RU2181729C1 - Производные мурамовой кислоты - Google Patents
Производные мурамовой кислоты Download PDFInfo
- Publication number
- RU2181729C1 RU2181729C1 RU2000124015A RU2000124015A RU2181729C1 RU 2181729 C1 RU2181729 C1 RU 2181729C1 RU 2000124015 A RU2000124015 A RU 2000124015A RU 2000124015 A RU2000124015 A RU 2000124015A RU 2181729 C1 RU2181729 C1 RU 2181729C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mmol
- acetamido
- deoxy
- chloroform
- glucopyranoside
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к соединениям формулы (1), где Х - С1-С20-алкил, за исключением Х - бутил, гептил или гексадецил, или С3-С9-циклоалкил, незамещенный или замещенный С1-С3-алкилом, или адамантил, незамещенный или замещенный С1-С3-алкилом, или С6-С12-арил, незамещенный или замещенный одним или тремя С1-С3-алкилами. Соединения обладают высокой иммуномодулирующей активностью и высокой биологической доступностью. 2 табл.
Description
Изобретение относится к новым производным мурамовой кислоты, которые могут найти применение в народном хозяйстве, в частности в медицине.
Среди большого числа эндогенных и экзогенных иммуномодуляторов известны и производные мурамовой кислоты, например, N-ацетилмурамил-L-аланил-D-изоглутамин (мурамилдипептид, или МДП) (Ellouz E., Adam A., Cioburi R. & Lederer E. // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1974. - Vol. 59. - P. 1317-1325).
Известно, что мурамилдипептид способен активировать основные звенья иммунитета, в частности, противоопухолевого ответа. Однако, обладая высокой гидрофильностью, он быстро выводится из организма и является высоко пирогенным.
Известно и другое производное мурамовой кислоты -β-гептилгликозид-N-ацетилмурамил-L-аланил-D-изоглутамин (β-гептилгликозид-МДП), обладающее свойствами иммуномодулятора (Калюжин О.В., Караулов А.В. // В книге "Успехи клинической иммунологии и аллергологии" под ред. А.В. Караулова. - 2000. - Т.1. - С. 252-258).
Указанное амфифильное соединение активирует основные звенья иммунитета и стимулирует противоопухолевый иммунный ответ, эффективнее немодифицированного МДП.
Недостатком этого производного является его сравнительно невысокая иммуномодулирующая активность.
Задача изобретения - создание новых производных мурамовой кислоты, обладающих более высокой иммуномодулирующей активностью и большей биологической доступностью при разных формах введения.
Указанная задача решается производными мурамовой кислоты общей формулы
где Х - C1-С20-алкил, за исключением Х - гептил или гексадецил,
или С3-С9-циклоалкил, незамещенный или замещенный C1-С3-алкилом,
или адамантил, незамещенный или замещенный C1-С3-алкилом,
или С6-C12-арил, незамещенный или замещенный одним или тремя C1-С3-алкилами.
где Х - C1-С20-алкил, за исключением Х - гептил или гексадецил,
или С3-С9-циклоалкил, незамещенный или замещенный C1-С3-алкилом,
или адамантил, незамещенный или замещенный C1-С3-алкилом,
или С6-C12-арил, незамещенный или замещенный одним или тремя C1-С3-алкилами.
Указанные соединения могут быть получены, в частности, последовательным гликозилированием спиртов или фенолов в присутствии соответственно иодида ртути или гидроксида натрия и тетраалкиламмоний хлорида, деацетилированием метанолом в присутствии каталитического количества метилата натрия, изопропилиденированием 2,2-диметоксипропаном, алкилированием S-2-бромпропановой кислотой в присутствии гидрида натрия, конденсацией с трифторацетатом бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина N-оксисукцинимидным методом, кислотным гидролизом изопропилиденовой группы и каталитического гидрогенолиза бензилового эфира.
Нижеследующие примеры иллюстрируют синтез соединений по изобретению и их биологическую активность.
Общие методики синтеза
Гликозилирование в присутствии Hgl2.
Гликозилирование в присутствии Hgl2.
К раствору 2-ацетамидо-3,4,6-три-0-ацетил-2-дезокси-α-0-глюкопиранозилхлорида (1) в сухом дихлорэтане (25 мл/г) добавили 1,16 экв. иодида ртути (II) и 1 экв. спирта. Реакционную смесь перемешивали в присутствии молекулярных сит 0,3 нм до исчезновения гликозил-донора (контроль ТСХ в системе хлороформ - бензол - этанол, 10:1:1). Молекулярные сита и катализатор отфильтровали, фильтрат разбавили хлороформом, промыли раствором тиосульфата натрия и водой. Органический слой отделили, осушили безводным Na2SO4 и упарили. Остаток очищали кристаллизацией или колоночной хроматографией.
Дезацетилирование
К раствору ацетата в сухом метаноле (10 мл/г) добавили 0,01-0,05 экв. 0,1 н. раствора метилата натрия в метаноле, выдержали 12-24 ч. Раствор нейтрализовали катионитом КУ-2 (Н+), смолу промыли метанолом и фильтрат упарили.
