PT2480541E

PT2480541E - Hidratos de cloreto de metiltiónio cristalino (azul de metileno)

Info

Publication number: PT2480541E
Application number: PT107715161T
Authority: PT
Inventors: Rolf Hilfiker; Timo Rager
Original assignee: Wista Lab Ltd
Priority date: 2009-09-24
Filing date: 2010-09-23
Publication date: 2016-01-26
Also published as: SI3792254T1; JP2013505925A; PT3792254T; US8765742B2; EP2963024A2; SI2480541T1; CA3077911A1; DK3378856T3; MX355627B; HRP20181567T1; KR20120099409A; HRP20210086T1; EP3378856A2; CA2773305C; CA3141737C; FI3792254T3; CA3004822A1; CA3141737A1; BR112012006638B1; JP5806217B2

Description

DESCRIÇÃO

HIDRATOS DE CLORETO DE METILTIONIO CRISTALINO (AZUL DE METILENO) A presente invenção refere-se a hidratos de cloreto de metiltionínio cristalino, em particular a forma C de di-hidrato de cloreto de metiltionínio; os processos para a preparação da Forma C; e a composições, preferentemente, farmacêuticas que compreendem a Forma C.

Cloreto de metiltionínio (MTC) [Azul de metileno: cloreto de 3,7-bisdimetilaminofenazotiónio, Ci6H18C1N3S, 319,85 g/mol] foi preparado pela primeira vez em 1876 (The Merck Index, 13a edição, Merck & Co. , Inc., 2001, entrada 6085). Vários métodos de síntese são conhecidos e têm recentemente sido sumarizados no documento WO 2006/032879. O documento WO 2006/032879 também indica um número de aplicações de azul de metileno, que incluem a utilização como um corante médico, como um indicador redox, um antisséptico, para o tratamento e prevenção de pedras nos rins, o tratamento de melanoma, malária, infeções virais, e doença de Alzheimer. MTC também tem sido utilizado como um agente oxidante e como antídoto no caso de envenenamento por CO, nitrito e anilina. MTC é conhecido por existir na forma de hidratos. Por exemplo, o catálogo Fluka indica em termos muito gerais que o MTC pode conter até 22 % de água [Fluka Catalogue 1997/1998, Fluka Chemie AG, 1997] . As estruturas com uma a cinco moléculas de água foram formuladas na literatura [J.O. Warwicker, J. Chem. Soc. (1955) 2531; G.F. Davidson, J. Textile Institute 38 (1947) T408-418]. A formação de um tri-hidrato, aparentemente, encontrou ampla aceitação [por exemplo, The Merck Index, 13a edição, Merck & Co. , Inc., 2001, entrada 6085]. No entanto, esta alegação já foi disputada mais de 80 anos atrás, e a adsorção não específica de água por MTC foi proposta ao invés disso [H. Wales, 0, A. Nelson, J. Am. Chem. Soc. 45 (1923) 1657; C.M. Martin, J.W.G. Neuhaus, F.H. Reuter, Analyst 71 (1946) 29-31] .

Até o momento, o único hidrato que tem sido caraterizado em detalhe é um penta-hidrato de MTC [J.O. Warwicker, J. Chem. Soc. (1955) 2531; H.E. Marr III, J.M. Stewart, M.F. Chiu, Acta Cryst. B29 (1973) 847]. Para este hidrato, até os dados de raios X de cristal único estão disponíveis. Consiste em colunas π-empilhadas de catiões de metiltionínio que são dispostas em planos perpendiculares ao eixo α do cristal. As moléculas de água e os iões de cloreto estão localizados entre estas camadas, nas quais os iões de cloreto são concentrados em planos praticamente perpendiculares aos planos de água e paralelos ao eixo das colunas. Os iões de cloreto são coordenados com três pontes de hidrogénio de 3/2 de moléculas de água.

Presumivelmente, a mesma estrutura foi anteriormente atribuída a um tetra-hidrato [W.H. Tailor, Z. Krist. 91 (1935) 450]. Descreveu-se que uma transição de fase entre o penta-hidrato e uma segunda forma polimórfica ocorre perto de 30 °C em suspensão aquosa [S.W. Bodman, S.P. Kodama, P.C. Pfeil, R.E. Stevens, J. Chem. Eng. Data 12 (1967) 500]. A segunda forma foi também obtida através de secagem por vácuo do penta-hidrato, à temperatura ambiente, e indicou-se que o seu conteúdo de água se eleva a cerca de 1 mol/mol. A forma no estado sólido de um composto é de grande importância para aplicações farmacêuticas. Pode influenciar a estabilidade química e física do próprio composto e das suas formulações, pode ter um impacto sobre a farmacocinética e a biodisponibilidade. No caso de hidratos, a composição tem também uma influência sobre a dosagem correta do ingrediente farmacêutico ativo. O cloreto de metiltionínio usado em composições farmacêuticas é descrito como um tri-hidrato (USP Material Safety Data Sheet for Methylene Blue (Número de Catálogo 1428008), 2005), que é pensado que seja penta-hidrato de cloreto de metiltioninio misturado com outros componentes. A mistura ou componentes na mistura são estáveis sob condições diferentes, eles podem converter-se a outras espécies polimórficas ou pseudopolimórficas e, consequentemente, alterar a sua composição, de modo que a dosagem correta é um problema de estabilidade na armazenagem e pode ser considerada como sendo insuficiente. A presente invenção proporciona formas polimórficas especificas de hidratos de cloreto de metiltioninio, bem como processos seguros e reprodutíveis para a sua preparação. A presente invenção também proporciona formas polimórficas específicas de hidratos de cloreto de metiltionínio, que são estáveis sob condições definidas, e que têm uma boa solubilidade e biodisponibilidade. A presente invenção proporciona formas polimórficas específicas de hidratos de cloreto de metiltionínio, que podem ser facilmente medidas para chegar ao conteúdo definido em composições farmacêuticas, a fim de administrar quantidades exatas do composto ativo.

Descreve-se no presente documento MTC substancialmente na Forma B cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltionínio.

Em alguns casos, a Forma B não é exatamente um di-hidrato, mas pode conter uma pequena quantidade de água (por exemplo, -0,2-0,3 equivalentes) em excesso de di-hidrato. No entanto, por conveniência é no presente documento referida como Forma B cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltionínio. A Forma B cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltionínio tem um padrão de difração de pó de raios X (comprimento de onda 1,54180 Á) contendo picos específicos nos seguintes valores de 2Θ (± 0,1 °): 5,8, 11,2, 25,3, 26, 8 . A Forma B cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltioninio pode também ter os seguintes picos adicionais num padrão de difração de pó de raios X nos seguintes valores de 2Θ (± 0,1o): 15,6, 16,9, 20,3, 28,3. A Forma B cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltioninio pode também ser caraterizada por qualquer combinação de três ou mais picos selecionados a partir da lista de 8 picos acima, com uma preferência dada a picos em ângulos baixos.

Um padrão de XRD de pó representativo de Forma B cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltioninio é mostrado na Figura 1.

