RU2242992C2

RU2242992C2 - Pharmaceutic preparation containing carboxypeptidase u inhibitor and that of thrombin

Info

Publication number: RU2242992C2
Application number: RU2001128158/15A
Authority: RU
Inventors: Томми АБРАХАМССОН (SE); Томми АБРАХАМССОН; Вивека НЕРМЕ (SE); Вивека НЕРМЕ; Магнус ПОЛЛА (SE); Магнус Полла
Original assignee: Астразенека Аб
Priority date: 1999-05-03
Filing date: 2000-05-03
Publication date: 2004-12-27

Abstract

FIELD: pharmaceutics.

SUBSTANCE: the present innovation deals with pharmaceutical preparation of carboxypeptidase U (CPU) inhibitor and thrombin inhibitor in the mixture of pharmaceutically acceptable adjuvant, solvent or carrier and, also, with the set of components, method for therapy and application of these preparations applied in treating the states when CPU inhibition and/or thrombin inhibition is either required or desirable.

EFFECT: higher efficiency of the preparation.

30 cl, 3 ex, 3 tbl

Description

Область изобретенияField of Invention

Настоящее изобретение относится к фармацевтическим препаратам ингибитора карбоксипептидазы U (CPU) и ингибитора тромбина в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем, а также к набору компонентов, к способу лечения и к применению этих препаратов для лечения состояний, при которых ингибирование CPU и/или ингибирование тромбина требуется или желательно.The present invention relates to pharmaceutical preparations of a carboxypeptidase U inhibitor (CPU) and a thrombin inhibitor in a mixture with a pharmaceutically acceptable adjuvant, diluent or carrier, as well as a kit of components, a method of treatment and the use of these drugs for the treatment of conditions in which CPU inhibition and / or thrombin inhibition is required or desirable.

Предпосылки изобретенияBACKGROUND OF THE INVENTION

Коагуляция крови является ключевым процессом, затрагивающим как гемостаз (то есть предупреждение кровопотери из травмированного сосуда), так и тромбоз (то есть патологическую закупорку кровеносного сосуда кровяным сгустком). Коагуляция является результатом сложного ряда ферментативных реакций, одной из конечных стадий которого является превращение профермента протромбина в активный фермент тромбин.Blood coagulation is a key process that affects both hemostasis (i.e. preventing blood loss from an injured vessel) and thrombosis (i.e. pathological blockage of a blood vessel by a blood clot). Coagulation is the result of a complex series of enzymatic reactions, one of the final stages of which is the conversion of the prothrombin proenzyme to the active thrombin enzyme.

Тромбин играет центральную роль в коагуляции. Он активирует тромбоциты, он превращает фибриноген в фибриновые мономеры, которые самопроизвольно полимеризуются в нитевидные структуры, и он активирует фактор XIII, который в свою очередь сшивает полимер в нерастворимый фибрин. Тромбин также активирует фактор V и фактор VIII в реакциях с положительной обратной связью. Таким образом, предполагается, что ингибиторы тромбина являются эффективными антикоагулянтами посредством ингибирования тромбоцитов, образования фибрина и стабилизации фибрина. Предполагается, что, ингибируя механизм положительной обратной связи, они задействуют ингибирование в начале цепочки событий, ведущих к коагуляции и тромбозу.Thrombin plays a central role in coagulation. It activates platelets, it converts fibrinogen into fibrin monomers, which spontaneously polymerize into threadlike structures, and it activates factor XIII, which in turn crosslinks the polymer into insoluble fibrin. Thrombin also activates factor V and factor VIII in positive feedback reactions. Thus, thrombin inhibitors are believed to be effective anticoagulants through platelet inhibition, fibrin formation, and fibrin stabilization. It is believed that by inhibiting the mechanism of positive feedback, they activate inhibition at the beginning of the chain of events leading to coagulation and thrombosis.

Фибринолиз является результатом ряда ферментативных реакций, приводящих к расщеплению фибрина плазмином. Активация плазминогена является центральным процессом в фибринолизе. Расщепление плазминогена с получением плазмина осуществляют активаторы плазминогена, активатор плазминогена тканевого типа (t-PA) или активатор плазминогена урокиназного типа (u-РА). В ходе начального расщепления фибрина плазмином образуются карбокси-концевые остатки лизина, которые служат в качестве высокоаффинных сайтов связывания плазминогена. Так как плазминоген, связанный с фибрином, активируется в плазмин намного легче, чем свободный плазминоген, этот механизм обеспечивает регулирование фибринолиза по типу положительной обратной связи.Fibrinolysis is the result of a series of enzymatic reactions leading to cleavage of fibrin by plasmin. Plasminogen activation is a central process in fibrinolysis. Plasminogen cleavage to obtain plasmin is carried out by plasminogen activators, tissue type plasminogen activator (t-PA) or urokinase type plasminogen activator (u-PA). During the initial cleavage of fibrin by plasmin, carboxy-terminal lysine residues are formed, which serve as high-affinity plasminogen binding sites. Since the plasminogen associated with fibrin is more easily activated in plasmin than free plasminogen, this mechanism provides for the regulation of fibrinolysis by the type of positive feedback.

Одним из эндогенных ингибиторов фибринолиза является карбоксипептидаза U (CPU). CPU также известна как плазменная карбоксипептидаза В, активный ингибитор тромбин-активируемого фибринолиза (TAFIa), карбоксипептидаза R и индуцируемая карбоксипептидазная активность. CPU образуется во время коагуляции и фибринолиза из своего предшественника npoCPU под действием протеолитических ферментов, например тромбина, тромбин-тромбомодулинового комплекса или плазмина. CPU расщепляет основные аминокислоты на карбоксильном конце фибриновых фрагментов. Потеря карбокси-концевых лизинов и в результате этого лизиновых сайтов связывания плазминогена затем способствует ингибированию фибринолиза.One of the endogenous inhibitors of fibrinolysis is carboxypeptidase U (CPU). CPU is also known as plasma carboxypeptidase B, an active inhibitor of thrombin-activated fibrinolysis (TAFIa), carboxypeptidase R, and inducible carboxypeptidase activity. The CPU is formed during coagulation and fibrinolysis from its npoCPU precursor under the action of proteolytic enzymes such as thrombin, thrombin-thrombomodulin complex or plasmin. CPU breaks down the basic amino acids at the carboxyl end of fibrin fragments. The loss of carboxy-terminal lysines and, as a result, the lysine plasminogen binding sites then contributes to the inhibition of fibrinolysis.

Сущность изобретенияSUMMARY OF THE INVENTION

Настоящее изобретение относится к фармацевтическим препаратам, содержащим ингибитор CPU и ингибитор тромбина в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем и/или носителем, а также к способу лечения и к применению этих препаратов для лечения состояния, при котором ингибирование CPU и/или ингибирование тромбина требуется или желательно.The present invention relates to pharmaceutical preparations containing a CPU inhibitor and a thrombin inhibitor in admixture with a pharmaceutically acceptable adjuvant, diluent and / or carrier, as well as a method of treatment and the use of these drugs for the treatment of a condition in which CPU inhibition and / or thrombin inhibition is required or desirable.

Данное изобретение также относится к набору компонентов, включающему в себя сосуды, содержащие ингибитор CPU и ингибитор тромбина, и инструкции для введения этих ингибиторов пациенту, нуждающемуся в этом.The present invention also relates to a kit of components including vessels containing a CPU inhibitor and a thrombin inhibitor, and instructions for administering these inhibitors to a patient in need thereof.

Данное изобретение также относится к набору компонентов, включающему в себя препараты, содержащие ингибитор CPU и ингибитор тромбина, каждый в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем и/или носителем.The invention also relates to a kit of components comprising preparations comprising a CPU inhibitor and a thrombin inhibitor, each in a mixture with a pharmaceutically acceptable adjuvant, diluent and / or carrier.

Подробное описание изобретенияDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

Неожиданно было обнаружено, что по сравнению с раздельным применением ингибиторов CPU и тромбина настоящее изобретение, включающее комбинацию ингибитора CPU и ингибитора тромбина, усиливает антитромботические эффекты, тем самым снижая риск тромбоза и гиперкоагуляции в крови и тканях млекопитающих. Кроме того, согласно настоящему изобретению предложено введение более низких доз активных ингредиентов, что снижает риск потенциальных побочных эффектов ингибиторов тромбина.Unexpectedly, it has been found that, compared to the separate use of CPU inhibitors and thrombin, the present invention, comprising a combination of a CPU inhibitor and a thrombin inhibitor, enhances antithrombotic effects, thereby reducing the risk of thrombosis and hypercoagulation in the blood and tissues of mammals. In addition, the present invention provides the administration of lower doses of active ingredients, which reduces the risk of potential side effects of thrombin inhibitors.

Так, в одном аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтическим препаратам, содержащимSo, in one aspect, the present invention relates to pharmaceutical preparations containing

1) ингибитор карбоксипептидазы U или его фармацевтически приемлемую соль и1) a carboxypeptidase U inhibitor or a pharmaceutically acceptable salt thereof; and

2) ингибитор тромбина или его производное2) a thrombin inhibitor or its derivative

в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.in admixture with a pharmaceutically acceptable adjuvant, diluent or carrier.

В следующем аспекте настоящее изобретение относится к наборам компонентов, включающим в себя:In a further aspect, the present invention relates to kits of components, including:

1) сосуд, содержащий ингибитор карбоксипептидазы U или его фармацевтически приемлемую соль;1) a vessel containing a carboxypeptidase U inhibitor or a pharmaceutically acceptable salt thereof;

2) сосуд, содержащий ингибитор тромбина или его производное;2) a vessel containing a thrombin inhibitor or its derivative;

и инструкции для последовательного, раздельного или одновременного введения ингибиторов (1) и (2) пациенту, нуждающемуся в этом.and instructions for sequential, separate or simultaneous administration of inhibitors (1) and (2) to a patient in need thereof.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к наборам компонентов, включающим в себяIn another aspect, the present invention relates to kits of components, including

1) фармацевтический препарат, содержащий ингибитор карбоксипептидазы U или его фармацевтически приемлемую соль в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем; и1) a pharmaceutical preparation containing a carboxypeptidase U inhibitor or a pharmaceutically acceptable salt thereof in a mixture with a pharmaceutically acceptable adjuvant, diluent or carrier; and

2) фармацевтический препарат, содержащий ингибитор тромбина или его производное, в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем;2) a pharmaceutical preparation containing a thrombin inhibitor or its derivative, in a mixture with a pharmaceutically acceptable adjuvant, diluent or carrier;

причем ингибиторы (1) и (2) представлены в формах, которые подходят для введения совместно друг с другом.moreover, the inhibitors (1) and (2) are presented in forms that are suitable for administration together with each other.

Под "введением совместно с" подразумевается, что соответствующие препараты, содержащие ингибитор CPU и ингибитор тромбина, вводят последовательно, раздельно и/или одновременно в течение курса лечения релевантного состояния, которое может быть острым или хроническим. Предпочтительно этот термин означает, что два препарата вводят (возможно неоднократно) достаточно близко по времени, чтобы обеспечить благотворный эффект для пациента, который в течение курса лечения релевантного состояния сильнее, чем если бы эти два препарата вводили (возможно неоднократно) по отдельности в отсутствие другого препарата в течение такого же курса лечения. Установление того, обеспечивает ли комбинация более сильный благотворный эффект в отношении конкретного состояния в течение курса лечения, зависит от состояния, которое нужно лечить или предупреждать, и в обычной практике может быть успешно выполнено специалистом в данной области.By “co-administration with” is meant that the corresponding preparations containing a CPU inhibitor and a thrombin inhibitor are administered sequentially, separately and / or simultaneously during a course of treatment of a relevant condition, which may be acute or chronic. Preferably, this term means that two drugs are administered (possibly repeatedly) close enough in time to provide a beneficial effect for the patient, who is stronger during the course of treatment of the relevant condition than if the two drugs were administered (possibly repeatedly) separately in the absence of the other drug during the same course of treatment. The determination of whether the combination provides a stronger beneficial effect in relation to a particular condition during the course of treatment depends on the condition that needs to be treated or prevented, and in ordinary practice can be successfully performed by a person skilled in the art.

Таким образом, термин "совместно с" означает, что либо тот, либо другой из этих двух препаратов можно вводить (возможно неоднократно) до, после введения другого компонента и/или в одно и то же время с другим компонентом. Используемые в данном контексте термины "вводят одновременно" и "вводят в одно и то же время" означают, что индивидуальные дозы ингибитора CPU и ингибитора тромбина вводят в пределах 48 часов, например 24 часов, друг от друга.Thus, the term “in conjunction with” means that either one or the other of these two drugs can be administered (possibly repeatedly) before, after the administration of the other component and / or at the same time with the other component. As used herein, the terms “administered at the same time” and “administered at the same time” mean that the individual doses of the CPU inhibitor and the thrombin inhibitor are administered within 48 hours, for example 24 hours, from each other.

Согласно следующему аспекту изобретения предложен способ изготовления набора компонентов, как он определен здесь, при котором компонент (а), как определено выше, объединяют с компонентом (б), как он определен выше, делая таким образом эти два компонента пригодными для введения совместно друг с другом.According to a further aspect of the invention, there is provided a method of manufacturing a kit of components as defined herein, wherein component (a) as defined above is combined with component (b) as defined above, thereby making the two components suitable for administration together friend.

Термин "объединение двух компонентов друг с другом" означает, что компоненты (а) и (б) могут бытьThe term “combining two components with each other” means that components (a) and (b) can be

1) представлены как отдельные препараты (то есть независимо один от другого), которые затем берут вместе для применения совместно друг с другом в комбинированной терапии; или1) are presented as separate preparations (that is, independently of one another), which are then taken together for use together with each other in combination therapy; or

2) упакованы и представлены вместе как отдельные компоненты "комбинированной упаковки" для применения совместно друг с другом в комбинированной терапии.2) are packaged and presented together as separate components of a “combination package” for use together with each other in combination therapy.

В еще одном аспекте данное изобретение относится к способам лечения пациента, страдающего состоянием, при котором ингибирование тромбина и/или ингибирование карбоксипептидазы U требуется или желательно, или восприимчивого к такому состоянию, путем введения пациенту терапевтически эффективного общего количестваIn yet another aspect, the invention relates to methods for treating a patient suffering from a condition in which inhibition of thrombin and / or inhibition of carboxypeptidase U is required or desirable, or susceptible to such a condition, by administering to the patient a therapeutically effective total amount

1) ингибитора карбоксипептидазы U или его фармацевтически приемлемой соли в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем совместно с1) a carboxypeptidase U inhibitor or a pharmaceutically acceptable salt thereof in a mixture with a pharmaceutically acceptable adjuvant, diluent or carrier, together with

2) ингибитором тромбина или его производным в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.2) a thrombin inhibitor or its derivative in a mixture with a pharmaceutically acceptable adjuvant, diluent or carrier.

