RU2145869C1 - Method of anti-mutagenic action on body - Google Patents

Abstract

FIELD: medicinal ecology. SUBSTANCE: method involves administering aspartic acid dipeptide and phenylalanine or pharmaceutically acceptable derivatives (for instance, aspartyl-phenylalanine, aspartame, and other) as substances inhibiting clastogene effect of mutagenic agents such as alkylation agents, e.g. cyclophosphamide or prooxidants (e.g. dioxidine). EFFECT: extended choice of methods for protection of living body against environmental mutagenic effects. 6 cl, 2 tbl, 2 ex

Description

Изобретение относится к области медицины, в частности к генетической токсикологии, и касается способа воздействия на организм с использованием вещества, обладающего антимутагенными свойствами. The invention relates to medicine, in particular to genetic toxicology, and relates to a method of exposure to an organism using a substance having antimutagenic properties.

В настоящее время глобальный характер приобретает проблема загрязнения окружающей среды и последствия этого воздействия на генетический аппарат клетки. Мутагены - физические, химические и биологические факторы, способные вызывать наследственные изменения, т. е. мутации в живой клетке. Действие мутагенов универсально для всех живых организмов. Биологические эффекты мутагенов подразделяются на эффекты в соматических клетках, которые приводят к возникновению синдромов поражения отдельных органов и тканей, и эффекты в зародышевых клетках, в результате чего повреждается хромосомный аппарат клетки, возникают несущие мутацию гаметы, что приводит к возникновению различных наследственных патологий [1]. Currently, the problem of environmental pollution and the consequences of this effect on the genetic apparatus of the cell are becoming global. Mutagens are physical, chemical and biological factors that can cause hereditary changes, i.e. mutations in a living cell. The action of mutagens is universal for all living organisms. The biological effects of mutagens are divided into effects in somatic cells, which lead to the appearance of syndromes of damage to individual organs and tissues, and effects in germ cells, as a result of which the chromosome apparatus of the cell is damaged, gamete-bearing mutations occur, which leads to various hereditary pathologies [1] .

Мутагены широко распространены в среде обитания человека. Они содержатся в продуктах питания, воде и воздухе. С повреждающим действием мутагенов на генетические структуры связывают возникновение врожденных пороков развития, злокачественных опухолей, а также преждевременное старение и бесплодие. В связи с невозможностью изоляции человека от воздействия внешней среды встает вопрос о защите генома человека и других организмов от вредных последствий антропогенного загрязнения окружающей среды, необходимости поиска путей снижения давления мутационного груза в популяции. Существуют различные механизмы, противодействующие возникновению мутаций в клетке. Появилось много работ, в которых установлены антимутагенные эффекты ряда соединений [2,3,4]. Mutagens are widespread in the human environment. They are found in food, water and air. The damaging effects of mutagens on genetic structures are associated with the occurrence of congenital malformations, malignant tumors, as well as premature aging and infertility. In connection with the impossibility of isolating a person from the influence of the external environment, the question arises of protecting the human genome and other organisms from the harmful effects of anthropogenic environmental pollution, the need to find ways to reduce the pressure of a mutational load in the population. There are various mechanisms that counteract the occurrence of mutations in the cell. Many works have appeared in which the antimutagenic effects of a number of compounds have been established [2,3,4].

В настоящее время принято подразделять вещества, подавляющие или снижающие мутагенную активность химических соединений, на десмутагены и антимутагены. В первом случае подразумеваются вещества, инактивирующие мутагены вне клетки, во втором - вещества, снижающие мутагенный эффект путем модификации различных этапов индуцированного мутагенеза [10]. Currently, it is customary to subdivide substances that suppress or reduce the mutagenic activity of chemical compounds into desmutagens and antimutagens. In the first case, we mean substances that inactivate mutagens outside the cell, and in the second, substances that reduce the mutagenic effect by modifying the various stages of induced mutagenesis [10].

Антимутагены - соединения, способные снижать повреждающее действие мутагенов на генетические структуры. Для профилактики мутагенных воздействий возможно применение фармакологических средств защиты генома, а также некоторых антиоксидантов. Antimutagens are compounds that can reduce the damaging effects of mutagens on genetic structures. For the prevention of mutagenic effects, it is possible to use pharmacological means of protecting the genome, as well as some antioxidants.

