PT98974A - Processo de preparacao de derivados de acidos piridiltio ou piridiloxi-alcanoicos e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

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MEMÓRIA DESCRITIVA

Antecedentes do Invento Âmbito do Invento

Este invento refere à preparação de certos ácidos piridil--alcanóicos substituídos e seus derivados, que sã antagonistas do leucotrieno e são portanto úteis no tratamento de doenças provocadas ou envolvendo leucotrienos.

Pormenores dos Antecedentes do Invento A "Substância de Reacção Lenta de Anafilaxia" (SRSA) mostrou ser uma substância broncoconstritora altamente potente que é libertada principalmente por mastócitos e por basófilos quando há desafios antigénicos. A SRS-A tem sido proposta como mediadora principal na asma humana. A SRS-A, além dos seus efeitos pronunciados sobre o tecido pulmonar, produz também alterações de permeabilidade na pele e pode estar envolvida em reacções alérgicas agudas cutâneas. Tem-se também verificado que a SRS-A produz depressão da contracção ventricular e potência os efeitos cardiovasculares da histamina. A descoberta de leucotrienos que ocorrem naturalmente e a sua relação como a SRS-A veio reforçar o interesse na SRS-A e noutros metabolitos dos araquidonatos. As SRS-A derivadas de ratinho, ratazana, cobaia e do Homem foram todas caracterizadas como misturas de leucotrieno-C4 (LTC4), leucotrieno-D4 (LTD4) e leucotrieno-E4 (LTE4).

Os leucotrienos constituem um grupo de eicosanoides formados no metabolismo do ácido araquidónico, através da via da lipoxigenase. Estes derivados lipídicos vêm do LTA4 e são de dois tipos: (1) os que contêm uma cadeia lateral sulfido-peptídica (LTC4, LTD4 e LTE4) e (2) os que não são peptídicos (LTB4). Os leucotrienos compreendem um grupo de substâncias que ocorrem naturalmente e que têm a capacidade de contribuir significativamente para a patogénese de diversas desordens inflamatórias e isquémicas. Estudos intensivos recentes têm focado o papel patofisiológico dos leucotrienos.

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De acordo com o resumo de Left, A.M., Biochemical Pharmaco-locrv. 35. 2, 123-127 (1986) tanto os leucotrienos peptídicos como os não peptídicos exercem acções microcirculatórias, promovendo a passagem de fluidos através das membranas de capilares endoteli-ais, na maior parte dos tecidos vasculares, o LTB4 tem forte acção quimiotática e contribui para o recrutamento e aderência das células depuradoras móveis à membrana endotelial. Os LTC4, LTD4 e LTE4 estimulam diversos tipos de músculos. Os LTC4 e LTD4 são potentes broncoconstritores e estimuladores eficientes do músculo liso vascular. Verifica-se que este efeito vasoconstritor ocorre em vasculaturas pulmonares, coronárias, cerebrais, renais e mesentéricas.

Os leucotrienos têm sido implicados nalgumas doenças pulmonares. Sabe-se que os leucotrienos são potentes broncoconstritores no Homem. Verifica-se que os LTC4 e LTD4 são agonistas potentes e selectivos das vias aéreas periféricas, sendo mais activos do que a histamina. [Ver Drazen, J.M. et al., Proc. Nat·1. Acad. Sei. USA. 77, 7, 4354-4358 (1980)]. Os LTC4 e LTD4 mostraram aumentar a libertação de muco das vias aéreas humanas, in vitro. [Ver Marom, Z. et al. , Am. Rev. Respir. Pis. . 126, 449-451 (1982)]. Os antagonistas do leucotrieno do presente invento podem ser úteis no tratamento das asma brônquica alérgica ou não alérgica e da anafilaxia pulmonar. Têm sido identificados leucotrienos nas secreções nasais de pessoas alérgicas que sofreram desafio in vivo de antigénios específicos. A libertação de leucotrienos estava correlacionada com os sintomas e sinais alérgicos normais. [Ver Creticos, P.S. et al., New Enqland J. of Med.. 310f 25, 1626-1629 (1984)]. Isto sugere que a rinite alérgica é uma outra área de utilização dos antagonistas do leucotrieno.

Os leucotrienos têm também sido directa ou indirectamente implicados em várias doenças não pulmonares nos campos ocular, dermatológico, cardiovascular, renal, trauma, inflamatório, car-cinogénico e noutras áreas. 73 090 SB CASE 14418 -5-

Uma outra área de utilização dos antagonistas do leucotrieno é o tratamento de doenças cardiovasculares. Uma vez que os leucotrienos peptídicos são potentes vasoconstritores coronários, estão implicados em vários distúrbios cardíacos incluindo arritmias, bloqueios de condução e depressão cardíaca. Os leucotrienos sintéticos têm mostrado ser depressores poderosos do miocárdio, consistindo os seus efeitos num decréscimo da força contráctil e do fluxo coronário. Os efeitos cardíacos do LTC4 e LTD4 são antagonizados por um antagonista específico do leucotrieno, sugerindo a utilidade dos antagonistas do leucotrieno nas áreas da depressão miocárdica e da anafilaxia cardíaca. [Ver Burke, J.A., et al., J. Pharmacoloay and Experimental Theraoeutics. 221. 1, 235-241 (1982)].

Os antagonistas do leucotrieno podem também ser úteis na área da isquemia renal ou na insuficiência renal. Badr et al. mostraram que o LTC4 produz uma elevação significativa da pressão média arterial e reduções no débito cardíaco de saída -cardíaca e no fluxo sanguíneo renal, e que tais efeitos podiam ser abolidos por um antagonista específico do leucotrieno. [Ver Badr, K.R. et al., Circulation Research. 54 . 5, 492-499 (1984)]. Os leucotrienos mostraram também desempenhar um papel na insuficiência renal induzida por endotoxinas e os seus efeitos eram selectivamente antagonizados neste modelo de dano renal. [Ver Badr, K.F., et al., Kidnev International. 30. 474-480 (1986)]. O LTD4 mostrou produzir acções constritoras glomerulares locais que eram evitadas por tratamento com um antagonista de leucotrieno. [Ver Badr, K.F. et al., Kidnev International. 29., 1, 328 (1986)]. Mostrou-se que o LTC4 contraía as células mesangiais glomerulares da ratazana, em cultura, e que portanto tinham efeito intraglomerular que reduziam a área superficial de filtração. [Ver Dunn, M.J. et al., Kidnev International. 27, 1, 256 (1985)]. Deste modo outra área de utilização dos antagonistas de leucotrieno pode ser o tratamento da glomerulonefrite.

Os leucotrienos de cisteínilo mostraram passar pela circulação entero-hepática e estão portanto indicados na área de doenças inflamatórias do fígado. [Ver Denzlinger, C. et al., 73 090 SB CASE 14418 -6

Prostacrlandins Leukotrienes and Medicine. 21. 321-322 (1986)]. Os leucotrienos podem também ser mediadores importantes da inflamação em doenças inflamatórias do cólon. [Ver Peskar, B.M. et al., Aqents and Actions. 18, 381-383 (1986)]. Os antagonistas de leucotrieno podem portanto ser úteis no tratamento de doenças inflamatórias do fígado e intestinos.

Outras áreas onde os antagonistas do leucotrieno podem ser úteis, por os leucotrienos estarem indicados como mediadores, incluem a prevenção do parto prematuro [Ver Clayton, J.K. et al., Proceedinqs of the BPS. 573P, 17-19 Dec. 1984]; o tratamento de enxaquecas [Ver Gazzaniga, P.P. et al., Abstracts Int/1 Conf. on Prostaqlandins and Related Como.. 121, Florença, Itália (Junho de 1986)]? e o tratamento de cálculos biliares [Ver Doty, J.E. et al., Amer. J. of Suroerv. 145, 54-61 (1983) e Marom, Z. et al., Arner. Rev. Respir. Pis.. 126. 449-451 (1982).

Por antagonizarem os efeitos do LTC4, LTD4 e LTE4 ou outros mediadores farmacologicamente activos no órgão final p. ex. o músculo liso das vias aéreas, os compostos e as composições farmacêuticas do presente invento são valiosos no tratamento de doenças em pacientes, incluindo o Homem ou animais, onde os leucotrienos sejam um factor-chave.

Sumário do Invento

Este invento refere-se a compostos de fórmula (I):

Y

I onde nenhum dos dois substituintes do piridilo está substituído no azoto do piridilo, ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que X é 0 ou S(0)q onde q é 0, 1 ou 2, com a condição de ^ não ser alquiltio ou feniltioalquilo quando q for 1 ou 2; R-L é alquilo C8 a C13, alcoxilo C7 a C12/ alquiltio C7 a

73 090 SB CASE 14418 -7 C12, 1-alcinilo c10 a C12, 10-undeciniloxilo, 11-dodecinilo, fenil-(alquilo C4 a C10), fenil(alcoxilo C3 a Cg), feniltio(alquilo C3 a Cg), fenil(alquiltio C3 a Cg) com cada fenilo opcionalmente monossubstituído com bromo, cloro, trifluorometilo, alcoxilo C^ a C4, metiltio ou trifluorometiltio, furil(alquilo C4 a C10), trifluorometil-alquilo C7 a C12 ou ciclo-hexil-alquilo C4 a ); Y é R2, CH(R3)(CH2)mR2/ CH(R3)-tetrazol-5-ilo ou tetrazol-5- -ilo; R2 é -C0R4 onde R4 é -OH, -0E onde E é um catião farmaceuti-camente aceitável ou um grupo formador de éster farmaceuticamente aceitável, -CN, -S03H, -S02NH2, -NHS02R6, -CH(NH2)C0R4 ou -CONHCH2COR4, ou R2 é -C0N(R5)2 onde R5 é H, alquilo C± a Cg, fenil(alquilo Cχ a Cg), ou os dois grupos R5 estão combinados formando um grupo cíclico com 3 a 5 carbonos; R3 é hidrogénio, metilo, alcoxilo ^ a C4, fluoro ou hidro- xilo;

Rg é alquilo em C^ a C10, fenilo ou fenilo substituído; m é 0, 1 ou 2; R é -(CH2)nD, -(CH2)nArD, onde n é 0-6, Ar é fenilo ou fenilo substituído, tienilo, piridilo, imidazolilo, tetrazol-5-ilo ou tiazolilo e D é -(0Η2)^2 onde 1 é 10-3 ou tetrazol-5-ilo;

Este invento descreve também a preparação de uma composição farmacêutica que compreende um composto de fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável ou um seu éster, e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitáveis.

Este invento descreve também a preparação de composições farmacêuticas para inibirem a anafilaxia respiratória induzida por antigénios, que compreendem uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I) sozinho ou em combinação com um excipien-te farmaceuticamente aceitável; e pode também estar presente nesta composição um bloqueador %.

Um processo para tratar uma doença em que os leucotrienos sejam um factor, processo que compreende administrar, a um paciente carenciado, uma quantidade eficaz de um composto da

73 090 SB CASE 14418 -8- reivindicação 1, sozinho ou em combinação com um excipiente far-maceuticamente aceitável.

Descrição Detalhada do Invento

As descrições e definições seguintes são usadas para estabelecer e esclarecer este invento.

