Claims (79)
1. Изолированный или рекомбинантный полипептид, содержащий последовательность, которая1. An isolated or recombinant polypeptide containing a sequence that
(a) отличается в 1-16 положениях аминокислот от SEQ ID NO:1 и(a) differs in 1-16 positions of amino acids from SEQ ID NO: 1 and
(b) содержит одну или более замен относительно SEQ ID NO:1, выбранных из группы, состоящей из F48A/L; V51P; F55A; F65A; F68P; L111А и V114Р,(b) contains one or more substitutions relative to SEQ ID NO: 1 selected from the group consisting of F48A / L; V51P; F55A; F65A; F68P; L111A and V114P,
причем этот полипептид проявляет антивирусную активность.moreover, this polypeptide exhibits antiviral activity.
2. Полипептид по п.1, содержащий последовательность, которая отличается от SEQ ID NO:1 в 1-10 положениях аминокислот.2. The polypeptide according to claim 1, containing a sequence that differs from SEQ ID NO: 1 at 1-10 amino acid positions.
3. Полипептид по п.1, содержащий последовательность, которая отличается от SEQ ID NO:1 в 1-8 положениях аминокислот.3. The polypeptide according to claim 1, containing a sequence that differs from SEQ ID NO: 1 at 1-8 amino acid positions.
4. Полипептид по п.1, дополнительно содержащий одну или более замен, выбранных из группы, состоящей из H47Q; V51A; Q52P/E; А53Т; F55S; L56V; F57L; Y58H; M61I; N113К; V114Е и E160D.4. The polypeptide according to claim 1, additionally containing one or more substitutions selected from the group consisting of H47Q; V51A; Q52P / E; A53T; F55S; L56V; F57L; Y58H; M61I; N113K; V114E and E160D.
5. Полипептид по п.1, содержащий последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:2-35.5. The polypeptide according to claim 1, containing a sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 2-35.
6. Полипептид по п.1, последовательность которого содержит замену F48A/L относительно SEQ ID NO:1.6. The polypeptide according to claim 1, the sequence of which contains the replacement of F48A / L relative to SEQ ID NO: 1.
7. Полипептид по п.6, содержащий последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:34 и SEQ ID NO:35.7. The polypeptide according to claim 6, containing a sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: : 15, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 , SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 34 and SEQ ID NO: 35.
8. Изолированный или рекомбинантный полипептид, содержащий последовательность, которая8. An isolated or recombinant polypeptide containing a sequence that
(a) отличается в 0-16 положениях аминокислот от SEQ ID NO:13 и(a) differs at 0-16 amino acid positions from SEQ ID NO: 13 and
(b) содержит одно или более из: Ala или Leu в положении 48; Pro в положении 51; Ala в положении 55; Ala в положении 65; Pro в положении 68; Ala в положении 111 и Pro в положении 114,(b) contains one or more of: Ala or Leu at position 48; Pro at position 51; Ala at position 55; Ala at position 65; Pro at position 68; Ala at position 111 and Pro at position 114,
причем этот полипептид проявляет антивирусную активность.moreover, this polypeptide exhibits antiviral activity.
9. Полипептид по п.8, последовательность которого содержит Ala или Leu в положении 48.9. The polypeptide of claim 8, the sequence of which contains Ala or Leu at position 48.
10. Полипептид по п.8, содержащий последовательность, которая отличается от SEQ ID NO:13 в 0-8 положениях аминокислот.10. The polypeptide of claim 8, containing a sequence that differs from SEQ ID NO: 13 at 0-8 positions of amino acids.
