PT2208734E - Produto alimentar para inibição da formação de osteoclasto - Google Patents
Produto alimentar para inibição da formação de osteoclasto Download PDFInfo
- Publication number
- PT2208734E PT2208734E PT08844720T PT08844720T PT2208734E PT 2208734 E PT2208734 E PT 2208734E PT 08844720 T PT08844720 T PT 08844720T PT 08844720 T PT08844720 T PT 08844720T PT 2208734 E PT2208734 E PT 2208734E
- Authority
- PT
- Portugal
- Prior art keywords
- protein fraction
- milk protein
- milk
- osteoclastogenesis
- degradation product
- Prior art date
Links
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title claims abstract description 58
- 235000013305 food Nutrition 0.000 title claims description 17
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 title description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 title description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title description 2
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 131
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 131
- 235000021239 milk protein Nutrition 0.000 claims abstract description 131
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims abstract description 37
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 37
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 37
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 33
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 28
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims abstract description 23
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 claims description 45
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 claims description 11
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 6
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 6
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 6
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims description 6
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 6
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 claims description 6
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 claims description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 claims 2
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 abstract description 7
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 abstract description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 22
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 10
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 9
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 8
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 8
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 8
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 8
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 8
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 8
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 7
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 7
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 6
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 6
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 6
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 6
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 5
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 5
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 5
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 4
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 4
- 235000010724 Wisteria floribunda Nutrition 0.000 description 4
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 4
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 4
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 208000008035 Back Pain Diseases 0.000 description 3
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 3
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 3
- 208000008930 Low Back Pain Diseases 0.000 description 3
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 3
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 238000000909 electrodialysis Methods 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 3
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- SPFMQWBKVUQXJV-BTVCFUMJSA-N (2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;hydrate Chemical compound O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O SPFMQWBKVUQXJV-BTVCFUMJSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 2
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 2
- 101710093543 Probable non-specific lipid-transfer protein Proteins 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 2
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- -1 ester compound Chemical class 0.000 description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019759 Maize starch Nutrition 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 235000015895 biscuits Nutrition 0.000 description 1
- 230000037176 bone building Effects 0.000 description 1
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 1
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000009547 dual-energy X-ray absorptiometry Methods 0.000 description 1
- 210000003278 egg shell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000020251 goat milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000010954 inorganic particle Substances 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000013310 margarine Nutrition 0.000 description 1
- 239000003264 margarine Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000014059 processed cheese Nutrition 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 235000020185 raw untreated milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000020254 sheep milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 238000013024 troubleshooting Methods 0.000 description 1
- 229960001322 trypsin Drugs 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N vitamin D3 Chemical class C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
- C07K14/4703—Inhibitors; Suppressors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A21—BAKING; EDIBLE DOUGHS
- A21D—TREATMENT, e.g. PRESERVATION, OF FLOUR OR DOUGH, e.g. BY ADDITION OF MATERIALS; BAKING; BAKERY PRODUCTS; PRESERVATION THEREOF
- A21D13/00—Finished or partly finished bakery products
- A21D13/80—Pastry not otherwise provided for elsewhere, e.g. cakes, biscuits or cookies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A21—BAKING; EDIBLE DOUGHS
- A21D—TREATMENT, e.g. PRESERVATION, OF FLOUR OR DOUGH, e.g. BY ADDITION OF MATERIALS; BAKING; BAKERY PRODUCTS; PRESERVATION THEREOF
- A21D2/00—Treatment of flour or dough by adding materials thereto before or during baking
- A21D2/08—Treatment of flour or dough by adding materials thereto before or during baking by adding organic substances
- A21D2/24—Organic nitrogen compounds
- A21D2/26—Proteins
- A21D2/261—Animal proteins
- A21D2/263—Animal proteins from dairy products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
- A23C19/06—Treating cheese curd after whey separation; Products obtained thereby
- A23C19/068—Particular types of cheese
- A23C19/08—Process cheese preparations; Making thereof, e.g. melting, emulsifying, sterilizing
- A23C19/082—Adding substances to the curd before or during melting; Melting salts
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/142—Amino acids; Derivatives thereof
- A23K20/147—Polymeric derivatives, e.g. peptides or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/40—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for carnivorous animals, e.g. cats or dogs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/02—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation containing fruit or vegetable juices
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/52—Adding ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
- A23L33/19—Dairy proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Birds (AREA)
- Mycology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Description
ΕΡ 2 208 734/PT
DESCRIÇÃO "Produto alimentar para inibição da formação de osteoclasto"
CAMPO TÉCNICO O presente invento diz respeito a uma fracção proteica de leite ou a um produto de degradação da fracção proteica de leite que apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese.
Uma vez que a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite de acordo com o presente invento apresenta efeito inibidor da osteoclastogénese, a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite é útil como agente inibidor da osteoclastogénese que visa prevenir ou tratar doenças ósseas ou fortalecimento do osso, e é igualmente útil como ingrediente activo de um produto farmacêutico, alimentar, bebida ou rações para animais que visa prevenir ou tratar doenças ósseas ou inibir a osteoclastogénese.
ESTADO DA TÉCNICA
Em anos recentes, várias doenças ósseas, tais como a osteoporose, fracturas ósseas, lumbago ou similares têm aumentado juntamente com o aumento progressivo da população idosa. Num tecido ósseo, ocorrem incessantemente osteogénese e reabsorção óssea. Numa pessoa jovem, é mantido um balanço entre a osteogénese e a reabsorção óssea, mas o balanço é perturbado em relação à reabsorção óssea devido a várias causas com o envelhecimento (desacoplamento). A continuação deste estado durante um período de tempo longo torna o tecido ósseo frágil, resultando na ocorrência de várias doenças ósseas, tal como a osteoporose, fracturas ósseas e lumbago. Considera-se que a prevenção do desacoplamento permite a prevenção de várias doenças ósseas, tal como a osteoporose, fracturas ósseas e lumbago.
