RU2160992C1 - Сухой биопрепарат и способ его получения - Google Patents
Сухой биопрепарат и способ его получения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2160992C1 RU2160992C1 RU99117491/13A RU99117491A RU2160992C1 RU 2160992 C1 RU2160992 C1 RU 2160992C1 RU 99117491/13 A RU99117491/13 A RU 99117491/13A RU 99117491 A RU99117491 A RU 99117491A RU 2160992 C1 RU2160992 C1 RU 2160992C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lactobacillus acidophilus
- strains
- milk
- preparation
- cells
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Может быть использовано в пищевой промышленности, медицине, ветеринарии и смежных отраслях. Сухой препарат содержит в качестве бактерий смесь штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и H-1 при следующем соотношении ингредиентов на 1 г препарата: смесь штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и H-1 2-100 млрд. клеток; желатин 0,5-2,5 мас. %, сахароза 5-20 мас.%, обезжиренное сухое молоко 3-5 мас.%, вода 2-8 мас.%, остатки культуральной жидкости остальное. Способ получения препарата включает культивирование бактерий с использованием посевного материала штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и H-1 на гидролизатно-молочной питательной среде. Питательная среда содержит дополнительно 0,3-0,5% углекислого кальция. После культивирования в культуральную жидкость вводят защитную среду при следующем соотношении компонентов: 1-3 мас.% желатина, 8-12 мас. % сахарозы и 3-5 мас.% обезжиренного сухого молока. Смесь замораживают при - 25-30°С. Затем подвергают сублимационной сушке при температуре не выше - 30°С и давлении 13-15 Па. Полученный препарат показал высокую сбраживающую активность в отношении молока и стабильность при длительном хранении. Способ позволяет получать заданное соотношение клеток различных штаммов в кисломолочном продукте. 2 с. и 4 з.п. ф-лы, 2 табл.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к сухим препаратам и способам их получения и может быть использовано в пищевой промышленности, медицине, ветеринарии и смежных отраслях.
Известны сухие биопрепараты на основе молочнокислых микроорганизмов (Евр. пат. N 0097484, 1984 кл. A 23 C 1/05: евр. пат. N 0043962, 1980 кл. A 23 C 19/086: пат. США N 4289888, 1979, кл. A 23 C 9/123). Препарат содержит клетки бактерий, остатки культуральной жидкости (КЖ), жиры, белки, лактозу, камедь и другие добавки. Технология включает в себя, как правило, подготовку раствора или взвеси биомассы микроорганизмов, введение в нее специальных добавок, высушивание и получение готового продукта. Условия процесса и состав композиций определяются особенностями используемых микроорганизмов и характером поставленной задачи.
Известны способы получения сухих препаратов на основе ацидофильных микроорганизмов (пат. РФ N 2064269, 1994, кл. A 23 C 9/12, авт.св. СССР N 1227145, 1983, кл. A 23 C 9/123), включающие в себя выращивание микроорганизмов на питательной среде, введение в культуральную жидкость (КЖ) или ее концентрат защитной среды и сушку. Препарат, как правило, содержит клетки бактерий и остатки КЖ с некоторыми добавками, улучшающими его эксплуатационные характеристики.
Недостатком препаратов является относительно невысокая активность, а для способов - невозможность использовать для получения препаратов на основе симбиотических бактериальных систем.
Прототипом настоящего изобретения является препарат и способ его получения, описанный в патенте RU 2080795 A 1, 10.06.1997. Данный препарат содержит живые клетки Lactobacillus acidophilus, желатин, сахарозу, обезжиренное молоко, воду, остатки культуральной жидкости.
Способ его получения предусматривает культивирование бактерий Lactobacillus acidophilus в жидкой питательной среде, введение защитной среды, содержащей желатин, сахарозу, обезжиренное молоко, замораживание при температуре - 30 - (-)35oC в течение 18-12 часов, сублимационную сушку в течение 45-52 часов.
Недостатком прототипа является неприменимость способа для получения сухого препарата на основе симбиотических бактериальных культур.
Задачей, стоявшей перед авторами, являлось создание более эффективного и стабильного при хранении ферментирующего молоко препарата на основе симбиотических штаммов Lactobacillus acidophilus и способа его получения.
Основной проблемой являлось обеспечение устойчивого равновесия между штаммами как в полученном конечном продукте при его хранении, так и на стадиях получения препарата, в ходе которых клетки подвергаются стрессовым воздействиям, т. е. нахождение таких условий, при которых воздействие на оба штамма являлось бы одинаковым и обеспечивало бы оптимальное поддержание баланса в системе.