Sem desejar estar preso à teoria, a Forma B é uma forma termodinamicamente meta-estável à temperatura

ambiente em todo o intervalo de humidade relativa. Raios X de pó e DSC indicam o caráter cristalino da forma B. A termogravimetria (TG, taxa de aquecimento 10 °C/min) resulta numa perda de água de 10,6 % ou de 10,9 a 11,5 % entre a temperatura ambiente e 150 °C, correspondente a um conteúdo de água de cerca de 2, por exemplo, 2,2-2,3

moléculas de água por molécula de azul de metileno. A análise de TG permite que a Forma B seja distinguida das Formas A e E. A Forma B pode também ser caraterizada usando

Calorimetria Diferencial de Varrimento (DSC). Quando submetida a DSC, com uma taxa de aquecimento 100 °C/min num cadinho de ouro, a Forma B tem um pico de fusão a 186 °C com um patamar à temperatura mais baixa. Quando submetida a DSC, com uma taxa de aquecimento de 20 °C/min num cadinho de ouro, a Forma B exibe um pequeno pico endotérmico próximo a 100 °C e um pico de fusão a 183 °C com um patamar à temperatura mais baixa. O pico de fusão é imediatamente seguido de decomposição. A Forma B pode também ser caraterizada usando espectroscopia de reflexão total atenuada no infravermelho (RTA-IV). Sinais de IV caraterísticos da forma B são encontrados a 1068, 877, e 839 cm-1. A Forma B cristalina é obtida como um pó esverdeado. A Forma B de di-hidrato de cloreto de metiltionínio é solúvel em metanol e ácido acético e possui uma solubilidade baixa a moderada em água, ácido clorídrico e outros solventes orgânicos. Sua solubilidade é semelhante a essa da Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio.

Também se descreve no presente documento um processo para a preparação da Forma B, que compreende a secagem de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio da Forma A sólida numa temperatura elevada e humidade baixa. A temperatura é preferentemente pelo menos 40 °C, ou mesmo 50 °C, e pode ser inferior a 70 °C. Em formas de realização preferidas, a temperatura é de cerca de 60 °C. A humidade é preferentemente abaixo de 40 % de h.r, e é mais preferentemente cerca de 35 % de h.r., ou menos. A secagem deveria continuar durante um tempo suficiente para obter a conversão para a Forma B.

Também se descreve no presente documento um processo para a preparação da Forma B cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltionínio, que compreende expor a Forma A sólida de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio à temperatura ambiente a um fluxo de gás inerte que tem uma humidade relativa de 8 a 15 %. A humidade relativa é preferentemente de 9 a 12 % à temperatura ambiente. Exemplos para gases inertes são ar, azoto, hélio, néon, árgon e crípton, ou misturas dos mesmos. A Forma A sólida de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio é preferentemente na forma de um pó cristalino, que pode ser agitado para acelerar a operação de secagem. O tempo de exposição depende da quantidade da Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio e pode variar de horas a diversas semanas.

Temperatura ambiente pode significar uma temperatura de 15 a 30 °C e preferentemente 20 a 25 °C.

Os presentes inventores também encontraram que cloreto de metiltioninio existe em pelo menos duas formas cristalinas de di-hidrato adicionais, a seguir no presente documento denominadas formas C e D.

Um aspeto da presente invenção é uma Forma C cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltioninio. A Forma C cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltioninio tem um padrão de difração de pó de raios X caraterístico contendo picos específicos nos seguintes valores de 2Θ (± 0,1 °): 8,1, 11,1, 17,6, 25,9, 27,2. A Forma C cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltioninio pode também ter os seguintes picos adicionais num padrão de difração de pó de raios X nos seguintes valores de 2Θ (± 0,1 °): 16,2, 17, 8, 24,4, 30,8, 31,3, 33, 0 . A Forma C cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltioninio pode também ter os seguintes picos adicionais num padrão de difração de pó de raios X nos seguintes valores de 2Θ (± 0,1 °): 13,4, 18,4, 28,7, 29,5, 30,0, 34,1,36, 0, 36,7, 39,5, 42,7, 45,3, 48, 0. A Forma C cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltioninio pode também ser caraterizada por qualquer combinação de cinco ou mais picos selecionados a partir da lista de 23 picos acima, com uma preferência dada a picos em ângulos baixos.

Um padrão de XRD de pó representativo de di-hidrato de cloreto de metiltioninio Forma C cristalina é mostrado na Figura 2.

Sem desejar estar preso à teoria, a Forma C é a forma termodinamicamente estável à temperatura ambiente e uma humidade relativa de inferior a 40 % e baixa a cerca de 10 %, ou baixa possivelmente ainda a 4 %. Este amplo intervalo de estabilidade termodinâmica (em comparação com as Formas B, D ou E) , que em adição amplia a temperaturas mais elevadas, torna a Forma C a forma escolhida para os processos de preparação, armazenagem ou utilização acima de temperaturas de 25 °C. Difração de raios X do pó e DSC indicam o caráter cristalino da forma C. A termogravimetria (TG) , com uma taxa de aquecimento de 10 °C/min, indica uma perda de água de cerca de 9,8 a 11,4 % entre a temperatura ambiente e 150 °C correspondente a um conteúdo de água de cerca de 1,9 a 2,3 moléculas de água por molécula de azul de metileno. Em formas de realização preferidas, a termogravimetria com uma taxa de aquecimento 10 °C/min indicou uma perda de água de cerca de 9,8 a 10,7 % entre a temperatura ambiente e 150 °C, em duas etapas. A perda total de água corresponde a um conteúdo de água de quase exatamente duas moléculas de água por molécula de azul de metileno. A presença de duas etapas é caraterístico do perfil de TG da Forma C. A análise de TG permite que a Forma C seja distinguida das Formas A e E. A Forma C pode também ser caraterizada usando Calorimetria Diferencial de Varrimento (DSC) . Quando submetida a DSC, com uma taxa de aquecimento de 100 °C/min num cadinho de ouro, a Forma C tem duas máximas endotérmicas a 151 °C e 183 °C. A Forma C pode também ser caraterizada usando espectroscopia de reflexão total atenuada no infravermelho (RTA-IV). Sinais de IV caraterísticos da forma C são encontrados a 1497/1483 (pico duplo), 1438, 1301, e 1060 cm-1 . A Forma C cristalina é obtida como um pó esverdeado com um brilho dourado.

Um aspeto adicional da invenção é um processo para a preparação da Forma C por meio da recristalização de cloreto de metiltionínio contendo água ou hidratos específicos de dimetilsulfóxido. A Forma C pode também ser preparada por meio de equilibração de suspensão das Formas A ou B ou outras formas polimórficas em acetonitrilo ou isopropanol na presença de quantidades pequenas de água. Portanto, outro aspeto da presente invenção é um processo para a preparação da Forma C di-hidrato de cloreto de metiltioninio, em que um cloreto de metiltioninio contendo água ou uma mistura de vários hidratos ou um hidrato especifico de cloreto de metiltioninio é suspenso e agitado à temperatura ambiente num solvente selecionado a partir do grupo que compreende isopropanol, 1-propanol, 1-butanol, 2- butanol, terc-butanol, tetrahidrofurano, dioxano, acetona, 2-butanona, e acetonitrilo, ou misturas dos mesmos, contendo uma quantidade pequena de água.