Convencionalmente, de modo a prevenir o desacoplamento para prevenir ou tratar doenças ósseas, têm sido levados a cabo os seguintes métodos: (1) suplementação de cálcio por dieta, (2) exercícios ligeiros, (3) insolação, (4) medicação 2
ΕΡ 2 208 734/PT e similares. Para a suplementação de cálcio por dieta, são utilizados sais de cálcio, tais como carbonato de cálcio, fosfato de cálcio ou similares, ou agentes de cálcio naturais, tais como casca de ovo, pó de osso de peixe e similares. Contudo, estes materiais não são necessariamente adequados para ingestão oral. Corrida, marcha ou similares podem ser recomendados como exercícios ligeiros. Contudo, mesmo o exercício ligeiro é problemático para uma pessoa cujo corpo enfraqueceu, e é quase impossível uma pessoa idosa acamada fazer exercício. Considera-se que a insolação é um bom meio para suplementar vitamina D3 activada, mas não é suficiente por si só. Ια-Hidroxivitamina D3, uma preparação de calcitonina, ou similar é usada para administração de um produto farmacêutico e é conhecida como sendo eficaz no tratamento da osteoporose. Contudo, estas substâncias são elas próprias produtos farmacêuticos e não podem ser usadas como produto alimentar.
Os inventores do presente invento procuraram um factor de fortalecimento ósseo contido no leite de modo a obter uma substância de fortalecimento ósseo que possa ser usado como produto alimentar. Como resultado, os inventores determinaram que uma mistura de proteína e péptido obtida por remoção de um sal derivado de um soro de leite de uma fracção solúvel em água de uma proteína de soro de leite apresenta um efeito de fortalecimento ósseo (ver Documento Patente 1, por exemplo). Os inventores determinaram que uma fracção obtida sujeitando uma solução aquosa da mistura de proteína e péptido a um tratamento com etanol, um tratamento com calor, um tratamento salino e um tratamento por membrana de ultra-filtração, apresenta um efeito promotor do crescimento de osteoblastos e um efeito de fortalecimento ósseo (ver Documentos Patente 2 e 3, por exemplo). Os inventores determinaram ainda que uma proteína básica contida no leite apresenta um efeito promotor do crescimento de osteoblastos, um efeito de fortalecimento ósseo e um efeito de prevenção da reabsorção óssea (ver Documento Patente 4, por exemplo).
Documento Patente 1: Patente Japonesa N° 3160862
Documento Patente 2: Patente Japonesa N° 3092874
Documento Patente 3: JP-A-H05-320066
Documento Patente 4: Patente Japonesa N° 3112637 3
ΕΡ 2 208 734/PT
DIVULGAÇÃO DO INVENTO
PROBLEMAS A SER RESOLVIDOS PELO INVENTO
Um objecto do presente invento é o de proporcionar uma fracção proteica de leite ou um produto de degradação da fracção proteica de leite que apresente um efeito inibidor da osteoclastogénese e possa ser usado como um produto alimentar, um agente inibidor da osteoclastogénese contendo a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite que apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese, e um produto farmacêutico, alimentar, bebida ou ração para inibir a osteoclastogénese contendo a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite que apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese.
MEIOS PARA RESOLUÇÃO DOS PROBLEMAS
Os inventores procuraram um novo material inibidor da osteoclastogénese, e determinaram que pode ser obtida uma fracção que apresenta um elevado efeito inibidor da osteoclastogénese quando comparado com um produto alimentar conhecido. Com base nestes resultados, os inventores obtiveram desse modo um agente inibidor da osteoclastogénese contendo a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite que apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese, e um produto farmacêutico, alimento, bebida ou ração contendo a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite que apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese.
Especificamente, o presente invento é constituído tal como se segue: (A) Uma fracção proteica de leite possuindo um efeito inibidor da osteoclastogénese e as seguintes características (1) a fracção proteica de leite é derivada do leite, (2) a fracção proteica de leite contém proteínas com um peso molecular de 80.000 a 85.00 Daltons determinado por 4
ΕΡ 2 208 734/PT electroforese em gel de dodecilsulfato de sódio -poliacrilamida (SDS-PAGE), (3) a fracção proteica de leite contém 16 a 18% em peso de aminoácidos básicos na composição de aminoácidos constituintes e possui uma proporção aminoácido básico/aminoácido ácido de 0,65 a 0,85, e (4) a fracção proteica de leite possui um efeito inibidor da osteoclastogénese. (B) Um produto de degradação da fracção proteica de leite obtido por degradação da fracção proteica de leite supra com uma protease. (C) Um agente inibidor da osteoclastogénese compreendendo a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite de acordo com (A) ou (B) , respectivamente. (D) Um produto farmacêutico para inibição da osteoclastogénese compreendendo a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite de acordo com (A) ou (B), respectivamente. (E) Um alimento ou bebida para inibição da osteoclastogénese compreendendo a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite de acordo com (A) ou (B), respectivamente. (F) Uma ração para inibição da osteoclastogénese compreendendo a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite de acordo com (A) ou (B), respectivamente.
EFEITOS DO INVENTO O agente inibidor da osteoclastogénese contendo a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite que apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese como ingrediente activo, e o produto farmacêutico, alimento, bebida ou ração inibidor da osteoclastogénese contendo a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite que 5
ΕΡ 2 208 734/PT apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese de acordo com o presente invento inibem a osteoclastogénese num corpo quando administrados oralmente.
