RU2395519C2 - Глипикан-3 (gpc3)-производные антигенные пептиды, отторгающие опухоли, используемые для нla-a2-положительных пациентов, и фармацевтическая продукция, включающая их - Google Patents
Глипикан-3 (gpc3)-производные антигенные пептиды, отторгающие опухоли, используемые для нla-a2-положительных пациентов, и фармацевтическая продукция, включающая их Download PDFInfo
- Publication number
- RU2395519C2 RU2395519C2 RU2008109015/13A RU2008109015A RU2395519C2 RU 2395519 C2 RU2395519 C2 RU 2395519C2 RU 2008109015/13 A RU2008109015/13 A RU 2008109015/13A RU 2008109015 A RU2008109015 A RU 2008109015A RU 2395519 C2 RU2395519 C2 RU 2395519C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- peptide
- gpc3
- killer
- cell
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 138
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 43
- 108010074032 HLA-A2 Antigen Proteins 0.000 title abstract description 23
- 102000025850 HLA-A2 Antigen Human genes 0.000 title abstract description 23
- 102000010956 Glypican Human genes 0.000 title description 71
- 108050001154 Glypican Proteins 0.000 title description 71
- 108050007237 Glypican-3 Proteins 0.000 title description 71
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title description 23
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 title description 3
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 title description 2
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 title description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 20
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 19
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims abstract description 19
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 15
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 claims abstract description 10
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 claims abstract description 4
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 claims abstract 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 83
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 25
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 25
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 25
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 17
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 claims description 10
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 9
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 8
- 241000288906 Primates Species 0.000 claims description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 7
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 5
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 claims description 4
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 4
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 2
- 210000001239 CD8-positive, alpha-beta cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 abstract description 65
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 39
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 abstract description 17
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 abstract description 4
- 101001014668 Homo sapiens Glypican-3 Proteins 0.000 abstract description 3
- 102100032530 Glypican-3 Human genes 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 description 33
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 26
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 26
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 14
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 11
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 11
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 9
- 108010013476 HLA-A24 Antigen Proteins 0.000 description 8
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 8
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 7
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 7
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 7
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 6
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 5
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 5
- 241001467552 Mycobacterium bovis BCG Species 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 5
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 5
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 5
- 239000000439 tumor marker Substances 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 229960000190 bacillus calmette–guérin vaccine Drugs 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 4
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 4
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 4
- 101150039713 gpc3 gene Proteins 0.000 description 4
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 4
- 229940023041 peptide vaccine Drugs 0.000 description 4
- 230000009984 peri-natal effect Effects 0.000 description 4
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 4
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 3
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 3
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 3
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 3
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 3
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 238000011510 Elispot assay Methods 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101000599940 Homo sapiens Interferon gamma Proteins 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000551546 Minerva Species 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 102000048373 human GPC3 Human genes 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 2
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 2
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000010208 microarray analysis Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N muramyl dipeptide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDQLRUYAYXDIFW-RWKIJVEZSA-N (2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-4-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxymethyl]oxan-2-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 WDQLRUYAYXDIFW-RWKIJVEZSA-N 0.000 description 1
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- VQFKFAKEUMHBLV-BYSUZVQFSA-N 1-O-(alpha-D-galactosyl)-N-hexacosanoylphytosphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@H]([C@H](O)[C@H](O)CCCCCCCCCCCCCC)CO[C@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQFKFAKEUMHBLV-BYSUZVQFSA-N 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 208000001382 Experimental Melanoma Diseases 0.000 description 1
- 208000022072 Gallbladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 1
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 1
- 101001109588 Homo sapiens Polynucleotide 5'-hydroxyl-kinase NOL9 Proteins 0.000 description 1
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229920001491 Lentinan Polymers 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 241000711408 Murine respirovirus Species 0.000 description 1
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N Ozone Chemical compound [O-][O+]=O CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- 102100022739 Polynucleotide 5'-hydroxyl-kinase NOL9 Human genes 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 229920002305 Schizophyllan Polymers 0.000 description 1
- 108091058545 Secretory proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000040739 Secretory proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007503 antigenic stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000011398 antitumor immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 201000011281 bladder sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N calcein am Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O)=C(OC(C)=O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(=O)C)C(OC(C)=O)=C1 BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 1
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000003163 cell fusion method Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 125000005519 fluorenylmethyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 201000010175 gallbladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940115286 lentinan Drugs 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 210000000581 natural killer T-cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000031942 natural killer cell mediated cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000028591 pheochromocytoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 210000003171 tumor-infiltrating lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4748—Tumour specific antigens; Tumour rejection antigen precursors [TRAP], e.g. MAGE
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4725—Proteoglycans, e.g. aggreccan
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Hematology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой пептид, индуцирующий киллерные Т-клетки ex vivo и который имеет аминокислотную последовательность, как показано в одной из SEQ ID NOS: от 1 до 3. Пептид по изобретению используется в ех vivo агенте индуцирования противоопухолевого иммунитета, в ех vivo агенте для индуцирования антиген-презентирующих клеток, в ех vivo агенте, индуцирующем опухолереактивные Т-клетки, а также в ех vivo фармацевтическом средстве при лечении и/или предотвращении опухолей. Кроме того, изобретение относится к антителу, к указанному пептиду. Агенты по изобретению позволяют идентифицировать глипикан-3-производный пептид, который способен связываться с HLA-A2, и активировать киллерные Т-клетки человека так, чтобы обеспечить средства проведения иммунотерапии, которая была бы эффективна приблизительно у 40% японских пациентов, больных некоторыми типами злокачественных опухолей, сопровождающихся экспрессией GPC3, на высоком уровне. 7 н.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл.
Description
Описание
Область техники, к которой относится изобретение
Данное изобретение относится к новым пептидам, которые эффективны в качестве вакцины для злокачественных опухолей с высокой экспрессией глипикана-3 (GPC3), таких как гепатоцеллюлярная карцинома, злокачественная меланома (меланома), и фармацевтической продукции, включающей вышеупомянутые пептиды и используемой для лечения и предотвращения опухолей.
Уровень техники
Прежде всего, гепатоцеллюлярная карцинома является злокачественным заболеванием, которое встречается с высокой частотой в различных странах по всему миру. Как результат больших вспышек гепатита В и С по всему миру распространенность гепатоцеллюлярной карциномы быстро возрастала в азиатских и европейских странах. Принимая во внимание долгий инкубационный период от заражения вирусом гепатита до начала заболевания, ожидают, что такая тенденция будет продолжаться на протяжении последующих пятидесяти лет. Гепатоцеллюлярная карцинома, обстановка с которой ухудшилась, имеет неблагоприятный прогноз. Таким образом, желательно быстро развивать новую стратегию лечения.
С одной стороны, с развитием молекулярной биологии и иммунологии опухолей в последние годы было показано, что цитотоксические (киллерные) Т-клетки и хелперные Т-клетки узнают пептиды, образованные путем распада белков, высоко экспрессируемых специфически в опухолевых клетках, которые презентируются на поверхности раковых клеток или антиген-презентирующих клеток посредством HLA-молекул и что они проявляют иммунную реакцию, направленную на разрушение таких клеток злокачественной опухоли. Кроме того, было установлено большое количество опухолевых антигенных беков и пептидов, которые стимулируют такую иммунную реакцию, чтобы атаковать злокачественную опухоль, и развивалось применение антиген-специфичной опухолевой иммунотерапии в медицинской практике.
Молекулы HLA класса I экспрессируются на поверхностях всех ядерных клеток тела. Пептиды, полученные из распавшихся цитоплазматических и ядерных белков, связаны с молекулами HLA класса I и экспрессируются на поверхностях таких клеток. На поверхностях нормальных клеток пептиды, полученные из нормальных аутогенных белков, связываются с молекулами HLA класса I, и Т-клетки иммунной системы как не узнают, так и не отвечают на такие пептиды, связанные с молекулами HLA класса I. С другой стороны, в процессе, в котором нормальные клетки превращаются в опухолевые, такие опухолевые клетки могут экспрессировать большое количество белков, которые почти не экспрессируются или экспрессируются только в небольших количествах в нормальных клетках. Если пептид, образованный путем распада в цитоплазме такого белка, который высоко и специфически экспрессируется в опухолевых клетках, связывается с молекулой HLA класса I и экспрессируется на поверхности такой опухолевой клетки, киллерная Т-клетка узнает пептид и разрушает только раковую клетку. Помимо этого, вводя такой опухолеспецифический антиген или пептид индивидууму, возможно разрушить опухолевые клетки и подавить рост злокачественной опухоли, не повреждая нормальные клетки. Это относится к опухолевой иммунотерапии, использующей опухолеспецифический антиген. Кроме того, молекула HLA класса II экспрессируется в основном на поверхности антиген-презентирующей клетки. Такая молекула HLA класса II связывается с пептидом, полученным из опухолеспецифического антигена, образованного инкорпорированием опухолеспецифического антигена извне клетки и распадом его в клетке, и экспрессируется на поверхности клетки. Хелперная Т-клетка, которая узнала пептид, связанный с молекулой HLA класса II, активируется, чтобы вырабатывать различные цитокины, которые активируют другие иммунокомпетентные клетки, чтобы индуцировать или усилить иммунную реакцию против опухоли.
