PT100566B

PT100566B - Azaspiranos imunomoduladores, composicoes farmaceuticas que os contem, sua preparacao e seu uso

Info

Publication number: PT100566B
Application number: PT100566A
Authority: PT
Inventors: Alison Mary Badger; David Aaron Schwartz; Gary James Bridger
Original assignee: Smithkline Beecham Corp
Priority date: 1991-06-07
Filing date: 1992-06-04
Publication date: 1999-06-30
Also published as: CA2110577A1; DE69232984D1; IE921827A1; KR940701253A; ES2191657T3; ATE235902T1; KR100251570B1; EP0587800A1; DE69232984T2; AU2247992A; NZ243029A; JPH06508367A; ZA924107B; MX9202713A; JP3155277B2; PT100566A; AU665359B2; EP0587800A4; WO1992022294A1; EP0587800B1

Description

MEMÓRIA DESCRITIVA Ês.

Campo do Invento presente invento refere-se a alguns novos compostos de azaspirano substituídos, a composições farmacêuticas que contêm estes compostos e a métodos para a utilização destes compostos para induzir um efeito imunossupressor num mamífero, incluindo um ser humano, que dele necessite.

Antecedentes do Invento

Foram já descritos derivados de azaspirano, processos para a sua preparação e métodos para o seu uso. Geschickter et al., Patente U.S. 4 468 393, concedida a 28 de Agosto de 1984.

Tenoso et al., Patente U.S. 4 654 333, concedida a 31 de Março de 1987.

Rice et al., J. Heterocvcl. Chem.. 10(5), 731-735 (1973).

Rice et al., J. Heterocvcl. Chem., 10(5), 737-741 (1973).

Rice et al., Patente U.S. 3 256 277, concedida em Junho 14,

1966.

Rice et al., Patente U.S. 3 282 947, concedida em Novembro 1, 1966.

Rice et al., J. Med. Chem.. 6., 388-402 (1963).

Rice et al., J. Heterocvcl. Chem.. 1(3), 125-127 (1964).

Rice et al., Patente U.S. 3 825 546, concedida em Julho 23, 1974.

DiMartino et al., J, Pharmacol. Exp, Therapeut., 236. 103-110 (1986).

Badger et al., Immunopharmacol.. 10. 201-207 (1985).

Geschickter Fund, Pedido de Patente Britânica Número 929, 739, publicado em Junho 26, 1963.

Um texto completo dos antecedentes do invento como descrito acima foi publicado em Badger, et al. Patente U.S. 4, 963, 557, concedida em Outubro 16, 1990.

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-3Sumário do Invento

O presente invento reside na verificação de que certos análogos azaspirano substituídos, novos, induzem um efeito imunossupressor, num mamífero, incluindo um ser humano, que dele necessite, e que são potentes agentes imunomoduladores.

Presentemente, os compostos do invento preferidos e os compostos usados nas composições farmacêuticas inventadas e nos processos inventados incluem:

invento refere-se também a um processo para induzir actividade de células supressoras em mamíferos, incluindo seres humanos, o qual compreende administrar, a um sujeito que necessite, uma quantidade eficaz de um composto imunomodulador agora inventado.

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Estão incluídas no presente invento composições farmacêuticas que compreendem um portador farmacêutico e compostos úteis nos processos do invento.

Descrição Detalhada do Invento

Os compostos agora inventados que são potentes agentes imunomoduladores têm a seguinte fórmula (I):

na qual:

m é 1 ou 2;

r! e R² são iguais ou diferentes e são seleccionados de entre hidrogénio ou alquilo de cadeia linear, cadeia ramificada ou cíclico, desde que o número total de átomos de carbono contidos em R¹ e R², quando tomados em conjunto, seja de 4-10; ou R¹ e R² estão ligados para formar um grupo alquilo cíclico contendo 3-7 átomos de carbono;

A está ausente ou presente como alquilo c^-c-jí e

R³ é um anel heterocíclico ou heterobicíclico, contendo portanto o referido anel heterocíclico ou heterobicíclico até 10 átomos de carbono e 1-3 heteroátomos de fórmula >NR⁴, onde R⁴está ausente ou presente como hidrogénio ou alquilo de cadeia linear contendo 1-3 átomos de carbono; ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável.

Um grupo preferido dos compostos inventados é o de Fórmula (I) em que:

m é 1;

R¹ e R² são cada um independentemente alquilo C₂ ou C₃;

A está ausente ou presente como alquilo C^-C₂; e

R³ é um anel heterocíclico, contendo portanto o referido

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-5- ->?' ♦.

anel heterocíclico até 6 átomos de carbono e 1-2 heteroátomos de fórmula >NR⁴, onde R⁴ está ausente ou presente como hidrogénio ou metilo.

Adicionalmente, de entre os compostos agora inventados são preferidos os de Fórmula (I) em que:

m é 1;

R¹ e R² são cada um propilo;

A está ausente; e

R³ é um anel heterocíclico, contendo portanto o referido anel heterocíclico até 6 átomos de carbono e 1 heteroátomo de fórmula >NH.

Os anéis heterocíclicos ou heterobicíclicos preferidos tal como definidos acima são aqueles em que pelo menos um dos referidos heteroátomos está posicionado com três átomos de carbono entre o heteroátomo sujeito e o substituinte 2-aza.

Os compostos de Fórmula (I) estão incluídos nas composições farmacêuticas e são usados nos processos do invento.

Os compostos deste invento são preparados por procedimentos descritos abaixo e ilustrados pelos exemplos. Os reagentes, grupos protectores e funcionalidade da molécula devem ser consistentes com as transformações químicas propostas. Os passos da síntese devem ser compatíveis com os grupos funcionais e os grupos protectores.

Os compostos de Fórmula (I) são preparados como se descreve no Esquema I, onde R¹, R², R³ e A são definidos como para a Fórmula I e a definição de R⁴ compreende adicionalmente grupos protectores, preferivelmente grupos protectores de benzilo, os quais são dissociados para preparar os substituintes de R⁴, definido como para a Fórmula I, ou são dissociados e depois feitos reagir para preparar os substituintes de R⁴ definido como para a Fórmula I.

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líalh₄

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Ο esquema I mostra a formação de compostos de Formula (I). Os compostos anidrido de partida são conhecidos e são sintetizados a partir de precursores disponíveis usando procedimentos conhecidos. De acordo com o Esquema I, uma solução de um composto anidrido (a) e um composto de amina primária substituída são adicionados a um solvente orgânico apropriado, preferivelmente xileno ou tolueno, para formar uma mistura reaccional. Esta mistura reaccional é agitada ao refluxo, com remoção de água constante, e evaporada para formar compostos de Fórmula (b).

Os compostos de Fórmula (c) são preparados adicionando a um composto de Fórmula (b), dissolvido num solvente orgânico adequado, tal como tetra-hidrofurano (THF), um agente redutor adequado, preferivelmente hidreto de alumínio e lítio.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis e a sua preparação são

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Ρ 50018 —7— %''^^Τ***^***^ — bem conhecidos dos peritos na arte. Os sais farmaceuticamente aceitáveis preferidos para os compostos básicos de Fórmula (I) incluem, não limitativamente, hidrocloreto, citrato, maleato, lactato, hidrobrometo e sulfato.

