RU2153351C2

RU2153351C2 - Agent for regulation of endogenous production of cytokine and hemopoietic factor (variants) and method of its using

Info

Publication number: RU2153351C2
Application number: RU98108088/14A
Authority: RU
Inventors: М.Б. Балазовский; кин Л.А. Кожем; Л.А. Кожемякин
Original assignee: Закрытое акционерное общество "ВАМ"
Priority date: 1995-12-14
Filing date: 1996-12-10
Publication date: 2000-07-27

Abstract

FIELD: medicine, therapy, pharmacology. SUBSTANCE: invention relates to method of modulation and/or reproduction of effects of endogenous production of cytokines and hemopoietic factors and/or induction of apoptosis mechanisms. Method involves administration of effective amount of oxidized glutathione or its pharmaceutically acceptable derivative in mammalian organism needing with stimulation of cytokines or hemopoietic factors for time that is sufficient for modulation of endogenous production of cytokines and hemopoietic factors to obtain therapeutic effect. Indicated oxidized glutathione and/or its pharmaceutically acceptable salts and/or pharmaceutically acceptable derivatives are administrated by parenteral or topical route. Oxidized glutathione and/or its pharmaceutically acceptable salts and/or pharmaceutically acceptable derivatives are administrated in combination with prolongator of indicated oxidized glutathione half-life and/or its pharmaceutically acceptable salts and/or its pharmaceutically acceptable derivatives half-life. EFFECT: broadened spectrum of agents for regulation of production of cytokines and hemopoietic factors. 56 cl, 7 dwg, 48 tbl, 27 ex

Description

Изобретение относится к медицине, в частности к фармакологии и терапии, и может быть использовано для профилактики и лечения различных заболеваний посредством регулирования эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов и индукции механизмов апоптоза в вирус- и/или опухоле-трансформированных клетках. The invention relates to medicine, in particular to pharmacology and therapy, and can be used for the prevention and treatment of various diseases by regulating the endogenous production of cytokines and hematopoietic factors and inducing apoptosis mechanisms in virus and / or tumor-transformed cells.

Уровень техники
Известно, что ряд гуморальных факторов, эндогенно вырабатываемых в организме млекопитающих, - цитокинов и гемопоэтических факторов - обладают высокой биологической активностью и способны оказывать существенный лечебный эффект при разнообразных заболеваниях у человека [1], [2]. Многие из этих факторов оценивались в рамках клинических испытаний и сегодня используются как лекарственные препараты.State of the art
It is known that a number of humoral factors endogenously produced in the body of mammals — cytokines and hematopoietic factors — have high biological activity and are able to have a significant therapeutic effect in various diseases in humans [1], [2]. Many of these factors have been evaluated in clinical trials and are now used as medications.

Так в онкологической практике широко изучается применение следующих цитокинов и гематопоэтических факторов: интерлейкина 2 (IL-2) [3], [4], фактора некроза опухолей (TNF-α ) [5], эритропоэтина, макрофагально-гранулоцитарного и гранулоцитарного колоние-стимулирующих факторов, (GM-CSF и G-CSF), соответственно [6] , [7]. Не менее интенсивно изучается использование цитокинов и гемопоэтических факторов для лечения инфекционных заболеваний: интерфероны (IFN -γ и IFN -α ) [8], [9], [10], колоние-стимулирующие факторы [II], [12] и другие [13]. Колоние-стимулирующие факторы и эритропоэтин активно применяются в гематологии [14], [15]. So in oncological practice, the use of the following cytokines and hematopoietic factors is widely studied: interleukin 2 (IL-2) [3], [4], tumor necrosis factor (TNF-α) [5], erythropoietin, macrophage-granulocyte and granulocyte colony-stimulating factors, (GM-CSF and G-CSF), respectively [6], [7]. The use of cytokines and hematopoietic factors for the treatment of infectious diseases is no less intensively studied: interferons (IFN-γ and IFN-α) [8], [9], [10], colony-stimulating factors [II], [12] and others [ 13]. Colony-stimulating factors and erythropoietin are actively used in hematology [14], [15].

Следует отметить, что лечебное применение этих веществ, вводимых экзогенно, имеет ограничения, связанные с отсутствием приемлемых лекарственных форм или их высокой стоимостью, коротким сроком полу-жизни веществ данного класса в биологических средах, трудностями в выборе доз, а также разнообразными токсическими и аллергическими эффектами [16], [17], поскольку рекомбинантные продукты достаточно иммуногенны для человеческого организма
Известно, что уже оценивается ряд соединений, модулирующих эндогенную продукцию цитокинов и гемопоэтических факторов в экспериментальных и клинических условиях. Широко известно о применении, в том числе успешном, микробных продуктов для лечения рака, что связано со стимуляцией эндогенной продукции фактора некроза опухолей [18]. Продукты, способные вызывать одновременную продукцию различных цитокинов и гемопоэтических факторов, получили название мульти-цитокиновых индукторов (multi-cytokine inducer). К средствам подобного действия относят препарат убитых стрептококков, нокардий (Nocardia opaca) и другие бактериальные продукты [19], [20], [21]. Однако, практически все вещества, обладающие подобной способностью, это или убитые микроорганизмы, или микробные продукты, или соединения с неустановленной или переменной структурой, что существенно ограничивает возможности их медицинского применения в лечебных целях, а в ряде случаев делает такое применение невозможным.It should be noted that the therapeutic use of these substances introduced exogenously has limitations associated with the lack of acceptable dosage forms or their high cost, the short half-life of substances of this class in biological media, difficulties in choosing doses, and various toxic and allergic effects [16], [17], since recombinant products are sufficiently immunogenic for the human body
It is known that a number of compounds have already been evaluated that modulate the endogenous production of cytokines and hematopoietic factors in experimental and clinical conditions. It is widely known that microbial products for the treatment of cancer, including successful ones, are associated with the stimulation of endogenous production of tumor necrosis factor [18]. Products that can cause the simultaneous production of various cytokines and hematopoietic factors are called multi-cytokine inducers. The remedies of this action include the preparation of killed streptococci, nocardia (Nocardia opaca) and other bacterial products [19], [20], [21]. However, almost all substances with such ability are either killed microorganisms, or microbial products, or compounds with an unknown or variable structure, which significantly limits the possibility of their medical use for medicinal purposes, and in some cases makes such use impossible.

Окисленный глутатион (также известный как глутатион дисульфид, GSSG) далее в данной заявке будет обозначаться как GSSG. Oxidized glutathione (also known as glutathione disulfide, GSSG) will hereinafter be referred to as GSSG.

GSSG известен как димер трипептида глутатиона (γ-глутамил-цистеинил-глицина), в котором две молекулы трипептида с вышеозначенной структурой соединены друг с другом ковалентной дисульфидной связью между цистеиновыми остатками. Таким образом, как трипептид глутатион (глутатион, глутатион восстановленный, GSH; далее - GSH), так и его димер - GSSG - являются природными метаболитами и присутствуют в клетках и биологических жидкостях животных, организмов. GSSG is known as a dimer of glutathione tripeptide (γ-glutamyl-cysteinyl-glycine), in which two tripeptide molecules with the above structure are connected to each other by a covalent disulfide bond between cysteine residues. Thus, both the glutathione tripeptide (glutathione, reduced glutathione, GSH; hereinafter - GSH), and its dimer - GSSG - are natural metabolites and are present in the cells and biological fluids of animals and organisms.

Известны свойства GSH, как одного из важнейших участников метаболизма аминокислот и фактора обеспечения внутриклеточного гомеостаза [22], [23]. Большое значение имеют восстановительные свойства GSH и его функция донора восстановительных эквивалентов, которую молекула GSH способна выполнять благодаря наличию сульфгидрильной группы цистеинового остатка. Этим качеством GSH определяется и его роль как принципиального элемента одной из важнейших внутриклеточных антиоксидантных систем, включающей собственно GSH и два основных фермента его метаболизма: глутатион пероксидазу и глутатион редуктазу [24] , [25] . Постоянное функционирование данной системы необходимо для инактивации или восстановления как эндогенно образующихся оксидантов, так и активных метаболитов веществ, попадающих в организм извне [26], [27]. The properties of GSH are known as one of the most important participants in the metabolism of amino acids and the factor for ensuring intracellular homeostasis [22], [23]. Of great importance are the reducing properties of GSH and its donor function of reducing equivalents, which the GSH molecule is able to perform due to the presence of the sulfhydryl group of the cysteine residue. This quality of GSH determines its role as a fundamental element of one of the most important intracellular antioxidant systems, including GSH itself and two main enzymes of its metabolism: glutathione peroxidase and glutathione reductase [24], [25]. The constant functioning of this system is necessary for the inactivation or restoration of both endogenously formed oxidants and active metabolites of substances entering the body from outside [26], [27].

Антиоксидантные свойства восстановленного глутатиона (GSH) являются именно тем, что делает эту молекулу особенно привлекательной с точки зрения поиска преимуществ ее медицинского использования и создания потенциальных лекарственных препаратов и методов лечения. При этом, GSH и другие фармацевтически приемлемые вещества, способные обеспечить поддержание повышенного содержания GSH в клетках и биологических средах, рассматриваются как многообещающие соединения для создания фармацевтических веществ при проведении антиоксидантной терапии, то есть, для поддержания низкого содержания прооксидантных факторов и перекисных продуктов. The antioxidant properties of reduced glutathione (GSH) are exactly what makes this molecule particularly attractive in terms of seeking the benefits of its medical use and the creation of potential drugs and treatments. At the same time, GSH and other pharmaceutically acceptable substances capable of maintaining an increased content of GSH in cells and biological media are considered promising compounds for the creation of pharmaceutical substances during antioxidant therapy, that is, to maintain a low content of prooxidant factors and peroxide products.

Следует также отметить, что именно антиоксидантные свойства GSH используются при создании фармацевтических композиций для достижения терапевтических эффектов, описанных в подавляющем большинстве известных публикаций в том числе и патентов, предметом которых является глутатионовая (тиоловая) система. It should also be noted that it is the antioxidant properties of GSH that are used in the creation of pharmaceutical compositions to achieve the therapeutic effects described in the vast majority of well-known publications, including patents, the subject of which is the glutathione (thiol) system.

Известно также участие GSH в обеспечении реакций детоксикации, протекающих с участием группы ферментов, объединяемых названием глутатион S-трансферазы [28]. Данные ферменты способны конъюгировать молекулу GSH с самыми разнообразными ксенобиотиками, формируя связь между ними и глутатионом через тиоловую группу цистеинового остатка трипептида. Последующая деградация конъюгата осуществляется ферментами γ- глутамильного цикла и может иметь значительные вариации, зависящие от природы ксенобиотика. GSH is also known to be involved in providing detoxification reactions that take place with the participation of a group of enzymes, united by the name glutathione S-transferase [28]. These enzymes are able to conjugate the GSH molecule with a wide variety of xenobiotics, forming a bond between them and glutathione through the thiol group of the cysteine residue of the tripeptide. Subsequent degradation of the conjugate is carried out by the enzymes of the γ-glutamyl cycle and can have significant variations, depending on the nature of the xenobiotic.

Известно изобретение [29], согласно которому окисленный глутатион (GSSG) применяют в качестве одного из компонентов композиции для лечения расстройств иммунитета у млекопитающих. Указанная композиция состоит из окисленного и неокисленного глутатиона и других фармацевтически активных компонентов, которые способны увеличивать уровень восстановленного глутатиона (GSH) в организме. Более того, присутствие окисленного глутатиона в указанной композиции не является существенным для достижения указанного эффекта, поскольку, как показано в [29], окисленный глутатион может быть заменен восстановленным глутатионом или любым иным активным соединением, способным увеличить уровень восстановленного глутатиона (GSH) в организме. Эту композицию используют в качестве пищевой добавки и дополнительного питания для медицинского использования у больных [29]. Следует отметить, что в известном изобретении [29] GSSG вводится через желудочно-кишечный тракт. Однако, будучи пептидной субстанцией, большая часть перорально вводимого GSSG расщепляется в желудочно-кишечном тракте, а оставшаяся часть восстанавливается в клетках кишечника и печени до GSH, который может частично поступать в кровоток только в виде восстановленного глутатиона. Таким образом, основной целью перорального применения GSSG согласно указанному изобретению является увеличение уровня восстановленного глутатиона (GSH) в крови и тканях. The invention is known [29], according to which oxidized glutathione (GSSG) is used as one of the components of the composition for the treatment of immune disorders in mammals. The specified composition consists of oxidized and non-oxidized glutathione and other pharmaceutically active components that are able to increase the level of reduced glutathione (GSH) in the body. Moreover, the presence of oxidized glutathione in this composition is not essential for achieving the indicated effect, since, as shown in [29], oxidized glutathione can be replaced by reduced glutathione or any other active compound that can increase the level of reduced glutathione (GSH) in the body. This composition is used as a dietary supplement and additional nutrition for medical use in patients [29]. It should be noted that in the known invention [29] GSSG is administered through the gastrointestinal tract. However, being a peptide substance, most of the orally administered GSSG is cleaved in the gastrointestinal tract, and the rest is restored in the intestinal and liver cells to GSH, which can only partially enter the bloodstream as reduced glutathione. Thus, the main goal of oral administration of GSSG according to the invention is to increase the level of reduced glutathione (GSH) in the blood and tissues.

Известно, что повышение эндогенного уровня GSH в лечебных целях предлагается для стимуляции иммунитета [30], при лечении интоксикаций, отравлений, сахарного диабета, сердечно-сосудистых, инфекционных, а также других заболеваний [31], [32], [33]. It is known that increasing the endogenous level of GSH for therapeutic purposes is proposed to stimulate immunity [30], in the treatment of intoxication, poisoning, diabetes mellitus, cardiovascular, infectious, and other diseases [31], [32], [33].

Известно также использование экзогенного GSH или его прямых (γ-глутамил-цистеин, n-ацетил-цистеин, n-ацетил-цистеинил-глицин) или непрямых (2-оксотиазолидин-4-карбоксилат) биохимических предшественников, или их солей и эфиров в качестве лекарственных средств или пищевых добавок при лечении различных заболеваний [34], [35], [36], [37], [38]. It is also known to use exogenous GSH or its direct (γ-glutamyl-cysteine, n-acetyl-cysteine, n-acetyl-cysteinyl-glycine) or indirect (2-oxo-thiazolidine-4-carboxylate) biochemical precursors, or their salts and esters as drugs or food additives in the treatment of various diseases [34], [35], [36], [37], [38].

Также известно о полезности применения GSH как хемопротекторного агента, что при химиотерапии рака предотвращало нейротоксичность [39], а также о комбинации с противоопухолевыми препаратами для повышения эффективности их действия [40]. The usefulness of using GSH as a chemoprotective agent is also known, which prevented neurotoxicity during cancer chemotherapy [39], as well as a combination with antitumor drugs to increase their effectiveness [40].

Таким образом, известный нам предшествующий уровень техники в данной области свидетельствует, что применение биологически-активных веществ тиолового ряда направлено на обеспечение уровня повышенного содержания восстановленного глутатиона (GSH), чем, по-нашему мнению, достигается цель антиоксидантного и некоторого цитопротекторного эффектов. Thus, the prior art known to us in this field indicates that the use of biologically active substances of the thiol series is aimed at providing a high level of reduced glutathione (GSH), which, in our opinion, achieves the goal of antioxidant and some cytoprotective effects.

Известно изобретение [41], в котором окисленный глутатион (GSSG) в составе сложных композиций (цистин, N-метил-D-глюкозамин, бутил-гидроперекись) вводится парентерально с одновременным применением микроволнового электромагнитного излучения в диапазоне 432-436 МГц в целях повышения количества T-лимфоцитов у иммунодефицитных больных, в частности больных ВИЧ- инфекцией. Эффективное повышение количества T-лимфоцитов (являющееся в сравнении с настоящей заявкой единственным показателем, демонстрирующим заявляемый эффект указанного изобретения) достигается только при одновременном воздействии указанных композиций и электромагнитного излучения. The invention is known [41], in which oxidized glutathione (GSSG) in complex compositions (cystine, N-methyl-D-glucosamine, butyl hydroperoxide) is administered parenterally with the simultaneous use of microwave electromagnetic radiation in the range 432-436 MHz in order to increase the amount T-lymphocytes in immunodeficient patients, in particular patients with HIV infection. An effective increase in the number of T-lymphocytes (which, in comparison with the present application, is the only indicator demonstrating the claimed effect of this invention) is achieved only with the simultaneous exposure to these compositions and electromagnetic radiation.

Как уже упоминалось, использование GSH и GSSG, а также цистеина предлагается в лечебных целях для стимуляции иммунитета [30]. В данной публикации на сугубо экспериментальном материале (in vitro, культура клеток - лимфоциты) рассматривается влияние экзогенных тиолов: цистеина, GSH, GSSG на активность транскриптационного фактора NFkB, который и является объектом исследования. В настоящем изобретении, заявлена ранее неизвестная группа биологических, фармацевтических и терапевтических свойств окисленного глутатиона и его производных, а именно: мультицитокинактивирующее действие GSSG, воспроизведение им эффектов цитокинов и индукция механизмов апоптоза в трансформированных клетках. В отличие от упомянутого исследования (30), в заявляемом изобретении продемонстрированы ранее неизвестные свойства окисленного глутатиона (GSSG) на основе данных in vitro, in vivo и результатов клинических испытаний на людях. Данный уровень обоснований принципиально необходим, так как результаты, полученные в опытах in vitro (30), могут не только существенно отличаться от таковых в опытах in vivo, но даже быть противоположными. Более того, следует также подчеркнуть четкое различие между активными агентами, вызывающими биологические эффекты и функциональные изменения в биологических системах в случае вышеупомянутой публикации [30] и в соответствии с настоящим изобретением. В первом случае [30], то начало, которое вызывает биологические эффекты в биологических тест-системах - это цистеин, с использованием GSSG только в качестве носителя молекулы цистеина. Согласно настоящему изобретению цельная молекула GSSG заявляется в качестве активного вещества, фармакологического и терапевтического агента, а также - как молекулярная база для разработки семейства фармацевтически приемлемых производных (новые химические формулы или композиции и комбинации), обладающие благоприятным биолого-медицинским действием. As already mentioned, the use of GSH and GSSG, as well as cysteine, is proposed for therapeutic purposes to stimulate immunity [30]. In this publication, on a purely experimental material (in vitro, cell culture - lymphocytes), the effect of exogenous thiols: cysteine, GSH, GSSG on the activity of the transcription factor NFkB, which is the subject of the study, is examined. In the present invention, a previously unknown group of biological, pharmaceutical and therapeutic properties of oxidized glutathione and its derivatives is claimed, namely: the multicytokine-activating effect of GSSG, its reproduction of the effects of cytokines and the induction of apoptosis mechanisms in transformed cells. In contrast to the mentioned study (30), the claimed invention demonstrated previously unknown properties of oxidized glutathione (GSSG) based on in vitro, in vivo data and the results of clinical trials in humans. This level of justification is fundamentally necessary, since the results obtained in in vitro experiments (30) can not only differ significantly from those in in vivo experiments, but even can be opposite. Moreover, it should also emphasize the clear difference between the active agents that cause biological effects and functional changes in biological systems in the case of the aforementioned publication [30] and in accordance with the present invention. In the first case [30], the beginning that causes biological effects in biological test systems is cysteine, using GSSG only as a carrier of the cysteine molecule. According to the present invention, the whole GSSG molecule is claimed as an active substance, a pharmacological and therapeutic agent, and also as a molecular base for the development of a family of pharmaceutically acceptable derivatives (new chemical formulas or compositions and combinations) with favorable biological and medical effects.

В настоящее время, по данным общедоступных источников информации, неизвестно о применении GSSG, как самостоятельного фармацевтического средства в виде моновещества, а также фармацевтически приемлемых производных окисленного глутатиона GSSG, в качестве модулятора эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов, а также средств для воспроизведения эффектов цитокинов, и/или индуктора механизмов апоптоза в трансформированных клетках. Currently, according to publicly available sources of information, it is not known about the use of GSSG as an independent pharmaceutical in the form of mono-substance, as well as pharmaceutically acceptable derivatives of oxidized glutathione GSSG, as a modulator of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, as well as means for reproducing the effects of cytokines, and / or an inducer of apoptosis mechanisms in transformed cells.

Краткое описание изобретения
Согласно изобретению, заявляется применение окисленного глутатиона (GSSG), а также вещества лекарственные средства - с пролонгированным пребыванием GSSG в окисленной форме в биологических средах посредством получения его в форме лекарственных средств для достижения лечебных эффектов, на основе неизвестных ранее и выявленных нами биолого-фармацевтических свойств окисленного глутатиона: модулировать эндогенную продукцию цитокинов и гемопоэтических факторов; воспроизводить эффекты широкой группы цитокинов; осуществлять дифференцированное воздействие в отношении нормальных (регуляция метаболизма, пролиферация и дифференцировка) и трансформированных клеток (индукция апоптоза).SUMMARY OF THE INVENTION
According to the invention, the use of oxidized glutathione (GSSG) is claimed, as well as the drug substance - with prolonged exposure of GSSG in oxidized form in biological media by obtaining it in the form of drugs to achieve therapeutic effects, based on previously unknown biological and pharmaceutical properties oxidized glutathione: modulate endogenous production of cytokines and hematopoietic factors; reproduce the effects of a wide group of cytokines; to carry out a differential effect in relation to normal (regulation of metabolism, proliferation and differentiation) and transformed cells (induction of apoptosis).

При этом, в зависимости от исходного биологического состояния пациента, в том числе от состояния его системы иммунитета: иммунодефицит, то есть гипореактивность; или иммуноаутоагрессия, то есть гиперреактивность; наличие опухоле- или вирусотрансформированных клеток, окисленный глутатион (GSSG), и/или его фармацевтически приемлемые производные, способны выступать, соответственно как модулятор эндогенной продукции цитокинов и/или как средство, воспроизводящее эффекты цитокинов; и/или как индуктор механизмов апоптоза. Moreover, depending on the initial biological state of the patient, including the state of his immune system: immunodeficiency, that is, hyporeactivity; or immuno-auto-aggression, i.e. hyperreactivity; the presence of tumor- or virus-transformed cells, oxidized glutathione (GSSG), and / or its pharmaceutically acceptable derivatives, can act, respectively, as a modulator of endogenous production of cytokines and / or as a means of reproducing the effects of cytokines; and / or as an inducer of apoptosis mechanisms.

Согласно настоящему изобретению заявляется группа фармацевтически приемлемых решений, которые будут эффективны для предотвращения восстановления GSSG до GSH и пролонгирования его существования в окисленной форме в биологических средах. Эти притязания настоящего изобретения подтверждаются биомедицинскими результатами, полученными в ходе широко масштабной и последовательной программы доклинических и клинических исследований. The present invention claims a group of pharmaceutically acceptable solutions that will be effective in preventing the reduction of GSSG to GSH and prolonging its existence in oxidized form in biological media. These claims of the present invention are supported by biomedical results obtained from a wide-ranging and consistent program of preclinical and clinical research.

В этой связи, с точки зрения достижения более стабильного и значимого лечебного эффекта, не сопровождающегося побочными явлениями, более предпочтительной является модуляция эндогенной продукции аутологичных цитокинов и гемопоэтических факторов непосредственно в организме пациента. Лечебный эффект, достигаемый при этом, естественен для организма и лишен всех недостатков, связанных с экзогенным введением цитокинов и гемопоэтических факторов. In this regard, from the point of view of achieving a more stable and significant therapeutic effect that is not accompanied by side effects, it is more preferable to modulate the endogenous production of autologous cytokines and hematopoietic factors directly in the patient's body. The therapeutic effect achieved in this case is natural for the body and is devoid of all the disadvantages associated with exogenous administration of cytokines and hematopoietic factors.

В настоящем изобретении заявляется биолого-медицинская целесообразность безусловно отличающегося фармакологического - прооксидантного - воздействия, которое достигается посредством введения в организм стабилизированной формы окисленного глутатиона (GSSG) в качестве вещества, обладающего прооксидантным потенциалом и соответствующими благоприятными фармакологическими свойствами. The present invention claims the biological and medical feasibility of an unconditionally different pharmacological - prooxidant - effect, which is achieved by introducing into the body a stable form of oxidized glutathione (GSSG) as a substance with a prooxidant potential and corresponding favorable pharmacological properties.

В основу заявляемого изобретения положена концептуальная модель создания фармацевтических композиций - лекарственных средств, содержащих в качестве действующего вещества производные окисленного глутатиона (GSSG) в виде: его солей: или композитных препаратов, включая комбинации GSSG с веществами, пролонгирующими или усиливающими действие окисленного глутатиона или производных GSSG в качестве новых композиций, то есть, новых формул (новых соединений), когда последние получают посредством создания ковалентной связи между GSSG и каким-то иным веществом. The claimed invention is based on a conceptual model for the creation of pharmaceutical compositions - drugs containing, as active substance, derivatives of oxidized glutathione (GSSG) in the form of: its salts: or composite preparations, including combinations of GSSG with substances that prolong or enhance the effect of oxidized glutathione or derivatives of GSSG as new compositions, that is, new formulas (new compounds), when the latter are obtained by creating a covalent bond between GSSG and some other EU ETS.

Данные соединения и их лекарственные формы, полученные на основе фармацевтически приемлемых производных окисленного глутатиона (GSSG), заявляются как лекарственные средства, способные в терапевтических целях в зависимости от исходного биологического состояния субъекта, нуждающегося в этом, осуществлять регуляцию (модуляцию) эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов, а также воспроизведение эффектов цитокинов, и/или дифференцированное воздействие в отношении нормальных (регуляция метаболизма, пролиферации и дифференцировки) и опухоле- и/или вирусо-трансформированных клеток (индукция апоптоза). These compounds and their dosage forms, obtained on the basis of pharmaceutically acceptable derivatives of oxidized glutathione (GSSG), are claimed as drugs capable of therapeutic, depending on the initial biological state of a subject in need, to regulate (modulate) the endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, as well as the reproduction of the effects of cytokines, and / or differentiated effects in relation to normal (regulation of metabolism, proliferation and differentiation Rovkov) and opuhole- and / or virus-transformed cells (induction of apoptosis).

"Субъект, нуждающийся в этом" означает млекопитающее, например человека, домашних животных и скот, включая кошек, собак, крупный и мелкий рогатый скот, лошадей, имеющих одно или более проявление заболеваний, при которых стимуляция/модуляция эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов, а также регуляция механизмов апоптоза целесообразна с позиций современных биомедицинских знаний. “Subject in need thereof” means a mammal, for example, humans, domestic animals and livestock, including cats, dogs, cattle and small cattle, horses having one or more manifestations of diseases in which the stimulation / modulation of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, and also the regulation of apoptosis mechanisms is advisable from the standpoint of modern biomedical knowledge.

Понятие "лекарственное средство", используемое в данной заявке, подразумевает использование любой лекарственной формы, содержащей различные фармацевтические производные GSSG, которые обладают терапевтическим эффектом при лечении онкологических, инфекционных, гематологических, иммунологических, нейродистрофических и других заболеваний. The term "drug" as used in this application means the use of any dosage form containing various pharmaceutical derivatives of GSSG, which have a therapeutic effect in the treatment of cancer, infectious, hematological, immunological, neurodystrophic and other diseases.

Понятие "фармацевтически приемлемое производное в форме соли", используемое в данной заявке, подразумевает производное окисленного глутатиона (GSSG) в виде соли, при этом в данные формулы входят, например, катионы натрия или лития, соответственно - динатриевая или дилитиевая соль. The term "pharmaceutically acceptable derivative in the form of a salt" as used in this application means a derivative of oxidized glutathione (GSSG) in the form of a salt, wherein these formulas include, for example, sodium or lithium cations, respectively, disodium or dilithium salt.

Понятие "фармацевтически приемлемая комбинация", используемое в данной заявке, подразумевает комбинацию (как сочетание в растворе) окисленного глутатиона (GSSG) с иными веществами, которые по отношению к окисленному глутатиону выполняют функции либо стабилизатора-пролонгатора, либо усилителя/модулятора эффектов окисленного глутатиона (GSSG). Например, фармацевтически приемлемая комбинация окисленного глутатиона с инозином, или фармацевтически приемлемая комбинация окисленного глутатиона с холином. The term "pharmaceutically acceptable combination" used in this application means a combination (as a combination in solution) of oxidized glutathione (GSSG) with other substances which, with respect to oxidized glutathione, act as either a stabilizer-prolonger or an enhancer / modulator of the effects of oxidized glutathione ( GSSG). For example, a pharmaceutically acceptable combination of oxidized glutathione with inosine, or a pharmaceutically acceptable combination of oxidized glutathione with choline.

Понятие "фармацевтически приемлемая композиция" (дериват), используемое в данной заявке, подразумевает окисленный глутатион (GSSG), ковалентно связанный с фармацевтически приемлемым веществом из группы активных метаболитов или другим химическим соединением. Например, фармацевтически приемлемая композиция (дериват) - окисленный глутатион, ковалентно связанный с метионином, или окисленный глутатион, ковалентно связанный с цистеамином. The term "pharmaceutically acceptable composition" (derivative), as used in this application, means oxidized glutathione (GSSG), covalently linked to a pharmaceutically acceptable substance from the group of active metabolites or other chemical compound. For example, a pharmaceutically acceptable composition (derivative) is oxidized glutathione covalently linked to methionine, or oxidized glutathione covalently linked to cysteamine.

Под "онкологическими и инфекционными заболеваниями", "депрессией кроветворения и иммунитета различного происхождения" и "другими заболеваниями" понимаются любые онкологические или инфекционные заболевания, любые состояния, вызванные или сопровождающиеся угнетением красного или белого ростка кроветворения или депрессией количественных или функциональных показателей системы иммунитета, а также любые другие заболевания или патологические состояния, при которых модуляция эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов, а также воспроизведение эффектов цитокинов, и/или дифференцированное воздействие в отношении нормальных (регуляция метаболизма, пролиферация и дифференцировка) и трансформированных клеток (индукция апоптоза) была бы целесообразна по соображениям, очевидным для специалиста в соответствующей области медицины. “Oncological and infectious diseases”, “hematopoietic depression and immunity of various origins” and “other diseases” are understood to mean any oncological or infectious diseases, any conditions caused or accompanied by inhibition of the red or white germ of hematopoiesis or depression of quantitative or functional indicators of the immune system, and also any other diseases or pathological conditions in which modulation of the endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, and t kzhe playback effects of cytokines and / or differential impact to normal (metabolism regulation, proliferation and differentiation), and transformed cells (induction of apoptosis) might be appropriate for reasons obvious to those skilled in the field of medicine.

В поисках приемлемого с точки зрения медицины и фармакологии индуктора эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов, авторы заявляемого изобретения в ходе выполненных доклинических и клинико-экспериментальных исследований, обнаружили новые свойства известного ранее вещества - окисленного глутатиона (глутатион окисленный, глутатион дисульфид, далее - GSSG). In search of an inducer of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, acceptable from the point of view of medicine and pharmacology, the authors of the claimed invention, in the course of preclinical and clinical experimental studies, discovered new properties of the previously known substance - oxidized glutathione (oxidized glutathione, glutathione disulfide, hereinafter - GSSG) .

При парентеральном введении или действии на изолированные клетки GSSG способен модулировать эндогенную продукцию ряда цитокинов (TNF-α, IFN-γ и IFN-α, IL-1, IL-2, IL-6 и IL-10, эритропоэтина и GM-CSF) у млекопитающих (человека и животных) как в нормальных, так и в патологических условиях, а также индуцировать механизмы апоптоза в трансформированных клетках (тканях) в опытах in vitro и in vivo. Установленные авторами свойства GSSG определяют биолого-фармацевтические эффекты самого окисленного глутатиона (GSSG), а также получаемых на его основе фармацевтически приемлемых производных, в частности его солей, а значит, и лечебные эффекты лекарственных средств, в которых активным началом является GSSG и его соли. When administered parenterally or acting on isolated cells, GSSG is able to modulate the endogenous production of a number of cytokines (TNF-α, IFN-γ and IFN-α, IL-1, IL-2, IL-6 and IL-10, erythropoietin and GM-CSF) in mammals (humans and animals) both under normal and pathological conditions, and also to induce apoptosis mechanisms in transformed cells (tissues) in vitro and in vivo experiments. The properties of GSSG established by the authors determine the biological and pharmaceutical effects of oxidized glutathione (GSSG) itself, as well as pharmaceutically acceptable derivatives obtained on its basis, in particular its salts, and therefore the therapeutic effects of drugs in which GSSG and its salts are the active principle.

Сущность заявляемого изобретения состоит в том, что в качестве действующего вещества (активной субстанции), обеспечивающей модуляцию эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов, а также воспроизведение эффектов цитокинов, и/или индукцию апоптоза, у субъектов, нуждающихся в этом, предлагается использовать окисленный глутатион (GSSG) или его фармацевтически приемлемые производные, которые при парентеральном введении регулируют (модулируют) эндогенную продукцию ряда цитокинов и/или гемопоэтических факторов, чем достигается регуляция процессов метаболизма, пролиферации и дифференцировки нормальных клеток. При этом в опухоле- и/или вирусо-трансформированных клетках индуцируется механизм апоптоза. The essence of the claimed invention lies in the fact that, as an active substance (active substance), providing modulation of the endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, as well as reproducing the effects of cytokines, and / or induction of apoptosis, it is proposed to use oxidized glutathione in subjects in need of this ( GSSG) or its pharmaceutically acceptable derivatives, which upon parenteral administration regulate (modulate) the endogenous production of a number of cytokines and / or hematopoietic factors, which is achieved regulation of metabolic processes, proliferation and differentiation of normal cells. In this case, the apoptosis mechanism is induced in the tumor and / or virus-transformed cells.

Согласно заявляемому изобретению, авторы впервые показали и обосновали, что окисленный глутатион (GSSG) является мультицитокин-активирующим фактором, а также фактором воспроизведения эффектов цитокинов по отношению к нормальным иммунокомпетентным клеткам и индуктором механизмов апоптоза в трансформированных клетках. According to the claimed invention, the authors first showed and substantiated that oxidized glutathione (GSSG) is a multicytokine-activating factor, as well as a factor in reproducing the effects of cytokines in relation to normal immunocompetent cells and an inducer of apoptosis mechanisms in transformed cells.

Более того, авторы впервые обнаружили, что воздействие окисленного глутатиона (GSSG) на изолированные лимфоциты человека вызывает через 10 минут (пик наблюдается на 30 минуте) значимое возрастание уровня фосфорилирования по тирозину цитозольных белков лимфоцитов, что является интегративной характеристикой активности клеточных сигнал-передающих систем. Эти изменения вследствие действия GSSG (это также будет продемонстрировано в большей степени в примерах реализации изобретения благодаря действию композитных препаратов GSSG) вызывает экспрессию редокс-чувствительных генов, в первую очередь, иммунологически значимых генов, ответственных за синтез цитокинов и гемопоэтических факторов. Следовательно, применение GSSG или его производных в виде лекарственных средств в лечебных целях не только стимулирует эндогенную продукцию цитокинов и гемопоэтических факторов, но и обеспечивает воспроизведение биохимических и физиологических эффектов цитокинов, в частности, в случае потери чувствительности рецепторов, что наблюдается при онкологической и ретровирусной патологии. Moreover, the authors first discovered that the effect of oxidized glutathione (GSSG) on isolated human lymphocytes causes a significant increase in tyrosine phosphorylation of cytosolic lymphocyte proteins after 10 minutes (peak occurs at 30 minutes), which is an integrative characteristic of the activity of cellular signal-transmitting systems. These changes due to the action of GSSG (this will also be demonstrated to a greater extent in the examples of the invention due to the action of composite preparations GSSG) causes the expression of redox-sensitive genes, primarily immunologically significant genes responsible for the synthesis of cytokines and hematopoietic factors. Therefore, the use of GSSG or its derivatives in the form of medicinal products for therapeutic purposes not only stimulates the endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, but also ensures the reproduction of the biochemical and physiological effects of cytokines, in particular, in the case of loss of receptor sensitivity, which is observed with oncological and retroviral pathology .

Авторы также впервые показали, что фармацевтически приемлемые производные GSSG в форме его солей; или комбинации GSSG с пролонгаторами; или комбинации GSSG с усилителями/модуляторами в качестве лекарственных средств значительно эффективнее и целенаправленнее индуцируют продукцию цитокинов и гемопоэтических факторов как в нормальных, так и в патологических условиях, а также более эффективно индуцируют механизмы апоптоза в опухоле- или вирус-трансформированных клетках. The authors also first showed that pharmaceutically acceptable derivatives of GSSG in the form of its salts; or combinations of GSSG with prolongators; or combinations of GSSG with enhancers / modulators as drugs significantly more efficiently and purposefully induce the production of cytokines and hematopoietic factors both under normal and pathological conditions, and also more efficiently induce apoptosis mechanisms in tumor- or virus-transformed cells.

Таким образом, заявляется полученный на основе окисленного глутатиона (GSSG) новый класс лекарственных средств, лечебные эффекты которых обусловлены впервые установленными и неизвестными ранее свойствами окисленного глутатиона (GSSG) и его производных осуществлять регуляцию продукции цитокинов и гемопоэтических факторов и воспроизведение эффектов цитокинов и, следовательно, регулировать пролиферацию и дифференцировку нормальных клеток, а также селективно индуцировать механизмы апоптоза в трансформированных клетках. Thus, a new class of drugs based on oxidized glutathione (GSSG) is claimed, the therapeutic effects of which are due to the first established and previously unknown properties of oxidized glutathione (GSSG) and its derivatives to regulate the production of cytokines and hematopoietic factors and reproduce the effects of cytokines and, therefore, regulate the proliferation and differentiation of normal cells, as well as selectively induce apoptotic mechanisms in transformed cells.

В изобретении представлен метод стимуляции эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов, а также индукции механизмов апоптоза в случае, когда стимуляция цитокинов и гемопоэтических факторов и/или индукция механизмов апоптоза, или и то, и другое, является целесообразным, что может быть достигнуто путем введения в организм млекопитающих, нуждающихся в этом, эффективного количества GSSG, его солей и других фармацевтически приемлемых производных окисленного глутатиона на достаточный период времени для достижения терапевтического эффекта. The invention provides a method for stimulating the endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, as well as inducing apoptosis mechanisms when stimulation of cytokines and hematopoietic factors and / or inducing apoptosis mechanisms, or both, is appropriate, which can be achieved by introducing the body of mammals in need of this, an effective amount of GSSG, its salts and other pharmaceutically acceptable derivatives of oxidized glutathione for a sufficient period of time to achieve therapeutic th effect.

Предпочтительно применение окисленного глутатиона и его производных парентерально или местно. Метод заключается во введении окисленного глутатиона (GSSG) или его солей совместно с веществом, которое способно продлевать период пребывания GSSG в окисленной форме в биологических средах; или с веществом, способным повышать эффект GSSG для усиления регуляторного воздействия на эндогенную продукцию цитокинов и гемопоэтических факторов; или индуцировать механизмы апоптоза в трансформированных тканях, что обеспечивает регуляцию метаболизма, пролиферации и дифференцировки в тканях и достижение соответствующего терапевтического эффекта. The use of oxidized glutathione and its derivatives parenterally or topically is preferred. The method consists in introducing oxidized glutathione (GSSG) or its salts together with a substance that can prolong the period of stay of GSSG in the oxidized form in biological media; or with a substance capable of enhancing the effect of GSSG to enhance the regulatory effect on endogenous production of cytokines and hematopoietic factors; or induce apoptosis mechanisms in transformed tissues, which ensures the regulation of metabolism, proliferation and differentiation in tissues and the achievement of an appropriate therapeutic effect.

В процессе экспериментальных исследований установлено, что наибольшая терапевтическая эффективность достигается, когда производные GSSG выбраны из группы соединений, представляющих собой химически измененные молекулы GSSG посредством получения его солей, а также посредством ковалентного связывания GSSG с иными химическими соединениями, в том числе активными метаболитами. В свою очередь, биолого-фармацевтические, а, следовательно, и терапевтические эффекты солей окисленного глутатиона существенным образом возрастают в случае получения комбинации солей окисленного глутатиона, в частности, Na-GSSG, с веществами, стабилизирующими молекулу окисленного глутатиона и замедляющими его восстановление в GSH в биологических средах, т.е., с пролонгаторами; или с веществами, усиливающими биолого-фармацевтические эффекты, а, следовательно, и терапевтические эффекты солей окисленного глутатиона, т.е., усилителями/модуляторами. In the course of experimental studies, it was found that the greatest therapeutic efficacy is achieved when GSSG derivatives are selected from the group of compounds representing chemically altered GSSG molecules by preparing its salts, as well as by covalent binding of GSSG to other chemical compounds, including active metabolites. In turn, the biological, pharmaceutical, and, therefore, therapeutic effects of oxidized glutathione salts significantly increase when a combination of oxidized glutathione salts, in particular, Na-GSSG, is obtained with substances that stabilize the molecule of oxidized glutathione and slow its recovery in GSH in biological media, i.e., with prolongators; or with substances that enhance the biological and pharmaceutical effects, and, consequently, the therapeutic effects of salts of oxidized glutathione, i.e., enhancers / modulators.

Особое предпочтение отдается производным GSSG в форме его натриевой, литиевой, калиевой, кальциевой, цинковой, молибденовой, ванадиевой и других, например, содержащей фтор или платину солей, а также производным окисленного глутатиона, полученным посредством ковалентного связывания GSSG с цистеамином (S-тиоэтиламин-глутатион дисульфид), или с липоевой кислотой (бис-[6,8-дитиооктанил] •глутатион дисульфид), или с карнозином ([b-аланил-гистидил]•глутатион дисульфид), или с аденозином ([9- β- D-рибофуранозиладенил] •глутатион дисульфид), или с метионином (бис- α- амино- γ- метилтиобутаноил] •глутатион дисульфид), и некоторыми другими аминокислотами, включая D- и L-формы аминокислот, упомянутых в этом документе. Particular preference is given to derivatives of GSSG in the form of its sodium, lithium, potassium, calcium, zinc, molybdenum, vanadium and others, for example, containing fluorine or platinum salts, as well as a derivative of oxidized glutathione obtained by covalent binding of GSSG to cysteamine (S-thioethylamine glutathione disulfide), or with lipoic acid (bis- [6,8-dithiooctanyl] • glutathione disulfide), or with carnosine ([b-alanyl-histidyl] • glutathione disulfide), or with adenosine ([9-β-D- ribofuranosyladenyl] • glutathione disulfide), or with methionine ohm (bis-α-amino-γ-methylthiobutanoyl] • glutathione disulfide), and several other amino acids, including the D- and L-forms of the amino acids mentioned in this document.

Проведенными исследованиями убедительно доказано, что эффективные "пролонгаторы" относятся к группе веществ, представленных фармацевтически приемлемыми прооксидантыми соединениями, то есть окислителями, например, аскорбиновая кислота; или к группе веществ, способных формировать слабые ионные и координационные (водородные) связи, которые способствуют стабилизации молекулы GSSG (диметилсульфоксид, соли платины); или веществ, которые обладают конкурентными свойствами в отношении NADP-Н-зависимого восстановления GSSG в GSH, катализируемого глутатионредуктазой; или веществ, способных осуществлять обратимое ингибирование восстановления NADP+ в NADP-H, катализируемого глюкозо-6-фосфат- дегидрогеназой или другими NADP-Н-зависимыми ферментами. Studies have convincingly proved that effective “prolongators” belong to the group of substances represented by pharmaceutically acceptable prooxidant compounds, that is, oxidizing agents, for example, ascorbic acid; or to a group of substances capable of forming weak ionic and coordination (hydrogen) bonds, which contribute to the stabilization of the GSSG molecule (dimethyl sulfoxide, platinum salts); or substances that are competitive with respect to the NADP-H-dependent reduction of GSSG in GSH catalyzed by glutathione reductase; or substances capable of reversibly inhibiting the reduction of NADP + in NADP-H catalyzed by glucose-6-phosphate dehydrogenase or other NADP-H-dependent enzymes.

