00110.0011 4949 0,000230,00023 0,000320,00032 0,000420,00042 50fifty 0,01340.0134 0,09590,0959 0,08020,0802 5252 0,0830,083 0,45190.4519 0,15070,1507 ^a XTT-анализ после 72 час ингибирования. CCRF-CEM является линией клеток T-клеточного острого лимфобластного лейкоза человека. Все линии клеток CCRF-CEM/VBL и CCRF-CEM/Taxol сверхэкспрессируют P-гликопротеид и проявляют фенотип множественной лекарственной резистентности к связанным с MDR онколитикам. ^a XTT analysis after 72 hours of inhibition. CCRF-CEM is a cell line of human T-cell acute lymphoblastic leukemia. All CCRF-CEM / VBL and CCRF-CEM / Taxol cell lines overexpress P-glycoprotein and exhibit a multidrug resistance phenotype for MDR-related oncolytics.

Терапевтическое действие 9,10-де-H-EpoB у мышей nude, несущих ксенотрансплантат MX-1 (6-час в/в-инфузия, n=4).The therapeutic effect of 9,10-de-H-EpoB in nude mice bearing the MX-1 xenograft (6-hour iv infusion, n = 4).

В заключение, описанное выше представляет эффективный стереоселективный общий синтез 28 (Epo 3) и после сайт-селективного восстановления диимидом dEpoB (1) как такового. Приведенную в данном описании методику затем непосредственно применяли к получению соответствующих трифтор-аналогов 2 и 29 (Epo 4). Кроме того, эпоксидирование 28 давало 49 и 50, которые при сайт-селективном восстановлении диимидом давали эпотилон B (51) и 52. Приведенные выше данные свидетельствуют о появлении наиболее многообещающего нового семейства противоопухолевых лекарственных средств, которые целесообразно оценить в отношении пути возможного в таком случае продвижения к условиям клинического испытания на человеке. Кроме того, новая методика синтеза включает в себя существенные практические усовершенствования общего синтеза dEpoB и эпотилона B.In conclusion, the above described represents an effective stereoselective general synthesis of 28 (Epo 3) and after site-selective reduction with dEpoB (1) diimide per se. The technique described herein was then directly applied to the preparation of the corresponding trifluoro analogs 2 and 29 (Epo 4). In addition, epoxidation 28 yielded 49 and 50, which upon site-selective reduction with diimide yielded epothilone B (51) and 52. The above data indicate the appearance of the most promising new family of antitumor drugs, which should be assessed with respect to the possible route in this case advancement to the conditions of a clinical trial in humans. In addition, the new synthesis procedure includes significant practical improvements in the overall synthesis of dEpoB and epothilone B.

Экспериментальные исследованияExperimental research

Общие способы: Реагенты, полученные от коммерческих поставщиков, использовали без дополнительной очистки, если не оговорено особо. Следующие растворители получали из безводной системы растворителей (пропущенной через предварительно заполненную колонку окиси алюминия) и использовали без дальнейшей сушки: тетрагидрофуран, метиленхлорид, диэтиловый эфир, бензол и толуол. Все чувствительные к атмосфере и воде реакции осуществляли в высушенной в пламени стеклянной посуде при положительном давлении предварительно очищенного газа аргона. Спектры ЯМР (¹H и ¹³C) регистрировали на Bruker AMX-400 МГц или Bruker Advance DRX-500 МГц, которые указаны отдельно, используя в качестве эталона CDCl₃ (7,27 м.д. для ¹H и 77,0 м.д. для ¹³C). Инфракрасные спектры (ИК) получали на спектрометре Perkin-Elmer FT-IR модель 1600. Оптические вращения получали на цифровом поляриметре JASCO модели DIP-370 при 22±2°C. Аналитическую тонкослойную хроматографию проводили на пластинах E. Merck с силикагелем 60 F254. Соединения, которые не были УФ-активными, визуализировали, погружая пластины в раствор молибдата церия-аммония или пара-анисальдегида и нагревая. Хроматографию на силикагеле осуществляли, используя указанный растворитель на силикагеле Davisil® (сорт 1740, тип 60A, 170-400 меш). General methods: Reagents obtained from commercial suppliers were used without further purification, unless otherwise specified. The following solvents were obtained from an anhydrous solvent system (passed through a pre-filled column of alumina) and used without further drying: tetrahydrofuran, methylene chloride, diethyl ether, benzene and toluene. All reactions sensitive to the atmosphere and water were carried out in a glassware dried in a flame at a positive pressure of previously purified argon gas. NMR spectra ( ¹ H and ¹³ C) were recorded on a Bruker AMX-400 MHz or Bruker Advance DRX-500 MHz, which are indicated separately using CDCl ₃ as a reference (7.27 ppm for ¹ H and 77.0 m .d for ¹³ C). Infrared spectra (IR) were obtained on a Perkin-Elmer FT-IR Model 1600 spectrometer. Optical rotations were obtained on a JASCO DIP-370 digital polarimeter at 22 ± 2 ° C. Analytical thin layer chromatography was performed on E. Merck silica gel 60 F254 plates. Compounds that were not UV active were visualized by immersing the plates in a solution of cerium-ammonium molybdate or para-anisaldehyde and heating. Silica gel chromatography was performed using the indicated solvent on Davisil® silica gel (grade 1740, type 60A, 170-400 mesh).

Акронимы и сокращенияAcronyms and abbreviations

TES, триэтилсилил; TBS, диметилтретбутилсилил; EDCI, 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид; HF-PY, фтористый водород в пиридине; DMAP, 4-N,N-диметиламинопиридин; ДХМ, дихлорметан; ДМФА, N,N-диметилформамид; ТГФ, тетрагидрофуран.TES, triethylsilyl; TBS, dimethyltertbutylsilyl; EDCI, 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide; HF-PY, hydrogen fluoride in pyridine; DMAP, 4-N, N-dimethylaminopyridine; DXM, dichloromethane; DMF, N, N-dimethylformamide; THF, tetrahydrofuran.

Соединение 32: К раствору свежеприготовленного LDA (11,6 ммоль) в ТГФ (25 ммоль) по каплям добавляли раствор кетона 30 (2,40 г, 10,4 ммоль) в ТГФ (6,8 мл) при -78°C. После перемешивания при -40°C в течение 0,5 час смесь охлаждали до -90°C. По каплям добавляли раствор альдегида 31 (1,38 г, 7,72 ммоль) в ТГФ (6,8 мл). После перемешивания при -90°C в течение 35 мин реакцию гасили насыщенным водным NH₄Cl (15 мл) и экстрагировали EtOAc (50 мл × 3). Объединенные органические экстракты сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Очистка флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/EtOAc = от 15:1 до 12:1) давала 32 (2,09 г, 66%) и изомер 33 (0,39 г, 12%), оба в виде желтых масел. 32: [α]_D ²⁵  13,1 (c 1,22, CHCl₃); ИК (пленка) ν 3494, 2972, 2932, 1708, 1454, 1380, 1329, 1120, 1038, 998, 734 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 0,98 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,06 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,10 (3H, д, J=6,1 Гц), 1,14 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,15 (3H, c), 1,17 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,18 (3H, c), 1,20 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,81-1,92 (1H, м), 3,33 (1H, кв.д, J=7,0, 2,2, Гц), 3,51 (1H, дд, J=8,9, 6,3 Гц), 3,64 (1H, д, J=1,8 Гц), 3,66-3,71 (2H, м), 3,78-3,86 (2H, м), 4,51 (1H, д, J=12,0 Гц), 4,54 (1H, д, J=12,0 Гц), 4,58 (1H, c), 7,25-7,35 (5H, м); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ 10,0, 14,3, 20,5, 21,3, 21,9, 22,5, 23,5, 23,6, 36,4, 42,1, 54,1, 69,8, 71,2, 72,8, 73,3, 73,4, 103,8, 127,6, 127,7 (2C), 128,5 (2C), 138,9, 221,6; МС-НР (ESI) вычислено для С₂₄Н₄₀О₅Na [M+Na⁺] 431,3, найдено 431,4. Compound 32: To a solution of freshly prepared LDA (11.6 mmol) in THF (25 mmol) was added dropwise a solution of ketone 30 (2.40 g, 10.4 mmol) in THF (6.8 ml) at -78 ° C. After stirring at -40 ° C for 0.5 hour, the mixture was cooled to -90 ° C. A solution of aldehyde 31 (1.38 g, 7.72 mmol) in THF (6.8 ml) was added dropwise. After stirring at -90 ° C for 35 min, the reaction was quenched with saturated aqueous NH ₄ Cl (15 ml) and extracted with EtOAc (50 ml × 3). The combined organic extracts were dried over Na ₂ SO ₄ and concentrated. Purification by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / EtOAc = 15: 1 to 12: 1) gave 32 (2.09 g, 66%) and isomer 33 (0.39 g, 12%), both as yellow oils. 32: [α] _D ²⁵ 13.1 (c 1.22, CHCl ₃ ); IR (film) ν 3494, 2972, 2932, 1708, 1454, 1380, 1329, 1120, 1038, 998, 734 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 0.98 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.06 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.10 (3H, d, J = 6.1 Hz), 1.14 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.15 (3H, s), 1.17 (3H, d, J = 6.2 Hz) , 1.18 (3H, s), 1.20 (3H, d, J = 6.2 Hz), 1.81-1.92 (1H, m), 3.33 (1H, qd, J = 7.0, 2.2, Hz), 3.51 (1H, dd, J = 8.9, 6.3 Hz), 3.64 (1H, d, J = 1.8 Hz), 3, 66-3.71 (2H, m), 3.78-3.86 (2H, m), 4.51 (1H, d, J = 12.0 Hz), 4.54 (1H, d, J = 12.0 Hz), 4.58 (1H, s), 7.25-7.35 (5H, m); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 10.0, 14.3, 20.5, 21.3, 21.9, 22.5, 23.5, 23.6, 36.4, 42.1 , 54.1, 69.8, 71.2, 72.8, 73.3, 73.4, 103.8, 127.6, 127.7 (2C), 128.5 (2C), 138.9 , 221.6; MS-HP (ESI) calculated for C ₂₄ H ₄₀ O ₅ Na [M + Na ⁺ ] 431.3, found 431.4.

Соединение 32a (не показано): К охлажденному (-40°C) раствору спирта 32 (1,01 г, 2,47 ммоль) и 2,6-лутидина (69 мкл, 5,93 ммоль) добавляли TBSOTf (681 мкл, 3,00 ммоль) и смесь нагревали до -20°C в течение 3,5 час. Реакцию гасили насыщенным водным NaHCO₃ (10 мл). После экстракции гексаном (50 мл × 3) объединенные органические экстракты сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Очистка флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/EtOAc = 50:1) давала 32a (1,25 г, 2,39 ммоль, 97%) в виде бесцветного масла; [α]_D ²⁵  -19,7 (с 0,58, СНCl₃); ИК (пленка) ν 2966, 2931, 1696, 1455, 1378, 1320, 1255, 1091, 1044, 991, 873, 838, 773 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,08 (6H, c), 0,89 (9H, c), 0,99 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,04 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,07 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,07 (3H, c), 1,14 (3H, д, J=6,1 Гц), 1,17 (3H, c), 1,17 (3H, д, J=6,0 Гц), 1,20 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,76-1,85 (1H, м), 3,21 (1H, дд, J=9,2, 7,3 Гц), 3,32 (1H, квинт, J=7,4 Гц), 3,62 (1H, дд, J=9,2, 5,7 Гц), 3,78-3,85 (2H, м), 3,87 (1H, дд, J=7,7, 2,0 Гц), 4,46 (1H, д, J=12,1 Гц), 4,50 (1H, д, J=12,1 Гц), 4,73 (1H, c), 7,24-7,37 (5H, м); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ -3,6, -3,3, 15,6, 16,8, 18,7, 18,8, 21,8, 22,1, 22,5, 23,5, 23,7, 26,4 (3С), 39,0, 46,2, 54,0, 69,7, 70,9, 72,1, 73,4, 76,7, 103,1, 127,6, 127,8 (2С), 128,5 (2С), 139,0, 218,9; МС-НР (ESI) вычислено для С₃₀Н₅₄О₅SiNa [M+Na⁺] 545,4, найдено 545,4. Compound 32a (not shown): To a cooled (-40 ° C) solution of alcohol 32 (1.01 g, 2.47 mmol) and 2,6-lutidine (69 μl, 5.93 mmol) was added TBSOTf (681 μl, 3.00 mmol) and the mixture was heated to -20 ° C for 3.5 hours. The reaction was quenched with saturated aqueous NaHCO ₃ (10 ml). After extraction with hexane (50 ml × 3), the combined organic extracts were dried over Na ₂ SO ₄ and concentrated. Purification by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / EtOAc = 50: 1) gave 32a (1.25 g, 2.39 mmol, 97%) as a colorless oil; [α] _D ²⁵ -19.7 (c 0.58, CHCl ₃ ); IR (film) ν 2966, 2931, 1696, 1455, 1378, 1320, 1255, 1091, 1044, 991, 873, 838, 773 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.08 (6H, s), 0.89 (9H, s), 0.99 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.04 (3H , d, J = 7.0 Hz), 1.07 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.07 (3H, s), 1.14 (3H, d, J = 6.1 Hz ), 1.17 (3H, s), 1.17 (3H, d, J = 6.0 Hz), 1.20 (3H, d, J = 6.2 Hz), 1.76-1.85 (1H, m), 3.21 (1H, dd, J = 9.2, 7.3 Hz), 3.32 (1H, quint, J = 7.4 Hz), 3.62 (1H, dd, J = 9.2, 5.7 Hz), 3.78-3.85 (2H, m), 3.87 (1H, dd, J = 7.7, 2.0 Hz), 4.46 (1H d, J = 12.1 Hz), 4.50 (1H, d, J = 12.1 Hz), 4.73 (1H, s), 7.24-7.37 (5H, m); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -3.6, -3.3, 15.6, 16.8, 18.7, 18.8, 21.8, 22.1, 22.5, 23 5, 23.7, 26.4 (3C), 39.0, 46.2, 54.0, 69.7, 70.9, 72.1, 73.4, 76.7, 103.1, 127.6, 127.8 (2C), 128.5 (2C), 139.0, 218.9; MS-HP (ESI) calculated for C ₃₀ H ₅₄ O ₅ SiNa [M + Na ⁺ ] 545.4, found 545.4.

Соединение 34: Смесь 32a (3,03 г, 5,79 ммоль)и п-TsOH·H₂O (286 мг) в водном ТГФ (64 мл, ТГФ/H₂O = 4:1) кипятили с обратным холодильником в течение 6,5 час. Реакционную смесь охлаждали до КТ и вливали в насыщенный водный NaHCO₃ (25 мл). После экстракции EtOAc (100 мл + 50 мл × 2) объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Очистка флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/EtOAc = от 50:1 до 30:1) давала 34 (2,37 г, 5,64 ммоль, 98%) в виде бесцветного масла: [α]_D ²⁵  -25,8 (с 0,515, СНСl₃); ИК (пленка) ν 2955, 2931, 1731, 1696, 1455, 1360, 1255, 1091, 1026, 873, 826, 767 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,06 (3H, c), 0,07 (3H, c), 0,90 (9H, c), 0,95 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,03 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,28 (3H, c), 1,33 (3H, c), 1,73-1,82 (1H, м), 3,16 (1H, дд, J=9,2, 6,1 Гц), 3,28 (1H, квинт, J=7,3 Гц), 3,55 (1H, дд, J=9,2, 6,7 Гц), 3,91 (1H, дд, J=7,8, 2,1 Гц), 4,46 (2H, c), 7,27-7,36 (5H, м), 9,58 (1H, c); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ -3,6, -3,5, 15,7, 16,3, 18,6, 19,8, 20,1, 26,3 (3C), 39,1, 47,0, 61,1, 71,9, 73,4, 75,8, 127,7, 128,0 (2С), 128,5 (2С), 138,6, 201,3, 213,3; МС-НР (ESI) вычислено для С₂₄Н₄₀О₄SiNa [M+Na⁺] 443,3, найдено 443,2. Compound 34: A mixture of 32a (3.03 g, 5.79 mmol) and p-TsOH · H ₂ O (286 mg) in aqueous THF (64 ml, THF / H ₂ O = 4: 1) was refluxed within 6.5 hours The reaction mixture was cooled to RT and poured into saturated aqueous NaHCO ₃ (25 ml). After extraction with EtOAc (100 ml + 50 ml × 2), the combined organic layers were washed with brine, dried over Na ₂ SO ₄ and concentrated. Purification by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / EtOAc = 50: 1 to 30: 1) gave 34 (2.37 g, 5.64 mmol, 98%) as a colorless oil: [α] _D ²⁵ - 25.8 (c 0.515, CHCl ₃ ); IR (film) ν 2955, 2931, 1731, 1696, 1455, 1360, 1255, 1091, 1026, 873, 826, 767 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.06 (3H, s), 0.07 (3H, s), 0.90 (9H, s), 0.95 (3H, d, J = 7, 1 Hz), 1.03 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.28 (3H, s), 1.33 (3H, s), 1.73-1.82 (1H, m) , 3.16 (1H, dd, J = 9.2, 6.1 Hz), 3.28 (1H, quint, J = 7.3 Hz), 3.55 (1H, dd, J = 9.2 , 6.7 Hz), 3.91 (1H, dd, J = 7.8, 2.1 Hz), 4.46 (2H, s), 7.27-7.36 (5H, m), 9 58 (1H, s); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -3.6, -3.5, 15.7, 16.3, 18.6, 19.8, 20.1, 26.3 (3C), 39, 1, 47.0, 61.1, 71.9, 73.4, 75.8, 127.7, 128.0 (2C), 128.5 (2C), 138.6, 201.3, 213, 3; MS-HP (ESI) calculated for C ₂₄ H ₄₀ O ₄ SiNa [M + Na ⁺ ] 443.3, found 443.2.

Соединение 35: К раствору свежеприготовленного LDA (18 мл 0,5 М раствора в Et₂O, 9,0 ммоль) в Et₂O (20 мл) добавляли трет-бутилацетат (1,16 мл, 8,61 ммоль) при -78°C. После перемешивания в течение 50 мин по каплям через шприцевой насос добавляли CpTiCl(OR)₂ (100 мл 0,1 М раствора в Et₂O, 10,0 ммоль) в течение 65 мин. После перемешивания в течение 20 мин реакционную смесь нагревали до -30°C, перемешивали в течение 50 мин и снова охлаждали до -78°C. По каплям в течение 10 мин добавляли раствор 34 (2,42 г, 5,75 ммоль) в Et₂O (9 мл) и полученную в результате смесь перемешивали при -78°C. После перемешивания в течение 2 час реакцию гасили водным ТГФ (5 М H₂O, 37 мл) и перемешивали при КТ в течение 2 час. После добавления воды (40 мл) смесь перемешивали еще в течение 1 час. Образовавшийся осадок отфильтровывали на целите (промывка Et₂O) и фильтрат промывали водой (40 мл). Водный слой экстрагировали Et₂O (100 мл × 2) и объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли (40 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Очистка флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/EtOAc = 10:1) давала 35 (2,65 г, 4,94 ммоль, 86%) в виде бледно-желтого масла; [α]_D ²⁵  -20,3 (с 1,0, СНСl₃); ИК (пленка) ν 3523, 2957, 2930, 2856, 1732, 1700, 1472, 1368, 1252, 1152, 1091, 1042, 986, 834, 774 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,07 (3H, c), 0,07 (3H, c), 0,90 (9H, c), 0,99 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,07 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,10 (3H, c), 1,14 (3H, c), 1,47 (9H, c), 1,77-1,83 (1H, м), 2,26 (1H, дд, J=16,0, 10,0 Гц), 2,34 (1H, дд, J=15,9, 2,7 Гц), 3,23 (1H, дд, J=9,2, 7,1 Гц), 3,35 (1H, д, J=2,7 Гц, -OH), 3,36 (1H, квинт, J=7,0 Гц), 3,61 (1H, дд, J=9,2, 5,9 Гц), 3,88 (1H, дд, J=7,6, 2,0 Гц), 4,17 (1H, дт, J=10,0, 2,7 Гц), 4,48 (2H, c), 7,27-7,36 (5H, м); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ -3,5, -3,4, 16,3, 16,7, 18,7, 20,1, 21,6, 26,4 (3C), 28,3 (3C), 38,0, 39,1, 45,8, 51,8, 72,2, 72,9, 73,5, 76,7, 81,4, 127,7, 128,0 (2C), 128,5 (2C), 138,8, 172,7, 219,6; МС-НР (ESI) вычислено для С₃₀Н₅₂О₆SiNa [M+Na⁺] 559,3, найдено 559,4. Compound 35: To a solution of freshly prepared LDA (18 ml of a 0.5 M solution in Et ₂ O, 9.0 mmol) in Et ₂ O (20 ml) was added tert-butyl acetate (1.16 ml, 8.61 mmol) at - 78 ° C. After stirring for 50 minutes, CpTiCl (OR) ₂ (100 ml of a 0.1 M solution in Et ₂ O, 10.0 mmol) was added dropwise through a syringe pump over 65 minutes. After stirring for 20 min, the reaction mixture was heated to -30 ° C, stirred for 50 min and cooled again to -78 ° C. A solution of 34 (2.42 g, 5.75 mmol) in Et ₂ O (9 ml) was added dropwise over 10 minutes, and the resulting mixture was stirred at -78 ° C. After stirring for 2 hours, the reaction was quenched with aqueous THF (5 M H ₂ O, 37 ml) and stirred at RT for 2 hours. After adding water (40 ml), the mixture was stirred for another 1 hour. The precipitate formed was filtered on celite (washing with Et ₂ O) and the filtrate was washed with water (40 ml). The aqueous layer was extracted with Et ₂ O (100 ml × 2) and the combined organic layers were washed with brine (40 ml), dried over Na ₂ SO ₄ and concentrated. Purification by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / EtOAc = 10: 1) afforded 35 (2.65 g, 4.94 mmol, 86%) as a pale yellow oil; [α] _D ²⁵ -20.3 (c 1.0, CHCl ₃ ); IR (film) ν 3523, 2957, 2930, 2856, 1732, 1700, 1472, 1368, 1252, 1152, 1091, 1042, 986, 834, 774 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.07 (3H, s), 0.07 (3H, s), 0.90 (9H, s), 0.99 (3H, d, J = 7, 0 Hz), 1.07 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.10 (3H, s), 1.14 (3H, s), 1.47 (9H, s), 1.77 -1.83 (1H, m), 2.26 (1H, dd, J = 16.0, 10.0 Hz), 2.34 (1H, dd, J = 15.9, 2.7 Hz), 3.23 (1H, dd, J = 9.2, 7.1 Hz), 3.35 (1H, d, J = 2.7 Hz, -OH), 3.36 (1H, quint, J = 7 , 0 Hz), 3.61 (1H, dd, J = 9.2, 5.9 Hz), 3.88 (1H, dd, J = 7.6, 2.0 Hz), 4.17 (1H , dt, J = 10.0, 2.7 Hz), 4.48 (2H, s), 7.27-7.36 (5H, m); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -3.5, -3.4, 16.3, 16.7, 18.7, 20.1, 21.6, 26.4 (3C), 28, 3 (3C), 38.0, 39.1, 45.8, 51.8, 72.2, 72.9, 73.5, 76.7, 81.4, 127.7, 128.0 (2C ), 128.5 (2C), 138.8, 172.7, 219.6; MS-HP (ESI) calculated for C ₃₀ H ₅₂ O ₆ SiNa [M + Na ⁺ ] 559.3, found 559.4.

Соединение 35a (не показано): К смеси спирта 35 (10,2 г, 18,9 ммоль) и имидазола (2,70 г, 39,7 ммоль) в ДМФА (25 мл) добавляли TESCl (3,3 мл, 19,8 ммоль) при 0°C и смесь перемешивали при КТ в течение 2 час. Реакцию гасили насыщенным водным NaHCO₃ (50 мл). После экстракции гексаном (500 мл + 120 мл × 2) объединенные органические экстракты последовательно промывали водой (30 мл × 2) и насыщенным раствором соли (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Очистка флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/EtOAc = 40:1) давала 35a (12,1 г, 18,5 ммоль, 98%) в виде бесцветного масла: [α]_D ²⁵  -38,0 (с 0,46, СНСl₃); ИК (пленка) ν 2955, 2877, 1733, 1697, 1456, 1367, 1298, 1251, 1155, 1099, 988, 835, 742 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,05 (6H, c), 0,57-0,68 (6H, м), 0,89 (9H, c), 0,95 (9H, т, J=7,9 Гц), 0,99 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,02 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,04 (3H, c), 1,18 (3H, c), 1,45 (9H, c), 1,70-1,79 (1H, м), 2,16 (1H, дд, J=17,0, 7,0 Гц), 2,40 (1H, дд, J=17,0, 3,1 Гц), 3,22 (1H, дд, J=9,1, 7,5 Гц), 3,31 (1H, квинт, J=6,9 Гц), 3,61 (1H, дд, J=9,1, 5,4 Гц), 3,83 (1H, дд, J=7,3, 2,3 Гц), 4,30 (1H, дд, J=6,9, 3,1 Гц), 4,48 (2H, c), 7,27-7,36 (5H, м); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ -3,5, -3,4, 5,3 (3C), 7,3 (3C), 15,3, 16,9, 18,7, 20,1, 23,4, 26,4 (3C), 28,3 (3C), 39,1, 41,1, 46,2, 53,4, 72,2, 73,4, 74,3, 76,7, 80,6, 127,6, 127,9 (2C), 128,5 (2C), 138,9, 171,5, 218,4; МС-НР (ESI) вычислено для С₃₆Н₆₆О₆Si₂Na [M+Na⁺] 673,4, найдено 673,5. Compound 35a (not shown): To a mixture of alcohol 35 (10.2 g, 18.9 mmol) and imidazole (2.70 g, 39.7 mmol) in DMF (25 ml) was added TESCl (3.3 ml, 19 , 8 mmol) at 0 ° C and the mixture was stirred at RT for 2 hours. The reaction was quenched with saturated aqueous NaHCO ₃ (50 ml). After extraction with hexane (500 ml + 120 ml × 2), the combined organic extracts were washed successively with water (30 ml × 2) and brine (30 ml), dried over Na ₂ SO ₄ and concentrated. Purification by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / EtOAc = 40: 1) afforded 35a (12.1 g, 18.5 mmol, 98%) as a colorless oil: [α] _D ²⁵ -38.0 (s 0.46, CHCl ₃ ); IR (film) ν 2955, 2877, 1733, 1697, 1456, 1367, 1298, 1251, 1155, 1099, 988, 835, 742 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.05 (6H, s), 0.57-0.68 (6H, m), 0.89 (9H, s), 0.95 (9H, t, J = 7.9 Hz), 0.99 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.02 (3H, d, J = 6.8 Hz), 1.04 (3H, s), 1 18 (3H, s), 1.45 (9H, s), 1.70-1.79 (1H, m), 2.16 (1H, dd, J = 17.0, 7.0 Hz), 2.40 (1H, dd, J = 17.0, 3.1 Hz), 3.22 (1H, dd, J = 9.1, 7.5 Hz), 3.31 (1H, quint, J = 6.9 Hz), 3.61 (1H, dd, J = 9.1, 5.4 Hz), 3.83 (1H, dd, J = 7.3, 2.3 Hz), 4.30 ( 1H, dd, J = 6.9, 3.1 Hz), 4.48 (2H, s), 7.27-7.36 (5H, m); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -3.5, -3.4, 5.3 (3C), 7.3 (3C), 15.3, 16.9, 18.7, 20.1 , 23.4, 26.4 (3C), 28.3 (3C), 39.1, 41.1, 46.2, 53.4, 72.2, 73.4, 74.3, 76.7 80.6, 127.6, 127.9 (2C), 128.5 (2C), 138.9, 171.5, 218.4; MS-HP (ESI) calculated for C ₃₆ H ₆₆ O ₆ Si ₂ Na [M + Na ⁺ ] 673.4, found 673.5.

Соединение 35b (не показано): К перемешиваемому раствору 35a (4,37 г, 6,72 ммоль) в ТГФ (67 мл) добавляли Pd/C (приобретенный из Acros, 10% мас., 437 мг) и смесь перемешивали в атмосфере H₂. После перемешивания в течение 2,2 час смесь фильтровали через подушку целита, который промывали ТГФ (120 мл). Фильтрат концентрировали и очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/EtOAc = от 30:1 до 10:1), получая 35b (3,53 г, 6,28 ммоль, 94%) в виде бесцветного масла; Compound 35b (not shown): To a stirred solution of 35a (4.37 g, 6.72 mmol) in THF (67 ml) was added Pd / C (purchased from Acros, 10% wt., 437 mg) and the mixture was stirred in the atmosphere H ₂ . After stirring for 2.2 hours, the mixture was filtered through a pad of celite, which was washed with THF (120 ml). The filtrate was concentrated and purified by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / EtOAc = 30: 1 to 10: 1) to give 35b (3.53 g, 6.28 mmol, 94%) as a colorless oil;

[α]_D ²⁵  -16,1 (с 0,62, СНСl₃); ИК (пленка) ν 3543, 2956, 1732, 1696, 1472, 1368, 1299, 1252, 1155, 1100, 988, 837, 775, 742 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,10 (3Н, c), 0,12 (3H, c), 0,60-0,68 (6H, м), 0,93 (9H, c), 0,96 (9H, т, J=8,0 Гц), 0,99 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,10 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,14 (3H, c), 1,20 (3H, c), 1,45 (9H, c), 1,46-1,55 (1H, м), 2,21 (1H, дд, J=17,2, 7,1 Гц), 2,39 (1H, дд, J=17,2, 2,8 Гц), 2,54 (1H, т, J=5,8 Гц, -ОН), 3,30 (1H, квинт, J=6,9 Гц), 3,58 (1H, дт, J=11,5, 5,5 Гц), 3,66 (1H, дт, J=11,3, 5,4 Гц), 3,92 (1H, дд, J=8,0, 2,1 Гц), 4,32 (1H, дд, J=7,1, 2,9 Гц); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ -3,6, -3,5, 5,3 (3С), 7,2 (3С), 16,0, 16,1, 18,6, 20,0, 23,4, 26,4 (3С), 28,3 (3С), 40,0, 40,9, 46,9, 53,7, 64,8, 73,3, 78,1, 80,9, 171,7, 218,5; МС-НР (ESI) вычислено для С₂₉Н₆₀О₆Si₂Na [M+Na⁺] 583,4, найдено 583,5.[α] _D ²⁵ -16.1 (c 0.62, CHCl ₃ ); IR (film) ν 3543, 2956, 1732, 1696, 1472, 1368, 1299, 1252, 1155, 1100, 988, 837, 775, 742 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.10 (3H, s), 0.12 (3H, s), 0.60-0.68 (6H, m), 0.93 (9H, s) , 0.96 (9H, t, J = 8.0 Hz), 0.99 (3H, d, J = 7.1 Hz), 1.10 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1 14 (3H, s), 1.20 (3H, s), 1.45 (9H, s), 1.46-1.55 (1H, m), 2.21 (1H, dd, J = 17 , 2, 7.1 Hz), 2.39 (1H, dd, J = 17.2, 2.8 Hz), 2.54 (1H, t, J = 5.8 Hz, -OH), 3, 30 (1H, quint, J = 6.9 Hz), 3.58 (1H, dt, J = 11.5, 5.5 Hz), 3.66 (1H, dt, J = 11.3, 5, 4 Hz), 3.92 (1H, dd, J = 8.0, 2.1 Hz), 4.32 (1H, dd, J = 7.1, 2.9 Hz); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -3.6, -3.5, 5.3 (3C), 7.2 (3C), 16.0, 16.1, 18.6, 20.0 , 23.4, 26.4 (3C), 28.3 (3C), 40.0, 40.9, 46.9, 53.7, 64.8, 73.3, 78.1, 80.9 , 171.7, 218.5; MS-HP (ESI) calculated for C ₂₉ H ₆₀ O ₆ Si ₂ Na [M + Na ⁺ ] 583.4, found 583.5.

Соединение 35c (не показано): К перемешиваемой смеси спирта 35b (3,53 г, 6,28 ммоль) и порошкообразного MS4A (свежеактивированный, 2,50 г) в CH₂Cl₂ (32 мл) добавляли NMO (1,17 г, 10,0 ммоль), затем TPAP (132 мг, 0,377 ммоль). После перемешивания при КТ в течение 35 мин смесь фильтровали через колонку с силикагелем (гексан/Et₂O = 8:1), получая 35c (3,34 г, 5,98 ммоль, 95%) в виде бесцветного масла; [α]_D ²⁵  -69,6 (с 0,25, СНСl₃); ИК (пленка) ν 2955, 2878, 1732, 1696, 1472, 1368, 1253, 1155, 1097, 989, 837 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,09 (3H, c), 0,10 (3H, c), 0,59-0,68 (6Н, м), 0,89 (9Н, c), 0,95 (9Н, т, J=8,0 Гц), 1,08 (3H, c), 1,11 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,14 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,24 (3H, c), 1,45 (9Н, c), 2,19 (1H, дд, J=17,0, 6,7 Гц), 2,33 (1H, кв.т, J=7,1, 2,2 Гц), 2,41 (1H, дд, J=17,0, 3,3 Гц), 3,28 (1H, квинт, J=7,5 Гц), 4,07 (1H, дд, J=7,9, 2,2 Гц), 4,32 (1H, дд, J=6,7, 3,2 Гц), 9,74 (1H, д, J=2,0 Гц); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ -3,8, -3,5, 5,3 (3С), 7,2 (3С), 12,6, 15,6, 18,5, 20,5, 23,3, 26,2 (3С), 28,3 (3С), 41,1, 46,9, 51,1, 53,5, 74,0, 76,5, 80,7, 171,1, 204,3, 218,0 МС-НР (ESI) вычислено для С₂₉Н₅₈О₆Si₂Na [M+Na⁺] 581,3, найдено 581,3. Compound 35c (not shown): To a stirred mixture of alcohol 35b (3.53 g, 6.28 mmol) and powdered MS4A (freshly activated, 2.50 g) in CH ₂ Cl ₂ (32 ml) was added NMO (1.17 g 10.0 mmol), then TPAP (132 mg, 0.377 mmol). After stirring at RT for 35 minutes, the mixture was filtered through a silica gel column (hexane / Et ₂ O = 8: 1) to give 35c (3.34 g, 5.98 mmol, 95%) as a colorless oil; [α] _D ²⁵ -69.6 (c 0.25, CHCl ₃ ); IR (film) ν 2955, 2878, 1732, 1696, 1472, 1368, 1253, 1155, 1097, 989, 837 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.09 (3H, s), 0.10 (3H, s), 0.59-0.68 (6H, m), 0.89 (9H, s) , 0.95 (9H, t, J = 8.0 Hz), 1.08 (3H, s), 1.11 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.14 (3H, d, J = 7.1 Hz), 1.24 (3H, s), 1.45 (9H, s), 2.19 (1H, dd, J = 17.0, 6.7 Hz), 2.33 ( 1H, qt, J = 7.1, 2.2 Hz), 2.41 (1H, dd, J = 17.0, 3.3 Hz), 3.28 (1H, quint, J = 7, 5 Hz), 4.07 (1H, dd, J = 7.9, 2.2 Hz), 4.32 (1H, dd, J = 6.7, 3.2 Hz), 9.74 (1H, d, J = 2.0 Hz); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -3.8, -3.5, 5.3 (3C), 7.2 (3C), 12.6, 15.6, 18.5, 20.5 , 23.3, 26.2 (3C), 28.3 (3C), 41.1, 46.9, 51.1, 53.5, 74.0, 76.5, 80.7, 171.1 , 204.3, 218.0 MS-HP (ESI) calculated for C ₂₉ H ₅₈ O ₆ Si ₂ Na [M + Na ⁺ ] 581.3, found 581.3.

Соединение 36: MePPh₃I (2,56 г, 7,18 ммоль) в ТГФ (40,0 мл) обрабатывали t-BuOK (6,57 мл 1,0 М раствора в ТГФ; 6,57 ммоль) при 0°C. После перемешивания при 0°C в течение 20 мин полученную в результате суспензию охлаждали до -78°C и добавляли раствор альдегида 35c (3,34 г, 5,98 ммоль) в ТГФ (14 мл). После перемешивания при -78°C в течение 15 мин смесь перемешивали при 0°C в течение 15 мин и при КТ в течение 15 мин. Реакцию гасили насыщенным водным NH₄Cl (20 мл) и экстрагировали Et₂O (120 мл + 50 мл × 2). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором соли (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂ ~80 г, гексан/Et₂O = 40:1), получая 36 (125,3 мг, 0,225 ммоль, 78%) в виде бесцветного масла; [α]_D ²⁵ -33,6 (с 0,250, СНСl₃); ИК (пленка) ν 2956, 2878, 1733, 1696, 1472, 1367,1299, 1253, 1156, 1100, 988, 837, 774 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,08 (3H, c), 0,08 (3H, c), 0,60-0,68 (6H, м), 0,93 (9H, c), 0,96 (9H, т, J=8,0 Гц), 1,04 (6H, д, J=7,0 Гц), 1,09 (3H, c), 1,20 (3H, c), 1,45 (9H, c), 2,08-2,15 (1H, м), 2,29 (1H, дд, J=17,0, 7,0 Гц), 2,41 (1H, дд, J=17,0, 3,1 Гц), 3,08 (1H, квинт, J=7,0 Гц), 3,84 (1H, дд, J=7,0, 2,1 Гц), 4,32 (1H, дд, J=7,0, 3,1 Гц), 5,02 (1H, дд, J=17,9, 1,0 Гц), 5,06 (1H, дд, J=10,5, 1,0 Гц), 5,93 (1H, ддд, J=17,9, 10,5, 7,7 Гц); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ -3,6, -3,3, 5,4 (3С), 7,2 (3С), 15,2, 18,7, 19,0, 20,2, 23,6, 26,4 (3С), 28,3 (3С), 41,1, 43,8, 46,4, 53,5, 73,9, 76,6, 80,6, 115,5, 140,2, 171,5, 218,5; МС-НР (ESI) вычислено для С₃₀Н₆₀О₅Si₂Na [M+Na⁺] 579,4, найдено 579,4. Compound 36: MePPh ₃ I (2.56 g, 7.18 mmol) in THF (40.0 ml) was treated with t-BuOK (6.57 ml of a 1.0 M solution in THF; 6.57 mmol) at 0 ° C. After stirring at 0 ° C for 20 minutes, the resulting suspension was cooled to -78 ° C and a solution of aldehyde 35c (3.34 g, 5.98 mmol) in THF (14 ml) was added. After stirring at -78 ° C for 15 minutes, the mixture was stirred at 0 ° C for 15 minutes and at RT for 15 minutes. The reaction was quenched with saturated aqueous NH ₄ Cl (20 ml) and extracted with Et ₂ O (120 ml + 50 ml × 2). The combined organic extracts were washed with brine (20 ml), dried over Na ₂ SO ₄ and concentrated. The residue was purified by flash column chromatography (SiO ₂ ~ 80 g, hexane / Et ₂ O = 40: 1) to obtain 36 (125.3 mg, 0.225 mmol, 78%) as a colorless oil; [α] _D ²⁵ -33.6 (c 0.250, CHCl ₃ ); IR (film) ν 2956, 2878, 1733, 1696, 1472, 1367.1299, 1253, 1156, 1100, 988, 837, 774 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.08 (3H, s), 0.08 (3H, s), 0.60-0.68 (6H, m), 0.93 (9H, s) , 0.96 (9H, t, J = 8.0 Hz), 1.04 (6H, d, J = 7.0 Hz), 1.09 (3H, s), 1.20 (3H, s) 1.45 (9H, s), 2.08-2.15 (1H, m), 2.29 (1H, dd, J = 17.0, 7.0 Hz), 2.41 (1H, dd , J = 17.0, 3.1 Hz), 3.08 (1H, fifth, J = 7.0 Hz), 3.84 (1H, dd, J = 7.0, 2.1 Hz), 4 32 (1H, dd, J = 7.0, 3.1 Hz), 5.02 (1H, dd, J = 17.9, 1.0 Hz), 5.06 (1H, dd, J = 10 5, 1.0 Hz), 5.93 (1H, ddd, J = 17.9, 10.5, 7.7 Hz); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -3.6, -3.3, 5.4 (3C), 7.2 (3C), 15.2, 18.7, 19.0, 20.2 , 23.6, 26.4 (3C), 28.3 (3C), 41.1, 43.8, 46.4, 53.5, 73.9, 76.6, 80.6, 115.5 , 140.2, 171.5, 218.5; MS-HP (ESI) calculated for C ₃₀ H ₆₀ O ₅ Si ₂ Na [M + Na ⁺ ] 579.4, found 579.4.

