RU2255272C1 - Device for freezing and storing cells - Google Patents

Device for freezing and storing cells Download PDF

Info

Publication number
RU2255272C1
RU2255272C1 RU2004113134/12A RU2004113134A RU2255272C1 RU 2255272 C1 RU2255272 C1 RU 2255272C1 RU 2004113134/12 A RU2004113134/12 A RU 2004113134/12A RU 2004113134 A RU2004113134 A RU 2004113134A RU 2255272 C1 RU2255272 C1 RU 2255272C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
internal cavity
tissue cells
tubes
freezing
cavity
Prior art date
Application number
RU2004113134/12A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Ю.А. Моисеенко (RU)
Ю.А. Моисеенко
Original Assignee
Моисеенко Юрий Аркадьевич
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Моисеенко Юрий Аркадьевич filed Critical Моисеенко Юрий Аркадьевич
Priority to RU2004113134/12A priority Critical patent/RU2255272C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2255272C1 publication Critical patent/RU2255272C1/en

Links

Images

Landscapes

  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

FIELD: cooling or freezing apparatus.
SUBSTANCE: device comprises housing, inner space, throat that connects the inner space with the ambient. The inner space is filled with liquefied gas. A part of the inner space is filled with gas or gas mixture. The inner space receives ampoules with cells of issue and a part of the ampoules are submerged into the liquefied gas.
EFFECT: improved structure.
17 cl, 2 dwg

Description

Область техники, к которой относится изобретениеFIELD OF THE INVENTION

Изобретение относится к биологии, медицине и холодильной технике и может быть использовано для проектирования, изготовления и эксплуатации устройств для замораживания и хранения клеток ткани, в частности форменных элементов крови, клеток предшественников людей и животных.The invention relates to biology, medicine and refrigeration and can be used for the design, manufacture and operation of devices for freezing and storing tissue cells, in particular blood cells, cells of human and animal precursors.

Уровень техникиState of the art

Известно техническое решение (аналог), описанное в изобретении (Патент на изобретение РФ № 2044972, МКИ F 25 D 3/10, оп. 1995 г.) "Прибор для замораживания биологических суспензий". Прибор для замораживания биологических суспензий содержит корпус, размещенный внутри него вращающийся охлаждаемый барабан, механизм загрузки суспензии, механизм выгрузки замороженной суспензии и устройство для отделения замороженной суспензии. Загрузочное устройство представляет собой один или несколько сосудов. Механизм выгрузки состоит из одной или нескольких капсул-пробирок, установленных в теплоизолированном кожухе.Known technical solution (analogue) described in the invention (Patent for the invention of the Russian Federation No. 2044972, MKI F 25 D 3/10, op. 1995) "Device for freezing biological suspensions". A device for freezing biological suspensions contains a housing, a rotatable cooled drum placed inside it, a suspension loading mechanism, a frozen suspension unloading mechanism, and a device for separating the frozen suspension. The loading device is one or more vessels. The unloading mechanism consists of one or more capsule tubes installed in a thermally insulated casing.

Недостатком прибора является то, что он предназначен только для замораживания. Известен аналог “Криогенное хранилище для биологических материалов”, содержащее теплоизолированный сосуд, внутренняя полость которого включает газовую и жидкостную полости, и расположенную внутри сосуда камеру с горловиной для загрузки и извлечения объектов хранения, полость камеры сообщена с полостью сосуда посредством канала, вход в который со стороны сосуда расположен в его газовой полости. В сосуде расположено несколько камер, полости которых сообщены между собой (Патент на изобретение РФ № 2031334, МКИ F 25 D 3/10, оп. 1995 г.).The disadvantage of this device is that it is intended only for freezing. The analogue “Cryogenic storage for biological materials” is known, containing a thermally insulated vessel, the internal cavity of which includes gas and liquid cavities, and a chamber with a neck located inside the vessel for loading and extracting storage objects, the chamber cavity is in communication with the vessel cavity through a channel, the entrance to which is side of the vessel is located in its gas cavity. In the vessel there are several chambers, the cavities of which are interconnected (Patent for the invention of the Russian Federation No. 2031334, MKI F 25 D 3/10, op. 1995).

Известен также аналог “Криогенное хранилище для биологических материалов”, содержащее цилиндрический теплоизолированный сосуд и расположенную внутри сосуда камеру, полость которой изолирована от полости сосуда, горловину для загрузки и извлечения объектов хранения, отличающееся тем, что вход в горловину расположен на боковой поверхности сосуда, камера имеет форму тела вращения, и в камере расположено многосекционное поворотное устройство для размещения объектов хранения (Патент на изобретение РФ № 2031333, МКИ F 25 D 3/10, оп. 1995 г.).Also known is the analogue “Cryogenic storage for biological materials”, containing a cylindrical thermally insulated vessel and a chamber located inside the vessel, the cavity of which is isolated from the cavity of the vessel, a neck for loading and removing storage objects, characterized in that the entrance to the neck is located on the side surface of the vessel, has the shape of a body of revolution, and in the chamber there is a multi-section rotary device for placing storage objects (Patent for the invention of the Russian Federation No. 2031333, MKI F 25 D 3/10, op. 1995).