Deste modo, o agente inibidor da osteoclastogénese contendo a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite como ingrediente activo, e o produto farmacêutico, alimento, bebida ou ração contendo a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite que apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese de acordo com o presente invento apresentam um efeito de fortalecimento ósseo inibindo a osteoclastogénese no corpo de um humano ou animal, e são desse modo eficazes para suprimir uma diminuição da massa óssea devida à osteoporose ou similar.
MELHOR MODO DE REALIZAR 0 INVENTO 0 presente invento diz respeito a um agente inibidor da osteoclastogénese incluindo uma fracção proteica de leite ou um produto de degradação da fracção proteica de leite que apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese como ingrediente activo, bem como a um produto farmacêutico, alimento, bebida e ração inibidor da osteoclastogénese incluindo uma fracção proteica de leite ou um produto de degradação da fracção proteica de leite que apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese. A fracção proteica de leite de acordo com o presente invento pode ser obtida, por exemplo, fazendo contactar leite cru, tal como leite desnatado, soro de leite ou similar com uma resina de permuta iónica, lavar a resina de permuta iónica com solução de cloreto de sódio 0, 6M e eluindo a proteína do leite adsorvida na resina de permuta iónica usando um eluente de cloreto de sódio 1,0M a 1,5M. Notar que podem ser usados sais tais como um sal de potássio, um sal de amónio, um fosfato, um acetato, um carbonato ou similares além do cloreto de sódio. A fracção proteica de leite de acordo com o presente invento pode ser obtida ajustando de modo apropriado a força iónica do agente de lavagem de 0,55 a 0,65 e força iónica da solução de eluição a 1,0 ou superior, preferencialmente 1,0 a 0,2. Além disso, a fracção proteica 6
ΕΡ 2 208 734/PT de leite de acordo com o presente invento pode ser obtida recolhendo a fracção eluída, dessalinizar ou concentrar a fracção usando uma membrana de osmose inversa (RO) , electrodiálise (ED) ou similar, e opcionalmente secar o produto resultante. Exemplos da membrana de osmose inversa (RO) incluem Desal-3 (fabricada por Desalination), HR-95 (fabricada por Dow, Dinamarca), NTR-729HF (fabricada por Nitto Denko Corporation) e similares. Exemplos de um sistema de electrodiálise (ED) incluem sistemas de electrodiálise fabricado por Yusasa-Ionics Inc. e Nippon Rensui Co., Ltd.
Como método de obtenção de traços de uma fracção proteica derivado do leite, são conhecidos um método de obtenção de uma fracção proteica fazendo contactar leite ou uma matéria prima derivada do leite com um permutador de catiões, e eluindo a fracção de proteína básica que é adsorvida no permutador de catiões usando um eluente que possua um pH superior a 5 e uma força iónica superior a 0,5 (JP-A-H05-202098), um método de obtenção de uma fracção proteica usando um gel de ácido algínico (JP-A-S61-246198), um método de obtenção de uma fracção proteica a partir de um soro de leite usando partículas inorgânicas porosas (JP-A-H01-86839), um método de obtenção de uma fracção proteica do leite usando um composto éster sulfatado (JP-A-S63-255300) e similares. A fracção proteica que é derivada do leite pode ser obtida através desses métodos no presente invento. A fracção proteica de leite recolhida deste modo pode ser normalmente transformada em pó através de liofilização ou similar antes de uso. A fracção proteica de leite que apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese usada no presente invento contém preferencialmente 16 a 18% ponderai de aminoácidos básicos na composição de aminoácidos constituintes, e possui uma proporção aminoácido básico/ aminoácido ácido de 0, 65 a 0,75. O efeito do presente invento pode não ser atingido se o teor em aminoácidos básicos ou se a proporção aminoácido básico/ aminoácido ácido estiver fora da gama supra. O produto do presente invento é uma mistura contendo como componente principal proteínas com um peso molecular de 80.000 a 85.000 Daltons, e o ponto isoeléctrico de 7 a 8. 7
ΕΡ 2 208 734/PT Ο produto de degradação da fracção proteica de leite possui a mesma composição em aminoácidos que a fracção proteica de leite. Por exemplo, um produto de degradação da fracção proteica de leite com um peso molecular médio de 4000 ou inferior pode ser obtido tratando uma fracção proteica de leite obtida pelo método supra com uma protease tal como pepsina, tripsina, quimotripsina ou similar, e opcionalmente tratando o produto resultante com uma protease tal como pancreatina ou similar. O produto de degradação da fracção proteica de leite é normalmente transformado em pó através de liofilização ou similar antes de uso.