Существует положительный опыт применения в качестве антимутагенов некоторых фармакологических средств, таких как сарколизин, 2-меркаптобензимидазол, бензодиазепиновые транквилизаторы; растительных масел, таких как пасленовое и физалисное, некоторых бактериальных и ферментных препаратов, ингибиторов ферментов, витаминов, таких как A, C, E и других биологически активных веществ [5,6,7,9]. There is positive experience with the use of certain pharmacological agents as antimutagens, such as sarcolysin, 2-mercaptobenzimidazole, benzodiazepine tranquilizers; vegetable oils, such as nightshade and physalis, certain bacterial and enzyme preparations, enzyme inhibitors, vitamins such as A, C, E and other biologically active substances [5,6,7,9].

В настоящее время известны также способы антимутагенного воздействия на клетку, в которых используют препараты белкового происхождения, например интерферон, и его производные [8], микробную рибонуклеазу [9]. Currently, there are also known methods of antimutagenic effects on the cell, which use drugs of protein origin, for example interferon, and its derivatives [8], microbial ribonuclease [9].

В тоже время, накопленный опыт показывает, что многочисленные положительные эффекты действия витаминов (в том числе антимутагенные) проявляются преимущественно на фоне соответствующих гипо- и авитаминозов, а применение фармакологических средств для защиты генома затруднено невозможностью их назначения широким континентам населения [4]. At the same time, experience has shown that numerous positive effects of vitamins (including antimutagenic ones) are manifested mainly against the background of the corresponding hypo- and vitamin deficiencies, and the use of pharmacological agents to protect the genome is complicated by the impossibility of their appointment to wide continents of the population [4].

Настоящее изобретение посвящено разработке способа антимутагенного воздействия на организм с помощью использования аспартама - дипептида, молекула которого состоит из остатков двух аминокислот: аспарагиновой и фенилаланина. Препарат используется как пищевая добавка, обладающая сладким вкусом. The present invention is devoted to the development of a method of antimutagenic effects on the body using aspartame, a dipeptide, the molecule of which consists of two amino acid residues: aspartic and phenylalanine. The drug is used as a sweet food supplement.

Аспартам и целый ряд его химических производных известны как вещества со значительным подслащивающим эффектом; его используют в медицине, пищевой, фармацевтической и парфюмерно-косметической промышленности, а также ветеринарии (RU 2043419 C1, 10.09.95, FR 2719590, 10.11.95, FR 2719592, 23.06.95). В частности, в разработке, описанной в патенте US 5728863, 17.03.98, указано, что метиловый эфир α-L-аспартил-L-фенилаланина обладает низкой калорийностью и при этом слаще в 200 раз по сравнению с сахаром. Aspartame and a number of its chemical derivatives are known as substances with a significant sweetening effect; it is used in medicine, food, pharmaceutical and perfumery and cosmetic industries, as well as veterinary medicine (RU 2043419 C1, 09/10/95, FR 2719590, 11/10/95, FR 2719592, 06/23/95). In particular, in the development described in US Pat. No. 5,728,863, 3/17/98, it is indicated that α-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester has a low calorie content and is 200 times sweeter than sugar.

В патентах RU 2043419, 10.09.95 и RU 2098425, 10.12.97, RU 2083585, 10.07.97 приведены сведения о производных аспартама, обладающих значительным подслащивающим эффектом. В медицинской практике аспартам используют для питания больных диабетом и ожирением. In the patents RU 2043419, 09/10/95 and RU 2098425, 12/10/97, RU 2083585, 07/10/97, information is given on aspartame derivatives having a significant sweetening effect. In medical practice, aspartame is used to power patients with diabetes and obesity.

В доступной научно-технической и патентной литературе мы не обнаружили сведений о возможных антимутагенных свойствах аспартама и его производных. In the available scientific, technical and patent literature, we did not find information about the possible antimutagenic properties of aspartame and its derivatives.