Недостатком двух вышеприведенных криогенных хранилищ является то, что они предназначены только для хранения биологических материалов в замороженном состоянии.The disadvantage of the above two cryogenic storage facilities is that they are intended only for storing biological materials in a frozen state.

Известно техническое решение, описанное в Интернете на сайте http://www.cryomedica.com (прототип): устройство для замораживания и хранения клеток ткани, содержащее два блока: блок замораживания и криохранилище, обеспечивающее хранение замороженных клеток ткани. Криохранилище содержит корпус, внутреннюю полость, горловину, соединяющую внутреннюю полость с окружающим устройство пространством. Блок замораживания также содержит корпус с теплоизоляцией и внутреннюю полость. Таким образом, устройство содержит две полости, в одной замораживают, а в другой хранят замороженные клетки ткани.A technical solution is known, described on the Internet at http://www.cryomedica.com (prototype): a device for freezing and storing tissue cells, containing two units: a freezing unit and a cryostorage, which provides storage of frozen tissue cells. The cryogenic storage contains a housing, an internal cavity, a neck connecting the internal cavity with the space surrounding the device. The freezing unit also contains a housing with thermal insulation and an internal cavity. Thus, the device contains two cavities, frozen in one and frozen tissue cells in the other.

В качестве блока для замораживания клеток ткани используют программный фризер “PLANER kryosave” компании Planer (Великобритания). Фризер соединен с компьютером, который контролирует процесс замораживания клеток до температуры -80°С. Прибор обеспечивает плавный поэтапный процесс замораживания, что защищает клетки от холодового повреждения.As a block for freezing tissue cells, a software freezer “PLANER kryosave” from Planer (Great Britain) is used. The freezer is connected to a computer that controls the process of freezing cells to a temperature of -80 ° C. The device provides a smooth phased freezing process that protects cells from cold damage.

Недостатками прототипа являются невозможность в одной внутренней полости осуществлять одновременно два процесса: процесс замораживания и процесс хранения пробирок с клетками ткани.The disadvantages of the prototype are the inability in one internal cavity to carry out two processes simultaneously: the freezing process and the process of storing test tubes with tissue cells.

Другим недостатком является невозможность замораживания различных пробирок с клетками ткани с различной скоростью в одной внутренней полости устройства.Another disadvantage is the impossibility of freezing various tubes with tissue cells at different speeds in the same internal cavity of the device.

Также недостатком является и то, что прототип не обеспечивает возможности хранения пробирок с клетками ткани при различной температуре в одной внутренней полости устройства.Also a disadvantage is that the prototype does not provide the ability to store tubes with tissue cells at different temperatures in one internal cavity of the device.

Раскрытие изобретенияDisclosure of invention

Задачей настоящего изобретения является создание устройства для замораживания и хранения клеток ткани, которое позволило бы одновременно проводить работы и опыты, связанные с замораживанием клеток ткани и хранением их при различных отрицательных температурах.The objective of the present invention is to provide a device for freezing and storing tissue cells, which would allow simultaneous work and experiments related to freezing tissue cells and storing them at various negative temperatures.

Поставленная задача и технические результаты (будут описаны ниже) достигаются тем, что устройство для замораживания и хранения клеток ткани, содержащее корпус, внутреннюю полость, горловину, соединяющую внутреннюю полость с окружающим устройство пространством, отличающееся тем, что часть внутренней полости устройства заполнена сжиженным газом и часть внутренней полости устройства заполнена газом или смесью газов, при этом во внутренней полости устройства расположены пробирки с клетками ткани и часть пробирок с клетками ткани расположена в сжиженном газе.The task and technical results (to be described below) are achieved in that a device for freezing and storing tissue cells, comprising a body, an internal cavity, a neck connecting the internal cavity with the space surrounding the device, characterized in that a part of the internal cavity of the device is filled with liquefied gas and part of the internal cavity of the device is filled with gas or a mixture of gases, while in the internal cavity of the device there are tubes with tissue cells and part of the tubes with tissue cells ene in LPG.

Заявленное устройство предназначено для замораживания (вплоть до криогенных температур) и хранения клеток ткани, в частности форменных элементов крови, клеток предшественников людей и животных в замороженном состоянии.The claimed device is intended for freezing (up to cryogenic temperatures) and storing tissue cells, in particular blood cells, human and animal precursor cells in a frozen state.

Техническими результатами изобретения являются:The technical results of the invention are:

обеспечение возможности в одной внутренней полости устройства осуществлять одновременно следующие процессы: процесс замораживания, процесс размораживания и процесс хранения пробирок с клетками ткани;providing the ability to simultaneously carry out the following processes in one internal cavity of the device: the freezing process, the defrosting process and the storage process of test tubes with tissue cells;

обеспечение возможности замораживания различных пробирок с клетками ткани с различной скоростью в одной внутренней полости устройства;the possibility of freezing various test tubes with tissue cells at different speeds in one internal cavity of the device;

обеспечение возможности хранения пробирок с клетками ткани при различной температуре в одной внутренней полости устройства.providing the ability to store tubes with tissue cells at different temperatures in one internal cavity of the device.