Таким образом, если можно развивать иммунотерапию, нацеленную на антиген, который высоко или специфически экспрессируется в такой злокачественной опухоли, она может стать методом лечения для эффективной элиминации только злокачественной опухоли, не повреждая нормальные аутологичные органы. Кроме того, ожидают, что такая иммунотерапия может стать методом лечения, применимым к пациентам, страдающим от терминальных стадий злокачественной опухоли, для которых не может осуществляться никакое другое лечение. К тому же, если опухолеспецифический антиген и пептид вводятся в форме вакцины человеку с высоким риском развития такой злокачественной опухоли, существует вероятность, что начало злокачественной опухоли может быть предотвращено.
Сообщалось, что в нормальных тканях α-фетопротеин (АФП) экспрессируется только в перинатальном периоде, и это так называемый раковый эмбриональный белок, экспрессия которого снова активируется во многих гепатоцеллюлярных карциномах. Помимо этого, несколько типов мышиных и человеческих Т-клеток узнают пептидный эпитоп, полученный из АФП, презентируемый молекулой МНС класса I. На протяжении стадии развития эмбрион подвержен действию АФП, высокий уровень которого содержится в плазме. Однако зрелые Т-клетки не приобретают полную иммунологическую толерантность к АФП, и АФП-специфичные Т-клетки обнаруживают в периферической крови. Другими словами, такой раковый эмбриональный белок может быть мишенью иммунотерапии.
Существуют различные методы лечения гепатоцеллюлярной карциномы. Однако прогноз такой гепатоцеллюлярной карциномы хуже, чем у других типов злокачественных опухолей, и, таким образом, эта злокачественная опухоль считается трудноконтролируемой злокачественной опухолью. Это может происходить из-за того, что гепатоцеллюлярная карцинома развивается на базе цирроза печени и пациенты с гепатоцеллюлярной карциномой имеют недостаточную функцию печени. Это может также происходить из-за того, что хотя большая часть злокачественной опухоли была излечена, другая злокачественная опухоль развивается из другого участка. Следовательно, было необходимым быстро развивать новую стратегию лечения. Если иммунотерапевтическое выявление антигена, который высоко и специфически экспрессируется в гепатоцеллюлярной карциноме, можно развить, существует вероятность, что такая иммунотерапия станет терапевтическим методом для эффективной элиминации только злокачественной опухоли, не повреждая нормальные аутологичные органы. Кроме того, ожидается, что вышеупомянутая иммунотерапия может быть терапевтическим методом, доступным для пациентов, находящихся в терминальной стадии злокачественной опухоли, и, более того, для пациентов, функция печени у которых слишком слаба, чтобы позволить вынести другие способы лечения. На сегодняшний день сказано, что в Японии более 2000000 людей инфицированы вирусом гепатита С, и что такие люди являются потенциальными пациентами с гепатоцеллюлярной карциномой. Существует вероятность, что вышеупомянутая иммунотерапия будет также применяться к таким инфицированным пациентам, чтобы все-таки предотвратить заболевание гепатоцеллюлярной карциномой.
Меланома является одним из типов кожного рака, который часто называют злокачественной меланомой. Существует много типов кожных злокачественных опухолей. Среди таких кожных злокачественных опухолей меланому классифицируют как имеющую самый высокий уровень малигнизации, и, таким образом, ее сильно боятся. Среди клеток, которые входят в состав кожи, некоторые клетки вырабатывают пигмент меланин. Такие клетки называют меланоцитами. Когда такие меланоциты становятся раковыми, возникает меланома.
В Японии распространенность меланомы изменяется от 1,5 до 2 человек на 100000 в основной популяции. Таким образом, подсчитано, что приблизительно у 1500-2000 человек в год развивается меланома. С другой стороны, в западных странах более чем у десяти человек на 100000 в основной популяции развивается меланома. В частности, в Австралии у двадцати или более человек на 100000 в основной популяции развивается меланома, и, таким образом, говорят, что распространенность меланомы в Австралии самая высокая в мире. При таких обстоятельствах люди, которые живут в Европе, Соединенных Штатах и Австралии интересуются меланомой и обращают внимание на случаи меланомы. Помимо этого, частота случаев меланомы возрастала, особенно среди европейцев, в результате увеличения воздействия ультрафиолетовых лучей, благодаря уменьшению озонового слоя в атмосфере, вызванного разрушением окружающей среды. Кроме того, случаи меланомы в Японии тоже имеют тенденцию к возрастанию год от года. Согласно последним работам ежегодное количество погибших от меланом в Японии возросло до приблизительно 450. Меланома развивается независимо от возраста. Однако распространенность этого заболевания возрастает для тех, кому больше 40, и она самая высокая для тех, кому 60 и 70. Начало этого заболевания в детском возрасте очень редко, но это не значит, что заболевание никогда не развивается в детском возрасте. В последнее время случаи меланомы имеют тенденцию к возрастанию у молодых пациентов в возрасте 20 и 30 лет. Меланома развивается независимо от пола, и заболевают как пациенты мужчины, так и женщины. В случае японских пациентов, участком, на котором чаще всего развивается меланома, является ступня (подошва ноги), и она насчитывает 30% всех случаев меланомы. Особенностью японских пациентов является то, что меланома также развивается в подошвенной и ногтевой частях пальцев. Помимо этого, как в случае западных пациентов, так и у японских пациентов, меланома развивается на всех частях кожи, таких как туловище, рука, стопа, лицо и голова.
Во-первых, настоящие изобретатели провели общегеномный анализ экспрессии гена, включая рассмотрение 23040 видов генов человека, используя кДНК-микрочиповый анализ. Изобретатели проанализировали профили экспрессии этих генов в 20 случаях первичных гепатоцеллюлярных карцином и в различных типах нормальных органов, включая присутствующие в перинатальный период. В результате изобретатели выяснили, что глипикан-3 (GPC3) экспрессируется в печени, почке и легком на протяжении перинатального периода, а также, что такой глипикан-3 высоко экспрессируется во многих гепатоцеллюлярных карциномах, хотя он почти никогда не экспрессируется в нормальных взрослых органах, хотя он экспрессируется в плаценте. Более того, изобретатели сообщили, что GPC3 является секреторным белком, что такой GPC3 можно обнаружить в сыворотке у 40% пациентов с гепатоцеллюлярными карциномами при помощи метода ELISA и что это применяют в качестве нового опухолевого маркера гепатоцеллюлярной карциномы (Nakatsura, T. еt al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 306, 16-25 (2003)). Кроме того, они также сообщили, что GPC3 обнаружили в сыворотке пациентов с меланомой, и что его также применяют в качестве опухолевого маркера меланомы (Nakatsura, T. еt al., Clin. Cancer Res. 10: 6612-6621 (2004)).
Настоящие изобретатели уже установили GPC3 пептид, который связывается с HLA-A24 и презентируется киллерным Т-клеткам человека и который применяется для иммунотерапии, которая направлена на пациентов с HLA-A24 положительной гепатоцеллюлярной карциномой или меланомой. Изобретатели провели эксперимент на животных, используя мышей линии BALB/С, которые экспрессируют мышиные Kd молекулы, с которыми связывается пептид, имеющий такую же структуру, как пептид, связывающийся с HLA-A24. Посредством этого они продемонстрировали эффективность иммунотерапии с применением вышеупомянутого пептида и уже представили результаты (International Application No. PCT/JР2004/016374; International Filing Date: October 28, 2004). В нормальных органах, с того момента как GPC3 экспрессируется только в плаценте и в печени перинатального периода, даже когда осуществляется иммунотерапевтическое выявление GPC3 для подавления роста опухоли, такие неблагоприятные события как аутоиммунное заболевание не встречаются. Это было подтверждено экспериментами на мышах.