В еще одном аспекте данное изобретение относится к способам лечения пациента, страдающего состоянием, при котором ингибирование тромбина и/или ингибирование карбоксипептидазы U требуется или желательно, или подверженного такому состоянию, путем введения пациенту фармацевтического препарата, содержащего:In yet another aspect, the invention relates to methods for treating a patient suffering from a condition in which inhibition of thrombin and / or inhibition of carboxypeptidase U is required or subject to such a condition by administering to the patient a pharmaceutical preparation comprising:

В еще одном аспекте данное изобретение относится к применению фармацевтических препаратов, содержащихIn another aspect, this invention relates to the use of pharmaceutical preparations containing

в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем, в изготовлении лекарства для лечения состояния, при котором ингибирование тромбина и/или ингибирование карбоксипептидазы U требуется или желательно.in admixture with a pharmaceutically acceptable adjuvant, diluent or carrier, in the manufacture of a medicament for the treatment of a condition in which inhibition of thrombin and / or inhibition of carboxypeptidase U is required or desirable.

Во избежание сомнений используемый здесь термин "лечение" включает в себя терапевтическое и/или профилактическое лечение.For the avoidance of doubt, the term “treatment” as used herein includes therapeutic and / or prophylactic treatment.

Ингибиторы CPUCPU Inhibitors

Ингибиторы CPU, упоминаемые в этой заявке, включают низкомолекулярные ингибиторы карбоксипептидазы с молекулярной массой ниже 1000, предпочтительно ниже 700.The CPU inhibitors referred to in this application include low molecular weight carboxypeptidase inhibitors with a molecular weight below 1000, preferably below 700.

В настоящей заявке ингибитор CPU представляет собой предпочтительноIn this application, the CPU inhibitor is preferably

1) соединение общей формулы I1) a compound of general formula I

(I)

или его фармацевтически приемлемую соль, или сольват, или сольват такой соли, гдеor its pharmaceutically acceptable salt, or MES, or MES such salt, where

R₁ представляет собойR ₁ represents

C₁-С₆алкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;C ₁ -C ₆ alkyl substituted with one or more basic groups, such as amino, amidino and / or guanidino;

циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;cycloalkyl substituted with one or more than one basic group, such as amino, amidino and / or guanidino;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота;heterocyclyl containing at least one nitrogen atom;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один гетероатом, выбранный из S или О, и замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;heterocyclyl containing at least one heteroatom selected from S or O and substituted by one or more basic groups, such as amino, amidino and / or guanidino;

или арил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;or aryl substituted with one or more than one basic group, such as amino, amidino and / or guanidino;

R₂ представляет собой Н, ацил, ациламино, алкил, алкилкарбамоил, алкилтио, алкокси, ароил, ароиламино, арилокси, арилтио, амидино, амино, арил, карбамоил, карбокси, циано, циклоалкил, формил, гуанидино, галоген, гетероциклил, гидрокси, оксо, нитро, тиол, группу Z₂N-CO-O-, ZO-CO-NZ или Z₂N-CO-NZ-;R ₂ represents H, acyl, acylamino, alkyl, alkylcarbamoyl, alkylthio, alkoxy, aroyl, aroylamino, aryloxy, arylthio, amidino, amino, aryl, carbamoyl, carboxy, cyano, cycloalkyl, formyl, guanidino, halo, hydroxy oxo, nitro, thiol, the group Z ₂ N-CO-O-, ZO-CO-NZ or Z ₂ N-CO-NZ-;

R₃ представляет собой COOR₅, SO(OR₅), SO₃R₅. P=O(OR₅)₂, B(OR₅)₂, P=OR₅(OR₅), или тетразол, или любой изостер карбоновой кислоты;R ₃ represents COOR ₅ , SO (OR ₅ ), SO ₃ R ₅ . P = O (OR ₅ ) ₂ , B (OR ₅ ) ₂ , P = OR ₅ (OR ₅ ), or tetrazole, or any carboxylic acid isoster;

R₄ представляет собой SH, S-СО-С₁-C₆алкил или S-CO-арил;R ₄ represents SH, S — CO — C ₁ –C ₆ alkyl or S — CO — aryl;

R₅ представляет собой Н, C₁-С₆алкил или арил;R ₅ represents H, C ₁ -C ₆ alkyl or aryl;

R₆ представляет собой Н или C₁-С₆алкил;R ₆ represents H or C ₁ -C ₆ alkyl;

Х представляет собой О, S, SO, SO₂, C(Z)₂, N(Z), NR₇SO₂, SO₂NR₇, NR₇CO или CONR₇;X represents O, S, SO, SO ₂ , C (Z) ₂ , N (Z), NR ₇ SO ₂ , SO ₂ NR ₇ , NR ₇ CO or CONR ₇ ;

Y представляет собой C(Z)₂;Y represents C (Z) ₂ ;

Z независимо представляет собой Н, C₁-С₆алкил, арил, циклоалкил или гетероциклил;Z independently represents H, C ₁ -C ₆ alkyl, aryl, cycloalkyl or heterocyclyl;

илиor

2) соединение общей формулы II2) the compound of General formula II

или его фармацевтически приемлемые соль или сольват, или сольват такой соли, гдеor a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, or a solvate of such a salt, wherein

R₇ представляет собойR ₇ represents

R₈ представляет собой Н, ацил, ациламино, алкил, алкилкарбамоил, алкилтио, алкокси, ароил, ароиламино, арилокси, арилтио, амидино, амино, арил, карбамоил, карбокси, циано, циклоалкил, формил, гуанидино, галоген, гетероциклил, гидрокси, оксо, нитро, тиол, группу Z₂N-CO-O-, ZO-CO-NZ или Z₂N-CO-NZ-;R ₈ represents H, acyl, acylamino, alkyl, alkylcarbamoyl, alkylthio, alkoxy, aroyl, aroylamino, aryloxy, arylthio, amidino, amino, aryl, carbamoyl, carboxy, cyano, cycloalkyl, formyl, guanidino, halo, hydroxy oxo, nitro, thiol, the group Z ₂ N-CO-O-, ZO-CO-NZ or Z ₂ N-CO-NZ-;

R₉ представляет собой COOR₁₁, SO(OR₁₁), SO₃R₁₁, P=O(OR₁₁)₂, B(OR₁₁)₂, P=OR₁₁(OR₁₁), или тетразол, или любой изостер карбоновой кислоты;R ₉ represents COOR ₁₁ , SO (OR ₁₁ ), SO ₃ R ₁₁ , P = O (OR ₁₁ ) ₂ , B (OR ₁₁ ) ₂ , P = OR ₁₁ (OR ₁₁ ), or tetrazole, or any carbon isoster acids;

R₁₀ представляет собой группу

R ₁₀ represents a group

R₁₁ представляет собой Н, C₁-С₆алкил или арил;R ₁₁ represents H, C ₁ -C ₆ alkyl or aryl;

R₁₂ представляет собой C₁-С₆алкил, арил, циклоалкил, гетероциклил или возможно N-замещенную группу H₂N-C(Z)-CONH-C(Z)или H₂N-C(Z)-;R ₁₂ represents C ₁ -C ₆ alkyl, aryl, cycloalkyl, heterocyclyl or an optionally N-substituted group H ₂ NC (Z) -CONH-C (Z) or H ₂ NC (Z) -;

R₁₃ представляет собой Н или C₁-С₆алкил;R ₁₃ represents H or C ₁ -C ₆ alkyl;

Х представляет собой О, S, SO, SO₂, C(Z)₂, N(Z), NR₁₃SO₂, SO₂NR₁₃, NR₁₃CO или CONR₁₃;X represents O, S, SO, SO ₂ , C (Z) ₂ , N (Z), NR ₁₃ SO ₂ , SO ₂ NR ₁₃ , NR ₁₃ CO or CONR ₁₃ ;

Y представляет собой О, N(Z), S, C(Z)₂ или одинарную связь;Y represents O, N (Z), S, C (Z) ₂ or a single bond;

Z независимо представляет собой Н, C₁-С₆ алкил, арил, циклоалкил или гетероциклил;Z independently represents H, C ₁ -C ₆ alkyl, aryl, cycloalkyl or heterocyclyl;

при условии, что когда Х представляет собой О, S, SO, SO₂, N(Z), NR₇SO₂, SO₂NR₇ или NR₇CO, тогда Y представляет собой C(Z)₂ или одинарную связь.with the proviso that when X represents O, S, SO, SO ₂ , N (Z), NR ₇ SO ₂ , SO ₂ NR ₇ or NR ₇ CO, then Y represents C (Z) ₂ or a single bond.

Более предпочтительные ингибиторы CPU включают соединения общей формулы I, или их фармацевтически приемлемые соль или сольват, или сольват такой соли, гдеMore preferred CPU inhibitors include compounds of general formula I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, or a solvate of such a salt, wherein

R₁ представляет собойR ₁ represents

R₃ представляет собой COOR₅;R ₃ represents COOR ₅ ;

R₄ представляет собой SH, S-CO-C₁-С₆алкил или S-CO-арил;R ₄ represents SH, S-CO-C ₁ -C ₆ alkyl or S-CO-aryl;

Х представляет собой О, S, SO, SO₂, C(Z)₂, N(Z), NR₆SO₂, SO₂NR₆ или CONR₆;X represents O, S, SO, SO ₂ , C (Z) ₂ , N (Z), NR ₆ SO ₂ , SO ₂ NR ₆ or CONR ₆ ;

Y представляет собой C(Z)₂;Y represents C (Z) ₂ ;

Z представляет собой независимо Н, C₁-С₆алкил, арил, циклоалкил или гетероциклил.Z is independently H, C ₁ -C ₆ alkyl, aryl, cycloalkyl or heterocyclyl.

Еще более предпочтительные ингибиторы CPU включают соединения общей формулы I или их фармацевтически приемлемые соли, гдеEven more preferred CPU inhibitors include compounds of general formula I or their pharmaceutically acceptable salts, where

R₁ представляет собой циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;R ₁ represents cycloalkyl substituted with one or more basic groups, such as amino, amidino and / or guanidino;

R₂ представляет собой Н, C₁-С₃алкил, амино, галоген или гидрокси;R ₂ represents H, C ₁ -C ₃ alkyl, amino, halogen or hydroxy;

R₃ представляет собой COOR₅;R ₃ represents COOR ₅ ;

R₅ представляет собой Н, С₁-С₆алкил или арил;R ₅ represents H, C ₁ -C ₆ alkyl or aryl;

Х представляет собой C(Z)₂;X represents C (Z) ₂ ;

Y представляет собой C(Z)₂;Y represents C (Z) ₂ ;

Z независимо представляет собой Н или С₁-С₆алкил.Z independently represents H or C ₁ -C ₆ alkyl.

Более предпочтительные ингибиторы CPU включают соединения общей формулы II, или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, или сольваты таких солей, гдеMore preferred CPU inhibitors include compounds of general formula II, or pharmaceutically acceptable salts or solvates thereof, or solvates of such salts, wherein

R₇ представляет собойR ₇ represents

R₉ представляет собой COOR₁₁;R ₉ represents COOR ₁₁ ;

R₁₀ представляет собой группуR ₁₀ represents a group

R₁₂ представляет собой С₁-С₆алкил, арил, циклоалкил, гетероциклил или возможно N-замещенную группу H₂N-C(Z)-CONH-C(Z)или H₂N-C(Z)-;R ₁₂ represents C ₁ -C ₆ alkyl, aryl, cycloalkyl, heterocyclyl or an optionally N-substituted group H ₂ NC (Z) -CONH-C (Z) or H ₂ NC (Z) -;

Х представляет собой C(Z)₂;X represents C (Z) ₂ ;

Z представляет собой независимо Н, С₁-С₆алкил, арил, циклоалкил или гетероциклил.Z is independently H, C ₁ -C ₆ alkyl, aryl, cycloalkyl or heterocyclyl.

Еще более предпочтительные ингибиторы CPU включают соединения общей формулы II или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, или сольваты таких солей, гдеEven more preferred CPU inhibitors include compounds of general formula II, or pharmaceutically acceptable salts or solvates thereof, or solvates of such salts, wherein

R₇ представляет собой циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;R ₇ is cycloalkyl substituted with one or more basic groups, such as amino, amidino and / or guanidino;

R₈ представляет собой Н, C₁-С₆алкил, амино, галоген, гидрокси;R ₈ represents H, C ₁ -C ₆ alkyl, amino, halogen, hydroxy;

;

R₁₂ представляет собой С₁-С₆алкил, арил, циклоалкил, гетероциклил или возможно N-замещенную группу H₂N-C(Z)-CONH-C(Z) или H₂N-C(Z)-;R ₁₂ represents C ₁ -C ₆ alkyl, aryl, cycloalkyl, heterocyclyl or an optionally N-substituted group H ₂ NC (Z) -CONH-C (Z) or H ₂ NC (Z) -;

Х представляет собой C(Z)₂;X represents C (Z) ₂ ;

Y представляет собой О или C(Z)₂;Y represents O or C (Z) ₂ ;

Z представляет собой независимо Н или C₁-С₆алкил.Z is independently H or C ₁ -C ₆ alkyl.

В данном описании изобретения и в прилагаемой формуле изобретения использованы следующие определения.The following definitions are used in this specification and in the appended claims.

Термин "основная группа" означает основную группу, причем сопряженная кислота указанной основной группы имеет рКа от приблизительно -5 до приблизительно 25, предпочтительно от 1 до 15.The term “main group” means a basic group, wherein the conjugate acid of said main group has a pKa of from about −5 to about 25, preferably from 1 to 15.

Термин "изостер карбоновой кислоты" означает кислотную группу, имеющую рКа от приблизительно -5 до приблизительно 25, предпочтительно от 1 до 15.The term "carboxylic acid isoster" means an acid group having a pKa of from about -5 to about 25, preferably from 1 to 15.

Термин "С₁-С₆алкил" означает прямую или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную, замещенную или незамещенную алкильную группу, имеющую от 1 до 6 углеродных атомов в цепи, причем эта алкильная группа может быть возможно прервана одним или более чем одним гетероатомом, выбранным из О, N или S. Примеры указанного алкила включают в себя, без ограничений, метил, этил, этенил, этинил, н-пропил, изопропил, пропенил, изопропенил, пропинил, н-бутил, изобутил, втop-бутил, трет-бутил, бутенил, изобутенил, бутинил и пентил и гексил с прямой или разветвленной цепью.The term “C ₁ -C ₆ alkyl” means a straight or branched, saturated or unsaturated, substituted or unsubstituted alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms in a chain, and this alkyl group may optionally be interrupted by one or more heteroatoms selected from O, N or S. Examples of said alkyl include, but are not limited to, methyl, ethyl, ethenyl, ethynyl, n-propyl, isopropyl, propenyl, isopropenyl, propynyl, n-butyl, isobutyl, w-butyl, tert-butyl , butenyl, isobutenyl, butynyl and pentyl and hexyl straight or branched chain.

