RU1818051C - Method for preparation of fodder addition - Google Patents

Abstract

Использование: к производству кормов из биомассы продуцентов органических кислот - отхода производства лимонной кислоты. Сущность: отход производства лимонной кислоты (влажную и липкую мицели- альную массу гриба Aspergillus niger смешивают с сухими наполнител ми в соот- ношёнии{1-2): (1-3), затем высушивают при 40-50°С до влагосодержани  1,3-7,5%. Срок хранени  кормодобавок по предлагаемому способу не менее 12 мес. Питательность кормодобавок соответствует 0,71-0,8 корм. ед.Usage: for the production of feed from biomass producers of organic acids - waste production of citric acid. SUBSTANCE: citric acid production waste (wet and sticky mycelial mass of Aspergillus niger fungus is mixed with dry excipients in the ratio {1-2): (1-3), then dried at 40-50 ° C until moisture content 1.3-7.5%. The shelf life of feed additives according to the proposed method is at least 12 months. Nutrition of feed additives corresponds to 0.71-0.8 feed. units

Description

Изобретение относитс  к производству кормов из биомассы продуцентов органических кислот. Способ может быть использован дл  приготовлени  кормовых добавок из мицё- лиальной массы гриба Aspergillus niger, примен емого дл  биосинтеза лимонной кислоты.The invention relates to the production of feed from biomass of organic acid producers. The method can be used to prepare feed additives from the mycelial mass of Aspergillus niger fungus used for biosynthesis of citric acid.

Целью данного изобретени   вл етс  расширение кормовой базы, снижение энергозатрат и улучшение экологической обстановки производства лимонной кислоты . Поставленна  цель достигаетс  тем, что мицелиальную массу влагосодержанием 65-75% (отход производства лимонной кислоты ) смешивают с Сухим наполнителем, затем полученную смесь высушивают при 40-50°С при перемешивании смеси до влагосодержани  1,3-7,5%,The aim of the present invention is to expand the food supply, reduce energy consumption and improve the ecological situation in the production of citric acid. The goal is achieved in that the mycelial mass with a moisture content of 65-75% (waste product of citric acid) is mixed with a dry filler, then the resulting mixture is dried at 40-50 ° C while stirring the mixture to a moisture content of 1.3-7.5%.

Сущность изобретени  в том, что мицели- алъную массу смешивают с наполнителем. За счет гигроскопичности наполнител  при смешивании происходит снижение влагосодержани  и липкости мицелиальной массы.The essence of the invention is that the mycelial mass is mixed with a filler. Due to the hygroscopicity of the filler during mixing, the moisture content and stickiness of the mycelial mass are reduced.

. В предлагаемом способе используют отход производства лимонной кислоты - мицелиальную массу, при этом полученную смесь сушат при более низких температурах , чем по прототипу, что позвол ет сохранить ценные компоненты, вход щие в состав мицелиальной массы, и снизить энергоемкость получени  кормовой добавки . В качестве сухих наполнителей используют трав ную муку, подсолнечный и хлопковый шроты, пшеничные отруби и м сокостную муку.. In the proposed method, the waste product of citric acid production is used - mycelial mass, while the resulting mixture is dried at lower temperatures than the prototype, which allows you to save the valuable components that make up the mycelial mass and reduce the energy consumption of obtaining the feed additive. Herbal flour, sunflower and cottonseed meal, wheat bran and meat flour are used as dry fillers.

Дл  получени  кормовой добавки наполнитель смешивают с мицелиальной массой в соотношении (1-2) : (1-3), при этом в качестве наполнител  используют определенный продукт или смесь нескольких продуктов . В составе предлагаемой кормовой добавки присутствует р д ценных компонентов: белок, микроэлементы, витамины группы В, биологически активные вещестэа, органические кислоты, незаменимые дл  животного организма аминокислоты, в частности , валин. лизин, лейцин, изолейцин, треонин, триптрфан, фенилаланин. Кормо (ЛTo obtain a feed additive, the filler is mixed with the mycelial mass in the ratio (1-2): (1-3), with a particular product or a mixture of several products being used as filler. The proposed feed additive contains a number of valuable components: protein, microelements, B vitamins, biologically active substances, organic acids, amino acids essential for the animal organism, in particular, valine. lysine, leucine, isoleucine, threonine, tryptrfan, phenylalanine. Cormo (L

