RU2364406C1 - Method of preparing probiotic ferment for animals - Google Patents

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: method provides preparation of associated strains of lactobacilli and strain of propionic bacteria consisting of 3 complexes. The 1^st complex is associated strains of lactobacilli Streptococcus salivarius - LT1, Streptococcus thermophilus - LT9, LT10, LTP and strain of propionic bacteria Propionibacterium freidenreichii - LT8 in ratio 5:1, mixed with grain or legumes in ratio 1:3. The 2^nd complex is associated strains of lactobacilli Lactobacillus plantarum-LT7, Lactobacillus acidophilus-LT12 and strain of propionic bacteria Propionibacterium freidenreichii - LT8 in ratio 2:1. And the 3^rd complex is associated strain of propionic bacteria - Propionibacterium freidenreichii - LT8 and strains of lactobacilli Streptococcus salivarius - LT1, Lactobacillus plantarum - LT7, Streptococcus thermophilus - LT9, LT10, LT11, Lactobacillus acidophilus - LT12 in ratio 7:2, made by the same method as applied for the 1^st complex. The prepared complex is used to ferment 1.5-2.5 % pasteurised milk in ratio 1:30.

EFFECT: it enables preparation of B12-concentrated probiotic ferment with high acid-forming, fermentation and antibiotic activity, able to inhibit opportunistic microflora in gastrointestinal tract of animals, thus considerably reducing contagion-induced loss of young animals.

1 tbl

Description

Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарии, а именно к производству комплексной закваски с широким спектром действия на основе молочнокислых и пропионовокислых бактерий для лечения и профилактики сельскохозяйственных животных.The invention relates to biotechnology and veterinary medicine, namely to the production of complex starter culture with a wide spectrum of action based on lactic acid and propionic acid bacteria for the treatment and prevention of farm animals.

Как показывает практика, основным наиболее доступным средством коррекции нарушенного микробиоценоза у молодняка сельскохозяйственных животных и птицы являются препараты и продукты на основе бактерий-пробиотиков.As practice shows, the main most affordable means of correcting impaired microbiocenosis in young farm animals and poultry are drugs and products based on probiotic bacteria.

Промышленное производство коммерческих препаратов пробиотического действия представляет собой сложный технологический процесс, включающий применение дорогостоящего крупногабаритного оборудования, эксплуатация которого требует значительных затрат энергетических и людских ресурсов. Экономические расчеты показывают, что ежегодно растущие цены на электроэнергию и нефтепродукты делают производство препаратов-пробиотиков на промышленных предприятиях нерентабельным.The industrial production of commercial probiotic preparations is a complex technological process, including the use of expensive large-sized equipment, the operation of which requires significant energy and human resources. Economic calculations show that annually rising prices for electricity and oil products make the production of probiotic preparations at industrial enterprises unprofitable.

Лечебно-профилактический эффект препаратов-пробиотиков определяют входящие в их состав бактерии-продуценты биологически активных веществ (белки, жиры, углеводы, ферменты, витамины и др.), проявляющие свое действие при скармливании животным.The therapeutic and prophylactic effect of probiotic preparations is determined by the bacteria-producers of biologically active substances (proteins, fats, carbohydrates, enzymes, vitamins, etc.) that are part of their composition, which exert their effect when fed to animals.

В приведенных источниках информации предлагаемые способы получения бактериальных препаратов предусматривают использование в основном монокультур бактерий (бифидобактерии, ацидофильная или болгарская палочка, стрептококки и др.).In the above sources of information, the proposed methods for producing bacterial preparations involve the use of mainly monocultures of bacteria (bifidobacteria, acidophilus or Bulgarian bacillus, streptococci, etc.).

Недостаток всех этих способов заключается в том, что изготовляемые препараты на основе одной-двух культур бактерий, как правило, не обладают достаточно высокими антибиотическими и антагонистическими свойствами по отношению к патогенной и условно-патогенной микрофлоре, присутствующей в желудочно-кишечном тракте животных. Известно, что активность пробиотического действия культуры зависит от ее способности приживляться в желудочно-кишечном тракте (1, 3).The disadvantage of all these methods is that the preparations made on the basis of one or two cultures of bacteria, as a rule, do not have sufficiently high antibiotic and antagonistic properties with respect to the pathogenic and conditionally pathogenic microflora present in the gastrointestinal tract of animals. It is known that the activity of the probiotic action of a culture depends on its ability to take root in the gastrointestinal tract (1, 3).