Задачей настоящего изобретения является создание способа антимутагенного воздействия на организм, в котором дипептид аспарагиновой кислоты и фенилаланина, например аспартам, используют как средство, снижающее кластогенное действие мутагенов. The objective of the present invention is to provide a method of antimutagenic effects on the body, in which the dipeptide of aspartic acid and phenylalanine, for example aspartame, is used as a means of reducing the clastogenic effect of mutagens.

Поставленная задача решается тем, что разработан способ антимутагенного воздействия на организм, включающий введение дипептида аспарагиновой кислоты и фенилаланина или его фармацевтически приемлемых производных (например, аспартам, его метиловый эфир и др.) в качестве вещества, снижающего кластогенное действие мутагенных средств, таких как алкилирующие агенты, например циклофосфамид, или прооксидантов, например диоксидин. The problem is solved in that a method of antimutagenic effects on the body has been developed, including the administration of an aspartic acid dipeptide and phenylalanine or its pharmaceutically acceptable derivatives (e.g. aspartame, its methyl ether, etc.) as a substance that reduces the clastogenic effect of mutagenic agents, such as alkylating agents, for example cyclophosphamide, or prooxidants, for example dioxidine.

В качестве индукторов мутагенеза выбраны соединения, наиболее полно отражающие картину мутагенного воздействия на организм. Один - из группы алкилирующих агентов, второй - из группы прооксидантов - активаторов свободнорадикального окисления. Compounds that most fully reflect the picture of mutagenic effects on the body are selected as mutagenesis inducers. One is from the group of alkylating agents, the second is from the group of prooxidants - activators of free radical oxidation.

Высокой мутагенной активностью обладают соединения, способные переносить на молекулу ДНК алкильные группировки (метиловые, этиловые, пропиловые). Однако, обладая высокой реакционной способностью, эти соединения легко реагируют с внеклеточными компонентами и поэтому внутрь клетки попадает небольшое их количество по сравнению с содержанием этих алкилирующих агентов во внеклеточной среде. В молекуле ДНК, кроме азотистых оснований, могут также алкилироваться фосфатные группы рибонуклеотидов, вызывая тем самым разрывы (кластогенный эффект) хромосом и их структурные перестройки. По характеру генетического эффекта алкилирующие соединения относят к радиомиметикам, т.е. к соединениям, чей мутагенный эффект напоминает мутагенный эффект ионизирующего излучения. Compounds capable of transferring alkyl groups (methyl, ethyl, propyl) to a DNA molecule possess high mutagenic activity. However, having a high reactivity, these compounds easily react with extracellular components and therefore a small amount of them gets into the cell compared to the content of these alkylating agents in the extracellular medium. In addition to nitrogenous bases, phosphate groups of ribonucleotides can also be alkylated in the DNA molecule, thereby causing breaks (clastogenic effect) of chromosomes and their structural rearrangements. By the nature of the genetic effect, alkylating compounds are classified as radiomimetics, i.e. to compounds whose mutagenic effect resembles the mutagenic effect of ionizing radiation.

В качестве алкилирующего агента, обладающего кластогенным действием, выбран один из наиболее распространенных средовых мутагенов - циклофосфамид [1,4]. As an alkylating agent with a clastogenic effect, one of the most common environmental mutagens, cyclophosphamide, was selected [1,4].

Мутагенная активность прооксидантов определяется концентрацией в среде свободных радикалов: -OH^*, -O₂ -HO₂ ^*. Мутагенный эффект прооксидантов может быть усилен действием облучения светом видимой части спектра, УФ-облучением, кислородом, что способствует появлению в окружающей среде свободных радикалов.The mutagenic activity of prooxidants is determined by the concentration of free radicals in the medium: -OH ^* , -O ₂ -HO ₂ ^* . The mutagenic effect of prooxidants can be enhanced by exposure to visible light, UV radiation, and oxygen, which contributes to the appearance of free radicals in the environment.

В качестве прооксиданта, также обладающего кластогенным действием, в экспериментах использовали известный генератор свободных радикалов - диоксидин [4]. Следует напомнить, что одним из важнейших последствий воздействия мутагенов на организм является активация процесса свободнорадикального перекисного окисления липидов (СПОЛ). As a prooxidant, which also has a clastogenic effect, a well-known free radical generator, dioxidine, was used in experiments [4]. It should be recalled that one of the most important effects of mutagens on the body is the activation of the process of free radical lipid peroxidation (SPOL).