Os ésteres farmaceuticamente aceitáveis podem ser preparados a partir de compostos que tenham uma função ácido carboxílico. Estes ésteres, ou diésteres, conforme o caso, serão qualquer éster que, como os sais farmaceuticamente aceitáveis produzam um éster que retém a actividade do composto progenitor e que não confira ao ácido progenitor quaisquer efeitos farmacológicos inconvenientes inaceitáveis ou efeitos tóxicos, no contexto do seu uso e aplicação pretendidos. Ainda que se julgue que possa ser usado qualquer éster de ácido carboxílico, prefere-se utilizar certos ésteres derivados dos seguintes radicais: alquilo a Cg, cicloalquilo, arilo, arilalquilo, alquilarilo, alquilarilalquilo, aminoalquilo, indanilo, pivaloiloximetilo, acetoximetilo, propioniloximetilo, gliciloximetilo, fenilgliciloximetilo ou tienilgliciloximetilo.

Os compostos do presente invento, dependendo dos seus componentes atómicos, são capazes de formar sais farmaceuticamente aceitáveis com ácidos e bases de acordo com os procedimentos já bem conhecidos na arte. Esses sais são os que mostram actividade semelhante à do composto progenitor e que não revelam actividade inconveniente ou prejudicial. São ácidos aceitáveis os ácidos inorgânicos e orgânicos como os ácidos clorídrico, sulfúrico, metano-sulfónico, benzeno-sulfónico, p-tolueno-sulfónico e ácido acético. As bases incluem as bases orgânicas e inorgânicas, como a amoníaco, arginina, aminas orgânicas, bases de metais alcalinos e bases de metais alcalino-terrosos. Os sais de piperazina e de etilenodiamina são particularmente úteis neste invento. São também preferidos os sais de dipotássio, dissódio, magnésio, zinco e cálcio dos compostos diácidos de fórmula (I). Os catiões farmaceuticamente aceitáveis são os mesmos acima citados para os sais

73 090 SB CASE 14418 -9- farmaceuticamente aceitáveis derivados de bases.

Uma classe sub-genérica preferida de compostos destes invento é a daqueles em que dois substituintes do piridilo são intercambiáveis nas posições 2 e 3, e onde X é S ou 0. Preferem--se os compostos em que X é S, Y é -]¾ ou CH(R3) (CH2)mR2 onde R2 é -C00H, R3 é H ou -OH e m é O e R é -(CH2)nD onde n é 1, 2 ou 3, ou R é -(CH2)nArD onde n é 0 ou 1 e Ar é fenilo ou tetrazol-5--ilo. Para cada um destes sub-grupos, os grupos R^ preferidos são alquiltio C7 a C12/ alquilo Cg a C13, fenil(alquiltio C3 a C9) e fenil(alquil C4 a C10).

Os compostos mais preferidos são exemplificados pelos seguintes compostos: ácido 3-(2-carboxifeniltio)-3-[3-(2-(8-feniloctil))piridil]propi-ónico; ácido 3-(2-carboxifeniltio)-3-[3-(2-(8-feniloctil))piridil]-2--hidroxipropiónico 7 ácido 4-(carboximetiltio)—4—[3—(2—(8-feniloctil))piridil]butíri-co; ácido 3-[(tetrazol-5-il)metiltio]-3-[3-(2-(8-feniloctil))piri-dil]propiónico ? ácido 2-hidroxi-3-[(tetrazol-5-il)metiltio]-3-[3-(2-(8-feniloctil) )piridil]propiónico; ácido 3-(2-carboxifeniltio)-3-(3-(2-(8-feniloctil))piridil]propiónico ; ácido 3-(carboximetiltio)-3-[3-(2-(8-feniltiooctiltio))piridil]-propiónico; ácido 3-(4-carboxi-2-metoxifenilmetiltio)-3-[3-(2-(6-feniloxi-he-xiloxi))piridil]propiónico; ácido 3-(2-carboxietiltio)-3-[3-(2-(7-fenil-heptiltio))piridil]-propiónico; ácido 3-(2-carboxietiltio)—3—[3—(2—(7-fenil-heptiloxi))piridil]--2-hidroxipropiónico; ácido 3-(2-carboxietiltio)-3-(3-(8,8,8-trifluorooctil))piridil]-propiónico 7 ácido 2-hidroxi-3-(5-tetrazolilmetiltio)-3-[3-(2-(8-feniloctil))-piridil]propiónico ? 73 090 SB CASE 14418 -10- ácido 3-(5-tetrazolilmetiltio)-3-[3-(2-(8-feniloctil))piridil]-propiónico; ácido 2-hidroxi-3-(2-carboxietiltio)-3-[3-(2-(8-feniloctil))piridil ]propiónico; ácido 2-liidroxi-3-( 4-carboxif eniltio)-3-[3-(2-(8-feniloctil))pi-ridil]propiónico; ácido 2-hidroxi-3-([4-carboxi-2-fluorobenzi1tio)-3-[3-(2-(8-feniloctil) )piridil]propiónico; ácido 3-(3-carboximetiltio)-3-[3-(2-(8-feniloctil))piridil]-2-hi-droxipropiónico; ácido 3-(5-tetrazolilmetiltio)-3-[3-(2-(8,8,8-trifluorooctil)piridil ]-2-metoxipropiónico;

J ácido 2-hidroxi-3-(4-carboxi-2-metoxifenilmeti1tio)-3-[3-(2-(l0, 10,10-trifluorodeciloxi))piridil]propiónico; ácido 2-hidroxi-3-(4-carboxifenilmetiltio)-3-[3-(2-(4,4,4-triflu-orobutiltio))piridil]propiónico; ácido 2-hidroxi-3-(2-fluoro-4-carboxifenilmetiltio)—3—[3—(2—(8— -feniloctil))fenil]propiónico; ácido 2-metoxi-3-(4-carboxifeniltio)-3-[3-(2-(6-feniltio-hexil-tio))piridil]propiónico; ácido 2-hidroxi-3-(4-hidroxifeniltio)-3-[3-(2-(6-fenil-hexil-oxi))piridil]propiónico; ácido 2-metoxi-3-(4-carboxifenilmetiltio)—3—[3—(2-(8-feniloctil) )piridil]propiónico;

ácido 2-metil-3-(carboximetiltio)-3-[3-(2-(7-feniloxi-heptiloxi)-piridil]propiónico; ácido 2-(2-carboxifeniltio)-2-[3-(2-(8-feniloctil))piridil]acético; ácido 2-(carboximetiltio)-2-[3-(2-(8-feniloctil))piridil]acético; ácido 2-(3-carboxifenilmetiltio)-2-[3-(2-(7-fenil-heptiltio))piridil ]acético; ácido 2-(carboximetiltio)-2-[3-(2-(7-feniltio-heptiltio))piri-dil]acético; ácido 2-(carboximetiltio)-3-[3-(2-(6-fenil-hexiloxi)Jpiridil]-acético; ácido 2-(carboximetiltio)-2-[3-(2-(6-feniloxi-hexiloxi))piridil]-acético e ácido 2-(2-(tetrazol-5-il)etiltio)-2-[3-(2-(8-feniloctil))piri- 73 090 SB CASE 14418 -11- dil]acético.

Adicionalmente os análogos oxi de cada um destes tioéteres constituem uma concretização preferida deste invento. 0 azoto do anel piridilo pode ser oxidado a óxido nitroso por meio de um oxidante apropriado. Estes óxidos estarão limitados aos compostos de fórmula (I) em que D é O ou S(0)2·

Alguns dos compostos de fórmula (I) contêm um ou dois centros assimétricos. Isto leva à possibilidade de haver 2 ou 4 estereoisómeros por cada um destes compostos. O presente invento inclui todos estes estereoisómeros, racematos ou suas misturas.

Os compostos de fórmula (I) onde Y é COR2, em que R2 é -OH ou um éster, são convenientemente preparados a partir de um aldeído precursor de fórmula (II)

R (II) onde R-l é descrito acima. Um composto de fórmula (II) é tratado com cianeto de trimetilsililo na presença de iodeto de zinco, a baixas temperaturas, num solvente inerte, para formar a ciano-hi-drina protegida por trimetilsililo. O tratamento deste produto com cloreto de hidrogénio gasoso em metanol, dá o derivado 2-hidroxiacetato de metilo que é convertido no 2-cloroacetato com cloreto de tionilo. Este valioso intermediário vai depois reagir com um tiol substituído escolhido para dar um composto de fórmula (I). 0 éster pode ser hidrolisado obtendo-se o sal ou o ácido livre.

Os compostos de fórmula (I) onde Y é CH2COR2 ou CH(R3)COR4 onde R4 é OH ou um éster, R3 é H, metilo ou alcoxilo, são preparados fazendo reagir o aldeído apropriado de fórmula (II) e um bromoacetato esterifiçado, convenientemente o bromoacetato de 73 090 SB CASE 14418 -12-

t-butilo, com uma mistura de cloreto de dietilalumínio, zinco em pó e uma quantidade catalítica de brometo cuproso, a baixas temperaturas, num solvente inerte, para dar o derivado 3-hidroxipropionato esterifiçado que reage directamente com um tiol substituído, em ácido trifluoroacético. Em alternativa pode-se usar uma mistura de borato de trimetilo e zinco, em tetra-hidrofurano, para preparar o derivado 3-hidroxipropionato. Em alternativa, pode-se fazer reagir um aldeído de fórmula (II), a baixa temperatura, com o sal α-lítio preparado a partir de um ácido α-haloacético esterifiçado, convenientemente o t-butilacetato, num solvente inerte, obtendo-se o derivado 3-hidroxipropionato esterifiçado. Utilizando um 2-bromopropionato esterifiçado na reacção mencionada acima como um aldeído (II), obtêm-se os compostos de fórmula (I) onde Y é CH(CH3)COR4 onde R4 é OH ou um éster.

Em alternativa, os compostos de fórmula (I) onde Y é CH(R3)COR4 onde R4 é OH ou um éster e R3 é H, metilo, alcoxilo ou fluoro, são preparados a partir de um precursor propenoato, da seguinte fórmula estrutural (III):

R (III) onde R*l é descrito acima, R4 é um grupo protector de alquil--éster, p. ex. t-butilo, e Ri:l é H, metilo, alcoxilo ou fluoro. Faz-se reagir um composto de fórmula (III) com uma mistura de alcóxido de metal alcalino, p. ex. metóxido de sódio, e de tiol substituído ou álcool, obtendo-se um éster de fórmula (I) que pode ser saponifiçado obtendo-se um sal ou o ácido.

Os precursores propenoato de fórmula (III) são preparados a partir dos aldeídos correspondentes de fórmula (II) pelos processos gerais como a reacção com um (trifenilfosforanilideno)acetato de alquilo ou por conversão do aldeído num derivado 3-hidroxipropionato, como acima se descreve, seguida de uma

73 090 SB CASE 14418 -13- reacção de eliminação para formar a ligação dupla. Adicionalmente, obtém-se o precursor propenoato a partir de um derivado 3-metano-sulfoniloxipropionato por tratamento com trietilamina.

