RU2388490C2 - Composition containing vegetable or cod-liver oil and compounds which contain non-oxidising structural elements of fatty acids - Google Patents
Composition containing vegetable or cod-liver oil and compounds which contain non-oxidising structural elements of fatty acids Download PDFInfo
- Publication number
- RU2388490C2 RU2388490C2 RU2007105886/15A RU2007105886A RU2388490C2 RU 2388490 C2 RU2388490 C2 RU 2388490C2 RU 2007105886/15 A RU2007105886/15 A RU 2007105886/15A RU 2007105886 A RU2007105886 A RU 2007105886A RU 2388490 C2 RU2388490 C2 RU 2388490C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- group
- atom
- carbon atoms
- saturated
- unsaturated
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Description
ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯFIELD OF THE INVENTION
Было показано, что при использовании сочетания соединений, содержащих не подвергающиеся β-окислению структурные элементы жирных кислот, и растительного или рыбьего жира, достигаются неожиданные синергические эффекты. Настоящее изобретение относится к композиции, полученной комбинированием соединений, содержащих не подвергающиеся β-окислению структурные элементы жирных кислот и растительный и/или рыбий жир. Указанная композиция может использоваться для изготовления фармацевтической или пищевой композиции для профилактики и/или лечения резистентности к инсулину, ожирения, диабета, жировой инфильтрации печени, гиперхолестеринемии, дислипидемии, атеросклероза, коронарной болезни сердца, тромбоза, стеноза, вторичного стеноза, инфаркта миокарда, инсульта, повышенного кровяного давления, эндотелиальной дисфункции, состояния повышенной свертываемости крови, синдрома поликистоза яичников, метаболического синдрома, злокачественной опухоли, воспалительных нарушений и пролиферативных нарушений кожи. Указанная композиция также может использоваться в качестве дополнительного компонента в корме для животных для повседневного кормления животных в целях влиять на состав тканей их организма в общем, и, конкретно, на состав жирных кислот.It has been shown that by using a combination of compounds containing non-β-oxidizing structural elements of fatty acids and vegetable or fish oil, unexpected synergistic effects are achieved. The present invention relates to a composition obtained by combining compounds containing non-β-oxidizing structural elements of fatty acids and vegetable and / or fish oil. The specified composition can be used for the manufacture of a pharmaceutical or food composition for the prevention and / or treatment of insulin resistance, obesity, diabetes, fatty liver, hypercholesterolemia, dyslipidemia, atherosclerosis, coronary heart disease, thrombosis, stenosis, secondary stenosis, myocardial infarction, stroke, high blood pressure, endothelial dysfunction, conditions of increased blood coagulability, polycystic ovary syndrome, metabolic syndrome, malignant tumor, spalitelnyh disorders and proliferative skin disorders. The specified composition can also be used as an additional component in animal feed for daily feeding of animals in order to influence the composition of the tissues of their body in general, and, specifically, the composition of fatty acids.
ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯBACKGROUND OF THE INVENTION
В более ранних патентных заявках авторы изобретения описали лечебное применение не подвергающихся β-окислению аналогов жирных кислот по настоящему изобретению для лечения и профилактики ожирения (NO 2000 5461), диабета (NO 2000 5462), первичного и вторичного стеноза (NO 2000 5463), злокачественной опухоли (NO 2002 5930), пролиферативных нарушений кожи (NO 2003 1080), воспалительных и аутоиммунных нарушений (NO 2003 2054).In earlier patent applications, the inventors described the therapeutic use of non-β-oxidizing fatty acid analogues of the present invention for the treatment and prevention of obesity (NO 2000 5461), diabetes (NO 2000 5462), primary and secondary stenosis (NO 2000 5463), malignant tumors (NO 2002 5930), proliferative skin disorders (NO 2003 1080), inflammatory and autoimmune disorders (NO 2003 2054).
Далее, неожиданно авторы настоящего изобретения показали, что применение сочетания соединений, содержащих не подвергающиеся β-окислению структурные элементы жирных кислот, с растительным или рыбьим жиром оказывает синергические полезные биологические эффекты. Авторы изобретения показали, что сочетание не подвергающихся β-окислению структурных элементов жирных кислот с растительным или рыбьим жиром приводит к снижению концентрации в плазме холестерина, триглицеридов и фосфолипидов и к повышению активности ацил-CoA-оксидазы жиров. Кроме того, авторы изобретения описывают, каким образом не подвергающиеся β-окислению структурные элементы жирных кислот и растительный или рыбий жир могут быть непосредственно добавлены в корм для животных. Корм является легко перевариваемым, и для него были показаны неожиданные эффекты на состав жирных кислот у животных. На основе этих неожиданных открытий ожидается, что сочетание соединений, содержащих не подвергающиеся β-окислению структурные элементы жирных кислот, и растительного или рыбьего жира будет обладать повышенным профилактическим и/или терапевтическим эффектом в отношении всех заболеваний, против которых эффективны соединения, содержащие не подвергающиеся β-окислению структурные элементы жирных кислот, по сравнению с эффектом соединений, содержащих аналоги жирных кислот, отдельно.Further, unexpectedly, the authors of the present invention showed that the use of a combination of compounds containing non-β-oxidizing structural elements of fatty acids with vegetable or fish oil has synergistic beneficial biological effects. The inventors have shown that the combination of non-β-oxidizing structural elements of fatty acids with vegetable or fish oil leads to a decrease in plasma concentrations of cholesterol, triglycerides and phospholipids and to an increase in the activity of acyl-CoA oxidase fats. In addition, the inventors describe how non-β-oxidizing structural elements of fatty acids and vegetable or fish oil can be directly added to animal feed. The food is easily digestible, and unexpected effects on the composition of fatty acids in animals have been shown for it. Based on these unexpected discoveries, it is expected that a combination of compounds containing non-β-oxidizing structural elements of fatty acids and vegetable or fish oil will have an enhanced prophylactic and / or therapeutic effect against all diseases against which compounds containing non-β -oxidation of the structural elements of fatty acids, compared with the effect of compounds containing analogues of fatty acids, separately.
Липиды являются более дешевыми источниками энергии, чем белки, и фермеры предпочитают, чтобы животные получали максимальное количество энергии из липидов в рационе (с повышенным окислением липидов) и минимальное количество из белков. Также, если корм содержит большое содержание жиров, то существует тенденция к более быстрому росту животного, что, как правило, является желательным качеством. Изобретение иллюстрируется здесь в отношении разведения рыб и в отношении рыб, особенно атлантического лосося.Lipids are cheaper sources of energy than proteins, and farmers prefer that animals get the maximum amount of energy from lipids in their diet (with increased lipid oxidation) and the minimum amount from proteins. Also, if the feed contains a high fat content, then there is a tendency for faster growth of the animal, which, as a rule, is a desirable quality. The invention is illustrated here in relation to fish farming and in relation to fish, especially Atlantic salmon.
Таким образом, для роста мышц может использоваться увеличение количества белков. Ранее было известно, что не подвергающиеся β-окислению аналоги жирных кислот, такие как 3-тиа жирная кислота тетрадецилтиоуксусная кислота (TTA), могут приводить к повышению митохондриального и пероксисомального окисления жирных кислот в печени и мышцах у млекопитающих (Berge et al., 1989b, Aarsland et al, 1989, Asiedu et al., 1993, Skrede et al., 1993, Asiedu et al., 1995) и к снижению содержания жиров в организме у крыс (Spiegelman 1998, Madsen et al., 2002).Thus, an increase in protein can be used for muscle growth. It was previously known that non-β-oxidizing fatty acid analogues, such as 3-thia fatty acid tetradecylthioacetic acid (TTA), can lead to increased mitochondrial and peroxisomal oxidation of fatty acids in the liver and muscles in mammals (Berge et al., 1989b , Aarsland et al, 1989, Asiedu et al., 1993, Skrede et al., 1993, Asiedu et al., 1995) and to reduce the body fat content in rats (Spiegelman 1998, Madsen et al., 2002).
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Настоящее изобретение относится к применению препарата, содержащего сочетание:The present invention relates to the use of a preparation containing a combination of:
1) растительного жира и/или рыбьего жира; и1) vegetable oil and / or fish oil; and
2) одного или нескольких соединений, содержащих не подвергающиеся β-окислению структурные элементы жирных кислот, представленные2) one or more compounds containing non-β-oxidizing fatty acid structural elements represented by
(a) общей формулой R"-COO-(CH2)2n+1-X-R', где X представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп, выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, группу SO и группу SO2; и R" представляет собой атом водорода или алкильную группу, содержащую от 1 до 4 атомов углерода; и/или(a) the general formula R "-COO- (CH 2 ) 2n + 1 -X-R ', where X represents a sulfur atom, selenium atom, oxygen atom, CH 2 group, SO group or SO 2 group; n represents a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group containing atom oxygen, sulfur atom, selenium atom, an oxygen atom, a group CH 2, a group SO, and SO 2 group; and R "represents is hydrogen or an alkyl group containing from 1 to 4 carbon atoms; and / or
(b) общей формулой (I),(b) general formula (I),
где R1, R2 и R3 представляют собойwhere R1, R2 and R3 are
i) атом водорода; илиi) a hydrogen atom; or
ii) группу формулы CO-R, в которой R представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, и главная цепь указанного R содержит от 1 до 25 атомов углерода; илиii) a group of the formula CO-R, in which R is a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, and the main chain of said R contains from 1 to 25 carbon atoms; or
iii) группу формулы CO-(CH2)2n+1-X-R', где X представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп, выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO и группу SO2;iii) a group of the formula CO- (CH 2 ) 2n + 1 -X-R ', where X represents a sulfur atom, a selenium atom, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group or an SO 2 group; n is a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group consisting of an oxygen atom, a sulfur atom, an atom selenium, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group and an SO 2 group;
iv) структурный элемент, выбранный из группы, содержащей -PO3CH2CHNH3COOH (фосфатидилсерин), PO3CH2CH2NH3 (фосфатидилэтаноламин), PO3CH2CH2N(СН3)3 (фосфатидилхолин), PO3CH2CHOHCH2OH (фосфатидилглицерин) и РО3(СНОН)6 (фосфатидилинозитол); где R1, R2 и R3 выбраны независимо из i), ii), iii) или iv), но по меньшей мере один из R1, R2 или R3 определяется как iii); и/илиiv) a structural element selected from the group consisting of —PO 3 CH 2 CHNH 3 COOH (phosphatidylserine), PO 3 CH 2 CH 2 NH 3 (phosphatidylethanolamine), PO 3 CH 2 CH 2 N (CH 3 ) 3 (phosphatidylcholine), PO 3 CH 2 CHOHCH 2 OH (phosphatidylglycerol) and PO 3 (CHOH) 6 (phosphatidylinositol); where R1, R2 and R3 are independently selected from i), ii), iii) or iv), but at least one of R1, R2 or R3 is defined as iii); and / or
(с) общей формулой (II),(c) general formula (II),
где A1, A2 и A3 выбраны независимо и представляют собой атом кислорода, атом серы или группу N-R4, в которой R4 представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, содержащую от 1 до 5 атомов углерода;where A1, A2 and A3 are independently selected and represent an oxygen atom, a sulfur atom or an N-R4 group, in which R4 represents a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, containing from 1 to 5 carbon atoms ;
где R1, R2 и R3 представляют собойwhere R1, R2 and R3 are
i) атом водорода или линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, содержащую от 1 до 23 атомов углерода; илиi) a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, containing from 1 to 23 carbon atoms; or
ii) группу формулы CO-R, в которой R представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, и главная цепь указанного R содержит от 1 до 25 атомов углерода; илиii) a group of the formula CO-R, in which R is a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, and the main chain of said R contains from 1 to 25 carbon atoms; or
iii) группу формулы СО-(СН2)2n+1-X-R', где Х представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп, выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO и группу SO2;iii) a group of the formula CO- (CH 2 ) 2n + 1 —X — R ′, wherein X represents a sulfur atom, a selenium atom, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group or an SO 2 group; n is a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group consisting of an oxygen atom, a sulfur atom, an atom selenium, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group and an SO 2 group;
iv) структурный элемент, выбранный из группы, содержащей - PO3CH2CHNH3COOH (фосфатидилсерин), PO3CH2CH2NH3 (фосфатидилэтаноламин), PO3CH2CH2N(СН3)3 (фосфатидилхолин), PO3CH2CHOHCH2OH (фосфатидилглицерин) и РО3(СНОН)6 (фосфатидилинозитол);iv) a structural element selected from the group consisting of - PO 3 CH 2 CHNH 3 COOH (phosphatidylserine), PO 3 CH 2 CH 2 NH 3 (phosphatidylethanolamine), PO 3 CH 2 CH 2 N (CH 3 ) 3 (phosphatidylcholine), PO 3 CH 2 CHOHCH 2 OH (phosphatidylglycerol) and PO 3 (CHOH) 6 (phosphatidylinositol);
где R1, R2 и R3 выбраны независимо из i), ii), iii) или iv), но по меньшей мере один из R1, R2 или R3 определяется как iii); и/илиwhere R1, R2 and R3 are independently selected from i), ii), iii) or iv), but at least one of R1, R2 or R3 is defined as iii); and / or
соли, пролекарства или комплекса соединений по пп.(а)-(с).salts, prodrugs or complex compounds according to paragraphs. (a) - (C).
В предпочтительном варианте осуществления соединения по этому изобретению по меньшей мере один из R1, R2 или R3 представляет собой алкил.In a preferred embodiment, the compounds of this invention at least one of R1, R2, or R3 is alkyl.
В предпочтительном варианте осуществления соединения по этому изобретению по меньшей мере один из R1, R2 или R3 представляет собой алкен.In a preferred embodiment, the compounds of this invention at least one of R1, R2, or R3 is alkene.
В предпочтительном варианте осуществления соединения по этому изобретению по меньшей мере один из R1, R2 или R3 представляет собой алкин.In a preferred embodiment, the compounds of this invention at least one of R1, R2 or R3 is alkine.
В предпочтительном варианте осуществления соединения по этому изобретению по меньшей мере один из R1, R2 или R3 представляет собой тетрадецилтиоуксусную кислоту.In a preferred embodiment of the compound of this invention, at least one of R1, R2, or R3 is tetradecylthioacetic acid.
В предпочтительном варианте осуществления соединения по этому изобретению по меньшей мере один из R1, R2 или R3 представляет собой тетрадецилселеноуксусную кислоту.In a preferred embodiment, the compounds of this invention at least one of R1, R2 or R3 is tetradecylselenoacetic acid.
Предпочтительными вариантами осуществления соединений по этому изобретению являются не подвергающиеся β-окислению жирные кислоты.Preferred embodiments of the compounds of this invention are non-β-oxidizing fatty acids.
В предпочтительном варианте осуществления соединения по этому изобретению X представляет собой атом серы или атом селена.In a preferred embodiment of the compound of this invention, X represents a sulfur atom or a selenium atom.
Предпочтительными вариантами осуществления соединений по этому изобретению являются тетрадецилтиоуксусная кислота (TTA), тетрадецилселеноуксусная кислота и 3-тиа-15-гептадецин.Preferred embodiments of the compounds of this invention are tetradecylthioacetic acid (TTA), tetradecylselenoacetic acid and 3-thia-15-heptadecin.
В предпочтительном варианте осуществления соединения по этому изобретению n представляет собой 0 или 1.In a preferred embodiment of the compound of this invention, n is 0 or 1.
В предпочтительном варианте осуществления соединения по этому изобретению указанное соединение представляет собой фосфолипид, где указанный фосфолипид выбран из группы, содержащей фосфатидилсерин, фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилинозитол, фосфатидилглицерин, дифосфатидилглицерин.In a preferred embodiment of the compound of this invention, said compound is a phospholipid, wherein said phospholipid is selected from the group consisting of phosphatidylserine, phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, phosphatidylinositol, phosphatidylglycerol, diphosphatidylglycerol.
В предпочтительном варианте осуществления соединения по этому изобретению указанное соединение представляет собой триацилглицерин.In a preferred embodiment of the compound of this invention, said compound is triacylglycerol.
В предпочтительном варианте осуществления соединения по этому изобретению указанное соединение представляет собой диацилглицерин.In a preferred embodiment of the compound of this invention, said compound is diacylglycerol.
В предпочтительном варианте осуществления соединения по этому изобретению указанное соединение представляет собой моноацилглицерин.In a preferred embodiment of the compound of this invention, said compound is monoacylglycerol.
В предпочтительном варианте осуществления соединения по этому изобретению указанное соединение представляет собой производное фосфатидилхолина (PC) 1,2-дитетрадецилтиоацетоил-sn-глицеро-3-фосфохолин.In a preferred embodiment of the compound of this invention, said compound is a derivative of phosphatidylcholine (PC) 1,2-ditetradecylthioacetoyl-sn-glycero-3-phosphocholine.
В предпочтительном варианте осуществления соединения по этому изобретению указанное соединение представляет собой производное фосфатидилэтаноламина (PE) 1,2-дитетрадецилтиоацетоил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин.In a preferred embodiment of the compound of this invention, said compound is a derivative of phosphatidylethanolamine (PE) 1,2-ditetradecylthioacetoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine.
Предпочтительными вариантами осуществления соединений по этому изобретению являются моно-, ди- или триацилглицериды.Preferred embodiments of the compounds of this invention are mono-, di- or triacylglycerides.
Предпочтительными вариантами осуществления соединений по этому изобретению являются триацилглицериды, содержащие тетрадецилтиоуксусную кислоту (TTA).Preferred embodiments of the compounds of this invention are triacylglycerides containing tetradecylthioacetic acid (TTA).
В предпочтительном варианте осуществления соединения формулы (II) каждый из A1 и A3 представляет собой атом кислорода, в то время как A2 представляет собой атом серы или группу N-R4, в которой R4 представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, содержащую от 1 до 5 атомов углерода.In a preferred embodiment of the compound of formula (II), each of A1 and A3 represents an oxygen atom, while A2 represents a sulfur atom or an N-R4 group in which R4 represents a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, containing from 1 to 5 carbon atoms.
Соединения по этому изобретению являются аналогами природных соединений и по существу распознаются теми же системами, которые перерабатывают природные соединения, включая ферменты, которые осуществляют β-окисление и в некоторых случаях ω-окисление природных длинноцепочечных жирных кислот. Аналоги отличаются от их природных эквивалентов тем, что они не могут полностью окисляться таким способом.The compounds of this invention are analogues of natural compounds and are essentially recognized by the same systems that process natural compounds, including enzymes that effect β-oxidation and, in some cases, ω-oxidation of natural long chain fatty acids. Analogs differ from their natural equivalents in that they cannot be completely oxidized in this way.
Соединения по этому изобретению могут представлять собой не подвергающиеся β-окислению аналоги жирных кислот, как представлено формулой R"CCO-(CH2)2n+1-X-R'. Однако указанные соединения также могут представлять собой более сложные структуры, полученные из одного или нескольких из указанных не подвергающихся β-окислению аналогов жирных кислот, как представлено общими формулами (I) или (II). Эти соединения представляет собой аналоги природных моно-, ди- и триацилглицеринов или фосфолипидов, включая фосфатидилсерин, фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилинозитол, фосфатидилглицерин и дифосфатидилглицерин. Указанные соединения также могут содержать замену в остове глицерина, как представлено в формуле (II). Указанного замещения кислорода(ов) достигают замещением кислорода(ов) группой, содержащей серу или азот. Это может блокировать гидролиз перед захватом в тонком кишечнике, таким образом, повышая биодоступность соединений.The compounds of this invention may be non-β-oxidizing fatty acid analogues, as represented by the formula R ″ CCO- (CH 2 ) 2n + 1 -X-R ′. However, these compounds may also be more complex structures derived from one or several of these non-β-oxidizing fatty acid analogues, as represented by the general formulas (I) or (II) These compounds are analogues of natural mono-, di- and triacylglycerols or phospholipids, including phosphatidylserine, phosphatidylcholine, phosphatidylate nolamine, phosphatidylinositol, phosphatidylglycerol and diphosphatidylglycerol. These compounds may also contain a glycerol substitution as shown in formula (II). The indicated oxygen (s) substitution is achieved by replacing the oxygen (s) with a sulfur or nitrogen containing group. This may block hydrolysis before entrainment in the small intestine, thus increasing the bioavailability of the compounds.