СWITH

соwith

0000

о atabout at

ва  добавка содержит также разные ферменты: пектиназу, амилазу, инвертазу, липазу и др. По внешнему виду добавка представл ет собой рассыпчатый продукт кремового, серого, зеленого или коричневого цвета в зависимости от используемого наполнител . Кормовую добавку хран т в течение 12 мес цев. Микробиологические исследовани  показывают отсутствие нежелательной микрофлоры.Your additive also contains various enzymes: pectinase, amylase, invertase, lipase, etc. In appearance, the additive is a crumbly cream, gray, green, or brown product, depending on the filler used. The feed additive is stored for 12 months. Microbiological studies show the absence of unwanted microflora.

Таким образом, предлагаемый способ позвол ет эффективно использовать отход микробиологического синтеза лимонной кислоты в кормопроизводстве. Кроме того, использование указанного отхода дает возможность расширить и укрепить кормовую базу сельского хоз йства. Thus, the proposed method allows the efficient use of waste microbiological synthesis of citric acid in feed production. In addition, the use of this waste makes it possible to expand and strengthen the fodder base of agriculture.

Мицелиальна  масса - отход производства лимонной кислоты - отработанна  влажна  биомасса продуцента лимонной кислоты (гриба Aspergillus nlger). Влагосо- держание отхода производства лимонной кислоты 65-75% регламентировано спецификой микробиологического производства лимонной кислоты. Дл  производства кормовой добавки по предлагаемому способу примен етс  влажна  свежа  мицелиаль- на  масса и сухие кормовые наполнители.Mycelial mass - waste product of citric acid production - spent wet biomass of citric acid producer (Aspergillus nlger fungus). The moisture content of the waste product of citric acid production of 65-75% is regulated by the specifics of the microbiological production of citric acid. For the production of a feed additive according to the proposed method, moist fresh mycelial mass and dry feed fillers are used.

П. р и м е р 1. .50 г биомассы (отхода производства лимонной кислоты) (25% сухих веществ (СВ), в 50 г биомассы соответствует 12,5 г) смешивают с 50 г пшеничных отрубей (СВ - 91,5%, в 50 г пшеничных отрубей соответствует 45,75 г) з соотношении 1:1. Смесь высушивают при 40°С. Получают 59 г продукта коричневого цвета (СВ - 98,7%) в виде порошка. Полученна  кормова  добавка-1 имеет следующий состав, %: сырой протеин 26,8; сырой жир 3,46; сыра  клетчатка 8,2; сыра  зола 18,9; лизин 1,19; метионин 0,26; триптофан 0,85; цистин 0,38; кальций 0,67; фосфор 0,78; натрий 0,03; калий 3,74; магний 0,3; железо 0,009; сера 0,11; хлор 0,62; влага 1,3; неидентифицированные органические соединени  32,4. Кор- модобавка-1 содержит в 1 кг витамины, мг: Bi - 5,4; Bz - 5,1; Вз - 36,0; В - 920; Bs - 122,0; каротин 0,16. Питательна  ценность 1 кг кормодобавки-1 составл ет 0,74 корм.ед. Обменна  энерги  100 г кормодобавки-1 равна 174 кал.P. primer 1. .50 g of biomass (waste product of citric acid) (25% solids (CB), 50 g of biomass corresponds to 12.5 g) is mixed with 50 g of wheat bran (CB - 91.5 %, in 50 g of wheat bran corresponds to 45.75 g) in a ratio of 1: 1. The mixture is dried at 40 ° C. Obtain 59 g of a brown product (CB - 98.7%) in the form of a powder. The resulting feed additive-1 has the following composition,%: crude protein 26.8; crude fat 3.46; fiber cheese 8.2; ash cheese 18.9; lysine 1.19; methionine 0.26; tryptophan 0.85; cystine 0.38; calcium 0.67; phosphorus 0.78; sodium 0.03; potassium 3.74; magnesium 0.3; iron 0.009; sulfur 0.11; chlorine 0.62; moisture 1.3; unidentified organic compounds 32.4. Kormodopadavka-1 contains vitamins in 1 kg, mg: Bi - 5.4; Bz - 5.1; Bt - 36.0; B - 920; Bs - 122.0; carotene 0.16. The nutritional value of 1 kg of feed additive-1 is 0.74 feed units. The metabolic energy of 100 g of feed additive-1 is 174 cal.