Было найдено, что предъявляемым требованиям отвечал препарат следующего состава (содержание ингредиентов на 1 г сухого препарата):
Смесь штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и H-1 - 2-100 млрд. клеток
Желатин - 0,5-2,5 мас.%
Сахароза - 5-20 мас.%
Обезжиренное сухое молоко (ОСМ) - 3-5 мас.%
Вода - 2-8 мас.%
Остатки культуральной жидкости (ОКЖ) - Остальное
Отличием препарата от прототипа использование в качестве бактерий смеси штаммов Lactobacilfus acidophilus А-1 и H-1, а в качестве источников углерода и азота - смесь желатина, сахарозы и обезжиренного сухого молока определенного состава.
Смесь штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и H-1 - 2-100 млрд. клеток
Желатин - 0,5-2,5 мас.%
Сахароза - 5-20 мас.%
Обезжиренное сухое молоко (ОСМ) - 3-5 мас.%
Вода - 2-8 мас.%
Остатки культуральной жидкости (ОКЖ) - Остальное
Отличием препарата от прототипа использование в качестве бактерий смеси штаммов Lactobacilfus acidophilus А-1 и H-1, а в качестве источников углерода и азота - смесь желатина, сахарозы и обезжиренного сухого молока определенного состава.
Состав препарата является оптимальным для данных штаммов. Оптимальным является соотношение их клеток 1: 1, однако допустимо соотношение клеток штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и Н-1 до 40:60 до 60:40.
Содержание сахарозы менее 5% ведет к неудовлетворительной структуре конечного препарата, при ее содержание более 20% - препарат инактивируется.
Содержание желатина менее 0.5% требует ведения высушивания при более низких температурах, что сложно технологически, содержание желатина более 2.5% приводит к возникновению дисбаланса штаммов, что снижает сбраживающие характеристики конечного препарата.
Содержание обезжиренного молока менее 3% ведет к инактивации препарата, его содержание более 5% приводит к возникновению дисбаланса штаммов, что снижает сбраживающие характеристики конечного препарата.
Содержание воды должно быть минимальным для длительного хранения, однако сушка до содержания воды менее 2% технологически более сложна, причем низкое содержание воды негативно сказывается на поддержание клеток в живом виде.
Способ получения сухого препарата заключается в том, что культивирование проводят с использованием посевного материала штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и Н-1 на гидролизатно-молочной питательной среде, содержащей дополнительно 0.3-0.5% углекислого кальция, после культивирования в культуральную жидкость в качестве добавок вводят (% в расчете на получаемый сухой продукт) 1-3 мас.% желатина, 8-12 мас.% сахарозы и 3-5 мас.% обезжиренного сухого молока и подвергают замораживанию при -25 -30oC, а затем сублимационной сушке при температуре не выше - 30oC и давлении 13-15 Па. Сушку проводят, как правило, в течении по крайней мере 40 часов.
Оптимально, чтобы соотношение клеток штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и Н-1 в посевном материале составляло около 1:1, что контролируется по данным оптической плотности исходных культур при длине волны 600 нм.
В качестве гидролизатно-молочной питательной среды используют стандартную среду, содержащую в 1 л панкреатического гидролизата молока 2 г пептона, 0.6 г хлористого натрия, 0.02 г цистеина, и 1 г лактозы с учетом погрешности введения компонентов (около 5%). Как правило, культивирование проводят при 38±2oC в течение 16-20 часов.
Возможное даже небольшое изменение условий получения препарата приводит либо к ухудшению его активности, либо к снижению срока хранения.
Сущность изобретения иллюстрируются следующими примерами.
Пример 1. В ампулы с лиофилизованными эталонами производственных штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и Н-1 вносят по 1 мл дистиллированной воды, после чего тщательно перемешивают и вносят раздельно в пробирки с обезжиренным молоком, и выдерживают при 37±2oC в течение 16-20 часов
Посевной материал вводят в колбы, содержащие по 100 мл гидролизатно-молочной среды, содержащей в панкреатическом гидролизате молока 0.2 г пептона, 0.06 г хлористого натрия, 0.002 г цистеина и 0.1 г лактозы и выдерживают при 37±2oC в течение 16-20 часов.
Посевной материал вводят в колбы, содержащие по 100 мл гидролизатно-молочной среды, содержащей в панкреатическом гидролизате молока 0.2 г пептона, 0.06 г хлористого натрия, 0.002 г цистеина и 0.1 г лактозы и выдерживают при 37±2oC в течение 16-20 часов.