Из "пролонгаторов" особенно предпочтительными являются инозин, аскорбиновая кислота, диметилсульфоксид, цистамин, соединения платины. Of the “prolongators”, inosine, ascorbic acid, dimethyl sulfoxide, cystamine, platinum compounds are particularly preferred.

Следует подчеркнуть, что максимальная стабилизация молекулы экзогенного GSSG именно в окисленной форме, в том числе при введении в биологические среды, достигается в том случае, когда используется комбинация (смесь) молекул окисленного глутатиона, состоящая на 50% из GSSG, в котором все аминокислоты представлены в L-форме, и на 50% из GSSG, в котором две химически однозначные аминокислоты представлены в D-форме, а остальные - в L-форме. It should be emphasized that the maximum stabilization of the exogenous GSSG molecule in the oxidized form, including when introduced into biological media, is achieved when a combination (mixture) of oxidized glutathione molecules is used, consisting of 50% GSSG in which all amino acids are present in L-form, and 50% of GSSG, in which two chemically unique amino acids are represented in D-form, and the rest in L-form.

Предпочтительно, чтобы "усилитель/модулятор" был выбран из группы веществ, являющихся донорами метильных групп (например, холин-хлорид {[2- гидроксиэтил] триметиламмониум хлорид}, или S-аденозил-метионин); и/или веществ, которые способны образовывать окислительно-восстановительные пары (липоевая/дегидролипоевая, фолиевая/дегидрофолиевая, аскорбиновая/дегидроаскорбиновая кислоты). "Усилитель" или "модулятор", или "усилитель/модулятор" в данном случае должен быть представлен веществом, которое увеличивает или целесообразно изменяет с точки зрения лечебных результатов терапевтический эффект GSSG или его производных, но посредством механизмов, отличающихся от механизмов действия пролонгаторов, которые увеличивают время пребывания GSSG в окисленной форме, то есть замедляют его восстановление в биологических средах в GSH. Preferably, the “enhancer / modulator” is selected from the group of substances that are methyl group donors (for example, choline chloride {[[2-hydroxyethyl] trimethylammonium chloride}, or S-adenosylmethionine); and / or substances that are capable of forming redox pairs (lipoic / dehydrolipoic, folic / dehydrofolic, ascorbic / dehydroascorbic acids). An “enhancer” or “modulator” or “amplifier / modulator” in this case should be represented by a substance that enhances or expediently changes the therapeutic effect of GSSG or its derivatives from the point of view of therapeutic results, but through mechanisms different from the mechanisms of action of prolongators, which increase the residence time of GSSG in oxidized form, that is, slow its recovery in biological media in GSH.

В частности, наиболее предпочтительными "усилителями" или "модуляторами" являются холин-хлорид, S-аденозил-метионин, липоевая (6,8-тиооктановая) и фолиевая (птероилглутаминовая) кислоты. In particular, the most preferred “enhancers” or “modulators” are choline chloride, S-adenosyl-methionine, lipoic (6,8-thiooctanoic) and folic (pteroylglutamic) acids.

Согласно предлагаемому изобретению, лекарственное средство для лечения онкологических, инфекционных, гематологических, иммунологических, ишемических, нейродегенеративных, метаболических, эндокринных и других заболеваний содержит в качестве фармацевтически активного компонента эффективное количество фармацевтически приемлемых производных окисленного глутатиона (GSSG) в форме его солей; или комбинаций с пролонгатором или усилителем/модулятором; или композиций, представляющих собой окисленный глутатион, ковалентно связанный с фармацевтически приемлемым веществом из группы активных метаболитов. Предпочтительно, чтобы фармацевтически приемлемые производные окисленного глутатиона для парентерального использования применяли в виде фармацевтически приемлемого раствора, например, водного раствора, включая воду, раствора глюкозы, изотонические растворы хлорида натрия, забуференные солевые растворы. According to the invention, the drug for the treatment of oncological, infectious, hematological, immunological, ischemic, neurodegenerative, metabolic, endocrine and other diseases contains, as a pharmaceutically active component, an effective amount of pharmaceutically acceptable derivatives of oxidized glutathione (GSSG) in the form of its salts; or combinations with a prolongator or amplifier / modulator; or compositions comprising oxidized glutathione covalently linked to a pharmaceutically acceptable substance from the group of active metabolites. Preferably, the pharmaceutically acceptable derivatives of oxidized glutathione for parenteral use are used in the form of a pharmaceutically acceptable solution, for example, an aqueous solution including water, glucose solution, isotonic sodium chloride solutions, buffered saline solutions.

Обнаруженная в процессе исследований индуцированная посредством GSSG модуляция эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов, а также индукция механизмов апоптоза в трансформированных клетках и связанная с этими эффектами регуляция метаболизма, пролиферации и дифференцировки клеток в организме, приводит к противоопухолевому, противоинфекционному, гемопоэтическому, иммуномодулирующему и другим фармакологическим эффектам, которые, в свою очередь, обеспечивают достижение в той или иной степени лечебного или профилактического эффекта при различных заболеваниях. The GSSG-induced modulation of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, as well as the induction of apoptosis mechanisms in transformed cells and the regulation of cell metabolism, proliferation and differentiation associated with these effects, leads to antitumor, anti-infectious, hematopoietic, and immunomodulatory pharmacomodulators. effects, which, in turn, ensure the achievement of varying degrees of therapeutic or prophylactic th effect in various diseases.

Является предпочтительным, чтобы фармацевтически приемлемые производные GSSG вводили в организм в дозе от 0.01 до 0.5 мг GSSG на кг массы тела в пересчете на основание или соль GSSG; или в дозе от 1 до 30 мг на 1 м² поверхности тела, а в случаях накожного применения/введения посредством инстилляций в дозе от 1 мг до 30 мг на 1 м² поверхности тела по крайней мере однократно в каждый период времени, состоящий из 24 часов. Также данное вещество может быть введено путем последовательных инъекций или другим способом получено организмом с целью достижения общей дозировки от 0.01 до 0.5 мг на кг массы тела - в случае введения солей GSSG, и от 1.0 до 3.0 мг на 1 кг поверхности тела в течение каждых 24 часов. Желательно, чтобы применение и введение данного вещества в организм проводили до тех пор, пока не будет получен желаемый эффект регуляции продукции цитокинов и гемопоэтических факторов и/или индукции апоптоза, и, тем самым, регуляции метаболизма, пролиферации и дифференцировки клеток, что определяет достижение соответствующего терапевтического эффекта.It is preferred that the pharmaceutically acceptable derivatives of GSSG are administered to the body at a dose of from 0.01 to 0.5 mg of GSSG per kg body weight, based on the base or GSSG salt; or in a dose of 1 to 30 mg per 1 m ² of body surface, and in cases of cutaneous application / administration by instillation in a dose of 1 mg to 30 mg per 1 m ² of body surface, at least once in each time period consisting of 24 hours. Also, this substance can be introduced by successive injections or otherwise obtained by the body in order to achieve a total dosage of from 0.01 to 0.5 mg per kg of body weight - in the case of the introduction of GSSG salts, and from 1.0 to 3.0 mg per 1 kg of body surface for every 24 hours. It is desirable that the use and introduction of this substance into the body is carried out until the desired effect of regulating the production of cytokines and hematopoietic factors and / or inducing apoptosis is obtained, and thereby regulating the metabolism, proliferation and differentiation of cells, which determines the achievement of the appropriate therapeutic effect.

Краткое описание чертежей. A brief description of the drawings.

Вышеупомянутые преимущества настоящего изобретения более наглядно дополняет графически представленный материал. The above advantages of the present invention more clearly complements the graphically presented material.

На фиг. 1а, 1б, 1в и 1г представлены данные цитофлуорометрического анализа клеток HL-60, цитофлуорометрического анализа клеток HL-60 в присутствии представленного в данном изобретении фармакологического средства цитофлуорометрического анализа лимфоцитов человека и цитофлуорометрического анализа лимфоцитов в присутствии представленного в данном изобретении фармакологического средства соответственно. Описание дано в обсуждении примера 4, который имеет отношение к исследованию апоптоз-индуцирующей активности препарата на культуре клеток млекопитающих. In FIG. 1a, 1b, 1c, and 1d, data are presented for cytofluorometric analysis of HL-60 cells, cytofluorometric analysis of HL-60 cells in the presence of a pharmacological agent for cytofluorometric analysis of human lymphocytes and cytofluorometric analysis of lymphocytes in the presence of a pharmacological agent for the invention, respectively. The description is given in the discussion of example 4, which is related to the study of apoptosis-inducing activity of the drug in a culture of mammalian cells.

На фиг. 2 представлено схематическое изображение молекулы GSSG с указанием участков для химической модификации молекулы данного соединения для получения фармацевтически приемлемых производных GSSG. In FIG. 2 is a schematic representation of a GSSG molecule indicating the sites for chemical modification of the molecule of this compound to produce pharmaceutically acceptable derivatives of GSSG.

В структурной формуле на фиг. 2, точки X1, X2, X3, X4, X5 и X6 являются участками, в которых возможно проведение химической модификации молекулы GSSG. Динатриевые и дилитиевые соли, где X1, X4 - это катионы натрия, либо катионы лития, либо катионы цинка, являются наиболее предпочтительными для обеспечения высокой проницаемости в клетки и максимального сродства лекарства к тем или иным тканям. В каждой из точек X1, X2, X3 и X4 может быть водород, если не используются другие заместители. Могут быть использованы другие соли GSSG, в том случае, когда они фармацевтически приемлемы, т.е. не обладают неблагоприятным воздействием на организм, например, во всех (в одной или более) точках X1, X2, X3 и X4 могут быть калий, кальций, цинк, молибден, ванадий, фтор, платина или любые другие фармацевтически приемлемые заместители. В данном изобретении использование водорастворимых солей является наиболее предпочтительным. In the structural formula of FIG. 2, points X1, X2, X3, X4, X5 and X6 are areas where chemical modification of the GSSG molecule is possible. Disodium and dilithium salts, where X1, X4 are sodium cations, or lithium cations, or zinc cations, are most preferable to ensure high cell permeability and maximum affinity of the drug to certain tissues. At each of the points X1, X2, X3 and X4, there may be hydrogen, unless other substituents are used. Other GSSG salts may be used when they are pharmaceutically acceptable, i.e. do not have an adverse effect on the body, for example, at all (at one or more) points X1, X2, X3 and X4 there may be potassium, calcium, zinc, molybdenum, vanadium, fluorine, platinum or any other pharmaceutically acceptable substituents. In the present invention, the use of water soluble salts is most preferred.

На фиг. 3, 4, 5, 6 и 7 приведены формулы новых веществ, полученных как дериваты GSSG, где GSSG ковалентно связан с цистеамином (S-тиоэтиламин-глутатион дисульфид, фиг. 3); или с липоевой кислотой (бис-[6,8-дитиооктанил] •глутатион дисульфид, фиг. 4); или с карнозином ([b-аланил-гистидил] •глутатион дисульфид, фиг. 5); или с аденозином ([9- β- D-рибофуранозиладенил] •глутатион дисульфид, фиг. 6); или с метионином (бис-[2-амино-4-[метилтио]бутаноил]•глутатион дисульфид, фиг. 7). In FIG. 3, 4, 5, 6 and 7 are formulas of new substances obtained as derivatives of GSSG, where GSSG is covalently linked to cysteamine (S-thioethylamine-glutathione disulfide, Fig. 3); or with lipoic acid (bis- [6,8-dithiooctanyl] • glutathione disulfide, Fig. 4); or with carnosine ([b-alanyl-histidyl] • glutathione disulfide, Fig. 5); or with adenosine ([9-β-D-ribofuranosyladenyl] • glutathione disulfide, Fig. 6); or with methionine (bis- [2-amino-4- [methylthio] butanoyl] • glutathione disulfide, Fig. 7).

В структурной формуле на фиг. 3 точка X1 (или, возможно, X1 и X2) указаны как участки ковалентного связывания с молекулой(ами) цистеамина (2-меркаптоэтиламин). В структурной формуле на фиг. 4 точки X5 и X6 отмечены как участки ковалентного связывания с молекулами липоевой кислоты (6,8-дитиооктановая кислота). В структурной формуле на фиг. 5 точка X3 отмечена как участок ковалентного связывания с молекулой карнозина (b-аланил-гистидин). В структурной формуле на фиг. 6 точка X2 указана в качестве участка ковалентного связывания с молекулой аденозина (9- β- D-рибофуранозиладенин). В структурной формуле на фиг. 7 точки X5 и X6 отмечены как места ковалентного связывания с молекулами метионина (2-амино-4- [метилтио]бутановая кислота). In the structural formula of FIG. 3 point X1 (or possibly X1 and X2) are indicated as sites of covalent binding to cysteamine molecule (s) (2-mercaptoethylamine). In the structural formula of FIG. 4 points X5 and X6 are marked as sites of covalent binding to lipoic acid molecules (6,8-dithiooctanoic acid). In the structural formula of FIG. 5, point X3 is marked as a site of covalent binding to a carnosine molecule (b-alanyl-histidine). In the structural formula of FIG. 6, point X2 is indicated as a site of covalent binding to an adenosine molecule (9-β-D-ribofuranosyladenine). In the structural formula of FIG. 7 points X5 and X6 are marked as covalent binding sites with methionine molecules (2-amino-4- [methylthio] butanoic acid).

Описание предпочтительного воплощения идей изобретения. Description of the preferred embodiment of the ideas of the invention.

Согласно настоящему изобретению предлагается базовое лекарственное средство и группа лекарственных средств, получаемых на основе GSSG, для лечения инфекционных, онкологических, гематологических, нейродегенеративных, ишемических и других заболеваний, а также заболеваний вследствие иммунных, метаболических и эндокринных нарушений, при которых регуляция эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов и/или индукция механизмов апоптоза является целесообразной. Указанные лекарственные средства в качестве активного начала содержат эффективное количество GSSG или его фармацевтически приемлемых производных. Целесообразно применять лекарственную форму препарата в виде инъекционного раствора, содержащего от 0.01% до 4.0% основания GSSG или его солей; и от 1.0% до 10% основания GSSG или его солей в случае применения препаратов GSSG в форме растворов для ингаляций, локальных инстилляций, глазных капель, интраназального введения или мазей для накожных аппликаций. The present invention provides a basic drug and a group of drugs based on GSSG for the treatment of infectious, oncological, hematological, neurodegenerative, ischemic and other diseases, as well as diseases due to immune, metabolic and endocrine disorders, in which the regulation of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors and / or the induction of apoptosis mechanisms is appropriate. These drugs as an active principle contain an effective amount of GSSG or its pharmaceutically acceptable derivatives. It is advisable to use the dosage form of the drug in the form of an injection solution containing from 0.01% to 4.0% of the base of GSSG or its salts; and from 1.0% to 10% of the base of GSSG or its salts in the case of the use of GSSG preparations in the form of solutions for inhalation, local instillation, eye drops, intranasal administration or ointments for skin applications.

Согласно настоящему изобретению, целесообразно использовать GSSG и его соли совместно с такими компонентами, которые либо замедляют восстановление GSSG, то есть, продлевают пребывание окисленного глутатиона в тканях и биологических средах ("пролонгаторы)", либо увеличивают, или благоприятно модулируют выявленные биологические и терапевтические свойства GSSG ("усилители/модуляторы"). According to the present invention, it is advisable to use GSSG and its salts together with such components that either slow down the recovery of GSSG, that is, prolong the stay of oxidized glutathione in tissues and biological media (“prolongators”), or increase or favorably modulate the revealed biological and therapeutic properties GSSG (Amplifiers / Modulators).

Согласно настоящему изобретению, для пролонгирования пребывания в окисленной форме, а также для целесообразной модуляции и/или усиления терапевтического эффекта GSSG, рекомендуется, чтобы лекарственная форма GSSG содержала GSSG и/или его соли, как указывалось выше, совместно с фармацевтически приемлемым компонентом ("пролонгатором" или "усилителем/модулятором"), который способен увеличивать время пребывания GSSG в окисленной форме или усиливать/модулировать биологический и терапевтический эффекты композитных составов GSSG. According to the present invention, in order to prolong the stay in the oxidized form, as well as to expediently modulate and / or enhance the therapeutic effect of GSSG, it is recommended that the dosage form of GSSG contain GSSG and / or its salts, as mentioned above, together with a pharmaceutically acceptable component (“prolongator” "or" amplifier / modulator "), which is able to increase the residence time of GSSG in oxidized form or to enhance / modulate the biological and therapeutic effects of GSSG composite formulations.

В изобретении заявляется также (в отличие от фармацевтически приемлемых комбинаций с пролонгаторами и усилителями/модуляторами) целесообразность получения на основе GSSG или его солей фармацевтически приемлемых композиций, то есть, новых формул химических соединений (см. фиг. 3-7), в которых окисленный глутатион (GSSG) ковалентно связан с цистеамином (S-тиоэтиламин-глутатион дисульфид, см. структурную формулу на фиг.3), или с липоевой кислотой (бис-[6.8-дитиооктанил] •глутатион дисульфид, см. фиг. 4), или с карнозином ([b-аланил-гистидил]•глутатион дисульфид, см. фиг. 5), или с аденозином ([9- β- D-рибофуранозиладенил]•глутатион дисульфид, см. фиг. 6), или с метионином (бис[2-амино-4-[метилтио] бутаноил] •глутатион дисульфид, см. фиг. 7). The invention also claims (in contrast to pharmaceutically acceptable combinations with prolongators and enhancers / modulators) the feasibility of obtaining pharmaceutically acceptable compositions based on GSSG or its salts, that is, new formulas of chemical compounds (see FIGS. 3-7) in which glutathione (GSSG) is covalently bound to cysteamine (S-thioethylamine-glutathione disulfide, see structural formula in FIG. 3), or to lipoic acid (bis- [6.8-dithiooctanyl] • glutathione disulfide, see FIG. 4), or with carnosine ([b-alanyl-histidyl] • glutathione di ulphide, see Fig. 5), or with adenosine ([9-β-D-ribofuranosyladenyl] • glutathione disulfide, see Fig. 6), or with methionine (bis [2-amino-4- [methylthio] butanoyl] • glutathione disulfide, see Fig. 7).

Фармацевтически приемлемые производные GSSG целесообразно использовать как лекарственные средства в виде 0.01%-4.0% инъекционного раствора со шкалой доз от 0.01 до 0.5 мг основания GSSG или его солей на кг веса тела; или в дозах от 1 до 30 мг на 1 м² поверхности тела, один или более раз в день, однократно или последовательно до получения желаемого терапевтического эффекта. В качестве фармацевтически приемлемого компонента для продления времени существования глутатиона в окисленной форме в заявке могут быть рекомендованы: 0.003% перекись водорода или 5.0% аскорбиновая кислота. Это объясняется тем, что в присутствии перекиси водорода или аскорбиновой кислоты, которые являются донорами промежуточных активных форм кислорода (т.е., прооксидантами), GSSG восстанавливается глутатион редуктазой до GSH с меньшей скоростью, таким образом, обуславливая более медленное восстановление экзогенно введенного в биологическую среду GSSG.It is advisable to use pharmaceutically acceptable derivatives of GSSG as medicines in the form of a 0.01% -4.0% injection solution with a scale of doses from 0.01 to 0.5 mg of the base of GSSG or its salts per kg of body weight; or in doses of 1 to 30 mg per 1 m ² of body surface, one or more times a day, once or sequentially until the desired therapeutic effect is obtained. As a pharmaceutically acceptable component for prolonging the lifetime of glutathione in oxidized form, the application may recommend: 0.003% hydrogen peroxide or 5.0% ascorbic acid. This is because in the presence of hydrogen peroxide or ascorbic acid, which are donors of intermediate reactive oxygen species (i.e., prooxidants), GSSG is reduced by glutathione reductase to GSH at a lower rate, thus causing a slower recovery of exogenously introduced into biological GSSG environment.

Перекись водорода может быть рекомендована для использования в диапазоне от 0.03 до 0.0003% в растворах (от 1.0 до 5.0 мл раствора, независимо от того, содержит ли данный раствор GSSG или фармацевтически приемлемые соли GSSG). Предпочтительно, чтобы аскорбиновую кислоту использовали в количествах от 0.1 до 10% по весу в используемых растворах, независимо от того, содержит ли данный раствор GSSG, или фармацевтически приемлемые соли GSSG, или его фармацевтически приемлемые комбинации, и/или его производные/соли производных. Hydrogen peroxide can be recommended for use in the range from 0.03 to 0.0003% in solutions (from 1.0 to 5.0 ml of a solution, regardless of whether this solution contains GSSG or pharmaceutically acceptable salts of GSSG). Preferably, ascorbic acid is used in amounts of 0.1 to 10% by weight in the solutions used, regardless of whether the solution contains GSSG, or pharmaceutically acceptable salts of GSSG, or its pharmaceutically acceptable combinations, and / or its derivatives / salts thereof.

Использование фармацевтически приемлемых концентраций перекиси водорода (H₂O₂) или аскорбиновой кислоты в составе лекарственной формы для парентерального применения, также как и использование любых других прооксидантных компонентов (доноров активных форм кислорода), дает возможность воспользоваться только одним из доступных методов продления существования окисленного глутатиона или его производных в окисленной форме в биологических жидкостях и тканях и, таким образом, увеличить и продлить фармацевтический эффект GSSG и/или его производных.The use of pharmaceutically acceptable concentrations of hydrogen peroxide (H ₂ O ₂ ) or ascorbic acid in the parenteral dosage form, as well as the use of any other prooxidant components (donors of reactive oxygen species), makes it possible to use only one of the available methods for prolonging the existence of oxidized glutathione or its derivatives in oxidized form in biological fluids and tissues, and thus increase and extend the pharmaceutical effect of GSSG and / or its production water.

В процессе исследований нами установлено, что некоторые другие фармацевтически приемлемые компоненты или "пролонгаторы" способствуют замедлению процесса восстановления экзогенного GSSG и его солей в GSH в биологических средах. Таковыми, в частности, являются: вещества, способные формировать слабые ионные и/или координационные связи, которые стабилизируют молекулу GSSG, например, диметил сульфоксид или соединения платины. Рекомендуется использовать соединения платины для стабилизации GSSG или его солей в окисленной форме в диапазоне концентраций от 0.3% до 0.0003% (вес/объем). Наиболее предпочтительно использовать диметилсульфоксид в качестве 3.0% (объем/объем) раствора, и рекомендуется его использовать в виде раствора от 1.0% до 30% по объему (растворы от 1.0 до 30.0 мл или более при использовании накожно/для локальных инстилляций). In the process of research, we found that some other pharmaceutically acceptable components or “prolongators” slow down the recovery of exogenous GSSG and its salts in GSH in biological media. These, in particular, are: substances capable of forming weak ionic and / or coordination bonds that stabilize the GSSG molecule, for example, dimethyl sulfoxide or platinum compounds. It is recommended that platinum compounds be used to stabilize GSSG or its salts in oxidized form in a concentration range from 0.3% to 0.0003% (weight / volume). It is most preferable to use dimethyl sulfoxide as a 3.0% (volume / volume) solution, and it is recommended to use it in the form of a solution from 1.0% to 30% by volume (solutions from 1.0 to 30.0 ml or more when using cutaneous / for local instillations).

Поскольку восстановленный NADP-H является ключевым кофактором глутатионредуктазной системы, катализирующей восстановление GSSG до GSH, то любые фармацевтически приемлемые компоненты, которые задерживают процесс восстановления GSSG или блокируют биологическое восстановление NADP-H глутатион редуктазой, обеспечат сохранение GSSG или солей GSSG от восстановления в биологических средах и, тем самым, будут усиливать и продлевать лечебные эффекты GSSG или солей GSSG. Since reduced NADP-H is a key cofactor of the glutathione reductase system that catalyzes the reduction of GSSG to GSH, any pharmaceutically acceptable components that delay the GSSG reduction process or block the biological reduction of NADP-H glutathione reductase will ensure that GSSG or GSSG salts are preserved from reduction in biological media and thereby enhancing and prolonging the therapeutic effects of GSSG or GSSG salts.

Благодаря проведенным исследованиям мы впервые показали, что фармацевтические эффекты GSSG усиливаются, если GSSG используется в комбинации с веществами, обладающими конкурентными свойствами по отношению к NADP-H, а также с компонентами, обратимо ингибирующими ферментативные реакции, катализируемые глюкозо-6-фосфат- дегидрогеназой, которая опосредует восстановление окисленной формы NADP+. Thanks to our studies, we first showed that the pharmaceutical effects of GSSG are enhanced if GSSG is used in combination with substances that are competitive with NADP-H, as well as with components reversibly inhibiting enzymatic reactions catalyzed by glucose-6-phosphate dehydrogenase, which mediates the reduction of the oxidized form of NADP +.

В результате проведенных исследований нами впервые обнаружено, что биологический и фармацевтический эффекты GSSG и его солей усиливается при использовании в комбинации с веществами, вступающими в конкурентные отношения с NADP-H, а также с веществами, обратимо ингибирующими ферментативные реакции, катализируемые глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназой, в результате которой происходит восстановление окисленной формы NADP+. As a result of our studies, we first discovered that the biological and pharmaceutical effects of GSSG and its salts are enhanced when used in combination with substances that enter into competition with NADP-H, as well as with substances that reversibly inhibit enzymatic reactions catalyzed by glucose-6-phosphate -dehydrogenase, which results in the restoration of the oxidized form of NADP +.

Помимо аскорбиновой кислоты, диметилсульфоксида, соединений платины, одним из других фармацевтически приемлемых компонентов, способных продлить пребывание окисленного глутатиона в окисленной форме в биологических средах, может быть гипоксантинрибозид (инозин, или 9- β- рибофуранозилгипоксантин), который предлагается использовать в качестве 0.1% раствора. Выполненные исследования показали, что гипоксантинрибозид оказывает потенцирующее действие в отношении фармацевтических, биологических и терапевтических эффектов GSSG. Было показано, что данное свойство гипоксантинрибозида основано на его способности вступать в конкурентные отношения с NADP-H, и, таким образом, получить замедление реакции восстановления GSSG в GSH. Более того, также нами было установлено, что данным свойством обладают и другие производные гипоксантина (в том числе нуклеозидные производные инозина). In addition to ascorbic acid, dimethyl sulfoxide, platinum compounds, one of the other pharmaceutically acceptable components that can prolong the stay of oxidized glutathione in oxidized form in biological media can be hypoxanthine riboside (inosine, or 9-β-ribofuranosylhypoxanthine), which is proposed to be used as a 0.1% solution . Studies have shown that hypoxanthine riboside has a potentiating effect on the pharmaceutical, biological and therapeutic effects of GSSG. It was shown that this property of hypoxanthine riboside is based on its ability to compete with NADP-H, and, thus, to obtain a slowdown in the recovery reaction of GSSG in GSH. Moreover, we have also found that other hypoxanthine derivatives (including nucleoside derivatives of inosine) also possess this property.

Также помимо упомянутых выше окислителей и гипоксантинрибозида, другим фармацевтически приемлемым компонентом, предлагаемым к использованию и способным продлить пребывание глутатиона в окисленной форме, является цистамин (2,2-диаминодиэтилдисульфид). Выполненные исследования показали, что цистамин оказывает потенцирующее действие в отношении фармацевтических, биологических и лечебных эффектов GSSG. Было показано, что данное действие цистамина проявляется вследствие его способности осуществлять обратимое ингибирование пускового фермента пентозо-фосфатного цикла - глюкозо-6-фосфат- дегидрогеназы, катализирующего реакцию восстановления NADP+ в NADP-H. Also, in addition to the oxidizing agents and hypoxanthine riboside mentioned above, another pharmaceutically acceptable component proposed for use and capable of prolonging the stay of glutathione in the oxidized form is cystamine (2,2-diaminodiethyl disulfide). Studies have shown that cystamine has a potentiating effect on the pharmaceutical, biological and therapeutic effects of GSSG. It was shown that this action of cystamine is manifested due to its ability to reversibly inhibit the pentose-phosphate cycle start-up enzyme, glucose-6-phosphate dehydrogenase, which catalyzes the NADP + reduction reaction in NADP-H.

В заявляемом изобретении также предлагается способ потенцирования способности окисленного глутатиона (GSSG) стимулировать эндогенную продукцию цитокинов и гемопоэтических факторов, заключающийся в том, что GSSG и его соли используют в составе фармацевтических комбинаций, содержащих компонент, способный продлить пребывание глутатиона в окисленной форме. Это достигается путем использования фармацевтически приемлемых комбинаций, содержащих лекарственные формы солей GSSG и лекарственные формы веществ, способных продлить пребывание окисленного глутатиона в биологических средах в окисленной форме, например: 0.003% раствор перекиси водорода или другие прооксидантно активные соединения; 0.1% раствор гипоксантинрибозида или другие производные гипоксантина, в том числе нуклеозидные производные инозина; а также 0.1% раствор цистамина (или другие соединения, способные осуществлять обратимое ингибирование пускового фермента пентозо-фосфатного цикла - глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы). The invention also provides a method for potentiating the ability of oxidized glutathione (GSSG) to stimulate endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, namely that GSSG and its salts are used in pharmaceutical combinations containing a component capable of prolonging the stay of glutathione in an oxidized form. This is achieved by using pharmaceutically acceptable combinations containing dosage forms of GSSG salts and dosage forms of substances capable of prolonging the stay of oxidized glutathione in biological media in an oxidized form, for example: 0.003% hydrogen peroxide solution or other prooxidant active compounds; 0.1% solution of hypoxanthine riboside or other derivatives of hypoxanthine, including nucleoside derivatives of inosine; as well as a 0.1% cystamine solution (or other compounds capable of reversibly inhibiting the pentose-phosphate cycle start-up enzyme, glucose-6-phosphate dehydrogenase).

Установлено, что парентеральное (внутривенное, внутрибрюшинное, подкожное, внутримышечное и т.д.) применение GSSG в 1-5 мл 0.003% раствора перекиси водорода, GSSG в 1-5 мл 0.1% раствора гипоксантинрибозида, а также GSSG в 1-5 мл 0.1% раствора цистамина, стимулирует эндогенную продукцию TNF -α, IFN -α и IFN -γ, IFN -β, IL-1, IL-2, IL-6 и IL-10, эритропоэтина и GM-CSF у млекопитающих в большей степени, чем это наблюдается в случае применения только GSSG. It was found that parenteral (intravenous, intraperitoneal, subcutaneous, intramuscular, etc.) application of GSSG in 1-5 ml of a 0.003% hydrogen peroxide solution, GSSG in 1-5 ml of a 0.1% solution of hypoxanthine riboside, as well as GSSG in 1-5 ml 0.1% cystamine solution, stimulates the endogenous production of TNF-α, IFN-α and IFN-γ, IFN-β, IL-1, IL-2, IL-6 and IL-10, erythropoietin and GM-CSF in mammals to a greater extent than this is observed when using only GSSG.

Проведенные исследования подтверждают способность вышеупомянутых соединений (прооксиданты, гипоксантинрибозида и цистамина) усиливать биологические и терапевтические эффекты GSSG и его солей, что свидетельствуют о целесообразности их сочетанного применения в целях повышения эффективности лечения онкологических, инфекционных, ишемических, гематологических и других заболеваний, при которых регуляция эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов целесообразна по соображениям, очевидным для специалиста в соответствующей области медицины. The studies confirm the ability of the above compounds (prooxidants, hypoxanthine riboside and cystamine) to enhance the biological and therapeutic effects of GSSG and its salts, which indicates the advisability of their combined use in order to increase the effectiveness of the treatment of cancer, infectious, ischemic, hematological and other diseases in which the regulation of endogenous the production of cytokines and hematopoietic factors is advisable for reasons obvious to the specialist in the relevant areas of medicine.

Таким образом, согласно заявляемому изобретению с целью усиления и продления терапевтического эффекта GSSG целесообразно, чтобы лекарственная форма данного соединения (1-5 мл инъекционного раствора) содержала дополнительные фармацевтически приемлемые компоненты-пролонгаторы, способные продлить пребывание экзогенного GSSG, введенного в биологические среды организма, в окисленной форме, например:
а) перекись водорода в концентрации 0.003% или любые другие фармацевтически приемлемые прооксидантно активные соединения, являющиеся донорами активных форм кислорода;
б) гипоксантинрибозид (инозин, 9-β- D-рибофуранозилгипоксантин) в диапазоне концентраций от 0.1% до 1.0% или любые другие фармацевтически приемлемые метаболические конкуренты NADP-H, способные тормозить восстановление GSSG в GSH, катализируемое глутатион редуктазой;
в) цистамин (β,β-диаминодиэтилсульфид) в диапазоне концентраций от 0.1% до 0.5% или любые другие фармацевтически приемлемые компоненты, способные вызывать обратимое ингибирование восстановления NADP+ в NADP-H, катализируемое глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназой;
г) диметилсульфоксид (DMSO) в диапазоне концентраций от 0.1% до 30% или соединения платины, способные стабилизировать молекулу GSSG в окисленной форме за счет образования ионных и координационных связей в диапазоне концентраций от 0.3% до 0.0003% (вес/объем);
д) максимальная стабилизация экзогенного GSSG в окисленной форме, в том числе при введении в биологические среды достигается в случае использования комбинации (смеси) молекул окисленного глутатиона, состоящей на 50% из молекул GSSG, в которой все аминокислоты представлены в L-форме, и на 50% из молекул GSSG, в которой две химически однозначные аминокислоты представлены в D-форме, а остальные - L-форме.Thus, according to the claimed invention, in order to enhance and prolong the therapeutic effect of GSSG, it is advisable that the dosage form of this compound (1-5 ml injection solution) contain additional pharmaceutically acceptable prolonging components that can prolong the stay of exogenous GSSG introduced into the biological environment of the body in oxidized form, for example:
a) hydrogen peroxide at a concentration of 0.003% or any other pharmaceutically acceptable prooxidant active compounds that are donors of reactive oxygen species;
b) hypoxanthine riboside (inosine, 9-β-D-ribofuranosylhypoxanthine) in the concentration range from 0.1% to 1.0% or any other pharmaceutically acceptable metabolic competitors NADP-H that can inhibit the restoration of GSSG in GSH catalyzed by glutathione reductase;
c) cystamine (β, β-diaminodiethyl sulfide) in the concentration range from 0.1% to 0.5% or any other pharmaceutically acceptable components that can cause reversible inhibition of NADP + to NADP-H reduction catalyzed by glucose-6-phosphate dehydrogenase;
d) dimethyl sulfoxide (DMSO) in the concentration range from 0.1% to 30% or platinum compounds capable of stabilizing the GSSG molecule in the oxidized form due to the formation of ionic and coordination bonds in the concentration range from 0.3% to 0.0003% (weight / volume);
e) the maximum stabilization of exogenous GSSG in an oxidized form, including when introduced into biological media, is achieved if a combination (mixture) of oxidized glutathione molecules is used, which consists of 50% GSSG molecules in which all amino acids are in L-form and 50% of the GSSG molecules, in which two chemically unambiguous amino acids are represented in D-form, and the rest in L-form.

Наряду с использованием "пролонгаторов", впервые обосновано применение фармацевтически приемлемых соединений, способных усиливать или благоприятно модулировать биологический и терапевтический эффект GSSG и производных GSSG. Было найдено несколько групп химических веществ, обладающих способностью усиливать или благоприятно модулировать эффекты GSSG и его солей. Along with the use of “prolongators”, the use of pharmaceutically acceptable compounds capable of enhancing or favorably modulating the biological and therapeutic effect of GSSG and GSSG derivatives has been substantiated for the first time. Several groups of chemicals have been found to be able to enhance or favorably modulate the effects of GSSG and its salts.

Например, доноры метильных групп, такие, как холин-хлорид и S-аденозил-метионин, используемые в комбинации с GSSG или солями GSSG, более эффективны по сравнению с введением только GSSG или его солей, в случае лечения вышеуказанными комбинациями больных с иммуно- или инфекционной патологией. For example, methyl group donors, such as choline chloride and S-adenosyl methionine, used in combination with GSSG or GSSG salts, are more effective than administering only GSSG or its salts in the case of treatment with the above combinations of patients with immuno- or infectious pathology.

В свою очередь, было показано, что соединения, которые способны образовывать внутриклеточные окислительно-восстановительные пары (липоевая, фолиевая и аскорбиновая кислоты), также усиливают эффекты GSSG или его фармацевтически приемлемого производного, в частности, его солей, при гематологических или эндокринных заболеваниях, например, при сахарном диабете. Наиболее эффективно использовать липоевую кислоту у больных в форме 0.5% раствора, но также возможно и ее использование в качестве раствора от 0.1% до 1.0% по весу (от 1.0 до 5.0 мл раствора). Рекомендуется у гематологических больных использовать фолиевую кислоту в виде 0.5% раствора, а также возможно ее использование как раствора от 0.1% до 1.0% по весу (от 1.0 до 5.0 мл раствора). In turn, it was shown that compounds that are capable of forming intracellular redox pairs (lipoic, folic, and ascorbic acids) also enhance the effects of GSSG or its pharmaceutically acceptable derivative, in particular its salts, in hematological or endocrine diseases, for example with diabetes. It is most effective to use lipoic acid in patients in the form of a 0.5% solution, but it is also possible to use it as a solution from 0.1% to 1.0% by weight (from 1.0 to 5.0 ml of solution). It is recommended that hematological patients use folic acid in the form of a 0.5% solution, and it can also be used as a solution from 0.1% to 1.0% by weight (from 1.0 to 5.0 ml of solution).

Следовательно, термин "усилитель/модулятор", использованный в данной заявке, может соответствовать холин-хлориду, который предпочтительно использовать в виде 10% раствора; S-аденозил-метионину, используемого преимущественно в виде 5.0% раствора, или другим фармацевтически приемлемым донорам метильных групп; липоевой кислоте, предпочтительно используемой в виде 0.5% раствора; фолиевой кислоте, предпочтительно в виде 0.5% раствора. Therefore, the term “amplifier / modulator” used in this application may correspond to choline chloride, which is preferably used in the form of a 10% solution; S-adenosyl-methionine, used primarily in the form of a 5.0% solution, or to other pharmaceutically acceptable methyl group donors; lipoic acid, preferably used as a 0.5% solution; folic acid, preferably in the form of a 0.5% solution.

В такой же степени термин "фармацевтически приемлемые композиции" (дериваты), использованный в данной заявке, обозначает группу препаратов GSSG, полученных в виде новых формул химических соединений (фиг. 3-7): S-тиоэтиламин-глутатион дисульфид, или (бис-[6.8-дитиооктанил]•глутатион дисульфид, или [b-аланил- гистидил]•глутатион дисульфид, или ([9- β- D- рибофуранозиладенил]•глутатион дисульфид, или (бис[ α- амино- γ- [метилтио]бутаноил] •глутатион дисульфид. В вышеперечисленных препаратах одна или более L-аминокислот, входящих в состав молекулы GSSG, замещена ее D-формой. Согласно представленным ниже примерам реализации изобретения, указанные лекарственные препараты применяются в диапазоне доз от 0.01 до 0.5 мг на кг массы или от 1 до 30 мг на 1 м² поверхности тела.To the same extent, the term "pharmaceutically acceptable compositions" (derivatives) used in this application refers to a group of GSSG preparations obtained in the form of new formulas of chemical compounds (Fig. 3-7): S-thioethylamine-glutathione disulfide, or (bis- [6.8-dithiooctanyl] • glutathione disulfide, or [b-alanyl histidyl] • glutathione disulfide, or ([9-β-D-ribofuranosyladenyl] • glutathione disulfide, or (bis [α-amino-γ- [methylthio] butanoyl ] • glutathione disulfide. In the above preparations, one or more L-amino acids that make up the GSSG molecule, According to the following examples of implementation of the invention, these drugs are used in the dose range from 0.01 to 0.5 mg per kg of body weight or from 1 to 30 mg per 1 m ² of body surface.

Из данных проведенных исследований (см. примеры реализации изобретения) следует, что неизвестная ранее способность GSSG регулировать эндогенную продукцию цитокинов и гемопоэтических факторов и оказывать терапевтический эффект при различных заболеваниях не связана с повышением уровня GSH, поскольку тестирование GSH в широком диапазоне доз и концентраций не выявило стимуляции и/или благоприятной модуляции эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов. В равной мере, неизвестное ранее свойство окисленного глутатиона и его солей, и, в еще большей степени, солей окисленного глутатиона в 0.1% растворе гипоксантинрибозида индуцировать механизмы апоптоза в трансформированных клетках определяет, что терапевтические эффекты лекарственной формы окисленного глутатиона и его фармацевтически приемлемых комбинаций при онкопатологии также не связаны с повышением уровня восстановленного глутатиона (GSH), поскольку использование GSH в широком диапазоне доз и концентраций, в том числе и в 0.1% растворе гипоксантинрибозида не позволяет получить индукцию апоптоза в трансформированных клетках. From the data of the studies (see examples of the invention) it follows that the previously unknown ability of GSSG to regulate the endogenous production of cytokines and hematopoietic factors and to exert a therapeutic effect in various diseases is not associated with an increase in the level of GSH, since GSH testing in a wide range of doses and concentrations did not reveal stimulation and / or favorable modulation of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors. Equally, the previously unknown property of oxidized glutathione and its salts, and, even more, the salts of oxidized glutathione in a 0.1% solution of hypoxanthineriboside to induce apoptosis mechanisms in transformed cells determines that the therapeutic effects of the dosage form of oxidized glutathione and its pharmaceutically acceptable combinations in oncopathology also not associated with an increase in the level of reduced glutathione (GSH), since the use of GSH in a wide range of doses and concentrations, including in a 0.1% solution of ipoxanthinriboside does not allow the induction of apoptosis in transformed cells.

Таким образом, терапевтические эффекты препаратов, полученных на базе GSSG и его производных, основываются на их мультицитокинактивирущем действии и способности воспроизводить эффекты цитокинов и гемопоэтических факторов. Более того, действие GSSG и его производных проявляется дифференцированным эффектом относительно нормальных и опухолевых клеток. Исследование с применением нормальных и опухолевых клеток показало, что GSSG, его соли, в большей степени в случае применения GSSG в составе фармацевтически приемлемых комбинаций, обеспечивающих продление пребывания окисленного глутатиона в окисленной форме, инициирует гибель опухолевых клеток по апоптотическому механизму. При этом, в случае нормальных клеток их гибели не наблюдалось (фиг. 1). Thus, the therapeutic effects of drugs based on GSSG and its derivatives are based on their multicytokine-activating effect and the ability to reproduce the effects of cytokines and hematopoietic factors. Moreover, the effect of GSSG and its derivatives is manifested by a differentiated effect with respect to normal and tumor cells. A study using normal and tumor cells showed that GSSG, its salts, to a greater extent when using GSSG in pharmaceutically acceptable combinations that prolong the stay of oxidized glutathione in an oxidized form, initiates the death of tumor cells by the apoptotic mechanism. Moreover, in the case of normal cells, their death was not observed (Fig. 1).

Следует отметить, что дифференцированные эффекты лекарственных средств на основе GSSG и особенно его композиции с инозином, или цистеамином, или фолиевой кислотой, или композит GSSG с литием или с платиной вызывают максимальную индукцию механизмов апоптоза в трансформированных клетках при отсутствии подобного действия в нормальных клетках (см. примеры реализации изобретения). It should be noted that the differentiated effects of drugs based on GSSG and especially its composition with inosine, or cysteamine, or folic acid, or a GSSG composite with lithium or platinum cause the maximum induction of apoptosis mechanisms in transformed cells in the absence of a similar effect in normal cells (see examples of implementation of the invention).

Следует также отметить высокую эффективность заявляемых лекарственных средств на основе GSSG относительно индукции механизмов апоптоза в вирусо-трансформированных клетках, например, в случае вирусных гепатитов B и C, что подтверждают приведенные ниже клинические примеры. It should also be noted the high efficiency of the claimed drugs based on GSSG with respect to the induction of apoptosis mechanisms in virus-transformed cells, for example, in the case of viral hepatitis B and C, which is confirmed by the following clinical examples.