Соединение 25: К раствору сложного трет-бутилового эфира 36 (4,87 г, 8,74 ммоль) и 2,6-лутидина (свежеперегнанного, 4,1 мл, 35,0 ммоль) в CH₂Cl₂ (58 мл) добавляли TESOTf (4,0 мл, 17,5 ммоль) при 0°C. После перемешивания при 0°C в течение 25 мин смесь перемешивали при КТ в течение 3,2 час. Смесь разбавляли Et₂O (600 мл), последовательно промывали 5% водным KHSO₄ (60 мл × 2) и насыщенным раствором соли (60 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток сушили в условиях высокого вакуума в течение 1,5 час, получая неочищенную кислоту 25 (6,30 г, загрязненную TESOH). Неочищенный продукт (6,30 г) растворяли в водном ТГФ (87,5 мл, ТГФ/H₂O = 6:1) и обрабатывали насыщенным водным NaHCO₃ (12,5 мл). После перемешивания при КТ в течение 20 мин полученную в результате суспензию разбавляли Et₂O (500 мл) и подкисляли водным 5% KHSO₄ (55 мл). После разделения слоев водный слой экстрагировали Et₂O (100 мл × 2) и объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли (50 мл × 2), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток сушили в условиях высокого вакуума в течение ночи, получая неочищенную кислоту (5,60 г, загрязненную TESOH) в виде бесцветного масла, которое использовали для следующей реакции без дополнительной очистки. Для характеристики очищали флэш-хроматографией на колонке на силикагеле, элюируя смесью гексан/EtOAc = 4/1. [α]_D ²⁵ -30,7 (с 0,985, СНСl₃); ИК (пленка) ν 2956, 2936, 2879, 1712, 1472, 1417, 1303, 1253, 1107, 1046, 1003, 988, 872, 837, 775, 741 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,08 (3H, c), 0,09 (3H, c), 0,59-0,67 (6H, м), 0,93 (9H, c), 0,96 (9H, т, J=8,1 Гц), 1,05 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,05 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,20 (3H, c), 1,21 (3H, c), 2,06-2,13 (1H, м), 2,34 (1H, дд, J=16,4, 7,4 Гц), 2,50 (1H, дд, J=16,4, 3,0 Гц), 3,06 (1H, квинт, J=7,3 Гц), 3,87 (1H, дд, J=7,5, 1,8 Гц), 4,40 (1H, дд, J=7,3, 2,9 Гц), 5,01 (1H, дд, J=18,0, 0,9 Гц), 5,07 (1H, дд, J=10,4, 1,2 Гц), 5,93 (1H, ддд, J=18,0, 10,4, 7,8 Гц); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ -3,6, -3,3, 5,3 (3C), 7,1 (3C), 15,6, 18,7, 19,1, 19,2, 24,1, 26,4 (3C), 39,8, 43,6, 46,4, 53,5, 73,7, 76,6, 115,6, 140,0, 177,9, 218,7; МС-НР (ESI) вычислено для С₂₆Н₅₂О₅Si₂Na [M+Na⁺] 523,3, найдено 522,9. Compound 25: To a solution of tert-butyl ester 36 (4.87 g, 8.74 mmol) and 2,6-lutidine (freshly distilled, 4.1 ml, 35.0 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (58 ml) TESOTf (4.0 ml, 17.5 mmol) was added at 0 ° C. After stirring at 0 ° C for 25 minutes, the mixture was stirred at RT for 3.2 hours. The mixture was diluted with Et ₂ O (600 ml), washed successively with 5% aqueous KHSO ₄ (60 ml × 2) and brine (60 ml), dried over Na ₂ SO ₄ and concentrated. The residue was dried under high vacuum for 1.5 hours to give crude acid 25 (6.30 g contaminated with TESOH). The crude product (6.30 g) was dissolved in aqueous THF (87.5 ml, THF / H ₂ O = 6: 1) and treated with saturated aqueous NaHCO ₃ (12.5 ml). After stirring at RT for 20 minutes, the resulting suspension was diluted with Et ₂ O (500 ml) and acidified with aqueous 5% KHSO ₄ (55 ml). After separation of the layers, the aqueous layer was extracted with Et ₂ O (100 ml × 2) and the combined organic layers were washed with brine (50 ml × 2), dried over Na ₂ SO ₄ and concentrated. The residue was dried under high vacuum overnight to give the crude acid (5.60 g, contaminated with TESOH) as a colorless oil, which was used for the next reaction without further purification. For characterization, it was purified by flash column chromatography on silica gel, eluting with hexane / EtOAc = 4/1. [α] _D ²⁵ -30.7 (c 0.985, CHCl _3); IR (film) ν 2956, 2936, 2879, 1712, 1472, 1417, 1303, 1253, 1107, 1046, 1003, 988, 872, 837, 775, 741 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.08 (3H, s), 0.09 (3H, s), 0.59-0.67 (6H, m), 0.93 (9H, s) , 0.96 (9H, t, J = 8.1 Hz), 1.05 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.05 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1 , 20 (3H, s), 1.21 (3H, s), 2.06-2.13 (1H, m), 2.34 (1H, dd, J = 16.4, 7.4 Hz), 2.50 (1H, dd, J = 16.4, 3.0 Hz), 3.06 (1H, quint, J = 7.3 Hz), 3.87 (1H, dd, J = 7.5, 1.8 Hz), 4.40 (1H, dd, J = 7.3, 2.9 Hz), 5.01 (1H, dd, J = 18.0, 0.9 Hz), 5.07 ( 1H, dd, J = 10.4, 1.2 Hz); 5.93 (1H, ddd, J = 18.0, 10.4, 7.8 Hz); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -3.6, -3.3, 5.3 (3C), 7.1 (3C), 15.6, 18.7, 19.1, 19.2 , 24.1, 26.4 (3C), 39.8, 43.6, 46.4, 53.5, 73.7, 76.6, 115.6, 140.0, 177.9, 218, 7; MS-HP (ESI) calculated for C ₂₆ H ₅₂ O ₅ Si ₂ Na [M + Na ⁺ ] 523.3, found 522.9.

Соединение 45: 3-O-TES-6-O-TBS-защищенную кислоту 25 сушили посредством азеотропной перегонки с бензолом. Свежевысушенный спирт 43 (200 мг, 1,19 ммоль) растворяли в ДХМ (10 мл) и охлаждали до 0°C и в это время добавляли твердый DMAP (167 мг, 1,37 ммоль) и твердый EDCI (261 мг, 1,37 ммоль). После перемешивания реакционной смеси при 0°C в течение 15 мин по каплям добавляли раствор кислоты 25 (425 мг, 0,85 ммоль) в ДХМ (2 мл). Охлаждающую баню убирали и перемешивание продолжали еще в течение 2 часов. Неочищенную реакционную смесь разбавляли ДХМ (10 мл) и очищали хроматографией на силикагеле, используя 10% EtOAc/гексаны в качестве элюента, получая сложный эфир 45 (380 мг, выход 81%, две стадии, начиная с 36) в виде прозрачного масла: [α]_D -15,1 (c 1,2, CDCl₃); ИК (чистое вещество) 2955, 2932, 2877, 1743, 1732, 1694, 1474, 1461, 1417, 1380, 1360, 1295, 1252, 1169, 1094, 1043, 988,3, 912,9, 871,4, 836,5, 774,8, 741,6 cм^-1; ¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃) 0,08 (3H, c), 0,08 (3H, c), 0,60-0,68 (6H, м), 0,93 (9Н, c), 0,95 (9Н, т, J=8,0 Гц), 1,04 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,05 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,10 (3H, c), 1,25 (3H, c), 1,69 (3H, c), 2,08-2,15 (2H, м), 2,16 (3H, c), 2,38 (1H, дд, J=17,0,7,0 Гц), 2,48 (2H, т, J=6,5 Гц), 2,57 (1H, дд, J=17,0, 2,7 Гц), 2,71-2,76 (2H, м), 3,07 (1H, квинт, J=7,0 Гц), 3,83 (1H, д, J=7,2 Гц), 4,36 (1H, дд, J=7,0, 2,7 Гц), 4,97-5,07 (4H, м), 5,19 (1H, т, J=7,0), 5,73 (1H, тд, J=15,4, 5,9 Гц), 5,92 (1H, дд, J=15,7, 8,0 Гц); ¹³С ЯМР (500 МГц, СDCl₃) δ 218,4, 205,4, 172,1, 140,1, 137,4, 135,4, 119,1, 115,8, 115,6, 78,7, 76,5, 73,9, 53,3, 46,3, 43,7, 39,6, 36,6, 29,2, 26,7, 26,4, 23,8, 23,7, 19,9, 18,9, 18,7, 15,4, 7,06, 5,30, -3,29, -3,62; МС-НР (ESI) вычислено для С₃₆Н₆₆О₆Si₂Na [M+Na⁺] 673,4, найдено 673,5. Compound 45: 3-O-TES-6-O-TBS-protected acid 25 was dried by azeotropic distillation with benzene. Freshly dried alcohol 43 (200 mg, 1.19 mmol) was dissolved in DCM (10 ml) and cooled to 0 ° C, at which time solid DMAP (167 mg, 1.37 mmol) and solid EDCI (261 mg, 1, 37 mmol). After stirring the reaction mixture at 0 ° C for 15 min, a solution of acid 25 (425 mg, 0.85 mmol) in DCM (2 ml) was added dropwise. The cooling bath was removed and stirring was continued for another 2 hours. The crude reaction mixture was diluted with DCM (10 ml) and purified by silica gel chromatography using 10% EtOAc / Hexanes as an eluent to give ester 45 (380 mg, 81% yield, two steps starting from 36) as a clear oil: [ α] _D -15.1 (c 1.2, CDCl ₃ ); IR (pure substance) 2955, 2932, 2877, 1743, 1732, 1694, 1474, 1461, 1417, 1380, 1360, 1295, 1252, 1169, 1094, 1043, 988.3, 912.9, 871.4, 836 5, 774.8, 741.6 cm ^-1 ; ¹ H NMR (500 MHz, CDCl ₃ ) 0.08 (3H, s), 0.08 (3H, s), 0.60-0.68 (6H, m), 0.93 (9H, s), 0.95 (9H, t, J = 8.0 Hz), 1.04 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.05 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1, 10 (3H, s), 1.25 (3H, s), 1.69 (3H, s), 2.08-2.15 (2H, m), 2.16 (3H, s), 2.38 (1H, dd, J = 17.0.7.0 Hz), 2.48 (2H, t, J = 6.5 Hz), 2.57 (1H, dd, J = 17.0, 2.7 Hz), 2.71-2.76 (2H, m), 3.07 (1H, quint, J = 7.0 Hz), 3.83 (1H, d, J = 7.2 Hz), 4, 36 (1H, dd, J = 7.0, 2.7 Hz), 4.97-5.07 (4H, m), 5.19 (1H, t, J = 7.0), 5.73 ( 1H, td, J = 15.4, 5.9 Hz); 5.92 (1H, dd, J = 15.7, 8.0 Hz); ¹³ C NMR (500 MHz, CDCl ₃ ) δ 218.4, 205.4, 172.1, 140.1, 137.4, 135.4, 119.1, 115.8, 115.6, 78.7 , 76.5, 73.9, 53.3, 46.3, 43.7, 39.6, 36.6, 29.2, 26.7, 26.4, 23.8, 23.7, 19 9, 18.9, 18.7, 15.4, 7.06, 5.30, -3.29, -3.62; MS-HP (ESI) calculated for C ₃₆ H ₆₆ O ₆ Si ₂ Na [M + Na ⁺ ] 673.4, found 673.5.

Соединение 47: К раствору соединения 45 (20 мг, 0,031 ммоль) в безводном толуоле (60 мл) при кипячении с обратным холодильником одной порцией добавляли раствор дихлорида трициклогексилфосфин[1,3-бис(2,4,6-триметилфенил)-4,5-дигидроимидазол-2-илиден][бензилиден]рутения (IV) (5,2 мг, 0,0061 ммоль) в безводном толуоле (2 мл) и смесь нагревали в течение 10 минут. Реакционную смесь сразу же охлаждали на бане со льдом, наносили на диоксид кремния и очищали, используя хроматографию на силикагеле с применением 4-10% градиента EtOAc/пентан в качестве элюента, чтобы получить соединение 47 (15 мг, выход 78%) в виде масла: [α] -28,6 (с 1,2, СНСl₃); ИК (чистое вещество) 2955, 2933, 2878, 1745, 1731, 1695, 1471, 1462, 1380, 1361, 1251, 1159, 1104, 1080, 1019, 985,0, 876,1, 835,5, 774,7, 743,1, 670,1 cм^-1; ¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃) 0,07 (3H, c), 0,10 (3H, c), 0,59-0,68 (6H, м), 0,91 (9H, т, J=8,0 Гц), 0,93 (9H, c), 1,04 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,10 (3H, c), 1,11 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,17 (3H, c), 1,71 (3H, c), 2,21 (3H, c), 2,27-2,32 (1H), 2,38 (1H, дд, J=14,6, 6,8 Гц), 2,51-2,61 (2H, м), 2,57 (1H, дд, J=15,5, 3,3 Гц), 2,93-3,1 (3H, м), 3,94 (1H, д, J=8,5 Гц), 4,28 (1H, дд, J=8,6, 3,0 Гц), 5,04 (1H, дд, J=8,7, 2,4), 5,16 (1H, т, J=7,5), 5,73 (1H, ^tдд, J=12,8, 9,94, 6,9 Гц), 5,92 (1H, ддд, J=18,0, 10,3, 7,8 Гц); ¹³С ЯМР (125 МГц, СDCl₃) δ 215,9, 204,8, 171,3, 140,0, 132,7, 129,2, 118,6, 79,1, 78,2, 75,4, 54,0, 48,2, 41,7, 40,3, 35,0, 29,2, 26,6, 26,5, 23,5, 22,8, 20,6,18,8, 17,5, 14,3, 7,19, 5,53, -3,36; МС-НР (ESI) вычислено для С₃₄Н₆₂О₆Si₂ 645,4, найдено 645,4 (M+Na⁺). Compound 47: To a solution of compound 45 (20 mg, 0.031 mmol) in anhydrous toluene (60 ml), a solution of tricyclohexylphosphine dichloride [1,3-bis (2,4,6-trimethylphenyl) -4 was added in one portion at a boil under reflux. 5-dihydroimidazol-2-ylidene] [benzylidene] ruthenium (IV) (5.2 mg, 0.0061 mmol) in anhydrous toluene (2 ml) and the mixture was heated for 10 minutes. The reaction mixture was immediately cooled in an ice bath, applied to silica and purified using silica gel chromatography using a 4-10% EtOAc / pentane gradient as eluent to give compound 47 (15 mg, 78% yield) as an oil : [α] -28.6 (c 1.2, CHCl ₃ ); IR (pure substance) 2955, 2933, 2878, 1745, 1731, 1695, 1471, 1462, 1380, 1361, 1251, 1159, 1104, 1080, 1019, 985.0, 876.1, 835.5, 774.7 743.1, 670.1 cm ^-1 ; ¹ H NMR (500 MHz, CDCl ₃ ) 0.07 (3H, s), 0.10 (3H, s), 0.59-0.68 (6H, m), 0.91 (9H, t, J = 8.0 Hz), 0.93 (9H, s), 1.04 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.10 (3H, s), 1.11 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.17 (3H, s), 1.71 (3H, s), 2.21 (3H, s), 2.27-2.32 (1H), 2.38 (1H , dd, J = 14.6, 6.8 Hz), 2.51-2.61 (2H, m), 2.57 (1H, dd, J = 15.5, 3.3 Hz), 2, 93-3.1 (3H, m), 3.94 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.28 (1H, dd, J = 8.6, 3.0 Hz), 5.04 (1H, dd, J = 8.7, 2.4), 5.16 (1H, t, J = 7.5), 5.73 (1H, ^t dd, J = 12.8, 9.94, 6.9 Hz), 5.92 (1H, ddd, J = 18.0, 10.3, 7.8 Hz); ¹³ C NMR (125 MHz, CDCl ₃ ) δ 215.9, 204.8, 171.3, 140.0, 132.7, 129.2, 118.6, 79.1, 78.2, 75.4 , 54.0, 48.2, 41.7, 40.3, 35.0, 29.2, 26.6, 26.5, 23.5, 22.8, 20.6.18.8, 17 5, 14.3, 7.19, 5.53, -3.36; MS-HP (ESI) calculated for C ₃₄ H ₆₂ O ₆ Si ₂ 645.4, found 645.4 (M + Na ⁺ ).

Соединение 39a: К раствору реагента Виттига (19,1 мг, 54,7 мкмоль) в ТГФ (0,4 мл) добавляли KHMDS (109 мкл 0,5 М раствора в толуоле, 54,7 мкмоль) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 0,5 час и затем охлаждали до -78°C. К смеси по каплям добавляли раствор кетона 47 (5,7 мг, 9,12 мкмоль) в ТГФ (0,3 мл) и полученной в результате смеси давали возможность нагреться до -20°C в течение 1,5 час. Реакцию гасили насыщенным водным NH₄Cl (2 мл) и экстрагировали EtOAc (7 мл × 3). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/Et₂O = 10:1), получая 5,6 мг неразделимой смеси E/Z-олефинов (E/Z = 9:1). Смесь очищали препаративной ТСХ (гексан/Et₂O = 4:1), получая чистый 39a (5,0 мг, 6,96 мкмоль, 76%) в виде бесцветного масла; [α]_D ²⁵ -41,5 (с 0,715, СНСl₃); ИК (пленка) ν 2955, 2884, 1737, 1690, 1467, 1378, 1249, 1179, 1102, 1014, 979, 879, 826, 773 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,08 (3H, c), 0,12 (3H, c), 0,57 (6H, кв, J=7,8 Гц), 0,89 (9H, т, J=8,0 Гц), 0,93 (9H, c), 1,04 (3H, c), 1,06 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,12 (3H, c), 1,17 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,68 (3H, c), 2,15 (3H, д, J=0,8 Гц), 2,14-2,27 (2H, м), 2,45 (1H, дд, J=14,0, 4,8 Гц), 2,50 (1H, дд, J=14,9, 3,2 Гц), 2,64-2,74 (2H, м), 2,72 (3H, c), 3,02 (1H, квинт, J=7,0 Гц), 3,10 (1H, дд, J=14,4, 7,3 Гц), 3,96 (1H, д, J=8,7 Гц), 4,43 (1H, дд, J=8,3, 2,9 Гц), 5,22 (1H, дд, J=9,8, 5,7 Гц), 5,33-5,42 (2H, м), 5,69 (1H, дд, J=15,8, 8,2 Гц), 6,57 (1H, c), 6,96 (1H, c); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ -3,3, -3,2, 5,6 (3C), 7,1 (3C), 15,0, 17,2, 18,8, 19,4, 21,4, 21,7, 23,8, 24,3, 26,5 (3C), 33,2, 35,6, 41,3, 41,8, 48,2, 54,0, 74,4, 77,4, 79,3, 116,4, 120,5, 121,0, 129,3, 132,1, 137,8, 138,0, 152,7, 164,8, 170,7, 216,8; МС-НР (ESI) вычислено для С₃₉Н₆₈NО₅SSi₂ [M+H⁺] 718,4, найдено 718,3. Compound 39a: To a solution of Wittig reagent (19.1 mg, 54.7 μmol) in THF (0.4 ml) was added KHMDS (109 μl of a 0.5 M solution in toluene, 54.7 μmol) at 0 ° C. The mixture was stirred at 0 ° C for 0.5 hour and then cooled to -78 ° C. A solution of ketone 47 (5.7 mg, 9.12 μmol) in THF (0.3 ml) was added dropwise to the mixture, and the resulting mixture was allowed to warm to −20 ° C. for 1.5 hours. The reaction was quenched with saturated aqueous NH ₄ Cl (2 ml) and extracted with EtOAc (7 ml × 3). The combined organic layers were dried over Na ₂ SO ₄ and concentrated. The residue was purified by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / Et ₂ O = 10: 1) to obtain 5.6 mg of an inseparable mixture of E / Z-olefins (E / Z = 9: 1). The mixture was purified by preparative TLC (hexane / Et ₂ O = 4: 1) to give pure 39a (5.0 mg, 6.96 μmol, 76%) as a colorless oil; [α] _D ²⁵ -41.5 (c 0.715, CHCl ₃ ); IR (film) ν 2955, 2884, 1737, 1690, 1467, 1378, 1249, 1179, 1102, 1014, 979, 879, 826, 773 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.08 (3H, s), 0.12 (3H, s), 0.57 (6H, q, J = 7.8 Hz), 0.89 (9H , t, J = 8.0 Hz), 0.93 (9H, s), 1.04 (3H, s), 1.06 (3H, d, J = 7.1 Hz), 1.12 (3H , c), 1.17 (3H, d, J = 7.1 Hz), 1.68 (3H, s), 2.15 (3H, d, J = 0.8 Hz), 2.14-2 , 27 (2H, m), 2.45 (1H, dd, J = 14.0, 4.8 Hz), 2.50 (1H, dd, J = 14.9, 3.2 Hz), 2, 64-2.74 (2H, m), 2.72 (3H, s), 3.02 (1H, quint, J = 7.0 Hz), 3.10 (1H, dd, J = 14.4, 7.3 Hz), 3.96 (1H, d, J = 8.7 Hz), 4.43 (1H, dd, J = 8.3, 2.9 Hz), 5.22 (1H, dd, J = 9.8, 5.7 Hz), 5.33-5.42 (2H, m), 5.69 (1H, dd, J = 15.8, 8.2 Hz), 6.57 (1H c), 6.96 (1H, s); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -3.3, -3.2, 5.6 (3C), 7.1 (3C), 15.0, 17.2, 18.8, 19.4 , 21.4, 21.7, 23.8, 24.3, 26.5 (3C), 33.2, 35.6, 41.3, 41.8, 48.2, 54.0, 74, 4, 77.4, 79.3, 116.4, 120.5, 121.0, 129.3, 132.1, 137.8, 138.0, 152.7, 164.8, 170.7, 216.8; MS-HP (ESI) calculated for C ₃₉ H ₆₈ NO ₅ SSi ₂ [M + H ⁺ ] 718.4, found 718.3.

Соединение 28 (Epo 3): К раствору 39a (298,8 мг, 0,416 ммоль) в ТГФ (6,5 мл) добавляли HF·пиридин (3,2 мл) при 0°C и смесь перемешивали при КТ в течение 3 час. Реакцию гасили добавлением по каплям TMSOMe (30 мл) при 0°C. После концентрирования и сушки в условиях высокого вакуума остаток очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/EtOAc = 1:1), получая 28 (196,6 мг, 0,402 ммоль, 97%) в виде белого твердого вещества; [α]_D ²⁵ -96,6 (с 0,235, СНСl₃); ИК (пленка) ν 3502, 2970, 2927, 1733, 1685, 1506, 1456, 1375, 1251, 1152, 1040, 977 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,06 (3H, c), 1,11 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,22 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,28 (3H, c), 1,72 (3H, c), 2,10 (3H, c), 2,31-2,40 (2H, м), 2,43 (1H, дд, J=16,0, 3,7 Гц), 2,49 (1H, дд, J=16,0, 9,2 Гц), 2,55-2,68 (2H, м), 2,71 (3H, c), 2,98 (1H, дд, J=14,4, 6,4 Гц), 3,16 (1H, квинт, J=6,2 Гц), 3,76 (1H, дд, J=5,9, 3,2 Гц), 4,30 (1H, дд, J=9,2, 3,7 Гц), 5,18 (1H, ушир.т, J=7,3 Гц), 5,32 (1H, дд, J=8,4, 2,5 Гц), 5,63 (1H, дд, J=15,7, 6,4 Гц), 5,60 (1H, ддд, J=15,7, 6,9, 5,1 Гц), 6,60 (1H, c), 6,98 (1H, c); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ 15,1, 16,0, 17,7, 19,2, 19,5, 22,5, 23,6, 32,0, 35,0, 39,6, 40,3, 44,8, 53,3, 71,8, 75,6, 78,3, 116,1, 119,6, 120,5, 129,9, 131,3, 137,5, 138,2, 152,2, 165,0, 170,7, 218,8; МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₄₀NО₅S [M+H⁺] 490,3, найдено 490,2. Compound 28 (Epo 3): To a solution of 39a (298.8 mg, 0.416 mmol) in THF (6.5 ml) was added HF · pyridine (3.2 ml) at 0 ° C and the mixture was stirred at RT for 3 hours . The reaction was quenched by dropwise addition of TMSOMe (30 ml) at 0 ° C. After concentration and drying under high vacuum, the residue was purified by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / EtOAc = 1: 1) to obtain 28 (196.6 mg, 0.402 mmol, 97%) as a white solid; [α] _D ²⁵ -96.6 (c 0.235, CHCl ₃ ); IR (film) ν 3502, 2970, 2927, 1733, 1685, 1506, 1456, 1375, 1251, 1152, 1040, 977 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.06 (3H, s), 1.11 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.22 (3H, d, J = 6.8 Hz ), 1.28 (3H, s), 1.72 (3H, s), 2.10 (3H, s), 2.31-2.40 (2H, m), 2.43 (1H, dd, J = 16.0, 3.7 Hz), 2.49 (1H, dd, J = 16.0, 9.2 Hz), 2.55-2.68 (2H, m), 2.71 (3H , c), 2.98 (1H, dd, J = 14.4, 6.4 Hz), 3.16 (1H, quint, J = 6.2 Hz), 3.76 (1H, dd, J = 5.9, 3.2 Hz), 4.30 (1H, dd, J = 9.2, 3.7 Hz), 5.18 (1H, broad t, J = 7.3 Hz), 5, 32 (1H, dd, J = 8.4, 2.5 Hz), 5.63 (1H, dd, J = 15.7, 6.4 Hz), 5.60 (1H, ddd, J = 15, 7, 6.9, 5.1 Hz), 6.60 (1H, s), 6.98 (1H, s); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 15.1, 16.0, 17.7, 19.2, 19.5, 22.5, 23.6, 32.0, 35.0, 39.6 , 40.3, 44.8, 53.3, 71.8, 75.6, 78.3, 116.1, 119.6, 120.5, 129.9, 131.3, 137.5, 138 2, 152.2, 165.0, 170.7, 218.8; MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₄₀ NO ₅ S [M + H ⁺ ] 490.3, found 490.2.

dEpoB (1, Epo 1): К раствору 28 (1,2 мг, 2,5 мкмоль) и ТрисNHNH₂ (29,3 мг, 98 мкмоль) в ClCH₂CH₂Cl (0,7 мл) при 50°C добавляли Et₃N (13,7 мкл, 98 мкмоль). Реакцию контролировали с помощью ВЭТСХ (гексан/EtOAc/CH₂Cl₂ = 1/1/2). После перемешивания в течение 7 час смесь охлаждали до КТ, разбавляли EtOAc и фильтровали через подушку силикагеля, которую промывали EtOAc. После концентрирования остаток очищали препаративной ТСХ (гексан/EtOAc/CH₂Cl₂ = 1/1/2), получая 1 (1,1 мг, 2,2 мкмоль, 91%) в виде белого твердого вещества. Спектральные данные для 1 были идентичны данным, описанным для dEpoB. dEpoB (1, Epo 1): To a solution of 28 (1.2 mg, 2.5 μmol) and TrisNHNH ₂ (29.3 mg, 98 μmol) in ClCH ₂ CH ₂ Cl (0.7 ml) at 50 ° C Et ₃ N (13.7 μl, 98 μmol) was added. The reaction was monitored by HPLC (hexane / EtOAc / CH ₂ Cl ₂ = 1/1/2). After stirring for 7 hours, the mixture was cooled to RT, diluted with EtOAc and filtered through a pad of silica gel, which was washed with EtOAc. After concentration, the residue was purified by preparative TLC (hexane / EtOAc / CH ₂ Cl ₂ = 1/1/2) to give 1 (1.1 mg, 2.2 μmol, 91%) as a white solid. The spectral data for 1 were identical to those described for dEpoB.

Соединение 27: Перед реакцией кислоту 25 и спирт 24 подвергали азеотропной перегонке с безводным бензолом (5 мл × 2) и сушили в условиях высокого вакуума. К раствору спирта 24 (639 мг, 2,63 ммоль) в CH₂Cl₂ (13 мл) добавляли EDCI (576 мг, 3,09 ммоль) и DMAP (366 мг, 3,09 ммоль) при 0°C. К смеси по каплям добавляли раствор кислоты 25 (1,11 г, 1,88 ммоль) в CH₂Cl₂ (промывка 5 мл + 2 мл) в течение 16 мин при 0°C. После перемешивания при 0°C в течение 1,5 час смесь перемешивали при КТ в течение 3,5 час. После концентрирования остаток очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/EtOAc = от 30:1 до 20:1), получая 27 (1,20 г, 1,61 ммоль, 86%, исходя из сложного трет-бутилового эфира) в виде бесцветного масла; [α]_D ²⁴ -25,1 (с 1,30, СНСl₃); ИК (пленка) ν 2955, 2925, 2872, 1732, 1696, 1461, 1378, 1290, 1243, 1173, 1091, 985, 873, 773 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,06 (3H, c), 0,06 (3H, c), 0,58-0,66 (6H, м), 0,92 (9Н, c), 0,95 (9H, т, J=8,0 Гц), 1,02 (3H, д, J=6,5 Гц), 1,03 (3H, д, J=6,5 Гц), 1,07 (3H, c), 1,21 (3H, c), 1,67 (3H, c), 2,07 (3H, c), 2,05-2,12 (1H, м), 2,30 (1H, дд, J=16,9, 7,5 Гц), 2,39 (1H, дт, J=14,8, 6,7 Гц), 2,49 (1H, дд, J=17,0, 3,0 Гц), 2,50 (1H, дт, J=14,8,6,7 Гц), 2,70 (3H, c), 2,74-2,30 (2H, м), 3,07 (1H, дд, J=7,0 Гц), 3,83 (1H, дд, J=7,1, 2,0 Гц), 4,35 (1H, дд, J=7,4, 2,8 Гц), 4,98-5,07 (4H, м), 5,16 (1H, ушир.т, J=7,0 Гц), 5,23 (1H, т, J=6,9 Гц), 5,74 (1H, ддт, J=16,7, 10,2, 6,5 Гц), 5,91 (1H, ддд, J=17,8, 10,5, 7,8 Гц), 6,50 (1H, c), 6,95 (1H, c); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ -3,7, -3,3, 5,3 (3C), 7,2 (3C), 14,8, 15,2, 18,7, 18,9, 19,4, 20,3, 23,6, 23,7, 26,4 (3C), 31,7, 36,7, 40,1, 43,8,46,4, 53,3, 74,2, 76,5, 79,6, 115,5, 115,6, 116,5, 120,5, 121,3, 135,8, 136,1, 137,4, 140,2, 152,9, 164,7, 171,5, 218,4; МС-НР (ESI) вычислено для С₄₁Н₇₁NО₅SSi₂ [M+Na⁺] 768,5, найдено 768,5. Compound 27: Before the reaction, acid 25 and alcohol 24 were subjected to azeotropic distillation with anhydrous benzene (5 ml × 2) and dried under high vacuum. To a solution of alcohol 24 (639 mg, 2.63 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (13 ml) were added EDCI (576 mg, 3.09 mmol) and DMAP (366 mg, 3.09 mmol) at 0 ° C. To the mixture was added dropwise a solution of acid 25 (1.11 g, 1.88 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (washing with 5 ml + 2 ml) over 16 minutes at 0 ° C. After stirring at 0 ° C for 1.5 hours, the mixture was stirred at RT for 3.5 hours. After concentration, the residue was purified by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / EtOAc = 30: 1 to 20: 1) to obtain 27 (1.20 g, 1.61 mmol, 86% based on tert-butyl ester ) as a colorless oil; [α] _D ²⁴ -25.1 (c 1.30, CHCl ₃ ); IR (film) ν 2955, 2925, 2872, 1732, 1696, 1461, 1378, 1290, 1243, 1173, 1091, 985, 873, 773 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.06 (3H, s), 0.06 (3H, s), 0.58-0.66 (6H, m), 0.92 (9H, s) , 0.95 (9H, t, J = 8.0 Hz), 1.02 (3H, d, J = 6.5 Hz), 1.03 (3H, d, J = 6.5 Hz), 1 07 (3H, s), 1.21 (3H, s), 1.67 (3H, s), 2.07 (3H, s), 2.05-2.12 (1H, m), 2, 30 (1H, dd, J = 16.9, 7.5 Hz), 2.39 (1H, dt, J = 14.8, 6.7 Hz), 2.49 (1H, dd, J = 17, 0, 3.0 Hz), 2.50 (1H, dt, J = 14.8.6.7 Hz), 2.70 (3H, s), 2.74-2.30 (2H, m), 3.07 (1H, dd, J = 7.0 Hz), 3.83 (1H, dd, J = 7.1, 2.0 Hz), 4.35 (1H, dd, J = 7.4, 2.8 Hz), 4.98-5.07 (4H, m), 5.16 (1H, br t, J = 7.0 Hz), 5.23 (1H, t, J = 6.9 Hz), 5.74 (1H, ddd, J = 16.7, 10.2, 6.5 Hz), 5.91 (1H, ddd, J = 17.8, 10.5, 7.8 Hz) 6.50 (1H, s); 6.95 (1H, s); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -3.7, -3.3, 5.3 (3C), 7.2 (3C), 14.8, 15.2, 18.7, 18.9 , 19.4, 20.3, 23.6, 23.7, 26.4 (3C), 31.7, 36.7, 40.1, 43.8.46.4, 53.3, 74, 2, 76.5, 79.6, 115.5, 115.6, 116.5, 120.5, 121.3, 135.8, 136.1, 137.4, 140.2, 152.9, 164.7, 171.5, 218.4; MS-HP (ESI) calculated for C ₄₁ H ₇₁ NO ₅ SSi ₂ [M + Na ⁺ ] 768.5, found 768.5.

Соединение 39a: Раствор 27 (26,9 мг, 36,1 мкмоль) в толуоле (70 мл) кипятили с обратным холодильником и обрабатывали раствором катализатора Груббса (3,1 мг, 3,61 мкмоль) в толуоле (2 мл). Смесь перемешивали в течение 25 мин, охлаждали до 0°C и фильтровали через подушку силикагеля, которую промывали смесью гексан/EtOAc = 2/1. Объединенные фильтраты концентрировали и очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/Et₂O = от 40:1 до 5:1), получая 39a (9,9 мг, 13,8 мкмоль, 38%) в виде бесцветного масла; [α]_D ²⁵ -41,5 (с 0,715, СНСl₃); ИК (пленка) ν 2955, 2884, 1737, 1690, 1467, 1378, 1249, 1179, 1102, 1014, 979, 879, 826, 773 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,08 (3H, c), 0,12 (3H, c), 0,57 (6H, кв, J=7,8 Гц), 0,89 (9H, т, J=8,0 Гц), 0,93 (9H, c), 1,04 (3H, c), 1,06 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,12 (3H, c), 1,17 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,68 (3H, c), 2,15 (3H, д, J=0,8 Гц), 2,14-2,27 (2H, м), 2,45 (1H, дд, J=14,0, 4,8 Гц), 2,50 (1H, дд, J=14,9, 3,2 Гц), 2,64-2,74 (2H, м), 2,72 (3H, c), 3,02 (1H, квинт, J=7,0 Гц), 3,10 (1H, дд, J=14,4, 7,3 Гц), 3,96 (1H, д, J=8,7 Гц), 4,43 (1H, дд, J=8,3, 2,9 Гц), 5,22 (1H, дд, J=9,8, 5,7 Гц), 5,33-5,42 (2H, м), 5,69 (1H, дд, J=15,8, 8,2 Гц), 6,57 (1H, c), 6,96 (1H, c); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ -3,3, -3,2, 5,6 (3C), 7,1 (3C), 15,0, 17,2, 18,8, 19,4, 21,4, 21,7, 23,8, 24,3, 26,5 (3C), 33,2, 35,6, 41,3, 41,8, 48,2, 54,0, 74,4, 77,4, 79,3, 116,4, 120,5, 121,0, 129,3, 132,1, 137,8, 138,0, 152,7, 164,8, 170,7, 216,8; МС-НР (ESI) вычислено для С₃₉Н₆₈NО₅SSi₂ [M+H⁺] 718,4, найдено 718,3. Compound 39a: A solution of 27 (26.9 mg, 36.1 μmol) in toluene (70 ml) was refluxed and treated with a solution of Grubbs catalyst (3.1 mg, 3.61 μmol) in toluene (2 ml). The mixture was stirred for 25 min, cooled to 0 ° C and filtered through a pad of silica gel, which was washed with hexane / EtOAc = 2/1. The combined filtrates were concentrated and purified by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / Et ₂ O = 40: 1 to 5: 1) to give 39a (9.9 mg, 13.8 μmol, 38%) as a colorless oil ; [α] _D ²⁵ -41.5 (c 0.715, CHCl ₃ ); IR (film) ν 2955, 2884, 1737, 1690, 1467, 1378, 1249, 1179, 1102, 1014, 979, 879, 826, 773 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.08 (3H, s), 0.12 (3H, s), 0.57 (6H, q, J = 7.8 Hz), 0.89 (9H , t, J = 8.0 Hz), 0.93 (9H, s), 1.04 (3H, s), 1.06 (3H, d, J = 7.1 Hz), 1.12 (3H , c), 1.17 (3H, d, J = 7.1 Hz), 1.68 (3H, s), 2.15 (3H, d, J = 0.8 Hz), 2.14-2 , 27 (2H, m), 2.45 (1H, dd, J = 14.0, 4.8 Hz), 2.50 (1H, dd, J = 14.9, 3.2 Hz), 2, 64-2.74 (2H, m), 2.72 (3H, s), 3.02 (1H, quint, J = 7.0 Hz), 3.10 (1H, dd, J = 14.4, 7.3 Hz), 3.96 (1H, d, J = 8.7 Hz), 4.43 (1H, dd, J = 8.3, 2.9 Hz), 5.22 (1H, dd, J = 9.8, 5.7 Hz), 5.33-5.42 (2H, m), 5.69 (1H, dd, J = 15.8, 8.2 Hz), 6.57 (1H c), 6.96 (1H, s); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -3.3, -3.2, 5.6 (3C), 7.1 (3C), 15.0, 17.2, 18.8, 19.4 , 21.4, 21.7, 23.8, 24.3, 26.5 (3C), 33.2, 35.6, 41.3, 41.8, 48.2, 54.0, 74, 4, 77.4, 79.3, 116.4, 120.5, 121.0, 129.3, 132.1, 137.8, 138.0, 152.7, 164.8, 170.7, 216.8; MS-HP (ESI) calculated for C ₃₉ H ₆₈ NO ₅ SSi ₂ [M + H ⁺ ] 718.4, found 718.3.

Соединение 28: К раствору 39a (298,8 мг, 0,416 ммоль) в ТГФ (6,5 мл) добавляли HF-пиридин (3,2 мл) при 0°C и смесь перемешивали при КТ в течение 3 час. Реакцию гасили, добавляя по каплям TMSOMe (30 мл) при 0°C, и смесь перемешивали при КТ в течение 3 час. После концентрирования и сушки в условиях высокого вакуума остаток очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/EtOAc = 1:1), получая 28 (196,6 мг, 0,402 ммоль, 97%) в виде белого твердого вещества; [α]_D ²⁵ -96,6 (c 0,235, CHCl₃); ИК (пленка) ν 3502, 2970, 2927, 1733, 1685, 1506, 1456, 1375, 1251, 1152, 1040, 977 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,06 (3H, c), 1,11 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,22 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,28 (3H, c), 1,72 (3H, c), 2,10 (3H, c), 2,31-2,40 (2H, м), 2,43 (1H, дд, J=16,0, 3,7 Гц), 2,49 (1H, дд, J=16,0, 9,2 Гц), 2,55-2,68 (2H, м), 2,71 (3H, c), 2,98 (1H, дд, J=14,4, 6,4 Гц), 3,16 (1H, квинт, J=6,2 Гц), 3,76 (1H, дд, J=5,9, 3,2 Гц), 4,30 (1H, дд, J=9,2, 3,7 Гц), 5,18 (1H, ушир.т, J=7,3 Гц), 5,32 (1H, дд, J=8,4, 2,5 Гц), 5,63 (1H, дд, J=15,7, 6,4 Гц), 5,60 (1H, ддд, J=15,7, 6,9, 5,1 Гц), 6,60 (1H, c), 6,98 (1H, c); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ 15,1, 16,0, 17,7, 19,2, 19,5, 22,5, 23,6, 32,0, 35,0, 39,6, 40,3, 44,8, 53,3, 71,8, 75,6, 78,3, 116,1, 119,6, 120,5, 129,9, 131,3, 137,5, 138,2, 152,2, 165,0, 170,7, 218,8; МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₄₀NО₅S [M+H⁺] 490,3, найдено 490,2. Compound 28: To a solution of 39a (298.8 mg, 0.416 mmol) in THF (6.5 ml) was added HF-pyridine (3.2 ml) at 0 ° C and the mixture was stirred at RT for 3 hours. The reaction was quenched by adding dropwise TMSOMe (30 ml) at 0 ° C, and the mixture was stirred at RT for 3 hours. After concentration and drying under high vacuum, the residue was purified by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / EtOAc = 1: 1) to obtain 28 (196.6 mg, 0.402 mmol, 97%) as a white solid; [α] _D ²⁵ -96.6 (c 0.235, CHCl ₃ ); IR (film) ν 3502, 2970, 2927, 1733, 1685, 1506, 1456, 1375, 1251, 1152, 1040, 977 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.06 (3H, s), 1.11 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.22 (3H, d, J = 6.8 Hz ), 1.28 (3H, s), 1.72 (3H, s), 2.10 (3H, s), 2.31-2.40 (2H, m), 2.43 (1H, dd, J = 16.0, 3.7 Hz), 2.49 (1H, dd, J = 16.0, 9.2 Hz), 2.55-2.68 (2H, m), 2.71 (3H , c), 2.98 (1H, dd, J = 14.4, 6.4 Hz), 3.16 (1H, quint, J = 6.2 Hz), 3.76 (1H, dd, J = 5.9, 3.2 Hz), 4.30 (1H, dd, J = 9.2, 3.7 Hz), 5.18 (1H, broad t, J = 7.3 Hz), 5, 32 (1H, dd, J = 8.4, 2.5 Hz), 5.63 (1H, dd, J = 15.7, 6.4 Hz), 5.60 (1H, ddd, J = 15, 7, 6.9, 5.1 Hz), 6.60 (1H, s), 6.98 (1H, s); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 15.1, 16.0, 17.7, 19.2, 19.5, 22.5, 23.6, 32.0, 35.0, 39.6 , 40.3, 44.8, 53.3, 71.8, 75.6, 78.3, 116.1, 119.6, 120.5, 129.9, 131.3, 137.5, 138 2, 152.2, 165.0, 170.7, 218.8; MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₄₀ NO ₅ S [M + H ⁺ ] 490.3, found 490.2.