Como leite ou matéria prima derivada do leite que podem ser usados como fonte de fracção proteica de leite de acordo com o presente invento que apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese, podem ser usados leite de vaca, leite humano, leite de cabra, leite de ovelha ou similares. Tais leites podem ser usados tal qual, ou podem ser usados leite recombinado, leite desnatado, soro de leite ou similares derivados desses leites. A fracção proteica de leite ou produto de degradação da fracção proteica de leite que apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese e é um ingrediente activo pode ser usada tal qual quando se administra o agente inibidor da osteoclastogénese de acordo com o presente invento. De notar que é igualmente possível usar após ser formulado sob a forma de produto farmacêutico em pó, grânulos, um comprimido, uma cápsula, uma preparação bebível, ou similares de acordo com um método convencional. Além disso, a fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite, tal qual ou após formulação de uma preparação do mesmo, pode ser adicionado a uma preparação de nutrientes, alimentos e bebidas, ou similares de modo a obter um efeito inibidor da osteoclastogénese. Dado que a fracção proteica de leite ou produto de degradação da fracção proteica de leite de acordo com o presente invento é relativamente estável em relação ao calor, a fracção proteica de leite ou produto de degradação da fracção proteica de leite pode ser esterilizada a quente sob condições convencionais. 8
ΕΡ 2 208 734/PT
No presente invento, de modo a atingir o efeito inibidor da osteoclastogénese a dosagem ou similar pode ser apropriadamente determinada tendo em linha de conta o peso, sexo, idade e outros. A quantidade de fracção proteica de leite ou produto de degradação da fracção proteica de leite na formulação pode ser ajustada de modo a que um adulto normal tome a fracção proteica de leite ou produto de degradação da fracção proteica de leite do presente invento numa quantidade de 10 a 100 mg/dia. Ou seja, a fracção proteica de leite ou produto de degradação da fracção proteica de leite de acordo com o presente invento é eficaz em dosagem baixa. No presente invento, o ingrediente com efeito inibidor da osteoclastogénese exerce o efeito inibidor da osteoclastogénese quando é administrado oralmente um agente inibidor da osteoclastogénese ou um produto farmacêutico, alimento e bebida, ou ração formulado o agente inibidor da osteoclastogénese. O presente invento é ainda adiante descrito através de exemplos de referência, exemplos e exemplos teste. De notar que os exemplos que se seguem meramente ilustram vários aspectos do presente invento e não deverão ser interpretados como limitantes do presente invento.
Exemplo de referência 1
Uma fracção proteica de leite apresentando um efeito inibidor da osteoclastogénese, a qual estava comercialmente disponível, foi preparada de acordo com o método seguinte (ver Patente Japonesa N° 3112637).
Uma coluna (diâmetro: 10 cm) carregada com 0,5 litros de Chitopearl sulfonado (resina de permuta catiónica; fabricada por Fuji Spinning Co. , Ltd.) foi suficientemente lavada com água desionizada. Após passarem 50 1 de leite desnatado não esterilizado através da coluna com um fluxo de 100 ml/min, a coluna foi suficientemente lavada com água desionizada. Posteriormente passou-se através da coluna 2,5 1 de um tampão fosfato 0,05M (pH 7,0) contendo cloreto de sódio 0,95M para eluir proteínas adsorvidas na resina. O eluato foi dessalinizado e concentrado através de tratamento com membrana de osmose inversa (RO) e posteriormente liofilizado 9
ΕΡ 2 208 734/PT para obter uma fracção proteica de leite em pó. O procedimento supra foi repetido duas vezes para se obter 104 g de uma fracção proteica. A fracção proteica possuía um ponto isoeléctrico de 7,0 a 8,5. O teor de aminoácidos básicos na fracção proteica era de 17,8%.
Exemplo 1
Uma coluna (diâmetro: 10 cm) carregada com 0,5 1 de
Chitopearl sulfonado (resina de permuta catiónica; fabricada por Fuji Spinning Co., Ltd.) foi suficientemente lavada com água desionizada. Após passarem 50 1 de leite desnatado não esterilizado através da coluna com um fluxo de 100 ml/min, a coluna foi suficientemente lavada com um tampão fosfato 0,05M (pH 7,0) contendo cloreto de sódio 0,55M. Posteriormente passou-se através da coluna 2,5 1 de um tampão fosfato 0,05M (pH 7,0) contendo cloreto de sódio 1,45M para eluir proteínas adsorvidas na resina. O eluato foi dessalinizado e concentrado através de tratamento com membrana de osmose inversa (RO) e posteriormente liofilizado para obter uma fracção proteica de leite em pó. O procedimento supra foi repetido duas vezes para se obter 48 g de uma fracção proteica. A fracção proteica possuía um peso molecular de 80.000 a 85.000 Daltons e um ponto isoeléctrico de 7,0 a 8,0. 0 teor de aminoácidos básicos nos aminoácidos constituintes contidos na fracção proteica foi de 16 a 18%. A fracção proteica apresentava uma proporção aminoácido básico/aminoácido ácido de 0,65 a 0,85.
Exemplo 2
Uma coluna (diâmetro: 10 cm) carregada com 0,5 1 de Chitopearl sulfonado (resina de permuta catiónica; fabricada por Fuji Spinning Co., Ltd.) foi suficientemente lavada com água desionizada. Após passarem 50 1 de leite desnatado não esterilizado através da coluna com um fluxo de 100 ml/min, a coluna foi suficientemente lavada com um tampão fosfato 0,05M (pH 7,0) contendo cloreto de sódio 0,55M. Posteriormente passou-se através da coluna 2,5 1 de um tampão fosfato 0,05M (pH 7,0) contendo cloreto de sódio 0,55M. Posteriormente passou-se através da coluna 2,5 1 de um tampão fosfato 0,05M (pH 7,0) contendo cloreto de sódio 1,0M para eluir proteínas 10
ΕΡ 2 208 734/PT adsorvidas na resina. O eluato foi dessalinizado e concentrado através de tratamento com membrana de osmose inversa (RO) e posteriormente liofilizado para obter uma fracção proteica de leite em pó. O procedimento supra foi realizado uma vez para se obter 22,1 g de uma fracção proteica de leite. A fracção proteica possuía um peso molecular de 80.000 a 85.000 Daltons e um ponto isoeléctrico de 7,0 a 8,0. O teor de aminoácidos básicos nos aminoácidos constituintes contidos na fracção proteica foi de 16 a 18%. A fracção proteica apresentava uma proporção aminoácido básico/aminoácido ácido de 0,65 a 0,85.
