PT106446B - Matriz cromatográfica baseada no polímero polissacárido gelana e método para sua obtenção - Google Patents
Matriz cromatográfica baseada no polímero polissacárido gelana e método para sua obtenção Download PDFInfo
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Abstract
A PRESENTE INVENÇÃO DIZ RESPEITO À UTILIZAÇÃO DA GELANA, A QUAL É UM POLISSACÁRIDO ANIÁNICO PRODUZIDO POR SPHINGOMONAS ELODEA, COMO MATRIZ CROMATOGRÁFICA, BEM COMO AO MÉTODO PARA SUA OBTENÇÃO. PARA TAL, TESTOU-SE A ESTABILIDADE DA MATRIZ ATRAVÉS DA SUA FORMULAÇÃO COM DIFERENTES CATIÕES, VERIFICANDO-SE QUE O IÀO COBRE (II) FOI O QUE PERMITIU O MAIOR NÚMERO DE ENSAIOS REPRODUTÍVEIS. POR ANÁLISES DE SEM FOI CONFIRMADA A PRESENÇA DE ALGUMA RETICULAÇÃO NA FORMULAÇÃO DE GELANA. PARA COMPROVAR A POTENCIALIDADE DA GELANA COMO MATRIZ CROMATOGRÁFICA NA PURIFICAÇÃO DE BIOMOLÉCULAS EFETUOU-SE O ESTUDO DO PERFIL DE ELUIÇÃO DE ALGUMAS PROTEÍNAS MODELO (BSA, LISOZIMA E A QUIMIOTRIPSINA) . VERIFICOU-SE A RETENÇÃO DAS PROTEÍNAS USADAS NA MATRIZ, CONSEGUINDO-SE A SUA ELUIÇÃO COM O AUMENTO DA FORÇA IÓNICA. A MANIPULAÇÃO DA FORÇA IÓNICA PERMITIU OBSERVAR QUE AS PROTEÍNAS SE LIGAM À MATRIZ COM DIFERENTES INTENSIDADES.
Description
DESCRIÇÃO
Hatxia cros&stográfíca basaseda nc polís&ero polls^acárído graX&na o sssétodo para sua oboewSo
Dosaiaio fcécnico da iavesçâ© llll)BÇ)IÍ^ÍÍilÇ3ÍiÍlll):;CsCfllBÇ)|Çlll)SiÇiíÇCsÇ^ÍlllDCÇ)ÇÇC^Cl;C^Clilll)O^ilÍ1^7BBiCÍlllll llllijÍC7jlÍllllllÍ|ÍIÍÍIll|ÍlIl)iCl<ÍlÇÍjl)Í|(|IÍÍI(Çl);jlÍOllÇlll<|77|iÇjl)|Bjjj|jl llllÍBÇijÇ^lSÍÍlÍ7C(|fÍÍl73C:iCÍ7^Ç7CiÍlll^CiÇl|)))Íl;iill^ÇClll)CiOCÍ;tiÇlÇill)ÍÇlllÍÇÍlÍlll llllBieiSia:lllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllll^^ llllsÚ-Ílll>C^Í57;CúOC)iÇllBÇ17Í|;dBlÍ-iCjlÍítÇÇ74Çsll)ÇI7Ç^C)êÍBÇÇÍllÇ|jl3iÇt)ÇÇÇÇll^|llll llllBiÇ7ÍÇjsÍCCCf|ll)BíÍ30lllllljCiÇaÇC^iÇllC|CllOilCll^SÍvOjõljÍ:iÇÇÇ.CslllÇ5ÇiC<illll
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Snmârio da invenção A gslana é am rolissacurido aniériicp produzido por Snfinpomonan elopes, Devida á sua capacidade em farpar géis revereivoxs termicamente, Pen como a sua elevada estanilidade cura vasta paca do pH , a peiana e atilirada na iednririe slimentar e farmacêutica,
Tendo por Paro estas propr iedae.es, a presence invenção tem corro objetive o st ill sacão deste poiissacárido como mat rir cromatogrâi ica,.l Coe esta finalidade, testou-se a e s f a.b i 1 I dude da ma t tis a Ccards d a s ua formed. aç a e com diferentes catides, verificando-se gue o ide cobro (TI) fel agaoie gue porrdsia o maior numero de ensaios A porosidade ; de uma ma tris e considerada uma das oaract©ris ricas fundamentais de um suporto oromatopráf100, Assim, per anáiises do SEÀ foi confirmada a proserpa de poros na formulação de goiana. tara comprovar a potencialidade ; da peiana como maorir cromatonrafica na purificação de biomoiécuias ©fetneu-se c estudo do perfil de elniçan de algumas proteínas modelo VCC iisoui,ma e d™ gu.imiofripsinã)u median to estes estudos verificou-se a retenção das proteínas usadas na mattir, conseguindo·· se a sua eluioAo cem o aumento da força ionioa,: Suta alem disse, a man i ρη i a ç ão da força i ónica ρofmi tin obsorvat dae as proteínas eivo se Iipam à metric com diferentes irtens idades.
