RU2229513C2 - Способ получения l-аминокислот, штамм escherichia coli - продуцент l-аминокислоты (варианты) - Google Patents

Способ получения l-аминокислот, штамм escherichia coli - продуцент l-аминокислоты (варианты) Download PDF

Info

Publication number
RU2229513C2
RU2229513C2 RU2001131570/13A RU2001131570A RU2229513C2 RU 2229513 C2 RU2229513 C2 RU 2229513C2 RU 2001131570/13 A RU2001131570/13 A RU 2001131570/13A RU 2001131570 A RU2001131570 A RU 2001131570A RU 2229513 C2 RU2229513 C2 RU 2229513C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
amino acids
bacterium
threonine
phenylalanine
amino acid
Prior art date
Application number
RU2001131570/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2001131570A (ru
Inventor
В.А. Лившиц (RU)
В.А. Лившиц
М.В. Витушкина (RU)
М.В. Витушкина
тинер М.М. Гус (RU)
М.М. Гусятинер
тдинов М.Х. Зи (RU)
М.Х. Зиятдинов
н В.З. Ахверд (RU)
В.З. Ахвердян
Е.А. Саврасова (RU)
Е.А. Саврасова
В.Г. Дорошенко (RU)
В.Г. Дорошенко
С.В. Машко (RU)
С.В. Машко
Original Assignee
Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority to RU2001131570/13A priority Critical patent/RU2229513C2/ru
Application filed by Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" filed Critical Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика"
Priority to AU2002355021A priority patent/AU2002355021C1/en
Priority to CA2468178A priority patent/CA2468178C/en
Priority to JP2003545812A priority patent/JP4305183B2/ja
Priority to KR1020047007782A priority patent/KR101023924B1/ko
Priority to ES02788635T priority patent/ES2269788T3/es
Priority to PCT/JP2002/012202 priority patent/WO2003044191A1/ja
Priority to BRPI0214329-1A priority patent/BR0214329B1/pt
Priority to CNB028274784A priority patent/CN100469875C/zh
Priority to AT02788635T priority patent/ATE334190T1/de
Priority to DE60213456T priority patent/DE60213456T2/de
Priority to DK02788635T priority patent/DK1449917T3/da
Priority to EP06009979A priority patent/EP1688482A1/en
Priority to PL369776A priority patent/PL207851B1/pl
Priority to MXPA04004872A priority patent/MXPA04004872A/es
Priority to EP02788635A priority patent/EP1449917B1/en
Priority to ARP020104507A priority patent/AR037583A1/es
Priority to US10/302,983 priority patent/US7259003B2/en
Publication of RU2001131570A publication Critical patent/RU2001131570A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2229513C2 publication Critical patent/RU2229513C2/ru
Priority to US11/761,465 priority patent/US7531332B2/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/24—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Enterobacteriaceae (F), e.g. Citrobacter, Serratia, Proteus, Providencia, Morganella, Yersinia
    • C07K14/245—Escherichia (G)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
    • C07K5/06113—Asp- or Asn-amino acid
    • C07K5/06121—Asp- or Asn-amino acid the second amino acid being aromatic or cycloaliphatic
    • C07K5/0613—Aspartame
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • C12P13/08—Lysine; Diaminopimelic acid; Threonine; Valine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • C12P13/22—Tryptophan; Tyrosine; Phenylalanine; 3,4-Dihydroxyphenylalanine
    • C12P13/222—Phenylalanine

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Изобретение относится к биотехнологии. L-аминокислоты, такие как L-фенилаланин или L-треонин, получают культивированием бактерии Escherichia coli с увеличенной способностью к продукции L-аминокислот. Затем аминокислоты выделяют из культуральной жидкости. Штаммы бактерии Escherichia coli AJ12739 (pAYCTER-YEDA2) и MG442/pYEDA1 обладают увеличенной способностью к продукции L-фенилаланина и L-треонина соответственно. Изобретение позволяет получать L-аминокислоты с высокой степенью эффективности. 3 с. и 4 з.п.ф-лы, 3 табл.