Терапевтический эффект GSSG и его фармацевтически приемлемых производных, в частности солей, при лечении онкологических, инфекционных (вирусных) заболеваний, может быть объяснен как регуляцией продукции эндогенных цитокинов, так и уникальной способностью активировать апоптотическую гибель исключительно трансформированных клеток. Более того, согласно изобретению большинство из терапевтических эффектов GSSG и его фармацевтически приемлемых производных, как в экспериментальных, так и в клинических условиях, связано с выявленными нами свойствами GSSG и его лекарственных форм стимулировать/модулировать эндогенную продукцию цитокинов или воспроизводить их эффекты в отношении того, что касается стимуляции пролиферации и дифференцировки нормальных клеток и, в то же время, активировать апоптотическую гибель исключительно трансформированных клеток. The therapeutic effect of GSSG and its pharmaceutically acceptable derivatives, in particular salts, in the treatment of oncological, infectious (viral) diseases can be explained both by the regulation of the production of endogenous cytokines and the unique ability to activate apoptotic death of exclusively transformed cells. Moreover, according to the invention, most of the therapeutic effects of GSSG and its pharmaceutically acceptable derivatives, both in experimental and in clinical conditions, are associated with the properties of GSSG and its dosage forms that we have identified that stimulate / modulate endogenous production of cytokines or reproduce their effects in relation to as for the stimulation of proliferation and differentiation of normal cells and, at the same time, activate apoptotic death of exclusively transformed cells.

Резюмируя результаты выполненных, доклинических и клинических исследований группы лекарственных средств, созданных на основе GSSG, следует подчеркнуть, что парентеральное (внутривенное, внутримышечное, подкожное; инстилляции в мочевой пузырь или per rectum) введение указанных лекарственных средств обеспечивает стимуляцию/модуляцию эндогенной продукции TNF -α, IFN -α и IFN -γ, IL-1, IL-2, IL-6 и IL-10, эритропоэтина и GM-CSF; воспроизведение эффектов названных цитокинов и гемопоэтических факторов в случае десенситизации рецепторов к цитокинам; а также индукцию механизмов апоптоза исключительно в опухоле- или вирусо- трансформированных клетках, вызывая в организме субъекта, нуждающемся в этом, соответствующий терапевтический эффект, более выраженный, чем при применении только GSSG. Summarizing the results of performed, preclinical and clinical studies of a group of drugs created on the basis of GSSG, it should be emphasized that parenteral (intravenous, intramuscular, subcutaneous; instillation into the bladder or per rectum) administration of these drugs provides stimulation / modulation of the endogenous production of TNF-α , IFN-α and IFN-γ, IL-1, IL-2, IL-6 and IL-10, erythropoietin and GM-CSF; reproduction of the effects of these cytokines and hematopoietic factors in the case of desensitization of receptors for cytokines; and also the induction of apoptosis mechanisms exclusively in tumor- or virus-transformed cells, causing in the body of the subject in need of this, the corresponding therapeutic effect, more pronounced than when using only GSSG.

Применение данных фармацевтически приемлемых производных GSSG в виде его солей (см. фиг.2) или композиций (см. фиг. 3-7) означает получение лекарственных средств, обладающих преимущественным терапевтическим эффектом либо в отношении опухолевых заболеваний, либо вирусных инфекций, либо гематологических заболеваний, либо иммуноаутоагрессий; либо ишемических или эндокринных поражений; а также обладающих преимущественной тропностью (сродством) к тем или иным органам и тканям. The use of these pharmaceutically acceptable derivatives of GSSG in the form of its salts (see Fig. 2) or compositions (see Fig. 3-7) means the preparation of drugs having a predominant therapeutic effect either against tumor diseases, or viral infections, or hematological diseases or immunoaggression; either ischemic or endocrine lesions; as well as those with predominant tropism (affinity) for these or other organs and tissues.

Приведенные ниже примеры реализации изобретения демонстрируют возможность его практической применимости и подтверждают его эффективность, а также целесообразность применения данных лекарственных средств в виде инъекционных растворов, содержащих от 0.01% до 4% основания GSSG или его солей с использованием шкалы доз от 0.01 до 0.5 мг на кг массы тела; или от 1 до 30 мг на 1 м² поверхности тела. В случае применения препаратов GSSG в форме растворов для ингаляций, локальных инстилляций, глазных капель, интраназального введения или мазей для накожных аппликаций, или свечей, рекомендуемые концентрации находятся в диапазоне от 1% до 10% основания GSSG или его солей.The following examples of the invention demonstrate the possibility of its practical applicability and confirm its effectiveness, as well as the feasibility of using these drugs in the form of injection solutions containing from 0.01% to 4% GSSG base or its salts using a dose scale of 0.01 to 0.5 mg per kg body weight or from 1 to 30 mg per 1 m ² of body surface. In the case of the use of GSSG preparations in the form of solutions for inhalation, local instillation, eye drops, intranasal administration or ointments for skin applications or suppositories, the recommended concentrations are in the range from 1% to 10% of the base of GSSG or its salts.

Активное вещество, пептид GSSG, обладающий способностью стимулировать эндогенную продукцию цитокинов и гемопоэтических факторов, а также индуцировать апоптоз трансформированных клеток, может быть получен известным и общепринятым методом пептидного синтеза [39]. Полученный таким образом пептид GSSG с целью его дальнейшего применения в условиях (in vivo) у людей и животных, используется в виде фармацевтически приемлемых производных GSSG в инъекционной лекарственной форме, получаемой путем растворения сухого вещества в стерильной воде для инъекций или любом фармацевтически приемлемом растворителе с конечной концентрацией 0.01-4.0%. Для исследований в условиях in vitro GSSG или его производные могут растворяться в приемлемых для проведения соответствующих экспериментов жидкостях, таких, как культуральные среды, изотонические солевые растворы, растворы глюкозы и т.д. The active substance, the GSSG peptide, which has the ability to stimulate the endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, as well as induce apoptosis of transformed cells, can be obtained by the well-known and generally accepted peptide synthesis method [39]. The GSSG peptide thus obtained, for the purpose of its further use in vivo in humans and animals, is used as pharmaceutically acceptable derivatives of GSSG in an injectable dosage form, obtained by dissolving the dry substance in sterile water for injection or any pharmaceutically acceptable solvent with a final concentration of 0.01-4.0%. For in vitro studies, GSSG or its derivatives may dissolve in fluids acceptable for conducting the respective experiments, such as culture media, isotonic saline solutions, glucose solutions, etc.

Предпочтительно, чтобы была использована водная основа или растворитель, в то же время, могут быть использованы другие физиологически приемлемые основы или растворители. Для местного применения, включая применение в различные полости тела, могут быть использованы органические растворители или основы в виде мазей, паст, кремов или свечей. Preferably, an aqueous base or solvent is used, while other physiologically acceptable bases or solvents can be used. For topical application, including use in various body cavities, organic solvents or bases in the form of ointments, pastes, creams or suppositories can be used.

Приготовление лекарственной формы для применения у людей и животных должно выполняться с соблюдением условий стерильности и апирогенности и должно исключать возможность химического или бактериального загрязнения лекарственной формы. The preparation of the dosage form for use in humans and animals should be subject to sterility and pyrogen-free conditions and should exclude the possibility of chemical or bacterial contamination of the dosage form.

Инъекционные лекарственные формы GSSG, его солей и композиций были исследованы в экспериментах на животных, а также в ходе широких клинических испытаний и пилотных исследований на больных людях. Injectable dosage forms of GSSG, its salts and compositions have been investigated in animal experiments, as well as in extensive clinical trials and pilot studies in sick people.

Таким образом, заявляется и обосновывается метод получения на основе окисленного глутатиона (GSSG) нового класса лекарственных веществ, лечебные эффекты которых определяются впервые установленными и ранее неизвестными свойствами окисленного глутатиона (GSSG) и его производных осуществлять стимуляцию эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов и воспроизведение их эффектов, следовательно, осуществлять стимуляцию и/или модуляцию пролиферации и дифференцировки нормальных клеток, а также целенаправленно индуцировать механизмы апоптоза в вирус- и опухоле-трансформированных клетках. Thus, a method is claimed and justified for producing a new class of drugs based on oxidized glutathione (GSSG), the therapeutic effects of which are determined by the first established and previously unknown properties of oxidized glutathione (GSSG) and its derivatives to stimulate the endogenous production of cytokines and hematopoietic factors and reproduce their effects therefore, to stimulate and / or modulate the proliferation and differentiation of normal cells, as well as purposefully induce the mechanism Zm apoptosis in virus and tumor-transformed cells.

Благодаря использованию максимально достижимой концентрации инъекционного раствора натриевой соли GSSG (10.0%, 100 мг/мл) в воде для инъекций (или в физиологическом растворе, или в 0.003% растворе перекиси водорода, или в 0.1% растворе инозина или цистамина), а также благодаря использованию максимально переносимых объемов жидкости, инъецируемых мышам при внутрибрюшинном (в/б, 2.0 мл), внутривенном (в/в, 0.5 мл) и внутримышечном (в/м, 0.05 мл) введении, были достигнуты дозы GSSG, составляющие 5000 мг/кг (в/б), 1350 мг/кг (в/в) и 135 мг/кг (в/м), что превышает максимальную дозу, рекомендуемую для человека и составляющую 0.5 мг/кг, в 1000, 270 и 27 раз соответственно. Ни в одном из случаев не отмечалось гибели животных, а также каких-либо токсических проявлений, что фактически свидетельствует о нетоксичности GSSG, используемого в лекарственной форме раствора для инъекций, а также о нетоксичности применявшихся фармацевтических композиций, содержащих GSSG. Due to the use of the maximum achievable concentration of the injection solution of GSSG sodium salt (10.0%, 100 mg / ml) in water for injection (either in physiological solution, or in a 0.003% solution of hydrogen peroxide, or in a 0.1% solution of inosine or cystamine), and also due to using the maximum tolerated volumes of fluid injected into mice with intraperitoneal (i.v., 2.0 ml), intravenous (i.v., 0.5 ml) and intramuscular (i / m, 0.05 ml) doses of GSSG of 5000 mg / kg were achieved (in / b), 1350 mg / kg (in / in) and 135 mg / kg (in / m), which exceeds the maximum dose Recommended for human component and 0.5 mg / kg, 1000, 270 and 27 times, respectively. In no case was the death of animals, as well as any toxic manifestations, which actually indicates the non-toxicity of the GSSG used in the dosage form of the injection, as well as the non-toxicity of the applied pharmaceutical compositions containing GSSG.

Пример 1. Example 1

Влияние GSSG и его лекарственных форм на продукцию цитокинов мононуклеарными лейкоцитами периферической крови человека in vitro. The effect of GSSG and its dosage forms on the production of cytokines by mononuclear leukocytes of human peripheral blood in vitro.

Оценивали действие окисленного глутатиона (GSSG), а также его лекарственных форм, содержащих 0.003% раствор перекиси водорода, 0,1% раствор инозина, 0,1% раствор цистамина на продукцию цитокинов мононуклеарными лейкоцитами периферической крови человека в условиях in vitro. The effect of oxidized glutathione (GSSG), as well as its dosage forms containing 0.003% hydrogen peroxide solution, 0.1% inosine solution, 0.1% cystamine on the production of cytokines by human peripheral blood mononuclear leukocytes in vitro, was evaluated.

Продукцию цитокинов лейкоцитами инициировали добавлением митогена, конканавалина A (ConA), который добавлялся в клеточную культуру сразу же после внесения исследуемых веществ. Супернатанты культур собирали через 24 часа после начала сочетанного воздействия ConA и исследуемых веществ и хранили до момента определения цитокинов при -70^oC.The production of cytokines by leukocytes was initiated by the addition of a mitogen, concanavalin A (ConA), which was added to the cell culture immediately after application of the test substances. Culture supernatants were collected 24 hours after the start of the combined exposure to ConA and test substances and stored until cytokines were detected at -70 ^o C.

Для оценки функционального состоянии клеток и их способности отвечать на митоген в присутствии каждой из оцениваемых концентраций исследуемых веществ, контрольные культуры клеток, содержащие исследуемые вещества в идентичных концентрациях, инкубировали в течение 72 часов после начала сочетанного воздействия ConA и исследуемых веществ. За 16 часов до окончания инкубации в контрольные культуры вносили ³H-тимидин и степень включения метки в ДНК расценивали как критерий функционального состояния клеточной тест системы.To assess the functional state of cells and their ability to respond to mitogen in the presence of each of the estimated concentrations of the test substances, control cell cultures containing the test substances in identical concentrations were incubated for 72 hours after the start of the combined exposure to ConA and the test substances. 16 hours before the end of incubation, ³ H-thymidine was added to the control cultures, and the degree of incorporation of the label into DNA was regarded as a criterion for the functional state of the cell test system.

Венозную кровь от здоровых доноров, мужчин, собирали в пластиковые гепаринизированные пробирки, тестированные на отсутствие эндотоксина (endotoxin tested). Мононуклеарную фракцию лейкоцитов крови получали центрифугированием в градиенте плотности фиколл-диатризоат натрия (Histopaque-1077, Sigma). Venous blood from healthy donors, men, was collected in plastic heparinized tubes tested for the absence of endotoxin (endotoxin tested). The mononuclear fraction of blood leukocytes was obtained by centrifugation in a density gradient ficoll-sodium diatrizoate (Histopaque-1077, Sigma).

Концентрацию клеток доводили до 2•10⁶ клеток на 1 мл "полной" культуральной среды (RPMI 1640, Sigma), содержащей 20 mM HEPES, 2 mM глутамина, 50 мкг/мл гентамицина и 10% фетальной телячьей сыворотки. Все использованные реагенты были "для культур тканей", Sigma. Жизнеспособность клеток оценивали по методу исключения с трипановым синим и 100 μл клеточной суспензии (200.000 клеток) разносили в лунки плоскодонных 96-луночных планшетов для культур тканей. Клетки от каждого донора разносили не менее чем в 39 лунок.The cell concentration was adjusted to 2 • 10 ⁶ cells per 1 ml of “complete” culture medium (RPMI 1640, Sigma) containing 20 mM HEPES, 2 mM glutamine, 50 μg / ml gentamicin and 10% fetal calf serum. All reagents used were “for tissue culture,” Sigma. Cell viability was assessed by the trypan blue exclusion method and 100 μl of cell suspension (200,000 cells) was placed into wells of flat-bottomed 96-well tissue culture plates. Cells from each donor were carried in at least 39 wells.

Оценивали влияние 5 конечных концентраций (5000 μг/мл; 500 μг/мл; 50 μг/мл; 5 μг/мл и 0.5 μг/мл) тестируемых веществ - окисленного глутатиона (GSSG), а также GSSG в сочетании: с перекисью водорода в концентрации 0.003%; с инозином в концентрации 0.1%; с цистамином в концентрации 0.1%. Каждую из концентраций создавали не менее чем в 6 лунках, внося 50 μл "полной" культуральной среды, содержащей необходимое количество предварительно растворенных исследуемых веществ. Еще 6 лунок использовались для контроля (добавлялось 50 μл только "полной" культуральной среды или полной среды, содержащей соответственно 0.003% раствор перекиси водорода, или раствор 0.1% инозина, или раствор 0.1% цистамина). We evaluated the effect of 5 final concentrations (5000 μg / ml; 500 μg / ml; 50 μg / ml; 5 μg / ml and 0.5 μg / ml) of the tested substances - oxidized glutathione (GSSG), as well as GSSG in combination with hydrogen peroxide concentration of 0.003%; with inosine at a concentration of 0.1%; with cystamine at a concentration of 0.1%. Each of the concentrations was created in at least 6 wells, adding 50 μl of a “complete” culture medium containing the required amount of previously dissolved test substances. Another 6 wells were used for control (50 μl of only the “complete” culture medium or complete medium containing, respectively, 0.003% hydrogen peroxide solution, or 0.1% inosine solution, or 0.1% cystamine solution was added).

Непосредственно после внесения исследуемых веществ во все лунки (за исключением 3-х дополнительных, которые служили для оценки спонтанного захвата ³H-тимидина (без ConA)) вносили по 50 μл "полной" культуральной среды, содержащей такое количество ConA (Sigma, для культур тканей), чтобы его конечная концентрация составляла 4.0 μг/мл.Immediately after the test substances were added to all wells (with the exception of 3 additional ones, which served to assess the spontaneous uptake of ³ H-thymidine (without ConA), 50 μl of the “complete” culture medium containing such an amount of ConA (Sigma for cultures tissues) so that its final concentration is 4.0 μg / ml.

Через 24 часа инкубации планшетов при 37^oC в присутствии 5% CO₂ содержимое половины лунок (по 3 лунки из каждых 6, содержащих одинаковую концентрацию исследуемых веществ) отсасывали, подвергали центрифугированию, супернатанты замораживали и хранили при -70^oC до момента определения присутствия цитокинов. Содержимое всех оставшихся заполненными лунок (3-х оставшихся) продолжали инкубировать при вышеописанных условиях.After 24 hours of incubation of the plates at 37 ^° C in the presence of 5% CO _{2, the} contents of half of the wells (3 wells out of every 6 containing the same concentration of the test substances) were aspirated, centrifuged, supernatants were frozen and stored at -70 ^° C until the presence was determined cytokines. The contents of all remaining filled wells (3 remaining) continued to incubate under the above conditions.

Через 56 часов от начала инкубации во все оставшиеся лунки добавляли по 1.0 μCi ³H-тимидина и продолжали инкубацию еще 16 часов, после чего содержимое лунок извлекалось и при помощи клеточного харвестера (cell harvester) наносили на стекловолокнистые фильтры, которые последовательно обрабатывали 5% трихлоруксусной кислотой и этанолом. Фильтры высушивали и их радиоактивность (импульсы в 1 мин, имп/мин) определяли с помощью жидкостного сцинтиляционного счетчика Betaplate 1205 (LKB).After 56 hours from the start of incubation, 1.0 μCi ³ H-thymidine was added to all remaining wells and the incubation continued for another 16 hours, after which the contents of the wells were removed and applied using a cell harvester to glass fiber filters, which were sequentially treated with 5% trichloroacetic acid and ethanol. The filters were dried and their radioactivity (1 min pulses, pulse / min) was determined using a Betaplate 1205 liquid scintillation counter (LKB).

Значения радиоактивности фильтров для каждого триплета лунок усредняли и рассчитывали индекс митогенной стимуляции: отношение усредненных значений имп/мин ConA-стимулированных культур к усредненным значениям имп/мин в культурах, в которые не добавлялся ConA (3 лунки без ConA). По индексу стимуляции в качестве критерия судили о функциональном состоянии клеток в лунках, где оцениваемые вещества присутствовали в различных концентрациях, и о способности клеток отвечать на митогенную стимуляцию. The radioactivity values of the filters for each triplet of wells were averaged and the mitogenic stimulation index was calculated: the ratio of the average impulses per minute of ConA-stimulated cultures to the average impulses per minute in cultures to which ConA was not added (3 wells without ConA). Based on the stimulation index, we judged as a criterion the functional state of cells in the wells, where the substances to be evaluated were present in various concentrations, and the ability of cells to respond to mitogenic stimulation.

Последующему анализу на содержание цитокинов подвергали клеточные супернатанты 24-часовых культур только из тех триплетов лунок, в контрольных триплетах которых при 72-часовой инкубации была выявлена митогенная реакция на ConA с индексом стимуляции в диапазоне от 15 до 50. Subsequent analysis of the cytokine content was performed on the cell supernatants of 24-hour cultures from only those triplets of wells, in the control triplets of which, after 72-hour incubation, a mitogenic response to ConA with a stimulation index ranging from 15 to 50 was detected.

Концентрации интерлейкина-1b; интерлейкина-6 (IL-6); фактора некроза опухолей α (TNF -α ) и интерферона α (IFN -α ) определяли по методу ELISA с использованием коммерческих наборов фирмы Medgenix (Бельгия) и выражали в пкг/мл культуральных супернатантов. Concentrations of interleukin-1b; interleukin-6 (IL-6); tumor necrosis factor α (TNF-α) and interferon α (IFN-α) were determined by ELISA using commercial kits from Medgenix (Belgium) and expressed in PCG / ml of culture supernatants.

Заметные результаты представлены в таблицах 1 - 4. Согласно данным таблиц 1 и 2, добавление GSSG в культуральную среду приводило к статистически достоверной и дозозависимой стимуляции продукции цитокинов мононуклеарными лейкоцитами человека. При этом, присутствие перекиси водорода приводило к повышению контрольных (в отсутствие GSSG) показателей уровней IL-6 и TNF -α. Кроме того, в комбинации с перекисью водорода GSSG оказывает более выраженное (в 1.5-2 раза) стимулирующее влияние на продукцию исследуемых цитокинов в исследовании: для IL-1 β - в концентрациях 5.0 - 5000 μг/мл; для IL-6 и TNF -α - во всем диапазоне концентраций; и для IFN -α - в концентрациях 500 и 5000 μг/мл. Noticeable results are presented in tables 1 - 4. According to the data of tables 1 and 2, the addition of GSSG to the culture medium led to statistically significant and dose-dependent stimulation of cytokine production by human mononuclear leukocytes. Moreover, the presence of hydrogen peroxide led to an increase in the control (in the absence of GSSG) indicators of the levels of IL-6 and TNF-α. In addition, in combination with hydrogen peroxide, GSSG has a more pronounced (1.5–2 times) stimulating effect on the production of the studied cytokines in the study: for IL-1 β, in concentrations of 5.0–5000 μg / ml; for IL-6 and TNF-α - in the whole range of concentrations; and for IFN-α, at concentrations of 500 and 5000 μg / ml.

Применение GSSG в 0.1% растворе инозина и 0.1% растворе цистамина приводит к достоверному и дозозависимому повышению продукции цитокинов, особенно в отношении IL-6 и TNF -α (таблицы 3 и 4). The use of GSSG in 0.1% inosine solution and 0.1% cystamine solution leads to a significant and dose-dependent increase in cytokine production, especially with respect to IL-6 and TNF-α (tables 3 and 4).

Таким образом, действие GSSG на мононуклеарные лейкоциты периферической крови людей в условиях in vitro приводит к убедительной стимуляции продукции цитокинов в культуральную среду, чем подтверждается стимулирующее действие GSSG на естественную цитокин-продуцирующую способность клеток крови человека. Использование GSSG в комбинации с перекисью водорода, инозином, а также с цистамином, приводит к более выраженному проявлению эффектов GSSG в отношении индукции эндогенной продукции цитокинов. Thus, the effect of GSSG on mononuclear leukocytes of human peripheral blood in vitro leads to a convincing stimulation of cytokine production in the culture medium, which confirms the stimulating effect of GSSG on the natural cytokine-producing ability of human blood cells. The use of GSSG in combination with hydrogen peroxide, inosine, as well as with cystamine, leads to a more pronounced manifestation of the effects of GSSG in relation to the induction of endogenous cytokine production.

Пример 2. Example 2

Влияние GSSG и его лекарственных форм на продукцию цитокинов и гемопоэтических факторов, а также показатели кроветворения и иммунитета при циклофосфамид-индуцированной гемо- и иммунодепрессии. The effect of GSSG and its dosage forms on the production of cytokines and hematopoietic factors, as well as blood formation and immunity parameters in cyclophosphamide-induced hemo- and immunosuppression.

Действие окисленного (GSSG) и восстановленного (GSH) глутатиона, а также лекарственных форм GSSG в 0.003% растворе перекиси водорода, или в 0,1% растворе инозина, или в 0.1% растворе цистамина, оценивали в модели гемо- и иммунодепрессии у мышей, индуцированной однократным введением цитостатика циклофосфамида (ЦФ). The effect of oxidized (GSSG) and reduced (GSH) glutathione, as well as GSSG dosage forms in a 0.003% hydrogen peroxide solution, or in a 0.1% inosine solution, or in a 0.1% cystamine solution, was evaluated in a model of hemo- and immunosuppression in mice, induced by a single injection of the cytostatic cyclophosphamide (CF).

В рамках данного исследования была проведена оценка влияния 5-дневного применения вышеперечисленных веществ на способность лимфоцитов селезенки мышей, подвергнутых действию ЦФ, продуцировать IL-2 и GM-CSF в условиях in vitro. Помимо этого, оценивалась клеточность крови (число лейкоцитов и лимфоцитов) и костного мозга (число кариоцитов) на 8-й день после применения ЦФ. У части животных, получивших ЦФ и затем подвергнутых иммунизации эритроцитами барана (ЭБ), оценивали способность развивать гуморальный иммунный ответ к данному антигену. In this study, we evaluated the effect of a 5-day use of the above substances on the ability of spleen lymphocytes of mice exposed to CF to produce IL-2 and GM-CSF in vitro. In addition, the cellularity of blood (the number of leukocytes and lymphocytes) and bone marrow (the number of karyocytes) was evaluated on the 8th day after the application of CF. The ability to develop a humoral immune response to this antigen was evaluated in some animals that received CF and then were immunized with sheep erythrocytes (EB).

Исследование было проведено на мышах линии СВА, самцах, массой 18-20 г, которым однократно вводился ЦФ (50 мг/кг, внутрибрюшинно). Семь групп животных (не менее 15 мышей в каждой) было сформировано в рамках проведенного исследования. Описание групп приведено ниже. The study was conducted on CBA mice, males, weighing 18-20 g, to which CF was administered once (50 mg / kg, intraperitoneally). Seven groups of animals (at least 15 mice each) were formed as part of the study. Description of groups is given below.

Контрольные группы:
N1 - интактные животные, получившие вместо инъекции ЦФ инъекцию растворителя исследуемых веществ (физиологического раствора);
N2 - животные, получившие инъекцию ЦФ, у которых в дальнейшем применялся растворитель исследуемых веществ (физиологический раствор) (контроль);
N3 - животные, получившие инъекцию ЦФ, у которых в дальнейшем применялось вещество сравнения (GSH в физиологическом растворе) из расчета 5 мг/кг массы тела;
Опытные группы:
N4 - животные, получившие инъекцию ЦФ, у которых в дальнейшем применялось исследуемое вещество (GSSG в физиологическом растворе) из расчета 5 мг/кг массы тела;
N5 - животные, получившие инъекцию ЦФ, у которых в дальнейшем применялся GSSG в физиологическом растворе, содержащей вариант фармацевтически активной композиции исследуемого вещества (GSSG в физиологическом растворе, содержащем 0.003% перекиси водорода) из расчета 5 мг GSSG на кг массы тела;
N6 - животные, получившие инъекцию ЦФ, у которых в дальнейшем применялся вариант фармацевтически активной композиции исследуемого вещества (GSSG в физиологическом растворе, содержащем 0,1% инозина), из расчета 5 мг GSSG на кг массы тела;
N7 - животные, получившие инъекцию ЦФ, у которых в дальнейшем применялся вариант фармацевтически активной композиции исследуемого вещества (GSSG в физиологическом растворе, содержащем 0,1% цистамина) из расчета 5 мг GSSG на кг массы тела;
Через 24 часа после применения ЦФ по 5 животных из каждой группы было подвергнуто иммунизации эритроцитами барана (ЭБ, 10⁷ эритроцитов в 0.5 мл физиологического раствора, внутрибрюшинно).Control groups:
N1 - intact animals that received, instead of CF injections, an injection of a solvent of the test substances (physiological saline);
N2 - animals that received an injection of CF, in which the solvent of the test substances (physiological saline) was subsequently used (control);
N3 - animals that received an injection of CF, which later used the reference substance (GSH in physiological saline) at the rate of 5 mg / kg body weight;
Experienced groups:
N4 - animals that received an injection of CF, in which the test substance (GSSG in physiological saline) was subsequently used at the rate of 5 mg / kg body weight;
N5 - animals that received the injection of CF, which was subsequently used GSSG in physiological saline containing a variant of the pharmaceutically active composition of the test substance (GSSG in physiological saline containing 0.003% hydrogen peroxide) at the rate of 5 mg GSSG per kg body weight;
N6 - animals that received the injection of CF, in which the version of the pharmaceutically active composition of the test substance (GSSG in physiological saline containing 0.1% inosine) was subsequently used, at the rate of 5 mg GSSG per kg body weight;
N7 - animals that received the injection of CF, which subsequently used a variant of the pharmaceutically active composition of the test substance (GSSG in physiological solution containing 0.1% cystamine) at the rate of 5 mg GSSG per kg body weight;
24 hours after the application of CF, 5 animals from each group were immunized with sheep erythrocytes (EB, 10 ⁷ red blood cells in 0.5 ml of saline, intraperitoneally).

С 3-х суток после инъекции ЦФ (через 24 часа после иммунизации) животным начинали внутрибрюшинное введение контрольных или исследуемых веществ, как описано выше. Введение веществ продолжали в течение 5 дней (ежедневно, один раз в день). From the 3rd day after the injection of CF (24 hours after immunization), animals began intraperitoneal administration of control or test substances, as described above. The introduction of substances continued for 5 days (daily, once a day).

Через 24 часа после окончания 5-дневного курса применения контрольных или исследуемых веществ (на 8-й день после инъекции ЦФ) мышей эвтаназировали и в стерильных условиях готовили суспензию спленоцитов для оценки спонтанной продукции IL-2 и GM-CSF лимфоцитами селезенки в условиях in vitro. 24 hours after the end of the 5-day course of the use of control or test substances (on the 8th day after CF injection), the mice were euthanized and a splenocyte suspension was prepared under sterile conditions to evaluate spontaneous production of IL-2 and GM-CSF by spleen lymphocytes in vitro .

Параллельно с этим забирали образцы крови и костного мозга для оценки их клеточности (число лейкоцитов и лимфоцитов крови, кариоцитов костного мозга). In parallel, blood and bone marrow samples were taken to assess their cellularity (the number of leukocytes and blood lymphocytes, bone marrow karyocytes).

У иммунизированных животных на 7-й день после иммунизации (8-й день после инъекции ЦФ) оценивали сывороточный титр гемагглютининов к ЭБ. In immunized animals, on the 7th day after immunization (8th day after CF injection), the serum titer of hemagglutinins for EB was evaluated.

В таблице 5 приведены показатели продукции IL-2 и GM-CSF спленоцитами, показатели клеточности крови и костного мозга и уровень гуморального иммунного ответа на эритроциты барана у мышей, получавших исследуемые вещества на фоне циклофосфан-индуцированной гемо- и иммунодепрессии. Table 5 shows the production indicators of IL-2 and GM-CSF with splenocytes, blood and bone marrow cellularity, and the level of the humoral immune response to ram erythrocytes in mice receiving the test substances against cyclophosphamide-induced hemo- and immunosuppression.

Согласно данным, представленным в таблице 5, применение GSSG и GSSG в 0.003% растворе перекиси водорода практически нормализует продукцию IL-2 и GM-CSF клетками селезенки, тогда как GSH не обладает подобным действием. При этом GSSG и GSSG в растворе перекиси водорода оказывают достоверное восстанавливающее действие на параметры крови и костного мозга и способность животных формировать иммунный ответ к ЭБ. According to the data presented in table 5, the use of GSSG and GSSG in a 0.003% hydrogen peroxide solution practically normalizes the production of IL-2 and GM-CSF by spleen cells, whereas GSH does not have a similar effect. In this case, GSSG and GSSG in a solution of hydrogen peroxide have a significant restorative effect on the parameters of blood and bone marrow and the ability of animals to form an immune response to EB.

В таблицах 6 и 7 представлены данные влияния фармацевтически активных композиций, содержащих GSSG (в комбинации с 0.1% раствором инозина и с 0.1% раствором цистамина), на динамику исследуемых показателей в условиях ЦФ-индуцированной гемо- и иммунодепрессии. Приведенные данные свидетельствует о существенном усилении эффектов GSSG такими компонентами, как инозин и цистамин, относительно стимуляции продукции IL-2 и GM-CSF и восстановления клеточности крови и костного мозга. При этом, как можно видеть, GSH не обладал подобным действием; а максимальная стимуляция была выявлена в случае сочетания GSSG и 0.1% инозина. Tables 6 and 7 present data on the effect of pharmaceutically active compositions containing GSSG (in combination with 0.1% inosine solution and 0.1% cystamine solution) on the dynamics of the studied parameters under conditions of CF-induced hemo- and immunosuppression. These data indicate a significant increase in the effects of GSSG by components such as inosine and cystamine, with respect to stimulation of IL-2 and GM-CSF production and restoration of blood and bone marrow cellularity. Moreover, as you can see, GSH did not have a similar effect; and maximum stimulation was detected in the case of a combination of GSSG and 0.1% inosine.

Таким образом, применение заявляемого способа у животных, подвергнутых химической (циклофосфамид-индуцированной) гемо- и иммунодепрессии, приводит к выраженной стимуляции эндогенной продукции IL-2 и GM-CSF; оказывает восстанавливающее действие на параметры клеточности крови и костного мозга, а также на формирование иммунного ответа на эритроциты барана. Thus, the use of the proposed method in animals subjected to chemical (cyclophosphamide-induced) hemo- and immunosuppression leads to marked stimulation of the endogenous production of IL-2 and GM-CSF; It has a restoring effect on the cellularity parameters of blood and bone marrow, as well as on the formation of an immune response to sheep erythrocytes.

Пример 3. Example 3

Влияние GSSG и его лекарственных форм на продукцию цитокинов и гемопоэтических факторов, а также показатели кроветворения и иммунитета при радиационной гемо- и иммунодепрессии. The influence of GSSG and its dosage forms on the production of cytokines and hematopoietic factors, as well as indicators of blood formation and immunity in radiation hemo- and immunosuppression.

Действие окисленного (GSSG) и восстановленного (GSH) глутатиона, а также лекарственных форм GSSG, содержащих 0.003% раствор перекиси водорода, или 0.1% раствор инозина, или 0.1% раствор цистамина, оценивалось в модели радиационной гемо- и иммунодепрессии у мышей, индуцированной однократным облучением в общей дозе 1 грэй. The effects of oxidized (GSSG) and reduced (GSH) glutathione, as well as GSSG dosage forms containing a 0.003% hydrogen peroxide solution, or 0.1% inosine solution, or 0.1% cystamine solution, were evaluated in a single-dose induced hemo- and immunosuppression model in mice irradiation in a total dose of 1 gray.

В рамках данного исследования была проведена оценка влияния 7-дневного ежедневного применения исследуемых веществ (первое введение препаратов через два часа после облучения) на способность спленоцитов мышей, подвергнутых радиационному воздействию, продуцировать IL-2 и GM-CSF в условиях in vitro. Помимо этого, на 8-й день после облучения оценивалась клеточность крови (число лейкоцитов и лимфоцитов), селезенки и костного мозга (число кариоцитов), а также колоние-образующая способность клеток костного мозга и селезенки. As part of this study, we evaluated the effect of a 7-day daily use of the test substances (the first injection of drugs two hours after irradiation) on the ability of splenocytes of mice exposed to radiation to produce IL-2 and GM-CSF in vitro. In addition, on the 8th day after irradiation, the cellularity of blood (number of leukocytes and lymphocytes), spleen and bone marrow (number of karyocytes), as well as the colony-forming ability of bone marrow and spleen cells were evaluated.

Исследование было проведено на мышах линии СВА, самцах, массой 18-20 г, которые были подвергнуты однократному рентгеновскому облучению в общей поглощенной дозе 1 грэй (расстояние от источника - 70 см, мощность 180 kV, 15 мА, фильтр - 0.5 мм Cu, длительность облучения - 2 мин 28 сек). The study was conducted on CBA mice, males weighing 18-20 g, which were subjected to a single x-ray irradiation in a total absorbed dose of 1 gray (distance from the source - 70 cm, power 180 kV, 15 mA, filter - 0.5 mm Cu, duration irradiation - 2 min 28 sec).

Было сформировано семь групп животных (не менее 12 мышей в каждой). Описание групп приведено ниже. Seven groups of animals were formed (at least 12 mice each). Description of groups is given below.

Контрольные группы:
N1 - интактные животные, получившие стрессорное воздействие в виде ложного облучения, у которых в дальнейшем применялся растворитель исследуемого вещества (физиологический раствор);
N2 - контрольные животные, облученные в дозе 1 грэй, у которых в дальнейшем применялся растворитель исследуемых веществ (физиологический раствор);
N3 - животные, облученные в дозе 1 грэй, у которых в дальнейшем применялось вещество сравнения (GSH в физиологическом растворе) из расчета 5 мг/кг массы тела;
Опытные группы:
N4 - животные, облученные в дозе 1 грэй, у которых в дальнейшем применялось исследуемое вещество (GSSG в физиологическом растворе) из расчета 5 мг/кг массы тела;
N5 - животные, облученные в дозе 1 грэй, у которых в дальнейшем применялась лекарственная форма исследуемого вещества (GSSG в физиологическом растворе, содержащем 0.003% перекиси водорода) из расчета 5 мг GSSG на кг массы тела;
N6 - животные, облученные в дозе 1 грэй, у которых в дальнейшем применялся GSSG в физиологическом растворе, содержащем 0,1% инозина из расчета 5 мг GSSG на кг массы тела;
N7 - животные, облученные в дозе 1 грэй, у которых в дальнейшем применялся GSSG в физиологическом растворе, содержащем 0,1% цистамина из расчета 5 мг GSSG на кг массы тела.Control groups:
N1 - intact animals that received a stress effect in the form of false exposure, in which the solvent of the substance under study was subsequently used (physiological saline);
N2 — control animals irradiated at a dose of 1 gray, in which the solvent of the studied substances was subsequently used (physiological saline);
N3 - animals irradiated with a dose of 1 gray, in which the reference substance (GSH in physiological saline) was subsequently used at the rate of 5 mg / kg body weight;
Experienced groups:
N4 - animals irradiated with a dose of 1 gray, in which the test substance (GSSG in physiological saline) was subsequently used at the rate of 5 mg / kg body weight;
N5 - animals irradiated with a dose of 1 gray, in which the dosage form of the test substance (GSSG in physiological saline containing 0.003% hydrogen peroxide) was subsequently used at the rate of 5 mg GSSG per kg body weight;
N6 - animals irradiated with a dose of 1 gray, in which GSSG was subsequently used in physiological saline containing 0.1% inosine at the rate of 5 mg GSSG per kg body weight;
N7 - animals irradiated with a dose of 1 gray, in which GSSG was subsequently used in physiological saline containing 0.1% cystamine at the rate of 5 mg GSSG per kg body weight.

Через 2 часа после облучения животным начинали внутрибрюшинное введение контрольных или исследуемых веществ, как описано выше. Введение веществ продолжали в течение 7 дней (ежедневно, один раз в день). After 2 hours after irradiation, animals started intraperitoneal administration of control or test substances, as described above. The introduction of substances continued for 7 days (daily, once a day).

Через 24 часа после окончания применения контрольных или исследуемых веществ (на 8-й день после облучения) мышей эвтаназировали и в стерильных условиях готовили суспензию спленоцитов для оценки спонтанной продукции IL-2 и GM- CSF лимфоцитами селезенки в условиях in vitro. 24 hours after the end of the use of control or test substances (on the 8th day after irradiation), the mice were euthanized and a splenocyte suspension was prepared under sterile conditions to evaluate spontaneous production of IL-2 and GM-CSF by spleen lymphocytes in vitro.

Параллельно с этим забирали образцы крови, селезенки и костного мозга для оценки их клеточности (число лейкоцитов и лимфоцитов крови, кариоцитов селезенки и костного мозга). In parallel, blood, spleen and bone marrow samples were taken to assess their cellularity (the number of leukocytes and blood lymphocytes, karyocytes of the spleen and bone marrow).

Одновременно, определяли гемопоэтическую колониеобразующую способность клеток костного мозга и селезенки методом прямой подсчета колониеобразующих единиц (КОЕ) в селезенке сингенных облученных мышей СВА, которым внутривенно вводили порции исследуемых суспензий клеток костного мозга и селезенки от животных исследуемых групп. At the same time, the hematopoietic colony forming ability of bone marrow and spleen cells was determined by direct counting of colony forming units (CFU) in the spleen of syngene irradiated CBA mice, which were administered intravenously portions of the studied suspensions of bone marrow and spleen cells from animals of the studied groups.

В таблицах 8, 9, 10 приведены показатели продукции IL-2 и GM-CSF спленоцитами, показатели клеточности крови, селезенки и костного мозга, а также показатели колониеобразования (колониеобразующие единицы, КОЕ) костного мозга и селезенки облученных животных на 8 день после радиационного воздействия. Tables 8, 9, 10 show the production indicators of IL-2 and GM-CSF with splenocytes, the cellularity of blood, spleen and bone marrow, as well as colony formation (colony forming units, CFU) of bone marrow and spleen of irradiated animals on day 8 after radiation exposure .

Как следует из материалов таблиц, применение GSSG и лекарственных форм GSSG в 0,003% растворе перекиси водорода, или в 0,1% растворе инозина, или в 0,1% растворе цистамина статистически достоверно восстанавливает продукцию IL-2 и GM- CSF клетками селезенки, тогда как GSH не оказывает существенного эффекта. As follows from the table materials, the use of GSSG and dosage forms of GSSG in a 0.003% hydrogen peroxide solution, or in a 0.1% inosine solution, or in a 0.1% cystamine solution statistically significantly restores the production of IL-2 and GM-CSF by spleen cells, whereas GSH does not have a significant effect.

При этом, как GSSG, так и GSSG в составе фармацевтически активных композиций оказывали достоверное нормализующее действие на клеточность крови, селезенки и костного мозга. В ряде случаев эффект GSSG в растворе перекиси водорода оказался более существенным. Так, в случае применения только GSSG эффект данного вещества не имел статистической значимости (при сравнении с контрольной группой) для таких показателей, как продукция IL-2 спленоцитами, лейкоциты крови, и клеточность костного мозга, а также колониеобразующая активность клеток костного мозга, тогда как в случае использования GSSG в растворе перекиси водорода имели место статистически достоверные отличия. Еще более достоверными и убедительными потенцирующими эффектами действия GSSG обладают инозин и цистамин, максимальным лечебным эффектом обладает активная композиция GSSG с инозином. At the same time, both GSSG and GSSG in the composition of pharmaceutically active compositions had a significant normalizing effect on the cellularity of blood, spleen and bone marrow. In some cases, the effect of GSSG in a solution of hydrogen peroxide turned out to be more significant. So, if only GSSG was used, the effect of this substance did not have statistical significance (when compared with the control group) for such indicators as production of IL-2 by splenocytes, blood leukocytes, and bone marrow cellularity, as well as colony-forming activity of bone marrow cells, whereas in the case of using GSSG in a solution of hydrogen peroxide, there were statistically significant differences. Inosine and cystamine have even more reliable and convincing potentiating effects of the action of GSSG, and the active composition of GSSG with inosine has the maximum therapeutic effect.

Таким образом, применение заявляемого способа у животных, подвергнутых радиационной гемо- и иммунодепрессии, приводит к выраженной стимуляции эндогенной продукции IL-2 и GM-CSF; эффективному восстановлению клеточности крови, лимфоидных и кроветворных органов, а также колониеобразующей активности костного мозга и селезенки. Thus, the use of the proposed method in animals subjected to radiation hemo- and immunosuppression leads to marked stimulation of the endogenous production of IL-2 and GM-CSF; effective restoration of cellularity of blood, lymphoid and blood-forming organs, as well as colony-forming activity of bone marrow and spleen.

Пример 4. Example 4

Влияние GSSG и его лекарственных форм на процессы пролиферации и апоптотической гибели нормальных и трансформированных клеток. The effect of GSSG and its dosage forms on the proliferation and apoptotic death of normal and transformed cells.