Estado da, técnica Õ dasenvolvimento de estratégias de purificação do biomoiécuias f armaceutioau como proteínas:, anticorpos ou ::::::::::::3:7)3::93733:):):3)3)7::.:ί.θ3::7)930:):):03)370)):)33ο:.):3:)7)33<3:3:0:::::33:0330003303::7)33):))0:09:3):):73))):0:.3·:03)3?0<3:)): sssssíX^DaDííííí?DaííííííDaDaaeííííííÍaEíXDuODísígxeaDDííííííaeODDOiXROííííííaf;DS5aaeOiax;OEísíííííííítiai!5iííí; ::::::::::::0:07033:) :7)3:35s3:::::::::::::)3)9333::::::::::::::373::g73O:33:-7))))))))))3::g:9779í:g33033:0))))))))))33OO)))))))))g:3:) 33 fagoo) 3:)3))) 7777aiXÇá7façfj£iX^Ó^ççao^çasg||:OaçÍaSfl7f^Ç^fagj;:xxi|^,||^:çaígaáÇÇÍKa'X^jfça|?çi7Bfa|7açx?DÇi7 7777ύχΧϊθΒίί^χοΐ77Χχο^Οχχί7ΧθίΒ:Χχ^ί5Ϊοχϊ1Ι7)χί1ΐχΙ7ού^χχϊΧ^όχίχ^|ρΒ<10ρ;ο||*^:^^^*^^^^||^^|κ κ^κ^κ^κί^θ7^νΧϊχθ^οοοκ:κ:κοοχο/κ:κ:^οκκκοχοχθίχοροχοο·κίκίθ:Χο#ΰ^<κκκκ:^ pop o o o sos ó o o goou o 7: o o. llllBjS7llçB:x’xB;iaiiBx)OáOiiDai?iiil<aBaiiBi:íaiOllsOlCiiiCiaf)ejiiBaaiía^fpíf<i5<Diáax| lllll:içafa;çi>|;|;a^açaaii:4^xibçabçB:aaÍIIBsÃi)5iXxX;'iall)5:ax|áiú^aDa|íÇiilfjOç7a:iÊÍat;çe;ij|ss lllláÃlai^ááiaa7ã7iS:7u:jáfiÇgaip)oa^rpi^Boi^xoii)paie^dai)ai:ixafpa;p^o|||pççilB)iB7ái^iÉla )))))))):33:Í3ggÍOÍg)7iOOs3Í))))))))039)37g93g4:Í)97::)g7)a))))) sísísísíaçaxsaç:e^açíçaíííííçoa!PííííaaçRt:aa?ç:íííí:aaíííííeEíaa?eo^áíííDDaááá®^^EE!apDaí;fííííaoaíaí:íRE:Raiííí; llllaÍ)|aiç;|DÍÃÍlÍlÍÍí>eiÍlÍÍCB(ilDusÍa|:ÍaaX|l|aBlll7ÍÇ)ÉÍlÍiÍlieÍÍÉiÍ^íÍlÍl(Ífasl lllll|)ÍiillÍ^DÍ^i<:aiÃpij||la|alç:çç|si:iSBj:O:çf|)çlBf|)pjalÍa:5o|ápxf|itt?jijapji|a|oif)aj7 i7i7Bai:fBiaje|ç;BaÇipa:fi;eDiBassDaai?iBfaf'eaiçaaiBDi^ÍDaláçiS7sj)ÉsifieDaÍaçDãaeaxsss iiiiataiiaaaa:apaaafaiiaçp;aii^ppaaçiiiçii^xroitDãDaaXi73ÈóSiiáDÊioi7^ÉffiixíOiu:uBis j|||^ÇíjÇç;jj|Í7i||||f;aaS|j|ai|:af <0 07 :'.'·: \- \Λ\.·'· llllo|aiDDlliÍSxBalBlBiiliÍ7llIÃ|oBla|alaÃliaf'iDoieça^j;|a|£a:aiipp^aç?pij^alai aXwado ooOOOaliaO 039 gíoogos acdio £7:7,0-oo goie eol. otívoí).: <7 θ3Ο:θ7 3.009) . 03:3.0370000 097 O 7 00::? 033 00730035 00 73,73 77)3) 3703.330 )))))))))))Í44gsÍ))4BÍ)3g<3g)))gB7)|))))o7)ÍSg)i)))))i44)))Bigia^ .3« 33377)0733930 0330790000x4)770370 OOO 0 0.07-7 3.7 0.3930.7:- 003033907770 p<73) )))))))))))73730):7077737O37)7O:00)))))))))))))))777O)7)777g)3)))))))))))))))7)0i7))))))))))))))7)3)9393i7gO:0))))))))))))))O0Do4730)7400))))) ))))))))))))3)73703)37)3:)ΟΪ03|00))))))))))7770))))))))))7)0)9373)))))))))<307737)70::)))))))))7007:)033093)))))))))0:))))))))))7)337)9;00000))))^ ::707:37)000. )3:7 3:7 3 3900)3'30097 00003)00 £.033 0330. 