Os solventes orgânicos selecionados incluindo misturas de pelo menos dois solventes preferentemente possuem uma solubilidade baixa para Forma C de di-hidrato de MTC na temperatura de isolamento deste produto cristalino, que é tipicamente à temperatura ambiente ou inferior. Uma solubilidade de menos de 20 g/1 e em particular menos de 2 g/1 à temperatura ambiente é preferida. O solvente é miscivel com água, e sua pressão de vapor preferentemente excede a da água. A quantidade de hidratos na suspensão pode ser de 1 a 70 %, preferentemente de 5 a 60 %, mais preferentemente de 5 a 50 % e particularmente preferido de 10 a 40 % em peso, referido como a quantidade de solvente. Temperatura ambiente pode significar uma temperatura de 15 a 30 °C e preferentemente 20 a 25 °C. A quantidade pequena apropriada de água depende da quantidade de água já proporcionada pelos hidratos de cloreto de metiltioninio adicionados inicialmente, a concentração de cloreto de metiltioninio na suspensão, e a atividade da água no solvente escolhido como uma função do conteúdo de água. Quando conduzido à temperatura ambiente, o conteúdo de água no final do processo de transformação tem que corresponder a uma atividade da água entre 0,04 e 0,4, preferentemente 0,1 e 0,3 (correspondente a 4 a 40 respetivamente 10 a 30 % de humidade relativa). O tratamento deveria ser longo o suficiente para a conversão das outras formas na Forma C. O tempo de tratamento principalmente depende da quantidade de sólido na suspensão e a composição do material de partida e pode ser desde horas até diversos dias.

Em seguida à conversão na Forma C, o sólido pode ser isolado. O isolamento do sólido é levado a cabo por meio da filtração. Em seguida ao isolamento, o solvente pode ser removido da Forma C. A remoção de solvente pode ser levada a cabo a vácuo e numa temperatura abaixo de 100 °C, preferentemente abaixo de 50 °C, e o mais preferido próximo à temperatura ambiente. Alternativamente, um fluxo de gás com uma humidade relativa, que corresponde ao intervalo de estabilidade do hidrato, pode ser passado sobre a amostra para secagem.

Também se descreve no presente documento Forma D cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltioninio. A Forma D cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltioninio tem um padrão de difração de pó de raios X contendo picos específicos nos seguintes valores de 2Θ (± 0,1o): 7, 0, 8,5, 12,0, 14,4, 25,3, 25,7, 27,5. A Forma D cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltioninio pode também ter os seguintes picos adicionais num padrão de difração de pó de raios X nos seguintes valores de 2Θ (± 0,1o): 6,0, 10,4, 20,9, 21,1,21,7, 22,3, 23,7, 24,5, 26, 9, 28,5, 29,0, 30,4, 31,8. A Forma D cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltioninio pode também ter os seguintes picos adicionais num padrão de difração de pó de raios X nos seguintes valores de 2Θ (± 0,1o): 9,8, 16,3, 17,1, 18,1,34,9, 41,5, 46,5. A Forma D cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltioninio pode também ser caraterizada por qualquer combinação de cinco ou mais picos selecionados a partir da lista de 27 picos acima, com uma preferência dada a picos em ângulos baixos.

Um padrão de XRD de pó representativo da Forma D cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltioninio é mostrado na Figura 3.

Sem desejar estar preso à teoria, a Forma D é meta-estável termodinamicamente à temperatura ambiente e sobre todo o intervalo de humidade relativa. Difração de raios X do pó e DSC indicam o caráter cristalino da forma D. A termogravimetria (TG, taxa de aquecimento 10 °C/min) resulta numa perda de água de cerca de 9,3 a 11,2 % entre a temperatura ambiente e 150 °C, correspondente a um conteúdo de água de cerca de 1,9 a 2,3 moléculas de água por molécula de azul de metileno. A análise de TG permite que a Forma D seja distinguida das Formas A e E. A Forma D pode também ser caraterizada usando Calorimetria Diferencial de Varrimento (DSC). Quando submetida a DSC, com uma taxa de aquecimento 100 °C/min num cadinho de ouro, a Forma D tem dois máximos de pico endotérmico a 164 °C e 185 °C e um degrau na linha de base é observado próximo a 63 °C. A Forma D pode também ser caraterizada usando espectroscopia de reflexão total atenuada no infravermelho (RTA-IV). Sinais de IV caraterísticos da forma D são encontrados a 1181, 1140, 1066, 951, e 831 cm-1. A Forma D cristalina é obtida como um pó cinza a violeta. A Forma D pura pode ser preparada por meio de processos de precipitação tal como a adição de uma solução num bom solvente a um excesso grande de um não solvente. Consequentemente, um aspeto adicional da invenção é um processo para a preparação de Forma D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio, que compreende dissolver a Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio em metanol e combinar a solução com t-butil-metil éter, por meio da adição de t-butil-metil éter à solução metanólica ou por meio da adição da solução metanólica a t-butil metil éter.

Também se descreve no presente documento um processo para a preparação da Forma D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio essencialmente pura, que compreende dissolver a Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio em ácido acético e combinar a solução com tolueno, por meio da adição de tolueno à solução de ácido acético ou por meio da adição da solução de ácido acético a tolueno. A concentração da Forma A na solução de metanol ou ácido acético pode variar de 1 a 30 % em peso e preferentemente de 5 a 20 % em peso, com base na quantidade de metanol ou ácido acético. A quantidade de t-butil-metil éter ou tolueno pode ser igual ao volume de metanol ou ácido acético, mas preferentemente excede este volume em pelo menos um fator de 5, mais preferentemente num fator de 10 .

Após a precipitação da Forma D em qualquer dos dois métodos acima, o sólido pode ser isolado por meio da filtração. Após isolamento, o solvente pode ser removido da Forma D. O solvente é removido por meio de secagem a vácuo ou num fluxo de gás inerte, pelo qual a humidade relativa do ar em todas as etapas de processo é inferior a 50 %, e preferentemente inferior a 40 %.

Os presentes inventores também encontraram que azul de metileno forma um monoidrato cristalino.

Também se descreve no presente documenta Forma E cristalina de monoidrato de cloreto de metiltionínio. A Forma E cristalina de monoidrato de cloreto de metiltionínio tem um padrão de difração de pó de raios X caraterístico contendo picos específicos nos seguintes valores de 2Θ (± 0,1o): 9,0, 12,5, 14,1, 14,4, 18,1, 23,2, 24,1, 26, 0. A Forma E cristalina de monoidrato de cloreto de metiltioninio pode também ter os seguintes picos adicionais num padrão de difração de pó de raios X nos seguintes valores de 2Θ (± 0,1°) : 24,5, 27,2. A Forma E cristalina de monoidrato de cloreto de metiltioninio pode também ter os seguintes picos adicionais num padrão de difração de pó de raios X nos seguintes valores de 2Θ (± 0,1o): 21,8, 22,1, 28,4, 29,6, 32,0, 39,3, 41,7, 47,1 A Forma E cristalina de monoidrato de cloreto de metiltioninio pode também ser caraterizada por qualquer combinação de cinco ou mais picos selecionados a partir da lista de 18 picos acima, com uma preferência dada a picos em ângulos baixos.

Um padrão de XRD de pó representativo da Forma E cristalina de monoidrato de cloreto de metiltioninio é mostrado na Figura 4.