11. Изолированный или рекомбинантный полипептид, содержащий последовательность SEQ ID NO:13, необязательно содержащую дополнительно метионин на N-конце, причем этот полипептид проявляет антивирусную активность11. An isolated or recombinant polypeptide containing the sequence of SEQ ID NO: 13, optionally additionally containing methionine at the N-terminus, the polypeptide exhibiting antiviral activity
12. Изолированный или рекомбинантный полипептид, содержащий последовательность, которая12. An isolated or recombinant polypeptide containing a sequence that
(a) отличается в 1-16 положениях аминокислот от SEQ ID NO:36 и(a) differs in 1-16 positions of amino acids from SEQ ID NO: 36 and
(b) содержит одну или более замен относительно SEQ ID NO:36, выбранных из группы, состоящей из М21А; I24P; F48A/L; Т51Р; S55A; F65A; F68P; F90A; М93Р; L111A; V114Р; F124A; I127P и E160D,(b) contains one or more substitutions relative to SEQ ID NO: 36 selected from the group consisting of M21A; I24P; F48A / L; T51P; S55A; F65A; F68P; F90A; M93P; L111A; V114P; F124A; I127P and E160D,
причем этот полипептид проявляет антивирусную активность.moreover, this polypeptide exhibits antiviral activity.
13. Полипептид по п.12, содержащий последовательность, которая отличается от SEQ ID NO:36 в 1-10 положениях аминокислот.13. The polypeptide according to item 12, containing a sequence that differs from SEQ ID NO: 36 in the 1-10 positions of the amino acids.
14. Полипептид по п.12, содержащий последовательность, которая отличается от SEQ ID NO:36 в 1-8 положениях аминокислот.14. The polypeptide according to item 12, containing a sequence that differs from SEQ ID NO: 36 in 1-8 positions of amino acids.
15. Полипептид по п.12, дополнительно содержащий одну или более замен, выбранных из группы, состоящей из P26L; H47Q; T51V; S55P/F; V56L; H58Y; L60M; F90Y; M93L; N95D; N113К; V114Е; R125Q; Т132К и L154F.15. The polypeptide of claim 12, further comprising one or more substitutions selected from the group consisting of P26L; H47Q; T51V; S55P / F; V56L; H58Y; L60M; F90Y; M93L; N95D; N113K; V114E; R125Q; T132K and L154F.
16. Полипептид по п.12, содержащий последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:37-44.16. The polypeptide according to item 12, containing a sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 37-44.
17. Полипептид по п.12, последовательность которого содержит замену F48A/L относительно SEQ ID NO:36.17. The polypeptide according to item 12, the sequence of which contains the replacement of F48A / L relative to SEQ ID NO: 36.
18. Полипептид по п.17, содержащий последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:42 и SEQ ID NO:43.18. The polypeptide according to 17, containing a sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO : 42 and SEQ ID NO: 43.
19. Полипептид по п.12, содержащий последовательность SEQ ID NO:44.19. The polypeptide according to item 12, containing the sequence of SEQ ID NO: 44.
20. Изолированный или рекомбинантный полипептид, содержащий последовательность, которая20. An isolated or recombinant polypeptide containing a sequence that
(a) отличается в 0-16 положениях аминокислот от SEQ ID NO:38 и(a) differs at 0-16 amino acid positions from SEQ ID NO: 38 and
(b) содержит одно или более из: Ala в положении 21; Pro в положении 24; Ala или Leu в положении 48; Pro в положении 51; Ala в положении 55; Ala в положении 65; Pro в положении 68; Ala в положении 90; Pro в положении 93; Ala в положении 111; Pro в положении 114; Ala в положении 124; Pro в положении 127 и Glu в положении 160,(b) contains one or more of: Ala at position 21; Pro at position 24; Ala or Leu at position 48; Pro at position 51; Ala at position 55; Ala at position 65; Pro at position 68; Ala at position 90; Pro at position 93; Ala at position 111; Pro at position 114; Ala at position 124; Pro at position 127 and Glu at position 160,
причем этот полипептид проявляет антивирусную активность.moreover, this polypeptide exhibits antiviral activity.
21. Полипептид по п.29, последовательность которого содержит Ala или Leu в положении 48.21. The polypeptide according to clause 29, the sequence of which contains Ala or Leu at position 48.
22. Полипептид по п.20, содержащий последовательность, которая отличается от SEQ ID NO:38 в 0-8 положениях аминокислот.22. The polypeptide according to claim 20, containing a sequence that differs from SEQ ID NO: 38 at 0-8 positions of amino acids.
23. Изолированный или рекомбинантный полипептид, содержащий последовательность SEQ ID NO:38, необязательно содержащую дополнительно метионин на N-конце, причем этот полипептид проявляет антивирусную активность.23. An isolated or recombinant polypeptide containing the sequence of SEQ ID NO: 38, optionally additionally containing methionine at the N-terminus, the polypeptide exhibiting antiviral activity.