Соединение 26: Перед реакцией кислоту 25 и спирт 21 подвергали азеотропной перегонке с безводным бензолом (5 мл × 2) и сушили в условиях высокого вакуума. К раствору спирта 21 (240 мг, 0,756 ммоль) в CH₂Cl₂ (5 мл) добавляли EDCI (192,7 мг, 1,01 ммоль) и DMAP (122,8 мг, 1,01 ммоль) при 0°C. К смеси по каплям добавляли раствор кислоты 25 (314,6 мг, 0,628 ммоль) в CH₂Cl₂ (промывка 2 мл + 1 мл) в течение 15 мин при 0°C. После перемешивания при 0°C в течение 2 час смесь перемешивали при КТ в течение 2 час. После концентрирования остаток очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/EtOAc = от 20:1 до 15:1), получая 26 (340,1 мг, 0,425 ммоль, 68% на основе кислоты) в виде бесцветного масла; [α]_D ²⁴ -27,5 (с 0,28, СНСl₃); ИК (пленка) ν 2956, 2878, 1740, 1692, 1472, 1378, 1317, 1253, 1174, 1118, 988, 915, 872, 837, 775 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,06 (6H, c), 0,57-0,65 (6H, м), 0,92 (9H, c), 0,94 (9H, т, J=7,9 Гц), 1,02 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,03 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,07 (3H, c), 1,22 (3H, c), 2,07-2,10 (1H, м), 2,09 (3H, c), 2,31 (1H, дд, J=16,9, 7,3 Гц), 2,51 (1H, дд, J=16,8, 3,0 Гц) 2,49-2,65 (2H, м), 2,71 (3H, c), 2,96-2,99 (2H, м), 3,06 (1H, квинт, J=7,1 Гц), 3,83 (1H, дд, J=7,3, 2,1 Гц), 4,35 (1H, дд, J=7,2, 3,0 Гц), 4,98-5,12 (4H, м), 5,30 (1H, т, J=6,7 Гц), 5,76 (1H, ддт, J=16,7,10,2, 6,2 Гц), 5,92 (1H, ддд, J=17,8, 9,9, 7,8 Гц), 6,19 (1H, т, J=7,0 Гц), 6,51 (1H, c), 6,97 (1H, c); МС-НР (ESI) вычислено для С₄₁Н₆₈F₃NO₅SSi₂Na [M+Na⁺] 822,4, найдено 822,4. Compound 26: Before the reaction, acid 25 and alcohol 21 were subjected to azeotropic distillation with anhydrous benzene (5 ml × 2) and dried under high vacuum. To a solution of alcohol 21 (240 mg, 0.756 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (5 ml) was added EDCI (192.7 mg, 1.01 mmol) and DMAP (122.8 mg, 1.01 mmol) at 0 ° C . To the mixture was added dropwise a solution of acid 25 (314.6 mg, 0.628 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (washing with 2 ml + 1 ml) over 15 minutes at 0 ° C. After stirring at 0 ° C for 2 hours, the mixture was stirred at RT for 2 hours. After concentration, the residue was purified by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / EtOAc = 20: 1 to 15: 1) to obtain 26 (340.1 mg, 0.425 mmol, 68% based on acid) as a colorless oil; [α] _D ²⁴ -27.5 (c 0.28, CHCl ₃ ); IR (film) ν 2956, 2878, 1740, 1692, 1472, 1378, 1317, 1253, 1174, 1118, 988, 915, 872, 837, 775 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.06 (6H, s), 0.57-0.65 (6H, m), 0.92 (9H, s), 0.94 (9H, t, J = 7.9 Hz), 1.02 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.03 (3H, d, J = 6.8 Hz), 1.07 (3H, s), 1 22 (3H, s), 2.07-2.10 (1H, m), 2.09 (3H, s), 2.31 (1H, dd, J = 16.9, 7.3 Hz), 2.51 (1H, dd, J = 16.8, 3.0 Hz) 2.49-2.65 (2H, m), 2.71 (3H, s), 2.96-2.99 (2H , m), 3.06 (1H, quint, J = 7.1 Hz), 3.83 (1H, dd, J = 7.3, 2.1 Hz), 4.35 (1H, dd, J = 7.2, 3.0 Hz), 4.98-5.12 (4H, m), 5.30 (1H, t, J = 6.7 Hz), 5.76 (1H, DDT, J = 16 , 7.10.2, 6.2 Hz), 5.92 (1H, ddd, J = 17.8, 9.9, 7.8 Hz), 6.19 (1H, t, J = 7.0 Hz), 6.51 (1H, s); 6.97 (1H, s); MS-HP (ESI) calculated for C ₄₁ H ₆₈ F ₃ NO ₅ SSi ₂ Na [M + Na ⁺ ] 822.4, found 822.4.

Соединение 40a (посредством RCM 26): Раствор 26 (57,6 мг, 72,0 мкмоль) в толуоле (142 мл) кипятили с обратным холодильником и обрабатывали раствором катализатора Груббса (6,1 мг, 7,20 мкмоль) в толуоле (2 мл). Смесь перемешивали в течение 28 мин, охлаждали до 0°C и фильтровали через подушку силикагеля, которую промывали смесью гексан/EtOAc = 2/1 (300 мл). Объединенные фильтраты концентрировали и очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/Et₂O = от 40:1 до 15:2), получая 40a (12,0 мг, 15,5 мкмоль, 22%) в виде бесцветного масла; ИК (пленка) ν 2955, 2884, 1743, 1690, 1472, 1320, 1173, 1114,1038, 1008, 873, 832, 773 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,09 (3H, c), 0,12 (3H, c), 0,55 (6H, кв, J=7,7 Гц), 0,88 (9H, т, J=8,0 Гц), 0,96 (9H, c), 1,01 (3H, c), 1,06 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,12 (3H, c), 1,20 (3H, д, J=7,1 Гц), 2,07-2,17 (1H, м), 2,19 (3H, c), 2,38 (1H, дд, J=14,3, 3,5 Гц), 2,39-2,49 (1H, м), 2,50 (1H, дд, J=14,3, 7,3 Гц), 2,73 (3H, c), 2,77-2,91 (2H, м), 2,96-3,09 (2H, м), 3,98 (1H, дд, J=8,9 Гц), 4,54 (1H, дд, J=7,3, 3,4 Гц), 5,28-5,38 (1H, м), 5,63 (1H, дд, J=9,6, 2,3 Гц), 5,77 (1H, дд, J=15,9, 8,5 Гц), 6,21-6,28 (1H, м), 6,60 (1H, c), 6,99 (1H, c); МС-НР (ESI) вычислено для С₃₉Н₆₅F₃NO₅SSi₂ [M+H⁺] 772,4, найдено 772,4. Compound 40a (via RCM 26): A solution of 26 (57.6 mg, 72.0 μmol) in toluene (142 ml) was refluxed and treated with a solution of Grubbs catalyst (6.1 mg, 7.20 μmol) in toluene ( 2 ml). The mixture was stirred for 28 minutes, cooled to 0 ° C and filtered through a pad of silica gel, which was washed with hexane / EtOAc = 2/1 (300 ml). The combined filtrates were concentrated and purified by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / Et ₂ O = 40: 1 to 15: 2) to give 40a (12.0 mg, 15.5 μmol, 22%) as a colorless oil ; IR (film) ν 2955, 2884, 1743, 1690, 1472, 1320, 1173, 1114.1038, 1008, 873, 832, 773 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.09 (3H, s), 0.12 (3H, s), 0.55 (6H, q, J = 7.7 Hz), 0.88 (9H , t, J = 8.0 Hz), 0.96 (9H, s), 1.01 (3H, s), 1.06 (3H, d, J = 7.1 Hz), 1.12 (3H , c), 1.20 (3H, d, J = 7.1 Hz), 2.07-2.17 (1H, m), 2.19 (3H, s), 2.38 (1H, dd, J = 14.3, 3.5 Hz), 2.39-2.49 (1H, m), 2.50 (1H, dd, J = 14.3, 7.3 Hz), 2.73 (3H , c), 2.77-2.91 (2H, m), 2.96-3.09 (2H, m), 3.98 (1H, dd, J = 8.9 Hz), 4.54 ( 1H, dd, J = 7.3, 3.4 Hz), 5.28-5.38 (1H, m), 5.63 (1H, dd, J = 9.6, 2.3 Hz), 5 77 (1H, dd, J = 15.9, 8.5 Hz), 6.21-6.28 (1H, m), 6.60 (1H, s), 6.99 (1H, s); MS-HP (ESI) calculated for C ₃₉ H ₆₅ F ₃ NO ₅ SSi ₂ [M + H ⁺ ] 772.4, found 772.4.

Соединение 29: К раствору 40a (1,78 г, 2,31 ммоль) в ТГФ (25 мл) медленно добавляли HF·пиридин (12,5 мл) при 0°C и смесь перемешивали при КТ в течение 4 час. Реакцию гасили, добавляя по каплям TMSOMe (80 мл) в течение 10 мин при 0°C. Смесь энергично перемешивали при КТ в течение 2,5 час. После концентрирования и сушки в условиях высокого вакуума в течение 2 час остаток очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂ ~50 г, гексан/EtOAc = 1:1), получая 29 (1,20 г, 2,21 ммоль, 96%) в виде бесцветного порошка; [α]_D ²⁵ -54,6 (с 0,28, СНСl₃); ИК (пленка) ν 3478, 2974, 2929, 1736, 1689, 1449, 1381, 1318, 1247, 1169, 1113, 1039, 983, 867, 736 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,05 (3H, c), 1,12 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,23 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,37 (3H, c), 2,04 (1H, ушир.д, J=3,8 Гц, -ОН), 2,12 (3H, c), 2,25-2,33 (1H, м), 2,38 (1H, дд, J=15,3, 3,0 Гц), 2,48 (1H, дд, J=15,4, 9,8 Гц), 2,54-2,61 (1H, м), 2,66-2,76 (1H, м), 2,71 (3H, c), 2,96 (1H, дд, J=16,5,4,5 Гц), 3,02 (1H, дд, J=16,3, 6,5 Гц), 3,11 (1H, квинт, J=6,7 Гц), 3,19 (1H, ушир.c, =OH), 3,74 (1H, ушир.c), 4,35 (1H, ушир.д, J=9,5 Гц), 5,42 (1H, дд, J=6,2, 4,1 Гц), 5,60 (1H, ддд, J=15,8, 5,6, 4,5 Гц), 5,66 (1H, дд, J=15,8, 5,8 Гц), 6,24 (1H, т, J=7,2 Гц), 6,64 (1H, c), 7,00 (1H, c); ¹³C ЯМР (100 МГц, (CDCl₃) δ 15,1,16,1, 17,7, 18,5, 19,3, 22,5, 28,8, 31,1, 39,6, 39,7, 45,0, 53,7, 71,4, 75,3, 76,8, 116,7, 120,2, 124,3 [кв, ¹J(C,F) = 273,4 Гц], 127,9, 130,2 [кв, ³J(C,F) = 6,0 Гц], 130,6 [кв, ²J(CF) = 28,4 Гц], 132,5, 136,7, 152,0, 165,4, 170,2, 218,4; МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₃₇F₃NO₅S [M+H⁺] 544,2, найдено 544,1. Compound 29: To a solution of 40a (1.78 g, 2.31 mmol) in THF (25 ml) was slowly added HF · pyridine (12.5 ml) at 0 ° C and the mixture was stirred at RT for 4 hours. The reaction was quenched by adding dropwise TMSOMe (80 ml) for 10 min at 0 ° C. The mixture was vigorously stirred at RT for 2.5 hours. After concentration and drying under high vacuum for 2 hours, the residue was purified by flash column chromatography (SiO ₂ ~ 50 g, hexane / EtOAc = 1: 1) to obtain 29 (1.20 g, 2.21 mmol, 96% ) in the form of a colorless powder; [α] _D ²⁵ -54.6 (c 0.28, CHCl ₃ ); IR (film) ν 3478, 2974, 2929, 1736, 1689, 1449, 1381, 1318, 1247, 1169, 1113, 1039, 983, 867, 736 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.05 (3H, s), 1.12 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.23 (3H, d, J = 6.8 Hz ), 1.37 (3H, s), 2.04 (1H, broad d, J = 3.8 Hz, -OH), 2.12 (3H, s), 2.25-2.33 (1H , m), 2.38 (1H, dd, J = 15.3, 3.0 Hz), 2.48 (1H, dd, J = 15.4, 9.8 Hz), 2.54-2, 61 (1H, m), 2.66-2.76 (1H, m), 2.71 (3H, s), 2.96 (1H, dd, J = 16.5.4.5 Hz), 3 , 02 (1H, dd, J = 16.3, 6.5 Hz), 3.11 (1H, fifth, J = 6.7 Hz), 3.19 (1H, broad s, = OH), 3 74 (1H, broad s), 4.35 (1H, broad d, J = 9.5 Hz), 5.42 (1H, dd, J = 6.2, 4.1 Hz), 5, 60 (1H, ddd, J = 15.8, 5.6, 4.5 Hz), 5.66 (1H, dd, J = 15.8, 5.8 Hz), 6.24 (1H, t, J = 7.2 Hz), 6.64 (1H, s), 7.00 (1H, s); ¹³ C NMR (100 MHz, (CDCl ₃ ) δ 15,1,16,1, 17,7, 18,5, 19,3, 22,5, 28,8, 31,1, 39,6, 39, 7, 45.0, 53.7, 71.4, 75.3, 76.8, 116.7, 120.2, 124.3 [q, ¹ J (C, F) = 273.4 Hz], 127.9, 130.2 [q, ³ J (C, F) = 6.0 Hz], 130.6 [q, ² J (CF) = 28.4 Hz], 132.5, 136.7, 152.0, 165.4, 170.2, 218.4; MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₃₇ F ₃ NO ₅ S [M + H ⁺ ] 544.2, found 544.1.

Соединение 2: К раствору 29 (1,22 мг, 2,24 мкмоль) и трисNHNH₂ (26,7 мг, 89,6 мкмоль) в ClCH₂CH₂Cl (1 мл) при 50°C добавляли Et₃N (12,5 мкл, 89,6 мкмоль). Реакцию контролировали с помощью ВЭТСХ (гексан/EtOAc/CH₂Cl₂ = 1/1/2). После перемешивания в течение 6,5 час к смеси дополнительно добавляли трисNHNH₂ (26,7 мг, 89,6 мкмоль) и Et₃N (12,5 мкл, 89,6 мкмоль). После перемешивания в течение 14 час смесь охлаждали до КТ, разбавляли EtOAc и фильтровали через подушку силикагеля, которую промывали EtOAc. После концентрирования остаток очищали препаративной ТСХ (гексан/EtOAc/CH₂Cl₂ =1/1/2), получая 2 (1,16 мг, 2,13 мкмоль, 94%) в виде белого твердого вещества; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,03 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,08 (3H, c), 1,19 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,25-1,35 (2H, м), 1,37 (3H, c), 1,42-1,55 (2H, м), 1,65-1,82 (2H, м), 2,10 (3H, д, J=0,8 Гц), 2,21-2,47 (2H, м), 2,27 (1H, дд, J=14,2, 2,6 Гц), 2,48 (1H, дд, J=14,3, 10,8 Гц), 2,70 (3H, c), 2,70-2,28 (1H, м), 3,02 (1H, д, J=2,0 Гц, -OH), 3,19 (1H, кв.д, J=6,9, 2,2 Гц), 3,65 (1H, д, J=6,2 Гц, -OH), 3,69-3,72 (1H, м), 4,34 (1H, ддд, J=10,8, 6,2, 2,6 Гц), 5,28 (1H, дд, J=10,2, 2,2 Гц), 6,12 (1H, дд, J=10,2, 5,2 Гц), 6,61 (1H, c), 6,98 (1H, c); МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₃₉F₃NO₅S [M+H⁺] 546,3, найдено 546,2. Compound 2: To a solution of 29 (1.22 mg, 2.24 μmol) and TrisNHNH ₂ (26.7 mg, 89.6 μmol) in ClCH ₂ CH ₂ Cl (1 ml) at 50 ° C was added Et ₃ N ( 12.5 μl, 89.6 μmol). The reaction was monitored by HPLC (hexane / EtOAc / CH ₂ Cl ₂ = 1/1/2). After stirring for 6.5 hours, TrisNHNH ₂ (26.7 mg, 89.6 μmol) and Et ₃ N (12.5 μl, 89.6 μmol) were additionally added to the mixture. After stirring for 14 hours, the mixture was cooled to RT, diluted with EtOAc and filtered through a pad of silica gel, which was washed with EtOAc. After concentration, the residue was purified by preparative TLC (hexane / EtOAc / CH ₂ Cl ₂ = 1/1/2) to give 2 (1.16 mg, 2.13 μmol, 94%) as a white solid; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.03 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.08 (3H, s), 1.19 (3H, d, J = 6.8 Hz ), 1.25-1.35 (2H, m), 1.37 (3H, s), 1.42-1.55 (2H, m), 1.65-1.82 (2H, m), 2.10 (3H, d, J = 0.8 Hz), 2.21-2.47 (2H, m), 2.27 (1H, dd, J = 14.2, 2.6 Hz), 2 48 (1H, dd, J = 14.3, 10.8 Hz), 2.70 (3H, s), 2.70-2.28 (1H, m), 3.02 (1H, d, J = 2.0 Hz, -OH), 3.19 (1H, qd, J = 6.9, 2.2 Hz), 3.65 (1H, d, J = 6.2 Hz, -OH) , 3.69-3.72 (1H, m), 4.34 (1H, ddd, J = 10.8, 6.2, 2.6 Hz), 5.28 (1H, dd, J = 10, 2, 2.2 Hz), 6.12 (1H, dd, J = 10.2, 5.2 Hz), 6.61 (1H, s), 6.98 (1H, s); MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₃₉ F ₃ NO ₅ S [M + H ⁺ ] 546.3, found 546.2.

Соединение 54: Перед реакцией кислоту 25 и спирт 53 подвергали азеотропной перегонке с безводным бензолом (3 мл × 2) и сушили в условиях высокого вакуума. К раствору спирта 53 (68,0 мг, 0,173 ммоль) в CH₂Cl₂ (1,3 мл) добавляли EDCI (37,8 мг, 0,197 ммоль) и DMAP (24,1 мг, 0,197 ммоль) при 0°C. К смеси по каплям добавляли раствор кислоты 25 (72,6 мг, 0,123 ммоль) в CH₂Cl₂ (0,7 мл) в течение 5 мин при 0°C. После перемешивания при 0°C в течение 1 час смесь перемешивали при КТ в течение 2,5 час. После концентрирования остаток очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/EtOAc = 30:1), получая 54 (99,5 мг, 0,114 ммоль, 92%, исходя из сложного трет-бутилового эфира) в виде бесцветного масла; [α]_D ²⁵ -23,4 (с 0,56, СНСl₃); ИК (пленка) ν 2955, 2931, 2880, 1735, 1696, 1506, 1472, 1386, 1362, 1294, 1254, 1174, 1104, 988, 878, 776, 742 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,06 (3H, c), 0,06 (3H, c), 0,14 (6H, c), 0,63 (6H, кв, J=8,0 Гц), 0,92 (9H, c), 0,94 (9H, т, J=8,0 Гц), 0,97 (9H, c), 1,02 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,05 (3H, д, J=6,5 Гц), 1,07 (3H, c), 1,21 (3H, c), 1,67 (3H, c), 2,06 (3H, д, J=0,8 Гц), 2,05-2,14 (1H, м), 2,30 (1H, дд, J=16,9, 7,5 Гц), 2,33-2,53 (2H, м), 2,50 (1H, дд, J=16,9, 2,7 Гц), 2,76-2,80 (2H, м), 3,07 (1H, квинт, J=7,0 Гц), 3,83 (1H, дд, J=7,0, 2,2 Гц), 4,35 (1H, дд, J=7,4, 2,8 Гц), 4,97 (2H, c), 4,97-5,07 (4H, м), 5,16 (1H, т, J=7,2 Гц), 5,24 (1H, т, J=6,9 Гц), 5,74 (1H, ддт, J=16,6, 10,0, 6,5 Гц), 5,91 (1H, ддд, J=17,6, 9,9, 7,7 Гц), 6,50 (1H, c), 7,06 (1H, c); ¹³C ЯМР (100 МГц, (CDCl₃) δ -5,2 (2C), -3,7, -3,3, 5,3 (3C), 7,2 (3C), 14,7, 15,2, 18,5, 18,7, 18,9, 20,3, 23,6, 23,7, 26,0 (3C), 26,4 (3C), 31,7, 36,7, 40,1, 43,8, 46,4, 53,3, 63,4, 74,2, 76,5, 79,6, 115,5, 115,6, 116,6, 120,5, 121,3, 135,8, 136,1, 137,4, 140,1, 153,0, 171,5, 172,2, 218,4; МС-НР (ESI) вычислено для С₄₇Н₈₆NO₆SSi₃ [M+H⁺] 876,6, найдено 876,5. Compound 54: Before the reaction, acid 25 and alcohol 53 were subjected to azeotropic distillation with anhydrous benzene (3 ml × 2) and dried under high vacuum. To a solution of alcohol 53 (68.0 mg, 0.173 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (1.3 ml) was added EDCI (37.8 mg, 0.197 mmol) and DMAP (24.1 mg, 0.197 mmol) at 0 ° C . To the mixture was added dropwise a solution of acid 25 (72.6 mg, 0.123 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (0.7 ml) over 5 minutes at 0 ° C. After stirring at 0 ° C for 1 hour, the mixture was stirred at RT for 2.5 hours. After concentration, the residue was purified by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / EtOAc = 30: 1) to obtain 54 (99.5 mg, 0.114 mmol, 92% based on tert-butyl ester) as a colorless oil; [α] _D ²⁵ -23.4 (c 0.56, CHCl ₃ ); IR (film) ν 2955, 2931, 2880, 1735, 1696, 1506, 1472, 1386, 1362, 1294, 1254, 1174, 1104, 988, 878, 776, 742 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.06 (3H, s), 0.06 (3H, s), 0.14 (6H, s), 0.63 (6H, q, J = 8, 0 Hz), 0.92 (9H, s), 0.94 (9H, t, J = 8.0 Hz), 0.97 (9H, s), 1.02 (3H, d, J = 6, 6 Hz), 1.05 (3H, d, J = 6.5 Hz), 1.07 (3H, s), 1.21 (3H, s), 1.67 (3H, s), 2.06 (3H, d, J = 0.8 Hz), 2.05-2.14 (1H, m), 2.30 (1H, dd, J = 16.9, 7.5 Hz), 2.33- 2.53 (2H, m), 2.50 (1H, dd, J = 16.9, 2.7 Hz), 2.76-2.80 (2H, m), 3.07 (1H, quint, J = 7.0 Hz), 3.83 (1H, dd, J = 7.0, 2.2 Hz), 4.35 (1H, dd, J = 7.4, 2.8 Hz), 4, 97 (2H, s), 4.97-5.07 (4H, m), 5.16 (1H, t, J = 7.2 Hz), 5.24 (1H, t, J = 6.9 Hz ), 5.74 (1H, ddd, J = 16.6, 10.0, 6.5 Hz), 5.91 (1H, ddd, J = 17.6, 9.9, 7.7 Hz), 6.50 (1H, s); 7.06 (1H, s); ¹³ C NMR (100 MHz, (CDCl ₃ ) δ -5.2 (2C), -3.7, -3.3, 5.3 (3C), 7.2 (3C), 14.7, 15, 2, 18.5, 18.7, 18.9, 20.3, 23.6, 23.7, 26.0 (3C), 26.4 (3C), 31.7, 36.7, 40, 1, 43.8, 46.4, 53.3, 63.4, 74.2, 76.5, 79.6, 115.5, 115.6, 116.6, 120.5, 121.3, 135.8, 136.1, 137.4, 140.1, 153.0, 171.5, 172.2, 218.4; MS-HP (ESI) calculated for C ₄₇ H ₈₆ NO ₆ SSi ₃ [M + H ⁺ ] 876.6, found 876.5.

Соединение 55: Раствор 54 (69,7 мг, 79,5 мкмоль) в толуоле (158 мл) кипятили с обратным холодильником и обрабатывали раствором катализатора Груббса (6,7 мг, 7,95 мкмоль) в толуоле (2 мл). Смесь перемешивали в течение 11 мин, охлаждали до 0°C и фильтровали через подушку силикагеля, которую промывали смесью гексан/EtOAc = 3/1 (280 мл). Объединенные фильтраты концентрировали и очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/Et₂O = от 20:1 до 15:1), получая 55 (18,4 мг, 21,7 мкмоль, 27%) в виде бесцветного масла; [α]_D ²⁴ -40,4 (с 0,26, СНСl₃); ИК (пленка) ν 2955, 2930, 2879, 1740, 1694, 1472, 1387, 1362, 1253, 1200, 1107, 1007, 838, 776, 742 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,08 (3H, c), 0,12 (3H, c), 0,15 (6H, c), 0,57 (6H, кв, J=7,9 Гц), 0,88 (9H, т, J=8,0 Гц), 0,95 (9H, c), 0,97 (9H, c), 1,04 (3H, c), 1,06 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,12 (3H, c), 1,17 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,69 (3H, c), 2,06-2,30 (2H, м), 2,14 (3H, c), 2,45 (1H, дд, J=15,6, 3,6 Гц), 2,50 (1H, дд, J=14,9, 3,1 Гц), 2,63-2,75 (2H, м), 2,97-3,06 (1H, м), 3,10 (1H, дд, J=14,6, 7,7 Гц), 3,97 (1H, д, J=8,5 Гц), 4,44 (1H, дд, J=8,4, 2,9 Гц), 4,97 (2H, c), 5,22 (1H, дд, J=8,7, 5,2 Гц), 5,33-5,44 (2H, м), 5,70 (1H, дд, J=15,6, 8,1 Гц), 6,57 (1H, c), 7,07 (1H, c); МС-НР (ESI) вычислено для С₄₅Н₈₂NO₆SSi₃ [M+H⁺] 848,5, найдено 848,5. Compound 55: A solution of 54 (69.7 mg, 79.5 μmol) in toluene (158 ml) was refluxed and treated with a solution of Grubbs catalyst (6.7 mg, 7.95 μmol) in toluene (2 ml). The mixture was stirred for 11 min, cooled to 0 ° C and filtered through a pad of silica gel, which was washed with hexane / EtOAc = 3/1 (280 ml). The combined filtrates were concentrated and purified by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / Et ₂ O = 20: 1 to 15: 1) to obtain 55 (18.4 mg, 21.7 μmol, 27%) as a colorless oil ; [α] _D ²⁴ -40.4 (c 0.26, CHCl ₃ ); IR (film) ν 2955, 2930, 2879, 1740, 1694, 1472, 1387, 1362, 1253, 1200, 1107, 1007, 838, 776, 742 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.08 (3H, s), 0.12 (3H, s), 0.15 (6H, s), 0.57 (6H, q, J = 7, 9 Hz), 0.88 (9H, t, J = 8.0 Hz), 0.95 (9H, s), 0.97 (9H, s), 1.04 (3H, s), 1.06 (3H, d, J = 7.1 Hz), 1.12 (3H, s), 1.17 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.69 (3H, s), 2.06 -2.30 (2H, m), 2.14 (3H, s), 2.45 (1H, dd, J = 15.6, 3.6 Hz), 2.50 (1H, dd, J = 14 9, 3.1 Hz), 2.63-2.75 (2H, m), 2.97-3.06 (1H, m), 3.10 (1H, dd, J = 14.6, 7 , 7 Hz), 3.97 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.44 (1H, dd, J = 8.4, 2.9 Hz), 4.97 (2H, s), 5.22 (1H, dd, J = 8.7, 5.2 Hz), 5.33-5.44 (2H, m), 5.70 (1H, dd, J = 15.6, 8.1 Hz), 6.57 (1H, s); 7.07 (1H, s); MS-HP (ESI) calculated for C ₄₅ H ₈₂ NO ₆ SSi ₃ [M + H ⁺ ] 848.5, found 848.5.

Соединение 57: К раствору 55 (61,8 мг, 72,8 мкмоль) в ТГФ (2 мл) добавляли HF·пиридин (1 мл) при 0°C и смесь перемешивали при КТ в течение 3,2 час. Реакцию гасили, добавляя по каплям TMSOMe (15 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при КТ в течение 2 час. После концентрирования и сушки в условиях высокого вакуума остаток очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/EtOAc = 1:3), получая 57 (32,4 мг, 64,1 мкмоль, 88%) в виде белого твердого вещества; [α]_D ²⁵ -108,4 (с 0,285, СНСl₃); ИК (пленка) ν 3422, 2968, 2919, 2729, 1689, 1449, 1377, 1252, 1152, 1064, 978 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,05 (3H, c), 1,12 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,22 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,32 (3H, c), 1,72 (3H, c), 2,08 (3H, c), 2,31-2,40 (3H, м), 2,43 (1H, дд, J=15,5, 3,5 Гц), 2,49 (1H, дд, J=15,5, 9,5 Гц), 2,55-2,67 (2H, м), 2,95 (1H, дд, J=14,6, 6,3 Гц), 3,13 (1H, квинт, J=6,6 Гц), 3,34 (1H, ушир.c, -ОН), 3,75 (1H, дд, J=6,6, 2,4 Гц), 4,06 (1H, ушир.c, -ОН), 4,33 (1H, дд, J=9,4, 3,0 Гц), 4,92 (2H, c), 5,18 (1H, т, J=6,9 Гц), 5,33 (1H, дд, J=8,0, 2,5 Гц), 5,52 (1H, дд, J=15,8, 6,4 Гц), 5,59 (1H, ддд, J=15,8, 6,6, 5,0 Гц), 6,63 (1H, c), 7,13 (1H, c); ¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) δ 15,3, 16,3, 17,8, 19,2, 22,8, 23,7, 31,9, 35,1, 39,7, 40,2, 45,0, 53,4, 61,8, 71,7, 75,8, 78,1, 116,7, 119,0, 120,5, 130,0, 131,2, 137,6, 138,9, 152,5, 170,0, 170,7, 218,7; МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₃₉NO₆SNa [M+Na⁺] 528,2, найдено 528,0. Compound 57: To a solution of 55 (61.8 mg, 72.8 μmol) in THF (2 ml) was added HF · pyridine (1 ml) at 0 ° C and the mixture was stirred at RT for 3.2 hours. The reaction was quenched by adding dropwise TMSOMe (15 ml) at 0 ° C. The mixture was stirred at RT for 2 hours. After concentration and drying under high vacuum, the residue was purified by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / EtOAc = 1: 3) to obtain 57 (32.4 mg, 64.1 μmol, 88%) as a white solid; [α] _D ²⁵ -108.4 (c 0.285, CHCl ₃ ); IR (film) ν 3422, 2968, 2919, 2729, 1689, 1449, 1377, 1252, 1152, 1064, 978 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.05 (3H, s), 1.12 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.22 (3H, d, J = 6.8 Hz ), 1.32 (3H, s), 1.72 (3H, s), 2.08 (3H, s), 2.31-2.40 (3H, m), 2.43 (1H, dd, J = 15.5, 3.5 Hz), 2.49 (1H, dd, J = 15.5, 9.5 Hz), 2.55-2.67 (2H, m), 2.95 (1H dd, J = 14.6, 6.3 Hz), 3.13 (1H, fifth, J = 6.6 Hz), 3.34 (1H, broad s, -OH), 3.75 (1H dd, J = 6.6, 2.4 Hz), 4.06 (1H, broad s, -OH), 4.33 (1H, dd, J = 9.4, 3.0 Hz), 4 92 (2H, s), 5.18 (1H, t, J = 6.9 Hz), 5.33 (1H, dd, J = 8.0, 2.5 Hz), 5.52 (1H, dd, J = 15.8, 6.4 Hz), 5.59 (1H, ddd, J = 15.8, 6.6, 5.0 Hz), 6.63 (1H, s), 7.13 (1H, s); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 15.3, 16.3, 17.8, 19.2, 22.8, 23.7, 31.9, 35.1, 39.7, 40.2 , 45.0, 53.4, 61.8, 71.7, 75.8, 78.1, 116.7, 119.0, 120.5, 130.0, 131.2, 137.6, 138 9, 152.5, 170.0, 170.7, 218.7; MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₃₉ NO ₆ SNa [M + Na ⁺ ] 528.2, found 528.0.

Соединение 46: Перед реакцией неочищенную кислоту 25 (4,65 г, 7,27 ммоль) и спирт 44 (2,18 г, 9,84 ммоль) подвергали азеотропной перегонке с безводным бензолом и сушили в условиях высокого вакуума. К раствору спирта 44 (2,18 г, 9,84 ммоль) в CH₂Cl₂ (65 мл) добавляли EDCI (2,09 г, 10,9 ммоль) и DMAP (1,33 г, 10,9 ммоль) при 0°C. К смеси по каплям добавляли раствор неочищенной кислоты 25 (4,65 г, 7,27 ммоль) в CH₂Cl₂ (промывка 20 мл + 5 мл) в течение 20 мин при 0°C. После перемешивания при 0°C в течение 40 мин смесь перемешивали при КТ в течение 4 час. После концентрирования остаток очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂ ~160 г; гексан/EtOAc = 20:1), получая 46 (4,85 г, 6,87 ммоль, 94% исходя из сложного трет-бутилового эфира) в виде бесцветного масла; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,08 (3H, c), 0,08 (3H, c), 0,60 (6H, кв, J=7,8 Гц), 0,93 (9H, c), 0,94 (9H, т, J=8,0 Гц), 1,04 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,04 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,11 (3H, c), 1,23 (3H, c), 2,05-2,14 (1H, м), 2,17 (3H, c), 2,40 (1H, дд, J=16,9, 7,0 Гц), 2,59 (1Н, дд, J=17,0, 3,6 Гц), 2,56-2,64 (2H, м), 2,90-3,01 (2H, м), 3,06 (1H, квинт, J=7,0 Гц), 3,85 (1H, дд, J=7,3, 2,0 Гц), 4,38 (1H, д, J=7,0, 3,4 Гц), 4,97-5,14 (5H, м), 5,75 (1H, ддт, J=16,0, 9,9, 6,2 Гц), 5,92 (1H, ддд, J=17,8, 10,5, 7,8 Гц), 6,21 (1H, тд, J=7,2, 1,5 Гц); МС-НР (ESI) вычислено для С₃₆Н₆₃F₃O₆Si₂Na [M+Na⁺] 727,4, найдено 727,3. Compound 46: Before the reaction, crude acid 25 (4.65 g, 7.27 mmol) and alcohol 44 (2.18 g, 9.84 mmol) were azeotroped with anhydrous benzene and dried under high vacuum. To a solution of alcohol 44 (2.18 g, 9.84 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (65 ml) was added EDCI (2.09 g, 10.9 mmol) and DMAP (1.33 g, 10.9 mmol) at 0 ° C. A solution of crude acid 25 (4.65 g, 7.27 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (washing with 20 ml + 5 ml) was added dropwise to the mixture over 20 minutes at 0 ° C. After stirring at 0 ° C for 40 minutes, the mixture was stirred at RT for 4 hours. After concentration, the residue was purified by flash column chromatography (SiO ₂ ~ 160 g; hexane / EtOAc = 20: 1) to obtain 46 (4.85 g, 6.87 mmol, 94% based on tert-butyl ester) as colorless oil; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.08 (3H, s), 0.08 (3H, s), 0.60 (6H, q, J = 7.8 Hz), 0.93 (9H , c), 0.94 (9H, t, J = 8.0 Hz), 1.04 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.04 (3H, d, J = 7.0 Hz ), 1.11 (3H, s), 1.23 (3H, s), 2.05-2.14 (1H, m), 2.17 (3H, s), 2.40 (1H, dd, J = 16.9, 7.0 Hz), 2.59 (1H, dd, J = 17.0, 3.6 Hz), 2.56-2.64 (2H, m), 2.90-3 01 (2H, m), 3.06 (1H, quint, J = 7.0 Hz), 3.85 (1H, dd, J = 7.3, 2.0 Hz), 4.38 (1H, d, J = 7.0, 3.4 Hz), 4.97-5.14 (5H, m), 5.75 (1H, DDT, J = 16.0, 9.9, 6.2 Hz) 5.92 (1H, ddd, J = 17.8, 10.5, 7.8 Hz); 6.21 (1H, td, J = 7.2, 1.5 Hz); MS-HP (ESI) calculated for C ₃₆ H ₆₃ F ₃ O ₆ Si ₂ Na [M + Na ⁺ ] 727.4, found 727.3.

Соединение 48: Раствор 46 (510,0 мг, 0,723 ммоль) в толуоле (500 мл) кипятили с обратным холодильником и обрабатывали раствором катализатора Груббса (92,1 мг, 0,109 ммоль) в толуоле (10 мл). Смесь перемешивали в течение 17 мин при кипячении с обратным холодильником и сразу же охлаждали до 0°C и хранили при 0°C перед фильтрованием через подушку силикагеля. Вторую партию диена (510,0 мг, 0,723 ммоль) обрабатывали идентично и одновременно. Объединенные реакционные смеси фильтровали через подушку силикагеля (100 г), которую промывали смесью гексан/EtOAc = 3/1 (1,4 л). Объединенные фильтраты концентрировали и очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂ ~65 г, гексан/Et₂O = от 10:1 до 5:1), получая 48 (742,4 мг, 1,10 ммоль, 76%) в виде бесцветного масла; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,08 (3Н), 0,10 (3Н, c), 0,60 (6H, кв, J=7,8 Гц), 0,93 (9H, c), 0,94 (9H, т, J=7,8 Гц), 1,03 (3Н, д, J=7,1 Гц), 1,08 (3Н, c), 1,13 (3Н, д, J=7,0 Гц), 1,17 (3Н, c), 2,26 (3Н, c), 2,25-2,34 (1H, м), 2,64 (1H, дд, J=15,5, 5,0 Гц), 2,68-2,75 (2H, м), 2,76 (1H, дд, J=15,6, 6,4 Гц), 2,85 (1H, дд, J=15,6, 5,7 Гц), 2,97 (1H, кв.д, J=8,3, 6,9 Гц), 3,04 (1H, дд, J=15,6, 6,3 Гц), 3,92 (1H, дд, J=8,3, 1,2 Гц), 4,36 (1H, т, J=5,3 Гц), 5,30-5,39 (2H, м), 5,58 (1H, дд, J=15,5, 8,0 Гц), 6,13 (1H, ушир.т, J=7,2 Гц); ¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) δ -3,6, -3,6, 5,4 (3С), 7,0 (3С), 17,5, 18,5, 19,0, 21,6, 23,5, 26,3 (3С), 26,5, 28,6, 29,1, 41,0, 42,3, 47,3, 54,1, 74,2, 76,8, 77,7, 124,0 [¹J(C,F)=273,7 Гц], 126,0, 128,7 [³J(C,F)=5,9 Гц], 132,2 [²J(C,F)=28,1 Гц], 133,8, 170,5, 204,1, 216,1; МС-НР (ESI) вычислено для С₃₄Н₅₉F₃O₆Si₂Na [M+Na⁺] 699,4, найдено 699,4. Compound 48: A solution of 46 (510.0 mg, 0.723 mmol) in toluene (500 ml) was refluxed and treated with a solution of Grubbs catalyst (92.1 mg, 0.109 mmol) in toluene (10 ml). The mixture was stirred for 17 minutes under reflux and immediately cooled to 0 ° C and stored at 0 ° C before being filtered through a pad of silica gel. The second batch of diene (510.0 mg, 0.723 mmol) was treated identically and simultaneously. The combined reaction mixtures were filtered through a pad of silica gel (100 g), which was washed with hexane / EtOAc = 3/1 (1.4 L). The combined filtrates were concentrated and purified by flash column chromatography (SiO ₂ ~ 65 g, hexane / Et ₂ O = 10: 1 to 5: 1) to obtain 48 (742.4 mg, 1.10 mmol, 76%) in colorless oil; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.08 (3H), 0.10 (3H, s), 0.60 (6H, q, J = 7.8 Hz), 0.93 (9H, s ), 0.94 (9H, t, J = 7.8 Hz), 1.03 (3H, d, J = 7.1 Hz), 1.08 (3H, s), 1.13 (3H, d , J = 7.0 Hz), 1.17 (3H, s), 2.26 (3H, s), 2.25-2.34 (1H, m), 2.64 (1H, dd, J = 15.5, 5.0 Hz), 2.68-2.75 (2H, m), 2.76 (1H, dd, J = 15.6, 6.4 Hz), 2.85 (1H, dd , J = 15.6, 5.7 Hz), 2.97 (1H, qd, J = 8.3, 6.9 Hz), 3.04 (1H, dd, J = 15.6, 6 , 3 Hz), 3.92 (1H, dd, J = 8.3, 1.2 Hz), 4.36 (1H, t, J = 5.3 Hz), 5.30-5.39 (2H , m), 5.58 (1H, dd, J = 15.5, 8.0 Hz), 6.13 (1H, broad t, J = 7.2 Hz); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -3.6, -3.6, 5.4 (3C), 7.0 (3C), 17.5, 18.5, 19.0, 21.6 , 23.5, 26.3 (3C), 26.5, 28.6, 29.1, 41.0, 42.3, 47.3, 54.1, 74.2, 76.8, 77, 7, 124.0 [ ¹ J (C, F) = 273.7 Hz], 126.0, 128.7 [ ³ J (C, F) = 5.9 Hz], 132.2 [ ² J (C , F) = 28.1 Hz], 133.8, 170.5, 204.1, 216.1; MS-HP (ESI) calculated for C ₃₄ H ₅₉ F ₃ O ₆ Si ₂ Na [M + Na ⁺ ] 699.4, found 699.4.

