RU2288718C2 - Drugs containing human h-sgk kinase inhibitors controlling cell volume - Google Patents

Drugs containing human h-sgk kinase inhibitors controlling cell volume Download PDF

Info

Publication number
RU2288718C2
RU2288718C2 RU2001131351/15A RU2001131351A RU2288718C2 RU 2288718 C2 RU2288718 C2 RU 2288718C2 RU 2001131351/15 A RU2001131351/15 A RU 2001131351/15A RU 2001131351 A RU2001131351 A RU 2001131351A RU 2288718 C2 RU2288718 C2 RU 2288718C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
sgk
expression
kinase
disease
enac
Prior art date
Application number
RU2001131351/15A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2288718C9 (en
RU2001131351A (en
Inventor
Флориан ЛАНГ (DE)
Флориан Ланг
Зигфрид ВАЛЬДЕГГЕР (DE)
Зигфрид ВАЛЬДЕГГЕР
Карстен ВАГНЕР (DE)
Карстен ВАГНЕР
Штефан БРЕЭР (DE)
Штефан БРЕЭР
Карин КЛИНГЕЛЬ (DE)
Карин КЛИНГЕЛЬ
Original Assignee
Флориан Ланг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Флориан Ланг filed Critical Флориан Ланг
Publication of RU2001131351A publication Critical patent/RU2001131351A/en
Publication of RU2288718C2 publication Critical patent/RU2288718C2/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2288718C9 publication Critical patent/RU2288718C9/en

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4741—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having oxygen as a ring hetero atom, e.g. tubocuraran derivatives, noscapine, bicuculline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/553—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having at least one nitrogen and one oxygen as ring hetero atoms, e.g. loxapine, staurosporine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/005—Enzyme inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: drugs contain H-SGK kinase having lysine substituted by arginine in position 127.
EFFECT: enhanced effectiveness in treating states for which sodium channel and/or Na+, K+, 2Cl- cocarrier activity is to be reduced.
2 cl, 6 dwg

Description

Настоящее изобретение касается лекарственных средств, содержащих ингибиторы или активаторы человеческой h-sgk киназы, контролирующей клеточный объем. Такие лекарственные средства пригодны для лечения болезненных состояний, при которых наблюдается повышенная или пониженная экспрессия h-sgk. H-sgk, а также способ ее получения, описан в европейской заявке на патент ЕР-O 861896, подробное содержание которого является составляющей предлагаемого описания.The present invention relates to drugs containing inhibitors or activators of human h-sgk kinase that controls cell volume. Such drugs are suitable for the treatment of disease states in which increased or decreased expression of h-sgk is observed. H-sgk, as well as a method for its preparation, is described in European patent application EP-O 861896, the detailed content of which is a component of the proposed description.

Толкование понятий:Interpretation of concepts:

Figure 00000001
Figure 00000001

Повышение экспрессии h-sgk ярко выражается при таких болезнях, как: сахарный диабет, артериосклероз, болезнь Альцгеймера, цирроз печени, болезнь Крона, фиброзный панкреатит, фиброз легких и хронический бронхит. Повышенное образование h-sgk можно объяснить стимуляцией экспрессии через фактор TGFβ1 (фиг.1). Причиной фиброзных заболеваний является высокая степень образования и слабая степень расщепления матричных протеинов. Оба явления являются результатом действия фактора TGFβ1. В фибробластах можно приостановить повышенную экспрессию матричных протеинов посредством подавления NKCC фуросемидом (фиг.2). До сих пор было не ясно, является ли повышенная экспрессия h-sgk лишь следствием или причиной заболевания.An increase in h-sgk expression is pronounced in diseases such as diabetes mellitus, arteriosclerosis, Alzheimer's disease, cirrhosis, Crohn's disease, fibrous pancreatitis, pulmonary fibrosis, and chronic bronchitis. The increased formation of h-sgk can be explained by stimulation of expression through the factor TGFβ 1 (Fig. 1). The cause of fibrotic diseases is a high degree of formation and a weak degree of breakdown of matrix proteins. Both phenomena are the result of the action of factor TGFβ 1 . In fibroblasts, increased expression of matrix proteins can be stopped by inhibiting NKCC with furosemide (FIG. 2). Until now, it was not clear whether the increased expression of h-sgk is only a consequence or cause of the disease.

Данные анализа удивительным образом подтверждают, что h-sgk активирует Na+, К+, 2Cl- соперенос (фиг.3). Отсюда можно сделать вывод, что стимуляция NKCC посредством h-sgk вызывает фиброз. Наряду с Na+, К+, 2Сl- сопереносом посредством h-sgk активируются еще ENaC (фиг.4 и 5) и MDEG.The analysis data surprisingly confirm that h-sgk activates Na + , K + , 2Cl - co - transfer (Fig. 3). From this it can be concluded that stimulation of NKCC by h-sgk causes fibrosis. Along with Na + , K + , 2Cl - co - transfer, h-sgk also activates ENaC (Figs. 4 and 5) and MDEG.

Стимулирующее действие h-sgk на ENaC можно приостановить с помощью ингибитора киназы, как например, стауроспорин (Sigma, D-8204 Deisenhofen) или хелеритрин (Sigma, loc.cit.) (фиг.4). Кроме этого, действие h-sgk на ENaC можно приостановить, например, с помощью трансдоминантной ингибиторной киназы (фиг.5). Поэтому ингибиторы h-sgk, такие как стауроспорин, хелеритрин или другие ингибиторы киназ, могли бы быть использованы при лечении названных выше заболеваний. В основном для этих целей пригодны все известные ингибиторы киназ. Ингибиторы киназ во многих случаях можно приобрести в торговой сети, например, фирмы Calbiochem-Novabiochem GmbH, Lisztweg 1, D-65812 Bad Soden ("1998 General Catalog"). Другие ингибиторы киназ можно приобрести из других коммерческих и некоммерческих источников, известных специалисту.The stimulatory effect of h-sgk on ENaC can be stopped with a kinase inhibitor such as staurosporine (Sigma, D-8204 Deisenhofen) or chelerythrin (Sigma, loc.cit.) (Fig. 4). In addition, the effect of h-sgk on ENaC can be suspended, for example, using a transdominant inhibitory kinase (Fig. 5). Therefore, h-sgk inhibitors, such as staurosporine, cheleritrin or other kinase inhibitors, could be used in the treatment of the above diseases. Basically, all known kinase inhibitors are suitable for these purposes. In many cases, kinase inhibitors can be purchased from a distribution network, for example, Calbiochem-Novabiochem GmbH, Lisztweg 1, D-65812 Bad Soden ("1998 General Catalog"). Other kinase inhibitors can be obtained from other commercial and non-commercial sources known to the specialist.