Exemplo 3
Uma coluna (diâmetro: 10 cm) carregada com 0,5 1 de
Chitopearl sulfonado (resina de permuta catiónica; fabricada por Fuji Spinning Co., Ltd.) foi suficientemente lavada com água desionizada. Após passarem 50 1 de leite desnatado não esterilizado através da coluna com um fluxo de 100 ml/min, a coluna foi suficientemente lavada com um tampão fosfato 0,05M (pH 7,0) contendo cloreto de sódio 0,65M. Posteriormente passou-se através da coluna 2,5 1 de um tampão fosfato 0,05M (pH 7,0) contendo cloreto de sódio 0,55M. Posteriormente passou-se através da coluna 2,5 1 de um tampão fosfato 0,05M (pH 7,0) contendo cloreto de sódio 2,0M para eluir proteínas adsorvidas na resina. O eluato foi dessalinizado e concentrado através de tratamento com membrana de osmose inversa (RO) e posteriormente liofilizado para obter uma fracção proteica de leite em pó. O procedimento supra foi repetido duas vezes para se obter 48,8 g de uma fracção proteica de leite. A fracção proteica possuía um peso molecular de 80.000 a 85.000 Daltons e um ponto isoeléctrico de 7,0 a 8,0. O teor de aminoácidos básicos nos aminoácidos constituintes contidos na fracção proteica foi de 16 a 18%. A fracção proteica apresentava uma proporção aminoácido básico/aminoácido ácido de 0,65 a 0,85.
Exemplo 4 22,1 g da fracção proteica de leite obtida no Exemplo 2 foi dissolvida em 8 1 de água destilada. Após adicionar tripsina (fabricado por Kanto Kagaku Co., Ltd) de modo a que 11
ΕΡ 2 208 734/PT a concentração fosse de 2%, a fracção proteica de leite foi hidrolisada a 37°C durante uma hora com agitação. Após a mistura ser neutralizada a pH 6,6 com uma solução de hidróxido de sódio, adicionou-se pancreatina a 1% (fabricada por Sigma). Posteriormente a mistura foi feita reagir a 37°C durante duas horas. Após a reacção estar completa, a protease foi inactivada através de aquecimento da mistura a 80°C durante 10 minutos para se obter 46,7 g de um produto de degradação da fracção proteica de leite.
Exemplo 5 48,8 g da fracção proteica de leite obtida no Exemplo 3 foi dissolvida em 10 1 de água destilada. Após adicionar pepsina (fabricado por Kanto Kagaku Co., Ltd) de modo a que a concentração fosse de 2%, a fracção proteica de leite foi hidrolisada a 37 °C durante uma hora com agitação. Após a mistura ser neutralizada a pH 6,8 com uma solução de hidróxido de sódio, adicionou-se pancreatina a 1% (fabricada por Sigma). Posteriormente a mistura foi feita reagir a 37°C durante duas horas. Após a reacção estar completa, a protease foi inactivada através de aquecimento da mistura a 80°C durante 10 minutos para se obter 2 0,8 g de um produto de degradação da fracção proteica de leite.
Exemplo teste 1
Um factor inibidor da osteoclastogénese (OPG) produzido por um osteoblasto é conhecido como um inibidor da diferenciação do osteoclasto fisiológico. O efeito promotor da produção de osteoblasto OPG de cada uma das fracções proteicas de leite obtidas no Exemplo de referência 1 e Exemplo 1 foi determinado como o efeito inibidor da osteoclastogénese. Especificamente, osteoblastos humanos MG63 foram suspensos num meio MEM-E (fabricado por GIBCO, soro fetal de bovino: 10%, solução de aminoácidos não essenciais (fabricada por GIBCO): 1%, solução penicilina-estreptomicina (fabricada por GIBCO) : 1%) de modo a que densidade celular fosse de 2xl04 células/ml, e adicionados a uma placa de 96 poços (200 μΐ/poço) . As células foram colocadas em cultura durante quatro dias num incubador com 5% de dióxido de carbono. Após remoção do meio através de sucção, a fracção 12
ΕΡ 2 208 734/PT proteica de leite obtida no meio MEM-E supra (160 μΐ/poço) e o meio MEM-E do Exemplo 1 ou Exemplo de referência 1 nos quais a fracção proteica de leite foi dissolvida até uma concentração de 1,0 mg/ml ou 0,1 mg/ml, respectivamente, foram adicionados (40 μΐ/poço) e as células foram de novo colocadas em cultura durante quatro dias. O liquido sobrenadante da cultura foi recolhido e a concentração de OPG no liquido sobrenadante da cultura foi medida usando um kit OPG-ELISA (fabricado por BIOMEDICA) . As células colocadas em cultura somente num meio MEM-E ao qual a amostra não foi adicionada foram usadas como controlo.
Os resultados são apresentados na Tabela 1.
Tabela 1
Amostra Concentração final Concentração de OPG (pmol/L) Controlo — 125 ± 10,9 (%, ± DP) Fracção proteica de leite (Exemplo de referência 1) 1,0 mg/ml 162 ± 13,1 Fracção proteica de leite (Exemplo 1) 1,0 mg/ml 368 ± 24,7 Fracção proteica de leite (Exemplo 1) 0,1 mg/ml 182,9 ± 15,6
As fracções proteicas de leite obtidas no Exemplo de Referência 1 e Exemplo 1, ambas promoveram a produção de OPG do osteoblasto humano MG63. O efeito promotor da produção de OPG da fracção proteica de leite obtida no Exemplo 1 foi significativamente superior ao da fracção proteica de leite obtida no Exemplo de Referência 1. Isto indica que a fracção proteica de leite obtida no Exemplo 1 apresenta um excelente efeito inibidor da osteoclastogénese.