На сегодняшний день, что касается глипикана-3 (GPC3), как антигена, отторгающего опухоли, настоящие изобретатели определили пептид, который презентируется в основном HLA-A24 киллерной Т-клетке (International Application No. PCT/JP03/10459; International Filing Date: August 19, 2003). Однако только с такими пептидами, презентируемыми HLA-A24 киллерным Т-клеткам, пептидные вакцины могут вводиться только 60% японцев, имеющим HLA-A24. Если пептид, презентируемый киллерной Т-клетке при помощи HLA-A2, по которому 40% японцев положительны, может быть определен, то приблизительно 85% японцев могут быть вакцинированы двумя типами пептидных вакцин. Кроме того, поскольку у европейцев западных стран частота HLA-A2 относительно высока, такой пептид, презентируемый HLA-A2, может быть использован для многих западноевропейцев. Следовательно, определение вышеупомянутого пептида, презентируемого HLA-A2 киллерным Т-клеткам, является важной целью. В частности, поскольку меланома является злокачественной опухолью, которая часто развивается у европейцев и в западных странах, и для которой иммунотерапия является эффективной, и, более того, поскольку частота гепатоцеллюлярной карциномы также быстро возросла в западных странах, предполагают, что будет большое количество пациентов, для которых сможет применяться иммунотерапия с использованием HLA-A2-связывающего GPC3 пептида.
Раскрытие изобретения
Проблемы, которые решает изобретение
Целью данного изобретения является установить пептиды, презентируемые HLA-A2 киллерным Т-клеткам, чтобы обеспечить средство проведения иммунотерапии, которая смогла бы проводиться у 40% японских пациентов, больных различными типами злокачественных опухолей, которые экспрессируют GPC3 на высоком уровне.
Средство решения проблем
Ранее настоящие изобретатели, опираясь на кДНК-микрочиповый анализ, идентифицировали глипикан-3 (GPC3) как новый раковый эмбриональный белок, который специфически и избыточно экспрессируется в гепатоцеллюлярной карциноме человека. Более того, изобретатели выяснили, что растворимый белок GPC3 обнаруживается в сыворотке пациента с гепатоцеллюлярной карциномой и что такой GPC3 может являться новым опухолевым маркером гепатоцеллюлярной карциномы. Настоящие изобретатели обнаружили, что GPC3 экспрессируется в клеточной линии мышиной меланомы В16 и высоко экспрессируется в меланоме на высокой стадии прогрессии, как и в гепатоцеллюлярной карциноме. Таким образом, исследователи предположили, что GPC3 может стать опухолевым маркером применительно к меланоме. В результате проверочного эксперимента они выяснили, что GPC3 выступает в роли опухолевого маркера меланомы, облегчая раннюю диагностику, которая не была реализована до сих пор. На этот раз данные изобретатели стимулировали человеческие CD8-положительные киллерные Т-клетки при помощи их сокультивирования in vitro вместе с моноцитарными дендритными клетками человеческой периферической крови моноцитарного происхождения, к которым был сгенерирован GPC3 пептид человека, имеющий HLA-A2-связывающий мотив, индуцируя, благодаря этому, GPC3 пептид-специфичные киллерные Т-клетки. Присутствие или отсутствие индукции киллерных Т-клеток, специфичных для каждого GPC3 пептида, детектировалось при помощи ELISPOT метода, детектирующего γ-интерферон (ИФН-γ), вырабатываемый активированными киллерными Т-клетками, узнающими пептиды, презентируемые HLA-A2, и был обнаружен новый GPC3 пептид, который может быть кандидатом на таргетный антиген, применимый для иммунотерапии.
Другими словами, данное изобретение обеспечивает следующие характерные черты изобретения:
(1) Любой из следующих пептидов (А) и (Б):
(А) пептид, имеющий аминокислотную последовательность, как показано в одной из SEQ ID NOS: от 1 до 3; или
(Б) пептид, имеющий аминокислотную последовательность, включающую замену или добавление одной или двух аминокислот в аминокислотной последовательности, как показано в одной из SEQ ID NOS: от 1 до 3, и который способен индуцировать киллерные Т-клетки.
(2) Иммунный индуктор, применяемый для злокачественных опухолей, который включает хотя бы один тип пептида из вышеприведенного абзаца (1).
(3) Фармацевтическое средство для лечения и/или предотвращения опухолей, которое включает хотя бы один тип пептида из вышеприведенного абзаца (1).
(4) Агент, индуцирующий антиген-презентирующие клетки, имеющий высокую способность индуцировать опухолереактивные Т-клетки, который включает пептид из вышеприведенного абзаца (1).
(5) Агент, индуцирующий антиген-презентирующие клетки, имеющий высокую способность индуцировать опухолереактивные Т-клетки, включающие ген, кодирующий любой пептид из (А) или (Б):
(А) пептид, имеющий аминокислотную последовательность, как показано в одной из SEQ ID NOS: от 1 до 3; или
(Б) пептид, имеющий аминокислотную последовательность, включающую замену или добавление одной или двух аминокислот в аминокислотную последовательность, как показано в одной из SEQ ID NOS: от 1 до 3, и который способен индуцировать киллерные Т-клетки.
(6) Агент, индуцирующий опухолереактивные клетки, который включает пептид из вышеприведенного абзаца (1).
(7) Антитело к пептиду из вышеприведенного абзаца (1).
(8) Хелперная Т-клетка, киллерная Т-клетка или популяция иммуноцитов, включающая такие клетки, которая индуцируется при помощи пептида из вышеприведенного абзаца (1).
(9) Антиген-презентирующая клетка, которая презентирует комплекс, состоящий из молекулы HLA и пептида из вышеприведенного абзаца (1).
(10) Антиген-презентирующая клетка из вышестоящего пункта (9), которую индуцируют при помощи агента из вышеприведенных абзацев (4) или (5).
Лучший вариант осуществления изобретения
(1) Пептиды данного изобретения и иммунный индуктор, включающий их, использующиеся при злокачественных опухолях
Пептидом данного изобретения является любой из следующих пептидов (А) или (Б):
(А) пептид, имеющий аминокислотную последовательность, как показано в одной из SEQ ID NOS: от 1 до 3; или
(Б) пептид, имеющий аминокислотную последовательность, включающую замену или добавление одной или двух аминокислот в аминокислотную последовательность, как показано в одной из SEQ ID NOS: от 1 до 3, и который способен индуцировать киллерные Т-клетки.
Термин «пептид, способный индуцировать киллерные Т-клетки» используется в данном описании для обозначения пептида, обладающего индуцирующей Т-клетки активностью, стимулирующей киллерные Т-клетки (цитотоксические Т-лимфоциты/CTL).
Способ получения/продукции пептида данного изобретения не имеет конкретных ограничений. Может применяться как химически синтезированный белок, так и рекомбинантный белок, полученный путем генетической рекомбинации.
Когда получают химически синтезированный пептид, пептид по изобретению могут синтезировать, например, путем такого метода химического синтеза, как Fmoc-метод (флуоренилметилоксикарбонильный метод) или tBoc-метод (трет-бутилоксикарбонильный метод). Помимо этого, пептид по данному изобретению может также быть синтезирован при помощи различных типов, доступных для приобретения синтезаторов пептидов.
Когда пептид по данному изобретению получают в форме рекомбинантного белка, получают ДНК, имеющую последовательность нуклеотидов, кодирующую вышеупомянутый пептид, ее мутант или ее гомолог, и затем ее помещают в подходящую систему экспрессии, чтобы получить пептид по данному изобретению.
В качестве вектора экспрессии предпочтительно может применяться вектор, допускающий репликацию в клетке-хозяине или допускающий встраивание в хромосому клетки-хозяина. Применяется вектор экспрессии, включающий промотор в положении, допускающем экспрессию гена, кодирующего пептид. Помимо этого, трансформант, содержащий ген, кодирующий пептид по данному изобретению, может быть получен при помощи введения вышеупомянутого вектора экспрессии в клетку-хозяина. В качестве хозяина может использоваться любая бактерия, дрожжи, животная клетка и клетка насекомого. Вектор экспрессии может быть вставлен в хозяина согласно известному методу, в зависимости от типа такого хозяина.