Os compostos de Fórmula (I) podem formar hidratos ou solvatos. É conhecido dos peritos na arte que os compostos carregados formam espécies hidratadas quando liofilizados com água, ou formam espécies solvatadas quando concentrados numa solução com um solvente orgânico apropriado.

Todos os compostos de Fórmula (I) são úteis para o tratamento de um animal, incluindo seres humanos, que necessite de imunomodulação. Esta actividade imunomoduladora foi determinada utilizando quer o ensaio de actividade da célula supressora descrito por Badger et al., ImmunoDharmacoloqy 10, 201-207 (1985) quer o ensaio de actividade estimulante de colónia descrito abaixo.

No ensaio de actividade da célula supressora, obtiveram-se ratazanas Lewis consanguíneas em Charles River Breeding Laboratories (Wilmington, MA, E.U.A.). As ratazanas foram mantidas a água e Chow de rotina para ratazanas e foram usadas às 6 a 8 semanas de idade (160-180 g). Em qualquer dada experiência só foram usadas ratazanas com a mesma idade, estirpe e sexo. A concanavalina A (Con A) foi obtida em Pharmacia Fine Chemicals (Piscataway, NJ) e foi dissolvida num meio de cultura de tecido (RPMI-1640, Flow Laboratories, Rockville, MD) que foi suplementado com penicilina, estreptomicina e L-glutamina (Grand Island Biological Co., Grand Island, NY) e com 10% de soro de vitela fetal inactivado pelo calor (56^eC, 30 min). Este meio será daqui em diante designado por RPMI-10. Para tratamento in vivo, os compostos foram dissolvidos em 0,5% de tragacanta e foram administrados oralmente uma vez ao dia. As células do baço de animais tratados com os compostos de fórmula (I) foram estabilizadas em RPMI-10 a 5 x 10®/ml. Realizaram-se experiências com co-culturas para a determinação de células supressoras, adicionando-se primeiro números variáveis das

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Ρ 50018 células supressoras putativas (0,15 a 5 x 10⁵) a placas de microtitulação com fundo redondo e com 96 poços (Linbro, Flow Labs) em 100 μΐ de RPMI-10. Estas células foram então irradiadas (2000 Rad) numa célula Gamma 40 com uma fonte de 137Cs. A estas culturas adicionaram-se 5 x 10⁵ células normais e uma concentração óptima de Con A (5 /xg/ml) e o volume final foi ajustado a 200 μΐ. As culturas de células foram incubadas durante 72 horas a 37°C numa atmosfera de 5% de CO₂ e pulsadas com [³H]timidina 0,5 /xCi (actividade específica 1,9 Ci/mmol; schwarz/Mann, Orangeburg, NY) durante as últimas 16 horas de cultura. As células foram colhidas num colector de amostras múltiplas automatizado e a radioactividade associada às células foi contada num contador de cintilação líquida Beckman. A actividade significativa das células supressoras é determinada por comparação da incorporação de ³H-timidina (cpm) de co-culturas contendo células não tratadas com a de culturas contendo células tratadas, pelo teste de t de Student.

A actividade das células supressoras é calculada do modo que se segue. Foi gerada uma representação da percentagem de supressão (variável dependente) versus logaritmo (base e) do número de células supressoras (variável independente) e a área sob a curva (AUC) representada pelos pontos desta representação foi determinada pela regra do trapezóide. A regra do trapezóide proporciona AUC por meio da soma das áreas dos trapezóides cujos vértices estão localizados em valores adjacentes da variável independente e nos correspondentes valores da variável dependente. Os dados de AUC estão representados em unidades de supressão. 0 di-hidrocloreto de N,N-dimetil-8,8-dipropil-2-azaspiro[4.5]decano-2-propanamina (Composto A) é revelado e reivindicado em Badger et al., Patente u.s. n^a 4,963,557 como potente agente imunomodulador indutor de células supressoras, o qual exibe uma actividade de 172 unidades no ensaio da actividade das células supressoras a 30 mg/kg. (Ver quadro II, coluna 9, composto 2).

Os compostos indutores de células supressoras têm também sido associados a um efeito hematopoiético transiente (King et

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al.) Int. J. Immunopharmac., 13, N^a 1, 91-100 (1991), (King I). Um indicador da estimulação hematopoiética é um aumento da actividade estimulante de colónias no soro (King I). Como tal, o potencial de indução de células supressoras dos compostos pode ser facilmente determinado utilizando o ensaio da actividade estimulante de colónias descrito abaixo.

No ensaio da actividade estimulante de colónias é dada uma injecção oral ou I.P. (mg/kg) de PBS ou do composto que está a ser investigado a ratinhos (Fêmeas C57BL, Jackson Laboratories, ME). Remove-se sangue 6 horas mais tarde e coloca-se num tubo não heparinizado. O sangue é rodado a 2000 RPM durante 20 minutos para separar o soro. São então adicionadas várias diluições de soro à linha de células NFS-60 (linha de células mielóide murinas dependentes de IL-3 que responde a factores de estimulação de colónias). A resposta proliferativa à actividade estimulante de colónias no soro é determinada por medição da incorporação de ³H-timidina durante as últimas 6 horas de um período de 24 horas de cultura.

Para comparação dos análogos de azaspirano foi desenvolvido um programa que podia ser usado para comparar a actividade estimulante de colónias gerada em diferentes experiências e as actividades de diferentes compostos. Isto foi calculado da seguinte forma. Foi gerada uma representação da percentagem de estimulação (variáveis dependentes) e a área sob a curva (AUC), representada pelos pontos desta representação, foi determinada pela regra do trapezóide. A regra do trapezóide proporciona AUC por meio da soma das áreas dos trapezóides cujos vértices estão localizados nos valores adjacentes da variável independente. Os dados de AUC estão representados em unidades de estimulação. 0 soro de ratinhos tratados com uma única injecção

I.P. de Composto A (30 mg/kg) contém, por este método, 1655 unidades de actividade estimulante de colónias (valor médio obtido de quatro experiências).

Os compostos no âmbito deste invento foram testados e mostraram ter actividade de 109-248 unidades no ensaio de

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P 50018 5'^: actividade de células supressoras ( a 30 mg/kg) e de 592 a 2000 unidades no ensaio da actividade estimulante de colónias (a 30 mg/kg). Os compostos no âmbito deste invento são potentes agentes imunomoduladores.

Por gerar células supressoras, induzir células supressoras ou induzir actividade das células supressoras entende-se que o composto induz uma actividade semelhante á da célula supressora, p. exp., uma célula que é capaz de suprimir a função imune de uma célula normal num ensaio de co-cultura in vitro tal como o de Rich e Pierce, J. Exp. Med. , 13 7, 649 (1973). As células do baço de animais tratados foram estabilizadas a diferentes concentrações com células normais. Estas células supressoras são também capazes de inibir reacções de linfócitos mistos, a síntese de anticorpos e respostas de hipersensibilidade do tipo retardado.

Os compostos que induzem actividade de células supressoras têm também mostrado inibir a produção de citoquinas, particularmente inibir a produção de interleucina-1 (IL-1) e inibir a produção de factor de necrose tumoral (TNF), em Badger et al. Pedido de patente U.S. n² 657,578, cujas revelações são aqui incorporadas por referência.

