RU2239630C1 - Method for preparing adjoene (z)- and (e)-isomers in ratio 2:1 - Google Patents
Method for preparing adjoene (z)- and (e)-isomers in ratio 2:1 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2239630C1 RU2239630C1 RU2003113228/04A RU2003113228A RU2239630C1 RU 2239630 C1 RU2239630 C1 RU 2239630C1 RU 2003113228/04 A RU2003113228/04 A RU 2003113228/04A RU 2003113228 A RU2003113228 A RU 2003113228A RU 2239630 C1 RU2239630 C1 RU 2239630C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- ajoen
- isomers
- garlic
- ratio
- allicin
- Prior art date
Links
Abstract
Description
Изобретение относится к способу получения и выделения изомеров аджоена.The invention relates to a method for the preparation and isolation of ajoen isomers.
Данные соединения обладают широким спектром биологической активности и представляют большой интерес в качестве основы для медицинских препаратов различного действия.These compounds have a wide spectrum of biological activity and are of great interest as the basis for drugs with various effects.
Впервые эти соединения были выделены из экстракта чеснока (Alieum Sativum) в 1986 году Block et al. [Block E., Ahmad S., Catalfamo J.L., Jain М.К., Apitz-Castro, R. (1986). Antitrombotic organosulfur compounds fiom garlic: structural, mechanistic, and synthetic studies. J. Am. Chem. 108, 7045-55.]. Авторы показали, что Е-(I) и Z-(II) аджоены образуются как продукты превращения содержащегося в измельченном чесноке аллицина (диаллилтиосульфинат). В этой же работе было показано, что изомеры аджоена являются ответственными за антитромботическое действие экстрактов чеснока.These compounds were first isolated from garlic extract (Alieum Sativum) in 1986 by Block et al. [Block E., Ahmad S., Catalfamo J.L., Jain M.K., Apitz-Castro, R. (1986). Antitrombotic organosulfur compounds fiom garlic: structural, mechanistic, and synthetic studies. J. Am. Chem. 108, 7045-55.]. The authors showed that E- (I) and Z- (II) ajoenes are formed as products of the conversion of allicin (diallyl thiosulfinate) contained in minced garlic. In the same work, it was shown that ajoen isomers are responsible for the antithrombotic effect of garlic extracts.
За период, прошедший с момента выделения аджоена, были проведены многочисленные исследования его биологической активности. Эти исследования подтвердили антитромботическое действие аджоена. и позволили установить некоторые механизмы этого действия. Например, аджоен препятствует агрегации тромбоцитов, стимулированных арахидонатом, мертиолятом, адреналином, АДФ и кальциевым ионофором [Apitz-Castro R., Badimon J.J., Badimon L. Effect of ajoene, the major antiplatelet compound from garlic, on platelet thrombus formation. Thromb. Res. (1992). 68, 145-55, Apitz-Castro R., Jain M.K., Bartoli F., Ledezma E., Ruiz M.C., Salas R. Evidence for direct coupling of primary agonist-receptor interaction to the exposure of functional lib-IIIa complexes in human blood platelets. Results from studies with the antiplatelet compound ajoene. Biochem. Biophys. Acta. (1991). 1094, 269-80]. Характер ингибирования тромботической активности является необратимым. Кроме того, изомеры аджоена способны ингибировать 5-липоксигеназу и биосинтез простагландинов [Wagner H., Wierer M., Fessler В. Effects of garlic constituents on arachidonate metabolism. Planta Medica. (1987). 53, 305-6]. Биосинтез лейкотриенов также угнетается аджоеном [Belman S., Solomon J., Segal A., Block E., Barany G. Inhibition of soybean lypoxygenase and mouse skin tumor promotion by onion and garlic components. J. Biochem. Toxicol. 1989, 4, 151-60].During the period since the isolation of Ajoen, numerous studies of its biological activity have been carried out. These studies have confirmed the antithrombotic effect of Ajoen. and allowed to establish some mechanisms of this action. For example, ajoen inhibits platelet aggregation stimulated by arachidonate, merthiolate, adrenaline, ADP and calcium ionophore [Apitz-Castro R., Badimon J.J., Badimon L. Effect of ajoene, the major antiplatelet compound from garlic, on platelet thrombus formation. Thromb. Res. (1992). 68, 145-55, Apitz-Castro R., Jain MK, Bartoli F., Ledezma E., Ruiz MC, Salas R. Evidence for direct coupling of primary agonist-receptor interaction to the exposure of functional lib-IIIa complexes in human blood platelets. Results from studies with the antiplatelet compound ajoene. Biochem. Biophys. Acta. (1991). 1094, 269-80]. The pattern of inhibition of thrombotic activity is irreversible. In addition, ajoen isomers are capable of inhibiting 5-lipoxygenase and prostaglandin biosynthesis [Wagner H., Wierer M., Fessler B. Effects of garlic constituents on arachidonate metabolism. Planta Medica. (1987). 53, 305-6]. The biosynthesis of leukotrienes is also inhibited by Ajoen [Belman S., Solomon J., Segal A., Block E., Barany G. Inhibition of soybean lypoxygenase and mouse skin tumor promotion by onion and garlic components. J. Biochem. Toxicol. 1989, 4, 151-60].