Оценивали способность окисленного глутатиона (GSSG), а также его лекарственные формы: GSSG в 0.003% растворе перекиси водорода, или GSSG в 0.1% растворе инозина, или GSSG в 0.1% растворе цистамина, влиять на процессы пролиферации и/или программированной гибели нормальных и трансформированных клеток. Для этого осуществляли инкубацию GSSG или его лекарственных форм в течение 24 часов с клетками миелоидной линии HL-60 и нормальными лимфоцитами, полученными из периферической крови здоровых волонтеров, с последующей оценкой клеточного цикла методом проточной цитофлуометрии. We evaluated the ability of oxidized glutathione (GSSG), as well as its dosage forms: GSSG in a 0.003% hydrogen peroxide solution, or GSSG in a 0.1% inosine solution, or GSSG in a 0.1% cystamine solution, to influence the proliferation and / or programmed death of normal and transformed cells. For this, GSSG or its dosage forms were incubated for 24 hours with HL-60 myeloid cells and normal lymphocytes obtained from the peripheral blood of healthy volunteers, followed by flow cytometry.

Венозную кровь от здоровых доноров собирали в гепаринизированные пробирки, тестированные на отсутствие эндотоксина. Мононуклеарную фракцию лейкоцитов крови получали центрифугированием в градиенте плотности фиколл-метризоат (Histopaque, Sigma). Концентрацию клеток доводили до 2•10⁶ клеток на 1 мл полной культуральной среды (RPMI 1640), содержащей 20 мМ HEPES, 2 мМ глутамина, 50 мкг/мл гентамицина и 10% эмбриональную телячью сыворотку. Жизнеспособность клеток оценивали в тесте с трипановым синим и клеточную суспензию разносили в лунки 96- луночных планшетов из расчета 200 000 клеток на лунку.Venous blood from healthy donors was collected in heparinized tubes tested for endotoxin absence. The mononuclear fraction of blood leukocytes was obtained by centrifugation in a density gradient ficoll metrizoate (Histopaque, Sigma). The cell concentration was adjusted to 2 • 10 ⁶ cells per 1 ml of complete culture medium (RPMI 1640) containing 20 mM HEPES, 2 mM glutamine, 50 μg / ml gentamicin and 10% fetal calf serum. Cell viability was evaluated in a trypan blue assay and the cell suspension was plated in 96-well plates at a rate of 200,000 cells per well.

Клетки перевиваемой миелоидной линии HL-60 выращивались в среде RPMI 1640 с добавкой 10% эмбриональной телячьей сыворотки. Культивирование проводили в закрытых флаконах, объем среды 12 мл, смену среды проводили каждые 4 дня путем центрифугирования. Характер роста клеток - суспензионный. HL-60 transplantable myeloid line cells were grown in RPMI 1640 medium supplemented with 10% fetal calf serum. The cultivation was carried out in closed vials, the volume of the medium was 12 ml, the medium was changed every 4 days by centrifugation. The nature of cell growth is suspension.

Оценивали влияние исследуемого раствора GSSG (5000 μг/мл), а также GSSG в 0.003% растворе перекиси водорода, GSSG в 0.1% растворе инозина, и GSSG в 0.1% растворе цистамина. Каждый из растворов оценивали по 6 пробам для нормальных лимфоцитов и клеток HL-60. Каждый из растворов тестируемых веществ в количестве 50 μл добавлялся в ту или иную культуральную среду и клетки культивировали в течение 24-96 часов. Затем они тестировались с помощью проточной цитофлуометрии на предмет содержания ДНК в клеточных ядрах. В случае наступления апоптотической гибели наблюдалось уменьшение доли клеточных ядер с нормальным содержанием ДНК и увеличивалось число ядер с существенно меньшим содержанием ДНК. The effect of the test solution of GSSG (5000 μg / ml), as well as GSSG in a 0.003% solution of hydrogen peroxide, GSSG in a 0.1% solution of inosine, and GSSG in a 0.1% solution of cystamine were evaluated. Each of the solutions was evaluated using 6 samples for normal lymphocytes and HL-60 cells. Each of the solutions of the tested substances in an amount of 50 μl was added to a particular culture medium and the cells were cultured for 24-96 hours. They were then tested by flow cytometry for DNA in the cell nuclei. In the event of apoptotic death, a decrease in the proportion of cell nuclei with normal DNA content was observed, and the number of nuclei with significantly lower DNA content increased.

Процедура анализа заключалась в следующем: после инкубации клетки центрифугированием переводились в стандартный фосфатный изотонический буфер pH 7,4, содержащий РНК-азу A (20 мкг/мл), бромистый этидий (флуометрический индикатор двойных спиралей нуклеиновой кислоты, 10 мкг/мл) и MgCl₂ (5 мМ). Затем клетки вскрывались добавлением не-ионного детергента Triton X-100 (конечная концентрация 0,1%). Полученная в результате суспензия клеточных ядер анализировалась на проточном цитофлуометре с аргоновым лазером в качестве источника света (длина волны 488 нм). Регистрируемая красная флюоресценция связанного с ДНК бромистого этидия является мерой содержания ДНК в ядрах клеток. - Параллельно визуально анализировались изменения в морфологии изучаемых клеток соответствующих образцов.The analysis procedure was as follows: after incubation, the cells were transferred by centrifugation into a standard phosphate isotonic pH 7.4 buffer containing RNAase A (20 μg / ml), ethidium bromide (fluometric indicator of double helix nucleic acid, 10 μg / ml) and MgCl ₂ (5 mM). Then the cells were opened by the addition of the non-ionic detergent Triton X-100 (final concentration of 0.1%). The resulting suspension of cell nuclei was analyzed on a flow cytometer with an argon laser as a light source (wavelength 488 nm). The recorded red fluorescence of DNA-bound ethidium bromide is a measure of the DNA content in cell nuclei. - In parallel, changes in the morphology of the studied cells of the corresponding samples were visually analyzed.

Результаты исследования представлены в таблице 11, 12 и на фиг. 1. Как можно видеть из данных таблицы 11, добавление GSSG или его лекарственных форм стимулирует пролиферацию нормальных лимфоцитов здорового человека, что приводит к увеличению их количества, при этом проточный цитофлуометрический анализ не обнаружил каких-либо изменений, характерных для процессов апоптотической гибели клеток (см. фиг. 1в-1г). The results of the study are presented in table 11, 12 and in FIG. 1. As can be seen from the data of table 11, the addition of GSSG or its dosage forms stimulates the proliferation of normal lymphocytes in a healthy person, which leads to an increase in their number, while flow cytometric analysis did not reveal any changes characteristic of apoptotic cell death processes (see Fig. 1c-1d).

Исследования, проведенные на клеточных культурах трансформированных клеток миелоидной линии HL-60, выявили способность GSSG, а также его лекарственных форм, тормозить пролиферацию трансформированных клеток. Данные таблицы 12 показывают, что композиции GSSG с перекисью водорода, инозином и цистамином обладают большей способностью ингибировать пролиферацию клеток HL-60 в сравнении с GSSG, применяемым в монорежиме. Проведенный проточный цитофлуометрический анализ показал, что уменьшение клеточного роста клеток линии HL-60 сопровождается появлением характерных морфологических признаков апоптотической гибели: клетки из сферических становились многолопастными с множественными перетяжками; отмечалось уменьшение клеточных ядер с нормальным содержанием ДНК и увеличивалось число ядер с ненормально сниженным содержанием ДНК (фиг. 1а-1б). Studies conducted on cell cultures of transformed cells of the myeloid line HL-60, revealed the ability of GSSG, as well as its dosage forms, to inhibit the proliferation of transformed cells. The data in table 12 show that the compositions of GSSG with hydrogen peroxide, inosine and cystamine have a greater ability to inhibit the proliferation of HL-60 cells in comparison with GSSG used in mono mode. A flow cytometric analysis showed that a decrease in the cell growth of HL-60 cells is accompanied by the appearance of characteristic morphological signs of apoptotic death: spherical cells became multilobated with multiple constrictions; there was a decrease in cell nuclei with normal DNA content and an increase in the number of nuclei with an abnormally reduced DNA content (Fig. 1a-1b).

Таким образом, проведенные in vitro исследования позволяют говорить о наличии бифункциональной активности GSSG, а также его лекарственных форм, которые избирательно вызывают апоптотическую гибель в опухолевых клетках и замедляет их пролиферацию, при этом отсутствует какие-либо признаки апоптоза у нормальных клеток (лимфоцитов), а пролиферация последних отчетливо ускоряется. Использование GSSG в комбинации с инозином приводит к наиболее выраженному апоптотическому эффекту GSSG в отношении трансформированных клеток. Thus, in vitro studies suggest the presence of bifunctional activity of GSSG, as well as its dosage forms, which selectively cause apoptotic death in tumor cells and slows their proliferation, while there are no signs of apoptosis in normal cells (lymphocytes), and proliferation of the latter is clearly accelerated. The use of GSSG in combination with inosine leads to the most pronounced apoptotic effect of GSSG in relation to transformed cells.

Пример 5. Example 5

Влияние GSSG и его лекарственных форм на рост перевиваемых опухолей у мышей. The effect of GSSG and its dosage forms on the growth of transplantable tumors in mice.

Исследовалась противоопухолевая активность окисленного глутатиона (GSSG), а также его лекарственных форм в 0.003% растворе перекиси водорода, или в 0.1% растворе инозина, или в 0.1% растворе цистамина, на двух моделях опухолевого процесса у мышей, индуцированного введением клеток лейкемии P388 и лейкемии L1210. В рамках данного исследования оценивалось влияние 7-дневного применения исследуемых препаратов на динамику содержания цитокинов (IL-I; IL-2; IL-6; IFN -α; TNF) в крови мышей с перевитыми опухолями и у контрольных животных. Параллельно оценивали опухолевую прогрессию, используя два интегральных показателя: динамику увеличения массы тела мышей вследствие накопления асцитической жидкости и среднюю продолжительность жизни после введения. We studied the antitumor activity of oxidized glutathione (GSSG), as well as its dosage forms in a 0.003% hydrogen peroxide solution, or in a 0.1% inosine solution, or in a 0.1% cystamine solution, in two models of the tumor process in mice induced by the introduction of P388 leukemia cells and leukemia L1210. In the framework of this study, the effect of a 7-day use of the studied drugs on the dynamics of the content of cytokines (IL-I; IL-2; IL-6; IFN-α; TNF) in the blood of mice with inoculated tumors and in control animals was evaluated. At the same time, tumor progression was evaluated using two integral indicators: the dynamics of the increase in body weight of mice due to the accumulation of ascitic fluid and the average life expectancy after administration.

Исследование проводилось на мышах линии DBA/2 с массой тела животных 18-21 г. В начале проводили пассаж каждой из линий опухолевых клеток на 6 животных. Для этого культуры клеток, хранящиеся при температуре жидкого азота, размораживали и разводили в стерильном растворе Хенкса до концентрации 5•10⁶ клеток/мл 0.2 мл полученной суспензии клеток каждой линии внутрибрюшинно инокулировали 6 мышам.The study was conducted on mice of the DBA / 2 line with an animal body weight of 18-21 g. At the beginning, each of the tumor cell lines was passageed into 6 animals. For this, cell cultures stored at liquid nitrogen temperature were thawed and diluted in Hanks sterile solution to a concentration of 5 • 10 ⁶ cells / ml. 0.2 ml of the obtained suspension of cells of each line were inoculated intraperitoneally to 6 mice.

На 8-й день пассажа в случае клеток P388 и на 6-й день пассажа в случае клеток L1210 из брюшной полости извлекали асцитную жидкость и полученные образцы опухолевых клеток были использованы для проведения основных экспериментов. Асцитную жидкость разводили стерильным раствором Хенкса до концентрации: 5•10⁶ клеток/мл в случае клеток P388 и до концентрации 5•10⁵ клеток/мл в случае клеток L1210.On the 8th day of passage in the case of P388 cells and on the 6th day of passage in the case of L1210 cells, ascites fluid was removed from the abdominal cavity and the obtained tumor cell samples were used for basic experiments. The ascitic fluid was diluted with Hanks sterile solution to a concentration of: 5 • 10 ⁶ cells / ml in the case of P388 cells and to a concentration of 5 • 10 ⁵ cells / ml in the case of L1210 cells.

Для исследований с каждой из опухолевых линий были сформированы по 9 групп животных не менее 15-й мышей в каждой. Объем конечной инокулируемой суспензии составил 0.2 мл на мышь, доза инокулюма: 10⁶ клеток/мышь - в случае клеток P388 и 10⁵ клеток/мышь - в случае клеток L1210. Через 24 часа после инокуляции опухолевых клеток, животным начинали внутрибрюшинное введение исследуемых веществ или растворителей. Далее инъекции исследуемых веществ продолжали до 14-го дня исследования или до момента гибели животного. Объем инъекции - 0.01 мл/г массы тела животного.For studies from each of the tumor lines, 9 groups of animals of at least 15 mice in each were formed. The volume of the final inoculated suspension was 0.2 ml per mouse, inoculum dose: 10 ⁶ cells / mouse for P388 cells and 10 ⁵ cells / mouse for L1210 cells. 24 hours after the inoculation of tumor cells, animals began intraperitoneal administration of the test substances or solvents. Further, the injection of the test substances was continued until the 14th day of the study or until the death of the animal. The injection volume is 0.01 ml / g of body weight of the animal.

Для экспериментов с каждой из опухолевых линий было сформировано по 9 групп животных, описание которых приведено ниже. For experiments with each of the tumor lines, 9 groups of animals were formed, the description of which is given below.

Контрольные группы:
N 1 - интактные животные, получившие имитацию инъекции опухолевых клеток (инъекцию физиологического раствора), который вводился им в дальнейшем (интактные) в течение всего исследования;
N 2 - контрольные животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился растворитель исследуемых веществ (физиологический раствор).Control groups:
N 1 - intact animals that received an imitation of an injection of tumor cells (injection of physiological saline), which was introduced later (intact) throughout the study;
N 2 - control animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently injected with a solvent of the test substances (physiological saline).

Опытные группы:
N 3 - животные, получившие инъекции опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводилось исследуемое вещество (GSSG в физиологическом растворе) из расчета 5 мг/кг массы тела;
N 4 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился вариант лекарственной формы исследуемого вещества (GSSG в физиологическом растворе, содержащем 0.003% перекиси водорода) из расчета 5 мг GSSG на кг массы тела;
N 5 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился вариант лекарственной формы исследуемого вещества (GSSG в физиологическом растворе, содержащем 0.1% инозина) из расчета 5 мг GSSG на кг массы тела;
N 6 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился вариант лекарственной формы исследуемого вещества (GSSG в физиологическом растворе, содержащем 0.1% цистамина) из расчета 5 мг GSSG на кг массы тела;
N 7 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился вариант компонента лекарственной формы исследуемого вещества (0.003% раствор перекиси водорода) без GSSG;
N 8 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился вариант компонента лекарственной формы исследуемого вещества (0.1% раствор инозина) без GSSG;
N 9 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился вариант компонента лекарственной формы исследуемого вещества (0.1% раствор цистамина) без GSSG.Experienced groups:
N 3 - animals that received injections of tumor cells, which were subsequently injected with the test substance (GSSG in physiological saline) at the rate of 5 mg / kg body weight;
N 4 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently injected with a variant of the dosage form of the test substance (GSSG in physiological solution containing 0.003% hydrogen peroxide) at the rate of 5 mg GSSG per kg body weight;
N 5 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently introduced with a variant of the dosage form of the test substance (GSSG in physiological solution containing 0.1% inosine) at the rate of 5 mg GSSG per kg body weight;
N 6 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently introduced with a variant of the dosage form of the test substance (GSSG in physiological solution containing 0.1% cystamine) at the rate of 5 mg GSSG per kg body weight;
N 7 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently introduced with a variant of the component of the dosage form of the test substance (0.003% hydrogen peroxide solution) without GSSG;
N 8 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently introduced with a variant of the component of the dosage form of the test substance (0.1% inosine solution) without GSSG;
N 9 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently introduced with a variant of the component of the dosage form of the test substance (0.1% cystamine solution) without GSSG.

В таблицах13 и 14 приведены результаты оценки эффективности влияния исследуемых веществ как на эндогенную продукцию цитокинов, так и данные по интегративным показателям прогрессии опухолевого процесса. Полученные результаты свидетельствует о том, что и GSSG, и его лекарственные формы обладают отчетливым цитокинактивирующим действием, достоверно (относительно контрольных групп) замедляя накопление асцитической жидкости и увеличивая среднюю продолжительность жизни. GSSG и GSSG в 0.003% растворе перекиси водорода в большей степени повышают содержание в крови IL-1 и IFN -α; тогда как GSSG в комбинации с 0.1% раствором инозина и 0.1% раствором цистамина обуславливают более высокие уровни IL-2, IL-6, TNF -α сыворотке крови. Tables 13 and 14 show the results of evaluating the effectiveness of the studied substances both on the endogenous production of cytokines and data on integrative indicators of the progression of the tumor process. The results obtained indicate that both GSSG and its dosage forms have a distinct cytokine-activating effect, reliably (relative to control groups) slowing down the accumulation of ascitic fluid and increasing the average life expectancy. GSSG and GSSG in a 0.003% hydrogen peroxide solution increase the blood levels of IL-1 and IFN-α to a greater extent; whereas GSSG in combination with 0.1% inosine solution and 0.1% cystamine solution cause higher levels of IL-2, IL-6, TNF-α in blood serum.

Максимальный уровень таких показателей противоопухолевого действия исследуемых веществ, как торможение накопления асцита и продолжительность жизни получена в обеих моделях опухолевого процесса (лейкемия P388 и L1210) в случае применения GSSG в комбинации с 0.1% растворе цистамина. The maximum level of such antitumor effects of the studied substances as inhibition of ascites accumulation and life expectancy was obtained in both tumor models (leukemia P388 and L1210) in the case of GSSG in combination with 0.1% cystamine solution.

Таким образом, применение заявляемого способа для лечения мышей с перевитыми опухолями приводит: к выраженному увеличению эндогенной продукции IL-2, IL-6, IFN -α и TNF -α; к достоверному торможению прогрессии перевиваемых опухолей и увеличению средней продолжительности жизни. Thus, the use of the proposed method for the treatment of mice with transplanted tumors leads to: a pronounced increase in the endogenous production of IL-2, IL-6, IFN-α and TNF-α; to reliable inhibition of the progression of transplanted tumors and an increase in average life expectancy.

Неизвестные ранее свойства известного вещества - окисленного глутатиона (GSSG) и его фармацевтически активных композиций, содержащих 0.003% раствор перекиси водорода, или 0.1% раствор инозина, или 0.1% раствор цистамина - установленные в ходе доклинических исследований, позволяют утверждать, что GSSG и его лекарственные формы обладают выраженной фармакологической активностью, а также лечебным эффектом. Это обосновывает показания к применению соответствующих лекарственных форм как самого GSSG, так и GSSG в комбинации с фармацевтически приемлемыми компонентами, способными увеличить время полужизни окисленного глутатиона, для профилактики и лечения заболеваний, при которых стимуляция эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов целесообразна и считается таковой специалистами в соответствующей области техники. Previously unknown properties of the known substance - oxidized glutathione (GSSG) and its pharmaceutically active compositions containing 0.003% hydrogen peroxide solution, or 0.1% inosine solution, or 0.1% cystamine solution - established during preclinical studies, suggest that GSSG and its medicinal products forms have a pronounced pharmacological activity, as well as a therapeutic effect. This substantiates the indications for the use of appropriate dosage forms of both GSSG and GSSG in combination with pharmaceutically acceptable components that can increase the half-life of oxidized glutathione for the prevention and treatment of diseases in which stimulation of the endogenous production of cytokines and hematopoietic factors is appropriate and is considered to be such by specialists in relevant technical field.

Примеры клинического применения лекарственных форм GSSG, приведенные далее (примеры NN 9-26), подтверждают идею использования GSSG как индуктора эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов, и утверждают метод лечения заболеваний, основанного на данных свойствах GSSG. The clinical applications of GSSG dosage forms given below (examples NN 9-26) confirm the idea of using GSSG as an inducer of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, and approve a method of treating diseases based on these properties of GSSG.

Пример 6. Example 6

Влияние литиевой соли окисленного глутатиона и S-тиоэтиламина глутатиона и их лекарственных форм на процесс апоптоза нормальных и трансформированных клеток. The effect of the lithium salt of oxidized glutathione and S-thioethylamine glutathione and their dosage forms on the apoptosis of normal and transformed cells.

Оценивали способность литиевой соли окисленного глутатиона (Li-GSSG) и S-тиоэтиламина (дериват окисленного глутатиона - ТЭА), а также их лекарственных форм, содержащих перекись водорода (0,003%), или инозин (0,1%), или цистамин (0,1%), или диметилсульфоксид (ДМСО) (7%), влиять на процессы программированной клеточной гибели (апоптоза) в отношении нормальных и опухолевых клеток Для этих целей указанные вещества инкубировали в течение 72 часов с клетками эмбриональных фибробластов крысы (REF) и с теми же клетками, но трансформированными геном аденовируса E1A в комплементации с ras-онкогеном (клеточная линия e-ras). Последующая оценка клеточности экспериментальных моделей осуществлялась посредством подсчета количества клеток на миллилитр (для клеточной линии REF) и количества клонов в чашке (для клеточной линии e-ras). The ability of oxidized glutathione lithium salt (Li-GSSG) and S-thioethylamine (oxidized glutathione derivative - TEA), as well as their dosage forms containing hydrogen peroxide (0.003%), or inosine (0.1%), or cystamine (0 , 1%), or dimethyl sulfoxide (DMSO) (7%), influence the processes of programmed cell death (apoptosis) in relation to normal and tumor cells. For these purposes, these substances were incubated for 72 hours with rat embryonic fibroblast cells (REF) and the same cells, but transformed with the adenovirus E1A gene into implementation with ras-oncogen (cell line e-ras). Subsequent assessment of the cellularity of the experimental models was carried out by counting the number of cells per milliliter (for the REF cell line) and the number of clones in the dish (for the e-ras cell line).

Клетки выращивались в среде DMEM с добавкой 10% эмбриональной телячьей сыворотки и 50 μг/мл гентамицина. Культивирование проводили в чашках Петри. Клетки REF культивировались в чашках Петри с плотностью 800000 клеток на мл, оценка клеточности производилась на через 0, 24, 48 и 72 часа инкубации с исследуемыми веществами. Клетки e-ras рассевали с плотностью 300 клеток на 5-ти сантиметровую чашку. После 7 дней роста клеток e-ras определяли количество клонов, и исследуемые вещества добавляли в чашки. Cells were grown in DMEM supplemented with 10% fetal calf serum and 50 μg / ml gentamicin. Cultivation was carried out in Petri dishes. REF cells were cultured in Petri dishes with a density of 800,000 cells per ml, the cellularity was evaluated after 0, 24, 48 and 72 hours of incubation with the test substances. E-ras cells were scattered at a density of 300 cells per 5 cm dish. After 7 days of e-ras cell growth, the number of clones was determined and the test substances were added to the plates.

Оценивали влияние исследуемых растворов Li-GSSG и ТЭА (5000 μг/мл), а также растворы Li-GSSG и ТЭА, содержащие 0,003% раствор перекиси водорода, или 0,1% раствор инозина, или 0,1% раствор цистамина, или 7% раствор ДМСО. Каждый из растворов оценивали по 6 клеточным моделям для каждой клеточной линии. The effect of the studied Li-GSSG and TEA solutions (5000 μg / ml), as well as Li-GSSG and TEA solutions containing a 0.003% hydrogen peroxide solution, or 0.1% inosine solution, or 0.1% cystamine solution, or 7, were evaluated. % DMSO solution. Each of the solutions was evaluated using 6 cell models for each cell line.

Тестируемый раствор в количестве 50 мкл добавлялся в ту или иную клеточную культуру и клетки культивировали в течение 24-72 часов. В качестве тест-системы для оценки регулирования апоптоза использовали УФ-индуцированную клеточную гибель в дозе 4 Дж. Исследуемые вещества добавляли сразу после облучения. Каждые 24 часа определяли количество клеток в мл (для клеточной линии REF) и количество клонов (для e-ras клеток). Для определения фрагментации ДНК использовали метод электрофореза в агарозном геле со стандартными установками. The test solution in an amount of 50 μl was added to a particular cell culture and the cells were cultured for 24-72 hours. A 4-J UV-induced cell death was used as a test system for assessing apoptosis regulation. The test substances were added immediately after irradiation. Every 24 hours, the number of cells in ml (for the REF cell line) and the number of clones (for e-ras cells) were determined. To determine DNA fragmentation, an agarose gel electrophoresis method with standard settings was used.

Результаты исследования представлены в таблицах 15-18. Таблицы 15 и 16 показывают, что присутствие литиевой соли GSSG, ТЭА и их лекарственных форм не вызывают апоптоз нормальных клеток (клетки REF). Исследования, выполненные на клетках e-ras, показывают способность литиевой соли GSSG и ТЭА, так же как и их лекарственных форм, индуцировать клеточную гибель трансформированных клеток. The results of the study are presented in tables 15-18. Tables 15 and 16 show that the presence of lithium salt of GSSG, TEA and their dosage forms do not cause apoptosis of normal cells (REF cells). Studies performed on e-ras cells show the ability of the lithium salt of GSSG and TEA, as well as their dosage forms, to induce cell death of transformed cells.

В таблицах 17 и 18 показано, что присутствие литиевой соли GSSG, ТЭА и их лекарственных форм не усиливают апоптоз, вызванный УФ-облучением, у нормальных клеток (клетки REF). Исследования, выполненные на клетках e-ras, показали способность литиевой соли GSSG, ТЭА и их лекарственных форм потенцировать гибель трансформированных клеток (клетки e-ras). Tables 17 and 18 show that the presence of lithium salt of GSSG, TEA and their dosage forms do not enhance apoptosis caused by UV radiation in normal cells (REF cells). Studies performed on e-ras cells showed the ability of lithium salt GSSG, TEA and their dosage forms to potentiate the death of transformed cells (e-ras cells).

Таким образом, полученные результаты позволяют говорить о наличии бифункциональных свойств литиевой соли GSSG, ТЭА и их лекарственных форм, которые селективно индуцируют апоптоз-подобную гибель опухолевых клеток без каких-либо признаков апоптоза у нормальных клеток. Кроме того, все исследуемые вещества оказались способны уменьшить процессы апоптоза, индуцированного УФ-облучением, в нормальных клетках и потенцировать эти процессы в трансформированных клетках. Применение ТЭА в комбинации с ДМСО давало наиболее выраженный эффект, чем литиевая соль GSSG, в отношении трансформированных клеток. Thus, the obtained results suggest the presence of bifunctional properties of lithium salt GSSG, TEA and their dosage forms, which selectively induce apoptosis-like death of tumor cells without any signs of apoptosis in normal cells. In addition, all the studied substances were able to reduce the processes of apoptosis induced by UV radiation in normal cells and to potentiate these processes in transformed cells. The use of TEA in combination with DMSO gave the most pronounced effect than the lithium salt of GSSG in relation to transformed cells.

Пример 7. Example 7

Влияние литиевой соли окисленного глутатиона, S-тиоэтиламина и их лекарственных форм на рост перевиваемых опухолей у мышей. The effect of lithium salt of oxidized glutathione, S-thioethylamine and their dosage forms on the growth of transplantable tumors in mice.

Исследовалась противоопухолевая активность литиевой соли окисленного глутатиона GSSG (Li-GSSG), S-тиоэтиламина (ТЭА), а также их лекарственных форм, содержащих 0,003% перекись водорода, или 0,1% инозин, или 0,1% цистамин, или 7% диметилсульфоксид (ДМСО) на трех моделях опухолевого процесса, индуцированного интраперитонеальной инокуляцией клеток лейкемии P388, лейкемии L1210 и аденокарциномы Эрлиха. В рамках данного исследования оценивалось влияние 7-дневного применения исследуемых препаратов на опухолевую прогрессию, которая оценивалась по двум интегральным показателям: динамике увеличения массы тела вследствие накопления асцитической жидкости и средней продолжительности жизни после инокуляции. We studied the antitumor activity of the lithium salt of oxidized glutathione GSSG (Li-GSSG), S-thioethylamine (TEA), as well as their dosage forms containing 0.003% hydrogen peroxide, or 0.1% inosine, or 0.1% cystamine, or 7% dimethyl sulfoxide (DMSO) on three models of the tumor process induced by intraperitoneal inoculation of leukemia cells P388, leukemia L1210 and Ehrlich adenocarcinoma. In the framework of this study, the effect of a 7-day use of the studied drugs on tumor progression was assessed, which was assessed by two integral indicators: the dynamics of weight gain due to accumulation of ascitic fluid and average life expectancy after inoculation.

Исследование проводилось на мышах линии DBA/2, масса тела 18-21 г. Во-первых, осуществлялся пассаж опухолевых клеток, используя по 6 животных из каждой клеточной линии. Для этого культуры клеток, хранящиеся при температуре жидкого азота, размораживали и разводили в стерильном растворе Хенкса до концентрации 5•10⁶ клеток/мл. Затем 0.2 мл полученной суспензии клеток каждой линии инокулировали внутрибрюшинно 6 мышам.The study was carried out on mice of the DBA / 2 line, body weight 18-21 g. First, the passage of tumor cells was carried out using 6 animals from each cell line. For this, cell cultures stored at liquid nitrogen temperature were thawed and diluted in Hanks sterile solution to a concentration of 5 • 10 ⁶ cells / ml. Then 0.2 ml of the obtained cell suspension of each line was inoculated intraperitoneally to 6 mice.

На 8-й день пассажа клеток P388, на 6-й день пассажа клеток L1210 и 18 день после инокуляции клеток аденокарциномы Эрлиха была собрана асцитическая жидкость. Полученные таким образом образцы асцитической жидкости были использованы для проведения основных экспериментов. Асцитическую жидкость разводили стерильным раствором Хенкса так, чтобы концентрация клеток была 5•10⁶ клеток/мл для клеток P388 и аденокарциномы Эрлиха и 5•10⁵ клеток/мл для клеток L1210.On the 8th day of the passage of P388 cells, on the 6th day of the passage of L1210 cells and 18 days after inoculation of Ehrlich adenocarcinoma cells, ascites fluid was collected. The ascitic fluid samples obtained in this way were used for basic experiments. The ascitic fluid was diluted with sterile Hanks solution so that the cell concentration was 5 • 10 ⁶ cells / ml for P388 cells and Ehrlich adenocarcinoma and 5 • 10 ⁵ cells / ml for L1210 cells.

Были сформированы 16 групп животных (не менее 15-й мышей в каждой) для проведения исследования с каждой линией опухолевых клеток. Мышам провели инокуляцию конечной суспензии опухолевых клеток по 0.2 мл на мышь (10⁶ клеток на мышь - для клеток P388 и аденокарциномы Эрлиха, 10⁵ клеток на мышь - для клеток L1210).16 groups of animals were formed (at least 15 mice in each) for the study with each line of tumor cells. Mice were inoculated with a final suspension of tumor cells of 0.2 ml per mouse (10 ⁶ cells per mouse for P388 cells and Ehrlich adenocarcinoma, 10 ⁵ cells per mouse for L1210 cells).

Через 24 часа после инокуляции опухолевых клеток, животным сделали инъекции исследуемых веществ и растворителей. Инъекции исследуемых веществ продолжали проводить ежедневно до 14-го дня исследования или до гибели животного. Объем инъекции - 0.01 мл/г массы тела животного. 24 hours after the inoculation of tumor cells, the animals were injected with the test substances and solvents. Injections of the test substances were continued daily until the 14th day of the study or until the death of the animal. The injection volume is 0.01 ml / g of body weight of the animal.

Ниже приведено описание шестнадцати групп животных, сформированных для проведения эксперимента с каждой линией опухолевых клеток:
Контрольные группы:
N 1 - интактные животные, получившие имитацию инъекции опухолевых клеток (инъекции физиологического раствора), которым вводили физиологический раствор в течение всего эксперимента;
N 2 - контрольные животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился растворитель исследуемого вещества (физиологический раствор).The following is a description of sixteen groups of animals formed to conduct an experiment with each line of tumor cells:
Control groups:
N 1 - intact animals that received an imitation of an injection of tumor cells (injection of saline), which were injected with saline throughout the experiment;
N 2 - control animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently injected with a solvent of the test substance (physiological saline).

Опытные группы:
N 3 - животные, получавшие инъекции опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводилось исследуемое вещество (ТЭА в физиологическом растворе) из расчета 5 мг/кг массы тела;
N 4 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился вариант лекарственной формы исследуемого вещества (ТЭА в физиологическом растворе, содержащем 0.003% перекиси водорода) из расчета 5 мг на кг массы тела;
N 5 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился вариант лекарственной формы исследуемого вещества (ТЭА в физиологическом растворе, содержащем 0.1% инозина) из расчета 5 мг на кг массы тела;
N 6 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился вариант лекарственной формы исследуемого вещества (ТЭА в физиологическом растворе, содержащем 0.1% цистамина) из расчета 5 мг на кг массы тела;
N 7 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился вариант лекарственной формы исследуемого вещества (ТЭА в физиологическом растворе, содержащем 7% ДМСО) из расчета 5 мг на кг массы тела;
N 8 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводилось исследуемое вещество (Li соль GSSG, растворенная в физиологическом растворе) из расчета 5 мг/кг массы тела;
N 9 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился вариант лекарственной формы исследуемого вещества (Li соль GSSG, растворенная в физиологическом растворе, содержащем 0.003% перекиси водорода) из расчета 5 мг на кг массы тела;
N 10 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился вариант лекарственной формы исследуемого вещества (Li соль GSSG, растворенная в физиологическом растворе, содержащем 0.1% инозина) из расчета 5 мг на кг массы тела;
N 11 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился вариант лекарственной формы исследуемого вещества (Li соль GSSG, растворенная в физиологическом растворе, содержащем 0.1% цистамина) из расчета 5 мг на кг массы тела;
N 12 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился вариант лекарственной формы исследуемого вещества (Li соль GSSG, растворенная в физиологическом растворе, содержащем 7% ДМСО) из расчета 5 мг на кг массы тела;
N 13 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился компонент варианта лекарственной формы исследуемого вещества (0.003% раствор перекиси водорода), без GSSG;
N 14 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился компонент варианта лекарственной формы исследуемого вещества (0.1% раствор инозина), без GSSG;
N 15 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился компонент варианта лекарственной формы исследуемого вещества (0.1% раствор цистамина), без GSSG;
N 16 - животные, получившие инъекцию опухолевых клеток, которым в дальнейшем вводился компонент варианта лекарственной формы исследуемого вещества (7% раствор ДМСО), без GSSG.Experienced groups:
N 3 - animals that received injections of tumor cells, which were subsequently injected with the test substance (TEA in saline) at the rate of 5 mg / kg body weight;
N 4 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently introduced with a variant of the dosage form of the test substance (TEA in physiological solution containing 0.003% hydrogen peroxide) at the rate of 5 mg per kg of body weight;
N 5 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently introduced with a variant of the dosage form of the test substance (TEA in physiological solution containing 0.1% inosine) at the rate of 5 mg per kg of body weight;
N 6 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently introduced with a variant of the dosage form of the test substance (TEA in physiological solution containing 0.1% cystamine) at the rate of 5 mg per kg of body weight;
N 7 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently introduced with the dosage form of the test substance (TEA in physiological solution containing 7% DMSO) at the rate of 5 mg per kg of body weight;
N 8 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently injected with the test substance (Li salt GSSG dissolved in physiological saline) at the rate of 5 mg / kg body weight;
N 9 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently introduced with a variant of the dosage form of the test substance (Li salt GSSG dissolved in physiological solution containing 0.003% hydrogen peroxide) at the rate of 5 mg per kg of body weight;
N 10 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently introduced with a variant of the dosage form of the test substance (Li salt GSSG, dissolved in physiological solution containing 0.1% inosine) at the rate of 5 mg per kg of body weight;
N 11 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently introduced with a variant of the dosage form of the test substance (Li salt GSSG dissolved in physiological solution containing 0.1% cystamine) at the rate of 5 mg per kg of body weight;
N 12 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently introduced with a variant of the dosage form of the test substance (Li salt GSSG dissolved in physiological solution containing 7% DMSO) at the rate of 5 mg per kg of body weight;
N 13 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently injected with a component of a variant of the dosage form of the test substance (0.003% hydrogen peroxide solution), without GSSG;
N 14 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently injected with a component of a variant of the dosage form of the test substance (0.1% inosine solution), without GSSG;
N 15 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently injected with a component of a variant of the dosage form of the test substance (0.1% cystamine solution), without GSSG;
N 16 - animals that received an injection of tumor cells, which were subsequently injected with a component of a variant of the dosage form of the test substance (7% DMSO solution), without GSSG.

В таблицах 19-21 приведены результаты оценки влияния исследуемых веществ на интегральные показатели опухолевой прогрессии. Tables 19-21 show the results of evaluating the effect of the test substances on the integral indicators of tumor progression.

Наиболее выраженный противоопухолевый эффект, характеризующийся уменьшением накопления асцитической жидкости и увеличения средней продолжительности жизни для каждой опухолевой модели (лейкемия P388 и L1210, аденокарцинома Эрлиха), был получен при использовании ТЭА в комбинации с 0.1% инозином и 7% ДМСО. The most pronounced antitumor effect, characterized by a decrease in the accumulation of ascitic fluid and an increase in the average life expectancy for each tumor model (leukemia P388 and L1210, Ehrlich adenocarcinoma), was obtained using TEA in combination with 0.1% inosine and 7% DMSO.

Пример 8. Example 8

Влияние цинковой соли GSSG, S-аденозил-метионина-GSSG и их лекарственных форм на течение экспериментального аллергического энцефаломиелита (ЭАЭ). The effect of the zinc salt of GSSG, S-adenosyl-methionine-GSSG and their dosage forms on the course of experimental allergic encephalomyelitis (EAE).

На модели ЭАЭ, являющегося экспериментальной моделью рассеянного склероза, исследовали действие цинковой соли GSSG в 0.003% растворе H₂O₂ S-аденозил-метионина-GSSG в 5% растворе аскорбиновой кислоты на динамику течения патологического процесса.On the model of EAE, which is an experimental model of multiple sclerosis, we studied the effect of the zinc salt GSSG in a 0.003% solution of H ₂ O ₂ S-adenosyl-methionine-GSSG in a 5% solution of ascorbic acid on the dynamics of the pathological process.

В рамках данного исследования оценивали воздействие 10-дневного курса названных комбинационных лекформ GSSG на клеточный состав крови (содержание лейкоцитов, лимфоцитов, моноцитов и нейтрофилов). С целью оценки выраженности клеточной гиперчувствительности к основному белку миелина и антигену мембран нейронов исследовали in vitro миграционную активность лейкоцитов периферической крови в присутствии данных антигенов. Использован капиллярный метод реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ). In the framework of this study, we evaluated the effect of a 10-day course of the indicated GSSG combination leforms on the cellular composition of the blood (the content of leukocytes, lymphocytes, monocytes and neutrophils). In order to assess the severity of cellular hypersensitivity to the main myelin protein and the antigen of neuronal membranes, the migration activity of peripheral blood leukocytes in the presence of these antigens was studied in vitro. The capillary method of the inhibition of leukocyte migration (RTML) was used.

Исследование проводили на самцах морских свинок с массой тела 400-500 г. The study was conducted on male guinea pigs with a body weight of 400-500 g.

Вещество, способствующее развитию энцефалита - основной белок миелина (ОБМ) - получали из бычьего спинного мозга с использованием метода колоночной хроматографии и эмульгировали в полном адъюванте Фрейнда. Иммунизацию животных проводили посредством подкожного введения энцефалит-индуцирующей смеси в передние лапки (ОБМ + полный адъювант Фрейнда). Латентный период клинического проявления ЭАЭ в среднем составлял 14-15 дней, минимально - 12 дней. A substance contributing to the development of encephalitis - the main protein of myelin (MBP) - was obtained from bovine spinal cord using the method of column chromatography and emulsified in complete Freund's adjuvant. Immunization of animals was carried out by subcutaneous injection of an encephalitis-inducing mixture into the forelegs (MBP + Freund's complete adjuvant). The latent period of the clinical manifestation of EAE averaged 14-15 days, at least 12 days.

Контрольные группы:
N 1 - Интактные животные, которым вводили физиологический раствор;
N 2 - Животные, которым вводили энцефалит-индуцирующую смесь, затем физиологический раствор.Control groups:
N 1 - Intact animals that were injected with saline;
N 2 - Animals that were injected with an encephalitis-inducing mixture, then saline.

Экспериментальные группы:
N 3 - Животные, которые получали энцефалит-индуцирующую смесь и цинковую соль глутатиона (GSSG-Zn) в 0.003% растворе H₂O₂ (5 мг GSSG на кг массы);
N 4 - Животные, которые получали энцефалит-индуцирующую смесь, затем S-тиоэтиламин-GSSG в 5% растворе аскорбиновой кислоты, 5 мг основания GSSG на кг веса тела.Experimental groups:
N 3 - Animals that received the encephalitis-inducing mixture and the glutathione zinc salt (GSSG-Zn) in a 0.003% solution of H ₂ O ₂ (5 mg GSSG per kg mass);
N 4 - Animals that received the encephalitis-inducing mixture, then S-thioethylamine-GSSG in 5% solution of ascorbic acid, 5 mg of GSSG base per kg of body weight.

Показатели неврологического статуса:
1 мышечная слабость, дискоординация движений;
2 парез лапок, атония мочевого пузыря, расстройство мочеиспускания;
3 моторный и функциональный паралич тазовых органов;
4 расстройства циркуляции крови и терморегуляции;
5 агония, дыхание по Шейну-Стоксу.Neurological status indicators:
1 muscle weakness, discoordination of movements;
2 paresis of the legs, atony of the bladder, urination disorder;
3 motor and functional paralysis of the pelvic organs;
4 disorders of blood circulation and thermoregulation;
5 agony, Shane-Stokes breathing.

Методы оценки клеточного иммунитета
1. Реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) - вариант реакции Гиперчувствительности Замедленного Типа in vitro. Метод основан на изменении миграционной активности лейкоцитов периферической крови за время контакта с ОБМ в стеклянных капиллярах. Зоны миграции измеряют посредством микроскопа при использовании окуляр микрометра. Индекс миграции рассчитывают как отношение протяженности зоны миграции клеток под воздействием антигена к протяженности зоны спонтанной миграции (без воздействия антигена). Статистически значимым является изменение величины индекса миграции более чем в 0.2, т.е. индекс миграции меньше, чем 0.8, рассматривается как ее подавление.Cell Immunity Assessment Methods
1. The leukocyte migration inhibition reaction (RTML) is an in vitro variant of the Slow Type Hypersensitivity reaction. The method is based on a change in the migration activity of peripheral blood leukocytes during contact with MBP in glass capillaries. Migration zones are measured using a microscope using an eyepiece micrometer. The migration index is calculated as the ratio of the length of the zone of migration of cells under the influence of antigen to the length of the zone of spontaneous migration (without exposure to antigen). Statistically significant is a change in the migration index of more than 0.2, i.e. a migration index less than 0.8 is considered to be its suppression.

2. Спонтанная адгезия лейкоцитов крови и ее изменения за время контакта с ОБМ. Миграция клеток крови через эндотелий сосудов является ключевым моментом в развитии повреждений, связанных с воспалением, при ЭАЭ. Данный процесс определяется сочетанным воздействием молекул адгезии, экспрессированных на лейкоцитах и эндотелии. Супрессия адгезивных свойств лейкоцитов антигеном указывает на специфическую сенсибилизацию иммунизированных животных; изменения в этом индексе при ингибировании характеризуют иммунотропные свойства препарата в отношении клеточного иммунитета. 2. Spontaneous adhesion of blood leukocytes and its changes during contact with MBP. The migration of blood cells through the vascular endothelium is a key point in the development of inflammation-related injuries in EAE. This process is determined by the combined effect of adhesion molecules expressed on white blood cells and endothelium. The suppression of the adhesive properties of leukocytes by an antigen indicates specific sensitization of immunized animals; changes in this index during inhibition characterize the immunotropic properties of the drug in relation to cellular immunity.