Os compostos de fórmula (I) onde Y é CH(OH)(CH2)nCOR4 onde R4 é OH ou um éster, são preparados a partir de um precursor epóxido da seguinte fórmula estrutural (IV):

R (IV) onde R-l e n são descritos como acima e R4 é alcoxilo inferior. Paz-se reagir um composto de fórmula (IV), num solvente prótico, com trietilamina e um tiol substituído ou álcool, escolhidos para darem o diéster de fórmula (I). Este diéster pode ser hidrolisado no sal ou no ácido livre por meios convencionais, p. ex. por hidrólise básica.

Os precursores epóxido de fórmula (IV) onde n é 2, são preparados por reacção de um derivado de Grignard de um composto de bromopiridina de fórmula (IX):

com acroleína, obtendo-se o correspondente derivado enol que é tratado com um trialquilortoacetato, seguido por epoxidação usando ácido m-cloroperbenzóico.

Os precursores epóxido de fórmula (IV) onde n é 0, são preparados por reacção de um aldeído de fórmula (II) com um cloroacetato de alquilo inferior e um alcóxido de metal alcalino, como o metóxido de sódio. 73 090 SB CASE 14418 14-

Os compostos de fórmula (I) onde Y é CH(OH)CH2COOH podem também ser preparados a partir de um éster de fórmula (V) onde R é -(CH2)2COR4 e Y é CH(OH)CH2COR4:

R ç ✓ (CH2)nC02R4 \^CH2C02R4 (V) onde R4 é alquilo inferior. Faz-se reagir um composto de fórmula (V) com hidreto de sódio, num solvente inerte, seguindo-se a reacção com um brometo de benzilo substituído obtendo-se um produto de fórmula (I).

Os compostos de fórmula (I) onde Y é -(CH2)3C0R4 são preparados a partir do precursor lactona de fórmula (VI) 0

onde R-l é descrito como acima. Faz-se reagir um composto de fórmula (VI) com uma mistura de iodeto de zinco e um tiol substituído, num solvente inerte, ou com um tiol substituído em ácido trifluoroacético, obtendo-se, após remoção de qualquer grupo protector éster, um composto de fórmula (I).

Os precursores tetra-hidro-4H-piran-2-ona de fórmula (VI) são preparados por reacção do derivado de Grignard do composto de bromopiridina de fórmula (IV) com cloro-titânio-tri-isopropóxido, seguindo-se a reacção com éster 5-oxovalerato-alquílico.

Os aldeídos de fórmula (II) são já conhecidos ou facilmente preparados utilizando os procedimentos gerais abaixo descritos.

Os precursores aldeído dos compostos de fórmula (I) onde R^

73 090 SB CASE 14418 -15- é p. ex. um radical alquilo contendo 8-13 carbonos, são psreparéT-dos a partir de etilnicotinato-2-carboxaldeído por reacção com o brometo de alquiltrifenilfosfónio apropriado, seguida de redução catalítica. O éster reage depois com hidreto de alumínio e lítio, em tetra-hidrofurano, seguindo-se a reacção com dióxido de manganês em cloreto de metileno para se obter a 2-alquil-3-formilpiridina correspondente. 0 precursor etilnicotinato-2-carboxaldeído é preparado a partir do etil-2-metilnicotinato, disponível no comércio, por reacção com dióxido de selénio ou anidrido benzeno-selénico.

Os precursores aldeído contendo alquiltio, dos compostos de fórmula (I), são preparados a partir da 2-mercapto-3-carboxipiri-dina. Paz-se reagir o ácido com um halogeneto de alquilo num solvente aprótico apropriado, como a dimetilformamida, na presença de carbonato de potássio, seguindo-se a adição de diazometano para dar uma 2-alquiltio-3-carbometoxipiridina. 0 éster reage então com hidreto de alumínio e lítio em tetra-hidrofurano, seguindo-se a reacção com cloreto de oxalilo em dimetilsulfóxido e trietila-mina èm cloreto de metileno para dar a correspondente 2-alquiltio-3-formilpiridina.

Os precursores heteroarilmercaptano necessários para preparar os compostos de fórmula (I) são compostos já conhecidos e são convenientemente preparados utilizando reacções químicas clássicas. Os derivados mercapto destes precursores são preparados segundo métodos já conhecidos. Estes mercaptanos reagem como acima se descreveu para dar os compostos de fórmula (I).

Os compostos de fórmula (I) contendo uma função éster na posição Y, são preparados a partir dos correspondentes compostos diácidos com um grupo ácido carboxílico nas posições Y e R da fórmula (I), por reacção do diácido com um álcool apropriado segundo processos já conhecidos na arte. Os compostos de fórmula (I) contendo uma função éster na posição R, são preparados a partir dos correspondentes compostos diácidos acima descritos, por reacção do diácido com um álcool na presença de um catalisador 73 090

SB CASE 14418 16- ácido segundo processos já conhecidos na arte. ^4* 4Γ

Modificações apropriadas dos processos gerais apresentados e ainda como se descreve nos Exemplos expostos a seguir, fornecem os vários compostos definidos pela fórmula (I).

Um processo de preparação dos compostos de fórmula (I) de quiralidade conhecida, compreende a reacção de um diéster com uma base forte para produzir um tiol que depois reage com um agente de alquilação ou com um aceitador de Michael, obtendo-se o composto pretendido.

Um diéster apropriado, p. ex. um que tenha um grupo -OH no substituinte Y, é tratado com uma base forte adequada como o metóxido de sódio, hidreto de sódio, amida de sódio ou diisopro-pilamida de lítio. A reacção realiza-se num solvente aprótico como o tetra-hidrofurano, dimetilsulfóxido ou N,N-dimetilfor-mamida, a pressão e temperatura ambientes. Produz-se um composto intermédio, de quiralidade conhecida.

Este tiol vai então reagir com um agente de alquilação ou aceitador de Michael, obtendo-se um composto de fórmula (I). São agentes de alquilação adequados os halogenetos de alquilo, como o brometo de alquilo ou o iodeto de alquilo. Os halogenetos de ben-zilo são especialmente adequados para preparar compostos de Fórmula (I). A reacção realiza-se num solvente aprótico a pressão e temperatura ambientes. São aceitadores de Michael adequados os compostos que sofrem adição nucleofílica. São exemplos os compostos que contêm grupos carbonilo, carboalcoxilo ou ciano, conjugados com uma dupla ou tripla ligação. Os compostos de carbonilo ou alcinos representados pelas seguintes fórmulas estruturais são especialmente adequados ^13. CO2R3

17- 73 090 SB CASE 14418

Aqui R13, R14 e Rlg são, independentemente uns dos outros, escolhidos entre hidrogénio ou alquilo em Cj^-Cg; e R15 e R17 são, independentemente um do outro, escolhidos entre H, arilo ou alquilo em C-L-Cg. A reacção realiza-se num solvente aprótico à pressão e temperatura ambientes. A actividade antagonista de leucotrieno dos compostos deste invento mede-se pela capacidade dos compostos inibirem a contracção, induzida pelo leucotrieno, dos tecidos da traqueia da cobaia, in vitro. Utilizou-se a seguinte metodologia:

In vitro: tiras em espiral da traqueia da cobaia (macho adulto, albino, estirpe Hartley) de dimensões aproximadas de 2 a 3 mm de largura da secção recta e com 3,5 cm de comprimento, foram banhadas em tampão modificado de Krebs em 10 ml de banho de tecidos, encamisado e continuamente ventilado com 95% 02/5% C02. Os tecidos foram ligados por sutura de seda a transductores de força-deslocamento para registo da tensão isométrica. Equilibraram-se os tecidos durante 1 h, pré-trataram-se durante 15 min com ácido meclofenâmico (1 mM) para remover as respostas intrínsecas à prostaglandina e depois pré-tataram-se por mais 30 minutos com o composto de ensaio ou com o veiculo de controlo. Uma curva de concentrações cumulativas-resposta, ao LTD4, em tecidos em triplicado, foi construída por aumentos sucessivos da concentração do banho de LTD4. Para minimizar a variabilidade inter-tecidos, as contracções originadas pelo LTD4 foram normalizadas como percentagem da resposta máxima obtida com um agonista de referência, o carbacol (10 mM). Cálculos: as médias das curvas à concentração de LTD4-resposta, em triplicado, tanto na presença como na ausência do composto de ensaio, foram registadas em papel de gráfico logarítmico. A concentração de LTD4 necessária para originar 30% da contracção originada pelo carbacol foi medida e definida como EC3q. 0 valor -log KB do composto de ensaio foi determinado pelas seguintes equações: 1. EC30 (em presença do composto de ensaio)/EC3q (em presença do veículo de controlo) iguala a razão de doses que iguala X, e 2. KB = concentração do composto de ensaio/(X-l).

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Os compostos preparados por este invento possuem actividade antagonista contra leucotrienos, principalmente o leucotrieno D4. A actividade antagonista dos compostos representativos deste invento está listada na Tabela I. Os valores -log KB foram calculados pelo protocolo anterior. Quando os compostos foram ensaiados mais de uma vez, os valores -log KB representam os valores médios.

As composições farmacêuticas preparadas pelo presente invento compreendem um veículo ou diluente farmacêuticos e uma quantidade de um composto de fórmula (I) ou de um seu sal farmaceutica-mente aceitável, por exemplo um seu sal de metal alcalino, suficiente para produzir inibição dos efeitos dos leucotrienos, tais como sintomas de asma e de outras doenças da hipersensibilidade.

Quando se utiliza a composição farmacêutica sob a forma de uma solução ou suspensão, são exemplos de veículos ou diluentes farmacêuticos apropriados: para sistemas aquosos, a água? para sistemas não aquosos, o etanol, glicerina, propilenoglicol, óleo de milho, óleo de semente de algodão, óleo de amendoim, óleo de sésamo, parafinas líquidas, e suas misturas com água; para sistemas sólidos, a lactose, caolino e manitol; e para sistemas de aerossol, o diclorodifluorometano, clorotrifluoroetano e anidrido carbónico comprimido. Além do veículo ou diluente farmacêuticos, as composições podem incluir outros ingredientes como estabilizadores, antioxidantes, conservantes, lubrificantes, agentes de suspensão, modificadores da viscosidade e semelhantes, com a condição dos ingredientes adicionais não apresentarem efeitos prejudiciais na acção terapêutica das composições. A natureza da composição e do veículo ou diluente farmacêutico depende evidentemente da via de administração pretendida, isto é, oral, parentérica, tópica ou por inalação.

Em geral, especialmente no tratamento profilático da asma, as composições encontrar-se-ão sob uma forma adequada à administração por inalação. Assim, as composições compreenderão

73 090 SB CASE 14418 -19- administração por meio de um nebulizador convencional nativa, as composições podem compreender uma suspensão ou solução do ingrediente activo num propulsor liquefeito convencional ou num gás comprimido para ser administrado a partir de um recipiente pressurizado de aerossol. As composições podem ainda compreender o ingrediente activo sólido diluído com um diluente sólido para administração por um dispositivo de inalação de pó. Nas referidas composições, a quantidade de veículo ou diluente é variável mas, de preferência, constituirá a proporção maioritária de uma suspensão ou solução do ingrediente activo. Quando o diluente for sólido, poderá estar presente numa quantidade menor, igual ou superior á do ingrediente activo sólido.

Para administração parentérica, a composição farmacêutica poderá estar sob a forma de solução estéril injectável ou de uma suspensão líquida aquosa ou não aquosa.