Также установлено, что аджоен обладает антибактериальным [Naganawa R., Iwata N., Ishikawa К., Fukuda H., Fujino Т., Suzuki A. Inhibition of vicrobial growth by ajoene, a sulfur-containing compound derived from garlic. Applied and Environmental Microbiology. (1996). 62, 4238-42.] и фунгицидным [San-Blas G., Urbina J.A., Marchan E., Contreras L.M., Sorais F., San-Bias F. Inhibition of Paracoccides brasiliensis by ajoene is associated with blockade of phosphatidylcholine biosynthesis. Microbiology. (1997). 143, 1583-6, Ledezma E., Lopez J.C., Marin P., Romero H., Ferrara G., De Sousa L., Jorquera A., Apitz Castro. Ajoene in the topical short-term treatment of tinea cruris and tinea corporis in humans. Randomized comparative study with terbinafine. Arzneimittelforschung. (1999). 49, 544-7] действием.It has also been found that Ajoen has antibacterial [Naganawa R., Iwata N., Ishikawa K., Fukuda H., Fujino T., Suzuki A. Inhibition of vicrobial growth by ajoene, a sulfur-containing compound derived from garlic. Applied and Environmental Microbiology. (1996). 62, 4238-42.] And fungicidal [San-Blas G., Urbina J.A., Marchan E., Contreras L.M., Sorais F., San-Bias F. Inhibition of Paracoccides brasiliensis by ajoene is associated with blockade of phosphatidylcholine biosynthesis. Microbiology. (1997). 143, 1583-6, Ledezma E., Lopez J.C., Marin P., Romero H., Ferrara G., De Sousa L., Jorquera A., Apitz Castro. Ajoene in the topical short-term treatment of tinea cruris and tinea corporis in humans. Randomized comparative study with terbinafine. Arzneimittelforschung. (1999). 49, 544-7] action.