Наиболее близким по технологической сущности и достигаемому результату является способ получения пробиотического препарата на основе культур штаммов пробиотиков медицинского и ветеринарного назначения, полученных в условиях глубинного выращивания. Рекомендуемый способ получения пробиотического препарата в сухой гранулированной форме, предусматривающий смешивание микробной суспензии с мукой злаковых растений в соотношении 1:(1,8-2,0) и проведение контактно-сорбционного обезвоживания целевого продукта с использованием охлажденного цеолита с последующей досушкой при 0-4°С в течение 18-24 ч, трудно воспроизводим непосредственно на местах в хозяйствах (2).The closest in technological essence and the achieved result is a method for producing a probiotic preparation based on cultures of strains of probiotics for medical and veterinary purposes, obtained in deep growing conditions. The recommended method for producing a probiotic preparation in dry granular form, which involves mixing a microbial suspension with flour of cereal plants in a ratio of 1: (1.8-2.0) and carrying out contact-sorption dehydration of the target product using chilled zeolite, followed by drying at 0-4 ° C for 18-24 hours, it is difficult to reproduce directly in the field on the farms (2).

Технический результат изобретения - создание комплексной закваски с высокой пробиотической активностью для животных и упрощение способа ее получения непосредственно на местах в хозяйствах-потребителях.The technical result of the invention is the creation of a comprehensive starter culture with high probiotic activity for animals and the simplification of the method of its production directly on the premises in consumer farms.

Поставленная цель достигается тем, что маточный материал специфической закваски получают на основе семи культур молочнокислых и пропионовокислых бактерий, идентифицированных до вида по филогенетическим, культуральным и физиолого-биохимическим признакам. Штаммы выделены автором из животного и растительного материала, взятого в разных регионах страны.This goal is achieved by the fact that the uterine material of a specific yeast is obtained on the basis of seven cultures of lactic and propionic acid bacteria identified to the species by phylogenetic, cultural and physiological-biochemical characteristics. Strains isolated by the author from animal and plant material taken in different regions of the country.

В таблице 1 приведен видовой состав комплексной пробиотической закваски для животных. Филогенетические признаки культур ЛТ1, ЛТ7 ЛТ12 определяли по фрагментам генов 16 S pРНК величиной до 720 нуклеотидов. Сравнение полученных нуклеотидных последовательностей с имеющимися в Genbank последовательностями генов 16 S pРНК позволило предварительно отнести культуры к видам, указанным в таблице 1.Table 1 shows the species composition of complex probiotic starter culture for animals. Phylogenetic characters of LT1, LT7 LT12 cultures were determined by fragments of 16 S pRNA genes up to 720 nucleotides in size. Comparison of the obtained nucleotide sequences with the 16 S pRNA gene sequences available in Genbank made it possible to preliminarily attribute the cultures to the species indicated in Table 1.

Культура ЛТ1 по физиолого-биохимическим свойствам отнесена к Streptococcus salivarius. Она характеризуется овальными клетками размером 0,8-1,0 мкм, образующими цепочки от коротких до длинных; образует кислоту из глюкозы, сахарозы, мальтозы, раффинозы, но не из глицерола, маннитола, сорбитола или ксилозы. По данным характеристикам этот штамм четко относится к Streptococcus salivarius и отличается от других видов этого рода.Culture LT1 physiological and biochemical properties assigned to Streptococcus salivarius. It is characterized by oval cells 0.8-1.0 microns in size, forming chains from short to long; forms acid from glucose, sucrose, maltose, raffinose, but not from glycerol, mannitol, sorbitol or xylose. According to these characteristics, this strain clearly refers to Streptococcus salivarius and differs from other species of this genus.

Культура ЛТ7 отнесена к Lactobacillus plantarum на основе филогенетических данных, а также культуральных и физиолого-биохимических признаков, отличающих ее от других родственных видов лактобацилл: способность к росту при +15°С, ферментирует рибозу, но не ферментирует глицерин и ксилозу.The LT7 culture is assigned to Lactobacillus plantarum on the basis of phylogenetic data, as well as cultural, physiological and biochemical characteristics that distinguish it from other related species of lactobacilli: the ability to grow at + 15 ° C, ferments ribose, but does not ferment glycerol and xylose.