24. Полипептид по пп.1-23, где антивирусная активность этого полипептида равна или больше антивирусной активности huIFN-α 2b или huIFN-α 2а.24. The polypeptide according to claims 1 to 23, where the antiviral activity of this polypeptide is equal to or greater than the antiviral activity of huIFN-α 2b or huIFN-α 2a.
25. Полипептид по п.24, где антивирусная активность этого полипептида является по меньшей мере в два раза большей, чем антивирусная активность huIFN-α 2b или huIFN-α 2а.25. The polypeptide according to paragraph 24, where the antiviral activity of this polypeptide is at least two times greater than the antiviral activity of huIFN-α 2b or huIFN-α 2a.
26. Полипептид по пп.1-23, где этот полипептид обнаруживает отношение антивирусная активность/антипролиферативная активность по меньшей мере в два раза большее, чем отношение антивирусная активность/антипролиферативная активность, обнаруживаемое huIFN-α 2b или huIFN-α 2а.26. The polypeptide according to claims 1-23, where the polypeptide has an antiviral activity / antiproliferative activity ratio of at least two times greater than the antiviral activity / antiproliferative activity ratio detected by huIFN-α 2b or huIFN-α 2a.
27. Конъюгат, содержащий27. The conjugate containing
(a) полипептид по пп.1-26 и(a) the polypeptide according to claims 1 to 26 and
(b) неполипептидную группу, ковалентно присоединенную к этому полипептиду.(b) a non-polypeptide group covalently attached to this polypeptide.
28. Конъюгат по п.27, содержащий по меньшей мере две неполипептидные группы.28. The conjugate according to item 27, containing at least two non-polypeptide groups.
29. Конъюгат по п.27, содержащий неполипептидную группу, ковалентно присоединенную к остатку цистеина.29. The conjugate of claim 27, comprising a non-polypeptide group covalently attached to a cysteine residue.
30. Конъюгат по п.27, содержащий неполипептидную группу, ковалентно присоединенную к остатку лизина или к N-концевой аминогруппе.30. The conjugate according to item 27, containing a non-polypeptide group, covalently attached to the lysine residue or to the N-terminal amino group.
31. Конъюгат по п.27, содержащий неполипептидную группу, ковалентно присоединенную к остатку лизина.31. The conjugate according to item 27, containing a non-polypeptide group covalently attached to the lysine residue.
32. Конъюгат по п.27, содержащий неполипептидную группу, ковалентно присоединенную к N-концевой аминогруппе.32. The conjugate according to item 27, containing a non-polypeptide group, covalently attached to the N-terminal amino group.
33. Конъюгат по п.27, где эта неполипептидная группа является полимером.33. The conjugate of claim 27, wherein the non-polypeptide group is a polymer.
34. Конъюгат по п.33, где этот полимер является полиэтиленгликолем.34. The conjugate of claim 33, wherein the polymer is polyethylene glycol.
35. Конъюгат по п.34, где этот полиэталенгликоль является мПЭГ2-группой 40 кДа, ковалентно присоединенной к остатку лизина.35. The conjugate of claim 34, wherein the polyethylene glycol is a 40 kD mEGEG group covalently attached to a lysine residue.
36. Конъюгат по п.27, где эта неполипептидная группа является сахаром.36. The conjugate of claim 27, wherein the non-polypeptide group is sugar.
37. Конъюгат по п.36, где этот сахар присоединен к сайту N-гликозилирования этого полипептида.37. The conjugate according to clause 36, where this sugar is attached to the N-glycosylation site of this polypeptide.
38. Конъюгат, содержащий38. The conjugate containing
(a) полипептид, содержащий последовательность SEQ ID NO:13, необязательно содержащий дополнительно метионин на N-конце; и(a) a polypeptide containing the sequence of SEQ ID NO: 13, optionally additionally containing methionine at the N-terminus; and
(b) ПЭГ-группу, ковалентно присоединенную к остатку лизина этого полипептида, причем этот конъюгат проявляет антивирусную активность.(b) a PEG group covalently attached to the lysine residue of this polypeptide, wherein the conjugate exhibits antiviral activity.