Аджоен способен оказывать противоопухолевое действие. Например, он обладает прямой цитотоксичностью, при этом в опытах in vitro было показано, что чувствительность к аджоену туморогенных клеточных линий значительно выше, чем у нетуморогенных линий [Scharfenberg К., Wagner R., Wagner К.G. The cytotoxic effect of ajoene, a natural product from garlic, investigated with different cell lines. Cancer Lett. (1990), 53, 103-8]. Кроме прямого цитотоксического действия аджоен способен вызывать апоптоз лейкемических клеток крови, не оказывая при этом действия на клетки крови здоровых доноров [Dirch V.M., Gerbes A.L., Vallmar A.M. Ajoene, a compound of garlic, induces apoptosis in human promyeloleukemic cells, accompanied by generation of reactive oxygen species and activation nuclear factor кВ. Mol. Pharmacol. (1998). 53, 402-7]. Наряду с непосредственным воздействием на опухолевые клетки изомеры аджоена способны влиять на иммунные реакции организма, влияя на мембранно-зависимые свойства иммунных клеток [Romano E.L., Montano R.F., Brito В., Apitz R., Alonso J., Romano M., Gebran S., Soyano A. Effects of ajoene on lymphocyte and macrophage membrane-dependent functions. Immunopharmacol. Immwiotoxicol. (1997). 19,15-36].Ajoen is able to exert an antitumor effect. For example, it has direct cytotoxicity, while in vitro experiments have shown that the sensitivity to agjoen of tumorigenic cell lines is significantly higher than that of non-tumorigenic lines [Scharfenberg K., Wagner R., Wagner K.G. The cytotoxic effect of ajoene, a natural product from garlic, investigated with different cell lines. Cancer Lett. (1990), 53, 103-8]. In addition to the direct cytotoxic effect, ajoen is able to induce apoptosis of leukemic blood cells without affecting the blood cells of healthy donors [Dirch V.M., Gerbes A.L., Vallmar A.M. Ajoene, a compound of garlic, induces apoptosis in human promyeloleukemic cells, accompanied by generation of reactive oxygen species and activation nuclear factor kV. Mol. Pharmacol (1998). 53, 402-7]. Along with a direct effect on tumor cells, ajoen isomers are able to affect the body's immune responses, affecting the membrane-dependent properties of immune cells [Romano EL, Montano RF, Brito B., Apitz R., Alonso J., Romano M., Gebran S. , Soyano A. Effects of ajoene on lymphocyte and macrophage membrane-dependent functions. Immunopharmacol. Immwiotoxicol. (1997). 19.15-36].
Изучено антимутагенное действие аджоена. С помощью теста Эймса показано, что аджоен способен ингибировать химически индуцированный мутагенез, вызываемый такими агентами, как бензо[а]пирен и 4-нитро-1,2-фенилендиамин [Ishikawa К., Naganawa R., Yoshida H., Iwata N., Fukuda H., Fujino Т., Suzuki A. (1996). Antimutagenic effects of ajoene, an organosulfur compound derived from garlic. Biosci. Biotechnol. Biochem. 60, 2086-8]. Известно также, что аджоен препятствует связыванию метаболитов афлотоксина В1 (потенциального гепатоканцерогена) с клеточной ДНК [Tadi P.P., Lau B.H., Teel R.W., Herrmann C.E. Binding of the aflatoxin Bl to DNA inhibited by ajoene and diallyl sulfide. Anticancer Res. (1991). 11,2037-41].The antimutagenic effect of ajoen has been studied. Using the Ames test, it was shown that ajoen is able to inhibit chemically induced mutagenesis caused by agents such as benzo [a] pyrene and 4-nitro-1,2-phenylenediamine [Ishikawa K., Naganawa R., Yoshida H., Iwata N. , Fukuda H., Fujino T., Suzuki A. (1996). Antimutagenic effects of ajoene, an organosulfur compound derived from garlic. Biosci. Biotechnol. Biochem. 60, 2086-8]. Ajoen is also known to inhibit the binding of aflotoxin B1 metabolites (potential hepatocarcinogen) to cellular DNA [Tadi P.P., Lau B.H., Teel R.W., Herrmann C.E. Binding of the aflatoxin Bl to DNA inhibited by ajoene and diallyl sulfide. Anticancer Res. (1991). 11.2037-41].
Известно, что некоторые компоненты чесночных экстрактов обладают антивирусной активностью. Однако наиболее сильное противовирусное действие проявляет аджоен [Weber N.D., Andersen D.O., North J.A., Murray B.K., Lawson L.D., Hughes B.G. In vitro virucidal effects of Allium sativum (garlic) extract and compounds. Planta Medica (1992). 58, 417-23]. Показано, что данное соединение подавляет размножение вирусов иммунодефицита человека и обезьяны, причем ингибирующие действие аджоена на лизис ВИЧ-инфицированных клеток наблюдается не только на стадиях адсорбции и пенетрации, но и на более поздних этапах вирусного цикла [Walder R., Kalvathev Z., Apitz-Castro R. Selective in vitro protection of SIV agm-induced cytolysis by ajoene, [(e)-(z)-4,5,9-trithiadodeca-l,6,ll-triene-9 oxide]. Biomed. Pharmacother. (1998). 52, 229-35].It is known that some components of garlic extracts have antiviral activity. However, the most powerful antiviral effect is shown by ajoen [Weber N.D., Andersen D.O., North J.A., Murray B.K., Lawson L.D., Hughes B.G. In vitro virucidal effects of Allium sativum (garlic) extract and compounds. Planta Medica (1992). 58, 417-23]. This compound has been shown to inhibit the proliferation of human and monkey immunodeficiency viruses, and the inhibitory effect of ajoen on the lysis of HIV-infected cells is observed not only at the stages of adsorption and penetration, but also at the later stages of the viral cycle [Walder R., Kalvathev Z., Apitz -Castro R. Selective in vitro protection of SIV agm-induced cytolysis by ajoene, [(e) - (z) -4,5,9-trithiadodeca-l, 6, ll-triene-9 oxide]. Biomed. Pharmacother (1998). 52, 229-35].