09.9)773970 003)00:3 0000 0-3 0 7)70-0 :.:).:7:7.3 03)30 0.:07 033: 0)39)0 00p03)£7.03,o7. Ο< con sequent eme·"· te, uma: elevada capacidade de ligação, A elevada. porosidade e também una vantagem aa separação de biomolécniiss de grande tamanho. dims. matris rromatográfica baseada em geiane. beneficia dos factos enunciados anteriormente, bem como do soe caráter anisnico .catarei.. A presença do ião cobre (lli na. termal a cão do del pera além de aumentar a esfahiiidade da matrix; taxtbém cone citei uma vantagem ao eivei croxnac ogra fico : peie facto de permitir explorar cafres interações devido à caros positive desce ião, Esta matrio apt as eu ta t ar Per; vantagens a c n i v e I beds si r i a i dev i d o a simplicidade da ana forms.;, act o Pam como o bal.no caste associado,
Descrição geral da invenção d presente rnvcnçáo pretende desenvolver nma matris croma to grã fica; para a separação do Piomoléoulas, metric esta bassa da num: no1i mero po1à ssacaride de s i cnado por goiana, cuja estrotura consiste na repetição do dois resíduos de glicose, um de ácido glacorcrd.oo e cm de ramnes e, Acre see que na: f or ma 1 ação de go i á de gel a na, a presença de nations é fundamental para, o anxrento da sua es f ap i 1. idade.
Descrição detalhada da invenção
Esta invenção ; apresenta a formulação de uma matris cromaiog r á f 1 oa rendo por Paso o poI io sacarido ge1ana psra a purificação de piomoléoulas (figura li, íísísísígaianassíísín;e.oes:Sasuast:ttttgeííísísíçaf :3<çzS'Cssss\ne.ssssHS:X5nKKSssi:orçrx;Zin:í™aòK<ssssvisKS llllsOar:abÍ(Iç(dsg!p|p<gp^gx;iÇ^e-pg.i||ppg|ççgj)e||rpÇç|gçgÇÇ^Tg,Ççç|ç:fggpgu;gnÍdllO<ss llllB)ti(l:iÍlfBiCtÍÍÍÍfAÍlU:O(|jÍÍÍIÍÍÇÍllÍt(lÍÍiiÍllllIlÍS|IÍld|)OlSÍlBlÍE|pll lll|sOplÇ:lIt((lliBpflll)tTsfSíl|gÇllp:lftílrlllI)Í)*çlell)oeilttttPllttIl|j(UÍ)Í'i:aÍÇ::ÍÍll lllllpjjill;::Illisdsli)Il(lÍ(aljÍ.allppat?esilÍrÍeajlllÍtlu:jjjdtqr?rIisIsll(sall(rÍsijlllAÍl ssssserrsa:-iiieritrpa:p:duAs(tasrsssdpsqnpasss:c:rsstInili(dssc:dtulIrri)d:t^snrsqaassosi )))))))jIdp)))iS®Ijl)))SdjlI))))q))):e)))ÍgS))):Ída)))eÍlfiIÍ|) e,. as nauessxte: sara passar s cotsaa .· A tcrjausiagsc que 11111Ιρ:Ι:|Ρ0ΐη,1|0ΑΑό(5)ΡΡ11(11ρη:Ι:|0ΐ1^Ο11Ι111Ιρρρ:ρ11|(1κ111111Ιί:11Α:0Ρΐ11ρΐΒ·Ο0ΐ1Ι1::: sssi)psarr^enp:esi(jiidlnaessoesseasssssossdaiispnapisdipu:dipappiism:i(as;pssAs::peri:
