RU2414918C2 - Method for producing worm preparations enriched with microelements - Google Patents

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: invention refers to medicine and cosmetology. A method for producing an earthworm powder is characterised by the fact that alive earthworms are washed thoroughly, kept foodless for one day, placed in physiologic saline for 10 minutes, then kept in aqueous solutions of heavy metal salts or microelements in concentrations avoiding physiological inactivation of worms up to 2 days, or in soil impregnated with said solutions up to 10 days; further worms are sliced by 2-3 cm, dried for about one day in a well ventilated place and in a thermostat at 50±5°C for about 5-10 hours, and powdered.

EFFECT: invention provides producing worm preparations with the increased concentration of microelements.

3 tbl, 3 ex

Description

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу получения на основе дождевых червей порошка, обогащенного микроэлементами. Изобретение основано на том, что получаемые вермипрепараты обогащаются жизненно важными для человека и животных и одновременно потенциально опасными в свободном виде элементами (Zn, Cr, Cu), которые будут находиться в них в нетоксичной связанной форме. Обезвреживание тяжелых металлов червями обусловлено тем, что их ионы являются индукторами биосинтеза тионеина. Этот белок благодаря высокому содержанию остатков цистеина обладает высоким сродством к ионам двухвалентных металлов и блокирует их токсичность.The invention relates to medicine, in particular to a method for producing, based on earthworms, a powder enriched with trace elements. The invention is based on the fact that the resulting vermicomposites are enriched with vitally important elements for humans and animals and, at the same time, potentially dangerous in free form elements (Zn, Cr, Cu), which will be present in them in a non-toxic bound form. The neutralization of heavy metals by worms is due to the fact that their ions are inducers of thionein biosynthesis. Due to the high content of cysteine residues, this protein has a high affinity for divalent metal ions and blocks their toxicity.

В настоящее время самыми различными отечественными и зарубежными фирмами выпускается огромное количество препаратов из дождевых червей и поливитаминных комплексов, включающих в себя различные микроэлементы. Эти комплексы получают просто механическим смешиванием различных витаминов с находящимися в дефиците жизненно необходимыми минеральными солями. Аналогичным образом, механическим перемешиванием смеси, приготавливают и многочисленные фармацевтические средства, выпускаемые на основе комбинаций дождевые черви-лекарственные травы. Некоторые ингредиенты таких смесей токсичны и сами по себе, например многие тяжелые металлы, являющиеся одновременно важными микроэлементами для живых организмов. Для устранения указанных недостатков предлагаются технически простые специальные технологии, позволяющие получать вермипрепараты, в которых микроэлементы будут находиться в связанной, легко усвояемой форме. Имеется информация о том, что дождевые черви высоко устойчивы к воздействию тяжелых металлов, хорошо их накапливают в достаточно высоких концентрациях и эффективно связывают [1].Currently, a wide variety of domestic and foreign companies produce a huge number of preparations from earthworms and multivitamin complexes, which include various trace elements. These complexes are obtained simply by mechanical mixing of various vitamins with vital mineral salts in short supply. Similarly, by mechanical stirring of the mixture, numerous pharmaceutical preparations are produced, which are produced on the basis of combinations of earthworms and medicinal herbs. Some of the ingredients of such mixtures are toxic in themselves, for example, many heavy metals, which are simultaneously important trace elements for living organisms. To eliminate these shortcomings, technically simple special technologies are proposed that allow one to obtain vermicelli preparations in which microelements will be in a bound, easily digestible form. There is information that earthworms are highly resistant to heavy metals, they accumulate well in fairly high concentrations and effectively bind [1].

Известен способ получения препарата "Dilongjing" /патент CN 1114202, A61K 35/64; A61K 35/56; 1996 г./, включающий промывание живых дождевых червей, отделение центрифугированием, лиофилизацию для получения сухого порошка и загрузку в капсулы или смешивание с медом, чтобы получить жидкость для принятия во внутрь.A known method of obtaining the drug "Dilongjing" / patent CN 1114202, A61K 35/64; A61K 35/56; 1996 /, including washing live earthworms, separating by centrifugation, lyophilization to obtain a dry powder and loading into capsules or mixing with honey to obtain oral liquid.

Известен способ получения сухого порошка из дождевых червей антидиабетического, антигипертонического и антигипотонического препаратов, содержащих сухой порошок дождевых червей в качестве активного ингредиента /патент США №5024844, A61K 35/56, 1991 г./. Живых дождевых червей помещают в пресную воду или 0.1% водный раствор органической кислоты типа уксусной или лимонной кислоты на время от 1 до 40 часов. Таким образом, пищеварительный тракт живых дождевых червей будет в основном освобожден от грунта. После этого живых дождевых червей отмывают водой, чтобы удалить грязь с поверхности их тела. Затем живых влажных дождевых червей выдерживают при низкой температуре -5°С или ниже (предпочтительно -10°С - -60°С). На следующем этапе червей высушивают замораживанием или под вакуумом от 10 до 60 часов. Таким образом, получают стерильный высушенный порошок дождевого червя.A known method of producing dry powder from earthworms of antidiabetic, antihypertensive and antihypotonic preparations containing dry powder of earthworms as an active ingredient / US patent No. 5024844, A61K 35/56, 1991 /. Live earthworms are placed in fresh water or a 0.1% aqueous solution of an organic acid such as acetic or citric acid for a period of 1 to 40 hours. Thus, the digestive tract of living earthworms will be largely emptied. After this, live earthworms are washed with water to remove dirt from the surface of their body. Then live wet earthworms are kept at a low temperature of −5 ° C. or lower (preferably −10 ° C. to −60 ° C.). In the next step, the worms are dried by freezing or under vacuum for 10 to 60 hours. Thus, a sterile dried earthworm powder is obtained.