Большинство исследований по биологической активности было проведено на неразделенной смеси Е- и Z-изомеров аджоена. Это связано с тем, что препаративное разделение этих изомеров является сложным и трудоемким. Существует только очень небольшое количество работ, проведенных на разделенных изомерах. Так, в работе [Block Е., Ahmad S., Catalfamo J.L., Jain M.K., Apitz-Castro, R. Antitrombotic organosulfur compounds from garlic: structural, mechanistic, and synthetic studies. J. Am. Chem. (1986). 108, 7045-55] определена антитромботическая активность каждого изомера. В работе [Ledezma Е., Jorquera A., Bendezu H., Vivas J., Perez G. Antiproliferative and Leshmanicidal effect of ajoene on various Leishmania species: ultrastructural study. Parasitol. Res. (2002 Aug)., 88(8), 748-53] изучено влияние как Е-, так и Z-изомера на различные разновидности Leishmania mexicano. Авторами [Li M, Cm JR, Ye Y, Min JM, Zhang LH, Wang K, Gares M, Cros J, Wright M, Leung-Tack J. Antitumor activity of Z-ajoene, a natural compound purified from garlic: antimitotic and microtubule-interaction properties. Carcinogenesis, 2002 Apr, 23(4), 573-9] определена противоопухолевая активность Z-изомера.Most studies of biological activity have been carried out on an undivided mixture of E- and Z-isomers of ajoen. This is due to the fact that the preparative separation of these isomers is complex and time-consuming. There is only a very small number of studies carried out on separated isomers. Thus, in [Block E., Ahmad S., Catalfamo J.L., Jain M.K., Apitz-Castro, R. Antitrombotic organosulfur compounds from garlic: structural, mechanistic, and synthetic studies. J. Am. Chem. (1986). 108, 7045-55] the antithrombotic activity of each isomer was determined. In [Ledezma E., Jorquera A., Bendezu H., Vivas J., Perez G. Antiproliferative and Leshmanicidal effect of ajoene on various Leishmania species: ultrastructural study. Parasitol. Res. (2002 Aug)., 88 (8), 748-53] studied the effect of both the E- and Z-isomers on various varieties of Leishmania mexicano. Authors [Li M, Cm JR, Ye Y, Min JM, Zhang LH, Wang K, Gares M, Cros J, Wright M, Leung-Tack J. Antitumor activity of Z-ajoene, a natural compound compound from garlic: antimitotic and microtubule-interaction properties. Carcinogenesis, 2002 Apr, 23 (4), 573-9] the antitumor activity of the Z-isomer was determined.
Несмотря на многочисленные исследования по биологической активности аджоена в патентной и научной литературе описано немного способов получения этих веществ. Условно все предлагаемые методы получения аджоена можно разделить на выделение из чеснока и химический синтез.Despite numerous studies on the biological activity of Ajoen in the patent and scientific literature, few methods for producing these substances are described. Conventionally, all the proposed methods for producing ajoen can be divided into garlic isolation and chemical synthesis.