Исследования последних лет показали, что чрезмерная интенсификация свободно-радикальных и перекисных реакций является одним из главных факторов повреждения мембран и ферментов клеток [2,3,4]. Ведущее значение при этом имеют следующие процессы: изменение физико-химических свойств липидов мембран, уменьшение содержания в них фосфолипидов, холестерина, жирных кислот. Это обуславливает нарушение конформации их липопротеидных комплексов и в связи с этим снижение активности белков и ферментных систем, обеспечивающих рецепцию гуморальных воздействий, трансмембранный перенос ионов и молекул, структурную целостность мембран; изменение физико-химических свойств белковых мицелл, выполняющих структурную и ферментные функции в клетке; образование структурных дефектов в мембране, так называемых кластеров, вследствие внедрения в них продуктов СПОЛ. В частности, накопление в мембране липидных гидроперекисей приводит к их объединению в мицеллы, создающие трансмембранные каналы проницаемости, по которым возможен неконтролируемый ток катионов и других молекул органических и неорганических соединений в клетку и из нее. Увеличение образования продуктов СПОЛ и параллельно с этим кластеров может привести к фрагментации мембран и к гибели клетки. Указанные процессы в свою очередь обуславливают нарушение важных для жизнедеятельности клеток процессов - возбудимости, генерации и проведения нервного импульса, обмена веществ, восприятия и реализации регулирующих воздействий, межклеточного взаимодействия и др. Таким образом, в качестве второго мутагенного агента, обладающего кластогенным действием, выбран активатор перекисного окисления липидов, в частности диоксидин. Recent studies have shown that excessive intensification of free-radical and peroxide reactions is one of the main factors in damage to membranes and cell enzymes [2,3,4]. The following processes are of leading importance: the change in the physicochemical properties of membrane lipids, a decrease in the content of phospholipids, cholesterol, fatty acids in them. This causes a violation of the conformation of their lipoprotein complexes and, therefore, a decrease in the activity of proteins and enzyme systems providing reception of humoral effects, transmembrane transfer of ions and molecules, structural integrity of membranes; a change in the physicochemical properties of protein micelles that perform structural and enzymatic functions in the cell; the formation of structural defects in the membrane, the so-called clusters, due to the introduction of SPOL products in them. In particular, the accumulation of lipid hydroperoxides in the membrane leads to their unification into micelles, which create transmembrane permeability channels through which an uncontrolled flow of cations and other molecules of organic and inorganic compounds into and out of the cell is possible. An increase in the formation of SPOL products and, in parallel with this, clusters can lead to membrane fragmentation and cell death. These processes, in turn, cause a violation of processes important for cell life — excitability, generation and conduction of a nerve impulse, metabolism, perception and implementation of regulatory influences, intercellular interaction, etc. Thus, an activator was chosen as the second mutagenic agent with a clastogenic effect lipid peroxidation, in particular dioxidine.

Исследования проводились в экспериментах на мышах линии C57 В 1/6 массой 18-20 г (питомник "Светлые горы" Российской Академии Медицинских Наук). Были испытаны дозы аспартама в диапазоне от 4.0 до 40 мг/кг. The studies were conducted in experiments on mice of the C57 B line 1/6 weighing 18-20 g (nursery "Bright Mountains" of the Russian Academy of Medical Sciences). Doses of aspartame ranging from 4.0 to 40 mg / kg have been tested.

Было проведено 4 серии экспериментов. Во всех экспериментах оценивали количество клеток костного мозга с хромосомными повреждениями (кластогенный эффект) путем микроскопического анализа цитогенетических препаратов, приготовленных по общепринятой методике. 4 series of experiments were conducted. In all experiments, the number of bone marrow cells with chromosomal lesions (clastogenic effect) was estimated by microscopic analysis of cytogenetic preparations prepared according to the standard technique.