Sem desejar estar preso à teoria, a Forma E é termodinamicamente estável à temperatura ambiente numa humidade relativa de menos de cerca de 10 %, ou inferior a cerca de 4 %, e baixa a cerca de 2 %. Difração de raios X do pó indica o caráter cristalino da forma E. A termogravimetria (TG, taxa de aquecimento 10 °C/min) resulta numa perda de água de 5,1 % a 5,4 % entre a temperatura ambiente e 110 °C, correspondente a um conteúdo de água de uma molécula de água por molécula de azul de metileno. TG pode ser usado para distinguir a Forma E das formas A, B, C e D. A Forma E pode também ser caraterizada usando

Calorimetria Diferencial de Varrimento (DSC). Quando submetida a DSC, com uma taxa de aquecimento de 100 °C/min num cadinho de ouro, a Forma E não mostra nenhum evento térmico até a temperatura de decomposição próxima a 220 °C. A Forma E pode também ser caraterizada usando espectroscopia de reflexão total atenuada no infravermelho (RTA-IV). Sinais de IV caraterísticos da forma E são encontrados a 1350, 1323, 1242, 1218, 1175, 1134, e 1035 cirT1. A Forma E cristalina é obtida como um pó de cor ocre, A Forma E pura pode ser preparada por meio de equilibração de suspensão de cloreto de metiltionínio contendo água ou formas A, B, C ou D ou misturas do mesmo sob condições secas num solvente. Solventes adequados incluem aqueles usados na equilibração de suspensão para a preparação da forma C de di-hidrato de cloreto de metiltionínio, nomeadamente isopropanol, 1-propanol, 1-butanol, 2-butanol, 2-metil-2-butanol, tetrahidrofurano, dioxano, acetona, 2-butanona, e acetonitrilo. Consequentemente, outro aspeto da presente invenção é um processo para a preparação de forma E cristalina de mono-hidrato de cloreto de metiltionínio, em que cloreto de metiltionínio contendo água ou uma mistura de vários hidratos ou um hidrato específico de cloreto de metiltionínio é suspenso e agitado à temperatura ambiente num solvente seco, preferentemente isopropanol. A quantidade de hidratos na suspensão pode ser de 1 a 70 %, preferentemente de 5 a 60 %, mais preferentemente de 5 a 50 % e particularmente preferido de 10 a 40 % em peso, referido como a quantidade de não solvente. Temperatura ambiente pode significar uma temperatura de 15 a 35 °C e preferentemente 20 a 35 °C. Um ciclo de temperatura de 20 a 35 °C dentro de, por exemplo, 30 minutos podem ser aplicado para facilitar a remoção de água. Isopropanol seco significa um conteúdo de água de menos de 1 % em peso em isopropanol, preferentemente inferior a 0,1 % em peso. O tempo de tratamento deveria ser suficiente para permitir a conversão à Forma E. O tempo de tratamento principalmente depende da quantidade de sólido na suspensão e pode ser desde horas até diversas semanas. Após um tempo de equilibração apropriado, o solvente pode ter que ser removido e ser substituído por novo solvente seco com a finalidade de manter o conteúdo de água baixo.

Após a formação da Forma E, o sólido pode ser isolado. 0 isolamento do sólido é levado a cabo por meio da filtração. Após o isolamento do sólido, o solvente pode ser removido da Forma E. A remoção de solvente pode ser levada a cabo a vácuo e numa temperatura abaixo de 100 °C, preferentemente abaixo de 50 °C, e o mais preferido próximo à temperatura ambiente. Alternativamente, um fluxo de gás com uma humidade relativa, que corresponde ao intervalo de estabilidade do hidrato, pode ser passado sobre a amostra para secagem.

Pureza

Em cada um dos aspetos acima, cloreto de metiltionínio é preferentemente substancialmente na Forma descrito. "Substancialmente na Forma descrita" significa que pelo menos 50 % em peso de cloreto de metiltionínio é na Forma descrita, preferentemente pelo menos 70 % em peso, 80 % ou 90 % em peso. Em algumas formas de realização, pelo menos 95 % em peso, 99 % em peso ou mesmo 99,5 % ou mais em peso pode ser na forma cristalina descrita.

Em cada um dos aspetos acima, cloreto de metiltionínio é preferentemente substancialmente livre de solvente. O termo "substancialmente livre de solvente" como usado no presente documento refere-se à forma que tem somente quantidades não significativas de qualquer solvente, por exemplo, uma forma com um total de 0,5 % em peso ou menos de qualquer solvente. A quantidade total de qualquer solvente pode ser 0,25 %, 0,1 %, 0,05 % ou 0,025 % em peso ou menos.

Composições

Também se descrevem no presente documento composições que compreendem a Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de metiltionínio, como descrito no presente documento.

Num exemplo a composição compreende ainda um veiculo farmaceuticamente aceitável, diluente, ou excipiente. Métodos de inativação de agentes patogénicos

Também se descreve a utilização da Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de metiltionínio, como descrito no presente documento, num método de inativação de um agente patogénico numa amostra (por exemplo uma amostra de sangue ou plasma), o método compreende introduzir o composto na amostra, e expor a amostra à luz. Métodos de Tratamento Médico

Também se descreve uma Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de metiltionínio, como descrito no presente documento, para utilização num método de tratamento (por exemplo, de uma condição de doença) do corpo humano ou animal por meio de terapêutica.

Também se descreve a utilização da Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de metiltionínio, como descrito no presente documento, para o fabrico de um medicamento para utilização no tratamento de uma condição de doença.

Também se descreve a utilização da Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de metiltionínio, como descrito no presente documento, no tratamento de uma condição de doença.

Também se descreve um método de tratamento de uma condição de doença num paciente, que compreende administrar ao dito paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz da Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de metiltionínio, como descrito no presente documento.

Condições de Doença

Numa forma de realização, a condição de doença é uma tauopatia.

Uma "tauopatia" é uma condição em que proteína tau (e função aberrante ou processamento da mesma) desempenha um papel. A Doença de Alzheimer é um exemplo de uma tauopatia. A patogénese de distúrbios neurodegenerativos tais como doença de Pick e Paralisia Supranuclear Progressiva (PSP) parecem correlacionar com um acúmulo de agregados de tau truncados patológicos no giro dentado e células piramidais estreladas do neocórtex, respetivamente. Outras demências incluem demência frontotemporal (FTD); parkinsonismo ligado ao cromossoma 17 (FTDP-17); complexo de desinibição-

demência-parkinsonismo-amiotropia (DDPAC); degeneração pallido-ponto-nigral (PPND); síndrome de Guam-ALS; degeneração pallido-nigro-luisiana (PNLD); degeneração cortico-basal (CBD) e outras (veja-se, por exemplo, Wischik, C.M., Theuring, F. & Harrington, C.R. (2000) A base molecular da patologia da proteína tau na doença de

Alzheimer e demências neurodegenerativas relacionadas. Na Neurobiologia da Doença de Alzheimer (Eds. D. Dawbarn & S. J. Allen) Oxford University Press, Oxford, 103-206, especialmente Quadro 5.1 no mesmo). Cada uma destas doenças, que é caraterizada primariamente ou parcialmente por agregação de tau anormal, é referida como no presente documento como uma "tauopatia."

Numa forma de realização, a condição de doença é doença de Alzheimer (DA).

Numa forma de realização, a condição de doença é cancro de pele.

Numa forma de realização, a condição de doença é melanoma.

Numa forma de realização, a condição de doença é virai, bacteriana ou por protozoários.

Numa forma de realização, a condição de doença por protozoários é malaria. Nesta forma de realização o tratamento pode ser em combinação com outro agente antimicrobiano, por exemplo, em combinação com cloroquina ou atovaquona.

Numa forma de realização, a condição de doença virai é causada por Hepatite C, VIH ou virus West Nile.

Tratamento 0 termo "tratamento," como usado no presente documento no contexto de tratamento de uma condição, pertence geralmente a tratamento e terapêutica, se de um ser humano ou um animal (por exemplo, em aplicações veterinárias) , no qual algum efeito terapêutico desejado é conseguido, por exemplo, a inibição do progresso da condição, e inclui uma redução na taxa de progresso, uma paragem na taxa de progresso, a regressão da doença, melhoramento da condição, e cura da condição. 0 tratamento como medida profilática (isto é, profilaxia, prevenção) está também incluído. 0 termo "quantidade terapeuticamente eficaz," como usado no presente documento, refere-se à quantidade de um composto ativo, ou um material, composição ou forma farmacêutica que compreende um composto ativo, que é eficaz para produzir algum efeito terapêutico desejado, comensurável com uma razão razoável de risco/benefício, quando administrada de acordo com um regime de tratamento desejado. 0 termo "tratamento" inclui tratamentos e terapêuticas de combinação, na qual dois ou mais tratamentos ou terapêuticas são combinados, por exemplo, sequencialmente ou simultaneamente.