Description

Область техники
Настоящее изобретение относится к биотехнологии, в частности к способу получения L-аминокислот методом ферментации, и, более конкретно, к гену, полученному из бактерии Escherichia coli. Указанный ген позволяет улучшить продукцию L-аминокислот, например L-фенилаланина и L-треонина.
Предшествующий уровень техники
Традиционно L-аминокислоты в промышленном масштабе могут быть получены методом ферментации с использованием штаммов микроорганизмов, полученных из природных источников, или их мутантов, специально модифицированных для того, чтобы увеличить продукцию L-аминокислот.
Описано множество методов увеличения продукции L-аминокислот, например, путем трансформации микроорганизма рекомбинантной ДНК (см., например, патент США 4278765). Указанные методы основаны на повышении активности ферментов, вовлеченных в биосинтез аминокислот, и/или уменьшении чувствительности целевого фермента к обратному ингибированию продуцируемой L-аминокислотой (см., например, выложенную патентную заявку Японии № 56-18596 (1981), WO 95/16042 или патенты США 5661012 и 6040160).
С другой стороны, повышенная экскреция L-аминокислот может увеличить продуктивность штамма, продуцирующего L-аминокислоту. Описан штамм бактерии, принадлежащей к роду Corynebacterium, обладающей повышенной экспрессией гена экскреции L-лизина (ген lysE) (WO 9723597 A2). Кроме того, описаны гены, кодирующие белки, способные к секреции L-цистеина, L-цистина, N-ацетилсерина или производных триазолидина (патент США 5972633).
К настоящему времени описаны несколько генов, кодирующих, как предполагается, мембранные белки, которые увеличивают продукцию L-аминокислот. Дополнительная копия гена rhtB делает бактерию более устойчивой к L-гомосерину и увеличивает продукцию L-гомосерина, L-треонина, L-аланина, L-валина и L-изолейцина (Европейская патентная заявка ЕР 994190 А2). Дополнительная копия гена rhtC делает бактерию более устойчивой к L-гомосерину и L-треонину и увеличивает продукцию L-гомосерина, L-треонина и L-лейцина (Европейская патентная заявка ЕР 1013765 А1). Дополнительные копии генов yahN, yeaS, yfiK и yggA увеличивают продукцию L-глутаминовой кислоты, L-лизина, L-треонина, L- аланина, L-гистидина, L-пролина, L-аргинина, L-валина и L-изолейцина (Европейская патентная заявка ЕР 1016710 А2).
Ранее авторы настоящего изобретения получили, исходя из E.coli К12, мутант, содержащий мутацию thrR (упоминаемый здесь и далее как rhtA23), придающую устойчивость к высокой концентрации треонина и гомосерина на минимальной питательной среде (Astaurova, О.В. et al., Appl. Biochem. Microbiol., 21,611-616, 1985). Указанная мутация улучшала продукцию L-треонина (Авторское свидетельство СССР № 974817), гомосерина и глутамата (Astaurova, O.B. et al., Appl. Biochem. Microbiol., 27, 556-561, 1991) соответствующими продуцентами - штаммами E.coli.
Более того, авторы настоящего изобретения выяснили, что ген rhtA расположен в положении 18 min на хромосоме E.coli рядом с опероном glnHPQ, кодирующим компоненты системы транспорта глутамина, а также выяснили, что ген rhtA идентичен открытой рамке считывания ybiF, расположенной между генами рехВ и оmрХ. Указанный ген, экспрессирующий белок, кодируемый открытой рамкой считывания, был обозначен как ген rhtA (rht: resistance to homoserine and threonine - устойчивость к гомосерину и треонину).
Кроме того, авторы настоящего изобретения установили, что амплификация гена rhtA также придает устойчивость к гомосерину и треонину. Мутация rhtA23 является заменой А на G положении-1 относительно старт-кодона ATG (ABSTRACTS of 17th International Congress of Biochemistry and Molecular Biology in conjugation with 1997 Annual Meeting of the American Society for Biochemistry and Molecular Biology, San Francisco, California, August, 24-29, 1997, abstract No.457). Известно, что состав нуклеотидов между последовательностью SD и старт-кодоном, а в особенности последовательность непосредственно перед старт-кодоном, очень сильно влияет на транслируемость мРНК. Было обнаружено 20-кратное изменение уровня экспрессии в зависимости от природы трех нуклеотидов, предшествующих старт-кодону (Gold et al., Annu. Rev. Microbiol., 35, 365-403, 1981; Hui et al., EMBO J., 3, 623-629, 1984). Поэтому было высказано предположение, что мутация rhtA23 увеличивает экспрессию гена rhtA.
Ген rhtA кодирует состояший из 295 аминокислот сильногидрофобный белок, содержащий 10 предполагаемых трансмембранных сегментов. Поиск с помощью программы PSI-BLAST в нуклеотидной последовательности генома Е.соli К-12, принадлежащего к роду Escherichia, выявил по крайней мере 10 белков, гомологичный белку RhtA. Среди них оказались белки, кодируемые генами ydeD и yedA. Ранее было показано, что ген ydeD вовлечен в процесс выброса из клетки веществ - метаболитов биосинтеза цистеина (Daβler et al., Mol. Microbiol., 36, 1101-1112, 2000; патент США 5972663). Ген yedA известен как ген, кодирующий, как предполагается, трансмембранную субъединицу с неизвестной функцией (нуклеотиды с 8037 по 8957 в последовательности с инвентарным номером АЕ 000287 U 00096 в базе данных GenBank).
Описание изобретения
Целью настоящего изобретения является увеличение продуктивности штаммов, продуцирующих L-аминокислоты, и предоставление способа получения L-аминокислот, например L-фенилаланина и L-треонина, с использованием указанных штаммов.
Данная цель была достигнута путем обнаружения того факта, что yedA, кодирующий мембранный белок, гомологичный RhtA, не вовлеченый в путь биосинтеза целевых L-аминокислот, придает микроорганизму устойчивость к нескольким аминокислотам и их аналогам в случае, когда аллель дикого типа этого гена амплифицировался в микроорганизме на многокопийном векторе. Кроме того, ген yedA увеличивает продукцию аминокислоты в случае, когда дополнительные копии указанного гена введены в клетки соответствующего штамма-продуцента. Таким образом было совершено настоящее изобретение.
Настоящее изобретение включает в себя следующее:
1. Бактерия - продуцент L-аминокислоты, принадлежащая к роду Escherichia, в которой продукция L-аминокислоты упомянутой бактерией увеличена за счет повышения активности белков, описанных в пунктах (А) или (В), в клетке упомянутой бактерии:
(A) белок, который представлен аминокислотной последовательностью, приведенной в списке последовательностей под номером 2;
(B) белок, который представлен аминокислотной последовательностью, включающей делеции, замены, вставки или добавление одной или нескольких аминокислот в аминокислотную последовательность, приведенную в списке последовательностей под номером 2, и который обладает активностью, придающей бактерии повышенную устойчивость к L-аминокислотам, таким как фенилаланин, треонин, гомосерин или цистеин, и/или их аналогам, таким как п-фторфенилаланин, 5-фтор-DL-триптофан, S-(2-аминоэтил)цистеин или 4-аза-DL-лейцин (здесь и далее белки, описанные в вышеупомянутых пунктах (А) или (В), упоминаются как "белки согласно настоящему изобретению").
2. Бактерия в соответствии с вышеупомянутой бактерией, в которой активности белков, описанных в пунктах (А) или (В), повышены путем трансформации бактерии с помощью ДНК, кодирующей белки, описанные в пунктах (А) или (В), или путем изменения регуляции экспрессии указанной ДНК в хромосоме упомянутой бактерии.
3. Бактерия в соответствии с вышеупомянутой бактерией, в которой трансформация осуществляется с использованием многокопийного вектора.
4. Способ получения L-аминокислоты, включающий стадии выращивания бактерии в соответствии с вышеупомянутой бактерией в питательной среде и сбора из культуральной жидкости полученной и накопленной в ней L-аминокислоты.
5. Способ в соответствии с вышеупомянутым способом, в котором L-аминокислотой является L-фенилаланин.
6. Способ в соответствии с вышеупомянутым способом, в котором у указанной бактерии повышена экспрессия генов биосинтеза фенилаланина.
7. Способ в соответствии с вышеупомянутым способом, в котором L-аминокислотой является L-треонин.
8. Способ в соответствии с вышеупомянутым способом, в котором у указанной бактерии повышена экспрессия треонинового оперона.
Способ получения L-аминокислоты включает продукцию L-фенилаланина с использованием бактерии - продуцента L-фенилаланина, в которой повышены активности белков согласно настоящему изобретению, например, представленных аминокислотной последовательностью, приведенной под номером 2. Также способ получения L-аминокислоты включает продукцию L-треонина с использованием бактерии - продуцента L-треонина, в которой повышены активности белков согласно настоящему изобретению, например, представленных аминокислотной последовательностью, приведенной под номером 2.
Настоящее изобретение более детально будет описано ниже.
Вышеуказанной бактерией согласно настоящему изобретению является бактерия - продуцент L-аминокислоты, принадлежащая к роду Escherichia, в которой продукция L-аминокислоты указанной бактерией увеличена за счет повышения активностей белков согласно настоящему изобретению в клетке бактерии.
Вышеуказанной бактерией согласно настоящему изобретению является бактерия - продуцент L-аминокислоты, принадлежащая к роду Escherichia и обладающая повышенной активностью белков, которые увеличивают продукцию целевой L-аминокислоты. Конкретно, бактерией согласно настоящему изобретению является бактерия - продуцент L-аминокислоты, принадлежащая к роду Escherichia и обладающая повышенной активностью белков согласно настоящему изобретению. Более конкретно, бактерия согласно настоящему изобретению содержит ДНК, в которой повышена экспрессия гена yedА на хромосоме или на плазмиде в бактерии, и обладает повышенной способностью к продукции L-аминокислоты, например L-фенилаланина или L-треонина.
К белкам согласно настоящему изобретению относятся белки, описанные в следующих пунктах (А) или (В):
