RU2224791C1 - Штамм бактерий azotobacter vinelandii для получения биопрепарата для борьбы с болезнями пшеницы, вызываемыми грибными фитопатогенами, и повышения урожая - Google Patents
Штамм бактерий azotobacter vinelandii для получения биопрепарата для борьбы с болезнями пшеницы, вызываемыми грибными фитопатогенами, и повышения урожая Download PDFInfo
- Publication number
- RU2224791C1 RU2224791C1 RU2002116983/13A RU2002116983A RU2224791C1 RU 2224791 C1 RU2224791 C1 RU 2224791C1 RU 2002116983/13 A RU2002116983/13 A RU 2002116983/13A RU 2002116983 A RU2002116983 A RU 2002116983A RU 2224791 C1 RU2224791 C1 RU 2224791C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- preparing
- azotobacter vinelandii
- preparation
- plants
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии, в частности к новому штамму бактерий, получению биопрепарата для снижения заболеваемости растений, вызываемых корневыми гнилями. Получен новый штамм несимбиотических азотфиксирующих бактерий Azotobacter vinelandii ИБ 1 методом аналитической селекции природных изолятов по принципу отбора продуцентов, обладающих достаточно высокой антагонистической активностью по отношению к грибам - фитопатогенам. Штамм депонирован в коллекции культур Института биологии Уфимского научного центра РАН под Az ИБ 1. Для получения препарата штамм выращивают на безазотистой среде Федорова в течение 60 ч при 28-30oС с аэрацией до титра 1010 КОЕ/мл. Препарат, полученный на основе данного штамма, подавляет развитие заболеваний растений, вызываемых корневыми гнилями, и стимулирует рост растений за счет продуцирования гормонов роста - цитокининов в количестве 290 Нг/мл культуральной жидкости. 3 табл.
Description
Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и касается штамма, который оказывает антагонистическое действие на возбудителей заболеваний пшеницы корневыми гнилями, и повышает урожайность пшеницы. Новый штамм может быть реализован в микробиологической промышленности для получения биопрепарата для защиты от болезней и повышения урожайности злаковых культур.
Известен штамм Pseudomonas sp. ЦМПМ В-348, используемый для получения препарата при защите злаковых от возбудителя обыкновенной корневой гнили Helminthosporium sativum /1/. Однако этот штамм неэффективен для подавления корневой гнили злаков, вызываемой комплексом грибов Fusarium spp. и Helminthosporium sativum.
Известны штаммы Pseudomonas putida, подавляющие рост фитопатогенного гриба Fusarium oxysporum /2/ и Pseudomonas putida BKM В-1743 Д, подавляющий рост грибов рода Fusarium /3/. Недостатками известных штаммов является узкий спектр антагонистического действия.
Известен штамм Azotobacter chroococcum N В-3173, предназначенный для получения бактериального удобрения /4/, повышающий урожайность злаковых культур. Недостатком является отсутствие антагонизма по отношению к фитопатогенным грибам.
Наиболее близким к заявляемому является штамм Azotobacter chroococcum 92 /5/, обладающий способностью подавлять рост некоторых фитопатогенных грибов. Недостатком штамма является узкий спектр антагонистического действия и сравнительно невысокая продуктивность.
Технической задачей изобретения является выделение нового природного штамма с широким спектром антагонистического действия на возбудителей грибных заболеваний пшеницы, обладающего высокой продуктивностью и повышающим урожайность.
Поставленная задача достигается выявлением и использованием штамма Azotobacter vinelandii ИБ 1, выделенного из образца пахотных земель, отобранного в Уфимском районе Республики Башкортостан. Штамм хранится и поддерживается в коллекции микроорганизмов Института биологии Уфимского научного центра РАН, имеет коллекционный номер Az ИБ 1.
1. Культурально-морфологические признаки.
1.1. На агаризованной питательной среде, имеющий состав, г/л: КН2РO4 - 0,3; СаНРO4 - 0,2; MgSO4 - 0,3; К2SO4 - 0,2; NaCl - 0,5; FeCl3 - 0,01; СаСО3 - 5,0; сахароза - 20 г; агар - 1,5%; смесь микроэлементов - 1 мл; дистиллированная вода до 1000 мл, рН 6,8-7, культура образует круглые колонии диаметром 3-4 мм, с гладкой блестящей поверхностью, выпуклые, прозрачные, с гладкими краями, мягкой тягучей консистенции. На 24 часу роста клетки - мелкие палочки 0,5•1,5 мкм, подвижные; на 48-72 часу - палочки, есть цисты, встречаются палочки клостридиальной формы.