As actividades biológicas atribuídas a IL-1 são reveladas no pedido U.S. n^s 657,578 e são resumidas no Quadro A abaixo.

Quadro A

Actividades Biológicas Atribuídas a IL-1

Febre (em coelhos, ratinhos e ratazanas);

Hipoferremia; Hipozincemia; Hipercupremia;

neutrófilos sanguíneos proteínas da fase aguda hepática

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ressorção (resorption) óssea, incluindo; osteoprose e doença de Paget quebra de cartilagens proteólise do músculo sono de ondas lentas (slow-wave) procoagulante endotelial proteases condrócitas colagenase sinovial aderência de neutrófilos endoteliais desgranulação de neutrófilos superóxido de neutrófilos, e produção de interferon Aumentados;

Proliferação de fibroblastos células gliais células mesangiais fibroblastos sinoviais linhas de células EBV B;

Quimiotaxia de monócitos neutrófilos linfócitos;

Estimulação de PGE₂ em hipotalamo córtex músculo esquelético fibroblasto dérmico condrócito macrófago/monócito endotélio (PGI₂);

síntese hepática de albumina apetite, e ligação cerebral de opióides

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Diminuídas;

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Aumento de respostas de células T respostas de células B actividade de NK produção de IL-2 produção de linfoquina.

aparecimento de um composto que inibe a produção de IL-1 proporciona uma abordagem terapêutica para doenças em que está implicada a produção excessiva ou não regulada de IL-1.

Badger et al. (Pedido n^a 657,578) também revela várias condições em mamíferos nas quais está implicado TNF, na mediação ou exacerbação.Estas condições incluem: artrite reumatóide, espondilite reumatóide, osteoartrite, artrite gotosa e outras condições artríticas; sépsis, choque séptico, choque endotóxico, sépsis gram negativa, síndrome do choque tóxico, síndrome da dificuldade respiratória no adultos, malária, doença inflamatória do pulmão, doenças de ressorção óssea, lesão por reperfusão, reacção enxerto vs. hospedeiro, febre e mialgias devidas a infecção, tal como gripe, caquexia secundária a infecção ou malignidade, caquexia secundária a síndrome da imunodeficiência adquirida (SIDA), SIDA, formação quelóide, formação de tecido de cicatrização, doença de Crohn, colite ulcerativa ou pirese.

Os compostos no âmbito deste invento, como agentes de indução de células supressoras, também têm utilidade na inibição da produção de citoquinas, particularmente IL-1 e TNF.

termo citoquina como usado aqui significa qualquer polipéptido segregado que afecta as funções de outras células, e é uma molécula que modula interacções entre células na resposta imune ou inflamatória. Uma citoquina inclui, não limitativamente, monoquinas e linfoquinas, independentemente de quais as células que as produzem. Por exemplo, uma monoquina é

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-13geralmente considerada como sendo produzida e segregada por uma célula mononuclear, tal como um macrófago e/ou monócito, mas muitas outras células produzem monoquinas, tal como células assassinas naturais, fibroblastos, basófilos, neutrófilos, células endoteliais, astrócitos cerebrais, células de estroma da medula óssea, queratinócitos epidérmicos e linfócitos As linfoquinas são geralmente consideradas como sendo produzidas por células linfócitos. Exemplos de citoquinas incluem, não limitativamente, interleucina-1 (IL-1), factor de necrose tumoral alfa (TNFa) e factor de necrose tumoral beta (TNFjB).

A expressão quantidade inibidora da produção de citoquina, como usada aqui, significa uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula (I), a qual irá provocar, quando administrada para o tratamento, profilático ou terapêutico, de qualquer estado de doença que é exacerbado ou causado por produção excessiva e não regulada de citoquina, uma diminuição dos níveis in vivo da citoquina para níveis normais ou abaixo do normal.

A expressão inibição da produção de citoquinas, como usada aqui, significa:

a) uma diminuição de níveis excessivos de citoquinas, in vivo, num mamífero, incluindo um ser humano, para níveis normais ou níveis abaixo do normal por inibição da libertação in vivo de citoquinas por todas as células, incluindo, não limitativamente, monócitos ou macrófagos;

b) uma regulação por defeito, ao nível da transcrição ou tradução, de níveis excessivos de citoquinas, in vivo. num mamífero, incluindo um ser humano, para níveis normais ou níveis abaixo do normal; ou

c) uma regulação por defeito, por inibição da síntese directa de citoquinas, como um acontecimento pós tradução.

Mostrou-se também, em Badger, Pedido de Patente U.S. n^B

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622,452, cujas revelações são aqui incorporadas por referência, que os compostos que induzem actividade semelhante à das células supressoras se combinam sinergicamente com compostos imunossupressores que induzem células não supressoras, para produzir potentes agentes imunomoduladores. Os compostos no âmbito deste invento, como agentes imunomoduladores indutores de de células supressoras, também têm utilidade para induzir sinergicamente actividade imunosupressora num mamífero, incluindo um ser humano, que dele necessite, quando terapeuticamente combinados com um composto imunossupressor indutor de células não supressoras.

Este invento também se refere a uma composição farmacêutica que compreende um portador ou diluente farmaceuticamente aceitável e uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula (I).

Um composto de Fórmula (I) é administrado numa forma de dosagem convencional, preparada por combinação de uma quantidade terapeuticamente eficaz (i.e., uma quantidade imunomoduladora eficaz) de um composto de Fórmula (I) (ingrediente activo) com portadores ou diluentes farmacêuticos standard, de acordo com procedimentos convencionais. Estes procedimentos podem envolver mistura, granulação e compressão ou dissolução de ingredientes, como apropriado na desejada preparação.

portador farmacêutico empregue pode ser, por exemplo, um sólido ou líquido. Exemplos de portadores sólidos são lactose, terra alba, sacarose, talco, gelatina, ágar, pectina, goma arábica, estearato de magnésio, ácido esteárico e similares. Exemplos de portadores líquidos são xarope, óleo de amendoim, óleo de oliva, água e similares. Analogamente, o portador ou diluente pode incluir material retardador bem conhecido na arte, tal como monoestearato de glicerilo ou diestearato de glicerilo, sozinho ou com uma cera, etilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, metacrilato de metilo e similares.

Pode ser empregue uma grande variedade de formas farmacêuticas. Assim, se se usar um portador sólido, a

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preparação pode ser transformada num comprimido,	colocada numa

cápsula de gelatina dura sob a forma de pó ou de pelota ou estar sob a forma de rebuçado ou pastilha. A quantidade de portador sólido variará largamente, mas será preferivelmente de cerca de 25 mg a cerca de 1 g. Se se usar um portador líquido, a preparação estará na forma de um xarope, emulsão, cápsula de gelatina macia, solução ou suspensão injectável estéril numa ampola ou frasco ou suspensão líquida não aquosa.

Para se obter uma forma de dose solúvel em água e estável, um composto de Fórmula (I) é dissolvido numa solução aquosa de um ácido orgânico ou inorgânico, tal como uma solução 0,3 M de ácido succínico, ou preferivelmente de ácido cítrico.