Культуры ЛТ9, ЛТ10, ЛТ11 отнесены к Streptococcus thermophilus. Все три культуры представляют собой овальные клетки, главным образом в парах и короткие цепочки. На питательном агаре образуют круглые гладкие колонии. Неподвижные, не способны продуцировать кислоту из большинства углеводов, в том числе из инулина, раффинозы, салицина, чем отличаются от штаммов других видов рода Streptococcus. Между собой культуры отличаются по скорости роста на жидкой среде МС (культура ЛТ10 растет быстрее, чем ЛТ9 и ЛТ11). Культура ЛТ-10 образует кислоту активнее, чем культуры ЛТ9 и ЛТ11. Культуры ЛТ9 и ЛТ11 быстрее растут при температуре 35°С, чем культура ЛТ-10. Полученные данные позволяют заключить, что культуры ЛТ9, ЛТ10, ЛТ11 имеют специфические физиолого-биохимические особенности, по которым отличаются друг от друга.Cultures LT9, LT10, LT11 are assigned to Streptococcus thermophilus. All three cultures are oval cells, mainly in pairs and short chains. On nutrient agar form round smooth colonies. Stationary, unable to produce acid from most carbohydrates, including from inulin, raffinose, salicin, which differs from strains of other species of the genus Streptococcus. Between themselves, cultures differ in growth rate on liquid MS medium (LT10 culture grows faster than LT9 and LT11). The LT-10 culture forms an acid more actively than the LT9 and LT11 cultures. The LT9 and LT11 cultures grow faster at a temperature of 35 ° C than the LT-10 culture. The data obtained allow us to conclude that the cultures of LT9, LT10, LT11 have specific physiological and biochemical characteristics, which differ from each other.

Lactobacillus acidophilus ЛТ12 - палочковидные клетки, обычно правильной формы, размеры 0,5-1,0×3-10 мкм; грамположительные; спор не образуют, неподвижные. Факультативные анаэробы, лучше растут при пониженном содержании кислорода. На питательной агаровой среде образуют непрозрачные выпуклые колонии диаметром 2-5 мм с цельным краем. Нуждается в богатой среде, хорошо растет на обезжиренном молоке. Метаболизм бродильного типа, в основном конечный продукт - лактат.Lactobacillus acidophilus LT12 - rod-shaped cells, usually of regular shape, sizes 0.5-1.0 × 3-10 microns; gram-positive; do not form a dispute, motionless. Optional anaerobes grow better with low oxygen levels. On a nutrient agar medium form opaque convex colonies with a diameter of 2-5 mm with a solid edge. Needs a rich environment, grows well in skim milk. Fermentation type metabolism, mainly the final product is lactate.

Каталазоотрицательная культура, цитохромов не содержит; нитрат не восстанавливает, желатин не разжижает.Catalase-negative culture, does not contain cytochromes; nitrate does not restore, gelatin does not thin.

Оптимальная температура для роста 30-40°С.The optimum temperature for growth is 30-40 ° C.

Культура ЛТ8 отнесена к Propionibacterium freidenreichii на основе филогенетических данных, а также культуральных и физиолого-биохимических признаков, отличающих ее от родственных видов пропионибактерий, а именно: розовый цвет колоний, не образует кислоту из мальтозы и сахарозы.The LT8 culture is assigned to Propionibacterium freidenreichii on the basis of phylogenetic data, as well as cultural, physiological and biochemical characteristics that distinguish it from related species of propionibacteria, namely: the pink color of the colonies does not form acid from maltose and sucrose.