В данном изобретении трансформант, такой как полученный вышеупомянутым способом, культивируют и затем изобретенный пептид вырабатывается и накапливается в культуре. Впоследствии пептид по данному изобретению собирают с культуры, чтобы выделить рекомбинантный пептид.
Когда таким трансформантом является прокариот, такой как Escherichia coli, или такой эукариот как дрожжи, средой, применяемой для культивации таких микроорганизмов, может быть либо естественная среда, либо синтетическая среда, если только она включает источник углерода, источник азота, неорганические соли и нечто подобное тому, что может усваиваться вышеупомянутыми микроорганизмами, и если она способна эффективно поддерживать культуру трансформанта. Кроме того, такую культуру можно вести в условиях, которые обычно применяются для культивации вышеупомянутых микроорганизмов. После завершения ведения культуры изобретенный пептид можно выделить из культуры трансформанта и очистить, согласно общим методам выделения и очистки пептида.
Пептид, имеющий аминокислотную последовательность, включающую замещение или добавление одной или двух аминокислот в аминокислотную последовательность, как показано в любой из SEQ ID NOS: от 1 до 3, соответственно может быть получен или приобретен средним специалистом в данной области на основании информации, относящейся к последовательности нуклеотидов ДНК, кодирующей аминокислотную последовательность, как показано в любой из SEQ ID NOS: от 1 до 3. Другими словами, ген, кодирующий пептид, который имеет аминокислотную последовательность, включающую замещение или добавление одной или двух аминокислот в аминокислотную последовательность, как показано в любой из SEQ ID NOS: от 1 до 3, способен индуцировать киллерные Т-клетки, может быть получен при помощи любого приведенного метода, известного среднему специалисту в такой области, как химический синтез, средства генной инженерии или мутагенез. Например, сайт-направленный мутагенез, как средство генной инженерии, применяется потому, что является средством индукции специфической мутации в специфическом положении. Такой сайт-направленный мутагенез проводится при помощи метода, описанного в Молекулярном клонировании: Лабораторный справочник, 2-е доп., Лаборатория Колд Спринг Харбор, Колд Спринг Харбор, Нью-Йорк, 1989 (здесь и далее сокращенно как Молекулярное клонирование, 2-е доп.), Текущие протоколы в молекулярной биологии, Приложения 1-38, Джон Вилей и сыновья (1987-1997) 1989 (здесь и далее сокращенно как Текущие протоколы в молекулярной биологии), и т.д.
Как описано далее в примерах, вышеупомянутый пептид по данному изобретению способен индуцировать иммунитет против злокачественных опухолей. Таким образом, данное изобретение обеспечивает иммунный индуктор, используемый при злокачественных опухолях, который содержит пептид по данному изобретению.
Иммунный индуктор по данному изобретению, используемый при злокачественных опухолях, применяется in vitro или in vivo так, чтобы он мог индуцировать хелперную Т-клетку, киллерную Т-клетку или популяцию иммуноцитов, включающую такие клетки, обеспечивая, таким образом, иммунитет против злокачественных опухолей.
(2) Антитело по данному изобретению
Данное изобретение также относится к антителу, которое узнает часть или все из вышеупомянутых пептидов по данному изобретению в качестве эпитопа (антигена), и к киллерной Т-клетке, индуцируемой при помощи in vitro-стимуляции с использованием вышеупомянутого белка или пептида. В основном, такая киллерная Т-клетка проявляет противоопухолевую активность, которая сильнее, чем активность антитела.
Изобретенное антитело может быть как поликлональным, так и моноклональным антителом. Такое антитело может быть получено обычным методом.
Например, поликлональное антитело может быть получено при помощи иммунизации млекопитающего или примата пептидом по данному изобретению, использованным в качестве антигена, затем забирают кровь у млекопитающего или примата и затем выделяют и очищают антитело от забранной крови. Например, могут быть иммунизированы такие млекопитающие или приматы как мышь, хомяк, морская свинка, курица, крыса, кролик, собака, коза, овца или бык. Такой метод иммунизации известен среднему специалисту в данной области. Например, антиген может вводиться 2 или 3 раза с интервалами от 7 до 30 дней. В качестве дозы однократно может вводиться, например, примерно от 0,05 до 2 мг антигена. Путь введения может варьировать, и может быть выбрано, как подходящее, подкожное введение, внутрикожное введение, внутрибрюшинное введение, внутривенное введение, внутримышечное введение и т.д. Кроме того, антиген можно растворять в подходящем буфере, например, подходит буфер, включающий полный адъювант Фрейнда или такой обычно используемый адъювант как оксид алюминия, и можно использовать.
Иммунизированных таким образом млекопитающих или приматов выращивают в течение определенного периода времени. Впоследствии, если титр антител возрастает, может быть проведено усиление с использованием, например, от 100 до 1000 мкг антигена. Через один или два месяца после последней иммунизации забирают кровь у иммунизированного млекопитающего или примата. Затем собранную таким образом кровь разделяют и очищают обычным методом, включающим центрифугирование, преципитацию с использованием сульфата аммония или полиэтиленгликоля, такую хроматографию как фильтрационная хроматография, ионнообменная хроматография или аффинная хроматография и т.д., чтобы получить поликлональное антитело, узнающее пептид по данному изобретению, в форме поликлональной антисыворотки.
С другой стороны, моноклональное антитело может быть получено при помощи создания гибридомы. Например, такие гибридомы могут быть получены слиянием антиген-вырабатывающей клетки и клетки миеломы. Гибридома, которая вырабатывает моноклональное антитело по данному изобретению, может быть получена нижеупомянутым методом слияния клеток.
В качестве антитело-продуцирующей клетки используют селезеночную клетку, клетку лимфоузла, В-лимфоцит или нечто подобное из иммунизированного животного. В качестве антигена используют пептид по данному изобретению. В качестве животного для иммунизации используют мышь, крысу или подобное. Антиген вводят такому животному согласно обычному методу. Например, суспензия или эмульгированная жидкость, содержащая такой адъювант, как полный адъювант Фрейнда или неполный адъювант Фрейнда, и пептид по данному изобретению, используемый как антиген, вводится животному путем внутривенного введения, подкожного введения, внутрикожного введения, внутрибрюшинного введения и др. несколько раз, чтобы иммунизировать животное. Впоследствии, такую антитело-продуцирующую клетку как селезеночная клетка, получают из иммунизированного животного и затем полученную таким образом селезеночную клетку сливают с клеткой миеломы согласно известному методу (G. Kohler et al., Nature, 256 495 (1975)), получая, таким образом, гибридому. Примеры клеточного штамма миеломы, используемого в слиянии клеток, включают штамм P3X63Ag8, штамм P3U1 и штамм Sp2/0, в случае мыши. Когда проводят такое слияние клеток, используют такой промотор слияния, как полиэтиленгликоль или вирус Сендай. Для отбора гибридомы после завершения слияния по обычному методу используют гипоксантинаминоптеринтимидиновую (ГАТ) среду. Гибридому, полученную в результате слияния клеток, клонируют при помощи метода серийных разведений. Далее, если необходимо, проводят скрининг при помощи иммуноферментного анализа с использованием пептида по данному изобретению, чтобы получить клеточный штамм, который продуцирует моноклональное антитело, специфически узнающее пептид по данному изобретению.
Чтобы получить интересующее моноклональное антитело из полученной таким образом гибридомы, гибридому культивируют обычным методом культивации клеток или методом формирования асцитов и затем интересующее моноклональное антитело может быть очищено от клеточного супернатанта или асцита. Моноклональное антитело может быть очищено от клеточного супернатанта или асцита обычным методом. Могут комбинироваться и использоваться, например, фракционирование сульфатом аммония, фильтрация в геле, ионнообменная хроматография, аффинная хроматография и другие методы.
Кроме того, фрагменты вышеупомянутого антитела включены в объем данного изобретения. Примеры таких антительных фрагментов включают F(ab')2-фрагмент и Fab'-фрагмент.
(3) Хелперная Т-клетка, киллерная Т-клетка или популяция иммуноцитов, включающая такие клетки
Данное изобретение относится также к хелперной Т-клетке, киллерной Т-клетке или популяции иммуноцитов, включающей такие клетки, которую индуцируют при помощи in vitro-стимуляции с использованием пептида по данному изобретению. Например, когда стимулируют лимфоциты периферической крови и опухоль-инфильтрирующие лимфоциты in vitro, используя пептид по данному изобретению, индуцируются активные опухолереактивные Т-клетки. Активированные таким образом клетки могут использоваться для адаптивной иммунотерапии. К тому же, дендритные клетки, являющиеся сильными антиген-презентирующими клетками, имеют возможность экспрессировать изобретенный пептид in vitro или in vivo и затем антиген-экспрессирующие дендритные клетки используются для осуществления иммунной индукции.