39. Конъюгат по п.38, где ПЭГ-группа является мПЭГ-группой 40 кДа.39. The conjugate according to § 38, where the PEG group is an MPEG group of 40 kDa.
40. Конъюгат по п.39, где мПЭГ-группа 40 кДа ковалентно присоединена к остатку лизина, выбранному из Lys 122 и Lys 135.40. The conjugate of claim 39, wherein the 40 kD MPEG group is covalently attached to a lysine residue selected from Lys 122 and Lys 135.
41. Конъюгат, содержащий41. The conjugate containing
(a) полипептид, содержащий последовательность SEQ ID NO:38, необязательно содержащий дополнительно метионин на N-конце; и(a) a polypeptide containing the sequence of SEQ ID NO: 38, optionally additionally containing methionine at the N-terminus; and
(b) ПЭГ-группу, ковалентно присоединенную к остатку лизина этого полипептида, причем этот конъюгат проявляет антивирусную активность.(b) a PEG group covalently attached to the lysine residue of this polypeptide, wherein the conjugate exhibits antiviral activity.
42. Конъюгат по п.41, где ПЭГ-группа является мПЭГ-группой 40 кДа.42. The conjugate according to paragraph 41, where the PEG group is an MPEG group of 40 kDa.
43. Конъюгат по п.42, где мПЭГ-группа 40 кДа ковалентно присоединена к остатку лизина, выбранному из Lys 31, Lys 122 и Lys 135.43. The conjugate of claim 42, wherein the 40 kD MPEG group is covalently attached to a lysine residue selected from Lys 31, Lys 122 and Lys 135.
44. Композиция, содержащая44. A composition comprising
(a) конъюгат, содержащий полипептид, содержащий последовательность SEQ ID NO:13, необязательно содержащий дополнительно метионин на N-конце, и мПЭГ-группу 40 кДа, ковалентно присоединенную к Lys 122; и(a) a conjugate containing a polypeptide containing the sequence of SEQ ID NO: 13, optionally additionally containing methionine at the N-terminus, and a 40 kDa MPEG group covalently attached to Lys 122; and
(b) конъюгат, содержащий полипептид, содержащий последовательность SEQ ID NO:13, необязательно содержащий дополнительно метионин на N-конце, и мПЭГ-группу 40 кДа, ковалентно присоединенную к Lys 135,(b) a conjugate containing a polypeptide containing the sequence of SEQ ID NO: 13, optionally additionally containing methionine at the N-terminus, and a 40 kDa MPEG group covalently attached to Lys 135,
причем эта композиция проявляет антивирусную активность.moreover, this composition exhibits antiviral activity.
45. Композиция, содержащая45. A composition comprising
(a) конъюгат, содержащий полипептид, содержащий последовательность SEQ ID NO:38, необязательно содержащий дополнительно метионин на N-конце, и мПЭГ-группу 40 кДа, ковалентно присоединенную к Lys 31;(a) a conjugate containing a polypeptide containing the sequence of SEQ ID NO: 38, optionally additionally containing methionine at the N-terminus, and a 40 kDa MPEG group covalently attached to Lys 31;
(b) конъюгат, содержащий полипептид, содержащий последовательность SEQ ID NO:38, необязательно содержащий дополнительно метионин на N-конце, и мПЭГ-группу 40 кДа, ковалентно присоединенную к Lys 122; и(b) a conjugate containing a polypeptide containing the sequence of SEQ ID NO: 38, optionally additionally containing methionine at the N-terminus, and a 40 kDa MPEG group covalently attached to Lys 122; and
(c) конъюгат, содержащий полипептид, содержащий последовательность SEQ ID NO:38, необязательно содержащий дополнительно метионин на N-конце, и мПЭГ-группу 40 кДа, ковалентно присоединенную к Lys 135,(c) a conjugate containing a polypeptide containing the sequence of SEQ ID NO: 38, optionally additionally containing methionine at the N-terminus, and a 40 kDa MPEG group covalently attached to Lys 135,
причем эта композиция проявляет антивирусную активность.moreover, this composition exhibits antiviral activity.