Ближайшим аналогом является способ получения фармацевтических препаратов из дождевых червей. Собранных дождевых червей режут на кусочки 1-2 см, промывают в воде 1-2 минуты, а полученную массу сушат на сильном солнце. Высушенных червей помещают в деревянную коробочку и хранят в вентилируемом месте [1].The closest analogue is a method for producing pharmaceutical preparations from earthworms. The collected earthworms are cut into pieces of 1-2 cm, washed in water for 1-2 minutes, and the resulting mass is dried in strong sun. Dried worms are placed in a wooden box and stored in a ventilated place [1].

Недостатком известных способов является низкое содержание микроэлементов в них.A disadvantage of the known methods is the low content of trace elements in them.

Отличие предлагаемого нами способа в используемых манипуляциях. Задачей предлагаемого изобретения является создание способа получения вермипрепарата с более высоким содержанием биологически связанных микроэлементов. Поставленная задача достигается тем, что на первом этапе червей помещают в физиологический раствор. Из-за гиперосмотичности физиологического раствора по отношению к дождевым червям последние теряют около 30% в своей массе и вследствие этого более интенсивно поглощают водные растворы металлов. Затем, используя разработанные нами экспрессные методы биотестирования (патент РФ №2215411), по оценке скорости зарывания дождевых червей в почву или по длительности времени их ухода с освещенного участка садка в затемненный, опытным путем находят максимально оптимальные концентрации солей металлов в воде (они должны приближаться к максимальным, но не приводить к гибели дождевых червей, ухудшению их жизнедеятельности, повреждению кожных покровов в результате осмотических реакций).The difference of our proposed method in the manipulations used. The objective of the invention is to provide a method for producing a vermipreparation with a higher content of biologically related trace elements. The problem is achieved in that at the first stage of the worms are placed in physiological saline. Due to the hyperosmoticity of the physiological saline with respect to earthworms, the latter lose about 30% of their mass and, as a result, absorb aqueous solutions of metals more intensively. Then, using the express bioassay methods developed by us (RF patent No. 2215411), by estimating the rate of burrowing of earthworms into the soil or by the length of time they leave the illuminated cage for shading, they experimentally find the most optimal concentration of metal salts in water (they should be close to maximum, but not lead to the death of earthworms, the deterioration of their vital functions, damage to the skin as a result of osmotic reactions).

Способ осуществляется следующим образом. Червей, взятых из почвы, тщательно промывают в нескольких стерильных водах. Выдерживают в течение суток без пищи в 0,5 л банках с влажной фильтровальной бумагой для освобождения кишечника от почвенных комочков. После этого дождевых червей переносят на 10 минут в физиологический раствор. Затем:The method is as follows. Worms taken from the soil are thoroughly washed in several sterile waters. Withstand for 24 hours without food in 0.5 l jars with wet filter paper to free the intestines from soil lumps. After this, earthworms are transferred for 10 minutes in saline. Then:

- пример 1: до 2-х суток выдерживают в водном растворе соли ZnSO₄ или до 10-ти суток в почвенном субстрате, пропитанном водным раствором этой соли, при концентрации, не вызывающей подавление физиологической активности червей (таблица 1);- example 1: they are kept in an aqueous solution of ZnSO ₄ salt for up to 2 days or up to 10 days in a soil substrate saturated with an aqueous solution of this salt at a concentration that does not suppress the physiological activity of worms (table 1);

- пример 2: до 2-х суток выдерживают в водном растворе соли K₂Cr₂O₇ или до 10-ти суток в почвенном субстрате, пропитанном водным раствором этой соли, при концентрации, не вызывающей подавление физиологической активности червей (таблица 2);- example 2: up to 2 days they are kept in an aqueous solution of K ₂ Cr ₂ O ₇ salt or up to 10 days in a soil substrate saturated with an aqueous solution of this salt at a concentration that does not suppress the physiological activity of worms (table 2);

- пример 3: до 2-х суток выдерживают в водном растворе соли CuSO₄ или до 10-ти суток в почвенном субстрате, пропитанном водным раствором этой соли, при концентрации, не вызывающей подавление физиологической активности червей (таблица 3);- example 3: they are kept in an aqueous solution of CuSO ₄ salt for up to 2 days or up to 10 days in a soil substrate soaked in an aqueous solution of this salt at a concentration that does not suppress the physiological activity of worms (table 3);

После этого живых червей разрезают на кусочки длинной 2-3 см, сушат около суток в хорошо проветриваемой месте, затем около 10 часов в сушильном шкафу при 50±5°С. Высушенных червей измельчают в стерильной сухой ступке до получения порошка. Полученный препарат хранят в холодильнике в плотно закрытых флаконах.After this, live worms are cut into pieces 2-3 cm long, dried for about a day in a well-ventilated place, then about 10 hours in an oven at 50 ± 5 ° C. The dried worms are crushed in a sterile dry mortar to obtain a powder. The resulting preparation is stored in a refrigerator in tightly closed vials.