От прототипа устройство отличается тем, что часть внутренней полости устройства заполнена сжиженным газом и часть внутренней полости устройства заполнена газом или смесью газов, при этом во внутренней полости устройства расположены пробирки с клетками ткани и часть пробирок с клетками ткани расположена в сжиженном газе.The device differs from the prototype in that a part of the internal cavity of the device is filled with liquefied gas and a part of the internal cavity of the device is filled with gas or a mixture of gases, while tubes with tissue cells are located in the internal cavity of the device and part of the tubes with tissue cells are located in liquefied gas.

Конструктивно корпус состоит, по меньшей мере, из внешней и внутренней герметичных оболочек с вакуумной полостью между ними, по меньшей мере, частично заполненной теплоизоляционными материалами или экранно-вакуумной изоляцией. Оболочки могут быть выполнены из металла или пластмассы.Structurally, the housing consists of at least external and internal sealed shells with a vacuum cavity between them, at least partially filled with insulating materials or screen-vacuum insulation. The shells may be made of metal or plastic.

Объем части внутренней полости устройства для замораживания и хранения клеток ткани, заполненной сжиженным газом, составляет от 30 до 90% от величины объема внутренней полости устройства для замораживания и хранения клеток ткани.The volume of the part of the internal cavity of the device for freezing and storing tissue cells filled with liquefied gas is from 30 to 90% of the volume of the internal cavity of the device for freezing and storing tissue cells.

Диаметр проходного сечения горловины может составлять от 5 до 75% от максимального диаметра устройства. Собственно корпус устройства может выполняться по форме цилиндрическим, призматическим, из комбинации различных по форме фигур.The diameter of the passage through the neck can be from 5 to 75% of the maximum diameter of the device. The body of the device itself can be cylindrical, prismatic in shape, from a combination of shapes that are different in shape.

Устройство для замораживания и хранения клеток ткани может быть выполнено с объемом внутренней полости от 3 до 50 л. Объем всего устройства для замораживания и хранения клеток ткани может превышать внутренний объем в 1,01÷2 раза.A device for freezing and storing tissue cells can be performed with a volume of the internal cavity from 3 to 50 liters. The volume of the entire device for freezing and storing tissue cells can exceed the internal volume by 1.01 ÷ 2 times.

В качестве сжиженного газа используют жидкий азот с температурой кипения -195,8°С, температурой плавления -210°С. В общем случае могут использовать и другие сжиженные газы: гелий с температурой кипения -268,2°С, температурой плавления -272,2°С, воздух с температурой кипения -192°С, температурой плавления -213°С. Для непродолжительного хранения может использоваться аммиак.Liquid nitrogen is used as a liquefied gas with a boiling point of -195.8 ° C and a melting point of -210 ° C. In general, other liquefied gases can be used: helium with a boiling point of -268.2 ° C, a melting point of -272.2 ° C, air with a boiling point of -192 ° C, and a melting point of -213 ° C. For short storage, ammonia can be used.

В качестве газа используют газообразный азот. В качестве смеси газов используют, по меньшей мере, смесь азота с кислородом.Nitrogen gas is used as the gas. As a mixture of gases, at least a mixture of nitrogen with oxygen is used.

При полном первоначальном заполнении внутренней полости азотом и последующем его испарении при не плотно закрытой горловине (при зазоре в 5 - 10 мм) полость 3 будет полностью заполнена газообразным азотом.With the initial filling of the inner cavity with nitrogen and its subsequent evaporation with a not tightly closed neck (with a gap of 5-10 mm), the cavity 3 will be completely filled with gaseous nitrogen.

При открытой горловине полость 3 будет в основном заполнена смесью азота и кислорода.With the neck open, cavity 3 will be mostly filled with a mixture of nitrogen and oxygen.

Пробирки с клетками ткани закрыты крышками с уплотнительными кольцами. По меньшей мере, часть пробирок выполнена из пластмассы.Tubes with tissue cells are closed with caps with o-rings. At least a portion of the tubes is made of plastic.

По меньшей мере, часть пробирок имеет объем от 2,5 до 50 мл. Устройство содержит один или несколько штативов в виде криобоксов для размещения от 5 до 100 пробирок. Предпочтительно использовать штативы на 6 пробирок с клетками ткани, например, одного человека.At least a portion of the tubes has a volume of 2.5 to 50 ml. The device contains one or more racks in the form of cryoboxes for placement from 5 to 100 tubes. It is preferable to use racks of 6 tubes with tissue cells, for example, one person.