Указанные выше комплексные структуры, полученные из одного или нескольких из указанных не подвергающихся β-окислению структурных элементов жирных кислот, оказывают свой эффект вследствие того, что они содержат аналоги жирных кислот, которые не способны к полному β-окислению. Указанные комплексные структуры могут оказывать эффект в качестве целых структур и в качестве образованных вследствие природной деградации продуктов, содержащих аналоги жирных кислот. Вследствие того, что соединения не способны к полному β-окислению, они накапливаются и это запускает повышение β-окисления природных жирных кислот. Множество эффектов соединений по этому изобретению являются следствием такого повышения β-окисления.The above complex structures obtained from one or more of these non-β-oxidizing fatty acid structural elements exert their effect because they contain fatty acid analogues that are not capable of complete β-oxidation. These complex structures can have an effect as whole structures and as products formed due to the natural degradation of products containing fatty acid analogues. Due to the fact that the compounds are not capable of complete β-oxidation, they accumulate and this triggers an increase in the β-oxidation of natural fatty acids. Many of the effects of the compounds of this invention are a consequence of such an increase in β-oxidation.
В процессе β-окисления ферментативно окисленная жирная кислота расщепляется между атомами углерода 2 и 3 (если считать от карбоксильного конца жирной кислоты), что приводит к удалению двух атомов углерода с каждой стороны участка окисления в виде уксусной кислоты. Эта стадия затем повторяется с только что укороченной на два атома углерода жирной кислотой, и снова повторяется до тех пор, пока жирная кислота не окислится полностью. β-окисление является обычным путем, которым in vivo осуществляется катаболизм большинства жирных кислот. Блокирования β-окисления соединениями по этому изобретению достигают встраиванием не подвергающейся окислению группы в положение X формулы по настоящему изобретению. Вследствие того, что механизм β-окисления хорошо известен, X определяется как S, O, SO, SO2, CH2 или Se. Специалист в данной области может допустить, без изобретательского уровня, что эти соединения все будут блокировать β-окисление аналогичным образом.During β-oxidation, the enzymatically oxidized fatty acid splits between carbon atoms 2 and 3 (if counted from the carboxyl end of the fatty acid), which leads to the removal of two carbon atoms on each side of the oxidation site in the form of acetic acid. This step is then repeated with the fatty acid just shortened by two carbon atoms, and is repeated again until the fatty acid is completely oxidized. β-oxidation is the usual way in which most fatty acids are catabolized in vivo. Blocking β-oxidation by the compounds of this invention is achieved by embedding the non-oxidizing group at position X of the formula of the present invention. Due to the well-known mechanism of β-oxidation, X is defined as S, O, SO, SO 2 , CH 2 or Se. One of skill in the art can admit, without inventive step, that these compounds will all block β-oxidation in a similar manner.
Кроме того, соединения могут содержать более одного блока, т.е. в дополнение к X, R' может необязательно содержать одну или несколько гетерогрупп, выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, группу SO и группу SO2. В качестве примера, для того, чтобы вызвать изменения в деградации жирной кислоты и, таким образом, получить модулированный эффект, в качестве X можно встроить два или три атома серы. Большое количество атомов серы в некоторой степени также приводит к изменению полярности и стабильности. С фармакологической точки зрения для избежания или предотвращения проблем, связанных с устойчивостью, как правило, более желательно иметь возможность получить набор соединений, чем только одно соединение.In addition, the connections may contain more than one block, i.e. in addition to X, R ′ may optionally contain one or more hetero groups selected from the group consisting of an oxygen atom, a sulfur atom, a selenium atom, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group and an SO 2 group. As an example, in order to cause changes in the degradation of a fatty acid and thus obtain a modulated effect, two or three sulfur atoms can be inserted as X. A large number of sulfur atoms to some extent also leads to a change in polarity and stability. From a pharmacological point of view, in order to avoid or prevent problems associated with resistance, it is generally more desirable to be able to obtain a set of compounds than just one compound.
В дополнение к структуре X, его положение также является предметом обсуждения. Расстояние от X до карбоксильного конца жирной кислоты определяется тем, какое количество групп CH2 находится между X и карбоксильным концом жирной кислоты, которое определятся как (CH2)2n+1, где n представляет собой число от 0 до 11. Таким образом, получается нечетное число групп CH2, то есть положение X относительно карбоксильной группы такое, при котором X в итоге блокирует β-окисление. Диапазон значений n выбран так, чтобы включать все варианты аналога жирных кислот, который обладает требуемым биологическим эффектом. Поскольку теоретически β-окисление может действовать на молекулы неограниченной длины, n может представлять собой бесконечную величину, однако на практике это не так. Длина жирных кислот, которые в норме подвергаются β-окислению, как правило, составляет от 14 до 24 атомов углерода, и такая длина, таким образом, является наиболее оптимальной для осуществления ферментативного β-окисления. Таким образом, диапазоны n и R' приведены так, чтобы аналоги жирных кислот охватывали этот диапазон. (Аналогично для того, чтобы получить аналоги природных соединений параметр ii) формул (I) и (II) определяет R, как обладающий от 1 до 25 групп углерода, и параметр i) формулы (II) определяет алкильную группу, как содержащую от 1 до 23 атомов углерода). Общее количество атомов углерода в остове жирной кислоты предпочтительно составляет между 8 и 30, наиболее предпочтительно между 12 и 26. Этот диапазон размеров также является желательным для захвата аналогов жирных кислот по настоящему изобретению и их транспорта через клеточные мембраны.In addition to structure X, its position is also a subject of discussion. The distance from X to the carboxyl end of the fatty acid is determined by the number of CH 2 groups between X and the carboxyl end of the fatty acid, which is defined as (CH 2 ) 2n + 1 , where n is a number from 0 to 11. Thus, it turns out an odd number of CH 2 groups, that is, the position of X relative to the carboxyl group is such that X ultimately blocks β-oxidation. The range of values of n is chosen so as to include all variants of the analogue of fatty acids, which has the desired biological effect. Since, theoretically, β-oxidation can act on molecules of unlimited length, n can be an infinite value, but in practice this is not so. The length of fatty acids, which normally undergo β-oxidation, is usually from 14 to 24 carbon atoms, and this length is thus most optimal for enzymatic β-oxidation. Thus, the ranges n and R ′ are given so that fatty acid analogues encompass this range. (Similarly, in order to obtain analogues of natural compounds, parameter ii) of formulas (I) and (II) defines R as having from 1 to 25 carbon groups, and parameter i) of formula (II) defines an alkyl group as containing from 1 to 23 carbon atoms). The total number of carbon atoms in the skeleton of the fatty acid is preferably between 8 and 30, most preferably between 12 and 26. This size range is also desirable for capturing the fatty acid analogs of the present invention and their transport across cell membranes.
Несмотря на то, что аналоги жирных кислот с нечетным положением блокатора β-окисления X, удаленным от карбоксильного конца, блокируют окисление, величина их биологического эффекта может варьировать. Это происходит вследствие различия времени биологической деградации для различных соединений. Авторы изобретения провели эксперименты с целью показать эффект дальнейшего удаления X от карбоксильного конца жирной кислоты. В этих экспериментах активность (нмоль/мин/мг/белок) митохондриального β-окисления аналогов жирных кислот в печени измеряли при наличии серы в 3, 5 и 7 положениях относительно карбоксильного конца. Активность составляла 0,81 для серы в 3 положении, 0,61 для серы в 5 положении, 0,58 для серы в 7 положении и 0,47 для пальмитиновой кислоты, не блокирующего β-окисление контроля. Как ожидалось, это показывает, что β-окисление действительно блокируется аналогами жирных кислот с различным положением блока, и что их эффект снижается при дальнейшем удалении положения блока от карбоксильного конца, вследствие того, что требуется больше времени для достижения блока при β-окислении, так что к тому времени деградируется большее количество жирных кислот. Однако, поскольку отклонение является значительным при переходе от 3 к 5 положению, но небольшим при переходе от 5 к 7 положению, то обоснованно можно предположить, что при продвижении вдоль цепи это отклонение будет далее уменьшаться, и, таким образом, что к тому моменту, когда совсем не будет наблюдаться никакого эффекта (по сравнению с контролем), положение безусловно окажется значительно удаленным.Despite the fact that analogues of fatty acids with an odd position of the β-oxidation blocker X, remote from the carboxyl end, block oxidation, the magnitude of their biological effect may vary. This is due to the difference in biological degradation time for different compounds. The inventors conducted experiments to show the effect of further removal of X from the carboxyl end of the fatty acid. In these experiments, the activity (nmol / min / mg / protein) of mitochondrial β-oxidation of fatty acid analogues in the liver was measured in the presence of sulfur at 3, 5, and 7 positions relative to the carboxyl end. The activity was 0.81 for sulfur in the 3 position, 0.61 for sulfur in the 5 position, 0.58 for sulfur in the 7 position and 0.47 for palmitic acid, which does not block the β-oxidation of the control. As expected, this shows that β-oxidation is indeed blocked by fatty acid analogues with different block positions, and that their effect decreases when the block position is further removed from the carboxyl end, because it takes longer to reach the block during β-oxidation, so that by then a greater amount of fatty acids is being degraded. However, since the deviation is significant when moving from 3 to 5 position, but small when moving from 5 to 7 position, it can reasonably be assumed that when moving along the chain this deviation will further decrease, and thus, by that moment, when no effect will be observed at all (in comparison with the control), the position will certainly be significantly removed.
Таким образом, обоснованным является включение в качестве соединений по настоящему изобретению аналогов жирных кислот и других соединений, представленных общими формулами (I) и (II), (которые содержат указанный аналог(и) жирной кислоты), которые блокируют β-окисление на различных расстояниях от карбоксильного конца аналогов, как соединений по настоящему изобретению, действительно блокирующих β-окисление, даже если эффект может быть модулированным. Это модулирование в конечном итоге может различаться в истощающих условиях; в различных тканях, при истощающих дозировках, и при изменении аналога жирных кислот, так чтобы он не так легко распадался, как описано далее. Таким образом, обоснованным является включение в формулу всех расстояний блокатора β-окисления от карбоксильного конца аналога жирной кислоты, которые являются биологически пригодными.Thus, it is justified to include, as compounds of the present invention, analogues of fatty acids and other compounds represented by the general formulas (I) and (II) (which contain the specified analogue (s) of a fatty acid) that block β-oxidation at different distances from the carboxyl end of analogues, like the compounds of the present invention, really blocking β-oxidation, even if the effect can be modulated. This modulation may ultimately vary in debilitating conditions; in various tissues, at depleting dosages, and when changing the analogue of fatty acids, so that it does not decompose so easily, as described below. Thus, it is reasonable to include in the formula all the distances of the β-oxidation blocker from the carboxyl end of the fatty acid analogue, which are biologically suitable.
Несмотря на то, что аналоги жирных кислот, как описано, с блоком в положении X не могут подвергаться β-окислению, они тем не менее могут подвергаться ω-окислению. Это значительно менее универсальный и более медленный биологический процесс, при котором происходит окисление жирных кислот не с карбоксильного конца, а предпочтительнее с метильной/гидрофобной концевой группы, здесь обозначаемой R'. При этом каскаде атом углерода с ω-конца жирной кислоты гидроксилируется членом семейства ферментов цитохрома P450. Затем эта гидроксилированная жирная кислота превращается алкогольдегидрогеназой в альдегид, и затем этот альдегид превращается альдегиддегидрогеназой в карбоксильную группу. В результате, конечным продуктом каскада является дикарбоновая жирная кислота, которая может далее деградироваться ω-окислением с ω-конца.Despite the fact that fatty acid analogues, as described, with a block in position X cannot be β-oxidized, they can nevertheless undergo ω-oxidation. This is a much less universal and slower biological process, in which the fatty acids are not oxidized from the carboxyl end, but rather from the methyl / hydrophobic end group, here denoted by R '. In this cascade, the carbon atom from the ω-terminus of the fatty acid is hydroxylated by a member of the cytochrome P450 enzyme family. Then this hydroxylated fatty acid is converted by an alcohol dehydrogenase to an aldehyde, and then this aldehyde is converted by an aldehyde dehydrogenase to a carboxyl group. As a result, the end product of the cascade is dicarboxylic fatty acid, which can be further degraded by ω-oxidation from the ω-end.
Полагают, что ω-окисление является главным путем деградации аналогов жирных кислот, как описано, с блоком в положении X. Таким образом, проводили эксперименты, где R' изменяли для блокирования ω-окисления введением тройной связи в метильный конец аналога жирной кислоты. Результатом этого оказался аналог жирной кислоты 3-тиа-15-гептадецин, для которого при тестировании были показаны следующие ожидаемые результаты: существенно увеличенное время деградации in vivo. Это является важным для применения аналогов жирных кислот в фармацевтическом препарате, поскольку это может усиливать эффекты подвергающихся β-окислению аналогов жирных кислот дальнейшим снижением их распада.It is believed that ω-oxidation is the main route of degradation of fatty acid analogues, as described, with a block at position X. Thus, experiments were performed where R ′ was modified to block ω-oxidation by introducing a triple bond at the methyl end of the fatty acid analogue. The result was an analogue of the fatty acid 3-thia-15-heptadecin, for which the following expected results were shown during testing: a significantly increased in vivo degradation time. This is important for the use of fatty acid analogs in a pharmaceutical preparation, since this can enhance the effects of β-oxidized fatty acid analogues by further reducing their breakdown.
С другой стороны, как в случае блокирования β-окисления, общепринятой практикой является выявление других аналогов жирных кислот, которые будут блокировать ω-окисление точно таким же способом, на основе знаний о том, как происходит ω-окисление. Например, двойная связь будет обладать таким же эффектом, как и тройная связь, и, таким образом, в определение метильной/гидрофобной концевой группы молекулы, обозначаемой здесь R', включается, что она может быть насыщенной или ненасыщенной. Разветвление также может приводить к блокированию окисления, так что группа R' определяется как линейная или разветвленная.On the other hand, as in the case of blocking β-oxidation, it is common practice to identify other analogues of fatty acids that will block ω-oxidation in exactly the same way, based on knowledge of how ω-oxidation occurs. For example, a double bond will have the same effect as a triple bond, and thus it is included in the definition of the methyl / hydrophobic end group of the molecule, referred to herein as R ′, that it may be saturated or unsaturated. Branching can also lead to blocking of oxidation, so that the group R 'is defined as linear or branched.
В целях блокировать ω-окисление встраиванием заместителя в R', указанный R' может быть замещен в одном или нескольких положениях гетерогруппой, выбранной из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, SO и группу SO2. R' также может быть замещен одним или несколькими соединениями, выбранными из группы, содержащей фторид, хлорид, гидрокси, C1-С4алкокси, C1-С4алкилтио, C2-С5ацилокси или C1-С4алкил.In order to block ω-oxidation by embedding a substituent in R ′, said R ′ may be substituted at one or more positions by a hetero group selected from the group consisting of an oxygen atom, a sulfur atom, a selenium atom, an oxygen atom, a CH 2 group, SO and a SO group 2 . R 'may also be substituted with one or more compounds selected from the group consisting of fluoride, chloride, hydroxy, C 1 -C 4 alkoxy, C 1 -C 4 alkylthio, C 2 -C 5 acyloxy or C 1 -C 4 alkyl.
Таким образом, соединения в соответствии с настоящим изобретением представляют собой либо жирные кислоты, аналогичные природным жирным кислотам, которые не способны подвергаться β-окислению, либо природные липиды, содержащие указанные аналоги жирных кислот. Было показано, что in vivo аналоги жирных кислот строго предпочтительно встраиваются в фосфолипиды. В некоторых случаях действительно является предпочтительным имитировать свойства и встраивать аналоги жирных кислот в природные липиды, такие как моно-, ди- и триглицериды и фосфолипиды. Это приводит к изменению всасывания соединений (при сравнении жирных кислот с жирными кислотами, встраиваемыми в более крупные липидные структуры) и может повышать биодоступность или стабильность.Thus, the compounds in accordance with the present invention are either fatty acids similar to natural fatty acids that are not capable of undergoing β-oxidation, or natural lipids containing these fatty acid analogues. It has been shown that in vivo fatty acid analogs are strictly preferably incorporated into phospholipids. In some cases, it is indeed preferable to mimic the properties and incorporate fatty acid analogues into natural lipids, such as mono-, di- and triglycerides and phospholipids. This leads to a change in the absorption of the compounds (when comparing fatty acids with fatty acids embedded in larger lipid structures) and may increase bioavailability or stability.
Например, можно получать комплекс встраиванием жирной кислоты(кислот), которая не способна подвергаться β-окислению, в триацилглицерин. Такие соединения охватываются формулами (I) и (II). При пероральном приеме такого триацилглицерина, например, в продукте корма для животных, он, вероятно, будет транспортироваться подобно любому триацилглицерину из тонкого кишечника в хиломикронах и из печени в липопротеинах крови для запасания в жировой ткани или использования в мышцах, сердце или печени, с гидролизом триацилглицерина до глицерина и 3 свободных жирных кислот. Свободные жирные кислоты на данном этапе окажутся исходным соединением по настоящему изобретению, и не будут более представлять собой комплекс.For example, you can get the complex by embedding a fatty acid (s), which is not able to undergo β-oxidation, in triacylglycerol. Such compounds are encompassed by formulas (I) and (II). When orally administered with such triacylglycerol, for example, in an animal feed product, it is likely to be transported like any triacylglycerol from the small intestine in chylomicrons and from the liver in blood lipoproteins for storage in adipose tissue or for use in muscle, heart or liver, with hydrolysis triacylglycerol to glycerol and 3 free fatty acids. Free fatty acids at this stage will be the starting compound of the present invention, and will no longer be a complex.
Другие возможные глицерофосфолипидные производные жирных кислот по настоящему изобретению включают в себя, но не ограничиваются ими, фосфатидилхолины, фосфатидилэтаноламины, фосфатидилинозитолы, фосфатидилсерины и фосфатидилглицерины.Other possible glycerophospholipid fatty acid derivatives of the present invention include, but are not limited to, phosphatidylcholines, phosphatidylethanolamines, phosphatidylinositols, phosphatidylserines and phosphatidylglycerols.
Другим способом этерификации жирных кислот, выявленным in vivo, который легко можно использовать для получения комплекса с соединением по настоящему изобретению, может являться получение спирта или полиспирта, соответствующего жирной кислоте, например, можно получить производное сфинголипида, такое как церамид или сфингомиелин, получением соответствующего аминоспирта. Подобно глицерофосфолипидным комплексам, такие комплексы могут быть в высокой степени нерастворимыми в воде и менее гидрофильными. Эти типы гидрофобных комплексов по настоящему изобретению будут легче проходить через биологические мембраны.Another method of esterification of fatty acids, identified in vivo, which can be easily used to obtain a complex with the compound of the present invention, can be to obtain an alcohol or polyalcohol corresponding to a fatty acid, for example, you can obtain a sphingolipid derivative, such as ceramide or sphingomyelin, to obtain the corresponding amino alcohol . Like glycerophospholipid complexes, such complexes can be highly insoluble in water and less hydrophilic. These types of hydrophobic complexes of the present invention will more easily pass through biological membranes.
Другими возможными полярными комплексами по настоящему изобретению могут быть, но не ограничиваться ими, лизофосфолипиды, фосфатидиновая кислота, алкоксисоединения, глицероуглеводы, ганглиозиды и цереброзиды.Other possible polar complexes of the present invention may include, but are not limited to, lysophospholipids, phosphatidic acid, alkoxy compounds, glycerol carbohydrates, gangliosides and cerebrosides.