Exemplo teste 2
Cada efeito de fortalecimento ósseo das fracções proteicas obtidas no Exemplo de referência 1 e Exemplo 1 foi investigado através de ensaios em animais. Ratos Wistar (fêmeas, 4 semanas de idade) foram usados para os ensaios com animais. Após a alimentação preliminar durante uma semana, o ovário foi removido de cada rato. Foi posteriormente 13
ΕΡ 2 208 734/PT fornecida alimentação deficiente em cálcio aos ratos durante cinco semanas. Os ratos dos quais o ovário foi removido e aos quais foi fornecida a alimentação deficiente em cálcio durante cinco semanas apresentavam sintomas óbvios de osteoporose. Os ratos com sintomas de osteoporose foram divididos em 3 grupos de ensaio (sete ratos por cada ensaio) de um grupo de controlo (Grupo A) ao qual não foi administrado fracção proteica de leite, um grupo (Grupo B) ao qual foi administrado 0,1% em peso da fracção proteica de leite obtida no Exemplo de referência 1, e um grupo (Grupo C) ao qual foi administrado 0,1% em peso da fracção proteica de leite obtida no Exemplo 2. Uma ração de teste apresentada na Tabela 2 foi alimentada a cada grupo durante quatro meses. O teor em azoto em cada ração de teste foi ajustado de modo uniforme a 17,06% usando caseína. Cada ração de teste foi misturada com 300 mg de cálcio, 230 mg de fósforo e 50 mg de magnésio por 100 g de ração de teste.
Tabela 2
Grupo A B c Caseína 20, 0 19, 9 19, 9 Amido de Milho 15, 0 15, 0 15, 0 Celulose 5, 0 5,0 5, 0 Óleo de milho 5, 0 5,0 5, 0 Mistura de vitaminas 1,0 1,0 1,0 Mistura mineral 2,65 2,65 2,65 Sacarose 51, 05 51,05 51, 05 DL-metionina 0,3 0,3 0,3 Fracção proteica de leite obtida no Exemplo de Referência 1 - 0,1 - Fracção proteica de leite obtida no Exemplo 1 - - 0,1 (% ponderai)
Foi removido o fémur de cada rato que tinha sido alimentado durante quatro meses, e o teor mineral do osso foi medido através de absorciometria de raios-X de dupla energia (DEXA), utilizando um analisador de mineral do osso ("DCS-600", fabricado por Aloka) . Foi igualmente medido o teor mineral do fémur no grupo de controlo. Os resultados são apresentados na Tabela 3. Tal como apresentado na Tabela 3, o 14
ΕΡ 2 208 734/PT teor mineral no fémur dos ratos do grupo (grupo B) , ao qual foi administrada a fracção proteica de leite obtida no Exemplo de Referência 1 e o grupo (grupo C) ao qual foi administrada a fracção proteica de leite obtida no Exemplo 2 foi significativamente maior do que a dos ratos do grupo de controlo após serem alimentados com a ração de teste durante quatro meses. Cada fracção proteica de leite apresentou um efeito de aumento do teor mineral ósseo, isto é, efeito inibidor da osteoclastogénese. No entanto, o efeito alcançado pelo produto do presente invento foi superior ao da fracção proteica de leite obtida no Exemplo de Referência 1. Foi observado um efeito semelhante quando se utilizam os produtos de degradação da fracção proteica de leite obtidos nos Exemplos 4 e 5 (mas não sendo apresentados os resultados).
Tabela 3
Teor mineral ósseo (mg ± DP) Controlo (Grupo A) 129,4 ± 4,2 Fracção proteica de leite obtida no Exemplo de Referência 1 (Grupo B) 135,2 ± 3,4 Fracção proteica de leite obtida no Exemplo 2 (Grupo C) 140,1 ± 2,5
Exemplo 6 100 mg da fracção proteica de leite obtida no Exemplo 1 foi adicionada com 93,4 g de hidrato de glicose cristalina, 5 g de carbonato de cálcio, 1 g de um éster de açúcar, e 0,5 g de aromatizante, e misturados. O resultante foi então formatado num comprimido para se obter um agente inibidor da osteoclastogénese de acordo com o presente invento.
Exemplo 7
Os componentes foram misturados de acordo com a composição apresentada na Tabela 4 para se obter uma massa. A massa foi formatada e cozida para produzir um biscoito para inibir a osteoclastogénese. 15
ΕΡ 2 208 734/PT
Tabela 4
Farinha 50,0 (% ponderai) Açúcar 20,0 Sal 0,5 Margarina 12,5 Ovo 12,1 Água 4,0 Hidrogenocarbonato de sódio 0,1 Bicarbonato de amónio 0,2 Carbonato de cálcio 0,5 Pó de fracção proteica de leite (Exemplo 1) 0,1
Exemplo 8
Foi produzida uma bebida de sumo de fruta inibidora da osteoclastogénese, com uma composição apresentada na Tabela 5.
Tabela 5
Mistura de açúcares isomerizados 15,0 (% ponderai) Sumo de fruta 10,0 Ácido cítrico LO O Pó de fracção proteica de leite (Exemplo 1) LO O Aromatizante 0,1 Cálcio 0,1 Água 73,8
Exemplo 9
Os ingredientes foram misturados de acordo com a formulação apresentada na Tabela 6 para produzir uma ração para cães para inibir a osteoclastogénese. 16
ΕΡ 2 208 734/PT
Tabela 6 Pó de fracção proteica de leite (Exemplo 1) 2,5 (% ponderai) Leite desnatado em pó 13, 5 Bolo de soja 12,0 Óleo de soja 4,0 Óleo de milho 2,0 Óleo de palma 27,0 Amido de milho 14,0 Farinha 9 Farelo 2,0 Mistura de vitaminas 9 Mistura de minerais 2,0 Celulose O 00
Exemplo 10
Cada ingrediente foi misturado em conformidade com a formulação apresentada na Tabela 7, e formatou-se sob pressão para produzir um comprimido inibidor da osteoclastogénese o produto de degradação da fracção proteica de leite obtido no Exemplo 4.