Устройство выполнено с возможностью введения штатива во внутреннюю полость или выведения штатива из внутренней полости. Штатив для размещения пробирок содержит устройство для введения штатива во внутреннюю полость устройства для замораживания и хранения клеток ткани и перемещения его через часть внутренней полости, заполненной газом или смесью газов в часть полости, заполненную сжиженным газом. Устройство для введения штатива может быть выполнено в виде стержня (обеспечивающего ручное введение штатива), закрепленного одним концом на корпусе штатива. Устройство для введения штатива может быть выполнено в виде более сложной конструкции, оно может содержать трос, на котором закреплен штатив, трос намотан на барабан, барабан соосно соединен с ротором электродвигателя (например, через редуктор). В зависимости от того, наматывается или сматывается трос с барабана штатив вводится во внутреннюю полость или выводится из внутренней полости.The device is configured to insert a tripod into the internal cavity or to remove the tripod from the internal cavity. The tube rack contains a device for introducing a tripod into the internal cavity of the device for freezing and storing tissue cells and moving it through a portion of the internal cavity filled with gas or a mixture of gases into a portion of the cavity filled with liquefied gas. The device for introducing the tripod can be made in the form of a rod (providing manual introduction of the tripod), fixed at one end to the tripod body. A device for introducing a tripod can be made in the form of a more complex structure, it can contain a cable on which a tripod is mounted, the cable is wound on a drum, the drum is coaxially connected to the rotor of the electric motor (for example, through a gearbox). Depending on whether the cable is wound or wound from the drum, the tripod is inserted into the internal cavity or is removed from the internal cavity.

Заявленное устройство имеет дополнительные преимущества над прототипом, а именно повышенная производительность устройства;The claimed device has additional advantages over the prototype, namely the increased performance of the device;

сокращение времени нахождения пробирок с клетками ткани вне устройства (устройств) для замораживания и хранения.reduction of the time spent by tubes with tissue cells outside the device (s) for freezing and storage.

Устройство позволит замораживать и хранить клетки ткани (жидкой или твердой), в частности эритроциты, лейкоциты, тромбоциты, стволовые клетки крови, как ядросодержащие так и неядросодержащих и многие другие клетки ткани. Дополнительно устройство позволит замораживать и хранить, например, жидкую часть крови - плазму.The device will allow freezing and storing tissue cells (liquid or solid), in particular red blood cells, white blood cells, platelets, blood stem cells, both nucleated and non-nucleated, and many other tissue cells. Additionally, the device will freeze and store, for example, the liquid part of the blood - plasma.

Как правило, в заявленном устройстве клетки ткани замораживают после центрифугирования. Клетки размещают в пробирке (пробирках) и смешивают с криопротектором. После чего пробирку с клетками ткани закрывают крышкой, размещают в штативе. Штатив помещают над горловиной устройства для замораживания и хранения клеток ткани в зоне с температурой на 5-10°С ниже температуры окружающего воздуха. Затем вводят во внутреннюю полость устройства со скоростью 3-30 мм/мин. Внутренняя полость может быть частично заполнена сжиженным газом. Причем чем ближе к жидкости находится штатив с пробиркой, тем ниже температура. При погружении штатива с пробиркой в сжиженный газ температура пробирки достигает температуры хранения. Описанный процесс может продолжаться как угодно долго - до момента заполнения внутренней полости устройства штативами с пробирками. Сжиженный газ при открытой горловине будет испаряться, поэтому его необходимо периодически доливать.Typically, in the claimed device, tissue cells are frozen after centrifugation. Cells are placed in a test tube (s) and mixed with a cryoprotectant. Then the test tube with tissue cells is closed with a lid, placed in a tripod. A tripod is placed over the neck of the device for freezing and storing tissue cells in an area with a temperature of 5-10 ° C below ambient temperature. Then introduced into the internal cavity of the device at a speed of 3-30 mm / min The internal cavity may be partially filled with liquefied gas. Moreover, the closer to the liquid the tripod with the test tube is, the lower the temperature. When a tripod with a tube is immersed in liquefied gas, the temperature of the tube reaches the storage temperature. The described process can continue as long as desired - until the internal cavity of the device is filled with test tube racks. Liquefied gas with an open neck will evaporate, so it must be periodically replenished.

В прототипе производительность ограничивалась в основном работой программного фризера. В заявке устройство для замораживания и хранения совмещены.In the prototype, performance was limited mainly by the operation of the software freezer. In the application, the device for freezing and storage is combined.

Во внутренней полости заявленного устройства могут осуществляться одновременно следующие процессы: процесс замораживания, процесс размораживания и процесс хранения пробирок с клетками ткани, причем обеспечивается возможность замораживания (размораживания) различных пробирок с клетками ткани с различной скоростью в одной внутренней полости устройства. Кроме того, обеспечивается возможность хранения пробирок с клетками ткани при различной температуре в одной внутренней полости устройства. Это свойство позволяет работать с различными типами тканей одновременно (например, с клетками крови и клетками костной ткани).The following processes can be carried out simultaneously in the internal cavity of the claimed device: the freezing process, the defrosting process and the storage process of test tubes with tissue cells, and it is possible to freeze (thaw) various test tubes with tissue cells at different speeds in the same internal cavity of the device. In addition, it is possible to store tubes with tissue cells at different temperatures in the same internal cavity of the device. This property allows you to work with different types of tissues at the same time (for example, with blood cells and bone cells).

Разница в температурах пробирок может составлять от нескольких градусов до нескольких десятков градусов, например разница в температурах может составлять от 2°С до 150°С. Замораживание пробирок с клетками ткани с различной скоростью достигается за счет того, что штативы с пробирками вводят во внутреннюю полость устройства с различной скоростью.The difference in temperature of the tubes can be from several degrees to several tens of degrees, for example, the difference in temperature can be from 2 ° C to 150 ° C. The freezing of test tubes with tissue cells at different speeds is achieved due to the fact that the test tube racks are introduced into the internal cavity of the device at different speeds.