Adicionalmente, o composto de Fórmula (I) é dissolvido num co-solvente adequado ou em suas combinações. Exemplos de tais co-solventes adequados incluem, não limitativamente, álcool, propilenoglicol, polietilenoglicol 300, polisorbato 80, glicerina e similares, em concentrações variando entre 0-60% do volume total.

Preferivelmente, cada unidade de dosagem parentérica conterá o ingrediente activo numa quantidade de cerca de 0,1 mg a cerca de 500 mg. Preferivelmente cada unidade de dosagem oral conterá o ingrediente activo numa quantidade de cerca de 1 mg a cerca de 1000 mg.

As formulações tópicas do presente invento, tanto para uso veterinário como para uso médico em seres humanos, compreenderá um ingrediente activo em conjunto com um ou mais portador(es) e opcionalmente qualquer(quaisquer) outro(s) ingrediente(s) terapêutico(s) . O(s) portador(es) tem(têm) que ser aceitável(aceitáveis)'· no sentido de serem compatíveis com os outros ingredientes da formulação e de não serem prejudiciais para o seu receptor.

As formulações adequadas para administração tópica incluem preparações líquidas e semi-líquidas adequadas para penetração

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L através da pele até ao local em que o tratamento é necessário: linimentos, loções, cremes, unguentos ou pastas e gotas adequadas para administração aos olhos, ouvidos ou nariz.

As gotas de acordo com o presente invento podem compreender soluções ou suspensões aquosas ou oleosas estéreis e podem ser preparadas por dissolução do ingrediente activo numa solução aquosa adequada de um agente bactericida e/ou fungicida e/ou qualquer outro conservante adequado, e preferivelmente inclui um agente tensioactivo. A solução resultante pode então ser clarificada por filtração, transferida para o recipiente adequado, o qual é então selado e esterilizado em autoclave ou mantida a 90-100°C durante meia hora. Alternativamente, a solução pode ser esterilizada por filtração e transferida para um recipiente por uma técnica asséptica. Exemplos de agentes bactericidas e fungicidas adequados para inclusão nas gotas são nitrato ou acetato fenilmercúrico (0,002%), cloreto de benzalcónio (0,01%) e acetato de clorhexidina (0,01%). Solventes adequados para a preparação de uma solução oleosa incluem glicerol, álcool diluído e propilenoglicol.

As loções de acordo com o presente invento incluem as que são adequadas para aplicação à pele ou aos olhos. Uma loção para os olhos pode compreender uma solução aquosa estéril contendo opcionalmente um bactericida e pode ser preparada por métodos similares aos da preparação de gotas. Loções ou linimentos para aplicação à pele também podem incluir um agente para acelerar a secagem e para refrescar a pele, tal como um álcool ou acetona, e/ou um humidificador tal como glicerol ou um óleo tal como óleo de rícino ou óleo de amendoim.

Cremes, unguentos ou pastas de acordo com o presente invento são formulações semi-sólidas do ingrediente activo para aplicação externa. Eles podem ser feitos por mistura do ingrediente activo sob a forma finamente dividida ou sob a forma de pó, sozinha ou em solução ou suspensão num fluido aquoso ou não aquoso, com o auxílio de maquineria adequada, com uma base gordurosa ou não gordurosa. A base pode compreender

74014 Ρ 50018 hidrocarbonetos tal como parafina dura, mole ou líquida, glicerol, cera de abelhas, um sabão metálico; uma mucilagem; um óleo de origem natural tal como amêndoa, milho, amendoim, rícino ou de oliva; gordura de lã ou seus derivados, ou um ácido gordo tal como ácido esteárico ou ácido oleico em conjunto com um álcool tal como propilenoglicol ou macrogóis. A formulação pode incorporar qualquer agente tensioactivo adequado tal como um surfactante aniónico, catiónico ou não iónico tal como ésteres de sorbitano ou seus derivados de polioxietileno. Podem também ser incluídos agentes de suspensão tais com gomas naturais, derivados de celulose ou materiais inorgânicos tais como sílicas siliciosas, e outros ingredientes tais como lanolina.

Os compostos de Fórmula (I) são todos activos como agentes imunomoduladores em animais, incluindo seres humanos, que necessitem dessa imunomodulação quando esses compostos são administrados a esses animais de acordo com o método deste invento. A expressão imunomodulador, agente imunomodulador ou composto imunomodulador, como aqui usada, significa que cada um dos compostos de Fórmula (I) é capaz de induzir supressão imune via indução da actividade do tipo célula supressora (tal como evidenciado pela sua actividade no ensaio da actividade da célula supressora e/ou no ensaio da actividade da célula supressora e no ensaio da actividade estimulante de colónias descrito acima). As indicações para terapia usando um agente imunomodulador incluem, não limitativamente, o tratamento dos seguintes estados de doença:

artrite reumatóide lúpus sistémico eritematoso esclerose múltipla rejeição aguda de transplantações/enxertos de orgãos ou medula óssea miastenia gravis esclerose sistémica progressiva mieloma múltiplo dermatite atópica hiperimunoglobina E hepatite activa crónica negativa por antigénio da hepatite B

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-18- / tiróidite de Hashimoto febre familiar mediterrânica doença de Grave anemia hemolítica auto-imune cirrose biliar primária doença inflamatória dos intestinos diabetes mellitus dependente de insulina

Este invento também se refere ao uso de um composto de Fórmula (I) no tratamento de um animal que necessite de imunomodulação, incluindo seres humanos e outros mamíferos, o qual compreende administrar a esse animal uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula (I) ou de um seu sal, hidrato ou solvato, farmaceutimente aceitável. O termo tratamento significa terapia profilática ou terapêutica. O composto de Fórmula (I) é administrado a um animal que necessite de tratamento imunomodulador numa quantidade suficiente para produzir essa imunomodulação num grau terapêutico ou profilático. Esse composto de Fórmula (I) pode ser administrado a esse animal numa forma de dosagem convencional preparada por combinação do composto de Fórmula (I) com um portador ou diluente farmaceuticamente aceitável convencional, de acordo com técnicas conhecidas. Será facilmente compreendido por um perito na arte que a forma e caracter do portador ou diluente farmaceuticamente aceitável será ditada pela quantidade do ingrediente activo com o qual será combinado, pela via de administração e por outras variáveis bem conhecidas.

A via de administração do composto de Fórmula (I) pode ser oral, parentérica, por inalação ou tópica. 0 termo parentérica, como aqui usado, inclui administração intravenosa, intramuscular, subcutânea, rectal, vaginal ou intraperitoneal. As formas subcutânea e intramuscular de administração parentérica são geralmente preferidas. O regime de dosagem parentérica diário para um composto será preferivelmente de cerca de 0,1 mg a cerca de 1 000 mg por dia. O regime de dosagem oral diário será preferivelmente de cerca de 1 mg a cerca de 2 000 mg.

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Os compostos de Fórmula (I) podem também ser administrados por inalação. Por inalação entende-se administração intranasal e por inalação oral. As formas de dosagem apropriadas para esta administração, tal como uma formulação em aerossol ou inalador com doseador, podem ser preparadas por técnicas convencionais. A quantidade de dosagem diária preferida de um composto de Fórmula (I) administrado por inalação é de cerca de 10 mg a cerca de 100 mg por dia.