Несмотря на то, что могут существовать большие структурные различия между различными соединениями, содержащими не подвергающиеся β-окислению структурные элементы жирных кислот по настоящему изобретению, можно ожидать, что биологические функции всех таких соединений являются очень сходными вследствие того, что все они блокируют β-окисление сходным образом. Такая неспособность аналогов жирных кислот к β-окислению (и в некоторых случаях, к ω-окислению) приводит к накоплению аналогов в митохондриях, которые запускают β-окисление in vivo природных жирных кислот, которое, в свою очередь, приводит к множеству биологических эффектов соединений, содержащих аналоги жирных кислот по настоящему изобретению. (Berge RK et al. (2002) Curr Opin Lipidol 13(3):295-304).Although there may be large structural differences between different compounds containing non-β-oxidizing structural elements of the fatty acids of the present invention, it can be expected that the biological functions of all such compounds are very similar due to the fact that they all block β-oxidation in a similar way. This inability of fatty acid analogues to β-oxidation (and in some cases, to ω-oxidation) leads to the accumulation of analogues in mitochondria, which trigger in vivo β-oxidation of natural fatty acids, which, in turn, leads to many biological effects of the compounds containing fatty acid analogues of the present invention. (Berge RK et al. (2002) Curr Opin Lipidol 13 (3): 295-304).
Каскад β-окисления жирных кислот представляет собой главный путь метаболизма жиров. Начальная и скорость-лимитирующая реакция осуществляются ацил-CoA-оксидазой в пероксисомах печени. Ацил-CoA-оксидаза катализирует дегидрогенизацию ацил-CoA-тиоэфиров до соответствующего транс-2-еноил-CoA. Аналог жирной кислоты формулы (I); тетрадецилтиоуксусную кислоту (TTA), авторы изобретения ранее использовали для анализа различных биологических эффектов жирных кислот. Для настоящего изобретения анализировали ее действие на ацил-CoA-оксидазу, а также эффект различных растительных жиров и рыбьего жира, отдельно или в сочетании. Было показано, что TTA отдельно вызывает значительное повышение ферментативной активности по сравнению с отрицательным контролем. Растительный и рыбий жиры демонстрировали очень небольшое повышение активности ацил-CoA-оксидазы по сравнению с отрицательным контролем. При совместном введении подсолнечное масло не повышало активность TTA. Поэтому можно ожидать, что активность ацил-CoA-оксидазы при введении TTA с жирами будет оставаться такой же, что и без добавления жиров. Было показано, что рыбий жир и оливковое масло вызывают незначительное усиление повышения посредством TTA активности ацил-CoA-оксидазы. Соевое масло без TTA обладало незначительными эффектами на активность ацил-CoA-оксидазы, но в сочетании с TTA оно вызывало 60% повышение, по сравнению с эффектами TTA отдельно. Это усиление TTA в качестве активатора ацил-CoA-оксидазы соевым маслом оказалось совершенно неожиданным.The cascade of β-oxidation of fatty acids is the main pathway for fat metabolism. The initial and speed-limiting reaction is carried out by acyl-CoA oxidase in liver peroxisomes. Acyl-CoA oxidase catalyzes the dehydrogenation of acyl-CoA-thioesters to the corresponding trans-2-enoyl-CoA. Fatty acid analogue of formula (I); tetradecylthioacetic acid (TTA), the inventors have previously used to analyze the various biological effects of fatty acids. For the present invention, its effect on acyl-CoA oxidase was analyzed, as well as the effect of various vegetable fats and fish oil, alone or in combination. It has been shown that TTA alone causes a significant increase in enzymatic activity compared to the negative control. Vegetable and fish oils showed a very slight increase in the activity of acyl-CoA oxidase compared to the negative control. When co-administered, sunflower oil did not increase TTA activity. Therefore, it can be expected that the activity of acyl-CoA oxidase upon administration of TTA with fats will remain the same as without the addition of fats. It has been shown that fish oil and olive oil cause a slight increase in the increase through TTA of the activity of acyl-CoA oxidase. Soybean oil without TTA had negligible effects on the activity of acyl-CoA oxidase, but in combination with TTA, it caused a 60% increase, compared to the effects of TTA alone. This increase in TTA as an activator of acyl CoA oxidase by soybean oil was completely unexpected.
Для настоящего изобретения, также анализировали действие не подвергающихся β-окислению структурных элементов жирных кислот на уровень фосфолипидов, а также эффект различных растительных масел и рыбьего жира, отдельно или в сочетании с TTA. Подсолнечное масло и рыбий жир снижали уровень фосфолипидов, и усиливали способность TTA снижать уровень фосфолипидов с увеличением способности в отношении снижения уровня фосфолипидов, по сравнению со способностью TTA или жиров отдельно. Соевое масло и оливковое масло, в действительности, повышали уровень фосфолипидов, однако, неожиданно эти масла значительно усиливали способность TTA снижать уровень фосфолипидов. Эффект соевого масла является особенно примечательным, самостоятельно оно повышало уровень фосфолипидов на 10% по сравнению с контролем, однако при введении совместно с TTA оно снижало уровень фосфолипидов дополнительно на 40% по сравнению с TTA отдельно.For the present invention, the effect of non-β-oxidizing structural elements of fatty acids on the level of phospholipids was also analyzed, as well as the effect of various vegetable oils and fish oil, alone or in combination with TTA. Sunflower oil and fish oil reduced the level of phospholipids, and enhanced the ability of TTA to reduce the level of phospholipids with an increase in the ability to reduce the level of phospholipids, compared with the ability of TTA or fats separately. Soybean oil and olive oil actually increased the level of phospholipids, however, unexpectedly, these oils significantly increased the ability of TTA to lower the level of phospholipids. The effect of soybean oil is especially remarkable, on its own it increased the level of phospholipids by 10% compared with the control, however, when administered together with TTA, it reduced the level of phospholipids by an additional 40% compared to TTA separately.
Для настоящего изобретения также анализировали эффект не подвергающихся β-окислению структурных элементов жирных кислот, а также эффект различных растительных масел и рыбьего жира, отдельно или в сочетании с TTA, на уровень холестерина в плазме. TTA снижала уровень холестерина в большей степени, чем любое из растительных масел или рыбий жир отдельно. Подсолнечное масло или рыбий жир без TTA в некоторой степени снижали уровень холестерина, совместно с TTA, уровень холестерина снижался в большей степени, чем TTA отдельно. Оливковое и соевое масло, в действительности, самостоятельно повышали уровень холестерина, однако, совершенно неожиданно, при добавлении к TTA эти масла повышали способность TTA снижать уровень холестерина. Этот эффект в отношении усиления TTA, был наибольшим у соевого масла, которое снижало уровень холестерина на 60% по сравнению TTA отдельно.For the present invention, the effect of non-β-oxidizing structural elements of fatty acids, as well as the effect of various vegetable oils and fish oil, alone or in combination with TTA, on plasma cholesterol were also analyzed. TTA lowered cholesterol more than any of the vegetable oils or fish oil alone. Sunflower oil or fish oil without TTA to some extent lowered cholesterol levels, together with TTA, cholesterol levels decreased to a greater extent than TTA alone. Olive and soybean oil actually actually raised cholesterol levels, however, quite unexpectedly, when added to TTA, these oils increased TTA's ability to lower cholesterol. This effect on TTA enhancement was greatest for soybean oil, which reduced cholesterol by 60% compared to TTA alone.
Было показано, что TTA снижает уровень триглицерина в плазме вследствие увеличения количества митохондрий и стимуляции митохондриального β-окисления обычных насыщенных и ненасыщенных жирных кислот до кетоновых тел (Froyland L et al. (1997) J Lipid Res 38:1851-1858). Для настоящего изобретения было выявлено, что такой эффект дополнительно неожиданно усиливается добавлением растительного или рыбьего жира. Оливковое, подсолнечное масло и рыбий жир самостоятельно снижали уровень триацилглицерина, подсолнечное масло и рыбий жир снижали даже в большей степени, чем TTA отдельно, и дополнительно усиливали эффект TTA в отношении снижения уровня холестерина в большей степени, чем наблюдалось как для масел, так и для TTA по отдельности. Для соевого масла были показаны наиболее яркие результаты; самостоятельно оно, в действительности, повышало уровень холестерина на 15% по сравнению с контролем, однако совершенно неожиданно оно усиливало эффект TTA в отношении снижения уровня холестерина на 130%.TTA has been shown to lower plasma triglycerine levels due to increased mitochondria and stimulated mitochondrial β-oxidation of common saturated and unsaturated fatty acids to ketone bodies (Froyland L et al. (1997) J Lipid Res 38: 1851-1858). For the present invention, it was found that this effect is further unexpectedly enhanced by the addition of vegetable or fish oil. Olive, sunflower oil and fish oil independently reduced the level of triacylglycerol, sunflower oil and fish oil even lower than TTA alone, and further enhanced the effect of TTA in lowering cholesterol to a greater extent than was observed both for oils and for TTA individually. For soybean oil, the most striking results were shown; on its own, it actually increased cholesterol by 15% compared with the control, but quite unexpectedly it enhanced the effect of TTA with respect to lowering cholesterol by 130%.
Для настоящего изобретения анализировали эффект кормления атлантического лосося кормом, содержащим не подвергающиеся β-окислению аналоги жирных кислот, масло, обычные компоненты корма и необязательно ферментированный белковый материал сои. В примере 2.1, корм для рыб состоял из покрытых обычных кормовых гранул с рыбьим жиром, включающих TTA. Такой корм затем использовали в примере 2.2 в качестве питания для атлантического лосося, и наличие TTA оказывало благоприятные эффекты на полученный таким образом корм для рыб по сравнению с эквивалентным кормом без TTA (примеры 2.3 и 2.4).For the present invention, the effect of feeding Atlantic salmon with a feed containing non-β-oxidizing fatty acid analogues, oil, common feed components and optionally fermented soy protein material was analyzed. In Example 2.1, the fish food consisted of coated conventional fish oil feed pellets including TTA. Such food was then used in Example 2.2 as a feed for Atlantic salmon, and the presence of TTA had beneficial effects on the fish food thus obtained compared to an equivalent food without TTA (Examples 2.3 and 2.4).
Обычные используемые кормовые гранулы содержат главным образом рыбную кормовую муку, немного пшеницы и витаминные и минеральные добавки. Масло, используемое для покрытия гранул, также было морского происхождения, из мойвы, и содержало различные количества смешанной с ним TTA. В таблице 1 описаны состав и химическая композиция рационов. Источник белка (рыбная мука) или углеводов (пшеница) сам по себе не очень важен, важной частью является то, что корм представляет собой обычный корм, хорошо подходящий для анализируемых видов (в этом примере атлантический лосось), для которого при добавлении TTA были показаны благоприятные эффекты.Commonly used feed pellets mainly contain fish feed meal, some wheat, and vitamin and mineral supplements. The oil used to coat the granules was also of marine origin, from capelin, and contained various amounts of TTA mixed with it. Table 1 describes the composition and chemical composition of the diets. The source of protein (fishmeal) or carbohydrates (wheat) is not very important in itself, the important part is that the feed is a normal feed, well suited for the species being analyzed (in this example, Atlantic salmon), for which TTA was added beneficial effects.
Несмотря на то, что источник белка сам по себе не является важным, в находящейся на рассмотрении заявке (№ 20043093) было показано, что TTA, введенная совместно с белком обладает дополнительным полезным эффектом по сравнению с эффектом TTA отдельно. Выбор источника жиров для рациона может являться более важным, поскольку было показано здесь, что TTA оказывает неожиданные эффекты совместно с маслами, особенно морского происхождения. Таким образом, тот факт, что этот обычный корм является кормом с высоким содержанием жиров и белков и с низким содержанием углеводов, вероятно, усиливает полезные эффекты TTA по сравнению с эффектами TTA, вводимой отдельно, или совместно с питанием с большим количеством углеводов.Despite the fact that the protein source alone is not important, the pending application (No. 20043093) showed that TTA, introduced together with the protein has an additional beneficial effect compared to the effect of TTA separately. The choice of the source of fats for the diet may be more important because it has been shown here that TTA has unexpected effects in conjunction with oils, especially those of marine origin. Thus, the fact that this regular food is a high-fat, low-carbohydrate, low-carb diet probably enhances the beneficial effects of TTA compared to the effects of TTA, administered alone or in conjunction with a high-carb diet.
В примере 2.4 определяли эффекты конкретного белкового материала, ферментированного белкового материала сои. Ферментированный белковый материал сои получают в результате ферментации бобов сои. Он содержит модифицированные и немодифицированные белки сои и изофлавоны, а также другие составляющие сои. В предпочтительном варианте осуществления по этому изобретению используется ферментированный белковый материал сои Gendaxin®.In Example 2.4, the effects of a particular protein material, a fermented soy protein material, were determined. Fermented soy protein material is obtained by fermenting soy beans. It contains modified and unmodified soy proteins and isoflavones, as well as other components of soy. In a preferred embodiment of the invention, Gendaxin® fermented soy protein material is used.
В таблице 2 описан состав жирных кислот рационов. В составе жирных кислот рационов существовали совсем незначительные различия (все содержали приблизительно 100% рыбий жир), процентное содержание n-3 жирных кислот (FA) было практически одинаковым. Рацион, в который была добавлена TTA, при этом приводил к значительным изменениям процентного содержания в составе n-3 жирных кислот фосфолипидов (PL), триацилглицеринов (TAG) и свободных жирных кислот (FFA) в жабрах, сердце и в печени атлантического лосося. Введение TTA в течение 8 недель также приводило к снижению процентного содержания насыщенных FA практически во всех липидных фракциях. Процентное содержание n-3 FA, особенно DHA, повышалось в жабрах и сердце, как можно видеть в примере 2.3.Table 2 describes the composition of the fatty acids of the diets. There were very slight differences in the composition of dietary fatty acids (all contained approximately 100% fish oil), the percentage of n-3 fatty acids (FA) was almost the same. The diet to which TTA was added resulted in significant changes in the percentage of n-3 fatty acids phospholipids (PL), triacylglycerols (TAG) and free fatty acids (FFA) in the gills, heart and liver of Atlantic salmon. The introduction of TTA for 8 weeks also led to a decrease in the percentage of saturated FA in almost all lipid fractions. The percentage of n-3 FA, especially DHA, increased in the gills and heart, as can be seen in example 2.3.
Атлантический лосось, которого кормили рационом, содержащим TTA, рос медленнее, чем рыбы, которых кормили контрольным рационом. Уровень липидов в организме рыб, которых кормили рационом с добавлением TTA, был значительно более низким, чем уровень у рыб, которых кормили контрольным рационом.Atlantic salmon fed a diet containing TTA grew slower than fish fed a control diet. The lipid level in the body of fish fed a diet supplemented with TTA was significantly lower than the level of fish fed a control diet.
Существуют благоприятные эффекты на здоровье самих рыб, которых кормили кормом по этому изобретению. У старых рыб может развиваться склероз артерий и приводить к проблемам со здоровьем, как и у человека, и снижение липидов оказывает благоприятный эффект в этом отношении.There are beneficial effects on the health of the fish themselves that were fed the food of this invention. In old fish, arterial sclerosis can develop and lead to health problems, as in humans, and a decrease in lipids has a beneficial effect in this regard.
В общем, полагают, что постные сорта мяса, полученные способом по настоящему изобретению, являются полезными у большинства видов животных, которых разводят для потребления. Таким образом, эффект снижения общего уровня липидов сам по себе является преимущественным. Кроме того, конкретные изменения в составе жирных кислот являются особенно положительными. Общепризнанным является то, что употребление меньшего количества насыщенных жирных кислот полезно для здоровья, и повышенное потребление n-3 связано с пользой для здоровья всего организма, от снижения вероятности заболеваний сердца до противовоспалительных эффектов и даже для повышения интеллекта у детей.In general, it is believed that lean meats obtained by the method of the present invention are useful in most animal species that are bred for consumption. Thus, the effect of lowering the overall level of lipids in itself is advantageous. In addition, specific changes in the composition of fatty acids are particularly positive. It is generally recognized that consuming less saturated fatty acids is good for health, and increased n-3 intake is associated with health benefits for the whole body, from reducing the likelihood of heart disease to anti-inflammatory effects and even to increase intelligence in children.
Другие животные продукты, полученные из животных, которых кормили кормом по настоящему изобретению, также могут обладать полезными эффектами. В качестве примера рыбий жир, полученный таким образом, будет обладать преимущественным пищевым составом по сравнению с маслом из рыбы, которую кормили коммерческим рационом. Другие продукты, такие как шкура рыбы, также могут обладать положительными эффектами, наблюдаемыми при улучшении состава тканей всего организма.Other animal products derived from animals fed with the food of the present invention may also have beneficial effects. As an example, the fish oil obtained in this way will have a superior nutritional composition compared to fish oil, which was fed a commercial diet. Other foods, such as fish skins, may also have the beneficial effects observed when improving the tissue composition of the whole organism.
Уровень жирных кислот в крови в норме определяется относительными скоростями расщепления жиров и этерификации в жировой ткани и потреблением жирных кислот в мышцах. В мышцах жирные кислоты ингибируют потребление глюкозы и окисление. Повышенный уровень жирных кислот и триацилглицерина в крови и мышцах, таким образом, коррелирует с ожирением и резистентностью к инсулину, а также со снижением способности метаболизировать глюкозу (Olefsky JM (2000) J Clin Invest 106:467-472; Guerre-Millo M et al. (2000) J Biol Chem 275:16638-16642). Стимуляцией окисления жирных кислот и снижением концентрации жирных кислот в плазме не подвергающимися β-окислению структурными элементами жирных кислот и растительным и/или рыбьим жиром можно, таким образом предотвращать и лечить резистентность к инсулину и вызванные ей заболеваний (Shulman GI (2000) J Clin Invest 106(2):171-176). Было выявлено, что TTA полностью предотвращает вызванную рационом с высоким содержанием жиров резистентность к инсулину и ожирение, и снижает ожирение, гипергликемию и чувствительность к инсулину у крыс с ожирением (Madsen M et al. (2002) J Lipid Res 43 (5): 742-50). Вследствие неожиданных синергических результатов, обнаруженных авторами изобретения при использовании как TTA, так и растительного и рыбьего жира, без подтверждения какой-либо объясняющей полученные результаты конкретной теорией, авторы настоящего изобретения в настоящее время ожидают, что такое сочетание окажется даже более эффективным при лечении этих состояний. Авторы настоящего изобретения также ожидают, что эффект TTA будет усиливаться рыбьим и растительным жиром, и также необязательно маслом, при лечении сходных заболеваний и нарушений, включая повышенное кровяное давление, повышенный уровень липидов и холестерина, эндотелиальную дисфункцию, состояние повышенной свертываемости крови, синдром поликистоза яичников и метаболический синдром.The level of fatty acids in the blood is normally determined by the relative rates of fat breakdown and esterification in adipose tissue and muscle fatty acid intake. In muscles, fatty acids inhibit glucose uptake and oxidation. Elevated levels of fatty acids and triacylglycerol in the blood and muscles, therefore, correlate with obesity and insulin resistance, as well as with a decrease in the ability to metabolize glucose (Olefsky JM (2000) J Clin Invest 106: 467-472; Guerre-Millo M et al . (2000) J Biol Chem 275: 16638-16642). By stimulating fatty acid oxidation and lowering the concentration of fatty acids in plasma by non-β-oxidizing structural elements of fatty acids and vegetable and / or fish oil, it is possible to prevent and treat insulin resistance and related diseases (Shulman GI (2000) J Clin Invest 106 (2): 171-176). TTA has been found to completely prevent high-fat diet-induced insulin resistance and obesity, and to reduce obesity, hyperglycemia, and insulin sensitivity in obese rats (Madsen M et al. (2002) J Lipid Res 43 (5): 742 -fifty). Due to unexpected synergistic results found by the inventors using both TTA and vegetable and fish oil, without confirmation by any particular theory explaining the results, the present inventors now expect this combination to be even more effective in treating these conditions . The authors of the present invention also expect that the effect of TTA will be enhanced by fish and vegetable oils, and also optionally oil, in the treatment of similar diseases and disorders, including high blood pressure, high lipids and cholesterol, endothelial dysfunction, high blood coagulation, polycystic ovary syndrome and metabolic syndrome.