В первой серии экспериментов аспартам вводили перорально одновременно с внутрибрюшинной инъекцией диоксидина (100 мг/кг) на срок 24 часа (острый эксперимент). In the first series of experiments, aspartame was administered orally simultaneously with an intraperitoneal injection of dioxidine (100 mg / kg) for a period of 24 hours (acute experiment).

Во второй серии эксперимента аспартам вводили перорально, ежедневно в течение 5 дней, последнее введение аспартама сочетали с внутрибрюшинной инъекцией диоксидина (100 мг/кг) на срок 24 часа (предобработка). In the second series of the experiment, aspartame was administered orally, daily for 5 days, the last administration of aspartame was combined with an intraperitoneal injection of dioxidine (100 mg / kg) for a period of 24 hours (pre-treatment).

В третьей серии экспериментов аспартам вводили перорально одновременно с внутрибрюшинной инъекцией циклофосфамида (20 мг/кг) на срок 24 часа (острый эксперимент). In the third series of experiments, aspartame was administered orally simultaneously with an intraperitoneal injection of cyclophosphamide (20 mg / kg) for a period of 24 hours (acute experiment).

В четвертой серии эксперимента аспартам вводили перорально, ежедневно в течение 5 дней, последнее введение аспартама сочетали с внутрибрюшинной инъекцией циклофосфамида (20 мг/кг) на срок 24 часа (предобработка). In the fourth series of the experiment, aspartame was administered orally, daily for 5 days, the last administration of aspartame was combined with an intraperitoneal injection of cyclophosphamide (20 mg / kg) for a period of 24 hours (pretreatment).

Полученные результаты представлены в виде таблиц 1 и 2. В таблице 1 можно проследить влияние аспартама на цитогенетические эффекты диоксидина в дозе 100 мг/кг. В таблице представлены статистически обработанные данные по уровню хромосомных повреждений в остром эксперименте и при условии предварительного введения в организм аспартама (предобработка). Результаты, представленные в таблице 1, демонстрируют, что отдельно взятый диоксидин (в остром эксперименте) индуцирует хромосомные повреждения в 5.8-7.0% исследованных клеток. The results are presented in the form of tables 1 and 2. In table 1, we can trace the effect of aspartame on the cytogenetic effects of dioxidine at a dose of 100 mg / kg. The table shows statistically processed data on the level of chromosomal damage in an acute experiment and subject to the preliminary introduction of aspartame into the body (pre-treatment). The results presented in table 1 demonstrate that a single dioxidine (in an acute experiment) induces chromosomal damage in 5.8-7.0% of the studied cells.

Аспартам в дозе 4.0 мг/кг, вводимый на срок 24 часа совместно с диоксидином, статистически достоверно, в 2.9 раза снижает кластогенное действие мутагена на клетки костного мозга. Однако не влияет на эффект мутагена при использовании из расчета 20 и 40 мг/кг (табл. 1). Aspartame at a dose of 4.0 mg / kg, administered for a period of 24 hours together with dioxidine, is statistically significant, reduces the clastogenic effect of mutagen on bone marrow cells by 2.9 times. However, it does not affect the effect of mutagen when used at the rate of 20 and 40 mg / kg (Table 1).

Антимутагенное действие аспартама в значительно большей степени выражено при его предварительном пятидневном введении перед инъекцией диоксидина. В этом случае аспартам в дозе 4 мг/кг полностью подавляет кластогенную активность диоксидина (1.6% поврежденных клеток против 1.4% поврежденных клеток у интактных животных в контроле). А в дозах 20 и 40 мг/кг статистически значимо снижает кластогенный эффект мутагена в 2.7 и 2.2 раза соответственно (табл. 1). The antimutagenic effect of aspartame is much more pronounced with its preliminary five-day administration before dioxidine injection. In this case, aspartame at a dose of 4 mg / kg completely suppresses the clastogenic activity of dioxidine (1.6% of damaged cells versus 1.4% of damaged cells in intact animals in the control). At doses of 20 and 40 mg / kg, the clastogenic effect of the mutagen is statistically significantly reduced by 2.7 and 2.2 times, respectively (Table 1).

В таблице 2 представлено влияние аспартама на цитогенетические эффекты циклофосфамида в дозе 100 мг/кг. Table 2 shows the effect of aspartame on the cytogenetic effects of cyclophosphamide at a dose of 100 mg / kg.