При эпилептическом приступе h-sgk многократно экспримируется. Обнаруженные нами данные показывают, что полезными являются воздействия, снижающие возбудимость нейронов, так как активация NKCC приводит к снижению внеклеточной концентрации К* и, как следствие этого, гиперполяризации и связанному с этим подавлению активности нейронов. Кроме этого, подавление MDEG должно сдерживать возбудимость нейронов. Поэтому активаторы киназы, превышающие гемато-энцефалический барьер, могли бы успешно применяться при эпилептических приступах. И наоборот, сдерживание киназы могло бы в сочетании с медикаментами, превышающими гемато-энцефалический барьер, повышать внимательность и способность к учению. Активаторы киназ давно известны специалистам, особый интерес представляют С-активаторы протеинкиназы (смотри Calbiochem-Novabiochem 1998 General Catalog, loc.cit). Другие активаторы киназ можно приобрести из других известных специалисту коммерческих и не коммерческих источников.In an epileptic seizure, h-sgk is repeatedly expressed. The data we found show that effects that reduce the excitability of neurons are useful, since activation of NKCC leads to a decrease in the extracellular concentration of K * and, as a consequence, hyperpolarization and the associated suppression of neuron activity. In addition, the suppression of MDEG should restrain the excitability of neurons. Therefore, kinase activators that exceed the blood-brain barrier could be successfully used for epileptic seizures. Conversely, suppressing kinase could, in combination with medications that exceed the blood-brain barrier, increase alertness and learning ability. Kinase activators have long been known in the art, of particular interest are protein kinase C-activators (see Calbiochem-Novabiochem 1998 General Catalog, loc.cit). Other kinase activators can be obtained from other commercial and non-commercial sources known to the skilled person.

Поскольку Na+, К+, 2Cl- соперенос и Na+-канал играют важную роль при почечной Na+ резорбции, а повышенная почечная Na+-резорбция протекает при гипертонии, следует предположить, что повышение экспрессии киназы приводит к гипертонии, а понижение экспрессии киназы к гипотонии.Since Na + , K + , 2Cl - co - transfer and Na + -channel play an important role in renal Na + resorption, and increased renal Na + -resorption occurs during hypertension, it should be assumed that an increase in kinase expression leads to hypertension, and a decrease in kinase expression to hypotension.

Настоящее изобретение касается, таким образом, также применения ингибиторов h-sgk для получения лекарственных средств для лечения сахарного диабета, артериосклероза, болезни Альцгеймера, цирроза печени, болезни Крона, фиброзного панкреатита, фиброза легких, хронического бронхита, радиационного фиброза, склеродермии, кистозного фиброза и других фиброзных заболеваний, а также для лечения артериальной гипертонии. Кроме этого, лекарственные средства, содержащие ингибиторы или активаторы h-sgk можно использовать для регулирования нейрональной возбудимости. В особенности предпочтительно применение в качестве ингибиторов стауроспорина или хелеритрина, а также их аналогов.The present invention also relates to the use of h-sgk inhibitors for the manufacture of medicaments for the treatment of diabetes mellitus, arteriosclerosis, Alzheimer's disease, cirrhosis, Crohn’s disease, fibrotic pancreatitis, pulmonary fibrosis, chronic bronchitis, radiation fibrosis, scleroderma, cystic fibrosis and other fibrotic diseases, as well as for the treatment of arterial hypertension. In addition, drugs containing h-sgk inhibitors or activators can be used to regulate neuronal excitability. Particularly preferred is the use of staurosporin or helerythrin as well as their analogues as inhibitors.

Результатыresults

Диабетическая почка:Diabetic kidney:

В обычной почке h-sgk лишь слабо экспримирована. Четкая экспрессия h-sgk обнаруживается в отдельных клетках почечного клубочка, поздних проксимальных и дистальных канальцев. В отличие от этого в диабетической почке обнаруживаются скопления клеток с массивной эспрессией h-sgk.In a normal kidney, h-sgk is only poorly expressed. Clear expression of h-sgk is found in individual cells of the renal glomerulus, late proximal and distal tubules. In contrast, clusters of cells with massive h-sgk expression are found in the diabetic kidney.

Артериосклероз:Arteriosclerosis:

В стенках артериосклеротических сосудов обнаруживается увеличение массива экспримирующих h-sgk клеток.An increase in the array of expressing h-sgk cells is detected in the walls of arteriosclerotic vessels.

Болезнь Альцгеймера:Alzheimer's disease:

В обычном мозгу однаружены лишь отдельные клетки, экспримирующие h-sgk. Этими клетками очевидно являются олигодендроглиальные клетки. При болезни Альцгеймера наблюдается значительное увеличение числа клеток, экспримирующих h-sgk.Only single cells expressing h-sgk are found in the normal brain. These cells are obviously oligodendroglial cells. In Alzheimer's disease, there is a significant increase in the number of cells expressing h-sgk.

Цирроз печени:Cirrhosis of the liver:

В обычной печени h-sgk экспримирует лишь в Купфферовских клетках. При циррозе печени ткани усеяны клетками, экспримирующими h-sgk.In a normal liver, h-sgk expresses only in Kupffer cells. In cirrhosis of the liver, tissues are dotted with cells expressing h-sgk.