Хелперная Т-клетка, киллерная Т-клетка или популяция иммуноцитов, включающая такие клетки, предпочтительно могут быть индуцированы при помощи in vitro-стимуляции с использованием пептида по данному изобретению и иммуностимулятора. Примеры такого иммуностимулятора, использованного здесь, включают клеточный фактор роста и цитокин.
Полученная таким образом хелперная Т-клетка, киллерная Т-клетка или популяция иммуноцитов, включающая такие клетки, переносится в тело так, что опухоль может быть подавлена и что рак может быть предотвращен и/или излечен.
К тому же, с использованием пептида по данному изобретению может быть получена хелперная Т-клетка, киллерная Т-клетка или популяция иммуноцитов, включающая такие клетки, которая способна подавить опухоль, как описано выше. Следовательно, данное изобретение включает раствор клеточной культуры, который содержит пептид по данному изобретению. При использовании такого раствора клеточной культуры можно получить хелперную Т-клетку, киллерную Т-клетку или популяцию иммуноцитов, включающую такие клетки, способную подавить опухоль. Более того, данное изобретение также включает набор, содержащий клеточную культуру для получения хелперной Т-клетки, киллерной Т-клетки или популяции иммуноцитов, включающей такие клетки, который включает раствор вышеупомянутой клеточной культуры и емкость с клеточной культурой.
(4) Фармацевтическое средство по данному изобретению для лечения и/или предотвращения опухоли (раковая вакцина)
В силу того, что пептид по данному изобретению способен индуцировать опухолеспецифические киллерные Т-клетки, можно ожидать, что он является антигеном для лечения и/или предотвращения злокачественной опухоли. Например, такая бактерия, как BCG (Bacillus Calmette-GuErin), трансформированная рекомбинантной ДНК, полученная при помощи встраивания гена, кодирующего пептид по данному изобретению, в подходящий вектор или в такие вирусы, как вирус коровьей оспы, в геном, из которого ДНК, кодирующая пептид по данному изобретению, была встроена, может быть эффективно использована в качестве вакцины для лечения и/или предотвращения злокачественной опухоли человека. Следует отметить, что доза и метод введения таких противоопухолевых вакцин те же, что и при обычной вакцинации от оспы или при BCG-вакцинации.
Другими словами, ДНК, кодирующая пептид по данному изобретению (которая используется сама или существует в форме плазмиды ДНК, встроенной в вектор экспрессии), или рекомбинантный вирус, или рекомбинантная бактерия, включающая вышеупомянутую ДНК, могут быть введены в качестве противоопухолевой вакцины млекопитающим, включая человека, прямо или в состоянии, где они диспергированы в адъюванте. Аналогично пептид по данному изобретению может также быть введен в качестве противоопухолевой вакцины в форме, где он диспергирован в адъюванте.
Примерами адъювантов, используемых в данном изобретении, являются неполный адъювант Фрейнда, BCG, димиколат трегалозы (TDM), липополисахарид (LPS), квасцовый адъювант и адъювант оксида кремния. С точки зрения способности индуцировать антитела предпочтительно используется неполный адъювант Фрейнда (IFA).
В данном описании не указан определенный тип злокачественной опухоли. Специфические примеры злокачественных опухолей включают рак пищевода, рак груди, рак щитовидной железы, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, злокачественную меланому (меланому), злокачественную лимфому, остеосаркому, феохромоцитому, рак головы и шеи, рак матки, рак яичника, опухоль мозга, хронический миелогенный лейкоз, острый миелогенный лейкоз, рак почки, рак простаты, рак легкого, рак желудка, рак печени, рак желчного пузыря, рак яичка, рак мочевого пузыря и саркому.
Пептид по данному изобретению играет роль Т-клеточного эпитопа и индуцирует киллерные Т-клетки, специфичные для опухолевых клеток. Таким образом, пептид по данному изобретению используется в качестве агента для предотвращения и/или лечения злокачественных опухолей у человека. В дополнение, поскольку антитело по данному изобретению способно ингибировать активность GРC3 в качестве антигена злокачественной опухоли, оно также является полезным для профилактики и/или лечения злокачественных опухолей человека. Фактическое использование пептида или антитела по данному изобретению может заключаться во введении его в качестве продукта для инъекции, напрямую или вместе с фармацевтически подходящим носителем и/или разбавителем и, при необходимости, также вместе с нижеупомянутыми вспомогательными веществами. Кроме того, пептид или антитело по данному изобретению могут также вводиться при помощи такого метода, как распыление, посредством чрезкожной абсорбции и абсорбции через слизистую оболочку. Термин «носитель» используется здесь для обозначения, например, сывороточного альбумина. Помимо этого, в качестве разбавителя может использоваться PBS, дистиллированная вода или нечто подобное.
Дозировка, в которой могут вводиться исследуемые пептид или антитело, лежит в пределах от 0,01 до 100 мг для взрослого на введение. Однако дозировка не сводится к вышеупомянутым пределам. Лекарственная форма также конкретно не ограничена. Подходящими могут являться сублимированный продукт или гранулы, полученные добавлением такого инертного наполнителя, как сахар.
Примеры вспомогательного вещества, которое можно добавлять агенту по данному изобретению, чтобы усилить активность, индуцирующую опухолереактивные Т-клетки, включают: мурамилдипептид (MDP); такие бактериальные компоненты как бактерия BCG; ISCOM, описанный в Nature, том 344, стр. 873 (1990); сапонин QS-21, описанный в J. Immunol., том 148, стр. 1438 (1992); липосома и оксид алюминия. Кроме того, такие иммуностимуляторы как лентинан, шизофиллан или Пицибанил, также могут использоваться в качестве вспомогательных веществ. Другие примеры продуктов, используемых здесь, в качестве вспомогательных веществ включают: такие цитокины для усиления роста или дифференцировки Т-клеток, как IL-2, IL-4, IL-12, IL-1, IL-6 или TNF; α-галактозилцерамид для активации NKT-клеток; CpG, который связывается с Toll-подобными рецепторами, чтобы активировать систему врожденного иммунитета, и липополисахарид (LPS).
К тому же, вышеупомянутый антигенный пептид in vitro добавляют к клеткам, взятым у пациента, или (аллогенным) клеткам другого человека, имеющего несколько таких же HLA аллелей, с последующей презентацией антигена клеток. Впоследствии клетки вводятся в кровеносный сосуд пациента так, что киллерные Т-клетки могут быть эффективно индуцированы в теле пациента. Помимо этого, данный пептид добавляют к лимфоцитам периферической крови пациента и затем полученную смесь культивируют in vitro. Таким образом, киллерные Т-клетки могут быть индуцированы in vitro, и затем они могут быть возвращены в кровеносный сосуд пациента. Такая терапия, включающая перенос клеток, уже проводилась в качестве метода лечения злокачественной опухоли, и, таким образом, она является хорошо известным методом для среднего специалиста в данной области.
При введении пептида по данному изобретению в тело происходит индукция и активация киллерных Т-клеток, и, в результате, ожидается противоопухолевый эффект. Кроме того, когда стимулируются лимфоциты при помощи изобретенного пептида in vitro, происходит индукция активированных Т-клеток. Активированные Т-клетки инъецируют в пораженную область. Таким образом, эта техника может эффективно использоваться для адоптивной иммунотерапии.
Далее данное изобретение будет описано в нижеупомянутых примерах. Однако эти примеры не предполагают ограничения границ данного изобретения.