К раствору ацетата в сухом метаноле (10 мл/г) добавили 0,01-0,05 экв. 0,1 н. раствора метилата натрия в метаноле, выдержали 12-24 ч. Раствор нейтрализовали катионитом КУ-2 (Н+), смолу промыли метанолом и фильтрат упарили.
Изопропилиденирование
К раствору триола в диоксане или тетрагидрофуране (50 мл/г) при нагревании до 60oС, добавили 3 экв. 2,2-диметоксипропана и 10-20 мг сухой TsOH. Через 1 ч (контроль ТСХ в системе хлороформ - этанол, 15:1) реакционную смесь нейтрализовали пиридином и упарили. Остаток растворили в 50 мл хлороформа, промыли водой (3•25 мл). Органический слой высушили безводным Na2SO4 и упарили досуха. Изопропилиденовое производное очищали колоночной хроматографией (элюент: хлороформ --> хлороформ - этанол, 20:1).
К раствору триола в диоксане или тетрагидрофуране (50 мл/г) при нагревании до 60oС, добавили 3 экв. 2,2-диметоксипропана и 10-20 мг сухой TsOH. Через 1 ч (контроль ТСХ в системе хлороформ - этанол, 15:1) реакционную смесь нейтрализовали пиридином и упарили. Остаток растворили в 50 мл хлороформа, промыли водой (3•25 мл). Органический слой высушили безводным Na2SO4 и упарили досуха. Изопропилиденовое производное очищали колоночной хроматографией (элюент: хлороформ --> хлороформ - этанол, 20:1).
Получение мурамовых кислот
К раствору сахарида со свободной С-3-ОН группой в сухом диоксане (20 мл/г) при перемешивании порциями добавили 4 экв. гидрида натрия. Реакционную смесь нагрели до 95oС, выдержали при этой температуре 1 ч и после охлаждения до 65oС прилили 1,5 экв. S-2-бромпропановой кислоты и выдержали при 65oС еще 3 ч. После охлаждения избыток гидрида натрия разложили этанолом, смесь концентрировали и вылили в холодную воду. Раствор подкислили 2 н. серной кислотой до рН 2-3 и экстрагировали мурамовую кислоту хлороформом. Экстракт высушили безводным Na2SO4 и упарили.
К раствору сахарида со свободной С-3-ОН группой в сухом диоксане (20 мл/г) при перемешивании порциями добавили 4 экв. гидрида натрия. Реакционную смесь нагрели до 95oС, выдержали при этой температуре 1 ч и после охлаждения до 65oС прилили 1,5 экв. S-2-бромпропановой кислоты и выдержали при 65oС еще 3 ч. После охлаждения избыток гидрида натрия разложили этанолом, смесь концентрировали и вылили в холодную воду. Раствор подкислили 2 н. серной кислотой до рН 2-3 и экстрагировали мурамовую кислоту хлороформом. Экстракт высушили безводным Na2SO4 и упарили.
Конденсация N-оксисукцинимидным методом
К раствору кислоты в сухом диоксане или ТГФ (10-20 мл/г) при перемешивании добавили 1,1 экв. N-гидроксисукцинимида (HOSu) и 1,1 экв. N,N'-дициклогексилкарбодиимида (DCC). Через 3-5 ч отфильтровали осадок дициклогексилмочевины, промыли его растворителем. К фильтрату добавили 1 экв. трифторацетата бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина и триэтиламин до рН 8. По окончании реакции продукт отделили фильтрованием.
К раствору кислоты в сухом диоксане или ТГФ (10-20 мл/г) при перемешивании добавили 1,1 экв. N-гидроксисукцинимида (HOSu) и 1,1 экв. N,N'-дициклогексилкарбодиимида (DCC). Через 3-5 ч отфильтровали осадок дициклогексилмочевины, промыли его растворителем. К фильтрату добавили 1 экв. трифторацетата бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина и триэтиламин до рН 8. По окончании реакции продукт отделили фильтрованием.
Гидролиз изопропилиденовых производных
Изопропилиденовые производные растворили при нагревании на кипящей водяной бане в 80% уксусной кислоте (10 мл/г) и выдержали при этой температуре 20 мин (контроль ТСХ в системе хлороформ - этанол, 5:1). Раствор упарили досуха, остаток очистили колоночной хроматографией (элюент: хлороформ хлороформ --> этанол, 10:1).
Изопропилиденовые производные растворили при нагревании на кипящей водяной бане в 80% уксусной кислоте (10 мл/г) и выдержали при этой температуре 20 мин (контроль ТСХ в системе хлороформ - этанол, 5:1). Раствор упарили досуха, остаток очистили колоночной хроматографией (элюент: хлороформ хлороформ --> этанол, 10:1).
