RU2301257C1 - Consortium of bifidobacterium strains for preparing fermented-milk, fermented and nonfermented foodstuffs, biologically active supplements, bacterial preparations, hygienic and cosmetic agents - Google Patents

Abstract

FIELD: food processing, cosmetic, medicinal industry, biotechnology.

SUBSTANCE: invention proposes consortium prepared by combination of eight bifidobacterium strains - B. bifidum 792, 79-37, LBA-3, B. longum B379M, YA-3, YA-4, B. breve 79-88, B. infantis 79-43. Proposed consortium consisting of eight bifidobacterium strains multiplies actively in nutrient media and accumulates industrial biomass for short cultivation times, ferments milk and forms clot of good taste and organoleptic properties and possesses the specific activity. Consortium of eight bifidobacterium strains possesses high specific activity, able for rapid adaptation in human intestine and to promote normalization of intestine microflora for short times. Also, it can be used as a base for preparing curative-prophylactic foodstuffs showing good organoleptic properties that expands assortment of such agents.

EFFECT: valuable properties of consortium.

1 tbl, 6 ex

Description

Изобретение относится к пищевой, косметической, биотехнологической и медицинской промышленности, в частности используется для приготовления кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов.The invention relates to the food, cosmetic, biotechnological and medical industries, in particular it is used for the preparation of sour-milk, fermented and non-fermented food products, starter cultures, hygienic and cosmetic products, biologically active additives and bacterial preparations.

В связи с неблагоприятными экологическими условиями, стрессами, длительной антибактериальной, лучевой и химиотерапией, дисбиозами, возникающими вследствие перенесенных заболеваний, увеличивается количество людей, страдающих нарушениями нормальной микрофлоры организма. Для лечения и профилактики этих нарушений все большее внимание уделяется как препаратам, обладающим пробиотическим действием, так и пищевым продуктам, содержащим бифидобактерии.Due to adverse environmental conditions, stress, prolonged antibacterial, radiation and chemotherapy, dysbiosis resulting from past diseases, the number of people suffering from disorders of the normal microflora of the body increases. For the treatment and prevention of these disorders, increasing attention is being paid to both drugs with a probiotic effect and food products containing bifidobacteria.

В кишечнике человека встречаются 5 видов бифидобактерий - B.bifidum, B.longum, B.adolescentis, В.breve и B.infantis. С наибольшей частотой в биоценозе обнаруживаются виды B.bifidum и B.longum (до 75%). Вид B.adolescentis встречается в основном у взрослых людей, а виды B.breve и B.infantis - преимущественно у детей грудного возраста (17%-36%).Five types of bifidobacteria are found in the human intestine - B. bifidum, B. longum, B. adolescentis, B. breve and B.infantis. The species B.bifidum and B.longum are found with the highest frequency in the biocenosis (up to 75%). Species B.adolescentis is found mainly in adults, and species B.breve and B.infantis - mainly in infants (17% -36%).

Известны зарубежные моно- и комплексные препараты-эубиотики и кисломолочные продукты, включающие в свой состав бифидобактерии видов B.bifidum, B.lonqum, B.adolescentis, B.breve (патент 2336886, патент 2411008, Франция; патент 637297, Швейцария; патент 2134179, патент 2421066 ФРГ; патент 05227946, патент 0430642, Япония; патент 4645667, США).Foreign mono- and complex eubiotics and fermented milk products are known, including bifidobacteria of the species B. bifidum, B.lonqum, B. adolescentis, B.breve (patent 2336886, patent 2411008, France; patent 637297, Switzerland; patent 2134179 , patent 2421066 Germany; patent 05227946, patent 0430642, Japan; patent 4645667, USA).