Os compostos de Fórmula (I) podem também ser administrados topicamente.

A quantidade de um composto de Fórmula (I) (daqui em diante designado por ingrediente activo) necessária para o efeito terapêutico por administração tópica variará, evidentemente, com o composto escolhido, a natureza e gravidade da condição inflamatória e com o animal a sofrer tratamento e está em última análise dependente do discernimento do médico. Uma dose imunomoduladora adequada de um composto de Fórmula (I) é de 1,5 mg a 500 mg de base por quilograma de peso corporal para administração tópica, sendo a dosagem mais preferida de 1 mg a 50 mg/kg de peso corporal do animal, por exemplo 5 mg a 25 mg/kg; administrado duas ou três vezes ao dia. Para aplicação à pele, podem ser aplicados 1 mg a 500 mg de ingrediente activo por aplicação, preferivelmente de 10 mg a 100 mg por aplicação.

Por administração tópica entende-se administração não sistémica e inclui a aplicação de um composto de Fórmula (I) externamente à epiderme, à cavidade bucal e instilação de um tal composto no ouvido, olho e nariz, e quando o composto não entra significativamente na corrente sanguínea. Por administração sistémica entende-se administração oral, intravenosa, intraperitoneal e intramuscular.

Embora seja possível administrar sozinho um ingrediente activo, é preferível apresentá-lo como uma formulação farmacêutica. 0 ingrediente activo pode compreender, para administração tópica, de 0,001% a 10% p/p, p. exp. 1% a 2% em

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-20peso da formulação, embora ela possa compreender tanto quanto 10% p/p mas preferivelmente não mais de 5% p/p e mais preferivelmente 0,1% a 1% p/p da formulação.

Será evidente para um perito na arte que a quantidade e o espaçamento óptimos das dosagens individuais do composto de Fórmula (I) serão determinadas pela natureza e extensão condição a tratar, forma, via e local de administração e pelo animal particular a ser tratado, e que esses óptimos podem ser determinados por técnicas convencionais. Será também de notar por um perito na arte que o curso óptimo do tratamento, i.e. o número de doses de composto de Fórmula (I) dado por dia durante um número de dias definido, pode ser determinado pelos peritos na arte usando testes de determinação do curso do tratamento, convencionais.

Sem mais elaboração, crê-se que um perito na arte pode usar o presente invento na sua total extensão usando a descrição precedente. Os exemplos que se seguem devem ser contudo entendidos como meramente ilustrativos e não, de modo algum, como uma limitação do âmbito do presente invento.

I. EXEMPLOS DE SÍNTESE

Nos exemplos que se seguem, a temperatura está em graus Centígrados (⁰ C).

anidrido do ácido 4,4-dipropilciclo-hexano-l-carboxi-1-acético, o anidrido do ácido 4,4-dietilciclo-hexano-l-carboxi-l-acético, o anidrido do ácido 4,4-dipropilciclo-hexano-1,1-diacético, e o anidrido do ácido 4,4-dietilciclo-hexano-1,1-diacético foram sintetizados como descrito na Patente U.S. 4,963,557. A 4-amino-l-benzilpiperidina, o hidreto de alumínio e lítio e a tropinona foram adquiridos em Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI) . A 3R-pirrolidina e a 3S-pirrolidina foram adquiridas em CTC Organics (Atlanta, GA).

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Ρ 50018

-21EXEMPLO 1

Di-hidrocloreto de 2-(4-piperidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiro Γ 4.51-decano (i) 2-Γ 4-f N-Benzil)piperidinil1-8,8-dipropil-2-azaspiro r 4.5 ] - decano-1,3-decano

A uma solução de anidrido do ácido 4,4-dipropilciclo-hexano-

1-carboxi-l-acético (1 equivalente molar) em xileno adicionou-se

4-amino-l-benzilpiperidina (1 equivalente molar). A mistura reaccional foi aquecida ao refluxo com uma ratoeira de Dean Stark até ser recolhido na ratoeira 1 equivalente de água. A mistura reaccional foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida para dar um sólido branco. A imida em bruto foi dissolvida em acetato de etilo em excesso seguindo-se duas lavagens com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio para remover do produto qualquer ácido-amida residual. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada para dar a imida desejada sob a forma de um sólido branco; pf 148-149°C; rendimento de 90-95%.

(ii) 2— Γ4 —(N-Benzil)niperidinil1-8,8-dipropil-2-azaspiroΓ4.51decano

A uma mistura de hidreto de alumínio e lítio (3,2 equivalentes molares) em tetra-hidrofurano adicionou-se gota a gota uma solução de 2-[4-(N-benzil)piperidinil]-8,8-dipropil-2-azaspiro[4.5]-decano-1,3-diona (1 equivalente molar) em tetra-hidrofurano. A mistura reaccional foi agitada durante 2-6 h depois da finalização da adição. 0 hidreto em excesso foi anulado com deca-hidrato de sulfato de sódio e a mistura resultante foi filtrada e o filtrado foi concentrado para dar a desejada diamina sob a forma de um óleo incolor e viscoso. O óleo foi usado directamente sem mais purificação; 90-95% de rendimento.

74014

Ρ 50018 (iii) 2-(4-Piperidinil) -8,8-dipropil-2-azaspiro Γ4.5Ί -decano/..^. „'

A uma suspensão de 10% de paládio em carbono (0,1 equivalentes molares) numa solução de ácido fórmico a 7,5% em metanol adicionou-se 2-[4-(N-benzilJpiperidinil]-8,8-dipropil-2azaspiro[4.5]-decano (1 equivalente molar). A mistura reaccional foi hidrogenada a uma pressão de hidrogénio de 420 kPa (60 psi) num aparelho de hidrogenação Parr, à temperatura ambiente, até a absorção de hidrogénio ter cessado (48-96h). 0 catalisador foi removido por filtração através de celite e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. 0 resíduo foi dissolvido em água e em seguida baseifiçado com NaOH a 10%. A emulsão aquosa resultante foi extractada com éter etílico. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada para dar o produto diamina desbenzilada, sob a forma de um produto incolor; rendimento de 90-95%.

(iv) Di-hidrocloreto de 2-(4-piperidinil)-8,8-dipropil-2azaspiro Γ 4.51-decano

Dissolveu-se 2-(4-piperidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiro[4.5]decano numa porção mínima de etanol anidro e adicionou-se a uma solução arrefecida de cloreto de hidrogénio em etanol. Por adição de um grande volume de éter formou-se um precipitado branco que foi isolado por filtração. 0 sólido branco foi recristalizado em etanol ou metanol; pf 298-300°C; 85-90% de rendimento.

EXEMPLO 2

Di-hidrocloreto de 2-(4-(N-metil)piperidinil)-8,8-dipropil-2azaspiro Γ 4.5 Ί-decano (i) 2-(4-(N-Metil)piperidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiro Γ 4.51 decano

A uma solução de 2-(4-piperidinil)-8,8-dipropil-2azaspiro[4.5]-decano (1 equivalente molar, preparado de acordo com o Exemplo 1 (iii))) em acetonitrilo adicionou-se formaldeído

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Ρ 50018 ãj-23aquoso a 37% (5 equivalentes molares) e cianoboro-hidreto de sódio (1,6 equivalentes molares). A mistura reaccional foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. Adicionou-se KOH 2N e extractou-se a mistura reaccional duas vezes com acetato de etilo. Os extractos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados para dar óleo viscoso amarelo. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica usando MeOH/acetato de etilo/hidróxido de amónio conc. (74/24/1,5) como eluente. O produto foi isolado sob a forma de um óleo incolor; 60% de rendimento.