Para administração tópica, a composição farmacêutica poderá estar sob a forma de creme ou de unguento.

Usualmente, o composto de fórmula I é administrado a um paciente animal, numa composição que compreende uma quantidade não tóxica do composto, suficiente para produzir a inibição dos sintomas de uma resposta alérgica. Quando utilizada desta maneira, a dosagem da composição é escolhida na gama de 1 pg até 700 mg de ingrediente activo por cada administração. Ê conveniente que sejam administradas doses iguais, 1 a 4 vezes por dia, sendo o regime de dosagem diária escolhido entre cerca de 1 μg até cerca de 2800 mg por dia.

As preparações farmacêuticas assim descritas, são preparadas seguindo as técnicas convencionais do químico farmacêutico, de modo apropriado ao produto final pretendido.

Incluído no âmbito desta descrição, encontra-se o processo de inibição dos sintomas de uma resposta alérgica resultante da libertação de um mediador, que compreende administrar ao paciente animal uma quantidade terapeuticamente eficaz, para produzir a 73 090 SB CASE 14418 -20-

sob a forma de um antagonista, em quantidades suficientes para inibir a anafilaxia respiratória induzida pelo antigénio. Para este fim, utiliza-se com vantagem a dosagem acima referida do composto de fórmula I e a dosagem eficaz já conhecida para o antagonista do receptor de histamina H-l· Os métodos de administração acima descritos para um único ingrediente activo podem ser analogamente aplicados para a combinação com um antagonista de receptor de histamina .

Os seguintes exemplos ilustram a preparação dos compostos deste invento e a sua incorporação em composições farmacêuticas, e tal não deve ser considerado como uma limitação do invento definido nas reivindicações em anexo. Todos os exemplos indicam temperaturas em graus centígrados. EXEMPLO 1 ácido 2-hidroxi-3-(2-carboxietiltio)-3-í2-r3-(7-fenil-heptil-tio^Ipiridil^prooiónico, sal dipotássico 1 fa^ 3-(7-fenil-heotiltio}-2-(carbometoxiloiridina

Dissolveu-se 2-carboxi-3-mercaptopiridina (4,5 g; 0,029M) em 15 ml de dimetilformamida seca e aqueceu-se até 80°C. Juntou-se K2C03 (5/6 9' 0,041M) cautelosamente, em 3 porções, para evitar espuma intensa. Agitou-se a mistura reagente durante 5 min. a 90*C e juntou-se gota a gota 7-fenil-l-bromo-heptano (7,7 g; 0,32M). Depois de agitar a 100-110°C durante 3 1/2 h, arrefeceu-se a mistura até à temperatura ambiente e agitou-se durante a noite.

Verteu-se depois a mistura reagente numa mistura agitada de água e acetato de etilo, e ajustou-se o pH a 2,0 com HC1 3N. Separou-se a camada orgânica e a parte aquosa foi extractada duas vezes mais com acetato de etilo. Os extractos juntos foram lavados duas vezes com água e secos sobre MgS04. Filtrou-se a mistura e concentrou-se até um volume de 100 ml. Juntou-se esta solução, gota a gota, a 0°C, a uma solução etérea de diazometano (preparada do modo habitual a partir de l-metil-3-ni-tro-l-nitrosoguanidina (6,0 g? 0,04M), KOH (6,5 g; 0,124M) e

73 090 SB CASE 14418 tro-l-nitrosoguanidina (6,0 g; 0,04η), KOH (6,5 g; 0,124M) e Et20/H20, 120/30 ml). Juntaram-se 15 ml de metanol para facilitar a solubilização do ácido piridinacarboxílico. Depois de agitar durante 16 h à temperatura ambiente, a solução vermelho escuro foi evaporada até se obter um óleo e purificada por cromatografia "flash" (Baker Si02, 20% de acetato de etilo/hexano), obtendo-se o composto do título. lfb) 2-hidroximetil-3-f7-fenil-heptiltio)piridina O composto do Exemplo l(a) (7,11 g; 0,22M) foi dissolvido em 125 ml de tetra-hidrofurano seco, sob atmosfera de árgon e arrefecido a 0°C, Juntou-se gota a gota hidreto de diisobutilalumínio (33,6 ml; 1,5 m em tolueno, 0,05M), agitou-se a solução e deixou--se aquecer à temperatura ambiente, durante a noite. A mistura reagente foi depois arrefecida em banho de gelo, parou-se a reacção pela adição de NH4C1 aquoso a 10%; deixou-se aquecer até temperatura ambiente e aqueceu-se durante 10 min a 35 °C.

Extractou-se a mistura três vezes com acetato de etilo. Os extractos do acetato de etilo juntos foram lavados uma vez com H20, uma vez com NaHC03 a 5% e uma vez com salmoura, e secos sobre MgS04. Por filtração e evaporação do solvente obteve-se o composto do título. A cromatografia em camada fina (Si02, 40% de acetato de etilo/hexano) indicou haver essencialmente uma única substância. l(cl 2-formil-3-(7-fenil-heptiltio)piridina A uma solução de DMSO (228 ml; 0,035M) em 100 ml de cloreto de metileno seco, sob atmosfera de árgon a -78°C, juntou-se cloreto de oxalilo puro (1,54 ml; 0,017M). Agitou-se esta solução durante 10 min a -78°, aqueceu-se rapidamente até 60°, rearrefe-ceu-se até -78° e juntou-se o composto do exemplo l(b) (4,85 g; 0,0158M) em 15 ml de cloreto de metileno. Agitou-se a mistura reagente a -78° durante 20 min, depois a -60° durante 5 min e rear-refeceu-se a -78°. Dissolveu-se trietilamina (11 ml; 0,079M) em 15 ml de cloreto de metileno ao longo de 2 min e retirou-se o banho de arrefecimento. Depois da mistura reagente ter aquecido até temperatura ambiente, juntaram-se 100 ml de solução a 10% de cio-

73 090 SB CASE 14418 -22- reto de amónio. Separou-se a camada de cloreto de metileno e lavou-se uma vez com cloreto de amónio a 10%, uma vez com água, uma vez com bicarbonato de sódio a 5%, uma vez com salmoura, e secou--se sobre MgS04. Por filtração e evaporação obteve-se um óleo vermelho que foi ainda purificado por cromatografia "flash" (Baker Si02, 28% acetato de etilo/hexano) obtendo-se o composto do título. l(d) 2.3-epoxi-3-(2-r3-(7-fenil-heptiltioΪloiridil^propanoato de metilo

Dissolveu-se o composto do exemplo l(c) (2,63 g; 8,4 mM) em 25 ml de cloreto de metileno seco e juntou-se cloroacetato de me-tilo (1,04 ml; 11,76 mM). Arrefeceu-se a solução a -15® (banho de gelo/metanol) sob atmosfera de árgon e juntou-se gota a gota solução de metóxido de sódio (2,27 ml; 25% em metanol). Agitou-se a mistura reagente a -15° durante 5 min e deixou-se aquecer até à temperatura ambiente. O NaCl precipitou da solução à medida que a mistura era aquecida. Depois de agitar à temperatura ambiente durante 1 1/2 h, parou-se a reacção pela adição de solução tampão padrão de pH 7,0 (Thomas Scientific). Evaporou-se o cloreto de metileno e extractou-se a solução aquosa, turva, três vezes com acetato de etilo. Lavou-se a solução de acetato de etilo uma vez com água, uma vez com NaHC03 a 5%, aquoso, uma vez com salmoura e secou-se sobre MgS04. Por filtração e evaporação da solução de acetato de etilo e por cromatografia "flash" (Baker Si02/ 20% de acetato de etilo/hexano) do óleo resultante, obteve-se o composto do título. lfe) 2-hidroxi-3-f2-rcarbometoxi1etiltio)-3-(2-r3-(7-fenil-hep-tiltio)loiridil^oropanoato de metilo 0 composto do exemplo l(d) (2,1 g; 5,45 mM) foi dissolvido em 2 ml de metanol e agitado sob atmosfera de árgon. Juntou-se uma solução de trietilamina (3,0 ml; 21,82 mM) e 3--mercaptopropionato (1,21 ml; 10,91 mM) em 3 ml de metanol. Depois de agitar durante 16 h à temperatura ambiente, o metanol e a trietilamina foram evaporados e o óleo residual foi dissolvido em acetato de etilo. Lavou-se esta solução uma vez com água, uma vez com NaHC03 a 5%, uma vez com salmoura e secou-se sobre MgS04. 73 090

SB CASE 14418 -23- A cromatografia em camada fina (Si02, 35% a etilo/hexano) e a RMN indicaram uma mistura de regioisómeros resultantes da abertura do epóxido pelo tiol nas duas posições 2 e 3. A RMN indicou aproximadamente 55% do α-hidroxi-éster e 45% de álcool benzílico.

Filtrando e evaporando o acetato de etilo, obteve-se um óleo amarelo. Dissolveu-se este óleo em 9 ml de metanol e juntou-se gota a gota 1,25 ml de solução a 25% de metóxido de sódio (em metanol). Depois de agitar 1 1/2 h, a cromatografia em camada fina indicou que a maior parte do regioisómero indesejado tinha sofrido condensação retro-aldol. Parou-se a reacção pela adição de 5 ml de solução aquosa a 5% de cloreto de amónio. Diluiu-se a mistura com água e extractou-se três vezes com acetato de etilo. Os extractos de acetato de etilo juntos foram lavados uma vez com água, uma vez com salmoura e secos sobre MgS04. Por filtração e evaporação da solução de acetato de etilo, obteve-se um óleo que foi ainda purificado por cromatografia "flash" (Baker Sio2, 20% cetato de etilo/hexano), obtendo-se o composto do título. lff) ácido 2-hidroxi-3-(2-carboxietiltio)-3-f2-Γ3-(7-fenil-hep-tiltio)1piridil)prooiónico, sal dipotássico

Dissolveu-se o composto do exemplo l(e) (0,96 g; 1,9 mM) em 15 ml de metanol e agitou-se em atmosfera de árgon. Juntou-se, gota a gota, KOH (0,375 g; 5,7 mM) em 5 ml de água. Depois de agitar durante 2 h, diluiu-se a mistura reagente com água e lavou-se a solução duas vezes com acetato de etilo. A parte aquosa foi depois acamada com acetato de etilo e acidificada com HC1 3N até pH 2,0. Separou-se a camada orgânica e extractou-se a camada aquosa uma vez com acetato de etilo. Os extractos orgânicos ácidos foram juntos e lavados uma vez com água, uma vez com salmoura e secou-se sobre MgS04. Por filtração e evaporação do solvente, obteve-se um óleo amarelo. Dissolveu-se o óleo em alguns ml de água com KHC03 (1,52 g; 15,2 mM) e submeteu-se a cromatografia "flash" (Baker RP-18, eluíu-se usando um gradiente em degrau: 100% H20, 200 ml; 40% Me0H/H20, 200 ml; 50% MeOH/H20, 100 ml? 60% Me0H/H20, 100 ml). 0 material pretendido, eluído nas fracções de 40% Me0H/H20 que foram evaporadas, formou uma 73 090 SB CASE 14418 -24-

película que foi reconstituída em água destilada e liofilizada, obtendo-se uma substância sólida branca amorfa. ^-H-RMN a 250 MHz(D20/ ref=HOD=4,60); 6: 8,12 (d,lp), 7,68 (d,lp), 6,90-7,28 (m, 6p), 4,78 (d,lp), 4,23 (d,lp), 2,68-2,95(m,2p), 2,52--2,65(t,2p), 2,32-2,48(t,2p), 2,1-2,32 (m,2p), 1,3-1,55 (m,4p), 0,95-1,3 (m,6p) (m,4p), 0,95-1,3 (m,6p). EXEMPLO 2 ácido 2-hidroxi-3-f2-carboxietiltio)-3-f3-r2-(7-fenil-heptil-tio)lPÍridil)propiónico, sal dipotássico 2(a^ 2-(7-fenil-heptiltio)-3-carboxipiridina