Термин "C₁-С₃алкил" означает прямую или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную, замещенную или незамещенную алкильную группу, имеющую от 1 до 3 углеродных атомов в цепи, причем алкильная группа может быть возможно прервана одним или более чем одним гетероатомом, выбранным из О, N или S. Примеры указанного алкила включают в себя, без ограничений, метил, этил, этенил, этинил, н-пропил, изопропил, пропенил, изопропенил, пропинил.The term “C ₁ -C ₃ alkyl” means a straight or branched, saturated or unsaturated, substituted or unsubstituted alkyl group having from 1 to 3 carbon atoms in a chain, and the alkyl group may optionally be interrupted by one or more heteroatoms selected from O, N or S. Examples of said alkyl include, but are not limited to, methyl, ethyl, ethenyl, ethynyl, n-propyl, isopropyl, propenyl, isopropenyl, propynyl.

Термин "С₁алкил" означает замещенную или незамещенную алкильную группу, имеющую 1 углеродный атом. Пример указанного алкила включает в себя, без ограничений, метил.The term “C ₁ alkyl” means a substituted or unsubstituted alkyl group having 1 carbon atom. An example of said alkyl includes, without limitation, methyl.

Термин "C₁-С₆алкокси" означает алкил-O-группу, где C₁-С₆алкил такой, как определено выше.The term "C ₁ -C ₆ alkoxy" means an alkyl-O-group, where C ₁ -C ₆ alkyl is as defined above.

Термин "C₁-С₃алкокси" означает алкил-O-группу, где C₁-С₃алкил такой, как определено выше.The term "C ₁ -C ₃ alkoxy" means an alkyl-O-group, where C ₁ -C ₃ alkyl is as defined above.

Термин "гетероциклил" означает замещенную или незамещенную, 4-10-членную моноциклическую или многоциклическую кольцевую систему, в которой один или более чем один атом в кольце или в кольцах является элементом, отличным от углерода, например азотом, кислородом или серой, в частности 4-, 5- или 6-членные ароматические или алифатические гетероциклические группы, и включает, без ограничений, азетидиновую, фурановую, тиофеновую, пиррольную, пирролиновую, пирролидиновую, диоксолановую, оксатиолановую, оксазолановую, оксазольную, тиазольную, имидазольную, имидазолиновую, имидазолидиновую, пиразольную, пиразолиновую, пиразолидиновую, изоксазольную, изотиазольную, оксадиазольную, фуразановую, триазольную, тиадиазольную, пирановую, пиридиновую, пиперидиновую, диоксановую, морфолиновую, дитиановую, оксатиановую, тиоморфолиновую, пиридазиновую, пиримидиновую, пиразиновую, пиперазиновую, триазиновую, тиадиазиновую, дитиазиновую, азаиндольную, азаиндолиновую, индольную, индолиновую, нафтиридиновую группы и, что очевидно, включают все изомеры вышеназванных групп. Очевидно, что, например, термин "азетидинил" включает в себя 2- и 3-изомеры, а термины "пиридил" и "пиперидинил" включают в себя 2-, 3- и 4-изомеры.The term "heterocyclyl" means a substituted or unsubstituted, 4-10 membered monocyclic or multicyclic ring system in which one or more than one atom in the ring or rings is an element other than carbon, for example nitrogen, oxygen or sulfur, in particular 4 -, 5- or 6-membered aromatic or aliphatic heterocyclic groups, and includes, without limitation, azetidine, furan, thiophene, pyrrole, pyrroline, pyrrolidine, dioxolane, oxathiolane, oxazolane, oxazole, thiazole, imide Aulnay, imidazoline, imidazolidine, pyrazole, pyrazoline, pyrazolidine, isoxazole, isothiazole, oxadiazole, furazan, triazole, thiadiazole, pyran, pyridine, piperidine, the dioxane, morpholine, dithiane, oksatianovuyu, thiomorpholine, pyridazine, pyrimidine, pyrazine, piperazine, triazine, thiadiazine, dithiazine, azaindole, azaindole, indole, indoline, naphthyridine groups and, obviously, include all isomers of the above groups. Obviously, for example, the term “azetidinyl” includes 2- and 3-isomers, and the terms “pyridyl” and “piperidinyl” include 2-, 3-, and 4-isomers.

Термин "циклоалкил" означает насыщенное или ненасыщенное, замещенное или незамещенное, неароматическое кольцо, состоящее из 3, 4, 5, 6 или 7 углеродных атомов, и включает в себя, без ограничений, группы циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклобутенил, циклопентенил, циклогексенил, циклогептенил, циклопентадиенил, циклогексадиенил или циклогептадиенил.The term "cycloalkyl" means a saturated or unsaturated, substituted or unsubstituted, non-aromatic ring consisting of 3, 4, 5, 6 or 7 carbon atoms, and includes, without limitation, groups of cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, cyclobutenyl , cyclopentenyl, cyclohexenyl, cycloheptenyl, cyclopentadienyl, cyclohexadienyl or cycloheptadienyl.

Термин "галоген" включает в себя группы фторо, хлоро, бромо и йодо.The term “halogen” includes fluoro, chloro, bromo and iodo groups.

Термин "арил" означает замещенный или незамещенный С₆-С₁₄ ароматический углеводород и включает в себя, без ограничений, фенил, нафтил, инденил, антраценил, фенантренил и флуоренил.The term “aryl” means a substituted or unsubstituted C ₆ -C ₁₄ aromatic hydrocarbon and includes, without limitation, phenyl, naphthyl, indenyl, anthracenyl, phenanthrenyl and fluorenyl.

Термин "арилокси" означает арил-O-группу, где арил такой, как определено выше.The term "aryloxy" means an aryl-O-group, where aryl is as defined above.

Термин "ацил" означает алкил-СО-группу, где алкил такой, как определено выше.The term “acyl” means an alkyl-CO— group wherein alkyl is as defined above.

Термин "ароил" означает арил-СО-группу, где арил такой, как определено выше.The term "aroyl" means an aryl-CO group, where aryl is as defined above.

Термин "алкилтио" означает алкил-S-группу, где алкил такой, как определено выше.The term "alkylthio" means an alkyl-S-group, where alkyl is as defined above.

Термин "арилтио" означает арил-S-группу, где арил такой, как определено выше.The term “arylthio” means an aryl-S group, wherein aryl is as defined above.

Термин "ароиламино" означает ароил-N(Z)-группу, где ароил и Z такие, как определено выше.The term “aroylamino” means an aroyl-N (Z) group, wherein aroylamino and Z are as defined above.

Термин "ациламино" означает ацил-N(Z)-группу, где ацил и Z такие, как определено выше.The term “acylamino” means an acyl-N (Z) group, wherein acyl and Z are as defined above.

Термин "карбамоил" означает H₂N-CO-группу.The term "carbamoyl" means an H ₂ N-CO group.

Термин "алкилкарбамоил" означает Z₂N-CO-группу, где Z такой, как определено выше.The term “alkylcarbamoyl” means a Z ₂ N — CO group, wherein Z is as defined above.

Термин "замещенный" означает группу "С₁алкил", "С₁-С₃алкил", "С₁-С₆алкил", "циклоалкил", "гетероциклил" или "арил", как определено выше, которая замещена одной или более чем одной ацильной, ациламино, алкильной, алкилкарбамоильной, алкилтио, алкокси, ароильной, ароиламино, арилокси, арилтио, амидино, амино, арильной, карбамоильной, карбокси, циано, циклоалкильной, формильной, гуанидино, галогено, гетероциклильной, гидрокси, оксо, нитро, тиольной, тио, Z₂N-CO-O-, ZO-CO-NZ или Z₂N-CO-NZ-группой.The term "substituted" means a group of "C ₁ alkyl", "C ₁ -C ₃ alkyl", "C ₁ -C ₆ alkyl", "cycloalkyl", "heterocyclyl" or "aryl", as defined above, which is substituted by one or more than one acyl, acylamino, alkyl, alkylcarbamoyl, alkylthio, alkoxy, aroyl, aroylamino, aryloxy, arylthio, amidino, amino, aryl, carbamoyl, carboxy, cyano, cycloalkyl, formyl, guanidino, halogeno, hydroxycyclic thiol, thio, Z ₂ N-CO-O-, ZO-CO-NZ or Z ₂ N-CO-NZ-group.

Кроме того, соединения формулы I, где R₄ представляет собой меркапто, могут находиться в форме димера, соединенного через -S-S-связь, который также включен в данное изобретение.In addition, the compounds of formula I, where R ₄ is mercapto, may be in the form of a dimer connected via an -SS bond, which is also included in this invention.

Как чистые энантиомеры, так и рацемические смеси и неравные смеси двух энантиомеров входят в объем настоящего изобретения. Очевидно, что все возможные диастереомерные формы входят в объем настоящего изобретения.Both pure enantiomers and racemic mixtures and unequal mixtures of two enantiomers are included in the scope of the present invention. Obviously, all possible diastereomeric forms are included in the scope of the present invention.

В зависимости от условий способа получения соединения формулы I получают либо в нейтральной, либо в солевой форме или в виде сольвата, например гидрата, и все они входят в объем настоящего изобретения.Depending on the conditions of the preparation method, the compounds of formula I are prepared either in neutral, in salt form or in the form of a solvate, for example a hydrate, and all of them are within the scope of the present invention.

Также включены в данное изобретение все производные соединений формулы I и II, которые имеют биологическую функцию соединений формулы I и II соответственно. Например, некоторые защищенные производные соединений формулы I и II могут быть получены до последней стадии удаления защиты с образованием соединений формулы I и II соответственно.Also included in this invention are all derivatives of compounds of formula I and II that have the biological function of compounds of formula I and II, respectively. For example, some protected derivatives of compounds of formula I and II can be prepared prior to the last deprotection step to form compounds of formula I and II, respectively.

Использование защитных групп описано в "Protective Groups in Organic Synthesis", 2nd edition, T.W.Greene & P.G.M. Wutz, Wiley-Interscience (1991). Защитной группой может быть также полимерная смола, такая как смола Ванга или 2-хлортритилхлоридная смола.The use of protecting groups is described in "Protective Groups in Organic Synthesis", 2nd edition, T.W. Greene & P.G.M. Wutz, Wiley-Interscience (1991). The protecting group may also be a polymer resin, such as a Wang resin or a 2-chlorotrityl chloride resin.

Для специалистов в данной области также очевидно, что хотя такие защищенные производные соединений формулы I и II сами по себе могут и не обладать фармакологической активностью, они могут быть введены парентерально или перорально вместе с ингибитором тромбина, и после этого метаболизироваться в организме с образованием соединений формулы I и II, которые фармакологически активны. Такие производные могут быть, следовательно, охарактеризованы как "пролекарства". Все пролекарства соединений формулы I и II включены в объем данного изобретения.It will also be apparent to those skilled in the art that although such protected derivatives of the compounds of formula I and II may themselves not have pharmacological activity, they can be administered parenterally or orally with a thrombin inhibitor, and then metabolized in the body to form compounds of the formula I and II, which are pharmacologically active. Such derivatives can therefore be characterized as "prodrugs". All prodrugs of the compounds of formula I and II are included within the scope of this invention.

В настоящей заявке ингибиторы CPU включают химические модификации, такие как сложные эфиры, пролекарства и метаболиты, как активные, так и не активные, и фармацевтически приемлемые соли любого из перечисленного.In this application, CPU inhibitors include chemical modifications, such as esters, prodrugs and metabolites, both active and inactive, and pharmaceutically acceptable salts of any of the above.

Получение ингибиторов CPU обшей формулы IObtaining CPU inhibitors of the general formula I

Ингибиторы CPU общей формулы I могут быть получены следующими способами А-В.Inhibitors of the CPU of General formula I can be obtained by the following methods AB.

Способ АMethod A

Способ А получения соединений общей формулы I, где R₁, R₃, R₄ и Y такие, как определено выше, R₂ представляет собой Н, и Х представляет собой C(Z)₂, включает в себя следующие стадии:Method A for the preparation of compounds of general formula I, wherein R ₁ , R ₃ , R ₄ and Y are as defined above, R ₂ is H, and X is C (Z) ₂ , the process includes the following steps:

а) Соединения общей формулы IIIa) Compounds of General Formula III

где R₁ такой, как определено для формулы I, a X представляет собой C(Z)₂, которые либо имеются в продаже, либо их можно получить с использованием известных методик, могут быть превращены в соединение общей формулы IVwhere R ₁ is as defined for formula I, and X is C (Z) ₂ , which are either commercially available or can be obtained using known methods, can be converted into a compound of general formula IV

где L является подходящей уходящей группой, такой как хлоро, бромо, иодо, трифлат или тозил, в стандартных условиях с использованием подходящего реагента, такого как РРh₃/СВr₄, TosCl/пиридин или (СF₃SО₂)₂О/ТЕА.where L is a suitable leaving group, such as chloro, bromo, iodo, triflate, or tosyl, under standard conditions, using a suitable reagent such as PPh ₃ / CBr ₄ , TosCl / pyridine or (CF ₃ SO ₂ ) ₂ O / TEA.

б) Соединения общей формулы IV затем может быть подвергнуто взаимодействию с соединениями общей формулы Vb) The compounds of general formula IV can then be reacted with compounds of general formula V

где R₂ и R₃ такие, как определено для формулы I, которые либо имеются в продаже, либо их можно получить с использованием известных методик, в присутствии подходящего основания, такого как К₂СО_з или NaH, в стандартных условиях, с получением соединений общей формулы VIwherein R ₂ and R ₃ are as defined for formula I, which are either commercially available or can be prepared using known methods, in the presence of a suitable base such as K ₂ CO _s or NaH, under standard conditions to give compounds general formula VI

в) Соединения общей формулы VI, где R₁ и R₃ такие, как определено для формулы I, Х представляет собой C(Z)₂, и R₂ представляет собой Н, затем могут быть превращены в соединения общей формулы VIIc) Compounds of general formula VI, wherein R ₁ and R ₃ are as defined for formula I, X is C (Z) ₂ , and R ₂ is H, then can be converted to compounds of general formula VII

путем обработки формальдегидом в присутствии подходящего основания, такого как Et₂NH, в стандартных условиях.by treatment with formaldehyde in the presence of a suitable base, such as Et ₂ NH, under standard conditions.