Выделение аджоена из чеснока является достаточно сложной и трудоемкой процедурой, требующей большого количества растворителей. Так, в работе [Block E., Ahmad S., Catalfamo J.L., Jain M.K,, Apitz-Castro, R. Antitrombotic organosulfur compounds from garlic: structural, mechanistic, and synthetic studies. J. Am. Chem. (1986). 108, 7045-55] предложен метод выделения фракции чесночного экстракта, обогащенной аджоеном, с помощью многократной замены растворителя. Окончательное выделение изомеров аджоена проводилось методом препаративной ВЭЖХ. В европейском патенте [Европейский патент ЕР №0702002 В1 (May 13, 1998)] предложен способ выделения аджоена из чеснока с использованием в качестве экстрагента растительного масла. Этот метод позволяет получить смесь изомеров в растительном масле с соотношением Z/E-4. Использование масла хотя и обеспечивает практически полное выделение аджоена из чеснока, но сильно затрудняет последующее разделение Z- и Е-изомеров. В общем, можно сказать, что применение этих методов ограничено очень низким содержанием аджоена в чесноке (0,03-0,04% от веса свежего чеснока).Isolation of ajoen from garlic is a rather complex and time-consuming procedure requiring a large number of solvents. Thus, in [Block E., Ahmad S., Catalfamo J.L., Jain M.K., Apitz-Castro, R. Antitrombotic organosulfur compounds from garlic: structural, mechanistic, and synthetic studies. J. Am. Chem. (1986). 108, 7045-55] a method for isolating the fraction of garlic extract enriched in Ajoen using multiple solvent changes is proposed. The final isolation of ajoen isomers was carried out by preparative HPLC. In the European patent [European patent EP No. 0702002 B1 (May 13, 1998)] a method for isolating ajoen from garlic using vegetable oil as an extractant is proposed. This method allows you to get a mixture of isomers in vegetable oil with a ratio of Z / E-4. The use of oil, although it provides almost complete isolation of Ajoen from garlic, greatly complicates the subsequent separation of Z- and E-isomers. In general, we can say that the use of these methods is limited by the very low content of ajoen in garlic (0.03-0.04% by weight of fresh garlic).
Во всех известных методах синтеза в качестве исходного вещества для получения аджоена использовался аллицин (диаллилтиосульфинат). В европейском патенте [Европейский патент ЕР №0721940 А1 (Jan 11, 1996)] предложен способ получения изомеров аджоена с помощью образования комплекса между аллицином и α- или β-циклодекстрином. Данный метод позволяет получать 30% аджоена по отношению к исходному аллицину с соотношением Е- и Z-изомеров 2/1. Недостатком этого метода является использование большого количества органических растворителей и воды (3 л воды и 1,5 л диэтилового эфира на 150 мг аджоена).In all known synthesis methods, allicin (diallylthiosulfinate) was used as the starting material for the preparation of ajoen. In the European patent [European patent EP No. 0721940 A1 (Jan 11, 1996)], a method for producing ajoen isomers by complexing between allicin and α- or β-cyclodextrin is proposed. This method allows you to get 30% ajoen in relation to the original allicin with a ratio of E - and Z-isomers 2/1. The disadvantage of this method is the use of a large amount of organic solvents and water (3 l of water and 1.5 l of diethyl ether per 150 mg of ajoen).
Наиболее близкий к предлагаемому способ получения аджоена предложен в патенте [патент США №4643994 (Feb 17, 1987) ]. В этом методе аджоен получали из неочищенного аллицина в растворе в смеси ацетон/вода (60:40) при температуре 45-46°С в течение 32 часов с последующей экстракцией хлористым метиленом. Данный способ позволяет получать 41% аджоена по отношению к исходному аллицину. Соотношение Е- и Z-изомеров составляло 9/1. Недостатком метода является низкое количество Z-изомера, что сильно затрудняет его выделение.Closest to the proposed method for producing ajoen proposed in the patent [US patent No. 4643994 (Feb 17, 1987)]. In this method, ajoen was obtained from crude allicin in solution in an acetone / water mixture (60:40) at a temperature of 45-46 ° C for 32 hours, followed by extraction with methylene chloride. This method allows to obtain 41% of ajoen in relation to the original allicin. The ratio of E and Z isomers was 9/1. The disadvantage of this method is the low amount of Z-isomer, which makes it difficult to isolate.
В данной заявке на изобретение предлагается способ получения смеси изомеров аджоена из синтетически полученного неочищенного аллицина в н-бутаноле.This patent application provides a process for the preparation of a mixture of Ajoen isomers from synthetically prepared crude allicin in n-butanol.
