RU2245142C1 - Иммуномодулятор - Google Patents
Иммуномодулятор Download PDFInfo
- Publication number
- RU2245142C1 RU2245142C1 RU2003121689/15A RU2003121689A RU2245142C1 RU 2245142 C1 RU2245142 C1 RU 2245142C1 RU 2003121689/15 A RU2003121689/15 A RU 2003121689/15A RU 2003121689 A RU2003121689 A RU 2003121689A RU 2245142 C1 RU2245142 C1 RU 2245142C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- compound
- properties
- ammonium salt
- cells
- hydroxyethyl
- Prior art date
Links
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Предложено применение трис-(2-оксиэтил) аммониевой соли 2,4-дихлор феноксиуксусной кислоты в качестве иммуномодулятора. Вновь выявленные свойства позволяют создавать на ее основе лекарственные средства для лечения воспалительных, аутоиммунных и лимфопролиферативных заболеваний. Изобретение расширяет арсенал средств указанного назначения. 4 табл.
Description
Изобретение относится к новым биологически активным веществам из класса алкан-карбоновых кислот и может быть использовано в медицине и биологии в качестве основы для создания лекарственных препаратов.
Известен ряд препаратов, модулирующих иммунные реакции. К иммуномодуляторам относятся вещества, специфически воздействующие на клеточную и гуморальную систему иммунитета, избирательно подавляя или стимулируя иммунный ответ.
Гетероциклический иммуномодулятор левамизол (М.Д.Машковский, Лекарственные средства, М., Медицина, 1986, т.2, стр.169-170) может выполнять функции иммуномодулятора, способного усилить слабую реакцию клеточного иммунитета, ослабить сильную и не действовать на нормальную. Левамизол проявляет дозозависимое воздействие на иммунитет и применять его, например, в качестве иммуностимулятора нужно с осторожностью, так как при превышении доз возможно не иммуностимулирующее, а иммунодепрессивное действие, причем в некоторых случаях от малых доз левамизола. Применение левамизола может вызвать различные побочные явления. Клинические испытания показали, что у 30-40% больных, получающих левамизол, зарегистрированы разнообразные осложнения: головная боль, нарушение сна, аллергические реакции, агранулоцитоз, лейкопения. Современные знания о патогенезе многих заболеваний, связанных с нарушением межклональных взаимоотношений за счет расстройства Th1/Th2 регуляторных влияний и баланса соответствующих цитокинов, выдвигают требования к поиску новых иммуноактивных препаратов. В связи этим представляют интерес препараты, проявляющие при первичном скрининге in vivo на иктактных животных разнонаправленное влияние на интегральные показатели - антителообразование и ГЗТ, оказывающие влияние либо только на гуморальный, либо только на клеточный иммунитет и не оказывающие токсического воздействия на организм. С целью расширения арсенала синтетических средств, обладающих иммуномодулирующими свойствами, предлагается использовать трис-(2-оксиэтил) аммониевую соль 2,4-дихлор-феноксиуксусной кислоты в качестве иммуномодулятора. Трис-(2-оксиэтил) аммониевая соль 2,4-дихлор-феноксиуксусной кислоты обладает антиоксидантными свойствами (“Клиническая эффективность и безопасность цефалоспориновых антибиотиков производства ООО “АБОЛмед” сб. трудов НИИКИ, АГМУ и МКБ, Новосибирск, 2002, стр.179).
Сущность изобретения заключается в том, что были исследованы иммуномодулирующие свойства трис-(2-оксиэтил) аммониевой соли 2,4-дихлор-феноксиуксусной кислоты по способности данного соединения влиять на количество ядросодержащих клеток крови у мышей (миелоактивные свойства), на количество IgM антителообразующих клеток in vivo (первичный гуморальный ответ), реакцию гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) - (клеточный иммунитет), на спонтанную и митоген-стимулированную пролиферацию спленоцитов у мышей in vitro (антипролиферативные свойства).
В работе использовали здоровых половозрелых животных - мышей гибридов (CBAxC57BL16)F1 (CBF1) обоего пола, 8-10 недельного возраста, массой тела 18-20 г. Разброс в группах по исходной массе тела не превышал ±10%. Контрольные и опытные животные одного возраста и получены одновременно из одного питомника ("Рассвет", г. Томск). До и в период эксперимента контрольные и опытные животные содержались в виварии в одинаковых условиях: стандартных пластиковых клетках с мелкой древесной стружкой (не более 10 особей) на стандартном рационе. Все исследования проводились в одно и то же время суток (утром). Данные обрабатывались по непараметрическому критерию U Вилкоксона-Манна-Уитни.
Пример 1. Оценка миелоактивных свойств соединения.
Опытной группе животных соединение вводили в дозе 1/10 LD50 внутрибрюшинно в объеме 0,5 мл ежедневно в течение 7 дней, через 24 часа после последнего введения определяли количество ядросодержащих клеток в периферической крови. Контрольным животным в таком же объеме и режиме вводили растворитель (воду). Критерием оценки миелоактивных свойств является изменение в лейкоцитарной формуле ±20%. Результаты выражали в количестве лейкоцитов в одном мл крови и в процентах к соответствующему контролю.