Tabela 7
Hidrato de glicose cristalina 59,4 (% ponderai) Produto de degradação da fracção proteica de leite (Exemplo 4) 16, 0 Amido de milho 12,0 Celulose 4,0 Óleo de milho 4,0 Mistura de vitaminas (incluindo colina) 1,0 Mistura de minerais 3,6
Exemplo 11
Cada ingrediente foi misturado em conformidade com a formulação apresentada na Tabela 8, e emulsionou-se a 85°C para produzir um queijo processado inibidor da osteoclastogénese formulando o produto de degradação da fracção proteica de leite obtido no Exemplo 5. 17
ΕΡ 2 208 734/PT
Tabela 8
Queijo Gouda 43,0 (% ponderai) Queijo Cheddar 43,0 Citrato de sódio 2,0 Produto de degradação da fracção proteica de leite (Exemplo 5) 0,5 Cálcio derivado do leite 1,0 Água 10,5
APLICABILIDADE INDUSTRIAL A fracção proteica de leite e o produto de degradação da fracção proteica de leite de acordo com o presente invento apresentam um efeito inibidor da osteoclastogénese, e são eficazes para suprimir uma diminuição da massa óssea observada na osteoporose. Deste modo, fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite podem ser usados para um agente inibidor da osteoclastogénese contendo fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite que apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese como ingrediente activo, e um produto farmacêutico, alimento, bebida ou ração inibidor da osteoclastogénese contendo fracção proteica de leite ou o produto de degradação da fracção proteica de leite que apresenta um efeito inibidor da osteoclastogénese.
Lisboa, 2012-03-16
Claims (6)
- ΕΡ 2 208 734/PT 1/1 REIVINDICAÇÕES 1. Fracção proteica de leite com as seguintes caracteristicas (1) a (4) : (1) a fracção proteica de leite é derivada do leite, (2) a fracção proteica de leite contém proteínas com um peso molecular de 80.000 a 85.00 Daltons determinado por electroforese em gel de dodecilsulfato de sódio poliacrilamida (SDS-PAGE), (3) a fracção proteica de leite contém 16 a 18% em peso de aminoácidos básicos na composição de aminoácidos constituintes e possui uma proporção aminoácido básico/aminoácido ácido de 0,65 a 0,85, e (4) a fracção proteica de leite possui um efeito inibidor da osteoclastogénese.
- 2. Produto de degradação da fracção proteica de leite obtido por degradação da fracção proteica de leite de acordo com a reivindicação 1 com uma protease.
- 3. Agente inibidor da osteoclastogénese compreendendo a fracção proteica de leite de acordo com a reivindicação 1 ou o produto de degradação da fracção proteica de leite de acordo com a reivindicação 2.
- 4. Produto farmacêutico para uso na inibição da osteoclastogénese compreendendo a fracção proteica de leite de acordo com a reivindicação 1 ou o produto de degradação da fracção proteica de leite de acordo com a reivindicação 2.
- 5. Alimento ou bebida para uso na inibição da osteoclastogénese compreendendo a fracção proteica de leite de acordo com a reivindicação 1 ou o produto de degradação da fracção proteica de leite de acordo com a reivindicação 2.
- 6. Ração para uso na inibição da osteoclastogénese compreendendo a fracção proteica de leite de acordo com a reivindicação 1 ou o produto de degradação da fracção proteica de leite de acordo com a reivindicação 2. Lisboa, 2012-03-16
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2007285423 | 2007-11-01 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PT2208734E true PT2208734E (pt) | 2012-03-29 |
Family
ID=40590694
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PT08844720T PT2208734E (pt) | 2007-11-01 | 2008-10-28 | Produto alimentar para inibição da formação de osteoclasto |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20100234296A1 (pt) |
| EP (1) | EP2208734B1 (pt) |
| JP (1) | JPWO2009057287A1 (pt) |
| KR (1) | KR20100100845A (pt) |
| CN (1) | CN101842385B (pt) |
| AT (1) | ATE542832T1 (pt) |
| AU (1) | AU2008320277A1 (pt) |
| CA (1) | CA2704092C (pt) |
| DK (1) | DK2208734T3 (pt) |
| ES (1) | ES2378213T3 (pt) |
| NZ (1) | NZ585092A (pt) |
| PT (1) | PT2208734E (pt) |
| WO (1) | WO2009057287A1 (pt) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE526344T1 (de) * | 2007-11-01 | 2011-10-15 | Megmilk Snow Brand Co Ltd | Nahrungsmittel zur förderung der differenzierung von osteoblasten und zur inhibierung der differenzierung von osteoclasten |
| AU2008320270B2 (en) * | 2007-11-01 | 2013-06-06 | Megmilk Snow Brand Co., Ltd. | Bone-strengthening food material |
| CA2704042C (en) * | 2007-11-01 | 2017-06-20 | Snow Brand Milk Products Co., Ltd. | Bone resorption inhibitory food material for inhibiting bone resorption |