Соединение 40a (посредством реакции Виттига из кетона 48): Кетон 48 подвергали азеотропной перегонке с бензолом (5 мл × 2) и затем сушили в условиях высокого вакуума в течение 0,5 час. К раствору соли Виттига (907 мг, 2,59 ммоль) в ТГФ (19 мл) по каплям добавляли t-BuOK (2,4 мл 1,0 М раствора в ТГФ, 2,43 ммоль) в течение 5 мин при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 0,5 час и затем охлаждали до Compound 40a (via Wittig reaction from ketone 48): Ketone 48 was azeotroped with benzene (5 ml × 2) and then dried under high vacuum for 0.5 hour. To a solution of Wittig salt (907 mg, 2.59 mmol) in THF (19 ml) was added dropwise t-BuOK (2.4 ml of a 1.0 M solution in THF, 2.43 mmol) over 5 minutes at 0 ° C. The mixture was stirred at 0 ° C for 0.5 hour and then cooled to

-78°C. К смеси по каплям добавляли раствор кетона 48 (1,10 г, 1,62 ммоль) в ТГФ (13 мл) в течение 10 мин и полученной в результате смеси давали возможность нагреться до -20°C в течение 2 час. Реакцию гасили насыщенным водным NH₄Cl (15 мл) и экстрагировали EtOAc (50 мл × 3). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO₂, гексан/Et₂O = от 20:1 до 10:1), получая требуемый 16(E)-изомер 40a (940 мг, 1,22 ммоль, 75%) вместе с нежелательным 16(Z)-изомером 40b (140,9 мг, 0,182 ммоль, 11%), оба в виде бесцветных масел; -78 ° C. To the mixture was added dropwise a solution of ketone 48 (1.10 g, 1.62 mmol) in THF (13 ml) over 10 minutes and the resulting mixture was allowed to warm to -20 ° C for 2 hours. The reaction was quenched with saturated aqueous NH ₄ Cl (15 ml) and extracted with EtOAc (50 ml × 3). The combined organic layers were washed with brine (20 ml), dried over Na ₂ SO ₄ and concentrated. The residue was purified by flash chromatography (SiO ₂ , hexane / Et ₂ O = 20: 1 to 10: 1) to obtain the desired 16 (E) isomer 40a (940 mg, 1.22 mmol, 75%) together with the undesired 16 The (Z) -isomer 40b (140.9 mg, 0.182 mmol, 11%), both as colorless oils;

[α]_D ²⁶ -17,1 (с 0,14, СНСl₃); ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,09 (3Н, c), 0,12 (3H, c), 0,55 (6H, кв, J=7,7 Гц), 0,88 (9H, т, J=8,0 Гц), 0,96 (9H, c), 1,01 (3H, c), 1,06 (3Н, д, J=7,1 Гц), 1,12 (3Н, c), 1,20 (3Н, д, J=7,1 Гц), 2,07-2,17 (1H, м), 2,19 (3Н, c), 2,38 (1H, дд, J=14,3, 3,5 Гц), 2,39-2,49 (1H, м), 2,50 (1H, дд, J=14,3, 7,3 Гц), 2,73 (3Н, c), 2,77-2,91 (2H, м), 2,96-3,09 (2H, м), 3,98 (1H, дд, J=8,9 Гц), 4,54 (1H, дд, J=7,3, 3,4 Гц), 5,28-5,38 (1H, м), 5,63 (1H, дд, J=9,6, 2,3 Гц), 5,77 (1H, дд, J=15,9, 8,5 Гц), 6,21-6,28 (1H, м), 6,60 (1H, c), 6,99 (1H, c); ¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) δ -3,4,-3,3, 5,5 (3C), 7,0 (3C), 14,6, 17,1, 18,7, 19,4, 19,9, 21,3, 24,8, 26,4 (3C), 29,6, 32,8, 42,0, 42,1, 48,2, 54,1, 73,4, 76,9, 77,8, 117,0, 121,6, 124,3 [¹J(C,F) = 273,5 Гц], 127,2, 130,6 [²J(С,F) = 28,2 Гц], 130,8 [³J(C,F) = 6,1 Гц], 133,2, 136,5, 152,3, 165,0, 170,1, 217,1; МС-НР (ESI) вычислено для С₃₉Н₆₅F₃NO₅SSi₂[M+H⁺] 772,4074, найдено 772,4102.[α] _D ²⁶ -17.1 (c 0.14, CHCl ₃ ); ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.09 (3H, s), 0.12 (3H, s), 0.55 (6H, q, J = 7.7 Hz), 0.88 (9H , t, J = 8.0 Hz), 0.96 (9H, s), 1.01 (3H, s), 1.06 (3H, d, J = 7.1 Hz), 1.12 (3H , c), 1.20 (3H, d, J = 7.1 Hz), 2.07-2.17 (1H, m), 2.19 (3H, s), 2.38 (1H, dd, J = 14.3, 3.5 Hz), 2.39-2.49 (1H, m), 2.50 (1H, dd, J = 14.3, 7.3 Hz), 2.73 (3H , c), 2.77-2.91 (2H, m), 2.96-3.09 (2H, m), 3.98 (1H, dd, J = 8.9 Hz), 4.54 ( 1H, dd, J = 7.3, 3.4 Hz), 5.28-5.38 (1H, m), 5.63 (1H, dd, J = 9.6, 2.3 Hz), 5 77 (1H, dd, J = 15.9, 8.5 Hz), 6.21-6.28 (1H, m), 6.60 (1H, s), 6.99 (1H, s); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -3.4, -3.3, 5.5 (3C), 7.0 (3C), 14.6, 17.1, 18.7, 19.4 , 19.9, 21.3, 24.8, 26.4 (3C), 29.6, 32.8, 42.0, 42.1, 48.2, 54.1, 73.4, 76, 9, 77.8, 117.0, 121.6, 124.3 [ ¹ J (C, F) = 273.5 Hz], 127.2, 130.6 [ ² J (C, F) = 28, 2 Hz], 130.8 [ ³ J (C, F) = 6.1 Hz], 133.2, 136.5, 152.3, 165.0, 170.1, 217.1; MS-HP (ESI) calculated for C ₃₉ H ₆₅ F ₃ NO ₅ SSi ₂ [M + H ⁺ ] 772.4074, found 772.4102.

[α]_D ²⁵ 62,7 (с 0,33, СНСl₃); ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,09 (3H, c), 0,13 (3H, c), 0,49 (6H, кв, J=7,8 Гц), 0,85 (9H, т, J=7,8 Гц), 0,97 (9H, c), 0,99 (3H, c), 1,06 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,11 (3H, c), 1,20 (3H, д, J=7,1 Гц), 2,00 (3H, c), 2,03-2,13 (1H, м), 2,35 (1H, дд, J=14,3, 3,0 Гц), 2,46 (1H, дд, J=14,3, 7,8 Гц), 2,41-2,50 (1H, м), 2,73 (3H, c), 2,71-2,90 (2H, м) 2,98-3,12 (2H, м), 3,99 (1H, д, J=9,2 Гц), 4,56 (1H, дд, J=7,7, 2,8 Гц), 5,33 (1H, ддд, J=15,6, 8,9, 4,1 Гц), 5,82 (1H, дд, J=15,6, 8,4 Гц), 6,29 (1H, c), 6,33-6,40 (1H, м), 6,94 (1H, м), 7,09 (1H, ушир.д, J=8,4 Гц); ¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) δ -3,2, -3,2, 5,5 (3С), 7,0 (3С), 17,2, 18,7, 19,3, 19,6, 20,0, 22,3, 24,9, 26,4 (3С), 29,7, 32,9, 41,9, 42,0, 48,6, 54,0, 72,2, 73,3, 77,0, 116,7, 120,7, 124,5 [¹J(C,F) = 273,3 Гц], 127,9, 129,7 [²J (C,F) = 28,0 Гц], 131,9 [³J (C,F) = 6,1 Гц], 132,9, 136,6, 152,1, 165,4, 170,2, 217,4; МС-НР (ESI) вычислено для С₃₉Н₆₅F₃NO₅SSi₂[M+H⁺] 772,4, найдено 772,4.[α] _D ²⁵ 62.7 (c 0.33, CHCl ₃ ); ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.09 (3H, s), 0.13 (3H, s), 0.49 (6H, q, J = 7.8 Hz), 0.85 (9H , t, J = 7.8 Hz), 0.97 (9H, s), 0.99 (3H, s), 1.06 (3H, d, J = 7.1 Hz), 1.11 (3H , c), 1.20 (3H, d, J = 7.1 Hz), 2.00 (3H, s), 2.03-2.13 (1H, m), 2.35 (1H, dd, J = 14.3, 3.0 Hz), 2.46 (1H, dd, J = 14.3, 7.8 Hz), 2.41-2.50 (1H, m), 2.73 (3H , c), 2.71-2.90 (2H, m) 2.98-3.12 (2H, m), 3.99 (1H, d, J = 9.2 Hz), 4.56 (1H dd, J = 7.7, 2.8 Hz), 5.33 (1H, ddd, J = 15.6, 8.9, 4.1 Hz), 5.82 (1H, dd, J = 15 6, 8.4 Hz), 6.29 (1H, s), 6.33-6.40 (1H, m), 6.94 (1H, m), 7.09 (1H, broad d, J = 8.4 Hz); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -3.2, -3.2, 5.5 (3C), 7.0 (3C), 17.2, 18.7, 19.3, 19.6 , 20.0, 22.3, 24.9, 26.4 (3C), 29.7, 32.9, 41.9, 42.0, 48.6, 54.0, 72.2, 73, 3, 77.0, 116.7, 120.7, 124.5 [ ¹ J (C, F) = 273.3 Hz], 127.9, 129.7 [ ² J (C, F) = 28, 0 Hz], 131.9 [ ³ J (C, F) = 6.1 Hz], 132.9, 136.6, 152.1, 165.4, 170.2, 217.4; MS-HP (ESI) calculated for C ₃₉ H ₆₅ F ₃ NO ₅ SSi ₂ [M + H ⁺ ] 772.4, found 772.4.

Соединение 58 (посредством реакции Виттига из кетона 48): Кетон 48 подвергали азеотропной перегонке с бензолом (5 мл × 2) и затем сушили в условиях высокого вакуума в течение 0,5 час. К раствору соли Виттига (1,19 г, 2,27 ммоль) в ТГФ (18 мл) по каплям добавляли t-BuOK (2,2 мл 1,0 М раствора в ТГФ, 2,20 ммоль) в течение 5 мин при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 20 мин и затем охлаждали до Compound 58 (via Wittig reaction from ketone 48): Ketone 48 was azeotroped with benzene (5 ml × 2) and then dried under high vacuum for 0.5 hour. To a solution of Wittig salt (1.19 g, 2.27 mmol) in THF (18 ml) was added dropwise t-BuOK (2.2 ml of a 1.0 M solution in THF, 2.20 mmol) over 5 minutes at 0 ° C. The mixture was stirred at 0 ° C for 20 minutes and then cooled to

-78°C. К смесь по каплям добавляли раствор кетона (1,06 г, 1,51 ммоль) в ТГФ (промывка 10 мл + 2 мл) в течение 10 мин и полученной в результате смеси давали возможность нагреться до -20°C в течение 2 час. Реакцию гасили насыщенным водным NH₄Cl (15 мл) и экстрагировали EtOAc (50 мл × 3). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂ ~65 г, гексан/Et₂O = от 30:1 до 20:1), получая требуемый 16(E)-изомер 58 (1,01 г, 1,11 ммоль, 74%) вместе с нежелательным 16(Z)-изомером 58a (154,5 мг, 0,182 ммоль, 11%), оба в виде бесцветных масел; -78 ° C. A solution of ketone (1.06 g, 1.51 mmol) in THF (washing with 10 ml + 2 ml) was added dropwise over 10 minutes, and the resulting mixture was allowed to warm to -20 ° C for 2 hours. The reaction was quenched with saturated aqueous NH ₄ Cl (15 ml) and extracted with EtOAc (50 ml × 3). The combined organic layers were washed with brine (20 ml), dried over Na ₂ SO ₄ and concentrated. The residue was purified by flash column chromatography (SiO ₂ ~ 65 g, hexane / Et ₂ O = 30: 1 to 20: 1) to obtain the desired 16 (E) -isomer 58 (1.01 g, 1.11 mmol, 74%) together with the undesirable 16 (Z) -isomer 58a (154.5 mg, 0.182 mmol, 11%), both in the form of colorless oils;

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,09 (3H, c), 0,12 (3H, c), 0,15 (6H, c), 0,55 (6H, кв, J=7,8 Гц), 0,87 (9H, т, J=8,0 Гц), 0,96 (9H, c), 0,97 (9H, c), 1,01 (3H, c), 1,06 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,12 (3H, c), 1,20 (3H, д, J=7,1 Гц), 2,07-2,16 (1H, м), 2,18 (3H, д, J=1,0 Гц), 2,38 (1H, дд, J=14,4, 3,3 Гц), 2,34-2,46 (1H, м), 2,49 (1H, дд, J=14,4, 7,4 Гц), 2,78-2,90 (2H, м), 2,97-3,09 (2H, м), 3,98 (1H, д, J=8,9 Гц), 4,54 (1H, дд, J=7,3, 3,3 Гц), 4,97 (2H, c), 5,33 (1H, ддд, J=15,8, 8,6, 4,9 Гц), 5,63 (1H, дд, J=9,6, 2,4 Гц), 5,78 (1H, дд, J=15,8, 8,2 Гц), 6,22-6,27 (1H, м), 6,60 (1H, c), 7,09 (1H, c); ¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) δ -5,3 (2C), -3,4, -3,3, 5,5 (3C), 7,0 (3C), 14,6, 17,1, 18,4, 18,7, 19,8, 21,3, 24,8, 25,9 (3C), 26,4 (3C), 29,6, 32,9, 42,0, 42,1, 48,2, 54,1, 63,4, 73,4, 76,9, 77,8, 117,2, 121,7, 124,3 [кв, ¹J(C,F)=273,6 Гц], 127,2, 130,7 [кв, ²J(C,F) = 27,5 Гц], 130,8 [кв, ³J(C,F) = 6,2 Гц], 133,2, 136,4, 152,6, 170,1, 172,4, 217,1; МС-НР (ESI) вычислено для С₄₅Н₇₈F₃NO₆SSi₃Na[M+Na⁺] 924,5, найдено 924,5. ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.09 (3H, s), 0.12 (3H, s), 0.15 (6H, s), 0.55 (6H, q, J = 7, 8 Hz), 0.87 (9H, t, J = 8.0 Hz), 0.96 (9H, s), 0.97 (9H, s), 1.01 (3H, s), 1.06 (3H, d, J = 7.1 Hz), 1.12 (3H, s), 1.20 (3H, d, J = 7.1 Hz), 2.07-2.16 (1H, m) , 2.18 (3H, d, J = 1.0 Hz), 2.38 (1H, dd, J = 14.4, 3.3 Hz), 2.34-2.46 (1H, m), 2.49 (1H, dd, J = 14.4, 7.4 Hz), 2.78-2.90 (2H, m), 2.97-3.09 (2H, m), 3.98 ( 1H, d, J = 8.9 Hz), 4.54 (1H, dd, J = 7.3, 3.3 Hz), 4.97 (2H, s), 5.33 (1H, ddd, J = 15.8, 8.6, 4.9 Hz), 5.63 (1H, dd, J = 9.6, 2.4 Hz), 5.78 (1H, dd, J = 15.8, 8 , 2 Hz), 6.22-6.27 (1H, m), 6.60 (1H, s), 7.09 (1H, s); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ -5.3 (2C), -3.4, -3.3, 5.5 (3C), 7.0 (3C), 14.6, 17.1 , 18.4, 18.7, 19.8, 21.3, 24.8, 25.9 (3C), 26.4 (3C), 29.6, 32.9, 42.0, 42.1 , 48.2, 54.1, 63.4, 73.4, 76.9, 77.8, 117.2, 121.7, 124.3 [q, ¹ J (C, F) = 273.6 Hz], 127.2, 130.7 [q, ² J (C, F) = 27.5 Hz], 130.8 [q, ³ J (C, F) = 6.2 Hz], 133.2 136.4, 152.6, 170.1, 172.4, 217.1; MS-HP (ESI) calculated for C ₄₅ H ₇₈ F ₃ NO ₆ SSi ₃ Na [M + Na ⁺ ] 924.5, found 924.5.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,07 (3H, c), 0,13 (3H, c), 0,16 (6H, c), 0,48 (6H, кв, J=7,8 Гц), 0,84 (9H, т, J=7,9 Гц), 0,97 (18H, c), 0,98 (3H, c), 1,06 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,11 (3H, c), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц), 2,00 (3H, c), 2,03-2,11 (1H, м), 2,33 (1H, дд, J=14,1, 2,8 Гц), 2,43 (1H, дд, J=14,0, 7,8 Гц), 2,40-2,48 (1H, м), 2,76-2,89 (2Н, м), 2,97-3,10 (2Н, м), 3,99 (1H, д, J=9,3 Гц), 4,57 (1H, дд, J=7,8, 2,6 Гц), 4,95 (1H, д, J=14,6 Гц), 5,00 (1H, д, J=14,6 Гц), 5,33 (1H, ддд, J=15,6, 9,1, 3,8 Гц), 5,82 (1H, дд, J=15,6, 8,3 Гц), 6,30 (1H, c), 6,32-6,38 (1H, м), 7,04 (1H, c), 7,11 (1H, дд, J=11,0, 2,3 Гц); МС-НР (ESI) вычислено для С₄₅Н₇₈F₃NO₆SNa[M+Na⁺] 924,5, найдено 924,5. ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.07 (3H, s), 0.13 (3H, s), 0.16 (6H, s), 0.48 (6H, q, J = 7, 8 Hz), 0.84 (9H, t, J = 7.9 Hz), 0.97 (18H, s), 0.98 (3H, s), 1.06 (3H, d, J = 7, 1 Hz), 1.11 (3H, s), 1.20 (3H, d, J = 7.2 Hz), 2.00 (3H, s), 2.03-2.11 (1H, m) 2.33 (1H, dd, J = 14.1, 2.8 Hz), 2.43 (1H, dd, J = 14.0, 7.8 Hz), 2.40-2.48 (1H , m), 2.76-2.89 (2Н, m), 2.97-3.10 (2Н, m), 3.99 (1H, d, J = 9.3 Hz), 4.57 ( 1H, dd, J = 7.8, 2.6 Hz), 4.95 (1H, d, J = 14.6 Hz), 5.00 (1H, d, J = 14.6 Hz), 5, 33 (1H, ddd, J = 15.6, 9.1, 3.8 Hz), 5.82 (1H, ddd, J = 15.6, 8.3 Hz), 6.30 (1H, s) 6.32-6.38 (1H, m), 7.04 (1H, s), 7.11 (1H, dd, J = 11.0, 2.3 Hz); MS-HP (ESI) calculated for C ₄₅ H ₇₈ F ₃ NO ₆ SNa [M + Na ⁺ ] 924.5, found 924.5.

Соединение 59: К раствору 58 (1,04 г, 2,25 ммоль) в ТГФ (22 мл) медленно добавляли HF·пиридин (11 мл) при 0°C и смесь перемешивали при КТ в течение 4,3 час. Реакцию гасили, добавляя по каплям TMSOMe (75 мл) в течение 10 мин при 0°C. Смесь энергично перемешивали при КТ в течение 4,2 час. После концентрирования и сушки в условиях высокого вакуума в течение 1 час остаток очищали флэш-хроматографией на колонке (SiO₂ ~25 г; гексан/EtOAc = от 3:4 до 1:2), получая 59 (615,7 мг, 1,00 ммоль, 96%) в виде бесцветного порошка; [α]_D ²⁵ -57,7 (с 1,20, СНСl₃); ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,04 (3Н, c), 1,12 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,25 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,36 (3H, c), 1,90 (1H, д, J=6,6 Гц, OH), 2,08 (3H, c), 2,23-2,32 (1H, м), 2,34 (1H, дд, J=15,7, 2,4 Гц), 2,49 (1H, дд, J=15,7, 10,1 Гц), 2,59-2,69 (2H, м), 2,95-3,01 (2Н, м), 3,04 (1H, квинтeт, J=6,8 Гц), 3,72 (1H, тд, J=7,0, 3,0 Гц), 3,78 (1H, д, J=5,7 Гц, ОН), 4,38 (1H, ддд, J=10,1, 5,7, 2,4 Гц), 4,90 (2H, д, J=6,1 Гц), 5,10 (1H, т, J=6,1 Гц, ОН), 5,44 (1H, т, J=4,7 Гц), 5,60 (1H, дд, J=15,9, 4,4 Гц), 5,66 (1H, дд, J=15,9, 5,0 Гц), 6,28 (1H, т, J=6,7 Гц), 6,73 (1H, c), 7,16 (1H, c); МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₃₇F₃NO₆SNa[M+Н⁺] 560,2, найдено 560,1. Compound 59: To a solution of 58 (1.04 g, 2.25 mmol) in THF (22 ml) was slowly added HF · pyridine (11 ml) at 0 ° C and the mixture was stirred at RT for 4.3 hours. The reaction was quenched by adding dropwise TMSOMe (75 ml) for 10 min at 0 ° C. The mixture was vigorously stirred at RT for 4.2 hours. After concentration and drying under high vacuum for 1 hour, the residue was purified by flash column chromatography (SiO ₂ ~ 25 g; hexane / EtOAc = 3: 4 to 1: 2) to obtain 59 (615.7 mg, 1, 00 mmol, 96%) as a colorless powder; [α] _D ²⁵ -57.7 (c 1.20, CHCl _3); ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.04 (3H, s), 1.12 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.25 (3H, d, J = 6.8 Hz ), 1.36 (3H, s), 1.90 (1H, d, J = 6.6 Hz, OH), 2.08 (3H, s), 2.23-2.32 (1H, m) 2.34 (1H, dd, J = 15.7, 2.4 Hz), 2.49 (1H, dd, J = 15.7, 10.1 Hz), 2.59-2.69 (2H , m), 2.95-3.01 (2H, m), 3.04 (1H, quintet, J = 6.8 Hz), 3.72 (1H, td, J = 7.0, 3.0 Hz), 3.78 (1H, d, J = 5.7 Hz, OH), 4.38 (1H, ddd, J = 10.1, 5.7, 2.4 Hz), 4.90 (2H d, J = 6.1 Hz), 5.10 (1H, t, J = 6.1 Hz, OH), 5.44 (1H, t, J = 4.7 Hz), 5.60 (1H , dd, J = 15.9, 4.4 Hz), 5.66 (1H, dd, J = 15.9, 5.0 Hz), 6.28 (1H, t, J = 6.7 Hz) 6.73 (1H, s); 7.16 (1H, s); MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₃₇ F ₃ NO ₆ SNa [M + H ⁺ ] 560.2, found 560.1.

Соединения 49 и 50: Раствор 28 (12,2 мг, 24,9 мкмоль) в CH₂Cl₂ (1,25 мл) охлаждали до -78°C и обрабатывали охлажденным раствором DMDO (-78°C, 0,06 М в ацетоне; 914 мкл, 54,8 мкмоль). Смеси давали возможность нагреться до -50°C и перемешивали при -50°C в течение 2,7 час. Избыток DMDO гасили при -50°C добавлением диметилсульфида (117 мкл) и смесь перемешивали при данной температуре в течение 0,5 час. Растворитель удаляли в вакууме. Очистка препаративной тонкослойной хроматографией (гексан/EtOAc = 1/2) давала β-эпоксид 49 (3,0 мг, 5,93 мкмоль, 24%) и α-эпоксид 50 (7,9 мг, 15,6 мкмоль, 63%), оба в виде бесцветного твердого вещества. Compounds 49 and 50: A solution of 28 (12.2 mg, 24.9 μmol) in CH ₂ Cl ₂ (1.25 ml) was cooled to -78 ° C and treated with a cooled DMDO solution (-78 ° C, 0.06 M in acetone; 914 μl, 54.8 μmol). The mixture was allowed to warm to -50 ° C and stirred at -50 ° C for 2.7 hours. Excess DMDO was quenched at -50 ° C by the addition of dimethyl sulfide (117 μl) and the mixture was stirred at this temperature for 0.5 hour. The solvent was removed in vacuo. Purification by preparative thin layer chromatography (hexane / EtOAc = 1/2) gave β-epoxide 49 (3.0 mg, 5.93 μmol, 24%) and α-epoxide 50 (7.9 mg, 15.6 μmol, 63% ), both in the form of a colorless solid.

Соединение 49 : ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,03 (3Н, с), 1,11 (3Н, д, J=7,0 Гц), 1,14 (3Н, д, J=6,9 Гц), 1,34 (3Н, c), 1,36 (3Н, c), 2,00 (1H, ддд, J=15,1, 7,3, 4,0 Гц), 2,14 (1H, дт, J=15,1, 5,2 Гц), 2,14 (3Н, c), 2,21 (1H, дд, J=14,6, 8,0 Гц), 2,33 (1H, дд, J=14,7, 4,8 Гц), 2,47 (1H, дд, J=13,8, 3,3 Гц), 2,59 (1H, дд, J=13,8, 9,4 Гц), 2,73 (3Н, c), 2,77 (1H, ушир.c, ОН), 2,93 (1H, дд, J=7,3, 4,8 Гц), 3,34 (1H, кв.д, J=6,9, 3,7 Гц), 3,75-3,82 (1H, м), 4,12-4,24 (2H, м, включая ОН), 5,54 (1H, ддд, J=15,7, 7,4, 5,0 Гц), 5,54-5,60 (1H, м), 5,64 (1H, дд, J=15,7, 5,6 Гц), 6,94 (1H, c), 7,01 (1H, c); МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₄₀NO₆S[M+Н⁺] 506,3, найдено 506,3. Compound 49 : ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.03 (3H, s), 1.11 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.14 (3H, d, J = 6 , 9 Hz), 1.34 (3H, s), 1.36 (3H, s), 2.00 (1H, ddd, J = 15.1, 7.3, 4.0 Hz), 2.14 (1H, dt, J = 15.1, 5.2 Hz), 2.14 (3H, s), 2.21 (1H, dd, J = 14.6, 8.0 Hz), 2.33 ( 1H, dd, J = 14.7, 4.8 Hz), 2.47 (1H, dd, J = 13.8, 3.3 Hz), 2.59 (1H, dd, J = 13.8, 9.4 Hz), 2.73 (3H, s), 2.77 (1H, broad s, OH), 2.93 (1H, dd, J = 7.3, 4.8 Hz), 3, 34 (1H, qd, J = 6.9, 3.7 Hz), 3.75-3.82 (1H, m), 4.12-4.24 (2H, m, including OH), 5 54 (1H, ddd, J = 15.7, 7.4, 5.0 Hz), 5.54-5.60 (1H, m), 5.64 (1H, dd, J = 15.7, 5.6 Hz), 6.94 (1H, s), 7.01 (1H, s); MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₄₀ NO ₆ S [M + H ⁺ ] 506.3, found 506.3.

Соединение 50: ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,00 (3H, c), 1,04 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,12 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,35 (3H, c), 1,35 (3H, c), 1,87 (1H, дт, J=15,0, 9,2 Гц), 2,03 (1H, дд, J=13,9, 9,2 Гц), 2,13 (3H, c), 2,13-2,19 (1H, м), 2,36 (1H, дд, J=13,9, 3,4 Гц), 2,39 (1H, дд, J=12,2, 2,1 Гц), 2,42-2,51 (1H, м), 2,49 (1H, дд, J=12,4, 10,9 Гц), 2,69 (1H, д, J=2,7 Гц), 2,72 (3H, c), 3,06 (1H, дд, J=9,7, 3,1 Гц), 3,54 (1H, кв.д, J=7,0, 2,0 Гц), 3,76-3,80 (1H, м), 4,07-4,14 (1H, м), 4,31 (1Н, д, J=4,1 Гц), 5,52 (1H, дд, J=15,5, 8,7 Гц), 5,60 (1H, ддд, J=15,1, 9,4, 3,4 Гц), 5,71 (1H, д, J=8,4 Гц), 6,63 (1H, c), 6,99 (1H, c); МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₃₉NO₆SNa[M+Na⁺] 528,2, найдено 528,2. Compound 50: ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.00 (3H, s), 1.04 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.12 (3H, d, J = 7 , 0 Hz), 1.35 (3H, s), 1.35 (3H, s), 1.87 (1H, dt, J = 15.0, 9.2 Hz), 2.03 (1H, dd , J = 13.9, 9.2 Hz), 2.13 (3H, s), 2.13-2.19 (1H, m), 2.36 (1H, dd, J = 13.9, 3 4 Hz), 2.39 (1H, dd, J = 12.2, 2.1 Hz), 2.42-2.51 (1H, m), 2.49 (1H, dd, J = 12, 4, 10.9 Hz), 2.69 (1H, d, J = 2.7 Hz), 2.72 (3H, s), 3.06 (1H, dd, J = 9.7, 3.1 Hz), 3.54 (1H, qd, J = 7.0, 2.0 Hz), 3.76-3.80 (1H, m), 4.07-4.14 (1H, m) 4.31 (1H, d, J = 4.1 Hz), 5.52 (1H, dd, J = 15.5, 8.7 Hz), 5.60 (1H, ddd, J = 15.1 9.4, 3.4 Hz), 5.71 (1H, d, J = 8.4 Hz), 6.63 (1H, s), 6.99 (1H, s); MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₃₉ NO ₆ SNa [M + Na ⁺ ] 528.2, found 528.2.

Соединение 52: К раствору 50 (1,7 мг, 3,4 мкмоль) и трисNHNH₂ (40,1 мг, 0,134 ммоль) в ClCH₂CH₂Cl (0,8 мл) при 50°C добавляли Et₃N (18,7 мкл, 0,134 ммоль). Реакцию контролировали с помощью ВЭТСХ (гексан/EtOAc = 1/2). После перемешивания в течение 4 час смесь охлаждали до КТ, разбавляли EtOAc и фильтровали через подушку силикагеля, которую промывали EtOAc. После концентрирования остаток очищали препаративной ТСХ (гексан/EtOAc = 1/2), получая 52 (1,2 мг, 2,4 мкмоль, 70%) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,95 (3Н, д, J=7,1 Гц), 1,04 (3H, c), 1,11 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,28 (3H, c), 1,37 (3H, c), 1,35-1,44 (1H, м), 1,45-1,59 (4H, м), 1,71-1,82 (2H, м), 1,86 (1H, дт, J=15,3, 9,5 Гц), 2,10 (1H, дд, J=15,3, 3,6 Гц), 2,13 (3H, c), 2,40 (1H, дд, J=12,5, 2,5 Гц), 2,49 (1H, дд, J=12,5, 11,0 Гц), 2,74 (3H, c), 2,80 (1H, ушир.c, ОН), 3,07 (1H, дд, J=10,3, 3,3 Гц), 3,34 (1H, кв.д, J=7,0, 1,0 Гц), 3,89 (1H, ушир.c, ОН), 4,03-4,09 (1H, м), 4,12-4,17 (1H, м), 5,69 (1H, д, J=9,1 Гц), 6,63 (1H, c), 7,00 (1H, c); МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₄₁NO₆SNa[M+Na⁺] 530,3, найдено 530,2. Compound 52: To a solution of 50 (1.7 mg, 3.4 μmol) and TrisNHNH ₂ (40.1 mg, 0.134 mmol) in ClCH ₂ CH ₂ Cl (0.8 ml), Et ₃ N ( 18.7 μl, 0.134 mmol). The reaction was monitored by HPLC (hexane / EtOAc = 1/2). After stirring for 4 hours, the mixture was cooled to RT, diluted with EtOAc and filtered through a pad of silica gel, which was washed with EtOAc. After concentration, the residue was purified by preparative TLC (hexane / EtOAc = 1/2) to obtain 52 (1.2 mg, 2.4 μmol, 70%) as a white solid. ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.95 (3H, d, J = 7.1 Hz), 1.04 (3H, s), 1.11 (3H, d, J = 7.0 Hz ), 1.28 (3H, s), 1.37 (3H, s), 1.35-1.44 (1H, m), 1.45-1.59 (4H, m), 1.71- 1.82 (2H, m), 1.86 (1H, dt, J = 15.3, 9.5 Hz), 2.10 (1H, dd, J = 15.3, 3.6 Hz), 2 , 13 (3H, s), 2.40 (1H, dd, J = 12.5, 2.5 Hz), 2.49 (1H, dd, J = 12.5, 11.0 Hz), 2, 74 (3H, s), 2.80 (1H, broad s, OH), 3.07 (1H, dd, J = 10.3, 3.3 Hz), 3.34 (1H, qd, J = 7.0, 1.0 Hz), 3.89 (1H, broad s, OH), 4.03-4.09 (1H, m), 4.12-4.17 (1H, m) 5.69 (1H, d, J = 9.1 Hz); 6.63 (1H, s); 7.00 (1H, s); MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₄₁ NO ₆ SNa [M + Na ⁺ ] 530.3, found 530.2.

Соединение 51: К раствору 49 (0,7 мг, 1,38 мкмоль) и трисNHNH₂ (20,6 мг, 69 мкмоль) в ClCH₂CH₂Cl (0,4 мл) при 50°C добавляли Et₃N (9,6 мкл, 69 мкмоль). Реакцию контролировали с помощью ВЭТСХ (гексан/EtOAc = 1/2). После перемешивания в течение 6 час смесь охлаждали до КТ, разбавляли EtOAc и фильтровали через подушку силикагеля, которую промывали EtOAc. После концентрирования остаток очищали препаративной ТСХ (гексан/EtOAc = 1/2), получая 51 (0,5 мг, 0,985 мкмоль, 71%) в виде белого твердого вещества. Спектральные данные 51 были идентичны данным, описанным для EpoB. Compound 51: To a solution of 49 (0.7 mg, 1.38 μmol) and TrisNHNH ₂ (20.6 mg, 69 μmol) in ClCH ₂ CH ₂ Cl (0.4 ml) at 50 ° C was added Et ₃ N ( 9.6 μl, 69 μmol). The reaction was monitored by HPLC (hexane / EtOAc = 1/2). After stirring for 6 hours, the mixture was cooled to RT, diluted with EtOAc and filtered through a pad of silica gel, which was washed with EtOAc. After concentration, the residue was purified by preparative TLC (hexane / EtOAc = 1/2) to give 51 (0.5 mg, 0.985 μmol, 71%) as a white solid. Spectral data 51 were identical to those described for EpoB.

Пример 2Example 2

Альтернативная методика синтеза для синтеза промежуточных продуктов эпотилоновAlternative synthesis procedure for the synthesis of epothilone intermediates

В следующих примерах предлагаются способы получения различных промежуточных продуктов синтеза аналогов эпотилонов.The following examples provide methods for producing various intermediates for the synthesis of epothilone analogues.

Оптимизация синтеза 9,10-дегидроэпотилоновOptimization of the synthesis of 9,10-dehydroepotilon

Пример 1Example 1

Пример 2Example 2

Восстановления НойориNeuori Recovery

Пример 3Example 3

Восстановления НойориNeuori Recovery

Пример 4Example 4

Альтернативный синтез ключевого дикетонаAlternative Key Diketone Synthesis

Пример 5Example 5

Способ 1. Миграция силильной группы - декарбоксилированиеMethod 1. Migration of the silyl group - decarboxylation

Способ 2. Декарбоксилирование - введение силильной группыMethod 2. Decarboxylation - the introduction of a silyl group

Пример 6Example 6

Дополнительный способ синтеза 2-гидроксикетона ЭвансаAn additional method for the synthesis of 2-hydroxyketone Evans

Пример 7Example 7

Способ синтеза 2-гидроксикетона Ковальского-ШарплессаThe method of synthesis of 2-hydroxyketone Kowalski-Sharplessa

ЭкспериментыThe experiments

1-(2-Бензилокси-1-метилэтил)-5,5-диизопропокси-2,4,4-триметил-3-оксопентиловый; 2,2,2-трихлорэтиловый диэфир карбоновой кислоты (32a)1- (2-Benzyloxy-1-methylethyl) -5,5-diisopropoxy-2,4,4-trimethyl-3-oxopentyl; 2,2,2-trichloroethyl carboxylic acid diester (32a)

К раствору 7-бензилокси-5-гидрокси-1,1-диизопропокси-2,2,4,6-тетраметилгептан-3-она 32 (1,0 г, 2,4 ммоль) и пиридина (0,8 мл, 7,3 ммоль) в CH₂Cl₂ (10,0 мл) при 0°C добавляли 2,2,2-трихлорэтилхлорформиат (668,0 мкл, 4,9 ммоль) и затем смеси давали возможность нагреться до КТ. Спустя 1 час реакционную смесь гасили насыщенным раствором соли и затем экстрагировали CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Грубый продукт очищали флэш-хроматографией (градиент от гексана до смеси гексан/EtOAc 93:7), получая 32a (1,285 г, 92%) в виде прозрачного масла: ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,03-1,09 (м, 12H), 1,15 (д, J=1,8 Гц, 3H), 1,17 (д, J=1,9 Гц, 3H), 1,19-1,21 (м, 6H), 1,97-2,11 (м, 1H), 3,2 (дд, J=6,2 и 9,0 Гц, 1H), 3,54 (дд, J=4,8 и 9,1 Гц, 1H), 3,57-3,60 (м, 1H), 3,82 (кв.д, J=3,6 и 5,9 Гц, 2H), 4,47 (c, 2H), 4,57 (c, 1H), 4,72 (д, J=11,9 Гц, 1H), 4,81 (д, J=11,9 Гц, 1H), 5,08 (т, J= 6,0 Гц, 1H), 7,29-7,35 (м, 5H); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ 11,9, 15,0, 18,8, 21,4, 21,7, 22,3, 23,2, 23,4, 35,7, 42,5, 53,4, 53,9, 69,4, 70,9, 71,4, 73,3, 81,3, 94,7, 103,4, 127,5, 127,6, 128,2, 138,2, 154,0, 215,6; ИК (пленка, NaCl, cм^-1) 2966, 1760, 1698, 1247; МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₄₁О₇Cl₃Na [M+Na⁺] 605,2, найдено 605,2; [α]²³ _D  = -20,4 (c = 1,0, CHCl₃).To a solution of 7-benzyloxy-5-hydroxy-1,1-diisopropoxy-2,2,4,6-tetramethylheptan-3-one 32 (1.0 g, 2.4 mmol) and pyridine (0.8 ml, 7 , 3 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (10.0 ml) at 0 ° C was added 2,2,2-trichloroethyl chloroformate (668.0 μl, 4.9 mmol) and then the mixture was allowed to warm to RT. After 1 hour, the reaction mixture was quenched with brine and then extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers were dried over MgSO ₄ and concentrated under reduced pressure. The crude product was purified by flash chromatography (hexane / hexane / EtOAc 93: 7 gradient) to give 32a (1.285 g, 92%) as a clear oil: ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.03-1 09 (m, 12H), 1.15 (d, J = 1.8 Hz, 3H), 1.17 (d, J = 1.9 Hz, 3H), 1.19-1.21 (m, 6H), 1.97-2.11 (m, 1H), 3.2 (dd, J = 6.2 and 9.0 Hz, 1H), 3.54 (dd, J = 4.8 and 9, 1 Hz, 1H), 3.57-3.60 (m, 1H), 3.82 (qd, J = 3.6 and 5.9 Hz, 2H), 4.47 (s, 2H), 4.57 (s, 1H), 4.72 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.81 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 5.08 (t, J = 6 , 0 Hz, 1H); 7.29-7.35 (m, 5H); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.9, 15.0, 18.8, 21.4, 21.7, 22.3, 23.2, 23.4, 35.7, 42.5 , 53.4, 53.9, 69.4, 70.9, 71.4, 73.3, 81.3, 94.7, 103.4, 127.5, 127.6, 128.2, 138 , 2, 154.0, 215.6; IR (film, NaCl, cm ^-1 ) 2966, 1760, 1698, 1247; MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₄₁ O ₇ Cl ₃ Na [M + Na ⁺ ] 605.2, found 605.2; [α] ²³ _D = -20.4 (c = 1.0, CHCl ₃ ).