Гидрогенолиз бензильных защит
Вещество растворили в этаноле, ТГФ или их смеси (50-100 мл/г) и подвергли гидрогенолизу над 10% Pd/C (1:5 к веществу) при комнатной температуре. Время реакции составляло 2-5 ч. По окончании реакции (контроль ТСХ в системе бутанол-1 - уксусная кислота - вода, 3:1:1) катализатор отфильтровали, промыли растворителем, фильтрат упарили. Остаток затерли в эфире.
Вещество растворили в этаноле, ТГФ или их смеси (50-100 мл/г) и подвергли гидрогенолизу над 10% Pd/C (1:5 к веществу) при комнатной температуре. Время реакции составляло 2-5 ч. По окончании реакции (контроль ТСХ в системе бутанол-1 - уксусная кислота - вода, 3:1:1) катализатор отфильтровали, промыли растворителем, фильтрат упарили. Остаток затерли в эфире.
Примеры синтеза производных мурамовой кислоты
Пример 1. 0-(Гексил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил)-D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамин (2).
Пример 1. 0-(Гексил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил)-D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамин (2).
Гексанол-1 (0,30 мл, 2,36 ммоль) гликозилировали 0,86 г (2,36 ммоль) хлорида 1 и после кристаллизации из эфира получили 0,45 г (45%) гексил-2-ацетамидо-3,4,6-три-0-ацетил-2-дезокси-р-0-глюкопиранозида (2а). Аналитический образец перекристаллизовали из смеси эфир - гексан; т. пл. 125-127oС, [α]54б-17° (с 1,0; хлороформ). 'Н-ЯМР (300 МГц, С2НСl3): 0,88 т 
, 1,28 м и 1,57 м ([СН2]n), 1,95с, 2,02с, 2,03с, 2,08с (12Н, NAc и 3 ОАс), 3,47 дт и 3,85 дт (2Н, С-1-ОСН3, Jгем 9,5 Гц), 3,70 ддд (1Н, Н-5, J5,6а 2,5 Гц, J5.6b 5 Гц), 3,83 ддд (1Н, Н-2, J2,3 10 Гц), 4,13 дд и 4,28 дд (2Н, Н-6a, Н-6b, J6а,6b 12 Гц), 4,69 д (1Н, Н-1, J1,2 8,5 Гц), 5,07 дд (1Н, Н-4, J4,5 9,5 Гц), 5,32 дд (1Н, Н-3, J3,4 9,5 Гц), 5,63 д (1Н, NH, J2,NH 8,5 Гц).
1,54 г (3,57 ммоль) ацетата 2а дезацетилировали и получили 1,0 г (92%) гексил-2-ацетамидо-2- дезокси-β-D- глюкопиранозида (2б), которое изопропилиденировали и получили 0,61 г (54%) гексил-2-ацетамидо- 2-дезокси-4,6-0-изопропилиденβ- D-глюкопиранозида (2в); стеклообразный продукт, [α]54б-88° (с 1,0; хлороформ).
Алкилированием 485 мг (1,41 ммоль) соединения 2в 5-2-бромпропановой кислотой синтезировали 0,57 г (97%) гексил-2-ацетамидо-2-дезокси-4,6-0-изопропилиден-3-0-(D-1-карбоксиэтил)-β-D-глюкопиранозида (2г), которые конденсировали с трифторацетатом бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина. В гликопептидном 2д производном гидролизовали изопропилиденовую защиту и получили 0,48 г (55%) бензилового эфира 0-(гексил-2-ацетамидо-2- дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил) -D-лактоил-L-аланил-D- изоглутамина (2е), аморфный порошок, [α]54б-2° (с 1,0; этанол). 'Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): 0,85 т γ- 1,22 м 
1,24 м и 1,43 м ([СН2]n), 1,75с (3Н, NAc), 1,77 м и 2,01 м (2Н, 
-СН2-Glu), 2,35 т (2Н, β-CH2-Glu), 4,10 ддд (1Н, CH-Glu), 4,18 дк (1Н, CH-Ala), 4,22 к γ- 4,35 д (1Н, H-1, J1.2 8 Гц), 4,61 т (1Н, С-6-ОН), 5,04с (2Н, COOCH2Ph), 5,28а (1Н, С-4-ОН), 7,13с и 7,29с (2Н, CONH2-Glu), 7,36 м (5Н, Ph), 7,39 д, 7,80 д и 8,13 д (3Н, 3 NH).
В 250 мг (0,38 ммоль) соединения 2е удалили гидрогенолизом бензиловый эфир. Добавлением эфира высадили 170 мг (78%) аморфного гликопептида 2; [α]54б+5° (с 0,83; этанол).
Пример 2. 0-(Октил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил) -D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамин (3).
