RU2247776C2 - Method for activating enzymes in slaughtering animal tissues - Google Patents

Abstract

FIELD: biotechnology, biochemistry, enzymes.

SUBSTANCE: invention relates to a method for activation of pancreas proteolytic enzymes from slaughtering animals. Proposed method provides elevating the enzymatic activity of pancreas proteolytic enzymes, reducing time and enhancing the effectiveness of activation process. Invention can be used in preparing protein hydrolyzates in meat processing.

EFFECT: improved method for activation.

Description

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способам активации ферментов в тканях убойных животных, и может быть использовано для получения белковых гидролизатов и пептона.The invention relates to biotechnology, and in particular to methods of activating enzymes in the tissues of slaughtered animals, and can be used to obtain protein hydrolysates and peptone.

Известно, что практически все сельскохозяйственные животные содержат многочисленное число разнообразных ферментов, многие из которых выделены в чистом виде и нашли себе применение в различных отраслях хозяйства страны, например пепсин, трипсин, α-химотрипсин, карбоксипептидаза, лейцинаминопептидаза и др. Наиболее широко используется в пищевой и медицинской практике панкреатин, представляющий из себя смесь трипсина, химотрипсина и карбоксипептидазы, обладающий широкой субстрактной специфичностью и способный гидролизовать многие пептидные связи в белках, превращая последние в смесь аминокислот и пептидов (см. М.Диксон, Э.Уэбб “Ферменты”. - М.: Мир, 1982, т.3, стр. 1132 - аналог).It is known that almost all farm animals contain a large number of various enzymes, many of which are isolated in their pure form and have found application in various sectors of the country's economy, for example, pepsin, trypsin, α-chymotrypsin, carboxypeptidase, leucine aminopeptidase, etc. The most widely used in food and medical practice, pancreatin, which is a mixture of trypsin, chymotrypsin and carboxypeptidase, has a broad extract specificity and is able to hydrolyze many peptides hydrate bonds in proteins, converting the latter into a mixture of amino acids and peptides (see M. Dixon, E. Webb “Enzymes.” - M .: Mir, 1982, vol. 3, p. 1132 - analogue).

Однако выделение этих ферментов из природных источников связано со многими трудностями, что в ряде случаев приводит к существенному увеличению их стоимости, а иногда к потере активности за счет утраты кофакторов, ионов переходных металлов и других химических соединений, необходимых для проявления их биокаталитической активности.However, the isolation of these enzymes from natural sources is associated with many difficulties, which in some cases leads to a significant increase in their cost, and sometimes to a loss of activity due to the loss of cofactors, transition metal ions, and other chemical compounds necessary for the manifestation of their biocatalytic activity.

Известен наиболее близкий способ активации ферментов, в соответствии с которым животную ткань, содержащую ферменты, а именно поджелудочную железу убойных животных, подвергают несколько раз дефростированию и замораживанию, после чего измельчают на волчке и смешивают с водой в соотношении 1:5, к полученной смеси добавляют 0,5% этилового спирта в качестве консерванта и затем всю реакционную массу нагревают в течение нескольких часов до достижения максимальной ферментативной активности (см. патент РФ №2112801, кл. С 12 N 9/64, 9/00, 1998 - аналог).The closest method for activating enzymes is known, according to which animal tissue containing enzymes, namely the pancreas of slaughtered animals, is subjected to defrosting and freezing several times, then it is ground on a top and mixed with water in a ratio of 1: 5, and the resulting mixture is added 0.5% ethyl alcohol as a preservative and then the whole reaction mass is heated for several hours until the maximum enzymatic activity is achieved (see RF patent No. 2112801, class 12 N 9/64, 9/00, 1998 - analogue).

Недостатком приведенного способа является длительность процесса активации (многократное замораживание и оттаивание животной ткани требует длительного времени, не менее 2-3 часов), использование антисептика и относительно низкая ферментативная активность получаемого экстракта (не выше 9000 ПЕ/г).The disadvantage of this method is the duration of the activation process (repeated freezing and thawing of animal tissue requires a long time, at least 2-3 hours), the use of an antiseptic and the relatively low enzymatic activity of the obtained extract (not higher than 9000 PE / g).

Целью изобретения является увеличение ферментативной активности ферментов, уменьшение времени и увеличение производительности активации.The aim of the invention is to increase the enzymatic activity of enzymes, reduce time and increase productivity of activation.