| JP2012077015A (ja) * | 2010-09-30 | 2012-04-19 | Snow Brand Milk Products Co Ltd | 皮膚コラーゲン産生促進剤 |
| AU2012210013C1 (en) | 2011-01-26 | 2017-06-01 | Megmilk Snow Brand Co., Ltd. | Sense-improving agent |
| JP5969225B2 (ja) * | 2012-03-09 | 2016-08-17 | 雪印メグミルク株式会社 | 骨強化剤 |
Family Cites Families (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BE901672A (fr) | 1985-02-07 | 1985-08-07 | Oleofina Sa | Procede de purification de proteines du lait et de ses derives. |
| IE61701B1 (en) * | 1986-07-17 | 1994-11-30 | Morinaga Milk Industry Co Ltd | Process for producing bovine lactoferrin in high purity |
| JPH0725800B2 (ja) | 1987-04-10 | 1995-03-22 | 雪印乳業株式会社 | 硫酸エステル化物を用いて乳からラクトフエリンを分離、精製する方法 |
| FR2616628B1 (fr) | 1987-06-19 | 1989-09-29 | Entremont Sa | Procede pour extraire des proteines du lactoserum par adsorption et elution |
| JP3160862B2 (ja) | 1990-11-15 | 2001-04-25 | 雪印乳業株式会社 | 骨強化食品、飼料及び医薬 |
| JP3604159B2 (ja) | 1992-05-07 | 2004-12-22 | 雪印乳業株式会社 | 乳清由来の骨芽細胞増殖促進及び骨強化因子ならびに該因子を含有せしめた骨強化食品、医薬および飼料 |
| JP3092874B2 (ja) | 1991-12-26 | 2000-09-25 | 雪印乳業株式会社 | 乳清由来の骨芽細胞増殖・骨強化画分及び該画分を含有する骨強化食品、飼料、薬品類 |
| JPH05202098A (ja) | 1992-01-29 | 1993-08-10 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 乳質原料から生理活性物質の製造法 |
| JP3112637B2 (ja) * | 1994-09-30 | 2000-11-27 | 雪印乳業株式会社 | 骨強化剤 |
| JP3929088B2 (ja) * | 1996-06-20 | 2007-06-13 | 雪印乳業株式会社 | 骨形成促進及び骨吸収防止剤 |
| JP2001346519A (ja) * | 2000-06-09 | 2001-12-18 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 乳塩基性シスタチン高含有画分及びその分解物の製造方法 |
| US6649590B2 (en) * | 2000-06-09 | 2003-11-18 | Snow Brand Milk Products Co., Ltd. | Method of producing fractions containing a high concentration of milk basic cystatin and decomposition products thereof |
| US7169559B2 (en) * | 2002-05-13 | 2007-01-30 | Fonterra Corporate Research and Development Ltd. | LDL receptor-related proteins 1 and 2 and treatment of bone or cartilage conditions |
| FR2841747B1 (fr) * | 2002-07-02 | 2004-08-20 | Cie Laitiere Europeenne | Isolat de proteines de lait et procede pour sa preparation |
| JP2004115509A (ja) * | 2002-09-05 | 2004-04-15 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 破骨細胞分化抑制因子産生促進剤 |
| JP2004238320A (ja) * | 2003-02-05 | 2004-08-26 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 骨吸収抑制剤 |
| JP4536341B2 (ja) * | 2003-08-15 | 2010-09-01 | 雪印乳業株式会社 | 骨形成促進剤 |
| AU2004275649A1 (en) * | 2003-09-30 | 2005-04-07 | Snow Brand Milk Products Co., Ltd. | Agent for promoting osteogenesis and/or inhibiting bone resorption |
| EP1937298A4 (en) * | 2005-10-14 | 2009-11-11 | Auckland Uniservices Ltd | USE OF LACTOFERRIN FRAGMENTS AND HYDROLYSATES |
-
2008
- 2008-10-28 JP JP2009538926A patent/JPWO2009057287A1/ja active Pending
- 2008-10-28 AU AU2008320277A patent/AU2008320277A1/en not_active Abandoned
- 2008-10-28 US US12/740,743 patent/US20100234296A1/en not_active Abandoned
- 2008-10-28 ES ES08844720T patent/ES2378213T3/es active Active
- 2008-10-28 DK DK08844720.6T patent/DK2208734T3/da active
- 2008-10-28 WO PCT/JP2008/003071 patent/WO2009057287A1/ja active Application Filing
- 2008-10-28 CN CN2008801136177A patent/CN101842385B/zh active Active
- 2008-10-28 NZ NZ585092A patent/NZ585092A/xx unknown
- 2008-10-28 EP EP08844720A patent/EP2208734B1/en active Active
- 2008-10-28 CA CA2704092A patent/CA2704092C/en active Active
- 2008-10-28 AT AT08844720T patent/ATE542832T1/de active
- 2008-10-28 KR KR1020107012036A patent/KR20100100845A/ko not_active IP Right Cessation
- 2008-10-28 PT PT08844720T patent/PT2208734E/pt unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101842385A (zh) | 2010-09-22 |
| EP2208734B1 (en) | 2012-01-25 |
| CN101842385B (zh) | 2013-11-27 |
| WO2009057287A1 (ja) | 2009-05-07 |
| ATE542832T1 (de) | 2012-02-15 |
| EP2208734A4 (en) | 2010-11-03 |
| DK2208734T3 (da) | 2012-05-14 |
| CA2704092A1 (en) | 2009-05-07 |
| ES2378213T3 (es) | 2012-04-10 |
| EP2208734A1 (en) | 2010-07-21 |
| US20100234296A1 (en) | 2010-09-16 |
| NZ585092A (en) | 2013-03-28 |
| AU2008320277A1 (en) | 2009-05-07 |
| JPWO2009057287A1 (ja) | 2011-03-10 |
| KR20100100845A (ko) | 2010-09-15 |
| CA2704092C (en) | 2017-06-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20120040908A1 (en) | Fracture repair promoter | |
| PT2208734E (pt) | Produto alimentar para inibição da formação de osteoclasto | |
| PT2208735E (pt) | Matéria alimentar para promover a diferenciação de osteoblasto e inibir a diferenciação de osteoclasto | |
| ES2547402T3 (es) | Composiciones para fortalecer los huesos | |
| US8580740B2 (en) | Bone resorption inhibitory food material for inhibiting bone resorption | |
| AU2012210013C1 (en) | Sense-improving agent |