Октанол-1 (0,40 мл, 3,28 ммоль) гликозилировали 1,0 г (2,73 ммоль) хлорида 1 и после очистки колоночной хроматографией (элюент: бензол --> бензол - этанол, 50:1) получили 0,95 г (76%) октил-2-ацетамидо-3,4,6-три-0-ацетил- 2-дезокси-β-D-глюкопиранозида (3а). Аналитический образец перекристаллизовали из смеси эфир - гексан; т. пл. 103-105oС, [α]54б-31° (с 1,0; хлороформ). 'Н-ЯМР (300 МГц, С2НСl3): 0,88т 
1,26 м и 1,56 м ([СН2]n), 1,95с, 2,02с, 2,03с, 2,08с (12Н, NAc и 3 ОАс), 3,47 дт и 3,86 дт (2Н, С-1-ОСН, Jгем 9,5 Гц), 3,84 ддд (1Н, Н-2, J2.3 10 Гц), 3,69 м (1-Н, H-5, J5,6a 2 Гц, J5.6b 4,5 Гц), 4,13 дд и 4,27 дд (2Н, Н-6а, H-6b, J6а, 6b 12 Гц), 4,69д (1Н, H-1, J1.2 8,5 Гц), 5,07 дд (1Н,H-4 J4.5 9,5 Гц), 5,32 дд (1Н, Н-3, J3.4 9,5 Гц), 5,49д (1Н, NH, J2,NH 8.5 Гц).
Дезацетилированием 2,5 г (5,45 ммоль) ацетата 3а получили 1,80 г (99%) октил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D- глюкопиранозида (3б), изопропилиденирование 1,65 г (4,95 ммоль) триола 3б дало 1,55 г (84%) аморфного октил-2-ацетамидо-2-дезокси-4,6-0-изопропилиден-β-D-глюкопиранозида (3в); [α]54б-71° (с 1,0; хлороформ).
Алкилированием 2,2 г (5,9 ммоль) соединения 3в S-2-бромпропановой кислотой синтезировали 2,4 г (92%) октил-2-ацетамидо-2-дезокси-4,6-0-изопропилиден-3-0-(D-1-карбоксиэтил)-β-0-глюкопиранозида (3 г). Мурамовую кислоту 3г (2,0 г, 4,49 ммоль) конденсировали с трифторацетатом бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина. Выход гликопептидного производного 3д составил 2,0 г (61%). В 1,0 г (1,36 ммоль) соединения 3д гидролизовали изопропилиденовую защиту и получили 0,72 г (76%) бензилового эфира О-(октил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил) -D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамина (3е); [α]54б-2° (с 1,0; этанол). 'Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): 0,86т 
1,24 м и 1,44 м 
1,75с (3Н, NAc), 1,71 м и 1,94 м (2Н, β-CH2-Glu), 2,20 т (2Н, γ-CH2-Glu), 3,69ддд (1Н, CH-Glu), 4,12дк (1Н, CH-Ala), 4,22к 
4,25д (1Н, H-1, J1.2 8 Гц), 4,57т (1Н, С-6-ОН), 5,02с (2Н, COOCH2Ph), 5,25а (1Н, С-4-ОН), 7,09с и 7,33с (2Н, CONH2-Glu), 7,36 м (5Н, Ph), 7.39д, 7,80д и 8,09д (3Н, 3 NH).
В соединении 3е (350 мг, 0,51 ммоль) подвергли гидрогенолизу бензиловый эфир. Добавлением эфира высадили 290 мг (95%) аморфного гликопептида 3 [α]54б+12° (с 0,93, этанол).
Пример 3. 0-(Циклогексил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил)-D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамин (4).
Гликозилирование 1,42 мл (13,7 ммоль) циклогексанола 5,0 г (13,7 ммоль) хлорида 1 дало после перекристаллизации из эфира 3,97 г (68%) циклогексил-2-ацетамидо -3,4,6-три-0-ацетил-2-дезокси-β-D- глюкопиранозида (4а), т. пл. 178oС, [α]54б-18° (с 0,77; хлороформ), 'Н-ЯМР (200 МГц, С2НС13): 0,15 м, 1,61 м ([СН2] n), 1,83с, 1,91с, 1,92с, 1,97с (12Н, NAc и 3 ОАс), 3,55 (1Н, С-1-ОСН), 3,56 м (1Н, Н-2, J2.3 10,5 Гц), 3,59 м (1-Н, H-5, J5.6a 2,5 Гц, J5.6b 4,5 Гц), 3,99дд и 4,16дд (2Н, Н-6а, Н-6b, J6а,6b 12 Гц), 4,76д (1Н, Н-1, J1,2 8,5 Гц), 4,93дд (1Н, Н-4, J4.5 9,5 Гц), 5,29дд (1Н, Н-3, J3,4 9,5 Гц), 5,48д (1Н, NH, J2.NH 8,5 Гц).
Дезацетилированием 2,8 г (6,5 ммоль) перацетата 4а получили 1,9 г (96%) циклогексил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозида (4б). Изопропилиденирование 830 мг (2,74 ммоль) триола 4б дало 765 мг (81%) циклогексил-2-ацетамидо-2-дезокси- 4,6-0-изопропилиден-β-D- глюкопиранозида (4в), стеклообразный продукт, [α]54б-69° (с 1,0, хлороформ).