1.2. На питательной агаризованной среде Берка, имеющий состав, г/л: К2НРO4 - 0,8; КН2РO4 - 0,2; MgSO4 - 0,3; NaCl - 0,2; CaSO4 - 0,1; Fe2(MoO4) - 0,01; глюкоза - 10 г; дистиллированная вода до 1000 мл; агар-агар - 1,5%; рН 6,8-7,0, культура образует круглые колонии диаметром 2-3 мм, с гладкой блестящей поверхностью, выпуклые, прозрачные, бесцветные, с гладкими ровными краями, однородной структуры.
1.3. На твердой питательной среде с бензойнокислым натрием в качестве единственного источника углерода рост отсутствует. При внесении бензойнокисого натрия в среду в количестве 0,15% рост хороший.
1.4. На жидкой питательной среде Федорова с мелассой, имеющей состав, г/л: К2НРO4 - 0,3; СаНРO4 - 0,2; MgSO4 - 0,3; K2SO4 - 0,2; NaCl - 0,5; FeCl3 - 0,01; СаСО3 - 5,0; меласса - 40 г; смесь микроэлементов - 1 мл; рН 6,8-7,0, выращивание при температуре плюс 28±1oС и режиме аэрации-перемешивания 180 об/мин в течение 60 часов. Круглые колонии диаметром 0,5 см, выпуклые с ровными краями, слизистой консистенции.
1.5. На питательной среде КГА колонии круглые диаметром 6 мм, выпуклые, белого полупрозрачного цвета, консистенция тягучая мягкая. Пигмента не образуют. На 24 часу роста - мелкие подвижные палочки.
1.6. На питательной среде Эшби с маннитом в качестве источника углерода колонии слизистые прозрачные диаметром 3 мм, консистенция тянущаяся. На 24-48 часу роста клетки - длинные тонкие палочки 6 мкм, подвижные, встречаются палочки клостридиальной формы.
2. Физиолого-биохимические признаки.
Штамм является аэробным микроорганизмом, оптимальная температура роста 28oС.
Отношение к источникам углерода: очень хорошо усваивает глюкозу, сахарозу; хорошо усваивает маннит, мальтозу, ксилозу, сорбит, рамнозу, лактозу, декстрин, галактозу, маннозу, глицерин, фруктозу, этанол; слабо усваивает арабинозу, мезоинозитол. Слабо растет на МПА.
Хорошо растет на среде с уксуснокислым натрием в качестве единственного источника углерода
Отношение к источникам азота: растет на безазотистых средах, сохраняя высокую продуктивность не менее 8•1010 кл/мл. Не погибает при нагревании при 50oС в течение 15 мин.
Отношение к источникам азота: растет на безазотистых средах, сохраняя высокую продуктивность не менее 8•1010 кл/мл. Не погибает при нагревании при 50oС в течение 15 мин.
Штамм не обладает фитопатогенной активностью, о чем свидетельствует отсутствие мацерации на ломтиках картофеля при нанесении на них уколом живых клеток штамма.
Штамм хранится на косяках со средой Федорова в холодильнике с пересевом на свежие косяки через 2-4 месяца, а также в лиофильновысушенном состоянии.
Штамм идентифицирован по определителю Bergey Manual of Determinative Bacteriology.
Пример 1. Для сравнения продуктивности нового штамма Az ИБ 1 с известным штаммом 92 проводили выращивание в колбах на качалке при 180-200 об/мин в течение 60 часов, при температуре 28oС на жидкой питательной среде следующего состава, %: сахароза 3,0; К2НРO4 0,03; СаНРО4 0,02; NaCl 0,05; СаСО3 0,5; K2SO4 0,02. Результаты приведены в табл. 1.
Пример 2. Изучение антагонистической активности нового штамма Azotobacter vinelandii ИБ 1.
На чашки Петри с агаризованной средой КГА (картофель тертый 200 г; глюкоза 20 г; агар 20 г; вода водопроводная 1 л) высевают сплошным газоном суспензию спор грибного фитопатогена. Затем в эти же чашки уколом сажают бактерии штамма Azotobacter vinelandii ИБ 1. Чашки инкубируют при 28oС в течение 3 суток. Учет проводят по зонам отсутствия или подавления роста гриба вокруг колонии штамма. Результаты приведены в табл. 2 и свидетельствуют о широком спектре антагонистического действия нового штамма.