г) Соединения общей формулы VII могут быть получены также путем обработки соединений общей формулы VIIIg) Compounds of general formula VII can also be obtained by treating compounds of general formula VIII

где R₃ и R₅ такие, как определено для формулы I, алкилирующим агентом общей формулы IV в присутствии подходящего основания, такого как LDA или NaH, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы IXwhere R ₃ and R ₅ are as defined for formula I, an alkylating agent of general formula IV in the presence of a suitable base such as LDA or NaH, under standard conditions, to obtain compounds of general formula IX

д) Соединения общей формулы IX затем могут быть подвергнуты взаимодействию с соответствующим альдегидом или кетоном OC(Z)₂ в присутствии подходящего основания, такого как KOtBu, LDA или NaH, в стандартных условиях с получением соединения общей формулы VIIe) The compounds of general formula IX can then be reacted with the corresponding aldehyde or ketone OC (Z) ₂ in the presence of a suitable base such as KOtBu, LDA or NaH, under standard conditions to give a compound of general formula VII

е) Соединения общей формулы VII далее могут быть подвергнуты взаимодействию с соединениями общей формулы X,e) The compounds of general formula VII may then be reacted with compounds of general formula X,

где R₅ является подходящей защитной группой, такой как Ac, Bz, РМВ или Вn, одни или в присутствии подходящего основания, такого как NaOMe, NaH или триэтиламин, или, альтернативно, в присутствии свободно-радикального инициатора, такого как AIBN, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R₁, R₃, R₄ и Y такие, как определено для формулы I, R₂ представляет собой Н, и Х представляет собой C(Z)₂.where R ₅ is a suitable protecting group, such as Ac, Bz, PMB or Bn, alone or in the presence of a suitable base, such as NaOMe, NaH or triethylamine, or, alternatively, in the presence of a free radical initiator, such as AIBN, in standard conditions to obtain compounds of General formula I, where R ₁ , R ₃ , R ₄ and Y are as defined for formula I, R ₂ represents H, and X represents C (Z) ₂ .

Способ БMethod B

Способ Б получения соединений общей формулы I, где R₁, R₂, R₃ и R₄ такие, как определено в формуле I, Y представляет собой СН₂, и Х представляет собой О, S, SO, SO₂, C(Z)₂ или N(Z), включает следующие стадии:Method B for preparing compounds of general formula I, where R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ are as defined in formula I, Y is CH ₂ , and X is O, S, SO, SO ₂ , C (Z ) ₂ or N (Z), includes the following stages:

а) Соединение общей формулы XIa) The compound of General formula XI

где R₁ такой, как определено для формулы I, а Х представляет собой О, S или N(Z), с алкилирующим агентом общей формулы XIIwhere R ₁ is as defined for formula I, and X represents O, S or N (Z), with an alkylating agent of General formula XII

где R₂ и R₃ такие, как определено для формулы I, a L является подходящей уходящей группой, такой как хлоро, бромо, иодо, трифлатная или тозилатная группа, в стандартных условиях с использованием подходящих реагентов, таких как NaH, Аg₂СО₃ или Bu₄NHSO₄/NaOH, с получением соединений общей формулы XIIIwhere R ₂ and R ₃ are as defined for formula I, and L is a suitable leaving group, such as a chloro, bromo, iodo, triflate or tosylate group, under standard conditions using suitable reagents such as NaH, Ag ₂ CO ₃ or Bu ₄ NHSO ₄ / NaOH to give compounds of general formula XIII

б) Соединения общей формулы XIII затем могут быть подвергнуты взаимодействию с диоксидом углерода в присутствии подходящего основания, такого как LDA или KHMDS, в стандартных условиях с получением соединения общей формулы XIVb) Compounds of general formula XIII can then be reacted with carbon dioxide in the presence of a suitable base such as LDA or KHMDS under standard conditions to give a compound of general formula XIV

в) Соединения общей формулы XIV затем могут быть подвергнуты взаимодействию с алкилхлорформиатом, таким как CICOOMe, в присутствии основания, такого как триэтиламин, после чего образовавшийся смешанный ангидрид восстанавливают подходящим восстанавливающим агентом, таким как NaBH₄, в стандартных условиях с получением соединения общей формулы XVc) The compounds of general formula XIV can then be reacted with an alkyl chloroformate such as CICOOMe in the presence of a base such as triethylamine, after which the resulting mixed anhydride is reduced with a suitable reducing agent such as NaBH ₄ under standard conditions to give a compound of general formula XV

г) Соединения общей формулы XV затем могут быть подвергнуты взаимодействию с соединением общей формулы Xd) Compounds of general formula XV may then be reacted with a compound of general formula X

где R₅ является подходящей защитной группой, такой как Ас или Bz, в присутствии подходящего реагента, такого как РРh₃/DIAD, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R₁, R₂, R₃ и R₄ такие, как определено выше, Y представляет собой СН₂, и Х представляет собой О, S, C(Z)₂ или N(Z).where R ₅ is a suitable protecting group, such as Ac or Bz, in the presence of a suitable reagent, such as PPh ₃ / DIAD, under standard conditions to obtain compounds of General formula I, where R ₁ , R ₂ , R ₃ and R _{4 are} such as defined above, Y represents CH ₂ , and X represents O, S, C (Z) ₂ or N (Z).

д) Соединения общей формулы I, где R₁, R₂, R₃, R₄ и Y такие, как определено выше, а Х представляет собой S, затем могут быть подвергнуты взаимодействию с подходящим окисляющим реагентом, таким как МСРВА, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R₁, R₂, R₃, R₄ и Y такие, как определено выше, а Х представляет собой SO или SO₂.e) Compounds of general formula I, wherein R ₁ , R ₂ , R ₃ , R ₄ and Y are as defined above and X is S, then they can be reacted with a suitable oxidizing reagent, such as MCPBA, under standard conditions to give compounds of general formula I, wherein R ₁ , R ₂ , R ₃ , R ₄ and Y are as defined above, and X is SO or SO ₂ .

Способ ВMethod B

Способ В получения соединений общей формулы I, где R₁, R₂, R₃, R₄ и Y такие, как определено выше, а Х представляет собой NR₆CO, CONR₆, SO₂NR₆ или NR₆SO₂, включает следующие стадии:Method B, compounds of general formula I, wherein R ₁ , R ₂ , R ₃ , R ₄ and Y are as defined above and X is NR ₆ CO, CONR ₆ , SO ₂ NR ₆ or NR ₆ SO ₂ , comprises following stages:

а) Соединение общей формулы XVIa) The compound of General formula XVI

где R₂, R₃, R₆ и Y такие, как определено для формулы I, a R₅ является подходящей защитной группой, такой как Ac, Bz, PMB или Вn, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы XVIIwhere R ₂ , R ₃ , R ₆ and Y are as defined for formula I, and R ₅ is a suitable protecting group, such as Ac, Bz, PMB or Bn, is reacted with a compound of general formula XVII

где R₁ такой, как определено для формулы I, а Х представляет собой СООН или SO₂Cl, в присутствии подходящих связывающих реагентов, таких как PyBOP/DIPEA, DCC/HOBt, EDC/TEA/DMAP или пиридин, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R₁, R₂, R₃, R₄ и Y такие, как определено выше, а Х представляет собой NR₆CO или NR₆SO₂.where R ₁ is as defined for formula I, and X represents COOH or SO ₂ Cl, in the presence of suitable binding reagents, such as PyBOP / DIPEA, DCC / HOBt, EDC / TEA / DMAP or pyridine, under standard conditions to obtain compounds of General formula I, where R ₁ , R ₂ , R ₃ , R ₄ and Y are as defined above, and X represents NR ₆ CO or NR ₆ SO ₂ .

б) Соединение общей формулы XVIIIb) The compound of General formula XVIII

где R₂, R₃ и Y такие, как определено для формулы I, X представляет собой СООН или SO₂Cl, и R₅ является подходящей защитной группой, такой как Ас, Bz, PMB или Вn, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы XIXwhere R ₂ , R ₃ and Y are as defined for formula I, X is COOH or SO ₂ Cl, and R ₅ is a suitable protecting group, such as Ac, Bz, PMB or Bn, is reacted with a compound of general formula XIX

где R₆ такой, как определено для формулы I, в присутствии подходящих связывающих реагентов, таких как PyBOP/DIPEA, DCC/HOBt, EDCIEADMAP или пиридин, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R₁, R₂, R₃, R₄ и Y такие, как определено выше, а Х представляет собой CONR₆ или SO₂NR₆.where R ₆ is as defined for formula I, in the presence of suitable binding reagents, such as PyBOP / DIPEA, DCC / HOBt, EDCIEADMAP or pyridine, under standard conditions to obtain compounds of General formula I, where R ₁ , R ₂ , R ₃ , R ₄ and Y are as defined above, and X represents CONR ₆ or SO ₂ NR ₆ .

Получение ингибиторов CPU обшей формулы IIObtaining CPU inhibitors of the general formula II

Ингибиторы CPU общей формулы II могут быть получены следующими способами Г-Ж.Inhibitors of the CPU of General formula II can be obtained by the following methods MF.

Способ ГMethod D

Способ Г получения соединений общей формулы II, где R₇, R₁₁, R₁₂ и Z такие, как определено выше, R₈ представляет собой Н, R₉ представляет собой COOR₁₁,Method D for the preparation of compounds of general formula II, wherein R ₇ , R ₁₁ , R ₁₂ and Z are as defined above, R ₈ is H, R ₉ is COOR ₁₁ ,

Х представляет собой C(Z)₂, и Y представляет собой C(Z)₂, включает следующие стадии:X represents C (Z) ₂ , and Y represents C (Z) ₂ , includes the following steps:

а) Соединения общей формулы XXa) Compounds of General Formula XX

где R₇ и Z такие, как определено для формулы II, а Х представляет собой C(Z)₂, которые либо имеются в продаже, либо могут быть получены с использованием известных методик, могут быть превращены в соединение общей формулы XXIwhere R ₇ and Z are as defined for formula II, and X represents C (Z) ₂ , which are either commercially available or can be obtained using known methods, can be converted into a compound of General formula XXI

где L является подходящей уходящей группой, такой как хлоро, бромо, иодо, трифлат или тозил, в стандартных условиях с использованием подходящего реагента, такого как РРh₃/СВr₄, TosCl/пиридин или (СF₃SO₂)₂O/ТЕА.where L is a suitable leaving group, such as chloro, bromo, iodo, triflate or tosyl, under standard conditions, using a suitable reagent such as PPh ₃ / CBr ₄ , TosCl / pyridine or (CF ₃ SO ₂ ) ₂ O / TEA.

б) Соединения общей формулы XXI затем могут быть подвергнуты взаимодействию с соединениями общей формулы XXIIb) Compounds of general formula XXI may then be reacted with compounds of general formula XXII

которые либо имеются в продаже, либо могут быть получены с использованием известных методик, в присутствии подходящего основания, такого как К₂СО_з или NaH, в стандартных условиях с получением соединений общей формулыare either commercially available or can be prepared using known methods, in the presence of a suitable base such as K ₂ CO _s or NaH, under standard conditions to give compounds of the general formula

в) Соединения общей формулы XXIII затем могут быть превращены в соединения общей формулы XXIVc) Compounds of general formula XXIII can then be converted into compounds of general formula XXIV

Однако если Y представляет собой CH(Z), то соединения общей формулы XXIV могут быть получены путем обработки соединений общей формулы XXVHowever, if Y is CH (Z), then compounds of general formula XXIV can be obtained by treating compounds of general formula XXV

алкилирующим агентом общей формулы XXI,an alkylating agent of the general formula XXI,

где R₇ такой, как определено для формулы II, a L является подходящей уходящей группой, такой как хлоро, бромо, иодо, трифлатная или тозильная группа, в присутствии подходящего основания, такого как LDA или NaH в стандартных условиях с получением соединений общей формулы XXVIwhere R ₇ is as defined for formula II, a L is a suitable leaving group, such as a chloro, bromo, iodo, triflate or tosyl group, in the presence of a suitable base such as LDA or NaH under standard conditions to give compounds of general formula XXVI

Соединения общей формулы XXVI затем могут быть подвергнуты взаимодействию с подходящим альдегидом CHO(Z), где Z такой, как определено для формулы II, в присутствии подходящего основания, такого как KOtBu, LDA или NaH, в стандартных условиях с получением соединения общей формулы XXIV.Compounds of general formula XXVI can then be reacted with a suitable aldehyde CHO (Z), where Z is as defined for formula II, in the presence of a suitable base such as KOtBu, LDA or NaH, under standard conditions to give a compound of general formula XXIV.

г) Соединения общей формулы XXIV далее могут быть подвергнуты взаимодействию с соединениями общей формулы XXVIId) Compounds of general formula XXIV may then be reacted with compounds of general formula XXVII

где R₁₂ такой, как определено для формулы II, в присутствии подходящего реагента, такого как BSA или HMDS, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы II, где R₇, R₁₁, R₁₂ и Z такие, как определено выше, R₈ представляет собой Н, R₉ представляет собой COOR₁₁, R₁₀ представляет собой группуwhere R ₁₂ is as defined for formula II, in the presence of a suitable reagent, such as BSA or HMDS, under standard conditions to obtain compounds of general formula II, where R ₇ , R ₁₁ , R ₁₂ and Z are as defined above, R ₈ represents H, R ₉ represents COOR ₁₁ , R ₁₀ represents a group

Х представляет собой C(Z)₂, и Y представляет собой C(Z)₂.X represents C (Z) ₂ , and Y represents C (Z) ₂ .

Способ ДMethod D

Способ Д получения соединений общей формулы II, где R₇, R₈, R₁₁, R₁₂ и Z такие, как определено выше, R₉ представляет собой COOR₁₁, X представляет собой C(Z)₂, Y представляет собой О, и R₁₀ представляет собой группуMethod D for the preparation of compounds of general formula II, wherein R ₇ , R ₈ , R ₁₁ , R ₁₂ and Z are as defined above, R ₉ is COOR ₁₁ , X is C (Z) ₂ , Y is O, and R ₁₀ represents a group

включает следующие стадии:includes the following stages:

а) Соединение общей формулы XXVIIIa) The compound of General formula XXVIII

где R₇, R₈ и Z такие, как определено для формулы II, а Х представляет собой C(Z)₂, подвергают реакции в присутствии подходящих реагентов, таких как TMSCN/ZnI₂ или КСМ/НОАс, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы XXIX,where R ₇ , R ₈ and Z are as defined for formula II and X is C (Z) ₂ , the reaction is carried out in the presence of suitable reagents, such as TMSCN / ZnI ₂ or KSM / HOAc, under standard conditions to give compounds general formula XXIX,

где R₇ и R₈ такие, как определено для формулы II, а Х представляет собой C(Z)₂.where R ₇ and R ₈ are as defined for formula II, and X represents C (Z) ₂ .