Алкилирование 0,75 г (2,19 ммоль) соединения 4в S-2-бромпропановой кислотой привело к 0,85 г (94%) циклогексил-2-ацетамидо-2-дезокси-4,6-0-изопропилиден-3-0-(D-1-карбоксиэтил)-β-D- глюкопиранозида (4г). 250 мг (0,53 ммоль) кислоты 4 г конденсировали с трифторацетатом бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина. В защищенном гликопептиде 4д удалили изопропилиденовую защиту и получили 635 мг (48%) бензилового эфира 0-(циклогексил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил)-D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамина (4е); аморфный белый порошок, [α]54б+6° (с 1,0; этанол). 'Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): 1,23 м, 1,41 м и 1,60 м 
1,74с (3Н, NAc), 1,77 м и 2,01 м (2Н, β-СН2-Glu), 2,35 т (2Н, γ-CH2-Glu), 4,09ддд (1Н, CH-Glu), 4,17дк (1Н, CH-Ala), 4,23к 
4,37д (1Н, H-1, J1.2 8 Гц), 4,56т (1Н, С-6-ОН), 5,07с 
5,24д (1Н, С-4-ОH), 7,12с и 7,32с (2Н, CONH2-Glu), 7,35 м (5Н, Ph), 7,41д, 7,77д и 8,12д (3Н, 3 NH).
Каталитический гидрогенолиз 325 мг (0,49 ммоль) бензилового эфира 4е привел к 265 мг (92%) гликопептида 4; аморфный порошок, [α]54б+6° (с 0,67; этанол).
Пример 4. 0-[(Адамантил-1-метил)-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил]-D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамин (5)
230 мг (1,37 ммоль) адамантил-1-метанола гликозилировали 500 мг (1,37 ммоль) хлорида 1 и после очистки колоночной хроматографией (элюент: бензол --> бензол - этанол, 25:1) получили 270 мг (41%) (адамантил-1-метил)-2-ацетамидо-3,4,6-три-0-ацетил-2-дезокси-β-D-глюкопиранозида (5а); т. пл. 136-138oС, [α]54б-30° (с 0,77; хлороформ). 'Н-ЯМР (200 МГц, С2НСl3): 1,43 м, 1,61 м (СН2 и СН), 1,89с, 1,96с, 1,97с, 2,03с (12Н, NAc и 3 ОАс), 2,90д и 3,45д (2Н, C-1-OCH2, Jгем 10), 3,86ддд (1Н, Н-2, J2.3 10,5 Гц), 3.60ддд (1-Н, Н-5, J5.6а 2,5 Гц, J5.6b 4,5 Гц), 4,06дд и 4,21дд (2Н, Н-6а, H-6b, J6a,6b 12 Гц), 4,48д (1Н, Н-1, J1.2 8,5 Гц), 5,06дд (1Н, Н-4, J4,5 9,5 Гц), 5,18дд (1Н, Н-3, J3,4 9,5 Гц), 5,58д (1Н, NH, J2,NH 8,5 Гц).
230 мг (1,37 ммоль) адамантил-1-метанола гликозилировали 500 мг (1,37 ммоль) хлорида 1 и после очистки колоночной хроматографией (элюент: бензол --> бензол - этанол, 25:1) получили 270 мг (41%) (адамантил-1-метил)-2-ацетамидо-3,4,6-три-0-ацетил-2-дезокси-β-D-глюкопиранозида (5а); т. пл. 136-138oС, [α]54б-30° (с 0,77; хлороформ). 'Н-ЯМР (200 МГц, С2НСl3): 1,43 м, 1,61 м (СН2 и СН), 1,89с, 1,96с, 1,97с, 2,03с (12Н, NAc и 3 ОАс), 2,90д и 3,45д (2Н, C-1-OCH2, Jгем 10), 3,86ддд (1Н, Н-2, J2.3 10,5 Гц), 3.60ддд (1-Н, Н-5, J5.6а 2,5 Гц, J5.6b 4,5 Гц), 4,06дд и 4,21дд (2Н, Н-6а, H-6b, J6a,6b 12 Гц), 4,48д (1Н, Н-1, J1.2 8,5 Гц), 5,06дд (1Н, Н-4, J4,5 9,5 Гц), 5,18дд (1Н, Н-3, J3,4 9,5 Гц), 5,58д (1Н, NH, J2,NH 8,5 Гц).
Дезацетилирование 1,0 г (2,02 ммоль) ацетата 5а дало 0,71 г (95%) (адамантил-1-метил)-2-ацетамидо -2-дезокси-р-0- глюкопиранозида (5б). Изопропилиденировали 0,61 г (1,66 ммоль) вещества 5б и выделили 416 мг (62%) (адамантил-1-метил)-2-ацетамидо-2-дезокси-4,6-0-изопропилиден -β-D-глюкопиранозида (5в), т. пл. 172-174oС, [α]54б-56° (с 1,0; хлороформ).