Пример 3. Антагонистическое действие нового штамма против комплекса возбудителей корневых гнилей пшеницы испытывают в лабораторных условиях на пшенице сорта "Жница" с естественным уровнем заражения посевного материала, полученного в условиях опытного поля Башкирского Государственного Аграрного Университета. Посевной материал дополнительно инфицируют спорами фитопатогенных грибов Fusarium oxysporum и Bipolaris sorokiniana (титр споровой суспензии обоих патогенов составил 5•104 КОЕ/мл). Семена пшеницы обрабатывают суспензией штамма (с титром 109 КОЕ/мл) из расчета 50 мкл суспензии на 50 г семян. Семена переносят на увлажненную до полной влагоемкости полоску фильтровальной бумаги, поверх которой накладывают полоску полиэтилена, сворачивают в рулон, помещают вертикально в лабораторный стакан и оставляют при комнатной температуре. В контрольных опытах обработку семян осуществляют водопроводной водой. В качестве эталона используют известный биопрепарат - фитоспорин. Эксперимент выполняют в четырехкратной повторности. Обработку результатов проводят через 7 дней. Эффективность штамма определяют при сопоставлении степени проявления корневых гнилей проростков пшеницы в опыте и контроле. Результаты приведены в табл. 3.
Из табл. 3 следует, что новый штамм в условиях эксперимента не уступает биологическому препарату фитоспорин в эффективности воздействия на фитопатогены.
Пример 4. Определение ростстимулирующей способности заявляемого штамма.
Некоторые микроорганизмы, обитающие в ризосфере растений, способны синтезировать цитокинины. Цитокинины представляют собой природные соединения, участвующие в гормональной регуляции онтогенеза растений, характеризующиеся способностью индуцировать деление растительных клеток и являющиеся наиболее активными среди открытых рострегулирующих веществ. Образование заявляемым штаммом цитокининов характеризуется следующим примером.
Штамм бактерий Azotobacter vinelandii ИБ 1 выращивают на вышеупомянутой питательной среде Федорова. На поздней логарифмической фазе роста или в начале стационарной фазы биомассу отделяют от культуральной жидкости и супернатант анализируют на содержание цитокининов методом непрямого конкурентного иммуноферментного анализа /6/. Выполненный анализ показал наличие цитокининов в количестве 290 нг/мл культуральной жидкости заявляемого штамма. Таким образом, выделен новый штамм Azotobacter vinelandii ИБ 1, который отличается высокой продуктивностью, широким спектром антагонистического воздействия на грибные фитопатогены и способностью продуцировать цитокинины. Перечисленные полезные свойства позволяют использовать его для борьбы с грибными болезнями пшеницы и повышения ее урожайности.
Источники информации
1. Авторское свидетельство СССР 1464468, кл. А 01 N 63/00, 1988.
1. Авторское свидетельство СССР 1464468, кл. А 01 N 63/00, 1988.
2. Патент США 4714614, кл. 424-93, 1987.
3. Патент RU 1805849, кл. А 01 N 63/00, 1993.
4. Авторское свидетельство СССР 1359272, кл. С 05 F 11/08, 1985.
5. Авторское свидетельство СССР 9221105, кл. С 05 F 11/08, 1982.
6. Кудоярова Г.Р., Веселов С.Ю., Каравайко Н.Н., Гюли-заде В.З., Чередова Е.П., Мустафина А.Р., Мошков И.Е., Кунаева О.Н. Иммуноферментная система для определения цитокининов //Физиология растений. - 1990. - Т. 37, вып. 1. - С. 193-199.
Claims (1)
- Штамм бактерий Azotobacter vinelandii, депонированный в коллекции микроорганизмов Института биологии Уфимского научного центра Российской Академии Наук под номером Аz ИБ 1, для получения препарата против заболеваний пшеницы, вызываемых грибными фитопатогенами, и повышения урожая.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2002116983/13A RU2224791C1 (ru) | 2002-06-25 | 2002-06-25 | Штамм бактерий azotobacter vinelandii для получения биопрепарата для борьбы с болезнями пшеницы, вызываемыми грибными фитопатогенами, и повышения урожая |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2002116983/13A RU2224791C1 (ru) | 2002-06-25 | 2002-06-25 | Штамм бактерий azotobacter vinelandii для получения биопрепарата для борьбы с болезнями пшеницы, вызываемыми грибными фитопатогенами, и повышения урожая |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2002116983A RU2002116983A (ru) | 2004-02-10 |
RU2224791C1 true RU2224791C1 (ru) | 2004-02-27 |
Family
ID=32172916
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2002116983/13A RU2224791C1 (ru) | 2002-06-25 | 2002-06-25 | Штамм бактерий azotobacter vinelandii для получения биопрепарата для борьбы с болезнями пшеницы, вызываемыми грибными фитопатогенами, и повышения урожая |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2224791C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2539738C1 (ru) * | 2013-08-20 | 2015-01-27 | Закрытое акционерное общество научно-производственное предприятие "Биомедхим" (ЗАО НПП "Биомедхим") | ШТАММ БАКТЕРИЙ Paenibacillus sp. ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИОПРЕПАРАТА ПРОТИВ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПШЕНИЦЫ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ФИТОПАТОГЕННЫМИ ГРИБАМИ |
