RU2109512C1 - Product to normalize a system for peroxide oxidation of cerebral lipids - Google Patents

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: it is suggested to apply an ozonized physiological solution as a product to normalize peroxide oxidation of cerebral lipids. EFFECT: higher efficiency of the process due to activation of oxygen-dependent reactions and improved blood supply of cerebral tissues. 2 tbl

Description

Изобретение относится к лекарственным препаратам, содержащим неорганические активные ингредиенты, и может быть использовано для нормализации системы перекисного окисления липидов (ПОЛ) мозга при активации последних в различных стрессовых ситуациях как у больных, так и у здоровых людей. The invention relates to medicines containing inorganic active ingredients, and can be used to normalize the system of lipid peroxidation (LPO) of the brain when the latter is activated in various stressful situations in both patients and healthy people.

Известно, что устойчивыми показателями состояния эмоционального напряжения, тревоги и страха являются активация систем ПОЛ и повышенное содержание продуктов свободно-радикального окисления липидов [1]. It is known that stable indicators of the state of emotional stress, anxiety, and fear are activation of lipid peroxidation systems and an increased content of products of free-radical lipid oxidation [1].

Для нормализации систем ПОЛ применяют средства, обладающие мембрано-стабилизирующими, антиоксидантными свойствами как естественного происхождения типа аскорбиновой кислоты, витамина E, как и синтезированные химические препараты: дибунол, эмоксипин и др. [2]. To normalize LPO systems, agents are used that have membrane-stabilizing, antioxidant properties as a natural origin such as ascorbic acid, vitamin E, as well as synthesized chemicals: dibunol, emoxipin, etc. [2].

Для повышения эффективности воздействия препаратов применяют, как правило, композиции из натуральных и синтезированных средств. При этом оказывается, что химические препараты, являясь короткоцепочечными соединениями, конкурируют за место на мембране клеток с длинноцепочечными соединениями, например с витамином E. Это приводит в конечном итоге к повреждению клеток, что может повлечь за собой активацию канцерогенеза. To increase the effectiveness of the effects of drugs, as a rule, compositions from natural and synthesized agents are used. It turns out that chemical preparations, being short-chain compounds, compete for a place on the membrane of cells with long-chain compounds, for example, vitamin E. This ultimately leads to cell damage, which can lead to the activation of carcinogenesis.

Известны также гормональные препараты типа хорионического гонадотропина (ХГ), применяемые для нормализации системы ПОЛ [3]. Also known are hormonal preparations such as chorionic gonadotropin (CG), used to normalize the LPO system [3].

Однако получаемый из мочи беременных женщин этот дорогостоящий препарат может обладать побочным гормональным эффектом. However, this expensive drug obtained from the urine of pregnant women may have a hormonal side effect.

Кроме того, ХГ вводится подкожно, что требует специальной подготовки для проведения данной манипуляции. In addition, CG is administered subcutaneously, which requires special preparation for this manipulation.

Задачей изобретения является нормализация систем перекисного окисления липидов за счет применения недорогого и безопасного для здоровья средства, обладающего при этом высокой эффективностью воздействия. The objective of the invention is the normalization of lipid peroxidation systems through the use of inexpensive and safe for health funds with high efficacy.

Поставленная задача решается за счет применения физиологического раствора, насыщенного озоном, активизирующим аэробные реакции, в ходе которых образуется НАД-Н (источник протонов для восстановления неферментативной антиоксидантной системы защиты). The problem is solved through the use of physiological saline saturated with ozone, activating aerobic reactions, during which NAD-H (a source of protons for the restoration of non-enzymatic antioxidant defense systems) is formed.

Обоснование способа осуществлялось экспериментально. The justification of the method was carried out experimentally.

Целью исследования эксперимента являлось опробирование озонированного физиологического раствора (ОФР) в качестве препарата, уменьшающего тревожное состояние у крыс в лабораторных условиях. В качестве объектов наблюдения были использованы 106 половозрелых самцов беспородных крыс массой 200-240 г. Модель панической атаки создавалась путем внутрибрюшного введения животным лактата натрия в дозе 600 мг на 1 кг веса. The aim of the experimental study was to test ozonized physiological saline (OGF) as a drug that reduces the anxiety state in rats under laboratory conditions. As the objects of observation, we used 106 sexually mature male outbred rats weighing 200-240 g. The panic attack model was created by intraperitoneal administration of 600 mg of sodium lactate per kg of body weight to animals.