У нас в стране для приготовления бактерийных препаратов и продуктов лечебно-диетического питания применяют отечественные штаммы бифидобактерий видов B.bifidum №1,791,792, ВКПМ S-1257, Ac-1578; B.lonqum В379М, Я4, B.adolescentis MC- 42, В.breve 79-119, В.infantis 79-43 (авторское свидетельство №343588, патент РФ №2215028, патент РФ 1347221, патент РФ 849779, патент РФ 2108383, патент РФ 2152993, патент РФ №2216589, патент РФ 863639, патент РФ 2078814, патент РФ 2111248).In our country, domestic strains of bifidobacteria of the species B. bifidum No. 1,791,792, VKPM S-1257, Ac-1578 are used for the preparation of bacterial preparations and dietetic food products; B.lonqum B379M, B4, B. adolescentis MC-42, B. breve 79-119, B. infantis 79-43 (copyright certificate No. 343588, RF patent No. 2215028, RF patent 1347221, RF patent 849779, RF patent 2108383, RF patent 2152993, RF patent No. 2216589, RF patent 863639, RF patent 2078814, RF patent 2111248).

Качество лечебных продуктов и препаратов во многом обусловлено свойствами штамма-продуцента - его специфической активностью и технологичностью. Использование многоштаммовых композиций позволит суммировать полезные свойства, присущие отдельным штаммам бифидобактерий, заселять организм человека теми из них, которые наиболее физиологичны для каждого индивидуума. Это делает возможным разработку комплексных продуктов лечебного питания и бактерийных препаратов, способных обеспечить высокую колонизационную резистентность организма человека, восстанавливать его нарушенную микрофлору и способствовать снижению заболеваемости.The quality of medicinal products and preparations is largely due to the properties of the producer strain - its specific activity and adaptability. The use of multi-strain compositions will allow us to summarize the beneficial properties inherent in individual strains of bifidobacteria, to populate the human body with those that are most physiological for each individual. This makes it possible to develop complex products of therapeutic nutrition and bacterial preparations that can ensure high colonization resistance of the human body, restore its disturbed microflora and help reduce morbidity.

Задачей настоящего изобретения является получение консорциума штаммов бифидобактерийна на основе четырех видов, обладающего комплексом свойств, присущих как отдельным штаммам, так и консорциуму из них, имеющего высокую биологическую активность, стабильное кислотообразование, способного хорошо расти при культивировании в искусственных питательных средах и молоке, устойчивого к условиям внешней среды, быстро приживляющегося в организме человека, способного нормализовать его микрофлору в более ранние сроки.The objective of the present invention is to obtain a consortium of bifidobacterin strains on the basis of four species, having a set of properties inherent in both individual strains, and a consortium of them having high biological activity, stable acid formation, capable of growing well when cultured in artificial nutrient media and milk, resistant to environmental conditions, quickly taking root in the human body, capable of normalizing its microflora at an earlier date.

Консорциум получен путем сочетания восьми штаммов бифидобактерий - B.bifidum 792, 79-37, ЛВА-3, B.longum В379М, Я-3, Я-4, В.breve 79-88, B.infantis 79-43. Эти штаммы имеют близкие культуральные и физиолого-биохимические свойства, а также обладают сквашивающей молоко активностью.The consortium was obtained by combining eight strains of bifidobacteria - B. bifidum 792, 79-37, LVA-3, B.longum B379M, I-3, I-4, B. breve 79-88, B.infantis 79-43. These strains have similar cultural and physiological-biochemical properties, as well as fermenting milk activity.

Штамм B.bifidum 792 выделен из содержимого кишечника здорового грудного ребенка, депонирован в ГКНМ ГУ МНИИЭМ им Г.Н.Габричевского под №171.Strain B.bifidum 792 isolated from the intestines of a healthy infant, deposited in the SCNM GU MNIIEM named after G.N.Gabrichevsky under No. 171.

Штамм B.bifidum ЛВА-3 выделен из содержимого кишечника здорового взрослого человека, депонирован в ЦМПМ ВНИИгенетика под №В-3299.The strain B. bifidum LVA-3 was isolated from the contents of the intestines of a healthy adult, deposited in TsMPM VNIIgenetika under No. B-3299.