Dissolveu-se 2-mercapto-3-carboxipiridina (8 g; 0,052M) em 25 ml de dimetilformamida e tratou-se com K2co3 (9,97 g; 0,722M) e 7-fenil-l-bromo-heptano, do mesmo modo que no exemplo l(a). Por esterificação com diazometano, do mesmo modo que no Exemplo l(a) (l-metil-3-nitro-l-nitrosoguanidina, 10,6 g, 0,722 m; KOH, 14,28 g, 0,216 m; Et20/H20, 200 ml/50 ml) obteve-se o composto do título. 2(b) 2-(7-fenil-heptiltio)-3-hidroximetilpiridina 0 composto do Exemplo 2(a) (16 g; 0,049M) foi dissolvido em 200 ml de tetra-hidrofurano seco e tratado com hidreto de diiso-butilalumínio (100 ml; 1,5M em tolueno; 0,15M), do mesmo modo que no Exemplo l(b), obtendo-se o composto do título. 2(c) 2-f8-fenil-heptiltio)-3-formilpiridina O composto do Exemplo 2(b) (13,75 g; 0,047M) reagiu com DMSO (6,45 ml; 0,0984M), cloreto de oxalilo (4,1 ml; 0,047 mM) e trie-tilamina (31 ml; 0,224M) em 300 ml de cloreto de metileno seco, do mesmo modo que no Exemplo l(c), obtendo-se o composto pretendido. 2(d) 2,3-epoxi-3-Γ2-(7-fenil-heptiltio)piridil1propanoato de me-tilo 0 composto do Exemplo 2(c) (11 g; 0,035M) foi dissolvido em 100 ml de cloreto de metileno seco e reagiu com metilcloroacetato (4,25 ml; 0,049M) e solução de metóxido de sódio (9,46 ml; 0,042M, 25% em MeOH), do mesmo modo que no Exemplo l(d). 0 produ-

73 090 SB CASE 14418 -25- to em bruto foi purificado por cromatografia "flash" ( 25% acetato de etilo/hexano), obtendo-se o composto do título. 2fe) 2-hidroxi-3-f2-rcarbometoxi1etiltio)-3-(3-r2-(7-fenil-hep-tiltio) lpiridiDpropanoato de metilo 0 composto do Exemplo 2(d) (8,68 g; 22,5 mM) foi dissolvido em 8 ml de metanol e tratado com 3-mercapto-propionato de metilo (5 ml, 45 mM) e trietilamina (12,5 ml; 90 mM) do mesmo modo que no Exemplo l(e). A condensação retro-aldol para degradar o regioisómero indesejado foi conseguida pelo mesmo método, dissolvendo o produto em bruto em 16 ml de MeOH e tratando-o com solução de metóxido de sódio (25% NaOMe/metanol, 5,14 ml; 22,5 mM). A purificação final foi realizada por cromatografia "flash" (Baker Si02, 18% acetato de etilo/hexano) obtendo-se o composto do título. 2(f) ácido 2-hidroxi-3-í2-carboxietiltio)-3-f3-Γ2-Γ7-fenil-hep-tiltio)iPiridiUpropiónico, sal dipotâssico

Dissolveu-se o composto do Exemplo 2(e) em 21 ml de metanol, em atmosfera de árgon, e tratou-se gota a gota com uma solução de KOH (58 g; 8,85 mM) em 7 ml de água. Após 4 h de reacção diluíu-se com água, pôs-se uma camada de acetato de etilo e acidificou-se a pH 2,0. Separou-se a camada orgânica e extractou-se a camada aquosa duas com acetato de etilo. Os extractos orgânicos juntos foram lavados uma vez com água, uma vez com salmoura e secos sobre MgS04. Por filtração e evaporação do solvente, obteve-se um óleo em bruto que, por cromatografia "flash" (Baker Si02, gradiente em degrau, 3-4% metanol/clorofórmio - 1% ácido trifluoroacético), produziu um óleo incolor. Dissolveu-se o óleo em 6 ml de H20 com KHC03 (2,36 g; 23,6 mM) e submeteu-se a cromatografia "flash" (Baker R-P 18, gradiente em degrau, 100% H20;250 ml; 100 ml de cada 40%, 50%, 60%, 70% e 80% metanol/H20). As fracções que continham o produto foram misturadas e evaporadas até se obter um produto vítreo. Este produto vítreo foi ressuspenso em H20 e liofilizado, obtendo-se o composto do título, com um pó higroscópico. p.f. 255-257 corn dec. 1H-RMN a 250 MHz (CD3OD, ref = CHD20H = 3,47); 5: 8,16 (d de d, lp), 8,02 (d de d, lp), 6,9-7,18 (m,6p), 4,68

2,63 (t,2p), 1,1-1,43 (m 73 090 SB CASE 14418 -26- (d, lp, J=4Hz), 4,23(d,lp,J=4Hz), 2,93-3,2 (m,2p), 2,5(t,2p), 2,35 (t,2p), 1,45-1,65 (m largo,4p), largo, 6p). EXEMPLO 3 ácido 2-hidroxi-3-(2-carboxietiltio)-3-(3-r2-(undeciltio)Ipiri-dilΪoropiónico 3(a) 2-(undeciltio^-3-(carbometoxi)piridina

Dissolveu-se 2-mercapto-3-carboxipiridina (6,0 g; 0,39M) em 30 ml de dimetilformamida seca e fez-se reagir com carbonato de sódio (7,5 g; 0,054M) e 1-bromo-undecano (10,5 g; 0,045M) de modo essencialmente idêntico ao do Exemplo l(a).

Depois de agitar durante 2 1/2 h a 100°, arrefeceu-se a mistura reagente e verteu-se sobre 400 ml de água gelada. A solução recebeu uma camada de acetato de etilo e ajustou-se a pH 2,0 com HC1 2N. Separou-se a camada orgânica e extractou-se a parte aquosa duas vezes com acetato de etilo. Os extractos orgânicos juntos foram lavados, uma vez com HC1 IN, uma vez com H2O, uma vez com salmoura e secam-se sobre MgS04. Por filtração e evaporação desta solução, obteve-se uma substância sólida amarela. Esta substância sólida foi aquecida e triturada com éter dietílico/hexano, arrefecida e filtrada, obtendo-se o ácido 2-(undeciltio)piridina-2-carboxílico. O ácido piridino-carboxílico acima preparado, 6,25 g, foi dissolvido em acetato de etil/acetona e adicionado, gota a gota, a um excesso de diazometano em éter dietílico a 0°C. Juntou-se metanol à solução etérea para obter a solubilização do ácido. Depois de agitar por 1/2 h a 0°C, deixou-se a mistura reagente aquecer até temperatura ambiente. Depois de 1 1/2 h à temperatura ambiente, evaporou-se o solvente no vácuo e cromatografou-se o resíduo oleoso sobre sílica-gel usando o processo "flash” (Baker Si02, 10% acetato de etilo/hexano). 3(b) 3-hidroximetil-2-undeciltiopjridina

Dissolveu-se o composto do Exemplo 3(a) (3,0 g; 9,68 mM) em cloreto de metileno e arrefeceu-se até -78°C em atmosfera de 73 090 SB CÀSE 14418 -27-

árgon, sob agitação. A esta baixa temperatura precipitou uma pequena quantidade do éster. Juntou-se gota a gota hidreto de di-isobutilalumínio (14,5 ml; 21,78 mM; 1,5M em tolueno). Agitou-se a mistura reagente a -78°C durante 1/2 h e colocou-se num congelador a -20°. Aqueceu-se a mistura 16 horas depois até à temperatura ambiente e agitou-se por mais 3 h. A cromatografia em camada fina indicou que todos os produtos iniciais se tinham consumido e que se tinha formado um novo produto principal (Si02, 30% acetato de etilo/hexano, u.v.+). Juntou-se gota a gota hidróxido de sódio a 10%, aquoso (6 ml). Agitou-se a mistura reagente durante 40 min à temperatura ambiente e filtrou-se. 0 bolo do filtro foi lavado com cloreto de metileno (2x) e o filtrado lavado com H20 (2x), salmoura (lx) e seco sobre MgS04. Por filtração e evaporação do solvente, obteve-se uma substância sólida branca que por cromatografia em camada fina se verificou ser essencialmente homogénea. 3(c) 3-formil-2-fundeciltio)piridina 0 composto do Exemplo 3(a) (2,0 g; 7,2 mM) foi oxidado usando o processo do Exemplo l(c), com dimetilsulfóxido (1,2 g; 1,1 ml; 15,6 mM), cloreto de oxalilo (0,99 g; 68 ml; 7,8 mM) e trie-tilamina (3,58 g; 4,59 ml; 35,5 mM) em 100 ml de cloreto de metileno. Obteve-se o composto do título. 3(d) 2.3-epoxi-3-(3-|'2-undeciltio)piridil)propanoato de metilo

Fez-se reagir o composto do Exemplo 3(c) (1,55 g; 5,29 mM) com cloroacetato de metilo (0,84 g; 0,65 ml; 7,4 mM) e metóxido de sódio (0,337 g; 6,24 mM; 1,43 ml de metóxido de sódio a 25% em metanol) em 65 ml de cloreto de metileno, de acordo com o processo do Exemplo l(d). Por cromatografia "flash" (Baker Si02, 10% acetato de etilo/hexano) obteve-se o composto do título. k 3(e) 2-hidroxi-3-( 2-rcarbometoxi')etiltio)-3-( 3-r2-undeciltiolPÍ-ridil)propanoato de metilo

Dissolveu-se o composto do Exemplo 3(d) (1,6 g; 4,38 mM) em 3 ml de metanol e juntou-se uma solução de metil-3-mercaptopropi-onato (1,05 g; 9,67 ml; 8,76 mM) e trietilamina (1,77 g; 2,45 ml; 17,52 mM) em 2 ml MeOH. Agitou-se a mistura reagente à temperatu-

73 090 SB CASE 14418 -28-ra ambiente, sob atmosfera de árgon, durante 48 h. Evaporóu-se o solvente, obtendo-se um óleo. Por cromatografia "flash" (Baker Si02, 15% acetato de etilo/hexano) o óleo produziu o isómero pretendido . 3(f) ácido 2-hidroxi-3-(2-carboxietiltio)-3-(3-r2-undeciltiolpi-ridi1)orooiónico, sal dipotássico 0 composto do Exemplo 3(c) (270 mg? 0,557 mM) foi dissolvido em 2,5 ml de metanol e juntou-se gota a gota hidróxido de potássio (110 mg? 1,67 mM) em 1 ml de água. Agitou-se a mistura reagente à temperatura ambiente durante 2 h, evaporou-se o metanol, diluiu-se a mistura reagente com água, lavou-se com éter dietílico (2x), juntou-se uma camada de acetato de etilo e acidificou-se até pH 2,0 com HC1 diluído. Separou-se a camada orgânica e extractou-se a parte aquosa com acetato de etilo (2x). Os extractos orgânicos juntos foram lavados com água (lx), salmoura (lx) e secos sobre MgS04. Por cromatografia "flash" (Baker SÍO2, 3,5% metanol/clorofórmio - 3,5% ácido trifluoroacético) esta substância produziu um óleo. 0 óleo foi ainda dissolvido em 1 ml de H20 e tratado com 230 mg (8 eq) de hidrogenocarbonato de potássio. A solução resultante foi aplicada a uma coluna de octa-decilsilano-sílica-gel (Baker ODS) e eluída sequencialmente com água (200 ml), 60% metanol/H20 (125 ml) e 70% metanol/H20 (100 ml).