ОФР вводили группе крыс до лактатной инфузии, а другой - после нее. В процессе эксперимента проводили сравнительный анализ эффективности ОФР и такого известного анксиолитика, как седуксен. Вегетативный компонент реакции животных оценивали по частоте сердечных сокращений (ЧСС), частоте дыхания (ЧД) и температуре тела. Комплексную оценку тревожно-фобического состояния крыс проводили многопараметровым методом по совокупности поведенческих реакций в 9 тестах, основанных на создании эмоциогенных ситуаций. FGM was administered to a group of rats before lactate infusion, and the other after it. In the course of the experiment, a comparative analysis of the effectiveness of OPR and such a well-known anxiolytic as seduxen was performed. The vegetative component of the animal response was evaluated by heart rate (HR), respiration rate (RR), and body temperature. A comprehensive assessment of the anxiety-phobic state of rats was carried out using the multi-parameter method according to the totality of behavioral reactions in 9 tests based on the creation of emotiogenic situations.

Примеры конкретного выполнения эксперимента представлены ниже. Examples of a specific experiment are presented below.

Крыса N 1 "Зеленая". Rat N 1 "Green".

Половозрелому животному массой 230 г, находившемуся до начала эксперимента в клетке в условиях естественной освещенности и свободного доступа к еде и питью, с целью моделирования "панической атаки" внутрибрюшинно ввели 1 мл раствора лактата натрия на 5%-й глюкозе из расчета 600 мг/кг массы и поместили обратно в клетку. Сразу же после введения препарата отмечена выраженная болевая реакция крысы в виде спонтанной вокализации, переворачивания на спину с попыткой "отряхнуть" задними лапами место укола, агрессивное поведение - вставание на задние лапы, нападение на соседей по клетке. Описанные реакции исчезли через 3-5 мин. Через 15 мин начали определение уровня тревожности в 9 тестах поведенческого характера, основанных на создании эмоциогенных ситуаций. Он составил 15,5 баллов (6,75 ± 0,55 в контрольной группе, в качестве которой рассматривалась группа интактных животных). По окончании тестирования с помощью радиотермометра МРТ-30 определили глубинную температуру тела крысы, которая составила 34,1^o (38,25 ± 0,205 - в контрольной группе). Подсчитанная частота дыхания оказалась равной 132 уд. (118,8 ± 5,4 в контрольной группе). Затем животное наркотизировали путем внутрибрюшинного введения тиопентала натрия в дозе 10 мг/кг, снова подсчитали частоту дыхания (67,0 за 1 мин). Затем сняли ЭКГ (вводя электроды подкожно) с последующем подсчетом ЧСС за 1 мин, которая составила 390 ударов (444,6 ± 7,48 в контрольной группе).A sexually mature animal weighing 230 g, which was in a cage under natural light and free access to food and drink before the experiment, in order to simulate a panic attack, was injected intraperitoneally with 1 ml of sodium lactate solution in 5% glucose at a rate of 600 mg / kg mass and placed back into the cage. Immediately after administration of the drug, a pronounced pain reaction of the rat was noted in the form of spontaneous vocalization, flipping onto the back with an attempt to "shake off" the injection site with hind legs, aggressive behavior - standing on hind legs, attacking cell neighbors. The described reactions disappeared after 3-5 minutes. After 15 minutes, they began to determine the level of anxiety in 9 tests of a behavioral nature, based on the creation of emotional situations. It amounted to 15.5 points (6.75 ± 0.55 in the control group, which was considered a group of intact animals). At the end of the test, the depth of the body temperature of the rat was determined using an MPT-30 radio thermometer, which was 34.1 ^o (38.25 ± 0.205 in the control group). The calculated respiratory rate was 132 beats. (118.8 ± 5.4 in the control group). Then the animal was anesthetized by intraperitoneal administration of sodium thiopental at a dose of 10 mg / kg, and the respiratory rate was again calculated (67.0 per 1 min). Then the ECG was taken (introducing the electrodes subcutaneously), followed by the calculation of heart rate in 1 min, which amounted to 390 strokes (444.6 ± 7.48 in the control group).