Примеры
[Пример 1]
(1) Выделение GPC3 пептида, проявляющего способность связываться с HLA-A2
Аминокислотная последовательность человеческого GPC3 была найдена при помощи системы BIMAS, и 4 типа последовательностей, имеющих предположительную связывающую аффинность к HLA-A2, были выбраны из 20 или более типов.
| [Таблица 1] | ||
| Расположение пептида | Аминокислотная последовательность пептида | Рамки связывающей активности |
| GPC3 44-52 | RLQPGLKWV | 879 |
| GPC3 144-152 | FVGEFFTDV | 828 |
| GPC3 155-163 | YILGSDINV | 162 |
| GPC3 169-177 | ELFDSLFPV | 1055 |
[Пример 2]
Индукция человеческих киллерных Т-клеток при помощи HLA-A2-связывающего GPC3 пептида
(1) Забор крови
От HLA-A2-положительных пациентов с гепатоцеллюлярной карциномой, находившихся на лечении в гастроэнтерологической хирургии Университета школы медицины Кумамото и в Западной больнице Национального ракового центра, было получено информированное согласие. Впоследствии образец крови в 30 мл был получен от индивидуальных пациентов, и затем были изолированы мононуклеарные клетки периферической крови, используя метод центрифугирования в градиенте плотности Фиколл-Конрея, согласно ранее доложенному методу (Nakatsura, T. et al., Eur. J. Immunol. 32, 826-836 (2002)).
(2) Отделение CD8-положительных клеток и CD14-положительных клеток от мононуклеарных клеток периферической крови и индукция киллерных Т-клеток
Из изолированных мононуклеарных клеток периферической крови были индуцированы киллерные Т-клетки при помощи ранее известного метода (Monji М. et al., Clin Cancer Res 10, 6047-6057, 2004). Сначала CD8-положительные клетки и CD14-положительные клетки были отделены от мононуклеарных клеток, используя MACS. CD14-положительные клетки культивировали в присутствии GM-CSF (100 нг/мл) и IL-4 (20 нг/мл) в течение 5 дней так, что была индуцирована дифференцировка дендритных клеток. Впоследствии туда добавляли TNF-α (20 нг/мл) для созревания. На седьмой день добавляли каждый GPC3-пептид (10 мкМ), и затем проводилось сокультивирование с CD8-положительными клетками. Такая антигенная стимуляция при помощи собственных CD14-положительных производных дендритных клеток повторялась 3 или 4 раза каждую неделю, чтобы индуцировать пептидспецифичные киллерные Т-клетки. В процессе индукции половина среды заменялась на новую каждые два дня, и добавляли IL-2 в концентрации 10 ед./мл.
(3) Анализ активности GPC3-специфичных киллерных Т-клеток при помощи метода ELISPOT
Присутствие или отсутствие киллерной Т-клетки, которая прочно и специфично реагирует с GPC3 и продуцирует ИФН-γ, детектируется с использованием набора «Человеческий ИФН-γ ELISPOT» (BD). Когда киллерная Т-клетка (эффектор) реагирует с стимулирующей клеткой (мишенью), чтобы выработать ИФН-γ, каждый ИФН-γ детектируется как красная точка. В качестве клеток мишеней использовались клетки SK-Hep-1, как клетки пациента, которые являются HLA-A2-положительными и не экспрессируют GPC3, и клетки SK-Hep-1/GPC3, в которых ген GPC3 был вставлен в клетки SK-Hep-1, чтобы экспрессировать белок GPC3. Сначала плашка ELISPOT (BD Bioscience) была покрыта антителом против человеческого ИФН-γ на 18 часов. Впоследствии оно было заблокировано 10% FCS/RPMI на 2 часа. Эффекторные клетки (100 мкл/на лунку) смешивали с клетками-мишенями (100 мкл/на лунку), и смесь культивировали при 37°С в течение 22 часов. Эксперимент проводился при соотношении эффектора и мишени (отношение Э/М) 5:1. Впоследствии, детектировали ИФН-γ-положительные точки в растворе субстрата. Количество таких точек подсчитывали, используя автоматический анализ программного обеспечения MINERVA TECH. В результате активность GPC3-специфичных киллерных Т-клеток может детектироваться в случае киллерных Т-клеток, индуцированных GPC3 44-52, 114-152 и 155-163 пептидов. Однако активность GPC3-специфичных киллерных Т-клеток не детектировалась в случае киллерных Т-клеток, индуцированных GPC3 169-177 пептидом (фигуры 1 и 2). Аналитические результаты по киллерным Т-клеткам, индуцированным типичным GPC3 155-163 пептидом, показаны на фигуре 1.
(4) Анализ цитотоксической активности киллерных Т-клеток при помощи теста на цитотоксичность
Цитотоксическую активность индуцированных киллерных Т-клеток анализировали при помощи цитотоксического теста, используя в качестве стимулированных клеток SK-Hep-1, как клетки пациента, которые являются HLA-A2-положительными и не экспрессируют GPC3, и клетки SK-Hep-1/GPC3, в которых ген GPC3 был вставлен в клетки SK-Hep-1, чтобы экспрессировать белок GPC3. Цитотоксическую активность киллерных Т-клеток оценивали при помощи цитотоксического теста с использованием Terascan VP. Сначала клетки мишени флуоресцентно метили кальцеин АМ окрашивающим раствором при 37°С в течение 30 минут. Такие клетки сокультивировали с киллерными Т-клетками на 96-луночных полуплощадных плашках Coster и затем детектировали флуоресцентно меченые клетки в динамике по времени, измеряя с помощью этого уровень цитотоксичности. Анализ проводили с использованием теста на цитотоксичность для обработки данных, при помощи программного обеспечения CalCt-961 MINERVA TECH, который использовался во флуоресцентном методе. Эксперимент проводился при отношении Э/М 20:1. В результате подтверждалась GPC3-специфичная цитотоксическая активность в киллерных Т-клетках, индуцированных GPC3 44-52, 144-152 и 155-163 пептидами. Однако GPC3-специфичная цитотоксичная активность не наблюдалась в киллерных Т-клетках, индуцированных GPC3 169-177 пептидом (фигура 2).
Промышленная применимость
Эффективность противоопухолевой иммунотерапии, выявляющей GPC3-пептид, презентируемый HLA-A24, была подтверждена экспериментами на животных с использованием мышей. Однако с использованием таких пептидов, презентируемых HLA-A24 киллерным Т-клеткам, пептидные вакцины могли вводиться только 60% японцев. На этот раз, за счет установления пептида, презентируемого киллерной Т-клетке при помощи HLA-A2, приблизительно 85% японцев могут быть вакцинированы двумя типами пептидных вакцин. Если эффективность экспериментальной терапии с использованием пептида, презентируемого HLA-A2 киллерной Т-клетке, будет продемонстрирована, весьма похоже, что такой пептид будет клинически применяться для европейцев в западных странах. Помимо этого, установив такой пептид, презентируемый HLA-A2 киллерной Т-клетке, мы не можем применять установленный пептид только для 40% японских пациентов, болеющих гепатоцеллюлярной карциномой и меланомой, но он может также применяться для многих европейцев, у которых частота HLA-A2 выше, чем у японцев.
Краткое описание чертежей
Фигура 1 отображает показательные результаты, полученные при помощи ELISPOT анализа ИФН-γ, продуцируемого киллерными Т-клетками, которые содержат специфически узнаваемые GPC3-пептиды и были активированы. Что касается киллерных Т-клеток, индуцированных стимуляцией CD8-положительных клеток периферической крови пациента с гепатоцеллюлярной карциномой дендритными клетками-производными CD14-положительных моноцитов, нагруженными GPC3 155-163 пептидом, количество точек и общая площадь таких точек в случае, где в качестве клеток-стимуляторов использовались клетки SK-Hep-1/GPC3, в которых ген GPC3 был вставлен в клетки SK-Hep-1, чтобы экспрессировать белок GPC3 (на правой стороне фигуры), были значительно больше, чем в случае, где использовались в качестве клеток-стимуляторов клетки SK-Hep-1, как клетки пациента, которые были HLA-A2-положительными и не экспрессировали GPC3 (на левой стороне фигуры 1). На основании таких результатов было установлено, что GPC3 155-163 пептид является эпитопным пептидом, допускающим индукцию GPC3-специфичных киллерных Т-клеток.