3. Адгезивную активность клеток изучали посредством флуоресцентной оценки адгезии к микропанелям Flakon Plastic 3034 и выражали как число клеток, у которых произошла спонтанная адгезия или адгезия в результате антигенного воздействия к панелям. 3. The adhesive activity of the cells was studied by means of a fluorescence assessment of adhesion to Flakon Plastic 3034 micropanels and expressed as the number of cells that had spontaneous adhesion or adhesion as a result of antigenic exposure to the panels.

Подсчет индекса адгезии:
(1-адгезия под воздействием антигена/спонтанная адгезия)•100 случаев адгезии
Индекс >30 показывает реакцию супрессии спонтанной адгезии.Adhesion Index Calculation:
(1-adhesion by antigen / spontaneous adhesion) • 100 cases of adhesion
Index> 30 shows the suppression reaction of spontaneous adhesion.

Через 24 часа после завершения 10-дневного введения исследуемых веществ выжившие животные были умерщвлены и проведен подсчет количества спленоцитов в стерильных условиях. Одновременно проводили забор крови для подсчета ее клеточного состава. 24 hours after completion of the 10-day administration of the test substances, the surviving animals were euthanized and the number of splenocytes was counted under sterile conditions. At the same time, blood was taken to calculate its cellular composition.

Данные, отражающие влияние исследуемых веществ на выживаемость и неврологические показатели животных, представлены в таблицах 22 и 23. Согласно приведенным данным, использование Zn-GSSG в 0.003% растворе H₂O₂ увеличивает выживаемость животных и существенно снижает неврологические симптомы ЭАЭ.Data reflecting the influence of the test substances on the survival and neurological parameters of animals are presented in Tables 22 and 23. According to the data presented, the use of Zn-GSSG in a 0.003% H ₂ O ₂ solution increases the survival of animals and significantly reduces the neurological symptoms of EAE.

В таблицах 24 и 25 представлены результаты, позволяющие выявить влияние исследуемых веществ на иммунологические параметры при ЭАЭ, которые демонстрируют значительный эффект исследуемых веществ на параметры сенсибилизации лимфоцитов крови к антигенам мозга. В то же время, происходит существенное уменьшение степени сенсибилизации лимфоцитов в РТАЛ (таблица 24) и РТМЛ (таблица 25). Tables 24 and 25 present the results that allow us to identify the effect of the test substances on the immunological parameters in EAE, which demonstrate a significant effect of the test substances on the sensitization parameters of blood lymphocytes to brain antigens. At the same time, there is a significant decrease in the degree of sensitization of lymphocytes in RTAL (table 24) and RTML (table 25).

Пример 9. Example 9

Влияние лекарственной формы GSSG на эндогенную продукцию цитокинов и эритропоэтина у людей, страдающих онкологическими заболеваниями. The effect of the dosage form of GSSG on the endogenous production of cytokines and erythropoietin in people suffering from cancer.

Приведены клинические данные, свидетельствующие о регулирующем влиянии GSSG на эндогенную продукцию цитокинов и гемопоэтических факторов у людей, страдающих онкологическими заболеваниями. Композитный состав GSSG в 0.1% растворе инозина вводился внутривенно, один раз в два дня, в дозе 5 мг на одну инъекцию. Об эндогенной продукции цитокинов судили по их содержанию в крови пациентов перед первой инъекцией (кровь собирали за 24 часа до момента введения), а также после третьей и седьмой инъекций GSSG. Содержание цитокинов определяли иммуноферментным методом с использованием коммерческих наборов фирмы Medgenix (Belgium) и выражали в пкг/мл культуральной среды. Clinical data showing the regulatory effect of GSSG on the endogenous production of cytokines and hematopoietic factors in people with cancer are presented. The composite composition of GSSG in a 0.1% solution of inosine was administered intravenously, once every two days, at a dose of 5 mg per injection. The endogenous production of cytokines was judged by their content in the blood of patients before the first injection (blood was collected 24 hours before injection), as well as after the third and seventh GSSG injections. The content of cytokines was determined by enzyme immunoassay using commercial kits from Medgenix (Belgium) and expressed in PCG / ml of culture medium.

Из данных, представленных в таблице 26, следует, что уже после трех первых инъекций GSSG отмечается выраженная стимуляция эндогенной продукции цитокинов (IL-1b, IL-6, TNF -α, IFN-α ) и эритропоэтина. После 7-й инъекции (14 дней лечения) в большинстве случаев отмечается многократный прирост содержания цитокинов и эритропоэтина в крови обследуемых пациентов. From the data presented in table 26, it follows that after the first three injections of GSSG, marked stimulation of endogenous production of cytokines (IL-1b, IL-6, TNF-α, IFN-α) and erythropoietin is noted. After the 7th injection (14 days of treatment), in most cases, there is a multiple increase in the content of cytokines and erythropoietin in the blood of the examined patients.

Пример 10. Example 10

Стимуляция эндогенной продукции цитокинов и эритропоэтина и лечебный эффект у больной раком сигмовидной кишки, осложненным гемодепрессией, вызванной химиотерапевтическим лечением. Stimulation of the endogenous production of cytokines and erythropoietin and therapeutic effect in a patient with sigmoid colon cancer complicated by hemodepression caused by chemotherapy treatment.

Больная 44 лет была прооперирована по поводу опухоли сигмовидной кишки с прорастанием в яичник и метастатическим поражением лимфатических узлов брыжейки и большого сальника (T₄N₃M₁). В послеоперационном периоде был проведен курс химиотерапии 5-фторурацилом (курсовая доза 5.5 г), сопровождавшийся выраженным гематотоксическим эффектом.A 44-year-old patient was operated on for a sigmoid colon tumor with germination in the ovary and metastatic damage to the lymph nodes of the mesentery and omentum (T ₄ N ₃ M ₁ ). In the postoperative period, a course of chemotherapy with 5-fluorouracil (course dose of 5.5 g) was carried out, accompanied by a pronounced hematotoxic effect.

Через 1 месяц после проведенного курса химиотерапии больная была повторно обследована с проведением ультразвукового исследования органов брюшной полости, а также компьютерной томографии печени, которые выявили одиночный метастаз в левой доле печени, овальной формы, размером 13х10 мм. При повторных клинических анализах крови у больной было обнаружено неполное восстановление показателей крови (регистрировались различные степени лейко- и лимфопении, анемии и тромбоцитопении), что делало невозможным проведение новых курсов химиотерапии. 1 month after the course of chemotherapy, the patient was re-examined with an ultrasound examination of the abdominal organs, as well as computed tomography of the liver, which revealed a single metastasis in the left lobe of the liver, oval, size 13x10 mm. During repeated clinical blood tests, the patient showed incomplete restoration of blood counts (various degrees of leukopenia and lymphopenia, anemia and thrombocytopenia were recorded), which made it impossible to conduct new chemotherapy courses.

Лабораторные параметры до начала применения лекарственной формы окисленного глутатиона (5 мг GSSG в 1 мл 0.003% перекиси водорода) приведены в таблице 27. Лечение по заявляемому способу было начато с внутривенных инъекций по 5 мг GSSG однократно в течение 7 дней. После 3-дневного перерыва доза препарата GSSG была увеличена до 15 мг, внутривенно, однократно в течение 10 дней. После 7-дневного перерыва препарат GSSG вводили внутримышечно по 15 мг, через день (всего 20 инъекций). Laboratory parameters prior to the use of the dosage form of oxidized glutathione (5 mg of GSSG in 1 ml of 0.003% hydrogen peroxide) are shown in table 27. Treatment by the present method was started with intravenous injection of 5 mg of GSSG once for 7 days. After a 3-day break, the dose of GSSG was increased to 15 mg, intravenously, once for 10 days. After a 7-day break, GSSG was administered intramuscularly at 15 mg every other day (a total of 20 injections).

Через 50 дней после начала лечения пациентке было проведено повторное ультразвуковое обследование органов брюшной полости и компьютерная томография печени, которые выявили существенную регрессию размеров одиночного метастаза в левой доле печени (более 50% от исходного). Иммунологические параметры после лечения приведены в таблице 27. 50 days after the start of treatment, the patient underwent repeated ultrasound examination of the abdominal organs and computed tomography of the liver, which revealed a significant regression of the size of a single metastasis in the left lobe of the liver (more than 50% of the initial). Immunological parameters after treatment are shown in table 27.

Как можно видеть, по окончании лечения значительно улучшились показатели красной и белой крови, практически нормализовалось число тромбоцитов, снизилось СОЭ, повысилось число CD4⁺- и CD8⁺-лимфоцитов, NK-клеток. Произошла убедительная стимуляция эндогенной продукции цитокинов и эритропоэтина, в том числе фактора некроза опухолей (наряду с ростом количества естественных киллеров), с чем может быть связана регрессия метастаза в печени. Данные изменения сопровождались улучшением общего состояния больной.As you can see, at the end of treatment, the red and white blood counts improved significantly, the platelet count normalized, ESR decreased, the number of CD4 ⁺ and CD8 ⁺ lymphocytes, NK cells increased. There was a convincing stimulation of the endogenous production of cytokines and erythropoietin, including tumor necrosis factor (along with an increase in the number of natural killers), which may be associated with regression of metastasis in the liver. These changes were accompanied by an improvement in the general condition of the patient.

Приведенное клиническое наблюдение свидетельствует об очевидной лечебной эффективности заявляемого способа. Метод вызвал существенную стимуляцию эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов, уменьшение размеров метастаза в печени, нормализацию иммунологических показателей, улучшение общего состояния пациентки. The above clinical observation indicates the apparent therapeutic effectiveness of the proposed method. The method caused a significant stimulation of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, a decrease in the size of liver metastases, normalization of immunological parameters, and an improvement in the general condition of the patient.

Пример 11. Example 11

Стимуляция эндогенной продукции цитокинов у больного СПИДом, осложненным криптококковым менингитом. Stimulation of endogenous cytokine production in an AIDS patient complicated by cryptococcal meningitis.

Мужчина 28 лет с подтвержденным ранее диагнозом СПИД, стадия 3/4C (WHO Staging System) поступил в состоянии средней тяжести. Жалобы на приступообразную головную боль, головокружение, рвоту. Вес тела 47 кг, индекс Карновского - 60, заторможен, повышение температуры тела до 39^oC, одышка в покое.A 28-year-old man with a previously confirmed diagnosis of AIDS, stage 3 / 4C (WHO Staging System), was admitted in a moderate state. Complaints of paroxysmal headache, dizziness, vomiting. Body weight 47 kg, Karnowski index - 60, inhibited, fever up to 39 ^o C, shortness of breath at rest.

При неврологическом осмотре выявлены ригидность затылочных мышц, снижение сухожильных рефлексов верхних и нижних конечностей (коленных, ахилловых, двуглавой и трехглавой мышц). При исследовании культуры спинномозговой жидкости обнаружен Cryptococcus neoformans, на основании чего было установлено наличие криптококкового менингоэнцефалита, стадия основного заболевания (СПИД) было уточнена как 4C. A neurological examination revealed stiff neck, decreased tendon reflexes of the upper and lower extremities (knee, Achilles, biceps and triceps). In the study of cerebrospinal fluid culture, Cryptococcus neoformans was detected, on the basis of which the presence of cryptococcal meningoencephalitis was found, the stage of the underlying disease (AIDS) was specified as 4C.

Начата активная инфузионная терапия. Помимо паллиативных средств больной получил курс лечения фунгизоном (Amphotericin В), который не дал положительного эффекта. Выраженность неврологической симптоматики и общее состояние больного продолжали ухудшаться. Сохранялась фебрильная температура тела (37.5 - 38.5^oC).Active infusion therapy has begun. In addition to palliative drugs, the patient received a course of treatment with fungizone (Amphotericin B), which did not give a positive effect. The severity of neurological symptoms and the general condition of the patient continued to deteriorate. Febrile body temperature was maintained (37.5 - 38.5 ^o C).

К моменту начала применения окисленного глутатиона (5 мг/кг) у больного определялось резкое снижение количества CD4⁺ и CD8⁺ Т-лимфоцитов периферической крови, анемия, общая лимфопения (таблица 17).By the time the use of oxidized glutathione (5 mg / kg) was started, the patient had a sharp decrease in the number of peripheral blood CD4 ⁺ and CD8 ⁺ T-lymphocytes, anemia, and general lymphopenia (table 17).

Лечение больного по заявляемому способу проводилось в течение 3-х месяцев (по 1 мл раствора GSSG на одну инъекцию). При этом, в течение первого месяца инъекции проводились через день (первые 10 дней внутривенно, в дальнейшем в/м), в течение 2-го месяца - раз в три дня (первые 10 дней в/в, в дальнейшем п/к). Treatment of the patient by the present method was carried out for 3 months (1 ml of GSSG solution per injection). At the same time, during the first month the injections were given every other day (the first 10 days intravenously, later in / m), during the 2nd month - every three days (the first 10 days in / in, hereinafter s / c).

К середине первого месяца лечения состояние больного существенно улучшилось, уменьшилась выраженность неврологической симптоматики, температура тела не поднималась выше 37.5^oC. В ходе проведения лечения по заявляемому способу больному дважды проводили микологическое исследование ликвора (цитологическое, культуральное, реакция латекс-агглютинации на наличие криптококкового антигена). К концу первого месяца лечения было обнаружено существенное снижение присутствия в ликворе способных к росту организмов Cryptococcus neoformans. К исходу второго месяца цитологические, культуральные и иммунологические тесты показали отсутствие возбудителя в спинномозговой жидкости. В течение 3-го месяца в связи со значительным улучшением в состоянии больного инъекции проводились 1 раз в неделю (в/м).By the middle of the first month of treatment, the patient’s condition improved significantly, the severity of neurological symptoms decreased, the body temperature did not rise above 37.5 ^o C. During the treatment according to the claimed method, the patient underwent mycological examination of cerebrospinal fluid (cytological, cultural, reaction of latex agglutination for the presence of cryptococcal antigen ) By the end of the first month of treatment, a significant decrease in the presence of Cryptococcus neoformans capable of growing organisms in the cerebrospinal fluid was found. By the end of the second month, cytological, cultural and immunological tests showed the absence of a pathogen in the cerebrospinal fluid. During the 3rd month, due to a significant improvement in the patient's condition, injections were carried out once a week (IM).

Результаты гематологического/иммунологического обследования больного по завершении лечения приведены в таблице 28. Как можно видеть, уменьшились проявления анемии, а также произошло существенное нарастание числа лимфоцитов и их субпопуляций, что позволяет констатировать рестадирование основного заболевания (СПИД) со стадии 4C в стадию 4B. The results of a hematological / immunological examination of the patient at the end of treatment are shown in Table 28. As you can see, the manifestations of anemia decreased, and there was a significant increase in the number of lymphocytes and their subpopulations, which allows us to establish the restoration of the underlying disease (AIDS) from stage 4C to stage 4B.

Обращает внимание убедительное нарастание содержания цитокинов в крови, ряд из которых (IL-2 и 6, IFN -γ) играют принципиальную роль в обеспечении механизмов защиты макроорганизма от патогенных грибов. A convincing increase in the content of cytokines in the blood draws attention, a number of which (IL-2 and 6, IFN-γ) play a fundamental role in providing mechanisms for protecting the macroorganism from pathogenic fungi.

К моменту выписки из стационара состояние пациента расценивалось как удовлетворительное, вес тела 60 кг (прибавка в весе составила 21.7% от исходного), температура тела нормальная, индекс Карновского - 90. Неврологическая симптоматика отсутствовала. By the time of discharge from the hospital, the patient's condition was assessed as satisfactory, body weight 60 kg (weight gain was 21.7% of the original), body temperature was normal, Karnowski index was 90. Neurological symptoms were absent.

Пример 12. Example 12

Стимуляция эндогенной продукции цитокинов и лечебный эффект у больного СПИДом, осложненным изоспориозом. Stimulation of endogenous production of cytokines and therapeutic effect in a patient with AIDS complicated by isosporiosis.

Мужчина 38 лет около 2 лет наблюдается с диагнозом СПИД, стадия 3C (WHO Staging System). В течение последнего года документированы повторные эпизоды кандидоза слизистой полости рта и пищевода, а также практически хроническое течение изоспориоза кишечника, проявляющееся в снижении аппетита, тошноте, частых эпизодах рвоты и жидкого стула с примесью слизи и крови. Периодическое применение котримоксазола (триметоприм в комбинации с сульфаметоксазолом, ТМР-SMX) давало нестойкие ремиссии с быстрым возобновлением симптоматики. Очередное обострение изоспориоза на протяжении последнего месяца перед госпитализацией. Курс терапии котримоксазолом, имодиумом (лоперамидом) улучшения не принес. Состояние постепенно ухудшалось: постоянная температура тела 38^oC и выше, жидкий стул с примесью крови и слизи до 6-7 раз в сутки, рвота, прогрессирующая потеря веса (за год около 15% от своего обычного веса). Госпитализирован в связи с прогрессирующим ухудшением состояния.A man of 38 years old, about 2 years old, is diagnosed with AIDS, stage 3C (WHO Staging System). Over the past year, repeated episodes of candidiasis of the oral mucosa and esophagus have been documented, as well as an almost chronic course of intestinal isosporiosis, manifested in a decrease in appetite, nausea, frequent episodes of vomiting and loose stool with an admixture of mucus and blood. Periodic use of cotrimoxazole (trimethoprim in combination with sulfamethoxazole, TMP-SMX) gave unstable remissions with a quick resumption of symptoms. Another exacerbation of isosporiosis over the last month before hospitalization. The course of therapy with cotrimoxazole, imodium (loperamide) did not bring improvement. The condition gradually worsened: a constant body temperature of 38 ^o C and above, loose stools with an admixture of blood and mucus up to 6-7 times a day, vomiting, progressive weight loss (about 15% of your usual weight per year). Hospitalized due to progressive deterioration.

При поступлении в стационар общее состояние средней тяжести, индекс по шкале Карновского - 50, температура тела 38.2^oC, больной истощен (вес 42 кг), подкожно-жировой слой практически отсутствует, кожные покровы бледные. Признаки кандидоза слизистой рта и пищевода. При повторных исследованиях кала обнаруживается большое количество ооцист Isospora belli.Upon admission to the hospital, the general condition is moderate, the index on the Karnowski scale is 50, the body temperature is 38.2 ^o C, the patient is depleted (weight 42 kg), the subcutaneous fat layer is practically absent, and the skin is pale. Signs of candidiasis of the oral mucosa and esophagus. Repeated studies of feces revealed a large number of Isospora belli oocysts.

К моменту начала лечения пациента по заявляемому способу, у больного определялась лимфопения, резкое снижение количества CD4⁺ и CD8⁺ лимфоцитов, гипопротеинемия (таблица 29).By the time the patient began treatment according to the claimed method, the patient was determined lymphopenia, a sharp decrease in the number of CD4 ⁺ and CD8 ⁺ lymphocytes, hypoproteinemia (table 29).

Лечение больного с применением лекарственной формы окисленного глутатиона (5 мг GSSG в 1 мл 0.003% перекиси водорода) проводилось в течение 2-х месяцев (по 1 мл раствора GSSG на одну инъекцию). При этом, в течение первого месяца инъекции выполнялись через день (первые 10 дней внутривенно, в дальнейшем в/м), в течение 2-го месяца - раз в три дня (первые 10 дней в/в, в дальнейшем п/к). The patient was treated with the dosage form of oxidized glutathione (5 mg of GSSG in 1 ml of 0.003% hydrogen peroxide) for 2 months (1 ml of GSSG solution per injection). At the same time, during the first month the injections were performed every other day (the first 10 days intravenously, then in / m), during the 2nd month - every three days (the first 10 days in / in, hereinafter s / c).

Состояние больного начало отчетливо улучшаться после первых 2-х недель лечения. К концу первого месяца лечения частота стула не превышала 1-2 раз в день, без примеси крови, температура тела лишь эпизодически превышала 37^oC. К исходу второго месяца повторные исследования кала на наличие ооцист Isospora belli показали отсутствие возбудителя. В течение 3-го месяца в связи со значительным улучшением в состоянии проводилось профилактическое применение лекарственной формы GSSG 1 раз в неделю (в/м). Рецидивов заболевания не отмечено.The patient's condition began to clearly improve after the first 2 weeks of treatment. By the end of the first month of treatment, the frequency of stool did not exceed 1-2 times a day, without blood impurity, body temperature only occasionally exceeded 37 ^o C. By the end of the second month, repeated studies of feces for the presence of Isospora belli oocysts showed the absence of a pathogen. During the 3rd month, in connection with a significant improvement in the condition, the prophylactic use of the GSSG dosage form was carried out once a week (IM). Relapse of the disease is not marked.

Результаты гематологического/биохимического обследования больного по завершении лечения приведены в таблице 29. Как можно видеть, уменьшились проявления гипопротеинемии, произошло существенное повышение числа лимфоцитов и их субпопуляций, что позволяет констатировать в итоге рестадирование СПИДа до 3В стадии по шкале WHO Staging System. The results of a hematological / biochemical examination of the patient at the end of the treatment are shown in Table 29. As you can see, the manifestations of hypoproteinemia decreased, there was a significant increase in the number of lymphocytes and their subpopulations, which allows us to ascertain the restoration of AIDS to stage 3B on the WHO Staging System scale.

Также обращает внимание значительное нарастание содержания цитокинов в крови, при этом известно, что IL-2 и IFN-γ играют важную роль в защите макроорганизма от протозойных инфекций. A significant increase in the content of cytokines in the blood also draws attention, while it is known that IL-2 and IFN-γ play an important role in protecting the macroorganism from protozoal infections.

После проведенного курса лечения общее состояние больного значительно улучшилось, уменьшилась слабость, улучшился аппетит. Прибавка в весе составила около 30% от исходного при поступлении, индекс Карновского - 90 баллов. При физикальном осмотре состояние больного расценивалось как удовлетворительное. В ходе наблюдения за больным в течение 1.5 месяцев после выписки из стационара рецидивов диареи не отмечено. After the course of treatment, the general condition of the patient improved significantly, weakness decreased, and appetite improved. The weight gain was about 30% of the original upon admission, the Karnowski index was 90 points. On physical examination, the patient's condition was assessed as satisfactory. During the observation of the patient within 1.5 months after discharge from the hospital, no recurrence of diarrhea was noted.

Пример 13. Example 13

Стимуляция эндогенной продукции эритропоэтина и лечебный эффект у больного гипопластической анемией и панцитопенией. Stimulation of endogenous erythropoietin production and therapeutic effect in a patient with hypoplastic anemia and pancytopenia.

Мужчина 37 лет наблюдается около года по поводу анемии неясного генеза, выраженность которой постепенно нарастает. В течение последних 10 месяцев постоянно беспокоят слабость, утомляемость, головокружения, частые носовые кровотечения, необычная подверженность респираторным инфекциям, трижды перенес пневмонию, при этом один раз - крупозную. Отмечает, что за год потерял около 10% своего обычного веса. Повторные амбулаторные курсы лечения пероральными и внутривенными препаратами железа, фолиевой кислоты, витаминами группы B, в том числе B₁₂, - без эффекта. При поступлении в стационар состояние средней тяжести, одышка при умеренной физической нагрузке, отмечаются кровоподтеки на коже, отдельные петехиальные высыпания. В повторных анализах крови среднетяжелая/тяжелая нормоцитарная анемия (эритроциты 1.5 - 2.5•10¹²/л) с тенденцией к гипохромии (цветной показатель 0.7 - 0.9), анизо- и пойкилоцитоз, умеренная лейкопения, тромбоцитопения в пределах 50 - 80•10⁹/л.A 37-year-old man is observed for about a year about anemia of unknown origin, the severity of which is gradually increasing. Over the past 10 months, weakness, fatigue, dizziness, frequent nosebleeds, unusual susceptibility to respiratory infections, and pneumonia three times, and once - croupous, have been constantly disturbing. He notes that during the year he lost about 10% of his usual weight. Repeated outpatient treatment with oral and intravenous preparations of iron, folic acid, B vitamins, including B ₁₂ , without effect. Upon admission to hospital, a moderate condition, shortness of breath with moderate physical exertion, bruising on the skin, separate petechial rashes are noted. In repeated blood tests, moderate / severe normocytic anemia (red blood cells 1.5 - 2.5 • 10 ¹² / l) with a tendency to hypochromia (color index 0.7 - 0.9), aniso- and poikilocytosis, moderate leukopenia, thrombocytopenia in the range 50 - 80 • 10 ⁹ / l

Активная инфузионная терапия препаратами железа, фолиевой кислоты, цианкобаламином, витаминами, преднизолоном, повторные переливания эритроцитарной массы - с незначительным улучшением. Active infusion therapy with iron, folic acid, cyanocobalamin, vitamins, prednisolone, red blood cell transfusions - with a slight improvement.

По данным миелограммы (трепанобиопсия) клеточность костного мозга резко снижена, межбалочные пространства заполнены преимущественно жировой тканью. Как миелоидный, так и эритроидный ростки значительно угнетены, соотношение эритроидных и миелоидных клеток резко снижено. Мегакариоциты практически отсутствуют. Относительное повышение содержания недифференцированных и плазматических клеток, бластов. Запасы железа увеличены. Диагноз: гипопластическая анемия неясного генеза, панцитопения. According to the myelogram (trepanobiopsy), bone marrow cellularity is sharply reduced, inter-beam spaces are filled mainly with adipose tissue. Both myeloid and erythroid germs are significantly inhibited, the ratio of erythroid and myeloid cells is sharply reduced. Megakaryocytes are practically absent. Relative increase in the content of undifferentiated and plasma cells, blasts. Iron reserves increased. Diagnosis: hypoplastic anemia of unknown origin, pancytopenia.

Результаты клинического анализа крови и уровень эритропоэтина к моменту начала применения лекарственной формы окисленного глутатиона (5 мг GSSG в 1 мл 0.003% перекиси водорода) приведены в таблице 30. Как можно видеть, лабораторные данные соответствуют картине гипопластической анемии, однако характерное для данного типа анемии нарастание уровня эритропоэтина крови отсутствует. Более того, уровень эритропоэтина оказался значительно снижен относительно нижней границы нормы (9.2 пкг/мл при норме 30 - 170 пкг/мл, что в международных единицах соответствует 3 - 17 mIU/мл). The results of the clinical blood test and the level of erythropoietin by the time the dosage form of oxidized glutathione was started (5 mg GSSG per 1 ml of 0.003% hydrogen peroxide) are shown in Table 30. As you can see, the laboratory data correspond to the picture of hypoplastic anemia, however, an increase characteristic of this type of anemia there is no blood erythropoietin level. Moreover, the level of erythropoietin was significantly reduced relative to the lower limit of the norm (9.2 pg / ml at a rate of 30 - 170 pg / ml, which in international units corresponds to 3 - 17 mIU / ml).

Применение лекарственной формы окисленного глутатиона (5 мг GSSG в 1 мл 0.003% перекиси водорода) было начато с внутримышечных инъекций по 1 мг GSSG 2 раза в день в течение 3 дней. Далее дозы были увеличены до 5 мг - 2 раза в день в течение 7 дней. В анализах крови было отмечено уменьшение выраженности анемии. В дальнейшем, композиция применялась по 10 мг GSSG внутримышечно 1 раз в день в течение 10 дней, после чего на фоне отчетливой позитивной динамики картины красной крови было начато внутривенное применение композиции: по 10 мг GSSG 1 раз в три дня, в течение 30 дней. Сопутствующая терапия включала витамины и препараты железа перорально. The use of a dosage form of oxidized glutathione (5 mg of GSSG in 1 ml of 0.003% hydrogen peroxide) was started with intramuscular injections of 1 mg of GSSG 2 times a day for 3 days. Further, the doses were increased to 5 mg - 2 times a day for 7 days. In blood tests, a decrease in the severity of anemia was noted. Subsequently, the composition was applied at a dose of 10 mg GSSG intramuscularly 1 time per day for 10 days, after which, against the background of a clear positive dynamics of the red blood picture, intravenous administration of the composition was started: 10 mg GSSG once every three days for 30 days. Concomitant therapy included vitamins and iron preparations orally.

Результаты гематологического исследования и уровень эритропоэтина крови через 50 дней от начала лечения по заявляемому способу приведены в таблице 30. Как можно видеть, число клеток красной и белой крови существенно улучшилось, наросло число тромбоцитов, снизилась СОЭ, уровень эритропоэтина превысил верхнюю границу нормы. Клинически у больного исчезли слабость, головокружения, одышка. При осмотре петехиальные кровоизлияния и кровоподтеки не выявляются, эпизодов носовых кровотечений не отмечалось. Прибавка в весе за время лечения составила 5.5 кг (около 8% веса до болезни). The results of a hematological study and the level of blood erythropoietin after 50 days from the start of treatment according to the claimed method are shown in table 30. As you can see, the number of red and white blood cells has improved significantly, the number of platelets has increased, ESR has decreased, the level of erythropoietin has exceeded the upper limit of normal. Clinically, the patient lost weakness, dizziness, shortness of breath. On examination, petechial hemorrhages and bruising were not detected, no episodes of nosebleeds were noted. The weight gain during treatment was 5.5 kg (about 8% of weight before illness).

По данным повторного исследования костного мозга (трепанобиопсия по окончании лечения), миелоидная ткань занимает до 60% объема межбалочных пространств. В островках миелоидной ткани соотношение числа клеток эритроидного и миелоидного ростков превышает норму. Имеются элементы нормобластоидной гиперплазии, в скоплениях нормобластов обнаруживаются группы клеток с признаками мегалобластоидности. Встречаются тучные клетки. Мегакариоциты представлены в значительном количестве. Объем запасов железа несколько увеличен. According to a re-examination of the bone marrow (trepanobiopsy at the end of treatment), myeloid tissue occupies up to 60% of the volume of inter-beam spaces. In the islands of myeloid tissue, the ratio of the number of cells of erythroid and myeloid sprouts exceeds the norm. There are elements of normoblastoid hyperplasia, in clusters of normoblasts groups of cells with signs of megaloblastoidness are found. Mast cells are found. Megakaryocytes are present in significant numbers. The volume of iron reserves is slightly increased.

Это клиническое наблюдение указывает на четкий терапевтический эффект исследуемой лекарственной формы GSSG. Благодаря проведенному лечению ранее подавленная эндогенная продукция эритропоэтина была существенно усилена. В результате, гематологические параметры, фактически, восстановились, и разрешились клинические признаки анемии. Больной был выписан в удовлетворительном состоянии. This clinical observation indicates a clear therapeutic effect of the test dosage form of GSSG. Thanks to the treatment, previously suppressed endogenous erythropoietin production was significantly enhanced. As a result, the hematologic parameters actually recovered and the clinical signs of anemia resolved. The patient was discharged in satisfactory condition.

Пример 14. Example 14

Стимуляции эндогенной продукции цитокинов и лечебный эффект у больного раком желудка, осложненным канцероматозом брюшины, асцитом, спленомегалией и холестатическим гепатитом. Stimulation of endogenous production of cytokines and therapeutic effect in a patient with gastric cancer complicated by peritoneal carcinomatosis, ascites, splenomegaly and cholestatic hepatitis.

Мужчина 33 лет наблюдается более двух лет по поводу неоплазмы желудка (аденокарцинома умеренной степени дифференцировки). В 1993 году больной оперирован по поводу малигнизированной язвы желудка и был обнаружен конгломерат плотных узлов в воротах печени, расцененный как метастазы. A 33-year-old man has been observed for more than two years due to gastric neoplasm (moderate adenocarcinoma of differentiation). In 1993, the patient was operated on for a malignant gastric ulcer and a conglomerate of dense nodes in the gates of the liver was detected, regarded as metastases.

В январе 1994 года проводимая химиотерапия (5-FU) осложнилась тяжелым холестазом, по поводу которого произведено чрезкожное дренирование правого и левого печеночных протоков, а еще через 6 месяцев - холедохоеюностомия на сменных транспеченочных дренажах с брауновским анастомозом. In January 1994, chemotherapy (5-FU) was complicated by severe cholestasis, which caused percutaneous drainage of the right and left hepatic ducts, and after another 6 months, choledochojejunostomy on removable transhepatic drains with Brownian anastomosis.

В ноябре 1995 года состояние ухудшилось. По данным обследования у больного - активный вторичный гепатит. Печень увеличена и болезненна, на 5-6 см выступает из-под края реберной дуги. Биохимические показатели крови патологически изменены, слабо поддаются коррекции проводимым лечением: гипербилирубинемия до 40,0 за счет непрямого билирубина (до 31,0); повышение активности трансаминаз в 6 раз; гипоальбуминемия - 26%; имеет место гипергаммаглобулинемия; гиперхолестеринемия - до 10,2 мкмоль/л. In November 1995, the condition worsened. According to the examination, the patient has active secondary hepatitis. The liver is enlarged and painful, 5-6 cm protrudes from under the edge of the costal arch. Blood biochemical parameters are pathologically altered, poorly amenable to correction by treatment: hyperbilirubinemia up to 40.0 due to indirect bilirubin (up to 31.0); a 6-fold increase in transaminase activity; hypoalbuminemia - 26%; hypergammaglobulinemia occurs; hypercholesterolemia - up to 10.2 μmol / l.

При фиброгастродуоденоскопии (ноябрь 1995 г.) в средней трети тела желудка была обнаружена опухоль протяженностью 8 см. Опухоль плотная. Стенки желудка ригидные. Гистологически опухоль идентифицирована как аденокарцинома умеренной степени дифференцировки. В декабре 1995 года больному произведена эксплоративная лапаратомия. Обнаружен асцит с множественными высыпаниями по всей брюшине, спленомегалия. Случай признан неоперабельным. With fibrogastroduodenoscopy (November 1995), a tumor of 8 cm in length was found in the middle third of the body of the stomach. The tumor is dense. The walls of the stomach are rigid. Histologically, the tumor is identified as adenocarcinoma of moderate degree of differentiation. In December 1995, the patient underwent exploratory laparatomy. Found ascites with multiple rashes throughout the peritoneum, splenomegaly. Case recognized inoperable.

Было принято решение использовать лекарственную форму GSSG в 0.1% растворе инозина. Препарат вводился парентерально (внутривенно и внутримышечно), и, дополнительно, использовалось локальное введение лекарственной формы посредством обкалывания опухоли через эндоскоп в трех точках. Средняя доза для внутривенного и внутримышечного введения 0,1 -0.5 мг/кг; при локальном введении до 50 мг местно. Парентеральное введение препарата 2 раза в сутки (утром внутривенно; вечером - внутримышечные инъекции), через день, в течение трех недель; затем два раза в неделю в течение 4 недель. Обкалывание через эндоскоп один раз в семь дней. Через 2 месяца после начала лечения используемой лекарственной формой картина фиброгастродуоденоскопии: пищевод проходим, слизистая розовая, розетка кардии смыкается не полностью. Натощак в желудке умеренное количество пенистого секрета, интенсивно окрашенного желчью, протяженность опухоли 5 см. Одновременно наблюдается существенное улучшение гематологических, биохимических показателей. It was decided to use the dosage form of GSSG in 0.1% inosine solution. The drug was administered parenterally (intravenously and intramuscularly), and, in addition, local administration of the dosage form was used by chipping the tumor through an endoscope at three points. The average dose for intravenous and intramuscular administration is 0.1-0.5 mg / kg; with local administration up to 50 mg topically. Parenteral administration of the drug 2 times a day (intravenously in the morning; in the evening - intramuscular injection), every other day, for three weeks; then twice a week for 4 weeks. Chipping through an endoscope once every seven days. 2 months after the start of treatment with the used dosage form, the picture of fibrogastroduodenoscopy: the esophagus passes, the pink mucosa, the cardia outlet does not close completely. On an empty stomach in the stomach there is a moderate amount of foamy secretion intensely stained with bile, the tumor is 5 cm long. At the same time, a significant improvement in hematological and biochemical parameters is observed.

Через 4 месяца лечения: печень выступает из-под реберной дуги на 1 см; безболезненная при пальпации. По данным УЗИ - на месте определяемых ранее очаговых опухолевых изменений фиброзная ткань. Картина фиброгастродуоденоскопии (май 1996 г): пищевод не смыкается; в просвете желудка светлая мутная жидкость со слюной. Слизистая желудка розовая. Опухоль протяженностью 3,6 см. Стенки желудка эластичные. Двенадцатиперстная кишка свободно проходима. After 4 months of treatment: the liver protrudes from under the costal arch by 1 cm; painless on palpation. According to ultrasound, in the place of previously determined focal tumor changes, fibrous tissue. The picture of fibrogastroduodenoscopy (May 1996): the esophagus does not close; in the lumen of the stomach is a clear cloudy liquid with saliva. The mucous membrane of the stomach is pink. The tumor is 3.6 cm long. The walls of the stomach are elastic. The duodenum is freely passable.

По сравнению с обследованием до начала лечения с использованием вышеупомянутой лекарственной формы GSSG (ноябрь 1995) определяется уменьшение размеров опухоли на 55%. Одновременно отмечается убедительная положительная динамика печеночных проб, гематологических и иммунологических показателей (таблица 31). Compared with the examination prior to treatment using the aforementioned dosage form GSSG (November 1995), a decrease in tumor size of 55% is determined. At the same time, convincing positive dynamics of liver tests, hematological and immunological parameters are noted (table 31).

Таким образом, в результате проведенного лечения по заявляемому способу наблюдается частичный регресс опухолевого процесса, с очевидными одновременными изменениями гематологических, биохимических и иммунологических параметров и существенным повышением качества жизни. Thus, as a result of the treatment according to the claimed method, there is a partial regression of the tumor process, with obvious simultaneous changes in hematological, biochemical and immunological parameters and a significant increase in the quality of life.

Пример 15. Example 15

Стимуляция эндогенной продукции цитокинов и лечебный эффект у больного раком кожи (карцинома Меркеля) и метастазами в местные лимфоузлы, и гемо-иммунодепрессией, вызванной химиотерапией. Stimulation of the endogenous production of cytokines and the therapeutic effect in a patient with skin cancer (Merkel's carcinoma) and metastases to local lymph nodes, and hemo-immunosuppression caused by chemotherapy.

Мужчина 64 лет наблюдается с августа 1995 года, когда появилось гиперемированное опухолевидное образование в левой окололопаточной области, безболезненное, постепенно увеличивающееся в размерах. По прошествии месяца процесс распространился на левую подмышечную область, увеличивался в размерах, стал болезненным. Появилась лихорадка (t= 38,9^oС). Обследование (гистологическое и иммунологическое), проведенное в октябре 1995 года, уточнило диагноз - нейроэндокринная форма рака кожи (карцинома Меркеля) III стадии.A 64-year-old man has been observed since August 1995, when a hyperemic tumor formation appeared in the left peritoneal region, painless, gradually increasing in size. After a month, the process spread to the left axillary region, increased in size, became painful. There was a fever (t = 38.9 ^o C). An examination (histological and immunological), conducted in October 1995, clarified the diagnosis - a neuroendocrine form of skin cancer (Merkel's carcinoma) stage III.

В декабре 1995 года проведен курс химиотерапии по схеме CMF (циклофосфан+метотрексат+фторурацил) без заметного лечебного эффекта. В то же время отмечается явное угнетение гемопоэза (лейкоциты 2,4•10⁹/л) и одновременный рост шейных и надключичных лимфоузлов с локальной гиперемией кожи.In December 1995, a chemotherapy course was carried out according to the CMF scheme (cyclophosphamide + methotrexate + fluorouracil) without a noticeable therapeutic effect. At the same time, there is a clear inhibition of hematopoiesis (white blood cells 2.4 • 10 ⁹ / l) and a simultaneous growth of cervical and supraclavicular lymph nodes with local hyperemia of the skin.

В январе - феврале 1996 года схема химиотерапии изменена: цисплатин+циклофосфамид (вместо CMF выполнен курс CP). На фоне проводимой химиотерапии осложнения: цитопения (лейкоцитов 1,4•10⁹/л), кардиотоксичность в виде обострения ишемической болезни сердца. После 2-го курса химиотерапии - резкое прогрессирование опухоли: некроз в левой подмышечной области с образованием свища, нарастание инфильтрации мягких тканей в области левого плечевого сустава и левой подмышечной области; отек левой руки; интоксикация, стойкое повышение температуры (38,8^oC). В связи с явным прогрессированием заболевания и отсутствием эффекта химиотерапии принято решение о проведении терапии лекарственной формой GSSG в 0,1% растворе цистамина, параллельно с курсом химиотерапии (схема CMF).In January - February 1996, the chemotherapy regimen was changed: cisplatin + cyclophosphamide (CP course was performed instead of CMF). Against the background of chemotherapy, complications: cytopenia (white blood cells 1.4 • 10 ⁹ / l), cardiotoxicity in the form of exacerbation of coronary heart disease. After the 2nd course of chemotherapy - a sharp progression of the tumor: necrosis in the left axillary region with the formation of a fistula, an increase in soft tissue infiltration in the region of the left shoulder joint and left axillary region; swelling of the left hand; intoxication, persistent increase in temperature (38.8 ^o C). Due to the obvious progression of the disease and the lack of chemotherapy effect, it was decided to conduct therapy with the GSSG dosage form in a 0.1% cystamine solution, in parallel with the chemotherapy course (CMF regimen).

Через 10 ежедневных инъекций используемой формы препарата (внутривенно и внутримышечно, в дозе на одно введение 0,1 - 0.5 мг/кг) отмечаются следующие изменения в состоянии больного: улучшение качества жизни (хороший аппетит, подвижность); подсыхание изъязвленных участков; ликвидация гнойного отделяемого; рубцевание свища; уменьшение опухолевой массы на 30%; нормализация температуры тела; ограничение зон гиперемии; улучшение гематологических показателей. After 10 daily injections of the used form of the drug (intravenously and intramuscularly, at a dose of 0.1 to 0.5 mg / kg per injection), the following changes in the patient's condition are noted: improved quality of life (good appetite, mobility); drying of ulcerated areas; elimination of purulent discharge; scarring of the fistula; 30% reduction in tumor mass; normalization of body temperature; restriction of zones of hyperemia; improvement of hematological parameters.

Проведены 3-й и 4-й курсы химиотерапии (схема CMF) проводились с одновременным введением лекарственной формы GSSG (внутривенные и внутримышечные инъекции два раза в сутки в дозе 0.5 мг/кг внутривенно и 0,2 мг/кг внутримышечно). Парентеральное введение препарата 3 раза в неделю и один раз в неделю локальное обкалывание в двух точках около опухоли через эндоскоп: до 25 мг в каждую точку. Были получены следующие результаты: регресс опухолевого процесса; хорошая переносимость химиотерапии, исчезновение болевого синдрома; постоянное улучшение качества жизни, реставрация иммунитета и гемопоэза, повышение содержания в крови цитокинов и гемопоэтических факторов (таблица 32). The 3rd and 4th chemotherapy courses (CMF regimen) were carried out with the simultaneous administration of the GSSG dosage form (intravenous and intramuscular injections twice a day at a dose of 0.5 mg / kg intravenously and 0.2 mg / kg intramuscularly). Parenteral administration of the drug 3 times a week and once a week local chipping at two points near the tumor through an endoscope: up to 25 mg at each point. The following results were obtained: regression of the tumor process; good tolerance to chemotherapy, the disappearance of pain; continuous improvement of the quality of life, restoration of immunity and hematopoiesis, increased levels of cytokines and hematopoietic factors in the blood (table 32).

Через 2 месяца после лечения по заявляемому способу имеет место стабильный уровень эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов; регресс левых шейных и надключичных лимфоузлов; регресс размеров опухоли по двум измерениям на 70% от исходных; положительная динамика иммунологических показателей; отсутствие угнетающего действия химиотерапии на кроветворение. 2 months after treatment by the present method, there is a stable level of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors; regression of the left cervical and supraclavicular lymph nodes; regression of tumor size in two dimensions by 70% of the original; positive dynamics of immunological parameters; the absence of the inhibitory effect of chemotherapy on blood formation.