(ii) Di-hidrocloreto de 2-(4-(N-metil)piperidinil)-8,8-dipropil-

2-azaspiro Γ 4.5 Ί-decano

O composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 1 (iv) substituindo 2-(4-piperidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiro[4.5]decano por 2-(4-(N-metil)piperidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiro[4.5]-decano; pf 332-334°C.

EXEMPLO 3

Di-hidrocloreto de 2-(4-piperidinil)-8,8-dietil-2-azaspiro Γ 4.5 Ί decano

O composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 1 (i-iv) substituindo anidrido do ácido 4,4-dipropilciclo-hexano-1-carboxi-l-acético por anidrido do ácido 4,4-dietilciclo-hexano-1-carboxi-l-acético; pf 331-332°C.

EXEMPLO 4

Di-hidrocloreto de 2-f2-f4-imidazolil)etil)-8,8-dipropil-2-azaspiro Γ 4.51-decano (i) 2-(2-(4-Imidazolil)etil)-8,8-dipropil-2-azaspiroΓ4.51-decano

O composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 1

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Ρ 50018

-24'j&r·'.

(i-iii) substituindo 4-amino-l-benzilpiperidina por histamina.

(ii) Di-hidrocloreto de 2-(2-( 4-imidazolil)etil) -8,8-dipropil-2azaspiro Γ 4.51-decano

Dissolveu-se 2-(2-(4-imidazolil)etil)-8,8-dipropil-2-azaspiro[4.5]-decano numa quantidade mínima de etanol e adicionou-se uma solução de HCl^gj/EtOH. 0 di-hidrocloreto não precipitou. A solução foi concentrada até à secura e colocada numa estufa de vácuo durante a noite a 60°/5 mm para dar o desejado sal di-hidrocloreto, sob a forma de um sólido branco. 72% de rendimento; p.f. 258-262°C.

EXEMPLO 5

Dimaleato de 2-f3R-pirrolidinil)-8.8-dipropil-2-azaspiror4.51decano (i) 2-(3R-Pirrolidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiroΓ 4.51-decano-1,3diona

A uma solução de anidrido do ácido 4,4-dipropilciclo-hexano-

1-carboxi-l-acético (1 equivalente molar) em xileno adicionou-se 3R-aminopirrolidina (1 equivalente molar). A mistura reaccional foi aquecida ao refluxo com uma ratoeira de Dean Stark até ser recolhido na ratoeira 1 equivalente de água. A mistura reaccional foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida para dar um óleo castanho escuro, viscoso. O produto bruto foi dissolvido em metanol e adicionou-se uma solução de metanol contendo ácido maleico (1 equivalente molar). Os voláteis foram removidos (stripped off), sob pressão reduzida, da solução de produto-maleato para dar um sólido castanho escuro, 0 sólido foi recristalizado em diclorometano/acetato de etilo para dar o sal puro sob a forma de um sólido cristalino branco. 0 sal produto foi solubilizado numa porção mínima de água e a solução resultante foi baseifiçada com hidróxido de sódio 1 M e extractada com éter etílico. Os extractos etéreos foram combinados, secos sobre

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Ρ 50018

-25sulfato de sódio, filtrados e concentrados para dar a imida desejada sob a forma de um óleo viscoso; rendimento de 70-75%.

(ii) 2-(3R-Pirrolidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiro Γ4.5Ί-decano

A uma mistura de hidreto de alumínio e lítio (3,2 equivalentes molares) em éter etílico adicionou-se gota a gota uma solução de 2-(3R-pirrolidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiro[4.5Jdecano-l,3-diona (1 equivalente molar) em éter etílico. A mistura reaccional foi agitada durante 2-6 h depois da adição estar completa. 0 hidreto em excesso foi anulado com deca-hidrato de sulfato de sódio e a mistura resultante foi filtrada. 0 filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar a diamina sob a forma de óleo incolor, viscoso; rendimento de 80-85%.

(iii) Dimaleato de 2-(3R-pirrolidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiro[4.51-decano

Dissolveu-se 2-(3R-Pirrolidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiro[4.5]-decano em metanol e adicionou-se uma solução de metanol contendo ácido maleico (2 equivalentes molares). O volume do solvente foi reduzido sob vacuo. Adicionou-se cuidadosamente uma solução de 10% de hexano em acetato de etilo à solução de produto-metanol para formar um precipitado branco que foi isolado por filtração. 0 produto sólido branco não necessitou de mais purificação; pf 168,5-170°C; rendimento de 70-80%.

EXEMPLO 6

Dimaleato de 2-(3S-pirrolidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiror4.51decano

O composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 5 (i-iii) substituindo 3R-aminopirrolidina por 3S-aminopirrolidina; pf 169,5-170,5°C.

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-26- ........z..'

EXEMPLO 7

Di-hidrocloreto de 2-(3^z-quinuclidinil)-8,8-dipropil-2azaspiro Γ 4.5 Ί-decano (i) 2-( 3^z-Quinuclidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiroΓ4.51-decano-1,3diona

A uma solução de anidrido do ácido 4,4-dipropilciclo-hexano-l-carboxi-l-acético (1 equivalente molar) em tolueno adicionou-se 3-aminoquinuclidina (1 equivalente molar). A mistura reaccional foi aquecida ao refluxo com agitação, usando uma ratoeira de Dean Stark até que o volume de água recolhido não se alterasse (aproximadamente cinco horas), e em seguida foi deixada arrefecer. 0 tolueno foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi submetido a partição entre acetato de etilo e solução de hidróxido de sódio IN. A fase orgânica foi separada, lavada com água, seca (MgSO^) e evaporada para dar

2-(3-quinuclidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiro[4.5]-decano-1,3-diona (94%) sob a forma de um óleo amarelo que solidificou em repouso. Este foi usado sem mais purificação.

(ii) 2- (3^z-Quinuclidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiro Γ4.5 Ί-decano

A uma suspensão agitada de hidreto de alumínio e lítio (3,5 equivalentes molares) em THF (80 ml) a 0°C, sob árgon, adicionouse, gota a gota, durante 45 minutos, uma solução de 2-(3^zquinuclidinil)-8,8-dipropil-2-azaspiro[4.5]-decano-1,3-diona (1 equivalente molar) em THF. A mistura reaccional foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e em seguida foi agitada durante a noite. Adicionou-se lentamente, em porções, deca-hidrato de sulfato de sódio para anular LAH (hidreto de alumínio e lítio) não reagido e a suspensão de sólidos resultante foi filtrada e o filtrado foi evaporado sob pressão reduzida para dar um óleo incolor residual.