Указанная цель достигается тем, что в способе активации ферментов в тканях убойных животных, включающем измельчение, тканей, содержащих ферменты, ткань измельчают на волчке, затем направляют в куттер, куда добавляют твердый хладогент, например лед, куттеруют до получения однородной эмульсии, к которой добавляют раствор соли, например 2-3% водный раствор хлорида натрия, после чего нагревают до температуры 45-55°С с выдержкой, достаточной для достижения удельной активности в пределах 9000-11000 ПЕ/г; в качестве раствора соли используют 1-2% водный раствор хлорида калия; в качестве раствора соли используют 1-5% водный раствор кальция; твердый хладоагент, например лед, добавляют в соотношении, например, 3:1 от массы ткани, содержащей ферменты.This goal is achieved by the fact that in the method of activating enzymes in the tissues of slaughtered animals, including grinding, tissues containing enzymes, the tissue is ground in a spinning top, then sent to the cutter, where solid refrigerant, for example ice, is added, cutted until a homogeneous emulsion is added to which salt solution, for example a 2-3% aqueous solution of sodium chloride, after which it is heated to a temperature of 45-55 ° C with an exposure sufficient to achieve a specific activity in the range of 9000-11000 PE / g; as a salt solution using a 1-2% aqueous solution of potassium chloride; as a salt solution using a 1-5% aqueous solution of calcium; a solid refrigerant, such as ice, is added in a ratio of, for example, 3: 1 by weight of tissue containing enzymes.

Способ осуществляют следующим образом.The method is as follows.

10 кг тканей убойных животных, например поджелудочной железы, измельчают на волчке и направляют в куттер, куда добавляют 30 кг льда и куттеруют в зависимости от производительности куттера 30-60 минут, поддерживая температуру реакционной массы в интервале 2-5°С до получения однородной эмульсии, после чего к эмульсии добавляют 1,0 л 2-3% водного раствора хлорида натрия, охлажденного до 2-5°С, куттерование продолжают еще 20-30 минут, после чего температуру реакционной смеси поднимают в течение 2-3 часов до 45-55°С до достижения максимальной ферментативной активности, определенной, например, по модифицированному методу Ансона или по гидролизу гемоглобина, которая составляет в зависимости от вида животного (свиньи или крупный рогатый скот) от 9000 до 11000 ПЕ/г.10 kg of tissues of slaughtered animals, for example, the pancreas, are crushed on a top and sent to a cutter, where 30 kg of ice is added and cutted depending on the performance of the cutter for 30-60 minutes, maintaining the temperature of the reaction mass in the range of 2-5 ° C until a homogeneous emulsion is obtained after which 1.0 l of a 2-3% aqueous solution of sodium chloride cooled to 2-5 ° C is added to the emulsion, the cutter is continued for another 20-30 minutes, after which the temperature of the reaction mixture is raised within 2-3 hours to 45- 55 ° C until maximum enzymatic ktivnosti determined, for example, by the modified method of Anson hemoglobin or hydrolysis, which is depending on the animal species (pig or cattle) of 9,000 to 11,000 PU / g.

Технико-экономические преимущества заявленного решения по сравнению с известными заключаются в увеличении производительности технологических процессов обработки мясного сырья, используя не высокоочищенные ферментные препараты, а любые клетки из животных тканей, содержащие эти ферменты. При этом снижается стоимость получения самих ферментов.The technical and economic advantages of the claimed solution compared to the known ones are to increase the productivity of technological processes for processing meat raw materials using not highly purified enzyme preparations, but any cells from animal tissues containing these enzymes. This reduces the cost of obtaining the enzymes themselves.

Claims (1)

Способ активации комплекса протеолитических ферментов поджелудочной железы убойных животных, включающий измельчение поджелудочной железы, отличающийся тем, что поджелудочную железу измельчают на волчке, затем направляют в куттер, куда добавляют твердый хладагент в соотношении 3:1 к массе поджелудочной железы, куттеруют до получения однородной эмульсии, к которой добавляют или 2-3%-ный водный раствор хлорида натрия, или 1-2%-ный водный раствор хлорида калия, или 1-5%-ный водный раствор хлорида кальция, после чего нагревают до температуры 45-55°С с выдержкой, достаточной для достижения удельной активности в пределах 9000-11000 ПЕ/г.The method of activating a complex of proteolytic pancreatic enzymes of slaughter animals, including grinding the pancreas, characterized in that the pancreas is crushed on a top, then sent to the cutter, where solid refrigerant is added in a ratio of 3: 1 to the mass of the pancreas, cutted until a homogeneous emulsion is obtained, to which is added either a 2-3% aqueous solution of sodium chloride, or a 1-2% aqueous solution of potassium chloride, or a 1-5% aqueous solution of calcium chloride, after which it is heated to a temperature of 45-55 ° C. with an exposure sufficient to achieve specific activity in the range of 9000-11000 PE / g