Краткое описание чертежейBrief Description of the Drawings

На фиг.1 представлена схема устройства для замораживания и хранения клеток ткани. На фиг.2 изображены температурные поля во внутренней полости и над горловиной устройства.Figure 1 presents a diagram of a device for freezing and storing tissue cells. Figure 2 shows the temperature field in the inner cavity and over the neck of the device.

Осуществление изобретенияThe implementation of the invention

Осуществление изобретения с реализацией указанного назначения будет показано на работе устройства при замораживании и хранении клеток ткани (например, крови) человека.The implementation of the invention with the implementation of this purpose will be shown on the operation of the device during freezing and storage of tissue cells (eg, blood) of a person.

Устройство для замораживания и хранения клеток ткани содержит корпус 1 с теплоизоляцией 2, внутреннюю полость 3, горловину 4, часть 5 внутренней полости устройства заполнена сжиженным газом и часть 6 внутренней полости устройства заполнена газом или смесью газов. Во внутренней полости устройства расположены пробирки 7-10. Пробирки 9 и 10 с клетками ткани расположены во внутренней полости в сжиженном газе, а пробирки 7 и 8 с клетками ткани расположены во внутренней полости в смеси газов.A device for freezing and storing tissue cells contains a housing 1 with thermal insulation 2, an internal cavity 3, a neck 4, part 5 of the internal cavity of the device is filled with liquefied gas, and part 6 of the internal cavity of the device is filled with a gas or gas mixture. Tubes 7-10 are located in the internal cavity of the device. Tubes 9 and 10 with tissue cells are located in the internal cavity in the liquefied gas, and tubes 7 and 8 with tissue cells are located in the internal cavity in the gas mixture.

Пробирки расположены в штативах 11, 12 и 13.The tubes are located in tripods 11, 12 and 13.

Объем части 5 внутренней полости, заполненной сжиженным газом, составляет 30% от величины объема внутренней полости 3 устройства для замораживания и хранения клеток ткани.The volume of part 5 of the inner cavity filled with liquefied gas is 30% of the volume of the inner cavity 3 of the device for freezing and storing tissue cells.

Диаметр проходного сечения горловины составляет 70% от максимального диаметра устройства. Собственно корпус устройства выполнен цилиндрическим по форме. Конструктивно корпус состоит из внешней 33 и внутренней 32 герметичных оболочек с вакуумной полостью между ними, заполненной теплоизоляционными материалами 2 или экранно-вакуумной изоляцией.The diameter of the orifice of the neck is 70% of the maximum diameter of the device. Actually, the housing of the device is cylindrical in shape. Structurally, the housing consists of an external 33 and an internal 32 airtight shells with a vacuum cavity between them, filled with heat-insulating materials 2 or screen-vacuum insulation.

Устройство содержит прибор 14 для контроля количества сжиженного газа во внутренней полости. В качестве сжиженного газа используют жидкий азот.The device comprises a device 14 for monitoring the amount of liquefied gas in the internal cavity. As liquefied gas, liquid nitrogen is used.

Пробирки 15 и 16 (на фиг.1 выносное сечение I) с клетками ткани 17 закрыты крышками 18 и 19 с уплотнительными кольцами 20.Tubes 15 and 16 (Fig. 1 is a cross-sectional view I) with tissue cells 17 closed by caps 18 and 19 with o-rings 20.

Пробирки выполнены из пластмассы. Пробирки имеет объем 2,5 мл.Test tubes are made of plastic. The tube has a volume of 2.5 ml.

Штативы 11-13 для размещения пробирок выполнены в виде криобоксов на шесть пробирок. Штативы посредством тросов (например, штатив 11 посредством троса 29, штатив 28 посредством троса 31) соединены с барабаном, например барабаном 30 устройства для введения штатива во внутреннюю полость. В зависимости от того, накручивается трос или скручивается, штатив будет подниматься или опускаться.Racks 11-13 for placement of test tubes are made in the form of cryoboxes on six test tubes. Tripods by means of cables (for example, a tripod 11 by means of a cable 29, a tripod 28 by means of a cable 31) are connected to a drum, for example, a drum 30 of a device for introducing a tripod into the internal cavity. Depending on whether the cable is twisted or twisted, the tripod will rise or fall.

При закрытой горловине устройства в качестве газа во внутренней полости находится азот. При открытой горловине в качестве смеси газов во внутренней полости находится в основном смесь азота с кислородом (имеется незначительное количество примесей других газов). Устройство для замораживания и хранения клеток ткани выполнено с объемом внутренней полости, равным 50 л. В целом объем устройства с теплоизоляцией составит 100 л.With the mouth of the device closed, nitrogen is in the internal cavity. With an open neck, as a mixture of gases in the inner cavity is mainly a mixture of nitrogen with oxygen (there is a small amount of impurities of other gases). A device for freezing and storing tissue cells is made with an internal cavity volume of 50 l. In general, the volume of the device with thermal insulation will be 100 liters.