1-(2-Бензилокси-1-метилэтил)-2,4,4-триметил-3,5-диоксопентиловый; 2,2,2-трихлорэтиловый диэфир карбоновой кислоты (67)1- (2-Benzyloxy-1-methylethyl) -2,4,4-trimethyl-3,5-dioxopentyl; 2,2,2-trichloroethyl carboxylic acid diester (67)

К раствору 32a (1,28 г, 2,25 ммоль) в 4:1 ТГФ/H₂O (25 мл) добавляли п-TsOH (111,0 мг, 0,6 ммоль). После нагревания при 70°C в течение 5 час реакционную смесь вливали в холодный (0°C) насыщенный водный раствор NaHCO₃ (12 мл) и затем экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Грубый продукт очищали флэш-хроматографией (градиент от гексана до смеси гексан/EtOAc 84:16), получая 67 (793,2 мг, 76%) в виде прозрачного масла: ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,90 (д, J=5,8 Гц, 3H), 1,0 (д, J=6,9 Гц, 3H), 1,24 (c, 6H), 1,97-2,04 (м, 1H), 3,24 (дд, J=4,8 и 9,2 Гц, 1H), 3,34 (м, 1H), 3,42 (дд, J=5,8 и 9,2 Гц, 1H), 4,35 (д, J=11,9 Гц, 1H), 4,39 (д, J=11,9 Гц, 1H), 4,64 (д, J=11,9 Гц, 1H), 4,69 (д, J=11,9 Гц, 1H), 4,96 (т, J=6,0 Гц, 1H), 7,19-7,28 (м, 5H), 9,49 (c, 1H); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) -12,0, 14,8, 19,5, 19,6, 35,4, 43,3, 60,9, 71,1, 73,3, 80,37, 94,5, 127,7, 127,8, 128,3, 137,9, 154,1, 201,0, 210,1; ИК (пленка, NaCl, cм^-1) 2973, 2880, 1758, 1701, 1453, 1380, 1248; МС-НР (ESI) вычислено для С₂₁Н₂₇О₆Cl₃Na [M+Na⁺] 503,0, найдено 503,0; [α]²³ _D  = -18,5 (c = 0,8, CHCl₃).To a solution of 32a (1.28 g, 2.25 mmol) in 4: 1 THF / H ₂ O (25 ml) was added p-TsOH (111.0 mg, 0.6 mmol). After heating at 70 ° C for 5 hours, the reaction mixture was poured into a cold (0 ° C) saturated aqueous NaHCO ₃ solution (12 ml) and then extracted with EtOAc. The combined organic layers were washed with brine, dried over MgSO ₄ and concentrated under reduced pressure. The crude product was purified by flash chromatography (gradient from hexane to hexane / EtOAc 84:16) to give 67 (793.2 mg, 76%) as a clear oil: ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.90 (d, J = 5.8 Hz, 3H), 1.0 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.24 (s, 6H), 1.97-2.04 (m, 1H) 3.24 (dd, J = 4.8 and 9.2 Hz, 1H), 3.34 (m, 1H), 3.42 (dd, J = 5.8 and 9.2 Hz, 1H), 4.35 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4, 69 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.96 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.19-7.28 (m, 5H), 9.49 (s, 1H ); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) -12.0, 14.8, 19.5, 19.6, 35.4, 43.3, 60.9, 71.1, 73.3, 80.37 , 94.5, 127.7, 127.8, 128.3, 137.9, 154.1, 201.0, 210.1; IR (film, NaCl, cm ^-1 ) 2973, 2880, 1758, 1701, 1453, 1380, 1248; MS-HP (ESI) calculated for C ₂₁ H ₂₇ O ₆ Cl ₃ Na [M + Na ⁺ ] 503.0, found 503.0; [α] ²³ _D = -18.5 (c = 0.8, CHCl ₃ ).

Трет-бутиловый эфир 9-бензилокси-4,4,6,8-тетраметил-3,5-диоксо-7-(2,2,2-трихлорэтоксикарбонилокси)нонановой кислоты (69)9-Benzyloxy-4,4,6,8-tetramethyl-3,5-dioxo-7- (2,2,2-trichloroethoxycarbonyloxy) nonanoic acid tert-butyl ester (69)

К раствору LDA (1,17 ммоль, 0,3 М в Et₂O) при -78°C добавляли трет-бутилацетат (1,0 ммоль, 135,0 мкл). Через 30 мин медленно в течение 15 мин добавляли раствор 67 (464,0 мг, 1 ммоль) в Et₂O (2 мл). После перемешивания в течение 1 час реакцию гасили насыщенным водным раствором NH₄Cl и затем экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Грубый продукт очищали флэш-хроматографией (градиент от гексана до смеси гексан/EtOAc 86:14), получая 68 (1:1 смесь эпимеров, 461,4 мг, 80%) в виде прозрачного масла: ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,87 (д, J=5,3 Гц, 3H), 0,89 (д, J=5,5 Гц, 3H), 1,02-1,10 (м, 18H), 1,38 (c, 18H), 1,97-2,2 (м, 2H), 2,27-2,31 (м, 2H), 3,22-3,27 (м, 3H), 3,39-3,48 (м, 5H), 4,03-4,06 (м, 1H), 4,11-4,14 (м, 1H), 4,38-4,45 (м, 4H), 4,58-4,73 (м, 4H), 4,97 (т, J=5,8 Гц, 1H), 5,02 (т, J=5,8 Гц, 1H), 7,18-7,27 (м, 10H); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ 11,9, 12,7, 14,9, 15,2, 18,7, 19,3, 21,4, 21,6, 28,0, 35,6, 37,4, 41,7, 42,0, 51,8, 51,9, 71,3, 71,3, 72,5, 73,0, 73,3, 73,3, 80,6, 81,2, 81,3, 94,6, 127,5, 127,7, 127,8, 128,3, 138,0, 138,1, 154,0, 154,1, 172,3, 172,4, 216,0, 216,3; ИК (пленка, NaCl, cм^-1) 3509, 2975, 1759, 1707, 1368, 1248, 1152; МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₃₉О₈Cl₃Na [M+Na⁺] 619,1, найдено 619,2.To a solution of LDA (1.17 mmol, 0.3 M in Et ₂ O), tert-butyl acetate (1.0 mmol, 135.0 μl) was added at -78 ° C. After 30 minutes, a solution of 67 (464.0 mg, 1 mmol) in Et ₂ O (2 ml) was added slowly over 15 minutes. After stirring for 1 hour, the reaction was quenched with saturated aqueous NH ₄ Cl and then extracted with EtOAc. The combined organic layers were washed with brine, dried over MgSO ₄ and concentrated under reduced pressure. The crude product was purified by flash chromatography (hexane / hexane / EtOAc 86:14 gradient) to give 68 (1: 1 epimer mixture, 461.4 mg, 80%) as a clear oil: ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.87 (d, J = 5.3 Hz, 3H), 0.89 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 1.02-1.10 (m, 18H), 1, 38 (s, 18H), 1.97-2.2 (m, 2H), 2.27-2.31 (m, 2H), 3.22-3.27 (m, 3H), 3.39- 3.48 (m, 5H), 4.03-4.06 (m, 1H), 4.11-4.14 (m, 1H), 4.38-4.45 (m, 4H), 4, 58-4.73 (m, 4H), 4.97 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 5.02 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 7.18-7.27 (m, 10H); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.9, 12.7, 14.9, 15.2, 18.7, 19.3, 21.4, 21.6, 28.0, 35.6 , 37.4, 41.7, 42.0, 51.8, 51.9, 71.3, 71.3, 72.5, 73.0, 73.3, 73.3, 80.6, 81 , 2, 81.3, 94.6, 127.5, 127.7, 127.8, 128.3, 138.0, 138.1, 154.0, 154.1, 172.3, 172.4 216.0, 216.3; IR (film, NaCl, cm ^-1 ) 3509, 2975, 1759, 1707, 1368, 1248, 1152; MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₃₉ O ₈ Cl ₃ Na [M + Na ⁺ ] 619.1, found 619.2.

К раствору 68 при 0°C (350,0 мг, 0,6 ммоль) в CH₂Cl₂ (10 мл) добавляли периодинан Десс-Мартина (398,0 мг, 0,9 ммоль). Смесь перемешивали при КТ в течение 1 час и затем вливали в хорошо перемешанную смесь 1:1 насыщенный Na₂S₂O₃/насыщенный NaHCO₃. Слои разделяли через 30 мин. Водный слой три раза экстрагировали Et₂O. Объединенные органические экстракты промывали насыщенным NaHCO₃, насыщенным раствором соли, сушили над MgSO₄ и концентрировали в вакууме. Грубый продукт очищали флэш-хроматографией (градиент от гексана до смеси гексан/EtOAc 91:9), получая 69 (258,4 мг, 74%) в виде прозрачного масла: ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,80 (д, J=6,9 Гц, 3H), 0,87 (д, J=6,9 Гц, 3H), 1,13 (c, 3H), 1,19 (c, 3H), 1,23 (c, 9H), 2,04-2,12 (м, 1H), 3,09-3,28 (м, 5H), 4,23 (c, 2H), 4,48(д, J=11,9 Гц, 1H), 4,55 (д, J=11,9 Гц, 1H), 4,79 (дд, J=4,6 и 7,3 Гц, 1H), 7,04-7,13 (м, 5H); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ 11,7, 14,6, 20,7, 21,5, 27,9, 35,5, 42,2, 43,4, 63,3, 71,3, 73,3, 79,9, 81,5, 90,5, 94,5, 127,6, 127,7, 128,2, 138,0, 154,0, 166,2, 202,9, 210,0; ИК (пленка, NaCl, cм^-1) 2977, 1758, 1697, 1368, 1248, 1154; МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₃₇О₈Cl₃Na [M+Na⁺] 617,1, найдено 617,1; [α]²³ _D  = -49,1 (c = 0,9, CHCl₃).To a solution of 68 at 0 ° C (350.0 mg, 0.6 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (10 ml) was added Dess-Martin periodinan (398.0 mg, 0.9 mmol). The mixture was stirred at RT for 1 hour and then poured into a 1: 1 saturated mixture of saturated Na ₂ S ₂ O ₃ / saturated NaHCO ₃ . The layers were separated after 30 minutes. The aqueous layer was extracted three times with Et ₂ O. The combined organic extracts were washed with saturated NaHCO ₃ , brine, dried over MgSO ₄ and concentrated in vacuo. The crude product was purified by flash chromatography (hexane / hexane / EtOAc 91: 9 gradient) to give 69 (258.4 mg, 74%) as a clear oil: ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.80 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.87 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.19 (s, 3H), 1.23 (s, 9H), 2.04-2.12 (m, 1H), 3.09-3.28 (m, 5H), 4.23 (s, 2H), 4.48 (d, J = 11 , 9 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.79 (dd, J = 4.6 and 7.3 Hz, 1H), 7.04-7.13 (m, 5H); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.7, 14.6, 20.7, 21.5, 27.9, 35.5, 42.2, 43.4, 63.3, 71.3 , 73.3, 79.9, 81.5, 90.5, 94.5, 127.6, 127.7, 128.2, 138.0, 154.0, 166.2, 202.9, 210 0; IR (film, NaCl, cm ^-1 ) 2977, 1758, 1697, 1368, 1248, 1154; MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₃₇ O ₈ Cl ₃ Na [M + Na ⁺ ] 617.1, found 617.1; [α] ²³ _D = -49.1 (c = 0.9, CHCl ₃ ).

Трет-бутиловый эфир 9-бензилокси-3-гидрокси-4,4,6,8-тетраметил-5-оксо-7-(2,2,2-трихлорэтоксикарбонилокси)нонановой кислоты (70)9-Benzyloxy-3-hydroxy-4,4,6,8-tetramethyl-5-oxo-7- (2,2,2-trichloroethoxycarbonyloxy) nonanoic acid tert-butyl ester (70)

Гильзу высокого давления загружали катализатором (R)-RuBINAP (16,8 мг, 10,0 мкмоль). Добавляли HCl (555 мкл, 0,2N в MeOH) и затем смесь обрабатывали ультразвуком в течение 15 сек. Затем добавляли раствор 69 (59,4 мг, 0,1 ммоль) в MeOH (555 мкл) и смесь переносили в аппарат Парра. Сосуд продували H₂ в течение 5 мин и затем создавали давление до 1200 фунтов/кв.дюйм. Через 17 час реакционную смесь возвращали в условия атмосферного давления и вливали в насыщенный водный раствор NaHCO₃. Водный слой три раза экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Грубый продукт очищали флэш-хроматографией (градиент от гексана до смеси гексан/EtOAc 88:12), получая 70 (dr>20:1 на основании ¹H-ЯМР-анализа) (47,6 мг, 80%) в виде бесцветного масла: ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,06 (д, J=6,9 Гц, 3Н), 1,11 (д, J=6,8 Гц, 3Н), 1,14 (c, 3H), 1,18 (c, 3H), 1,47 (c, 9H), 2,05-2,12 (м, 1H), 2,35-2,40 (м, 1H), 3,31-3,37 (м, 2H), 3,51-3,54 (м, 2H), 4,11-4,14 (м, 1H), 4,46 (c, 2H), 4,72 (д, J=11,9 Гц, 1H), 4,80 (д, J=11,9 Гц, 1H), 5,05 (дд, J=5,0 и 6,7 Гц, 1H), 7,27-7,35 (м, 5H); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ 12,0, 15,0, 19,3, 21,7, 28,0, 35,6, 37,5, 41,7, 51,8, 71,3, 73,0, 73,3, 80,6, 81,3, 94,7, 127,5, 127,7, 128,3, 138,2, 154,1, 172,4, 216; ИК (пленка, NaCl, cм^-1) 3849, 2974, 2879, 1758, 1701, 1454, 1368, 1248, 1152, 926, 734; МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₃₉О₈Cl₃Na [M+Na⁺] 619,1, найдено 619,2; [α]²³ _D  = -13,0 (c = 0,4, CHCl₃).The high pressure sleeve was loaded with (R) -RuBINAP catalyst (16.8 mg, 10.0 μmol). HCl (555 μl, 0.2N in MeOH) was added and then the mixture was sonicated for 15 sec. Then a solution of 69 (59.4 mg, 0.1 mmol) in MeOH (555 μl) was added and the mixture was transferred to a Parr apparatus. The vessel was purged with H ₂ for 5 minutes and then pressurized to 1200 psi. After 17 hours, the reaction mixture was returned to atmospheric pressure and poured into a saturated aqueous solution of NaHCO ₃ . The aqueous layer was extracted three times with EtOAc. The combined organic extracts were dried over MgSO ₄ and concentrated under reduced pressure. The crude product was purified by flash chromatography (hexane / hexane / EtOAc 88:12 gradient) to give 70 (dr> 20: 1 based on ¹ H-NMR analysis) (47.6 mg, 80%) as a colorless oil : ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.06 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.11 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.14 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.47 (s, 9H), 2.05-2.12 (m, 1H), 2.35-2.40 (m, 1H), 3.31 -3.37 (m, 2H), 3.51-3.54 (m, 2H), 4.11-4.14 (m, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.72 (d , J = 11.9 Hz, 1H), 4.80 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 5.05 (dd, J = 5.0 and 6.7 Hz, 1H), 7.27 -7.35 (m, 5H); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 12.0, 15.0, 19.3, 21.7, 28.0, 35.6, 37.5, 41.7, 51.8, 71.3 73.0, 73.3, 80.6, 81.3, 94.7, 127.5, 127.7, 128.3, 138.2, 154.1, 172.4, 216; IR (film, NaCl, cm ^-1 ) 3849, 2974, 2879, 1758, 1701, 1454, 1368, 1248, 1152, 926, 734; MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₃₉ O ₈ Cl ₃ Na [M + Na ⁺ ] 619.1, found 619.2; [α] ²³ _D = -13.0 (c = 0.4, CHCl ₃ ).

Трет-бутиловый эфир 9-бензилокси-4,4,6,8-тетраметил-5-оксо-7-(2,2,2-трихлорэтоксикарбонилокси)-3-(триэтилсиланилокси)нонановой кислоты (71)9-Benzyloxy-4,4,6,8-tetramethyl-5-oxo-7- (2,2,2-trichloroethoxycarbonyloxy) -3- (triethylsilanyloxy) nonanoic acid tert-butyl ester (71)

К раствору 70 (37,6 мг, 6,3 мкмоль) и имидазола (9,4 мг, 13,8 мкмоль) в ДМФА (0,4 мл) при 0°C добавляли TESCl (11,6 мкл, 69,3 мкмоль). Через 3 час смесь разбавляли насыщенным водным NaHCO₃. Водный слой три раза экстрагировали гексанами. Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Грубый продукт очищали флэш-хроматографией (градиент от гексана до смеси гексан/EtOAc 93:7), получая в порядке элюирования 71 (22,9 мг, 51%) и извлекаемый 70 (12,9 мг, 34%) в виде бесцветных масел. 7: ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 0,66 (кв, J=7,9 Гц, 6H), 0,96 (т, J=7,9 Гц, 9H), 1,01 (c, 3H), 1,05 (д, J=5,2 Гц, 3H), 1,07 (д, J=5,3 Гц, 3H), 1,35 (c, 3H), 1,44 (c, 9H), 2,05-2,11 (м, 2H), 2,50 (дд, J=3,5 и 17,2 Гц, 1H), 3,35 (дд, J=5,9 и 9,0 Гц, 1H), 3,49 (дд, J=4,0 и 9,0 Гц, 1H), 3,53 (дд, J=3,8 и 6,7 Гц, 1H), 4,18 (дд, J=3,5 и 6,5 Гц, 1H), 4,45 (c, 2H), 4,65 (д, J=11,9 Гц, 1H), 4,79 (д, J=11,9 Гц, 1H), 4,97 (дд, J=3,7 и 8,1 Гц, 1H), 7,29-7,52 (м, 5H); ¹³С ЯМР (125 МГц, СDCl₃) δ 5,3, 7,3, 10,9, 14,9, 21,3, 22,6, 28,4, 35,9, 41,1, 42,7, 53,7, 71,9, 73,7, 75,7, 80,1, 80,9, 95,1, 127,9, 128,0, 128,7, 138,6, 154,3, 171,7, 215,7; ИК (пленка, NaCl, cм^-1) 2956, 2876, 1732, 1694, 1456, 1366, 1257, 1154, 1098, 988, 835, 774, 741; МС-НР (ESI) вычислено для С₃₃Н₅₃О₈SiCl₃Na [M+Na⁺] 733,2, найдено 733,3; [α]²³ _D  = -16,1 (c = 0,1, CHCl₃).To a solution of 70 (37.6 mg, 6.3 μmol) and imidazole (9.4 mg, 13.8 μmol) in DMF (0.4 ml) at 0 ° C was added TESCl (11.6 μl, 69.3 μmol). After 3 hours, the mixture was diluted with saturated aqueous NaHCO ₃ . The aqueous layer was extracted three times with hexanes. The combined organic extracts were washed with brine, dried over MgSO ₄ and concentrated under reduced pressure. The crude product was purified by flash chromatography (gradient from hexane to hexane / EtOAc 93: 7) to give 71 (22.9 mg, 51%) and 70 (12.9 mg, 34%) as colorless oils in the elution order. . 7: ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.66 (q, J = 7.9 Hz, 6H), 0.96 (t, J = 7.9 Hz, 9H), 1.01 (s , 3H), 1.05 (d, J = 5.2 Hz, 3H), 1.07 (d, J = 5.3 Hz, 3H), 1.35 (s, 3H), 1.44 (s , 9H), 2.05-2.11 (m, 2H), 2.50 (dd, J = 3.5 and 17.2 Hz, 1H), 3.35 (dd, J = 5.9 and 9 , 0 Hz, 1H), 3.49 (dd, J = 4.0 and 9.0 Hz, 1H), 3.53 (dd, J = 3.8 and 6.7 Hz, 1H), 4.18 (dd, J = 3.5 and 6.5 Hz, 1H), 4.45 (s, 2H), 4.65 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.79 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.97 (dd, J = 3.7 and 8.1 Hz, 1H), 7.29-7.52 (m, 5H); ¹³ C NMR (125 MHz, CDCl ₃ ) δ 5.3, 7.3, 10.9, 14.9, 21.3, 22.6, 28.4, 35.9, 41.1, 42.7 , 53.7, 71.9, 73.7, 75.7, 80.1, 80.9, 95.1, 127.9, 128.0, 128.7, 138.6, 154.3, 171 7,215.7; IR (film, NaCl, cm ^-1 ) 2956, 2876, 1732, 1694, 1456, 1366, 1257, 1154, 1098, 988, 835, 774, 741; MS-HP (ESI) calculated for C ₃₃ H ₅₃ O ₈ SiCl ₃ Na [M + Na ⁺ ] 733.2, found 733.3; [α] ²³ _D = -16.1 (c = 0.1, CHCl ₃ ).

Трет-бутиловый эфир 9-бензилокси-3-(диэтилметилсиланилокси)-7-гидрокси-4,4,6,8-тетраметил-5-оксононановой кислоты (71a)9-Benzyloxy-3- (diethylmethylsilanyloxy) -7-hydroxy-4,4,6,8-tetramethyl-5-oxononanoic acid tert-butyl ester (71a)

К раствору 71 (22,9 мг, 3,2 мкмоль) в смеси 1:1 ТГФ/AcOH (1,4 мл) добавляли Zn (5,0 мг, 7,8 мкмоль, наноразмер). Смесь обрабатывали ультразвуком в течение 15 мин. Добавляли еще Zn (5,0 мг, 7,8 мкмоль, наноразмер), после чего обрабатывали ультразвуком еще в течение 15 мин. Суспензию фильтровали через подушку целита, несколько раз промывая EtOAc. Фильтраты промывали насыщенным NaHCO₃, насыщенным раствором соли, сушили над MgSO₄ и концентрировали в вакууме. Грубый продукт пропускали через небольшой слой силикагеля, элюируя смесью гексан/EtOAc 4:1, получая 17,1 мг (выход 99%) 71a в виде бесцветного масла: ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (м, 6H), 0,96 (т, J=7,9 Гц, 9H), 0,97 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,05 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,11 (c, 3H), 1,26 (c, 3H), 1,44 (c, 9H), 1,84-1,90 (м, 1H), 2,21 (дд, J=6,7 и 17,0 Гц, 1H), 2,36 (дд, J=6,7 и 17,0 Гц, 1H), 3,24-3,29 (м, 1H), 3,44-3,52 (м, 2H), 3,67 (дд, J=3,9 и 8,9 Гц, 1H), 4,36 (дд, J=3,5 и 6,5 Гц, 1H), 4,50 (д, J=12,0 Гц, 1Н), 4,54 (д, J=12,0 Гц, 1H), 7,32-7,36 (м, 5H); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ 5,0, 6,9, 9,7,13,9, 20,2, 21,8, 28,0, 36,3, 40,8, 41,5, 53,7, 72,5, 72,9, 73,2, 73,6, 80,7, 127,4, 127,5, 128,2, 138,6, 171,0, 221,4; ИК (пленка, NaCl, cм^-1) 3502, 2959, 2875, 1731, 1683, 1456, 1366, 1154, 1098, 996, 739; МС-НР (ESI) вычислено для С₃₀Н₅₂О₆SiCl₃Na [M+Na⁺] 559,3, найдено 559,3; [α]²³ _D  = -41,0 (c = 0,4, CHCl₃).To a solution of 71 (22.9 mg, 3.2 μmol) in a 1: 1 THF / AcOH mixture (1.4 ml) was added Zn (5.0 mg, 7.8 μmol, nanosize). The mixture was sonicated for 15 minutes. More Zn (5.0 mg, 7.8 μmol, nanosize) was added, after which it was sonicated for another 15 minutes. The suspension was filtered through a pad of celite, washing several times with EtOAc. The filtrates were washed with saturated NaHCO ₃ , brine, dried over MgSO ₄ and concentrated in vacuo. The crude product was passed through a small layer of silica gel, eluting with 4: 1 hexane / EtOAc to give 17.1 mg (99% yield) 71a as a colorless oil: ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ (m, 6H), 0.96 (t, J = 7.9 Hz, 9H), 0.97 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.05 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1, 11 (s, 3H), 1.26 (s, 3H), 1.44 (s, 9H), 1.84-1.90 (m, 1H), 2.21 (dd, J = 6.7 and 17.0 Hz, 1H), 2.36 (dd, J = 6.7 and 17.0 Hz, 1H), 3.24-3.29 (m, 1H), 3.44-3.52 (m , 2H), 3.67 (dd, J = 3.9 and 8.9 Hz, 1H), 4.36 (dd, J = 3.5 and 6.5 Hz, 1H), 4.50 (d, J = 12.0 Hz, 1H); 4.54 (d, J = 12.0 Hz, 1H); 7.32-7.36 (m, 5H); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 5.0, 6.9, 9.7.13.9, 20.2, 21.8, 28.0, 36.3, 40.8, 41.5 , 53.7, 72.5, 72.9, 73.2, 73.6, 80.7, 127.4, 127.5, 128.2, 138.6, 171.0, 221.4; IR (film, NaCl, cm ^-1 ) 3502, 2959, 2875, 1731, 1683, 1456, 1366, 1154, 1098, 996, 739; MS-HP (ESI) calculated for C ₃₀ H ₅₂ O ₆ SiCl ₃ Na [M + Na ⁺ ] 559.3, found 559.3; [α] ²³ _D = -41.0 (c = 0.4, CHCl ₃ ).

Трет-бутиловый эфир 9-бензилокси-7-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3-(диэтилметилсиланилокси)-4,4,6,8-тетраметил-5-оксононановой кислоты (36)9-Benzyloxy-7- (tert-butyldimethylsilanyloxy) -3- (diethylmethylsilanyloxy) -4,4,6,8-tetramethyl-5-oxononanoic acid tert-butyl ester (36)

К раствору 71a (4,1 мг, 7,6 мкмоль) и 2,6-лутидина (10,0 мкл, 43,5 ммоль) в CH₂Cl₂ (0,2 мл) при -78°C добавляли TBSOTf (10,0 мкл, 85,8 ммоль). Через 2 час дополнительно добавляли 2,6-лутидин (10,0 мкл, 43,5 ммоль) и TBSOTf (10,0 мкл, 85,8 ммоль). Через 6 час смесь разбавляли насыщенным водным NaHCO₃. Водный слой три раза экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Грубый продукт очищали флэш-хроматографией (градиент от гексана до смеси гексан/EtOAc 91:9), получая 36 (5,4 мг, 82%) в виде прозрачного масла. Спектроскопические данные хорошо согласуются с описанными значениями. To a solution of 71a (4.1 mg, 7.6 μmol) and 2,6-lutidine (10.0 μl, 43.5 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (0.2 ml) at -78 ° C was added TBSOTf ( 10.0 μl, 85.8 mmol). After 2 hours, 2,6-lutidine (10.0 μl, 43.5 mmol) and TBSOTf (10.0 μl, 85.8 mmol) were further added. After 6 hours, the mixture was diluted with saturated aqueous NaHCO ₃ . The aqueous layer was extracted three times with EtOAc. The combined organic extracts were washed with brine, dried over MgSO ₄ and concentrated under reduced pressure. The crude product was purified by flash chromatography (hexane / hexane / EtOAc 91: 9 gradient) to give 36 (5.4 mg, 82%) as a clear oil. Spectroscopic data are in good agreement with the described values.

Спирт 83. К раствору этил 4,4,4-трифторацетоацетата (24,0 мл, 0,164 моль) в смеси ТГФ-вода (3:1 = V:V, 320 мл) при комнатной температуре добавляли аллилбромид (20,0 мл, 1,4 экв.) и индий (порошок, -100 меш, 25 г, 1,3 экв.) и полученную в результате смесь перемешивали при 48°C в течение 15 час. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, гасили 2N водным HCl (400 мл) и экстрагировали CH₂Cl₂ (400 мл, 2×200 мл). Объединенные органические слои сушили (MgSO₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Флэш-хроматография (гексаны → гексаны-эфир 10:1 → 8:1 → 6:1 → 4:1) давала спирт 83 в виде прозрачного масла (31,64 г, выход 85%): ИК (пленка) 3426 (ушир.м), 2986 (м), 1713 (c), 1377 (м), 1345 (м), 1301 (м), 1232 (м), 1173 (c), 1095 (м), 1023 (м), 927 (м) cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 5,82 (м, 1H), 5,15 (м, 3H), 4,17 (м, 2H), 2,59 (м, 1H), 2,58 (д, J=3,4 Гц, 2H), 2,29 (дд, J=14,2, 8,6 Гц, 1H), 1,24 (т, J=7,2 Гц, 3H); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ 172,08, 130,89, 125,65 (кв, J=280 Гц), 120,27, 73,79 (кв, J=28 Гц), 61,55, 38,97, 35,65, 13,82; масс-спектр высокого разрешения m/z 227,0895 [(M+H)⁺; вычислено для С₉Н₁₄О₃F₃: 227,0895]. Alcohol 83. To a solution of ethyl 4,4,4-trifluoroacetoacetate (24.0 ml, 0.164 mol) in a mixture of THF-water (3: 1 = V: V, 320 ml), allyl bromide (20.0 ml, 1.4 equiv.) And indium (powder, -100 mesh, 25 g, 1.3 equiv.) And the resulting mixture was stirred at 48 ° C. for 15 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature, quenched with 2N aqueous HCl (400 ml) and extracted with CH ₂ Cl ₂ (400 ml, 2 × 200 ml). The combined organic layers were dried (MgSO ₄ ), filtered and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexanes → hexanes-ether 10: 1 → 8: 1 → 6: 1 → 4: 1) gave alcohol 83 as a clear oil (31.64 g, 85% yield): IR (film) 3426 (broad m.), 2986 (m), 1713 (s), 1377 (m), 1345 (m), 1301 (m), 1232 (m), 1173 (c), 1095 (m), 1023 (m), 927 (m) cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 5.82 (m, 1H), 5.15 (m, 3H), 4.17 (m, 2H), 2.59 (m, 1H), 2.58 (d, J = 3.4 Hz, 2H), 2.29 (dd, J = 14.2, 8.6 Hz, 1H), 1.24 (t, J = 7.2 Hz, 3H); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 172.08, 130.89, 125.65 (q, J = 280 Hz), 120.27, 73.79 (q, J = 28 Hz), 61.55 38.97; 35.65; 13.82; high resolution mass spectrum m / z 227.0895 [(M + H) ⁺ ; calculated for C ₉ H ₁₄ O ₃ F ₃ : 227.0895].

Сложный эфир 84. Смесь спирта 83 (16,71 г, 0,07386 моль) и пиридина (15,0 мл, 2,5 экв.) охлаждали до -10°C и медленно в течение 11 мин обрабатывали тионилхлоридом (11,3 мл, 2,1 экв.). Полученную в результате смесь нагревали до 55°C и перемешивали в течение 12 час. Реакционную смесь охлаждали до -5°C, гасили водой (200 мл) и экстрагировали CH₂Cl₂ (2×200 мл, 2×150 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным NaHCO₃ (2×200 мл) и насыщенным раствором соли (200 мл), сушили (MgSO₄) и концентрировали в вакуум. Флэш-хроматография (пентан:эфир, 15:1) давала сложный эфир 84 (11,90 г, выход 77%) в виде желтого масла: ИК (пленка) 2986 (w), 1731 (c), 1308 (c), 1265 (w), 1227 (м), 1197 (c), 1133 (c), 1025 (м), 920 (w), 896 (w) cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 6,36 (c, 1H), 5,79 (ддт, J=16,9, 10,2, 6,6 Гц, 1H), 5,15 (дд, J=17,1, 1,5 Гц, 1H), 5,08 (дд, J=10,0, 1,4 Гц, 1H), 4,22 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 3,44 (д, J=6,5 Гц, 2H), 1,29 (т, J=7,1 Гц, 3H); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ 164,22, 143,37 (кв, J=29 Гц), 132,71, 123,21 (кв, J=274 Гц), 122,60 (кв, J=6 Гц), 117,32, 60,85, 30,54, 13,85; масс-спектр высокого разрешения m/z 209,0788 [(M+H)⁺; вычислено для С₉Н₁₂О₂F₃: 209,0789]. Esters 84 . A mixture of alcohol 83 (16.71 g, 0.07386 mol) and pyridine (15.0 ml, 2.5 eq.) Was cooled to -10 ° C and treated slowly with 11 ml of thionyl chloride (11.3 ml, 2, 1 equiv.). The resulting mixture was heated to 55 ° C and stirred for 12 hours. The reaction mixture was cooled to -5 ° C, quenched with water (200 ml) and extracted with CH ₂ Cl ₂ (2 × 200 ml, 2 × 150 ml). The combined organic layers were washed with saturated NaHCO ₃ (2 × 200 ml) and brine (200 ml), dried (MgSO ₄ ) and concentrated in vacuo. Flash chromatography (pentane: ether, 15: 1) gave the ester 84 (11.90 g, 77% yield) as a yellow oil: IR (film) 2986 (w), 1731 (c), 1308 (c), 1265 (w), 1227 (m), 1197 (c), 1133 (c), 1025 (m), 920 (w), 896 (w) cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 6.36 (s, 1H), 5.79 (ddt, J = 16.9, 10.2, 6.6 Hz, 1H), 5.15 (dd, J = 17.1, 1.5 Hz, 1H), 5.08 (dd, J = 10.0, 1.4 Hz, 1H), 4.22 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.44 (d, J = 6.5 Hz, 2H); 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 164.22, 143.37 (q, J = 29 Hz), 132.71, 123.21 (q, J = 274 Hz), 122.60 (q, J = 6 Hz), 117.32, 60.85, 30.54, 13.85; high resolution mass spectrum m / z 209.0788 [(M + H) ⁺ ; calculated for C ₉ H ₁₂ O ₂ F ₃ : 209.0789].

Спирт 85. К охлажденному (-75°C) раствору сложного эфира 84 (7,12 г, 0,0342 моль) в CH₂Cl₂ (120 мл) добавляли раствор DIBAL-H (75 мл, 2,2 экв.) в CH₂Cl₂ (1,0 М) и полученную в результате смесь нагревали до комнатной температуры в течение 3 час. Реакционную смесь охлаждали до 0°C, гасили насыщенным NH₄Cl (12 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин. Реакционную смесь разбавляли эфиром (200 мл), сушили (MgSO₄) и концентрировали в вакууме. Флэш-хроматография (пентан:эфир, 3:1-1:1) давала спирт 85 (5,68 г, 99%) в виде прозрачного масла: ИК (пленка) 3331 (ушир.c), 2929 (м), 1642 (м), 1445 (м), 1417 (w), 1348 (c), 1316 (c), 1217 (c), 1175 (c), 1119 (c), 1045 (м), 985 (c), 921 (м), 831 (w) cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 6,33 (тд, J=6,1, 1,6 Гц, 1H), 5,75 (ддт, J=17,2, 10,0, 6,2 Гц, 1H), 5,07 (м, 2 H), 4,29 (ддд, J=6,3, 4,3, 2,1 Гц, 2H), 2,95 (д, J=6,2 Гц, 2H); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ 134,45 (кв, J=6 Гц), 133,38, 127,97 (кв, J=29 Гц), 123,76 (кв, J=271 Гц), 116,25, 57,87, 29,79. Alcohol 85. To a cooled (-75 ° C) solution of ester 84 (7.12 g, 0.0342 mol) in CH ₂ Cl ₂ (120 ml) was added a solution of DIBAL-H (75 ml, 2.2 equiv.) in CH ₂ Cl ₂ (1.0 M) and the resulting mixture was warmed to room temperature for 3 hours. The reaction mixture was cooled to 0 ° C, quenched with saturated NH ₄ Cl (12 ml) and stirred at room temperature for 20 minutes. The reaction mixture was diluted with ether (200 ml), dried (MgSO ₄ ) and concentrated in vacuo. Flash chromatography (pentane: ether, 3: 1-1: 1) gave alcohol 85 (5.68 g, 99%) as a clear oil: IR (film) 3331 (broad s), 2929 (m), 1642 (m), 1445 (m), 1417 (w), 1348 (c), 1316 (c), 1217 (c), 1175 (c), 1119 (c), 1045 (m), 985 (s), 921 (m), 831 (w) cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 6.33 (td, J = 6.1, 1.6 Hz, 1H), 5.75 (ddt, J = 17.2, 10.0, 6.2 Hz, 1H), 5.07 (m, 2 H), 4.29 (ddd, J = 6.3, 4.3, 2.1 Hz, 2H), 2.95 (d, J = 6.2 Hz, 2H); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 134.45 (q, J = 6 Hz), 133.38, 127.97 (q, J = 29 Hz), 123.76 (q, J = 271 Hz) 116.25, 57.87, 29.79.

Йодид 86. Охлажденный (0°C) раствор спирта 85 (5,97 г, 0,0358 моль) в CH₂Cl₂ (50 мл) обрабатывали PPh₃ (11,17 г, 1,2 экв.), имидазолом (3,55 г, 1,5 экв.) и I₂ (9,10 г, 1,1 экв.) и полученную в результате смесь перемешивали при 0°C в течение 10 мин. Реакционную смесь гасили смесью насыщенного Na₂S₂O₃ - насыщенного NaHCO₃ (1:1 = V:V, 200 мл) и экстрагировали пентаном (3×200 мл). Объединенные органические слои промывали смесью насыщенного Na₂S₂O₃ - насыщенного NaHCO₃ (1:1 = V:V, 200 мл) и насыщенным раствором соли (100 мл), сушили (MgSO₄) и концентрировали в вакууме. Флэш-хроматография (пентан) давала йодид 86 (6,69 г, 68%) в виде бледно-красного масла: ИК (пленка) 3083 (w), 2982 (w), 1636 (w), 1558 (w), 1456 (w), 1367 (w), 1317 (c), 1216 (м), 1181 (c), 1151 (c), 1120 (c), 989 (м), 921 (м), 896 (м) cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 6,45 (тд, J=8,9, 1,5 Гц, 1H), 5,79 (ддт, J=16,8, 10,3, 6,2 Гц, 1H), 5,12 (м, 2H), 3,85 (ддд, J=8,9, 2,9, 1,4 Гц, 2H), 3,00 (дт, J=6,1, 1,4 Гц, 2H); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ 132,42, 131,64 (кв, J=6 Гц), 129,63 (кв, J=29 Гц), 123,64 (кв, J=272 Гц), 117,00, 29,32, -4,27; масс-спектр высокого разрешения m/z 298,7 [(M+Na)⁺; вычислено для С₇Н₈F₃INa: 299,0]. Iodide 86. A cooled (0 ° C) solution of alcohol 85 (5.97 g, 0.0358 mol) in CH ₂ Cl ₂ (50 ml) was treated with PPh ₃ (11.17 g, 1.2 equiv.), Imidazole ( 3.55 g, 1.5 eq.) And I ₂ (9.10 g, 1.1 eq.) And the resulting mixture was stirred at 0 ° C for 10 minutes. The reaction mixture was quenched with a mixture of saturated Na ₂ S ₂ O ₃ - saturated NaHCO ₃ (1: 1 = V: V, 200 ml) and was extracted with pentane (3 × 200 ml). The combined organic layers were washed with a mixture of saturated Na ₂ S ₂ O ₃ - saturated NaHCO ₃ (1: 1 = V: V, 200 ml) and brine (100 ml), dried (MgSO ₄ ) and concentrated in vacuo. Flash chromatography (pentane) gave iodide 86 (6.69 g, 68%) as a pale red oil: IR (film) 3083 (w), 2982 (w), 1636 (w), 1558 (w), 1456 (w), 1367 (w), 1317 (c), 1216 (m), 1181 (c), 1151 (c), 1120 (c), 989 (m), 921 (m), 896 (m) cm ^{- 1} ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 6.45 (td, J = 8.9, 1.5 Hz, 1H), 5.79 (ddt, J = 16.8, 10.3, 6.2 Hz, 1H), 5.12 (m, 2H), 3.85 (ddd, J = 8.9, 2.9, 1.4 Hz, 2H), 3.00 (dt, J = 6.1, 1.4 Hz, 2H); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 132.42, 131.64 (q, J = 6 Hz), 129.63 (q, J = 29 Hz), 123.64 (q, J = 272 Hz) 117.00, 29.32, -4.27; high resolution mass spectrum m / z 298.7 [(M + Na) ⁺ ; calculated for C ₇ H ₈ F ₃ INa: 299.0].