Алкилированием 415 мг (1,02 ммоль) соединения 5в 5-2-бромпропионовой кислотой синтезировали 470 мг (96%) (адамантил-1-метил)-2-ацетамидо-2-дезокси- 4,6-0-изопропилиден-3-0-(D-1-карбоксиэтил)-β- D-глюкопиранозида (5 г). 470 мг (0,98 ммоль) кислоты 5г конденсировали трифторацетатом бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина и выделили 510 мг (68%) бензилового эфира 0-[(адамантил-1-метил)-2-ацетамидо- 2-дезокси-4,6-0- изопропилиден-β-D- глюкопиранозид-3-ил] -D-лактоил-L-аланил- D-изоглутамина (5д). 'Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): 1,20д и 1,25д 
1,32с и 1,46с (6Н, Ме2С), 1,43 м и 1,61 м (СН2 и СН), 1,78с (3Н, NAc), 1,90м и 2,00м (2Н, β-CH2-Glu), 2,35т (2Н, γ-СН2-Glu), 2,91д и 3.30д (2Н, C-1-ОСН2, Jгем 10), 4,00ддд (1Н, CH-Glu), 4,19дк (1Н, CH-Ala), 4,24к 
4,32д (1Н, Н-1, J1.2 8), 5,08с 
7,13с и 7,32с (2Н, CONH2), 7,36 м (5Н, Ph), 7,29д, 7,91 д и 8,15д (3Н, 3 NH). В производном 5д (280 мг, 0,36 ммоль) кислотным гидролизом удалили изопропилиденовую защиту и получили 250 мг (95%) бензилового эфира 0-[(адамантил-1-метил)-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D -глюкопиранозид-3-ил] -D-лактоил- L-аланил-D-изоглутамин (5е); т. пл. 133-135oС, [α]54б+4° (с 1,0; этанол).
Каталитический гидрогенолиз 250 мг (0,34 ммоль) бензилового эфира 5е привел к 190 мг (85%) гликопептида 5, аморфный порошок.
Пример 5. 0-(Фенил-2-ацетамидо-2-дезокси-α-D-глюкопиранозид-3-ил)-D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамин (6).
Реакционную смесь, состоящую из 1,0 г хлорида 7, 0,52 г (5,48 ммоль) фенола, 0,52 г (2,29 ммоль) тетраэтилбензиламмонийхлорида, 3,5 мл (4,38 ммоль) 1,25 н. раствора NaOH и 10 мл хлороформа, интенсивно перемешивали при комнатной температуре до исчезновения гликозил-донора (контроль ТСХ в системе хлороформ - этанол, 10:1). Смесь разбавили 10 мл воды и 10 мл хлороформа. Органический слой отделили, промыли 1 н. NaOH (2•5 мл) и водой (10 мл). Хлороформный экстракт осушили безводным Na2SO4 и упарили. Остаток перекристаллизовали из изопропилового спирта и получили 0,76 г (66%) фенил-2-ацетамидо-3,4,6-три-0-ацетил-2-дезокси-β-D -глюкопиранозида (6а), т. пл. 205-206oС, [α]54б-13° (с 0,95, хлороформ). 'Н-ЯМР (300 МГц, С2НСl3): 1,95с, 2,05с, 2,06с, 2,08с (12Н, NAc и 3 ОАс), 3,88ддд (1-Н, Н-5, J5.6a,2,5 Гц, J5.6b 5 Гц), 4,14ддд (1Н, Н-2, J2.3 10,5 Гц), 4,18дд и 4,29дд (2Н, Н-6а, Н-6b, J6a,6b 12 Гц), 5,15д (1Н, Н-4, J4,5 9,5 Гц), 5,28дд (1Н, Н-1, J1.2 8,5 Гц), 5,42дд (1Н, Н-3, J3.4 9,5 Гц), 5,58д (1Н, NH, J2.NH 9 Гц), 7,01 м и 7,28 м (5Н, СНаром).
0,76 г (1,8 ммоль) ацетата 6а растворили в кипящем сухом метаноле, охладили до -40oС и добавили 0,5 мл 0,1 н. раствора метилата натрия в метаноле. Выпавший при стоянии осадок отфильтровали, промыли холодным метанолом. Выход фенил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозида (6б) - 0,47 г (87%). Изопропилиденированием 0,47 г (1,57 ммоль) вещества 6б получили 0,47 г (89%) фенил-2-ацетамидо-2-дезокси-4,6-0-изопропилиден-β-/ D-глюкопиранозида (6в); т. пл. 153-154oС, [α]54б+55° (с 0,8; хлороформ - метанол, 3:1).