На фиг.2 изображены изотермы (температурные зоны) над горловиной и во внутренней полости устройства для замораживания и хранения клеток ткани. Изотерма 21 располагается на границе жидкости и газа и характеризуется температурой сжиженного газа: азота (-195,8°С). Изотерма 22 характеризуется температурой -190°С. Изотерма 23 характеризуется температурой -150°С. Изотерма 24 характеризуется температурой -90°С. Изотерма 25 характеризуется температурой -30°С. Изотерма 26 характеризуется температурой -10°С. Изотерма 27 характеризуется температурой окружающего воздуха +20°С. Штатив 28 расположен в области с температурой ниже -150°С. Общее понижение температуры в области 3 может быть достигнуто перекрытием (частичным или полным) горловины с помощью крышки (на чертежах на показана).Figure 2 shows isotherms (temperature zones) above the neck and in the internal cavity of the device for freezing and storing tissue cells. Isotherm 21 is located at the interface between liquid and gas and is characterized by the temperature of a liquefied gas: nitrogen (-195.8 ° C). Isotherm 22 is characterized by a temperature of -190 ° C. Isotherm 23 is characterized by a temperature of -150 ° C. Isotherm 24 is characterized by a temperature of -90 ° C. Isotherm 25 is characterized by a temperature of -30 ° C. Isotherm 26 is characterized by a temperature of -10 ° C. Isotherm 27 is characterized by an ambient temperature of + 20 ° C. Tripod 28 is located in an area with a temperature below -150 ° C. A general decrease in temperature in region 3 can be achieved by overlapping (partially or completely) the neck with a cover (shown in the drawings).

Работает устройство следующим образом.The device operates as follows.

1. Пробирки с клетками ткани размещают в штативе. Штатив, например, 11 при помощи троса 29 вводят во внутреннюю полость устройства для замораживания и хранения клеток ткани. Штатив проходит область 3, где его (и пробирок, размещенных в нем) температура снижается до температуры -90°С. При погружении в жидкий азот температура клеток ткани достигает величины -195.8°С. Эта температура является предпочтительной температурой для хранения различных типов клеток крови, например стволовых клеток крови.1. Tubes with tissue cells are placed in a tripod. A tripod, for example, 11 is inserted with a cable 29 into the internal cavity of the device for freezing and storing tissue cells. The tripod passes through region 3, where its temperature (and the tubes placed in it) drops to a temperature of -90 ° C. When immersed in liquid nitrogen, the temperature of tissue cells reaches -195.8 ° C. This temperature is the preferred temperature for storing various types of blood cells, for example, blood stem cells.

2. В процессе хранения клеток они подвергаются тестированию на наличие следующих агентов: Анти-HIV-l и -2, HIV-1Ag, Анти-HTLV-l и -II, Анти-HbcorAg, HBs-Ag, Анти-HCV. Тестирование происходит в стандартной медицинской лаборатории.2. During the storage of cells, they are tested for the presence of the following agents: Anti-HIV-l and -2, HIV-1Ag, Anti-HTLV-l and -II, Anti-HbcorAg, HBs-Ag, Anti-HCV. Testing takes place in a standard medical laboratory.

Перед тестированием клетки нагревают до температуры (-5)÷(+25)°С. Нагрев осуществляют путем постепенного выведения штатива с пробирками из внутренней полости устройства.Before testing, the cells are heated to a temperature of (-5) ÷ (+25) ° C. Heating is carried out by gradually removing the tripod with tubes from the internal cavity of the device.

3. Устройство для замораживания и хранения клеток ткани содержит устройство 14 для контроля количества сжиженного газа в устройстве. Устройство контроля содержит индикатор уровня жидкости.3. A device for freezing and storing tissue cells contains a device 14 for controlling the amount of liquefied gas in the device. The control device contains a liquid level indicator.

4. Ввод штатива во внутреннюю полость устройства осуществляют, например, со средней скоростью 20 мм/мин.4. The tripod is introduced into the internal cavity of the device, for example, at an average speed of 20 mm / min.

5. Вывод штатива из внутренней полости устройства осуществляют, например, со средней скоростью 15 мм/мин.5. The output of the tripod from the internal cavity of the device is carried out, for example, with an average speed of 15 mm / min

При расстоянии от среза горловины до жидкости, равном 1000 мм, время замораживания (размораживания) составит 50 минут.When the distance from the neck section to the liquid is 1000 mm, the time of freezing (thawing) will be 50 minutes.

6. Скорость замораживания (размораживания) целесообразно поддерживать на уровне 3-5 градусов в минуту. Процесс замораживания и процесс размораживания различных пробирок с клетками ткани в заявленном устройстве может проходить одновременно. Например, штатив 13 вводится во внутреннюю полость со скоростью 20 мм/мин, а штатив 12 выводится из внутренней полости со скоростью 15 мм/мин.6. The speed of freezing (thawing) is advisable to maintain at 3-5 degrees per minute. The process of freezing and thawing of various test tubes with tissue cells in the claimed device can take place simultaneously. For example, a tripod 13 is inserted into the internal cavity at a speed of 20 mm / min, and a tripod 12 is withdrawn from the internal cavity at a speed of 15 mm / min.