В этой таблице представлены результаты, демонстрирующие, что отдельно взятый циклофосфамид (в остром эксперименте) индуцирует хромосомные повреждения в 15.2-15.5% исследованных клеток. This table presents the results demonstrating that a single cyclophosphamide (in an acute experiment) induces chromosomal damage in 15.2-15.5% of the studied cells.

Аспартам, вводимый перорально в дозах 4, 20 и 40 мг/кг, вызывает статистически достоверное снижение кластогенного эффекта циклофосфамида соответственно в 1.7, 1.9 и 4.2 раза при 24-часовой экспозиции препаратов в организме животных (табл. 2). Aspartame, administered orally at doses of 4, 20 and 40 mg / kg, causes a statistically significant decrease in the clastogenic effect of cyclophosphamide 1.7, 1.9 and 4.2 times, respectively, with a 24-hour exposure to drugs in animals (Table 2).

На фоне предварительного пятидневного введения аспартама в дозах 4 и 40 мг/кг кластогенный эффект циклофосфамида был статистически достоверно снижен в 2.7 и 5.2 раза соответственно. Against the background of a five-day preliminary administration of aspartame in doses of 4 and 40 mg / kg, the clastogenic effect of cyclophosphamide was statistically significantly reduced 2.7 and 5.2 times, respectively.

Таким образом, полученные результаты позволяют заключить, что пероральное потребление аспартама в дозах от 4.0 до 40 мг/кг снижает кластогенное действие алкилирующих и прооксидантных мутагенов. Данное наблюдение позволяет сделать вывод о наличии у аспартама антимутагенных свойств. Thus, the results obtained allow us to conclude that the oral intake of aspartame in doses from 4.0 to 40 mg / kg reduces the clastogenic effect of alkylating and prooxidant mutagens. This observation allows us to conclude that aspartame has antimutagenic properties.

Пример 1. Мышам линии C 57 B 1/6 перорально в течение 5-ти дней, ежедневно вводили аспартам в дозе 4 мг/кг. Одновременно с последним введением аспартама мышам инъецировали диоксидин в дозе 100 мг/кг. Забой животных производили через 24 часа после последнего введения. Приготовленные цитогенетические препараты клеток спинного мозга анализировали с целью выявления метафазных пластинок, имеющих хромосомные повреждения. Example 1. Mice of the C 57 B 1/6 line orally for 5 days, daily administered aspartame at a dose of 4 mg / kg. Simultaneously with the last administration of aspartame, mice were injected with dioxidine at a dose of 100 mg / kg. The animals were slaughtered 24 hours after the last injection. The prepared cytogenetic preparations of spinal cord cells were analyzed in order to identify metaphase plates with chromosomal damage.

Анализ 500 клеток позволил выявить 1.6 ± 0.6% клеток с хромосомными повреждениями. В спектре повреждений были представлены ахроматические пробелы хромосом (гепы) в количестве 0.8 на каждые 100 исследованных метафаз и одиночные фрагменты хромосом (0.8 на 100 исследованных метафаз). Analysis of 500 cells revealed 1.6 ± 0.6% of cells with chromosomal damage. Achromatic gaps of chromosomes (geps) in the amount of 0.8 for every 100 metaphases studied and single fragments of chromosomes (0.8 per 100 metaphases studied) were presented in the damage spectrum.

Установленный результат не отличается от данных, зарегистрированных у интактных животных 1.4 ± 0.5% клеток с хромосомными повреждениями, и статистически значимо ниже (в 4.2 раза) результата, характеризующего кластогенный эффект мутагена, установленного у животных, получавших только диоксидин без аспартама. The established result does not differ from the data recorded in intact animals 1.4 ± 0.5% of cells with chromosomal damage, and is statistically significantly lower (4.2 times) than the result characterizing the clastogenic effect of the mutagen found in animals that received only dioxidine without aspartame.