•Λ. /

74014

Ρ 50018 (iii) Di-hidrocloreto de 2-f3^/-quinuclidinil)-8,8-dipropil-2azaspiro Γ 4.51-decano

Dissolveu-se 2-(3'-quinuclidinil)-8,8-dipropil-2azaspiro[4.5]-decano num pequeno volume de etanol e adicionou-se uma solução de cloreto de hidrogénio saturado em etanol. Após adição de um grande volume de éter formou-se um precipitado branco que foi filtrado e seco, dando o composto do título (70% de rendimento) sob a forma de um sólido branco amorfo; pf 277-278°C. A análise elementar sugere que o composto do título foi isolado sob a forma do mono-hidrato.

EXEMPLO 8

Di-hidrocloreto de 2-( 3 ^z-oi-( 8 ^z-metil-8-azabiciclo [ 3.2.1]-8,8-dipropil-2-azaspiro Γ 4.51-decano (i) 3-oi-Amino-8-metil-8-azabiciclo[3.2.1)octano (3-a-aminotropano)

Uma solução de tropinona (5,0 g) em etanol contendo paládio sobre carvão activado (10%, 2,0 g) foi saturada com amoníaco a 0°C e em seguida hidrogenada num aparelho Parr a 354x1o^-3 kPa (50 psi) durante 24 horas. A mistura foi filtrada através de celite e evaporada sob pressão reduzida. O óleo residual incolor foi usado sem mais purificação.

A amina anterior (0,5 g) em metanol (5 ml) foi tratada com 1 ml de isotiocianato de fenilo. Após agitação durante 30 minutos e trituração com éter, precipitou um sólido cristalino que foi retirado por filtração e recristalizado em acetato de etilo. A tio-ureída fundiu a 156-157°C (A. Stoll, E. Tucker e A. Ebnother, Helv. Chim. Acta 38, 559 (1955) e S. Archer, T. R. Lewis e M. J. Unser, J. Am. Chem. Soc. 79, 4194 (1957) referem pontos de fusão das tio-ureídas endo de 153-154°C e 160-161°c, respectivamente).

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Ρ 50018

-28 ·|Η· ' (ii) 3-8-Amino-8-metil-8-azabicicloΓ3.2.11 octano íf, (3-g-aminotropano)

Preparado por redução com sódio/álcool amílico de tropinona oxima (M. S. Hadley e F. D. King U.S. 4, 273, 778 para procedimentos exactos).

A correspondente 0-aminotropano tio-ureída fundiu a 178-179°C (R. Willstatler e W. Moller Ber., 31, 1202 (1898) e S. Arther, T. R. Lewis e M. J. Unser, J. Am. Chem. Soc. 79, 4194 (1957) referem pontos de fusão de 171-172°C e 173-175°C, respectivamente).

(iii) Di-hidrocloreto de 2-(3^z-a-(8^z-metil-8-azabiciclor3.2.1Toctano)-8,8-dipropil-2-azaspiro Γ 4.5 Ί-decano

O composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 7 (i-iii) substituindo 3-0-amino-8-metil-8-azabiciclo[3.2.1]octano (3-p-aminotropano) por 3-aminogainaclidina. O di-hidrocloreto foi isolado como se descreve no Exemplo 11; 60% de rendimento sob a forma de um sólido amorfo branco; p.f. 234-235^eC. A análise elementar sugere que o composto do título foi isolado sob a forma do mono-hidrato.

EXEMPLO 9

Di-hidrocloreto de 2-( 3 ^z fl-8 ^z-metil-8 ^z-azabiciclo Γ 3.2.1 ~l octano)-8,8-dipropil-2-azaspiro Γ 4.51-decano

O composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 7 (i-iii) substituindo 3-a-aminotropano por 3-j8-aminotropano. O di-hidrocloreto foi isolado sob a forma de um sólido branco amorfo; p.f. 245-247°C. A análise elementar sugere que o composto do título foi isolado sob a forma do mono-hidrato.

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-29- '

EXEMPLO 10

Di-hidrocloreto de 2-f4-piperidinil)-9,9-dipropil-3-azaspiro[4.5]-decano

O composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 1 (i-iv) substituindo anidrido do ácido 4,4-dipropilciclo-hexano-lcarboxi-l-acético por anidrido do ácido 4,4-dipropilciclo-hexano-

1,1-diacético.

II. Exemplos de Composições Exemplo 11 - COMPOSIÇÃO SOB A FORMA DE CÁPSULA

Uma composição farmacêutica deste invento sob a forma de uma cápsula é preparada por enchimento de uma cápsula convencional de duas peças de gelatina dura com a mistura de 50 mg de um composto de Fórmula (I), sob a forma de pó, 110 mg de lactose, 32 mg de talco e 8 mg de estearato de magnésio.

Exemplo 12 - COMPOSIÇÃO PARENTÉRICA INJECTÁVEL

Uma composição farmacêutica deste invento sob uma forma adequada para administração por injecção é preparada por dispersão de 1,5% em peso de um composto de Fórmula (I) em 10% em volume de propilenoglicol e água.

Exemplo 13 - COMPOSIÇÃO SOB A FORMA DE UNGUENTO

Composto de Fórmula (I) 1,0 g

Parafina macia branca até 100,0 g composto de Fórmula (I) é disperso num pequeno volume do veículo e gradualmente incorporado no veículo para produzir um produto suave e homogéneo. Enchem-se então com a dispersão tubos metálicos dobráveis.

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Ρ 50018

-30Exemplo 14 - COMPOSIÇÃO SOB A FORMA DE CREME TÓPICO

1,0 g

Composto de Fórmula (I)

Polawax GP 200	20,0
Lanolina Anidra	2,0
Cera de Abelhas Branca	2,5
Hidroxibenzoato de Metilo	0,1
Água Destilada até	100,0

A Polawax, a lanolina e a cera de abelhas são aquecidas em conjunto a 60 °C. Adiciona-se uma solução de hidroxibenzoato de metilo e consegue-se a homogeneização usando agitação a alta velocidade. A temperatura é então deixada baixar até 50°C. 0 composto de Fórmula (I) é então adicionado e completamente disperso e a composição é deixada arrefecer com agitação a baixa velocidade.

Exemplo 15 - COMPOSIÇÃO SOB A FORMA DE LOÇÃO TÓPICA

Composto de Fórmula (I)	1/0 g
Monolaurato de Sorbitano	0,6 g
Polysorbate 20	0,6 g
Álcool Cetostearílico	1,2 g
Glicerina	6,0 g
Hidroxibenzoato de Metilo	0,1 g
Água Purificada até	100,0 ml

hidroxibenzoato de metilo e a glicerina são dissolvidos em 70 ml de água a 75°. 0 monolaurato de sorbitano, o Polysorbate 20 e o álcool cetostearílico são fundidos em conjunto a 75°C e adicionados à solução aquosa. A emulsão resultante é homogeneizada, deixada arrefecer com agitação contínua e é adicionado o composto de Fórmula (I) como uma suspensão na restante água. A suspensão global é agitada até estar homogeneizada.