Пример 2. 50 г биомассы (25% СВ, в 50 г биомассы 12,5 г) смешивают со 150 г пшеничных отрубей (СВ - 91,5%, в 150 г пшеничных отрубей 137,25 г) в соотношении 1:3. Смесь высушивают при 45°С. Получают 162 г продукта кремового цвета (СВ - 92,4%) в виде порошка.Example 2. 50 g of biomass (25% CB, 50 g of biomass 12.5 g) are mixed with 150 g of wheat bran (CB - 91.5%, in 150 g of wheat bran 137.25 g) in a 1: 3 ratio. The mixture is dried at 45 ° C. 162 g of a cream-colored product is obtained (CB - 92.4%) in the form of a powder.

Полученна  кормова  добавка-2 имеет следующий состав. %: сырой протеин 29,7;The resulting feed additive-2 has the following composition. %: crude protein 29.7;

сырой жир 3,95; сыра  клетчатка 8,64; сыра  зола 21,4; лизин 1,36; метионин 0,28; триптофан 1,02; пистин 0,388; кальций 0,8; фосфор 0,92; натрий 0,036; калий 4,45; магнийcrude fat 3.95; cheese fiber 8.64; ash cheese 21.4; lysine 1.36; methionine 0.28; tryptophan 1.02; piston 0.388; calcium 0.8; phosphorus 0.92; sodium 0.036; potassium 4.45; magnesium

0,36; железо 0,01; сера 0,17; хлор 0,75; влага 7,4; неидентифицированные органические соединени  25,77. Питательна  ценность 1 кг кормодобавки-2 составл ет 0,75 корм, ед, Обменна  энерги  100 г кормодобавки-20.36; iron 0.01; sulfur 0.17; chlorine 0.75; moisture 7.4; unidentified organic compounds 25.77. The nutritional value of 1 kg of feed-2 is 0.75 feed, units, metabolic energy 100 g of feed-2

0 равна 180 кал,0 is 180 cal

Подобранное соотношение компонентов состава (пример 2) пригодно также и дл  производства кормодобавки-2 в гранулированном виде. Проведенные промышленныеThe selected ratio of the components of the composition (Example 2) is also suitable for the production of feed additives-2 in granular form. Conducted industrial

5 испытани  по гранул ции кормодобавки-2 на гранул торе ДГ-1 показали, что данное соотношение компонентов  вл етс  оптимальным .5 tests on granulation of feed additive-2 on a granulator DG-1 showed that this ratio of the components is optimal.

Пример 3. 50 г биомассы (25% - СВ,Example 3. 50 g of biomass (25% - ST,

0 в 50 г биомассы 12,5 г) смешивают с 50 г м сокостной муки-(СВ - 93,2%, в 50 г м сокостной муки 46,6 г) в соотношении 1:1, Смесь высушивают при 40°С. Получают 60 г продукта темно-коричневого цвета (СВ 5 98,5%) в виде порошка. Полученна  кормо- . добэвка-3.имеет следующий состав, %: сырой протеин 33,3;. сырой жир 13,2; сыра  клетчатка 4,3; сыра  зола 27,3; лизин 1,65; метионин 0,45; магний 0,14; триптофан 0,89;0 in 50 g of biomass 12.5 g) is mixed with 50 g m of coconut flour- (CB - 93.2%, in 50 g of coconut flour 46.6 g) in a 1: 1 ratio. The mixture is dried at 40 ° C. 60 g of a dark brown product (CB 5 98.5%) are obtained in the form of a powder. Received feed. Dobevka-3. has the following composition,%: crude protein 33.3 ;. crude fat 13.2; cheese fiber 4.3; ash cheese 27.3; lysine 1.65; methionine 0.45; magnesium 0.14; tryptophan 0.89;

0 цистин 0,67; кальций 7,9; фосфор 3,96; натрий 1,14; калий 3,6; железо 0,07 сера 0,16; хлор 0,71; в; га 1,5. Питательна  ценность 1 кг кор модобавки-3 составл ет 0,74 корм,- ед, Обменна  энерги  100 г кормодобавки-30 cystine 0.67; calcium 7.9; phosphorus 3.96; sodium 1.14; potassium 3.6; iron 0.07 sulfur 0.16; chlorine 0.71; at; ha 1.5. The nutritional value of 1 kg of core supplement 3 is 0.74 feed, - units, Metabolic energy 100 g of feed supplement 3

5 равна 187 кал.5 is equal to 187 cal.