Синтез исходного аллицина проводится по описанной методике [патент США №4643994 (Feb 17, 1987)] окислением диаллилдисульфида перекисью водорода в уксусной кислоте с последующей экстракцией хлористым метиленом. Полученный аллицин упаривался досуха и растворялся в н-бутаноле. Никакой дополнительной очистки аллицина не проводилось.The synthesis of the starting allicin is carried out according to the described procedure [US patent No. 4643994 (Feb 17, 1987)] by oxidation of diallyl disulfide with hydrogen peroxide in acetic acid, followed by extraction with methylene chloride. The resulting allicin was evaporated to dryness and dissolved in n-butanol. No further purification of allicin was performed.
Реакция проводится при комнатной температуре в 0,5%-ном растворе аллицина в н-бутаноле в течение 6 суток. Количественный анализ реакционной смеси осуществлялся методом ВЭЖХ на силикагеле. Условия анализа были следующими: колонка ULTRASIL 10×250 mm, элюент гексан/изопропанол 95/5, УФ-детектор с длиной волны 254 нм, скорость элюирования 4,5 мл/мин. В результате проведенного анализа установлено, что на протяжении первых шести суток наблюдается увеличение количества аджоена. Анализ, проведенный после семи и восьми суток, показал, что количество аджоена в смеси практически не изменилось. После девяти суток наблюдалось небольшое снижение концентрации аджоена, что свидетельствует о начале его разложения.The reaction is carried out at room temperature in a 0.5% solution of allicin in n-butanol for 6 days. Quantitative analysis of the reaction mixture was carried out by HPLC on silica gel. The assay conditions were as follows: ULTRASIL column 10 × 250 mm, eluent hexane / isopropanol 95/5, UV detector with a wavelength of 254 nm, elution speed 4.5 ml / min. As a result of the analysis, it was found that during the first six days there is an increase in the amount of ajoen. An analysis conducted after seven and eight days showed that the amount of ajoen in the mixture remained virtually unchanged. After nine days, a slight decrease in the concentration of ajoen was observed, which indicates the beginning of its decomposition.
Общий выход аджоена в процентах от массы исходного аллицина составляет 30%, при этом соотношение Е- и Z-изомеров в смеси 1/2. Динамика образования Z-изомера приведена в таблице.The total yield of ajoen as a percentage of the mass of the starting allicin is 30%, while the ratio of the E and Z isomers in the mixture is 1/2. The dynamics of the formation of the Z-isomer are shown in the table.
Окончательное выделение из реакционной смеси Z-изомера и Е-изомера аджоена осуществляется с помощью препаративной ВЭЖХ на силикагеле. Условия разделения следующие: колонка ULTRASIL 10х250 мм, элюент гексан/изопропанол 95/5, УФ-детектор с длиной волны 254 нм, скорость элюирования 4,5 мл/мин, количество вводимой пробы 50 мкл.The final isolation from the reaction mixture of the Z-isomer and E-isomer of Ajoen is carried out using preparative HPLC on silica gel. The separation conditions are as follows: a column of ULTRASIL 10x250 mm, eluent hexane / isopropanol 95/5, a UV detector with a wavelength of 254 nm, an elution rate of 4.5 ml / min, the amount of injected sample is 50 μl.
Структура полученных Z-аджоена и Е-аджоена была подтверждена методом ЯМР-спектроскопии.The structure of the obtained Z-ajoen and E-ajoen was confirmed by NMR spectroscopy.
Z-аджоенZ-ajoen
ЯМР’Н(СВСl3, δ); 6,45(д, 1H; J=9,4 Гц); 5,96-5,7 (м, 3Н); 5,46-5,38(м, 2Н); 5,20-5,14(м, 2Н); 3,67-3,47(м,3Н); 3,43-3,35(м,3Н)NMR'H (CBCl 3 , δ); 6.45 (d, 1H; J = 9.4 Hz); 5.96-5.7 (m, 3H); 5.46-5.38 (m, 2H); 5.20-5.14 (m, 2H); 3.67-3.47 (m, 3H); 3.43-3.35 (m, 3H)
ЯМР13С(CDCl3, δ); 138,52; 132,50; 125,57; 123,79; 119,23; 117,91; 54,83; 49,49; 42,02. 13 C NMR (CDCl 3 , δ); 138.52; 132.50; 125.57; 123.79; 119.23; 117.91; 54.83; 49.49; 42.02.