IÍIÍ5a:0Í:PpirIadppda:aAU:fS:AdriIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIÍIIIIIII anseies oe ASM,; cujas imagens se eu sent.-vez repressnsadea na jjjjjjfa:g'aistjjej;jjjppjjPpptpjjgajjsiip;iiAjjpA<ii:rp:edpiiid);:jjsdjj<ipj(ipggedtsj:slsj:j lllljleeliggn:eijIf:AiiiAiA)jájf)5):iiAiásiAqitijrqi(biige|sUa-iajjijÀ<iAteiiAuiigA-iájiáii en suspensas, Pesas imagens: de spp rerifisçu-sa que ennan partiaulas apresentavas; una perosidane inerente, jjjjj)AjjigrsiiI:|peejjl:|jjaísi::inAijjssi|sijItsa;njjajjj:i|a)itliiiijjjjtíjjljijijiIajs:|Aa(jj ::s estude sea net tis da licaentí/alaiedc de proteínas medeie, à nr.arrv.sa os nortes ia espicsnea eooststis nau pauso rsrs:desslSd?a:vetii::ltriO'ienrr:ef:ars:ia:dssnpgirst:assosats:ijipssiiis^spstgdrsieriisspss a eleição efetuadá por agente da. forca ionica para 50b r«M de: íiaCi em tampão MES 10 m35 pH 5,2; ,
Estes estudos : demonstraram quo a BSA, lisarima o o-quimiotr ipsi.cu se lugar um à matrrr em condi, ç o es do baixa força ionica (tampão AEE 10 mA pH 5,2), o tor am todas elnidas com. 500 md do AaCl (figura. 5? < Considerando os diferentes pontoo isoelétricos (pi) das protornas estudadas: asa, p!~ 4,7; lisocima, pi- 11,55:; o-quimlo trips ina ,: pi·· 8,75 e o pH de 5,2 do carpa.o 2;2t, as proteinas apresentar· diferentes carpas nas condições crema f cgr áticas: u t i 1 i radas, : Dos ta f erma, a 52 A. apr e s eu t a- se carregada negai fremente eugnanic a llsotima e a o-quimiorripsina ; estão carregadas positivamente, O comport amento o r orna t ográ fled de r o t en ç á o do t oda s as proteínas na : matris no primeiro passo sugere uxr envolvimento de interações: ionieas quer peio caráter negativo da geiane, quer pela cargo positiva· do ião; cobre que e utilisado na formulação da goiana como estacilisador da matris,
Para melhor caraotoritar a potencial idade da matris de goiana para a separação de biomolécuiae, procedes-se a uma s egnudá es era regia o os; três p a s s o s o r orna t ogr áf i o o s .· Um primeiro passo de ligação com tampão EES 15 mb ph 5,2, um segundo; passo onde se aplicou nma força ienioa de 222 md de Pad 1 em tampão WS 15 mã pn 6,2 e um terceiro passo; de 4 00 mb de PaCl em tampão HES 10 mã pK 5,2, Estes ensaios demonstraram que a lisos ima. ficou retida na matris, sendo e I ui dá dom á ma i or força li chi ca ap 1 içada («50 mH 34o C1) 1 to entanto, a BÉA :e a ccqaimiotripsina foram; elnidas no passo intermédio de 200 md daCl, Os resultados são apresentados na fignra 7·, O diferente comportamento o r orna t ogr ático das proteínas sugere que a u-qrm.mio trips ina e a ESA apresentam uma menor força de interação com a matris relativamsnte á. X .).5:00 5.05.0,.. 