Проведенное клиническое наблюдение свидетельствует об очевидном лечебном эффекте заявляемого способа: на фоне существенной стимуляции эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов выявлено уменьшение размеров опухоли; повышение качества жизни и благоприятные изменения гематологических, биохимических и иммунологических показателей. The clinical observation indicates an obvious therapeutic effect of the proposed method: against the background of significant stimulation of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, a decrease in tumor size was detected; improving the quality of life and favorable changes in hematological, biochemical and immunological parameters.

Пример 16. Example 16

Лечебный эффект препаратов группы GSSG у больного тяжелой формой острого вирусного гепатита. The therapeutic effect of drugs of the GSSG group in a patient with severe acute viral hepatitis.

Мужчина 32 лет поступил в клинику инфекционных заболеваний с признаками нарушения пигментного обмена: темная моча; светлый кал; желтушность кожи и слизистых оболочек; высокое содержание уробилиногена. Состояние тяжелое: температура тела 38,8^oС; астеновегетативный, гриппоподобный и артралгический синдромы. Печень увеличена более чем на 4-5 см. Был поставлен диагноз: острый вирусный гепатит. Окончательный диагноз: Острый вирусный гепатит "B". Тяжелая форма с острой печеночной недостаточностью.A 32-year-old man was admitted to the clinic of infectious diseases with signs of impaired pigment metabolism: dark urine; light feces; yellowness of the skin and mucous membranes; high content of urobilinogen. Severe condition: body temperature 38.8 ^o C; asthenovegetative, flu-like and arthralgic syndromes. The liver is enlarged by more than 4-5 cm. The diagnosis was made: acute viral hepatitis. Final diagnosis: Acute viral hepatitis "B". Severe form with acute liver failure.

Первый курс лечения препаратами группы GSSG включал внутривенные инъекции GSSG-Na₂ в 0.1% растворе фолиевой кислоты один раз в день в дозе 0.1-0.5 мг/кг массы тела в течение 7-ми дней.The first course of treatment with GSSG drugs included intravenous injections of GSSG-Na ₂ in a 0.1% solution of folic acid once a day at a dose of 0.1-0.5 mg / kg body weight for 7 days.

Второй курс лечения включал внутривенные инъекции GSSG-Zn в 0.1% растворе инозина один раз в день в течение 7-ми дней в дозе 0.1 мг/кг массы тела. The second course of treatment included intravenous injections of GSSG-Zn in a 0.1% solution of inosine once a day for 7 days at a dose of 0.1 mg / kg body weight.

Третий курс лечения включал внутривенные инъекции GSSG-Na₂ в 5% растворе аскорбиновой кислоты в течение 7- ми дней через день в дозе 0.1-0.5 мг/кг массы тела. Одновременно тот же состав вводился внутримышечно в той же дозировке один раз в день.The third course of treatment included intravenous injections of GSSG-Na ₂ in a 5% solution of ascorbic acid for 7 days every other day at a dose of 0.1-0.5 mg / kg body weight. At the same time, the same composition was administered intramuscularly in the same dosage once a day.

Данные в таблице 33 указывают на благоприятные изменения гематологических/иммунологических параметров, снижение (и/или нормализация) лабораторных маркеров гепатита. Таким образом, ликвидация патологического процесса и выздоровление больного имели место на 1.5-2 месяца ранее обычных сроков выздоровления при остром вирусном гепатите "B". The data in table 33 indicate favorable changes in hematological / immunological parameters, a decrease (and / or normalization) of laboratory markers of hepatitis. Thus, the elimination of the pathological process and the patient’s recovery took place 1.5-2 months earlier than the usual recovery time for acute viral hepatitis “B”.

Пример 17. Example 17

Лечебный эффект препаратов группы GSSG у больного хроническим вирусным гепатитом в стадии обострения. The therapeutic effect of drugs of the GSSG group in a patient with chronic viral hepatitis in the acute stage.

Женщина 56 лет была госпитализирована в клинику инфекционных болезней с жалобами на ухудшение самочувствия, слабость, утомляемость, раздражительность, анорексию, тошноту. Также наблюдались некоторые гастроинтестинальные симптомы, боли в области подреберья и повышение температуры до 38.5^oC.A 56-year-old woman was hospitalized in the clinic of infectious diseases with complaints of deterioration of health, weakness, fatigue, irritability, anorexia, nausea. Also observed some gastrointestinal symptoms, pain in the hypochondrium and fever up to 38.5 ^o C.

При осмотре: Общее состояние больной средней тяжести. При пальпации выявляется сплено- и гепатомегалия. Печень выступает на 3 см из-под края реберной дуги. Субиктеричность слизистых и склер. On examination: General condition of the patient of moderate severity. On palpation, splenitis and hepatomegaly are detected. The liver protrudes 3 cm from under the edge of the costal arch. Subictericity of mucous membranes and sclera.

УЗИ: печень заметно увеличена, портальная вена - 15 мм, стенки желчного пузыря утолщены, поджелудочная железа нормальной структуры, селезенка увеличена (578х168 мм) и утолщена. Почки без заметных структурных изменений. Ultrasound: the liver is noticeably enlarged, the portal vein is 15 mm, the walls of the gallbladder are thickened, the pancreas is normal in structure, the spleen is enlarged (578x168 mm) and thickened. Kidneys without noticeable structural changes.

В течение 2-х недель больная получала дезинтоксикационную и противовирусную терапию (Роферон-A, рекомбинантный α₂- интерферон). Вследствие дальнейшей прогрессии заболевания и неэффективности проводимого лечения было принято решение о попытке применения препаратов семейства GSSG.Within 2 weeks, the patient received detoxification and antiviral therapy (Roferon-A, recombinant α ₂ - interferon). Due to the further progression of the disease and the ineffectiveness of the treatment, it was decided to try to use the GSSG family of drugs.

Внутривенные инъекции GSSG-Na₂ в 10% растворе холин хлорида назначались в течение 7-ми дней (один раз в день в дозе 0.1-1.0 мг/кг массы тела).Intravenous injections of GSSG-Na ₂ in a 10% solution of choline chloride were prescribed for 7 days (once a day at a dose of 0.1-1.0 mg / kg body weight).

Внутривенные инъекции бис-метионил-GSSG в 5% растворе аскорбиновой кислоты назначались в течение последующих 10-и дней (один раз в день в дозе 0.1-0.5 мг/кг массы тела). Одновременно внутримышечно вводился GSSG-Na₂ в 0.1% растворе инозина в течение 10-и дней (один раз в день в дозе 0.1-0.5 мг/кг массы тела).Intravenous injections of bis-methionyl-GSSG in a 5% solution of ascorbic acid were prescribed for the next 10 days (once a day at a dose of 0.1-0.5 mg / kg body weight). At the same time, GSSG-Na ₂ was injected intramuscularly in a 0.1% inosine solution for 10 days (once a day at a dose of 0.1-0.5 mg / kg body weight).

Состояние больной существенно улучшилось через месяц после вышеупомянутого лечения препаратами группы GSSG. Сохранялись жалобы только на слабость и утомляемость. Заметным было уменьшение болевого и диспептического синдромов, нормализовалась температура тела. Наблюдались благоприятные изменения в лабораторных показателях (см. таблицу 34). На УЗИ было выявлено сохранение степени сплено- и гепатомегалии. The patient's condition improved significantly a month after the above treatment with GSSG drugs. Only complaints of weakness and fatigue persisted. A noticeable decrease was in pain and dyspeptic syndromes, and body temperature returned to normal. Favorable changes in laboratory parameters were observed (see table 34). Ultrasound revealed a degree of splenic and hepatomegaly.

Благодаря некоторому улучшению в состоянии больной, но с сохранением признаков альтерации печени, было принято решение провести еще один курс лечения с использованием препаратов группы GSSG. После второго курса полностью такой же терапии больная жалоб не предъявляла. Отсутствовали жалобы на боль и диспепсию. УЗИ показало уменьшение размеров селезенки и печени. При пальпации - печень на 1.5 см выступает из-под края реберной дуги. (Лабораторные данные - см. таблицу 34.)
Таким образом, использование комбинированной терапии с использованием препаратов группы GSSG обусловило заметный лечебный эффект, с улучшением состояния и качества жизни, стабилизацией и реверсией патологического процесса, благоприятными лабораторными изменениями.Due to some improvement in the patient’s condition, but with preserved signs of liver alteration, it was decided to conduct another course of treatment using GSSG drugs. After the second course of completely the same therapy, the patient did not complain. There were no complaints of pain and dyspepsia. Ultrasound showed a decrease in the size of the spleen and liver. On palpation, the liver 1.5 cm protrudes from under the edge of the costal arch. (Laboratory data - see table 34.)
Thus, the use of combination therapy using drugs of the GSSG group led to a noticeable therapeutic effect, with an improvement in the condition and quality of life, stabilization and reversal of the pathological process, and favorable laboratory changes.

Пример 18. Example 18

Лечебный эффект препаратов группы GSSG у больных с острым перитонитом. The therapeutic effect of drugs of the GSSG group in patients with acute peritonitis.

1. Женщина 78 лет была госпитализирована с диагнозом ущемленной вентральной грыжи, острым сдавлением тонкого кишечника с некрозом и развитием токсической фазы острого перитонита. На операции около 800 мл мутного выпота с хлопьями и сгустками фибрина было найдено и удалено из брюшной полости. Ущемленная часть тонкой кишки была некротизирована. Была выполнена резекция части тонкого кишечника с формированием анастомоза. Через пищевод и желудок в тонкую кишку был заведен зонд и помещен в илеоцекальном углу. В послеоперационном периоде один раз в день проводилось удаление кишечного содержимого. После этого 150 мл 0.1% раствора фолиевой кислоты в диметилсульфоксиде (ДМСО), содержащее 10 мл 1% раствора динатриевой соли GSSG, вводилось в тонкую кишку. Одновременно 0.1% раствор фолиевой кислоты и 1% раствор динатриевой соли GSSG вводился внутривенно в дозе от 0.01 до 0.1 мг/кг массы тела один раз в день в течение 4-х дней. 1. A 78-year-old woman was hospitalized with a diagnosis of strangulated ventral hernia, acute compression of the small intestine with necrosis, and the development of the toxic phase of acute peritonitis. During the operation, about 800 ml of a cloudy effusion with flakes and clots of fibrin was found and removed from the abdominal cavity. The injured part of the small intestine was necrotic. A part of the small intestine was resected with the formation of an anastomosis. A probe was inserted through the esophagus and stomach into the small intestine and placed in the ileocecal corner. In the postoperative period, once a day, intestinal contents were removed. After that, 150 ml of a 0.1% solution of folic acid in dimethyl sulfoxide (DMSO) containing 10 ml of a 1% solution of GSSG disodium salt was introduced into the small intestine. At the same time, a 0.1% solution of folic acid and a 1% solution of GSSG disodium salt were administered intravenously at a dose of 0.01 to 0.1 mg / kg body weight once a day for 4 days.

Адекватная перистальтика восстановилась на 2-е сутки после операции. Зонд был удален на 8-е сутки. Больная была выписана из клиники на 19-е сутки. Adequate peristalsis recovered on the 2nd day after surgery. The probe was removed on the 8th day. The patient was discharged from the clinic on the 19th day.

2. Больной 16 лет был госпитализирован с диагнозом: Острая спаечная тонкокишечная непроходимость. Разлитой перитонит, токсичная фаза. При операции в брюшной полости до 600 мл мутного выпота с хлопьями и фибриновыми наложениями было выявлено и удалено из брюшной полости. Выраженный спаечный процесс. Произведено рассечение спаек. Через нос, пищевод, желудок в тонкую кишку до илеоцекального угла проведен зонд. В послеоперационном периоде после эвакуации кишечного содержимого один раз в сутки в тонкую кишку вводили по 150 мл 0.1% раствора фолиевой кислоты в диметилсульфоксиде (ДМСО), содержащем 10 мл 1% раствора натриевой соли GSSG. Одновременно внутривенно осуществлялось введение 0.1% раствора фолиевой кислоты и 1% раствора натриевой соли GSSG в дозе от 0,01 до 0,1 мг/кг; ежедневно, один раз в день, в течение 4-х дней. 2. A 16-year-old patient was hospitalized with a diagnosis of Acute adhesive small bowel obstruction. Spilled peritonitis, toxic phase. During surgery in the abdominal cavity, up to 600 ml of a cloudy effusion with flakes and fibrin overlays was detected and removed from the abdominal cavity. Severe adhesion process. Dissected adhesions. A probe was passed through the nose, esophagus, stomach into the small intestine to the ileocecal angle. In the postoperative period after evacuation of intestinal contents, 150 ml of a 0.1% solution of folic acid in dimethyl sulfoxide (DMSO) containing 10 ml of a 1% solution of sodium salt of GSSG was administered once a day into the small intestine. At the same time, 0.1% folic acid solution and 1% GSSG sodium salt were administered intravenously at a dose of 0.01 to 0.1 mg / kg; daily, once a day, for 4 days.

Адекватная перистальтика восстановилась на 2 сутки; зонд удален на 8 сутки; больной выписан на 11 сутки. Adequate peristalsis recovered on day 2; probe removed on day 8; the patient was discharged on the 11th day.

Пример 19. Example 19

Лечебный эффект препаратов группы GSSG у больного раком простаты. The therapeutic effect of drugs of the GSSG group in a patient with prostate cancer.

Больной 63 лет был госпитализирован в урологическое отделение с подозрением на рак простаты. При пальпации обнаруживалась увеличенная, плотная простата. При рентгенологическом обследовании грудной клетки были найдены метастазы в передние отделы 4-7 реберных костей, а также в кости черепа, позвоночник, тазовые и бедренные кости. Был поставлен диагноз: рак предстательной железы с множественными костными метастазами (T₂N₂M₁).A 63-year-old patient was admitted to the urology department with suspected prostate cancer. On palpation, an enlarged, dense prostate was found. An X-ray examination of the chest revealed metastases in the anterior sections of 4-7 costal bones, as well as in the bones of the skull, spine, pelvic and femur. The diagnosis was made: prostate cancer with multiple bone metastases (T ₂ N ₂ M ₁ ).

Курсовое лечение длительностью 30 суток проводилось по следующей методике:
1. В течение 10 дней один раз в день внутривенно - GSSG-Zn в 1% растворе инозина в суточной дозе 0.01-0.5 мг/кг.Course treatment lasting 30 days was carried out according to the following method:
1. For 10 days, once a day, intravenously - GSSG-Zn in a 1% solution of inosine in a daily dose of 0.01-0.5 mg / kg.

2. В последующие 10 дней эндолимфатически вводили S-тиоэтиламин-GSSG в суточной дозе 0.1-1.0 мг/кг один раз в день. 2. In the next 10 days, S-thioethylamine-GSSG was administered endolymphatically in a daily dose of 0.1-1.0 mg / kg once a day.

3. В последние 10 дней - через день внутримышечно - GSSG-Zn в 1% растворе инозина в суточной дозе 0.01 - 0.5 мг/кг. 3. In the last 10 days - every other day intramuscularly - GSSG-Zn in a 1% solution of inosine in a daily dose of 0.01 - 0.5 mg / kg.

После окончания курса лечения отмечается значительное улучшение общего состояния, уменьшение болей в области промежности, снижение учащенного мочеиспускания до 2-3 раз за ночь, уменьшение отеков нижних конечностей. При гематологическом исследовании отмечается положительная динамика ряда показателей (см. таблицу 35). After the course of treatment, a significant improvement in the general condition, a decrease in pain in the perineum, a decrease in frequent urination to 2-3 times per night, a decrease in edema of the lower extremities are noted. During hematological examination, there is a positive dynamics of a number of indicators (see table 35).

После выписки больной получал GSSG-Zn в 1% растворе инозина в суточной дозе 0.01 - 0.5 мг/кг внутримышечно два раза в неделю. After discharge, the patient received GSSG-Zn in a 1% solution of inosine in a daily dose of 0.01 - 0.5 mg / kg intramuscularly twice a week.

Более чем через год больной вновь поступил в урологическое отделение для обследования и проведения повторного курса терапии препаратами группы GSSG. Через 3 месяца после окончания второго курса лечения основными терапевтическими эффектами считалось следующее: повышение качества жизни; отсутствие отеков нижних конечностей; регресс увеличенных лимфоузлов; отсутствие дизурических явлений; уменьшение размеров предстательной железы; положительная рентгенологическая динамика (кальцификация отдельных метастазов в ребрах и позвоночнике); реставрация параметров системы иммунитета и гемопоэза. More than a year later, the patient again entered the urology department for examination and a second course of therapy with drugs of the GSSG group. 3 months after the end of the second course of treatment, the main therapeutic effects were considered as follows: improving the quality of life; lack of edema of the lower extremities; regression of enlarged lymph nodes; lack of dysuric phenomena; reduction of the size of the prostate gland; positive radiological dynamics (calcification of individual metastases in the ribs and spine); restoration of parameters of the immune system and hematopoiesis.

Пример 20. Example 20

Лечебный эффект препаратов группы GSSG у больного раком поджелудочной железы. The therapeutic effect of drugs of the GSSG group in a patient with pancreatic cancer.

В мае 1996 года больной 56 лет госпитализирован во II хирургическое отделение Центральной медико-санитарной части N 122. При поступлении состояние тяжелое. Жалобы на: постоянные острые боли в верхней половине живота опоясывающего характера, усиливающиеся при положении на спине; на потерю аппетита, тошноту, рвоту, метеоризм, послабление стула. Индекс Карновского - 40. Пальпаторно отмечается болезненность и напряжение мышц брюшного пресса в месте проекции поджелудочной железы (симптом Керте). Поджелудочная железа плотная, бугристая, увеличена в размерах. Печень плотная, выступает из-под реберной дуги на 4 см. In May 1996, a 56-year-old patient was hospitalized in the II surgical department of the Central Health Unit N 122. Upon admission, the condition is serious. Complaints about: persistent acute pain in the upper abdomen of herpes zoster, aggravated by a supine position; loss of appetite, nausea, vomiting, flatulence, loose stools. The Karnowski index is 40. Pain and tension of the abdominal muscles at the site of the projection of the pancreas are palpated (symptom of Kerte). The pancreas is dense, tuberous, enlarged. The liver is dense, protrudes from under the costal arch by 4 cm.

Ультразвуковое исследование (УЗИ): Поджелудочная железа увеличена в размерах (головка 7 см, тело 4 см, хвост 2.5 см) с нечеткими контурами, плотная. Вирсунгов проток расширен 0.7 см. Печень увеличена, толщина правой доли 18 см, левой доли 10 см. Нижний край закруглен. Контуры неровные, структура неоднородная, в паренхиме множественные гиперэхогенные образования (метастазы). Диагноз: Рак поджелудочной железы с метастазами в печень (T₃N₂M₁).Ultrasound examination (ultrasound): The pancreas is enlarged (head 7 cm, body 4 cm, tail 2.5 cm) with fuzzy contours, dense. The Wirsung duct is expanded 0.7 cm. The liver is enlarged, the thickness of the right lobe is 18 cm, the left lobe is 10 cm. The lower edge is rounded. The contours are uneven, the structure is heterogeneous, in the parenchyma there are multiple hyperechoic formations (metastases). Diagnosis: Pancreatic cancer with liver metastases (T ₃ N ₂ M ₁ ).

Лечение: Детоксикационная терапия, ингибиторы протеаз, наркотические анальгетики. Treatment: Detoxification therapy, protease inhibitors, narcotic analgesics.

В связи с тяжестью состояния пациента и отсутствием альтернативного лечения принято решение использовать препарат группы GSSG. Due to the severity of the patient's condition and the lack of alternative treatment, it was decided to use a GSSG group drug.

Схема лечения: ежедневно внутривенно утром и вечером в течение 10 дней цинковая соль GSSG (суточная доза 0.01-0.5 мг/кг). В течение последующих 10 дней эндолимфатически - цинковая соль GSSG в 7% димексиде (суточная доза 0.01-1.0 мг/кг) и внутривенное введение через день цинковой соли GSSG (суточная доза 0.01-0.5 мг/кг). В течение последующих 10 дней (третья декада) 2 раза в неделю внутривенно цинковая соль GSSG (суточная доза 0.01-0.5 мг/кг). The treatment regimen: daily intravenous morning and evening for 10 days, zinc salt GSSG (daily dose of 0.01-0.5 mg / kg). Over the next 10 days, endolymphatic - zinc salt of GSSG in 7% dimexide (daily dose of 0.01-1.0 mg / kg) and intravenous administration of zinc salt of GSSG every other day (daily dose of 0.01-0.5 mg / kg). Over the next 10 days (third decade), 2 times a week, intravenous zinc salt of GSSG (daily dose of 0.01-0.5 mg / kg).

Через месяц лечения: состояние больного средней тяжести. Беспокоят незначительные периодичные боли в левом подреберье. Индекс Карновского - 60. Отменены наркотические анальгетики. Появился аппетит. Наметилась тенденция к нормализации показателей крови. After a month of treatment: the patient's condition is moderate. Concerned about minor periodic pain in the left hypochondrium. Karnowski index - 60. Canceled narcotic analgesics. Appetite appeared. There has been a tendency to normalize blood counts.

В течение 3-х недель после лечения в стационаре больной получал в/м один раз в неделю инъекции цинковой соли GSSG (суточная доза 0.01-0.5 мг/кг). Within 3 weeks after treatment in the hospital, the patient received IM GSSG zinc salt injections once a week (daily dose 0.01-0.5 mg / kg).

В июле 1996 года: больной поступил во II хирургическое отделение Центральной медико-санитарной части N 122 для обследования и проведения второго курса иммуномодулирующей терапии препаратами группы GSSG. In July 1996: the patient was admitted to the II surgical unit of the Central Health Unit N 122 for examination and the second course of immunomodulating therapy with drugs of the GSSG group.

При обследовании отмечается выраженная положительная динамика клинической картины заболевания и показателей крови (см. таблицу 36). Состояние практически удовлетворительное. Жалобы на слабые периодично возникающие боли в левом подреберье. Индекс Карновского - 70. Пальпаторно слабая болезненность в месте проекции головки и тела поджелудочной железы, железа менее плотная, сглаженная. During the examination, pronounced positive dynamics of the clinical picture of the disease and blood counts are noted (see table 36). The condition is almost satisfactory. Complaints of weak intermittent pain in the left hypochondrium. Karnowski index - 70. Palpation weak soreness in the place of projection of the head and body of the pancreas, the gland is less dense, smoothed.

При ультразвуковом исследовании: отмечается уменьшение размеров поджелудочной железы (головка 6.3 см, тело 3.2 см, хвост 2.1 см). Вирсунгов проток 0.4 см. Печень увеличена, правая доля 16.5 см, левая доля 9.5 см. Контуры неровные, структура неоднородная. В воротах печени фиброз. В паренхиме множественные гиперэхогенные тени. An ultrasound scan shows a decrease in the size of the pancreas (head 6.3 cm, body 3.2 cm, tail 2.1 cm). Wirsung duct 0.4 cm. The liver is enlarged, the right lobe is 16.5 cm, the left lobe is 9.5 cm. The contours are uneven, the structure is heterogeneous. At the gate of the liver is fibrosis. In the parenchyma, multiple hyperechoic shadows.

Схема лечения на повторный курс терапии препаратами группы GSSG: в течение 10 дней ежедневно через катетер в печеночную артерию вводился S-тиоэтиламин-GSSG (суточная доза 0.1-1.0 мг/кг). The treatment regimen for the second course of therapy with GSSG group drugs: S-thioethylamine-GSSG (daily dose 0.1-1.0 mg / kg) was injected daily through the catheter into the hepatic artery for 10 days.

В последующие 10 дней ежедневно внутривенно цинковая соль GSSG (суточная доза 0.01-0.5 мг/кг). После выписки больной получал поддерживающую иммунотерапию цинковой солью GSSG однократно в неделю (суточная доза 0.01-0.5 мг/кг) в течение 1 месяца. In the next 10 days, daily intravenous zinc salt of GSSG (daily dose of 0.01-0.5 mg / kg). After discharge, the patient received supportive immunotherapy with GSSG zinc salt once a week (daily dose of 0.01-0.5 mg / kg) for 1 month.

В сентябре 1996 г. больной госпитализирован в Центральную медико-санитарную часть N 122 для проведения третьего курса иммунотерапии. Клиническая картина без изменений. Картина периферической крови - см. таблицу 36. In September 1996, the patient was hospitalized in the Central Health Unit N 122 for the third course of immunotherapy. The clinical picture is unchanged. A picture of peripheral blood - see table 36.

На УЗИ: поджелудочная железа тех же размеров и структуры, как и при предыдущем исследовании. Печень незначительно увеличена, правая доля 15 см, левая 8 см, нижний край округлен, контуры четкие, ровные, паренхима неоднородная за счет гипо- и гиперэхогенных образований (участки фиброза и кальцификаты). Ultrasound: the pancreas is the same size and structure as in the previous study. The liver is slightly enlarged, the right lobe is 15 cm, the left is 8 cm, the lower edge is rounded, the contours are clear, even, the parenchyma is heterogeneous due to hypo- and hyperechoic formations (areas of fibrosis and calcifications).

Таким образом, лечебные эффекты препаратов GSSG оценены как существенные: повышение качества жизни; стабилизация опухолевого процесса; регресс метастатических очагов; реставрация параметров системы иммунитета и гемопоэза. Thus, the therapeutic effects of GSSG drugs are assessed as significant: improving the quality of life; stabilization of the tumor process; regression of metastatic lesions; restoration of parameters of the immune system and hematopoiesis.

Пример 21. Example 21

Лечебный эффект препаратов группы GSSG у больной сахарным диабетом. The therapeutic effect of drugs of the GSSG group in a patient with diabetes mellitus.

Больная 18 лет в марте 1992 года была госпитализирована в эндокринологическое отделение больницы N 16. Диагноз: Сахарный диабет. Инсулинозависимый тип - тип 1. Тяжелая форма инсулинорезистентности, диабетическая ангиоретинопатия IV степени, начальные проявления диабетической полиневропатии. Больна с 14 лет. Заболевание началось с прекоматозного состояния, уровень сахара в крови колебался от 18,4 до 28,0 ммоль/л, кетонурия (ацетон) и глюкозурия до 12%. Доза инсулина в начале заболевания: СУ-инсулин 68 ЕД, ИЦС 269 ед. Ранее неоднократно находилась на стационарном лечении. Доза инсулина с 1994 по 1996 гг. достигала 500 ЕД. При этом сахар в крови был в пределах 19,6-24,3 ммоль/л, глюкозурия - 4-6%, наличие кетонов в моче. A patient 18 years old in March 1992 was hospitalized in the endocrinology department of hospital N 16. Diagnosis: diabetes mellitus. Insulin-dependent type - type 1. Severe form of insulin resistance, diabetic angioretinopathy of the IV degree, initial manifestations of diabetic polyneuropathy. Sick since 14 years. The disease began with a precomatous state, blood sugar ranged from 18.4 to 28.0 mmol / L, ketonuria (acetone) and glucosuria up to 12%. Dose of insulin at the onset of the disease: SU-insulin 68 units, ICC 269 units. Previously, she was repeatedly hospitalized. The dose of insulin from 1994 to 1996. reached 500 units. In this case, blood sugar was in the range of 19.6-24.3 mmol / l, glucosuria - 4-6%, the presence of ketones in the urine.

В сентябре 1996 г. больная госпитализирована с курсом лечения: доза ИЦС-инсулин 500 ЕД, инсулин ИЦС-А 100 ЕД, СУ- инсулин 50 ЕД. Доза инсулина при поступлении: В-инсулин 480 ЕД, СУ-инсулин 22 ЕД. In September 1996, the patient was hospitalized with a course of treatment: a dose of ICS-insulin 500 IU, insulin ICS-A 100 IU, SU-insulin 50 IU. Dose of insulin upon admission: B-insulin 480 units, SU-insulin 22 units.

Содержание сахара в крови:
в 9.00 11.4 ммоль/л;
в 12.00 11.1 ммоль/л;
в 14.00 13.9 ммоль/л;
в 17.00 16.7 ммоль/л;
в 6.00 10.7 ммоль/л.Blood Sugar:
at 9.00 11.4 mmol / l;
at 12.00 11.1 mmol / l;
at 14.00 13.9 mmol / l;
at 17.00 16.7 mmol / l;
at 6.00 10.7 mmol / l.

Глюкозурия до 670 ммоль, реакция на ацетон +++. Glucosuria up to 670 mmol, reaction to acetone +++.

В связи с тяжелой формой инсулинорезистентности принято решение об использовании препаратов группы GSSG. In connection with the severe form of insulin resistance, a decision was made to use GSSG drugs.

Схема лечения: внутривенное введение в течение 10 дней один раз в день GSSG-Na₂ (натриевая соль) в 0.5% растворе липоевой кислоты (суточная доза 0.01-0.5 мг/кг).The treatment regimen: intravenous administration for 10 days once a day GSSG-Na ₂ (sodium salt) in a 0.5% solution of lipoic acid (daily dose of 0.01-0.5 mg / kg).

В течение следующих 10 дней, внутривенно один раз в два дня цинковая соль GSSG в 0.5% растворе липоевой кислоты (суточная доза 0.01-0.5 мг/кг). Over the next 10 days, intravenously once every two days, the zinc salt of GSSG in a 0.5% solution of lipoic acid (daily dose of 0.01-0.5 mg / kg).

В течение следующих 10 дней (третья декада) лечения внутримышечные инъекции натриевой соли GSSG в 5% растворе аскорбиновой кислоты один раз в день в течение 20 дней (суточная доза 0.1-0.5 мг/кг). Over the next 10 days (third decade) of treatment, intramuscular injections of GSSG sodium salt in a 5% solution of ascorbic acid once a day for 20 days (daily dose 0.1-0.5 mg / kg).

Наряду с проводимой терапией препаратами группы GSSG изменено лечение инсулином. Был назначен СУ-инсулин в нескольких инъекциях в течение суток, а пролонгированный инсулин отменен. Along with the therapy with GSSG drugs, insulin treatment was changed. SU-insulin was prescribed in several injections during the day, and prolonged insulin was canceled.

На фоне лечения доза инсулина постепенно уменьшена, из стационара больная выписана на следующих дозах инсулина:
в 6.00 - СУ-инсулина-4ЕД;
в 9.00 - 50 ЕД;
в 14.00 - 36 ЕД
в 19.00 - 36 ЕД;
в 23.00 - 8 ЕД (общая доза 134 ЕД).During treatment, the dose of insulin was gradually reduced, the patient was discharged from the hospital at the following doses of insulin:
at 6.00 - SU-insulin-4ED;
at 9.00 - 50 units;
at 14.00 - 36 units
at 19.00 - 36 units;
at 23.00 - 8 units (total dose of 134 units).

Сахар в крови нормализовался и не превышает 8 ммоль/л после еды. С момента выписки из стационара больная получала иммунотерапию препаратами группы GSSG амбулаторно в течение месяца. Blood sugar normalized and does not exceed 8 mmol / l after eating. From the moment of discharge from the hospital, the patient received immunotherapy with drugs of the GSSG group on an outpatient basis for a month.

Схема лечения:
В течение одного месяца через день внутримышечные инъекции натриевой соли GSSG в 0.5% растворе липоевой кислоты (суточная доза 0.01-0.5 мг/кг).Treatment scheme:
For one month every other day, intramuscular injections of GSSG sodium salt in 0.5% lipoic acid solution (daily dose of 0.01-0.5 mg / kg).

В течение 2 последовательных месяцев лечения данным препаратом у больной 2 развивалась гипогликемия - 1.8-2.2 ммоль/л, что вынудило снизить дозы инсулина. Через 2 месяца лечения использовалась следующая схема введения инсулина:
в 6.00 - СУ-инсулина-4 ЕД;
в 9.00 - 36 ЕД;
в 14.00 - 12 ЕД
в 19.00 - 12 ЕД;
в 23.00 - 4 ЕД (общая доза 68 ЕД).During 2 consecutive months of treatment with this drug, patient 2 developed hypoglycemia - 1.8-2.2 mmol / l, which forced to reduce the dose of insulin. After 2 months of treatment, the following insulin administration regimen was used:
at 6.00 - SU-insulin-4 units;
at 9.00 - 36 units;
at 14.00 - 12 units
at 19.00 - 12 units;
at 23.00 - 4 units (total dose of 68 units).

Через 2 месяца комбинированной терапии, в которой препараты группы GSSG применялись в качестве сопроводительной терапии - состояние больной удовлетворительное, жалоб нет. Динамика показателей крови приведена в таблице 37. Таким образом, получены следующие клинические эффекты: ликвидация инсулинорезистентности; снижение дозы инсулина; улучшение качества жизни и стабилизация уровня сахара в крови. After 2 months of combination therapy, in which GSSG preparations were used as an accompanying therapy, the patient's condition is satisfactory, no complaints. The dynamics of blood counts are shown in table 37. Thus, the following clinical effects were obtained: elimination of insulin resistance; insulin dose reduction; improving the quality of life and stabilizing blood sugar.

Пример 22. Example 22

Лечебный эффект препаратов группы GSSG у больного раком легких. The therapeutic effect of drugs of the GSSG group in a patient with lung cancer.

Диагноз: Рак верхней доли правого легкого (T₃N₂M₀) с прорастанием верхней полой вены и легочной артерии. Метастазы в лимфоузлы средостения.Diagnosis: Cancer of the upper lobe of the right lung (T ₃ N ₂ M ₀ ) with germination of the superior vena cava and pulmonary artery. Metastases in the lymph nodes of the mediastinum.

В сентябре 1995 года больной 59 лет поступил в хирургическое отделение Института Пульмонологии Министерства Здравоохранения РФ с подозрением на новообразование легких. На момент поступления в клинику жалобы на периодическое повышение температуры тела до 38.4^oC, снижение аппетита, похудание на 8 кг, одышку при движении.In September 1995, a 59-year-old patient was admitted to the surgical department of the Institute of Pulmonology of the Ministry of Health of the Russian Federation with suspected lung neoplasm. At the time of admission to the clinic complaints of a periodic increase in body temperature to 38.4 ^o C, loss of appetite, weight loss by 8 kg, shortness of breath when moving.

На серии компьютерных томограмм грудной полости от 29.08.96 г. правое легкое уменьшено в объеме за счет гиповентиляции верхней доли. Легочный рисунок правого легкого неоднороден. Верхнедолевой бронх справа сужен, деформирован, выявляется очаг размерами 4.0х5.0х6.0 см. Нельзя исключить наличие увеличенных парамедиастинальных лимфоузлов справа. Жидкости в плевральных полостях нет. On a series of computed tomograms of the chest cavity from 08.29.96, the right lung was reduced in volume due to hypoventilation of the upper lobe. The pulmonary pattern of the right lung is heterogeneous. The upper lobar bronchus on the right is narrowed, deformed, a lesion with a size of 4.0x5.0x6.0 cm is revealed. The presence of enlarged paramediastinal lymph nodes on the right cannot be ruled out. There is no fluid in the pleural cavities.

При бронхоскопии: определяется лимфангоит боковой стенки нижней трети трахеи, инфильтрация и лимфангоит боковой стенки правого главного бронха, инфильтративно-компрессионный стеноз верхнедолевого бронха справа (боковая стенка) 1-2 степени. With bronchoscopy: lymphangitis of the lateral wall of the lower third of the trachea, infiltration and lymphangitis of the lateral wall of the right main bronchus, infiltrative-compression stenosis of the upper lobe bronchus on the right (side wall) of 1-2 degrees are determined.

При диагностической торакотомии (14.09.95 г.): в области верхней доли правого легкого было выявлено бугристое образование плотной консистенции размерами 4.0х5.0х6.0 см, врастающее в париетальную плевру у верхушки легкого. При ревизии корня легкого, после вскрытия перикарда, обнаружено прорастание верхней полой вены и легочной артерии. Гистологически новообразование идентифицировано как низкодифференцированная (мелкоклеточная) карцинома. Случай признан неоперабельным. Diagnostic thoracotomy (September 14, 1995): in the region of the upper lobe of the right lung, a tuberous formation of dense consistency with a size of 4.0x5.0x6.0 cm was revealed, which grows into the parietal pleura at the apex of the lung. When revising the lung root, after opening the pericardium, the germination of the superior vena cava and pulmonary artery was detected. Histologically, the neoplasm is identified as low-grade (small cell) carcinoma. Case recognized inoperable.

Состояние больного продолжает ухудшаться: появляется увеличенный правый надключичный лимфоузел (3.5х4.0 см). Больной переводится в Институт Онкологии для проведения химиотерапии. После проведения первого курса химиотерапии по схеме VP-P (цисплатин, этопозид) состояние пациента существенно ухудшилось: рвота, тошнота, алопеция, гипертрансаминаземия, гиперкреатининемия, лейкопения. The patient's condition continues to worsen: an enlarged right supraclavicular lymph node appears (3.5x4.0 cm). The patient is transferred to the Institute of Oncology for chemotherapy. After the first course of chemotherapy according to the VP-P regimen (cisplatin, etoposide), the patient's condition worsened significantly: vomiting, nausea, alopecia, hypertransaminemia, hypercreatininemia, leukopenia.

В связи с тяжестью состояния пациента и отсутствием альтернативного лечения принято решение о проведении терапии препаратом литиевой соли GSSG (Li-GSSG). Due to the severity of the patient's condition and the lack of alternative treatment, it was decided to conduct therapy with the lithium salt GSSG (Li-GSSG).

На фоне терапии GSSG-Li (суточная доза 0.01-0.5 мг/кг внутривенно и внутримышечно через день в течение 14 дней), качество жизни существенно улучшилось (индекс Карновского 80 (60)), появился аппетит, несколько уменьшилась одышка. On the background of GSSG-Li therapy (daily dose of 0.01-0.5 mg / kg intravenously and intramuscularly every other day for 14 days), the quality of life improved significantly (Karnowski index 80 (60)), appetite appeared, shortness of breath decreased.

В течение двух недель применения литиевой соли GSSG в 0.003% растворе H₂O₂ существенно улучшились показатели крови (лейкоциты, красная кровь, креатинин, трансаминазы), что позволило провести повторный курс химиотерапии (VP-P). В отличие от первого курса химиотерапии, на фоне приема GSSG-Li второй курс цитостатической химиотерапии больной перенес без осложнений: не было тошноты и рвоты, появился аппетит (прибавил в весе 5 кг); общие клинические и биохимические показатели крови - в пределах нормы.Within two weeks of using lithium salt of GSSG in a 0.003% H ₂ O ₂ solution, blood counts (leukocytes, red blood, creatinine, transaminases) improved significantly, which allowed for a second course of chemotherapy (VP-P). Unlike the first course of chemotherapy, while taking GSSG-Li, the patient suffered a second course of cytostatic chemotherapy without complications: there was no nausea and vomiting, appetite appeared (added 5 kg in weight); general clinical and biochemical blood parameters are within normal limits.

После второго курса химиотерапии лечение препаратами группы GSSG было возобновлено: литиевая соль GSSG в 3% диметилсульфоксиде (DMSO) (суточная доза 0.01-0.5 мг/кг, внутривенно и внутримышечно 3 раза в неделю в течение 14 дней). After the second chemotherapy course, treatment with GSSG drugs was resumed: lithium salt of GSSG in 3% dimethyl sulfoxide (DMSO) (daily dose 0.01-0.5 mg / kg, intravenously and intramuscularly 3 times a week for 14 days).

Следующий этап лечения включал курс химиотерапии плюс GSSG- Li в Институте Онкологии. После 3 курса химиотерапии осложнений нет. Показатели крови в пределах нормы. Отмечается полный регресс увеличенного правого надключичного лимфоузла и положительная рентгенологическая динамика первичного очага: отсутствуют признаки ателектаза, дополнительных теней средостения и паратрахеально нет, трахея расположена правильно, остаточная полость исчезла. The next stage of treatment included a course of chemotherapy plus GSSG-Li at the Institute of Oncology. After 3 courses of chemotherapy, there are no complications. Blood counts are within normal limits. Complete regression of the enlarged right supraclavicular lymph node and positive radiological dynamics of the primary focus are noted: there are no signs of atelectasis, there are no additional shadows of the mediastinum and paratracheally, the trachea is located correctly, the residual cavity has disappeared.

Таким образом, два курса химиотерапии (схема VP-P) в сочетании с препаратами группы GSSG (литиевая соль GSSG) обеспечили: удовлетворительное качество жизни, системный регресс опухолевого процесса, реставрацию лабораторных параметров, что было связано со стабильным повышением эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов (см. таблицу 38). Позднее больной получал GSSG-Li в диапазоне доз 0.01-0.5 мг/кг, через день, в течение 14 дней. Thus, two courses of chemotherapy (VP-P regimen) in combination with GSSG drugs (GSSG lithium salt) provided: satisfactory quality of life, systemic regression of the tumor process, restoration of laboratory parameters, which was associated with a stable increase in the endogenous production of cytokines and hematopoietic factors (see table 38). Later, the patient received GSSG-Li in a dose range of 0.01-0.5 mg / kg, every other day, for 14 days.

Через год (14.10.96):
На томографии грудной клетки участок фиброзных изменений в правом верхнедолевом бронхе 1.5х1.5х2.0 см. В легочной ткани отсутствуют новые участки инфильтративных или фиброзных изменений. Просветы трахеи и бронхов в обоих легких не сужены и не деформированы. Отсутствует увеличение лимфоузлов средостения и корней легких. Выпота в плевральных полостях нет.After a year (10/14/96):
On the chest tomography, the plot of fibrotic changes in the upper right lobar bronchus is 1.5x1.5x2.0 cm. There are no new areas of infiltrative or fibrotic changes in the lung tissue. The gleams of the trachea and bronchi in both lungs are not narrowed and not deformed. There is no increase in the lymph nodes of the mediastinum and the roots of the lungs. There is no effusion in the pleural cavities.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ:
Сочетанное применение химиотерапии и GSSG-Li значительно потенцировало химиотерапевтическое воздействие с приемлемой переносимостью химиотерапии. В целом, комбинированная терапия привела к регрессу опухоли, ликвидации метастазов, восстановлению систем иммунитета и гематопоэза, улучшению качества жизни.CONCLUSION:
The combined use of chemotherapy and GSSG-Li significantly potentiated the chemotherapeutic effect with acceptable tolerance to chemotherapy. In general, combination therapy led to tumor regression, elimination of metastases, restoration of the immune system and hematopoiesis, and an improvement in the quality of life.

Пример 23. Example 23

Лечебный эффект препаратов группы GSSG у больной раком сигмовидной кишки. The therapeutic effect of drugs of the GSSG group in a patient with sigmoid colon cancer.

Диагноз: Рак (низкодифференцированная аденокарцинома) ректо-сигмоидного отдела толстой кишки (T₄N₀M₀), осложненный правосторонним аднекстумором, правосторонним тубоовариальным абсцессом; разлитым флегмонозно-гнойным перитонитом.Diagnosis: Cancer (low-grade adenocarcinoma) of the recto-sigmoid colon (T ₄ N ₀ M ₀ ), complicated by right-side adnexum, right-sided tubo-ovarian abscess; diffuse phlegmonous-purulent peritonitis.

В июне 1996 года по скорой помощи поступила во II хирургическое отделение Центральной медико-санитарной части N 122 больная 48 лет с вышеизложенным диагнозом. In June 1996, an ambulance was admitted to the II surgical department of the Central Health Unit N 122, a 48-year-old patient with the above diagnosis.