Фигура 2 отображает результаты ELISPOT анализа и теста на цитотоксичность. CD8-положительные Т-клетки были отобраны из периферической крови HLA-A2-положительных пациентов с гепатоцеллюлярной карциномой и затем отобранные клетки простимулировали дендритными клетками производными моноцитов, нагруженными каждым GPC3-пептидом. При помощи ELISPOT исследования было исследовано, реагировали ли специфически на GPC3-экспрессирующие клетки и продуцировали ли ИФН-γ полученные таким образом киллерные Т-клетки. Кроме того, при помощи теста на цитотоксичность было исследовано, убивали ли вышеупомянутые киллерные Т-клетки специфично GPC3-экспрессирующие клетки. В качестве клеток-мишеней использовались SK-Hep-1, как клетки пациента, которые являются HLA-A2-положительными и не экспрессируют GPC3, и клетки SK-Hep-1/GPC3, в которых ген GPC3 был вставлен в клетки SK-Hep-1, чтобы экспрессировать белок GPC3. В результате киллерные Т-клетки, индуцированные GPC3 44-52, 144-152 и 155-163 пептидами, GPC3-специфично узнавали клетки SK-Hep-1/GPC3 и продуцировали ИФН-γ, и они также проявляли сильную цитотоксическую активность. Киллерные Т-клетки, индуцированные GPC3 169-177 пептидом, напротив, не проявляли GPC3-специфичной Т-киллерной активности. На основании таких результатов было установлено, что GPC3 44-52, 144-152 и 155-163 пептиды являются эпитопными пептидами, допускающими индукцию GPC3-специфичных киллерных Т-клеток.
Claims (7)
1. Пептид, который способен индуцировать цитотоксические (киллерные) Т-клетки ex vivo, имеющий аминокислотную последовательность, как показано в любой из SEQ ID NOS: от 1 до 3.
2. Агент для индуцирования противоопухолевого иммунитета ех vivo, который содержит эффективное количество пептида по п.1.
3. Фармацевтическое средство, применяемое ех vivo при лечении и/или предотвращении опухолей, которое включает по меньшей мере один тип пептида по п.1 в дозе, находящейся в пределах от 0,01 до 100 мг.
4. Агент для индуцирования антиген-презентирующих клеток ех vivo, имеющий высокую способность индуцировать опухолереактивные Т-клетки, который включает пептид по п.1.
5. Агент для индуцирования антиген-презентирующих клеток ех vivo, имеющий высокую способность индуцировать опухолереактивные Т-клетки, включающие ген, кодирующий пептид, имеющий аминокислотную последовательность, как показано в любой из SEQ ID NOS: от 1 до 3.
6. Агент, индуцирующий опухолереактивные Т-клетки ех vivo, который включает пептид по п.1.
7. Антитело к пептиду по п.1, полученное посредством:
иммунизации млекопитающего или примата пептидом по п.1, использованным в качестве антигена, после чего забирают кровь у млекопитающего или примата, и затем выделяют и очищают антитело от забранной крови; или
получения гибридомы посредством использования антитело-продуцирующей клетки, культивирования гибридомы и очистку антитела из клеточного супернатанта или асцита.
иммунизации млекопитающего или примата пептидом по п.1, использованным в качестве антигена, после чего забирают кровь у млекопитающего или примата, и затем выделяют и очищают антитело от забранной крови; или
получения гибридомы посредством использования антитело-продуцирующей клетки, культивирования гибридомы и очистку антитела из клеточного супернатанта или асцита.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2005-230702 | 2005-08-09 | ||
| JP2005230702 | 2005-08-09 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008109015A RU2008109015A (ru) | 2009-09-20 |
| RU2395519C2 true RU2395519C2 (ru) | 2010-07-27 |
Family
ID=37727382
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008109015/13A RU2395519C2 (ru) | 2005-08-09 | 2006-08-08 | Глипикан-3 (gpc3)-производные антигенные пептиды, отторгающие опухоли, используемые для нla-a2-положительных пациентов, и фармацевтическая продукция, включающая их |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US8053556B2 (ru) |
| EP (1) | EP1923463B1 (ru) |
| JP (1) | JP5299942B2 (ru) |
| KR (1) | KR101304243B1 (ru) |
| CN (3) | CN103242428B (ru) |
| AU (1) | AU2006277295B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0614590A2 (ru) |
| CA (1) | CA2619443C (ru) |
| ES (1) | ES2373055T3 (ru) |
| HK (1) | HK1118079A1 (ru) |
| IL (1) | IL189389A (ru) |
| PL (1) | PL1923463T3 (ru) |
| PT (1) | PT1923463E (ru) |
| RU (1) | RU2395519C2 (ru) |
| WO (1) | WO2007018199A1 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2714117C2 (ru) * | 2015-03-09 | 2020-02-11 | Ситлимик Инк. | Пептид, полученный из gpc3, фармацевтическая композиция для лечения или предотвращения рака с его использованием, индуктор иммунитета и способ получения антиген-презентирующих клеток |
| US10660948B2 (en) | 2015-03-18 | 2020-05-26 | Omnicyte | Fusion proteins comprising modified alpha virus surface glycoproteins and tumor associated antigen and methods thereof |
| RU2756318C2 (ru) * | 2015-05-18 | 2021-09-29 | ПИЕРИС ФАРМАСЬЮТИКАЛС ГмбХ | Мутеины липокалина 2 человека с аффинностью в отношении глипикана-3 (gpc3) |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007018199A1 (ja) | 2005-08-09 | 2007-02-15 | Kumamoto University | HLA-A2陽性者用glypican-3(GPC3)由来癌拒絶抗原ペプチド及びこれを含む医薬 |
| ATE509096T1 (de) * | 2006-06-16 | 2011-05-15 | Onco Therapy Science Inc | Von sparc abgeleitetes krebsabstossungsantigenpeptid und pharmazeutikum, das dieses enthält |
| TWI438207B (zh) * | 2007-02-21 | 2014-05-21 | Oncotherapy Science Inc | 表現腫瘤相關抗原之癌症的胜肽疫苗 |
| US20130217122A1 (en) * | 2012-02-21 | 2013-08-22 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Expansion of Interferon-Gamma-Producing T-Cells Using Glypican-3 Peptide Library |
| WO2013133405A1 (ja) | 2012-03-09 | 2013-09-12 | オンコセラピー・サイエンス株式会社 | ペプチドを含む医薬組成物 |
| EP3511425A1 (en) * | 2012-07-12 | 2019-07-17 | Persimmune, Inc. | Personalized cancer vaccines and adoptive immune cell therapies |
| EP3198010B1 (en) * | 2014-09-26 | 2020-11-04 | Baylor College of Medicine | Glypican-3 specific chimeric antigen receptors for adoptive immunotherapy |
| US10537626B2 (en) | 2014-10-07 | 2020-01-21 | Cytlimic Inc. | HSP70-derived peptide, pharmaceutical composition for treating or preventing cancer using same, immunity inducer, and method for producing antigen presenting cell |
| TW201636358A (zh) * | 2014-12-09 | 2016-10-16 | 腫瘤療法 科學股份有限公司 | 對於ｔｈ１細胞之ｇｐｃ３抗原決定位胜肽及含此之疫苗 |
| AU2016244570B2 (en) | 2015-04-07 | 2020-08-27 | Nec Corporation | Medicine |
| BR112019006075A2 (pt) | 2016-10-11 | 2019-06-18 | Cytlimic Inc | medicamento |
| JP2018093823A (ja) * | 2016-12-15 | 2018-06-21 | Ｈｅａｒｔｓｅｅｄ株式会社 | 未分化幹細胞除去剤及び未分化幹細胞除去方法 |
| CN106822861A (zh) * | 2017-01-12 | 2017-06-13 | 中国人民解放军第二军医大学 | 抗原肽gpc3‑1和gpc3‑3在制备治疗肝癌药物中的应用 |
| EP3578650A4 (en) | 2017-02-06 | 2021-03-24 | National Cancer Center Japan | NEW T-LYMPHOCYTE RECEPTOR |
| WO2018195339A1 (en) | 2017-04-19 | 2018-10-25 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Immune cells expressing engineered antigen receptors |
| CN108144071B (zh) * | 2017-12-13 | 2021-05-18 | 中国医学科学院肿瘤医院 | 原发性肝癌磁共振双靶点特异性分子探针及其制备方法 |