0,45 г (1,36 ммоль) соединения 6в алкилировали S-2-бромпропионовой кислоты и добавлением эфира выделили 0,42 г (76%) фенил-2-ацетамидо-2-дезокси-4,6-0-
изопропилиден-3-0-(D-1-карбоксиэтил)-β-D-глюкопиранозида (6 г). 'Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6). 1,24д
1,33с и 1,48с (6Н, Ме2С), 1,80с (3Н, NAc), 4,19к 
5,25д (1H, Н-1, J1.2 6 Гц), 6,97 м и 7,29 м (5Н, СНаром.), 7,84д (1Н, NH, J2.NH 6 Гц), 12,48ус (1Н, СООН). Конденсацией 270 мг (0,66 ммоль) кислоты 6г с трифторацетатом бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина синтезировали 270 мг (59%) гликопептида 6д. Кислотный гидролиз изопропилиденовой защиты в производном 6д (190 мг, 0,27 ммоль) дал 179 мг (100%) бензилового эфира 0-(фенил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил)-D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамина (6е), т. пл. 212-213oС (с разл.), [α]54б+25° (с 0,67; этанол). 'Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): 1,25д и 1,27д (6H,2CH3CH,JMe,CH7Гц), 1,78с (3Н, NAc), 1,80 м и 2,02 м (2Н, β-CH2-Glu), 2,36т (2Н, γ-CH2-Glu), 3,90ддд (1Н, CH-Glu), 4,18дк (1Н, CH-Ala), 4,26к 
4,69ус (1Н, С-6-ОН), 4,95д (1Н, Н-1, J1.2 8,5 Гц), 5,08с 
5,40ус (1Н, С-4-ОН), 6,98м (3Н) и 7,30м (2Н) (5Н, Наром), 7,13с и 7,32с (2Н, CONH2), 7,36м (5Н, Ph), 7,47д, 7,91д и 8,14д (3Н, 3 NH).
изопропилиден-3-0-(D-1-карбоксиэтил)-β-D-глюкопиранозида (6 г). 'Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6). 1,24д
Бензиловый эфир 6е (180 мг, 0,27 ммоль) подвергли каталитическому гидрогенолизу. Выход гликопептида 6 - 130 мг (84%); аморфный порошок.
Примеры исследования биологических свойств производных мурамовой кислоты.
Исследована биологическая активность производных мурамовой кислоты в модельных тест-системах in vitro и in vivo. Продемонстировано, что вышеописанные соединения в большинстве тест-систем превышают по активности немодифицированный МДП и его известные гликозидные аналоги. Более того, в модельных тест-системах in vivo оригинальные производные МДП проявляли терапевтическое действие по стимуляции противоопухолевого иммунного ответа и усилению неспецифической резистетности к инфекционным заболеваниям в гораздо более низких концентрациях, чем немодицированный МДП. Последняя закономерность наблюдалась и при внутрибрюшинном, и при внутривенном, и при пероральном введении препаратов, что говорит о высокой биодоступности оригинальных производных мурамовой кислоты при вышеописанных путях введения в организм.
Ниже приведены два примера сравнительного изучения иммуномодулирующей активности производных мурамовой кислоты в модельных тест-ситемах in vitro.
Claims (1)
- Производные мурамовой кислоты общей формулы:
где Х - С1-С20-алкил, за исключением Х - бутил, гептил или гексадецил, или С3-С9-циклоалкил, незамещенный или замещенный С1-С3-алкилом, или адамантил, незамещенный или замещенный С1-С3-алкилом, или С6-С12-арил, незамещенный или замещенный одним или тремя С1-С3-алкилами.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000124015A RU2181729C1 (ru) | 2000-09-20 | 2000-09-20 | Производные мурамовой кислоты |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000124015A RU2181729C1 (ru) | 2000-09-20 | 2000-09-20 | Производные мурамовой кислоты |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2181729C1 true RU2181729C1 (ru) | 2002-04-27 |
Family
ID=20240227
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2000124015A RU2181729C1 (ru) | 2000-09-20 | 2000-09-20 | Производные мурамовой кислоты |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2181729C1 (ru) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20150031630A1 (en) * | 2011-05-18 | 2015-01-29 | Eumederis Pharmaceuticals, Inc. | Peptide Pharmaceuticals |
| US20150307550A1 (en) * | 2012-11-20 | 2015-10-29 | Eumederis Pharmaceuticals, Inc. | Improved peptide pharmaceuticals |
| RU2573991C1 (ru) * | 2015-04-29 | 2016-01-27 | Закрытое акционерное общество "ПЕПТЕК" | Способ получения n-ацетилглюкозаминил-n-ацетилмурамил-l-аланил-d-глутаминовой кислоты |
| US9856306B2 (en) | 2014-05-28 | 2018-01-02 | Spitfire Pharma, Inc. | Peptide pharmaceuticals for insulin resistance |
| US10471127B2 (en) | 2011-05-18 | 2019-11-12 | Mederis Diabetes, Llc | Peptide pharmaceuticals for insulin resistance |
| US11065304B2 (en) | 2012-11-20 | 2021-07-20 | Mederis Diabetes, Llc | Peptide pharmaceuticals for insulin resistance |
| US11541028B2 (en) | 2018-01-03 | 2023-01-03 | Altimmune Inc. | Peptide pharmaceuticals for treatment of NASH and other disorders |
-
2000