Е-аджоенEjojoen
ЯМР’Н(СDСl3, δ); 6,35(дт, 1Н; J=14,71 Гц, 1,1 Гц); 5,95-5,76 (м, 3Н); 5,48-5,36(м, 2Н); 5,21-5,15(м, 2Н); 3,56-3,38(м,4Н) 3,37 (д, 2Н; J=7,39 Гц)NMR'H (CDCl 3 , δ); 6.35 (dt, 1H; J = 14.71 Hz, 1.1 Hz); 5.95-5.76 (m, 3H); 5.48-5.36 (m, 2H); 5.21-5.15 (m, 2H); 3.56-3.38 (m, 4H) 3.37 (d, 2H; J = 7.39 Hz)
ЯМР13C(СDСl3, δ); 135,0; 132,7; 125,6; 124,0; 119,4; 116,6; 54,4; 53,3; 41,6.NMR 13 C (CDCl 3 , δ); 135.0; 132.7; 125.6; 124.0; 119.4; 116.6; 54.4; 53.3; 41.6.
ПримерExample
300 мг синтетического аллицина растворялось в 50 мл н-бутанола и выдерживалась, в течение 6 суток при температуре 21-23°С. Затем полученная реакционная масса концентрировалась под вакуумом на роторном испарителе до объема ≈1 мл. Далее осуществлялось разделение изомеров методом препаративной ВЭЖХ. Условия разделения: жидкостной хроматограф SESIL Adept System 2, колонка ULTRASIL 10×250 мм, элюент гексан/изопропанол 95/5, УФ-детектор с длиной волны 254 нм, скорость элюирования 4,5 мл/мин, количество вводимой пробы 50 мкл. Соответствующая хроматограмма приведена на чертеже.300 mg of synthetic allicin was dissolved in 50 ml of n-butanol and aged for 6 days at a temperature of 21-23 ° C. Then, the resulting reaction mass was concentrated under vacuum on a rotary evaporator to a volume of ≈1 ml. Next, isomers were separated by preparative HPLC. Separation conditions: SESIL Adept System 2 liquid chromatograph, ULTRASIL 10 × 250 mm column, eluent hexane / isopropanol 95/5, UV detector with a wavelength of 254 nm, elution speed 4.5 ml / min, amount of sample injected 50 μl. The corresponding chromatogram is shown in the drawing.
Полученные таким образом растворы Е- и Z-изомеров аджоена в элюенте упаривались досуха под вакуумом на роторном испарителе при комнатной температуре. Было выделено 67 мг Z-аджоена и 33 мг Е-аджоена.The thus obtained solutions of the E- and Z-isomers of ajoen in the eluent were evaporated to dryness under vacuum on a rotary evaporator at room temperature. 67 mg of Z-Ajoen and 33 mg of E-Ajoen were isolated.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2003113228/04A RU2239630C1 (en) | 2003-05-12 | 2003-05-12 | Method for preparing adjoene (z)- and (e)-isomers in ratio 2:1 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2003113228/04A RU2239630C1 (en) | 2003-05-12 | 2003-05-12 | Method for preparing adjoene (z)- and (e)-isomers in ratio 2:1 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2239630C1 true RU2239630C1 (en) | 2004-11-10 |
| RU2003113228A RU2003113228A (en) | 2004-12-27 |
Family
ID=34310835
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2003113228/04A RU2239630C1 (en) | 2003-05-12 | 2003-05-12 | Method for preparing adjoene (z)- and (e)-isomers in ratio 2:1 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2239630C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8623923B2 (en) | 2009-03-05 | 2014-01-07 | Neem Biotech Limited | Process for the preparation of ajoene |
| US10131629B2 (en) | 2014-11-25 | 2018-11-20 | Neem Biotech Ltd | Process for producing ajoene |
-
2003
- 2003-05-12 RU RU2003113228/04A patent/RU2239630C1/en not_active IP Right Cessation
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8623923B2 (en) | 2009-03-05 | 2014-01-07 | Neem Biotech Limited | Process for the preparation of ajoene |
| RU2542987C2 (en) * | 2009-03-05 | 2015-02-27 | Ним Байотек Лимитед | Method of obtaining ajoene |
| US10131629B2 (en) | 2014-11-25 | 2018-11-20 | Neem Biotech Ltd | Process for producing ajoene |
| RU2695788C2 (en) * | 2014-11-25 | 2019-07-26 | Неем Биотек Лимитед | Method of producing ajoene |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Quispe et al. | Chemical composition and antioxidant activity of Aloe vera from the Pica Oasis (Tarapacá, Chile) by UHPLC-Q/Orbitrap/MS/MS | |