Таблица 1 Влияние трио-(2-оксиэтил) аммониевой соли 2,4-дихлор-феноксиуксусной кислоты на количество ядросодержащих клеток крови у интактных мышей CBF1 |
|||
Группа | Доза 1/10 LD50 (мг/кг) | Кол-во ядросодержащих клеток | % к контролю |
Контроль | 9,87×106/мл | ||
Соединение | 75 | 15,1* | +52 |
*достоверно, Р<0,05 |
Как видно из данных табл.1, соединение достоверно обладает миелостимулирующими свойствами, т.е. существенно более чем на 20% вызывает увеличение количества лейкоцитов (на 52%).
Пример 2. Оценка влияния соединения на первичный гуморальный ответ.
Опытной группе животных соединение вводили в дозе 1/10LD50 внутрибрюшинно ежедневно в течение 7 дней в объеме 0,5 мл. Контрольным животным в таком же объеме и режиме вводили растворитель (воду). В день последнего введения соединения животных иммунизировали внутривенно эритроцитами барана (ЭБ) в дозе 0,5×107/мышь. Количество IgМ АОК в селезенке мышей оценивали на 4-е сутки после иммунизации по количеству локальных зон гемолиза в полужидкой среде модифицированным методом (Cunningham, 1968). Результаты выражали в абсолютном количестве tgM AOK в селезенке.
Таблица 2 Влияние трис-(2-оксиэтил) аммониевой соли 2,4-дихлор-феноксиуксусной кислоты на абсолютное количество IgM-AOK в селезенке мышей |
|
Группы | Число lgМ-АОК |
Контроль | 1839 |
Соединение | 4135* |
*Р<0,05 |
Как видно из данных таблицы 2, соединение достоверно стимулирует первичный гуморальный иммунный ответ.
Пример 3. Оценка влияния соединения на клеточный иммунный ответ.
Опытной группе животных соединение вводили в дозе 1/10 LD50 внутрибрюшинно ежедневно в течение 5 дней в объеме 0,5 мл. В день последнего введения соединения мышей сенсибилизировали внутрибрюшинным введением 0,25% ЭБ в объеме 0,5 мл; на 4-е сутки после сенсибилизации вводили разрешающую дозу антигена под подошвенный апоневроз правой задней лапы (50% ЭБ в объеме 50 мкл). В контрлатеральную лапу вводили растворитель в том же объеме. Контрольным животным в таком же объеме и режиме вводили растворитель соединения (воду). Реакцию ГЗТ оценивали по методике локальной ГЗТ (Crowte, 1975). Учет реакции производили через 24 часа после введения разрешающей дозы ЭБ, величину отека оценивали штангенциркулем. Результаты выражали в процентах или абсолютных значениях.
Таблица 3 Влияние трис-(2-оксиэтил)аммониевой соли 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты на реакцию гиперчувствительности замедленного типа (клеточный иммунитет) |
|
Группы | ГЗТ(%) |
1. Контроль | 47,7 |
2. Соединение | 35,2* |
*достоверно, Р<0,05 |
Как видно из данных Таблицы 3, трис-(2-оксиэтил)аммониевая соль 2,4-дихлор-феноксиуксусной кислоты достоверно подавляет клеточный иммунитет.
Пример 4. Оценка влияния соединения на спонтанную, Con А- и PWM-индуцированную пролиферацию клеток селезенки.
Клетки селезенки мышей культивировали в круглодонных планшетах для иммунологических реакций (“Linbro”) при +37°С в атмосфере 5% СО2 и 95% воздуха. Абсолютное количество клеток, вносимых в лунку, составляло 200000. Клетки стимулировали митогенами - конканавалином А (Con A, Sigma) или митогеном лаконоса (PWM, Sigma). Концентрации митогенов подбирались предварительным титрованием и использовались в оптимальной дозе, что составило для Con А 2 мкг/мл, а для PWM - 1 мкг/мл. Соединение в трех дозах вносили в лунки одновременно с митогенами. Пролиферативную активность клеток оценивали по включению Н3-тимидина в ДНК делящихся клеток. Метку вносили за 16 час до конца культивирования по 1 мкКи в каждую лунку планшета. Для этого основной раствор Н3-тимидина сначала растворяли в среде RPMI-1640 до концентрации 100 мкКи/мл, а затем по 10 мкп раствора добавляли в каждую лунку планшета. По окончании инкубации клетки собирали на стеклянно-волокнистые фильтры ("Flow Lab") с помощью аппарата Harvester ("Tritertek"). Фильтры высушивали и помещали во флаконы для сцинтилляционного счета, и радиоактивность подсчитывали в толуольном сцинтилляторе (4 г дифенилоксазола, 0,1 г дифенил-оксазолилбензола на 1 л толуола) в жидкостном сцинтилляционном счетчике "Delta" (США). Результаты выражали в имп/мин включенного тимидина на 2×105 клеток, представлены средние данные по триплету.