Способ осуществляют следующим образом. Музейные маточные монокультуры бактерий (ЛТ1, ЛТ7, ЛТ8, ЛТ9, ЛТ10, ЛТ11, ЛТ12) обновляют, пересевая их дважды на стерилизованное молоко (жирность 1,5-2,5%). Суточные культуры от второго пересева используют для выращивания смешанных культур. Первая смешанная поликультура (ассоциация культур ЛТ1, ЛТ9, ЛТ10, ЛТ11) готовится в пробирках на стерилизованном молоке внесением по одной петле каждой монокультуры с последующей инкубацией при температуре 30-35°С до полного сквашивания молока (12-15 ч). Затем эту поликультуру повторно обновляют на молоке и используют ее при приготовлении инокулята для комплекса №1. Для получения инокулята для комплекса №1 в отдельную пробирку с молоком вносят 5 петель первой смешанной культуры молочнокислых бактерий (ассоциация культур ЛТ1, ЛТ9-ЛТ11) и одну петлю пропионовокислых бактерий (культура ЛТ8).The method is as follows. Museum uterine monocultures of bacteria (LT1, LT7, LT8, LT9, LT10, LT11, LT12) are updated by transferring them twice to sterilized milk (fat content of 1.5-2.5%). Daily crops from the second reseeding are used for growing mixed crops. The first mixed polyculture (culture association LT1, LT9, LT10, LT11) is prepared in test tubes on sterilized milk by adding one loop of each monoculture, followed by incubation at a temperature of 30-35 ° С until the milk is completely fermented (12-15 hours). Then this polyculture is re-updated in milk and used in the preparation of the inoculum for complex No. 1. To obtain an inoculum for complex No. 1, 5 loops of the first mixed culture of lactic acid bacteria (LT1, LT9-LT11 culture association) and one loop of propionic acid bacteria (LT8 culture) are introduced into a separate test tube with milk.

Вторая смешанная культура (ассоциация культур ЛТ7, ЛТ12) готовится аналогичным способом, как и первая, внесением в молоко по одной петле каждой монокультуры. После повторного обновления на молоке ее используют для приготовления инокулята для комплекса №2. Его готовят аналогично приготовлению инокулята для комплекса №1: вносят 2 петли второй смешанной закваски (культуры ЛТ7, ЛТ12) и одну петлю культуры пропионовокислых бактерий (культура ЛТ8). Третья смешанная культура также готовится в пробирках на молоке внесением 7 петель пропионовокислых бактерий и по одной петле инокулята №1 и №2, обозначаемая как инокулят для комплекса №3.The second mixed culture (culture association LT7, LT12) is prepared in the same way as the first, by adding one loop of each monoculture to milk. After repeated renewal in milk, it is used to prepare the inoculum for complex No. 2. It is prepared similarly to the preparation of the inoculum for complex No. 1: 2 loops of the second mixed starter culture (cultures of LT7, LT12) and one loop of the culture of propionic acid bacteria (culture of LT8) are introduced. The third mixed culture is also prepared in test tubes on milk by adding 7 loops of propionic acid bacteria and one loop of inoculum No. 1 and No. 2, designated as inoculum for complex No. 3.

Затем три инокулята выращивают по отдельности в пробирках вместимостью 40 см³ с 25-30 см³ стерильного молока. Культуры инкубируют в термостате при 30-35°С до полного сквашивания молока (12-15 ч). На основе приготовленных инокулятов по отдельности наращивают жидкие закваски в массовых количествах (в зависимости от потребности). Затем отдельно каждую жидкую закваску смешивают со стерильным сорбентом-носителем (крупа любого сорта зерновых или бобовых культур) в соотношении 1:3. Сушку влажных комплексов проводят при температуре не выше 30°С в течение 2-3 суток до сухого состояния (влажность не выше 8%).Then, the three inoculums are grown separately in test tubes with a capacity of 40 cm ³ from 25-30 cm ^{3 of} sterile milk. The cultures are incubated in an incubator at 30-35 ° C until the milk is fully fermented (12-15 hours). On the basis of the prepared inoculum separately, liquid starter cultures are increased in bulk quantities (depending on need). Then, separately, each liquid sourdough is mixed with a sterile sorbent carrier (cereal of any kind of grain or bean crops) in a ratio of 1: 3. Drying of wet complexes is carried out at a temperature of no higher than 30 ° C for 2-3 days until dry (humidity not higher than 8%).

Сухие формы комплексов №1, №2, №3 размножают в массовых количествах на молоке той же жирности в соотношении 1:30. Жидкие закваски, смешанные в равных количествах, представляют собой комплексную пробиотическую закваску, которую скармливают или выпаивают животным.Dry forms of complexes No. 1, No. 2, No. 3 are propagated in mass quantities on milk of the same fat content in a ratio of 1:30. Liquid starter cultures, mixed in equal amounts, are a complex probiotic starter culture that is fed or fed to animals.