Готовый посевной материал получают смешением отдельно выращенных культур таким образом, чтобы соотношение клеток отдельных штаммов было близко к 1:1 по данным оптической плотности при длине, волны 600 нм.
Выращивание нативной культуры производится на среде, содержащей в 1 л панкреатического гидролизата молока 2 г пептона, 0.6 г хлористого натрия, 0.02 г цистеина, 4 г углекислого кальция и 1 г лактозы при 38±2oC в течение 16-20 часов.
К культуральной жидкости добавляют 3-компонентную среду, состоящую из сахарозы, желатина и ОСМ в соотношении 10% : 2% : 4% в расчете на сухое вещество конечного продукта.
Полученный продукт разливают по пенициллиновым флаконам исходя из 2 мл препарата в каждом флаконе и замораживают в камере сублимационной установки при -25-30oC, после чего подвергают сублимационному высушиванию при температуре конденсатора-вымораживателя не выше -50oC и вакууме 13-15 Па. Время достижения рабочего вакуума составляет 20-30 мин, суммарная длительность процесса высушивания - 40-46 часов.
Полученный после высушивания препарат имеет вид однородной по цвету и высоте таблетки. Цвет от светлого до темно-бежевого. Время полного растворения таблетки в дистиллированной воде от 0.5 до 2 мин. Остаточная влажность, как правило около 3±1%. (возможно до 5%).
Результаты испытаний по хранению препарата и сквашиванию молока по сравнению с жидкой формой приведены в таблице 1.
Пример 2. В условиях примера 1 осуществлялось получения препарата с модификацией отдельных компонентов его состава. Полученные результаты испытаний приведены в таблице 2.
Полученные результаты свидетельствуют о высокой стабильности и эффективности заявляемого препарата.
Claims (5)
1. Сухой препарат бактерий Lactobacillus acidophilus, содержащий живые клетки бактерий, желатин, сахарозу, обезжиренное сухое молоко, воду, остатки культуральной жидкости, отличающийся тем, что в качестве клеток Lactobacillus acidophilus он содержит смесь штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и Н-1 при следующем соотношении ингредиентов на 1 г препарата:
Смесь штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и Н-1 - 2 - 100 млрд клеток
Желатин - 0,5 - 2,5 масс.%
Сахароза - 5 - 20 масс.%
Обезжиренное сухое молоко - 3 - 5 масс.%
Вода - 2 - 8 масс.%
Остатки культуральной жидкости - Остальное
2. Сухой препарат по п.1, отличающийся тем, что соотношение клеток штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и Н-1 составляет от 40 : 60 до 60 : 40.
Смесь штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и Н-1 - 2 - 100 млрд клеток
Желатин - 0,5 - 2,5 масс.%
Сахароза - 5 - 20 масс.%
Обезжиренное сухое молоко - 3 - 5 масс.%
Вода - 2 - 8 масс.%
Остатки культуральной жидкости - Остальное
2. Сухой препарат по п.1, отличающийся тем, что соотношение клеток штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и Н-1 составляет от 40 : 60 до 60 : 40.
3. Способ получения сухого препарата бактерий Lactobacillus acidophilus, включающий в себя культивирование бактерий в жидкой питательной среде, введение защитной среды, содержащей желатин, сахарозу, обезжиренное сухое молоко и воду, замораживание, сублимационную сушку и получение готовой формы, отличающийся тем, что культивирование проводят с использованием посевного материала штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и Н-1 на гидролизатно-молочной питательной среде, содержащей дополнительно 0,3 - 0,5% углекислого кальция, после культивирования в культуральную жидкость вводят защитную среду при следующем соотношении компонентов: 1 - 3 мас.% желатина, 8 - 12 мас.% сахарозы и 3 - 5 мас.% обезжиренного сухого молока и подвергают замораживанию при температуре - 25 - 30oС, а затем сублимационной сушке при температуре не выше - 30oС и давлении 13 - 15 Па.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что соотношение клеток штаммов Lactobacillus acidophilus А-1 и Н-1 в посевном материале составляет около 1 : 1.
5. Способ по п.3, отличающийся тем, что в качестве гидролизатно-молочной питательной среды используют среду, содержащую в 1 л панкреатического гидролизата молока 2 г пептона, 0,6 г хлористого натрия, 0,02 г цистеина и 1 г лактозы.