Exemplos de tratamentos e terapêuticas incluem, mas não se limitam a, quimioterapia (a administração de agentes ativos, incluindo, por exemplo, fármacos, anticorpos (por exemplo, como em imunoterapêutica), pró-fármacos (por exemplo, como em terapêutica fotodinâmica, GDEPT, ADEPT, etc.); cirurgia; terapêutica com radiação; e terapêutica génica.

Vias de Administração A Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de metiltioninio ou cloreto de metiltioninio forma E de mono-hidrato, ou composição farmacêutica que compreende o mesmo, pode ser administrada a um indivíduo/paciente por qualquer via de administração conveniente, se sistematicamente/perifericamente ou topicamente (isto é, no local de ação desejado).

As vias de administração incluem, mas não são limitadas a, oral (por exemplo, por ingestão); bucal; sublingual; transdérmica (incluindo, por exemplo, por um sistema transdérmico, emplastro, etc.); transmucosal (incluindo, por exemplo, por um sistema transdérmico, emplastro, etc.); intranasal (por exemplo, por meio de spray nasal); ocular (por exemplo, por gotas oculares); pulmonar (por exemplo, por meio de terapêutica por inalação ou insuflação usando, por exemplo, via um aerossol, por exemplo, através da boca ou nariz); retal (por exemplo, por meio de supositório ou enema); vaginal (por exemplo, por meio de pessário) ; parentérica, por exemplo, por meio de injeção, incluindo subcutânea, intradérmica, intramuscular, intravenosa, intra-arterial, intracardiaca, intratecal, intraspinal, intracapsular, subcapsular, intraorbital, intraperitoneal, intratraqueal, subcuticular, intra-articular, subaracnoide, e intrastemal (incluindo, por exemplo, injeção intracateter no cérebro); por meio de implante de um depot ou reservatório, por exemplo, subcutaneamente ou intramuscularmente. O Indivíduo/Paciente 0 indivíduo/paciente pode ser um animal, um mamífero, um mamífero placentário, um marsupial (por exemplo, canguru, vombate), um monotremo (por exemplo, ornitorrinco), um roedor (por exemplo, um porquinho-da-índia, um hamster, um rato, um ratinho), murino (por exemplo, um ratinho), um lagomorfo (por exemplo, um coelho), ave (por exemplo, um pássaro), canino (por exemplo, um cão) , felino (por exemplo, um gato), equino (por exemplo, um cavalo), porcino (por exemplo, um porco), ovino (por exemplo, uma ovelha), bovino (por exemplo, uma vaca), um primata, símio (por exemplo, um mono ou macaco), um mono (por exemplo, sagui, babuíno), um macaco (por exemplo, gorila, chimpanzé, orangotango, gibão), ou um ser humano.

Além disso, o indivíduo/paciente pode estar em qualquer de suas formas de desenvolvimento, por exemplo, um feto.

Numa forma de realização preferida, o indivíduo/paciente é um ser humano.

Formulações

Embora seja possível que a Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de metiltioninio ou cloreto de metiltionínio forma E de mono-hidrato seja usada (por exemplo, administrada) em separado, é com frequência preferível apresenta-la como uma composição ou formulação.

Numa forma de realização, a composição é uma composição farmacêutica (por exemplo, formulação, preparação, medicamento) que compreende a Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio ou Forma E de mono-hidrato de cloreto de metiltionínio, como descrito no presente documento, e um veículo farmaceuticamente aceitável, diluente, ou excipiente.

Numa forma de realização, a composição é uma composição farmacêutica que compreende pelo menos a Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de met ilt ionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de metiltioninio, como descrito no presente documento, juntamente com um ou mais outros ingredientes farmaceuticamente aceitáveis bem conhecidos aos peritos na especialidade, incluindo, mas não limitado a, veículos, diluentes, excipientes, adjuvantes, cargas, tampões, conservantes, antioxidantes, lubrificantes, estabilizantes, solubilizantes, tensioativos (por exemplo, agentes molhantes), agentes de mascaramento, agentes corantes, agentes aromatizantes, e agentes adoçantes farmaceuticamente aceitáveis.

Numa forma de realização, a composição compreende ainda outros agentes ativos, por exemplo, outros agentes terapêuticos ou profiláticos.

Veículos, diluentes, excipientes, etc. adequados podem ser encontrados em textos farmacêuticos padrão. Veja-se, por exemplo, Handbook of Pharmaceutical Additives, 2a Edição (eds. M. Ash e I. Ash), 2001 (Synapse Information Resources, Inc., Endicott, Nova Iorque, EUA), Remington's Pharmaceutical Sciences, 20a edição, pub. Lippincott, Williams & Wilkins, 2000; e Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2a edição, 1994.

Outro aspeto da presente invenção refere-se a métodos de preparação de uma composição farmacêutica que compreende misturar Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de metiltionínio [11C]-radiomarcada, como definido no presente documento, juntamente com um ou mais outros ingredientes farmaceuticamente aceitáveis bem conhecidos aos peritos na especialidade, por exemplo, veículos, diluentes, excipientes, etc. Se for formulado como unidades discretas (por exemplo, comprimidos, etc.), cada unidade contém uma quantidade predeterminada (dosagem) do composto ativo. O termo "farmaceuticamente aceitável", como usado no presente documento, refere-se a compostos, ingredientes, materiais, composições, formas farmacêuticas, etc., que são, dentro do âmbito do julgamento médico razoável, adequados para utilização em contacto com os tecidos do indivíduo em questão (por exemplo, ser humano) sem excessiva toxicidade, irritação, resposta alérgica, ou outro problema ou complicação, proporcional a uma razão benefício/risco razoável. Cada portador, diluente, excipiente, etc. precisa também ser "aceitável" no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da formulação.

As formulações podem ser preparadas por quaisquer métodos bem conhecidos na especialidade de farmácia. Tais métodos incluem a etapa de colocar em associação o composto ativo com um veículo que constitui um ou mais ingredientes acessórios. Em geral, as formulações são preparadas por meio da colocação uniforme e intima em associação do composto ativo com veículos (por exemplo, veículos líquidos, veículo sólido finamente dividido, etc.), e então moldando o produto, se for necessário. A formulação pode ser preparada para tratar de libertação rápida ou lenta; imediata, retardada, programada, ou libertação sustentada; ou uma combinação das mesmas.