46. Композиция, содержащая полипептид по пп.1-26 и фармацевтически приемлемый эксципиент.46. A composition comprising a polypeptide according to claims 1 to 26 and a pharmaceutically acceptable excipient.
47. Композиция, содержащая конъюгат по пп.27-43 и фармацевтически приемлемый эксципиент.47. A composition comprising the conjugate of claims 27-43 and a pharmaceutically acceptable excipient.
48. Композиция по пп.44-45, дополнительно содержащая фармацевтически приемлемый эксципиент.48. The composition according to claims 44-45, further comprising a pharmaceutically acceptable excipient.
49. Изолированный или рекомбинантный полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид по пп.1-26.49. An isolated or recombinant polynucleotide containing a nucleic acid sequence that encodes a polypeptide according to claims 1 to 26.
50. Полинуклеотид по п.49, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид, содержащий последовательность SEQ ID NO:13.50. The polynucleotide of claim 49, comprising a nucleic acid sequence that encodes a polypeptide containing the sequence of SEQ ID NO: 13.
51. Полинуклеотид по п.50, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты, выбранную из SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:64 и SEQ ID NO:89.51. The polynucleotide of claim 50, comprising a nucleic acid sequence selected from SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 64, and SEQ ID NO: 89.
52. Полинуклеотид по п.49, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид, содержащий последовательность SEQ ID NO:38.52. The polynucleotide of claim 49, comprising a nucleic acid sequence that encodes a polypeptide containing the sequence of SEQ ID NO: 38.
53. Полинуклеотид по п.52, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты, выбранную из SEQ ID NO:80, SEQ ID NO:81, SEQ ID NO:82 и SEQ ID NO:90.53. The polynucleotide of claim 52, comprising a nucleic acid sequence selected from SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82, and SEQ ID NO: 90.
54. Клетка-хозяин, содержащая полинуклеотид по п.49.54. A host cell containing the polynucleotide of claim 49.
55. Вектор, содержащий полинуклеотид по п.49.55. Vector containing the polynucleotide according to § 49.
56. Вектор по п.55, который является экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, функционально связанный с промотором.56. The vector of claim 55, which is an expression vector comprising a polynucleotide operably linked to a promoter.
57. Клетка-хозяин, содержащая вектор по п.56.57. A host cell containing the vector of claim 56.
58. Композиция, содержащая полинуклеотид по п.49 и эксципиент.58. A composition comprising the polynucleotide of claim 49 and an excipient.
59. Способ получения полипептида по пп.1-26, предусматривающий:59. A method of producing a polypeptide according to claims 1 to 26, comprising:
обеспечение культуры, содержащей клетку-хозяина, причем эта клетка-хозяин содержит экспрессирующий вектор, содержащий промотор, функционально связанный с полинуклеотидом, причем этот полинуклеотид содержит последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует этот полипептид,providing a culture comprising a host cell, the host cell comprising an expression vector comprising a promoter operably linked to a polynucleotide, the polynucleotide containing a nucleic acid sequence that encodes this polypeptide,
культивирование этой культуры при условиях, которые делают возможной экспрессию этого полипептида, иculturing this culture under conditions that allow expression of the polypeptide, and
извлечение этого полипептида.extraction of this polypeptide.
60. Способ по п.59, где эта клетка-хозяин является гликозилирующей клеткой-хозяином.60. The method of claim 59, wherein the host cell is a glycosylating host cell.
61. Способ по п.59, где эта клетка-хозяин является бактериальной клеткой-хозяином.61. The method of claim 59, wherein the host cell is a bacterial host cell.
62. Способ по п.59, где бактериальной клеткой-хозяином является Е.coli.62. The method of claim 59, wherein the bacterial host cell is E. coli.