(A) белок, который представлен аминокислотной последовательностью, приведенной в списке последовательностей под номером 2;
(B) белок, который представлен аминокислотной последовательностью, включающей делеции, замены, вставки или добавление одной или нескольких аминокислот в аминокислотную последовательность, приведенную в списке последовательностей под номером 2, и который обладает активностью, придающей бактерии устойчивость к аминокислотам, таким как фенилаланин, треонин, гомосерин или цистеин, и/или их аналогам, таким как п-фторфенилаланин, 5-фтор-DL-триптофан, S-(2-аминоэтил)цистеин или 4-аза-DL-лейцин.
Количество “нескольких” аминокислот различается в зависимости от положения и типа аминокислотного остатка в трехмерной структуре белка. Оно может быть от 2 до 30, предпочтительно от 2 до 15, и более предпочтительно от 2 до 5 для белка (А).
Устойчивость к L-аминокислотам и/или их аналогам означает способность бактерии к росту на минимальной питательной среде, содержащей L-аминокислоту и/или ее аналог в концентрации, при которой штамм дикого типа или родительский штамм не может расти, или способность бактерии расти с большей скоростью на питательной среде, содержащей L-аминокислоту и/или ее аналог, чем штамм дикого типа или родительский штамм. Примерами аналогов L-аминокислот являются п-фторфенилаланин, 5-фтор-DL-триптофан, S-(2-аминоэтил)цистеин или 4-aзa-DL-лейцин. Упомянутая выше концентрация L-аминокислоты составляет обычно от 1 до 50 мг/мл, предпочтительно от 30 до 50 мг/мл в случае L-треонина, предпочтительно от 3 до 5 мг/мл в случае L-гомосерина, предпочтительно от 5 до 7 мг/мл в случае серина и цистеина. Упомянутая выше концентрация аналога L-аминокислоты составляет обычно от 0,1 до 1,0 мкг/мл, предпочтительно от 0,2 до 0,5 мкг/мл в случае 5-фтор-DL-триптофана; обычно от 0,1 до 2,0 мг/мл, предпочтительно от 0,5 до 1,0 мг/мл в случае п-фторфенилаланина; обычно от 0,1 до 2,0 мг/мл, предпочтительно от 0,5 до 10 мг/мл в случае 4-аза-DL-лейцина и S-(2-аминоэтил)цистеина.
К бактерии согласно настоящему изобретению также относятся бактерии, в которых активности белков согласно настоящему изобретению повышены путем трансформации бактерии с помощью ДНК, кодирующей белки, описанные в пунктах (А) или (В), или путем изменения регуляции экспрессии последовательности указанной ДНК в хромосоме упомянутой бактерии.
Упомянутая ДНК, использующаяся для модификации бактерии согласно настоящему изобретению, кодирует, как предполагается, белок, обладающий способностью к экскреции L-аминокислот. Более конкретно, ген yedA является такой ДНК. Ген yedA может быть получен, например, с помощью ПЦР с использованием затравок, полученных на основе нуклеотидной последовательности, приведенной под номером 1.
К ДНК согласно настоящему изобретению относится ДНК, кодирующая белок, включающий делеции, замены, вставки или добавление одной или нескольких аминокислот в одно или несколько положений белка (А) при условии, что они не приводят к утрате активности указанного белка. Хотя количество “нескольких” аминокислот различается в зависимости от положения и типа аминокислотного остатка в трехмерной структуре белка, оно может быть от 2 до 30, предпочтительно от 2 до 15, и более предпочтительно от 2 до 5 для белка (А). ДНК, кодирующая практически такой же белок, как белок, описанный в пункте (А), может быть получена, например, путем модификации нуклеотидной последовательности, кодирующей белок, описанный в пункте (А), с использованием сайт-направленного мутагенеза таким образом, что один или несколько аминокислотных остатков будут удалены, заменены, введены или добавлены. Модифицированная подобным образом ДНК может быть получена традиционными методами, использующими обработку химическими реагентами и содержание в условиях, вызывающих мутации. К подобного рода обработкам относятся обработка ДНК, кодирующей белки согласно настоящему изобретению, с помощью гидроксиламина или обработка бактерии, содержащей ДНК, с помощью УФ излучения или химического реагента, такого как N-метил-N’-нитро-N-нитрозогуанидин или азотистая кислота.
К ДНК согласно настоящему изобретению относятся варианты, которые могут быть найдены в различных штаммах или вариантах бактерий, принадлежащих к роду Escherichia, в виду природного разнообразия. ДНК, кодирующая подобные варианты, может быть получена путем выделения ДНК, которая гибридизуется с геном yedA или частью указанного гена в жестких условиях и которая кодирует белок, увеличивающий продукцию L-аминокислот. Термин “жесткие условия”, упомянутый здесь, означает условия, при которых образуются так называемые специфические гибриды, а неспецифические - не образуются. Например, к жестким условиям относятся условия, при которых гибридизуются ДНК, обладающие высокой степенью гомологии, к примеру ДНК, обладающие гомологией не менее 70% друг относительно друга. В качестве варианта примером жестких условий являются условия, соответствующие условиям отмывки при гибридизации по Саузерну, например 60°С, 1×SSC, 0,1% SDS, предпочтительно 0,1×SSC, 0,1% SDS. В качестве зонда для ДНК, кодирующей варианты и гибридизующейся с геном yedA, также может быть использована часть нуклеотидной последовательности под номером 1. Зонд подобного рода может быть получен в результате ПЦР с использованием в качестве затравок олигонуклеотидов, полученных на основе нуклеотидной последовательности под номером 1, и фрагмента ДНК, содержащего нуклеотидную последовательность под номером 1, в качестве матрицы. В случае, когда в качестве зонда используется фрагмент ДНК длиной около 300 пар оснований, условия отмывки при гибридизации соответствуют, например, 50°С, 2×SSC и 0,1% SDS.
Трансформация бактерии с помощью ДНК, кодирующей белок, означает введение указанной ДНК в клетку бактерии, например, с помощью традиционных методов для того, чтобы усилить экспрессию генов, кодирующих белок согласно настоящему изобретению, и повысить активность белка в клетке бактерии.
К методам увеличения экспрессии генов относятся методы увеличения числа копий гена. Введение гена в вектор, способный к функционированию в бактерии, принадлежащей к роду Escherichia, увеличивает число копий указанного гена. Для подобных целей могут быть предпочтительно использованы многокопийные векторы. Примерами многокопийных векторов являются pBR322, pUC19, pBluescript KS+, pACYC177, pACYC184, pAYC32, pMW119, pET22b и подобные им.
Кроме того, усиление экспрессии гена может быть достигнуто путем введения некоторого числа копий гена в бактериальную хромосому, например, методом гомологичной рекомбинации или подобным.
В случае, когда добиваются усиления экспрессии двух или более генов, указанные гены могут быть расположены вместе на одной и той же плазмиде или раздельно на различных плазмидах. Также допустимо, чтобы одни из генов располагались в хромосоме, а другие гены располагались на плазмиде.
С другой стороны, усиление экспрессии генов может быть достигнуто помещением ДНК согласно настоящему изобретению под контроль сильного промотора. Например, в качестве сильных промоторов известны lac промотор, trp промотор, trc промотор, PL промотор фага лямбда. Использование сильного промотора может быть совмещено с увеличением числа копий гена.
Методы получения хромосомной ДНК, гибридизации, ПЦР, получения ДНК плазмид, расщепления и лигирования ДНК, трансформации, отбора олигонуклеотидов в качестве затравок и другие подобные методы являются обычными методами, хорошо известными для специалиста в указанной области техники. Перечисленные методы описаны в Sambrook, J., and Russell D., "Molecular Cloning A Laboratory Manual, Third Edition", Cold Spring Harbor Laboratory Press (2001) или подобных изданиях.
Бактерия согласно настоящему изобретению может быть получена путем введения вышеуказанных ДНК в бактерию, уже обладающую способностью к продукции L-аминокислоты. С другой стороны, бактерия согласно настоящему изобретению может быть получена путем придания бактерии, уже содержащей указанные ДНК, способности к продукции L-аминокислоты.
Примеры бактерий, принадлежащих в роду Escherichia, - продуцентов.
Бактерии - продуценты фенилаланина.
В качестве родительских штаммов, в которых активности белков согласно настоящему изобретению будут повышены, могут быть использованы бактерии, принадлежащие к роду Escherichia, - продуценты L-фенилаланина, такие как штамм AJ12739 (tyrA:Tn10, tyrR) (ВКМП В-8197); штамм HW1089 (АТСС-55371), содержащий ген pheA34 (патент США 5354672); мутантный штамм MWEC101-b (KR8903681); штаммы NRRL В-12141, NRRL B-12145, NRRL В-12146 и NRRL В-12147 (патент США 4407952) и пободные им. Также в качестве родительских штаммов, в которых активности белков согласно настоящему изобретению будут повышены, могут быть использованы бактерии, принадлежащие к роду Escherichia, - продуценты L-фенилаланина, такие как штамм E.coli K-12[W3110(tyrA)/pPHAB] (FERM ВР-3566), штамм E.coli K-12[W3110(tyrA)/pPHAD] (FERM BP-12659), штамм E.coli K-12[W3110(tyrA)/pPHATerm] (FERM BP-12662) и штамм E.coli K-12[W3110(tyrA)/pBR-aroG4, рАСМАВ], названный как AJ12604 (FERM BP-3579) (Европейский патент ЕР 488424 В1).
Бактерии - продуценты треонина.
В качестве родительских штаммов, в которых активности белков согласно настоящему изобретению будут повышены, могут быть использованы бактерии -продуценты L-треонина, принадлежащие к роду Escherichia, такие как MG442 (ВКПМ В-1628) (Гусятинер М.М. и др. Генетика, 14, 947-956, 1978); ВКПМ В-3996 (патент США 6165756); ВКПМ В-5318 (патент США 6132999); FERM ВР-3756 и ВР-4072 (патент США 5376538) и подобные им.