As fracções contendo o material pretendido, que eluiram com 60% metanol/água, foram juntas, evaporadas no vácuo até pequeno volume, reconstituídas com água e liofilizadas, obtendo-se um pó branco higroscópico. 1H-RMN do ácido livre a 250 MHZ (CDC13 REF=TMS-0): δ 8,38 (d de d, lp), 8,15 (s largo, 4p? OH's), 8,0 (d de d, lp), 7,08 (d de d, lp), 4,73 (d, lp)), 1,53-1,75 (m, 2p), 1,05-1,50 (m largo, 18p). EXEMPLO 4 ácido 2-hidroxi-3-f3-Γ2-Γ8-feniloctil^lPÍridill-3-f2-carboxietil-tio)nrooiónico 4fa^ 2.3-enoxi-3-f3-T2-f8-feniloctil^loiridil^orooionato de meti-lo

73 090 SB CASE 14418 -29- A uma solução de 2-(8-feniloctil)-3-formilpiridina (0,92 g; 3,1 mmol) em cloreto de metileno (9 ml) juntou-se cloroacetato de metilo (0,47 g; 4,4 mmol). A solução foi depois arrefecida a -15°C e mantida em atmosfera de árgon. Juntou-se gota a gota metóxido de sódio (0,84 ml de 25% p/p em metanol; 3,1 mmol) e continuou-se a agitar durante 5 min a -15°C. Depois de aquecer até temperatura ambiente e agitar por 2 h, juntou-se uma solução tampão pH 7 à mistura reagente. Concentrou-se a mistura reagente sob pressão reduzida e extractou-se com acetato de etilo. Lavou-se o extracto orgânico sucessivamente com H20, 5% NaHC03 aquoso, salmoura e secou-se (MfS04). Removeu-se o solvente no vácuo e purificou-se o resíduo por cromatografia "flash11 eluindo com 30% acetato de etilo/éter de petróleo, obtendo-se o epóxido pretendido. 4(bl 2-hidroyi-3-(3-Γ2-(8-feniloctiHlPÍridill-3-f2-carbometoxie-tiltiolpropionato de metilo

Dissolveu-se 2,3-epoxi-3-{3-[2-(8-feniloctil)]piridil)propi-onato de metilo (0,64 g? 1,7 mmol) em metanol sob atmosfera de árgon. Juntou-se uma solução de metil-3-mercaptopropionato (0,42 g; 3,5 mmol) e trietilamina (0,7 g? 7,0 mmol) em metanol. Agitou--se a solução resultante, à temperatura ambiente, durante a noite, e depois concentrou-se sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em CH2C12, lavou-se sucessivamente com H20, NaHC03 a 5%, aquoso, e com NaCl aquoso saturado, e secou-se (MgS04). Removeu--se o solvente sob pressão reduzida e purificou-se o resíduo por HPLC, obtendo-se o álcool pretendido. CIMS, isobutano (m/e): 488 (M+H). 4(c) ácido 2-hidroxi-3-f3-[2-(8-feniloctil^~|piridill-3-(2-car-boxietiltio)propiónico. sal dipotássico A uma solução de 2-hidroxi-3-{3-[2-(8-feniloctil)]piridil}--3-(2-carbometoxietiltio)propionato de metilo (120 mg; 0,3 mmol) em metanol (12 ml) sob atmosfera de árgon, juntou-se KOH diluído aquoso e agitou-se a mistura resultante, à temperatura ambiente, durante 24 h. Concentrou-se a mistura sob pressão reduzida e submeteu-se o resíduo a partição entre H20 e acetato de etilo. 0 extracto orgânico foi lavado com H20 e seco (MgS04). Removeu-se o

73 090 SB CASE 14418 -30- solvente no vácuo e triturou-se o resíduo em cloreto de metileno. O precipitado sólido foi filtrado e lavado com éter dietílico, obtendo-se o diácido. FAB MS (m/e): 460,2 (M+H). EXEMPLO 5 ácido 3-f3-r2-(8-feniloctil)lpjridil>-3-f2-carboxietiltio^propió-nico 5(a^ 2-ciano-5-metoxipentadienoato de metilo A uma solução de malonaldeido-bis(dimetilacetal) (24,6 g? 0,149 mol) em anidrido acético (50 ml), juntou-se ZnCl2 (0,14 g; 0,001 mol). Depois de aquecer sob refluxo a mistura resultante, juntou-se gota a gota cianoacetato de metilo (9,9 g; 0,10 mol) e aqueceu-se, sob refluxo, durante a noite, a mistura reagente. Deixou-se a mistura arrefecer até temperatura ambiente, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. 0 resíduo semi-sólido foi triturado com éter dietílico/éter de petróleo. Por filtração removeu-se a parte sólida, dissolveu-se em éter e descorou-se. Por remoção do solvente sob pressão reduzida, obteve-se um resíduo semi-sólido que foi triturado com éter dietílico/éter de petróleo, obtendo-se o produto pretendido, p.f. 95-97°c. 5(b) 2-bromo-5-carbometoxipiridina

Uma solução de 2-ciano-5-metoxipentadienoato de metilo (1,6 g; 9,58 mmol) em ácido acético (8 ml), sob atmosfera de árgon, foi aquecida a 40eC e juntou-se-lhe gota a gota ácido acético (16 ml) saturado com HBr, mantendo a temperatura a 40°C. Após a adição, a mistura reagente foi aquecida a 50°C durante 30 min e depois deixada arrefecer até à temperatura ambiente. A substância sólida precipitada foi filtrada, lavada com éter e tratada com Na2C03 a 5% aquoso. O óleo separado foi dissolvido em éter dietílico, lavado com H20 e seco. Depois de tratado com carvão vegetal descorante, o solvente foi removido no vácuo, obtendo-se um óleo âmbar. 5(c^ 1-fenil-l.7-octadiino

Uma solução de fenilacetileno (3,19 g; 31,3 mmol) em tetra--hidrofurano (63 ml), sob atmosfera de árgon, foi arrefecida a -5°C e juntou-se-lhe lentamente n-butil-lítio (12,5 ml de solução 73 090 SB CASE 14418

-31- 2,5M; 31,3 mmol), seguindo-se HMPT em tetra-hidrofT*T^o. solução púrpura escura resultante, juntou-se, a 0°C, l-hex-5--inil-p-tolueno-sulfonato (7,9 g; 31,3 mmol) em tetra-hidrofurano (32 ml). Agitou-se a solução resultante a 0°C durante 1 h, deixou-se aquecer até à temperatura ambiente e agitou-se durante a noite. Verteu-se a mistura reagente sobre H20 e extractou-se com éter. O extracto orgânico foi seco (MgS04), filtrado e concentrado sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo por cromatografia Hflash"eluindo com 15% éter dietílico/éter de petróleo, obtendo--se o composto pretendido. 5(d) 2-(8-fenilocta-1.7—diinil^—3-carbometoxioiridina A uma solução de 2-bromo-3-carbometoxipiridina (3,5 g; 17,3 mmol) e l-fenil-l,7-octadiino (2,5 g; 13,7 mmol) em trietilamina (50 ml), juntaram-se cloreto de bis(trifenilfosfino)paládio (0,19 g; 0,27 mmol) e iodeto de cobre (26 mg; 0,14 mmol). Aqueceu-se a mistura resultante a 80°C, sob atmosfera de árgon, durante 2 h e deixou-se arrefecer até temperatura ambiente. Removeu-se o solvente no vácuo e juntou-se éter dietílico ao resíduo. Depois de tratamento pelo carvão vegetal descorante, removeu-se o solvente no vácuo e purificou-se o resíduo por cromatografia "flash", elu-indo com 30% éter dietílico/éter de petróleo, obtendo-se o produto pretendido. 5(e) 2-(8-feniloctil)-3-carbometoxipiridina A uma solução de 2-(8-fenilocta-1,7-diinil)-3-carbometoxipi-ridina (1,0 g; 3,1 mmol) em acetato de etilo (50 ml), juntou-se 10% de paládio sobre carvão activado (0,2 g). A mistura resultante foi clarificada com árgon e depois agitada, sob hidrogénio à pressão atmosférica, durante 15 min. Filtrou-se a mistura e con-centrou-se sob pressão reduzida, obtendo-se o produto pretendido. 2—í3—Γ2-(8-feniloctil)11-3-hidroximetilpiridina A lima solução de 2-(8-feniloctil)-3-carbometoxipiridina (1,0 g; 3,1 mmol) em tolueno (20 ml) a -78eC sob atmosfera de árgon, juntou-se gota a gota DiBAL (12,3 ml de solução 1M; 12,3 mmol). Agitou-se a mistura resultante a -78eC durante 1 h, depois deixou-se aquecer até à temperatura ambiente e agitou-se por várias

73 090 SB CASE 14418 -32-horas. Juntou-se lentamente metanol e agitou-se a mistura por mais 15 min. Filtrou-se a mistura reagente e concentrou-se o filtrado sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em αΗ2012 e secou-se (MgS04). Por remoção do solvente obteve-se o álcool que foi usado sem purificação adicional. 2-(8-feniloctil)-3-formilpiridina A uma solução da 2-{3-[2-(8-feniloctil)]}-3-hidroximetilpi-ridina preparada acima, em dicloreto de metileno (30 ml), juntou-se MnC>2 (8 g) e agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente sob atmosfera de árgon durante 2 h. Filtrou-se a mistura reagente e concentrou-se o filtrado sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em éter dietílico e tratou-se com carvão vegetal descorante. Removeu-se o solvente no vácuo e tratou-se azeotropi-camente com tolueno (2x), obtendo-se o aldeído pretendido. 5(f) 3-hidroxi-3-(3-r2-f8-feniloctil)ipiridillpropionato de t--butilo A uma solução de diisopropilamina (0,36 g; 3,6 mmol) em te-tra-hidrofurano (-5 ml) a -78°C sob atmosfera de árgon, juntou-se gota a gota n-butil-lítio (1,42 ml de solução 2,5M; 3,6 mmol) e agitou-se a solução resultante durante 5 min. Juntou-se gota a gota uma solução de t-butilacetato (0,41 g; 3,6 mmol) em tetra--hidrofurano (5 ml).Depois de agitar a -78°C durante 1 h, juntou-se gota a gota uma solução de 2-(8-feniloctil)-3-formilpiridina (0,7 g; 2,4 mmol) em tetra-hidrofurano ( 5 ml). Agitou-se a mistura a -78°C durante 1 h, depois deixou-se aquecer até temperatura ambiente e agitou-se durante a noite. Juntou-se NH4C1 aquoso saturado e extractou-se a mistura com éter dietílico. Lavou-se o extracto orgânico com H20 e secou-se. Removeu-se o solvente no vácuo, obtendo-se o produto pretendido. 5ícr) 3-í3-r2-f8-feniloctilllPÍridil)cinamato de t-butilo A uma solução de 3-hidroxi-3-{3-[2-(8-feniloctil)]piridil>-propionato de t-butilo (0,5 g; 1,2 mmol) e trietilamina (0,38 g? 3,6 mmol) em CH2C12 (10 ml) a -10°C, sob atmosfera de árgon, juntou-se gota a gota cloreto de metano-sulfonilo (0,21 g; 1,8 mmol). Deixou-se a mistura resultante aquecer até temperatura am-