б) Соединения общей формулы XXIX затем могут быть обработаны подходящими реагентами, такими как НСl или HCl/MeOH, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы XXXb) Compounds of general formula XXIX can then be treated with suitable reagents, such as Hcl or HCl / MeOH, under standard conditions to give compounds of general formula XXX

где R₇ и R₈ такие, как определено в формуле II, и Х представляет собой C(Z)₂.where R ₇ and R ₈ are as defined in formula II, and X represents C (Z) ₂ .

в) Соединения общей формулы XXX после этого могут быть подвергнуты взаимодействию с соединениями общей формулы XXXIc) Compounds of general formula XXX may then be reacted with compounds of general formula XXXI

где R₁₂ такой, как определено для общей формулы II, которые либо имеются в продаже, хорошо известны в литературе, либо могут быть получены с использованием известных методик, в присутствии подходящих связывающих реагентов, таких как DCC/DMAP, PyBOP/DIPEA, или SOCl₂, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы II, где R₇, R₈, R₁₁, R₁₂ и Z такие, как определено выше, R₉ представляет собой COOR₁₁, R₁₀ представляет собой группуwhere R ₁₂ is as defined for general formula II, which are either commercially available, are well known in the literature, or can be prepared using known techniques in the presence of suitable coupling reagents such as DCC / DMAP, PyBOP / DIPEA, or SOCl ₂ , under standard conditions, to obtain compounds of the general formula II, wherein R ₇ , R ₈ , R ₁₁ , R ₁₂ and Z are as defined above, R ₉ is COOR ₁₁ , R ₁₀ is a group

Х представляет собой C(Z)₂, и Y является О.X represents C (Z) ₂ , and Y is O.

Способ ЕMethod E

Способ Е получения соединений общей формулы II, где R₇ и R₈ такие, как определено выше, а Х и Y представляют собой C(Z)₂ или одинарную связь, и R₉ и R₁₀ представляют собой COOR₁₁, включает следующие стадии:Method E for the preparation of compounds of general formula II, wherein R ₇ and R ₈ are as defined above, and X and Y are C (Z) ₂ or a single bond, and R ₉ and R ₁₀ are COOR ₁₁ , comprising the following steps:

а) Соединение общей формулы XXXIIa) The compound of General formula XXXII

где R₈ и R₁₁ такие, как определено для формулы II, а Y представляет собой C(Z)₂ или одинарную связь, которое либо имеется в продаже, хорошо известно в литературе, либо может быть получено с использованием известных методик, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы XXIwhere R ₈ and R ₁₁ are as defined for formula II, and Y represents C (Z) ₂ or a single bond, which is either commercially available, is well known in the literature, or can be obtained using known methods, is reacted with the compound of General formula XXI

где R₇ такой, как определено для формулы II, Х представляет собой C(Z)₂, и L является подходящей уходящей группой, такой как Cl, Вr, I или тозил, в присутствии подходящего основания, такого как LDA или NaH, в стандартных условиях, с получением соединения общей формулы XXXIIIwhere R ₇ is as defined for formula II, X is C (Z) ₂ , and L is a suitable leaving group, such as Cl, Br, I or tosyl, in the presence of a suitable base such as LDA or NaH, in standard conditions, obtaining compounds of General formula XXXIII

б) Соединение общей формулы XXXIII гидролизуют, например обработкой водным NaOH или водной TFA в стандартных условиях с получением соединения общей формулы II, где R₇ и R₈ такие, как определено выше, Х и Y представляют собой C(Z)₂ или простую связь, и R₉ и R₁₀ представляют собой СООН.b) The compound of general formula XXXIII is hydrolyzed, for example, by treatment with aqueous NaOH or aqueous TFA under standard conditions to give a compound of general formula II, where R ₇ and R ₈ are as defined above, X and Y are C (Z) ₂ or a single bond and R ₉ and R ₁₀ are COOH.

Способ ЖMethod W

Способ Ж получения соединений общей формулы II, где R₇, R₈, R₁₁, R₁₃, X, Y и Z такие, как определено выше, R₉ представляет собой COOR₁₁, и R₁₀ представляет собой группуMethod G for the preparation of compounds of general formula II, wherein R ₇ , R ₈ , R ₁₁ , R ₁₃ , X, Y, and Z are as defined above, R ₉ is COOR ₁₁ , and R ₁₀ is a group

включает следующие стадии:includes the following stages:

а) Соединения общей формулы XXXIII,a) Compounds of General formula XXXIII,

могут быть подвергнуты взаимодействию с соединениями общей формулы XXXIVmay be reacted with compounds of the general formula XXXIV

где R₁₃ такой, как определено для формулы II, в присутствии подходящих реагентов, таких как DCC/DMAP, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы II, где R₇, R₈, R₁₁, R₁₃, X, Y и Z такие, как определено выше, R₉ представляет собой COOR₁₁, и R₁₀ представляет собой группуwhere R ₁₃ is as defined for formula II, in the presence of suitable reagents, such as DCC / DMAP, under standard conditions to obtain compounds of General formula II, where R ₇ , R ₈ , R ₁₁ , R ₁₃ , X, Y and Z such as defined above, R ₉ represents COOR ₁₁ , and R ₁₀ represents a group

Ингибиторы тромбинаThrombin inhibitors

Ингибиторы тромбина, упоминаемые в данной заявке, включают, без ограничений, низкомолекулярные ингибиторы тромбина. Термин "низкомолекулярный ингибитор тромбина" понятен специалистам в данной области техники. Следует также иметь в виду, что этот термин охватывает любую композицию вещества (например, химического соединения), которая ингибирует тромбин до экспериментально определяемой степени в in vivo и/или in vitro тестах и которая имеет молекулярную массу ниже приблизительно 2000, предпочтительно ниже приблизительно 1000.The thrombin inhibitors referred to in this application include, without limitation, low molecular weight thrombin inhibitors. The term "low molecular weight thrombin inhibitor" is understood by specialists in this field of technology. It should also be borne in mind that this term encompasses any composition of a substance (e.g., a chemical compound) that inhibits thrombin to an experimentally determined degree in in vivo and / or in vitro tests and which has a molecular weight below about 2000, preferably below about 1000.

Предпочтительные низкомолекулярные ингибиторы тромбина включают низкомолекулярные ингибиторы тромбина на основе пептидов, на основе аминокислот и/или на основе аналогов пептидов.Preferred low molecular weight thrombin inhibitors include peptide, amino acid and / or peptide analogue low molecular weight thrombin inhibitors.

Для специалистов в данной области очевидно, что термин "низкомолекулярные ингибиторы тромбина на основе пептидов, на основе аминокислот и/или на основе аналогов пептидов" охватывает низкомолекулярные ингибиторы тромбина с одной-четырьмя пептидными связями и охватывает ингибиторы, описанные в обзоре Claesson в Blood Coagul. Fibrin. (1994) 5, 411, а также описанные в патенте США №4346078, Международных патентных заявках WO 93/11152, WO 93/18060, WO 93/05069, WO 94/20467, WO 94/29336, WO 95/35309, WO 95/23609, WO 96/03374, WO 96/06832, WO 96/06849, WO 96/25426, WO 96/32110, WO 97/01338, WO 97/02284, WO 97/15190, WO 97/30708, WO 97/40024, WO 97/46577, WO 98/06740, WO 97/49404, WO 97/11693, WO 97/24135, WO 97/47299, WO 98/01422, WO 98/57932, WO 99/29664, WO 98/06741, WO 99/37668, WO 99/37611, WO 98/37075, WO 99/00371, WO 99/28297, WO 99/29670, WO 99/40072, WO 99/54313, WO 96/31504, WO 00/01704 и WO 00/08014; и в Европейских патентных заявках 648780, 468231, 559046, 641779, 185390, 526877, 542525, 195212, 362002, 364344, 530167, 293881, 686642, 669317, 601459 и 623596. Содержание всех этих документов включено в данное описание изобретения ссылкой.It will be apparent to those skilled in the art that the term “low molecular weight peptide-based thrombin inhibitors based on amino acids and / or peptide analogs” encompasses low molecular weight thrombin inhibitors with one to four peptide bonds and encompasses the inhibitors described in the Claesson review of Blood Coagul. Fibrin. (1994) 5, 411, and also described in US Pat. No. 4,346,078, International Patent Applications WO 93/11152, WO 93/18060, WO 93/05069, WO 94/20467, WO 94/29336, WO 95/35309, WO 95/23609, WO 96/03374, WO 96/06832, WO 96/06849, WO 96/25426, WO 96/32110, WO 97/01338, WO 97/02284, WO 97/15190, WO 97/30708, WO 97/40024, WO 97/46577, WO 98/06740, WO 97/49404, WO 97/11693, WO 97/24135, WO 97/47299, WO 98/01422, WO 98/57932, WO 99/29664, WO 98/06741, WO 99/37668, WO 99/37611, WO 98/37075, WO 99/00371, WO 99/28297, WO 99/29670, WO 99/40072, WO 99/54313, WO 96/31504, WO 00/01704 and WO 00/08014; and in European patent applications 648780, 468231, 559046, 641779, 185390, 526877, 542525, 195212, 362002, 364344, 530167, 293881, 686642, 669317, 601459 and 623596. The contents of all these documents are incorporated into this description by reference.

В настоящей заявке производные ингибиторов тромбина включают химические модификации, такие как сложные эфиры, пролекарства и метаболиты, как активные, так и не активные, и фармацевтически приемлемые соли и сольваты, например гидраты любого из них и сольваты любой такой соли.Derivatives of thrombin inhibitors herein include chemical modifications such as esters, prodrugs and metabolites, both active and inactive, and pharmaceutically acceptable salts and solvates, for example, hydrates of any of them and solvates of any such salt.

Предпочтительные низкомолекулярные ингибиторы тромбина на основе пептидов включают ингибиторы, известные под общим названием "гатраны". Конкретные гатраны, которые можно упомянуть, включают HOOC-CH₂-(R)Cha-Pic-Nag-H (известный как иногатран) и HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H (известный как мелагатран) (Международная патентная заявка WO 93/11152 и WO 94/29336 соответственно и список сокращений, приведенный здесь).Preferred low molecular weight peptide-based thrombin inhibitors include inhibitors known collectively as “gatranes”. Specific haatrans that may be mentioned include HOOC-CH ₂ - (R) Cha-Pic-Nag-H (known as inogatran) and HOOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-H (known as melagatran) ( International patent application WO 93/11152 and WO 94/29336, respectively, and the list of abbreviations given here).

В Международной патентной заявке WO 97/234499 раскрыт целый ряд соединений, которые, как было обнаружено, полезны в качестве пролекарств ингибиторов тромбина. Указанные пролекарства имеют общую формулуInternational patent application WO 97/234499 discloses a number of compounds that have been found to be useful as prodrugs of thrombin inhibitors. These prodrugs have the general formula

R^aOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-R^b R ^a OOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-R ^b

где R^a представляет собой Н, бензил или C₁-С₁₀алкил, R^b (который замещает один из атомов водорода в амидиновой единице Pab-H) представляет собой ОН, ОС(O)R^c или OC(O)R^d, R^c представляет собой С₁-С₁₇алкил, фенил или 2-нафтил, и R^d представляет собой С₁-С₁₂алкил, фенил, С₁-С₃алкилфенил или 2-нафтил. Предпочтительные соединения включают R^aOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-ОН, где R^a представляет собой бензил или C₁-С₁₀алкил, например этил или изопропил, в частности EtOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH. Сами активные ингибиторы тромбина раскрыты в WO 94/29336.where R ^a represents H, benzyl or C ₁ -C ₁₀ alkyl, R ^b (which replaces one of the hydrogen atoms in the amidine unit of Pab-H) represents OH, OC (O) R ^c or OC (O) R ^d , R ^c represents C ₁ -C ₁₇ alkyl, phenyl or 2-naphthyl, and R ^d represents C ₁ -C ₁₂ alkyl, phenyl, C ₁ -C ₃ alkyl phenyl or 2-naphthyl. Preferred compounds include R ^a OOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-OH, where R ^a is benzyl or C ₁ -C ₁₀ alkyl, for example ethyl or isopropyl, in particular EtOOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-OH. The active thrombin inhibitors themselves are disclosed in WO 94/29336.

Фармацевтические препаратыPharmaceuticals

Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим ингибитор CPU и ингибитор тромбина или их фармацевтически приемлемые соли в качестве активных ингредиентов.The present invention relates to pharmaceutical compositions comprising a CPU inhibitor and a thrombin inhibitor or their pharmaceutically acceptable salts as active ingredients.

Предпочтительными комбинациями ингибитора CPU и ингибитора тромбина являются комбинации, где ингибитор CPU представляет собой соединение общей формулы I или II, а ингибитор тромбина представляет собой HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H, его производные или пролекарства, в частности EtOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.Preferred combinations of a CPU inhibitor and a thrombin inhibitor are combinations where the CPU inhibitor is a compound of general formula I or II and the thrombin inhibitor is HOOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-H, its derivatives or prodrugs, in particular EtOOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-OH.

Подходящие препараты для использования с HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Н, его производными или пролекарствами описаны в литературе, например, как описано, среди прочих, в Международных патентных заявках WO 94/29336, WO 96/14084, WO 96/16671, WO 97/23499, WO 97/39770, WO 97/45138, WO 98/16252, WO 99/27912 и WO 99/27913, содержание которых включено в данное описание изобретения ссылкой.Suitable formulations for use with HOOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-H, its derivatives or prodrugs are described in the literature, for example, as described, inter alia, in International Patent Applications WO 94/29336, WO 96/14084 , WO 96/16671, WO 97/23499, WO 97/39770, WO 97/45138, WO 98/16252, WO 99/27912 and WO 99/27913, the contents of which are incorporated herein by reference.

В настоящем изобретении препарат и/или набор компонентов может содержать два или более чем два ингибитора CPU в комбинации с ингибитором тромбина, два или более чем два ингибитора тромбина в комбинации с ингибитором CPU или любую их комбинацию. Термин "два или более чем два ингибитора" охватывает комбинации активного ингредиента и одного из его пролекарств.In the present invention, the preparation and / or set of components may contain two or more than two CPU inhibitors in combination with a thrombin inhibitor, two or more than two thrombin inhibitors in combination with a CPU inhibitor, or any combination thereof. The term “two or more than two inhibitors” encompasses combinations of the active ingredient and one of its prodrugs.