П р и м е р 4.100 г биомассы (СВ - 25%,PRI me R 4.100 g of biomass (CB - 25%,

в 100 г биомассы 25 г) смешивают с 50 гin 100 g of biomass 25 g) are mixed with 50 g

трав ной муки (СВ - 92,5%, в 50 г трав ной grass flour (CB - 92.5%, in 50 g of grass flour

муки 46,25 г) в соотношении 2 :1 : 1, Смесьflour 46.25 g) in a ratio of 2: 1: 1, Mixture

0 высушивают при 50°С. Получают 76 г продукта зеленого цвета (СВ - 93,75%) в виде порошка. Полученна  кормодобавка-4 имеет следующий состав, %: сырой протеин 22,0; сырой жир сыра  клетчатка 15,2;0 dried at 50 ° C. Get 76 g of a green product (CB - 93.75%) in the form of a powder. The resulting feed additive-4 has the following composition,%: crude protein 22.0; crude fat in cheese fiber 15.2;

5 сыра  зола 14,5; лизин 0,96; метионин 0,22; триптофан 0,63; цистин 0,33; кальций 0,89; фосфор 0,19; натрий 0,07; калий 2,9; магний 0,12; железо 0,1; сера 0,08; хлор 0,57; влага 6,25; неидентифицированные органиче0 ские соединени  32,94. Питательна  ценность 1 кг кормодобавки-4 составл ет 0,71 корм. ед. Обменна  энерги  100 г кормодо- бавкм-4 равна 160 кал.5 cheese ash 14.5; lysine 0.96; methionine 0.22; tryptophan 0.63; cystine 0.33; calcium 0.89; phosphorus 0.19; sodium 0.07; potassium 2.9; magnesium 0.12; iron 0.1; sulfur 0.08; chlorine 0.57; moisture 6.25; unidentified organic compounds 32.94. The nutritional value of 1 kg of feed additive-4 is 0.71 feed. units The metabolic energy of 100 g of food supplement-4 is 160 cal.

Пример 5. 50 г биомассы (СВ - 25%,Example 5. 50 g of biomass (CB - 25%,

5 в 50 г биомассы 12,5 г) смешивают с 25 г трав ной муки (СВ - 92,5%, в 25 г трав ной муки 23,125 г) и 25 г подсолнечного шрота (СВ - 93%, в 25 г подсолнечного шрота 23,25 г) в соотношении 2:1:1. Смесь высушивают при 40°С. Получают 62 г продукта серо-зеле:5 in 50 g of biomass 12.5 g) are mixed with 25 g of grass flour (CB - 92.5%, in 25 g of grass flour 23.125 g) and 25 g of sunflower meal (CB - 93%, in 25 g of sunflower meal 23.25 g) in a ratio of 2: 1: 1. The mixture is dried at 40 ° C. Get 62 g of product gray-green:

ного цвета (СВ - 94,96%) в виде порошка, Полученна  кррмодобавка-5 имеет следующий состав,. %: сырой протеин 29,5; сырой жир 2,1; сыра  клетчатка 16,7; сыра  зола 18,6; лизин 1,3; метионин 0,39; триптофан 0,89; цистин 0.65; кальций 0,82; фосфор 0,45; натрий 0,08; калий 3,78; магний 0,28; .железо 0,07; сера 0,16; хлор 0,69; влага 5;04; неидентифицироеанные органические соединени  18,5, Питательна  ценность 1 кг кормодобавки-5 составл ет 0,79 корм, ед. Обменна  энерги  100 г кормодобавки-5 равна 199 кал.of a different color (CB - 94.96%) in the form of a powder. The obtained additive 50 has the following composition. %: crude protein 29.5; crude fat 2.1; cheese fiber 16.7; ash cheese 18.6; lysine 1.3; methionine 0.39; tryptophan 0.89; cystine 0.65; calcium 0.82; phosphorus 0.45; sodium 0.08; potassium 3.78; magnesium 0.28; iron 0.07; sulfur 0.16; chlorine 0.69; moisture 5; 04; unidentified organic compounds 18.5, Nutritional value of 1 kg of feed additive-5 is 0.79 feed, units The metabolic energy of 100 g of feed additive-5 is 199 cal.