Штамм B.bifidum 79-37 выделен из содержимого кишечника здорового грудного ребенка, депонирован в ГКНМ ГУ МНИИЭМ им Г.Н.Габричевского под №182.Strain B.bifidum 79-37 isolated from the contents of the intestines of a healthy infant, deposited in GKNM GU MNIIEM them G.N.Gabrichevsky under No. 182.

Штамм B.longum B379M выделен из содержимого кишечника здорового взрослого человека, депонирован в ЦМПМ ВНИИгенетика под №В-2000.Strain B.longum B379M isolated from the contents of the intestines of a healthy adult, deposited in TsMPM VNIIgenetika under No. B-2000.

Штамм B.longum Я3 выделен из содержимого кишечника здорового взрослого человека, депонирован в ЦМПМ ВНИИгенетика под №В-3301.Strain B.longum Я3 isolated from the contents of the intestines of a healthy adult, deposited at the Center for Medical Research Institute of Genetics under No. B-3301.

Штамм В. longum Я-4 выделен из содержимого кишечника здорового взрослого человека, депонирован в ГКНМ ГУ МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского под №169.Strain B. longum I-4 isolated from the contents of the intestines of a healthy adult, deposited in GKNM GU MNIIEM them. G.N.Gabrichevsky under No. 169.

Штамм В.breve 79-88 выделен из содержимого кишечника здорового грудного ребенка, депонирован в ГКНМ ГУ МНИИЭМ им Г.Н.Габричевского под №150.Strain B. breve 79-88 isolated from the intestines of a healthy infant, deposited in the SCNM GU MNIIEM named after G.N.Gabrichevsky under No. 150.

Штамм B.infantis 79-43 выделен из содержимого кишечника здорового грудного ребенка, депонирован в ГКНМ ГУ МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского под №156.Strain B.infantis 79-43 isolated from the contents of the intestines of a healthy infant, deposited in GKNM GU MNIIEM them. G.N.Gabrichevsky under No. 156.

Заявляемый консорциум штаммов бифидобактрий может быть использован при производстве кисломолочной продукции, заквасок, ферментированных пищевых продуктов, например: квас, пиво и т.п., неферментированных пищевых продуктов, например: соки, напитки и т.п. Также консорциум штаммов бифидобактерий может широко использоваться для производства гигиенических и косметических средств, например: кремов, лосьонов, салфеток, мыла, присыпок, тампонов, питательных масок, гелей, женских прокладок, косметического молочка, различных пудр и т.д. Кроме того, консорциум штаммов бифидобактерий может быть применен в производстве бактериальных препаратов, в виде свечей, пероральных и других средств.The inventive consortium of strains of bifidobacteria can be used in the production of dairy products, starter cultures, fermented foods, for example: kvass, beer, etc., unfermented foods, for example: juices, drinks, etc. Also, a consortium of bifidobacteria strains can be widely used for the production of hygiene and cosmetics, for example: creams, lotions, napkins, soaps, powders, tampons, nourishing masks, gels, women's pads, cosmetic milk, various powders, etc. In addition, a consortium of strains of bifidobacteria can be used in the production of bacterial preparations, in the form of suppositories, oral and other drugs.

Как показали проведенные исследования, не все штаммы бифидобактерий способны сосуществовать в виде консорциума, сохраняя при этом свои свойства. В предлагаемом комплексе штаммы бифидобактерий не только не подавляет друг друга, а, напротив, суммируя полезные свойства, повышают специфическую активность консорциума, тем самым улучшая его свойства.As the studies showed, not all strains of bifidobacteria are able to coexist in the form of a consortium, while maintaining their properties. In the proposed complex, the strains of bifidobacteria not only do not suppress each other, but, on the contrary, summing up the beneficial properties, increase the specific activity of the consortium, thereby improving its properties.