Болезнь Крона:Crohn's disease:

В нормальной ткани кишечника h-sgk экспримирует исключительно в энтероцитах. При болезни Крона киназу обнаруживают также и в соединительной ткани.In normal intestinal tissue, h-sgk expresses exclusively in enterocytes. In Crohn's disease, kinase is also found in connective tissue.

Фиброзный панкреатит:Fibrous pancreatitis:

В нормальной поджелудочной железе h-sgk обнаруживают в ацинарных клетках и мигрирующих клетках. Одиночные группы h-sgk-экспримирующих одноядерных клеток обнаруживаются вокруг входа в поджелудочную железу. При фиброзном панкреатите отчетливо повышается экспрессия киназы.In the normal pancreas, h-sgk is found in acinar cells and migrating cells. Single groups of h-sgk-expressing mononuclear cells are found around the entrance to the pancreas. With fibrous pancreatitis, kinase expression is clearly increased.

Фиброз легких и хронический бронхит:Pulmonary fibrosis and chronic bronchitis:

Массивная экспрессия h-sgk наблюдается при фиброзе легких и хронических бронхитах.Massive expression of h-sgk is observed in pulmonary fibrosis and chronic bronchitis.

Стимуляция h-sgk-экспрессии посредством фактора TGFβ1;Stimulation of h-sgk expression by factor TGFβ 1 ;

Экспрессия h-sgk стимулируется посредством фактора TGFβ1 (фиг.1). Поскольку TGFβ1 образуется в фиброзных воспаленных тканях, то этим объясняется повышенная экспрессия h-sgk в воспаленной ткани.The expression of h-sgk is stimulated by factor TGFβ 1 (figure 1). Since TGFβ 1 is formed in fibrous inflamed tissues, this explains the increased expression of h-sgk in inflamed tissue.

TGFβ1 стимулирует экспрессию матричного протеина бигликана, процесс, который приостанавливается под влиянием ингибитора NKCC фуросемида.TGFβ 1 stimulates the expression of the biglycan matrix protein, a process that stops under the influence of the NKCC inhibitor furosemide.

TGFβ1 стимулирует экспрессию бигликана. В присутствии NKCC-ингибитора фуросемида действие фактора TGFβ1 на экспрессию бигликана полностью парализовано. Таким образом фиброзное действие фактора TGFβ1 предполагает активирование NKCC (фиг.2).TGFβ 1 stimulates the expression of biglycan. In the presence of the NKCC furosemide inhibitor, the effect of TGFβ 1 factor on biglycan expression is completely paralyzed. Thus, the fibrotic effect of factor TGFβ 1 involves the activation of NKCC (figure 2).

Стимулирование NKCC посредством h-sgk:Stimulate NKCC through h-sgk:

Повышенная экспрессия киназы в фиброзных тканях может иметь различное значение, не имеющее причинной связи с фиброзом. Однако эксперименты с двухэлектродной клеммой напряжения показывают, что активность NKCC массированно стимулируется h-sgk (фиг.3). Эти данные исследования, принимая во внимание чувствительность фуросемида при синтезе бигликана, однозначно доказывают причинную роль h-sgk при фиброзе.The increased expression of kinase in fibrous tissues can have different meanings that have no causal relationship with fibrosis. However, experiments with a two-electrode voltage terminal show that NKCC activity is massively stimulated by h-sgk (Fig. 3). These studies, taking into account the sensitivity of furosemide in the synthesis of biglycan, unequivocally prove the causative role of h-sgk in fibrosis.

Стимулирование ENaC посредством h-sgk:Stimulating ENaC through h-sgk:

Этот процесс можно приостановить посредством ингибиторов киназы стауроспорина и хелеритрина. Как показано на фиг.4, поток через ENaC значительно возрастает благодаря соэкспрессии с h-sgk. Киназа, таким образом, стимулирует ENaC. Под воздействием ингибиторов киназы стауроспорина и хелеритрина можно полностью приостановить активирование ENaC посредством h-sgk.This process can be stopped by the kinase inhibitors staurosporin and helerythrin. As shown in FIG. 4, the flow through ENaC increases significantly due to co-expression with h-sgk. Kinase thus stimulates ENaC. Under the influence of kinase inhibitors staurosporine and cheleritrin, the activation of ENaC by h-sgk can be completely stopped.

Стимулирование эпителиального ENaC посредством h-sgk может измениться прямо в противоположную сторону из-за соэкспрессиии трансдоминантной ингибиторной h-sgk киназы:Stimulation of epithelial ENaC by h-sgk can change directly in the opposite direction due to co-expression and the transdominant inhibitory h-sgk kinase:

Как показано на фиг.5, стимулирующее действие h-sgk-соэкспрессии на Na+-поток, обусловленный ENaC, можно приостановить посредством соэкспрессиии трансдоминантной ингибиторной киназы. Эта трансдоминантно-ингибиторная киназа (смотри раздел "Толкование понятий") при катализе так изменяется, что она не может больше развивать свою функцию. Но поскольку она наслаивается на субстрат, она вытесняет активную киназу и подавляет таким образом ее действие. Трансдоминантно-ингибиторная киназа подавляет не только рост ENaC-активности посредством экзогенной h-sgk, но и, по всей видимости, угнетает стимулирование посредством эндогенной h-sgk.As shown in FIG. 5, the stimulatory effect of h-sgk coexpression on Na + flux due to ENaC can be stopped by coexpression and a transdominant inhibitory kinase. This transdominantly inhibitory kinase (see the section "Interpretation of concepts") during catalysis changes so much that it can no longer develop its function. But since it is layered on the substrate, it displaces the active kinase and thus suppresses its effect. Transdominantly inhibitory kinase not only inhibits the growth of ENaC activity by exogenous h-sgk, but also, apparently, inhibits stimulation by endogenous h-sgk.