Входящие в состав комплексной закваски молочнокислые бактерии, в частности Streptococcus thermophilus штаммы ЛТ9, ЛТ10, ЛТ11, совместимы с бактериями Propionibacterium freidenreichii ЛТ8. С учетом фактора совместимости получена на основе молочнокислых и пропионовокислых бактерий комплексная закваска, обладающая высокими пробиотическими и антибиотическими свойствами. Введение комплесной закваски животным, страдающим кишечными расстройствами с проявлением диарейного синдрома, устраняет симптомы острого заболевания. Это связано с тем, что молочнокислые бактерии колонизируют желудочно-кишечный тракт, вытесняя патогенную микрофлору. Кроме того, включение комплексной закваски в корм способствует улучшению его качества, переваримости, а следовательно, и усвояемости, что сказывается на физиологическом состоянии животных.The lactic acid bacteria included in the complex starter culture, in particular Streptococcus thermophilus strains LT9, LT10, LT11, are compatible with the bacteria Propionibacterium freidenreichii LT8. Taking into account the compatibility factor, a complex starter culture with high probiotic and antibiotic properties was obtained on the basis of lactic and propionic acid bacteria. The introduction of a complex leaven to animals suffering from intestinal disorders with the manifestation of diarrhea syndrome eliminates the symptoms of an acute disease. This is due to the fact that lactic acid bacteria colonize the gastrointestinal tract, displacing pathogenic microflora. In addition, the inclusion of complex starter culture in the feed improves its quality, digestibility, and therefore digestibility, which affects the physiological condition of animals.

По данным СКНИИЖ (г.Краснодар) добавление КМЗ к слаботоксичным кормам способствует практически полному отсутствию спор грибов Aspergillus и Penicillium в органах животных (свиней), в частности в печени, сердце, имеющих наибольшую пищевую ценность и используемых, как правило, для приготовления продуктов детского питания. В дополнение к сказанному следует добавить: добавка комплексной КМЗ в корм повышает прирост живой массы свиней (до 10%), снимает токсическое действие кормов, что связано с ее фунгицидными свойствами. Фунгицидную активность комплексной закваски определяют содержащиеся в ней пропионовокислые бактерии - продуценты пропионовой кислоты и витамина B₁₂.According to SKNIIZH (Krasnodar), the addition of CMH to low-toxic feeds contributes to the almost complete absence of Aspergillus and Penicillium fungi spores in the organs of animals (pigs), in particular in the liver and heart, which have the highest nutritional value and are used, as a rule, for the preparation of children's products nutrition. In addition to the above, it should be added: the addition of complex KMZ to feed increases the increase in live weight of pigs (up to 10%), removes the toxic effect of feed, due to its fungicidal properties. The fungicidal activity of complex starter culture is determined by the propionic acid bacteria contained in it - producers of propionic acid and vitamin B ₁₂ .

Технологическая схема предлагаемого способа получения закваски для животных на основе бактерий-пробиотиков включает получение маточного материала в сухом виде, состоящего из трех комплексов: 1-й комплекс - первая ассоциация молочнокислых и пропионовокислых бактерий в соотношении 5:1, смешанная с крупой любого сорта (зерновые, бобовые культуры) соответственно 1:3 (высушиваемый при температуре не выше 30°С и закладываемый на длительное хранение); 2-ой комплекс - вторая ассоциация молочнокислых и пропионовокислых бактерий в соотношении 2:1 и 3-й комплекс - третья ассоциация пропионовокислых и молочнокислых бактерий в соотношении 7:2, изготовляемые таким же способом, как и 1-й комплекс, которыми затем заквашивают пастеризованное молоко (жирность 1,5-2.5%) в соотношении 1:30 и используют для получения комплексной закваски в массовом количестве непосредственно на местах в хозяйствах.The technological scheme of the proposed method for producing starter culture for animals based on probiotic bacteria includes the production of uterine material in dry form, consisting of three complexes: 1st complex - the first association of lactic acid and propionic acid bacteria in a ratio of 5: 1, mixed with cereals of any kind (cereals , legumes) respectively 1: 3 (dried at a temperature of no higher than 30 ° C and laid for long-term storage); The 2nd complex - the second association of lactic acid and propionic acid bacteria in the ratio of 2: 1 and the 3rd complex - the third association of propionic acid and lactic acid bacteria in the ratio of 7: 2, made in the same way as the 1st complex, which then pasteurized milk (fat content of 1.5-2.5%) in the ratio of 1:30 and is used to obtain complex fermentation in bulk quantity directly on the premises in farms.