Техническим результатом заявленного изобретения является получение кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов, которые в качестве действующего начала содержат консорциум штаммов бифидобактерий, обладающий кислотообразующей и антагонистической активностью в отношении патогенной и условно-патогенной микрофлоры, что обеспечит нормализацию микробиоценозов организма человека, в т.ч. желудочно-кишечного и мочеполового трактов, кожных и слизистых покровов, а также расширение арсенала аналогичных средств.The technical result of the claimed invention is to obtain fermented milk, fermented and non-fermented foods, starter cultures, hygienic and cosmetic products, biologically active additives and bacterial preparations, which as an active principle contain a consortium of bifidobacteria strains with acid-forming and antagonistic activity against pathogenic and conditionally pathogenic microflora, which will ensure the normalization of microbiocenoses of the human body, including gastrointestinal and genitourinary tracts, skin and mucous membranes, as well as an expansion of the arsenal of similar drugs.

Культурально-морфологические признаки консорциума.Cultural and morphological signs of the consortium.

Клетки штаммов бифидобактерий представляют собой грам+ полиморфные палочки с бифуркацией или утолщением на 1-2-х концах, склонные к образованию скоплений. В жидких питательных средах растут по всей высоте объема, кроме зоны аэробиоза. Логарифмическая фаза роста заканчивается к 12-18 часам культивирования.Cells of bifidobacteria strains are gram + polymorphic bacilli with bifurcation or thickening at the 1-2 ends, prone to the formation of clusters. In liquid nutrient media, they grow along the entire height of the volume, except for the aerobiosis zone. The logarithmic phase of growth ends at 12-18 hours of cultivation.

Физиолого-биохимические признаки консорциума.Physiological and biochemical signs of the consortium.

Неподвижные, бесспоровые анаэробы. Оптимальная температура выращивания - (37,5-38)°С, рН питательных сред - 7,2-7,4. Каталазу не образуют, желатину не разжижают. Сбраживают глюкозу с образованием уксусной и L+ молочной кислоты без образования газа, закисляя среду выращивания до рН 4,2-3,6. Консорциум штаммов активно размножается на средах разного состава, а также в молоке, сквашивая его к 12-20 часам культивирования. Это позволит широко использовать консорциум штаммов бифидобактерий в различных технологических процессах (Таблица).Fixed, undisputed anaerobes. The optimum cultivation temperature is (37.5-38) ° C, the pH of the nutrient medium is 7.2-7.4. Catalase is not formed, gelatin is not liquefied. Glucose is fermented with the formation of acetic and L + lactic acid without the formation of gas, acidifying the growth medium to a pH of 4.2-3.6. A consortium of strains actively propagates on media of different compositions, as well as in milk, fermenting it by 12-20 hours of cultivation. This will make it possible to widely use a consortium of bifidobacteria strains in various technological processes (Table).

Табл.
Накопление микробной массы (КОЕ /мл lg 10) и активность кислотообразования (в градусах Тернера) консорциума штаммов бифидобактерий в динамике развития при культивировании в гидролизатно-молочной питательной среде (ГМ), Бифидум-среде (БФ) и молокеTab.
The accumulation of microbial mass (CFU / ml lg 10) and the activity of acid formation (in degrees Turner) of a consortium of bifidobacteria strains in the dynamics of development during cultivation in a hydrolyzate-milk nutrient medium (GM), Bifidum medium (BP) and milk ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДАNUTRITION БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ВРЕМЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ BIOLOGICAL ACTIVITY TIME OF CULTIVATION 12 ч12 h 24 ч24 h 48 ч48 h КОЕCFU Т°T ° КОЕCFU Т°T ° КОЕCFU Т°T ° ГМGM 8,68.6 100one hundred 8,88.8 146146 7,27.2 194194 БФBf 8,08.0 9696 8,48.4 122122 7,07.0 150150 МолокоMilk 8,48.4 7070 8,68.6 110110 7,67.6 120120