α-Гидроксиоксазолидинон 88. К охлажденному (-78°C) TES-защищенному 4-бензил-3-гидроксиацетилоксазолидин-2-ону 7 (16,28 г, 1,92 экв.) в ТГФ (160 мл) по каплям в течение 51 мин добавляли раствор LHMDS (42,0 мл, 1,73 экв.) в ТГФ (1,0 М) и полученную в результате смесь перемешивали при -78°C в течение 35 мин. Реакционную смесь обрабатывали раствором йодида 86 (6,69 г, 24,2 ммоль) в ТГФ (10 мл) и полученной в результате смеси давали возможность медленно нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь гасили насыщенным NAHCO₃ (200 мл) и экстрагировали EtOAc (3×200 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным NH₄Cl (150 мл), насыщенным раствором соли (150 мл), сушили (MgSO₄) и концентрировали в вакууме. Флэш-хроматография (гексаны-EtOAc 6:1 → 3:1) давала смесь продуктов алкилирования (13,6 г), которые использовали в следующей реакции без дополнительной очистка. Раствор продуктов алкилирования в смеси HOAc-вода-ТГФ (3:1:1 = V:V:V, 200 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 час. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, чтобы удалить HOAc, гасили насыщенным NaHCO₃ (400 мл) и экстрагировали EtOAc (3×200 мл). Объединенные органические слои сушили (MgSO₄) и концентрировали в вакууме. Флэш-хроматография (гексаны : EtOAc, 3:1 → 2:1) давала α-гидроксиоксазолидинон 88 (7,55 г, выход 81% для двух стадий) в виде прозрачного масла: [α]_D ²⁵  -48,2 (с 1,08, СНСl₃); ИК (пленка) 3486 (ушир.с), 3030 (м), 2983 (c), 2925 (м), 1790 (c), 1682 (c), 1481 (м), 1393 (м), 1360 (м), 1217 (м), 1171 (м), 1113 (м), 992 (м), 919 (м), 847 (w) cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,32 (м, 3H), 7,17 (м, 2Н), 6,33 (тд, J=7,2, 1,5 Гц, 1H), 5,77 (ддт, J=16,6, 10,1, 6,2 Гц, 1H), 5,08 (м, 3H), 4,74 (ддт, J=4,8, 3,7, 4,4 Гц, 1H), 4,33 (дд, J=8,6, 8,6 Гц, 1H), 4,26 (дд, J=9,2, 3,4 Гц, 1H), 3,42 (ушир.д, J=6,4 Гц, 1H), 3,24 (дд, J=13,5, 3,4 Гц, 1H), 2,99 (м, 2H), 2,79 (дд, J=13,5, 9,4 Гц, 1H), 2,70 (м, 1H), 2,50 (м, 1H); ¹³С ЯМР (125 МГц, СDCl₃) δ 173,93, 153,05, 134,43, 133,64, 129,98 (кв, J=6 Гц), 129,82 (кв, J=28 Гц), 129,29, 120,01, 127,58, 124,00 (кв, J=272 Гц), 116,34, 69,60, 67,31, 54,95, 37,78, 32,29, 29,84; масс-спектр высокого разрешения m/z 384,1421 [(M+Н)⁺; вычислено для С₁₉Н₂₁NO₄F₃: 384,1423]. α-Hydroxyoxazolidinone 88. To chilled (-78 ° C) TES-protected 4-benzyl-3-hydroxyacetyloxazolidin-2-one 7 (16.28 g, 1.92 equiv.) in THF (160 ml) dropwise over A solution of LHMDS (42.0 ml, 1.73 equiv.) In THF (1.0 M) was added over 51 minutes, and the resulting mixture was stirred at -78 ° C for 35 minutes. The reaction mixture was treated with a solution of iodide 86 (6.69 g, 24.2 mmol) in THF (10 ml) and the resulting mixture was allowed to slowly warm to room temperature overnight. The reaction was quenched with saturated NAHCO ₃ (200 ml) and extracted with EtOAc (3 × 200 ml). The combined organic layers were washed with saturated NH ₄ Cl (150 ml), brine (150 ml), dried (MgSO ₄ ) and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexanes-EtOAc 6: 1 → 3: 1) gave a mixture of alkylation products (13.6 g), which were used in the next reaction without further purification. A solution of the alkylation products in a HOAc-water-THF mixture (3: 1: 1 = V: V: V, 200 ml) was stirred at room temperature for 4 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuo to remove HOAc, quenched with saturated NaHCO ₃ (400 ml) and extracted with EtOAc (3 × 200 ml). The combined organic layers were dried (MgSO ₄ ) and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexanes: EtOAc, 3: 1 → 2: 1) gave α-hydroxyoxazolidinone 88 (7.55 g, 81% yield for two steps) as a clear oil: [α] _D ²⁵ -48.2 (s 1.08, CHCl ₃ ); IR (film) 3486 (br.s), 3030 (m), 2983 (c), 2925 (m), 1790 (c), 1682 (c), 1481 (m), 1393 (m), 1360 (m) , 1217 (m), 1171 (m), 1113 (m), 992 (m), 919 (m), 847 (w) cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 7.32 (m, 3H), 7.17 (m, 2H), 6.33 (td, J = 7.2, 1.5 Hz, 1H), 5 77 (DDT, J = 16.6, 10.1, 6.2 Hz, 1H), 5.08 (m, 3H), 4.74 (DDT, J = 4.8, 3.7, 4, 4 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 8.6, 8.6 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 9.2, 3.4 Hz, 1H), 3.42 ( broad d, J = 6.4 Hz, 1H), 3.24 (dd, J = 13.5, 3.4 Hz, 1H), 2.99 (m, 2H), 2.79 (dd, J = 13.5, 9.4 Hz, 1H), 2.70 (m, 1H), 2.50 (m, 1H); ¹³ C NMR (125 MHz, CDCl ₃ ) δ 173.93, 153.05, 134.43, 133.64, 129.98 (q, J = 6 Hz), 129.82 (q, J = 28 Hz) , 129.29, 120.01, 127.58, 124.00 (q, J = 272 Hz), 116.34, 69.60, 67.31, 54.95, 37.78, 32.29, 29 , 84; high resolution mass spectrum m / z 384.1421 [(M + H) ⁺ ; calculated for C ₁₉ H ₂₁ NO ₄ F ₃ : 384.1423].

α-Гидроксиамид 89. Суспензию (MeO)NHMe·HCl (10,1 г, 5,25 экв.) в ТГФ (100 мл) при 0°C по каплям обрабатывали раствором AlMe₃ (50 мл, 5,1 экв.) в толуоле (2,0 М) и полученный в результате прозрачный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 34 мин, затем добавляли к охлажденному (0ºC) раствору α-гидроксиоксазолидинона 88 (7,55 г, 19,7 ммоль) в ТГФ (70 мл). Полученную в результате смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 час. Реакционную смесь охлаждали до 0°C, гасили медленным добавлением 1N водной винной кислоты (100 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение 25 мин и экстрагировали EtOAc (3×200 мл). Объединенные органические слои сушили (MgSO₄) и концентрировали в вакууме. Флэш-хроматография (гексаны:EtOAc, 2:1 → 1:1) давала α-гидроксиамид 89 (5,12 г, выход 97%) в виде прозрачного масла: [α]_D ²⁵  -57,2 (с 1,03, СНСl₃); ИК (пленка) 3432 (ушир.c), 3084 (w), 2980 (м), 2943 (м), 1652 (c), 1464 (м), 1373 (м), 1318 (м), 1214 (м), 1171 (м), 1112 (м), 991 (м), 919 (м), 818 (w) cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 6,32 (тд, J=7,3, 1,5 Гц, 1H), 5,74 (ддт, J=16,9, 10,3, 6,1 Гц, 1H), 5,05 (м, 2H), 4,43 (дд, J=7,6, 3,5 Гц, 1H), 3,70 (c, 3H), 3,35 (ушир.c, 1H), 3,24 (c, 3H), 2,94 (д, J=6,1 Гц, 2H), 2,59 (м, 1H), 2,36 (м, 1H); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ 173,43, 133,68, 130,59 (кв, J=6 Гц), 129,25 (кв, J=28 Гц), 124,05 (кв, J=271 Гц), 116,17, 67,57, 61,44, 32,56, 32,38, 29,75; масс-спектр высокого разрешения m/z 268,1161 [(M+Н)⁺; вычислено для С₁₁Н₁₇NO₃F₃: 268,1161]. α-Hydroxyamide 89. A suspension of (MeO) NHMe · HCl (10.1 g, 5.25 equiv.) in THF (100 ml) at 0 ° C was treated dropwise with a solution of AlMe ₃ (50 ml, 5.1 equiv.) in toluene (2.0 M) and the resulting clear solution was stirred at room temperature for 34 minutes, then added to a cooled (0 ° C) solution of α-hydroxyoxazolidinone 88 (7.55 g, 19.7 mmol) in THF (70 ml). The resulting mixture was warmed to room temperature and stirred for 12 hours. The reaction mixture was cooled to 0 ° C, quenched by the slow addition of 1N aqueous tartaric acid (100 ml), stirred at room temperature for 25 min, and extracted with EtOAc (3 × 200 ml). The combined organic layers were dried (MgSO ₄ ) and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexanes: EtOAc, 2: 1 → 1: 1) gave α-hydroxyamide 89 (5.12 g, yield 97%) as a clear oil: [α] _D ²⁵ -57.2 (c 1.03 , CHCl ₃ ); IR (film) 3432 (broad s), 3084 (w), 2980 (m), 2943 (m), 1652 (s), 1464 (m), 1373 (m), 1318 (m), 1214 (m) 1171 (m), 1112 (m), 991 (m), 919 (m), 818 (w) cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 6.32 (td, J = 7.3, 1.5 Hz, 1H), 5.74 (ddt, J = 16.9, 10.3, 6.1 Hz, 1H), 5.05 (m, 2H), 4.43 (dd, J = 7.6, 3.5 Hz, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.35 (br.s , 1H), 3.24 (s, 3H), 2.94 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.59 (m, 1H), 2.36 (m, 1H); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 173.43, 133.68, 130.59 (q, J = 6 Hz), 129.25 (q, J = 28 Hz), 124.05 (q, J = 271 Hz), 116.17, 67.57, 61.44, 32.56, 32.38, 29.75; high resolution mass spectrum m / z 268.1161 [(M + H) ⁺ ; calculated for C ₁₁ H ₁₇ NO ₃ F ₃ : 268.1161].

α-Гидроксикетон 90. К охлажденному (0°C) раствору α-гидроксиамида 89 (4,87 г, 18,2 ммоль) в ТГФ (150 мл) добавляли раствор MeMgBr (75 мл, 12 экв.) в простом эфире (3,0 М). Через 5 мин реакционную смесь гасили насыщенным NH₄Cl (250 мл) и экстрагировали EtOAc (5×200 мл). Объединенные органические слои сушили (MgSO₄) и концентрировали в вакууме. Флэш-хроматография (гексаны:EtOAc 4:1 → 2:1 → 1:2) давала α-гидроксикетон 90 (2,16 г, выход 53%, выход 73% на основании извлечения исходного вещества) в виде прозрачного масла и исходное вещество α-гидроксиамид 89 (1,30 г, выход 27%): [α]_D ²⁵  +58,5 (с 1,30, СНСl₃); ИК (пленка) 3460 (ушир.c), 3085 (w), 2984 (м), 2926 (м), 1716 (c), 1679 (м), 1641 (м), 1417 (м), 1361 (м), 1319 (c), 1247 (м), 1216 (c), 1172 (c), 1113 (c), 1020 (м), 994 (м), 968 (w), 919 (м) cм^-1; ¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ 6,21 (т, J=7,0 Гц, 1H), 5,75 (ддт, J=16,7, 10,4, 6,2 Гц, 1H), 5,07 (м, 2H), 4,26 (дт, J=7,1, 4,5 Гц, 1H), 3,51 (д, J=4,7 Гц, 1H), 2,96 (д, J=6,1 Гц, 2H), 2,66 (м, 1H), 2,42 (м, 1H), 2,19 (c, 3H); ¹³С ЯМР (100 МГц, СDCl₃) δ 208,53, 133,43, 129,80 (кв, J=28 Гц), 129,76 (кв, J=6 Гц), 123,85 (кв, J=271 Гц), 116,32, 75,36, 31,22, 29,81, 25,11; масс-спектр высокого разрешения m/z 223,0945 [(M+Н)⁺; вычислено для С₁₀Н₁₄NO₂F₃: 223,0946]. α-Hydroxyketone 90. To a cooled (0 ° C) solution of α-hydroxyamide 89 (4.87 g, 18.2 mmol) in THF (150 ml) was added a solution of MeMgBr (75 ml, 12 equiv.) in ether (3 , 0 M). After 5 min, the reaction was quenched with saturated NH ₄ Cl (250 ml) and extracted with EtOAc (5 × 200 ml). The combined organic layers were dried (MgSO ₄ ) and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexanes: EtOAc 4: 1 → 2: 1 → 1: 2) afforded 90-hydroxyketone 90 (2.16 g, 53% yield, 73% yield based on the recovery of the starting material) as a clear oil and the starting material α-hydroxyamide 89 (1.30 g, yield 27%): [α] _D ²⁵ +58.5 (c 1.30, CHCl ₃ ); IR (film) 3460 (broad s), 3085 (w), 2984 (m), 2926 (m), 1716 (c), 1679 (m), 1641 (m), 1417 (m), 1361 (m) , 1319 (c), 1247 (m), 1216 (c), 1172 (c), 1113 (c), 1020 (m), 994 (m), 968 (w), 919 (m) cm ^-1 ; ¹ H NMR (500 MHz, CDCl ₃ ) δ 6.21 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 5.75 (ddt, J = 16.7, 10.4, 6.2 Hz, 1H) , 5.07 (m, 2H), 4.26 (dt, J = 7.1, 4.5 Hz, 1H), 3.51 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 2.96 ( d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.66 (m, 1H), 2.42 (m, 1H), 2.19 (s, 3H); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 208.53, 133.43, 129.80 (q, J = 28 Hz), 129.76 (q, J = 6 Hz), 123.85 (q, J = 271 Hz), 116.32, 75.36, 31.22, 29.81, 25.11; high resolution mass spectrum m / z 223.0945 [(M + H) ⁺ ; calculated for C ₁₀ H ₁₄ NO ₂ F ₃ : 223.0946].

Пример 8Example 8

Способ каталитического асимметрического окисленияThe method of catalytic asymmetric oxidation

Пример 9Example 9

Синтез 21-амино-26-трифтор-(E)-9,10-дегидро-dEpoBSynthesis of 21-amino-26-trifluoro- (E) -9,10-dehydro-dEpoB

Соединение 98: К раствору 59 (50,4 мг, 90,1 мкмоль) в ТГФ (1 мл) добавляли (PhO)₂PON₃ (27,2 мкл, 126 мкмоль) при 0°C. После перемешивания при 0°C в течение 5 мин добавляли DBU (16,2 мкл, 108 мкмоль). После перемешивания при 0°C в течение 2 час смесь перемешивали при КТ в течение 20,5 час. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и гасили добавлением воды (2 мл). После разделения слоев водный слой экстрагировали EtOAc (три раза) и объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄. После концентрирования остаток сушили в условиях высокого вакуума в течение 10 мин, чтобы удалить DBU. Очистка флэш-хроматографией на колонке (SiO₂, гексан/EtOAc = 3:2) давала азид 98 (45,6 мг, 78,0 мкмоль, 87%) в виде бесцветного твердого вещества; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,05 (3H, c), 1,12 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,23 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,33 (3H, c), 2,01 (1H, д, J=5,5 Гц, OH), 2,17 (3H, c), 2,25-2,35 (1H, м), 2,41 (1H, дд, J=15,5, 3,2 Гц), 2,49 (1H, дд, J=15,5, 9,5 Гц), 2,54-2,60 (1H, м), 2,66 (1H, д, J=6,0 Гц), 2,65-2,76 (1H, м), 2,96 (1H, дд, J=16,0, 4,2 Гц), 3,03 (1H, дд, J=16,1, 6,7 Гц), 3,11 (1H, квинтeт, J=6,8 Гц), 3,71-3,76 (1H, м), 4,31 (1H, ддд, J=9,2, 5,9, 3,2 Гц), 4,65 (2H, c), 5,43 (1H, дд, J=6,0, 4,3 Гц), 5,58 (1H, ддд, J=15,8, 6,4, 4,6 Гц), 5,66 (1H, дд, J=15,8, 6,1 Гц), 6,23 (1H, т, J=7,3 Гц), 6,63 (1H, c), 7,18 (1H, c); МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₃₅F₃N₄O₅SNa[M+Na⁺] 607,2, найдено 607,2. Compound 98: To a solution of 59 (50.4 mg, 90.1 μmol) in THF (1 ml) was added (PhO) ₂ PON ₃ (27.2 μl, 126 μmol) at 0 ° C. After stirring at 0 ° C for 5 min, DBU (16.2 μl, 108 μmol) was added. After stirring at 0 ° C for 2 hours, the mixture was stirred at RT for 20.5 hours. The reaction mixture was diluted with EtOAc and quenched by the addition of water (2 ml). After separation of the layers, the aqueous layer was extracted with EtOAc (three times) and the combined organic layers were dried over Na ₂ SO ₄ . After concentration, the residue was dried under high vacuum for 10 minutes to remove DBU. Purification by flash column chromatography (SiO ₂ , hexane / EtOAc = 3: 2) gave azide 98 (45.6 mg, 78.0 μmol, 87%) as a colorless solid; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.05 (3H, s), 1.12 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.23 (3H, d, J = 6.8 Hz ), 1.33 (3H, s), 2.01 (1H, d, J = 5.5 Hz, OH), 2.17 (3H, s), 2.25-2.35 (1H, m) 2.41 (1H, dd, J = 15.5, 3.2 Hz), 2.49 (1H, dd, J = 15.5, 9.5 Hz), 2.54-2.60 (1H , m), 2.66 (1H, d, J = 6.0 Hz), 2.65-2.76 (1H, m), 2.96 (1H, dd, J = 16.0, 4.2 Hz), 3.03 (1H, dd, J = 16.1, 6.7 Hz), 3.11 (1H, quintet, J = 6.8 Hz), 3.71-3.76 (1H, m ), 4.31 (1H, ddd, J = 9.2, 5.9, 3.2 Hz), 4.65 (2H, s), 5.43 (1H, dd, J = 6.0, 4 , 3 Hz), 5.58 (1H, ddd, J = 15.8, 6.4, 4.6 Hz), 5.66 (1H, dd, J = 15.8, 6.1 Hz), 6 23 (1H, t, J = 7.3 Hz); 6.63 (1H, s); 7.18 (1H, s); MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₃₅ F ₃ N ₄ O ₅ SNa [M + Na ⁺ ] 607.2, found 607.2.

Соединение 96: К раствору азида 98 (21,0 мг, 35,9 мкмоль) в ТГФ (0,6 мл) добавляли PMe₃ (1,0 М в ТГФ, 43,1 мкл, 43,1 мкмоль). После перемешивания при КТ в течение 2 мин добавляли воду (0,1 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение 3 час. Добавляли PMe₃ (1,0 М в ТГФ, 7,2 мкл, 7,2 мкмоль) и смесь перемешивали при КТ в течение 1,5 час. К смеси добавляли 28% NH₄OH (водный) (54,5 мкл). После перемешивания в течение 1 час смесь непосредственно очищали препаративной ТСХ (CH₂Cl₂/MeOH = 100:7,5), получая амин 96 (15,9 мг, 28,5 мкмоль, 79%) в виде бесцветного твердого вещества; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,05 (3H, c), 1,12 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,23 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,34 (3H, c), 2,12 (3H, д, J=0,7 Гц), 2,24-2,35 (1H, м), 2,39 (1H, дд, J=15,4, 3,0 Гц), 2,49 (1H, дд, J=15,4, 9,8 Гц), 2,54-2,63 (1H, м), 2,66-2,76 (1H, м), 2,97 (1H, дд, J=16,2, 4,2 Гц), 3,03 (1H, дд, J=16,3, 6,5 Гц), 3,10 (1H, квинтeт, J=6,8 Гц), 3,74 (1H, дд, J=6,7, 3,5 Гц), 4,18 (2H, c), 4,34 (1H, дд, J=9,8, 2,9 Гц), 5,43 (1H, дд, J=6,0, 4,3 Гц), 5,55-5,64 (1H, м), 5,67 (1H, дд, J=15,9, 5,8 Гц), 6,24 (1H, ушир.т, J=7,3 Гц), 6,66 (1H, c), 7,10 (1H, c); МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₃₈F₃N₂O₅S [M+Н⁺] 559,2, найдено 559,2. Compound 96: To a solution of azide 98 (21.0 mg, 35.9 μmol) in THF (0.6 ml) was added PMe ₃ (1.0 M in THF, 43.1 μl, 43.1 μmol). After stirring at RT for 2 minutes, water (0.1 ml) was added and the mixture was stirred at RT for 3 hours. PMe ₃ (1.0 M in THF, 7.2 μl, 7.2 μmol) was added and the mixture was stirred at RT for 1.5 hours. To the mixture was added 28% NH ₄ OH (aq) (54.5 μl). After stirring for 1 hour, the mixture was directly purified by preparative TLC (CH ₂ Cl ₂ / MeOH = 100: 7.5) to give amine 96 (15.9 mg, 28.5 μmol, 79%) as a colorless solid; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.05 (3H, s), 1.12 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.23 (3H, d, J = 6.8 Hz ), 1.34 (3H, s), 2.12 (3H, d, J = 0.7 Hz), 2.24-2.35 (1H, m), 2.39 (1H, dd, J = 15.4, 3.0 Hz), 2.49 (1H, dd, J = 15.4, 9.8 Hz), 2.54-2.63 (1H, m), 2.66-2.76 (1H, m), 2.97 (1H, dd, J = 16.2, 4.2 Hz), 3.03 (1H, dd, J = 16.3, 6.5 Hz), 3.10 ( 1H, quintet, J = 6.8 Hz), 3.74 (1H, dd, J = 6.7, 3.5 Hz), 4.18 (2H, s), 4.34 (1H, dd, J = 9.8, 2.9 Hz), 5.43 (1H, dd, J = 6.0, 4.3 Hz), 5.55-5.64 (1H, m), 5.67 (1H, dd, J = 15.9, 5.8 Hz), 6.24 (1H, br t, J = 7.3 Hz), 6.66 (1H, s), 7.10 (1H, s); MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₃₈ F ₃ N ₂ O ₅ S [M + H ⁺ ] 559.2, found 559.2.

Соединение 97: К раствору амина 96 (15,9 м, 28,5 мкмоль) в CH₃CN (0,78 мл) добавляли 37% HCHO (водный) (31,4 мкл, 0,143 ммоль), затем NaBH₃CN (1,0 М в ТГФ, 85,5 мкл, 85,5 мкмоль) и смесь перемешивали при КТ в течение 20 мин. Добавляли AcOH (1 каплю) и смесь перемешивали при КТ в течение 40 мин. Смесь очищали непосредственно препаративной ТСХ (CH₂Cl₂/MeOH = 100:8), получая продукт 97 (15,6 мг, 26,6 мкмоль, 93%) в виде бесцветного твердого вещества; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,05 (3H, c), 1,12 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,23 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,33 (3H, c), 2,17 (3H, c), 2,24-2,35 (1H, м), 2,43 (1H, дд, J=15,7, 3,6 Гц), 2,49 (1H, дд, J=15,6, 9,1 Гц), 2,55-2,64 (2H, м, включая ОН), 2,68-2,77 (1H, м), 2,80 (3H, c), 2,81 (3H, c), 2,92-3,06 (2H, м), 3,10 (1H, квинтeт, J=6,8 Гц), 3,69-3,76 (1H, м), 4,25-4,34 (1H, м), 4,33 (2H, c), 5,42 (1H, т, J=5,5 Гц), 5,57 (1H, дт, J=15,8, 6,3 Гц), 5,66 (1H, дд, J=15,7, 6,4 Гц), 6,22 (1H, ушир.т, J=7,2 Гц), 6,64 (1H, c), 7,30 (1H, c); МС-НР (ESI) вычислено для С₂₉Н₄₂F₃N₂O₅S [M+H⁺] 580,2, найдено 580,2. Compound 97: To a solution of amine 96 (15.9 m, 28.5 μmol) in CH ₃ CN (0.78 ml) was added 37% HCHO (aq) (31.4 μl, 0.143 mmol), then NaBH ₃ CN ( 1.0 M in THF, 85.5 μl, 85.5 μmol) and the mixture was stirred at RT for 20 minutes. AcOH (1 drop) was added and the mixture was stirred at RT for 40 minutes. The mixture was purified directly by preparative TLC (CH ₂ Cl ₂ / MeOH = 100: 8) to give product 97 (15.6 mg, 26.6 μmol, 93%) as a colorless solid; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.05 (3H, s), 1.12 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.23 (3H, d, J = 6.8 Hz ), 1.33 (3H, s), 2.17 (3H, s), 2.24-2.35 (1H, m), 2.43 (1H, dd, J = 15.7, 3.6 Hz), 2.49 (1H, dd, J = 15.6, 9.1 Hz), 2.55-2.64 (2H, m, including OH), 2.68-2.77 (1H, m ), 2.80 (3H, s), 2.81 (3H, s), 2.92-3.06 (2H, m), 3.10 (1H, quintet, J = 6.8 Hz), 3 69-3.76 (1H, m), 4.25-4.34 (1H, m), 4.33 (2H, s), 5.42 (1H, t, J = 5.5 Hz), 5.57 (1H, dt, J = 15.8, 6.3 Hz), 5.66 (1H, dd, J = 15.7, 6.4 Hz), 6.22 (1H, broad t, J = 7, 2 Hz), 6,64 (1H, c) , 7,30 (1H, c); MS-HP (ESI) calculated for C ₂₉ H ₄₂ F ₃ N ₂ O ₅ S [M + H ⁺ ] 580.2, found 580.2.

Соединения 94 и 95: К смеси 59 (18,9 мг, 33,8 мкмоль) и Et₃N (18,8 мкл, 0,135 ммоль) в CH₂Cl₂ (1 мл) добавляли TsCl (12,9 мг, 67,5 мкмоль) и DMAP (2,1 мг, 16,9 мкмоль) при 0°C. После перемешивания при КТ в течение 1,5 час смесь разбавляли EtOAc и фильтровали через подушку силикагеля (промывка EtOAc). После концентрирования остаток очищали препаративной ТСХ (гексан/EtOAc = 1:1), получая тозилат 94 (8,5 мг, 11,9 мкмоль, 35%) и хлорид 95 (4,3 мг, 7,44 мкмоль, 22%); оба в виде бесцветного твердого вещества; Compounds 94 and 95: To a mixture of 59 (18.9 mg, 33.8 μmol) and Et ₃ N (18.8 μl, 0.135 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (1 ml) was added TsCl (12.9 mg, 67 5 μmol) and DMAP (2.1 mg, 16.9 μmol) at 0 ° C. After stirring at RT for 1.5 hours, the mixture was diluted with EtOAc and filtered through a pad of silica gel (washing with EtOAc). After concentration, the residue was purified by preparative TLC (hexane / EtOAc = 1: 1) to obtain tosylate 94 (8.5 mg, 11.9 μmol, 35%) and chloride 95 (4.3 mg, 7.44 μmol, 22%) ; both as a colorless solid;

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,06 (3H, c), 1,12 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,23 (3H, д, J=6,7 Гц), 1,33 (3H, c), 1,99 (1H, д, J=5,5 Гц), 2,10 (3H, c), 2,25-2,34 (1H, м) 2,41 (1H, дд, J=15,5, 3,3 Гц), 2,47 (3H, c), 2,48 (1H, дд, J=15,7, 9,4 Гц), 2,51-2,63 (1H, м), 2,63 (1H, д, J=6,1 Гц, OH), 2,64-2,75 (1H, м), 2,91-3,05 (2H, м), 3,10 (1H, квинтeт, J=6,8 Гц), 3,70-3,75 (1H, м), 4,30 (1H, ддд, J=9,3, 6,1, 3,2 Гц), 5,32 (2H, c), 5,41 (1H, дд, J=5,8,4,5 Гц), 5,57 (1H, ддд, J=15,8, 6,4, 4,6 Гц), 5,65 (1H, дд, J=15,8, 6,0 Гц), 6,21 (1H, т, J=7,1 Гц), 6,59 (1H, c), 7,18 (1H, c), 7,37 (2H, д, J=8,1 Гц), 7,84 (2H, д, J=8,3 Гц); МС-НР (ESI) вычислено для С₃₄Н₄₂F₃NO₈S₂Na[M+Na⁺] 736,2, найдено 736,3. ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.06 (3H, s), 1.12 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.23 (3H, d, J = 6.7 Hz ), 1.33 (3H, s), 1.99 (1H, d, J = 5.5 Hz), 2.10 (3H, s), 2.25-2.34 (1H, m) 2, 41 (1H, dd, J = 15.5, 3.3 Hz), 2.47 (3H, s), 2.48 (1H, dd, J = 15.7, 9.4 Hz), 2.51 -2.63 (1H, m), 2.63 (1H, d, J = 6.1 Hz, OH), 2.64-2.75 (1H, m), 2.91-3.05 (2H , m), 3.10 (1H, quintet, J = 6.8 Hz), 3.70-3.75 (1H, m), 4.30 (1H, ddd, J = 9.3, 6.1 , 3.2 Hz), 5.32 (2H, s), 5.41 (1H, dd, J = 5.8.4.5 Hz), 5.57 (1H, ddd, J = 15.8, 6.4, 4.6 Hz), 5.65 (1H, dd, J = 15.8, 6.0 Hz), 6.21 (1H, t, J = 7.1 Hz), 6.59 ( 1H, s), 7.18 (1H, s), 7.37 (2H, d, J = 8.1 Hz), 7.84 (2H, d, J = 8.3 Hz); MS-HP (ESI) calculated for C ₃₄ H ₄₂ F ₃ NO ₈ S ₂ Na [M + Na ⁺ ] 736.2, found 736.3.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,06 (3Н, c), 1,12 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,23 (3H, д, J=6,7 Гц), 1,34 (3H, c), 2,00 (1H, д, J=5,6 Гц, ОН), 2,15 (3Н, c), 2,25-2,35 (1H, м), 2,41 (1H, дд, J=15,5, 3,2 Гц), 2,49 (1H, дд, J=15,5, 9,4 Гц), 2,53-2,62 (1H, м), 2,69 (1H, д, J=6,1 Гц, ОН), 2,66-2,76 (1H, м), 2,92-3,05 (2Н, м), 3,11 (1H, квинтeт, J=6,4 Гц), 3,70-3,76 (1H, м), 4,32 (1H, ддд, J=9,2, 5,9, 3,1 Гц), 4,85 (2Н, c), 5,43 (1H, дд, J=6,0, 4,4 Гц), 5,59 (1H, ддд, J=15,9, 6,4, 4,5 Гц), 5,66 (1H, дд, J=15,9, 6,1 Гц), 6,23 (1H, т, J=6,8 Гц), 6,63 (1H, c), 7,20 (1H, c); МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₃₅ClF₃NO₅Sna [M+Na⁺] 600,2, найдено 600,2. ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.06 (3H, s), 1.12 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.23 (3H, d, J = 6.7 Hz ), 1.34 (3H, s), 2.00 (1H, d, J = 5.6 Hz, OH), 2.15 (3H, s), 2.25-2.35 (1H, m) 2.41 (1H, dd, J = 15.5, 3.2 Hz), 2.49 (1H, dd, J = 15.5, 9.4 Hz), 2.53-2.62 (1H , m), 2.69 (1H, d, J = 6.1 Hz, OH), 2.66-2.76 (1H, m), 2.92-3.05 (2H, m), 3, 11 (1H, quintet, J = 6.4 Hz), 3.70-3.76 (1H, m), 4.32 (1H, ddd, J = 9.2, 5.9, 3.1 Hz) 4.85 (2H, s), 5.43 (1H, dd, J = 6.0, 4.4 Hz), 5.59 (1H, ddd, J = 15.9, 6.4, 4, 5 Hz), 5.66 (1H, dd, J = 15.9, 6.1 Hz), 6.23 (1H, t, J = 6.8 Hz), 6.63 (1H, s), 7 20 (1H, s); MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₃₅ ClF ₃ NO ₅ Sna [M + Na ⁺ ] 600.2, found 600.2.

Соединение 99: К раствору 59 (6,9 мг, 12,3 мкмоль) в CH₂Cl₂ (0,4 мл) добавляли активированный MnO₂ (приобретенный из Acros, 26,8 мг, 0,308 ммоль). После энергичного перемешивания при КТ в течение 4 час смесь фильтровали через подушку целита, которую промывали EtOAc. После концентрирования остаток очищали препаративной ТСХ (гексан/EtOAc = 1:1), получая альдегид 99 (2,7 мг, 4,84 мкмоль, 39%) в виде бесцветного твердого вещества; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,06 (3H, c), 1,13 (3H, д, J=7,2 Гц), 1,24 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,35 (3H, c), 1,96 (1Н, д, J=5,6 Гц, ОН), 2,22 (3H, д, J=0,7 Гц), 2,25-2,35 (1H, м), 2,44 (1H, дд, J=15,4, 3,5 Гц), 2,46 (1H, д, J=5,9 Гц, OH), 2,51 (1H, дд, J=15,7, 9,3 Гц), 2,57-28 (1H, м), 2,68-2,79 (1H, м), 2,96-3,03 (2H, м), 3,10 (1H, квинтeт, J=6,8 Гц), 3,71-3,76 (1H, м), 4,31 (1H, ддд, J=9,4, 6,3, 3,5 Гц), 5,45 (1H, т, J=5,0 Гц), 5,53-5,63 (1H, м), 5,67 (1H, дд, J=15,7, 6,2 Гц), 6,24 (1H, т, J=6,6 Гц), 6,72 (1H, c), 7,57 (1H, д, J=0,9 Гц), 10,01 (1H, д, J=1,2 Гц). Compound 99: Activated MnO ₂ (purchased from Acros, 26.8 mg, 0.308 mmol) was added to a solution of 59 (6.9 mg, 12.3 μmol) in CH ₂ Cl ₂ (0.4 ml). After vigorous stirring at RT for 4 hours, the mixture was filtered through a pad of celite, which was washed with EtOAc. After concentration, the residue was purified by preparative TLC (hexane / EtOAc = 1: 1) to give 99 aldehyde (2.7 mg, 4.84 μmol, 39%) as a colorless solid; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.06 (3H, s), 1.13 (3H, d, J = 7.2 Hz), 1.24 (3H, d, J = 6.9 Hz ), 1.35 (3H, s), 1.96 (1H, d, J = 5.6 Hz, OH), 2.22 (3H, d, J = 0.7 Hz), 2.25-2 , 35 (1H, m), 2.44 (1H, dd, J = 15.4, 3.5 Hz), 2.46 (1H, d, J = 5.9 Hz, OH), 2.51 ( 1H, dd, J = 15.7, 9.3 Hz), 2.57-28 (1H, m), 2.68-2.79 (1H, m), 2.96-3.03 (2H, m), 3.10 (1H, quintet, J = 6.8 Hz), 3.71-3.76 (1H, m), 4.31 (1H, ddd, J = 9.4, 6.3, 3.5 Hz), 5.45 (1H, t, J = 5.0 Hz), 5.53-5.63 (1H, m), 5.67 (1H, dd, J = 15.7, 6 , 2 Hz), 6.24 (1H, t, J = 6.6 Hz), 6.72 (1H, s), 7.57 (1H, d, J = 0.9 Hz), 10.01 ( 1H, d, J = 1.2 Hz).

Соединение 100: К раствору альдегида 99 (4,6 мг, 8,25 мкмоль) в CH₃CN (0,5 мл) при 0°C добавляли MeNH₂ (2,0 М в ТГФ, 41,3 мкл, 41,3 мкмоль). После перемешивания при 0°C в течение 15 мин добавляли NaBH₃CN (1,0 М в ТГФ; 25 мкл; 25 мкмоль). После перемешивания при 0°C в течение 0,5 час добавляли AcOH (3 капли). После перемешивания при 0°C в течение 2 час добавляли 28% NH₄OH (водный)(40 мкл) и смесь перемешивали при КТ в течение 10 мин. Смесь непосредственно дважды очищали препаративной ТСХ (CH₂Cl₂/MeOH = 100:9), получая 100 (2,4 мг, 4,19 мкмоль, 51%) в виде бесцветного твердого вещества; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,05 (3H, c), 1,12 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,23 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,34 (3H, c), 2,13 (3H, c), 2,25-2,34 (1H, м), 2,39 (1H, дд, J=15,3, 3,0 Гц), 2,49 (1H, дд, J=15,3, 9,7 Гц), 2,56 (3H, c), 2,54-2,64 (1H, м), 2,66-2,75 (1H, м), 2,89 (1H, д, J=5,1 Гц), 2,94-3,05 (2H, м), 3,11 (1H, квинтeт, J=6,8 Гц), 3,74 (1H, дд, J=6,6, 3,5 Гц), 4,08 (2H, c), 4,34 (1H, дд, J=9,6, 2,9 Гц), 5,43 (1H, дд, J=6,2, 4,1 Гц), 5,56-5,63 (1H, м), 5,66 (1H, дд, J=15,9, 5,7 Гц), 6,24 (1H, т, J=7,3 Гц), 6,66 (1H, c), 7,11 (1H, c); МС-НР (ESI) вычислено для С₂₈Н₄₀F₃N₂O₅S [M+H⁺] 573,3, найдено 573,3. Compound 100: To a solution of aldehyde 99 (4.6 mg, 8.25 μmol) in CH ₃ CN (0.5 ml) at 0 ° C was added MeNH ₂ (2.0 M in THF, 41.3 μl, 41, 3 μmol). After stirring at 0 ° C for 15 min, NaBH ₃ CN (1.0 M in THF; 25 μl; 25 μmol) was added. After stirring at 0 ° C for 0.5 hour, AcOH (3 drops) was added. After stirring at 0 ° C for 2 hours, 28% NH ₄ OH (water) (40 μl) was added and the mixture was stirred at RT for 10 minutes. The mixture was directly purified twice by preparative TLC (CH ₂ Cl ₂ / MeOH = 100: 9) to give 100 (2.4 mg, 4.19 μmol, 51%) as a colorless solid; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.05 (3H, s), 1.12 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.23 (3H, d, J = 6.8 Hz ), 1.34 (3H, s), 2.13 (3H, s), 2.25-2.34 (1H, m), 2.39 (1H, dd, J = 15.3, 3.0 Hz), 2.49 (1H, dd, J = 15.3, 9.7 Hz), 2.56 (3H, s), 2.54-2.64 (1H, m), 2.66-2 75 (1H, m), 2.89 (1H, d, J = 5.1 Hz), 2.94-3.05 (2H, m), 3.11 (1H, quintet, J = 6.8 Hz), 3.74 (1H, dd, J = 6.6, 3.5 Hz), 4.08 (2H, s), 4.34 (1H, dd, J = 9.6, 2.9 Hz ), 5.43 (1H, dd, J = 6.2, 4.1 Hz), 5.56-5.63 (1H, m), 5.66 (1H, dd, J = 15.9, 5 , 7 Hz), 6.24 (1H, t, J = 7.3 Hz), 6.66 (1H, s), 7.11 (1H, s); MS-HP (ESI) calculated for C ₂₈ H ₄₀ F ₃ N ₂ O ₅ S [M + H ⁺ ] 573.3, found 573.3.