63. Способ по п.62, где стадия извлечения полипептида предусматривает:63. The method according to item 62, where the stage of extraction of the polypeptide provides:
(a) выделение телец включения (IB), содержащих этот полипептид;(a) isolation of inclusion bodies (IB) containing this polypeptide;
(b) солюбилизацию этих IB с получением посредством этого не имеющего укладки полипептида;(b) solubilizing these IBs to thereby obtain a folding polypeptide;
(c) повторную укладку не имеющего укладки полипептида с получением посредством этого повторно уложенного полипептида; и(c) re-folding the non-folding polypeptide to thereby obtain a re-laid polypeptide; and
(d) очистку этого повторно уложенного полипептида.(d) purification of this re-laid polypeptide.
64. Способ получения конъюгата, предусматривающий:64. A method of producing a conjugate, comprising:
(i) обеспечение полипептида по пп.1-26 и(i) providing a polypeptide according to claims 1 to 26 and
(ii) присоединение по меньшей мере одной неполипептидной группы к этому полипептиду, причем полученный конъюгат проявляет антивирусную активность(ii) attaching at least one non-polypeptide group to this polypeptide, wherein the resulting conjugate exhibits antiviral activity
65. Способ по п.64, где стадия обеспечения полипептида предусматривает:65. The method of claim 64, wherein the step of providing the polypeptide comprises:
обеспечение культуры, содержащей клетку-хозяина, причем эта клетка-хозяин содержит экспрессирующий вектор, содержащий промотор, функционально связанный с полинуклеотидом, причем этот полинуклеотид содержит последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует этот полипептид,providing a culture comprising a host cell, the host cell comprising an expression vector comprising a promoter operably linked to a polynucleotide, the polynucleotide containing a nucleic acid sequence that encodes this polypeptide,
культивирование этой культуры при условиях, которые делают возможной экспрессию этого полипептида, иculturing this culture under conditions that allow expression of the polypeptide, and
извлечение этого полипептида.extraction of this polypeptide.
66. Способ по п.65, где эта клетка-хозяин является гликозилирующей клеткой-хозяином или бактериальной клеткой-хозяином.66. The method of claim 65, wherein the host cell is a glycosylating host cell or a bacterial host cell.
67. Способ по п.66, где бактериальной клеткой-хозяином является Е.coli.67. The method according to p, where the bacterial host cell is E. coli.
68. Способ по п.67, где стадия извлечения полипептида предусматривает:68. The method according to p, where the stage of extraction of the polypeptide provides:
(a) выделение телец включения (IB), содержащих этот полипептид;(a) isolation of inclusion bodies (IB) containing this polypeptide;
(b) солюбилизацию этих IB с получением посредством этого не имеющего укладки полипептида;(b) solubilizing these IBs to thereby obtain a folding polypeptide;
(c) повторную укладку не имеющего укладки полипептида с получением посредством этого повторно уложенного полипептида; и(c) re-folding the non-folding polypeptide to thereby obtain a re-laid polypeptide; and
(d) очистку этого повторно уложенного полипептида.(d) purification of this re-laid polypeptide.
69. Способ по п.64, где стадия присоединения по меньшей мере одной неполипептидной группы к этому полипептиду предусматривает:69. The method of claim 64, wherein the step of attaching at least one non-polypeptide group to the polypeptide comprises:
реакцию этого полипептида с мПЭГ-NHS 40 кДа при молярном отношении мПЭГ-NHS:полипептид приблизительно 3:1-5:1 при pH 9 и 4°С в течение 1 ч - в течение ночи.the reaction of this polypeptide with mPEG-NHS 40 kDa at a molar ratio of mPEG-NHS: polypeptide of approximately 3: 1-5: 1 at pH 9 and 4 ° C for 1 h - overnight.
70. Способ уменьшения количества копий вируса в клетках, инфицированных этим вирусом, предусматривающий: введение полипептида по пп.1-26, конъюгата по пп.27-43 или композиции по пп.44-48 в эти клетки в количестве, эффективном для уменьшения количества копий этого вируса в клетках, с уменьшением посредством этого количества копий этого вируса в указанных клетках.70. A method of reducing the number of copies of a virus in cells infected with this virus, comprising: introducing a polypeptide according to claims 1 to 26, a conjugate according to claims 27-43 or a composition according to claims 44-48 to these cells in an amount effective to reduce the number copies of this virus in cells, thereby decreasing the number of copies of this virus in said cells.