Продуцируя кислоты, консорциум штаммов бифидобактерий ингибирует рост патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Консорциум штаммов бифидобактерий способен наращивать микробную массу в питательных средах, сквашивать молоко в короткие сроки культивирования, проявлять специфическую активность. Это делает возможным его использование в приготовлении кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов.By producing acids, a consortium of strains of bifidobacteria inhibits the growth of pathogenic and conditionally pathogenic microorganisms. A consortium of strains of bifidobacteria is able to increase microbial mass in nutrient media, ferment milk in a short period of cultivation, and exhibit specific activity. This makes it possible to use it in the preparation of fermented, fermented and non-fermented foods, starter cultures, hygienic and cosmetic products, dietary supplements and bacterial preparations.

Пример №1. Использование консорциума штаммов бифидобактерий для приготовления кисломолочных продуктов.Example No. 1. Using a consortium of bifidobacteria strains for the preparation of fermented milk products.

1-й пассаж1st passage Лиофилизированные штаммы B.bifidum 792, 79-37, ЛВА-3, B.longum B379M, Я-3, Я-4, B.breve 79-88, B.infantisLyophilized strains of B. bifidum 792, 79-37, LVA-3, B. longum B379M, I-3, I-4, B.breve 79-88, B.infantis   79-43 в количестве 0,1 г сухой биомассы (1 доза) вносят по отдельности в среду выращивания и титруют методом десятикратных разведении до 10^-7-9. Выращивают при температуре 37-38 градусов по Цельсию до появления отдельных колоний в последнем разведении. Или 1 дозу сухой биомассы каждого штамма вносят в 20-30 мл питательной среды. Культивируют до получения биомассы с содержанием бифидобактерий не менее 10⁸/мл.79-43 in the amount of 0.1 g of dry biomass (1 dose) is introduced individually into the growing medium and titrated by ten-fold dilution to 10 ^-7-9 . Grown at a temperature of 37-38 degrees Celsius until the appearance of individual colonies in the last dilution. Or 1 dose of dry biomass of each strain is added to 20-30 ml of culture medium. Cultivate to obtain biomass with a bifidobacteria content of at least 10 ⁸ / ml. 2-й пассаж2nd passage Выращенную культуру каждого из штаммов объемом не более 10% вносят в среду накопления и культивируют при температуре 37-38 градусов по Цельсию до получения биомассы с содержанием микробных тел не менее 10⁸/мл.The grown culture of each of the strains with a volume of not more than 10% is introduced into the accumulation medium and cultivated at a temperature of 37-38 degrees Celsius to obtain biomass with a microbial content of at least 10 ⁸ / ml. 3-й пассаж (продукт)3rd passage (product) Полученную культуру каждого из штаммов смешивают, получая консорциум, и в объеме не более 5% вносят в стерильное молоко, культивируют при температуре 37-38 градусов по Цельсию до образования сгустка. Получают кисломолочный продукт с содержанием живых бифидобактерий не менее 10⁸/мл.The resulting culture of each of the strains is mixed, obtaining a consortium, and in a volume of not more than 5% contribute to sterile milk, cultivated at a temperature of 37-38 degrees Celsius until a clot forms. A fermented milk product with a content of live bifidobacteria of at least 10 ⁸ / ml is obtained.

Пример №2. Использование консорциума штаммов бифидобактерий для получения ферментированных и неферментированных пищевых продуктов.Example No. 2. Using a consortium of bifidobacteria strains to produce fermented and non-fermented foods.