Пример 2. Аспартам в дозе 40 мг/кг вводили мышам линии C 57 B 1/6 перорально однократно одновременно с инъекцией циклофосфамида в дозе 20 мг/кг. Забой животных производили через 24 часа после введения соединений. Готовили цитогенетические препараты клеток костного мозга, которые анализировали с целью выявления метафазных пластинок, имеющих хромосомные повреждения. Example 2. Aspartame at a dose of 40 mg / kg was administered to C 57 B 1/6 mice orally once at a time simultaneously with an injection of cyclophosphamide at a dose of 20 mg / kg. Animals were slaughtered 24 hours after administration of the compounds. Prepared cytogenetic preparations of bone marrow cells, which were analyzed in order to identify metaphase plates with chromosomal damage.

Анализ 500 метафазных пластинок клеток костного мозга мышей позволил выявить 3.6 ± 0.8% клеток с хромосомными повреждениями. Спектр хромосомных повреждений был представлен гепами (0.2/100 клеток), одиночными фрагментами (3.2/100 клеток), парными фрагментами (0.2/100 клеток) и обменами (0.4/100 клеток). Analysis of 500 metaphase plates of mouse bone marrow cells revealed 3.6 ± 0.8% of cells with chromosomal damage. The spectrum of chromosomal lesions was represented by geps (0.2 / 100 cells), single fragments (3.2 / 100 cells), paired fragments (0.2 / 100 cells) and exchanges (0.4 / 100 cells).

У животных, получавших только циклофосфамид (20 мг/кг), было установлено 15.2 ± 1.6% поврежденных метафаз. Спектр хромосомных повреждений был представлен гепами (0.4/100 клеток), одиночными фрагментами (13.2/100 клеток), парными фрагментами (0.2/100 клеток) и обменами (1.6/100 клеток), а также клетками с множественными повреждениями хромосом (3.0/100 клеток). In animals receiving only cyclophosphamide (20 mg / kg), 15.2 ± 1.6% of damaged metaphases were found. The spectrum of chromosomal lesions was represented by geps (0.4 / 100 cells), single fragments (13.2 / 100 cells), paired fragments (0.2 / 100 cells) and exchanges (1.6 / 100 cells), as well as cells with multiple chromosome lesions (3.0 / 100 cells).

Сравнение описанных результатов показало, что у мышей, получавших циклофосфамид в сочетании с аспартамом, уровень клеток с повреждениями хромосом статистически значимо в 5.2 раза ниже аналогичного показателя, зарегистрированного у животных, обработанных циклофосфамидом. Comparison of the described results showed that in mice treated with cyclophosphamide in combination with aspartame, the level of cells with chromosome damage was statistically significant 5.2 times lower than the same value recorded in animals treated with cyclophosphamide.

Таким образом, представленные материалы свидетельствуют о том, что дипептид аспарагиновой кислоты и фенилаланина (например, аспартам) обладает выраженным эффектом снижения кластогенного действия мутагенов алкилирующего и прооксидантного происхождения. Проведенные эксперименты на животных позволяют сделать вывод о том, что названный дипептид (в частности аспартам) может быть использован в качестве антимутагенного средства для защиты генома млекопитающих от вредного воздействия окружающей среды. Thus, the presented materials indicate that the dipeptide of aspartic acid and phenylalanine (for example, aspartame) has a pronounced effect of reducing the clastogenic effect of mutagens of alkylating and prooxidant origin. The experiments performed on animals allow us to conclude that the named dipeptide (in particular aspartame) can be used as an antimutagenic agent to protect the mammalian genome from the harmful effects of the environment.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
1. Дубинин Н.П., Пашин Ю.В. Мутагенез и окружающая среда. -М.: 1978.LIST OF REFERENCES:
1. Dubinin N.P., Pashin Yu.V. Mutagenesis and the environment. -M .: 1978.

2. Еремина А.Н. Совершенствование системы Salmonella (микросомы для качественной и количественной оценки мутагенного и антимутагенного действия химических веществ). автореф. канд. дис. -Челябинск: 1988. 2. Eremina A.N. Improving the Salmonella system (microsomes for the qualitative and quantitative assessment of the mutagenic and antimutagenic effects of chemicals). autoref. Cand. dis. Chelyabinsk: 1988.