6. Способ по п.3, отличающийся тем, что культивирование проводят при 38 ± 2oС в течение 16 - 20 ч.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99117491/13A RU2160992C1 (ru) | 1999-08-17 | 1999-08-17 | Сухой биопрепарат и способ его получения |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99117491/13A RU2160992C1 (ru) | 1999-08-17 | 1999-08-17 | Сухой биопрепарат и способ его получения |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2160992C1 true RU2160992C1 (ru) | 2000-12-27 |
Family
ID=20223785
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU99117491/13A RU2160992C1 (ru) | 1999-08-17 | 1999-08-17 | Сухой биопрепарат и способ его получения |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2160992C1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU169875U1 (ru) * | 2016-09-09 | 2017-04-04 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов" Федерального медико-биологического агентства | Устройство для получения и приема кисломолочного продукта в условиях невесомости |
RU2677668C2 (ru) * | 2017-06-20 | 2019-01-18 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов" Федерального медико-биологического агентства | ШТАММЫ Lactobacillus helveticus D75 и D76 И ПРЕПАРАТ, ИХ СОДЕРЖАЩИЙ |
-
1999
- 1999-08-17 RU RU99117491/13A patent/RU2160992C1/ru not_active IP Right Cessation
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU169875U1 (ru) * | 2016-09-09 | 2017-04-04 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов" Федерального медико-биологического агентства | Устройство для получения и приема кисломолочного продукта в условиях невесомости |
RU2677668C2 (ru) * | 2017-06-20 | 2019-01-18 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов" Федерального медико-биологического агентства | ШТАММЫ Lactobacillus helveticus D75 и D76 И ПРЕПАРАТ, ИХ СОДЕРЖАЩИЙ |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN106434463B (zh) | 一种鼠李糖乳杆菌冻干粉的制备方法 | |
KR102429539B1 (ko) | 구연산염을 포함하는 유산균 동결 보호용 조성물 | |
RU2160992C1 (ru) | Сухой биопрепарат и способ его получения | |
US3567585A (en) | Process for obtaining bcg-cultures | |
US20240182832A1 (en) | Single vessel multi-zone bioreactor for simultaneous culture of multiple microbial strains | |
RU2425576C1 (ru) | Сухой пробиотически активный биопрепарат и способ получения кисломолочного напитка на его основе | |
RU2169574C1 (ru) | Способ получения биопрепарата и сухой биопрепарат | |
RU2109054C1 (ru) | Консорциум бифидобактерий bifidobacterium bifidum 791, b. longum b 379 m, b. breve 79-119, b. infantis 73-15, b. adolescentis г 7513 для приготовления кисломолочных, неферментированных пищевых продуктов и бактерийных препаратов | |
RU2105562C1 (ru) | Способ получения бактериального препарата на основе bacillus subtilis | |
US3449209A (en) | Method of preparing brucella abortus vaccines | |
RU2083665C1 (ru) | Способ приготовления бактериального препарата для приготовления мясных продуктов | |
RU2129794C1 (ru) | Способ получения сухого препарата для производства кисломолочных продуктов | |
RU2067114C1 (ru) | Способ получения сухого пробиотического препарата | |
RU2085211C1 (ru) | Способ изготовления живой сухой вакцины против рожи свиней из штамма вр-2 | |
KR19980059063A (ko) | 보존성이 우수한 동결 건조 균체의 제조 방법 및 이를 위한 동결 건조 보호제 조성물 | |
RU2822476C1 (ru) | Способ длительного сохранения (консервирования) облигатно анаэробных бактерий высушиванием из замороженного состояния | |
RU2017816C1 (ru) | Способ получения биомассы микроорганизмов | |
RU2227806C1 (ru) | Способ получения питательной среды для культивирования бифидобактерий | |
RU2078812C1 (ru) | Способ получения азотсодержащего компонента питательной среды | |
KR0164680B1 (ko) | 보존성이 우수한 동결건조균체의 제조방법 | |
RU2207019C1 (ru) | Биологически активная добавка к пище и способ ее приготовления | |
SU863637A1 (ru) | Способ получени бактериального концентрата | |
RU2650786C1 (ru) | Способ криоконсервации клеток цианобактерий | |
RU2077214C1 (ru) | Способ приготовления сухой закваски для производства кисломолочных продуктов | |
JPS61265085A (ja) | 生菌保存安定性の良好なビフイズス菌培養物粉末の製造法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC4A | Invention patent assignment |
Effective date: 20051012 |
|
QB4A | Licence on use of patent |
Effective date: 20080131 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20130818 |