As formulações adequadas para administração parentérica (por exemplo, por injeção), incluem, líquidos isotónicos, isentos de pirogénios, aquosos ou não aquosos estéreis (por exemplo, soluções, suspensões), nos quais o ingrediente ativo é dissolvido, está em suspensão, ou é de outro modo fornecido (por exemplo, num lipossoma ou outro microparticulado). Tais líquidos podem conter outros ingredientes adicionais farmaceuticamente aceitáveis, tais como antioxidantes, tampões, conservantes, estabilizantes, bacteriostáticos, agentes de suspensão, agentes espessantes, e solutos que tornam a formulação isotónica com o sangue (ou outro fluido corporal relevante) da pretendida destinatário. Exemplos de excipientes incluem, por exemplo, água, álcoois, polióis, glicerol, óleos vegetais, e semelhantes. Exemplos de veículos isotónicos adequados para utilizar nessas formulações incluem injeção de cloreto de sódio, Solução de Ringer, ou Injeção de Ringer Lactada. Tipicamente, a concentração do ingrediente ativo no líquido é de cerca de 1 ng/ml a cerca de 10 mg/ml, por exemplo, de cerca de 10 ng/ml a cerca de 1 mg/ml. As formulações podem ser apresentadas em dose unitária ou em doses múltiplas de recipientes selados, por exemplo, ampolas e frascos, e podem ser armazenadas numa condição seca por congelamento (liofilizada), que requer apenas a adição do veículo líquido estéril, por exemplo água para injeções, imediatamente antes da utilização. As soluções e suspensões injetáveis extemporâneas podem ser preparadas a partir de pós estéreis, grânulos e comprimidos.

Exemplos de Formulações Preferidas

Um aspeto da presente invenção refere-se a uma forma farmacêutica unitária (por exemplo, um comprimido ou cápsula farmacêutica) que compreende 20 a 300 mg da Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de met ilt ionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de met ilt ionínio como descrito no presente documento, e um veículo farmaceuticamente aceitável, diluente, ou excipiente.

Numa forma de realização, a forma farmacêutica unitária é um comprimido.

Numa forma de realização, a forma farmacêutica unitária é uma cápsula.

Numa forma de realização, a quantidade é 20 a 200 mg.

Numa forma de realização, a quantidade é de cerca de 2 0 mg.

Numa forma de realização, a quantidade é de cerca de 60 mg.

Numa forma de realização, a quantidade é de cerca de 100 mg.

Numa forma de realização, a quantidade é de cerca de 150 mg.

Numa forma de realização, a quantidade é de cerca de 200 mg.

Numa forma de realização, o veículo farmaceuticamente aceitável, diluente, ou excipiente é ou compreende um ou ambos de um glicérido (por exemplo, Gelucire 44/14 ®; glicéridos de lauroil macrogol-32 PhEur, USP) e dióxido de silício coloidal (por exemplo, 2 % de Aerosil 200 ®; Dióxido de Silício Coloidal PhEur, USP).

Dosagem

Será apreciado por um perito na especialidade que as dosagens apropriadas da Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de metiltionínio, e composições que compreendem a Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de metiltionínio, podem variar de paciente para paciente. Determinar a dosagem ótima envolverá geralmente o equilíbrio do nível de benefício terapêutico contra qualquer risco ou efeitos secundários prejudiciais. O nível de dosagem selecionado dependerá de uma variedade de fatores incluindo, mas não limitado a, a atividade do composto particular, a via de administração, o tempo de administração, a taxa de excreção do composto, a duração do tratamento, outras fármacos, compostos, e/ou materiais usados em combinação, a gravidade da condição, e da espécie, sexo, idade, peso, condição, saúde geral e história médica anterior do paciente. A quantidade de composto e via de administração estará em última análise à discrição do médico, veterinário ou clínico, apesar de, em geral, a dosagem ser selecionada para atingir concentrações locais no local de ação que atinjam o efeito desejado sem causar substanciais ou prejudiciais efeitos secundários deletérios. A administração pode ser efetuada numa dose, continuamente ou intermitentemente (por exemplo, em doses divididas em intervalos apropriados) ao longo do curso do tratamento. Os métodos de determinação dos meios mais eficazes e dosagem de administração são bem conhecidos dos peritos na especialidade e variarão com a formulação usada para terapêutica, o objetivo da terapêutica, a(s) célula(s) alvo a ser(em) tratada(s) e o indivíduo a ser tratado. As administrações únicas ou múltiplas podem ser realizadas com 0 nível de dose e padrão selecionados pelo médico assistente, veterinário ou clínico.

De um modo geral, uma dose adequada da Forma B, C ou D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de metiltionínio é no intervalo de cerca de 100 ng a cerca de 25 mg (mais tipicamente cerca de 1 mg a cerca de 10 mg) por quilograma de peso corporal do indivíduo ao dia.

Numa forma de realização, a Forma B, C ou D de di- hidrato de cloreto de met ilt ionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de metiltionínio é administrada a um paciente humano de acordo com o seguinte regime de dosagem: cerca de 100 mg, 3 vezes diariamente.

Numa forma de realização, a Forma B, C ou D de di- hidrato de cloreto de met ilt ionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de metiltionínio é administrada a um paciente humano de acordo com o seguinte regime de dosagem: cerca de 150 mg, 2 vezes diariamente.

Numa forma de realização, a Forma B, C ou D de di- hidrato de cloreto de met ilt ionínio ou Forma E de monoidrato de cloreto de metiltionínio é administrada a um paciente humano de acordo com o seguinte regime de dosagem: cerca de 200 mg, 2 vezes diariamente.

Breve Descrição das Figuras A Figura 1 é um padrão de difração de pó de raios X caraterístico da Forma B cristalina contendo água de cloreto de metiltionínio; A Figura 2 é um padrão de difração de pó de raios X caraterístico da Forma C cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltionínio; A Figura 3 é um padrão de difração de pó de raios X caraterístico da Forma D cristalina de di-hidrato de cloreto de metiltionínio;

A Figura 4 é um padrão de difração de pó de raios X caraterístico da Forma E cristalina de monoidrato de cloreto de metiltionínio.

Os seguintes exemplos ilustram a presente invenção sem limitar o âmbito descrito.

Experimental:

Difração de raios X do pó (PXRD) : PXRD foi realizada num difratómetro de raios X de pó Bruker D8 Advance usando radiação CuKa. Os espaçamentos D são calculados a partir dos valores de 2Θ usando o comprimento de onda de 1,54180 Â. Geralmente, os valores de 2Θ estão dentro de um erro de ±0,1-0,2o. O erro experimental nos valores de espaçamento d é portanto dependente da localização do pico.

Calorimetria Diferencial de Varrimento (DSC): Perkin

Elmer DSC 7, medições realizadas em recipiente de ouro para amostras hermeticamente vedado sob condições ambientes. Uma taxa de aquecimento de 20 K/min ou 100 K/min foi usado. Todos os pontos de fusão dados no presente documento são determinados a partir das temperaturas de pico das medições de DSC.

Termogravimetria (TG): Perkin Elmer TGS 2. Cadinho de alumínio (aberto), atmosfera de N2, taxa de aquecimento 10 °C min-1, intervalo 25-350 °C.

Medições termogravimétricas com deteção de IV (TG-FTIR) : Netzsch Thermo-Microbalance TG 209 acoplado a um

Espetómetro de FTIR Vector 22 Bruker (recipientes para amostras com orifício, atmosfera de azoto, taxa de aquecimento 10 K/min).

Forma A de hidrato A Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio pode ser obtida por meio de recristalização do produto preparado de acordo com o documento WO 2006/032879 de ácido clorídrico a 0,1 Me secagem a vácuo a cerca de 60 mbar e temperatura ambiente (veja-se Exemplo 17) . Como uma comparação, valores d (A) são dados no quadro 1 para a forma A.

As abreviaturas entre parênteses significam: (vs) = intensidade muito forte; (s) = intensidade forte; (m) = intensidade média; e (w) = intensidade fraca.