К способам согласно настоящему изобретению относится способ продукции L-аминокислоты, включающий стадии выращивания бактерии согласно настоящему изобретению в питательной среде с целью продукции и накопления указанной L-аминокислоты в питательной среде и сбора L-аминокислоты из культуральной жидкости. Также к способам согласно настоящему изобретению относится способ продукции L-фенилаланина, включающий стадии выращивания бактерии согласно настоящему изобретению в питательной среде с целью продукции и накопления L-фенилаланина в указанной питательной среде и сбора L-фенилаланина из культуральной жидкости. Также к способам согласно настоящему изобретению относится способ продукции L-треонина, включающий стадии выращивания бактерии согласно настоящему изобретению в питательной среде с целью продукции и накопления L-треонина в указанной питательной среде и сбора L-треонина из культуральной жидкости.
Согласно настоящему изобретению выращивание, сбор и очистка L-аминокислоты из культуральной или подобной ей жидкости могут быть осуществлены способом, подобным традиционным способам ферментации, в которых аминокислота продуцируется с использованием микроорганизма. Питательная среда, используемая для выращивания, может быть как синтетической, так и натуральной при условии, что указанная среда содержит источники углерода, азота, минеральные добавки и, если необходимо, соответствующее количество питательных добавок, которые требуются микроорганизму для роста. К источникам углерода относятся различные углеводы, такие как глюкоза и сахароза, и различные органические кислоты. В зависимости от степени ассимиляции используемого микроорганизма могут использоваться спирты, такие как этанол и глицерин. В качестве источника азота могут использоваться различные соли аммония, такие как аммиак и сульфат аммония, другие соединения азота, такие как амины, природные источники азота, такие как пептон, гидролизат соевых бобов и ферментолизат микроорганизмов. В качестве минеральных добавок используются монофосфат калия, сульфат магния, хлорид натрия, сульфат железа, сульфат марганца, хлорид кальция и подобные соединения. Некоторые питательные добавки могут быть, при необходимости, добавлены в питательную среду. Например, если микроорганизму для роста необходим тирозин (ауксотрофия по тирозину), соответствующее количество тирозина может быть добавлено в питательную среду для выращивания.
Выращивание осуществляется предпочтительно в аэробных условиях, таких как перемешивание, ферментация с аэрацией, при температуре от 20 до 40°С, предпочтительно от 30 до 38°С. рН питательной среды находится в пределах от 5 до 9, предпочтительно от 6.5 до 7.2. рН среды может регулироваться аммиаком, карбонатом кальция, различными кислотами, основаниями и буферами. Обычно выращивание в течение от 1 до 5 дней приводит к накоплению целевой L-аминокислоты в культуральной жидкости.
После выращивания твердые остатки, такие как клетки, могут быть удалены из культуральной жидкости методом центрифугирования или фильтрацией через мембрану, а затем целевая L-аминокислота может быть собрана и очищена методами ионообменной хроматографии, концентрирования и кристаллизации.
Наилучший способ осуществления изобретения
Настоящее изобретение более детально описано со ссылкой на примеры. В указанных примерах аминокислоты являются аминокислотами L-конфигурации, если не указано иное.
Пример 1. Клонирование гена yedA из E.coli.
Полная нуклеотидная последовательность штамма E.coli К-12 определена (Science, 277, 1453-1474, 1997). Поиск с помощью программы PSI-BLAST выявил, что в геноме E.coli К-12 присутствуют по крайней мере 10 паралогов гена rhtA, включая ген yedА. Ген yedА кодирует, как предполагается, трансмембранную субъединицу, функция которой неизвестна.
На основе приведенной нуклеотидной последовательности были синтезированы затравки, приведенные под номерами 3 (затравка 1) и 4 (затравка 2) в Списке последовательностей (см. в конце описания). Затравка 1 комплементарна последовательности с 179 по 153 нуклеотид перед старт-кодоном и содержит сайт узнавания фермента рестрикции BamHI, введенный на ее 5’-конец. Затравка 2 комплементарна последовательности с 53 по 77 нуклеотид после стоп-кодона и содержит сайт узнавания фермента рестрикции SalI, введенный на ее 5’-конец.
Хромосомная ДНК штамма E.coli TG1 была получена стандартным методом. ПЦР осуществлялась на "Perkin Elmer GeneAmp PCR System 2400" в следующих условиях: 40 секунд при 95°С, 40 секунд при 47°С, 40 секунд при 72°С, 30 циклов с использованием Taq-полимеразы (Fermentas). Полученный фрагмент ДНК, содержащий ген yedA с его собственным промотором, был обработан рестриктазами BamHI и SalI и введен в многокопийные векторы pUC19 и pAYCTER3, предварительно обработанные теми же рестриктазами. Таким образом были получены плазмиды pYEDA1 и pYEDA2 соответственно. Вектор pAYCTER3 является производным вектора pAYC32 - очень стабильного вектора с умеренным числом копийности, сконструированного на основе плазмиды RSF1010 (Christoserdov A.Y., Tsygankov Y.D, Broad-host range vectors derived from a RSF1010 Tnl plasmid, Plasmid, 1986, v.16, pp.161-167). Вектор pAYCTER3 получен путем введения полилинкера из pUC19 и сильного терминатора rrnВ в плазмиду pAYC32 вместо ее промотора следующим образом. Сначала полилинкер из плазмиды pUC19 был получен с помощью ПЦР с использованием затравок, приведенных под номерами 5 и 6 в Списке последовательностей. Полученный продукт ПЦР был обработан рестриктазами EcoRI и BglII. Терминатор rrnВ также был получен с помощью ПЦР с использованием затравок, приведенных под номерами 7 и 8. Полученный продукт ПЦР был обработан рестриктазами BglII и BclII. Затем эти два фрагмента ДНК были лигированы в плазмиду pAYC32, предварительно обработанную рестриктазами EcoRI и BclII. Таким образом была получена плазмида pAYCTER3.
Пример 2. Влияние амплификации гена yedA на устойчивость штамма Е.coli TG1 к аминокислотам и их аналогам.
Плазмиды pYEDAl и pYEDA2, а также векторы pUC19 и pAYCTER3 были введены в штамм E.coli TG1. Таким образом были получены штаммы TG1 (pYEDA1), TG1 (pYEDA2), TG1 (pUC19) и TG1 (pAYCTER3).
Затем была определена способность каждого из указанных штаммов расти в присутствии аминокислот и их аналогов на минимальной агаризованной среде М9 с глюкозой, содержащей ступенчато увеличивающиеся концентрации ингибиторов. Чашки были засеяны от 106 до 107 клеток ночной культуры, выращенной на минимальной среде, содержащей 100 мг/мл ампицилина в случае штаммов с плазмидами. Способность к росту определялась после 44 часов инкубации при 37°С. Результаты экспериментов представлены в таблице 1.
Figure 00000001
Пример 3. Влияние амплификации гена yedA на продукцию фенилаланина.
Штамм E.coli АJ12739 - продуцент фенилаланина был использован в качестве исходного штамма для трансформации плазмидами, содержащими ген yedA. Штамм АJ12739 был депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) (Россия, 113545, Москва, 1-й Дорожный проезд, 1) 6 ноября 2001 года под инвентарным номером ВКПМ В-8197.
Штамм E.coli АJ12739 - продуцент фенилаланина был трансформирован с помощью плазмиды pYEDA2 или вектора pAYCTER3 с получением штаммов AJ12739/pYEDA2 и AJ 12739/pAYCTER3. Каждый из этих штаммов выращивался при 37°С в течение 18 часов в питательном бульоне, содержащем 100 мг/мл ампицилина; 0,3 мл полученной культуры было перенесено в 3 мл питательной среды для ферментации, содержащей 100 мг/мл ампицилина, в пробирке 20×200 мм и инкубировалось при 37°С в течение 48 часов на роторной качалке. После выращивания количество фенилаланина, накопленное в среде, определялось методом ТСХ. Использовались пластинки для ТСХ размером 10×15 см, покрытые слоем в 0,11 мм силикагелем Sorbfil без флюоресцентного индикатора (Компания “Сорбполимер”, Краснодар, РФ). Пластинки Sorbfil экспонировались с подвижной фазой следующего состава: пропан-2-ол: этилацетат: водный аммиак (25%): вода=40: 40:7:16 (v/v). В качестве реагента для визуализации использовался 2%-ный раствор нингидрина в ацетоне. Результаты представлены в таблице 2.
Состав среды для ферментации (г/л):
Глюкоза 40,0
(NH4)2SO4 16,0
К2НРО4 1,0
MgSО4 7H2О 1,0
FeSО4 7H2O 0,01
MnSО4 5H2O 0,01
Тиамин НСl 0,0002
Дрожжевой экстракт 2,0
Тирозин 0,1
СаСО3 30,0
Глюкоза и сульфат магния стерилизовали раздельно. СаСО3 стерилизовали при 180°С в течение 2 часов. рН поддерживался в районе 7,0. Антибиотик добавляли в питательную среду после стерилизации.
Figure 00000002
Как видно из таблицы 2, амплификация гена yedA увеличивает продукцию фенилаланина штаммом АJ12739.
Пример 4. Влияние амплификации гена yedA на продукцию треонина.
Известный штамм Е.соli ВНИИГенетика MG442 - продуцент треонина (Гусятинер М.М. и др. Генетика, 14, 947-956, 1978) (депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) в соответствии с Будапештским договором под инвентарным номером ВКПМ В-1628) был трансформирован плазмидой pYEDA1 или вектором pUC19 с получением штаммов MG442/pYEDA1 MG442/pUC19.
Каждый из этих штаммов выращивался при 37°С в течение 18 часов в питательном бульоне, содержащем 100 мг/мл ампицилина; 0,3 мл полученной культуры было перенесено в 3 мл питательной среды для ферментации, содержащей 100 мг/мл ампицилина, в пробирке 20×200 мм и инкубировалось при 37°С в течение 48 часов на роторной качалке. После выращивания количество треонина, накопленное в среде, определялось методом ТСХ. Пластинки Sorbfil экспонировались с подвижной фазой следующего состава: пропан-2-ол-: ацетон: водный аммиак (25%) :вода=25:25:6:7 (v/v). В качестве реагента для визуализации использовался 2%-ный раствор нингидрина в ацетоне. Результаты представлены в таблице 3.
Глюкоза 50,0
(NH4)2SO4 10,0
К2НРО4 1,0
MgSО4 7H2О 0,4
FeSО4 7H2O 0,02
MnSО4 5H2O 0,02
Тиамин НСl 0,0002
Дрожжевой экстракт 1,0
СаСО3 20,0
Глюкоза и сульфат магния стерилизовали раздельно. СаСО3 стерилизовали при 180°С в течение 2 часов. рН поддерживался в районе 7,0. Антибиотик добавляли в питательную среду после стерилизации.
Figure 00000003
Как видно из таблицы 3, амплификация гена yedA увеличивает продукцию треонина штаммом MG442.
Figure 00000004
Figure 00000005
Figure 00000006