MDEG полностью исключается благодаря соэкспрессии с h-sgk:MDEG is completely eliminated thanks to co-expression with h-sgk:

Как показано на фиг.6, экспрессия MDEG индуцирует в овоцитах сильный Na+-поток, который активируется путем снижения внеклеточной величины рН. Канал полностью блокируется за счет соэкспрессии с h-sgk. Отсюда напрашивается вывод, что h-sgk подавляет нейрональную возбудимость.As shown in FIG. 6, MDEG expression induces a strong Na + flux in oocytes, which is activated by lowering the extracellular pH. The channel is completely blocked due to co-expression with h-sgk. This suggests the conclusion that h-sgk suppresses neuronal excitability.

Примеры:Examples:

Пример 1: Гибридизация in situExample 1: In situ Hybridization

Ткани нормальной поджелудочной железы, печени, сосудов, мозга, легких, почек и кишечника, а также ткани при диабетической нефропатии, артериосклерозе, болезни Альцгеймера, циррозе печени, болезни Крона, фиброзном панкреатите и фиброзе легких в 4% параформальдегид/0,1М натрийфосфатном буфере (рН 7,2) заливают на 4 часа в парафин. Из срезов ткани удаляют парафин и проводят гибридизацию, как это описано ранее (Kandolf, R., D. Ameis, P. Kirschner A., Canu, P.H. Hofschneider, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84: 6272-6276, 1987; HohenadI, С., К., Klingel, J. Mertsching, P.H. Hofschneider, R. Kandolf., Mol. Cell. Probes 5: 11-20, 1991; Klingel,К.., С. HohenadI, A. Canu, M. Albrecht, M. Seemann, G. Mall, R. Kandolf, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:314-318, 1992).Tissues of normal pancreas, liver, blood vessels, brain, lungs, kidneys and intestines, as well as tissues for diabetic nephropathy, arteriosclerosis, Alzheimer's disease, cirrhosis, Crohn's disease, fibrous pancreatitis and pulmonary fibrosis in 4% paraformaldehyde / 0.1 M sodium phosphate buffer (pH 7.2) is poured into paraffin for 4 hours. Paraffin is removed from tissue sections and hybridized as previously described (Kandolf, R., D. Ameis, P. Kirschner A., Canu, PH Hofschneider, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84: 6272-6276, 1987 ; HohenadI, C., K., Klingel, J. Mertsching, PH Hofschneider, R. Kandolf., Mol. Cell. Probes 5: 11-20, 1991; Klingel, K. .., C. HohenadI, A. Canu, M. Albrecht, M. Seemann, G. Mall, R. Kandolf, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 314-318, 1992).

Гибридизированная смесь содержит или кодирующую h-sgk, 35S-маркированную сенс-РНК, или комплементарную к последней РНК, 35S-маркированную антисенс-РНК (по мере необходимости 500 нг/мл) в 10 мМ Трис-HCl, рН 7,4; 50% (объем/объем) деионизированного формамида; 600 мМ NaCl; 1 мМ EDTA (этилендиаминтетрауксусная кислота); 0,02% поливинилпирролидона; 0,02% фиколла; 0,05% телячьего сывороточного альбумина; 10% декстрансульфата; 10 мМ дитиотреитола; 200 мкг/мл денатурированной соницированной (гомогенат, полученный под воздействием ультразвука) ДНК спермы лосося и 100 μг/мл тРНК печени кролика.The hybridized mixture contains either coding h-sgk, 35 S-labeled sense RNA, or complementary to the last RNA, 35 S-labeled antisense RNA (500 ng / ml as needed) in 10 mM Tris-HCl, pH 7.4 ; 50% (v / v) deionized formamide; 600 mM NaCl; 1 mM EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid); 0.02% polyvinylpyrrolidone; 0.02% ficoll; 0.05% calf serum albumin; 10% dextran sulfate; 10 mM dithiothreitol; 200 μg / ml denatured sonicated (homogenate obtained by ultrasound) salmon sperm DNA and 100 μg / ml rabbit liver tRNA.

Гибридизацию с РНК-пробами проводят при температуре 42°С в течение 18 часов. Носители объектов промывают, как это описано в (HohenadI et al., 1991; Klingel et al., 1992), а затем проводят инкубацию в течение 1 часа при температуре 55°С в двухстандартном цитрате натрия. Негибридизированные пробы однонитевых РНК подвергают ферментативному разложению посредством РНКазы А (20 (μг/мл) в 10 мМ Трис-HCl, рН 8,0/0,5 М NaCl в течение 30 мин при температуре 37°С. Пробы ткани в течение трех недель ауторадиографируют (Klingel et al., 1992) и окрашивают гематоксилин/эозином.Hybridization with RNA samples is carried out at a temperature of 42 ° C for 18 hours. Carriers of objects are washed as described in (HohenadI et al., 1991; Klingel et al., 1992), and then incubated for 1 hour at 55 ° C in double standard sodium citrate. Non-hybridized single-stranded RNA samples are enzymatically decomposed by RNase A (20 (μg / ml) in 10 mM Tris-HCl, pH 8.0 / 0.5 M NaCl for 30 min at 37 ° C. Tissue samples for three weeks autoradiograph (Klingel et al., 1992) and stained with hematoxylin / eosin.

Пример 2: Транскрипционное регулирование бигликана и h-sgk.Example 2: Transcriptional regulation of biglycan and h-sgk.