3): <3'Χ0 0.05099:)0'9 55 Ο Ο Χ>ΟΟίΧ Χ.Ο3. 5.3.00 00 09: Ο OpO5909X3Ο 0.0 )))))))0χχοΒίΧχΐ9:9ΐ£ο4)))χο^^ ))))))))·4)))))ρχ4Βΐθ4χθ)))))3χ9ΒθΟο::θ|.4)))))3θ:θβ4χ9θχ:)) )))))))4οχ)χΙ14®|οΒΐ)))):)))74ΐ£ο4ΐ)7))))))))ο1ο114Χο)|4^ )))))))κ1θ43ΐθθ4ΐ·45)))44)))χ)3)θ|)))99)))1»)|Β1))))4^ ΙΙΙΙΙΙΙΙΙΟβΙίΒρΙΙΙΙΒβΙΙΙΙΙΙΙΙΙοοΒίΙΙΙοΒίΙΙΙΟΙ ))))))))θ|χ4θ44)))4)))£4ρ1£3)))))ΐ45Β£3Χχΐ£:θχ£4οθίθ4 )))))))))3gx7i7))))7<)))47jl))))9g'l4?j))):4)))ll£lx3)))XOxS4i® 7777aoxx7:S4x7xi)3)lx7aoi7BÍieii9iÍ7:Íl37ÍÍlÍÍ)5777777777777777777^ )))))))):|))Βΐ11θ9χ))44))1ΒΗ5θ|4κθ3:::®::):Β®^ lllllllllljjjífp Λ14. ϊ'Λ'ϊ?Γ <> ρο À -x Sxò :Í045S)|gO)))OX)XX5934:))4XÍ)7a|Í)3XÍl:)35as)íO)5))X50lí)))975í333955i4344i37)): ΗΗΗΗΗΗΗΗΗΗΗΟίΟΧΡΤΟ^ΟΧΟΧί^ίόΧΧΰΟΟΟΧΟΡΧχΟόΙ^)))))))))))))))))))))))))))) 777777777777Í)977i)lÍÍ4|álO)lí5l71|:7BÍlBxxl:77x|77l9Í)3;3|i4iaiil|;lx)|4 )))))))4χΐχ44χο3θ3)))4οΐ))β1ίΐ4:θ^ llllllllllllllllllll^llllfOwOWonlO^ ))))))))θ45.43ϊ)))))Χθ0.9ΧΟ:ΐί9)9'θΧ)3Βθ))))3θ3)449ο)3<959θο7)7θ9)7)7|:7))Χ37))1θ||)νρ)9:ί9θ7θ44))))0:Οκ)) 55555555550:004: X)))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))) 7777i:Bi:ilx7laxxBi777:l3iX)xl)x4i)397i)O7i974l|)0X)i)Xll5)li|iila9Olll4li
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Para além da soa versar 11 icad.e de interações, esta matrix pede ser pre parada da uma resma simples e com baixo seat o associado, sendo seomomáeaments viável do pente de vista rrrrrridddetr^Iáirrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrr
Fxemplo de aplicação a pctençiaiidade de aplicação da gelsna na pnrifdesças de toremoíésalas pede ser testada aspect fi earnest e co Is ei ames te da proteica oateotooi-P-meOritrausferase solúvel humana ;hACOAT1, a.......partir da 1 i s a d o s Pé1 u 1 a r e s camplaxes, 0 desenvolvimento: de estratégias de purificação desta proteína é de grande interesse para a indústria, farms o estica devi do á imporsaneia terapêutica: due a hiCOMi demonstra na : doença de Parkinson. besta forma, a versatilidade de Interacoões da matrix da gelara podo oondnxir a uma. essrav.eeia de parir 1 cação mais simplificada d de grande relevância economics.