Claims (7)

1. Способ получения L-фенилаланина или L-треонина методом ферментации, включающий стадии выращивания бактерии Escherichia coli - продуцента L-аминокислоты в питательной среде и выделения L-фенилаланина или L-треонина из культуральной жидкости, отличающийся тем, что в качестве бактерии-продуцента используют бактерию Escherichia coli, способность к продукции L-аминокислоты которой увеличена за счет увеличения активности белка, описанного в пункте (А) или (В): (А) белок, который представлен аминокислотной последовательностью, приведенной в списке последовательностей под номером 2; (В) белок, который представлен аминокислотной последовательностью, включающей делеции, замены, вставки или добавление одной или нескольких аминокислот в аминокислотную последовательность, приведенную в списке последовательностей под номером 2, и который обладает активностью, придающей бактерии устойчивость к L-аминокислотам, таким, как фенилаланин, треонин, гомосерин, цистеин или гистидин, и/или их аналогам, таким как п-фторфенилаланин, 5-фтор-DL-триптофан, S-(2-аминоэтил)цистеин или 4-аза-DL-лейцин.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что активность белка повышена путем трансформации бактерии с помощью ДНК, кодирующей белок, описанный в пункте (А) или (В), или путем изменения регуляции экспрессии последовательности указанной ДНК в хромосоме упомянутой бактерии.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что трансформация осуществляется с использованием многокопийного вектора.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что у упомянутой бактерии дополнительно повышена экспрессия генов биосинтеза L-фенилаланина.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что у упомянутой бактерии дополнительно повышена экспрессия генов треонинового оперона.
6. Штамм Escherichia coli AJ12739 (pAYCTER-YEDA2), трансформированный плазмидой, содержащей ген yedA - продуцент L-фенилаланина.
7. Штамм Escherichia coli MG442/pYEDA1, трансформированный плазмидой, содержащей ген yedA, - продуцент L-треонина.
RU2001131570/13A 2001-11-23 2001-11-23 Способ получения l-аминокислот, штамм escherichia coli - продуцент l-аминокислоты (варианты) RU2229513C2 (ru)

Priority Applications (19)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2001131570/13A RU2229513C2 (ru) 2001-11-23 2001-11-23 Способ получения l-аминокислот, штамм escherichia coli - продуцент l-аминокислоты (варианты)
EP06009979A EP1688482A1 (en) 2001-11-23 2002-11-21 Method for producing L-amino acid using bacteria belonging to the genus Escherichia
JP2003545812A JP4305183B2 (ja) 2001-11-23 2002-11-21 エシェリヒア属細菌を用いたｌ−アミノ酸の製造方法
KR1020047007782A KR101023924B1 (ko) 2001-11-23 2002-11-21 에세리키아속 세균을 사용한 ｌ-아미노산의 제조방법
ES02788635T ES2269788T3 (es) 2001-11-23 2002-11-21 Procedimiento para la produccion de l-aminoacidos utilizando escherichia.
PCT/JP2002/012202 WO2003044191A1 (fr) 2001-11-23 2002-11-21 Procede de production de l-aminoacides a l'aide d'escherichia
BRPI0214329-1A BR0214329B1 (pt) 2001-11-23 2002-11-21 Bactéria produtora de l-aminoácido, e, métodos para a produção de um l-aminoácido e de alquil éster inferior de alfa-l-aspartil-l-fenil-alanina
CNB028274784A CN100469875C (zh) 2001-11-23 2002-11-21 利用埃希杆菌属细菌生产l-氨基酸的方法
AU2002355021A AU2002355021C1 (en) 2001-11-23 2002-11-21 Process for producing L-amino acid using escherichia
DE60213456T DE60213456T2 (de) 2001-11-23 2002-11-21 Verfahren zur l-aminosäureproduktion mit escherichia
DK02788635T DK1449917T3 (da) 2001-11-23 2002-11-21 Fremgangsmåde til L-aminosyrefremstilling under anvendelse af Escherichia
CA2468178A CA2468178C (en) 2001-11-23 2002-11-21 Method for producing l-amino acid using bacteria belonging to the genus escherichia
PL369776A PL207851B1 (pl) 2001-11-23 2002-11-21 Sposób wytwarzania L-aminokwasu i sposób wytwarzania niższego estru alkilowego α-L-aspartylo-L-fenyloalaniny
MXPA04004872A MXPA04004872A (es) 2001-11-23 2002-11-21 Procedimiento para producir l-aminoacido utilizando escherichia.
EP02788635A EP1449917B1 (en) 2001-11-23 2002-11-21 Process for producing l-amino acid using escherichia
AT02788635T ATE334190T1 (de) 2001-11-23 2002-11-21 Verfahren zur l-aminosäureproduktion mit escherichia
ARP020104507A AR037583A1 (es) 2001-11-23 2002-11-22 Metodo para producir l-aminoacidos utilizando bacterias que pertenecen al genero escherichia
US10/302,983 US7259003B2 (en) 2001-11-23 2002-11-25 Escherichia bacteria transformed with a yedA homolog to enhance L-amino acid producing activity, and methods for producing an L-amino acid using same
US11/761,465 US7531332B2 (en) 2001-11-23 2007-06-12 Method for producing a lower alkyl ester of α-L-aspartyl-L-phenylalanine using Escherichia bacteria

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2001131570/13A RU2229513C2 (ru) 2001-11-23 2001-11-23 Способ получения l-аминокислот, штамм escherichia coli - продуцент l-аминокислоты (варианты)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2001131570A RU2001131570A (ru) 2003-08-20
RU2229513C2 true RU2229513C2 (ru) 2004-05-27

Family

ID=20254422

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2001131570/13A RU2229513C2 (ru) 2001-11-23 2001-11-23 Способ получения l-аминокислот, штамм escherichia coli - продуцент l-аминокислоты (варианты)

Country Status (17)