Пример 6. 50 г биомассы (СВ - 25%, в 50 г биомассы 12,5 г) смешивают с 25 г трав ной муки (СВ - 92,5%, в 25 г трав ной муки 23,1.25 г) и 25 г хлопкового шрота (СВ - 91%. в 25 г хлопкового шрота 22,75 г) в соотношении 2:1:1, Смесь высушивают при 40°С, Получают 61 г продукта коричневого цвета (СВ - 95,7%) в виде порошка. Полученна  кормодобэвка-6 имеет следующий состав, %: сырой протеин 29,1; сырой жир 2,12; сыра  клетчатка 16,8; сыра  зола 18,7; лизин 1,32; метионин 0,32; триптофан 0,89; цистин 0,60; кальций 0,79; фосфор 0,44; натрий 0,07; калий 3,80; магний 0,29; железо 06; сера 0,31; хлор 0,72; влага 4,3; немден : фицировчнные органические соединени  19,37. Питательна  ценность 1 кг кормодобавки-б составл ет 0,8 корм. ед. Обменна  энерги  100 г кормодобавки-б равна 194 кал.Example 6. 50 g of biomass (CB - 25%, in 50 g of biomass 12.5 g) are mixed with 25 g of grass flour (CB - 92.5%, in 25 g of grass flour 23.1.25 g) and 25 g cottonseed meal (CB - 91%. in 25 g cottonseed meal 22.75 g) in a ratio of 2: 1: 1, The mixture is dried at 40 ° C, 61 g of a brown product are obtained (CB - 95.7%) in the form of a powder . The resulting food supplement 6 has the following composition,%: crude protein 29.1; crude fat 2.12; cheese fiber 16.8; ash cheese 18.7; lysine 1.32; methionine 0.32; tryptophan 0.89; cystine 0.60; calcium 0.79; phosphorus 0.44; sodium 0.07; potassium 3.80; magnesium 0.29; iron 06; sulfur 0.31; chlorine 0.72; moisture 4.3; Nemden: Founded organic compounds 19.37. The nutritional value of 1 kg of food supplement-b is 0.8 food. units The metabolic energy of 100 g of feed supplement-b is 194 cal.

Пример 7, 50 г биомассы (СВ - 25%, в 50 г биомассы 12,5 г) смешивают с 25 г трав ной муки (СВ - 92,5%, в 25 г трав ной муки 23,125 г) и 25 г м сокостной муки (СВ - 93,2%, в 25 г м сокостной муки 23,3 г) в соотношении 2:1:1. Смесь высушивают при 40°С. Получают 63 г продукта коричневого цвета (СВ - 93,54%) в виде порошка. Полученна  кормодобаека 7 имеет следующий состав %; сырой протеин 29,3; сырой жир 7,8; сыра  клетчатка 12,00; сыра  зола 21,7; лизин 1,36; метионин 0,32; триптофан 0,88; цистин 0,49; кальций 4,4; фосфор 2,08; натрий 0,61; калий 3,72; магний 0,17; железо 0,06; сера 0,13; хлор 0,7; влага 6,46, неиден- тифицировэнные органические соединени Example 7, 50 g of biomass (CB - 25%, in 50 g of biomass 12.5 g) are mixed with 25 g of grass flour (CB - 92.5%, in 25 g of grass flour 23.125 g) and 25 g m flour (CB - 93.2%, in 25 g m of juice flour 23.3 g) in a ratio of 2: 1: 1. The mixture is dried at 40 ° C. Obtain 63 g of a brown product (CB - 93.54%) in the form of a powder. The resulting feedstock 7 has the following composition%; crude protein 29.3; crude fat 7.8; fiber cheese 12.00; cheese ash 21.7; lysine 1.36; methionine 0.32; tryptophan 0.88; cystine 0.49; calcium 4.4; phosphorus 2.08; sodium 0.61; potassium 3.72; magnesium 0.17; iron 0.06; sulfur 0.13; chlorine 0.7; moisture 6.46, unidentified organic compounds

7,82. Питательна  ценность, 1 кг кормодо- бавки-7 составл ет 0,74 корм. ед. Обменна  энерги  100 г кормодобавки-7 равна 176 кал.7.82. Nutritional value, 1 kg of food supplement-7 is 0.74 food. units The metabolic energy of 100 g of feed-7 is equal to 176 cal.