Descrição das figuxa®
Figura is Representação esquemática da. estrutura molecular do polímero poiissacárido delana,
Fignra Ss Representação das oondiçdec nillixadas na formulação dos : géis na presença do ião actors, onde :t ............rapresenta as condições ap11cadas nestas £o rmu1acoes a is) represents os tempos obtidos, e nos ensaias consideradas 222225ρβ0ηΒ|;ΒβΐΒ1|222222222222222222222222222222222222222222222
Figura. Ss •Mwreswvdupfis dos conbiçbes uailisadas sa 22222i:ipi5ailn:f;a22bd22(ibdd:iiBjidi2ixd:ddis22)ndBd:dli2sfl5ia5dl2adidl22;i222(d;222 22222ηΒρ·2(|Β:οηο·Α222ρο2|2Β:(η:2ρθΒ222^θΑΐΐΧΐ·255222ΐ20Β222(5ρΐ1115ΒΙ22ΡΡ2ΛΒ;1ρχ5ΐ1ΐ:οΒ12 sàgrxra <? Ilpp.rwentaç'S:a das soada oans analisadas na 22222:ddÍas5l;tadid2l21Ídd2llad:xb22;*2d22ddídB:dUdí:Í22bd221ll(d22)t2(;ld<Íld22sdhdd221(;g .ssprgssnns. as sondaçoes gangas e gai sapsnssadg· gn tempos (((((((((((iaidPggbiiiipsllBBsiiPlllldeidBdliddillat®
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Figura 7s Representesão esgtematits. do perfil de eiuiçao das proteínas testadas, com o passo do ligação exoeotano com MBS 10 mA, a pn 6,2, e com: s elni.eeo s. sor promovida em dois passos, nm passe inieial a 200 sM SaCl e um. finai da 4 00 mb tail., na cosi (D) represares o perfil obtido para a u-cuimiotripsina, it; o perfil da 35A e fFj o da lisoaima, ntelixandoa mats ir de peiana nas condiodesotimi radas, onde a iinna. :som gnadrados representa as aesorvenoías registadas e a linha sem quadrados a torça ienioa. Estes assai os for am o on trotados te I a med 1 cã o das abs o r van. cl, as das fragbes a, 280 nm.
Claims (1)
- : A E X V X D X C A Ç Õ S Β47ύ00^όΒ;ΐΑ^Β3ΑΒ17ΒΒΒΑ^ΒίΒό777ΐ07)ΒΒόίΒΒδΒ7ΒΏ7Α'Β4Β0ΒΒΒθ^Β^Χ(|07777777 Ι1Ι1Ι1Β^|71ΐ7:Αό2Ι11:ύΧΡύΧΒΐ:ΒΒ^|(|·©1|1ό01ΙΒ5ΐι)|ΑύΙ1)6ό(01Ι(1ύ^1ΐΐ7θύ1ΐ7ΙΐΒΐΐ9ί2ύΙ1Ι7^ύ1Ι1Ι1Ι1^ 777777^O0eAlÍiBlB77dii70B77iijV?il(j77)i77i?03i77iBÍB^ÍÍib77ilf7^BÍ7ÍdáX:BBhA^ÚB77déÍiÍiÍi7 llllll)llllljÍlBj5ÍilBill|(|)lBBÍOÍlÍll|lllilB^B)iB01jllÍIÍÍ)BllÍÍ7jbÍllOlÍliÍllllll)^ 7777771id777BldjsÍ7í5t:TTjB77ÍgB^®B)3BBBíBá3:7BB^B777)BBiO7B^B^27777:Íii77iBBiB^JiBBÍ777BiÍBíl77)B7777777^ 777777Ú7Bii?Ssn(BBBBíiB«B:17BÍi737Bj:fiiú;'Ai‘47:sB^B:B17Bs)B77ó:BBBB5b:B:stld<g77d;íi7BlÚúi?h^f^id77777ss) llllll)lâ)jjBB^B)illlllllllllslllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllll llllll)B;B:lÍlllÍÍ)ÍiÍ7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í7Í70lllllllllllll^ lllllllllllll)Í)Bllll)eilB(sllll)ÍBilllll3illll)ÍB^|Bsillll)B-Óflll7BBBllllBB^B)Ú|iB)Íllll9lÍlll s)s)s)s)s)BÍIBill?lÍI®llÍÍ)j(s)A|ÍBBBjis)|)s)IÍÉils)s|s)sÍÉIBjs)sÍjl;jBllBÍBs)ijKÍ^ llllllB )3B.ÍBiilllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllss
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Citations (2)
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|---|---|---|---|---|
| US6203680B1 (en) * | 1998-02-05 | 2001-03-20 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Commerce | Electrophoresis gels |
| WO2009003952A2 (en) * | 2007-06-29 | 2009-01-08 | Pronota N.V. | Column and method for preparing a biological sample for protein profiling |
-
2012
- 2012-07-16 PT PT106446A patent/PT106446B/pt active IP Right Grant
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6203680B1 (en) * | 1998-02-05 | 2001-03-20 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Commerce | Electrophoresis gels |
| WO2009003952A2 (en) * | 2007-06-29 | 2009-01-08 | Pronota N.V. | Column and method for preparing a biological sample for protein profiling |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| BB1A | Laying open of patent application |
Effective date: 20130521 |
|
| FG3A | Patent granted, date of granting |
Effective date: 20140915 |