Пример 10Example 10

Аналоги эпотилона, которые приводят к абляции ксенотрансплантированных опухолей до нерецидивирующего состоянияAnalogs of epothilone, which lead to the ablation of xenograft tumors to a non-recurrent state

Комбинируя химический синтез, молекулярное моделирование и спектроскопические анализы, авторы обнаружили, что введение E-9,10-двойной связи (см. соединение 28 ниже) дает примерно 10-кратное повышение эффективности лекарственного средства в экспериментах на основе ксенотрансплантатов с использованием опухолей MX-1, резистентных к лекарственным средствам (A. Rivkin et al. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 2899; включено в данное описание в виде ссылки). После сопоставления экспериментов in vitro и in vivo, направленных на опухоли типа MX-1, стало очевидным, что 28 по сути более цитотоксичен, чем 2b. Однако другим фактором, который вносит свой вклад, является то, что остаток лактона в ряду 9,10-дегидросоединений является значительно более стабильным в плазме мышей и человека, чем в случае с 9,10-дегидропредставителями того же ряда. Итогом указанных двух дополнительных эффектов было придание 28 способности осуществлять полное подавление опухоли в случае множества ксенотрансплантатов в дозе 3 мг/кг, в отличие от схемы с дозой 30 мг/кг в случае 1.Combining chemical synthesis, molecular modeling, and spectroscopic analyzes, the authors found that the administration of an E-9,10 double bond (see compound 28 below) provides an approximately 10-fold increase in drug efficacy in xenograft experiments using MX-1 tumors drug resistant drugs (A. Rivkin et al. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 2899; incorporated herein by reference). After comparing the in vitro and in vivo experiments aimed at tumors of the MX-1 type, it became apparent that 28 was essentially more cytotoxic than 2b. However, another factor that contributes is that the lactone residue in the series of 9,10-dehydro compounds is significantly more stable in the plasma of mice and humans than in the case of 9,10-dehydro-representatives of the same series. The result of these two additional effects was to give 28 the ability to completely suppress the tumor in the case of multiple xenografts at a dose of 3 mg / kg, in contrast to the regimen with a dose of 30 mg / kg in case 1.

При прекращении обработки пальпируемые опухоли появляются снова у некоторой части животных. Таким образом, по меньшей мере в настоящее время полностью синтетический 28 не полностью соответствует строгим стандартам высоко предпочтительного эффективного терапевтического индекса и элиминации опухолей до нерецидивирующего состояния.Upon termination of treatment, palpable tumors reappear in some part of the animals. Thus, at least at present, the fully synthetic 28 does not fully comply with the strict standards of the highly preferred effective therapeutic index and elimination of tumors to a non-recurrent state.

Указанные данные обратили внимание авторов на последствия замещения трех атомов водорода 26-метильной группы 28 тремя атомами фтора. Введение атомов фтора в данном положении приводит к повышенной стабильности 12,13-двойной связи по отношению к окислению (Smart, B. E. J. Fluorine Chem. 2001, 109, 3; публикация включена в данное изобретение в виде ссылки). Предшествующий опыт свидетельствовал о некотором ослаблении цитотоксичности при замене полярных групп в области C12-C13-двойной связи (A. Rivkin et al. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 2899; публикация включена в данное описание в виде ссылки). В данном описании авторы сообщают о получении посредством общего химического синтеза 9,10-дегидро-26-трифторэпотилонов, особенно фокусируя внимание на уникальной биологической эффективности исходной структуры 29.These data drew the authors' attention to the consequences of the replacement of three hydrogen atoms of the 26-methyl group by 28 with three fluorine atoms. The introduction of fluorine atoms in this position leads to increased stability of the 12,13-double bond with respect to oxidation (Smart, B. E. J. Fluorine Chem. 2001, 109, 3; the publication is incorporated into this invention by reference). Previous experience indicated a slight decrease in cytotoxicity when replacing polar groups in the C12-C13 double bond region (A. Rivkin et al. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 2899; the publication is incorporated herein by reference). In this description, the authors report the production of 9,10-dehydro-26-trifluoroepotilones by means of a general chemical synthesis, especially focusing on the unique biological effectiveness of the initial structure 29.

Внимательно изучали терапевтическую эффективность dEpoB (30 мг/кг), паклитаксела (20 мг/кг) и F₃-deH-dEpoB (29; 20 и 30 мг/кг) против ксенотрансплантатов карциномы молочной железы человека MX-1 в отношении исчезновения опухолей и рецидива, и результаты показаны в таблице 10-1. Каждая группа дозирования состояла из четырех или более мышей nude. Масса тела относится к общей массе тела минус масса опухоли. В случае всех трех соединений достигалось исчезновение опухолей. На 10 день после прекращения лечения рецидивы происходили у 5/10 (dEpoB),
2/7 (паклитаксел) и 0/4 (соединение 29) мышей. Продленные наблюдения после прекращения лечения дозами 29, составляющими 20 мг/кг, показали долговременное отсутствие опухолей вплоть до 27 дня, и в это время 2 из 4 опухолей мышей рецидивировали. Примечательно, что лечение дозами 29, составляющими 30 мг/кг, приводило к полному исчезновению опухолей и отсутствию какого-либо рецидива в течение двух месяцев после прекращения лечения.The therapeutic efficacy of dEpoB (30 mg / kg), paclitaxel (20 mg / kg) and F ₃ -deH-dEpoB ( 29 ; 20 and 30 mg / kg) against xenografts of human MX-1 breast carcinoma against tumor and relapse, and the results are shown in table 10-1. Each dosing group consisted of four or more nude mice. Body weight refers to the total body weight minus the mass of the tumor. In the case of all three compounds, the disappearance of tumors was achieved. On day 10 after discontinuation of treatment, relapses occurred in 5/10 (dEpoB),
2/7 (paclitaxel) and 0/4 (compound 29) mice. Extended observations after discontinuation of treatment with doses of 29, amounting to 20 mg / kg, showed a long-term absence of tumors up to 27 days, at which time 2 out of 4 tumors of mice recurred. It is noteworthy that treatment with doses of 29, amounting to 30 mg / kg, led to the complete disappearance of tumors and the absence of any relapse within two months after cessation of treatment.

Таблица 10-1Table 10-1
Терапевтическое действие dEpoB, паклитаксела и FTherapeutic effects of dEpoB, paclitaxel and F ₃₃ -deH-dEpoB против ксенотрансплантата MX-1 у мышей nude-deH-dEpoB versus MX-1 xenograft in nude mice ^[a][a] ЛекарственноеMedicinal
средствоmeans ДозаDose
(мг/кг)(mg / kg) Изменения массы тела (%)Changes in body weight (%) Опухоль, удаляемая после Q2Dx6 6 час в/в-инфузииTumor removed after Q2Dx6 6 hours IV infusion Опухоль, вновь появившаясяRe-emerging tumor
на 10 день после введения10 days after administration На 4 деньOn day 4
после прекращения введенияafter cessation of administration На 8 день после прекращения введенияOn day 8 after cessation of administration dEpoB (1)dEpoB (1) 30thirty -25,3±2,1-25.3 ± 2.1 -9,1±4,1-9.1 ± 4.1 10/1010/10 5/105/10 ПаклитакселPaclitaxel 20twenty -23,9±3,7-23.9 ± 3.7 -8,7±0,7-8.7 ± 0.7 7/77/7 2/72/7 F₃-deH-F ₃ -deH- 20twenty -22,4±0,6-22.4 ± 0.6 -7,3±0,7-7.3 ± 0.7 4/44/4 0/4^[b] 0/4 ^[b] dEpoB (29)dEpoB (29) 30thirty -27,1±2,7-27.1 ± 2.7 -17,4±5,5-17.4 ± 5.5 4/44/4 0/4^[b] 0/4 ^{[b] [a]} 50 мг ткани ксенотрансплантата карциномы молочной железы человека MX-1 имплантировали п/к в 0 день. Лечение Q2Dx6 с использованием 6-часовой в/в-инфузии начинали на 8 день и заканчивали на 18 день.
^[b] Регистрируемое повторное появление опухоли у 2/4 на 27-й день после прекращения лечения. Не наблюдалось дальнейшего повторного появления опухолей в течение 28-64-го дней после прекращения лечения.
^[c] Отсутствие повторного появления опухолей в течение 64 дней после прекращения лечения, когда был закончен эксперимент. ^[a] 50 mg of human mammary carcinoma xenograft tissue MX-1 was implanted sc at 0 day. Treatment with Q2Dx6 using a 6-hour iv infusion began on day 8 and ended on day 18.
^[b] Registered re-emergence of the tumor in 2/4 on the 27th day after discontinuation of treatment. No further re-emergence of tumors was observed within 28-64 days after cessation of treatment.
^[c] Lack of re-emergence of tumors within 64 days after discontinuation of treatment when the experiment was completed.

Снижение дозы агента 29 до 10 мг/кг (Q2D) также приводило к исчезновению опухолей MX-1, но для достижения данного результата требовалось девять доз (фиг.57, 58 и 59A). В качестве дополнительной проверки химиотерапевтическое лечение задерживали вплоть до того, как размер опухоли достигал 0,5 г (~2,3% массы тела). Лечение дозами 29, составляющими 25 мг/кг (Q2Dx7), вызывало исчезновение 4/4 опухолей мышей. В отличие от этого требовались дозы dEpoB, составляющие 30 мг/кг (Q2Dx8), для того, чтобы индуцировать исчезновение опухолей у 3 из 4 мышей. Однако в отличие от случая с применением 29 кажущееся исчезновение, которое происходило после лечения dEpoB, подвергалось рецидивам с течением времени (фиг.59B).Reducing the dose of agent 29 to 10 mg / kg (Q2D) also led to the disappearance of MX-1 tumors, but nine doses were required to achieve this result (Figs. 57, 58 and 59A). As an additional check, chemotherapy treatment was delayed until the tumor size reached 0.5 g (~ 2.3% of body weight). Treatment with doses of 29, constituting 25 mg / kg (Q2Dx7), caused the disappearance of 4/4 tumor of mice. In contrast, dEpoB doses of 30 mg / kg (Q2Dx8) were required in order to induce the disappearance of tumors in 3 of 4 mice. However, unlike the case with application 29, the apparent disappearance that occurred after dEpoB treatment underwent relapse over time (Fig. 59B).

Тот факт, что агент 29 полностью подавлял рост ксенотрансплантатов карциномы молочной железы человека MX-1, сокращал опухоли и вызывал их исчезновение в течение такого длительного периода времени как 64 дня, производит глубокое впечатление. Более того, после курсов лечения, проводимых с помощью 29 (20 мг/кг или 30 мг/кг Q2Dx6, 6-часовая в/в-инфузия, таблица 1 выше) масса тела организмов с ксенотрансплантатами возвращалась к контрольному уровню до лечения в течение 12-18 дней после прекращения лечения. Указанное наблюдение свидетельствует об отсутствии повреждения жизненно важных органов. При низких лечебных дозах 10 мг/кг, Q2DX12 (фиг.59B) максимальное снижение массы тела составляло только 12% с приростом массы тела на 6% во время последних трех доз. Масса тела возвращалась к контрольному уровню до лечения всего за три дня после прекращения лечения. В таблице 1 выше показано, что животные могут переживать потери массы тела до 27%. Достигаемый в данном случае запас терапевтической безопасности удивительно широк для лечебного противоопухолевого терапевтического средства.The fact that Agent 29 completely suppressed the growth of the MX-1 human breast carcinoma xenografts, shrunk the tumors and caused them to disappear for such a long period of time as 64 days, makes a deep impression. Moreover, after treatment with 29 (20 mg / kg or 30 mg / kg Q2Dx6, 6-hour iv infusion, table 1 above), the body weight of xenograft organisms returned to the control level before treatment for 12 -18 days after discontinuation of treatment. This observation indicates the absence of damage to vital organs. At low therapeutic doses of 10 mg / kg, Q2DX12 (FIG. 59B), the maximum decrease in body weight was only 12% with an increase in body weight of 6% during the last three doses. Body weight returned to the control level before treatment only three days after the cessation of treatment. Table 1 above shows that animals can experience weight loss of up to 27%. The therapeutic safety margin achieved in this case is surprisingly wide for a therapeutic antitumor therapeutic agent.

Также оценивали терапевтическую эффективность 29 против ксенотрансплантата карциномы легкого человека (A549) и ксенотрансплантатов резистентной к паклитакселу карциномы легкого человека A549/Taxol (фиг.59C и 59D). Медленно растущие ксенотрансплантаты карциномы легкого A549 лечили 29 (25 мг/кг, Q2DX6, дважды, восемь дней отдельно), и это приводило к 99,5% подавлению опухолей в конце концов с полным искоренением 4 из 4 опухолей после дополнительных двух доз (фиг.59C). Интересно, что масса тела мышей снижалась до 35% без какой-либо летальности и прекращение лечения приводило к быстрому восстановлению массы тела почти до контрольного уровня до лечения (фиг.59C). В отличие от этого параллельное исследование с применением dEpoB (30 мг/кг, Q2Dx6) приводило к подавлению 97,6% опухолей, но не приводило к искоренению опухолей. В дополнительном исследовании 29 (доза 20 мг/кг) по отношению к резистентному ксенотрансплантату A549/Taxol (фиг.59D) рост опухолей полностью подавлялся и опухоли в конечном итоге уменьшались на 24,4% от контроля до лечения. В ходе данного исследования максимальная масса тела снижалась на 24%, однако после прекращения лечения лекарственным средством масса тела возвращалась до уровня 90% от контроля до лечения. В сравнительном исследовании (E)-9,10-дегидро-dEpoB (28, группа 4 мг/кг) рост опухолей подавлялся на 41,6%.The therapeutic efficacy of 29 against human lung carcinoma xenograft (A549) and paclitaxel resistant xenograft carcinoma of human lung carcinoma A549 / Taxol (FIGS. 59C and 59D) was also evaluated. Slow-growing A549 lung carcinoma xenografts treated 29 (25 mg / kg, Q2DX6, twice, eight days separately), and this resulted in 99.5% tumor suppression, with complete eradication of 4 out of 4 tumors after an additional two doses (FIG. 59C). Interestingly, the body weight of the mice was reduced to 35% without any mortality and the cessation of treatment led to a rapid restoration of body weight to almost the control level before treatment (Fig. 59C). In contrast, a parallel study using dEpoB (30 mg / kg, Q2Dx6) suppressed 97.6% of the tumors, but did not eradicate the tumors. In an additional study 29 (dose 20 mg / kg) in relation to the resistant A549 / Taxol xenograft (Fig. 59D), tumor growth was completely suppressed and the tumors eventually decreased by 24.4% from the control before treatment. During this study, the maximum body weight decreased by 24%, however, after the cessation of treatment with the drug, body weight returned to the level of 90% from the control to treatment. In a comparative study (E) -9,10-dehydro-dEpoB (28, group 4 mg / kg), tumor growth was inhibited by 41.6%.

Данные, имеющие отношение к анализу того, какие факторы обеспечивают поразительный терапевтический индекс соединения 29, наряду с сопоставимыми данными, имеющими отношение к близко родственным представителям данного ряда, представлены в таблице 10-2. Отмечается, что в отношении присущей цитотоксичности при переходе от EpoB (2b) к dEpoB (1) теряется целый порядок значений. Примерно 60% указанной потери восстанавливается в случае 9,10-дегидро-dEpoB (28). Часть указанной присущей цитотоксичности утрачивается при переходе к соединению 29, которое в клетке имеет токсичность по меньшей мере в ~1,8 раз выше, чем в случае эталонного соединения dEpoB.Data relevant to the analysis of which factors provide a striking therapeutic index for compound 29, along with comparable data related to closely related members of this series, are presented in Table 10-2. It is noted that with respect to intrinsic cytotoxicity, a transition from EpoB (2b) to dEpoB (1) loses an order of magnitude. About 60% of this loss is recovered in the case of 9,10-dehydro-dEpoB (28). Part of this inherent cytotoxicity is lost upon transition to compound 29, which in the cell has a toxicity of at least ~ 1.8 times higher than in the case of the reference compound dEpoB.

Авторы отмечают, что среди 12,13-дегидроэпотилонов, 29 проявляет намного лучшую стабильность в плазме мышей, а также является наиболее стабильным в плазме печени человека S9. Авторы также отмечают, что в 2-наборах 12,13-дегидроизомеров 26-трифтор-содержащий образец привносит пониженную липофильность и в некоторой степени повышенную растворимость в воде (таблица 10-2, ниже). Теперь может быть ясно, что большое преимущество 29 является результатом повышения стабильности в сыворотке и биодоступности.The authors note that among 12,13-dehydroepothilones, 29 exhibits much better stability in the plasma of mice, and is also the most stable in human liver plasma S9. The authors also note that in the 2-sets of 12,13-dehydroisomers, the 26-trifluoro-containing sample brings reduced lipophilicity and somewhat increased solubility in water (Table 10-2, below). It may now be clear that the great advantage 29 is the result of increased serum stability and bioavailability.

Таблица 10-2Table 10-2
Профиль производных dEpoBDEpoB Derivatives Profile CоединенияCompounds Цитотокси-ческая эффектив-ность ICCytotoxic efficacy IC _50fifty (нМ) (nM) ^[a][a] Максима-льноеMaximal
снижение массы тела в % без гибелиweight loss in% without death Стабильность, период полужизниStability, half-life Раствори-мость в воде (мкг/мл)Solubility in water (μg / ml) Липофильность, распределение октанол/вода (POW)Lipophilicity, octanol / water distribution (POW) Схема терапевтического дозирования для Q2D 6-часовая в/в инфузия (мг/кг) Therapeutic dosing schedule for Q2D 6-hour iv infusion (mg / kg ) Относи-тельный терапев-тический индекс при MTDRelative Therapeutic Index for MTD ^[b][b] Плазма мышей (мин)Plasma of mice (min) Фракция S9 печени человека (час)Human liver fraction S9 (hour) EpoB (2b)EpoB (2b) 0,53±0,20.53 ± 0.2 15fifteen 5757 15,815.8 NDNd NDNd 0,6-0,80.6-0.8 ++++++ dEpoB (1)dEpoB (1) 5,6±2,85.6 ± 2.8 3232 46±746 ± 7 1,0±0,11.0 ± 0.1 9,49,4 4,44.4 25-3025-30 ++++++++ deH-dEpoB (28)deH-dEpoB (28) 0,90±0,400.90 ± 0.40 2929th 84±684 ± 6 4,9±0,74.9 ± 0.7 2727 3,33.3 3-43-4 ++++++++ F₃-dEpoB (2)F ₃ -dEpoB (2) 9,3±5,29.3 ± 5.2 2222 66±766 ± 7 1,6±0,41.6 ± 0.4 88 4,14.1 15-2015-20 ++++ F₃-deH-dEpoB (29)F ₃ -deH-dEpoB (29) 3,2±0,33.2 ± 0.3 3333 212±88212 ± 88 10,5±2,310.5 ± 2.3 20twenty 3,33.3 10-3010-30 ++++++++++ ^[a] Значения IC₅₀ приведены для лейкозных клеток CCRF-CEM. Значения основаны на ряде значений из двух экспериментов; все значения получают на основе семи точек концентрации; ND = не определено.
^[b] Ранжированный относительный терапевтический индекс (TI) при MTD (максимальной допустимой дозе):
+ Рост опухоли подавлен на 25-50%.
++ Рост опухоли подавлен на 50-100%.
+++ Опухоль сокращается, но не исчезает.
++++ опухоль исчезает у некоторых или у всех мышей nude с медленным восстановлением массы тела и/или с рецидивом у некоторых мышей в течение одной недели после прекращения лечения.
+++++ Опухоль исчезала у всех мышей nude, масса тела быстро восстанавливалась и/или не наступал рецидив.
Терапевтическое испытание эпотилонов против ксенотрансплантатов человека у мышей nude, таких как MX-1, исследовали в Chou, T. C. et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998, 95, 15798 и в 2001, 98, 8113. ^[a] IC ₅₀ values are given for CCRF-CEM leukemia cells. Values are based on a series of values from two experiments; all values are obtained based on seven concentration points; ND = not defined.
^[b] Ranked relative therapeutic index (TI) for MTD (maximum allowable dose):
+ Tumor growth is inhibited by 25-50%.
++ Tumor growth is suppressed by 50-100%.
+++ The tumor shrinks, but does not disappear.
++++ the tumor disappears in some or all nude mice with slow recovery of body weight and / or with relapse in some mice within one week after treatment termination.
+++++ The tumor disappeared in all nude mice, body weight recovered quickly and / or relapse did not occur.
The therapeutic test of epothilones against human xenografts in nude mice, such as MX-1, was investigated in Chou, TC et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1998, 95, 15798 and 2001, 98, 8113.

Все агенты 1-2 и 28-29 впервые получены с использованием общего синтеза. Практический синтез 1 описан ранее (Rivkin et al. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 2899; White et al. J. Am. Chem. Soc. 2001, 123, 5407; Yoshimura et al. Angew. Chem. 2003, 42, 2518; Rivkin et al., J. Org. Chem. 2002, 124, 7737; каждая публикация включена в данное описание в виде ссылки). Также впервые описаны пути создания 28 и 29, относящиеся к изобретательскому уровню. Избирательное восстановление 9,10-двойной связи 29 давало 2. Поразительные результаты, полученные на основе описанных выше исследований ксенотрансплантатов в отношении наиболее многообещающего в настоящее время соединения 29, несомненно требуют дальнейшего продвижения его подробного токсикологического и фармакокинетического исследований у более высокоорганизованных животных и от них, если это целесообразно, продвижения к клиническим испытаниям на человеке. Такие перспективы полностью изменили природу задачи синтеза от получения пробных образцов к задаче получения количеств указанных новых эпотилоновых агентов, измеряемых многими граммами. Осуществлена важная модернизация предыдущих способов авторов, впервые задуманная и показанная в условиях осуществления изобретения. В частности, в новых протоколах авторов осуществлены большие упрощения в стереоспецифическом конструировании в отношении атомов углерода 3 и 26. Спирт 32 получают, как описано ранее (Rivkin et al. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 2899; включено в данное описание в виде ссылки). Будет отмечено, что в случае нового синтеза стереоцентры 6, 7 и 8 получают из заведомо доступных кетона 30 и альдегида 31. После защиты спирта и гидролиза ацеталя соответствующий альдегид конденсировали с трет-бутилацетатом, получая продукт, подобный альдолю. Так как данная конденсация не контролируется в отношении диастереомеров, требовалась и осуществлена корректирующая мера. Окисление данной смеси 1:1 C3-эпимеров давало кетон 69. После весьма успешного восстановлении Нойори (Noyori et al. J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 5856; публикация включена в данное описание в виде ссылки) в указанных условиях в наличии был спирт 70. Затем осуществляли получение кислоты 25 в несколько дополнительных простых стадий, которые показаны.All agents 1-2 and 28-29 were first obtained using general synthesis. Practical synthesis 1 has been described previously (Rivkin et al. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 2899; White et al. J. Am. Chem. Soc. 2001, 123, 5407; Yoshimura et al. Angew. Chem. 2003, 42, 2518; Rivkin et al., J. Org. Chem. 2002, 124, 7737; each publication is incorporated herein by reference). Also for the first time described ways to create 28 and 29, related to the inventive step. Selective restoration of the 9,10-double bond 29 yielded 2. The astounding results obtained from the xenograft studies described above for the currently most promising compound 29 undoubtedly require further promotion of its detailed toxicological and pharmacokinetic studies in and from more highly organized animals. if appropriate, advancement to clinical trials in humans. Such prospects completely changed the nature of the synthesis problem from obtaining test samples to the task of obtaining quantities of these new epothilone agents, measured in many grams. An important modernization of the previous methods of the authors was carried out, first conceived and shown in the conditions of the invention. In particular, in the new protocols of the authors, great simplifications have been made in the stereospecific construction with respect to carbon atoms 3 and 26. Alcohol 32 is obtained as described previously (Rivkin et al. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 2899; included in this description by reference). It will be noted that in the case of a new synthesis, stereo centers 6, 7 and 8 are obtained from known ketone 30 and aldehyde 31. After protecting the alcohol and hydrolyzing the acetal, the corresponding aldehyde is condensed with tert-butyl acetate to give a product similar to the aldol. Since this condensation is not controlled with respect to diastereomers, a corrective measure was required and implemented. Oxidation of this 1: 1 mixture of C3 epimers gave ketone 69. After a very successful reduction of Noyori (Noyori et al. J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 5856; the publication is incorporated herein by reference) under the indicated conditions in the presence of alcohol was 70. Then acid 25 was produced in several additional simple steps, which are shown.

Схема 12. Синтез ацильного участка 25Scheme 12. Synthesis of the acyl region 25

Реагенты и условия: (a) (i) TrocCl, пиридин, 92%; (ii) п-TsOH·H₂O, 76%; (iii) LDA, трет-бутилацетат, ТГФ, 80%; (iv) периодинан Десс-Мартина, 74%; (b) катализатор Нойори (10 моль.%), MeOH/HCl, H₂, 1200 фунт./кв.дюйм, 80%. (c) (i) TESCl, имидазол, 77%; (ii) Zn, AcOH, ТГФ, 99%; (iii) TBSOTf, 2,6-лутидин, 82%; для остальных стадий см. Rivkin et al. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 2899. Reagents and conditions: (a) (i) TrocCl, pyridine, 92%; (ii) p-TsOH · H ₂ O, 76%; (iii) LDA, tert-butyl acetate, THF, 80%; (iv) Dess Martin periodinan, 74%; (b) Noyori catalyst (10 mol%), MeOH / HCl, H ₂ , 1200 psi, 80%. (c) (i) TESCl, imidazole, 77%; (ii) Zn, AcOH, THF, 99%; (iii) TBSOTf, 2,6-lutidine, 82%; for the remaining stages see Rivkin et al. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 2899.

Новый прямой и легко масштабируемый синтез также разработан для 90 (схема 13). Синтез начинается с взаимодействия коммерчески доступного трифторкетоэфира 82 с аллилбромидом индия. Ключевой стадией в синтезе является специфичная по положению и стереоспецифичная дегидратация полученного в результате третичного спирта с получением 84 (с общим выходом для двух стадий 65%). Стерическое регулирование данной реакции является результатом «биполярного эффекта», при котором сильно оттягивающие электрон группы CF₃ и CO₂Et лучше всего представлены в транс-положении по отношению к возникающей двойной связи. Требуемый йодид 86 получали в две стадии из 84. Алкилирование енолята лития 7, описанного ранее, йодидом 86 в ТГФ давало 88 с выходом 81% и высокой диастереоселективностью (>25:1 de). После удаления защиты вторичного спирта соединение 88 в три стадии превращали в 90, как показано.A new direct and easily scalable synthesis has also been developed for 90 (Scheme 13). The synthesis begins with the reaction of the commercially available trifluorocetoester 82 with indium allyl bromide. The key step in the synthesis is position-specific and stereospecific dehydration of the resulting tertiary alcohol to give 84 (with a total yield of 65% for the two steps). The steric regulation of this reaction is the result of a “bipolar effect” in which the strongly electron-attracting groups CF ₃ and CO ₂ Et are best represented in the trans position with respect to the resulting double bond. The required iodide 86 was obtained in two stages out of 84. Alkylation of lithium enolate 7, previously described, with iodide 86 in THF gave 88 in 81% yield and high diastereoselectivity (> 25: 1 de). After deprotection of the secondary alcohol, compound 88 was converted into 90 in three steps as shown.

Схема 13. Синтез алкильного участка 17Scheme 13. Synthesis of the alkyl section 17

Реагенты и условия: (a) (i) аллилбромид, In, ТГФ-вода (3:1) 48°C, 85%; SOCl₂, пиридин 55°C, 77%; (b) (i) DIBAL-H, CH₂Cl₂, от -78°C до КТ 99%; (ii) I₂, PPh₃, имидазол, CH₂Cl₂, 74%; (c) (i) LHMDS, ТГФ, от -78°C до КТ; (ii) HOAc-ТГФ-H₂O (3:1:1), 81% для двух стадий; (d) (i) AlMe₃, MeONHMe, ТГФ, от 0°C до КТ, 97%; (ii) MeMgBr, ТГФ, 0°C, 53% (73% на основании извлеченного исходного вещества).Reagents and conditions: (a) (i) allyl bromide, In, THF-water (3: 1) 48 ° C, 85%; SOCl ₂ , pyridine 55 ° C, 77%; (b) (i) DIBAL-H, CH ₂ Cl ₂ , −78 ° C. to 99% CT; (ii) I ₂ , PPh ₃ , imidazole, CH ₂ Cl ₂ , 74%; (c) (i) LHMDS, THF, -78 ° C to CT; (ii) HOAc-THF-H ₂ O (3: 1: 1), 81% for two stages; (d) (i) AlMe ₃ , MeONHMe, THF, 0 ° C to CT, 97%; (ii) MeMgBr, THF, 0 ° C, 53% (73% based on the recovered starting material).

При наличии 25 и 90 в результате легко осуществляемой химии путь к 29 был понятен, если следовать протоколам, впервые разработанным авторами в фазе изобретения (A. Rivkin et al. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 2899; включено в данное описание в виде ссылки). Ключевую реакцию метатезиса с замыканием цикла 25 осуществляли в толуоле, используя катализатор Груббса второго поколения (Grubbs, R. H.; Miller, S. J.; Fu, G. C. Acc. Chem. Res. 1995, 28, 446; Trnka, T.M.; Grubbs, R. H. Acc. Chem. Res. 2001, 34, 18; Alkene Metathesis in Organic Chemistry Ed.: Fürstner, A.; Springer, Berlin (1998); Fürstner, А. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 2000, 39, 3012; Schrock, R. R. Top. Organomet. Chem. 1998, 1, 1; каждая публикация включена в данное описание в виде ссылки). Реакция давала исключительно транс-изомер 48 с выходом 71%. После введения остатка тиазола посредством протокола, показанного на схеме 14, следовало удаление двух защитных групп силила с использованием HF-пиридина, тем самым приводя к соединению 29, которое затем превращали посредством восстановления 9,10-олефина в 2 с высоким выходом. Граммовые количества структурно новых эпотилонов получали общим синтезом в условиях лаборатории академического уровня.With 25 and 90 as a result of easy chemistry, the path to 29 was clear if you follow the protocols first developed by the authors in the phase of the invention (A. Rivkin et al. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 2899; included in this description by reference). The key loop closure metathesis reaction 25 was carried out in toluene using a second generation Grubbs catalyst (Grubbs, RH; Miller, SJ; Fu, GC Acc. Chem. Res. 1995, 28, 446; Trnka, TM; Grubbs, RH Acc. Chem Res. 2001, 34, 18; Alkene Metathesis in Organic Chemistry Ed .: Fürstner, A .; Springer, Berlin (1998); Fürstner, A. Angew. Chem. Int . Ed. Engl. 2000, 39, 3012; Schrock , RR Top. Organomet. Chem. 1998, 1, 1; each publication is incorporated herein by reference). The reaction gave exclusively trans-isomer 48 with a yield of 71%. After the thiazole residue was introduced via the protocol shown in Scheme 14, the two silyl protecting groups were removed using HF-pyridine, thereby leading to compound 29, which was then converted by reduction of 9,10-olefin in 2 in high yield. Gram quantities of structurally new epothilones were obtained by general synthesis in a laboratory of an academic level.

Схема 14. Конечные стадии синтеза 26-CFScheme 14. The final stages of the synthesis of 26-CF ₃₃ -(E)-9,10-дегидро-dEpoB (29)- (E) -9,10-dehydro-dEpoB (29)

Реагенты и условия: (a) EDCI, DMAP, CH₂Cl₂, 25, от 0°C до КТ, 86% исходя из сложного трет-бутилового эфира; (b) катализатор Груббса, толуол, 110°C, 20 мин, 71%; (c) (i) KHMDS, 101, ТГФ, от -78°C до -20°C, 70%; (ii) HF-пиридин, ТГФ, 98%.Reagents and conditions: (a) EDCI, DMAP, CH ₂ Cl ₂ , 25, 0 ° C to CT, 86% based on tert-butyl ester; (b) Grubbs catalyst, toluene, 110 ° C, 20 min, 71%; (c) (i) KHMDS, 101, THF, -78 ° C to -20 ° C, 70%; (ii) HF-pyridine, THF, 98%.

ЭкспериментыThe experiments

Общие способы: Реагенты, полученные от коммерческих поставщиков, использовали без дополнительной очистки, если не оговорено особо. Метиленхлорид получали из безводной системы растворителей (пропущенной через колонку, предварительно заполненную окисью алюминия) и использовали без дальнейшей сушки. Все чувствительные к атмосфере и воде реакции осуществляли в высушенной в пламени стеклянной посуде при положительном давлении предварительно очищенного газа аргона. Спектры ЯМР (¹H и ¹³C) регистрировали на Bruker AMX-400 МГц или Bruker Advance DRX-500 МГц, которые указаны отдельно, используя в качестве эталона CDCl₃ (7,27 м.д. для ¹H и 77,0 м.д. для ¹³C) или CD₂Cl₂ (5,32 м.д. для ¹H и 53,5 м.д. для ¹³C). Инфракрасные спектры (ИК) получали на спектрометре Perkin-Elmer FT-IR модель 1600. Оптические вращения получали на цифровом поляриметре JASCO модели DIP-370. Аналитическую тонкослойную хроматографию проводили на пластинах E. Merck с силикагелем 60 F254. Соединения, которые не были УФ-активными, визуализировали, погружая пластины в раствор пара-анисальдегида и нагревая. Препаративную тонкослойную хроматографию осуществляли, используя указанный растворитель, на пластине для ТСХ Whatman® (LK6F силикагель 60A). General methods : Reagents obtained from commercial suppliers were used without further purification, unless otherwise specified. Methylene chloride was obtained from an anhydrous solvent system (passed through a column pre-filled with alumina) and was used without further drying. All reactions sensitive to the atmosphere and water were carried out in a glassware dried in a flame at a positive pressure of previously purified argon gas. NMR spectra ( ¹ H and ¹³ C) were recorded on a Bruker AMX-400 MHz or Bruker Advance DRX-500 MHz, which are indicated separately using CDCl ₃ as a reference (7.27 ppm for ¹ H and 77.0 m ppm for ¹³ C) or CD ₂ Cl ₂ (5.32 ppm for ¹ H and 53.5 ppm for ¹³ C). Infrared spectra (IR) were obtained on a Perkin-Elmer FT-IR Model 1600 spectrometer. Optical rotations were obtained on a JASCO DIP-370 digital polarimeter. Analytical thin layer chromatography was performed on E. Merck silica gel 60 F254 plates. Compounds that were not UV active were visualized by immersing the plates in a solution of para-anisaldehyde and heating. Preparative thin layer chromatography was performed using the indicated solvent on a Whatman® TLC plate (LK6F silica gel 60A).

Химические вещества. Все эпотилоны синтезировали собственными силами (C. R. Harris, S. J. Danishefsky, J. Org. Chem. 1999, 64, 8434; D.-S. Su et al. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1997, 36, 2093; Smart, B. E. J. Fluorine Chem. 2001, 109, 3; F. Yoshimura, et al. Angew. Chem. 2003, 42, 2518; Rivkin et al. J. Org. Chem. 2002, 124, 7737; каждая публикация включена в данное описание в виде ссылки). Паклитаксел (Taxol®) и сульфат винбластина (VBL) приобретали из Sigma. Все указанные соединения растворяли в диметилсульфоксиде для анализов in vitro (за исключением VBL, который растворяли в физиологическом растворе). Для исследование in vivo все эпотилоны и паклитаксел растворяли в наполнителе кремофор/этанол (1:1) и затем разбавляли физиологическим раствором для в/в-инфузии в течение 6 час через хвостовую вену, используя изготовленный по заказу миникатетер (T.-C. Chou et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001, 98, 8113-8118; T.-C. Chou et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1998, 95, 15798-15802; каждая публикация включена в данное описание в виде ссылки). Chemical substances. All epothilones were synthesized on their own (CR Harris, SJ Danishefsky, J. Org. Chem. 1999, 64, 8434; D.-S. Su et al. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1997, 36, 2093; Smart , BEJ Fluorine Chem. 2001, 109, 3; F. Yoshimura, et al. Angew. Chem. 2003, 42, 2518; Rivkin et al. J. Org. Chem. 2002, 124, 7737; each publication is included in this description as a link). Paclitaxel (Taxol®) and vinblastine sulfate (VBL) were purchased from Sigma. All of these compounds were dissolved in dimethyl sulfoxide for in vitro assays (with the exception of VBL, which was dissolved in physiological saline). For an in vivo study, all epothilones and paclitaxel were dissolved in a cremophor / ethanol vehicle (1: 1) and then diluted with saline for iv infusion for 6 hours through the tail vein using a custom minicatheter (T.-C. Chou et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001, 98, 8113-8118; T.-C. Chou et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1998, 95, 15798-15802; each publication included in this description by reference).

Опухоли и линии клеток. Клетки лимфобластного лейкоза человека CCRF-CEM получали от Dr. William Beck, the University of Illinois, Chicago. Клетки карциномы молочной железы человека (MX-1) и карциномы легкого человека (A549) получали из американской коллекции типов культур (ATCC, Rockville, MD). Резистентные к паклитакселу клетки A549/taxol (44-кратная резистентность) создавали способом, описанным выше (T.-C. Chou et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001, 98, 8113-8118; публикация включена в данное описание в виде ссылки). Tumors and cell lines. CCRF-CEM human lymphoblastic leukemia cells were obtained from Dr. William Beck, the University of Illinois, Chicago. Human breast carcinoma cells (MX-1) and human lung carcinomas (A549) were obtained from the American culture type collection (ATCC, Rockville, MD). Paclitaxel-resistant A549 / taxol cells (44-fold resistance) were created by the method described above (T.-C. Chou et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001, 98, 8113-8118; publication included in this description by reference).

Животные. Бестимусных мышей nude, несущих ген nu/nu, получали из NCI, Frederick, MD и использовали для всех ксенотрансплантатов опухолей человека. Использовали самцов мышей 6-недельного возраста или старше, весящих 20-22 г. Лекарственные средства вводили через хвостовую вену в течение 6 часов в/в-инфузией, используя миникатетер для инфузии собственного изготовления и герметичную пробирку (T.-C. Chou et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001, 98, 8113-8118; публикация включена в данное описание в виде ссылки). Для в/в-инфузии использовали многоканальный программируемый шприцевый насос. Обычный объем при 6-часовой инфузии для каждого лекарственного средства в смеси кремофор/этанол (1:1) составлял 100 мл в 2,0 мл физиологического раствора. Объем опухоли оценивали измерением длины × ширину × высоту (или ширину), используя штангенциркуль. В случае несущих опухоли мышей nude в ходе эксперимента масса тела относится к общей массе минус масса опухоли. Все исследования на животных проводились в соответствии с правилами руководства по уходу и использованию животных Национального института здравоохранения и протоколом, одобренным Институтским комитетом по уходу и использованию животных Memorial Sloan-Kettering Cancer Center. Animals. Nude nude mice carrying the nu / nu gene were obtained from NCI, Frederick, MD and used for all xenografts of human tumors. Male mice of 6 weeks of age or older weighing 20-22 g were used. Drugs were administered via the tail vein for 6 hours by intravenous infusion using a self-made mini-catheter for infusion and a sealed tube (T.-C. Chou et al . Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001, 98, 8113-8118; the publication is incorporated herein by reference). For IV infusion, a multi-channel programmable syringe pump was used. The usual volume for a 6-hour infusion for each drug in a cremophor / ethanol mixture (1: 1) was 100 ml in 2.0 ml of physiological saline. Tumor volume was evaluated by measuring length × width × height (or width) using a vernier caliper. In the case of tumor-bearing nude mice during the experiment, body weight refers to the total mass minus the mass of the tumor. All animal studies were carried out in accordance with the rules of the guidelines for animal care and use of the National Institute of Health and the protocol approved by the Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Institute for Animal Care and Use.

Анализы цитотоксичности. В ходе подготовки для анализов цитотоксичности in vitro клетки культивировали с начальной плотностью 2-5×10⁴ клеток в миллилитре. Их поддерживали во влажной атмосфере с 5% CO₂ при 37°C в среде RPMI 1640 (GIBCO/BRL), содержащей пенициллин (100 единиц/мл), стрептомицин (100 мкг/мл, GIBCO/BRL), и 5% инактивированной нагреванием FBS. Для растущих в монослое клеток солидных опухолей (таких как A549) цитотоксичность лекарственного средства определяли в 96-луночных планшетах для микротитрования, используя способ на основе сульфородамина B (P. Skehan et al. J. Natl. Cancer. Inst. 1990, 82, 1107-1112; включено в данное описание в виде ссылки). Для клеток, выращенных в суспензии (таких как CCRF-CEM и их сублинии) цитотоксичность измеряли в двух повторах, используя способ для микрокультуры на основе гидроксида 2,3-бис-(2-метокси-4-нитро-5-сульфофенил)-5-карбоксанилид)-2H-тетразония (XTT) (D. A. Scudiero et al. Cancer Res. 1988, 48, 4827-4833; публикация включена в данное описание в виде ссылки), в 96-луночных планшетах для микротитрования. В случае обоих способов оптическую плотность каждой лунки измеряли с помощью считывающего устройства для микропланшетов (Power Wave XS, Bio-Tek, Winooski, VT). Данные зависимости доза-эффект, полученные для 6-7 концентраций каждого лекарственного средства в двух повторах, анализировали на основе графика медиан эффекта, используя компьютерную программу (T.-C. Chou, M. Hayball. CalcuSyn for Windows, Multiple-drug dose effect analyzer and manual. Biosoft, Cambridge Place, Cambridge, UK (1997); включено в данное описание в виде ссылки). Cytotoxicity assays. In preparation for in vitro cytotoxicity assays, cells were cultured with an initial density of 2-5 × 10 ⁴ cells per milliliter. They were maintained in a humid atmosphere with 5% CO ₂ at 37 ° C in RPMI 1640 medium (GIBCO / BRL) containing penicillin (100 units / ml), streptomycin (100 μg / ml, GIBCO / BRL), and 5% heat inactivated FBS For solid monolayer-growing solid tumor cells (such as A549), drug cytotoxicity was determined in 96-well microtiter plates using a method based on sulforodamine B (P. Skehan et al. J. Natl. Cancer. Inst. 1990, 82, 1107 -1112; incorporated herein by reference). For cells grown in suspension (such as CCRF-CEM and their subline), cytotoxicity was measured in duplicate using a 2,3-bis- (2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl) hydroxide microculture method -carboxanilide) -2H-tetrazonium (XTT) (DA Scudiero et al. Cancer Res. 1988, 48, 4827-4833; publication incorporated herein by reference), in 96-well microtiter plates. In both methods, the optical density of each well was measured using a microplate reader (Power Wave XS, Bio-Tek, Winooski, VT). The dose-response data obtained for 6-7 concentrations of each drug in two repetitions was analyzed on the basis of the median effect graph using a computer program (T.-C. Chou, M. Hayball. CalcuSyn for Windows, Multiple-drug dose effect analyzer and manual, Biosoft, Cambridge Place, Cambridge, UK (1997); incorporated herein by reference).