Таким образом, повышение производительности устройства, а также сокращение времени нахождения пробирок вне устройства достигается за счет того, что во внутренней полости устройства одновременно может осуществляться замораживание, размораживание и хранение в замороженном состоянии различных пробирок с клетками ткани.Thus, increasing the productivity of the device, as well as reducing the time spent by the test tubes outside the device, is achieved due to the fact that various tubes with tissue cells can be frozen, thawed, and frozen in the internal cavity of the device.

Замораживание пробирок с клетками ткани с различной скоростью в одном устройстве достигается за счет того, что штативы с пробирками вводят во внутреннюю полость устройства с различной скоростью.The freezing of test tubes with tissue cells at different speeds in one device is achieved due to the fact that the test tube racks are introduced into the internal cavity of the device at different speeds.

Размораживание пробирок с клетками ткани с различной скоростью в одном устройстве достигается за счет того, что штативы с пробирками выводят из внутренней полости устройства с различной скоростью. Хранение пробирок при различной температуре достигается тем, что пробирки хранятся в различных температурных зонах (ограниченных изобарами, изображенными на фиг.2).Thawing of test tubes with tissue cells at different speeds in one device is achieved due to the fact that the test tube racks are removed from the internal cavity of the device at different speeds. Storage of the tubes at different temperatures is achieved by the fact that the tubes are stored in different temperature zones (limited by the isobars shown in figure 2).

Claims (18)

1. Устройство для замораживания и хранения клеток ткани, содержащее корпус, внутреннюю полость, горловину, соединяющую внутреннюю полость с окружающим устройство пространством, отличающееся тем, что часть внутренней полости устройства заполнена сжиженным газом и часть внутренней полости устройства заполнена газом или смесью газов, при этом во внутренней полости устройства расположены пробирки с клетками ткани и часть пробирок с клетками ткани расположена в сжиженном газе.1. Device for freezing and storing tissue cells, comprising a housing, an internal cavity, a neck connecting the internal cavity with the surrounding device space, characterized in that part of the internal cavity of the device is filled with liquefied gas and part of the internal cavity of the device is filled with a gas or gas mixture, in the internal cavity of the device are tubes with tissue cells and part of the tubes with tissue cells are located in a liquefied gas. 2. Устройство по п.1, отличающееся тем, что объем части внутренней полости, заполненной сжиженным газом, составляет 30-90% от величины объема внутренней полости устройства для замораживания и хранения клеток ткани.2. The device according to claim 1, characterized in that the volume of the part of the internal cavity filled with liquefied gas is 30-90% of the volume of the internal cavity of the device for freezing and storing tissue cells. 3. Устройство по п.1, отличающееся тем, что содержит прибор для контроля количества сжиженного газа во внутренней полости.3. The device according to claim 1, characterized in that it contains a device for controlling the amount of liquefied gas in the internal cavity. 4. Устройство по п.1, отличающееся тем, что в качестве сжиженного газа используют жидкий азот.4. The device according to claim 1, characterized in that liquid nitrogen is used as the liquefied gas. 5. Устройство по п.1, отличающееся тем, что пробирки с клетками ткани закрыты крышками с уплотнительными кольцами.5. The device according to claim 1, characterized in that the tubes with tissue cells are closed with caps with o-rings. 6. Устройство по п.1, отличающееся тем, что, по меньшей мере, часть пробирок выполнена из пластмассы.6. The device according to claim 1, characterized in that at least part of the tubes are made of plastic. 7. Устройство по п.1, отличающееся тем, что, по меньшей мере, одна пробирка имеет объем 2,5-50 мл.7. The device according to claim 1, characterized in that at least one tube has a volume of 2.5-50 ml. 8. Устройство по п.1, отличающееся тем, что содержит один или несколько штативов для размещения пробирок.8. The device according to claim 1, characterized in that it contains one or more racks for placing test tubes. 9. Устройство по п.8, отличающееся тем, что выполнено с возможностью введения штатива во внутреннюю полость или выведения штатива из внутренней полости, при этом штатив для размещения пробирок содержит устройство для введения штатива во внутреннюю полость устройства для замораживания и хранения клеток ткани и перемещения его через часть внутренней полости, заполненной газом или смесью газов, в часть полости, заполненную сжиженным газом.9. The device according to claim 8, characterized in that it is made with the possibility of introducing a tripod into the inner cavity or removing the tripod from the inner cavity, while the rack for placing test tubes contains a device for introducing the tripod into the inner cavity of the device for freezing and storing tissue cells and moving it through a part of the internal cavity filled with gas or a mixture of gases into a part of the cavity filled with liquefied gas. 10. Устройство по п.8, отличающееся тем, что штативы для размещения пробирок выполнены в виде криобоксов от 5 до 100 пробирок.10. The device according to claim 8, characterized in that the racks for placing the tubes are made in the form of cryoboxes from 5 to 100 tubes. 11. Устройство по п.1, отличающееся тем, что в качестве газа используют азот.11. The device according to claim 1, characterized in that the gas used is nitrogen. 12. Устройство по п.1, отличающееся тем, что в качестве смеси газов используют, по меньшей мере, смесь азота с кислородом.12. The device according to claim 1, characterized in that at least a mixture of nitrogen with oxygen is used as a mixture of gases. 13. Устройство по п.1, отличающееся тем, что внутренняя полость выполнена с объемом 3-50 л.13. The device according to claim 1, characterized in that the internal cavity is made with a volume of 3-50 liters. 14. Устройство по п.1, отличающееся тем, что объем устройства для замораживания и хранения клеток ткани в 1,01 - 2 раза превышает объем внутренней полости устройства.14. The device according to claim 1, characterized in that the volume of the device for freezing and storing tissue cells is 1.01 to 2 times the volume of the internal cavity of the device. 15. Устройство по п.1, отличающееся тем, что корпус содержит теплоизоляцию и состоит, по меньшей мере, из внешней и внутренней оболочек с вакуумной полостью между ними.15. The device according to claim 1, characterized in that the housing contains thermal insulation and consists of at least an outer and inner shell with a vacuum cavity between them. 16. Устройство по п.15, отличающееся тем, что вакуумная полость заполнена теплоизоляционными материалами.16. The device according to p. 15, characterized in that the vacuum cavity is filled with heat-insulating materials. 17. Устройство по п.15, отличающееся тем, что вакуумная полость заполнена экранно-вакуумной изоляцией.17. The device according to p. 15, characterized in that the vacuum cavity is filled with screen-vacuum insulation. 18. Устройство по п.15, отличающееся тем, что вакуумная полость выполнена герметичной.18. The device according to clause 15, wherein the vacuum cavity is sealed.
RU2004113134/12A 2004-04-29 2004-04-29 Device for freezing and storing cells RU2255272C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2004113134/12A RU2255272C1 (en) 2004-04-29 2004-04-29 Device for freezing and storing cells