Клетки культивируют в RPMi / 5% СО2 / 10 мМ глюкозы при температуре 37°С, рН 7,4, добавляя к 10% (объем/объем) зародышевой телячьей сыворотки (FCS). Клетки культивируют до 90% слияния и после этого гомогенезируют в тризоле (GIBCO/BRL) (примерно 0,4×106 на образец). Полную РНК препарируют согласно указанию производителя. Блоты по Нортону разделяют методом электрофореза с 15 или 20 мкг/мл полной РНК с раздельным контролем в присутствии 2,4 моль/л формальдегида с использованием 10 г/л агарового геля. В вакууме (Appligene Oncor Trans DNA Express Vacuum Blotter, Appligene, Хайдельберг, Германия) РНК переносят на положительно заряженные нейлоновые мембраны (Boehringer Маннгейм, Гермния) и сшивают под воздействием ультрафиолетового света (UV Stratalinker 2400, Stratagane, Хайдельберг, Германия). Гибридизацию проводят в течение ночи с применением DIG-Easy-Hyb (Boehringer Маннгейм) при концентрации проб 25 μг/л при температуре 50°С. Дигоксигенин (DIG)-маркированные пробы получают с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР), как это подробно описано в (Waldegger et. al. (1997) PNAS 94: 4440-4445). Для ауторадиографии фильтры экспонируют на рентгеновскую пленку (Кодак) в среднем в течение 5 мин.Cells were cultured in RPMi / 5% CO 2/10 mM glucose at 37 ° C, pH 7.4 by adding a 10% (v / v) fetal calf serum (FCS). Cells are cultured up to 90% fusion and then homogenized in Trisol (GIBCO / BRL) (approximately 0.4 × 10 6 per sample). Complete RNA is prepared as directed by the manufacturer. Norton blots are separated by electrophoresis with 15 or 20 μg / ml total RNA with separate control in the presence of 2.4 mol / L formaldehyde using 10 g / L agar gel. In a vacuum (Appligene Oncor Trans DNA Express Vacuum Blotter, Appligene, Heidelberg, Germany), RNAs are transferred onto positively charged nylon membranes (Boehringer Mannheim, Germany) and crosslinked by ultraviolet light (UV Stratalinker 2400, Stratagane, Heidelberg, Germany). Hybridization is carried out overnight using DIG-Easy-Hyb (Boehringer Mannheim) at a sample concentration of 25 μg / L at a temperature of 50 ° C. Digoxygenin (DIG) -labeled samples are obtained by polymerase chain reaction (PCR), as described in detail in (Waldegger et. Al. (1997) PNAS 94: 4440-4445). For autoradiography, filters are exposed to an X-ray film (Kodak) for an average of 5 minutes.

Пример 3: Эксперименты с помощью двухэлектродной клеммы напряжения и меченых атомов.Example 3: Experiments using a two-electrode voltage terminal and labeled atoms.

Рассечение Xenopus laevis, получение и обработка овоцитов подробно описаны в (Busch et. al. 1992). Овоциты инъецируют по 1 нг цРНК из NKCC, ENaC или MDEG с или без одновременной инъекцией h-sgk. Эксперименты с двухэлектродными клеммами напряжения и тока можно проводить через 2-8 дней после инъекции. Сдерживание фуросемидом проникновения Na+ посредством NKCC выявляют путем поглощения 22Na+ овоцитами, которое определяют с применением сцинтилляторного счетчика. Поток Na+ (ENaC) фильтруют при частоте 10 Гц и регистрируют с помощью самописца. Эксперименты проводят обычно на второй день после инъекции цРНК. Раствор в ванне содержит: 96 мМ хлористого натрия, 2 мМ хлористого калия, 1,8 мМ хлористого кальция, 1 мМ хлористого магния и 5 мМ HEPES при величине рН 7,5 и поддерживаемом потенциале -50 мV. Во всех экспериментах величину рН устанавливают путем титрования соляной кислотой или едким натром. Скорость протекания через ванну составляет 20 мл/мин, благодаря чему обеспечивается полная смена раствора в измерительной камере в течение 10-15 сек. Все данные приведены в среднеарифметических величинах ±SEM.Dissection of Xenopus laevis, production and processing of oocytes are described in detail in (Busch et. Al. 1992). Ovocytes are injected with 1 ng of cRNA from NKCC, ENaC or MDEG with or without simultaneous injection of h-sgk. Experiments with two-electrode voltage and current terminals can be performed 2-8 days after injection. Furosemide containment of Na + penetration by NKCC was detected by uptake of 22 Na + by oocytes, which was determined using a scintillation counter. The Na + stream (ENaC) is filtered at a frequency of 10 Hz and recorded using a recorder. The experiments are usually carried out on the second day after the injection of cRNA. The bath solution contains: 96 mM sodium chloride, 2 mM potassium chloride, 1.8 mM calcium chloride, 1 mM magnesium chloride and 5 mM HEPES at pH 7.5 and a supported potential of -50 mV. In all experiments, the pH value is established by titration with hydrochloric acid or sodium hydroxide. The flow rate through the bath is 20 ml / min, which ensures a complete change of solution in the measuring chamber within 10-15 seconds. All data are presented in arithmetic mean values ± SEM.

Пояснения к чертежамExplanation of the drawings

Фиг.1 Стимулирование экспрессии h-sgk с посредством фактора TGFβ1:Figure 1 Stimulation of the expression of h-sgk with by factor TGFβ 1 :

Экспрессия h-sgk стимулируется фактором TGFβ1. Показано действие фактора TGFβ1 по истечении 0,5-6 часов (вверху). Форболовый эфир PDD (4-альфа-форбол-12,13-дидеканоат; стимулирует протеин киназу С) и ионофор Са++ иономицин (Sigma, loc.cit; повышает внутриклеточную концентрацию Са++) одновременно стимулируют экспрессию h-sgk (внизу).The expression of h-sgk is stimulated by factor TGFβ 1 . The effect of factor TGFβ 1 after 0.5-6 hours (top) is shown. PDB phorbol ester (4-alpha-phorbol-12,13-didecanoate; stimulates protein kinase C) and ionophore Ca ++ ionomycin (Sigma, loc.cit; increases the intracellular concentration of Ca ++ ) simultaneously stimulate the expression of h-sgk (bottom) .

Фиг.2 Стимулирование экспрессии бигликана посредством фактора TGFβ1:Figure 2 Stimulation of expression of biglycan by factor TGFβ 1 :

Экспрессия бигликана (В) стимулируется осмотическим набуханием клетки (гипо = h, вверху, слева) и фактором TGFβ1 (справа, вверху). В присутствии МКСС-ингибитора буметанида (b) действие фактора TGFβ1 на экспрессию бигликана почти полностью приостановлено (контроль = с).Expression of biglycan (B) is stimulated by osmotic cell swelling (hypo = h, top, left) and TGFβ 1 factor (right, top). In the presence of the MKCC inhibitor of bumetanide (b), the effect of TGFβ 1 factor on biglycan expression is almost completely suspended (control = c).