Для клинического применения ингибитор CPU и ингибитор тромбина вводят в состав фармацевтического препарата для перорального, внутривенного, подкожного, трахеального, бронхиального, интраназального, легочного, чрескожного, трансбуккального, ректального, парентерального или некоторых других способов введения. Фармацевтический препарат содержит ингибиторы в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем и/или носителем.For clinical use, a CPU inhibitor and a thrombin inhibitor are formulated for oral, intravenous, subcutaneous, tracheal, bronchial, intranasal, pulmonary, percutaneous, buccal, rectal, parenteral or some other routes of administration. The pharmaceutical preparation contains inhibitors in admixture with a pharmaceutically acceptable adjuvant, diluent and / or carrier.

Надлежащее общее количество активных ингредиентов находится в пределах от приблизительно 0,1% (мас./мас.) до приблизительно 95% (мас./мас.) от массы препарата, подходяще от 0,5% до 50% (мас./мас.) и предпочтительно от 1% до 25% (мас./мас.).An appropriate total amount of active ingredients is in the range of about 0.1% (w / w) to about 95% (w / w) of the weight of the preparation, suitably 0.5% to 50% (w / w) .) and preferably from 1% to 25% (w / w).

Молярное соотношение между ингибитором CPU и ингибитором тромбина может быть в пределах от приблизительно 1000:1 до приблизительно 1:1000. Подходящее молярное соотношение между ингибитором CPU и ингибитором тромбина лежит в пределах от 300:1 до 1:300 и предпочтительно от 50:1 до 1:50.The molar ratio between the CPU inhibitor and the thrombin inhibitor can range from about 1000: 1 to about 1: 1000. A suitable molar ratio between the CPU inhibitor and the thrombin inhibitor is in the range from 300: 1 to 1: 300, and preferably from 50: 1 to 1:50.

При изготовлении фармацевтических препаратов по настоящему изобретению активные ингредиенты можно смешивать с твердыми, порошкообразными ингредиентами, такими как лактоза, сахароза, сорбит, маннит, крахмал, амилопектин, производные целлюлозы, желатин или другой подходящий ингредиент, а также с разрыхляющими агентами и смазывающими агентами, такими как стеарат магния, стеарат кальция, стеарилфумарат натрия и полиэтиленгликолевые воски. Эту смесь затем можно переработать в гранулы или спрессовать в таблетки.In the manufacture of the pharmaceutical preparations of the present invention, the active ingredients can be mixed with solid, powdery ingredients such as lactose, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, amylopectin, cellulose derivatives, gelatin or other suitable ingredient, as well as with disintegrating agents and lubricating agents such such as magnesium stearate, calcium stearate, sodium fumarate and polyethylene glycol waxes. This mixture can then be processed into granules or compressed into tablets.

Активные ингредиенты можно предварительно смешивать по отдельности с другими неактивными ингредиентами, а затем смешивать для образования препарата. Активные ингредиенты также можно смешивать друг с другом перед смешением с неактивными ингредиентами для образования препарата.The active ingredients can be pre-mixed separately with other inactive ingredients, and then mixed to form a preparation. Active ingredients can also be mixed with each other before mixing with inactive ingredients to form a preparation.

Мягкие желатиновые капсулы могут быть получены с использованием капсул, содержащих смесь активных ингредиентов по изобретению, растительного масла, жира или другого подходящего наполнителя для мягких желатиновых капсул. Твердые желатиновые капсулы могут содержать гранулы активных ингредиентов. Твердые желатиновые капсулы могут также содержать активные ингредиенты в комбинации с твердыми порошкообразными ингредиентами, такими как лактоза, сахароза, сорбит, маннит, картофельный крахмал, кукурузный крахмал, амилопектин, производные целлюлозы или желатин.Soft gelatin capsules can be prepared using capsules containing a mixture of the active ingredients of the invention, vegetable oil, fat, or other suitable excipient for soft gelatin capsules. Hard gelatine capsules may contain granules of the active ingredients. Hard gelatine capsules may also contain the active ingredients in combination with solid powdery ingredients such as lactose, sucrose, sorbitol, mannitol, potato starch, corn starch, amylopectin, cellulose derivatives or gelatin.

Лекарственные единицы для ректального введения могут быть приготовлены (1) в форме суппозиториев, которые содержат активное вещество, смешанное с нейтральной жировой основой; (2) в форме желатиновых ректальных капсул, которые содержат активное вещество в смеси с растительным маслом, парафиновым маслом или другим подходящим наполнителем для желатиновых ректальных капсул; (3) в форме готовой микроклизмы; или (4) в форме сухого препарата для микроклизмы, предназначенного для разведения в подходящем растворителе непосредственно перед введением.Dosage units for rectal administration may be prepared (1) in the form of suppositories which contain an active substance mixed with a neutral fat base; (2) in the form of gelatin rectal capsules which contain the active substance in a mixture with vegetable oil, paraffin oil or other suitable excipient for gelatin rectal capsules; (3) in the form of a finished microclyster; or (4) in the form of a dry microclyster preparation for reconstitution in a suitable solvent immediately prior to administration.

Жидкие препараты могут быть приготовлены в форме сиропов или суспензий, например растворов или суспензий, содержащих активные ингредиенты и остаток, состоящий например, из сахара или сахарных спиртов и смеси этанола, воды, глицерина, пропиленгликоля и полиэтиленгликоля. Если желательно, такие жидкие препараты могут содержать красящие агенты, корригенты, консерванты, сахарин и карбоксиметилцеллюлозу или другие загущающие агенты. Жидкие препараты могут быть также приготовлены в форме сухого порошка, предназначенного для разведения в подходящем растворителе перед применением.Liquid preparations can be prepared in the form of syrups or suspensions, for example, solutions or suspensions containing the active ingredients and a residue consisting, for example, of sugar or sugar alcohols and a mixture of ethanol, water, glycerol, propylene glycol and polyethylene glycol. If desired, such liquid preparations may contain coloring agents, flavoring agents, preservatives, saccharin and carboxymethyl cellulose or other thickening agents. Liquid formulations may also be prepared in the form of a dry powder for reconstitution in a suitable solvent prior to use.

Растворы для парентерального введения могут быть приготовлены в виде раствора препарата по изобретению в фармацевтически приемлемом растворителе. Эти растворы могут также содержать стабилизирующие ингредиенты, консерванты и/или буферные ингредиенты. Растворы для парентерального введения могут быть приготовлены также в виде сухого препарата, предназначенного для разведения в подходящем растворителе перед применением.Solutions for parenteral administration may be prepared in the form of a solution of a preparation of the invention in a pharmaceutically acceptable solvent. These solutions may also contain stabilizing ingredients, preservatives and / or buffering ingredients. Solutions for parenteral administration can also be prepared in the form of a dry preparation, intended for dilution in a suitable solvent before use.

Доза соединения для введения зависит от релевантного показания, возраста, массы и пола пациента и может быть определена лечащим врачом. Дозировка предпочтительно находится в пределах от 0,01 мг/кг до 10 мг/кг.The dose of the compound for administration depends on the relevant indication, age, weight and gender of the patient and can be determined by the attending physician. The dosage is preferably in the range of 0.01 mg / kg to 10 mg / kg.

Обычная суточная доза активных ингредиентов варьирует в широких пределах и зависит от различных факторов, таких как релевантное показание, путь введения, возраст, масса и пол пациента, и может быть определена лечащим врачом. Как правило, пероральные и парентеральные дозировки находятся в пределах от 0,1 до 1000 мг в сутки активных ингредиентов в сумме.The usual daily dose of the active ingredients varies widely and depends on various factors, such as the relevant indication, route of administration, age, weight and gender of the patient, and can be determined by the attending physician. As a rule, oral and parenteral dosages range from 0.1 to 1000 mg per day of the active ingredients in total.

Согласно настоящему изобретению "терапевтически эффективное общее количество" относится к общему количеству ингибитора CPU и ингибитора тромбина, которое при введении в комбинации оказывает терапевтическое действие, даже если каждое количество, вводимое по отдельности, может быть меньше терапевтически эффективного количества.According to the present invention, a “therapeutically effective total amount” refers to a total amount of a CPU inhibitor and a thrombin inhibitor which, when administered in combination, has a therapeutic effect, even if each individually administered amount may be less than the therapeutically effective amount.

Медицинское и фармацевтическое применениеMedical and pharmaceutical applications

Согласно настоящему изобретению предложены также препараты и наборы компонентов для использования в лекарственной терапии; применение препаратов по настоящему изобретению для изготовления лекарств для использования для лечения состояния, при котором ингибирование тромбина и/или ингибирование CPU требуется или желательно; и способы терапевтического лечения путем введения пациенту, страдающему состоянием, при котором ингибирование тромбина и/или ингибирование CPU требуется или желательно, или подверженному такому состоянию, терапевтически эффективного общего количества ингибитора CPU и ингибитора тромбина по настоящему изобретению.The present invention also provides formulations and component kits for use in drug therapy; the use of the preparations of the present invention for the manufacture of drugs for use in treating a condition in which thrombin inhibition and / or CPU inhibition is required or desirable; and methods of therapeutic treatment by administering to a patient suffering from a condition in which thrombin inhibition and / or CPU inhibition is required or subject to such a condition, a therapeutically effective total amount of the CPU inhibitor and thrombin inhibitor of the present invention.

Ингибитор CPU и ингибитор тромбина можно вводить последовательно, раздельно и/или одновременно. Кроме того, ингибитор CPU можно вводить до введения ингибитора тромбина или наоборот.A CPU inhibitor and a thrombin inhibitor can be administered sequentially, separately and / or simultaneously. In addition, a CPU inhibitor may be administered prior to administration of a thrombin inhibitor, or vice versa.

Используемый здесь термин "лекарственная терапия" охватывает профилактические, диагностические и терапевтические курсы лечения, выполняемые in vivo или ex vivo на людях или других млекопитающих.As used herein, the term “drug therapy” embraces prophylactic, diagnostic, and therapeutic treatments performed in vivo or ex vivo in humans or other mammals.

Препараты по изобретению содержат ингибитор CPU и ингибитор тромбина либо сами по себе, либо, в случае пролекарств, после введения. Таким образом, предполагается, что препараты по изобретению полезны при тех состояниях, при которых ингибирование CPU и/или ингибирование тромбина благотворно, таких как лечение тромбоза и гиперкоагуляции в крови и тканях млекопитающих, включая человека.The preparations of the invention comprise a CPU inhibitor and a thrombin inhibitor, either by themselves or, in the case of prodrugs, after administration. Thus, it is believed that the preparations of the invention are useful in those conditions in which inhibition of CPU and / or inhibition of thrombin is beneficial, such as the treatment of thrombosis and hypercoagulation in the blood and tissues of mammals, including humans.

Специалисту в данной области ясно, что термин "состояние, при котором ингибирование тромбина требуется или желательно" охватывает следующее.One skilled in the art will recognize that the term "condition in which thrombin inhibition is required or desirable" encompasses the following.

Лечение и/или профилактика тромбоза и гиперкоагуляции в крови и тканях животных, включая человека. Известно, что гиперкоагуляция может привести к тромбоэмболическим заболеваниям. Состояния, связанные с гиперкоагуляцией и тромбоэмболические заболевания, которые можно упомянуть, включают унаследованную или приобретенную активированную резистентность к протеину С, такую как мутация фактора V (фактор V Лейдена), и унаследованные или приобретенные дефициты антитромбина III, протеина С, протеина S, гепаринового кофактора II. Другие состояния, о которых известно, что они связаны с гиперкоагуляцией и тромбоэмболическим заболеванием, включают циркулирующие антифосфолипидные антитела (антикоагулянт Люпуса), гомоцистеинемию, гепарин-индуцируемую тромбоцитопению и дефекты фибринолиза.Treatment and / or prevention of thrombosis and hypercoagulation in the blood and tissues of animals, including humans. It is known that hypercoagulation can lead to thromboembolic diseases. Hypercoagulable conditions and thromboembolic diseases that may be mentioned include inherited or acquired activated resistance to protein C, such as a mutation of factor V (Leiden factor V), and inherited or acquired deficiencies of antithrombin III, protein C, protein S, heparin cofactor II. Other conditions known to be associated with hypercoagulation and thromboembolic disease include circulating antiphospholipid antibodies (Lupus anticoagulant), homocysteinemia, heparin-induced thrombocytopenia and defects in fibrinolysis.

Лечение состояний, при которых имеет место нежелательный избыток тромбина без признаков гиперкоагуляции, например при нейродегенеративных заболеваниях, таких как болезнь Альцгеймера.Treating conditions in which there is an unwanted excess of thrombin without signs of hypercoagulation, such as neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease.

Терапевтическое и/или профилактическое лечение конкретных болезненных состояний, которое включает терапевтическое и/или профилактическое лечение венозного тромбоза (например, DVT (тромбоза глубоких вен)) и легочной эмболии, артериального тромбоза (например, при инфаркте миокарда, неустойчивой стенокардии, ударе в результате тромбоза и периферическом артериальном тромбозе) и системной эмболии, обычно из предсердия во время артериальной фибрилляции или из левого желудочка после трансмурального инфаркта миокарда или вызванной застойной сердечной недостаточностью; профилактику реокклюзии (то есть тромбоза) после тромболиза, чрескожной транслюминальной ангиопластики (РТА) и операций коронарного шунтирования; предупреждение повторного тромбоза после микрохирургического вмешательства и сосудистой хирургии в целом.Therapeutic and / or prophylactic treatment of specific disease conditions, which includes the therapeutic and / or prophylactic treatment of venous thrombosis (e.g. DVT (deep vein thrombosis)) and pulmonary embolism, arterial thrombosis (e.g. myocardial infarction, unstable angina, and thrombosis and peripheral arterial thrombosis) and systemic embolism, usually from the atrium during arterial fibrillation or from the left ventricle after transmural myocardial infarction or caused by congestive heart failure; prevention of reocclusion (i.e., thrombosis) after thrombolysis, percutaneous transluminal angioplasty (PTA) and coronary artery bypass surgery; prevention of repeated thrombosis after microsurgical intervention and vascular surgery in general.