Таблица 1Table 1 Видовой состав маточного материала пробиотической закваски для животныхThe species composition of the uterine material of probiotic sourdough for animals Видовое названиеView name Номер культурыCulture number Streptococcus salivariusStreptococcus salivarius ЛТ1LT1 Lactobacillus plantarumLactobacillus plantarum ЛТ7LT7 Streptococcus thermophilusStreptococcus thermophilus ЛТ9, ЛТ10, ЛТ11LT9, LT10, LT11 Lactobacillus acidophilusLactobacillus acidophilus ЛТ12LT12 Propionibacterium freidenreichiiPropionibacterium freidenreichii ЛТ8LT8

Источники информацииInformation sources

1. Квасников Е.И., Нестеренко О.А. Молочнокислые бактерии и пути их их использования. Москва, «Наука», 1975, с.390.1. Kvasnikov E.I., Nesterenko O.A. Lactic acid bacteria and ways to use them. Moscow, Nauka, 1975, p. 390.

2. Патент RU 2032736, 1995.2. Patent RU 2032736, 1995.

3. Патент RU 2265655, 2005.3. Patent RU 2265655, 2005.

Claims (1)

Способ получения пробиотической закваски для животных, предусматривающий выращивание молочнокислых и пропионово-кислых бактерий, смешивание полученных культур с сорбентом-носителем и высушивание, отличающийся тем, что в качестве молочнокислых и пропионово-кислых бактерий используют ассоциацию штаммов Streptococcus - ЛТ1, Lactobacillus plantarum - ЛТ7, Streptococcus thermophilus - ЛТ9, ЛТ10, ЛТ11, Lactobacillus acidophilus - ЛТ12 и штамм пропионово-кислых бактерий Propionibacterium freidenreichii - ЛТ8, состоящую из трех комплексов: 1-й комплекс ассоциация молочнокислых бактерий штаммов Streptococcus salivarius - ЛТ1, Streptococcus thermophilus - ЛТ9, ЛТ19, ЛТ11 и штамма пропионово-кислых бактерий Propionibacterium freidenreichii - ЛТ8 в соотношении 5:1, которую смешивают с крупой зерновых или бобовых культур в соотношении 1:3, 2-й комплекс - ассоциация молочнокислых бактерий штаммов Lactobacillus plantarum - ЛТ7, Lactobacillus acidophilus - ЛТ12 и штамма пропионово-кислых бактерий Propionibacterium freidenreichii - ЛТ8 в соотношении 2:1, 3-й комплекс - ассоциация штамма пропионово-кислых бактерий Propionibacterium freidenreichii - ЛТ8 и штаммов молочнокислых бактерий Streptococcus salivarius - ЛТ1, Lactobacillus plantarum - ЛТ7, Streptococcus thermophilus - ЛТ9, ЛТ10, ЛТ11, Lactobacillus acidophilus - ЛТ12 в соотношении 7:2, изготовленные тем же способом, как и 1-й комплекс, которыми затем заквашивают пастеризованное молоко, жирность которого 1,5-2,5%, в соотношении 1:30. A method of producing a probiotic starter culture for animals, involving the cultivation of lactic acid and propionic acid bacteria, mixing the resulting cultures with a sorbent carrier and drying, characterized in that as the lactic acid and propionic acid bacteria using the association of strains of Streptococcus - LT1, Lactobacillus plantarum - LT7, Streptococcus thermophilus - LT9, LT10, LT11, Lactobacillus acidophilus - LT12 and a propionic acid bacteria strain Propionibacterium freidenreichii - LT8, consisting of three complexes: the 1st complex is an association of lactic acid bacteria of Streptococcus salivarius strains - LT1, Streptococcus thermophilus - LT9, LT19, LT11 and the propionic acid bacteria strain Propionibacterium freidenreichii - LT8 in a ratio of 5: 1, which is mixed with cereals or legumes in a ratio of 1: 3, the 2nd complex is an association of lactic acid bacteria of Lactobacillus strains plantarum - LT7, Lactobacillus acidophilus - LT12 and the propionic acid bacteria strain Propionibacterium freidenreichii - LT8 in the ratio 2: 1, the 3rd complex is the association of the propionic acid bacteria strain Propionibacterium freidenreichii LT8 and the lactic acid bacteria strain Lactus straus bactarobocobactocactobactocactus - LT7, Streptococcus thermophilus - LT9, LT10, LT11, Lactobacillus acidophilus - LT12 in a ratio of 7: 2, made in the same way as the 1st complex, which then fermented pasteurized milk, the fat content of which is 1.5-2.5%, in a ratio of 1:30.