Фиг.3 Стимулирование NKCC посредством h-sgk:Figure 3 Stimulation of NKCC by h-sgk:

Поглощение 22Na+ овоцитами, сдерживаемое фуросемидом [поглощение (нмоль/20 мин/овоцит) = u], который экспримирует NKCC, массированно стимулируется посредством h-sgk. Овоциты, инъецированные NKCC, не характеризуются более высоким проникновением Na+, по сравнению с неинъецированными овоцитами (n.i.). Проникновение Na+ не сдерживается ингибитором NKCC фуросемидом (=F) (вверху). Экспрессия h-sgk сама по себе не приводит к стимулированию проникновения Na+. Соэкспрессия h-sgk с NKCC ведет к сильному увеличению проникновения Na+, которое полностью парализуется фуросемидом.Absorption of 22 Na + by oocytes, restrained by furosemide [absorption (nmol / 20 min / oocyte) = u], which expresses NKCC, is massively stimulated by h-sgk. Ovocytes injected with NKCC are not characterized by a higher penetration of Na + compared with uninjected oocytes (ni). Penetration of Na + is not inhibited by the NKCC inhibitor furosemide (= F) (above). Expression of h-sgk alone does not stimulate the penetration of Na + . Co-expression of h-sgk with NKCC leads to a strong increase in Na + penetration, which is completely paralyzed by furosemide.

Фиг.4 Стимулирование ENaC посредством h-sgk:Figure 4 Stimulation of ENaC by h-sgk:

Ток через ENaC (1) сильно возрастает благодаря соэкспрессии с h-sgk. Обработка овоцитов ингибиторами киназы стауроспорином (S) или хелеритрином (С) парализует активность Na+-канала благодаря h-sgk.The current through ENaC (1) is greatly increased due to co-expression with h-sgk. The treatment of oocytes with kinase inhibitors staurosporin (S) or cheleritrin (C) paralyzes the activity of the Na + channel due to h-sgk.

Фиг.5 Стимулирование ENaC посредством h-sgk может выглядеть противоположным образом вследствие соэкспрессии трансдоминантной ингибиторной киназы:Figure 5 Stimulation of ENaC by h-sgk may look the opposite due to coexpression of a transdominant inhibitory kinase:

Овоциты, которые одновременно экспримируют ENaC и h-sgk, показывают намного больший ток (1) по сравнению с овоцитами, которые экспримируют только ENaC. Соэкспрессия трансдоминантной ингибиторной киназы приостанавливает стимулирование ENaC посредством h-sgk.Ovocytes that simultaneously express ENaC and h-sgk show a much higher current (1) compared to oocytes that express only ENaC. Coexpression of the transdominant inhibitory kinase stops the stimulation of ENaC by h-sgk.

Фиг.6 Подавление MDEG посредством h-sgk:6 Suppression of MDEG by h-sgk:

Ток, вызванный MDEG (1), возрастает по мере увеличения продолжительности инкубирования [день (Т) 1-4]. Вследствие соэкспрессии с h-sgk ток полностью приостанавливается (пик = р; плато = pl).The current induced by MDEG (1) increases with increasing incubation time [day (T) 1-4]. Due to co-expression with h-sgk, the current is completely stopped (peak = p; plateau = pl).

Claims (2)

1. Применение ингибитора h-sgk киназы хелетрина или его аналога или трансдоминантно ингибиторной h-sgk киназы, у которой лизин в положении 127 заменен на аргинин, для приготовления лекарственного средства для снижения активности эпителиального натриевого канала и/или Na+, К+, 2Сl- сопереносчика при лечении заболеваний, выбранных из группы: цирроз печени, фиброзный панкреатит, фиброз легких, радиационный фиброз, склеродермия, кистозный фиброз, хронический бронхит, артериальная гипертония, болезнь Крона и болезнь Альцгеймера.1. The use of an inhibitor of h-sgk kinase heletrin or its analogue or a transdominantly inhibitory h-sgk kinase, in which the lysine at position 127 is replaced by arginine, for the preparation of a medicament for reducing the activity of the epithelial sodium channel and / or Na + , K + , 2Cl - a co - carrier in the treatment of diseases selected from the group: liver cirrhosis, fibrous pancreatitis, pulmonary fibrosis, radiation fibrosis, scleroderma, cystic fibrosis, chronic bronchitis, arterial hypertension, Crohn’s disease and Alzheimer's disease. 2. Трансдоминантно ингибиторная h-sgk киназа, у которой лизин в положении 127 заменен на аргинин.2. Transdominantly inhibitory h-sgk kinase, in which the lysine at position 127 is replaced by arginine.
RU2001131351/15A 1999-04-20 2000-04-19 DRUGS CONTAINING HUMAN h-sgk KINASE INHIBITORS CONTROLLING CELL VOLUME RU2288718C9 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19917990.5 1999-04-20
DE19917990A DE19917990A1 (en) 1999-04-20 1999-04-20 Medicament containing inhibitors of cell volume regulated human kinase h-sgk

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2001131351A RU2001131351A (en) 2003-08-20
RU2288718C2 true RU2288718C2 (en) 2006-12-10
RU2288718C9 RU2288718C9 (en) 2008-04-27

Family

ID=7905297

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2001131351/15A RU2288718C9 (en) 1999-04-20 2000-04-19 DRUGS CONTAINING HUMAN h-sgk KINASE INHIBITORS CONTROLLING CELL VOLUME

Country Status (18)