| WO2023224096A1 (ja) * | 2022-05-18 | 2023-11-23 | 国立研究開発法人国立がん研究センター | 共通がん抗原カクテルを利用した、がんワクチン、ｔｃｒ／ｃａｒ－ｔ細胞治療薬、コンパニオン診断方法、および血中循環がん細胞検出によるがんの発症リスク診断方法 |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5554506A (en) * | 1994-03-24 | 1996-09-10 | Ludwig Institute For Cancer Research | Isolated, MAGE-3 derived peptides which complex with HLA-A2 molecules and uses thereof |
| AU732468B2 (en) * | 1997-06-23 | 2001-04-26 | Ludwig Institute For Cancer Research | Isolated nona- and decapeptides which bind to HLA molecules, and the use thereof |
| WO1999037764A2 (en) * | 1998-01-27 | 1999-07-29 | Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie | New members of the glypican gene family |
| WO2001047944A2 (en) * | 1999-12-28 | 2001-07-05 | Curagen Corporation | Nucleic acids containing single nucleotide polymorphisms and methods of use thereof |
| KR100669065B1 (ko) * | 2001-04-03 | 2007-01-15 | 다카라 바이오 가부시키가이샤 | 세포상해성 ｔ 림프구 |
| AU2003254950A1 (en) * | 2002-08-26 | 2004-03-11 | Kirin Beer Kabushiki Kaisha | Peptides and drugs containing the same |
| AU2002338020A1 (en) | 2002-09-04 | 2004-03-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody against blood-solubilized n-terminal peptide in gpc3 |
| AU2002330482A1 (en) * | 2002-09-04 | 2004-03-29 | Perseus Proteomics Inc. | Method of diagnosing cancer by detecting gpc3 |
| AU2003298786A1 (en) * | 2002-11-26 | 2004-06-18 | Protein Design Labs, Inc. | Methods of detecting soft tissue sarcoma, compositions and methods of screening for soft tissue sarcoma modulators |
| WO2004067571A1 (fr) * | 2003-01-30 | 2004-08-12 | Wu, Mengchao | Anticorps monoclonal contre l'hepatome humain et utilisation de celui-ci |
| AU2004283614B2 (en) * | 2003-10-29 | 2010-05-13 | Lsip, Llc | Diagnostic agent for malignant melanoma |
| AU2005297303B2 (en) | 2004-10-19 | 2011-11-10 | Lsip, Llc | Novel diagnostic kit for malignant melanoma |
| WO2007018199A1 (ja) | 2005-08-09 | 2007-02-15 | Kumamoto University | HLA-A2陽性者用glypican-3(GPC3)由来癌拒絶抗原ペプチド及びこれを含む医薬 |
| ATE509096T1 (de) | 2006-06-16 | 2011-05-15 | Onco Therapy Science Inc | Von sparc abgeleitetes krebsabstossungsantigenpeptid und pharmazeutikum, das dieses enthält |
-
2006
- 2006-08-08 WO PCT/JP2006/315631 patent/WO2007018199A1/ja active Search and Examination
- 2006-08-08 CN CN201310064285.0A patent/CN103242428B/zh active Active
- 2006-08-08 CA CA2619443A patent/CA2619443C/en active Active
- 2006-08-08 JP JP2007529588A patent/JP5299942B2/ja active Active
- 2006-08-08 AU AU2006277295A patent/AU2006277295B2/en active Active
- 2006-08-08 CN CN2006800374198A patent/CN101313063B/zh active Active
- 2006-08-08 ES ES06796310T patent/ES2373055T3/es active Active
- 2006-08-08 US US12/063,165 patent/US8053556B2/en active Active
- 2006-08-08 BR BRPI0614590-6A patent/BRPI0614590A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2006-08-08 PT PT06796310T patent/PT1923463E/pt unknown
- 2006-08-08 PL PL06796310T patent/PL1923463T3/pl unknown
- 2006-08-08 CN CN201510101092.7A patent/CN104877008B/zh active Active
- 2006-08-08 EP EP06796310A patent/EP1923463B1/en active Active
- 2006-08-08 RU RU2008109015/13A patent/RU2395519C2/ru active
- 2006-08-08 KR KR1020087005067A patent/KR101304243B1/ko active IP Right Grant
-
2008
- 2008-02-07 IL IL189389A patent/IL189389A/en active IP Right Grant
- 2008-08-18 HK HK08109168.9A patent/HK1118079A1/xx unknown
-
2011
- 2011-09-23 US US13/242,019 patent/US8535942B2/en active Active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| PARKER К.С., ЕТ А1. Scheme for ranking potential HLA-A2 binding peptides based on independent binding of individual peptide side-chains. J Immunol., 152(1), 01.01.1994 г, стр.: 163-175. DIONNE S.O., ЕТ AL. Her-2/neu altered peptide ligand-induced CTL responses: implications for peptides with increased HLA affinity and T-cell-receptor interaction. Cancer Immunol. Immunother., 53(4), 2004, с.: 307-314. KUBO R.T., ЕТ AL. Definition of specific peptide motifs for four major HLA-A alleles. J Immunol., 152(8), 15.04.1994, с.: 3913-3924. FALK К, ЕТ AL. Allele-specific motifs revealed by sequencing of self-peptides eluted from MHC molecules. Nature, 351(6324), 23.05.1991, с.: 290-296. ZAREMBA S., ЕТ AL. Identification of an enhancer agonist cytotoxic Т lymphocyte peptide from human carcinoembryonic antigen. Cancer Res., 57(20), 15.10.1997, с.: 4570-4577. HOFFMANN Т.К., ЕТ AL. The ability of variant peptides to reverse the nonresponsiveness of Т lymphocytes to the wild-type sequence p 53 (264-2 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2714117C2 (ru) * | 2015-03-09 | 2020-02-11 | Ситлимик Инк. | Пептид, полученный из gpc3, фармацевтическая композиция для лечения или предотвращения рака с его использованием, индуктор иммунитета и способ получения антиген-презентирующих клеток |
| US10660948B2 (en) | 2015-03-18 | 2020-05-26 | Omnicyte | Fusion proteins comprising modified alpha virus surface glycoproteins and tumor associated antigen and methods thereof |
| US11471518B2 (en) | 2015-03-18 | 2022-10-18 | Omnicyte | Fusion proteins comprising modified alpha virus surface glycoproteins and tumor associated antigen and methods thereof |
| RU2756318C2 (ru) * | 2015-05-18 | 2021-09-29 | ПИЕРИС ФАРМАСЬЮТИКАЛС ГмбХ | Мутеины липокалина 2 человека с аффинностью в отношении глипикана-3 (gpc3) |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP1923463A4 (en) | 2009-09-09 |
| CN104877008B (zh) | 2018-06-05 |
| US8053556B2 (en) | 2011-11-08 |
| EP1923463B1 (en) | 2011-10-05 |
| PT1923463E (pt) | 2011-11-24 |
| AU2006277295A1 (en) | 2007-02-15 |
| ES2373055T3 (es) | 2012-01-31 |
| CA2619443A1 (en) | 2007-02-15 |
| JPWO2007018199A1 (ja) | 2009-02-19 |
| US20090239806A1 (en) | 2009-09-24 |
| IL189389A (en) | 2011-11-30 |
| EP1923463A1 (en) | 2008-05-21 |
| BRPI0614590A2 (pt) | 2013-05-14 |
| HK1118079A1 (en) | 2009-01-30 |
| KR101304243B1 (ko) | 2013-09-05 |
| KR20080056153A (ko) | 2008-06-20 |
| CN104877008A (zh) | 2015-09-02 |
| CN101313063B (zh) | 2013-04-03 |
| CN103242428A (zh) | 2013-08-14 |
| CN103242428B (zh) | 2015-04-15 |
| US8535942B2 (en) | 2013-09-17 |
| WO2007018199A1 (ja) | 2007-02-15 |
| RU2008109015A (ru) | 2009-09-20 |
| US20120040452A1 (en) | 2012-02-16 |
| CA2619443C (en) | 2014-07-08 |
| CN101313063A (zh) | 2008-11-26 |
| PL1923463T3 (pl) | 2012-02-29 |
| IL189389A0 (en) | 2008-06-05 |
| AU2006277295B2 (en) | 2011-08-11 |
| JP5299942B2 (ja) | 2013-09-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2395519C2 (ru) | Глипикан-3 (gpc3)-производные антигенные пептиды, отторгающие опухоли, используемые для нla-a2-положительных пациентов, и фармацевтическая продукция, включающая их | |
| JP5291641B2 (ja) | 癌抗原及びその利用 | |
| JP6005305B2 (ja) | Ｗｔ１抗原性ポリペプチド、及び該ポリペプチドを含む抗腫瘍剤 | |
| EP3263585B1 (en) | Foxm1 peptide and medicinal agent comprising the same | |
| US8053557B2 (en) | SPARC-derived tumor rejection antigenic peptides and medicaments comprising the same | |
| JP2013047230A (ja) | Ｈｌａ−ａ２陽性者用ｈｓｐ１０５由来癌拒絶抗原ペプチド及びこれを含む医薬 |