Таблица 4 Влияние трис-(2-оксиэтил) аммониевой соли 2,4-дихлор феноксиуксусной кислоты на спонтанную и митоген-стимулированную пролиферацию клеток селезенки интактных мышей in vitro (имп/мин) |
|||
Доза соединения (мкг/мл) | Спонтанная пролиферация | Con А-индуцированная пролиферация (2 мкг/мл) | PWM-Индуцированная пролиферация (1 мкг/мл) |
Контроль | 3346 | 15072 | 7226 |
0,75 | 3226 | 14285 | 6659 |
7,5 | 3566 | 14543 | 5610* |
75 | 2628 | 11447 | 5346 |
5610* достоверно относительно соответствующего контроля, Р<0,05 |
Как видно из данных, соединение проявляет ингибирующие свойства на PWM-стимулированную пролиферацию интактных клеток селезенки мышей.
Оценивая в целом результаты, можно отметить, что по свойствам стимулировать лейкопоэз и первичный гуморальный ответ трис-(2-оксиэтил) аммониевая соль 2,4-дихлор феноксиуксусной кислоты может быть отнесена к иммуностимуляторам. А по свойствам подавлять клеточный иммунный ответ, спонтанную и стимулированную пролиферацию клеток in vitro - к иммунодепрессантам.
Приведенные примеры иллюстрируют наличие у трис-(2-оксиэтил) аммониевой соли 2,4-дихлор-феноксиуксусной кислоты иммуномодулирующих свойств, что позволит в будущем создавать на ее основе лекарственные средства для лечения различных иммунокомпрометированных состояний.
Claims (1)
- Применение трис-(2-оксиэтил) аммониевой соли 2,4-дихлор феноксиуксусной кислоты в качестве иммуномодулятора.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003121689/15A RU2245142C1 (ru) | 2003-07-14 | 2003-07-14 | Иммуномодулятор |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003121689/15A RU2245142C1 (ru) | 2003-07-14 | 2003-07-14 | Иммуномодулятор |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2003121689A RU2003121689A (ru) | 2005-01-10 |
RU2245142C1 true RU2245142C1 (ru) | 2005-01-27 |
Family
ID=34881708
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2003121689/15A RU2245142C1 (ru) | 2003-07-14 | 2003-07-14 | Иммуномодулятор |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2245142C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2461390C2 (ru) * | 2005-01-28 | 2012-09-20 | Галенбио, Инк. | Иммунологически активные составы |
-
2003
- 2003-07-14 RU RU2003121689/15A patent/RU2245142C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
КОРДА М.М. Трис(2-оксиэтил)аммоний ортокрезоацетат ингибирует окислительную модификацию липопротеинов низкой плотности. Экспериментальная и клиническая медицина. - 1997, т.60, №6 с.37-39. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2461390C2 (ru) * | 2005-01-28 | 2012-09-20 | Галенбио, Инк. | Иммунологически активные составы |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2003121689A (ru) | 2005-01-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Eyssen et al. | The mode of action of antibiotics in stimulating growth of chicks | |
Gerbase-DeLima et al. | Immune function and survival in a long-lived mouse strain subjected to undernutrition | |
RU2245142C1 (ru) | Иммуномодулятор | |
RU2224513C1 (ru) | Иммуномодулятор | |
RU2253444C1 (ru) | Иммуномодулятор | |
Dinning et al. | Creatine metabolism in vitamin E deficiency. | |
Schwartz et al. | Quercetin inhibition of the induction and function of cytotoxic T lymphocytes | |
Smith et al. | Toxicity of tritiated thymidine to bone marrow transplants | |
RU2224512C1 (ru) | Иммуномодулятор | |
RU2252757C1 (ru) | Иммуномодулятор | |
RU2228178C1 (ru) | Иммунодепрессант | |
Kolesnikova et al. | Alkanolammonium salts of o-cresoxy-and p-chlorocresoxyacetic acids as immunopoiesis modulators and cytostatics | |
RU2240794C1 (ru) | Иммуномодулятор | |
RU2253447C1 (ru) | Иммуномодулятор | |
RU2473340C1 (ru) | Способ получения препарата для стимуляции неспецифической резистентности и обмена веществ у животных | |
US4737521A (en) | Suramin sodium for use as an immunostimulant | |
Schildknecht et al. | Antiparasitic activity of natural and semisynthetic monensin urethanes | |
Bosse et al. | Tribrissen® and tiamulin for control of enteric redmouth disease | |
RU2253448C1 (ru) | Иммунодепрессант | |
RU2253445C1 (ru) | Иммуномодулятор | |
RU2027434C1 (ru) | Иммуномодулирующее средство | |
RU2108100C1 (ru) | Иммуномодулятор | |
RU2115652C1 (ru) | Калиевая соль 2-[1-(1,1диоксотиетанил-3) бензимидазолил-2-тио]-уксусной кислоты, проявляющая иммунотропную активность | |
RU2813776C1 (ru) | Способ лечения сальмонеллеза у молодняка крупного рогатого скота | |
RU2228175C1 (ru) | Иммуностимулятор |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20090715 |