Country Link
EP (1) EP1171131A1 (en)
JP (1) JP2002542196A (en)
KR (1) KR100718900B1 (en)
CN (1) CN1351496A (en)
AU (1) AU779941B2 (en)
BR (1) BR0009914A (en)
CA (1) CA2369078A1 (en)
CZ (1) CZ20013778A3 (en)
DE (1) DE19917990A1 (en)
HU (1) HUP0200819A3 (en)
MX (1) MXPA01010588A (en)
NO (1) NO20015054L (en)
PL (1) PL198427B1 (en)
RU (1) RU2288718C9 (en)
SK (1) SK14972001A3 (en)
UA (1) UA79066C2 (en)
WO (1) WO2000062781A1 (en)
ZA (1) ZA200108610B (en)

Families Citing this family (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10042137A1 (en) * 2000-08-28 2002-03-14 Florian Lang sgk2 and sgk3 as diagnostic and therapeutic targets
DE10113876A1 (en) * 2001-03-21 2002-09-26 Eberhard Karls Uni Medizinisch Quantitative diagnosis of genetically related hypertension, by correlating blood pressure with overexpression or modification of human sgk family proteins
DE60233398D1 (en) 2001-04-27 2009-10-01 Cold Spring Harbor Lab REDUCTION OF MEMORY DEFICITS AND MEMORY COMPONENTS OF PSYCHIATRIC FUNCTIONAL DISORDERS BY CHANGING ATYPICAL PKM ACTIVITY
DE10149393A1 (en) * 2001-09-28 2003-04-24 Florian Lang Detecting the expression of serum and glucocorticoid-dependent kinase-1 (sgk1), for diagnosing coagulative diseases, diabetes, tumors, diabetes and autoimmune diseases, comprises using an antibody against sgk1
DE10225844A1 (en) * 2002-06-04 2003-12-18 Lang Florian sgk and nedd as diagnostic and therapeutic targets
DE10305212A1 (en) * 2003-02-07 2004-08-19 Florian Prof. Dr.med. Lang Use of the sgk gene family for the diagnosis and therapy of cataracts and glaucoma
KR101032281B1 (en) * 2003-03-03 2011-05-06 플로리안 랑 Sgk1 as diagnostic and therapeutic target
WO2004084889A1 (en) * 2003-03-28 2004-10-07 Pfizer Inc. Use of protein kinase c inhibitor for suppressing sustained slow postsynaptic excitation (sspe) of enteric neurons
DE10346913A1 (en) 2003-10-09 2005-05-04 Merck Patent Gmbh acylhydrazone
WO2005084702A1 (en) * 2004-03-02 2005-09-15 Hokkaido Technology Licensing Office Co., Ltd. Agent for preventing and treating organ fibrosis
KR20070015149A (en) * 2004-03-11 2007-02-01 메르크 파텐트 게엠베하 Methods for interfering with fibrosis
KR20070015148A (en) * 2004-03-11 2007-02-01 메르크 파텐트 게엠베하 Methods for modulating glutamate receptors for treating neuropsychiatric disorders comprising the use of modulators of serum and glucocorticoid inducible kinases
WO2005106491A2 (en) * 2004-04-30 2005-11-10 Bayer Healthcare Ag Diagnostics and therapeutics for diseases associated with serum/glucocorticoid regulated kinase 1 (sgk1)
WO2005118832A2 (en) * 2004-06-01 2005-12-15 Bayer Healthcare Ag Diagnostics and therapeutics for diseases associated with serum/glucocorticoid regulated kinase-like protein (sgkl)
DE102004030987A1 (en) * 2004-06-26 2006-01-12 Merck Patent Gmbh Ortho-substituted (3-hydroxyphenyl) -acetic acid benzylidene hydrazides
MX2007001155A (en) * 2004-07-29 2007-08-14 Creabilis Therapeutics Spa Methods, systems, and computer program products for providing presence gateway functionality in a telecommunications network.
DE102005001053A1 (en) * 2005-01-07 2006-07-20 Merck Patent Gmbh Square acid derivatives
DE102005015255A1 (en) * 2005-04-04 2006-10-05 Merck Patent Gmbh New acylhydrazide compounds are signal transduction kinase inhibitor, useful for treating and/or preventing diseases, e.g. diabetes, adiposity, metabolic syndrome, cancer and tumor cells
DE102005035742A1 (en) * 2005-07-29 2007-02-01 Merck Patent Gmbh New cyclobut-3-ene-1,2-dione derivatives are kinase inhibitors useful for treating e.g. cancer, hypertension, diabetes, glaucoma and bacterial infections
DE102005039541A1 (en) * 2005-08-22 2007-03-22 Merck Patent Gmbh 3-oxo-indazol-square acid derivatives
DE102007002717A1 (en) 2007-01-18 2008-07-24 Merck Patent Gmbh Heterocyclic indazole derivatives
DE102007022565A1 (en) 2007-05-14 2008-11-20 Merck Patent Gmbh Heterocyclic indazole derivatives
EP2014651A1 (en) * 2007-07-12 2009-01-14 Exonhit Therapeutics SA Compounds and methods for modulating Rho GTPases
DE102008010363A1 (en) 2008-02-18 2009-08-20 Lang, Florian, Prof. Dr.med. Sgk1 as a therapeutic and diagnostic target for carcinomatous diseases
DE102008010361A1 (en) 2008-02-18 2009-08-20 Merck Patent Gmbh sgk1 inhibitors for the prophylaxis and / or therapy of viral diseases and / or carcinomas
DE102008010362A1 (en) * 2008-02-18 2009-08-20 Florian Prof. Dr. Lang Sgk1 as a therapeutic and diagnostic target for viral diseases
DE102008029072A1 (en) * 2008-06-10 2009-12-17 Lang, Florian, Prof. Dr.med. Substance, which inhibits serum and glucocorticoid dependent kinase 3, useful for the prophylaxis and/or treatment or diagnosis of age-related diseases e.g. arteriosclerosis, skin atrophy, myasthenia, infertility, stroke and kyphosis
DE102008038222A1 (en) 2008-08-18 2010-02-25 Merck Patent Gmbh Indazol-5-carboxylic acid derivatives
DE102008038221A1 (en) 2008-08-18 2010-02-25 Merck Patent Gmbh 7-azaindole derivatives
DE102008038220A1 (en) 2008-08-18 2010-02-25 Merck Patent Gmbh oxadiazole
DE102008059133A1 (en) 2008-11-26 2010-05-27 Merck Patent Gmbh Difluorophenyl diacylhydrazide derivatives
US8802099B2 (en) 2010-11-10 2014-08-12 National Jewish Health Methods to treat allergic conditions
CN107875153A (en) * 2017-11-16 2018-04-06 上海壹志医药科技有限公司 The medicinal usage of Des-N-methylchelerythrine