1-й пассаж1st passage Лиофилизированные штаммы B.bifidum 792, 79-37, ЛВА-3, B.longum B379M, Я-3, Я-4, B.breve 79-88, B.infantis 79-43 в количестве 0,1 г сухой биомассы (1 доза) вносят по отдельности в среду выращивания и титруют методом десятикратных разведении до 10^7-9. Выращивают при температуре 37-38 градусов по Цельсию до появления отдельных колоний в последнем разведении. Или 1 дозу сухой биомассы каждого штамма вносят в 20-30 мл питательной среды. Выращивают до получения биомассы с содержанием бифидобактерий менее 10⁸/мл.Lyophilized strains of B. bifidum 792, 79-37, LVA-3, B.longum B379M, I-3, I-4, B.breve 79-88, B.infantis 79-43 in the amount of 0.1 g of dry biomass ( 1 dose) is introduced individually into the growing medium and titrated by ten-fold dilution to 10 ^7-9 . Grown at a temperature of 37-38 degrees Celsius until the appearance of individual colonies in the last dilution. Or 1 dose of dry biomass of each strain is added to 20-30 ml of culture medium. Grown to obtain biomass with a bifidobacteria content of less than 10 ⁸ / ml 2-й пассаж2nd passage Выросшую культуру каждого из штаммов объемом не более 10% вносят в среду накопления и культивируют при температуре 37-38 градусов по Цельсию до получения биомассы с содержанием микробных тел не менее 10⁸/мл.The grown culture of each of the strains with a volume of not more than 10% is introduced into the accumulation medium and cultivated at a temperature of 37-38 degrees Celsius to obtain biomass with a microbial content of at least 10 ⁸ / ml. Получение ферментированного или неферментированного пищевого продуктаObtaining a fermented or unfermented food product Полученную биомассу смешивают, получая консорциум, вносят в пищевое сырье (молоко, соки, пиво, квас и пр.), перемешивают и разливают в емкости. В результате получают продукт с титром бифидобактерий не менее 10⁶ в 1 мл.The resulting biomass is mixed, receiving a consortium, introduced into food raw materials (milk, juice, beer, kvass, etc.), mixed and poured into containers. The result is a product with a titer of bifidobacteria of at least 10 ⁶ in 1 ml.

Пример №3. Использование консорциума штаммов бифидобактерий для получения биологически активной добавки.Example No. 3. The use of a consortium of strains of bifidobacteria to obtain biologically active additives.

Получение жидкой биологически активной добавки (БАД)Obtaining a liquid dietary supplement (BAA) Штаммы B.bifidum 792, 79-37, ЛВА-3, B.longum В379М, Я-3, Я-4, B.breve 79-88, B.infantis 79-43 1-2- их пассажей (пример 1) смешивают, получая консорциум, вносят в питательную среду объемом не более 5%, выращивают до получения биомассы с содержанием бифидобактерий в 1 мл не менее 10⁸ и разливают в емкости. В результате получают биологически активную добавку, которая представляет собой жидкий концентрат с высоким, не менее 10⁸/мл, содержанием бифидобактерий.Strains B.bifidum 792, 79-37, LVA-3, B.longum B379M, I-3, I-4, B.breve 79-88, B.infantis 79-43 1-2- their passages (example 1) mixed, receiving a consortium, introduced into the nutrient medium with a volume of not more than 5%, grown to obtain biomass with a content of bifidobacteria in 1 ml of at least 10 ⁸ and poured into containers. The result is a biologically active additive, which is a liquid concentrate with a high, at least 10 ⁸ / ml, content of bifidobacteria. Получение сухой биологически активной добавки (БАД)Getting dry biologically active additives (BAA) В жидкую биологически активную добавку вносят защитные среды высушивания (сахароза 80% и желатина 8% в объеме 10-12%, обезжиренное молоко до 20%). Полученную суспензию разливают по 1-5 мл (1-5 доз) в ампулы или пенициллиновые флаконы, замораживают при t (40-45)°С и лиофилизируют из замороженного состояния в вакуум-сушильных аппаратах. Полученная сухая биологически активная добавка в 1 дозе содержит не менее 10⁷ живых клеток бифидобактерий.Protective drying media (sucrose 80% and gelatin 8% in a volume of 10-12%, skim milk up to 20%) are added to the liquid biologically active additive. The resulting suspension is poured into 1-5 ml (1-5 doses) into ampoules or penicillin vials, frozen at t (40-45) ° С and lyophilized from a frozen state in vacuum drying apparatus. The resulting dry biologically active additive in 1 dose contains at least 10 ⁷ living bifidobacteria cells.