Семейство рецепторов, активируемых пролифератором пероксисом (PPAR) являются плейотропными регуляторами клеточных функций, таких как клеточная пролиферация, дифференцировка и гомеостаз липидов (Ye JM et al. (2001) Diabetes 50:411-417). Семейство PPAR содержит три подтипа; PPARα, PPARβ и PPARγ. TTA является сильным лигандом для PPARα (Forman BM, Chen J, Evans RM (1997) Proc Natl Acad Sci 94:4312-4317; Gottlicher M et al. (1993) Biochem Pharmacol 46:2177-2184; Berge RK et al. (1999) Biochem J 343(1):191-197), а также активирует PPARβ и PPARγ (Raspe E et al. (1999) J Lipid Res 40:2099-2110). В качестве активатора PPARα TTA стимулирует катаболизм жирных кислот повышением их потребления клетками. Снижение уровня триглицеридов в плазме посредством TTA вызывает переключение метаболизма клеток печени в направлении регулируемого PPARα катаболизма жирных кислот в митохондриях. (Graf HJ et al. (2003) J Biol Chem 278(33):30525-33). Несмотря на то, что эффект TTA на уровень триацилглицеринов в плазме определяется активацией PPARα, что показано устранением этого эффекта у мышей с нокаутом PPARα, рыбий жир не вызывает снижения триацилглицерина в плазме даже у мышей с нокаутом (Dallongeville J et al. (2001) J Biol Chem 276:4634-4639).The peroxisome proliferator activated receptor (PPAR) family is a pleiotropic regulator of cellular functions, such as cell proliferation, differentiation, and lipid homeostasis (Ye JM et al. (2001) Diabetes 50: 411-417). The PPAR family contains three subtypes; PPARα, PPARβ and PPARγ. TTA is a strong ligand for PPARα (Forman BM, Chen J, Evans RM (1997) Proc Natl Acad Sci 94: 4312-4317; Gottlicher M et al. (1993) Biochem Pharmacol 46: 2177-2184; Berge RK et al. ( 1999) Biochem J 343 (1): 191-197), and also activates PPARβ and PPARγ (Raspe E et al. (1999) J Lipid Res 40: 2099-2110). As an activator, PPARα TTA stimulates the catabolism of fatty acids by increasing their cellular consumption. A decrease in plasma triglycerides by TTA causes a switch in the liver cell metabolism towards regulated PPARα fatty acid catabolism in mitochondria. (Graf HJ et al. (2003) J Biol Chem 278 (33): 30525-33). Although the effect of TTA on plasma triacylglycerols is determined by the activation of PPARα, as shown by the elimination of this effect in PPARα knockout mice, fish oil does not cause a decrease in plasma triacylglycerol even in knockout mice (Dallongeville J et al. (2001) J Biol Chem 276: 4634-4639).
Дополнение рациона n-3 полиненасыщенными жирными кислотами, подобными кислотам, находящимся в рыбьем жире, стимулирует активность ацил-CoA-оксидазы пероксисом печени и, таким образом, окисление жирных кислот в печени и в меньшей степени в скелетных мышцах (Ukropec J et al. (2003) Lipids 38(10):1023-9). Было показано, что рацион с увеличенным содержанием рыбьего жира повышает как активность, так и уровень мРНК ферментов окисления жирных кислот пероксисом и митохондрий печени (Hong DD et al. (2003) Biochim Biophys Acta: Mol Cell Biol Lipids 1635 (1):29-36). Рыбий жир вызывал повышение относительного содержания пероксисомальной ацил-CoA-оксидазы в печени, но не в мышцах крыс, и авторы предположили, что это происходит вследствие того, что n-3 жирные кислоты защищают от индуцируемой жирами резистентности к инсулину, выступая в качестве лигандов PPARα, индуцируя пролиферацию пероксисом в печени (не внутримышечную). Экспрессия гена PPARα не менялась (Neschen S et al. (2002) Am J Physiol Endocrinol Metab 282:E395-E401).Supplementing the diet with n-3 polyunsaturated fatty acids, similar to those found in fish oil, stimulates the activity of acyl CoA oxidase in liver peroxisomes and, thus, the oxidation of fatty acids in the liver and, to a lesser extent, in skeletal muscle (Ukropec J et al. ( 2003) Lipids 38 (10): 1023-9). A diet with an increased fish oil content has been shown to increase both the activity and the mRNA level of fatty acid oxidation enzymes by peroxisomes and liver mitochondria (Hong DD et al. (2003) Biochim Biophys Acta: Mol Cell Biol Lipids 1635 (1): 29- 36). Fish oil caused an increase in the relative content of peroxisomal acyl-CoA oxidase in the liver, but not in the muscles of rats, and the authors suggested that this is due to the fact that n-3 fatty acids protect against insulin resistance induced by fats, acting as PPARα ligands inducing proliferation of peroxisomes in the liver (not intramuscular). The expression of the PPARα gene did not change (Neschen S et al. (2002) Am J Physiol Endocrinol Metab 282: E395-E401).
Как можно видеть в указанных выше абзацах, биохимические детали того, каким именно образом TTA и рыбий жир влияют на метаболизм жиров, подробно не известны. Еще менее известно, каким образом растительные масла влияют на метаболизм жиров, как описано по настоящему изобретению (Rustan AC, Christiansen EN, Drevon CA (1992) Biochem J 283(2):333-339. Эффекты могут быть или могут не быть опосредованы одним путем как TTA, так и масла могут, например, действовать в качестве лигандов PPARα или действовать независимо от PPARα. Если они действуют одинаковыми путями, то нельзя ожидать усиления TTA маслами, вследствие того, что TTA представляет собой сильный активатор PPARα, который, как можно ожидать, будет полностью обеспечивать активацию PPARα. Даже при сложении эффектов, эффект TTA и растительного или рыбьего жира при сочетании двух компонентов окажется неожиданным. Получение синергичного эффекта выше аддитивного эффекта, как особенно можно видеть для TTA и соевого масла во всех испытаниях по настоящему изобретению, но и в меньшей степени для TTA и рыбьего жира или подсолнечного масла в отношении снижения уровня триацилглицерина, и для оливкового и подсолнечного масла в отношении снижения уровня холестерина, оказалось еще более неожиданным. Подвергаемые β-окислению аналоги жирных кислот обладают множеством эффектов, и авторы настоящего изобретения не знают, каким образом все они возникают, но исходя из неожиданных результатов по настоящему изобретению авторы ожидают, что все они будут усиливаться растительным или рыбьим жиром, без подтверждения какой-либо конкретной теорией.As can be seen in the above paragraphs, the biochemical details of how TTA and fish oil affect fat metabolism are not known in detail. Even less known is how vegetable oils affect fat metabolism as described in the present invention (Rustan AC, Christiansen EN, Drevon CA (1992) Biochem J 283 (2): 333-339. The effects may or may not be mediated by one both TTA and oils can, for example, act as PPARα ligands or act independently of PPARα. If they act in the same way, one cannot expect TTA to be enhanced with oils, because TTA is a strong PPARα activator, which, as much as possible expected to fully provide activation of PPARα. e when effects are combined, the effect of TTA and vegetable or fish oil when combining the two components will be unexpected.The synergistic effect is higher than the additive effect, as can be seen especially for TTA and soybean oil in all tests of the present invention, but to a lesser extent for TTA and fish oil or sunflower oil in relation to lowering the level of triacylglycerol, and for olive and sunflower oil in relation to lowering cholesterol, it was even more unexpected. Β-oxidation fatty acid analogues have many effects, and the authors of the present invention do not know how they all arise, but based on the unexpected results of the present invention, the authors expect that they will all be enhanced by vegetable or fish oil, without any confirmation specific theory.
Лиганды PPAR нарушают пролиферацию различных клеточных линий злокачественных опухолей. В частности, было выявлено, что TTA снижает пролиферацию множества клеточных линий злокачественных опухолей (Berge K et al. (2001) Carcinogenesis 22:1747-1755; Abdi-Dezfuli F et al. (1997) Breast Cancer Res Treat 45:229-239; Tronstad KJ et al. (2001) Biochem Pharmacol 61:639-649; Tronstad KJ et al. (2001) Lipids 36:305-313). Это снижение связано со снижением уровня триацилглицеринов (Tronstad KJ et al. (2001) Biochem Pharmacol 61:639-649) и опосредуется как PPAR-зависимыми, так и PPAR-независимыми путями (Berge K et al. (2001) Carcinogenesis 22:1747-1755). Поскольку масла повышают способность TTA снижать уровень триацилглицеринов и являются лигандом PPAR, то, таким образом, очень вероятно, что они также будут повышать антипролиферативные эффекты TTA, обеспечивая такое повышение способности TTA к профилактике и лечению злокачественных опухолей. TTA может использоваться для профилактики и/или лечения злокачественной опухоли, включая ингибирование: первичных и вторичных новообразований, роста опухолей, инвазии первичной опухоли в соединительную ткань и образования вторичных опухолей (NO 2002 5930).PPAR ligands disrupt the proliferation of various cancer cell lines. In particular, it was found that TTA reduces the proliferation of many cell lines of malignant tumors (Berge K et al. (2001) Carcinogenesis 22: 1747-1755; Abdi-Dezfuli F et al. (1997) Breast Cancer Res Treat 45: 229-239 ; Tronstad KJ et al. (2001) Biochem Pharmacol 61: 639-649; Tronstad KJ et al. (2001) Lipids 36: 305-313). This decrease is associated with a decrease in the level of triacylglycerols (Tronstad KJ et al. (2001) Biochem Pharmacol 61: 639-649) and is mediated by both PPAR-dependent and PPAR-independent pathways (Berge K et al. (2001) Carcinogenesis 22: 1747 -1755). Since oils increase the ability of TTA to lower triacylglycerols and are a PPAR ligand, it is thus very likely that they will also increase the antiproliferative effects of TTA, providing such an increase in the ability of TTA to prevent and treat malignant tumors. TTA can be used for the prevention and / or treatment of a malignant tumor, including the inhibition of: primary and secondary neoplasms, tumor growth, invasion of the primary tumor into the connective tissue and the formation of secondary tumors (NO 2002 5930).
Как правило, агонисты PPAR и полиненасыщенные жирные кислоты модулируют воспалительный ответ. TTA модулирует воспалительный ответ подавлением высвобождения воспалительного цитокина интерлейкина-2 и подавлением стимулированной PHA пролиферации периферических мононуклеарных клеток (Aukrust P et al. (2003) Eur J Clin Invest 33(5):426-33). Модулирование цитокина посредством TTA может быть опосредовано PPAR или изменением уровня простагландинов, или модификацией опосредуемой липидами передачи сигнала, последняя из них также является возможным механизмом действия полиненасыщенных жирных кислот, таких, какие находятся в растительном и рыбьем жире. Теперь, когда авторы изобретения обнаружили неожиданные результаты в отношении настоящего изобретения, они, таким образом, ожидают, что растительное масло и/или рыбий жир, в сочетании с не подвергающимися β-окислению структурными элементами жирных кислот будут усиливать эффект аналогов жирных кислот на воспалительные нарушения, включая иммуноопосредованные нарушения, такие как ревматоидный артрит, системный васкулит, системная красная волчанка, системная склеродермия, дерматомиозит, полимиозит, различные аутоиммунные эндокринные нарушения (например, тиреоидит и адреналит), различные иммуноопосредованные неврологические нарушения (например, рассеянный склероз и миастения), различные сердечно-сосудистые нарушения (например, миокардит, застойная сердечная недостаточность, артериосклероз и стабильная и нестабильная стенокардия, и гранулематоз Вегенера), воспалительные заболевания кишечника, болезнь Крона, неспецифический колит, панкреатит, нефрит, холестаз/фиброз печени, и острое и хронической отторжение трансплантата после трансплантации органа, а также пролиферативные нарушения кожи, такие как псориаз, атопический дерматит, неспецифический дерматит, первично ирритантный контактный дерматит, аллергический контактный дерматит, ламеллярный ихтиоз, эпидермолитический гиперкератоз, предзлокачественный индуцированный действием солнца кератоз и себорея, и заболевания, которые обладают воспалительным компонентом, такие как, болезнь Альцгеймера или нарушенная/способная к улучшению когнитивная функция.Typically, PPAR agonists and polyunsaturated fatty acids modulate the inflammatory response. TTA modulates the inflammatory response by suppressing the release of the inflammatory cytokine interleukin-2 and suppressing PHA-stimulated proliferation of peripheral mononuclear cells (Aukrust P et al. (2003) Eur J Clin Invest 33 (5): 426-33). Modulation of the cytokine by TTA can be mediated by PPAR or by altering the level of prostaglandins, or by modifying lipid-mediated signaling, the latter of which is also a possible mechanism of action of polyunsaturated fatty acids, such as those found in vegetable and fish oils. Now that the inventors have found unexpected results in relation to the present invention, they are thus expecting that vegetable oil and / or fish oil, in combination with non-β-oxidizing fatty acid structural elements, will enhance the effect of fatty acid analogues on inflammatory disorders including immune-mediated disorders, such as rheumatoid arthritis, systemic vasculitis, systemic lupus erythematosus, systemic scleroderma, dermatomyositis, polymyositis, various autoimmune endocrine deterioration (e.g., thyroiditis and adrenalitis), various immuno-mediated neurological disorders (e.g., multiple sclerosis and myasthenia gravis), various cardiovascular disorders (e.g., myocarditis, congestive heart failure, arteriosclerosis and stable and unstable angina, and Wegener's granulomatosis), inflammatory diseases bowel disease, Crohn's disease, nonspecific colitis, pancreatitis, nephritis, cholestasis / liver fibrosis, and acute and chronic transplant rejection after organ transplantation, as well as proliferation skin disorders such as psoriasis, atopic dermatitis, nonspecific dermatitis, primarily irritant contact dermatitis, allergic contact dermatitis, lamellar ichthyosis, epidermolytic hyperkeratosis, precancerous sun-induced keratosis and seborrhea, and diseases that have an inflammatory component such as an inflammatory component such as or impaired / capable of improving cognitive function.
ОПИСАНИЕ РИСУНКОВDESCRIPTION OF FIGURES
На Фигуре 1 показано, что повышение активности ацил-CoA жиров TTA усиливается соевым маслом, оливковым маслом и рыбьим жиром.Figure 1 shows that the increase in the activity of acyl-CoA TTA fats is enhanced by soybean oil, olive oil and fish oil.
На фигуре 2 показано, что эффект TTA в отношении снижения уровня фосфолипидов усиливается подсолнечным маслом, соевым маслом и рыбьим жиром.Figure 2 shows that the effect of TTA in reducing phospholipids is enhanced by sunflower oil, soybean oil, and fish oil.
На фигуре 3 показано, что эффект TTA в отношении снижения уровня холестерина усиливается оливковым маслом, подсолнечным маслом, соевым маслом и рыбьим жиром.Figure 3 shows that the effect of TTA on cholesterol lowering is enhanced by olive oil, sunflower oil, soybean oil and fish oil.
На фигуре 4 показано, что эффекты TTA в отношении снижения уровня триацилглицеринов усиливаются оливковым маслом, подсолнечным маслом, соевым маслом и рыбьим жиром.Figure 4 shows that the effects of TTA in reducing triacylglycerols are enhanced by olive oil, sunflower oil, soybean oil and fish oil.
ОПРЕДЕЛЕНИЯ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ЗАЯВКЕDEFINITIONS USED IN THE APPLICATION
ЖивотныеAnimals
В этом контексте термин "животные" включает в себя млекопитающих, таких как человек и фермерские (сельскохозяйственные) животные, особенно животных экономического значения, таких как куриные, млекопитающие, относящиеся к крупному рогатому скоту, овцам, козам и свиньям, особенно животных, посредством которых получают пригодные для потребления человеком продукты, такие как мясо, яйца и молоко. Далее, подразумевается, что термин включает в себя рыбу и моллюсков, таких как лосось, треска, тиляпия, двустворчатые моллюски, устрицы, омар или крабы. Также термин включает в себя домашних животных, таких как собаки и кошки.In this context, the term "animals" includes mammals, such as humans and farm (farm) animals, especially animals of economic importance, such as chicken, mammals related to cattle, sheep, goats and pigs, especially animals, through which get products suitable for human consumption, such as meat, eggs and milk. Further, the term is intended to include fish and shellfish such as salmon, cod, tilapia, bivalves, oysters, lobster or crabs. The term also includes domestic animals, such as dogs and cats.
Корм для животныхPet food
Термин "корм для животных" относится к пище для животных (как определено выше). Корм для животных, как правило, содержит соответствующие количества жиров, белков, углеводов, витаминов и минералов, необходимых для жизнеобеспечения определенного реципиента-животного, и может содержать дополнительные компоненты для улучшения вкуса, консистенции, цвета, запаха, стабильности, срока хранения и т.д., или антибиотики или другие компоненты, добавляемые для пользы для здоровья животного. Корм для животных предпочтительно, но не обязательно представляет собой сухое вещество, наиболее предпочтительно, гранулированное вещество. Также подразумевается, что термин "корм для животных" включает в себя пищевые композиции, ветеринарные композиции, и/или функциональные пищевые продукты для потребления животными.The term "animal feed" refers to food for animals (as defined above). Animal food, as a rule, contains the appropriate amounts of fats, proteins, carbohydrates, vitamins and minerals necessary for the life support of a particular recipient animal, and may contain additional components to improve the taste, texture, color, smell, stability, shelf life, etc. e., or antibiotics or other components added for the benefit of the animal’s health. Animal feed is preferably, but not necessarily, a dry substance, most preferably a granular substance. The term “animal feed” is also intended to include food compositions, veterinary compositions, and / or functional foods for animal consumption.
МясоMeat
Термин "мясо" относится к сырому мясу из любого животного, как определено выше. Таким образом, все виды содержащего белок сырого мяса из млекопитающих, птиц, рабы и моллюсков, рассматриваются как мясо. Термин "мясной продукт" относится к любому продукту из мяса, как определено выше.The term "meat" refers to raw meat from any animal, as defined above. Thus, all types of protein-containing raw meat from mammals, birds, slaves and mollusks are considered meat. The term "meat product" refers to any meat product as defined above.
Растительные жиры и/или рыбий жирVegetable Fats and / or Fish Oil
Они включают в себя все виды масла растительного или морского происхождения, включая, но не ограничиваясь ими, жирные или нелетучие масла, а также эфирные или летучие масла, и любое их сочетание. Они не обязательно должны находиться в жидкой форме. Подсолнечное масло, которое использовалось для настоящего изобретения, в действительности представляет собой масло из семян подсолнечника, а не из самого цветка.They include all types of oils of vegetable or marine origin, including, but not limited to, fatty or non-volatile oils, as well as essential or volatile oils, and any combination thereof. They do not have to be in liquid form. The sunflower oil that was used for the present invention is in fact an oil from sunflower seeds, and not from the flower itself.
Рыбий жирFish fat
Этот термин включает в себя все виды масла морского происхождения.This term includes all types of oil of marine origin.
Пищевая композицияFood composition
Подразумевается, что этот термин включает в себя любое потребляемое внутрь вещество, включая, но не ограничиваясь ими, пищевые добавки, функциональные пищевые продукты, растительные добавки и т.д. для употребления человеком и животными. Термин также включает в себя пищевые продукты для употребления человеком и корм для животного, где композиция по настоящему изобретению представляет собой дополнительный компонент, а не основной ингредиент. Это особенно относится к корму для животных, где любой корм может быть дополнен композицией по настоящему изобретению, для достижения ее биологических эффектов.It is understood that this term includes any ingestible substance, including, but not limited to, nutritional supplements, functional foods, herbal supplements, etc. for human and animal consumption. The term also includes foods for human consumption and animal feed, where the composition of the present invention is an additional component, and not the main ingredient. This is especially true for animal feed, where any food can be supplemented with the composition of the present invention to achieve its biological effects.
ЛечениеTreatment
В отношении фармацевтических аспектов применения этого изобретения, термин "лечение" относится к снижению тяжести заболевания.With respect to pharmaceutical aspects of the use of this invention, the term “treatment” refers to a reduction in the severity of a disease.
ПрофилактикаPrevention
Термин "профилактика" относится к предотвращению данного заболевания, т.е. соединение по настоящему изобретению вводят перед развитием состояния. Это означает, что соединения по настоящему изобретению могут использоваться в качестве профилактических средств или в качестве ингредиентов в пищевой композиции в целях предотвращения риска или развития данного заболевания.The term "prophylaxis" refers to the prevention of a given disease, i.e. the compound of the present invention is administered before the development of the condition. This means that the compounds of the present invention can be used as prophylactic agents or as ingredients in a food composition in order to prevent the risk or development of this disease.