71. Способ уменьшения уровня РНК HCV в сыворотке пациента, инфицированного HCV, предусматривающий введение этому пациенту полипептида по пп.1-26, конъюгата по пп.27-43 или композиции по пп.44-48 в количестве, эффективном для уменьшения уровня РНК HCV в сравнении с уровнем РНК HCV, присутствующим перед началом лечения.71. A method of reducing the level of HCV RNA in the serum of a patient infected with HCV, comprising administering to this patient a polypeptide according to claims 1 to 26, a conjugate according to claims 27-43, or a composition according to claims 44-48 in an amount effective to reduce the level of HCV RNA compared to the level of HCV RNA present before treatment.
72. Способ уменьшения уровня ДНК HBV в сыворотке пациента, инфицированного HBV, предусматривающий введение этому пациенту полипептида по пп.1-26, конъюгата по пп.27-43 или композиции по пп.44-48 в количестве, эффективном для уменьшения уровня ДНК HBV в сравнении с уровнем ДНК HBV, присутствующим перед началом лечения.72. A method of reducing the level of HBV DNA in the serum of a patient infected with HBV, comprising administering to this patient a polypeptide according to claims 1 to 26, a conjugate according to claims 27-43 or a composition according to claims 44-48 in an amount effective to reduce the level of HBV DNA compared to the level of HBV DNA present before starting treatment.
73. Способ уменьшения уровня РНК HIV в сыворотке пациента, инфицированного HIV, предусматривающий введение этому пациенту полипептида по пп.1-26, конъюгата по пп.27-43 или композиции по пп.44-48 в количестве, эффективном для уменьшения уровня РНК HIV в сравнении с уровнем РНК HIV, присутствующим перед началом лечения.73. A method of reducing the level of HIV RNA in the serum of a patient infected with HIV, comprising administering to this patient a polypeptide according to claims 1 to 26, a conjugate according to claims 27-43 or a composition according to claims 44-48 in an amount effective to reduce the level of HIV RNA in comparison with the level of HIV RNA present before starting treatment.
74. Полипептид по пп.1-26, конъюгат по пп.27-43 или композиция по пп.44-48 для применения в качестве лекарственного средства.74. The polypeptide according to claims 1 to 26, the conjugate according to claims 27-43 or the composition according to claims 44-48 for use as a medicine.
75. Применение полипептида по пп.1-26, конъюгата по пп.27-43 или композиции по пп.44-48 для изготовления лекарственного средства для применения в лечении заболеваний.75. The use of the polypeptide according to claims 1 to 26, the conjugate according to claims 27-43 or the composition according to claims 44-48 for the manufacture of a medicament for use in the treatment of diseases.
76. Применение полипептида по пп.1-26, конъюгата по пп.27-43 или композиции по пп.44-48 для изготовления лекарственного средства для применения в лечении вирусного заболевания.76. The use of the polypeptide according to claims 1 to 26, the conjugate according to claims 27-43 or the composition according to claims 44-48 for the manufacture of a medicament for use in the treatment of a viral disease.
77. Применение полипептида по пп.1-26, конъюгата по пп.27-43 или композиции по пп.44-48 для изготовления лекарственного средства для уменьшения количества копий вируса в клетках, инфицированных этим вирусом.77. The use of the polypeptide according to claims 1 to 26, the conjugate according to claims 27-43 or the composition according to claims 44-48 for the manufacture of a medicament for reducing the number of copies of the virus in cells infected with this virus.
78. Применение полипептида по пп.1-26, конъюгата по пп.27-43 или композиции по пп.44-48 для изготовления лекарственного средства для уменьшения уровня вируса в сыворотке пациента, инфицированного этим вирусом.78. The use of the polypeptide according to claims 1 to 26, the conjugate according to claims 27-43 or the composition according to claims 44-48 for the manufacture of a medicament for reducing the level of the virus in the serum of a patient infected with this virus.
79. Применение по любому из пп.61-63, где этим вирусом является вирус гепатита С (HCV), вирус гепатита В (HBV) или вирус иммунодефицита человека (HIV).79. The use according to any one of claims 61-63, wherein the virus is hepatitis C virus (HCV), hepatitis B virus (HBV) or human immunodeficiency virus (HIV).