Произведена операция - петлевая сигмостома, санация и дренирование брюшной полости. Состояние больной тяжелое: индекс Карновского 30, лихорадка 39-40^oC. Несмотря на комплексную консервативную терапию, клиническое состояние ухудшалось и осложнилось двухсторонней пневмонией. Подключение мощной антибиотикотерапии (антибиотики цефалоспоринового и пенициллинового рядов - клафоран - суточная доза 6 г, ампиокс - суточная доза 2 г) не обеспечивала желаемой положительной динамики.An operation was performed - loop sigmostoma, rehabilitation and drainage of the abdominal cavity. The patient's condition is serious: Karnovsky index 30, fever 39-40 ^o C. Despite complex conservative therapy, the clinical condition worsened and was complicated by bilateral pneumonia. The connection of powerful antibiotic therapy (cephalosporin and penicillin series antibiotics - claforan - daily dose of 6 g, ampiox - daily dose of 2 g) did not provide the desired positive dynamics.

В связи с неэффективностью проводимой терапии принято решение использовать препараты группы GSSG (GSSG-Zn₂).Due to the ineffectiveness of the therapy, it was decided to use drugs of the GSSG group (GSSG-Zn ₂ ).

Больной в течение недели на фоне комплексной терапии проводилось лечение GSSG-Zn₂ в 0.1% растворе цистамина (суточная доза 0.01-0.5 мг/кг внутривенно и внутримышечно в течение 7 дней). Через неделю лечения: клиническая картина существенно улучшилась, появился аппетит, исчезла слабость, нормализовался сон, репарация раны местно улучшилась. Наметилась тенденция к нормализации показателей крови (см. таблицу 39), рентгенологические признаки пневмонии не выявлены.A patient was treated with GSSG-Zn ₂ in a 0.1% cystamine solution for a week during the course of complex therapy (daily dose of 0.01-0.5 mg / kg intravenously and intramuscularly for 7 days). After a week of treatment: the clinical picture improved significantly, appetite appeared, weakness disappeared, sleep normalized, wound repair locally improved. There was a tendency to normalize blood counts (see table 39), radiological signs of pneumonia were not detected.

Достигнутые положительные эффекты позволили выполнить второй этап оперативного лечения: произведена реляпаротомия с резекцией ректо-сигмоидного отдела толстой кишки и правого придатка матки с яичником. Послеоперационный период охарактеризовался развитием правосторонней нижнедолевой плевропневмонии. Вновь к комплексному лечению подключен GSSG-Zn₂ в 0.1% растворе цистамина (суточная доза 0.01-0.5 мг/кг ежедневно внутримышечно и внутривенно в течение недели). Клинические и рентгенологические признаки пневмонии купированы в течение 3-х дней.The achieved positive effects made it possible to perform the second stage of surgical treatment: a relaparotomy was performed with resection of the recto-sigmoid colon and the right uterus with the ovary. The postoperative period was characterized by the development of right-sided lower lobe pleuropneumonia. Again, GSSG-Zn ₂ in 0.1% cystamine solution was connected to the complex treatment (daily dose of 0.01-0.5 mg / kg daily intramuscularly and intravenously for a week). Clinical and radiological signs of pneumonia were stopped within 3 days.

Со стороны послеоперационной раны осложнений не отмечено. Швы сняты на седьмые сутки. Больная выписана в удовлетворительном состоянии под наблюдение врачей по месту жительства. From the postoperative wound, no complications were noted. Sutures were removed on the seventh day. The patient was discharged in satisfactory condition under the supervision of doctors at the place of residence.

Результаты применения препаратов группы GSSG свидетельствуют об: улучшении качества жизни; потенцировании действия антибактериальной терапии;
реставрации клеточного и гуморального иммунитета; восстановлении лабораторных показателей; ускорении заживления раны; возможности проведения радикального хирургического лечения.The results of the use of drugs of the GSSG group indicate: improved quality of life; potentiation of antibiotic therapy;
restoration of cellular and humoral immunity; restoration of laboratory indicators; accelerating wound healing; the possibility of radical surgical treatment.

Пример 24. Example 24

Лечебный эффект препаратов группы GSSG у больного раком двенадцатиперстной кишки и поджелудочной железы. The therapeutic effect of drugs of the GSSG group in a patient with cancer of the duodenum and pancreas.

Диагноз: Рак поджелудочной железы с прорастанием 12-перстной кишки (T₃N₂M₁).Diagnosis: Pancreatic cancer with germination of the duodenum 12 (T ₃ N ₂ M ₁ ).

В январе 1996 года больной 67 лет поступил во II хирургическое отделение Центральной медико-санитарной части N 122 с наличием механической желтухи. Диагноз: Инфильтративная структура холедоха. Произведена операция: чрезкожно-чрезпеченочное наружно-внутреннее дренирование. In January 1996, a 67-year-old patient was admitted to the II surgical department of the Central Health Unit N 122 with the presence of obstructive jaundice. Diagnosis: Infiltrative structure of the common bile duct. The operation was performed: percutaneous-transhepatic external-internal drainage.

В феврале 1996 г. - холецистоэктомия, холедоходуаденоанастомоз по Юрашу. Больного беспокоят сильные боли в левом подреберье с иррадиацией в спину, в связи с чем назначены наркотические анальгетики. Отсутствует аппетит. Потеря массы тела за месяц составила 13 кг. Индекс Карновского - 40. Периодическая рвота, тошнота, стеаторея. Содержание амилазы и липазы в сыворотке крови повышено, диастазурия, анемия. Над проекцией головки поджелудочной железы пальпируется бугристое образование. При фиброгастродуоденоскопии: определяется инфильтрация слизистой 12-перстной кишки до области фатерова соска. In February 1996 - cholecystectomy, choledochoduoadenoanastomosis according to Jurash. The patient is worried about severe pain in the left hypochondrium with irradiation in the back, in connection with which narcotic analgesics are prescribed. There is no appetite. Monthly weight loss was 13 kg. Karnowski index - 40. Periodic vomiting, nausea, steatorrhea. The content of amylase and lipase in the blood serum is increased, diastasuria, anemia. Over the projection of the head of the pancreas, a tuberous formation is palpated. With fibrogastroduodenoscopy: the infiltration of the mucosa of the duodenum 12 to the area of the Vater's nipple is determined.

В связи с тяжестью состояния пациента, прогрессирующего ухудшения течения заболевания и отсутствием альтернативного лечения принято решение о применении препаратов группы GSSG, в частности GSSG-Zn₂ в диметилсульфоксиде (ДМСО).Due to the severity of the patient’s condition, progressive worsening of the disease and the lack of alternative treatment, it was decided to use GSSG drugs, in particular GSSG-Zn ₂ in dimethyl sulfoxide (DMSO).

Через 2 недели лечения состояние больного явно улучшилось. Индекс Карновского - 80. Выраженность болевого синдрома уменьшилась, хотя больной испытывал периодические боли умеренной интенсивности. Отменены наркотические анальгетики. Рвоты, тошноты - нет. Прибавил в весе на 4 кг. Нормализовались показатели крови (таблица 40). After 2 weeks of treatment, the patient's condition clearly improved. The Karnowski index is 80. The severity of the pain syndrome decreased, although the patient experienced periodic pain of moderate intensity. Canceled narcotic analgesics. Vomiting, nausea - no. He gained 4 kg in weight. Blood counts returned to normal (table 40).

Клиническое улучшение позволило провести сочетанную высокодозную химиотерапию (5-фторурацил - 10 г на курс) и терапию препаратом GSSG-Zn₂. В течение 3-х дней больной получал эндолимфатически 5-фторурацил (1 день - 3 г, 2 день - 3 г, 3 день - 4 г) и высокие дозы препарата GSSG- Zn₂ в ДМСО (суточная доза 0.1-1.0 мг/кг).Clinical improvement allowed the combination of high-dose chemotherapy (5-fluorouracil - 10 g per course) and therapy with GSSG-Zn ₂ . Within 3 days, the patient received 5-fluorouracil endolymphatically (1 day - 3 g, 2 days - 3 g, 3 days - 4 g) and high doses of GSSG-Zn ₂ in DMSO (daily dose 0.1-1.0 mg / kg )

Проведенное лечение пациент перенес без формирования синдрома цитопении (показатели крови - см. таблицу 40). В течение 3-х последовательных месяцев (февраль - апрель) больной получал поддерживающие дозы GSSG-Zn₂ в ДМСО (суточная доза 0.01- 0.3 мг/кг внутривенно и внутримышечно 2 раза в неделю). Состояние больного хорошее. Индекс Карновского 90. Отсутствуют боли. Аппетит хороший. Прибавил в весе на 8 кг.The patient underwent the treatment without the formation of cytopenia syndrome (blood counts - see table 40). For 3 consecutive months (February - April), the patient received maintenance doses of GSSG-Zn ₂ in DMSO (daily dose of 0.01-0.3 mg / kg intravenously and intramuscularly 2 times a week). The patient's condition is good. Karnowski index 90. There is no pain. The appetite is good. He gained 8 kg in weight.

Через 3 месяца (май, 1996 г.): в течение 3-х дней больному проведен повторный курс высокодозной химиотерапии в сочетании с GSSG-Zn₂ (общая доза 5-фторурацила 10 г, GSSG-Zn₂ - суточная доза 0.1-1.0 мг/кг). Осложнений не было. Пациент выписан в удовлетворительном состоянии для амбулаторного наблюдения. Лечение препаратом GSSG-Zn₂ проводилось в течение 3-х последовательных месяцев (суточная доза 0.01- 0.5 мг/кг внутривенно и внутримышечно 2 раза в неделю).After 3 months (May, 1996): within 3 days the patient was given a repeated course of high-dose chemotherapy in combination with GSSG-Zn ₂ (total dose of 5-fluorouracil 10 g, GSSG-Zn ₂ - daily dose 0.1-1.0 mg / kg). There were no complications. The patient was discharged in satisfactory condition for outpatient monitoring. Treatment with GSSG-Zn ₂ was carried out for 3 consecutive months (daily dose of 0.01-0.5 mg / kg intravenously and intramuscularly 2 times a week).

Через 6 месяцев (сентябрь, 1996 г.): проведен 3 курс высокодозной химио- и иммунотерапии в том же объеме, без осложнений. Состояние больного удовлетворительное. Индекс Карновского 90. Аппетит хороший. Рвота, тошнота не наблюдались. От начала лечения прибавил в весе на 12 кг. При ФГДС - существенное снижение инфильтрации слизистой 12-перстной кишки с признаками стабилизации опухолевого процесса. After 6 months (September, 1996): 3 courses of high-dose chemo and immunotherapy were carried out in the same volume, without complications. The patient's condition is satisfactory. Karnowski index 90. Good appetite. Vomiting, nausea were not observed. From the beginning of treatment, he gained 12 kg in weight. With FGDS - a significant decrease in infiltration of the mucosa of the duodenum 12 with signs of stabilization of the tumor process.

Таким образом, могут быть выделены следующие результаты комбинированного применения GSSG-Zn₂ и химиотерапии: улучшение качества жизни; отсутствие болевого синдрома; положительная динамика лабораторных показателей; стабилизация опухолевого процесса; хорошая переносимость химиотерапии.Thus, the following results of the combined use of GSSG-Zn ₂ and chemotherapy can be distinguished: improving the quality of life; lack of pain; positive dynamics of laboratory indicators; stabilization of the tumor process; good tolerance to chemotherapy.

Пример 25. Example 25

Лечебный эффект препаратов группы GSSG у больного с тяжелыми послеоперационными осложнениями. The therapeutic effect of drugs of the GSSG group in a patient with severe postoperative complications.

Диагноз: Постинтубационный рубцовый стеноз трахеи, трахеопищеводный свищ, послеоперационная эмпиема плевральной полости справа. Diagnosis: Post-intubation cicatricial stenosis of the trachea, tracheoesophageal fistula, postoperative empyema of the pleural cavity on the right.

Пациент 22 лет поступил на отделение хирургии Государственного Научного Центра Пульмонологии Министерства здравоохранения Российской Федерации в марте 1996 года после установки линейного стента трахеи. После его извлечения отмечено рецидивирование стеноза трахеи и появление признаков трахеопищеводного свища. Учитывая изложенное, в апреле 1996 года выполнена операция: циркулярная резекция трахеи, разобщение трахеопищеводного свища, оментопластика. A 22-year-old patient was admitted to the Department of Surgery of the State Scientific Center of Pulmonology of the Ministry of Health of the Russian Federation in March 1996 after the installation of a linear tracheal stent. After its extraction, recurrence of tracheal stenosis and the appearance of tracheoesophageal fistula were noted. Given the above, in April 1996, the operation was performed: circular resection of the trachea, dissociation of the tracheoesophageal fistula, omentoplasty.

В послеоперационном периоде отмечено развитие правосторонней эмпиемы плевры. Несмотря на массированную антибиотикотерапию, детоксикационную терапию, дренирование плевральной полости - состояние больного тяжелое. Больной бледен. Пульс 120 ударов в минуту, ритмичный. Артериальное давление 90/50 мм ртутного столба. Частота дыхания 28 в минуту. Малейшая физическая нагрузка приводит к одышке, температура 38.8-39.6^oC.In the postoperative period, the development of right-sided pleural empyema was noted. Despite massive antibiotic therapy, detoxification therapy, and drainage of the pleural cavity, the patient is in a serious condition. The patient is pale. The pulse is 120 beats per minute, rhythmic. Blood pressure 90/50 mmHg. Respiratory rate 28 per minute. The slightest physical activity leads to shortness of breath, a temperature of 38.8-39.6 ^o C.

На рентгенограмме грудной клетки: выявляется снижение прозрачности всего левого легкого поля за счет диффузной инфильтрации (отеком). Паракостально в латеральных отделах вдоль грудной стенки и в задних отделах в междолевых щелях - значительное количество жидкости. Расширена срединная тень в верхних отделах. On the chest x-ray: revealed a decrease in transparency of the entire left lung field due to diffuse infiltration (edema). A significant amount of fluid is paracostally in the lateral sections along the chest wall and in the posterior sections in the interlobar fissures. The median shadow in the upper sections is expanded.

В крови выраженный лейкоцитоз (30•10⁹/л), нейтрофилия, ускоренное СОЭ - 58 мм/ч, гипертрансаминаземия (см. таблицу 41).In the blood, expressed leukocytosis (30 • 10 ⁹ / l), neutrophilia, accelerated ESR - 58 mm / h, hypertransaminasemia (see table 41).

В связи с тяжестью состояния, дыхательной недостаточностью и отсутствием какой-либо альтернативной терапии принято решение о проведении терапии препаратом литиевой соли GSSG (GSSG-Li₂) в составе комплексной терапии.Due to the severity of the condition, respiratory failure, and the absence of any alternative therapy, a decision was made to conduct therapy with lithium salt GSSG (GSSG-Li ₂ ) as part of complex therapy.

На фоне терапии GSSG-Li₂ (в суточной дозе 0.01-0.5 мг/кг) наметился определенный положительный эффект - уменьшение признаков интоксикации (снижение температуры до 37,3^oC), пульс 88 ударов в минуту, купирование дыхательной недостаточности. Достигнутый положительный эффект стабилизирован благодаря последующим введениям препарата (суточная доза 0.01-0.5 мг/кг, ежедневно, внутривенно в течение 5 дней).During therapy with GSSG-Li ₂ (in a daily dose of 0.01-0.5 mg / kg), a definite positive effect was observed - a decrease in signs of intoxication (a decrease in temperature to 37.3 ^o C), a pulse of 88 beats per minute, and relief of respiratory failure. The achieved positive effect is stabilized due to subsequent injections of the drug (daily dose of 0.01-0.5 mg / kg, daily, intravenously for 5 days).

Через неделю комплексного лечения препаратом GSSG-Li₂ (в суточной дозе 0.01-0.5 мг/кг) и антибиотиками (клафоран в суточной дозе 6 г, ампиокс в суточной дозе 2 г) состояние больного удовлетворительное. Жалоб нет. Пульс 80 ударов в минуту, АД 115/70 мм ртутного столба. Дыхание несколько ослаблено справа, выслушивается во всех отделах.After a week of complex treatment with GSSG-Li ₂ (in a daily dose of 0.01-0.5 mg / kg) and antibiotics (Claforan in a daily dose of 6 g, Ampioks in a daily dose of 2 g), the patient's condition is satisfactory. There are no complaints. Pulse 80 beats per minute, HELL 115/70 mm Hg. Breathing is somewhat weakened on the right, is heard in all departments.

Рубцы после операции без признаков воспаления. Гранулирующая рана в области задней торакотомии без отделяемого. При бронхоскопии - анастомоз широкий без признаков грануляции. На рентгенограмме грудной клетки - без патологических изменений. Scars after surgery without signs of inflammation. Granulating wound in the posterior thoracotomy without detachable. With bronchoscopy, the anastomosis is wide without signs of granulation. On the chest x-ray - no pathological changes.

Через месяц лечения GSSG-Liz (в суточной дозе 0.01-0.5 мг/кг, через день, внутривенно и внутримышечно в течение 3-х недель): состояние больного удовлетворительное. Показатели крови в пределах нормы (см. таблицу 41). After a month of treatment with GSSG-Liz (in a daily dose of 0.01-0.5 mg / kg, every other day, intravenously and intramuscularly for 3 weeks): the patient's condition is satisfactory. Blood counts are within normal limits (see table 41).

Лечебный эффект: регресс гнойного процесса; потенцирование эффекта антибактериальной терапии; обеспечение детоксикационного эффекта; восстановление лабораторных параметров периферической крови. Therapeutic effect: regression of the purulent process; potentiation of the effect of antibiotic therapy; providing a detoxifying effect; restoration of laboratory parameters of peripheral blood.

Пример 26. Example 26

Лечебный эффект препаратов группы GSSG у больных рассеянным склерозом. The therapeutic effect of GSSG drugs in patients with multiple sclerosis.

Обследованы 19 больных с цереброспинальной формой рассеянного склероза (PC) в возрасте от 23 до 52 лет (таблица 42) с целью проведения терапии препаратами группы GSSG. Все больные поступили в стационар в периоде обострения заболевания. Диагноз верифицирован на основании рекомендаций Международной ассоциации по изучению рассеянного склероза (1992). По характеру течения преобладали больные с тяжелой формой прогредиентно-рецидивирующего течения. У 5 больных длительность обострения составила один месяц, у 7 - от одного до трех месяцев, у 7 - свыше трех месяцев. 19 patients with cerebrospinal form of multiple sclerosis (PC) aged 23 to 52 years were examined (Table 42) with the aim of conducting therapy with drugs of the GSSG group. All patients were admitted to the hospital during the period of exacerbation of the disease. The diagnosis was verified based on the recommendations of the International Multiple Sclerosis Association (1992). By the nature of the course, patients with a severe form of a progressively recurrent course predominated. In 5 patients, the exacerbation duration was one month, in 7 - from one to three months, in 7 - more than three months.

Проведен 90-дневный курс лечения по следующей схеме:
1. GSSG-Na в 10% растворе S-аденозил-метионина в/в, 1 раз в день в течение 10 дней, суточная доза-0.01-0.5 мг/кг.A 90-day course of treatment was carried out according to the following scheme:
1. GSSG-Na in a 10% solution of S-adenosyl-methionine iv, 1 time per day for 10 days, the daily dose is 0.01-0.5 mg / kg.

2. Двухнедельный перерыв. 2. A two-week break.

3. GSSG-Zn в 10% растворе S-аденозил-метионина в/в, через день в течение 20 дней, суточная доза - 0.01-0.5 мг/кг. 3. GSSG-Zn in a 10% solution of S-adenosyl-methionine iv, every other day for 20 days, the daily dose is 0.01-0.5 mg / kg.

4. Двухнедельный перерыв. 4. A two-week break.

5. Бис-метионил-GSSG в 5% растворе аскорбиновой кислоты (витамин C) в/в и в/м, чередуя пути введения (один из них - 1 день), суточная доза - 0.01-0.5 мг/кг в течение 30 дней. 5. Bis-methionyl-GSSG in a 5% solution of ascorbic acid (vitamin C) in / in and / m, alternating the route of administration (one of them - 1 day), daily dose - 0.01-0.5 mg / kg for 30 days .

Обследование пациентов осуществляли до лечения, через месяц, через 3 и через 6 месяцев лечения. В периферической крови определяли: содержание CD3⁺, CD4⁺, CD8⁺, CD20⁺ - субпопуляций лимфоцитов иммунофлуоресцентным методом с использованием наборов моноклональных антител, подсчитывали соотношение CD4⁺/CD8⁺ (таблица 43). Состояние клеточного иммунитета оценивали с помощью реакции торможения адгезии лейкоцитов в присутствии нейроспецифических антигенов: белка S-100, антигена нейрональных мембран и основного белка миелина (таблица 44). Контрольную группу составили 25 доноров крови и больных с корешковыми синдромами.Examination of patients was carried out before treatment, after a month, after 3 and after 6 months of treatment. In the peripheral blood was determined: the content of CD3 ⁺ , CD4 ⁺ , CD8 ⁺ , CD20 ⁺ - subpopulations of lymphocytes by immunofluorescence method using sets of monoclonal antibodies, the ratio of CD4 ⁺ / CD8 ^{+ was} calculated (table 43). The state of cellular immunity was assessed using the inhibition of leukocyte adhesion in the presence of neurospecific antigens: S-100 protein, antigen of neuronal membranes and the main myelin protein (table 44). The control group consisted of 25 blood donors and patients with radicular syndromes.

Исходное состояние иммунной системы характеризовалось уменьшением общего количества CD3⁺, достоверным снижением уровня CD4⁺, увеличением уровня CD8⁺, дисбалансом между субпопуляциями хелперных и супрессорных клеток, повышением содержания CD20⁺ субпопуляции лимфоцитов.The initial state of the immune system was characterized by a decrease in the total number of CD3 ⁺ , a significant decrease in the level of CD4 ⁺ , an increase in the level of CD8 ⁺ , an imbalance between the subpopulations of helper and suppressor cells, and an increase in the content of CD20 ⁺ subpopulations of lymphocytes.

После проведенного лечения у больных наблюдалась положительная динамика в отношении показателей клеточного иммунитета, что выражалось в нормализации содержания CD3⁺, CD4⁺ клеток, и CD8⁺ (Т-супрессорные) клеток. При этом наблюдался факт снижения процента сенсибилизации лимфоцитов к одному или нескольким нейроспецифическим антигенам. Отмечен описанный в литературе феномен иммунологической инверсии содержания белка S-100 и основного белка миелина (таблица 44).After the treatment, patients showed a positive dynamics in relation to indicators of cellular immunity, which was expressed in the normalization of the content of CD3 ⁺ , CD4 ⁺ cells, and CD8 ⁺ (T-suppressor) cells. At the same time, the fact of a decrease in the percentage of sensitization of lymphocytes to one or more neurospecific antigens was observed. The phenomenon of immunological inversion of the content of S-100 protein and the main myelin protein described in the literature was noted (Table 44).

Реставрация иммунной системы сопровождалась регрессом неврологической симптоматики у 84% больных. The restoration of the immune system was accompanied by a regression of neurological symptoms in 84% of patients.

В сыворотке крови и ликворе больных определяли эндогенное содержание ИНФ-α, ИФН-α, и TNF (таблица 45). Обращает внимание повышение ИНФ-γ в процессе лечения пациентов. При обследовании пациентов величина ТНФ. коррелировала со степенью неврологического дефицита, оцениваемого по шкале Куртцке. The endogenous content of INF-α, IFN-α, and TNF was determined in the blood serum and cerebrospinal fluid of patients (table 45). An increase in INF-γ in the treatment of patients is noteworthy. When examining patients, the TNF value. correlated with the degree of neurological deficit, assessed on the Kurtzke scale.

Проведено определение состояния гуморальной системы иммунитета по следующим параметрам: подсчет В-лимфоцитов по методу определения поверхностных иммуноглобулинов в тесте иммунофлюоресценсии, определение уровня иммуноглобулина A, M и G методом радикальной иммунодиффузии в геле и циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), осажденных на полиэтиленгликоле (таблица 46). У всех больных перед лечением выявлено достоверное увеличение уровня ЦИК и IgM, снижение уровня IgG. Уровень IgG при этом был достоверно и значительно ниже показателей группы контроля. The state of the humoral immunity system was determined by the following parameters: B-lymphocyte count by the method of determining surface immunoglobulins in the immunofluorescence test, determination of the level of immunoglobulin A, M and G by the method of radical immunodiffusion in gel and circulating immune complexes (CECs) deposited on polyethylene glycol (table 46 ) All patients before treatment revealed a significant increase in the level of CEC and IgM, a decrease in the level of IgG. The IgG level was significantly and significantly lower than the control group.

У всех больных в процессе лечения препаратами группы GSSG наступило улучшение неврологической симптоматики, уменьшился индекс способности к передвижению по Гаузеру, повысилось качество жизни. In all patients, during treatment with GSSG drugs, neurological symptoms improved, the index of ability to move around Gauser decreased, and the quality of life improved.

Хотя были описаны многие конкретные воплощения идеи изобретения, существуют возможности для множества модификаций. Например, непосредственно к GSSG или к его комбинациям с пролонгаторами либо с усилителями/модуляторами могут быть добавлены иные ингредиенты, не изменяющие действие GSSG, его производных, и/или как его пролонгаторов, так и усилителей/модуляторов, с целью введения в организм. Лекарственные формы могут помещаться в набор вместе со шприцом или аппликатором любого типа. Предпочтительно, чтобы к любому набору, включая лекарственную форму, прилагалась инструкция по применению при определенных заболеваниях. Ниже мы указали предпочтительное применение для GSSG и/или его производных как без, так и в присутствии пролонгаторов и усилителей/модуляторов в дозах от 0,01 до 0,5 мг основания GSSG на кг массы тела для GSSG и его солей (от 0,01 до 1,0 мг на кг массы тела для производных GSSG) в течение одного или более дней посредством внутривенного, внутримышечного, эндолимфатического, накожного или внутриполостного введения курсом длительностью до 6 месяцев, что показало свою эффективность при указанных ниже заболеваниях. Although many specific embodiments of the inventive concept have been described, there are scope for many modifications. For example, other ingredients that do not change the effect of GSSG, its derivatives, and / or its prolongators, and enhancers / modulators, for the purpose of introduction into the body, can be added directly to GSSG or to its combinations with prolongators or with enhancers / modulators. Dosage forms can be placed in a kit with a syringe or applicator of any type. Preferably, any kit, including dosage form, is accompanied by instructions for use in certain diseases. Below we have indicated the preferred use for GSSG and / or its derivatives, both without and in the presence of prolongators and enhancers / modulators in doses from 0.01 to 0.5 mg of GSSG base per kg of body weight for GSSG and its salts (from 0, 01 to 1.0 mg per kg body weight for GSSG derivatives) for one or more days by intravenous, intramuscular, endolymphatic, cutaneous or intracavitary administration for a course of up to 6 months, which has been shown to be effective in the following diseases.

Может осуществляться профилактическое и терапевтическое использование методов и лекарственных средств настоящего изобретения при иммунодефицитных состояниях, возникших вследствие радиационного или химического поражения при авариях, например, при ядерных катастрофах. The prophylactic and therapeutic use of the methods and drugs of the present invention can be carried out in immunodeficiency states resulting from radiation or chemical damage in accidents, for example, in nuclear disasters.

Там, где упоминались разнообразные пролонгаторы и разнообразные усилители/модуляторы, могут также использоваться иные конкретные пролонгаторы, которые удлиняют полу-жизнь окисленного глутатиона или/и иные конкретные усилители/модуляторы, которые благоприятно влияют на эффекты GSSG/производных. В некоторых случаях, может использоваться комбинация как одного или более различных пролонгаторов, так и одного или более различных усилителей/модуляторов. Where various prolongators and various enhancers / modulators have been mentioned, other specific prolongators may also be used that extend the half-life of oxidized glutathione and / or other specific enhancers / modulators that favorably affect the effects of GSSG / derivatives. In some cases, a combination of one or more different prolongators and one or more different amplifiers / modulators can be used.

Хотя препарат для парентерального введения находится предпочтительно в виде раствора, в некоторых случаях могут использоваться коллоидные суспензии и им подобное. Аналогичным образом, местное применение может включать использование фармацевтически приемлемых мазей, кремов и иных основ, например, вазелиновых основ, которые не взаимодействуют с GSSG/производными, а также как с пролонгаторами, так и с усилителями/модуляторами. Такие материалы известны в данном виде техники (вазелин, ланолин, спермацет с добавлением, в частности, ацетилсалициловой кислоты). Although the preparation for parenteral administration is preferably in the form of a solution, in some cases colloidal suspensions and the like may be used. Similarly, topical application may include the use of pharmaceutically acceptable ointments, creams and other bases, for example, petrolatum bases, which do not interact with GSSG / derivatives, as well as with prolongators and with enhancers / modulators. Such materials are known in the art (petrolatum, lanolin, spermaceti with the addition of, in particular, acetylsalicylic acid).

Инфекционные и иммунопатологические болезни. Infectious and immunopathological diseases.

Примечание: все дозы, указанные в данной главе, приведены по GSSG и его солям для "основания GSSG". Поскольку концепция "основания GSSG" не является полностью корректной для производных GSSG, то, в целом, правильно будет определить соответствующие величины дозировок для производных в интервале от подобного нижней границе для GSSG и до уровня, который в два-три раза превосходит верхнюю границу для GSSG и его солей. Note: all doses indicated in this chapter are given for GSSG and its salts for the “GSSG base”. Since the concept of “GSSG foundation” is not completely correct for GSSG derivatives, in general, it will be correct to determine the appropriate dosage values for derivatives in the range from a similar lower limit for GSSG and to a level that is two to three times higher than the upper limit for GSSG and its salts.

СПИД: величина дозировки - от 5 до 30 мг в день; полный курс - длительность 6 месяцев, с 2-недельными перерывами после каждого месяца. AIDS: dosage size - from 5 to 30 mg per day; full course - duration 6 months, with 2-week breaks after each month.

- Режим введения на первой неделе - по одной инъекции в день, перемежающаяся схема: один день - внутривенное введение, через день - внутримышечное введение;
- На второй неделе - дважды в день: один раз внутривенно (утром), второй раз - внутримышечно (вечером);
- На третьей и четвертой неделях - три раза в неделю: 1-й раз - внутривенная инъекция, 2-й и 3-й раз - внутримышечная инъекция.- The mode of administration in the first week - one injection per day, alternating scheme: one day - intravenous administration, every other day - intramuscular injection;
- In the second week - twice a day: once intravenously (in the morning), the second time - intramuscularly (in the evening);
- At the third and fourth weeks - three times a week: 1st time - intravenous injection, 2nd and 3rd time - intramuscular injection.

В случае энцефалопатии рекомендуются интралюмбальные инъекции препарата один раз в неделю в течение трех недель. In case of encephalopathy, intralumbal injections of the drug are recommended once a week for three weeks.

Гепатит: величина дозировки - от 5 до 10 мг в день; полный курс - длительность от 1 до 2 месяцев. Hepatitis: dosage - from 5 to 10 mg per day; full course - duration from 1 to 2 months.

- В течение первых трех недель: по одной инъекции ежедневно, перемежающаяся схема: один день - внутривенное введение, через день - внутримышечное введение;
- Затем - по две или три инъекции в неделю, 1-й раз - внутривенное введение, 2-й и 3-й раз - внутримышечное введение.- During the first three weeks: one injection daily, an alternating regimen: one day - intravenous administration, every other day - intramuscular administration;
- Then - two or three injections per week, the 1st time - intravenous administration, the 2nd and 3rd time - intramuscular injection.

Герпес: курс применения препарата совпадает с курсом при гепатите. Herpes: the course of use of the drug coincides with the course of hepatitis.

Туберкулез: Неактивная фаза: величина дозировки - от 5 до 10 мг в день; полный курс - длительность 6 месяцев, с 2-недельными перерывами после каждого месяца и 1 месяцем перерыва после 3-х месяцев применения препарата в качестве иммунологического сопровождения антибиотикотерапии. Tuberculosis: Inactive phase: dosage size - from 5 to 10 mg per day; the full course is 6 months, with 2-week breaks after each month and 1 month break after 3 months of using the drug as an immunological support for antibiotic therapy.

- В течение 1-х трех недель - по одной инъекции ежедневно, перемежающаяся схема: один день - внутривенное введение, через день - внутримышечное введение;
- В течение 4-й недели - по две или три инъекции в неделю, 1-й раз - внутривенное введение, 2-й и 3-й раз - внутримышечное введение.- For 1 to 3 weeks - one injection daily, an alternating regimen: one day - intravenous administration, every other day - intramuscular administration;
- During the 4th week - two or three injections per week, the 1st time - intravenous administration, the 2nd and 3rd time - intramuscular injection.

Активная фаза: величина дозировки - от 5 до 10 мг в день; полный курс - длительность 6 месяцев, схема введения в активной фазе такая же, как и в неактивной фазе. Active phase: dosage size - from 5 to 10 mg per day; the full course is 6 months, the administration schedule in the active phase is the same as in the inactive phase.

Менингит: величина дозировки - от 5 до 90 мг в день; полный курс - длительность 2 месяца:
- В течение 1-х двух недель - одна инъекция внутривенно (утром), вторая - внутримышечно (вечером);
- Затем - по две или три инъекции в неделю, 1-й раз - внутривенное введение, 2-й и 3-й раз - внутримышечное введение.Meningitis: dosage size - from 5 to 90 mg per day; full course - duration 2 months:
- Within 1 two weeks - one injection intravenously (in the morning), the second - intramuscularly (in the evening);
- Then - two or three injections per week, the 1st time - intravenous administration, the 2nd and 3rd time - intramuscular injection.

Рекомендуются интралюмбальные инъекции препарата - один раз в день в течение трех дней. Intralumbal injections of the drug are recommended - once a day for three days.

Перитонит: курс применения препарата - как в случае менингита (кроме интралюмбального введения). Peritonitis: the course of use of the drug - as in the case of meningitis (except for intralumbal administration).

Сепсис: величина дозировки - от 5 до 60 мг в день; полный курс - не менее чем 1 месяц, до полной нормализации клинического состояния и показателей крови:
- В течение 1-х двух или трех недель - дважды в день: одна инъекция внутривенно (утром), вторая - внутримышечно (вечером);
- Затем - по две или три инъекции в неделю, 1-й раз - внутривенное введение, 2-й и 3-й раз - внутримышечное введение.Sepsis: dosage size - from 5 to 60 mg per day; a full course - at least 1 month, until the clinical condition and blood counts are completely normalized:
- For 1 two, three weeks - twice a day: one injection intravenously (in the morning), the second - intramuscularly (in the evening);
- Then - two or three injections per week, the 1st time - intravenous administration, the 2nd and 3rd time - intramuscular injection.

Гнойные послеоперационные инфекционные осложнения: курс применения препарата - как в случае сепсиса. Purulent postoperative infectious complications: the course of use of the drug - as in the case of sepsis.

Иммунодепрессия: величина дозировки - от 5 до 20 мг в день; полный курс - длительность 6 месяцев, с 2-недельными перерывами после каждого месяца. Immunosuppression: dosage size - from 5 to 20 mg per day; full course - duration 6 months, with 2-week breaks after each month.

Иммунодефициты инфекционного, радиационного или токсического (химического) происхождения: величина дозировки - от 5 до 30 мг в день; курс применения препарата - как в случае иммунодепрессии. Immunodeficiencies of an infectious, radiation or toxic (chemical) origin: dosage size - from 5 to 30 mg per day; the course of use of the drug - as in the case of immunosuppression.

Рассеянный склероз: величина дозировки - от 5 до 20 мг в день; полный курс - длительность 3 месяца, с 2-недельными перерывами после каждого месяца; после 6 месячного перерыва - повторение полного курса. Multiple sclerosis: dosage size - from 5 to 20 mg per day; full course - duration 3 months, with 2-week breaks after each month; after a 6 month break, repeat the full course.

- В течение 1-го месяца полного курса - по одной инъекции ежедневно, перемежающаяся схема: один день - внутривенное введение, через день - внутримышечное введение;
- В течение 2-го месяца полного курса - по три инъекции в неделю, 1-й раз - внутривенное введение, 2-й и 3-й раз - внутримышечное введение;
- В течение 3-го месяца полного курса - по две внутримышечные инъекции в неделю, дозировка о 5 до 10 мг.- During the 1st month of the full course - one injection daily, an alternating scheme: one day - intravenous administration, every other day - intramuscular injection;
- During the 2nd month of the full course - three injections per week, the 1st time - intravenous administration, the 2nd and 3rd time - intramuscular injection;
- During the 3rd month of the full course - two intramuscular injections per week, dosage about 5 to 10 mg.

Нейродегенеративные заболевания: курс применения препарата - как в случае рассеянного склероза. Neurodegenerative diseases: the course of use of the drug - as in the case of multiple sclerosis.

Болезнь Альцгеймера: курс применения препарата - как в случае рассеянного склероза. Alzheimer's disease: the course of use of the drug - as in the case of multiple sclerosis.

Амиотрофический боковой склероз: курс применения препарата - как в случае рассеянного склероза. Amyotrophic lateral sclerosis: the course of use of the drug is as in the case of multiple sclerosis.

Гломерулонефрит: величина дозировки - от 5 до 30 мг в день; полный курс - длительность от 1 до 3-х месяцев, с 2-недельными перерывами после каждого месяца:
- В течение 1-х двух недель - по одной инъекции ежедневно, перемежающаяся схема: один день - внутривенное введение, через день - внутримышечное введение;
- Затем - по две или три инъекции в неделю, 1-й раз - внутривенное введение, 2-й и 3-й раз - внутримышечное введение.Glomerulonephritis: dosage size - from 5 to 30 mg per day; full course - duration from 1 to 3 months, with 2-week breaks after each month:
- Within 1 two weeks - one injection daily, alternating scheme: one day - intravenous administration, every other day - intramuscular administration;
- Then - two or three injections per week, the 1st time - intravenous administration, the 2nd and 3rd time - intramuscular injection.

Коллагенозы: курс применения препарата - как в случае гломерулонефрита. Collagenoses: the course of use of the drug - as in the case of glomerulonephritis.

Ревматоидный артрит: курс применения препарата - как в случае гломерулонефрита. Rheumatoid arthritis: the course of use of the drug is as in the case of glomerulonephritis.

Системная красная волчанка: курс применения препарата - как в случае гломерулонефрита. Systemic lupus erythematosus: the course of use of the drug - as in the case of glomerulonephritis.

Аллергические заболевания: курс применения препарата - как в случае гломерулонефрита, вместе с местным применением мазей (1-3% содержания активного вещества) - в течение 2-х недель, по одной аппликации в день, затем - по 2 аппликации в неделю. Allergic diseases: the course of use of the drug - as in the case of glomerulonephritis, together with topical use of ointments (1-3% of the content of the active substance) - for 2 weeks, one application per day, then 2 applications per week.

Псориаз: курс применения препарата - как в случае гломерулонефрита, вместе с местным применением мазей (1-3% содержания активного вещества) - в течение 2-х недель, по одной аппликации в день, затем - по 2 аппликации в неделю. Psoriasis: the course of use of the drug - as in the case of glomerulonephritis, together with topical application of ointments (1-3% of the content of the active substance) - for 2 weeks, one application per day, then 2 applications per week.

Новообразования: величина дозировки - от 5 до 90 мг в день; полный курс - длительность от 1 до 6 месяцев, с 2-4-недельными перерывами после каждого месяца. Neoplasms: dosage size - from 5 to 90 mg per day; full course - duration from 1 to 6 months, with 2-4-week breaks after each month.

- по одной инъекции в день, перемежающаяся схема: один день - внутривенное введение, через день - внутримышечное введение; как самостоятельно, так и в сочетании с эндолимфатическим введением (величина дозировки - 30-90 мг в день) в течение 10 дней, и локальное применение (региональная перфузия) с помощью катетеризации (величина дозировки - 30-90 мг в день) в течение 7 дней, три или четыре аппликации в неделю;
- рекомендуется лечебная схема совместно с полихимиотерапией.- one injection per day, alternating scheme: one day - intravenous administration, every other day - intramuscular administration; both independently and in combination with endolymphatic administration (dosage size - 30-90 mg per day) for 10 days, and local application (regional perfusion) by catheterization (dosage size - 30-90 mg per day) for 7 days, three or four applications per week;
- recommended treatment regimen in conjunction with polychemotherapy.

Метастатические процессы и гемобластозы: величина дозировки - от 5 до 90 мг в день; полный курс - длительность от 1 до 6 месяцев, с 2-4-недельными перерывами после каждого месяца. Metastatic processes and hemoblastoses: dosage size - from 5 to 90 mg per day; full course - duration from 1 to 6 months, with 2-4-week breaks after each month.

- по одной инъекции в день, перемежающаяся схема: один день - внутривенное введение, через день - внутримышечное введение; в сочетании с локальным применением (региональная перфузия) с помощью катетеризации (величина дозировки - 30-90 мг в день) в течение 7 дней, три или четыре аппликации в неделю. - one injection per day, alternating scheme: one day - intravenous administration, every other day - intramuscular administration; in combination with local application (regional perfusion) by catheterization (dosage size - 30-90 mg per day) for 7 days, three or four applications per week.

Лимфопролиферативные заболевания (лимфогранулематоз и лимфома): величина дозировки - от 5 до 90 мг в день; полный курс - длительность от 1 до 6 месяцев, с 2-4-недельными перерывами после каждого месяца в качестве иммунологического сопровождения полихимиотерапии. Lymphoproliferative diseases (lymphogranulomatosis and lymphoma): dosage size - from 5 to 90 mg per day; full course - duration from 1 to 6 months, with 2-4-week breaks after each month as an immunological support for polychemotherapy.

- В течение 1-й недели - по одной инъекции в день, перемежающаяся схема: один день - внутривенное введение, через день - внутримышечное введение; в сочетании с эндолимфатическим введением (величина дозировки - 30- 90 мг в день) в течение первых 10 дней;
- Затем - та же схема лечения в комбинации с глюкокортикоидами и цитостатиками.- During the 1st week - one injection per day, alternating scheme: one day - intravenous administration, every other day - intramuscular administration; in combination with endolymphatic administration (dosage - 30-90 mg per day) for the first 10 days;
- Then - the same treatment regimen in combination with glucocorticoids and cytostatics.

Пример 27. Влияние окисленного глутатиона (GSSG) и его солей на процессы фосфатной модификации и содержание лимфоцитов, несущих рецептор IL-2, доказывающее воспроизведение эффектов цитокинов окисленным глутатионом и его производными в форме солей. Example 27. The effect of oxidized glutathione (GSSG) and its salts on phosphate modification processes and the content of lymphocytes carrying the IL-2 receptor, proving the reproduction of the effects of cytokines by oxidized glutathione and its derivatives in the form of salts.

Исследовали молекулярные механизмы воспроизведения иммуно- биохимических эффектов цитокинов посредством GSSG и его солей. The molecular mechanisms of reproduction of the immunobiochemical effects of cytokines by GSSG and its salts were investigated.

Действие солей окисленного глутатиона (GSSG): натриевой (Na), литиевой (Li), магниевой (Mg) и платиновой (Pt) оценивали в модели гемо- и иммунодепрессии у мышей, индуцированной однократным введением цитостатика циклофосфамида (ЦФ). The effect of oxidized glutathione (GSSG) salts: sodium (Na), lithium (Li), magnesium (Mg) and platinum (Pt) was evaluated in a model of hemo- and immunosuppression in mice induced by a single injection of cyclophosphamide (CF) cytostatic.

В контексте данного исследования была проведена оценка влияния 5-ти дневного применения вышеуказанных веществ на уровень фосфорилирования цитозольных белков лимфоцитов по тирозину и содержание "активных" лимфоцитов, несущих рецептор IL-2. In the context of this study, we assessed the effect of a 5-day use of the above substances on the level of tyrosine phosphorylation of lymphocyte cytosolic proteins and the content of “active” lymphocytes carrying the IL-2 receptor.