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2004113134/12A RU2255272C1 (en) 2004-04-29 2004-04-29 Device for freezing and storing cells

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2255272C1 true RU2255272C1 (en) 2005-06-27

Family

ID=35836718

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2004113134/12A RU2255272C1 (en) 2004-04-29 2004-04-29 Device for freezing and storing cells

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2255272C1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2544623C2 (en) * 2009-11-23 2015-03-20 Л'Эр Ликид Сосьете Аноним Пур Л'Этюд Э Л'Эксплуатасьон Де Проседе Жорж Клод Bath for liquid nitrogen circulation and method of freezing of products therein
RU225027U1 (en) * 2023-03-01 2024-04-12 Леонид Юрьевич Прохоров DEVICE FOR PRE-FREEZING A SUSPENSION OF HUMAN AND ANIMAL CELLS BEFORE PLACING THEM INTO A CRYOBANK

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Устройство для замораживания и хранения клеток ткани. Перечень данных. [он-лайн] CRIOMEDICA (Криомедика) 2002. Найдено 2004-09-09 в Интернет: <htt//www.cryomedica. com/processing.shtml.>. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2544623C2 (en) * 2009-11-23 2015-03-20 Л'Эр Ликид Сосьете Аноним Пур Л'Этюд Э Л'Эксплуатасьон Де Проседе Жорж Клод Bath for liquid nitrogen circulation and method of freezing of products therein
RU225027U1 (en) * 2023-03-01 2024-04-12 Леонид Юрьевич Прохоров DEVICE FOR PRE-FREEZING A SUSPENSION OF HUMAN AND ANIMAL CELLS BEFORE PLACING THEM INTO A CRYOBANK

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4916922A (en) Rapid freezing apparatus
ES2748911T3 (en) Lyophilization method
WO2019218997A1 (en) Method and device for filling dry dewar tank
JP2006038220A (en) Cryogenic dewar bottle
BRPI0713683A2 (en) systems and methods for cell cryopreservation
CA2595198C (en) Cryogenic biological preservation unit
RU2255272C1 (en) Device for freezing and storing cells
RU48425U1 (en) DEVICE FOR FREEZING AND STORING LIQUID TISSUE CELLS
RU48424U1 (en) DEVICE FOR FREEZING AND STORING TISSUE CELLS
CN109720737A (en) Low temperature shift retainer and workbench
JP6667903B2 (en) Hollow fiber cryopreservation tool and cell cryopreservation method
CN208248942U (en) A kind of portable minisize Semiconductors At Low Temperatures sample collection transport apparatus
CN217497115U (en) Tissue sample transfer container
KR100850168B1 (en) Cryogenic storage vessel
US20110086417A1 (en) Apparatus and Method for Using a Brine Solution to Freeze Biopsy Material
EP3467408B1 (en) Method for operating a low-temperature storage plant with a nitrogen withdrawal apparatus in a building
CN113446773A (en) Temperature balance sample storage tank for biological experiments
CN216088520U (en) Self-exhausting specimen freezing tube
CN213036385U (en) Sample strorage device is used to oncology
CN109717183A (en) A kind of severed finger storage box
CN208544577U (en) A kind of tissue specimen low-temp storage box
CN216685677U (en) Sample transfer device
Vanapalli et al. A tissue snap-freezing apparatus without sacrificial cryogens
JPH0160441B2 (en)
CN213535607U (en) Low-temperature sample rack for submission

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20060430

MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20090430

NF4A Reinstatement of patent

Effective date: 20120310

MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20140430