П р и м е р 8. 40 г биомассы (СВ - 25%, в 40 г биомассы 10 г) смешивают с 10 г трав ной муки (СВ - 92,5%, в 10 г трав ной муки 9,25 г) и 10 г м сокостной муки (СВ - 93,2%, в 10 г м сокостной муки 9,32 г), иEXAMPLE 8. 40 g of biomass (CB - 25%, in 40 g of biomass 10 g) is mixed with 10 g of grass flour (CB - 92.5%, in 10 g of grass flour 9.25 g) and 10 g m of juice flour (CB - 93.2%, in 10 g m of juice flour 9.32 g), and

10 г подсолнечного шрота (СВ - 93%, в 10 г подсолнечного шрота 9,3 г), и 10 г хлопкового шрота (СВ - 91 %, в 10 г хлопкового шрота 9,1 г) в соотношении 4:1:1:1:1. Смесь высушивают при 40°С, Получают 50 г продукта светло-коричневого цвета (СВ - 93,94%) а виде порошка. Полученна  кормо- добавка-8 имеет следующий состав, %: сырой протеин 31,4; сырой жир 4,8; сыра  клетчатка 12,2; сыра  зола 20,1; лизин 1,38;10 g of sunflower meal (CB - 93%, in 10 g of sunflower meal 9.3 g), and 10 g of cotton cake (CB - 91%, in 10 g of cotton meal 9.1 g) in a ratio of 4: 1: 1: 1: 1. The mixture is dried at 40 ° C. Obtain 50 g of the product is a light brown color (CB - 93.94%) and in the form of a powder. The resulting feed additive-8 has the following composition,%: crude protein 31.4; crude fat 4.8; cheese fiber 12.2; ash cheese 20.1; lysine 1.38;

метионин 0,41; триптофан 0,9; цистин 0,81; кальций 2,8; фосфор 1,61; натрий 0,77; калий 3,73; магний 0,26; железо 0,04: сера 0,24; хлор 0,68; влага 6,06 неидентифицированные органические соединени  11,78. Питательна  ценность 1 кг кормодобавки-8 составл ет 0,8 корм. ед. Обменна  энерги  100 г кормодобавки-8 равна 203 кал.methionine 0.41; tryptophan 0.9; cystine 0.81; calcium 2.8; phosphorus 1.61; sodium 0.77; potassium 3.73; magnesium 0.26; iron 0.04: sulfur 0.24; chlorine 0.68; moisture 6.06 unidentified organic compounds 11.78. The nutritional value of 1 kg of feed additive-8 is 0.8 feed. units The metabolic energy of 100 g of feed additive-8 is 203 cal.

Claims (2)

1. Способ получени  кормовой добавки, предусматривающий смешивание биомассы с наполнителем, отличающийс  тем, что, с целью повышени  питательной ценности кормовой добавки, в качестве1. A method of producing a feed additive, comprising mixing biomass with a filler, characterized in that, in order to increase the nutritional value of the feed additive, as биомассы используют отходы производства лимонной кислоты - отработанную биомассу гриба, Aspergillus nlger, причем смешивают отходы и наполнитель в соотношении 1 : 2-3.biomass uses waste products from citric acid production - the spent biomass of the fungus, Aspergillus nlger, and waste and filler are mixed in a ratio of 1: 2-3. 2. Способ по.п. 1, отличающийс  тем, что в качестве наполнител  используют пшеничные отруби, или м сокостную муку, или трав ную муку, или смесь трав ной муки и хлопкового шрота, вз тых в соотношении2. The method of item p. 1, characterized in that wheat bran, or dairy flour, or grass meal, or a mixture of grass meal and cottonseed meal, taken in the ratio 1 : 1, или смесь трав ной муки и хлопкового шрота в соотношении 1 :1, или смесь трав ной муки, м сокостной муки, подсолнечного шрота и хлопкового шрота, вз тых в соотношении 1:1:1:1,1: 1, or a mixture of grass flour and cottonseed meal in a ratio of 1: 1, or a mixture of grass flour, mild flour, sunflower meal and cottonseed meal, taken in a ratio of 1: 1: 1: 1,