Исследование проведено на мышах линии СВА, самцах, массой 18-20 г, которым однократно вводился ЦФ (50 мг/кг, внутрибрюшинно). Через 24 часа после инъекции ЦФ животным начинали внутрибрюшинное введение исследуемых веществ в дозе 5 мг/кг. Введение веществ продолжали в течение 5 дней (ежедневно, 1 раз в день). Через 24 часа после окончания применения исследуемых веществ мышей эвтаназировали и забирали образцы крови для проведения исследований. The study was conducted on CBA mice, males, weighing 18-20 g, to which CF was administered once (50 mg / kg, intraperitoneally). 24 hours after CF injection, the animals started the intraperitoneal administration of the test substances at a dose of 5 mg / kg. The introduction of substances continued for 5 days (daily, 1 time per day). 24 hours after the end of the use of the test substances, the mice were euthanized and blood samples were taken for studies.

Мононуклеарную фракцию лейкоцитов крови получали центрифугированием в градиенте плотности фиколл-метризоат (Histopaque, Sigma). Концентрацию клеток доводили до 2•10⁵ клеток на 1 мл полной культуральной среды (RPMI 1640), содержащей 20 мМ HEPES, 2 мМ глутамина, 50 мкг/мл гентамицина и 10% эмбриональную телячью сыворотку. Жизнеспособность клеток оценивали в тесте с трипановым синим, и клеточную суспензию разносили в лунки 96-луночных планшетов из расчета 20000 клеток на лунку.The mononuclear fraction of blood leukocytes was obtained by centrifugation in a density gradient ficoll metrizoate (Histopaque, Sigma). The cell concentration was adjusted to 2 • 10 ⁵ cells per 1 ml of complete culture medium (RPMI 1640) containing 20 mM HEPES, 2 mM glutamine, 50 μg / ml gentamicin and 10% fetal calf serum. Cell viability was evaluated in a trypan blue test, and the cell suspension was plated in 96-well plates at a rate of 20,000 cells per well.

Определение содержания лимфоцитов, несущих рецептор IL-2, проводили в соответствии с Horgan A. F. (1994) на мазках мононуклеарной взвеси. В качестве первых антител использовали моноклональные антитела к цепям p55 и p75 рецептора IL-2. Для визуализации первых антител использовали поликлональные кроличьи антитела против иммуноглобулинов мыши, меченные ФИТЦ. Подсчет количества лимфоцитов, содержащих рецептор IL-2, проводили в процентном соотношении к общему числу лимфоцитов. The determination of the content of lymphocytes carrying the IL-2 receptor was carried out in accordance with Horgan A. F. (1994) on smears of a mononuclear suspension. Monoclonal antibodies to the p55 and p75 chains of IL-2 receptor were used as the first antibodies. Polyclonal rabbit antibodies against mouse immunoglobulins labeled with FITC were used to visualize the first antibodies. Counting the number of lymphocytes containing the IL-2 receptor was carried out as a percentage of the total number of lymphocytes.

Для метаболического мечения лимфоциты культивировали в среде Игла с добавлением 10% сыворотки крупного рогатого скота. Метаболическое мечение лимфоцитов [32P]ортофосфорной кислотой проводили с помощью инкубации клеток в течение 10-12 ч в бесфосфорной среде ДМЕ, содержащей 100 мк Ci/мл [32P] ортофосфата. На одну пробу добавляли по 0,2 мл среды с изотопом. После инкубации клетки разрушали пипетированием и центрифугировали при 6000g в течение 30 мин. Полученный супернатант использовали для иммунопреципитации поликлональными антителами к фосфотирозину по методу Fu (1992). Для осаждения иммунных комплексов использовали протеин A-сефарозу. После преципитации осадок трижды отмывали и активность осадка просчитывали на счетчике "Гамма". For metabolic labeling, lymphocytes were cultured in Eagle medium supplemented with 10% cattle serum. Metabolic labeling of lymphocytes [32P] with phosphoric acid was performed by incubating cells for 10-12 hours in a phosphorless DME medium containing 100 μCi / ml [32P] orthophosphate. 0.2 ml of isotope medium was added per sample. After incubation, the cells were disrupted by pipetting and centrifuged at 6000g for 30 minutes. The obtained supernatant was used for immunoprecipitation with polyclonal antibodies to phosphotyrosine according to the method of Fu (1992). Protein A-Sepharose was used to precipitate immune complexes. After precipitation, the precipitate was washed three times and the activity of the precipitate was calculated on a Gamma counter.

Согласно результатам выполненных исследований (таблица 47) установлено, что действие окисленного глутатиона (GSSG) на изолированные лимфоциты приводит к тому (см. таблицу 47), что уже через 10 минут наблюдается достоверное увеличение уровня фосфорилирования по тирозину цитозольных белков лимфоцитов, что является интегральным показателем активности сигнал передающих систем клеток. Данные изменения под действием GSSG, в большей степени под действием производных GSSG обусловливают модуляцию редокс-чувствительной экспрессии генов, в первую очередь, иммунологически важных генов, ответственных за синтез цитокинов и гемопоэтических факторов. According to the results of the studies (table 47), it was found that the effect of oxidized glutathione (GSSG) on isolated lymphocytes leads to the fact (see table 47) that after 10 minutes there is a significant increase in the level of tyrosine phosphorylation of lymphocyte cytosolic proteins, which is an integral indicator activity signal transmitting cell systems. These changes under the influence of GSSG, to a greater extent under the influence of derivatives of GSSG, cause modulation of the redox-sensitive expression of genes, primarily immunologically important genes, responsible for the synthesis of cytokines and hematopoietic factors.

В таблице 48 приведены данные об уровне фосфорилирования по тирозину цитозольных белков лимфоцитов и процентное содержание лимфоцитов, несущих рецептор IL-2 у мышей линии СВА, получавших исследуемые вещества на фоне циклофосфамид-индуцированной гемо- и иммунодепрессии. Table 48 shows the level of tyrosine phosphorylation of cytosolic lymphocyte proteins and the percentage of lymphocytes carrying the IL-2 receptor in CBA mice that received the test substances against cyclophosphamide-induced hemo- and immunosuppression.

Применение солей GSSG приводит к увеличению процентного содержания лимфоцитов, несущих рецептор IL-2, практически нормализуя их количество (в норме -18,3±1,6%). Схожая закономерность была выявлена при исследовании уровня фосфорилирования по тирозину цитозольных белков лимфоцитов. The use of GSSG salts leads to an increase in the percentage of lymphocytes carrying the IL-2 receptor, practically normalizing their number (normally -18.3 ± 1.6%). A similar pattern was revealed when studying the level of tyrosine phosphorylation of cytosolic lymphocyte proteins.

Применение различных солей GSSG способствует восстановлению процентного содержания лимфоцитов, несущих рецептор IL-2, в условиях иммунодефицита, моделированного циклофосфамидом. При этом происходит увеличение уровня фосфорилирования по тирозину цитозольных белков сигнал-передающих систем, что может выступать одним из факторов описанного иммуностимулирующего действия исследуемых веществ. The use of various GSSG salts helps to restore the percentage of lymphocytes carrying the IL-2 receptor under conditions of immunodeficiency modeled by cyclophosphamide. In this case, there is an increase in the level of tyrosine phosphorylation of cytosolic proteins of signal-transmitting systems, which may be one of the factors of the described immunostimulating effect of the studied substances.

Таким образом, авторами установлено ранее неизвестное свойство окисленной формы глутатиона (GSSG) и его солей воспроизводить (имитировать) регуляторные эффекты ряда цитокинов, в первую очередь, IL-2. Под воспроизведением IL-2 мы имеем в виду индукцию GSSG внутриклеточных механизмов, реализующих регуляторные сигналы цитокина на систему иммунокомпетентных и гемопоэтических клеток. Приведенные исследования показали, что изменение уровня фосфорилирования по тирозину белков сигнал-передающих систем клеток органов иммуногенеза и гемопоэза в условиях иммунодефицита моделированного циклофосфамидом, приводит к эффекту динамичной нормализации содержания активных лимфоцитов. Thus, the authors established a previously unknown property of the oxidized form of glutathione (GSSG) and its salts to reproduce (imitate) the regulatory effects of a number of cytokines, primarily IL-2. By reproducing IL-2, we mean the induction of GSSG intracellular mechanisms that implement regulatory cytokine signals to a system of immunocompetent and hematopoietic cells. The above studies showed that a change in the level of tyrosine phosphorylation of protein of signal-transmitting systems of cells of the organs of immunogenesis and hematopoiesis under conditions of immunodeficiency modeled by cyclophosphamide leads to the effect of a dynamic normalization of the content of active lymphocytes.

Следовательно, использование GSSG или его производных в форме лекарственных средств в терапевтических целях не только стимулирует эндогенную продукцию цитокинов и гемопоэтических факторов, но также, особенно в случае десенситизации рецепторов, наблюдаемой, как правило, при онко- и ретровирусной патологии, обеспечивает воспроизведение иммуно-биохимических эффектов цитокинов. Therefore, the use of GSSG or its derivatives in the form of drugs for therapeutic purposes not only stimulates the endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, but also, especially in the case of receptor desensitization, observed, as a rule, with oncological and retroviral pathology, ensures the reproduction of immuno-biochemical effects of cytokines.

Источники информации
1. Holmlund J. Т. Cytokines. Cancer Chemother Biol Response Modif. 1993. 14P 150-206.Sources of information
1. Holmlund J. T. Cytokines. Cancer Chemother Biol Response Modif. 1993.14P 150-206.

2. Hansson M., Soderstrom Т. The colony stimulating factors. Med Oncol Tumor Pharmacother. 1993. 10(1-2). P 5-12. 2. Hansson M., Soderstrom T. The colony stimulating factors. Med Oncol Tumor Pharmacother. 1993.10 (1-2). P 5-12.

3. Dillman R. O. The clinical experience with interleukin-2 in cancer therapy. Cancer Biother. 1994 Fall. 9(3). P 183-209. 3. Dillman R. O. The clinical experience with interleukin-2 in cancer therapy. Cancer Biother. 1994 Fall. 9 (3). P 183-209.

4. Whittington R. , Faulds D. Interleukin-2. A review of its pharmacological properties and therapeutic use in patients with cancer. Drugs. 1993 Sep. 46(3). P 446-514. 4. Whittington R., Faulds D. Interleukin-2. A review of its pharmacological properties and therapeutic use in patients with cancer. Drugs 1993 Sep. 46 (3). P 446-514.

5. Hieber U. , Heim M. E. Tumor necrosis factor for the treatment of malignancies. Oncology. 1994 Mar-Apr. 51(2). P 142-53. 5. Hieber U., Heim M. E. Tumor necrosis factor for the treatment of malignancies. Oncology. 1994 Mar-Apr. 51 (2). P 142-53.

6. Morstyn G. , Sheridan W. P. Hematopoietic growth factors in cancer chemotherapy. Cancer Chemother Biol Response Modif. 1993. 14P 353-70. 6. Morstyn G., Sheridan W. P. Hematopoietic growth factors in cancer chemotherapy. Cancer Chemother Biol Response Modif. 1993.14P 353-70.

7. Neidhart J. A. Hematopoietic cytokines. Current use in cancer therapy. Cancer. 1993 Dee 1. 72(11 Suppl). P 3381-6. 7. Neidhart J. A. Hematopoietic cytokines. Current use in cancer therapy. Cancer 1993 Dee 1. 72 (11 Suppl). P 3381-6.

8. Murray H. W. Interferon-gamma and host antimicrobial defense: current and future clinical applications. Am J Med. 1994 Nov. 97(5). P 459-67. 8. Murray H. W. Interferon-gamma and host antimicrobial defense: current and future clinical applications. Am J Med. 1994 Nov. 97 (5). P 459-67.

9. Cirelli R. Tyring S.K. Interferons in human papillomavirus infections. Antiviral Res. 1994 Jul. 24(2-3). P 191-204. 9. Cirelli R. Tyring S.K. Interferons in human papillomavirus infections. Antiviral Res. 1994 Jul. 24 (2-3). P 191-204.

10. Sher A., Coffman R.L. Regulation of immunity to parasites by T-cells and T-cell derived cytokines. Annu. Rev. Immunol., 1992, 10, P. 385-409. 10. Sher A., Coffman R.L. Regulation of immunity to parasites by T-cells and T-cell derived cytokines. Annu. Rev. Immunol., 1992, 10, P. 385-409.

11. Gillan E. , Plunkett M., Cairo M. S. Colony-stimulating factors in the modulation of sepsis. New Horiz. 1993 Feb. 1(1). P 96-109. 11. Gillan E., Plunkett M., Cairo M. S. Colony-stimulating factors in the modulation of sepsis. New Horiz. 1993 Feb. 1 (1). P 96-109.

12. Nelson S. Role of granulocyte colony-stimulating factor in the immune response to acute bacterial infection in the nonneutropenic host: an overview. Clin Infect Dis. 1994 Feb. 18 Suppl 2P S 197-204. 12. Nelson S. Role of granulocyte colony-stimulating factor in the immune response to acute bacterial infection in the nonneutropenic host: an overview. Clin Infect Dis. 1994 Feb. 18 Suppl 2P S 197-204.

13. Offenstadt G., Guidet B., Staikowsky F. Cytokines and severe infections. Pathol Biol (Paris). 1993 Oct. 41(8 Pt 2). P 820-31. 13. Offenstadt G., Guidet B., Staikowsky F. Cytokines and severe infections. Pathol Biol (Paris). 1993 Oct. 41 (8 Pt 2). P 820-31.

14. Nemunaitis J. Use of hematopoietic growth factors in marrow transplantation. Curr Opin Oncol. 1994 Mar. 6(2). P 139-45. 14. Nemunaitis J. Use of hematopoietic growth factors in marrow transplantation. Curr Opin Oncol. 1994 Mar. 6 (2). P 139-45.

15. Mittelman M. , Lessin L. S. Clinical application ofrecombinant erythropoietin in myelodysplasia. Hematol Oncol Clin North Am. 1994 Oct. 8(5). P 993-1009. 15. Mittelman M., Lessin L. S. Clinical application ofrecombinant erythropoietin in myelodysplasia. Hematol Oncol Clin North Am. 1994 Oct. 8 (5). P 993-1009.

16. Forman A. D. Neurologic complications of cytokine therapy. Oncology (Huntingt). 1994 Apr. 8(4). P 105-10; discussion 113, 116-7. 16. Forman A. D. Neurologic complications of cytokine therapy. Oncology (Huntingt). 1994 Apr. 8 (4). P 105-10; discussion 113, 116-7.

17. Hack C. E., Ogilvie A. C., Eisele B., Eerenberg A. J., WagstaffJ., Thijs L. G. Cl-inhibitor substitution therapy in septic shock and in the vascular leak syndrome induced by high doses of interleukin-2. Intensive Care Med. 1993. 19 Suppl 1P S 19-28. 17. Hack C. E., Ogilvie A. C., Eisele B., Eerenberg A. J., Wagstaff J., Thijs L. G. Cl-inhibitor substitution therapy in septic shock and in the vascular leak syndrome induced by high doses of interleukin-2. Intensive Care Med. 1993.19 Suppl 1P S 19-28.

18. Hieber U. , Heim M. E. Tumor necrosis factor for the treatment of malignancies. Oncology.1994 Mar-Apr. 51(2). P 142-53. 18. Hieber U., Heim M. E. Tumor necrosis factor for the treatment of malignancies. Oncology. 1994 Mar-Apr. 51 (2). P 142-53.

19. Saito M. OK-432, a killed streptococcal preparation, in the treatment of animal and human cancer and its mechanisms of action. Forum on immunomodulators. Ed. Guenounou M. John Libbey Eurotext, Paris, 1995, P. 13-30. 19. Saito M. OK-432, a killed streptococcal preparation, in the treatment of animal and human cancer and its mechanisms of action. Forum on immunomodulators. Ed. Guenounou M. John Libbey Eurotext, Paris, 1995, P. 13-30.

20. Barot-Ciorbaru R., Bona C. Immunomodulators from Nocardia opaca. Forum on immunomodulators. Ed. Guenounou M. John Libbey Eurotext, Paris, 1995, P. 63- 77. 20. Barot-Ciorbaru R., Bona C. Immunomodulators from Nocardia opaca. Forum on immunomodulators. Ed. Guenounou M. John Libbey Eurotext, Paris, 1995, P. 63-77.

21. Bloy С., Morales M., Guenounou M. RU 41740 (Biostim), an immunomodulating agent from bacterial origin. Ed. Guenounou M. John Libbey Eurotext, Paris, 1995, P. 85-100. 21. Bloy C., Morales M., Guenounou M. RU 41740 (Biostim), an immunomodulating agent from bacterial origin. Ed. Guenounou M. John Libbey Eurotext, Paris, 1995, P. 85-100.

22. Meister A. Anderson M.E. Glutathione. Annu. Rev. Biochem., 1983, 52: 711-60. 22. Meister A. Anderson M.E. Glutathione. Annu. Rev. Biochem., 1983, 52: 711-60.

23. Beutler E. Nutritional and metabolic aspects of glutathione. Review. Annu. Rev. Nutr., 1989,9:287. 23. Beutler E. Nutritional and metabolic aspects of glutathione. Review Annu. Rev. Nutr., 1989.9: 287.

24. Textbook of biochemistry: with clinical correlations. Ed. Devlin T. M., 3rd ed. 1992, Wiley-Liss, Inc., NY. p. 522-525. 24. Textbook of biochemistry: with clinical correlations. Ed. Devlin T. M., 3rd ed. 1992, Wiley-Liss, Inc., NY. p. 522-525.

25. Kehrer J.P., Lund L.G. Cellular reducing equivalents and oxidative stress. Free Radic Biol Med. 1994 Jul. 17(1). P 65-75. 25. Kehrer J.P., Lund L.G. Cellular reducing equivalents and oxidative stress. Free Radic Biol Med. 1994 Jul. 17 (1). P 65-75.

26. Michiels С., Raes M., Toussaint O., Remade J. Importance of Se-glutathione peroxidase, catalase, and Cu/Zn-SOD for cell survival against oxidative stress. Free Radic Biol Med. 1994 Sep. 17(3). P 235-48. 26. Michiels S., Raes M., Toussaint O., Remade J. Importance of Se-glutathione peroxidase, catalase, and Cu / Zn-SOD for cell survival against oxidative stress. Free Radic Biol Med. 1994 Sep. 17 (3). P 235-48.

27. Cohen G. Enzymatic/nonenzymatic sources of oxyradicals and regulation of antioxidant defenses. Ann N Y Acad Sci. 1994 Nov 17, 738. P 8- 14. 27. Cohen G. Enzymatic / nonenzymatic sources of oxyradicals and regulation of antioxidant defenses. Ann N Y Acad Sci. 1994 Nov 17, 738. P 8-14.

28. Beckett G.J., Hayes J.D. Glutathine S-transferase: biomedical applications. Advan. Clin. Chem. 1993, vol. 30, P. 281- 380. 28. Beckett G.J., Hayes J.D. Glutathine S-transferase: biomedical applications. Advan. Clin. Chem. 1993, vol. 30, P. 281-380.

29. Composition and method for disease treatment. PCT/US/92/04653, A 61 K 37/02, C 07 K 5/08, 5/06, WO92/21368. 29. Composition and method for disease treatment. PCT / US / 92/04653, A 61 K 37/02, C 07 K 5/08, 5/06, WO92 / 21368.

30. Droge W., SchuIze-Osthoff K., Mihm S., Gaiter D., Schenk H., Eck H. P. , Roth S., Gmunder H. Functions of glutathione and glutathione disulfide in immunology and immunopathology. FASEB J. 1994 Nov. 8(14). P 1131-8. 30. Droge W., SchuIze-Osthoff K., Mihm S., Gaiter D., Schenk H., Eck H. P., Roth S., Gmunder H. Functions of glutathione and glutathione disulfide in immunology and immunopathology. FASEB J. 1994 Nov. 8 (14). P 1131-8.

31. Sardesai V. , M. Role of antioxidants in health maintenance. Nutr Clin Pract. 1995 Feb. 10(1). P 19-25. 31. Sardesai V., M. Role of antioxidants in health maintenance. Nutr Clin Pract. 1995 Feb. 10 (1). P 19-25.

32. Giugliano D. , Ceriello A., Paolisso G. Diabetes mellitus, hypertension, and cardiovascular disease: which role for oxidative stress? Metabolism. 1995 Mar. 44(3). P 363-8. 32. Giugliano D., Ceriello A., Paolisso G. Diabetes mellitus, hypertension, and cardiovascular disease: which role for oxidative stress? Metabolism. 1995 Mar. 44 (3). P 363-8.

33. Keusch G. T. Antioxidants in infection. J Nutr Sci Vitaminol (Tokyo). 1993. 39 Suppl 1P S23-33. 33. Keusch G. T. Antioxidants in infection. J Nutr Sci Vitaminol (Tokyo). 1993.39 Suppl 1P S23-33.

34. Dipeptide compound having pharmaceutical activity and compositions containing them. US Patent 4,761,399. 34. Dipeptide compound having pharmaceutical activity and compositions containing them. US Patent 4,761,399.

35. g-L-Glutamyl-L-cysteine ethyl ester and pharmaceutical compositions containing the same as an effective ingredient. US Patent 4,927,808. 35. g-L-Glutamyl-L-cysteine ethyl ester and pharmaceutical compositions containing the same as an effective ingredient. US Patent 4,927,808.

36. Therapeutic agents for ischemic heart diseases. US Patent 4,968,671. 36. Therapeutic agents for ischemic heart diseases. US Patent 4,968,671.

37. Method for insuring adequate intracellular glutathione in tissue, publication number EP 0502313 A2. 37. Method for insuring adequate intracellular glutathione in tissue, publication number EP 0502313 A2.

38. Composition and method for disease treatment. PCT/US/92/04653. 38. Composition and method for disease treatment. PCT / US / 92/04653.

39. Glutathione as chemoprotective agent. PCT/EP/93/01494. 39. Glutathione as chemoprotective agent. PCT / EP / 93/01494.

40. Pharmaceutical compositions having antineoplastic activity. US Patent 4,871,528. 40. Pharmaceutical compositions having antineoplastic activity. US Patent 4,871,528.

41. Sokolovsky M. , Wilchek M. , Patchornik A. On the synthesis of cysteine peptides. J. Amer. Chem. Soc. 1964, Mar. 86(6), P 1202-6. 41. Sokolovsky M., Wilchek M., Patchornik A. On the synthesis of cysteine peptides. J. Amer. Chem. Soc. 1964, Mar. 86 (6), P 1202-6.

Claims

1. Применение окисленного глутатиона, представляющего собой димер восстановленного глутатиона, трипептида со структурной формулой - γ-глутамил-цистеинил-глицин, в котором две молекулы трипептида связаны посредством ковалентной дисульфидной связи между остатками цистеина, и его фармацевтически приемлемых производных в форме соли в качестве модулятора эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов и/или средства для воспроизведения эффектов эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов. 1. The use of oxidized glutathione, which is a dimer of reduced glutathione, a tripeptide with the structural formula γ-glutamyl-cysteinyl-glycine, in which two molecules of the tripeptide are linked via covalent disulfide bonds between cysteine residues and its pharmaceutically acceptable salt derivatives as a modulator endogenous production of cytokines and hematopoietic factors and / or means for reproducing the effects of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors.

2. Применение по п.1, в котором указанный окисленный глутатион или его соль используют в комбинации с веществом, являющимся пролонгатором, который выбирают из группы веществ, обладающих прооксидантными свойствами, или соединений, способных образовывать слабые ионные или координационные связи, которые стабилизируют молекулу окисленного глутатиона или его соли, и замедляют образование их восстановленной формы, или соединений являющихся конкурентными ингибиторами процесса использования восстановленной формы никотинамид-аденин-динуклеотидфосфата для восстановления окисленной формы глутатиона и образования его восстановленной формы, процесса, который катализирует глутатион-редуктаза, или соединений, являющихся обратимыми ингибиторами процесса восстановления окисленной формы никотинамид-аденин-динуклеотидфосфата и образования его восстановленной формы, процесса, который катализирует фермент глюкозо-6 фосфат-дегидрогеназа, или другие никотинамид-аденин-динуклеотидфосфат - зависимые ферменты. 2. The use according to claim 1, in which the specified oxidized glutathione or its salt is used in combination with a substance that is a prolongator, which is selected from the group of substances having prooxidant properties, or compounds capable of forming weak ionic or coordination bonds that stabilize the molecule of oxidized glutathione or its salts, and slow down the formation of their reduced form, or compounds that are competitive inhibitors of the use of the reduced form of nicotinamide-adenine-dinucleo typhosphate to restore the oxidized form of glutathione and form its reduced form, a process that catalyzes glutathione reductase, or compounds that are reversible inhibitors of the oxidized form of nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate and the formation of its reduced form, a process that catalyzes the enzyme glucose-6 phosphate β-dehydrogenase, or other nicotinamide-adenine-dinucleotide phosphate -dependent enzymes.

3. Применение по п.2, в котором указанным пролонгатором является аскорбиновая кислота (γ-лактон 2,3-дегидро-L-гулоновая кислота). 3. The use according to claim 2, in which the specified prolongator is ascorbic acid (γ-lactone 2,3-dehydro-L-gulonic acid).

4. Применение по п.2, в котором указанным пролонгатором является диметилсульфоксид. 4. The use according to claim 2, in which the specified prolongator is dimethyl sulfoxide.

5. Применение по п.2, в котором указанным пролонгатором является инозин(гипоксантин-9-D-рибофуранозид). 5. The use according to claim 2, in which the specified prolongator is inosine (hypoxanthine-9-D-ribofuranoside).

6. Применение по п.2, в котором указанным пролонгатором является цистамин(2,2'-дитиобис[этиламин]). 6. The use according to claim 2, in which the specified prolongator is cystamine (2,2'-dithiobis [ethylamine]).

7. Применение по п.2, в котором указанным пролонгатором окисленного глутатиона, в формуле которого все аминокислоты представлены в L-форме, является окисленный глутатион, в формуле которого две химически однозначные аминокислоты представлены в D-форме, а остальные аминокислоты представлены в L-форме. 7. The use according to claim 2, in which the specified prolongator of oxidized glutathione, in the formula of which all amino acids are represented in L-form, is oxidized glutathione, in the formula of which two chemically unambiguous amino acids are represented in D-form, and the remaining amino acids are represented in L- form.

8. Применение по п.2, в котором указанным пролонгатором являются соединения платины, например, платина-хлорид. 8. The use according to claim 2, in which the specified prolongator are platinum compounds, for example, platinum chloride.

9. Применение по п.1, в котором указанный окисленный глутатион или его соли используют в комбинации с веществом, являющимся усилителем/модулятором, который выбирают из группы веществ активных метаболитов, являющихся донорами метильных групп, или соединений, которые способствует образованию окислительно-восстановительных пар (редокс-пар) в клетке, или смесью тех или иных соединений. 9. The use according to claim 1, in which the specified oxidized glutathione or its salts are used in combination with a substance that is an enhancer / modulator, which is selected from the group of substances of active metabolites that are donors of methyl groups, or compounds that contribute to the formation of redox pairs (redox vapor) in the cell, or a mixture of certain compounds.

10. Применение по п. 9, в котором усилителем-модулятором является холин-хлорид(2-оксиэтил)-триметиламмоний хлорид). 10. The use according to claim 9, in which the amplifier-modulator is choline chloride (2-hydroxyethyl) -trimethylammonium chloride).

11. Применение по п.9, в котором усилителем-модулятором является S-аденозил-метионин. 11. The use according to claim 9, in which the amplifier-modulator is S-adenosyl-methionine.

12. Применение по п.9, в котором усилителем-модулятором является липоевая кислота (6,8-дитиооктановая кислота). 12. The use according to claim 9, in which the amplifier-modulator is lipoic acid (6,8-dithiooctanoic acid).

13. Применение по п.9, в котором усилителем-модулятором является фолиевая кислота (N-{ 4'-[2-амино-4-окси-6-птеридил)метил] амино} -бензоил-L(+)глутаминовая кислота). 13. The use according to claim 9, in which the enhancing modulator is folic acid (N- {4 '- [2-amino-4-hydroxy-6-pteridyl) methyl] amino} benzoyl-L (+) glutamic acid) .

14. Применение окисленного глутатиона, представляющего собой димер восстановленного глутатиона, трипептида со структурой формулой - γ-глутамин-цистеинил-глицин, в котором две молекулы трипептида связаны посредством ковалентной дисульфидной связи между остатками цистеина, в качестве индуктора механизмов апоптоза в опухоле- и/или вирусо-трансформированных клетках. 14. The use of oxidized glutathione, which is a dimer of reduced glutathione, a tripeptide with a structure of the formula γ-glutamine-cysteinyl-glycine, in which two tripeptide molecules are linked via a covalent disulfide bond between cysteine residues, as an inducer of apoptosis mechanisms in the tumor and / or virus-transformed cells.

15. Применение по п. 14, отличающееся тем, что указанный окисленный глутатион или его фармацевтически приемлемые производные в форме соли используют в комбинации с веществом, являющимся пролонгатором, который выбирают из группы веществ, обладающих прооксидантными свойствами, или соединений, способных образовывать слабые ионные или координационные связи, которые стабилизируют молекулу окисленного глутатиона или его соли, и замедляют образование их восстановленной формы, или соединений являющихся конкурентными ингибиторами процесса использования восстановленной формы никотинамид-аденин-динуклеотидфосфата для восстановления окисленной формы глутатиона и образования его восстановительной формы, процесса, который катализирует глутатион-редуктаза, или соединений, являющихся обратимыми ингибиторами процесса восстановления окисленной формы никотинамид-аденин-динуклеотидфосфата и образования его восстановленной формы, процесса, который катализирует фермент глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназа, или другие никотинамид-аденин-динуклеотидфосфат - зависимые ферменты. 15. The use according to claim 14, characterized in that said oxidized glutathione or its pharmaceutically acceptable derivatives in salt form is used in combination with a prolonging agent selected from the group of substances having prooxidant properties or compounds capable of forming weak ionic or coordination bonds that stabilize the molecule of oxidized glutathione or its salt, and slow down the formation of their reduced form, or compounds that are competitive inhibitors of the process of the use of the reduced form of nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate to restore the oxidized form of glutathione and the formation of its reducing form, a process that catalyzes glutathione reductase, or compounds that are reversible inhibitors of the oxidized form of nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate and the formation of its reduced form, the process, which catalyzes the enzyme glucose-6-phosphate dehydrogenase, or other nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-dependent enzymes.

16. Применение по п.15, в котором пролонгатором является аскорбиновая кислота (γ-лактон 2,3-дегидро-L-гулоновая кислота). 16. The application of clause 15, in which the prolongator is ascorbic acid (γ-lactone 2,3-dehydro-L-gulonic acid).

17. Применение по п.15, в котором пролонгатором является диметилсульфоксид. 17. The application of clause 15, in which the prolongator is dimethyl sulfoxide.

18. Применение по п.15, в котором пролонгатором является инозин(гипоксантин-9-D-рибофуранозид). 18. The application of clause 15, in which the prolongator is inosine (hypoxanthine-9-D-ribofuranoside).

19. Применение по п. 15, в котором пролонгатором является цистамин(2,2'-дитиобис[этиламин]). 19. The use of claim 15, wherein the protractor is cystamine (2,2'-dithiobis [ethylamine]).

20. Применение по п.15, в котором пролонгатором окисленного глутатиона, в формуле которого все аминокислоты представлены в L-форме, является окисленный глутатион, в формуле которого две химически однозначные аминокислоты представлены в D-форме, а остальные аминокислоты представлены в L-форме. 20. The application of clause 15, in which the prolongator of oxidized glutathione, in the formula of which all amino acids are presented in L-form, is oxidized glutathione, in the formula of which two chemically unique amino acids are presented in D-form, and the remaining amino acids are presented in L-form .

21. Применение по п. 15, в котором пролонгатором являются соединения платины, например, платина-хлорид. 21. The use of claim 15, wherein the prolongator is platinum compounds, for example, platinum chloride.

22. Применение по п.14, в котором указанный окисленный глутатион или его фармацевтически приемлемые соли используют в комбинации с веществом, являющимся усилителем/модулятором, который выбирают из группы веществ активных метаболитов, являющихся донорами метильных групп, или соединений, которые способствуют образованию окислительно-восстановительных пар (редокс-пар) в клетке, или смесью тех или иных соединений. 22. The use of claim 14, wherein said oxidized glutathione or pharmaceutically acceptable salts thereof are used in combination with an enhancer / modulator substance that is selected from the group of active metabolite substances that are donors of methyl groups, or compounds that promote the formation of oxidatively reducing pairs (redox pairs) in the cell, or a mixture of certain compounds.

23. Применение по п.22, в котором усилителем/модулятором является холин-хлорид(2-оксиэтил)-триметиламмоний хлорид). 23. The use of claim 22, wherein the enhancer / modulator is choline chloride (2-hydroxyethyl) trimethylammonium chloride).

24. Применение по п.22, в котором усилителем/модулятором является S-аденозил-метионин. 24. The use of claim 22, wherein the enhancer / modulator is S-adenosyl-methionine.

25. Применение по п.22, в котором усилителем/модулятором является липоевая кислота (6,8-дитиооктановая кислота). 25. The use of claim 22, wherein the enhancer / modulator is lipoic acid (6,8-dithiooctanoic acid).

26. Применение по п.22, в котором усилителем/модулятором является фолиевая кислота (N-{ 4'-[(2-амино-4-окси-6-птеридил)метил] амино}-бензоил-L(+)глутаминовая кислота). 26. The use of claim 22, wherein the enhancer / modulator is folic acid (N- {4 '- [(2-amino-4-hydroxy-6-pteridyl) methyl] amino} benzoyl-L (+) glutamic acid )

27. Лекарственное средство для лечения заболеваний, при которых модуляция и/или воспроизведение эффектов эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов, и/или индукция механизмов апоптоза в трансформированных клетках является целесообразной, содержащее активное начало и фармацевтически приемлемый компонент, отличающееся тем, что в качестве активного начала содержит эффективное количество фармацевтически приемлемых производных окисленного глутатиона в форме солей. 27. A drug for the treatment of diseases in which modulation and / or reproduction of the effects of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, and / or the induction of apoptosis mechanisms in transformed cells is appropriate, containing an active principle and a pharmaceutically acceptable component, characterized in that as an active the beginning contains an effective amount of pharmaceutically acceptable derivatives of oxidized glutathione in the form of salts.

28. Средство по п.27, в котором фармацевтически приемлемая соль является натрий содержащей солью. 28. The tool according to item 27, in which the pharmaceutically acceptable salt is a sodium containing salt.

29. Средство по п.27, в котором фармацевтически приемлемая соль является литий содержащей солью. 29. The tool according to item 27, in which the pharmaceutically acceptable salt is a lithium-containing salt.

30. Средство по п.27, в котором фармацевтически приемлемая соль является калийсодержащей солью. 30. The tool according to item 27, in which the pharmaceutically acceptable salt is a potassium salt.

31. Средство по п.27, в котором фармацевтически приемлемая соль является кальцийсодержащей солью. 31. The tool according to item 27, in which the pharmaceutically acceptable salt is a calcium salt.

32. Средство по п.27, в котором фармацевтически приемлемая соль является цинксодержащей солью. 32. The tool according to item 27, in which the pharmaceutically acceptable salt is a zinc-containing salt.

33. Средство по п.27, в котором фармацевтически приемлемая соль является молибденсодержащей солью. 33. The tool according to item 27, in which the pharmaceutically acceptable salt is a molybdenum-containing salt.

34. Средство по п.27, в котором фармацевтически приемлемая соль является ванадийсодержащей солью. 34. The tool according to item 27, in which the pharmaceutically acceptable salt is a vanadium-containing salt.

35. Средство по п.27, в котором фармацевтически приемлемая соль является фторсодержащей солью. 35. The tool according to item 27, in which the pharmaceutically acceptable salt is a fluorine-containing salt.

36. Лекарственное средство для лечения заболеваний, при которых модуляция и/или воспроизведение эффектов эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов, и/или индукция механизмов апоптоза в трансформированных клетках является целесообразной, содержащее активное начало и фармацевтически приемлемый компонент, отличающееся тем, что в качестве активного начала содержит эффективное количество фармацевтически приемлемых производных окисленного глутатиона в комбинации с пролонгатором или усилителем/модулятором. 36. A drug for the treatment of diseases in which modulation and / or reproduction of the effects of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, and / or the induction of apoptosis mechanisms in transformed cells is appropriate, containing an active principle and a pharmaceutically acceptable component, characterized in that as an active the beginning contains an effective amount of pharmaceutically acceptable derivatives of oxidized glutathione in combination with a prolongator or enhancer / modulator.

37. Средство по п.36, в котором пролонгатором является аскорбиновая кислота (γ-лактон 2,3-дегидро-L-гулоновая кислота). 37. The tool according to clause 36, in which the prolongator is ascorbic acid (γ-lactone 2,3-dehydro-L-gulonic acid).

38. Средство по п.36, в котором пролонгатором является диметилсульфоксид. 38. The tool according to clause 36, in which the prolongator is dimethyl sulfoxide.

39. Средство по п.36, в котором пролонгатором является инозин(гипоксантин-9-D-рибофуранозид). 39. The tool according to clause 36, in which the prolongator is inosine (hypoxanthine-9-D-ribofuranoside).

40. Средство по п.36, в котором пролонгатором является цистамин(2,2'-дитиобис[этиламин]). 40. The tool according to clause 36, in which the prolongator is cystamine (2,2'-dithiobis [ethylamine]).

41. Средство по п.36, в котором пролонгатором является соединение платины, например, платина-хлорид. 41. The tool according to clause 36, in which the prolongator is a platinum compound, for example, platinum chloride.

42. Средство по п. 36, в котором пролонгатором является холин-хлорид((2-оксиэтил])-триметиламмоний хлорид). 42. The tool according to p. 36, in which the prolongator is choline chloride ((2-hydroxyethyl]) - trimethylammonium chloride).

43. Средство по п.36, в котором пролонгатором является S-аденозил-метионин. 43. The tool according to clause 36, in which the prolongator is S-adenosyl-methionine.

44. Средство по п.36, в котором пролонгатором является липоевая кислота (бис-[6,8-дитиооктанил). 44. The tool according to clause 36, in which the prolongator is lipoic acid (bis- [6,8-dithiooctanyl).

45. Средство по п.36, в котором пролонгатором является фолиевая кислота (N-{ 4'-[(2-амино-4-окси-6-птеридил)-метил] -амино}-бензоил-L(+)глутаминовая кислота). 45. The tool according to clause 36, in which the prolongator is folic acid (N- {4 '- [(2-amino-4-hydroxy-6-pteridyl) methyl] amino} benzoyl-L (+) glutamic acid )

46. Средство по п.36, представляющее собой комбинацию солей окисленного глутатиона, состоящую в равных соотношениях из соли окисленного глутатиона, в формуле которого все аминокислоты представлены в L-форме и из соли окисленного глутатиона, в формуле которого две химически однозначные аминокислоты представлены в D-форме, а остальные аминокислоты представлены в L-форме. 46. The tool according to clause 36, which is a combination of salts of oxidized glutathione, consisting in equal proportions of a salt of oxidized glutathione, in the formula of which all amino acids are represented in L-form and from a salt of oxidized glutathione, in the formula of which two chemically unique amino acids are represented in D -form, and the remaining amino acids are presented in L-form.

47. Лекарственное средство для лечения заболеваний, при которых модуляция и/или воспроизведение эффектов эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов, и/или индукция механизмов апоптоза в трансформированных клетках является целесообразной, содержащее активное начало и фармацевтически приемлемый компонент, отличающееся тем, что в качестве активного начала содержит эффективное количество фармацевтически приемлемых производных окисленного глутатиона в форме композиций, представляющих собой окисленный глутатион, ковалентно связанный с фармацевтически приемлемым веществом из группы активных метаболитов. 47. A drug for the treatment of diseases in which modulation and / or reproduction of the effects of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, and / or the induction of apoptosis mechanisms in transformed cells is appropriate, containing an active principle and a pharmaceutically acceptable component, characterized in that as an active the beginning contains an effective amount of pharmaceutically acceptable derivatives of oxidized glutathione in the form of compositions comprising oxidized glutathione, covalen closely associated with a pharmaceutically acceptable substance from the group of active metabolites.

48. Средство по п.47, представляющее собой композицию окисленного глутатиона, ковалентно связанного с цистеамином(S-тиоэтиламин-глутатион дисульфид). 48. The tool according to clause 47, which is a composition of oxidized glutathione covalently linked to cysteamine (S-thioethylamine-glutathione disulfide).

49. Средство по п.47, представляющее собой композицию окисленного глутатиона, ковалентно связанного с липоевой кислотой (бис-[6,8-дитиооктанил]). 49. The tool according to clause 47, which is a composition of oxidized glutathione covalently linked to lipoic acid (bis- [6,8-dithiooctanyl]).

50. Средство по п.47, представляющее собой композицию окисленного глутатиона, ковалентно связанного с карнозином([β-аланил-гистидил]глутатион дисульфид). 50. The tool according to item 47, which is a composition of oxidized glutathione covalently linked to carnosine ([β-alanyl-histidyl] glutathione disulfide).

51. Средство по п.47, представляющее собой композицию окисленного глутатиона, ковалентно связанного с аденозином([9-β-D-рибофуранозиладенил]глутатион дисульфид). 51. The tool according to item 47, which is a composition of oxidized glutathione covalently linked to adenosine ([9-β-D-ribofuranosyladenyl] glutathione disulfide).

52. Средство по п.47, представляющее собой композицию окисленного глутатиона, ковалентно связанного с метионином(бис-[2-амино-4-]-метилтио]бутаноил глутатион дисульфид). 52. The tool according to item 47, which is a composition of oxidized glutathione covalently linked to methionine (bis- [2-amino-4 -] methylthio] butanoyl glutathione disulfide).

53. Средство по пп.27, 36, 47, где оно представлено в виде лекарственной формы для парентерального введения. 53. The tool according to PP.27, 36, 47, where it is presented in the form of a dosage form for parenteral administration.

54. Средство по пп.27, 36, 47, где оно представлено в виде лекарственной формы для ингаляций. 54. The tool according to PP.27, 36, 47, where it is presented in the form of a dosage form for inhalation.

55. Средство по пп.27, 36, 47, где оно представлено в виде лекарственной формы для накожной аппликации. 55. The tool according to PP.27, 36, 47, where it is presented in the form of a dosage form for skin application.

56. Способ модуляции и/или воспроизведения эффектов эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов, и/или индукции механизмов апоптоза в опухоле- и/или вирусо-трансформированных клетках, включающий введение в организм млекопитающих, нуждающихся в этом, лекарственного средства по пп.27, 36, 47 в дозах 0,01 - 0,5 мг на кг массы, или 1 - 30 мг на 1 м² поверхности тела для фармацевтически приемлемых солей окисленного глутатиона, 0,01 - 1,0 мг на кг массы, или 1 - 30 мг на 1 м² поверхности тела для фармацевтически приемлемых производных окисленного глутатиона в комбинации с пролонгатором, или с усилителем/модулятором, или композиций, по крайней мере, один раз в день в течение периода, необходимого для достижения терапевтического эффекта.56. A method of modulating and / or reproducing the effects of endogenous production of cytokines and hematopoietic factors, and / or inducing apoptosis mechanisms in tumor and / or virus-transformed cells, comprising administering to the body of a mammal in need thereof, the drug according to paragraph 27, 36, 47 in doses of 0.01 - 0.5 mg per kg of body weight, or 1 - 30 mg per 1 m ² of body surface for pharmaceutically acceptable salts of oxidized glutathione, 0.01 - 1.0 mg per kg of body weight, or 1 - 30 mg per 1 m ² body surface for pharmaceutically acceptable derivatives of oxidized gluta thione in combination with a prolongator, or with an amplifier / modulator, or compositions, at least once a day for the period necessary to achieve a therapeutic effect.

Приоритет по пунктам:
14.12.95 по пп.1, 27 и 36;
08.08.96 по пп.14 и 56;
10.12.96 по п.47.Priority on points:
12/14/95 according to claims 1, 27 and 36;
08.08.96 according to claims 14 and 56;
12/10/96 according to clause 47.