73 090 SB CASE 14418 -33-biente e agitou-se durante 48 h. Removeu-se o solvente no vácuo. Dissolveu-se o resíduo em CH2C12/ lavou-se sucessivamente com H20, HCl 3N e H20, e secou-se (MgS04). Por remoção do solvente no vácuo, obteve-se o epóxido. 5(h) 3-f 3-Γ2-ί8-feniloctil)Tpiridil>-3-( 2-carboroetoxitio)propio- nato de t-butilo A uma solução de 3-{3-[2-(8-feniloctil)]piridil}cinamato de t-butilo (0,4 g; 1,0 mmol) e 3-mercaptopropionato de metilo (0,7 g, 5,9 mmol) em metanol (5 ml) a 0°C, juntou-se trietilamina (1,19 g; 11,8 mmol). Deixou-se a solução resultante aquecer até temperatura ambiente e agitou-se sob atmosfera de árgon, durante a noite. Removeu-se o solvente no vácuo. Dissolveu-se o resíduo em CH2C12, lavou-se com H20 e secou-se. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida e purificou-se o resíduo por cromatografia "flash", eluindo com 20% acetato de etilo/hexano, obtendo-se o éster misto. 5 f i ^ ácido 3-f3-r2-f8-feniloctil^)piridill-3-f2-carboxietiltio)-propiónico. sal de dioioerazina

Uma solução de 3-{3-[2-(8-feniloctil]piridil}-3-(2-carbometoxietiltio)propionato de t-butilo (0,4 g; 0,8 mmol) em HCl 3N (20 ml) foi aquecida sob refluxo durante a noite. Concentrou-se a solução sob pressão reduzida e tratou-se azeotropica-mente o resíduo com tolueno (2x). Dissolveu-se o resíduo em metanol e secou-se. Removeu-se o solvente no vácuo, dissolveu-se o resíduo em álcool isopropílico e tratou-se com piperazina 1M. Agitou-se a mistura durante 2 h à temperatura ambiente e filtrou--se, obtendo-se um pó fino branco que foi recristalizado em álcool isopropílico. FAB MS (m/z): 444 (M+H). EXEMPLO 6 ácido 2-metoxi-3-Γ 4-carboxifeniltiol-3-13-Γ2-(7-fenil-heptil)-tio]piridilIpropionico 6(a) 2,3-epoxi-3-(3-Γ2-(7-fenil-heptil)tio)piridilIpropionamida A uma solução saturada de amoníaco em álcool (50 ml) a -20°C, juntou-se gota a gota uma solução de 2,3-epoxi-3-{3-[2-(7--fenil-heptil)tio]piridil}propanoato de metilo (2,0 g; 5,2 mmol) 73 090 SB CASE 14418

-34- em benzeno (5 ml). Deixou-se a mistura resultante aquecer até temperatura ambiente e agitou-se durante a noite. Removeu-se o solvente no vácuo, obtendo-se uma substância branca sólida que foi usada sem purificação adicional. 6(b) 2-hidroxi-3-r4-(carbometoxil)feniltio1-3-(3-r2-(7-fenil-hep-tilltiolpiridillpropionamida A uma solução de 2,3-epoxi-3-{3-[2-(7-fenil-heptil)tio]piri-dil}propionamida (0,54 g; 1,5 mmol) em THF (10 ml) a -10°C, sob atmosfera de árgon, juntou-se isopropóxido de titânio (1,46 g; 5,1 mmol), seguindo-se a adição gota a gota de uma solução de 4--mercaptobenzoato de metilo (0,37 g; 2,2 mmol) e NaH (10 mg de uma dispersão em óleo a 50%; 0,21 mmol) em THF (5 ml). Agitou-se a mistura resultante a 0° C durante 90 min, depois submeteu-se a partição entre Et20 e Na2S04 aquoso saturado e filtrou-se por Celite. Secou-se a fase orgânica (MgS04) e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por coluna cromatográfica (sílica-gel), eluindo com Et20, obtendo-se um produto sólido, vítreo. 90 MHz RMN (CDCI3)): δ 8,25 (dd, 1H, J = 4 Hz, J = 1 Hz); 7,95 (d, 1H, J = 7 Hz, J = 1 Hz); 7,85 (d, 2H, J = 8 Hz); 7,35 (d, 2H, J = 8 Hz); 7,20 (s largo, 5H); 6,88 (dd, 1H, J = 9 Hz, J = 3 Hz); 6,50 (s largo, 1H); 6,08 (s largo, 1H); 5,28 (d, 1H, J = 3 Hz); 4,70 (d, 1H, J = 6 Hz); 4,50 (dd, 1H, J = 6 Hz, J = 3 Hz); 3,82 (S, 3H); 3,18 (m, 2H); 2,54 (t, 2H, J = 7 Hz); 1,80 - 1,20 (m, 10H). 6(c) 2-hidroxi-3-r4-(carbometoxil)feniltio1-3-{3-r2-(7-fenil-hep-tilltiolpiridiDpropanoato de metilo

Tratou-se 3-[4-(carbometoxil)feniltio]-2-hidroxi-3-{3-[2--(7-fenil-heptil)tio]piridil}propionamida (0,44 g; 0,8 mmol) em metanol (100 ml) com HC1 a 25%, aquoso, (5 ml) e aqueceu-se sob reflxaxo, durante a noite, a solução resultante. Juntou-se carbonato de potássio; decantou-se a mistura e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a partição entre EtOAc e NaHC03 a 5%, aquoso. Lavou-se a fase orgânica com NaCl aquoso saturado e secou-se (MgS04). Por remoção do solvente no vácuo, -35- 73 090 SB CASE 14418 obteve-se um óleo incolor. 90 MHz RMN (CDC13): δ 8,20 (d, 1H, J = 4 Hz); 7,90 (m, 2H); 7,50 - 6,80 (m, 9H); 5,20 (d, 1H, J = 5 Hz); 4,60 (d, 1H, J - 3 HZ); 3,80 (S, 3H); 3,65 (S, 3H); 3,20 (m, 2H); 2,60 (t, 2H, J = 5 HZ); 1,80 - 1,20 (m, 10H). 6(d) 2-metdxi-3-r4-f carbometoxil)feniltio) -3-f3-r2-(7-fenil--heptil)tio]piridil^propanoato de metilo A uma solução de 3-[4-(carbometoxil)feniltio]-2-hidroxi-3--{3-[2-(7-fenil-heptil)tio]piridil}propanoato de metilo (0,10 g; 0,18 mmol) em DMF/THF (1:10) (4,5 ml) a 0°C, sob atmosfera de árgon, juntou-se NaH (17 mg de dispersão a 50% em óleo; 0,36 mmol), seguido de iodeto de metilo (23 μΐ; 0,36 mmol). Deixou-se a solução resultante aquecer até temperatura ambiente e agitou-se durante a noite. A solução foi concentrada no vácuo e o resíduo foi submetido a partição entre H20 e CH2C12· Secou-se a fase orgânica (MgS04) e concentrou-se sob pressão reduzida. Por purificação do resíduo por cromatografia em coluna (sílica-gel), eluindo com 10% Et20/hexano, obteve-se um óleo incolor. 90 MHz RMN (CDC13): δ 8,30 (dd, 1H, J = 5 Hz, J = 1 Hz); 7,80 (m, 2H); 7,30 (d, 1H, J = 8 Hz); 7,20 (br s, 5H); 6,90 (dd, 1H, J = 7 Hz, J = 4 Hz); 5,20 (d, 1H, J = 5 Hz); 4,20 (d, 1H, J = 5 Hz); 3,87 (s, 3H); 3,65 (s, 3H); 3,40 (s, 3H); 3,20 (m, 2H); 2,60 (t, 2H, J = 7 Hz); 1,90 - 1,20 (m, 10H). 6(e) ácido 2-metóxi-3-r4-carboxifeniltio1-3-l3-r2-f7-fenil-hep-til)tio1oiridillorooiónico

Uma solução de 3-[4-(carbometoxil)feniltio]-2-metoxi-3-{3--[2-(7-fenil-heptil)tio]piridil}propanoato de metilo (70 mg; 0,14 mmol) e NaOH (32 mg; 0,80 mmol) em H20/CH30H (1:1) (2 ml), foi deixada sob agitação, à temperatura ambiente, durante 36 h. Con-centrou-se a solução no vácuo para remover o CH3OH e ajustou-se o pH até 3-4 com HC1 3N. 0 precipitado resultante foi recolhido por filtração e seco. A substância sólida amorfa (60 mg) foi tratada com piperazina (1 eq), obtendo-se um produto sólido branco, p.f. 182 °C.

73 090 SB CASE 14418 -36- 90 MHZ RMN (CDC13): δ 8,42 (ddf 1H, J = 5 HZ, J = 1 HZ)} 7f90 (m, 2H); 7,50 (d, 1H, J = 8 Hz); 7,25 (br s, 5H); 7,20 (m, 3H); 5,32 (d, 1H, J = 6 Hz); 4,30 (d, 1H, J = 6 Hz); 3,45 (s, 3H); 3,23 (t, 2H, J = 6 Hz); 2,58 (t, 2H, J = 7 Hz); 1,90 - 1,20 (m, 10H). EXEMPLO 7 ácido 2-hidroxi-3-Γ4-f carboxifenil)tiol-3-(3-Γ2-(7-fenil-heotil)-tiolpiridillpropiónico 7(a) ácido 2-hidroxi-3-r4-(carboxifenil)tio1-3-f3-r2-7-fenil-hep-til)tio1oiridilIprooiónico

Uma solução de 3-[4-(carbometoxil)feniltio]-2-hidroxi-3-{3--[2-(7-fenil-heptil)tio]piridil}propanoato de metilo (0,12 g; 0,2 mmol) e NaOH (40 mg; 1,0 mmol) em H20 (CH3OH (1:3) (4 ml), foi deixada sob agitação à temperatura ambiente durante 36 h. Concentrou-se a solução no vácuo e ajustou-se o pH a 3-4 com HC1 3N. Extractou-se a mistura com CHCI3 (2x) e secaram-se (MgS04) os ex-tractos orgânicos juntos. Por remoção do solvente no vácuo, obteve-se um produto sólido, vítreo. 90 MHz RMN (CDCI3): 5 8,40 (dd, 1H, J - 6 Hz, J = 1 Hz); 8,00 - 7,00 (m, 11H); 5,20 (d, 1H, J = 7 Hz), 4,70 (d, 1H, J - 7 Hz); 3,30 (t, 2H, J = 8 Hz); 2,60 (t, 2H, J = 8 Hz); 1,90 - 1,20 (m, 10H). O tratamento do referido produto com piperazina (l eq) forneceu um sal, p.f. 204-6°C. EXEMPLO 8 ácido 2-(4-carboxifenoxi)-2-|'3-(2-undeciltio^piridinacético 8(i) 2-cloro-2-r3-f2-undeciltio)piridilacetato de metilo

Preparou-se o composto do título a partir da 3-formil-2-(un-deciltio)piridina [3(c)] seguindo o processo apresentado na patente U.S. Na. 4 820 719 para preparar o 2-cloro-2-(2-dodecilfe-nil)acetato de metilo a partir do 2-dodecilbenzaldeído.