Country Link
US (2) US7259003B2 (ru)
EP (2) EP1449917B1 (ru)
JP (1) JP4305183B2 (ru)
KR (1) KR101023924B1 (ru)
CN (1) CN100469875C (ru)
AR (1) AR037583A1 (ru)
AT (1) ATE334190T1 (ru)
AU (1) AU2002355021C1 (ru)
BR (1) BR0214329B1 (ru)
CA (1) CA2468178C (ru)
DE (1) DE60213456T2 (ru)
DK (1) DK1449917T3 (ru)
ES (1) ES2269788T3 (ru)
MX (1) MXPA04004872A (ru)
PL (1) PL207851B1 (ru)
RU (1) RU2229513C2 (ru)
WO (1) WO2003044191A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2497943C2 (ru) * 2010-07-15 2013-11-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА Enterobacteriaceae

Families Citing this family (79)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5976843A (en) * 1992-04-22 1999-11-02 Ajinomoto Co., Inc. Bacterial strain of Escherichia coli BKIIM B-3996 as the producer of L-threonine
US20060040364A1 (en) * 1998-10-13 2006-02-23 Livshits Vitaly A DNA coding for a protein which imparts L-homoserine resistance to Escherichia coli bacterium, and a method for producing L-amino acids
RU2144564C1 (ru) * 1998-10-13 2000-01-20 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" ФРАГМЕНТ ДНК rhtB, КОДИРУЮЩИЙ СИНТЕЗ БЕЛКА RhtB, ПРИДАЮЩЕГО УСТОЙЧИВОСТЬ К L-ГОМОСЕРИНУ БАКТЕРИЯМ ESCHERICHIA COLI, И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ
RU2175351C2 (ru) * 1998-12-30 2001-10-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") Фрагмент днк из escherichia coli, определяющий повышенную продукцию l-аминокислот (варианты), и способ получения l-аминокислот
RU2212447C2 (ru) * 2000-04-26 2003-09-20 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" Штамм escherichia coli - продуцент аминокислоты (варианты) и способ получения аминокислот (варианты)
DE60219968T2 (de) * 2001-02-13 2008-01-17 Ajinomoto Co., Inc. Verfahren zur Produktion von L-Aminosäuren mittels Bakterien der Gattung Escherichia
RU2229513C2 (ru) * 2001-11-23 2004-05-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" Способ получения l-аминокислот, штамм escherichia coli - продуцент l-аминокислоты (варианты)
PL207852B1 (pl) * 2001-11-23 2011-02-28 Ajinomoto Co Inc Bakteria z rodzaju Escherichia wytwarzająca L-aminokwas, sposób wytwarzania L-fenyloalaniny lub L-tryptofanu i sposób wytwarzania niższych estrów alkilowych α-L-aspartylo-L-fenyloalaniny
RU2244007C2 (ru) * 2002-02-27 2005-01-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" Способ получения l-треонина, штамм escherichia coli - продуцент треонина (варианты)
RU2273666C2 (ru) * 2003-02-26 2006-04-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" Способ получения l-аминокислот методом ферментации смеси глюкозы и пентоз
EP1604023A2 (en) * 2003-03-12 2005-12-14 Ajinomoto Co., Inc. Optimization of bacterial sucab expression by promoter mutagenesis for efficient l-glutamic acid production
EP1650296B1 (en) * 2003-07-16 2012-04-18 Ajinomoto Co., Inc. Mutant serine acetyltransferase and process for producing l-cysteine
RU2275425C2 (ru) * 2003-11-03 2006-04-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) Бактерия, принадлежащая к роду escherichia, - продуцент l-цистеина и способ получения l-цистеина
US20050176033A1 (en) * 2003-11-10 2005-08-11 Klyachko Elena V. Mutant phosphoribosylpyrophosphate synthetase and method for producing L-histidine
RU2275424C2 (ru) * 2003-12-05 2006-04-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) Способ получения l-треонина с использованием бактерий, принадлежащих к роду escherichia
US7005333B2 (en) * 2003-12-30 2006-02-28 Infineon Technologies Ag Transistor with silicon and carbon layer in the channel region
ES2331956T3 (es) * 2004-01-30 2010-01-21 Ajinomoto Co., Inc. Microorganismo que produce l-aminoacidos y procedimiento para producir l-aminoacidos.
US20050181488A1 (en) * 2004-02-12 2005-08-18 Akhverdian Valery Z. Method for producing L-threonine using bacteria belonging to the genus Escherichia
US20050191684A1 (en) * 2004-02-25 2005-09-01 Zimenkov Danila V. Method for producing L-amino acids
JP4604537B2 (ja) * 2004-03-31 2011-01-05 味の素株式会社 Ｌ−システイン生産菌及びｌ−システインの製造法
JP4760711B2 (ja) * 2004-03-31 2011-08-31 味の素株式会社 バチルス属又はエシェリヒア属に属する細菌を使用した発酵によるプリンヌクレオシド及びヌクレオチドの製造方法
RU2306338C2 (ru) * 2004-06-24 2007-09-20 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) Mob'-ПРОИЗВОДНАЯ ПЛАЗМИДА RSF1010, НЕ СОДЕРЖАЩАЯ ГЕНЫ УСТОЙЧИВОСТИ К АНТИБИОТИКАМ, БАКТЕРИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ УКАЗАННУЮ ПЛАЗМИДУ, И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛЕЗНЫХ МЕТАБОЛИТОВ
US7915018B2 (en) * 2004-10-22 2011-03-29 Ajinomoto Co., Inc. Method for producing L-amino acids using bacteria of the Enterobacteriaceae family
ATE438731T1 (de) 2005-02-18 2009-08-15 Ajinomoto Kk Verfahren zur herstellung einer l-aminosäure unter verwendung eines bakteriums der familie enterobacteriaceae
WO2006123764A1 (en) * 2005-05-16 2006-11-23 Ajinomoto Co., Inc. A method for producing an l-amino acid using a bacterium of the enterobacteriaceae family with attenuated expression of the kefb gene
EP1976994A1 (en) * 2006-01-26 2008-10-08 Ajinomoto Co., Inc. A method for producing an l-amino acid using a bacterium of enterobacteriaceae family with attenuated expression of the aldh gene
WO2007086618A1 (en) 2006-01-30 2007-08-02 Ajinomoto Co., Inc. L-amino acid producing bacterium and method of producing l-amino acid
JP2009095237A (ja) * 2006-02-02 2009-05-07 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸の製造法
JP2009118740A (ja) 2006-03-03 2009-06-04 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸の製造法
EP2351830B1 (en) 2006-03-23 2014-04-23 Ajinomoto Co., Inc. A method for producing an L-amino acid using bacterium of the Enterobacteriaceae family with attenuated expression of a gene coding for small RNA
WO2007119890A1 (en) * 2006-04-18 2007-10-25 Ajinomoto Co., Inc. A METHOD FOR PRODUCING AN L-AMINO ACID USING A BACTERIUM OF THE ENTEROBACTERIACEAE FAMILY WITH ATTENUATED EXPRESSION OF THE sfmACDFH-fimZ CLUSTER OR THE fimZ GENE
JP2009165355A (ja) 2006-04-28 2009-07-30 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸を生産する微生物及びｌ−アミノ酸の製造法
EP2035569A1 (en) 2006-06-01 2009-03-18 Ajinomoto Co., Inc. A method for producing an l-amino acid using a bacterium of the enterobacteriaceae family with attenuated expression of the rcsa gene
RU2337961C2 (ru) * 2006-07-04 2008-11-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-ТРЕОНИНА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ, ПРИНАДЛЕЖАЩЕЙ К РОДУ Escherichia, В КОТОРОЙ ИНАКТИВИРОВАН ОПЕРОН rspAB
RU2006129690A (ru) 2006-08-16 2008-02-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) (RU) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИЙ СЕМЕЙСТВА Enterobacteriaceae, В КОТОРОЙ ОСЛАБЛЕНА ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА ydiN, ГЕНА ydiB ИЛИ ИХ КОМБИНАЦИИ
JP2010017082A (ja) * 2006-10-10 2010-01-28 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸の製造法
RU2006143864A (ru) * 2006-12-12 2008-06-20 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) (RU) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА ENTEROBACTERIACEAE, В КОТОРОЙ ОСЛАБЛЕНА ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ cynT, cynS, cynX, ИЛИ cynR, ИЛИ ИХ КОМБИНАЦИИ
JP2010041920A (ja) 2006-12-19 2010-02-25 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸の製造法
RU2365622C2 (ru) 2006-12-22 2009-08-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) СПОСОБ ПРОДУКЦИИ ПУРИНОВЫХ НУКЛЕОЗИДОВ И НУКЛЕОТИДОВ МЕТОДОМ ФЕРМЕНТАЦИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИЙ, ПРИНАДЛЕЖАЩИХ К РОДУ Escherichia ИЛИ Bacillus
WO2008090770A1 (ja) 2007-01-22 2008-07-31 Ajinomoto Co., Inc. Ｌ－アミノ酸を生産する微生物及びｌ－アミノ酸の製造法
JP2010110216A (ja) 2007-02-20 2010-05-20 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸または核酸の製造方法
JP2010110217A (ja) 2007-02-22 2010-05-20 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸生産菌及びｌ−アミノ酸の製造法
EP2192170B1 (en) 2007-09-04 2017-02-15 Ajinomoto Co., Inc. Amino acid-producing microorganism and method of producing amino acid
RU2396336C2 (ru) 2007-09-27 2010-08-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ, ПРИНАДЛЕЖАЩЕЙ К РОДУ Escherichia
JP2011067095A (ja) 2008-01-10 2011-04-07 Ajinomoto Co Inc 発酵法による目的物質の製造法
JP5526785B2 (ja) 2008-01-23 2014-06-18 味の素株式会社 Ｌ−アミノ酸の製造法
RU2008105793A (ru) 2008-02-19 2009-08-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) (RU) Способ конструирования оперонов, содержащих трансляционно сопряженные гены, бактерия, содержащая такой оперон, способ продукции полезного метаболита и способ мониторинга экспрессии гена
ES2624913T3 (es) 2008-09-08 2017-07-18 Ajinomoto Co., Inc. Microorganismo que produce un L-aminoácido y procedimiento para producir un L-aminoácido
RU2008148283A (ru) * 2008-12-09 2010-06-20 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) (RU) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АРГИНИНА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА ENTEROBACTERIACEAE, В КОТОРОЙ ОСЛАБЛЕНА ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА artI
BRPI1007069A2 (pt) 2009-01-23 2015-08-25 Ajinomoto Kk Método para produzir um l-aminoácido.
BRPI1014661B1 (pt) 2009-07-29 2020-12-15 Ajinomoto Co., Inc. Método para produzir um l-aminoácido
JP2012223092A (ja) 2009-08-28 2012-11-15 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸の製造法
JP2013013329A (ja) 2009-11-06 2013-01-24 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸の製造法
RU2460793C2 (ru) 2010-01-15 2012-09-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) Способ получения l-аминокислот с использованием бактерий семейства enterobacteriaceae
JP2013074795A (ja) 2010-02-08 2013-04-25 Ajinomoto Co Inc 変異型ｒｐｓＡ遺伝子及びＬ−アミノ酸の製造法
RU2471868C2 (ru) 2010-02-18 2013-01-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) Мутантная аденилатциклаза, днк, кодирующая ее, бактерия семейства enterobacteriaceae, содержащая указанную днк, и способ получения l-аминокислот
RU2471870C2 (ru) 2010-06-03 2013-01-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АРГИНИНА И L-ЦИТРУЛЛИНА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА ENTEROBACTERIACEAE, В КОТОРОЙ ОСЛАБЛЕНА ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА pepA
RU2501858C2 (ru) 2010-07-21 2013-12-20 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА Enterobacteriaceae
RU2482188C2 (ru) 2010-07-21 2013-05-20 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АРГИНИНА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИЙ РОДА Escherichia, В КОТОРОЙ ИНАКТИВИРОВАН ОПЕРОН astCADBE
JP2014036576A (ja) 2010-12-10 2014-02-27 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸の製造法
RU2011134436A (ru) 2011-08-18 2013-10-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") Способ получения l-аминокислоты с использованием бактерии семейства enterobacteriaceae, обладающей повышенной экспрессией генов каскада образования флагелл и клеточной подвижности
RU2013118637A (ru) 2013-04-23 2014-10-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА ENTEROBACTERIACEAE, В КОТОРОЙ РАЗРЕГУЛИРОВАН ГЕН yjjK
RU2013140115A (ru) 2013-08-30 2015-03-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА Enterobacteriaceae, В КОТОРОЙ НАРУШЕНА ЭКСПРЕССИЯ КЛАСТЕРА ГЕНОВ znuACB
JP2016192903A (ja) 2013-09-17 2016-11-17 味の素株式会社 海藻由来バイオマスからのｌ−アミノ酸の製造方法
CN106459857B (zh) 2013-10-02 2019-04-19 味之素株式会社 氨控制装置及氨控制方法
RU2013144250A (ru) 2013-10-02 2015-04-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА Enterobacteriaceae, В КОТОРОЙ ОСЛАБЛЕНА ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА, КОДИРУЮЩЕГО ФОСФАТНЫЙ ТРАНСПОРТЕР
CN104736707B (zh) 2013-10-21 2017-08-25 味之素株式会社 生产l‑氨基酸的方法
RU2014105547A (ru) 2014-02-14 2015-08-20 Адзиномото Ко., Инк. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА ENTEROBACTERIACEAE, ИМЕЮЩЕЙ СВЕРХЭКСПРЕССИРУЕМЫЙ ГЕН yajL
RU2015120052A (ru) 2015-05-28 2016-12-20 Аджиномото Ко., Инк. Способ получения L-аминокислоты с использованием бактерии семейства Enterobacteriaceae, в которой ослаблена экспрессия гена gshA
WO2017122747A1 (en) 2016-01-12 2017-07-20 Ajinomoto Co., Inc. Method for producing benzaldehyde
BR112018017227A2 (pt) 2016-02-25 2019-02-05 Ajinomoto Kk método para produzir um l-aminoácido
JP7066977B2 (ja) 2017-04-03 2022-05-16 味の素株式会社 Ｌ－アミノ酸の製造法
KR101968317B1 (ko) * 2018-02-23 2019-04-11 씨제이제일제당 주식회사 신규 l-트립토판 배출 단백질 및 이를 이용한 l-트립토판을 생산하는 방법
EP3861109A1 (en) 2018-10-05 2021-08-11 Ajinomoto Co., Inc. Method for producing target substance by bacterial fermentation
BR112021014194A2 (pt) 2019-02-22 2021-12-28 Ajinomoto Kk Método para a produção de um l-aminoácido
BR112021017870A2 (pt) 2019-04-05 2021-12-07 Ajinomoto Kk Método para produzir um l-aminoácido
CN110592084B (zh) * 2019-08-28 2023-07-28 内蒙古伊品生物科技有限公司 一种rhtA基因启动子改造的重组菌株及其构建方法与应用
JP2022550084A (ja) 2019-09-25 2022-11-30 味の素株式会社 細菌の発酵によるｌ－アミノ酸の製造方法
EP4053287A4 (en) 2019-10-28 2023-11-01 Ajinomoto Co., Inc. METHOD FOR PRODUCING BENZALDEHYDE