Пищевая композицияFood composition
Подразумевается, что этот термин включает в себя употребляемый внутрь материал, включая, но не ограничиваясь ими, пищевые добавки, функциональные пищевые продукты, растительные добавки и т.д. для употребления человеком или животными. Термин также включает в себя пищевые продукты для употребления человеком и корм для животных, где композиция по настоящему изобретению является дополнительным компонентом, и не является основным ингредиентом. Это особенно относится к корму для животных, где любой корм может быть дополнен композицией по настоящему изобретению, для достижения ее биологических эффектов.It is understood that this term includes material used internally, including, but not limited to, nutritional supplements, functional foods, herbal supplements, etc. for human or animal consumption. The term also includes foods for human consumption and animal feed, where the composition of the present invention is an additional component, and is not the main ingredient. This is especially true for animal feed, where any food can be supplemented with the composition of the present invention to achieve its biological effects.
ВВЕДЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ ПО НАСТОЯЩЕМУ ИЗОБРЕТЕНИЮINTRODUCTION OF THE COMPOUNDS OF THE PRESENT INVENTION
В качестве фармацевтического лекарственного средства соединения по настоящему изобретению могут быть введены непосредственно животному любым пригодным способом, включая парентеральное, интраназальное, пероральное введение, или посредством всасывания через кожу. Она может быть введена местно или системно. Конкретный способ введения каждого средства зависит, например, от анамнеза рецепиента-человека или животного.As a pharmaceutical drug, the compounds of the present invention can be administered directly to an animal by any suitable method, including parenteral, intranasal, oral administration, or by absorption through the skin. It can be administered locally or systemically. The particular route of administration of each agent depends, for example, on the history of the human or animal recipient.
Примеры парентерального введения включают в себя подкожное, внутримышечное, внутривенное, интраартериальное и внутрибрюшинное введение.Examples of parenteral administration include subcutaneous, intramuscular, intravenous, intraarterial and intraperitoneal administration.
В качестве общего положения, общее фармацевтически эффективное количество каждого из не подвергающихся β-окислению структурных элементов жирных кислот, вводимого парентерально в дозе предпочтительно находится в диапазоне от приблизительно 1 мг/кг/сутки до 200 мг/кг/сутки на массу тела пациента для человека, хотя, как описано выше, можно проводить его значительное терапевтическое разделение. Доза от 5-50 мг/кг/сутки является наиболее предпочтительной. Доза масла 1-300 мг/кг/сутки является предпочтительной, и доза 10-150 мг/кг/сутки является наиболее предпочтительной.As a general point, the total pharmaceutically effective amount of each of the non-β-oxidizable structural elements of fatty acids administered parenterally in a dose is preferably in the range of about 1 mg / kg / day to 200 mg / kg / day per patient body weight for humans although, as described above, it is possible to carry out a significant therapeutic separation. A dose of 5-50 mg / kg / day is most preferred. An oil dose of 1-300 mg / kg / day is preferred, and a dose of 10-150 mg / kg / day is most preferred.
При постоянном введении, все соединения по настоящему изобретению, как правило, вводят в виде 1-4 инъекций в сутки или длительными подкожными инфузиями, например, с использованием мини-дозатора. Также может использоваться раствор из мешка для внутривенного введения. Основным фактором при выборе соответствующей дозы является конечный результат, определяемый по снижению общей массы тела или соотношения жира и мышечной массы, или по другим критериям измеряемого контроля, или по профилактике ожирения или профилактике связанных с ожирением состояний, как определяется соответствующим образом квалифицированным специалистом.When administered continuously, all compounds of the present invention are typically administered as 1-4 injections per day or by continuous subcutaneous infusions, for example, using a mini-dispenser. A solution from an intravenous bag may also be used. The main factor in choosing the appropriate dose is the final result, determined by reducing the total body weight or the ratio of fat to muscle mass, or by other criteria of the measured control, or by preventing obesity or preventing obesity-related conditions, as determined by an appropriately qualified specialist.
В случае парентерального введения, в одном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению изготовлены смешиванием каждого из них с соответствующей степенью чистоты в единичной дозированной инъецируемой форме (раствор, суспензия или эмульсия) c фармацевтически приемлемым носителем, т.е. с носителем, который является нетоксичным для реципиентов в используемых дозах и концентрациях и совместимым с другими ингредиентами состава.In the case of parenteral administration, in one embodiment, the compounds of the present invention are made by mixing each of them with an appropriate degree of purity in a unit dosage form of injection (solution, suspension or emulsion) with a pharmaceutically acceptable carrier, i.e. with a carrier that is non-toxic to recipients at the used doses and concentrations and is compatible with other ingredients of the composition.
Как правило, составы получают объединением соединений по настоящему изобретению с жидкими носителями или мелкоизмельченными твердыми носителями или и с теми, и с другими в равномерную и однородную смесь. Затем, если необходимо, продукту придают форму желательного препарата. Предпочтительно носитель представляет собой носитель для парентерального введения, более предпочтительно, раствор, который является изотоничным крови реципиента. Примеры таких носителей включают в себя воду, физиологический раствор, раствор Рингера и раствор декстрозы. Неводные носители, такие как жирные масла и этилолеат, а также липосомы, также являются пригодными здесь.Typically, formulations are prepared by combining the compounds of the present invention with liquid carriers or finely divided solid carriers, or both, in a uniform and uniform mixture. Then, if necessary, the product is shaped into the desired preparation. Preferably, the carrier is a carrier for parenteral administration, more preferably a solution that is isotonic with the blood of the recipient. Examples of such carriers include water, saline, Ringer's solution, and dextrose solution. Non-aqueous vehicles, such as fatty oils and ethyl oleate, as well as liposomes, are also suitable here.
Если целесообразно, носитель может содержать небольшие количества дополнительных компонентов, таких как вещества, которые увеличивают изотоничность и химическую стабильность. Такие вещества не являются токсичными для реципиента в используемых дозах и концентрациях и включают в себя буферы, такие как фосфатный, цитратный, сукцинатный, ацетатный буфер и другие буферы на основе органических кислот или их солей; антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота; иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие как глицин, глутаминовая кислота, аспарагиновая кислота или аргинин; моносахариды, дисахариды и другие углеводороды, включая целлюлозу или ее производные, глюкозу, маннозу или декстрины; хелатирующие агенты, такие как ЭДТА; спирты на основе сахаров, такие как маннит или сорбит; противоионы, такие как натрий; и/или неионные поверхностно-активные вещества, такие как полисорбаты, полоксамеры или PEG.If appropriate, the carrier may contain small amounts of additional components, such as substances that increase isotonicity and chemical stability. Such substances are not toxic to the recipient in the dosages and concentrations used and include buffers such as phosphate, citrate, succinate, acetate buffer and other buffers based on organic acids or their salts; antioxidants such as ascorbic acid; immunoglobulins; hydrophilic polymers such as polyvinylpyrrolidone; amino acids such as glycine, glutamic acid, aspartic acid or arginine; monosaccharides, disaccharides and other hydrocarbons, including cellulose or its derivatives, glucose, mannose or dextrins; chelating agents such as EDTA; sugar based alcohols such as mannitol or sorbitol; counterions such as sodium; and / or nonionic surfactants, such as polysorbates, poloxamers, or PEG.
В случае пероральных фармакологических композиций, могут использоваться такие носители, например, как вода, желатин, камеди, лактоза, крахмалы, стеарат магния, тальк, масла, полиалкенгликоль, вазелиновое масло и т.п. Такой фармацевтический препарат может быть в виде единичной дозированной формы и может дополнительно содержать другие терапевтически полезные вещества или общепринятые фармацевтические адъюванты, такие как консерванты, стабилизаторы, эмульгаторы, буферы и т.п. Фармацевтические препараты могут быть в виде общепринятых жидких форм, таких как таблетки, капсулы, драже, ампулы и т.п., в виде общепринятых дозированных форм, таких как ампулы, и в виде суппозиториев и т.п.In the case of oral pharmacological compositions, carriers such as water, gelatin, gums, lactose, starches, magnesium stearate, talc, oils, polyalkylene glycol, liquid paraffin, and the like can be used. Such a pharmaceutical preparation may be in unit dosage form and may additionally contain other therapeutically useful substances or conventional pharmaceutical adjuvants, such as preservatives, stabilizers, emulsifiers, buffers, and the like. The pharmaceutical preparations can be in the form of conventional liquid forms, such as tablets, capsules, dragees, ampoules, and the like, in the form of conventional dosage forms, such as ampoules, and in the form of suppositories and the like.
Кроме того, соединения по настоящему изобретению, т.е. соединения, содержащие аналог не подвергающейся β-окислению жирной кислоты и растительный или рыбий жир могут использоваться в пищевых препаратах, как определено выше, в случае которых дозировка не подвергающихся β-окислению аналогов жирных кислот представляет собой дозировку, как для описанных лекарственных средств или ниже, в то время как количество растительного и/или рыбьего жира предпочтительно является пригодным для изготовления пищевых и кормовых материалов. Как часть пищевой композиции и, особенно, корма для животных, растительный и/или рыбий жир могут представлять собой значительную часть корма, и, таким образом, обладать пищевой ценностью, а также усиливать эффекты не подвергающиеся β-окислению аналоги жирных кислот. Жир по настоящему изобретению может включать в себя вплоть до всех жиров питательной композиции. В корме для животных количество не подвергающегося β-окислению аналога жирной кислоты может быть вплоть до 10 раз выше, чем в продуктах для употребления человеком, то есть вплоть до 2 г/кг/сутки на массу тела животного. Такой корм для животных может использоваться для повседневного кормления животных. Композиция корма для животных также может содержать ферментированный белковый материал сои. Ферментированный белковый материал сои особенно пригоден в качестве функционального белка в пищевых продуктах, в частности, при использовании в качестве заместителя природной плазмы в кормах для животных и кормах для домашних животных. Композиция корма для животных также может содержать дополнительные ингредиенты, такие как жиры, сахара, соль, вкусовые добавки, минералы и т.д. Кроме того, продукту можно придавать форму кусков, сходных с природными кусками мяса по внешнему виду и консистенции. Продукт по этому изобретению обладает дополнительными преимуществами в том, что его легко изготавливать с содержанием необходимых пищевых добавок, он легко переваривается животными и обладает привлекательным вкусом для животных.In addition, the compounds of the present invention, i.e. compounds containing an analog of a non-β-oxidizing fatty acid and vegetable or fish oil can be used in food preparations as defined above, in which case the dosage of non-β-oxidizing fatty acid analogues is a dosage as for the described drugs or below, while the amount of vegetable and / or fish oil is preferably suitable for the manufacture of food and feed materials. As part of the food composition, and especially animal feed, vegetable and / or fish oil can be a significant part of the feed, and thus have nutritional value and also enhance the effects of non-β-oxidizing fatty acid analogues. The fat of the present invention may include up to all fats of the nutritional composition. In animal feed, the amount of non-β-oxidizing fatty acid analogue can be up to 10 times higher than in products for human consumption, that is, up to 2 g / kg / day per animal body weight. Such animal feed can be used for daily feeding of animals. The animal feed composition may also contain fermented soy protein material. The fermented protein material of soybean is particularly suitable as a functional protein in food products, in particular when used as a substitute for natural plasma in animal feed and pet food. The animal feed composition may also contain additional ingredients such as fats, sugars, salt, flavors, minerals, etc. In addition, the product can be shaped into pieces similar to natural pieces of meat in appearance and consistency. The product according to this invention has additional advantages in that it is easy to manufacture with the necessary food additives, it is easily digested by animals and has an attractive taste for animals.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬEXPERIMENTAL PART
Получение не подвергающихся β-окислению структурных элементов жирных кислот по настоящему изобретением подробно описано более ранних патентных заявках Норвегии № 20005461, 20005462, 20005463 и 20024114 заявителя. В этих документах также описаны исследования токсичности TTA. Препарат моно-, ди- и триглицеридов и содержащих азот липидов в соответствии по этому изобретению подробно описан в патентной заявке США № 10/484350. Препарат фосфолипидов, включающий серин, этаноламин, холин, глицерин и инозитол по этому изобретению подробно описан в более ранней патентной заявке Норвегии № 20045562 заявителя.The preparation of the non-β-oxidizing structural elements of the fatty acids of the present invention is described in detail in Norwegian earlier patent applications No. 20005461, 20005462, 20005463 and 20024114 of the applicant. These documents also describe TTA toxicity studies. The preparation of mono-, di- and triglycerides and nitrogen-containing lipids in accordance with this invention is described in detail in US patent application No. 10/484350. A phospholipid preparation comprising serine, ethanolamine, choline, glycerin and inositol according to this invention is described in detail in Norway's earlier patent application No. 20045562 of the applicant.
Пример 1. Биологические эффекты композиции по этому изобретению у крысExample 1. Biological effects of the composition of this invention in rats
1.1 Экспериментальная модель1.1 Experimental Model
Химические реактивыChemical reagents
Химические реактивы получали из общепринятых коммерческих источников, и они были химически чистыми. Рыбий жир получали из Hordafor, а растительные масла получали из Mills. В качестве контроля (отрицательного) использовали карбоксиметилцеллюлозу (CMC).Chemical reagents were obtained from generally accepted commercial sources, and they were chemically pure. Fish oil was obtained from Hordafor, and vegetable oils were obtained from Mills. As a control (negative), carboxymethyl cellulose (CMC) was used.
Экспериментальные животныеExperimental animals
Самцов крыс Вистар с массой от 250 до 358 г приобретали в AnLab Ltd. (Прага, Чешская Республика) и содержали в клетках из проволоки при температуре 22±1°C и в комнате с контролируемым освещением (свет от 7 до полудня до 7 после полудня). В приеме пищи и воды не было ограничений. В каждой клетке держали три крысы. Увеличение массы и потребление корма определяли каждые сутки.Male Wistar rats weighing from 250 to 358 g were purchased from AnLab Ltd. (Prague, Czech Republic) and kept in wire cages at a temperature of 22 ± 1 ° C and in a room with controlled lighting (light from 7 to noon to 7 in the afternoon). There were no restrictions on the intake of food and water. Three rats were kept in each cage. Weight gain and feed intake were determined every day.
Экспериментальные рационыExperimental rations
Крыс кормили стандартным рационом Chow ST1 (Velaz, Прага, Чешская Республика).Rats were fed a standard diet of Chow ST1 (Velaz, Prague, Czech Republic).
ВведениеIntroduction
Перед началом эксперимента самцам крыс Вистар давали возможность приспособиться к новым окружающим условиям. Затем им проводили введение каждые сутки в течение 10 суток посредством кормления через зонд. В качестве носителя и отрицательного контроля использовали CMC. В каждой группе по введению было по 4 крысы. В группах, в которых вводили TTA, вводили 150 мг/кг массы тела/сутки TTA, растворенной в CMC или маслах. В группах, в которых вводили жиры (подсолнечный, соевый, оливковый или рыбий), вводили 3 мл (приблизительно 2,5 г)/кг массы тела/сутки. В качестве носителя и отрицательного контроля использовали CMC. На следующие сутки после последнего введения крыс умерщвляли.Before the experiment, male Wistar rats were given the opportunity to adapt to new environmental conditions. Then they were administered every day for 10 days by feeding through a tube. As a carrier and a negative control, CMC was used. In each group, 4 rats were administered. In the groups in which TTA was administered, 150 mg / kg body weight / day of TTA dissolved in CMC or oils was administered. In the groups in which fats were administered (sunflower, soy, olive or fish), 3 ml (approximately 2.5 g) / kg body weight / day were administered. As a carrier and a negative control, CMC was used. The next day after the last injection, rats were euthanized.
Умерщвление и извлечение тканейKilling and tissue removal
Крысам проводили анестезию смесью 1:1 HypnormTM (фентанил цитрат 0,315 мг/мл и флуанизон 10 мг/мл, Janssen Animal Health) и Dormicum® (мидазолам 5 мг/мл, F. Hoffmann-La Roche), вводимой подкожно. Проводили забор крови непосредственно из сердца с использованием промытого гепарином шприца. Печень сразу удаляли, взвешивали и разделяли на две части, которые сразу охлаждали на льду или замораживали в жидком азоте, соответственно. Плазму и ткани хранили при -80°C до проведения анализа. Протокол был одобрен Управлением Норвегии по биологическим экспериментам на живых животных.Rats were anesthetized with a 1: 1 mixture of Hypnorm TM (fentanyl citrate 0.315 mg / ml and fluanisone 10 mg / ml, Janssen Animal Health) and Dormicum® (midazolam 5 mg / ml, F. Hoffmann-La Roche), administered subcutaneously. Blood was drawn directly from the heart using a heparin-washed syringe. The liver was immediately removed, weighed and divided into two parts, which were immediately cooled on ice or frozen in liquid nitrogen, respectively. Plasma and tissues were stored at -80 ° C until analysis. The protocol was approved by the Norwegian Office of Biological Experiments on Live Animals.
Получение субклеточных печеночных фракцийObtaining subcellular hepatic fractions
Печени крыс гомогенизировали по отдельности в ледяном растворе сахарозы (0,25 моль/л сахарозы в 10 ммоль/л буфера HEPES pH 7,4 и 1 ммоль/л ЭДТА) с использованием гомогенизатора Potter-Elvehjem. Субклеточное фракционирование печени проводили, как описано ранее (Berge RK et al. (1984) Eur J Biochem 141:637-44). Процедуру проводили при 0-4°C, и фракции хранили при -80°C. Белок оценивали набором для анализа белков BioRad с использованием бычьего сывороточного альбумина в качестве стандарта.The rat liver was homogenized individually in ice-cold sucrose solution (0.25 mol / L sucrose in 10 mmol / L HEPES pH 7.4 and 1 mmol / L EDTA) using a Potter-Elvehjem homogenizer. Subcellular liver fractionation was performed as previously described (Berge RK et al. (1984) Eur J Biochem 141: 637-44). The procedure was carried out at 0-4 ° C, and the fractions were stored at -80 ° C. Protein was evaluated by a BioRad protein assay kit using bovine serum albumin as a standard.
1.2 Биологические эффекты композиции по этому изобретению у крыс1.2 Biological effects of the composition of this invention in rats
Ферментный анализ ацил-CoA-оксидазы жировEnzyme analysis of acyl-CoA oxidase fats
Активность ацил-CoA-оксидазы жиров измеряли в пероксисомной фракции печени как описано ранее (Small GM, Burdett K, Connock MJ (1985) Biochem J 227: 205-10). Результаты представляли в качестве активности ацил-CoA оксидазы жиров относительно общего белка, вычитали исходную активность (активность контроля), и данные, которые представлены на фигуре 1 нормировали по отношению к активности TTA.Fat acyl CoA oxidase activity was measured in the peroxisomal fraction of the liver as previously described (Small GM, Burdett K, Connock MJ (1985) Biochem J 227: 205-10). The results were presented as the activity of fatty acyl-CoA oxidase relative to the total protein, the initial activity (control activity) was subtracted, and the data shown in Figure 1 were normalized with respect to the TTA activity.
Анализ липидовLipid analysis
Липиды плазмы и печени определяли ферментативно на системе Technicon Axon (Miles, Территаун, NY) с использованием набора для триглицеридов из Bayer, для общего холестерина (Bayer, Территаун, NY), и набора PAP 150 для фосфолипидов, содержащих холин, из bioMerieux. Результаты представлены относительно общего белка. Результаты были представлены относительно общего белка, и данные, которые представлены на фигурах 2-4, нормировали по отношению к активности положительного контроля (без добавления TTA или масел; т.е. "нормальному" уровню).Plasma and liver lipids were determined enzymatically on a Technicon Axon system (Miles, Territown, NY) using a Bayer triglyceride kit for total cholesterol (Bayer, Territown, NY) and a
Пример 2Example 2
Биологические эффекты композиции по этому изобретению у атлантического лососяThe biological effects of the composition of this invention in Atlantic salmon
2.1 Экспериментальная модель, включающая получение корма для рыб2.1 Experimental model, including obtaining food for fish
Экспериментальный рацион на основе рыбной муки был предоставлен EWOS и содержал 0,01% Y2O3 в качестве инертного маркера для определения перевариваемости (3-мм гранулы). В таблице 1 представлены составы и химические композиции трех видов рационов. Все три вида рационов были получены из одной кормовой смеси. Различные рационы были получены покрытием обычных кормовых гранул различными маслами и смесями. Рационы включали в себя либо рыбий жир (жир мойвы) (контроль), рыбий жир с добавлением 0,5% TTA (0,5% TTA) или рыбий жир с добавлением 1,5% TTA (1,5% TTA).An experimental fish meal diet was provided by EWOS and contained 0.01% Y 2 O 3 as an inert marker for determining digestibility (3 mm pellets). Table 1 presents the compositions and chemical compositions of the three types of diets. All three types of diets were obtained from a single feed mixture. Various diets were obtained by coating conventional feed pellets with various oils and mixtures. Diets included either fish oil (capelin oil) (control), fish oil supplemented with 0.5% TTA (0.5% TTA) or fish oil supplemented with 1.5% TTA (1.5% TTA).