Sinais de IV caraterísticos da forma A em RTA-IV são encontrados a 1491, 1421, 1356, 1225/1215 (pico duplo), 1177, e 1151 cm-1. A) Preparação da Forma B de polimorfo (Exemplos de referência)

Exemplo AI: 150 mg de penta-hidrato cristalino de cloreto de metiltionínio são aquecidos até 60 °C durante 5 dias a 35 % de h.r. A termogravimetria no produto mostra uma perda de peso de 10,6 % até uma temperatura de 150 °C, que corresponde à presença de duas equivalentes de água. PXRD revelou uma amostra cristalina. O padrão de difração de pó de raios X é mostrado na Figura 1 e os picos caraterísticos em 2Θ com os valores de espaçamento d correspondentes em A são dados no Quadro 2. DSC (-50 °C a 210 °C, 100 °C/min, cadinho de ouro) revelou um pico de fusão a 186 °C com um patamar à temperatura mais baixa.

Exemplo A2: 1 g de pó de Forma A cristalina de penta-hidrato de cloreto de metiltioninio, contaminado com uma quantidade pequena da forma B, foi armazenado à temperatura ambiente durante 3 semanas sob agitação com um pequeno agitador magnético sob um fluxo de azoto humidificado que tem aproximadamente 9 % de humidade relativa. A desidratação é completada após 3 semanas e produz quantitativamente a Forma B de di-hidrato de cloreto de metiltioninio como pó de cristal esverdeado. PXRD corresponde a este do exemplo AI.

Exemplo A3: 2 g de pó de Forma A cristalina de penta-hidrato de cloreto de metiltioninio, contaminados com uma quantidade pequena da forma B, foram armazenados à temperatura ambiente durante 4 semanas sob agitação com um pequeno agitador magnético sob um fluxo de azoto humidificado que tem aproximadamente 14 % de h.r. A desidratação é completada após 3 semanas e produz quantitativamente a Forma B de di-hidrato de cloreto de metiltioninio como pó de cristal esverdeado. PXRD corresponde a este do exemplo AI. B) Preparação de forma C de polimorfo

Exemplo BI:

Uma mistura da Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltioninio e Forma B de di-hidrato de cloreto de metiltioninio (170 mg) foi suspensa em 2 ml de acetonitrilo e agitada à temperatura ambiente durante 4 dias. O sólido foi retirado por filtração e seco a vácuo a 1 mbar e à temperatura ambiente durante 15 minutos. 110 mg da forma C de di-hidrato de cloreto de metiltioninio foram obtidos como pó de cristal esverdeado. PXRD revelou uma amostra cristalina. O padrão de difração de pó de raios X é mostrado na Figura 2 e os picos caraterísticos em 2Θ com os valores de espaçamento d correspondentes em A são dados no Quadro 3. TG-FTIR revelou uma perda de massa de cerca de 11,4 % em duas etapas entre a temperatura ambiente e 150 °C, que corresponde a um conteúdo de água de 2,2 equivalentes, que é ligeiramente mais do que o esperado para o di-hidrato. DSC (-50 °C a 210 °C, 100 °C/min, cadinho de ouro) revelou dois picos endotérmicos a 151 °C e 183 °C.

Exemplo B2: 175 mg de uma mistura da Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio e Forma B de di-hidrato de cloreto de metiltionínio foram dissolvidos em cerca de 100 °C em 3 ml de dimetilsulfóxido (DMSO). A solução foi deixada que se arrefecesse até a temperatura ambiente e armazenada durante a noite num refrigerador. A mistura sólida arrefecida foi deixada que se aquecesse até a temperatura ambiente, pelo qual o DMSO se funde. O sólido restante foi retirado por filtração e seco a vácuo a 1 mbar e à temperatura ambiente. Isto produz 135 mg de forma C de di-hidrato de cloreto de metiltionínio esverdeado. O PXRD corresponde a este do exemplo Bi.

Exemplo B3: 2 g da Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio foram suspensos em 10 ml de acetonitrilo e agitados à temperatura ambiente durante 6 dias. 0 sólido foi retirado por filtração e seco a vácuo a 1 mbar e à temperatura ambiente durante 15 minutos. Este procedimento foi repetido duas vezes. A forma C pura de di-hidrato de cloreto de metiltioninio foi obtida como pó de cristal esverdeado. 0 PXRD corresponde a este do exemplo BI. A termogravimetria revelou uma perda de massa de 9,8 % em duas etapas entre a temperatura ambiente e 150 °C. A perda total de massa corresponde quase exatamente a um conteúdo de água de 2 equivalentes.

Exemplo B4: 100 mg de uma mistura que compreende a Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltioninio, Forma B de di-hidrato de cloreto de metiltioninio, forma C de di-hidrato de cloreto de metiltioninio e Forma D de di-hidrato de cloreto de metiltioninio foram suspensos em 2 ml de isopropanol contendo 20 ml de água (correspondente a cerca de 12 % de humidade relativa) . A suspensão foi agitada à temperatura ambiente durante 6 dias. O sólido é retirado por filtração e seco a vácuo a 1 mbar e à temperatura ambiente durante 5 minutos. Isto produziu a forma C pura de di-hidrato de cloreto de metiltioninio como pó de cristal esverdeado. O PXRD corresponde a este do exemplo BI.

Exemplo B5:

100 mg de uma mistura que compreende a Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltioninio, Forma B de di-hidrato de cloreto de metiltioninio, forma C de di-hidrato de cloreto de metiltioninio e Forma D de di-hidrato de cloreto de metiltioninio foram suspensos em 2 ml de isopropanol contendo 50 ml de água (cerca de 28 % de h.r.). A suspensão foi agitada à temperatura ambiente durante 6 dias. O sólido foi retirado por filtração e seco sob vácuo a 1 mbar e à temperatura ambiente durante 5 minutos. Isto produziu a forma pura C de di-hidrato de cloreto de metiltioninio como pó de cristal esverdeado. O PXRD corresponde a este do exemplo BI. 100 mg do produto em pó foi prensado a um comprimido numa pressão de 1 to/0,5 cm2. A Forma C foi retida no comprimido. O PXRD corresponde a este do exemplo Bi.

Exemplo B6: 500 mg da Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio foram suspensos em 10 ml de isopropanol e agitados durante 2 semanas. O sólido foi retirado por filtração e seco sob vácuo a 1 mbar e à temperatura ambiente durante 5 minutos. Isto produziu a forma C de di-hidrato de cloreto de metiltionínio como pó de cristal esverdeado. O PXRD corresponde a este do exemplo Bi. C) Preparação da forma D de hidrato (Exemplos de referência)

Exemplo Cl: 100 mg da Forma B de di-hidrato de cloreto de metiltionínio foram dissolvidos em 2 ml de ácido acético puro. A solução foi filtrada através de um filtro de seringa de 0,2 pm e adicionada a 10 ml de tolueno. Um precipitado pegajoso forma-se dentro de um curto tempo. O sólido foi retirado por filtração cerca de 3 minutos após a precipitação, lavado com tolueno e seco sob vácuo a 1 mbar e à temperatura ambiente durante 15 minutos. Isto produz 70 mg da forma D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio como pó de cristal cinza a violeta. PXRD revelou uma amostra cristalina. O padrão de difração de pó de raios X é mostrado na Figura 3 e os picos caraterísticos em 2Θ com os valores de espaçamento d correspondentes em A são dados no Quadro 4. TG revelou uma perda de massa de cerca de 9,3 % e TG-FTIR revelou uma perda de massa de cerca de 11,0 % entre a temperatura ambiente e 150 °C, que corresponde a um conteúdo de água de 2,2 equivalentes, que é ligeiramente mais do que o esperado para o di-hidrato. DSC (-50 °C a 210 °C, 100 °C/min, cadinho de ouro) revelou dois picos endotérmicos a 164 °C e 185 °C.