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3786039A (en) * 1969-04-30 1974-01-15 Ajinomoto Kk Method of producing alpha-l-aspartyl-l-phenylalanine lower alkyl esters
SU974817A1 (ru) 1981-06-16 1990-08-23 Всесоюзный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Способ получени L-треонина
US5705371A (en) 1990-06-12 1998-01-06 Ajinomoto Co., Inc. Bacterial strain of escherichia coli BKIIM B-3996 as the producer of L-threonine
WO1990004636A1 (en) 1988-10-25 1990-05-03 Vsesojuzny Nauchno-Issledovatelsky Institut Genetiki I Selektsii Promyshlennykh Mikroorganizmov (Vniigenetika) Strain of bacteria escherichia coli, producer of l-threonine
US5976843A (en) * 1992-04-22 1999-11-02 Ajinomoto Co., Inc. Bacterial strain of Escherichia coli BKIIM B-3996 as the producer of L-threonine
US5534421A (en) 1991-05-30 1996-07-09 Ajinomoto Co., Inc. Production of isoleucine by escherichia coli having isoleucine auxotrophy and no negative feedback inhibition of isoleucine production
US6132999A (en) 1992-09-21 2000-10-17 Ajinomoto Co., Inc. L-threonine-producing microbacteria and a method for the production of L-threonine
EP0828718A1 (en) * 1995-06-02 1998-03-18 G.D. SEARLE & CO. Heterocyclo substituted hydroxamic acid derivatives as cyclooxygenase-2 and 5-lipoxygenase inhibitors
JP4032441B2 (ja) * 1995-08-30 2008-01-16 味の素株式会社 Ｌ−アミノ酸の製造方法
DE19548222A1 (de) 1995-12-22 1997-06-26 Forschungszentrum Juelich Gmbh Verfahren zur mikrobiellen Herstellung von Aminosäuren durch gesteigerte Aktivität von Exportcarriern
DE19726083A1 (de) 1997-06-19 1998-12-24 Consortium Elektrochem Ind Mikroorganismen und Verfahren zur fermentativen Herstellung von L-Cystein, L-Cystin, N-Acetyl-Serin oder Thiazolidinderivaten
RU2144564C1 (ru) * 1998-10-13 2000-01-20 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" ФРАГМЕНТ ДНК rhtB, КОДИРУЮЩИЙ СИНТЕЗ БЕЛКА RhtB, ПРИДАЮЩЕГО УСТОЙЧИВОСТЬ К L-ГОМОСЕРИНУ БАКТЕРИЯМ ESCHERICHIA COLI, И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ
RU2148642C1 (ru) * 1998-12-23 2000-05-10 ЗАО "Научно-исследовательский институт АДЖИНОМОТО-Генетика" (ЗАО "АГРИ") Фрагмент днк rhtc, кодирующий синтез белка rhtc, придающего повышенную устойчивость к l-треонину бактериям escherichia coli, и способ получения l-аминокислоты
RU2175351C2 (ru) * 1998-12-30 2001-10-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") Фрагмент днк из escherichia coli, определяющий повышенную продукцию l-аминокислот (варианты), и способ получения l-аминокислот
RU2209246C2 (ru) * 2000-01-26 2003-07-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" Малая субъединица изозима iii и изозим iii синтетазы ацетогидроксикислот из escherichia coli, фрагмент днк (варианты), штамм бактерии escherichia coli - продуцент l-валина (варианты) и способ получения l-валина
AU2001249345A1 (en) * 2000-03-21 2001-10-03 Elitra Pharmaceuticals, Inc. Identification of essential genes in prokaryotes
RU2212447C2 (ru) * 2000-04-26 2003-09-20 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" Штамм escherichia coli - продуцент аминокислоты (варианты) и способ получения аминокислот (варианты)
DE60219968T2 (de) * 2001-02-13 2008-01-17 Ajinomoto Co., Inc. Verfahren zur Produktion von L-Aminosäuren mittels Bakterien der Gattung Escherichia
PL207852B1 (pl) * 2001-11-23 2011-02-28 Ajinomoto Co Inc Bakteria z rodzaju Escherichia wytwarzająca L-aminokwas, sposób wytwarzania L-fenyloalaniny lub L-tryptofanu i sposób wytwarzania niższych estrów alkilowych α-L-aspartylo-L-fenyloalaniny
RU2229513C2 (ru) * 2001-11-23 2004-05-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" Способ получения l-аминокислот, штамм escherichia coli - продуцент l-аминокислоты (варианты)
RU2244007C2 (ru) * 2002-02-27 2005-01-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" Способ получения l-треонина, штамм escherichia coli - продуцент треонина (варианты)
EP1604023A2 (en) * 2003-03-12 2005-12-14 Ajinomoto Co., Inc. Optimization of bacterial sucab expression by promoter mutagenesis for efficient l-glutamic acid production
RU2268300C2 (ru) * 2003-04-07 2006-01-20 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИЙ, ОБЛАДАЮЩИХ ПОВЫШЕННОЙ ЭКСПРЕССИЕЙ ГЕНА pckA
EP1650296B1 (en) * 2003-07-16 2012-04-18 Ajinomoto Co., Inc. Mutant serine acetyltransferase and process for producing l-cysteine
RU2275424C2 (ru) * 2003-12-05 2006-04-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) Способ получения l-треонина с использованием бактерий, принадлежащих к роду escherichia
US20050181488A1 (en) * 2004-02-12 2005-08-18 Akhverdian Valery Z. Method for producing L-threonine using bacteria belonging to the genus Escherichia
US20050191684A1 (en) * 2004-02-25 2005-09-01 Zimenkov Danila V. Method for producing L-amino acids
US8003367B2 (en) * 2004-03-16 2011-08-23 Ajinomoto Co., Inc. Method for producing L-amino acids by fermentation using bacteria having enhanced expression of xylose utilization genes
RU2306338C2 (ru) * 2004-06-24 2007-09-20 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) Mob'-ПРОИЗВОДНАЯ ПЛАЗМИДА RSF1010, НЕ СОДЕРЖАЩАЯ ГЕНЫ УСТОЙЧИВОСТИ К АНТИБИОТИКАМ, БАКТЕРИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ УКАЗАННУЮ ПЛАЗМИДУ, И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛЕЗНЫХ МЕТАБОЛИТОВ
US7915018B2 (en) * 2004-10-22 2011-03-29 Ajinomoto Co., Inc. Method for producing L-amino acids using bacteria of the Enterobacteriaceae family