73 090 SB CASE 14418 -37- 8(ii) ácido 2-f4-carboxifenoxi)—2—Γ3-(2—undeciltio^piridinacético O composto do título é preparado a partir de 2-cloro-2-[3--(2-undeciltio)piridilacetato de metilo por reacção com 4-hidroxibenzoato de metilo e carbonato de potássio em dimetilfor-mamida, seguida da saponificação do diéster. EXEMPLO 9

As formulações para uso farmacêutico que incorporam compostos do presente invento, podem ser preparadas por várias formas e com numerosos excipientes. São dados abaixo exemplos destas formulações.

Formulação Inalante

Dissolve-se um composto de fórmula I, 1 a 10 mg/ml, em solução salina isotónica e usa-se como aerossol a partir de um nebulizador operando com uma corrente de ar ajustada para entregar para uso a quantidade pretendida de droga.

Por comprimido 40.0 mg 20.0 mg 20.0 mg 20.0 mg 1.3 ma 101,3 mg

Comprimidos Ingredientes_ 1. Ingrediente activo (Composto de Fórmula I) 2. Amido de milho 3. Ácido algínico 4. Alginato de sódio 5. Estearato de Mg

Por 10 000 comprimidos 400.0 g 200.0 g 200.0 g 200.0 g_i3,,_o_g. 1 013,0 g

Produção de comprimidos:

Passo 1 Misture os ingredientes Na. 1, Na. 2, Na. 3 e Na. 4 num misturador adequado.

Passo 2 junte água suficiente, em porções, para a mistura do Passo 1 com cuidadosa mistura após cada adição. Tais -38- -38- r·1 2 SB CASE 14418 adições de água e mistura são para que a massa tenha uma consistência que permita a sua conversão em grânulos húmidos.

Passo 3 A massa húmida é convertida em grânulos, fazendo-a passar por um granulador oscilante usando um crivo de mesh Nfi . 8 (2,38 mm).

Passo 4 Os grânulos húmidos são depois postos numa estufa a 60eC (110°F) até estarem secos.

Passo 5 Os grânulos secos são lubrificados com o ingrediente N3 4. 5.

Passo 6 Os grânulos lubrificados são comprimidos numa prensa de comprimidos adequada.

Supositórios

Por 1 000 Supos. 40,0 g 1 350,0 g 450.0 g 1 840,0 g 1

Ingredientes_Por Supos. 2

Comp. de Fórmula I 40,0 mg

Ingrediente activo 3

Polietilenoglicol 1 000 1 350,0 mg 4

Polietilenoglicol 4 000 450,0 mg 1 840,0 mg

Produção:

Passo 1 Funda os ingredientes Na. 2 e Ns. 3 juntos e agite até haver uniformidade.

Passo 2 Dissolva o ingrediente Na. 1 na massa fundida do Passo 1 e agite até ficar uniforme.

Passo 3 Verta a massa fundida do Passo 2 nos moldes para supositórios e arrefeça.

Passo 4 Retire os supositórios dos moldes e embale-os.

Claims (14)

1. 73 090 SB CASE 14418 -39- REIVINDICACOES 1 - Processo de preparação de um composto de fórmula I

   onde nenhum dos dois substituintes do piridilo estão substituídos no azoto do piridilo, ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, onde X é O ou S(0)g onde q é 0, 1 ou 2, com a condição de R-j^ não ser alquiltio ou feniltioalquilo quando q é 1 ou 2; R-L é alquilo Cg a C13, alcoxilo C7 a C12, alquiltio C7 a Ci2, 1-alcinilo C10 a C12, 10-undeciniloxilo, 11-dodecinilo, fe-nil-(alquilo C4 a C10)/ fenil-(alcoxilo C3 a Cg), feniltio-(alquilo C3 a Cg), com cada fenilo opcionalmente monossubstituído com bromo, cloro, trifluorometilo, alcoxilo a C4, metiltio ou trifluorometiltio, furil-(alquilo C4 a C10), trifluorome-til-(alquilo C7 a C12) ou ciclo-hexil-(alquilo C4 a C10); Y é R2, CH(R3)(CH2)mR2, CH(R3)-tetrazol-5-ilo ou tetrazol-5- -ilo; R2 é -COR4 onde R4 é -OH, -OE onde E é um catião farmaceuticamente aceitável ou um grupo formador de éster farmaceuticamente aceitável, -CN, -S03H, -S02NH2, -NHS02R6, -CH(NH2)COR4 ou -CONHCH2COR4, ou R2 é -CON(R5)2 onde R5 é H, alquilo C-^ a Cg, fenil-(alquilo C-l a C6), ou os dois grupos R5 estão combinados para formarem um grupo cíclico com 3 a 5 carbonos; R3 é hidrogénio, metilo, alcoxilo C^ a C4, fluoro ou hidroxilo; R6 é alquilo C-^ a C10, fenilo ou fenilo substituído;. m é 0, 1 ou 2; R é -(CH2)nD, -(CH2)nArD, onde n é 0-6, Ar é fenilo ou fenilo substituído, tienilo, piridilo, imidazolilo, tetrazol-5-ilo ou tiazolilo e D é -(CH2)1R2 onde 1 é 0-3 ou tetrazol-5-ilo; caracterizado por compreender: A. a preparação de um composto de fórmula I em que X é 0 ou

   73 090 SB CASE 14418 -40- S(0)g em que q é 0, por tratamento de qualquer um dos compostos seguintes com um tiol ou álcool de fórmula RSH ou ROH em que R é como acima definido; i) quando Y é -C0R2/ reagindo um 2-cloroacetato da fórmula seguinte: Cl

   com o referido tiol ou álcool; ou ii) quando Y é CH2COR4 ou CH2(R3)COR4/ em que R3 é H, metilo ou alcoxi reagindo um 3-hidroxipropionato ou 4-hidroxibutirato com uma das fórmula seguintes:

   com o referido tiol ou álcool; ou iii) quando Y é CH(R3)COR4, em que R3 é H, metilo, alcoxi ou fluoro, tratando um propenoato de fórmula:

   em que R4 é um grupo alcoxi com uma mistura do alcóxido de metal alcalino e do referido álcool ou tiol; iv) quando Y é CH(OH)CH2)mC0R4, tratando um epóxido de fórmula (segue fórmula) 73 090 SB CASE 14418 -41-

   0 "\MCH2)aCOR4

   em que m, R^^ e n são definidos como anteriormente, com o referido tiol na presença de uma trialquilamina num solvente inerte; ou B. quando XéS(0)geqélou2, a oxidação de um composto de fórmula I em que q é 0, desde que R-l não seja alquiltio ou feniltioalquilo.
2. 2 - Processo de acordo com a reivindicação lf caracterizado por se prepararem compostos de fórmula I na qual X é S.
3. 3 - Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por no composto de fórmula I preparado R ser -(CH2)nD onde n é 1 ou 2, Y é -C0R4 ou -CH(R3)(CH2)mC0R4 onde m é 0 ou 1 e R3 é -OH ou H.
4. 4 - Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por o composto preparado ser o ácido 2-hidroxi-3-(2-carboxietil-tio)-3-[2-(3-(7-fenil-heptiltio))piridil]propiónico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
5. 5 - Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por o composto preparado ser o ácido 2-hidroxi-3-(2-carboxietil-tio)-3-[3-(2-(7-fenil-heptiltio))piridil]propiónico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
6. 6 - Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por o composto preparado ser o ácido 3-(2-carboxietiltio)-3-[3--(2-(8-feniloctil))piridil]propiónico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
7. 7 - Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por o composto preparado ser ácido 2-hidroxi-3-(2-carbo-xietiltio)-3-[2-(3-(8-feniloctil))piridil]propiónico, ácido 2-

   73 090 SB CASE 14418 -42- -hidroxi-3-(2-carboxifeniltio)-3-[2-(3-(8-feniloctil))piridil]-propiónico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
8. 8 - Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por o composto preparado ser ácido 3-(2-carboxietiltio)-3--[2-(3-(8-feniloctil))piridil]propiónico, ácido 3-(2-carboxi-etiltio)-3-[3-(2-(8-feniloctil))piridil]propiónico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
9. 9 - Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por o composto preparado ser ácido 2-hidroxi-3-(2-carboxietil-tio)-3-[3-(2-(undeciltio))piridil]propiónico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
10. 10 - Processo de acordo com a reivindicação lf caracterizado por no composto preparado R ser -(CH2)nArD onde nélou2eAré fenilo, e Y ser -CH2(R3)COR4 onde R3 é H, OH ou metoxilo.
11. 11 - Processo de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por se preparar ácido 2-hidroxi-3-(4-carboxifeniltio)-3--[3-(2-(8-feniloctil))piridil]propiónico, ácido 2-hidróxi-3--([4-carboxi-2-fluorobenzil])tio-3-[3-(2-(8-feniloctil))piridil]-propiónico, ácido 2-metoxi-3-[4-(carboxifenil)tio]-3-{3-[2-(7--fenil-heptil)tio]piridil]propiónico, ácido 2-metoxi-3-(4-(car-boxibenziltio)-3-[3-(2-(8-feniloctil))piridil]propiónico, ou ácido 2-hidroxi-3-[4-(carboxifenil)tio]—3—{3—[2—(7-fenil-heptil)-tio]piridil}propiónico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
12. 12 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se preparar um composto onde X é O, Y é C0R4 ou CH(R3)(CH2)mCOR4 onde R3 é H ou -OH eméOouleRé -(CH2)nD ou -(CH2)nArD onde n é 1 ou 2.
13. 13 - Processo de acordo com a reivindicação 12, caracterizado por o composto preparado ser ácido 2-hidroxi-3-(2--carboxietiloxi)-3-[3-(2-(8-feniloctil))piridil]propiónico, ou ácido 2-hidroxi-3-(2-carboxietiloxi)-3-[2-(3-(8-feniloctil))pi- 43 % 73. 090 SB CASE 14418 ridil]propiónico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
14. 14 - Processo de preparação de uma composição farmacêutica, numa forma adequada para administração oral, parentérica, tópica ou por inalação, caracterizado por compreender misturar um composto de fórmula I, de acordo com a reivindicação 1, com um veículo farmaceuticamente aceitável. Lisboa, 13. $£l \s,. Por SMITHKLINE BEECHAM CORPORATION O AGENTE OFICIAL -