Состав и химическая композиция рационов
Рационы: рыбий жир (контроль), рыбий жир с добавлением 0,5% TTA (0,5% TTA), рыбий жир с добавлением 1,5% TTA (1,5% TTA).Table 1
The composition and chemical composition of rations
Diet: fish oil (control), fish oil with 0.5% TTA (0.5% TTA), fish oil with 1.5% TTA (1.5% TTA).
b Asta, BASF, lucanthin red.
с Canta, lucanthin pink. a Fat of capelin, Norsildmel, Norway.
b Asta, BASF, lucanthin red.
with Canta, lucanthin pink.
Состав жирных кислот в рационах отчетливо отражает, что использовался рыбий жир (жир мойвы) (таблица 2). Жир мойвы содержал относительно высокий уровень мононенасыщенных FA и также был обогащен n-3 FA с длинной цепью, 20:5 n-3 (EPA) и 22:6 n-3 (DHA). Корм, однако, содержал значительное количество рыбной муки, которая содержала n-3 FA, обеспечивая более высокий уровень этих FA в рационе, чем в добавленном масле.The composition of fatty acids in diets clearly reflects that fish oil (capelin oil) was used (table 2). Capelin fat contained a relatively high level of monounsaturated FA and was also enriched with long chain n-3 FAs, 20: 5 n-3 (EPA) and 22: 6 n-3 (DHA). The food, however, contained a significant amount of fish meal, which contained n-3 FA, providing a higher level of these FAs in the diet than in the added oil.
В дополнение к приведенным выше рационам, были изготовлены идентичные рационы, с 0,5% Gendaxin и 0% или 0,9% TTA (исходя из общей сухой массы корма).In addition to the above diets, identical diets were made, with 0.5% Gendaxin and 0% or 0.9% TTA (based on the total dry weight of the feed).
Состав жирных кислот рационовtable 2
The composition of fatty acids rations
2.2: Выращивание атлантического лосося на корме, содержащем TTA2.2: Growing Atlantic salmon in feed containing TTA
Рыба, условия и схема экспериментаFish, conditions and experimental design
Испытание проводили в научно-исследовательской станции AKVAFORSK, Sunndalsora, Норвегия. Атлантический лосось (Salmon salar) со средней исходной массой приблизительно 86 г помещали в 15 цилиндрических конических емкостей (диаметр 0,85 м), по 40 в емкость. Емкости наполняли морской водой с постоянной температурой 12°C. Рыбам давали возможность приспособиться к температуре и кормили коммерческим кормом в течение двух недель перед началом испытания. Испытание по выращиванию состояло из периода времени 8 недель.The test was conducted at AKVAFORSK Research Station, Sunndalsora, Norway. Atlantic salmon (Salmon salar) with an average initial mass of approximately 86 g was placed in 15 cylindrical conical containers (diameter 0.85 m), 40 each. The containers were filled with sea water at a constant temperature of 12 ° C. The fish were allowed to adjust to temperature and fed commercial food for two weeks before the start of the test. The growing test consisted of a time period of 8 weeks.
Рационы представляли собой рационы, как описано выше в таблице 2, которые содержали либо рыбий жир (жир мойвы) (контроль), либо рыбий жир с добавлением 0,5% TTA (0,5% TTA), либо рыбий жир с добавлением 1,5% TTA (1,5% TTA). Три рациона случайным образом распределяли на три емкости. Корм распределяли с помощью электрической системы подачи (Akvaprodukter AS, Sunndalsora). Емкости были разработаны таким образом, чтобы избыток корма собирался из отходящей воды в коробки из проволочного каркаса. Избыток корма собирали, и это позволяло вычислить массу потребленного корма.The diets were rations as described in Table 2 above, which either contained fish oil (capelin oil) (control), or fish oil supplemented with 0.5% TTA (0.5% TTA), or fish oil supplemented with 1, 5% TTA (1.5% TTA). Three rations were randomly assigned to three containers. The feed was distributed using an electric feed system (Akvaprodukter AS, Sunndalsora). The tanks were designed so that excess feed was collected from the waste water into wire frame boxes. Excess feed was collected, and this allowed us to calculate the mass of feed consumed.
Рацион, включающий в себя Gendaxin, использовали в отдельном эксперименте, но схема эксперимента была аналогичной описанной выше схеме.A diet including Gendaxin was used in a separate experiment, but the experimental design was similar to that described above.
Исходный и конечный забор образцовInitial and final sampling
Рыб не кормили в течение 2 суток перед исходным забором образов. Шести рыбам из каждой емкости проводили анестезию с помощью MS-222 в начале и в конце эксперимента и определяли среднюю массу и среднюю длину. Эти шесть рыб умерщвляли ударом по голове и вскрывали брюшную полость. Образцы печени, сердца, жабр и почек сразу замораживали в жидком азоте и хранили при -80°C. Эти образцы затем использовали для анализа состава жирных кислот. Дополнительным пяти рыбам из каждой емкости проводили анестезию и умерщвляли. Этих рыб использовали для определения состава всего тела.Fish were not fed for 2 days before the initial sampling of images. Six fish from each tank were anesthetized with MS-222 at the beginning and end of the experiment, and the average weight and average length were determined. These six fish were killed by a blow to the head and the abdominal cavity was opened. Samples of the liver, heart, gills, and kidneys were immediately frozen in liquid nitrogen and stored at -80 ° C. These samples were then used to analyze the composition of fatty acids. An additional five fish from each tank were anesthetized and killed. These fish were used to determine the composition of the whole body.
Перед конечным забором образцов кормление рыб не прекращали. Из пяти рыб из каждой емкости выделяли образцы экскрементов в соответствии со способом, описанным Austreng (Aquaculture, 1978 13:265-272). Перед анализом образцы экскрементов из каждой емкости объединяли. Образцы хранили при -20°C.Before the final sampling of the fish, the feeding of the fish did not stop. Excrement samples were isolated from five fish from each tank according to the method described by Austreng (Aquaculture, 1978 13: 265-272). Before analysis, excrement samples from each container were pooled. Samples were stored at -20 ° C.
Вторую жаберную дугу удаляли из рыбы, которой провели анестезию, и промывали ледяным буфером SEI (150 мМ сахарозы, 10 нМ ЭДТА, 50 мМ имидазола, pH 7,3) и сразу замораживали в жидком азоте. Ткани жабр хранили при -80°C. Печени гомогенизировали в ледяной среде с сахарозой.The second branchial arch was removed from the fish, which was anesthetized, and washed with ice-cold SEI buffer (150 mM sucrose, 10 nM EDTA, 50 mM imidazole, pH 7.3) and immediately frozen in liquid nitrogen. Gill tissue was stored at -80 ° C. The liver was homogenized in icy sucrose.
ПриростGrowth
Средняя масса рыб в группах со всеми рационами приблизительно утроилась в процессе испытания, от исходного значения 86 г до конечного значения приблизительно 250 г. SGR снижалась при повышении доз TTA в рационе, от SGR 1,8 в контрольной группе до SGR 1,7 в группе c 0,5% TTA и SGR 1,5 в группе с 1,5% TTA (Таблица 3). Между группами по рациону не было значимых различий в коэффициентах упитанности (таблица 3).The average weight of fish in groups with all diets approximately tripled during the test, from the initial value of 86 g to the final value of approximately 250 g. SGR decreased with increasing doses of TTA in the diet, from SGR 1.8 in the control group to SGR 1.7 in the group c 0.5% TTA and SGR 1.5 in the group with 1.5% TTA (table 3). There were no significant differences in fatness ratios between dietary groups (table 3).
Эффект включения в рацион TTA и масла на потребление корма и прирост у атлантического лососяTable 3
The effect of including TTA and oil in the diet on feed intake and growth in Atlantic salmon
CF (%): Коэффициент упитанности, SGR: Удельная скорость роста, TGC: Температурный коэффициент роста, FER: Соотношение эффективности корма (увеличение количества жидкости/прием сухого корма).
abc Различия между средними значениями в данном ряду являются достоверными (p≤0,05), как показано разными надстрочными буквами.Values are mean ± SEM (n = 3)
CF (%): Fatness coefficient, SGR: Specific growth rate, TGC: Temperature growth coefficient, FER: Ratio of feed efficiency (increase in the amount of liquid / intake of dry feed).
abc The differences between the average values in this series are significant (p≤0.05), as shown by different superscript letters.
Потребление корма и перевариваемость пищевой добавкиFeed intake and digestibility
В этом испытании были выявлены только небольшие различия в перевариваемости (таблица 4). Перевариваемость FA во всех группах по рационам была высокая, более чем 96% для суммы всех FA для рыб, которых кормили контрольным рационом и рационом с 0,5% TTA, и более 90% для рыб, которых кормили рационом с 1,5% TTA. Перевариваемость для насыщенных FA была, как правило, ниже, чем перевариваемость для других FA.In this test, only small differences in digestibility were identified (Table 4). The digestibility of FA in all dietary groups was high, more than 96% for the sum of all FA for fish fed a control diet and a diet with 0.5% TTA, and more than 90% for fish fed a diet with 1.5% TTA . Digestibility for saturated FAs was generally lower than digestibility for other FAs.
Перевариваемость пищевой добавки у атлантического лососяTable 4
Atlantic Salmon Digestion Supplement
Данные представляют собой средние значения ± SEM
Значения в одном ряду с различными надстрочными знаками являются достоверно различающимися; nd= не определяется.For the content of proteins, fats and energy and individual fatty acids in the diet of Atlantic salmon containing Control: fish oil, 0.5% TTA: fish oil with the addition of 0.5% TTA, 1.5% TTA: fish oil with the addition of 1, 5% TTA
Data are mean ± SEM
Values in the same row with different superscripts are significantly different; nd = not defined.
2.3 Биологические эффекты композиции по этому изобретению2.3 Biological effects of the composition of this invention
Химические реактивыChemical reagents
Уксусная кислота, хлороформ, петролейный эфир и метанол были получены из Merck (Дармштадт, Германия). Бензол был получен из Rathburn Chemicals Ltd. (Walkerburn, Шотландия) и 2',7'-дихлорфлуоресцеин из Sigma Chemical Co. (St.Louis, MO, USA). Метанольный раствор HCl и 2,2-диметоксипропан приобретали в Supelco Inc. (Bellfonte, PA, USA). Покрытые стеклом планшеты на основе силикагеля K6 получали в Whatman International Ltd. (Мейдстон, Великобритания).Acetic acid, chloroform, petroleum ether and methanol were obtained from Merck (Darmstadt, Germany). Benzene was obtained from Rathburn Chemicals Ltd. (Walkerburn, Scotland) and 2 ', 7'-dichlorofluorescein from Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA). HCl methanol solution and 2,2-dimethoxypropane were purchased from Supelco Inc. (Bellfonte, PA, USA). K6 silica gel-coated tablets were obtained from Whatman International Ltd. (Maidstone, UK).
Химический анализChemical analysis
В образцах рыбы, полученных в начале и в конце эксперимента, анализировали сухой остаток, жиры, белки, золу и энергетическую ценность. Во всех рационах и образцах экскрементов анализировали сухой остаток (высушиванием при 105°C до постоянной массы), жиры (экстракцией этилацетатом, как описано в NS 9402, 1994), белки (с помощью Kjeltec Autoanalyser-N*6.25), крахмал, золу (нагреванием до 550°C до постоянной массы), энергию и оксид иттрия (с использованием ICP-AES после мокрого озоления образцов). Энергетическую ценность рационов, фекалий и образцов целых рыб определяли с помощью адиабатической калориметрии в бомбе, с использованием калориметрической бомбы Parr 1271.In fish samples obtained at the beginning and at the end of the experiment, the dry residue, fats, proteins, ash and energy value were analyzed. In all diets and excrement samples, the dry residue was analyzed (by drying at 105 ° C to constant weight), fats (by extraction with ethyl acetate, as described in NS 9402, 1994), proteins (using Kjeltec Autoanalyser-N * 6.25), starch, ash ( heating to 550 ° C to constant weight), energy and yttrium oxide (using ICP-AES after wet ashing of samples). The energy value of rations, feces and samples of whole fish was determined using adiabatic calorimetry in a bomb using a Parr 1271 calorimetric bomb.
Экстракция липидов и анализ жирных кислотLipid Extraction and Fatty Acid Analysis
Общие липиды экстрагировали из гомогенизированных жабр, печени и сердца с использованием способа, описанного Folch (J Biol Chem 1957 226:497-509). Фазы хлороформ-метанол из жабр сушили в атмосфере азота и растворяли в гексане. Фосфолипиды (PL), триацилглицерин (TAG) и свободные жирные кислоты (FFA) разделяли тонкослойной хроматографией (TLC) с использованием смеси петролейного эфира, диэтилового эфира и уксусной кислоты (113:20:2 по объему) в качестве подвижной фазы. Липиды визуализировали распылением на плашки TLC 0,2% (мас./об.) 2'7'-дихлорфлуоресцеина в метаноле, и их идентифицировали сравнением с известными стандартами при УФ-свете.Total lipids were extracted from homogenized gills, liver and heart using the method described by Folch (J Biol Chem 1957 226: 497-509). The phase of chloroform-methanol from the gills was dried in a nitrogen atmosphere and dissolved in hexane. Phospholipids (PL), triacylglycerol (TAG) and free fatty acids (FFA) were separated by thin layer chromatography (TLC) using a mixture of petroleum ether, diethyl ether and acetic acid (113: 20: 2 by volume) as the mobile phase. Lipids were visualized by spraying onto TLC plates 0.2% (w / v) 2'7'-dichlorofluorescein in methanol and were identified by comparison with known standards under UV light.
Пятна, соответствующие PL, FFA и TAG, счищали в стеклянные пробирки и затем проводили транс-метилирование в течение ночи 2,2-диметоксипропаном, метанольной-HCL и бензолом при комнатной температуре, как описано Mason и Waller (Anal Chem 1964 36:583). Метиловые эфиры разделяли, в основном, на неполярной колонке со сплавленными капиллярами газовой хроматографий, как описано Rosjo (Fish Physiol Biochem 1994 13:119-132). Метиловые эфиры FA разделяли на газовом хроматографе (Perkin-Elmer Auto system GC, оборудованный инжектором, программируемым инжектором с разделением/без разделения) с колонкой CP wax 52 (с длиной 25 м, внутренним диаметром 0,25 мм и толщиной пленки 0,2 мкм), детектором ионизации пламени и системой данных 1022. Газ-носитель представлял собой He, и температура инжектора и детектора составляла 280°C. Температуру печи повышали от 50°C до 180°C со скоростью 10°C мин-1, и затем повышали до 240°C со скоростью 0,7°C мин-1. Относительное количество каждой представленной жирной кислоты определяли измерением площади пика, соответствующего этой кислоте.The spots corresponding to PL, FFA and TAG were cleaned into glass tubes and then trans-methylated overnight with 2,2-dimethoxypropane, methanol-HCL and benzene at room temperature as described by Mason and Waller (Anal Chem 1964 36: 583) . Methyl esters were separated mainly on a non-polar column with fused capillaries of gas chromatography as described by Rosjo (Fish Physiol Biochem 1994 13: 119-132). FA methyl esters were separated on a gas chromatograph (Perkin-Elmer Auto system GC, equipped with an injector, programmable injector with separation / without separation) with a CP wax 52 column (with a length of 25 m, an inner diameter of 0.25 mm and a film thickness of 0.2 μm ), a flame ionization detector, and a 1022 data system. The carrier gas was He, and the temperature of the injector and detector was 280 ° C. The temperature of the furnace was raised from 50 ° C to 180 ° C at a rate of 10 ° C min -1 , and then raised to 240 ° C at a speed of 0.7 ° C min -1 . The relative amount of each fatty acid present was determined by measuring the peak area corresponding to that acid.
ВычисленияCalculations
Коэффициент видимой перевариваемости (ADC) вычисляли, как описано Austreng (Aquaculture, 1978 13:265-272). Коффициент упитанности (CF), гепатосоматический индекс (HSI), удельный фактор роста (SGR) и коэффициент роста на единицу теплоты (TGC) вычисляли следующим образом, на основе индивидуальных показателей массы и длины:The apparent digestibility coefficient (ADC) was calculated as described by Austreng (Aquaculture, 1978 13: 265-272). Fatness ratio (CF), hepatosomatic index (HSI), specific growth factor (SGR) and growth rate per heat unit (TGC) were calculated as follows, based on individual weight and length indicators:
SGR=(e(ln W1-ln W0)/сутки)-1)·100SGR = (e (ln W1-ln W0) / day) -1) 100
TGC=(W1 1/3-W0 1/3)·1000/(сутки·°C),TGC = (W 1 1/3 -W 0 1/3 ) · 1000 / (day · ° C),
где W0 представляет собой исходную массу, W1 представляет собой конечную массу и t представляет собой температуру в течение суток.where W 0 represents the initial mass, W 1 represents the final mass and t represents the temperature during the day.
CF=100·W·(длина по Смиту)-3 CF = 100 · W · (Smith length) -3
HSI=100·масса печени·W-1 HSI = 100 · liver mass · W -1
Статистический анализStatistical analysis
Для всех данных проводили однофакторный дисперсионный анализ (ANOVA) и различия ранжировали по критерию множественных сравнений Дункана. Уровень значимости был установлен при значении 5%.One-way analysis of variance (ANOVA) was performed for all data and the differences were ranked according to the Duncan multiple comparison criterion. Significance level was set at 5%.
Состав тела и печениBody and liver composition
Рыбы, которых кормили рационом с 1,5% TTA, обладали более низким уровнем липидов в теле (9,6%), чем рыбы, которых кормили контрольным рационом (10,6%) (таблица 5). Не было выявлено статистически значимых различий в общем содержании липидов между рыбами, которых кормили контрольным рационом и рыбами, которых кормили рационом с TTA (таблица 6). Гепатосоматический индекс был значительно выше у рыб, которых кормили рационом с 1,5% TTA (1,2%), чем у рыб, которых кормили контрольным рационом (1,1%) (таблица 6).Fish fed a diet with 1.5% TTA had lower body lipids (9.6%) than fish fed a control diet (10.6%) (Table 5). There were no statistically significant differences in the total lipid content between fish fed the control diet and fish fed the diet with TTA (table 6). The hepatosomatic index was significantly higher in fish fed a diet with 1.5% TTA (1.2%) than in fish fed a control diet (1.1%) (Table 6).
Химический состав скелета в % от полной массыTable 5
The chemical composition of the skeleton in% of the total mass
abРазличия между средними значениями в данном ряду являются достоверными (p<0,05), как указано различными надстрочными буквами.Control: fish oil, 0.5% TTA: fish oil with 0.5% TTA, 1.5% TTA: fish oil with 1.5% TTA.
ab The differences between the mean values in this series are significant (p <0.05), as indicated by different superscript letters.
Эффект включения в рацион TTA и масел на гепатосоматический индекс (HSI) и содержание липидов в печениTable 6
Effect of inclusion of TTA and oils in the diet on hepatosomatic index (HSI) and lipid levels in the liver
Состав жирных кислот печени, жабр и сердцаThe composition of the fatty acids of the liver, gills and heart
Состав жирных кислот PL, TAG и FFA в жабрах, печени и сердце представлен в таблицах 7, 8 и 9. TTA входила в состав фракции PL в жабрах (0,8%) и сердце (0,7%) атлантического лосося, которого кормили рационом с 1,5% TTA. TTA также входила в состав фракций TG и FFA в жабрах (таблица 7). Следовые количества TTA и ее продуктов, полученных под действием Δ9 десатуразы, входили в состав липидов печени, в то время как не было выделено продуктов Δ9 десатуразы из липидов сердца и жабр.The composition of the fatty acids PL, TAG and FFA in the gills, liver and heart are presented in tables 7, 8 and 9. TTA was part of the PL fraction in the gills (0.8%) and heart (0.7%) of Atlantic salmon fed diet with 1.5% TTA. TTA was also part of the TG and FFA fractions in the gills (table 7). Traces of TTA and its products obtained under the action of Δ 9 desaturase were part of the liver lipids, while no products of Δ 9 desaturase were isolated from heart lipids and gills.