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Ρ 50018

-31Exemplo 16 - COMPOSIÇÃO SOB A FORMA DE GOTAS PARA OS OLHOS

Composto de Fórmula (I) Hidroxibenzoato de Metilo Hidroxibenzoato de Propilo Água Purificada até

0/5 g

0,01 g

0,04 g

100,00 ml

Os hidroxibenzoatos de metilo e propilo são dissolvidos em 70 ml de água purificada a 75°C e a solução resultante é deixada arrefecer. O composto de Fórmula (I) é então adicionado e a solução é esterilizada por filtração através de um filtro de membrana (tamanho do poro 0,22 /im) e embalada assepticamente em recipientes estéreis adequados.

Exemplo 17 - COMPOSIÇÃO PARA ADMINISTRAÇÃO POR INALAÇÃO

Para um recipiente de aerossol com uma capacidade de 15-20 ml: misture 10 mg de um composto de Fórmula (I) com 0,1-0,2% de um agente lubrificante, tal como polysorbate 85 ou ácido oleico e disperse esta mistura num propulsor, tal como freon, preferivelmente numa combinação de (1,2-diclorotetrafluoroetano) e difluoroclorometano e coloque num recipiente de aerossol apropriado, adaptado quer para administração intranasal quer oral.

Exemplo 18 - COMPOSIÇÃO PARA ADMINISTRAÇÃO POR INALAÇÃO

Para um recipiente de aerossol com uma capacidade de 15-20 ml: dissolva 10 mg de um composto de Fórmula (I) em etanol (6-8 ml), adicione 0,1-0,2% de um agente lubrificante, tal como polysorbate 85 ou ácido oleico e disperse esta mistura num propulsor, tal como freon, preferivelmente uma combinação de (1,2-diclorotetrafluoroetano) e difluoroclorometano e coloque num recipiente de aerossol apropriado, adaptado quer para administração intranasal quer para inalação oral.

74014 Ρ 50018 , , / ΐ'/Γ

Exemplo 19 - COMPOSIÇÃO SOB A FORMA DE COMPRIMIDO

Uma composição farmacêutica deste invento sob a forma de um comprimido é preparada por granulação de uma mistura de : 50 mg de um composto de Fórmula (I), sob a forma de pó, 100 mg de dihidrato de sulfato de cálcio, 10 mg de sacarose, 5 mg de amido, 3 mg de talco e lmg de ácido esteárico com uma solução de 10% de gelatina. Os grânulos húmidos são peneirados, secos, misturados com o amido, talco e ácido esteárico, peneirados e comprimidos para formarem um comprimido.

Claims

REIVINDICACÕES

1 - Composto caracterizado por ter a fórmula: (I) na qual:

m é 1 ou 2;

R¹ e R² são iguais ou diferentes e são seleccionados de entre hidrogénio ou alquilo de cadeia linear ou ramificada ou cíclico, desde que o número total de átomos de carbono contidos em R^ e R², quando tomados em conjunto, seja de 4-10; ou R^ e R²estão ligados para formar um grupo alquilo cíclico contendo 3-7 átomos de carbono;

A está ausente ou presente como alquilo C^-C·?; e

R³ é um anel heterocíclico ou heterobicíclico, contendo assim o referido anel heterocíclico ou heterobicíclico até 10 átomos de carbono e 1-3 heteroátomos de fórmula >NR⁴, onde R⁴está ausente ou presente como hidrogénio ou alquilo de cadeia linear contendo 1-3 átomos de carbono; ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável.
2 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por:

m ser 1;

R¹ e R² serem cada um, independentemente um do outro, alquilo C₂ ou C₃;

A estar ausente ou presente como alquilo C_Í-C₂1 e

R³ ser um anel heterocíclico, contendo assim o referido anel heterocíclico até 6 átomos de carbono e 1-2 heteroátomos de fórmula >NR⁴, onde R⁴ está ausente ou presente como hidrogénio ou metilo;

ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável.
3 - Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por:

R¹ e R² serem cada um propilo;

A estar ausente; e

R³ ser um anel heterocíclico, contendo assim o referido

74014

Ρ 50018 /Ύ '

-34anel heterocíclico até 6 átomos de carbono e 1 heteroátomo de fórmula >NH;

ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável.
4 - Composto de acordo com qualquer das reivindicações 1-3, caracterizado por ser:

ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável.
5 - Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por ser:

ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável.
6 - Composto de acordo com qualquer das reivindicações 1-5 para uso como medicamento.
7 - Composição farmacêutica caracterizada por compreender um portador farmacêutico adequado e um composto da reivindicação

1.
8 - Composição de acordo com a reivindicação 7, caracteri74014

Ρ 50018 ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável.
9 - Uso de um composto de Fórmula (I) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável definido como na reivindicação 1 no fabrico de um medicamento para o tratamento de um animal com necessidade de imunomodulação.
10 - Uso de um composto de Fórmula 1 ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável definido como na reivindicação 1 no fabrico de um medicamento para o tratamento de artrite reumatóide.
11 - Uso de um composto de Fórmula (I) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável definido como na reivindicação 1 no fabrico de um medicamento para a inibição da produção de citoquinas num animal.
12 - Processo de preparação de um composto de Fórmula (I)

74014

Ρ 50018

-36definido como na reivindicação 1, caracterizado por compreender a redução de um composto de fórmula na qual

R¹ e R² são iguais ou diferentes e são seleccionados de entre hidrogénio ou alquilo de cadeia linear ou ramificada ou cíclico, desde que o número total de átomos de carbono contidos em R¹ e R², quando tomados em conjunto, seja de 4-10; ou R¹ e R²estão ligados para formar um grupo alquilo cíclico contendo 3-7 átomos de carbono;

A está ausente ou presente como alquilo Cj-Ογ; e

R³ é um anel heterocíclico ou heterobicíclico, contendo assim o referido anel heterocíclico ou heterobicíclico até 10 átomos de carbono e 1-3 heteroátomos de fórmula >NR⁴, onde R⁴está ausente ou presente como hidrogénio ou alquilo de cadeia linear contendo 1-3 átomos de carbono; desde que a definição de R³ compreenda adicionalmente grupos protectores, preferivelmente grupos protectores de benzilo, os quais são dissociados para preparar os substituintes de R³ como definidos na Fórmula 1 ou são dissociados e ainda reagidos para preparar os substituintes de R³ como definidos na Fórmula I.
13 - Processo de acordo com a reivindicação 12, caracterizado por a redução ser efectuada por hidreto de alumínio e lítio.
14 - Processo de preparação de uma composição farmacêutica contendo um portador ou diluente farmaceuticamente aceitável e uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula (I):

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Ρ 50018

-37na qual:

R¹ e R² são iguais ou diferentes e são seleccionados de entre hidrogénio ou alquilo de cadeia linear ou ramificada ou cíclico, desde que o número total de átomos de carbono contidos em R¹ e R², quando tomados em conjunto, seja de 4-10; ou R¹ e R²estão ligados para formar um grupo alquilo cíclico contendo 3-7 átomos de carbono;

A está ausente ou presente como alquilo Cj-C·?; e

R³ é um anel heterocíclico ou heterobicíclico, contendo assim o referido anel heterocíclico ou heterobicíclico até 10 átomos de carbono e 1-3 heteroátomos de fórmula >NR^, onde R^ está ausente ou presente como hidrogénio ou alquilo de cadeia linear contendo 1-3 átomos de carbono; ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, processo caracterizado por compreender associar o composto de Fórmula (I) com o portador farmaceuticamente aceitável.