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5373501A (en) * 1976-12-11 1978-06-30 Kitasato Inst Novel antibiotics amm2282 and process for preparing same
US5242397A (en) * 1989-06-20 1993-09-07 Cedars-Sinai Medical Center Catheter device and method of use for intramural delivery of protein kinase C and tyrosine protein kinase inhibitors to prevent restenosis after balloon angioplasty
US5137912A (en) * 1991-01-28 1992-08-11 National Science Council Of Republic Of China Chelerythrine inhibits platelet aggregation--a potential anti-aggregation drug
GB9325395D0 (en) * 1993-12-11 1994-02-16 Ciba Geigy Ag Compositions
US5874464A (en) * 1995-01-13 1999-02-23 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Conformationally constrained diacylglycerol analogues
WO1997007081A2 (en) * 1995-08-11 1997-02-27 Yale University Glycosylated indolocarbazole synthesis
WO1997045397A1 (en) * 1996-05-30 1997-12-04 Hoechst Marion Roussel, Inc. Alkyloxyamino substituted fluorenones and their use as protein kinase c inhibitors
EP0887081B1 (en) * 1997-06-27 2003-04-23 Smithkline Beecham Corporation Human serum glucocorticoid regulated kinase, a target for chronic renal disease and diabetic nephropathy
EP0889127A1 (en) * 1997-07-01 1999-01-07 Smithkline Beecham Corporation Serine/threonine protein kinase (H-SGK2)
CO4940430A1 (en) * 1997-07-07 2000-07-24 Novartis Ag POLYCLIC COMPOUNDS CONTAINING HYDROGENATED STAUROSPORIN WITH CONVENIENT PHARMACOLOGICAL PROPERTIES AND AN INHIBITING EFFECT ON THE GROWTH OF TUMOR CELLS

Also Published As

Publication number Publication date
NO20015054D0 (en) 2001-10-17
RU2288718C9 (en) 2008-04-27
CA2369078A1 (en) 2000-10-26
CZ20013778A3 (en) 2002-06-12
HUP0200819A3 (en) 2009-08-28
KR20020012172A (en) 2002-02-15
AU4297200A (en) 2000-11-02
EP1171131A1 (en) 2002-01-16
BR0009914A (en) 2002-01-08
SK14972001A3 (en) 2002-06-04
PL352547A1 (en) 2003-08-25
DE19917990A1 (en) 2000-11-02
KR100718900B1 (en) 2007-05-17
JP2002542196A (en) 2002-12-10
HUP0200819A2 (en) 2002-07-29
UA79066C2 (en) 2007-05-25
ZA200108610B (en) 2002-01-02
MXPA01010588A (en) 2004-09-06
CN1351496A (en) 2002-05-29
NO20015054L (en) 2001-12-14
WO2000062781A1 (en) 2000-10-26
PL198427B1 (en) 2008-06-30
AU779941B2 (en) 2005-02-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2288718C2 (en) Drugs containing human h-sgk kinase inhibitors controlling cell volume
EP3389725B1 (en) Compositions and methods for treatment of central nervous system diseases
Pinsky et al. Nitric oxide triggers programmed cell death (apoptosis) of adult rat ventricular myocytes in culture
US9382313B2 (en) Modulation of synaptic maintenance
EP3212773B1 (en) Efficient delivery of therapeutic molecules to cells of the inner ear
Bossi et al. GluN3A excitatory glycine receptors control adult cortical and amygdalar circuits
US20230277574A1 (en) Treatment of hearing loss
KR20030031466A (en) Method for identifying and using a2b adenosine receptor antagonists to mediate mammalian cell proliferation
US7087581B1 (en) Method for the treatment of diseases or disorders of the inner ear
US20050064501A1 (en) Medicaments comprising inhibitors of the cell volume-regulated human kinase h-sgk
CA2451874C (en) Antisense oligonucleotides which can inhibit the formation of capillary tubes by endothelial cells
US20100112600A1 (en) Methods and compositions for modulating synapse formation
Mizuno et al. Effects of α-Lipoic acid and Dihydrolipoic acid on expression of proto-oncogene c-fos
EP0782573B1 (en) Brefeldin a and analogs to improved synaptic transmission
US20210145783A1 (en) Compositions and Methods for Treating Sickle Cell Disease
EP4085972A1 (en) Amp-activated protein kinase inhibitors for use in the treatment of ptsd in a subject
JP2005336081A (en) Reexpression inhibitor against nr2b-nmda receptor
Claphama Ion channel-kinase TRPM7 is required for maintaining cardiac automaticity
Dudek et al. AES Proceedings Annual Meeting of the American Epilepsy Society Philadelphia, Pennsylvania, November 30-December 5, 2001.
López-Candales et al. DIFFERENT TEMPORAL AND SPATIAL DISTRIBUTION OF TGF-β1 AND TGF-β2 IN RABBIT VASCULAR TISSUE: POTENTIAL ROLE IN NORMAL VESSEL GROWTH AND MATURATION
Ciucci Insulin-like Growth Factor 1 (IGF-1) mediates the effects of enriched environments on visual system development
NSI et al. DAY TWO-POSTER PRESENTATIONS
DE10305138A1 (en) Composition, useful for the prophylaxis/treatment of hepatitis C virus infection and/or associated diseases, comprises an agent e.g. selenium, all trans retinoic acid or 9-cis retinoic acid

Legal Events

Date Code Title Description
TH4A Reissue of patent specification
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20090420