Исследуя накопление цинка в дождевых червях, при использовании вышеописанных способов и выдерживании червей в водных растворах ZnSO₄ получили следующие результаты:Studying the accumulation of zinc in earthworms, using the above methods and keeping the worms in aqueous ZnSO ₄ solutions, the following results were obtained:

Таблица 1Table 1 Результаты определения цинка в сухих препаратах из дождевых червейThe results of the determination of zinc in dry preparations from earthworms № пробыSample number концентрация ZnSO₄, мг/дм³ the concentration of ZnSO ₄ , mg / DM ³ Время экспозиции, чExposure time, h Содержание Zn в червях, мг/кгThe content of Zn in worms, mg / kg 1one 22 1one 900900 20twenty 33703370 32203220 22 800800 20twenty 26702670 21402140 33 700700 20twenty 31903190 34103410 4four 600600 20twenty 21302130 21182118 55 500500 20twenty 33603360 33003300 66 400400 20twenty 14801480 15101510 77 300300 20twenty 12701270 15401540 88 200200 20twenty 462462 550550 99 100one hundred 4040 158158 153153 1010 1010 4040 129129 126126 11eleven 00 контроль (вода)control (water) 123123 113113

В почве с содержанием K₂Cr₂O₇ 100 мг/кг проводили 10-, 20-, 30-дневную экспозицию дождевых червей. Результаты определения концентрации хрома в тканях дождевых червей:In soil with a K ₂ Cr ₂ O ₇ content of 100 mg / kg, 10-, 20-, and 30-day exposure of earthworms was carried out. The results of determining the concentration of chromium in the tissues of earthworms:

Таблица 2table 2 Содержание хрома в сухих препаратах из дождевых червейChromium content in dry earthworm preparations Длительность экспозиции, суткиDuration of exposure, days Cr, мг/кгCr, mg / kg 00 -- 1010 2424 20twenty 3232 30thirty 4747

При содержании CuSO₄ в почве в количестве 400 мг/кг получено следующее:When the content of CuSO ₄ in the soil in the amount of 400 mg / kg received the following:

Таблица 3Table 3 Содержание меди в сухих препаратах из дождевых червейCopper content of dry earthworm preparations Длительность экспозиции, суткиDuration of exposure, days Cu, мг/кгCu, mg / kg 00   1010 6868 20twenty 9090 30thirty 127127

Предлагаемый способ позволяет получать вермипрепараты с повышенным содержанием микроэлементов, а следовательно, обладающие более высокими физиологическими свойствами.The proposed method allows to obtain vermipreparations with a high content of trace elements, and therefore with higher physiological properties.

ЛИТЕРАТУРАLITERATURE

1. Sun Zhenjun. Фармацевтическая ценность и использование дождевых червей в Китае. / Вторая Международная научно-практическая конференция "Дождевые черви и плодородие почв". 17-19 марта 2004, Владимир, Россия. Ковров, изд-во "X-PRESS", 2004. стр.49.1. Sun Zhenjun. Pharmaceutical value and use of earthworms in China. / Second International Scientific and Practical Conference "Earthworms and Soil Fertility". March 17-19, 2004, Vladimir, Russia. Kovrov, publishing house "X-PRESS", 2004. p. 49.

Claims (1)

Способ получения порошка из дождевых червей, характеризующийся тем, что живых червей тщательно промывают, выдерживают в течение суток без пищи, помещают в физиологический раствор на 10 мин, затем выдерживают в водных растворах солей тяжелых металлов или микроэлементов при концентрациях, не вызывающих подавление физиологической активности червей, до 2 суток или в почве, пропитанной указанными растворами, до 10 суток, далее червей разрезают на кусочки 2-3 см, сушат около суток в хорошо проветриваемом месте и около 5-10 ч в термостате при (50±5)°С и измельчают до порошкообразного состояния. A method of producing powder from earthworms, characterized in that live worms are thoroughly washed, kept for 24 hours without food, placed in physiological saline for 10 minutes, then kept in aqueous solutions of heavy metal salts or trace elements at concentrations that do not suppress the physiological activity of the worms , up to 2 days or in soil saturated with the indicated solutions, up to 10 days, then the worms are cut into pieces of 2-3 cm, dried for about a day in a well-ventilated place and about 5-10 hours in a thermostat at (50 ± 5) ° С andzmelchayut to a powder.