Стабильность эпотилонов у мышей и во фракции S9 печени человека. Исследование стабильности осуществляли с использованием полностью автоматизированной системы ВЭЖХ, которая состояла из системы приготовления образца Prospekt-2 (Spark Holland, Netherlands) и системы ВЭЖХ Agilent 1100. Коротко, Prospekt 2 захватывал картридж для экстракции C8 и промывал его ацетонитрилом и водой. Автоматический пробоотборник Agilent, установленный на 37°C, отбирал 20 мкл образца, наносил его на картридж, промывал его водой, затем Prospekt-2 направлял поток подвижной фазы через картридж для экстракции на аналитическую колонку Reliance Stable Bond C8 4×80 мм с защитной колонкой (MacMod, Chadds Ford, PA) и элюент контролировали при 250 нм. Подвижная фаза состояла из смеси 53 или 65% ацетонитрила/0,1% муравьиной кислоты при расходе 0,4 мл/мин, так что время удержания представляющего интерес соединения составляло примерно 6 минут. Приготовление образца заключалось в добавлении равных объемов плазмы к PBS до общего объема 300-400 мкл, фильтрование и добавление 0,5-2 мкл субстрата (20 мМ) до достижения примерно 30-50 мАU при 250 нм в анализе ВЭЖХ. Для объединенной фракции микросом печени человека S9 (Xeno Tech, Lenex, KS), 20 мкл (400 мкг) фракции S9 смешивали с 280 мкл PBS, затем действовали, как описано выше. Период отбора образца контролировали автоматическим пробоотборником и собирали данные площади пика, чтобы сравнить скорость исчезновения исходного соединения. Stability of epothilones in mice and in the human liver S9 fraction. The stability study was carried out using a fully automated HPLC system, which consisted of a Prospekt-2 sample preparation system (Spark Holland, Netherlands) and an Agilent 1100 HPLC system. Briefly, Prospekt 2 grabbed a C8 extraction cartridge and washed it with acetonitrile and water. An Agilent auto-sampler set at 37 ° C took 20 μl of the sample, applied it to the cartridge, washed it with water, then Prospekt-2 directed the flow of the mobile phase through the extraction cartridge to a 4 × 80 mm Reliance Stable Bond C8 analytical column with a protective column (MacMod, Chadds Ford, PA) and the eluent were controlled at 250 nm. The mobile phase consisted of a mixture of 53 or 65% acetonitrile / 0.1% formic acid at a flow rate of 0.4 ml / min, so that the retention time of the compound of interest was approximately 6 minutes. Sample preparation consisted of adding equal volumes of plasma to PBS to a total volume of 300-400 μl, filtering and adding 0.5-2 μl of substrate (20 mM) to achieve approximately 30-50 mAU at 250 nm in an HPLC analysis. For the pooled fraction of human liver microsomes S9 (Xeno Tech, Lenex, KS), 20 μl (400 μg) of the S9 fraction was mixed with 280 μl of PBS, then acted as described above. The sampling period was controlled by an automatic sampler and peak area data was collected to compare the rate of disappearance of the starting compound.

Определение коэффициента распределения октанол-вода (POW). Используют способ ВЭЖХ, чтобы оценить распределение октанол-вода. Используют систему ВЭЖХ Agilent 1100 с колонкой Eclipse XDB C18 4,6×250 мм с подвижной фазой в виде смеси 60% ацетонитрил/40% 25 мМ калий-фосфатный буфер при pH 7,4 и скоростью потока 0,8 мл в мин, и элюент контролируют при 250 нм. Используемыми стандартами являются бензиловый спирт, ацетофенон, бензофенон, нафталин, дифениловый эфир и дибензил с известными POW 1,1; 1,7; 3,2; 4,2 и 4,8, соответственно. Используют дихромат натрия, чтобы оценить начало отсчета, которое составляет 2,5 мин, и время удержания для стандартов составляет 3,9; 5,4; 10,6; 14, 18,7 и 19,8 мин, соответственно. Значение k value рассчитывают по формуле k=(t_rt-t₀)/t₀. Линейная регрессия log k против log POW дает прямую линию с r² = 0,966. Данный график используют для оценки значения POW аналогов эпотилона. Determination of octanol-water partition coefficient (POW ). Use the HPLC method to evaluate the distribution of octanol-water. An Agilent 1100 HPLC system was used with an Eclipse XDB C18 column of 4.6 × 250 mm with a mobile phase in the form of a mixture of 60% acetonitrile / 40% 25 mM potassium phosphate buffer at pH 7.4 and a flow rate of 0.8 ml per minute, and the eluent is controlled at 250 nm. The standards used are benzyl alcohol, acetophenone, benzophenone, naphthalene, diphenyl ether and dibenzyl with the known POW 1,1; 1.7; 3.2; 4.2 and 4.8, respectively. Sodium dichromate is used to estimate the reference point, which is 2.5 minutes, and the retention time for standards is 3.9; 5.4; 10.6; 14, 18.7 and 19.8 minutes, respectively. The value of k value is calculated by the formula k = (t _rt -t ₀ ) / t ₀ . Linear regression of log k versus log POW gives a straight line with r ² = 0.966. This graph is used to estimate the POW value of epothilone analogues.

Спектроскопические данные для 29 (26-трифтор-(E)-9,10-дегидро-dEpoB):Spectroscopic data for 29 (26-trifluoro- (E) -9,10-dehydro-dEpoB):

[α]_D ²⁵ -54,6 (с 0,28, СНСl₃); ИК (пленка) ν 3478, 2974, 2929, 1736, 1689, 1449, 1381, 1318, 1247, 1169, 1113, 1039, 983, 867, 736 cм^-1; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,05 (3H, c), 1,12 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,23 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,37 (3H, c), 2,04 (1H, ушир.д, J=3,8 Гц, -OH), 2,12 (3H, c), 2,25-2,33 (1H, м), 2,38 (1H, дд, J=15,3 и 3,0 Гц), 2,48 (1H, дд, J=15,4 и 9,8 Гц), 2,54-2,61 (1H, м), 2,66-2,76 (1H, м), 2,71 (3H, c), 2,96 (1H, дд, J=16,5 и 4,5 Гц), 3,02 (1H, дд, J=16,3 и 6,5 Гц), 3,11 (1H, квинтeт, J=6,7 Гц), 3,19 (1H, ушир.c, =OH), 3,74 (1H, ушир.c), 4,35 (1H, ушир.д, J=9,5 Гц), 5,42 (1H, дд, J=6,2 и 4,1 Гц), 5,60 (1H, ддд, J=15,8, 5,6, и 4,5 Гц), 5,66 (1H, дд, J=15,8 и 5,8 Гц), 6,24 (1H, т, J=7,2 Гц), 6,64 (1H, c), 7,00 (1H, c); ¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) δ 15,1, 16,1, 17,7, 18,5, 19,3, 22,5, 28,8, 31,1, 39,6, 39,7, 45,0, 53,7, 71,4, 75,3, 76,8, 116,7, 120,2, 124,3 [кв, ¹ J(C,F) = 273,4 Гц], 127,9, 130,2 [кв, ³ J(C,F) = 6,0 Гц], 130,6 [кв, ² J(C,F) = 28,4 Гц], 132,5, 136,7, 152,0, 165,4, 170,2, 218,4; МС-НР (ESI) вычислено для С₂₇Н₃₇F₃NO₅S [M+H⁺] 544,2, найдено 544,1.[α] _D ²⁵ -54.6 (c 0.28, CHCl ₃ ); IR (film) ν 3478, 2974, 2929, 1736, 1689, 1449, 1381, 1318, 1247, 1169, 1113, 1039, 983, 867, 736 cm ^-1 ; ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.05 (3H, s), 1.12 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.23 (3H, d, J = 6.8 Hz ), 1.37 (3H, s), 2.04 (1H, broad d, J = 3.8 Hz, -OH), 2.12 (3H, s), 2.25-2.33 (1H , m), 2.38 (1H, dd, J = 15.3 and 3.0 Hz), 2.48 (1H, dd, J = 15.4 and 9.8 Hz), 2.54-2, 61 (1H, m), 2.66-2.76 (1H, m), 2.71 (3H, s), 2.96 (1H, dd, J = 16.5 and 4.5 Hz), 3 , 02 (1H, dd, J = 16.3 and 6.5 Hz), 3.11 (1H, quintet, J = 6.7 Hz), 3.19 (1H, broad s, = OH), 3 74 (1H, broad s), 4.35 (1H, broad d, J = 9.5 Hz), 5.42 (1H, dd, J = 6.2 and 4.1 Hz), 5, 60 (1H, ddd, J = 15.8, 5.6, and 4.5 Hz), 5.66 (1H, dd, J = 15.8 and 5.8 Hz), 6.24 (1H, t , J = 7.2 Hz), 6.64 (1H, s), 7.00 (1H, s); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 15.1, 16.1, 17.7, 18.5, 19.3, 22.5, 28.8, 31.1, 39.6, 39.7 , 45.0, 53.7, 71.4, 75.3, 76.8, 116.7, 120.2, 124.3 [q, ¹ J (C, F) = 273.4 Hz], 127 9, 130.2 [q, ³ J (C, F) = 6.0 Hz], 130.6 [q, ² J (C, F) = 28.4 Hz], 132.5, 136.7 , 152.0, 165.4, 170.2, 218.4; MS-HP (ESI) calculated for C ₂₇ H ₃₇ F ₃ NO ₅ S [M + H ⁺ ] 544.2, found 544.1.

Пример 11Example 11

Исследования in vitroIn vitro studies

Типичный эксперимент включает в себя культивирование клеток (например, CCRF-CEM) с начальной плотностью 2-5×10⁴ клеток в мл. Их поддерживают во влажной атмосфере с 5% CO₂ при 37°C в среде RPMI 1640 (GIBCO/BRL), содержащей пенициллин (100 единиц/мл), стрептомицин (100 мкг/мл) (GIBCO/BRL) и 5% инактивированной нагреванием фетальной сыворотки теленка. В случае клеток, которые выращивали в суспензии (таких как CCRF-CEM и ее сублинии), цитотоксичность измеряют, используя тетразониевый способ для микрокультур на основе гидроксида 2,3-бис(2-метокси-4-нитро-5-сульфофенил)-5-карбоксанилид)-2H-тетразония (XTT), в двух повторах в 96-луночных планшетах для микротитрования. В случае обоих способов оптическую плотность измеряют с использованием считывающего устройства для микропланшетов (EL-340, Bio-Tek, Burlington, VT). Каждая серия содержит шесть или семь концентраций тестируемых лекарственных средств. Данные взаимосвязи доза-эффект анализируют на основе графика медиан эффекта.A typical experiment involves culturing cells (e.g., CCRF-CEM) with an initial density of 2-5 × 10 ⁴ cells per ml. They are maintained in a humid atmosphere with 5% CO ₂ at 37 ° C in RPMI 1640 medium (GIBCO / BRL) containing penicillin (100 units / ml), streptomycin (100 μg / ml) (GIBCO / BRL) and 5% heat inactivated fetal calf serum. In the case of cells that were grown in suspension (such as CCRF-CEM and its subline), cytotoxicity was measured using the tetrasonium method for microcultures based on 2,3-bis (2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl) -5 hydroxide β-carboxanilide) -2H-tetrazonium (XTT), in duplicate in 96-well microtiter plates. In the case of both methods, the optical density is measured using a microplate reader (EL-340, Bio-Tek, Burlington, VT). Each series contains six or seven concentrations of test drugs. The dose-response relationships are analyzed based on a graph of median effects.

T-клетки человека CCRF-CEM, клетки острого лимфобластного лейкоза, их резистентную к тенипозиду подлинию (CCRF-CEM/VM₁) и резистентную к винбластину подлинию (CCRF-CEM/VBL₁₀₀) получены от W. T. Beck (University of Illinois, Chicago, I1).Human T cells CCRF-CEM, acute lymphoblastic leukemia cells, their teniposide resistant subline (CCRF-CEM / VM ₁ ) and vinblastine resistant subline (CCRF-CEM / VBL ₁₀₀ ) were obtained from WT Beck (University of Illinois, Chicago, I1).

В типичном эксперименте, который в общем описан выше, некоторые предлагаемые в изобретении соединения (например, 9,10-дегидро-EpoD) проявляли активность в линиях клеток CCRF-CEM и линиях клеток CCRF-CEM, резистентных к таксолу. Некоторые из указанных соединений проявляют IC₅₀ в диапазоне от 0,0015 до примерно 0,120 на линиях клеток CCRF-CEM. Некоторые другие соединения проявляют IC₅₀ в диапазоне от 0,0015 до примерно 10,5. Некоторые из указанных соединений также проявляют IC₅₀ в диапазоне от 0,011 до примерно 0,80 на линия резистентных клеток CCRF-CEM/Taxol, а некоторые другие соединения проявляют IC₅₀ в диапазоне примерно от 0,011 до 13,0 мкМ. В некоторых вариантах 26F-EpoD проявляет активности в пределах 0,0015 мкМ на линиях клеток CCRF-CEM и в пределах 0,011 мкМ на линиях резистентных клеток CCRF-CEM/Taxol (фиг.11).In a typical experiment, which is generally described above, some of the compounds of the invention (for example, 9,10-dehydro-EpoD) were active in CCRF-CEM cell lines and taxol-resistant CCRF-CEM cell lines. Some of these compounds exhibit an IC ₅₀ in the range of 0.0015 to about 0.120 on CCRF-CEM cell lines. Some other compounds exhibit an IC ₅₀ in the range of 0.0015 to about 10.5. Some of these compounds also exhibit an IC ₅₀ in the range of 0.011 to about 0.80 per line of resistant CCRF-CEM / Taxol cells, and some other compounds exhibit an IC ₅₀ in the range of about 0.011 to 13.0 μM. In some embodiments, 26F-EpoD exhibits activities within 0.0015 μM on CCRF-CEM cell lines and within 0.011 μM on CCRF-CEM / Taxol resistant cell lines (Fig. 11).

Пример 12Example 12

Исследования in vivoIn vivo studies

Обычно для ксенотрансплантатов опухолей использовали бестимусных мышей nude, несущих ген nu/nu. Аутбредных мышей, происходящих от Swiss, получали из Charles River Laboratories. Для большинства экспериментов использовали самцов мышей 8-недельного возраста или старше, весящих 22 г. Лекарственное средство вводили через хвостовую вену посредством 6-часовой в/в-инфузии. Каждую отдельную мышь удерживали сосуде для иммобилизации из полипропиленовой пробирке Falcon с отверстиями для введения лекарственного средства. Объем опухоли оценивали измерением длины × ширину × высоту (или ширину), используя штангенциркуль. Для в/в-инфузии использовали многоканальный программируемый шприцевый насос Harvard PHD2000 (Harvard Apparatus). Все исследования на животных проводили в соответствии с правилами «Руководства по уходу и использованию животных» Национального института здравоохранения и протоколом, одобренным Институтским комитетом по уходу и использованию животных Memorial Sloan-Kettering Cancer Center. В соответствии с нормативами комитета в отношении гуманной обработки несущих опухоли животных мышей подвергали эвтаназии, когда опухоли достигали >10% их общей массы тела.Typically, nude mice bearing the nu / nu gene were used for tumor xenografts. Swiss-derived outbred mice were obtained from Charles River Laboratories. For most experiments, male mice of 8 weeks of age or older weighing 22 g were used. The drug was administered via the tail vein by means of a 6-hour iv infusion. Each individual mouse was held in a vessel for immobilization from a Falcon polypropylene tube with drug injection holes. Tumor volume was evaluated by measuring length × width × height (or width) using a vernier caliper. For IV infusion, a Harvard PHD2000 multi-channel programmable syringe pump (Harvard Apparatus) was used. All animal studies were carried out in accordance with the rules of the National Institute of Health's Guide to the Care and Use of Animals and the protocol approved by the Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Institute for Animal Care and Use. In accordance with committee guidelines for the humane treatment of tumor bearing animals, mice were euthanized when the tumors reached> 10% of their total body weight.

Как изображено на фиг.8, 9,10-дегидро-EpoB тестировали у мышей nude, несущих карциному молочной железы человека MX-1. В общем 9,10-дегидро-EpoB готовили следующим образом: 9,10-дегидро-EpoB растворяли в этаноле и добавляли кремофор (1:1) в концентрации 20 мг/мл. Данный раствор разбавляли физиологическим раствором для в/в-инфузии. Разбавленный раствор использовали для в/в-инфузии в течение одного часа. Затем измеряли размер опухоли и массу тела, используя дозы 10 мг/кг, 20 мг/кг и 30 мг/кг на протяжении 15 дней. Размер опухоли и массу тела также измеряли, используя схему дозирования 0,4 мг/кг Q3Dx2, 0,5 мг/кг Q3Dx2 и 0,6 мг/кг Q3Dx5 (см. фиг.33, 34, 55 и 56). Использовали схему введения дозы на каждый третий день, чтобы уменьшить токсичность. Другие терапевтические исследования 9,10-дегидро-EpoB показаны на фиг.70 и 71 (CCRF-CEM/Taxol Q3Dx5) и на фиг.23 и 24 (HCT-116, Q2Dx7).As shown in FIG. 8, 9,10-dehydro-EpoB was tested in nude mice bearing human breast carcinoma MX-1. In general, 9,10-dehydro-EpoB was prepared as follows: 9,10-dehydro-EpoB was dissolved in ethanol and cremophor (1: 1) was added at a concentration of 20 mg / ml. This solution was diluted with saline for intravenous infusion. The diluted solution was used for iv infusion for one hour. Tumor size and body weight were then measured using doses of 10 mg / kg, 20 mg / kg and 30 mg / kg for 15 days. Tumor size and body weight were also measured using a dosing schedule of 0.4 mg / kg Q3Dx2, 0.5 mg / kg Q3Dx2 and 0.6 mg / kg Q3Dx5 (see FIGS. 33, 34, 55 and 56). A dose schedule was used on every third day to reduce toxicity. Other therapeutic studies of 9,10-dehydro-EpoB are shown in FIGS. 70 and 71 (CCRF-CEM / Taxol Q3Dx5) and in FIGS. 23 and 24 (HCT-116, Q2Dx7).

Соединение 9,10-дегидро-12,13-дезоксипотилон B (изо-490-эпотилон) является в три раза более эффективным, чем dEpoB. Показано, что 9,10-дегидро-12,13-дезоксиэпотилон D тормозит рост опухоли после двух-трех инфузий в дозах 10 мг/кг или 20 мг/кг, каждую из которых вводили через день. Лучше результаты получены у мышей с использованием дозы 30 мг/кг 9,10-дегидро-12,13-дезоксиэпотилона B с использованием 6-часовой инфузии в/в через день. Также показано, что в случае 9,10-дегидро-dEpoB в дозе 5 мг/кг, Q3Dx9, 6-часовой в/в-инфузии, достигается исчезновение опухоли у мышей nude, несущих ксенотрансплантат MX-1, без гибели мышей и только с умеренной потерей массы тела (фиг.74 и 75). По-видимому, это осуществлено благодаря введению аналогов эпотилона каждый третий день, чтобы уменьшить токсичность (см. фиг.53 и 54). В заключение, 9,10-дегидро-12,13-дезоксиэпотилон B проявляет пониженную токсичность по сравнению с другими эпотилонами, более высокую эффективность в задержке опухолевого роста и более высокую стабильность в сыворотке. Другие терапевтические исследования показаны на фиг.17 и 18 (HCT-116, Q2Dx5 и Q3Dx5); на фиг.19 и 20 (A549/Taxol, Q3Dx7); и на фиг.21 и 22 (A549/Taxol, Q2Dx7).The compound 9,10-dehydro-12,13-deoxypotilone B (iso-490-epothilone) is three times more effective than dEpoB. It was shown that 9,10-dehydro-12,13-deoxyepothilone D inhibits tumor growth after two or three infusions at doses of 10 mg / kg or 20 mg / kg, each of which was administered every other day. Better results were obtained in mice using a dose of 30 mg / kg of 9,10-dehydro-12,13-deoxyepotilon B using a 6-hour iv infusion every other day. It was also shown that in the case of 9.10-dehydro-dEpoB at a dose of 5 mg / kg, Q3Dx9, 6-hour iv infusion, tumor disappearance is achieved in nude mice bearing MX-1 xenograft without the death of mice and only with moderate loss of body weight (Fig.74 and 75). Apparently, this was done by administering epothilone analogues every third day to reduce toxicity (see FIGS. 53 and 54). In conclusion, 9,10-dehydro-12,13-deoxyepothilone B exhibits reduced toxicity compared to other epothilones, higher efficacy in delaying tumor growth, and higher serum stability. Other therapeutic studies are shown in FIGS. 17 and 18 (HCT-116, Q2Dx5 and Q3Dx5); Figs. 19 and 20 (A549 / Taxol, Q3Dx7); and FIGS. 21 and 22 (A549 / Taxol, Q2Dx7).

9,10-дегидро-Epo B при введении каждый третий день 9-11 раз 6-часовой в/в-инфузией в дозе 0,4-0,6 мг/кг приводил к сокращению и исчезновению опухоли у мышей nude с имплантированными ксенотрансплантатами карциномы молочной железы человека MX-1 (фиг.68 и 69). Введение через день 8 доз приводило к подавлению роста опухоли, но не к сокращению опухоли. Когда 9,10-дегидро-Epo B вводили через день в количестве 9 доз, имплантированная опухоль продолжала умеренно сокращаться со второго по восьмой день, но масса тела восстанавливалась очень медленно от 76% до 82% от контроля в течение того же периода времени. На десятый день одна четверть опухоли исчезала. Когда вводили дозу 0,6 мг/кг 9,10-дегидро-EpoB, Q2Wx6, 6-часовой инфузией мышам nude с ксенотрансплантатами HCT-116, четыре из четырех мышей погибали от токсичности в течение трех дней после шести доз. 9,10-дегидро-EpoB прекращал рост опухоли CCRF-CEM/Taxol при использовании 0,6 мг/кг, схема Q3Dx5, x2 (фиг.70 и 71).When administered every third day 9-11 times with a 6-hour iv infusion at a dose of 0.4-0.6 mg / kg every third day, the tumor contracted and disappeared in nude mice with implanted carcinoma xenografts human mammary gland MX-1 (FIGS. 68 and 69). The administration of 8 doses every other day led to suppression of tumor growth, but not to reduction of the tumor. When 9.10-dehydro-Epo B was administered every other day in an amount of 9 doses, the implanted tumor continued to decline moderately from the second to the eighth day, but body weight recovered very slowly from 76% to 82% of the control over the same period of time. On the tenth day, one quarter of the tumor disappeared. When a dose of 0.6 mg / kg of 9,10-dehydro-EpoB, Q2Wx6, 6-hour infusion was administered to nude mice with HCT-116 xenografts, four out of four mice died of toxicity within three days after six doses. 9,10-dehydro-EpoB terminated the growth of CCRF-CEM / Taxol tumor using 0.6 mg / kg, scheme Q3Dx5, x2 (Figs. 70 and 71).

26-Трифтор-9,10-дегидро-12,13-дезоксиэпотилон B (F₃-deH-dEpoB), как показано на фигурах, оказывает целебное действие в дозах 20мг/кг и 30 мг/кг, Q2Dx6, 6-часовая инфузия, у модели на мышах nude, имплантированных ксенотрансплантатами карциномы молочной железы человека MX-1. Данные также свидетельствуют о том, что 30 мг/кг, Q2Dx6 приближенно является максимальной переносимой дозой. В дозе 20 мг/кг, Q2Dx6, 6-часовая инфузия, 26-трифтор-9,10-дегидро-12,13-дезоксиэпотилон B приводил к сокращению и исчезновению опухоли у четырех из четырех мышей nude с ксенотрансплантатами карциномы молочной железы человека MX-1. Не наблюдалось повторного появления опухоли на 20-й день после прекращения лечения. На 27-й день после прекращения лечения повторно появлялись 2/4. Не было дальнейшего повторного появления опухолей в течение 28-64 дней после прекращения лечения. В сравнении в случае dEpoB в дозе 30 мг/кг достигалось исчезновение опухоли в такой же мышиной модели у семи из семи мышей; однако опухоль повторно появлялась у 2 из пяти мышей на 8 день после прекращения лечения. Введение 26-трифтор-9,10-дегидро-12,13-дезоксиэпотилона B в дозе 20 мг/кг, Q2Dx6, 6-часовая в/в-инфузия, приводило к временному снижению массы тела мышей до 26%. Это уменьшение массы тела не приводило к гибели, свидетельствуя об отсутствии тяжелой токсичности по отношению к жизненно важным органам. Через два дня после последней обработки масса тела начинала восстанавливаться. На 16 день после обработки масса тела восстанавливалась до 109% от контроля до лечения, что свидетельствует о том, что токсичность, если она имеется, полностью обратима. В сравнении dEpoB, вводимый в дозе 30 мг/кг, приводил к 31% снижению массы тела без летальности.26-Trifluoro-9,10-dehydro-12,13-deoxyepothilone B (F ₃ -deH-dEpoB), as shown in the figures, has a healing effect in doses of 20 mg / kg and 30 mg / kg, Q2Dx6, 6-hour infusion , in a model on nude mice implanted with MX-1 human breast carcinoma xenografts. Data also suggests that 30 mg / kg, Q2Dx6 is approximately the maximum tolerated dose. At a dose of 20 mg / kg, Q2Dx6, a 6-hour infusion, 26-trifluoro-9,10-dehydro-12,13-deoxyepothilone B led to the reduction and disappearance of the tumor in four of the four nude mice with human breast carcinoma xenografts MX- one. No re-emergence of the tumor was observed on the 20th day after treatment termination. On the 27th day after discontinuation of treatment, 2/4 reappeared. There was no further re-emergence of tumors within 28-64 days after discontinuation of treatment. In comparison, in the case of dEpoB at a dose of 30 mg / kg, tumor disappearance was achieved in the same mouse model in seven of seven mice; however, the tumor reappeared in 2 of five mice on day 8 after discontinuation of treatment. The introduction of 26-trifluoro-9,10-dehydro-12,13-deoxyepotilone B at a dose of 20 mg / kg, Q2Dx6, 6-hour iv infusion, led to a temporary decrease in body weight of mice to 26%. This decrease in body weight did not lead to death, indicating the absence of severe toxicity to vital organs. Two days after the last treatment, body weight began to recover. On day 16 after treatment, body weight was restored to 109% of the control before treatment, which indicates that toxicity, if any, is completely reversible. In comparison, dEpoB, administered at a dose of 30 mg / kg, resulted in a 31% reduction in body weight without mortality.

В том случае, когда 26-трифтор-9,10-дегидро-12,13-дезоксиэпотилон B вводили в дозе 30 мг/кг, Q2Dx6, 6-часовая в/в-инфузия, исчезновение опухоли происходило на 2-3 дня раньше, чем при дозе 20 мг/кг. В случае данной более высокой дозы масса тела уменьшалась на 27% и удерживалась 4 дня, не приводя к летальности, что подтверждает отсутствие тяжелой токсичности по отношению к жизненно важным органам. Через четыре дня после последней обработки в дозе 30 мг/кг масса тела начинала восстанавливаться. На 16-й день после обработки масса тела восстанавливалась до 98% от контроля до лечения, что снова подтверждает обратимость токсичности. Лечение 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB в дозе 20 мг/кг и 30 мг/кг приводило к полному исчезновению опухолей, и при дозе 30 мг/кг не наблюдалось рецидива спустя 62 дня. Исчезновение опухолей также достигалось в случае 10 мг/кг при введении 9 доз, когда давали три дополнительные дозы (фиг.57). При дозе 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB в дозе 10 мг/кг наблюдалась только небольшая потеря массы тела (фиг.58). Не наблюдалось дальнейшей потери массы тела при продолжительном лечении.In the case when 26-trifluoro-9,10-dehydro-12,13-deoxyepothilone B was administered at a dose of 30 mg / kg, Q2Dx6, a 6-hour iv infusion, the tumor disappeared 2-3 days earlier. than at a dose of 20 mg / kg. In the case of this higher dose, body weight decreased by 27% and remained for 4 days, without leading to mortality, which confirms the absence of severe toxicity in relation to vital organs. Four days after the last treatment at a dose of 30 mg / kg, body weight began to recover. On the 16th day after treatment, body weight was restored to 98% of the control before treatment, which again confirms the reversibility of toxicity. Treatment with 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB at a dose of 20 mg / kg and 30 mg / kg led to the complete disappearance of tumors, and at a dose of 30 mg / kg no relapse was observed after 62 days. The disappearance of tumors was also achieved in the case of 10 mg / kg with the introduction of 9 doses, when three additional doses were given (Fig. 57). At a dose of 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB at a dose of 10 mg / kg, only a slight loss in body weight was observed (Fig. 58). No further weight loss was observed with prolonged treatment.

На фиг.59 суммированы эффекты 26-F₃-9,10-deH-dEpo B (и других эпотилонов) против ксенотрансплантата MX-1, A. При низкой дозе; B. Против крупной опухоли; против ксенотрансплантата карциномы легкого A549, C; и против резистентного к таксолу ксенотрансплантата карциномы легкого A549/Taxol, D.On Fig summarized the effects of 26-F ₃ -9,10-deH-dEpo B (and other epothilones) against xenograft MX-1, A. At a low dose; B. Against a large tumor; against lung carcinoma xenograft A549, C; and against taxol-resistant carcinoma lung carcinoma xenograft A549 / Taxol, D.

На фиг.61 приведен список, указывающий эффективность in vitro C-21-модифицированных эпотилонов в отношении CCRF-CEM, CCRF-CEM/VBL и CCRF-CEM/Taxol.Fig. 61 is a list showing the in vitro efficacy of C-21-modified epothilones against CCRF-CEM, CCRF-CEM / VBL and CCRF-CEM / Taxol.

На фиг.62 показано терапевтическое действие 26-F₃-9,10-deH-dEpoB (15 мг/кг и 30 мг/кг) и таксола (20 мг/кг) Q2Dx8, 6-часовая в/в-инфузия, против ксенотрансплантата T-клеточного лимфобластного лейкоза человека CCRF-CEM. Сходное снижение массы тела наблюдали во всех трех группах обработки (фиг.63).On Fig shows the therapeutic effect of 26-F ₃ -9,10-deH-dEpoB (15 mg / kg and 30 mg / kg) and Taxol (20 mg / kg) Q2Dx8, 6-hour iv infusion, against human T-cell lymphoblastic leukemia xenograft CCRF-CEM. A similar decrease in body weight was observed in all three treatment groups (Fig. 63).

При лечении ксенотрансплантата CCRF-CEM/Taxol (резистентного к таксолу) 26-F₃-9,10-deH-dEpo B в дозе 15 мг/кг достигалось исчезновение 1/3 опухолей, а в дозе 30 мг/кг достигалось исчезновение 3/4 опухолей. Такое же лечение таксолом в дозе 20 мг/кг давало только частичное подавление роста опухолей и не удавалось достичь сокращения опухоли (фиг.64). Изменения массы тела в ходе данного эксперимента показаны на фиг.65.In the treatment of xenograft CCRF-CEM / Taxol (taxol-resistant) 26-F ₃ -9,10-deH-dEpo B at a dose of 15 mg / kg, 1/3 of the tumors disappeared, and at a dose of 30 mg / kg, 3 / 4 tumors. The same treatment with Taxol at a dose of 20 mg / kg gave only a partial suppression of tumor growth and failed to achieve tumor contraction (Fig. 64). Changes in body weight during this experiment are shown in Fig. 65.

При лечении ксенотрансплантата карциномы ободочной кишки человека HCT-116 26-F₃-9,10-deH-dEpo B (20 мг/кг) достигали сходной эффективности как и в случае таксола (20 мг/кг). Однако F₃-deH-dEpo B в дозе 30 мг/кг оказывал терапевтический эффект лучше с исчезновением 2/4 опухолей после 5 доз (фиг.66). Изменения массы тела в ходе данного эксперимента показаны на фиг.67.In the treatment of human colon carcinoma xenograft HCT-116 26-F ₃ -9,10-deH-dEpo B (20 mg / kg), similar efficacy was achieved as in the case of taxol (20 mg / kg). However, F ₃ -deH-dEpo B at a dose of 30 mg / kg had a better therapeutic effect with the disappearance of 2/4 tumors after 5 doses (Fig. 66). Changes in body weight during this experiment are shown in Fig. 67.

Терапевтические эффекты F₃-9,10-дегидро-dEpoF против ксенотрансплантатов MX-1 при различных дозах (5-30 мг/кг) в случае 6-часовой в/в-инфузии и в/в-инъекции показаны на фиг.76 и 77.The therapeutic effects of F ₃ -9,10-dehydro-dEpoF against MX-1 xenografts at various doses (5-30 mg / kg) in the case of a 6-hour iv infusion and iv injection are shown in FIG. 76 and 77.

Заключение. 9,10-дегидро-, 26-трифтор- или обе модификации dEpoB приводят к 1,5-5-кратному увеличению цитотоксичности in vitro и 2-5-кратному увеличению периода полужизни в плазме мышей in vitro. Используя модели ксенотрансплантатов солидных опухолей человека у мышей nude и используя методику Q2Dx5~9, 6-часовой в/в-инфузии через хвостовую вену при максимальных переносимых дозах, оценивали противоопухолевую эффективность и токсичность 9,10-дегидроэпотилонов. Способность достигать полного подавления роста опухолей, сокращения и исчезновения опухолей способствовала проведению дальнейших исследований для того, чтобы определить частоту рецидивов и показатель эффективности лечения после прекращения лечения. 9,10-дегидро-EpoB, наиболее эффективный in vitro известный эпотилон, хотя и был высоко эффективным, но показал узкие пределы терапевтической безопасности in vivo. 9,10-дегидро-dEpoB в дозе 4 мг/кг, 9,10-дегидро-EpoB в дозе 0,4 мг/кг и 21-гидрокси-9,10-дегидро-dEpoB в дозе 3 мг/кг - все сильно подавляли рост опухоли в течение длительного периода времени и достигали некоторого сокращения опухолей, а иногда достигали исчезновения опухолей. dEpoB в дозе 30 мг/кг, 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB в дозе 20 мг/кг и паклитаксел в дозе 20 мг/кг - все демонстрировали сильное подавление роста опухолей и достигали сокращения и исчезновения опухолей ксенотрансплантатов карциномы молочной железы человека MX-1 у всех тестированных мышей. 26-трифтор-9,10-дегидро-dEpoB по сравнению с dEpoB или паклитакселом достигал долговременного излечения без рецидива опухоли и в равной мере демонстрировал быстрое восстановление массы тела до контрольного уровня до лечения. Conclusion 9,10-dehydro-, 26-trifluoro- or both modifications of dEpoB lead to a 1.5-5-fold increase in cytotoxicity in vitro and a 2-5-fold increase in half-life in plasma of mice in vitro. Using the xenograft models of solid human tumors in nude mice and using the Q2Dx5 ~ 9.6-hour intravenous infusion through the tail vein at maximum tolerated doses, the antitumor efficacy and toxicity of 9,10-dehydroepotilon were evaluated. The ability to achieve complete suppression of tumor growth, reduction and disappearance of tumors contributed to further research in order to determine the frequency of relapse and the indicator of the effectiveness of treatment after discontinuation of treatment. 9,10-dehydro-EpoB, the most effective in vitro epothilone known, although it was highly effective, but showed narrow limits of therapeutic safety in vivo. 9,10-dehydro-dEpoB at a dose of 4 mg / kg, 9,10-dehydro-EpoB at a dose of 0.4 mg / kg and 21-hydroxy-9,10-dehydro-dEpoB at a dose of 3 mg / kg - everything is strong suppressed tumor growth over a long period of time and achieved some reduction in tumors, and sometimes the disappearance of tumors was achieved. dEpoB at a dose of 30 mg / kg, 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB at a dose of 20 mg / kg and paclitaxel at a dose of 20 mg / kg - all showed a strong suppression of tumor growth and achieved reduction and disappearance of breast carcinoma xenografts tumors human MX-1 in all tested mice. Compared to dEpoB or paclitaxel, 26-trifluoro-9,10-dehydro-dEpoB achieved long-term cure without tumor recurrence and equally showed rapid restoration of body weight to a control level before treatment.

Пример 13Example 13

Синтез аналогов циклопропилэпотилонаSynthesis of cyclopropylepotilone analogues

Claims (15)

1. Соединение формулы:

или его фармацевтически приемлемая соль,
в которой R₁ означает водород или C_1-6алкил;
R₂ означает изооксазолильная группа, замещенная C_1-6алкилом;
R_B означает -CF₃, -CHF₂, -CH₂F, или С_1-6алкил.1. The compound of the formula:

or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
in which R ₁ means hydrogen or C _1-6 alkyl;
R ₂ is an isoxoxolyl group substituted with C _1-6 alkyl;
R _B is —CF ₃ , —CHF ₂ , —CH ₂ F, or C _1-6 alkyl. 2. Соединение по п.1, в котором R₁ означает C_1-6алкил.2. The compound according to claim 1, in which R ₁ means C _1-6 alkyl. 3. Соединение по п.2, в котором R₁ означает метил.3. The compound according to claim 2, in which R ₁ means methyl. 4. Соединение по п.3, в котором R_B означает -CF₃.4. The compound according to claim 3, in which R _B means-CF ₃ . 5. Соединение по п.3, в котором R_B означает метил.5. The compound according to claim 3, in which R _B means methyl. 6. Соединение по п.1, в котором R₂ замещен метилом.6. The compound according to claim 1, in which R _{2 is} substituted by methyl. 7. Фармацевтическая композиция для лечения рака, содержащая соединение по любому из пп.1-6 и фармацевтически приемлемый эксципиент.7. A pharmaceutical composition for treating cancer, comprising a compound according to any one of claims 1 to 6 and a pharmaceutically acceptable excipient. 8. Фармацевтическая композиция по п.7, дополнительно содержащая кремофор.8. The pharmaceutical composition according to claim 7, additionally containing cremophor. 9. Фармацевтическая композиция по п.7, дополнительно содержащая кремофор и этанол.9. The pharmaceutical composition according to claim 7, additionally containing cremophor and ethanol. 10. Фармацевтическая композиция по п.7, где соединение суспендировано в смеси кремофор/этанол в соотношении 1:1.10. The pharmaceutical composition according to claim 7, where the compound is suspended in a mixture of cremophor / ethanol in a ratio of 1: 1. 11. Фармацевтическая композиция по п.7, дополнительно содержащая дополнительный цитотоксический агент.11. The pharmaceutical composition according to claim 7, additionally containing an additional cytotoxic agent. 12. Фармацевтическая композиция для лечения рака, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-6 или его фармацевтически приемлемой соли; и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель,
причем терапевтически эффективное количество соединения является количеством, достаточным для доставки около 0,001 мг до около 40 мг соединения на кг веса субъекта.12. A pharmaceutical composition for treating cancer, comprising a therapeutically effective amount of a compound according to any one of claims 1 to 6 or a pharmaceutically acceptable salt thereof; and a pharmaceutically acceptable carrier or diluent,
moreover, a therapeutically effective amount of the compound is an amount sufficient to deliver about 0.001 mg to about 40 mg of the compound per kg of weight of the subject. 13. Применение соединения по любому из пп.1-6 в производстве лекарственного средства для лечения рака.13. The use of a compound according to any one of claims 1 to 6 in the manufacture of a medicament for the treatment of cancer. 14. Применение по п.13, где терапевтически эффективное количество соединения является количеством, достаточным для доставки около 0,001 мг до около 40 мг соединения на кг веса субъекта.14. The use of claim 13, wherein the therapeutically effective amount of the compound is sufficient to deliver about 0.001 mg to about 40 mg of the compound per kg of subject weight. 15. Применение по п.13, где терапевтически эффективное количество соединения является количеством, достаточным для доставки около 0,1 мг до около 25 мг соединения на кг веса субъекта. 15. The use of claim 13, wherein the therapeutically effective amount of the compound is sufficient to deliver about 0.1 mg to about 25 mg of the compound per kg of subject weight.

Images