Пример №4. Использование консорциума штаммов бифидобактерий для получения бактерийного препарата.Example No. 4. Using a consortium of bifidobacteria strains to obtain a bacterial preparation.

Штаммы B.bifidum 792, 79-37, ЛВА-3, B.longum B379M, Я-3, Я-4, B.breve 79-88, B.infantis 79-43 1-2-х пассажей (пример 1) вносят по отдельности в питательную среду объемом не более 5%, выращивают при температуре 37-38 градусов по Цельсию до получения микробной массы с содержанием бифидобактерий не менее 10⁸/мл. Выращенную биомассу смешивают, получая консорциум штаммов, добавляют защитные среды высушивания (сахароза 80% и желатина 8% в объеме 10-12%, обезжиренное молоко до 20%). Полученную суспензию разливают по 1-5 мл (1-5 доз) в ампулы или пенициллиновые флаконы, замораживают при t (40-45)°С и лиофилизируют из замороженного состояния в вакуум-сушильных аппаратах. Полученный препарат (консорциум) в 1 дозе содержит 10⁷ живых клеток бифидобактерий. Согласно НТД на препарат «Бифидумбактерин сухой» допускается содержание в 1 дозе не менее 10 живых клеток бифидобактерий.Strains B.bifidum 792, 79-37, LVA-3, B.longum B379M, I-3, I-4, B.breve 79-88, B.infantis 79-43 1-2 passages (example 1) individually introduced into the nutrient medium with a volume of not more than 5%, grown at a temperature of 37-38 degrees Celsius until a microbial mass with a content of bifidobacteria of at least 10 ⁸ / ml is obtained. The grown biomass is mixed, obtaining a consortium of strains, protective drying media are added (sucrose 80% and gelatin 8% in a volume of 10-12%, skim milk up to 20%). The resulting suspension is poured into 1-5 ml (1-5 doses) into ampoules or penicillin vials, frozen at t (40-45) ° С and lyophilized from a frozen state in vacuum drying apparatus. The resulting preparation (consortium) in 1 dose contains 10 ⁷ live bifidobacteria cells. According to the scientific and technical documentation, the preparation “Bifidumbacterin dry” is allowed to contain at least 10 live bifidobacteria cells in 1 dose.

Пример №5. Использование консорциума штаммов бифидобактерий для получения гигиенических и косметических средств.Example No. 5. Using a consortium of bifidobacteria strains to obtain hygiene and cosmetics.

Штаммы B.bifidum 792, 79-37, ЛВА-3, B.longum B379M, Я-3, Я-4, В.breve 79-88, B.infantis 79-43 1-2-х пассажей (пример 1) вносят по отдельности в питательную среду объемом не более 5%, выращивают при температуре 37-38 градусов по Цельсию до получения микробной массы с содержанием бифидобактерий не менее 10⁸/мл.Strains B.bifidum 792, 79-37, LVA-3, B.longum B379M, I-3, I-4, B. breve 79-88, B.infantis 79-43 1-2 passages (example 1) individually introduced into the nutrient medium with a volume of not more than 5%, grown at a temperature of 37-38 degrees Celsius until a microbial mass with a content of bifidobacteria of at least 10 ⁸ / ml is obtained.

Получение продукта: выросшую биомассу смешивают, получая консорциум, и вводят в состав гигиенического или косметического средства.Getting the product: the grown biomass is mixed, receiving a consortium, and introduced into the composition of hygiene or cosmetics.

Пример №6. Использование консорциума штаммов бифидобактерий для получения заквасок.Example No. 6. Using a consortium of strains of bifidobacteria to obtain starter cultures.