-
2002
- 2002-06-25 RU RU2002116983/13A patent/RU2224791C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ТЕРЕХОВ М.Б. и др. Об использовании биологической фиксации молекулярного азота штаммами ассоциативных азотофиксаторов при возделывании яровой пшеницы. Тез. Междунар. науч. конф. "Развитие научного наследия акад. Н.И.Вавилова". - Саратов, 1997, ч. 1, с. 134-136. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2539738C1 (ru) * | 2013-08-20 | 2015-01-27 | Закрытое акционерное общество научно-производственное предприятие "Биомедхим" (ЗАО НПП "Биомедхим") | ШТАММ БАКТЕРИЙ Paenibacillus sp. ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИОПРЕПАРАТА ПРОТИВ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПШЕНИЦЫ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ФИТОПАТОГЕННЫМИ ГРИБАМИ |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2002116983A (ru) | 2004-02-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Sokolova et al. | Effect of phytohormones synthesized by rhizosphere bacteria on plants | |
Ousley et al. | Effect of Trichoderma on plant growth: a balance between inhibition and growth promotion | |
CN105002121B (zh) | 一株简单芽孢杆菌及其应用 | |
EP2735607A1 (en) | Strain of Trichoderma harzianum and controlled release composition which contains said strain | |
RU2529958C1 (ru) | Штамм азотфиксирующих бактерий pseudomonas sp. для получения биопрепарата против заболеваний пшеницы, вызываемых фитопатогенными грибами, и повышения урожайности | |
RU2177466C2 (ru) | Штамм бактерий azotobacter chroococcum зао "биофлора" n b-05 для получения биопрепарата для повышения почвенного плодородия, повышения урожая сельскохозяйственных культур и качества его, оздоровления почвы, восстановления нарушенных земель и биопрепарат на его основе для повышения почвенного плодородия и восстановления нарушенных земель | |
CN110317747A (zh) | 一种解淀粉芽孢杆菌jt68及其在防治茶炭疽病的应用 | |
RU2539738C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Paenibacillus sp. ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИОПРЕПАРАТА ПРОТИВ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПШЕНИЦЫ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ФИТОПАТОГЕННЫМИ ГРИБАМИ | |
US6048713A (en) | Pseudomonas fluorescens | |
KR20020031961A (ko) | 길항미생물인 스트렙토마이세스 카슈겐시스 지비에이-0927균주, 이를 포함하는 미생물 제제, 및 이를 이용한 난시들음병 및 오이 흑성병 병해를 방제하는 방법 | |
CN105002120B (zh) | 一株蕈状芽孢杆菌及其应用 | |
CN114250176B (zh) | 一种微生物防治三七根腐病剂的制备方法及其应用 | |
JP3132195B2 (ja) | 新規微生物および植物病害防除剤 | |
RU2224791C1 (ru) | Штамм бактерий azotobacter vinelandii для получения биопрепарата для борьбы с болезнями пшеницы, вызываемыми грибными фитопатогенами, и повышения урожая | |
RU2625977C1 (ru) | Штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 для получения биопрепарата комплексного действия для защиты сельскохозяйственных растений от фитопатогенных грибов, стимуляции их роста и повышения урожайности | |
JPH06135811A (ja) | 植物病害防除剤 | |
Bhattacharya et al. | Epidemiological studies on jute diseases: Survival of Macrophomina phaseoli (Maubl.) Ashby in soil | |
RU2245918C1 (ru) | Штамм бактерий azotobacter vinelandii для получения биопрепарата для борьбы с корневыми гнилями пшеницы и повышения количества и качества урожая | |
RU2551968C2 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus pumilus А 1.5, В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ БОЛЕЗНЕЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ФИТОПАТОГЕННЫМИ МИКРООРГАНИЗМАМИ | |
Shirokikh et al. | Actinomycetes in the rhizosphere of barley grown on acid soddy podzolic soil | |
RU2203945C1 (ru) | Штамм бактерий pseudomonas aureofaciens для получения препарата против заболеваний пшеницы, вызываемых грибными фитопатогенами | |
RU2130261C1 (ru) | Штамм бактерий pseudomonas species для получения препарата, используемого для стимуляции роста и защиты растений от фитопатогенных микроорганизмов | |
RU2737140C1 (ru) | Штамм бактерий streptomyces resistomycificus recb-31b для получения биопрепарата для защиты сельскохозяйственных растений от фитопатогенных грибов, стимуляции их роста и повышения урожайности | |
RU2780228C1 (ru) | Штамм penicillium chrysogenum вкм f-4876d для получения биопрепарата для защиты сельскохозяйственных растений от фитопатогенных микроорганизмов, способ производства препарата | |
CN116445345B (zh) | 特基拉芽胞杆菌lms3及其在防治藜麦黑茎病中的应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150626 |