Через 2 ч после начала эксперимента животное декапитировали, голову крысы заморозили на 30 с в жидком азоте, после чего вычленили мозг животного на холоде с последующим приготовлением гомогенитов ткани. 2 hours after the start of the experiment, the animal was decapitated, the rat's head was frozen for 30 seconds in liquid nitrogen, and then the animal's brain was isolated in the cold, followed by preparation of tissue homogenites.

При биохимическом анализе ткани мозга крысы были получены следующие результаты:
диеновые конъюгаты - 1,78 опт. пл./мг общих липидов
основание Шиффа - 124,6 отн.ед./мг общих липидов
супероксиддисмутаза - 25,32 усл.ед./мин.г Hb
J_max /общие липиды - 136,1 имп.с/мл общих липидов
S /общие липиды - 462 имп.с/мл общих липидов
Крыса N 2 "Красная"
Половозрелому животному массой 217 г, находившемуся до начала эксперимента в клетке в условиях естественной освещенности и свободного доступа к еде и питью, ввели внутрибрюшинно 1 мл озонированного физиологического раствора, приготовленного путем пропускания озонокислородной смеси с содержанием озона 1200 мкг/л через флакон с физиологическим раствором со скоростью 1 л/мин в течение 15 мин. Крысу поместили обратно в клетку. Никаких отклонений в поведении животного не отмечено. Через 20 мин, внутрибрюшинно, с целью моделирования "панической атаки" ввели 1,0 раствора лактата натрия на 5%-ный глюкозе и вновь поместили в клетку. Каких-то элементов агрессивного поведения, реакции животного на боль не зафиксировано. Наблюдалось лишь небольшое усиление двигательной активности, сменившееся через 1,5 мин реакцией "затаивания". Через 15 мин начали определение уровня тревожности в 9 тестах поведенческого характера, основанных на создании эмоциогенных ситуаций. Он составил 8,3 балла (6,75 ± 0,55 в контрольной группе, в качестве которой рассматривалась группа интактных животных). По окончании тестирования с помощью радиотермометра МРТ-30 определяли глубинную температуру тела крысы, которая составила 36,4^o (38,25 ± 0,205). Подсчитанная за 1 мин частота дыхания оказалась равной 126 ударам (118,8 ± 5,4 в контрольной группе). После этого наркотизировали путем внутрибрюшинного введения тиопентала натрия в дозе 10 мг/кг. Через 5 мин сняли ЭКГ (вводят игольчатые электроды подкожно) и подсчитали частоту сердечных сокращений за 1 мин. Она составила 408.When biochemical analysis of rat brain tissue, the following results were obtained:
diene conjugates - 1.78 opt. S / mg total lipids
Schiff base - 124.6 rel.ed./ mg of total lipids
superoxide dismutase - 25.32 conventional units / min.g Hb
J _max / total lipids - 136.1 imp./ml total lipids
S / total lipids - 462 pulse / ml total lipids
Rat N 2 "Red"
A sexually mature animal weighing 217 g, which was in a cage under natural light and free access to food and drink prior to the start of the experiment, was injected intraperitoneally with 1 ml of ozonized physiological solution prepared by passing an ozone-oxygen mixture containing ozone 1200 μg / l through a bottle with physiological saline solution at a rate of 1 l / min for 15 minutes The rat was put back into the cage. No deviations in the behavior of the animal were noted. After 20 minutes, intraperitoneally, in order to simulate a “panic attack”, a 1.0 solution of sodium lactate in 5% glucose was injected and placed back into the cell. Some elements of aggressive behavior, the reaction of the animal to pain is not fixed. There was only a slight increase in locomotor activity, which was replaced after 1.5 minutes by the reaction of "harboring". After 15 minutes, they began to determine the level of anxiety in 9 tests of a behavioral nature, based on the creation of emotional situations. It amounted to 8.3 points (6.75 ± 0.55 in the control group, which was considered a group of intact animals). At the end of the test, the depth of the body temperature of the rat was determined using an MRT-30 radio thermometer, which was 36.4 ^° (38.25 ± 0.205). The respiratory rate calculated for 1 min was equal to 126 beats (118.8 ± 5.4 in the control group). After that, they were anesthetized by intraperitoneal administration of sodium thiopental at a dose of 10 mg / kg. After 5 minutes, the ECG was removed (needle electrodes were inserted subcutaneously) and the heart rate was calculated in 1 minute. She was 408.