| Rodríguez-Pérez et al. | Optimization of extraction method to obtain a phenolic compounds-rich extract from Moringa oleifera Lam leaves | |
| Avula et al. | Characterization and screening of pyrrolizidine alkaloids and N-oxides from botanicals and dietary supplements using UHPLC-high resolution mass spectrometry | |
| James et al. | Liquid chromatographic methods for the isolation and identification of new pectenotoxin-2 analogues from marine phytoplankton and shellfish | |
| Tocmo et al. | Boiling enriches the linear polysulfides and the hydrogen sulfide-releasing activity of garlic | |
| Granica et al. | Qualitative and quantitative analyses of secondary metabolites in aerial and subaerial of Scorzonera hispanica L.(black salsify) | |
| Flores et al. | Anthocyanins from Eugenia brasiliensis edible fruits as potential therapeutics for COPD treatment | |
| Wang et al. | Dissipation and residue behavior of emamectin benzoate on apple and cabbage field application | |
| Pugajeva et al. | Identification and determination of stilbenes by Q-TOF in grape skins, seeds, juice and stems | |
| Ciminiello et al. | Palytoxin in seafood by liquid chromatography tandem mass spectrometry: Investigation of extraction efficiency and matrix effect | |
| Makita et al. | UPLC-qTOF-MS profiling of pharmacologically important chlorogenic acids and associated glycosides in Moringa ovalifolia leaf extracts | |
| Jin et al. | Identification of polyphenols in mulberry (genus Morus) cultivars by liquid chromatography with time-of-flight mass spectrometer | |
| Rao et al. | HPLC determination of costunolide as a marker of Saussurea lappa and its herbal formulations | |
| Kim et al. | Simultaneous determination of bioactive phenolic compounds in the stem extract of Rhus verniciflua stokes by high performance liquid chromatography | |
| Hseu et al. | Antrodia salmonea in submerged culture exhibits antioxidant activities in vitro and protects human erythrocytes and low-density lipoproteins from oxidative modification | |
| Zhang et al. | Matrix solid-phase dispersion extraction coupled with HPLC-diode array detection method for the analysis of sesquiterpene lactones in root of Saussurea lappa CB Clarke | |
| Messaili et al. | Combination of molecular network and centrifugal partition chromatography fractionation for targeting and identifying Artemisia annua L. antioxidant compounds | |
| Spórna-Kucab et al. | Separation of betacyanins from Iresine herbstii Hook. ex Lindl. leaves by high-speed countercurrent chromatography in a polar solvent system | |
| Musharraf et al. | Sensitive analysis of bioactive secondary metabolites in lichen species using liquid chromatography–mass spectrometry | |
| Spórna-Kucab et al. | High-speed counter-current chromatography in separation of betacyanins from flowers of red Gomphrena globosa L. cultivars | |
| Park et al. | Discrimination of Platycodon grandiflorum and Codonopsis lanceolata using gas chromatography-mass spectrometry-based metabolomics approach | |
| RU2239630C1 (en) | Method for preparing adjoene (z)- and (e)-isomers in ratio 2:1 | |
| Djabou et al. | Evaluation of antioxidant and antimicrobial activities of the phenolic composition of Algerian Arbutus unedo L. roots | |
| Xu et al. | Quantitative determination and pharmacokinetic study of casticin in rat plasma by liquid chromatography–mass spectrometry | |
| Le et al. | High-performance liquid chromatography method development for the quality control of Ginkgonis Semen |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20050513 |