Дополнительные показания включают терапевтическое и/или профилактическое лечение диссеминированной внутрисосудистой коагуляции, вызванной бактериями, множественной травмой, интоксикацией или любым другим механизмом; антикоагулянтное лечение, когда кровь находится в контакте с чужеродными поверхностями в организме, такими как сосудистые трансплантаты, сосудистые стенты, сосудистые катетеры, механические и биологические протезные клапаны или любое другое медицинское приспособление; и антикоагулянтное лечение, когда кровь находится в контакте с медицинскими приспособлениями вне организма, такими как во время сердечно-сосудистой хирургической операции с использованием аппарата "сердце-легкие" или при гемодиализе; терапевтическое и/или профилактическое лечение идиопатического или взрослого респираторного дистресс-синдрома, легочного фиброза после лечения облучением или химиотерапии, септического шока, септицемии, воспалительных реакций, которые включают в себя, без ограничений, отек, острый или хронический атеросклероз, такой как коронарное артериальное заболевание, церебральное артериальное заболевание, периферическое артериальное заболевание, реперфузионное повреждение и рестеноз после чрескожной транслюминальной ангиопластики (РТА).Additional indications include therapeutic and / or prophylactic treatment of disseminated intravascular coagulation caused by bacteria, multiple trauma, intoxication, or any other mechanism; anticoagulant treatment when the blood is in contact with foreign surfaces in the body, such as vascular grafts, vascular stents, vascular catheters, mechanical and biological prosthetic valves or any other medical device; and anticoagulant treatment, when the blood is in contact with medical devices outside the body, such as during a cardiovascular surgery using a heart-lung apparatus or during hemodialysis; therapeutic and / or prophylactic treatment of idiopathic or adult respiratory distress syndrome, pulmonary fibrosis after radiation treatment or chemotherapy, septic shock, septicemia, inflammatory reactions, which include, without limitation, edema, acute or chronic atherosclerosis, such as coronary arterial disease , cerebral arterial disease, peripheral arterial disease, reperfusion injury and restenosis after percutaneous transluminal angioplasty (PTA).

ПРИМЕРЫEXAMPLES

Следующие примеры предназначены для иллюстрации и никоим образом не ограничивают объем данного изобретения.The following examples are intended to illustrate and in no way limit the scope of this invention.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫMATERIALS AND METHODS

МатериалыMaterials

Батроксобин №520 CRY (American Diagnostica Inc., Greenwich, CT, USA) держали при 8°С как во время лиофилизации, так и при растворении в физиологическом растворе в концентрации 10 BU/мл. В экспериментах его использовали в течение 5 суток. Оставшееся лекарственное средство замораживали и хранили при -20°С в течение максимум 30 суток.Batroxobin No. 520 CRY (American Diagnostica Inc., Greenwich, CT, USA) was kept at 8 ° C both during lyophilization and when dissolved in physiological saline at a concentration of 10 BU / ml. In experiments, it was used for 5 days. The remaining drug was frozen and stored at -20 ° C for a maximum of 30 days.

Эндотоксин L-3129 (Sigma, St. Louis, МО, USA) растворяли в физиологическом растворе в концентрации 50 мкг/мл. Для каждого эксперимента готовили свежий раствор.Endotoxin L-3129 (Sigma, St. Louis, MO, USA) was dissolved in physiological saline at a concentration of 50 μg / ml. A fresh solution was prepared for each experiment.

¹²⁵I-меченый человеческий фибриноген (Amersham, Little Chalfont, Buck., UK) хранили при 8°С во время лиофилизации. После растворения в смеси физиологический раствор/дистиллированная вода (80/20 об./об.) с получением исходного раствора приблизительно 0,8 МБк/мл (20 мкКи/мл) его разделяли на аликвоты (по одной для каждого эксперимента), быстро замораживали и хранили при -20°С. Его использовали в экспериментах в течение периода времени в пределах 14 суток после даты изготовления. ¹²⁵ I-labeled human fibrinogen (Amersham, Little Chalfont, Buck., UK) was stored at 8 ° C during lyophilization. After dissolving in a physiological saline / distilled water (80/20 v / v) mixture to obtain an initial solution of approximately 0.8 MBq / ml (20 μCi / ml), it was aliquoted (one for each experiment), quickly frozen and stored at -20 ° C. It was used in experiments for a period of time within 14 days after the date of manufacture.

Инактин, натриевую соль тиобутабарбитала (Research Biochemicals International, Natick, USA) растворяли в смеси физиологический раствор/дистиллированная вода (50/50 об./об.) в концентрации 50 мг/мл.Inactin, sodium salt of thiobutabarbital (Research Biochemicals International, Natick, USA) was dissolved in a mixture of saline / distilled water (50/50 vol./about.) At a concentration of 50 mg / ml.

Ингибитор тромбина иногатран растворяли в 40%-ном (мас./мас.) циклодекстрине (HPβCD) в концентрации 5 мг/мл и хранили при -20°С. Перед использованием в разных экспериментах его дополнительно разбавляли 40% циклодекстрином. В исследованиях это лекарственное средство вводили подкожно.Inogatran thrombin inhibitor was dissolved in 40% (w / w) cyclodextrin (HPβCD) at a concentration of 5 mg / ml and stored at -20 ° C. Before use in various experiments, it was additionally diluted with 40% cyclodextrin. In studies, this drug was administered subcutaneously.

Ингибитор тромбина мелагатран растворяли в физиологическом растворе.The thrombin inhibitor melagatran was dissolved in physiological saline.

Ингибиторы CPU MERGETRA и Соединение А растворяли в дезоксигенированном физиологическом растворе. Физиологический раствор дезоксигенировали обработкой ультразвуком в течение 20 минут и последующим пропусканием азота в течение еще 20 минут. Растворы всегда были свежеприготовленными для каждого эксперимента. Ингибитор CPU вводили крысам внутривенной инфузией в течение 5 минут.The CPU MERGETRA inhibitors and Compound A were dissolved in deoxygenated saline. Saline was deoxygenated by sonication for 20 minutes and then passing nitrogen for another 20 minutes. Solutions were always freshly prepared for each experiment. A CPU inhibitor was administered to rats by intravenous infusion over 5 minutes.

ЖивотныеAnimals

Самцов крыс линии Sprague Dawley (Charles River, Sweden) с массой тела 325 425 г использовали для этих экспериментов. Животных оставляли для аккомодации в AstraZeneca R&D,

, Sweden, в течение 1 недели перед использованием.Male Sprague Dawley rats (Charles River, Sweden) weighing 325,425 g were used for these experiments. Animals were accommodated at AstraZeneca R&D,

, Sweden, for 1 week before use.

Подготовка животныхAnimal preparation

Анестезию вызывали и поддерживали инактином 100 мг/кг внутрибрюшинно.Anesthesia was induced and maintained with 100 mg / kg inactin intraperitoneally.

Два катетера вставляли в левую яремную вену - один для введения ¹²⁵I фибриногена и батроксобина, а другой для введения эндотоксина и ингибитора CPU или их соответствующих растворителей. Третий катетер вставляли в сонную артерию для отбора проб и измерения среднего кровяного артериального давления и частоты сердечных сокращений. Чтобы избежать кровяных сгустков в артериальном катетере, во время эксперимента поддерживали медленную инфузию физиологического раствора (приблизительно 1,0 мл/кгч). Крысам делали трахеотомию, чтобы облегчить самостоятельное дыхание. Температуру тела контролировали и поддерживали при 38°С путем внешнего подогрева.Two catheters were inserted into the left jugular vein, one for administering ¹²⁵ I fibrinogen and batroxobin, and the other for administering endotoxin and a CPU inhibitor or their respective solvents. A third catheter was inserted into the carotid artery for sampling and measuring mean blood pressure and heart rate. To avoid blood clots in the arterial catheter, a slow infusion of saline was maintained during the experiment (approximately 1.0 ml / kg / h). Rats underwent tracheotomy to facilitate spontaneous breathing. Body temperature was monitored and maintained at 38 ° C by external heating.

Последовательность экспериментаExperiment sequence

Животным делали внутривенную инъекцию эндотоксина (50 мкг/кг) в начале эксперимента. Два часа спустя ингибитор тромбина или его растворитель вводили путем подкожной инъекции и спустя еще 15 минут вводили ¹²⁵I-фибриноген (0,04 МБк) внутривенной инъекцией. Через 5 минут начинали инфузию CPU-ингибитора или его растворителя, длящуюся 5 минут. Через 5 минут вводили батроксобин (10 BU/кг) внутривенной инъекцией ударной дозы вещества за одну минуту.Animals were given an intravenous injection of endotoxin (50 μg / kg) at the beginning of the experiment. Two hours later, a thrombin inhibitor or its solvent was administered by subcutaneous injection and ¹²⁵ I-fibrinogen (0.04 MBq) was administered intravenously after another 15 minutes. After 5 minutes, infusion of the CPU inhibitor or its solvent was started, lasting 5 minutes. After 5 minutes, batroxobin (10 BU / kg) was administered by intravenous injection of a shock dose of the substance in one minute.

Образцы крови для определения содержания ¹²⁵I отбирали во всех экспериментах непосредственно перед 5, 20 и 30 минутами после введения батроксобина. В конце эксперимента легкое вырезали, ткань аккуратно промывали в физиологическом растворе и после этого промокали и взвешивали. Содержание ¹²⁵I в образцах ткани и крови определяли, используя счетчик Wallac 1282 Compugamma. Содержание ¹²⁵I в плазме и в легких выражали в виде процентного отношения радиоактивности в образце артериальной крови, взятом для сравнения непосредственно перед инъекцией батроксобина.Blood samples for determining the content of ¹²⁵ I were taken in all experiments immediately before 5, 20 and 30 minutes after administration of batroxobin. At the end of the experiment, the lung was excised, the tissue was washed gently in saline and then soaked and weighed. The ¹²⁵ I content in tissue and blood samples was determined using a Wallac 1282 Compugamma counter. The content of ¹²⁵ I in plasma and in the lungs was expressed as a percentage of radioactivity in a sample of arterial blood taken for comparison immediately before injection of batroxobin.

Пример 1Example 1

Ингибитор CPU MERGETPA (DL-2-меркаптометил-3-гуанидиноэтилтио-пропионовая кислота), известный из, например, Biochimica & Biophysica Acta 1034 (1990) 86-92, использовали в комбинации с ингибитором тромбина иногатраном.The CPU inhibitor MERGETPA (DL-2-mercaptomethyl-3-guanidinoethylthio-propionic acid), known from, for example, Biochimica & Biophysica Acta 1034 (1990) 86-92, was used in combination with an inogatran thrombin inhibitor.

Результаты экспериментов приведены в таблице 1. Результаты выражены в виде остаточного фибрина в легком после обработки, то есть 100% равнозначно отсутствию действия, n означает количество экспериментов (крыс).The experimental results are shown in table 1. The results are expressed as residual fibrin in the lung after treatment, that is, 100% is equivalent to the absence of action, n means the number of experiments (rats).

Из таблицы 1 явствует, что введение комбинации ингибитора CPU и ингибитора тромбина дает лучшие peзультаты в отношении оставшегося после обработки фибрина, чем введение каждого ингибитора.From table 1 it is clear that the introduction of a combination of a CPU inhibitor and a thrombin inhibitor gives better results in relation to the remaining fibrin after treatment than the introduction of each inhibitor.

Пример 2Example 2

Ингибитор CPU (3-(6-амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовую кислоту) (Соединение А) использовали в комбинации с ингибитором тромбина мелагатраном.A CPU inhibitor (3- (6-amino-pyridin-3-yl) -2-mercaptomethyl-propionic acid) (Compound A) was used in combination with a thrombin inhibitor melagatran.

Результаты экспериментов приведены в таблице 2. Результаты выражены в виде остаточного фибрина в легких после обработки, то есть 100% равнозначно отсутствию действия, n означает количество экспериментов (крыс).The experimental results are shown in table 2. The results are expressed as residual fibrin in the lungs after treatment, that is, 100% is equivalent to the absence of action, n means the number of experiments (rats).

Из таблицы 2 явствует, что введение комбинации ингибитора CPU и ингибитора тромбина дает лучшие результаты в отношении оставшегося после обработки фибрина, чем введение любого ингибитора.From table 2 it is clear that the introduction of a combination of a CPU inhibitor and a thrombin inhibitor gives better results in relation to the remaining fibrin after treatment than the introduction of any inhibitor.

Пример 3Example 3

Ингибитор CPU (3-(6-амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовую кислоту (Соединение А) использовали в комбинации с ингибитором тромбина мелагатраном.A CPU inhibitor (3- (6-amino-pyridin-3-yl) -2-mercaptomethyl-propionic acid (Compound A) was used in combination with a thrombin inhibitor melagatran.

Результаты экспериментов приведены в таблице 3. Результаты выражены в виде остаточного фибрина в легких после обработки, то есть 100% равнозначно отсутствию действия, n означает количество экспериментов (крыс).The experimental results are shown in table 3. The results are expressed as residual fibrin in the lungs after treatment, that is, 100% is equivalent to the absence of action, n means the number of experiments (rats).

Для каждой из четырех разных комбинаций доз, только ингибитора CPU, только ингибитора тромбина, ингибитора тромбина вместе с ингибитором CPU в количестве 0,2 и 0,28 мкмоль/кг соответственно, были подобраны отдельные модели Е-mах. Модели были подобраны по логарифмической шкале, дающей оценки средней эффективной дозы, то есть дозы, при которой половина группы имеет 50% эффект. На чертеже представлен график, на который нанесены доверительные интервалы значений ED₅₀.For each of four different dose combinations, only a CPU inhibitor, only a thrombin inhibitor, a thrombin inhibitor together with a CPU inhibitor in the amount of 0.2 and 0.28 μmol / kg, respectively, separate E-max models were selected. The models were selected on a logarithmic scale, giving estimates of the average effective dose, that is, the dose at which half the group has a 50% effect. The drawing shows a graph on which the confidence intervals of the ED ₅₀ values are plotted.

При отсутствии синергетического эффекта ED₅₀ для комбинации ингибитора CPU и ингибитора тромбина должно лежать на линии, соединяющей значения ED₅₀ для каждого лекарственного средства, вводимого по отдельности (см. чертеже). Для того чтобы оценить синергетический эффект, все четыре комбинации доз подгоняли к модели Е-mах, где ED₅₀ для ингибитора тромбина вместе с ингибитором CPU при 0,2 и 0,28 мкмоль/кг соответственно моделировали, используя параметр Δ, как указано на чертеже. Было рассчитано, что параметр Δ равен 0,52 с 95% доверительным интервалом [0,116, 0,934] и является статистически значимым от 0, р<0,001.In the absence of a synergistic effect, the ED ₅₀ for the combination of the CPU inhibitor and the thrombin inhibitor should lie on the line connecting the ED ₅₀ values for each drug administered separately (see drawing). In order to evaluate the synergistic effect, all four dose combinations were adjusted to the E-max model, where the ED ₅₀ for the thrombin inhibitor together with the CPU inhibitor at 0.2 and 0.28 μmol / kg were respectively modeled using the Δ parameter, as indicated in the drawing . It was calculated that the parameter Δ is 0.52 with a 95% confidence interval [0.116, 0.934] and is statistically significant from 0, p <0.001.