Через 2 ч после начала эксперимента животное декапитировали, головку крысы заморозили на 30 с в жидком азоте, вычленили мозг животного на холоде с последующим приготовлением гомогенитов ткани. 2 hours after the start of the experiment, the animal was decapitated, the rat head was frozen for 30 s in liquid nitrogen, the brain of the animal was singled out in the cold, followed by the preparation of tissue homogenites.

При биохимическом анализе ткани мозга крысы были получены следующие результаты:
диеновые конъюгаты - 0,48 опт.пл./мг общих липидов
основание Шиффа - 84,2 отн. ед./мг общих липидов
супероксиддисмутаза - 38,14 усл. ед./мин • г Hb
J_max /общие липиды - 30,8 имп. с/мл общих липидов
S /общие липиды - 152,6 имп. с/мг общих липидов
Результаты проведенных исследований представлены в табл. 1 и 2.When biochemical analysis of rat brain tissue, the following results were obtained:
diene conjugates - 0.48 opt.pl./mg of total lipids
Schiff base - 84.2 rel. units / mg of total lipids
superoxide dismutase - 38.14 conv. units / min • g Hb
J _max / total lipids - 30.8 imp. s / ml total lipids
S / total lipids - 152.6 imp. s / mg total lipids
The results of the studies are presented in table. 1 and 2.

Как видно из представленных в таблице данных эксперимента, под действием лактата натрия уровень тревожности крыс увеличился в 2,3 раза, на 4^o снизилась температура тела, урежалась ЧСС. Применение ОФР значительно уменьшило выраженность тревожно-фобических расстройств, нормализовало температуру тела, увеличило ЧСС. В целом профилактическое введение ОФР оказалось более эффективным, чем его использование для купирования уже развившегося тревожного состояния. Действие ОФР на эмоциональное состояние крыс и вегетативные показатели приближались к таковым у седуксена.As can be seen from the experimental data presented in the table, under the influence of sodium lactate, the anxiety level of rats increased by 2.3 times, body temperature decreased by 4 ^o , heart rate decreased. The use of OFR significantly reduced the severity of anxiety-phobic disorders, normalized body temperature, and increased heart rate. In general, the prophylactic administration of FGM was more effective than its use for the relief of an already developed anxiety state. The effect of FGM on the emotional state of rats and vegetative indices were close to those of seduxen.

Биохимический анализ ткани мозга, приводившийся в конце эксперимента, выявил снижение интенсивности свечения хемолюминисценции, уменьшение количества первичных (диеновые конъюгаты) и конечных (основание Шиффа) молекулярных продуктов ПОЛ. Одновременно имела место активация фермента супероксиддисмутазы (СОД), вызванная, вероятно, нормализацией pH среды. Особенно важной оказалась активация общей антиоксидантной защиты. Все выявленные метаболические изменения свидетельствуют об активации кислородзависимых реакций и, следовательно, об улучшении кровоснабжения ткани мозга. A biochemical analysis of brain tissue, cited at the end of the experiment, revealed a decrease in the intensity of fluorescence of chemoluminescence, a decrease in the number of primary (lipid conjugates) and final (Schiff base) molecular products of LP. At the same time, the activation of the superoxide dismutase enzyme (SOD) took place, probably caused by normalization of the pH of the medium. Particularly important was the activation of a common antioxidant defense. All identified metabolic changes indicate the activation of oxygen-dependent reactions and, therefore, the improvement of blood supply to brain tissue.

Источники информации
1. Александровский Ю.А. "Неврозы и ПОЛ", 1991, - М.: Медицина.Sources of information
1. Aleksandrovsky Yu.A. "Neuroses and FLOOR", 1991, - M .: Medicine.

2. Машковский М. Д. Справочник "Лекарственные средства", 1991, - М.: Медицина. 2. Mashkovsky M. D. Reference "Medicines", 1991, - M .: Medicine.

3. Солопаева И. М., Солопаев Б.П. Стимуляция регенерации патологически измененной печени и хорионической гонадотропин, Н.Новгород, 1991. 3. Solopaeva I. M., Solopaev B.P. Stimulation of the regeneration of pathologically altered liver and chorionic gonadotropin, N. Novgorod, 1991.

Claims (1)

Применение озонированного физиологического раствора в качестве средства для нормализации системы перекисного окисления липидов мозга. The use of ozonized saline as a means to normalize the system of peroxidation of brain lipids.

Images