Процентное содержание n-3 FA в печени, жабрах и сердце также зависело от рациона, который давали рыбам. Процентное содержание EPA+DHA было значительно выше у рыб, которых кормили рационом с 1,5% TTA, чем у контрольных рыб, во всех липидных фракциях жабр и сердца. В печени, с другой стороны, TTA приводила только к умеренному повышению процентного содержания DHA и небольшому снижению процентного содержания EPA. Процентное содержание пальмитиновой кислоты (16:0) и суммы всех насыщенных FA было значительно ниже во фракции PL жабр, сердца и печени рыб, которых кормили рационом с 1,5% TTA, чем у рыб, которых кормили контрольным рационом (таблицы 7, 8, 9). Сумма всех мононенасыщенных FA была значительно ниже во фракциях TG и FFA жабр у рыб, которых кормили рационом 1,5% TTA, чем у рыб, которых кормили контрольным рационом (таблица 8). Напротив, процентное содержание суммы мононенасыщенных FA во фракциях PL и TAG печени было выше у рыб, которых кормили более высокими дозами TTA (Таблица 9).The percentage of n-3 FA in the liver, gills, and heart also depended on the diet given to the fish. The percentage of EPA + DHA was significantly higher in fish fed a diet with 1.5% TTA than in control fish in all lipid fractions of the gills and heart. In the liver, on the other hand, TTA only led to a moderate increase in the percentage of DHA and a slight decrease in the percentage of EPA. The percentage of palmitic acid (16: 0) and the sum of all saturated FAs were significantly lower in the PL fraction of the gills, heart, and liver of fish fed a diet with 1.5% TTA than in fish fed a control diet (Tables 7, 8 , 9). The sum of all monounsaturated FAs was significantly lower in the fractions of TG and FFA gills in fish fed a 1.5% TTA diet than in fish fed a control diet (Table 8). In contrast, the percentage of monounsaturated FA in PL and TAG fractions of the liver was higher in fish fed higher doses of TTA (Table 9).
Таблица 7Table 7
Состав жирных кислот жабрThe composition of the fatty acids of the gills
FO: рыбий жир, 0,5% TTA: рыбий жир с добавлением 0,5% TTA, 1,5% TTA: рыбий жир с добавлением 1,5% TTA. Количество каждой жирной кислоты представлено в качестве процентного количества от общих жирных кислот (FA). Данные представляют собой средние значения ± SEM. Значения в одном ряду с различными надстрочными буквами являются достоверно различными, p<0,05, n=3; nd=не определяется. ☼ Включает в себя nd. FA и некоторые FA с процентным содержанием менее 1.FO: fish oil, 0.5% TTA: fish oil with 0.5% TTA, 1.5% TTA: fish oil with 1.5% TTA. The amount of each fatty acid is presented as a percentage of total fatty acids (FA). Data are mean ± SEM. The values in the same row with different superscript letters are significantly different, p <0.05, n = 3; nd = not defined. ☼ Includes nd. FA and some FAs with a percentage of less than 1.
Таблица 8Table 8
Состав жирных кислот сердцаThe composition of heart fatty acids
FO: рыбий жир, 0,5% TTA: рыбий жир с добавлением 0,5% TTA, 1,5% TTA: рыбий жир с добавлением 1,5% TTA. Количество каждой жирной кислоты представлено в качестве процентного количества от общих жирных кислот (FA). Данные представляют собой средние значения ± SEM. Значения в одном ряду с различными надстрочными буквами являются достоверно различными, p<0,05, n=3; nd=не определяется. ☼ Включает в себя nd. FA и некоторые FA с процентным содержанием менее 1.FO: fish oil, 0.5% TTA: fish oil with 0.5% TTA, 1.5% TTA: fish oil with 1.5% TTA. The amount of each fatty acid is presented as a percentage of total fatty acids (FA). Data are mean ± SEM. The values in the same row with different superscript letters are significantly different, p <0.05, n = 3; nd = not defined. ☼ Includes nd. FA and some FAs with a percentage of less than 1.
Таблица 9Table 9
Состав жирных кислот печениComposition of liver fatty acids
FO: рыбий жир, 0,5% TTA: рыбий жир с добавлением 0,5% TTA, 1,5% TTA: рыбий жир с добавлением 1,5% TTA. Количество каждой жирной кислоты представлено в качестве процентного количества от общих жирных кислот (FA). Данные представляют собой средние значения ± SEM. Значения в одном ряду с различными надстрочными буквами являются достоверно различными, p<0,05, n=3; nd=не определяется. ☼ Включает в себя nd. FA и некоторые FA с процентным содержанием менее 1.FO: fish oil, 0.5% TTA: fish oil with 0.5% TTA, 1.5% TTA: fish oil with 1.5% TTA. The amount of each fatty acid is presented as a percentage of total fatty acids (FA). Data are mean ± SEM. The values in the same row with different superscript letters are significantly different, p <0.05, n = 3; nd = not defined. ☼ Includes nd. FA and some FAs with a percentage of less than 1.
2.4 Биологические эффекты композиции по этому изобретению, включающей ферментированный белковый материал сои2.4 Biological effects of a composition of this invention comprising a fermented soy protein material
Химические реактивыChemical reagents
Gendaxin получали из Aximed, Берген, Норвегия. Одна капсула Gendaxin® содержит 35 мг изофлавонов, помимо этого, 10 мг генистеина и 15 мг дайдзеина.Gendaxin was obtained from Aximed, Bergen, Norway. One capsule of Gendaxin® contains 35 mg of isoflavones, in addition, 10 mg of genistein and 15 mg of daidzein.
Анализ липидовLipid analysis
Липиды плазмы определяли ферментативно с помощью системы Technicon Axon (Miles, Tarrytown, NY) с использованием набора для триглицеридов из Bayer, набора для общего холестерина (Bayer, Территаун, NY), и набора PAP 150 для содержащих холин фосфолипидов из bioMerieux. Результаты представлены в ммоль/л, и данные представлены ниже в таблице 10.Plasma lipids were enzymatically determined using the Technicon Axon system (Miles, Tarrytown, NY) using a Bayer triglyceride kit, a total cholesterol kit (Bayer, Territown, NY), and a
Общий холестерин, триглицериды и фосфолипиды в плазмеTable 10
Total plasma cholesterol, triglycerides and phospholipids
Из представленных выше данных ясно, что добавление Gendaxin в корм рыбы оказывает положительный эффект на состав жирных кислот в плазме лосося. Уровень холестерина, триглицеридов и фосфолипидов при добавлении 0,25% Gendaxin в корм рыб снижался по сравнению с контролем. Дальнейшее добавление Gendaxin и TTA дополнительно улучшало состав жирных кислот в плазме.From the above data it is clear that the addition of Gendaxin to fish feed has a positive effect on the fatty acid composition in salmon plasma. The level of cholesterol, triglycerides and phospholipids with the addition of 0.25% Gendaxin in fish food decreased compared with the control. Further addition of Gendaxin and TTA further improved plasma fatty acid composition.
Анализ ферментовEnzyme analysis
Активность ацил-CoA-оксидазы жиров определяли в пероксисомальной фракции печени, как описано ранее (Small GM, Burdett K, Connock MJ (1985) Biochem J 227: 205-10). Результаты представлены в качестве активности ацил-CoA-оксидазы жиров относительно общего белка, и представлены ниже в таблице 11.The activity of fatty acyl CoA oxidase was determined in the peroxisomal fraction of the liver, as described previously (Small GM, Burdett K, Connock MJ (1985) Biochem J 227: 205-10). The results are presented as the activity of fatty acyl-CoA oxidase relative to the total protein, and are presented below in table 11.
β-окисление в печениTable 11
β-oxidation in the liver
Из представленных выше данных очевидно, что добавление в корм для рыб Gendaxin и TTA оказывает положительный эффект на β-окисление, поскольку β-окисление значительно повысилось.From the above data, it is obvious that the addition of Gendaxin and TTA to fish food has a positive effect on β-oxidation, since β-oxidation is significantly increased.
Пример 3Example 3
В соответствии с экспериментальной моделью, представленной в примере 1, авторы настоящего изобретения провели эксперимент по кормлению на самцах крыс Вистар (см. таблица 12) со следующими компонентами корма:In accordance with the experimental model presented in example 1, the authors of the present invention conducted an experiment on feeding on male Wistar rats (see table 12) with the following components of the feed:
30% жиров30% fat
20% белков20% protein
5% волокон5% fiber
10% сахарозы10% sucrose
3,5% минеральной смеси AIN93G3.5% AIN93G Mineral Mixture
1,0% витаминной смеси AIN-931.0% Vitamin AIN-93
Остальное: КрахмалElse: Starch
Компонент жиров представляет собой 30% свиного жира, или 2,5-5% свиного жира замещено на рыбий жир или 0,15 свиного жира замещено на TTA. Белковый материал представляет собой 20% белок молока (казеин), или половина его замещена белком рыбы или "Биопротеином".The fat component is 30% pork fat, or 2.5-5% pork fat is replaced with fish oil, or 0.15 pork fat is replaced by TTA. Protein material is 20% milk protein (casein), or half is replaced with fish protein or "Bioprotein".
ммоль/лCh
mmol / l
ммоль/лTg
mmol / l
ммоль/лHDL Ch,
mmol / l
ммоль/лFFA,
mmol / l
ммоль/лPl
mmol / l
соотнош-ниеHDL Ch / Ch
the ratio
WAT ret/bwRatio
Wat ret / bw
Claims (47)
1) растительного масла и/или рыбьего жира, за исключением подсолнечного масла; и
2) одного или нескольких соединений, содержащих не подвергающиеся β-окислению структурные элементы жирных кислот, представленные
(a) общей формулой R"-COO-(CH2)2n+1-X-R', где Х представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп, выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, группу SO и группу SO2; и R" представляет собой атом водорода или алкильную группу, содержащую от 1 до 4 атомов углерода; при условии, что по меньшей мере один Х представляет собой не СН2, и/или
(b) общей формулой (I)
где R1, R2 и R3 представляют собой
i) атом водорода; или
ii) группу формулы CO-R, в которой R представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, и главная цепь указанного R содержит от 1 до 25 атомов углерода; или
iii) группу формулы CO-(CH2)2n+1-X-R', где Х представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO и группу SO2;
iv) структурный элемент, выбранный из группы, содержащей -PO3CH2CHNH3COOH (фосфатидилсерин), PO3CH2CH2NH3 (фосфатидилэтаноламин), PO3CH2CH2N(СН3)3 (фосфатидилхолин), PO3CH2CHOHCH2OH (фосфатидилглицерин) и РО3(СНОН)6 (фосфатидилинозитол);
где R1, R2, и R3 выбраны независимо из i), ii), iii) или iv), но по меньшей мере один из R1, R2, или R3 определяется как iii); при условии, что по меньшей мере один Х представляет собой не СН2, и/или
(с) общей формулой (II)
где А1, А2 и A3 выбраны независимо и представляют собой атом кислорода, атом серы или группу N-R4, в которой R4 представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, содержащую от 1 до 5 атомов углерода;
где R1, R2 и R3 представляют собой
i) атом водорода или линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, содержащую от 1 до 23 атомов углерода; или
ii) группу формулы CO-R, в которой R представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, и главная цепь указанного R содержит от 1 до 25 атомов углерода; или
iii) группу формулы CO-(CH2)2n+1-X-R', где Х представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп, выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO и группу SO2;
iv) структурный элемент, выбранный из группы, содержащей - PO3CH2CHNH3COOH (фосфатидилсерин), PO3CH2CH2NH3 (фосфатидилэтаноламин), PO3CH2CH2N(СН3)3 (фосфатидилхолин), РО3СН2СНОНСН2ОН (фосфатидилглицерин) и РО3(СНОН)6 (фосфатидилинозитол);
где R1, R2, и R3 выбраны независимо из i), ii), iii) или iv), но по меньшей мере один из R1, R2, или R3 определяется как iii); при условии, что по меньшей мере один Х представляет собой не СН2, и/или
соли, пролекарства или комплекса соединений по пп.(а)-(с) для получения фармацевтической или пищевой композиций для профилактики и/или лечения резистентности к инсулину, ожирения, диабета, жировой инфильтрации печени, гиперхолестеринемии, дислипидемии, атеросклероза, коронарной болезни сердца, тромбоза, стеноза, вторичного стеноза, инфаркта миокарда, инсульта, повышенного кровяного давления, эндотелиальной дисфункции, состояния повышенной свертываемости крови, синдрома поликистоза яичников, метаболического синдрома, злокачественной опухоли, воспалительного нарушения и пролиферативного нарушения кожи.1. The use of a drug containing a combination of:
1) vegetable oil and / or fish oil, with the exception of sunflower oil; and
2) one or more compounds containing non-β-oxidizing fatty acid structural elements represented by
(a) the general formula R "-COO- (CH 2 ) 2n + 1 -X-R ', where X represents a sulfur atom, selenium atom, oxygen atom, CH 2 group, SO group or SO 2 group; n represents a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group containing atom oxygen, sulfur atom, selenium atom, an oxygen atom, a group CH 2, a group SO, and SO 2 group; and R "represents sobo a hydrogen atom or an alkyl group containing from 1 to 4 carbon atoms; provided that at least one X is not CH 2 and / or
(b) general formula (I)
where R1, R2 and R3 are
i) a hydrogen atom; or
ii) a group of the formula CO-R, in which R is a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, and the main chain of said R contains from 1 to 25 carbon atoms; or
iii) a group of the formula CO- (CH 2 ) 2n + 1 —X — R ′, wherein X represents a sulfur atom, a selenium atom, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group or an SO 2 group; n is a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group consisting of an oxygen atom, a sulfur atom, a selenium atom an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group and an SO 2 group;
iv) a structural element selected from the group consisting of —PO 3 CH 2 CHNH 3 COOH (phosphatidylserine), PO 3 CH 2 CH 2 NH 3 (phosphatidylethanolamine), PO 3 CH 2 CH 2 N (CH 3 ) 3 (phosphatidylcholine), PO 3 CH 2 CHOHCH 2 OH (phosphatidylglycerol) and PO 3 (CHOH) 6 (phosphatidylinositol);
where R1, R2, and R3 are independently selected from i), ii), iii) or iv), but at least one of R1, R2, or R3 is defined as iii); provided that at least one X is not CH 2 and / or
(c) general formula (II)
where A1, A2 and A3 are independently selected and represent an oxygen atom, a sulfur atom or an N-R4 group in which R4 represents a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, containing from 1 to 5 carbon atoms ;
where R1, R2 and R3 are
i) a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, containing from 1 to 23 carbon atoms; or
ii) a group of the formula CO-R, in which R is a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, and the main chain of said R contains from 1 to 25 carbon atoms; or
iii) a group of the formula CO- (CH2) 2n + 1 -X-R ', where X represents a sulfur atom, a selenium atom, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group or an SO 2 group; n is a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group consisting of an oxygen atom, a sulfur atom, an atom selenium, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group and an SO 2 group;
iv) a structural element selected from the group consisting of - PO 3 CH 2 CHNH 3 COOH (phosphatidylserine), PO 3 CH 2 CH 2 NH 3 (phosphatidylethanolamine), PO 3 CH 2 CH 2 N (CH 3 ) 3 (phosphatidylcholine), PO 3 CH 2 CHONCH 2 OH (phosphatidylglycerol) and PO 3 (CHOH) 6 (phosphatidylinositol);
where R1, R2, and R3 are independently selected from i), ii), iii) or iv), but at least one of R1, R2, or R3 is defined as iii); provided that at least one X is not CH 2 and / or
salts, prodrugs or complex of compounds according to claims (a) to (c) for the preparation of pharmaceutical or food compositions for the prevention and / or treatment of insulin resistance, obesity, diabetes, fatty liver infiltration, hypercholesterolemia, dyslipidemia, atherosclerosis, coronary heart disease, thrombosis, stenosis, secondary stenosis, myocardial infarction, stroke, high blood pressure, endothelial dysfunction, high blood coagulation, polycystic ovary syndrome, metabolic syndrome, malignant uholi, an inflammatory disorder, and proliferative skin disorders.
1) растительного масла и/или рыбьего жира, за исключением подсолнечного масла, и
2) одного или нескольких соединений, содержащих не подвергающиеся β-окислению структурные элементы жирных кислот, представленные
(a) общей формулой R"-COO-(CH2)2n+1-X-R', где Х представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп, выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, группу SO и группу SO2; и R" представляет собой атом водорода или алкильную группу, содержащую от 1 до 4 атомов углерода; при условии, что по меньшей мере один Х представляет собой не CH2, и/или
(b) общей формулой (I)
где R1, R2 и R3 представляют собой
i) атом водорода; или
ii) группу формулы CO-R, в которой R представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, и главная цепь указанного R содержит от 1 до 25 атомов углерода; или
iii) группу формулы CO-(CH2)2n+1-X-R', где Х представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO и группу SO2;
iv) структурный элемент, выбранный из группы, содержащей - PO3CH2CHNH3COOH (фосфатидилсерин), PO3CH2CH2NH3 (фосфатидилэтаноламин), PO3CH2CH2N(СН3)3 (фосфатидилхолин), PO3CH2CHOHCH2OH (фосфатидилглицерин) и РО3(СНОН)6 (фосфатидилинозитол);
где R1, R2, и R3 выбраны независимо из i), ii), iii) или iv), но по меньшей мере один из R1, R2, или R3 определяется как iii); при условии, что по меньшей мере один Х представляет собой не СН2, и/или
(с) общей формулой (II)
где А1, А2 и A3 выбраны независимо и представляют собой атом кислорода, атом серы или группу N-R4, в которой R4 представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, содержащую от 1 до 5 атомов углерода;
где R1, R2 и R3 представляют собой
i) атом водорода или линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, содержащую от 1 до 23 атомов углерода; или
ii) группу формулы CO-R, в которой R представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, и главная цепь указанного R содержит от 1 до 25 атомов углерода; или
iii) группу формулы CO-(CH2)2n+1-X-R', где Х представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп, выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO и группу SO2;
iv) структурный элемент, выбранный из группы, содержащей - PO3CH2CHNH3COOH (фосфатидилсерин), PO3CH2CH2NH3 (фосфатидилэтаноламин), PO3CH2CH2N(СН3)3 (фосфатидилхолин), PO3CH2CHOHCH2OH (фосфатидилглицерин) и РО3(СНОН)6 (фосфатидилнозитол);
где R1, R2, и R3 выбраны независимо из i), ii), iii) или iv), но по меньшей мере один из R1, R2, или R3 определяется как iii); при условии, что по меньшей мере один Х представляет собой не СН2, и/или
соли, пролекарства или комплекса соединений по пп.(а)-(с) для улучшения общего состава липидов в организме животного.5. The use of animal feed containing conventional food components and a combination of:
1) vegetable oil and / or fish oil, excluding sunflower oil, and
2) one or more compounds containing non-β-oxidizing fatty acid structural elements represented by
(a) the general formula R "-COO- (CH 2 ) 2n + 1 -X-R ', where X represents a sulfur atom, selenium atom, oxygen atom, CH 2 group, SO group or SO 2 group; n represents a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group containing atom oxygen, sulfur atom, selenium atom, oxygen atom, CH 2 group, SO group and SO 2 group; and R "represents a hydrogen atom or an alkyl group containing from 1 to 4 carbon atoms; provided that at least one X is not CH 2 , and / or
(b) general formula (I)
where R1, R2 and R3 are
i) a hydrogen atom; or
ii) a group of the formula CO-R, in which R is a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, and the main chain of said R contains from 1 to 25 carbon atoms; or
iii) a group of the formula CO- (CH 2 ) 2n + 1 —X — R ′, wherein X represents a sulfur atom, a selenium atom, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group or an SO 2 group; n is a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group consisting of an oxygen atom, a sulfur atom, a selenium atom an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group and an SO 2 group;
iv) a structural element selected from the group consisting of - PO 3 CH 2 CHNH 3 COOH (phosphatidylserine), PO 3 CH 2 CH 2 NH 3 (phosphatidylethanolamine), PO 3 CH 2 CH 2 N (CH 3 ) 3 (phosphatidylcholine), PO 3 CH 2 CHOHCH 2 OH (phosphatidylglycerol) and PO 3 (CHOH) 6 (phosphatidylinositol);
where R1, R2, and R3 are independently selected from i), ii), iii) or iv), but at least one of R1, R2, or R3 is defined as iii); provided that at least one X is not CH 2 and / or
(c) general formula (II)
where A1, A2 and A3 are independently selected and represent an oxygen atom, a sulfur atom or an N-R4 group in which R4 represents a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, containing from 1 to 5 carbon atoms ;
where R1, R2 and R3 are
i) a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, containing from 1 to 23 carbon atoms; or
ii) a group of the formula CO-R, in which R is a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, and the main chain of said R contains from 1 to 25 carbon atoms; or
iii) a group of the formula CO- (CH 2 ) 2n + 1 —X — R ′, wherein X represents a sulfur atom, a selenium atom, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group or an SO 2 group; n is a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group consisting of an oxygen atom, a sulfur atom, an atom selenium, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group and an SO 2 group;
iv) a structural element selected from the group consisting of - PO 3 CH 2 CHNH 3 COOH (phosphatidylserine), PO 3 CH 2 CH 2 NH 3 (phosphatidylethanolamine), PO 3 CH 2 CH 2 N (CH 3 ) 3 (phosphatidylcholine), PO 3 CH 2 CHOHCH 2 OH (phosphatidylglycerol) and PO 3 (CHOH) 6 (phosphatidylnositol);
where R1, R2, and R3 are independently selected from i), ii), iii) or iv), but at least one of R1, R2, or R3 is defined as iii); provided that at least one X is not CH 2 and / or
salts, prodrugs or complex compounds according to paragraphs. (a) - (c) to improve the overall composition of lipids in the animal.