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2497943C2 (ru) * 2010-07-15 2013-11-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА Enterobacteriaceae

Also Published As

Publication number Publication date
CA2468178A1 (en) 2003-05-30
CN1615360A (zh) 2005-05-11
BR0214329B1 (pt) 2014-07-22
AU2002355021B2 (en) 2007-12-13
EP1449917A4 (en) 2005-01-26
US20080153138A1 (en) 2008-06-26
WO2003044191A1 (fr) 2003-05-30
AU2002355021A1 (en) 2003-06-10
KR20050044573A (ko) 2005-05-12
US20030148473A1 (en) 2003-08-07
PL369776A1 (en) 2005-05-02
CA2468178C (en) 2014-06-17
JPWO2003044191A1 (ja) 2005-03-24
US7259003B2 (en) 2007-08-21
DE60213456T2 (de) 2007-03-01
KR101023924B1 (ko) 2011-03-22
EP1449917A1 (en) 2004-08-25
DK1449917T3 (da) 2006-11-27
BR0214329A (pt) 2004-11-03
EP1449917B1 (en) 2006-07-26
JP4305183B2 (ja) 2009-07-29
PL207851B1 (pl) 2011-02-28
AR037583A1 (es) 2004-11-17
US7531332B2 (en) 2009-05-12
EP1688482A1 (en) 2006-08-09
DE60213456D1 (de) 2006-09-07
AU2002355021C1 (en) 2009-03-19
ES2269788T3 (es) 2007-04-01
CN100469875C (zh) 2009-03-18
ATE334190T1 (de) 2006-08-15
MXPA04004872A (es) 2004-09-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2229513C2 (ru) Способ получения l-аминокислот, штамм escherichia coli - продуцент l-аминокислоты (варианты)
AU2002355022B2 (en) Process for producing L-amino acid using escherichia
EP2460873B1 (en) A method for producing an aromatic L-amino acid using a bacterium of the genus Eshcerichia with attenuated expression of any of the cynT, cynS, cynX or cynR genes or a combination thereof
CN102286562B (zh) 用肠杆菌科的细菌产生l-氨基酸的方法
WO2008020650A1 (en) A method for producing an l-amino acid using a bacterium of the enterobacteriaceae family with attenuated expression of the ydin gene or the ydib gene or combination thereof
WO2011055710A1 (ja) Ｌ－アミノ酸の製造法
RU2530171C2 (ru) МУТАНТНЫЙ БЕЛОК, КОДИРУЕМЫЙ ГЕНОМ yddG, И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АРОМАТИЧЕСКИХ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ РОДА Escherichia
RU2304615C2 (ru) Способ получения l-аминокислот с использованием бактерий, принадлежащих к роду escherichia