СокращенияAbbreviations

Ac=ацетатAc = acetate

AIBN=α,α’-азоизобутиронитрилAIBN = α, α’-azoisobutyronitrile

Aze=(S)-азетидин-2-карбоновая кислотаAze = (S) -azetidine-2-carboxylic acid

Вn=бензилBn = benzyl

Вu=бутилBu = butyl

BU=батроксобиновая единица (по определению American Diagnostica Inc., USA)BU = Batroxobin Unit (as defined by American Diagnostica Inc., USA)

Bz=бензоилBz = benzoyl

Cha=β-циклогексилаланинCha = β-cyclohexylalanine

Cgl=(S)-циклогексилглицинCgl = (S) -cyclohexylglycine

DCC=дициклогексилкарбодиимидDCC = Dicyclohexylcarbodiimide

DIAD=диизопропилазодикарбоксилатDIAD = diisopropylazodicarboxylate

DIPEA=диизопропилэтиламинDIPEA = Diisopropylethylamine

DMAP=N,N-диметиламинопиридинDMAP = N, N-dimethylaminopyridine

EDC=1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимидEDC = 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide

EtOH=этанолEtOH = Ethanol

HMDS=гексаметилдисилазанHMDS = hexamethyldisilazane

HOAc=уксусная кислотаHOAc = Acetic Acid

HOBt=1-гидроксибензотриазолHOBt = 1-hydroxybenzotriazole

HPβCD=гидроксипропил-β-циклодекстринHPβCD = hydroxypropyl-β-cyclodextrin

i.p.=внутрибрюшинноi.p. = intraperitoneal

i.v.=внутривенноi.v. = intravenously

KHMDS=бис(триметилсилил)амид калияKHMDS = potassium bis (trimethylsilyl) amide

LDA=диизопропиламид литияLDA = lithium diisopropylamide

Me=метилMe = methyl

МеОН=метанолMeOH = methanol

МСРВА=3-хлорпербензойная кислотаMCPBA = 3-chloroperbenzoic acid

Nag-H=норагматинNag-H = Noragmatine

Раb-Н=1-амидино-4-аминометилбензолRab-H = 1-amidino-4-aminomethylbenzene

Ph=фенилPh = phenyl

Pic=пипеколиновая кислотаPic = pipecolic acid

РМВ=4-метоксибензилPMB = 4-methoxybenzyl

РуВОР=(бензотриазол-1-илокси)трипирролидинофосфония гексафторфосфатRuBOP = (benzotriazol-1-yloxy) tripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate

SD=стандартное отклонениеSD = standard deviation

TEA=триэтиламинTEA = triethylamine

TFA=трифторуксусная кислотаTFA = trifluoroacetic acid

THF=тетрагидрофуранTHF = tetrahydrofuran

TMSCN=триметилсилилцианидTMSCN = Trimethylsilyl Cyanide

Tos(yl)=толуол-4-сульфонилTos (yl) = toluene-4-sulfonyl

Claims

1. Комбинация, содержащая ингибитор карбоксипептидазы U и ингибитор тромбина в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.1. A combination comprising a carboxypeptidase U inhibitor and a thrombin inhibitor in admixture with a pharmaceutically acceptable adjuvant, diluent or carrier.

2. Комбинация по п.1, где ингибитор карбоксипептидазы U представляет собой DL-2-меркаптометил-3-гуанидиноэтилтиопропионовую кислоту (MERGETPA) или 3-(6-амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовую кислоту.2. The combination according to claim 1, wherein the carboxypeptidase U inhibitor is DL-2-mercaptomethyl-3-guanidinoethylthiopropionic acid (MERGETPA) or 3- (6-amino-pyridin-3-yl) -2-mercaptomethyl-propionic acid.

3. Комбинация по п.1 или 2, где ингибитор тромбина представляет собой низкомолекулярный ингибитор тромбина на основе пептидов с одной-четырьмя пептидными связями.3. The combination according to claim 1 or 2, where the thrombin inhibitor is a low molecular weight peptide-based thrombin inhibitor with one to four peptide bonds.

4. Комбинация по п.3, где низкомолекулярный ингибитор тромбина представляет собой HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H или его пролекарство.4. The combination according to claim 3, where the low molecular weight thrombin inhibitor is HOOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-H or a prodrug thereof.

5. Комбинация по п.4, где пролекарство представляет собой ЕtOOС-СН₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.5. The combination of claim 4, wherein the prodrug is EtOOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-OH.

6. Комбинация по п.3, где низкомолекулярный ингибитор тромбина представляет собой HOOC-CH₂-(R)Cha-Pic-Nag-H (иногатран).6. The combination according to claim 3, where the low molecular weight thrombin inhibitor is HOOC-CH ₂ - (R) Cha-Pic-Nag-H (inogatran).

7. Комбинация по любому из пп.1-6, где молярное соотношение ингибитора карбоксипептидазы U и ингибитора тромбина находится в пределах от приблизительно 1000:1 до приблизительно 1:1000, предпочтительно от 50:1 до 1:50.7. The combination according to any one of claims 1 to 6, where the molar ratio of the carboxypeptidase inhibitor U to the thrombin inhibitor is in the range from about 1000: 1 to about 1: 1000, preferably from 50: 1 to 1:50.

8. Набор компонентов, включающий в себя 1) сосуд, содержащий ингибитор карбоксипептидазы U или его фармацевтически приемлемую соль; 2) сосуд, содержащий ингибитор тромбина или его производное; и инструкции для последовательного, раздельного или одновременного введения ингибиторов (1) и (2) пациенту, нуждающемуся в этом.8. A kit of components, including 1) a vessel containing a carboxypeptidase U inhibitor or a pharmaceutically acceptable salt thereof; 2) a vessel containing a thrombin inhibitor or its derivative; and instructions for sequential, separate or simultaneous administration of inhibitors (1) and (2) to a patient in need thereof.

9. Набор компонентов по п.8, где ингибитор карбоксипептидазы U представляет собой DL-2-меркаптометил-3-гуанидиноэтилтиопропионовую кислоту (MERGETPA) или 3-(6-амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовую кислоту.9. The component kit of claim 8, wherein the carboxypeptidase U inhibitor is DL-2-mercaptomethyl-3-guanidinoethylthiopropionic acid (MERGETPA) or 3- (6-amino-pyridin-3-yl) -2-mercaptomethyl-propionic acid.

10. Набор компонентов по п.8 или 9, где ингибитор тромбина представляет собой низкомолекулярный ингибитор тромбина на основе пептидов с одной-четырьмя пептидными связями.10. A set of components according to claim 8 or 9, where the thrombin inhibitor is a low molecular weight peptide-based thrombin inhibitor with one to four peptide bonds.

11. Набор компонентов по п.10, где низкомолекулярный ингибитор тромбина представляет собой HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H или его пролекарство.11. The set of components of claim 10, where the low molecular weight thrombin inhibitor is HOOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-H or a prodrug thereof.

12. Набор компонентов по п.11, где пролекарство представляет собой EtOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.12. The set of components according to claim 11, where the prodrug is EtOOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-OH.

13. Набор компонентов по п.10, где низкомолекулярный ингибитор тромбина представляет собой HOOC-CH₂-(R)Cha-Pic-Nag-H (иногатран).13. The set of components of claim 10, where the low molecular weight thrombin inhibitor is HOOC-CH ₂ - (R) Cha-Pic-Nag-H (inogatran).

14. Набор компонентов по любому из пп.8-13, где молярное соотношение ингибитора карбоксипептидазы U и ингибитора тромбина находится в пределах от приблизительно 1000:1 до приблизительно 1:1000, предпочтительно от 50:1 до 1:50.14. A kit of components according to any one of claims 8 to 13, wherein the molar ratio of the carboxypeptidase U inhibitor to the thrombin inhibitor is in the range from about 1000: 1 to about 1: 1000, preferably from 50: 1 to 1:50.

15. Набор компонентов, включающий в себя 1) фармацевтический препарат, содержащий ингибитор карбоксипептидазы U или его фармацевтически приемлемую соль в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем; и 2) фармацевтический препарат, содержащий ингибитор тромбина или его производное в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем; причем каждый ингибитор (1) и (2) представлен в форме, которая подходит для введения совместно друг с другом.15. A kit of components, including 1) a pharmaceutical preparation comprising a carboxypeptidase U inhibitor or a pharmaceutically acceptable salt thereof in admixture with a pharmaceutically acceptable adjuvant, diluent or carrier; and 2) a pharmaceutical preparation containing a thrombin inhibitor or its derivative in a mixture with a pharmaceutically acceptable adjuvant, diluent or carrier; moreover, each inhibitor (1) and (2) is presented in a form that is suitable for administration together with each other.

16. Набор компонентов по п.15, где ингибиторы (1) и (2) пригодны для последовательного, раздельного или одновременного введения.16. The set of components according to clause 15, where the inhibitors (1) and (2) are suitable for sequential, separate or simultaneous administration.

17. Набор компонентов по п.15 или 16, где ингибитор карбоксипептидазы U представляет собой DL-2-меркаптометил-3-гуанидиноэтилтиопропионовую кислоту (MERGETPA) или 3-(6-амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовую кислоту.17. A kit of components according to claim 15 or 16, wherein the carboxypeptidase U inhibitor is DL-2-mercaptomethyl-3-guanidinoethylthiopropionic acid (MERGETPA) or 3- (6-amino-pyridin-3-yl) -2-mercaptomethyl-propionic acid.

18. Набор компонентов по любому из пп.15-17, где ингибитор тромбина представляет собой низкомолекулярный ингибитор тромбина на основе пептидов с одной-четырьмя пептидными связями.18. A set of components according to any one of claims 15-17, wherein the thrombin inhibitor is a low molecular weight peptide-based thrombin inhibitor with one to four peptide bonds.

19. Набор компонентов по п.18, где низкомолекулярный ингибитор тромбина представляет собой HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H или его пролекарство.19. A kit of components according to claim 18, wherein the low molecular weight thrombin inhibitor is HOOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-H or a prodrug thereof.

20. Набор компонентов по п.19, где пролекарство представляет собой EtOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.20. The set of components according to claim 19, where the prodrug is EtOOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-OH.

21. Набор компонентов по п.18, где низкомолекулярный ингибитор тромбина представляет собой HOOC-CH₂-(R)Cha-Pic-Nag-H (иногатран).21. The set of components according to claim 18, wherein the low molecular weight thrombin inhibitor is HOOC-CH ₂ - (R) Cha-Pic-Nag-H (inogatran).

22. Набор компонентов по любому из пп.15-21, где молярное соотношение ингибитора карбоксипептидазы U и ингибитора тромбина находится в пределах от приблизительно 1000:1 до приблизительно 1:1000, предпочтительно от 50:1 до 1:50.22. A kit of components according to any one of claims 15-21, wherein the molar ratio of the carboxypeptidase U inhibitor to the thrombin inhibitor is in the range from about 1000: 1 to about 1: 1000, preferably from 50: 1 to 1:50.

23. Комбинация по любому из пп.1-7 или набор компонентов по любому из пп.8-22 для применения в лекарственной терапии.23. The combination according to any one of claims 1 to 7 or a set of components according to any one of claims 8 to 22 for use in drug therapy.

24. Комбинация по любому из пп.1-7 для применения в изготовлении лекарства для лечения состояния, при котором ингибирование тромбина и/или ингибирование карбоксипептидазы U требуется или желательно.24. The combination according to any one of claims 1 to 7 for use in the manufacture of a medicament for the treatment of a condition in which inhibition of thrombin and / or inhibition of carboxypeptidase U is required or desirable.

25. Комбинация по п.24, где ингибитор карбоксипептидазы U представляет собой DL-2-меркаптометил-3-гуанидиноэтилтиопропионовую кислоту (MERGETPA) или 3-(6-амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовую кислоту.25. The combination of claim 24, wherein the carboxypeptidase U inhibitor is DL-2-mercaptomethyl-3-guanidinoethylthiopropionic acid (MERGETPA) or 3- (6-amino-pyridin-3-yl) -2-mercaptomethyl-propionic acid.

26. Комбинация по п.24 или 25, где ингибитор тромбина представляет собой низкомолекулярный ингибитор тромбина на основе пептидов с одной-четырьмя пептидными связями.26. The combination according to paragraph 24 or 25, where the thrombin inhibitor is a low molecular weight thrombin inhibitor based on peptides with one to four peptide bonds.

27. Комбинация по п.26, где низкомолекулярный ингибитор тромбина представляет собой HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H или его пролекарство.27. The combination of claim 26, wherein the low molecular weight thrombin inhibitor is HOOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-H or a prodrug thereof.

28. Комбинация по п.27, где пролекарство представляет собой EtOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.28. The combination of claim 27, wherein the prodrug is EtOOC-CH ₂ - (R) Cgl-Aze-Pab-OH.

29. Комбинация по п.26, где низкомолекулярный ингибитор тромбина представляет собой HOOC-CH₂-(R)Cha-Pic-Nag-H (иногатран).29. The combination of claim 26, wherein the low molecular weight thrombin inhibitor is HOOC-CH ₂ - (R) Cha-Pic-Nag-H (inogatran).

30. Комбинация по любому из пп.24-29, где молярное соотношение ингибитора карбоксипептидазы U и ингибитора тромбина находится в пределах от приблизительно 1000:1 до приблизительно 1:1000, предпочтительно от 50:1 до 1:50.30. The combination according to any one of paragraphs.24-29, where the molar ratio of the carboxypeptidase inhibitor U and the thrombin inhibitor is in the range from about 1000: 1 to about 1: 1000, preferably from 50: 1 to 1:50.

Приоритеты по пунктам и признакам:Priorities by points and signs:

03.05.1999 SE-9901572-9 по пп.1, 8, 15;05/03/1999 SE-9901572-9 according to claims 1, 8, 15;

03.05.1999 SE-9901573-7 по пп.2, 9, 17, 25 с признаком “где ингибитор карбоксипептидазы U представляет собой 3-(6-амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовую кислоту”;05/03/1999 SE-9901573-7 according to claims 2, 9, 17, 25 with the sign “where the carboxypeptidase U inhibitor is 3- (6-amino-pyridin-3-yl) -2-mercaptomethyl-propionic acid”;

13.08.1999 SE-9902902-7 по пп.2, 9, 17, 25 с признаком “где ингибитор карбоксипептидазы U представляет собой -2-меркаптометил-3-гуанидиноэтилтиопропионовую кислоту(МЕRGЕТRА) и по остальным пунктам формулы изобретения.08/13/1999 SE-9902902-7 according to claims 2, 9, 17, 25 with the sign “where the carboxypeptidase U inhibitor is -2-mercaptomethyl-3-guanidinoethylthiopropionic acid (MERGETRA) and the remaining claims.