Лиофилизированные штаммы B.bifidum 792, 79-37, ЛВА-3, B.longum B379M, Я-3, Я-4, B.breve 79-88, B.infantis 79-43 в количестве 0,1 г (1 доза) сухой биомассы вносят по отдельности в 20-30 мл питательной среды. Выращивают до получения биомассы с содержанием бифидобактерий не менее 10⁸/мл.Lyophilized strains of B.bifidum 792, 79-37, LVA-3, B.longum B379M, I-3, I-4, B.breve 79-88, B.infantis 79-43 in an amount of 0.1 g (1 dose ) dry biomass individually contribute to 20-30 ml of culture medium. Grown to obtain biomass with a content of bifidobacteria of at least 10 ⁸ / ml.

Получение закваски. Выросшую культуру штаммов бифидобактерий смешивают, получая консорциум, и объемом не более 10% вносят в среду накопления. Культивируют при температуре 37-38 градусов по Цельсию до получения биомассы (закваски) с содержанием микробных тел не менее 10⁸/мл.Getting sourdough. The grown culture of bifidobacteria strains is mixed to form a consortium, and the volume of not more than 10% is introduced into the accumulation medium. Cultivate at a temperature of 37-38 degrees Celsius to obtain biomass (yeast) with a microbial content of at least 10 ⁸ / ml.

Таким образом, предлагаемый консорциум восьми штаммов бифидобактерий активно размножается в питательных средах с накоплением производственной биомассы в короткие сроки культивирования, сквашивает молоко с образованием сгустка с хорошими органолептическими свойствами, обладает специфической активностью.Thus, the proposed consortium of eight strains of bifidobacteria actively propagates in nutrient media with the accumulation of production biomass in a short cultivation period, ferments milk with the formation of a clot with good organoleptic properties, and has specific activity.

Полученный консорциум можно рекомендовать для приготовления кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, биологически активных добавок, бактерийных препаратов, гигиенических и косметических средств.The resulting consortium can be recommended for the preparation of dairy, fermented and non-fermented foods, starter cultures, dietary supplements, bacterial preparations, hygienic and cosmetic products.

Claims (1)

Консорциум штаммов бифидобактерий Bifidobacterium bifidum, коллекционный номер ГКНМ ГУ МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского 171, Bifidobacterium bifidum, коллекционный номер ЦМПМ ВНИИгенетика В-3299, Bifidobacterium bifidum, коллекционный номер ГКНМ ГУ МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского 182, Bifidobacterium longum, коллекционный номер ЦМПМ ВНИИгенетика В-2000, Bifidobacterium longum, коллекционный номер ГКНМ ГУ МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского 169, коллекционный номер ЦМПМ ВНИИгенетика В-3301, Bifidobacterium breve, коллекционный номер ГКНМ ГУ МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского 150, Bifidobacterium infantis, коллекционный номер ГКНМ ГУ МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского 156, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, биологически активных добавок, бактерийных препаратов, гигиенических и косметических средств.Consortium of strains of bifidobacteria Bifidobacterium bifidum, collection number GKNM GU MNIIEM them. G.N.Gabrichevsky 171, Bifidobacterium bifidum, collection number TsMPM VNIIgenetika V-3299, Bifidobacterium bifidum, collection number GKNM GU MNIIEM them. G.N.Gabrichevsky 182, Bifidobacterium longum, collection number TsMPM VNIIgenetika V-2000, Bifidobacterium longum, collection number GKNM GU MNIIEM them. G.N.Gabrichevsky 169, collection number TsMPM VNIIgenetika B-3301, Bifidobacterium breve, collection number GKNM GU MNIIEM them. G.N.Gabrichevsky 150, Bifidobacterium infantis, collection number GKNM GU MNIIEM them. G.N.Gabrichevskogo 156, used to obtain dairy, fermented and non-fermented foods, starter cultures, dietary supplements, bacterial preparations, hygiene and cosmetics.