- 2000-09-20 RU RU2000124015A patent/RU2181729C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| С.С. Пертель и др. Биоорганическая химия, 1999, т.25, № 9, с. 708-715. * |
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20150031630A1 (en) * | 2011-05-18 | 2015-01-29 | Eumederis Pharmaceuticals, Inc. | Peptide Pharmaceuticals |
| US10010617B2 (en) * | 2011-05-18 | 2018-07-03 | Eumederis Pharmaceuticals, Inc. | Peptide pharmaceuticals |
| US10420844B2 (en) | 2011-05-18 | 2019-09-24 | Mederis Diabetes Llc | Peptide pharmaceuticals |
| US10471127B2 (en) | 2011-05-18 | 2019-11-12 | Mederis Diabetes, Llc | Peptide pharmaceuticals for insulin resistance |
| US20150307550A1 (en) * | 2012-11-20 | 2015-10-29 | Eumederis Pharmaceuticals, Inc. | Improved peptide pharmaceuticals |
| US10005817B2 (en) * | 2012-11-20 | 2018-06-26 | Eumederis Pharmaceuticals, Inc. | Peptide pharmaceuticals |
| US11065304B2 (en) | 2012-11-20 | 2021-07-20 | Mederis Diabetes, Llc | Peptide pharmaceuticals for insulin resistance |
| US9856306B2 (en) | 2014-05-28 | 2018-01-02 | Spitfire Pharma, Inc. | Peptide pharmaceuticals for insulin resistance |
| US10577405B2 (en) | 2014-05-28 | 2020-03-03 | Mederis Diabetes Llc | Peptide pharmaceuticals for insulin resistance |
| RU2573991C1 (ru) * | 2015-04-29 | 2016-01-27 | Закрытое акционерное общество "ПЕПТЕК" | Способ получения n-ацетилглюкозаминил-n-ацетилмурамил-l-аланил-d-глутаминовой кислоты |
| US11541028B2 (en) | 2018-01-03 | 2023-01-03 | Altimmune Inc. | Peptide pharmaceuticals for treatment of NASH and other disorders |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE69825271T2 (de) | Aminoalkyl-glucosamin-phosphat-verbindungen und ihrer verwendung als adjuvanten und immunoeffektoren | |
| EP0025495B1 (de) | Lipophile Muramylpeptide, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung | |
| FI64164C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av 2-(2-acylamino-2-desoxi-(d)-glukosyl-3-0)-alkankarboxylsyrapeptid-derivat | |
| FI75172B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara n-glykosylerade karboksylsyraamidderivat. | |
| EP0714903A1 (de) | Neue Kohlenhydratkonjugate als Inhibitoren der Zelladhäsion | |
| EP0467331A1 (en) | O-methyl derivatives of azithromycin A, process and intermediates for their preparation, and use thereof in the preparation of pharmaceuticals | |
| EP0015468B1 (en) | 6-deoxyglucosamine-peptide derivatives, their production and use | |
| US4368190A (en) | Immunologically active dipeptidyl 4-O-,6-O-acyl-2-amino-2-deoxy-D-glucose derivatives and methods for their preparation | |
| WO2010116317A1 (en) | 6"-sialyllactose salts and process for their synthesis and for the synthesis of other a-sialyloligosaccharides | |
| RU2181729C1 (ru) | Производные мурамовой кислоты | |
| ES2222610T3 (es) | Nuevas 9a-azalidas. | |
| EP0041896B1 (en) | Immunologically active dipeptidyl 2-amino-1,2-dideoxy-d-glucose derivatives and methods of preparation | |
| WO1997018222A9 (en) | Novel oligosaccharide glycosides having mammalian immunosuppressive and tolerogenic properties | |
| US4310514A (en) | Immunologically active dipeptidyl 5-0,6-0-acyl-2-amino-2-deoxy-D-glucofuranose derivatives and methods of preparation | |
| EP0728763B1 (en) | Ganglioside gm3 analog having sialic acid residue fluorinated at the 9-position and intermediate therefor | |
| EP0771795A1 (de) | Neuartige Glycomimetika als Selektin-Antagonisten und entzündungshemmend wirkende Arzneimittel | |
| AU595987B2 (en) | Disaccharide derivatives | |
| GB1562734A (en) | N - acetylmuramyl - d - alanyl - d - isoglutamine | |
| Sliedregt et al. | Design and synthesis of a multivalent homing device for targeting to murine CD22 | |
| US20040058888A1 (en) | Methods for synthesis of alpha-d-gal (1~>3) gal-containing oligosaccharides | |
| Kusumoto et al. | Synthesis of. BETA.(1-4)-linked disaccharides of N-acetylglucosamine and N-acetylmuramic acid by their direct condensation. | |
| JPH01221387A (ja) | 新規ジサッカライド誘導体及びその塩 | |
| Burger et al. | A convenient preparation of 2-acetamido-2, 6-dideoxy-D-glucose, some of its alkyl glycosides, and allyl 2-acetamido-2, 6-dideoxy-α-D-galactopyranoside | |
| Wong et al. | The synthesis of derivatives of lactosamine and cellobiosamine to serve as probes in studies of the combining site of the monoclonal anti-I Ma antibody | |
| Käsbeck et al. | Convenient Syntheses of 2, 3, 4, 6‐Tetra‐O‐Alkylated d‐Glucose and d‐Galactose |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140921 |