Exemplo C2: 118 mg da Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio foram dissolvidos em 2 ml de ácido acético puro. A solução foi filtrada através de um filtro de seringa de 0,2 pm e adicionada a 10 ml de tolueno. Um precipitado pegajoso forma-se dentro de um curto tempo. O sólido foi retirado por filtração cerca de 3 minutos após a precipitação, lavado com tolueno e seco à temperatura ambiente durante 60 minutos. Isto produziu a forma D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio como um pó de cristal cinza a violeta. O PXRD corresponde a este do exemplo Cl. Exemplo C3: 1 g da Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio foi dissolvido em 10 ml metanol. A solução é filtrada através de um filtro de seringa de 0,2 pm e adicionada sem agitação o 100 ml de t-but il-met il éter (tBME). Um precipitado forma-se dentro de um curto tempo. O sólido foi retirado por filtração cerca de 3 minutos após a precipitação, lavado com tBME e seco num fluxo de azoto durante 1 hora. Isto produz 850 mg da forma D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio como pó de cristal cinza a violeta. O PXRD corresponde a este do exemplo Cl. D) Preparação da Forma E de hidrato (Exemplos de referência)

Exemplo Dl: 8 0 mg de uma mistura que compreende a Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio, Forma B de di-hidrato de cloreto de metiltionínio, forma C de di-hidrato de cloreto de metiltionínio e Forma D de di-hidrato de cloreto de metiltionínio foram suspensos em 2 ml de isopropanol seco contendo menos de 0,1 % em peso de água. A suspensão foi agitada sob ciclos de temperatura entre 25 °C e 35 °C durante 1 semana. O sólido foi filtrado e seco sob vácuo a 1 mbar e à temperatura ambiente durante 5 minutos. Isto produziu a Forma E de mono-hidrato de cloreto de metiltionínio como pó de cristal ocre. PXRD revelou uma amostra cristalina. O padrão de difração de pó de raios X é mostrado na Figura 4 e os picos caraterísticos em 2Θ com os valores de espaçamento d correspondentes em A são dados no Quadro 5. TG revelou uma perda de massa de cerca de 5,1 % entre a temperatura ambiente e 125 °C, que corresponde a um conteúdo de água de 1 equivalente. DSC (-50 °C a 210 °C, 100 °C/min, cadinho de ouro) não revelou nenhum evento térmico até a temperatura de decomposição de cerca de 200 °C.

Exemplo D2: 1 g da Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltionínio foi suspenso em 20 ml de isopropanol seco e agitado à temperatura ambiente durante 3 dias. O sólido foi retirado por filtração, ressuspenso em 10 ml de isopropanol seco e agitado durante outras 9 dias. O sólido foi retirado por filtração de novo. Quando ficou livre de solvente, o bolo de filtro tornou-se de cor ocre. Isopropanol residual é removido sob um fluxo de azoto seco durante 2 horas. Isto produz 700 mg de Forma E de mono-hidrato de cloreto de metiltioninio como um pó cristalino ocre. O PXRD corresponde a este do exemplo Dl.

Exemplo D3: 1 g da Forma A de penta-hidrato de cloreto de metiltioninio foi suspenso em 10 ml de isopropanol seco e agitado à temperatura ambiente durante 1 dia. O sólido foi retirado por filtração, de novo suspenso em 10 ml de isopropanol seco e agitado durante 3 dias. Filtração, ressuspensão e agitação foram repetidas uma vez mais. O sólido tornou-se de cor ocre. Finalmente, o sólido ocre foi retirado por filtração e o isopropanol residual é removido sob um fluxo de azoto seco durante 2 horas. Isto produz 650 mg da Forma E de mono-hidrato de cloreto de metiltioninio como um pó cristalino ocre. O PXRD corresponde a este do exemplo Dl.

DOCUMENTOS REFERIDOS NA DESCRIÇÃO

Esta lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informação do leitor. Não é parte integrante do documento de patente europeia. Não obstante o cuidado na sua elaboração, o IEP não assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissões.

Documentos de patente referidos na descrição • WO 2006032879 A [0002] [0129]

Documentos de não patente citados na descrição • The Merck Index. Merck & Co., Inc, 2001 [0002] · J.O. WARWICKER. J. Chem. Soc., 1955, 2531 [0003] [0004] • G.F. DAVIDSON. J. Textile Institute, 1947, vol. 38, 1408-418 [0003] • The Merck Index. Merck & Co., Inc, 2001 [0003] · H. WALES; O,A. NELSON. J. Am. Chem. Soc., 1923, vol. 45, 1657 [0003] • C.M. MARTIN ; J.W.G. NEUHAUS ; F.H. REUTER. Analyst, 1946, vol. 71, 29-31 [0003] • H.E. MARR III ; J.M. STEWART, M.F. CHIU. Acta Cryst. , 1973, vol. 29, 847 [0004] • W.H. TAYLOR. Z. Krist, 1935, vol. 91, 450 [0005] • S.W. BODMAN ; S.P. KODAMA ; P.C. PFEIL ; R.E. STEVENS. J. Chem. Eng. Data, 1967, vol. 12, 500 [0005] • The molecular basis of tau protein pathology in

Alzheimer'' s disease and related neurodegenerative dementias. WISCHIK, C.M. ; THEURING, F. ; HARRINGTON, C.R. Neurobiology of Alzheimer's Disease. Oxford University Press, 2000, 103-206 [0081] • Handbook of Pharmaceutical Additives. Synapse

Information Resources, Inc, 2001 [0101] • Remington's Pharmaceutical Sciences. Lippincott,

Williams & Wilkins, 2000 [0101] • Handbook of Pharmaceutical Excipients. 1994 [0101] Lisboa, 21 de Dezembro de 2015

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Di-hidrato de cloreto de metiltionínio cristalino como Forma C, que tem os seguintes picos caraterísticos num padrão de difração de pó de raios X usando radiação CuKa:
2. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 que tem os seguintes picos caraterísticos num padrão de difração de pó de raios X usando radiação CuKa:

que tem, opcionalmente, também duas máximas endotérmicas a 151 °C e 183 °C quando aquecido numa taxa de 100 °C por minuto em Calorimetria Diferencial de Varrimento.
3. Um processo para a preparação de di-hidrato de cloreto de metiltionínio em forma C de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2, em que um cloreto de metiltionínio contendo água ou uma mistura de vários hidratos ou um hidrato especifico do mesmo é suspenso e agitado à temperatura ambiente num solvente selecionado a partir do grupo que compreende isopropanol, 1- propanol, 1-butanol, 2-butanol, terc-butanol, tetrahidrofurano, dioxano, acetona, 2-butanona, e acetonitrilo contendo água, para gerar a forma C; o sólido é então isolado; e o solvente é removido do sólido.
4. Uma composição farmacêutica que compreende a forma C de di-hidrato de cloreto de metiltioninio de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2, e opcionalmente um veiculo farmaceuticamente aceitável, excipiente ou diluente.
5. Forma C de di-hidrato de cloreto de metiltioninio de acordo com a reivindicação 1 ou 2 para utilização num método de tratamento do corpo humano ou animal por meio de terapêutica.
6. Forma C de di-hidrato de cloreto de metiltioninio de acordo com a reivindicação 1 ou 2 para utilização no tratamento de uma condição de doença, por exemplo, no tratamento de uma tauopatia, doença de Alzheimer (DA) , cancro de pele, melanoma, Hepatite C, VIH ou virus West Nile. Lisboa, 21 de Dezembro de 2015