3. Дурнев А.Д., Середенин С.Б. Фармакологические проблемы поиска и применения антимутагенов. Вестник РАМН. 1993, N 1, c. 19 - 26. 3. Durnev A.D., Seredenin S.B. Pharmacological problems of the search and use of antimutagens. Bulletin of RAMS. 1993, N 1, c. 19 - 26.

4. Середенин С. Б. , Дурнев А.Д. Фармакологическая защита генома. -М.: 1992. 4. Seredenin S. B., Durnev A. D. Pharmacological protection of the genome. -M .: 1992.

5. Дурнев А. Д. Антимутагенные свойства диазепиновых транквилизаторов. Химико-фармацевтический журнал. 1989, 23, N7, с. 784-786. 5. Durnev A. D. Antimutagenic properties of diazepine tranquilizers. Chemical Pharmaceutical Journal. 1989, 23, N7, p. 784-786.

6. Умнова Н.В. Антимутагенное действие ингибиторов микросомных монооксигеназ. Вестник РАМН. -1993, N 1, с. 19 - 26. 6. Umnova N.V. Antimutagenic effect of microsomal monooxygenase inhibitors. Bulletin of RAMS. -1993, N 1, p. 19 - 26.

7. Пентюк А.А, Дурнев А.Д. Витамин A и ферментные системы метаболической активации генотоксических соединений. Вестник РАМН, -1995, N1, c.3-9. 7. Pentyuk A.A., Durnev A.D. Vitamin A and enzyme systems for the metabolic activation of genotoxic compounds. Bulletin of the Russian Academy of Medical Sciences, -1995, N1, p. 3-9.

8. Генгель Ф.И. Антимутагенное действие препарата видоспецифического интерферона. Вестник РАМН. 1993, N4, с 613-617. 8. Gengel F.I. Antimutagenic effect of the drug species-specific interferon. Bulletin of RAMS. 1993, N4, with 613-617.

9. Иванченко О. Б. Антимутагенная активность ферментного препарата "биназа...". Микробиология, -1995, 64, N2, с.234- 238. 9. Ivanchenko O. B. Antimutagenic activity of the enzyme preparation "binase ...". Microbiology, -1995, 64, N2, p. 234-238.

10. Kada T. Jn: Environ. Mutag. and Carcinog,- Tokyo: N.-Y., 1982, p. 355-359. 10. Kada T. Jn: Environ. Mutag. and Carcinog, - Tokyo: N.-Y., 1982, p. 355-359.

Claims (6)

1. Способ антимутагенного воздействия на организм, включающий введение в организм вещества пептидной природы, отличающийся тем, что в организм вводят дипептид аспарагиновой кислоты и фенилаланина или фармацевтически приемлемое производное этого дипептида в дозе, достаточной для снижения кластогенного действия мутагенных агентов. 1. The method of antimutagenic effects on the body, including the introduction into the body of a substance of peptide nature, characterized in that the body is administered a dipeptide of aspartic acid and phenylalanine or a pharmaceutically acceptable derivative of this dipeptide in a dose sufficient to reduce the clastogenic effect of mutagenic agents. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для снижения кластогенного действия мутагенов используют аспартам. 2. The method according to p. 1, characterized in that aspartame is used to reduce the clastogenic effect of mutagens. 3. Способ по пп.1 и 2, отличающийся тем, что аспартам вводят в дозе 4 - 40 мг/кг. 3. The method according to claims 1 and 2, characterized in that aspartame is administered in a dose of 4-40 mg / kg. 4. Способ по пп.1 - 3, отличающийся тем, что в качестве мутагенов выбирают вещества из группы алкилирующих агентов или генераторов свободных радикалов - прооксидантов. 4. The method according to claims 1 to 3, characterized in that the substances from the group of alkylating agents or generators of free radicals - prooxidants are selected as mutagens. 5. Способ по пп.1 - 4, отличающийся тем, что в качестве алкилирующего агента выбирают циклофосфамид. 5. The method according to claims 1 to 4, characterized in that cyclophosphamide is selected as the alkylating agent. 6. Способ по пп.1 - 4, отличающийся тем, что в качестве прооксиданта выбирают диоксидин. 6. The method according to claims 1 to 4, characterized in that dioxidine is chosen as the prooxidant.

Images