1) растительного масла и/или рыбьего жира, за исключением подсолнечного масла, и
2) одного или нескольких соединений, содержащих не подвергающиеся β-окислению структурные элементы жирных кислот, представленные
(а) общей формулой R"-COO-(CH2)2n+1-X-R', где Х представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп, выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO и группу SO2; и R" представляет собой атом водорода или алкильную группу, содержащую от 1 до 4 атомов углерода; при условии, что по меньшей мере один Х представляет собой не СН2, и/или
(b) общей формулой (I)
где R1, R2 и R3 представляют собой
i) атом водорода; или
ii) группу формулы CO-R, в которой R представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, и главная цепь указанного R содержит от 1 до 25 атомов углерода; или
iii) группу формулы CO-(CH2)2n+1-X-R', где Х представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO и группу SO2;
iv) структурный элемент, выбранный из группы, содержащей - PO3CH2CHNH3COOH (фосфатидилсерин), PO3CH2CH2NH3 (фосфатидилэтаноламин), PO3CH2CH2N(СН3)3(фосфатидилхолин), РО3СН2СНОНСН2ОН (фосфатидилглицерин) и РО3(СНОН)6 (фосфатидилинозитол);
где R1, R2, и R3 выбраны независимо из i), ii), iii) или iv), но по меньшей мере один из R1, R2, или R3 определяется как iii); при условии, что по меньшей мере один Х представляет собой не CH2, и/или (с) общей формулой (II)
где A1, A2 и A3 выбраны независимо и представляют собой атом кислорода, атом серы или группу N-R4, в которой R4 представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, содержащую от 1 до 5 атомов углерода;
где R1, R2 и R3 представляют собой
i) атом водорода или линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, содержащую от 1 до 23 атомов углерода; или
ii) группу формулы CO-R, в которой R представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, и главная цепь указанного R содержит от 1 до 25 атомов углерода; или
iii) группу формулы CO-(CH2)2n+1-X-R', где Х представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп, выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, группу SO и группу SO2;
iv) структурный элемент, выбранный из группы, содержащей - PO3CH2CHNH3COOH (фосфатидилсерин), PO3CH2CH2NH3 (фосфатидилэтаноламин), PO3CH2CH2N(СН3)3 (фосфатидилхолин), PO3CH2CHOHCH2OH (фосфатидилглицерин) и РО3(СНОН)6 (фосфатидилинозитол);
где R1, R2, и R3 выбраны независимо из i), ii), iii) или iv), но по меньшей мере один из R1, R2, или R3 определяется как iii); при условии, что по меньшей мере один Х представляет собой не СН2, и/или
соли, пролекарства или комплекса соединений по пп.(а)-(с).27. Composition for the prevention and / or treatment of insulin resistance, obesity, diabetes, fatty liver, hypercholesterolemia, dyslipidemia, atherosclerosis, coronary heart disease, thrombosis, stenosis, secondary stenosis, myocardial infarction, stroke, high blood pressure, endothelial dysfunction conditions of increased blood coagulation, polycystic ovary syndrome, metabolic syndrome, malignant tumors, inflammatory disorders and proliferative skin disorders, characterized in that seemed composition comprises the combination of:
1) vegetable oil and / or fish oil, excluding sunflower oil, and
2) one or more compounds containing non-β-oxidizing fatty acid structural elements represented by
(a) the general formula R "-COO- (CH 2 ) 2n + 1 -X-R ', where X represents a sulfur atom, selenium atom, oxygen atom, CH 2 group, SO group or SO 2 group; n represents a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group containing atom oxygen, sulfur atom, selenium atom, oxygen atom, CH 2 group, SO group and SO 2 group; and R "represents the th hydrogen atom or an alkyl group containing from 1 to 4 carbon atoms; provided that at least one X is not CH 2 and / or
(b) general formula (I)
where R1, R2 and R3 are
i) a hydrogen atom; or
ii) a group of the formula CO-R, in which R is a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, and the main chain of said R contains from 1 to 25 carbon atoms; or
iii) a group of the formula CO- (CH 2 ) 2n + 1 —X — R ′, wherein X represents a sulfur atom, a selenium atom, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group or an SO 2 group; n is a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group consisting of an oxygen atom, a sulfur atom, a selenium atom an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group and an SO 2 group;
iv) a structural element selected from the group consisting of - PO 3 CH 2 CHNH 3 COOH (phosphatidylserine), PO 3 CH 2 CH 2 NH 3 (phosphatidylethanolamine), PO 3 CH 2 CH 2 N (CH 3 ) 3 (phosphatidylcholine), PO 3 CH 2 CHONCH 2 OH (phosphatidylglycerol) and PO 3 (CHOH) 6 (phosphatidylinositol);
where R1, R2, and R3 are independently selected from i), ii), iii) or iv), but at least one of R1, R2, or R3 is defined as iii); with the proviso that at least one X is not CH 2 and / or (c) by the general formula (II)
where A1, A2 and A3 are independently selected and represent an oxygen atom, a sulfur atom or an N-R4 group, in which R4 represents a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, containing from 1 to 5 carbon atoms ;
where R1, R2 and R3 are
i) a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, containing from 1 to 23 carbon atoms; or
ii) a group of the formula CO-R, in which R is a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, and the main chain of said R contains from 1 to 25 carbon atoms; or
iii) a group of the formula CO- (CH 2 ) 2n + 1 —X — R ′, wherein X represents a sulfur atom, a selenium atom, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group or an SO 2 group; n is a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group consisting of an oxygen atom, a sulfur atom, an atom selenium, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group and an SO 2 group;
iv) a structural element selected from the group consisting of - PO 3 CH 2 CHNH 3 COOH (phosphatidylserine), PO 3 CH 2 CH 2 NH 3 (phosphatidylethanolamine), PO 3 CH 2 CH 2 N (CH 3 ) 3 (phosphatidylcholine), PO 3 CH 2 CHOHCH 2 OH (phosphatidylglycerol) and PO 3 (CHOH) 6 (phosphatidylinositol);
where R1, R2, and R3 are independently selected from i), ii), iii) or iv), but at least one of R1, R2, or R3 is defined as iii); provided that at least one X is not CH 2 and / or
salts, prodrugs or complex compounds according to paragraphs. (a) - (C).
1) растительного масла и/или рыбьего жира, за исключением подсолнечного масла, и
2) одного или нескольких соединений, содержащих не подвергающиеся β-окислению структурные элементы жирных кислот, отображаемых
(a) общей формулой R"-COO-(CH2)2n+1-X-R', где Х представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп, выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, группу SO и группу SO2; и R" представляет собой атом водорода или алкильную группу, содержащую от 1 до 4 атомов углерода; при условии, что по меньшей мере один Х представляет собой не СН2, и/или
(b) общей формулой (I)
где R1, R2 и R3 представляют собой
i) атом водорода; или
ii) группу формулы CO-R, в которой R представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, и главная цепь указанного R содержит от 1 до 25 атомов углерода; или
iii) группу формулы CO-(CH2)2n+1-X-R', где Х представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO и группу SO2;
iv) структурный элемент, выбранный из группы, содержащей - PO3CH2CHHN3COOH (фосфатидилсерин), PO3CH2CH2NH3 (фосфатидилэтаноламин), PO3CH2CH2N(СН3)3 (фосфатидилхолин), PO3CH2CHOHCH2OH (фосфатидилглицерин) и РО3(СНОН)6 (фосфатидилинозитол);
где R1, R2, и R3 выбраны независимо из i), ii), iii) или iv), но по меньшей мере один из R1, R2, или R3 определяется как iii); при условии, что по меньшей мере один Х представляет собой не СН2, и/или (с) общей формулой (II)
где A1, A2 и A3 выбраны независимо и представляют собой атом кислорода, атом серы или группу N-R4, в которой R4 представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, содержащую от 1 до 5 атомов углерода;
где R1, R2 и R3 представляют собой
i) атом водорода или линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, содержащую от 1 до 23 атомов углерода; или ii) группу формулы CO-R, в которой R представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, и главная цепь указанного R содержит от 1 до 25 атомов углерода; или
iii) группу формулы CO-(CH2)2n+1-X-R', где Х представляет собой атом серы, атом селена, атом кислорода, группу СН2, группу SO или группу SO2; n представляет собой число от 0 до 11; и R' представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, насыщенную или ненасыщенную, необязательно замещенную, где главная цепь указанного R' содержит от 13 до 23 атомов углерода и необязательно одну или несколько гетерогрупп, выбранных из группы, содержащей атом кислорода, атом серы, атом селена, атом кислорода, группу CH2, группу SO и группу SO2;
iv) структурный элемент, выбранный из группы, содержащей - PO3CH2CHNH3COOH (фосфатидилсерин), PO3CH2CH2NH3 (фосфатидилэтаноламин), PO3CH2CH2N(СН3)3 (фосфатидилхолин), PO3CH2CHOHCH2OH (фосфатидилглицерин) и РО3(СНОН)6 (фосфатидилинозитол);
где R1, R2, и R3 выбраны независимо из i), ii), iii) или iv), но по меньшей мере один из R1, R2, или R3 определяется как iii); при условии, что по меньшей мере один Х представляет собой не CH2, и/или
соли, пролекарства или комплекса соединений по пп.(а)-(с).43. A method of obtaining a product of animal origin with an improved composition of fatty acids, comprising feeding the animal intended to obtain the product, animal feed containing conventional food components and a combination of:
1) vegetable oil and / or fish oil, excluding sunflower oil, and
2) one or more compounds containing non-β-oxidizing structural elements of fatty acids displayed
(a) the general formula R "-COO- (CH 2 ) 2n + 1 -X-R ', where X represents a sulfur atom, selenium atom, oxygen atom, CH 2 group, SO group or SO 2 group; n represents a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group containing atom oxygen, sulfur atom, selenium atom, an oxygen atom, a group CH 2, a group SO, and SO 2 group; and R "represents sobo a hydrogen atom or an alkyl group containing from 1 to 4 carbon atoms; provided that at least one X is not CH 2 and / or
(b) general formula (I)
where R1, R2 and R3 are
i) a hydrogen atom; or
ii) a group of the formula CO-R, in which R is a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, and the main chain of said R contains from 1 to 25 carbon atoms; or
iii) a group of the formula CO- (CH 2 ) 2n + 1 —X — R ′, wherein X represents a sulfur atom, a selenium atom, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group or an SO 2 group; n is a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group consisting of an oxygen atom, a sulfur atom, a selenium atom an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group and an SO 2 group;
iv) a structural element selected from the group consisting of - PO 3 CH 2 CHHN 3 COOH (phosphatidylserine), PO 3 CH 2 CH 2 NH 3 (phosphatidylethanolamine), PO 3 CH 2 CH 2 N (CH 3 ) 3 (phosphatidylcholine), PO 3 CH 2 CHOHCH 2 OH (phosphatidylglycerol) and PO 3 (CHOH) 6 (phosphatidylinositol);
where R1, R2, and R3 are independently selected from i), ii), iii) or iv), but at least one of R1, R2, or R3 is defined as iii); with the proviso that at least one X is not CH 2 and / or (c) by the general formula (II)
where A1, A2 and A3 are independently selected and represent an oxygen atom, a sulfur atom or an N-R4 group, in which R4 represents a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, containing from 1 to 5 carbon atoms ;
where R1, R2 and R3 are
i) a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, containing from 1 to 23 carbon atoms; or ii) a group of the formula CO-R, in which R is a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, and the main chain of said R contains from 1 to 25 carbon atoms; or
iii) a group of the formula CO- (CH 2 ) 2n + 1 —X — R ′, wherein X represents a sulfur atom, a selenium atom, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group or an SO 2 group; n is a number from 0 to 11; and R 'represents a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, where the main chain of said R' contains from 13 to 23 carbon atoms and optionally one or more hetero groups selected from the group consisting of an oxygen atom, a sulfur atom, an atom selenium, an oxygen atom, a CH 2 group, an SO group and an SO 2 group;
iv) a structural element selected from the group consisting of - PO 3 CH 2 CHNH 3 COOH (phosphatidylserine), PO 3 CH 2 CH 2 NH 3 (phosphatidylethanolamine), PO 3 CH 2 CH 2 N (CH 3 ) 3 (phosphatidylcholine), PO 3 CH 2 CHOHCH 2 OH (phosphatidylglycerol) and PO 3 (CHOH) 6 (phosphatidylinositol);
where R1, R2, and R3 are independently selected from i), ii), iii) or iv), but at least one of R1, R2, or R3 is defined as iii); provided that at least one X is not CH 2 , and / or
salts, prodrugs or complex compounds according to paragraphs. (a) - (C).
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NO20043091 | 2004-07-19 | ||
| NO20043093 | 2004-07-19 | ||
| NO20043093A NO324534B1 (en) | 2004-07-19 | 2004-07-19 | Material prepared from a combination of non-β-oxidizable fatty acid analogues and a plant oil or fish oil and uses thereof |
| NO20043091A NO324533B1 (en) | 2004-07-19 | 2004-07-19 | Material prepared from a combination of non-β-oxidizable fatty acid analogues and a protein material, as well as the use thereof. |
| NO20045544 | 2004-12-17 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2007105886A RU2007105886A (en) | 2008-08-27 |
| RU2388490C2 true RU2388490C2 (en) | 2010-05-10 |
Family
ID=42674060
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2007105886/15A RU2388490C2 (en) | 2004-07-19 | 2005-07-19 | Composition containing vegetable or cod-liver oil and compounds which contain non-oxidising structural elements of fatty acids |
| RU2007105885/15A RU2394598C2 (en) | 2004-07-19 | 2005-07-19 | Composition containing protein material and compounds which contain unoxidisable structural elements of fatty acids |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2007105885/15A RU2394598C2 (en) | 2004-07-19 | 2005-07-19 | Composition containing protein material and compounds which contain unoxidisable structural elements of fatty acids |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (2) | RU2388490C2 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2537025C1 (en) * | 2013-05-28 | 2014-12-27 | Всеволод Иванович Киселев | Diindolylmethane drug preparation and using it for treating influenza and respiratory viral infections |
| US10117844B2 (en) | 2012-01-06 | 2018-11-06 | Omthera Pharmaceuticals, Inc. | DPA-enriched compositions of omega-3 polyunsaturated fatty acids in free acid form |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20150027008A (en) * | 2013-09-03 | 2015-03-11 | 한국생명공학연구원 | Composition comprising monoacetyldiacylglycerol compound for preventing or treating atopic dermatitis |
-
2005
- 2005-07-19 RU RU2007105886/15A patent/RU2388490C2/en not_active IP Right Cessation
- 2005-07-19 RU RU2007105885/15A patent/RU2394598C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| MADSEN L et al. Tetradecylthioacetic acid prevents high fat diet induced adiposity and insulin resistance. - JOURNAL OF LIPID RESEARCH 2002 UNITED STATES, v.43, №5, 2002, p.742-750, XP008060913 ISSN: 0022-2275 cited in the application. STORLIEN L. H et al. High fat diet-induced insulin resistance. Lessons and implications from animal studies. ANNALS OF THE NEW YORK ACADEMY OF SCIENCES 1993 UNITED STATES, v.683, 1993, p.82-90, XP008061129 ISSN: 0077-8923. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US10117844B2 (en) | 2012-01-06 | 2018-11-06 | Omthera Pharmaceuticals, Inc. | DPA-enriched compositions of omega-3 polyunsaturated fatty acids in free acid form |
| RU2537025C1 (en) * | 2013-05-28 | 2014-12-27 | Всеволод Иванович Киселев | Diindolylmethane drug preparation and using it for treating influenza and respiratory viral infections |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2394598C2 (en) | 2010-07-20 |
| RU2007105885A (en) | 2008-08-27 |
| RU2007105886A (en) | 2008-08-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20120276212A1 (en) | Composition comprising plant and/or fish oils and non-oxidizable fatty acid entities | |
| Chamruspollert et al. | Transfer of dietary conjugated linoleic acid to egg yolks of chickens | |
| ES2204142T3 (en) | NEW FAT ANALOGS FOR THE TREATMENT OF DIABETES. | |
| KR101182023B1 (en) | Fish protein hydrolyzate | |
| Røsjø et al. | Lipid digestibility and metabolism in Atlantic salmon (Salmo salar) fed medium-chain triglycerides | |
| EP1110548A1 (en) | Substances having antiobese and visceral fat-reducing functions and utilization thereof | |
| Kennedy et al. | Influence of dietary conjugated linoleic acid (CLA) and tetradecylthioacetic acid (TTA) on growth, lipid composition and key enzymes of fatty acid oxidation in liver and muscle of Atlantic cod (Gadus morhua L.) | |
| Kokou et al. | Growth performance and fatty acid tissue profile in gilthead seabream juveniles fed with different phospholipid sources supplemented in low-fish meal diets | |
| Chepkirui et al. | Fatty acids composition of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) fingerlings fed diets containing different levels of water spinach (Ipomoea aquatica) | |
| US6605297B2 (en) | Substances having antiobese and visceral fat-reducing functions and utilization thereof | |
| RU2388490C2 (en) | Composition containing vegetable or cod-liver oil and compounds which contain non-oxidising structural elements of fatty acids | |
| Rosa et al. | Physiological and biochemical effects of conjugated linoleic acid and its use in aquaculture | |
| CA2279887A1 (en) | Method for reducing secretion of apolipoprotein b in animals by administering conjugated linoleic acid | |
| CN101010102B (en) | Composition comprising non-oxidizable fatty acid analogoues and plant and/or fish oils | |
| CN101010101B (en) | Composition comprising protein material and non-oxidizable fatty acid entities | |
| Chepkirui et al. | Journal of Agriculture and Food Research | |
| Walbourne | Lipid nutrition in haddock (Melanogrammus aeglefinus) and Atlantic cod (Gadus morhua): the role of dietary lipid in hepatic lipid deposition | |
| Cartiff | Eicosapentanoic and Docosahexanoic Acids,(EPA; DHA), Increase Insulin Sensitivity in Growing Steers. | |
| NO326252B1 (en) | Animal feed comprising non-beta-oxidizable fatty acid analogues |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20100720 |