PL184377B1 - Nowe pochodne fosforoorganiczne i sposób ich wytwarzania - Google Patents
Nowe pochodne fosforoorganiczne i sposób ich wytwarzaniaInfo
- Publication number
- PL184377B1 PL184377B1 PL96312934A PL31293496A PL184377B1 PL 184377 B1 PL184377 B1 PL 184377B1 PL 96312934 A PL96312934 A PL 96312934A PL 31293496 A PL31293496 A PL 31293496A PL 184377 B1 PL184377 B1 PL 184377B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- group
- formula
- defined above
- nucleoside
- hydrogen
- Prior art date
Links
Landscapes
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
W Nowe pochoshos fosforoorganiczne przedstawione
ogólnym wzorem 1, w którym X
oznacza atem tlenu lub siarki Y oznacza -
NHPH, F lub grupę o wzorze -X’r3, w którym
X ma wyżej podane znaczenie aR3 oznacza
grupę metylową, lub grupę o wzorze -
CH2C6H4-R4, w którym Rł oznacza atom woderu,
atom cHloru lub grupę -NO2, Ri oznacza
grupę blokującą, korzystnie 4'-dimetoksytrytylewą
(DMT) lub 9-0enyloksanten-9-ylową
(Px), R" oznacza atem wodoru łub grupę alkoksylową
korzystnie mets)ksylową aB oznacza
N-zablokowaną zasadę purynową lub pirymidynową
korzystnie wybraną z grupy obejmującej
Tyminę, Uracyl, Adeninę, Cytozynę
i Guaninę.
Description
Przedmiotem wynalazku są nowe pochodne fosforoorganiczne o ogólnym wzorze 1, w którym X oznacza atom tlenu lub siarki, Y oznacza -NHPh, F lub grupę o wzorze -X'R:3 w którym X1 ma wyżej podane znaczenie dla X, a R3 oznacza grupę metylową, lub grupę o wzorze CH2C6H4-R4, w którym R4 oznacza atom wodoru, atom chloru lub grupę N02, R1 oznacza grupę blokującą, korzystnie 4'-dimetoksytrytylową (DMT) lub 9-fenyloksanten9-ylową (Px), R2 oznacza atom wodoru lub grupę alkoksylową. korzystnie metoksylową, a B oznacza N-zablokowaną zasadę purynową lub pirymidynową korzystnie wybraną z grupy obejmującej Tyminę, Uracyl, Adeninę, Cytozynę i Guaninę oraz sposób ich wytwarzania.
Zaproponowana przez Zamecnika i Stevensona koncepcja wykorzystania oligonukleotydów jako potencjalnych leków przeciwwirusowych (koncepcja ANTISENSE) (P.C.Zamecnik, M.L. Stephenson, 1978. Inhibition of Rous Sarcoma Virus Replication and Celi Transformation by a Specific Oligodeoxynucleotide, Proc.Natl.Acid.Sci. USA, 1975, 280) spowodowała wzrost zainteresowania syntezą i właściwościami oligonukleotydów i ich modyfikowanych analogów, zwłaszcza takich jak tiofosforany czy metylofosfoniany.
184 377
Koncepcja ta opiera się na wykorzystaniu oddziaływań pomiędzy oligonukleotydami komplementarnymi do fragmentów cząsteczek pre-mRNA lub mRNA, powodujących w efekcie zahamowanie biosyntezy niepożądanych i szkodliwych białek. Możliwe jest również oddziaływanie antysensowego DNA z podwójną helisą DNA (tworzenie struktury trójniciowej), dające ten sam efekt końcowy, wyrażający się specyficznym zahamowaniem procesu transkrypcji. Oba te procesy charakteryzuje wysoka selektywność, spowodowana oddziaływaniami ze ściśle określonymi fragmentami dNa lub RNA w różnych fazach procesu ekspresji genu w komórkach eukariotycznych. Powinowactwo oligonukleotydów w stosunku do sekwencji rozpoznawczej jest wynikiem oddziaływań hybrydyzacyjnych (parowanie zasad Watsona-Cricka oraz oddziaływania warstwowe w tworzącej się podwójnej helisie) i wzrasta wraz z długością kompleksu oligonukleotyd-rozpoznawana sekwencja.
Wprowadzenie modyfikacji do cząsteczki ANTISENSE może powodować zmianę tych oddziaływań, będącą wynikiem zmiany geometrii wokół modyfikowanych wiązań (Y.N. Vorobyov, Non-ionic Analogs of Oligonucleotide Duplexes. Molecular Mechanical Calculations of the Influence of Configuration of Asymmetrical Phosphorus Atoms in Methyl-phosphonate d(TPMe)6 and Phosphotriester Derivatives d(TPEt)6 on the Structure and Stability of their Complexes with dA6, 1990; Molekulyamaya Biologiya 24, 58), oraz wzrost ich trwałości w komórkach, będący rezultatem odporności na działanie enzymów nukleolitycznych (Y.L.Potter, B.A.Connolly, F.Eckstein, Synthesis and Configurational Analysis of a Dinucleoside Phosphate IsotopicallyChiral at Phosphorus.Stereochemical Course of Penicillium Citrum Nuclease PI Reaction, 1983, Biochemistry, 22, 1369; F.R.Bryant. S.J.Benkovic, Stereochemical Course of the Reaction Catalyzed by Nucleotide Phosphodiesterase from Snake Venom, 1979, Biochemistry, 18, 2825).
Oligometanofosfoniany nukleozydów (OligoMe) są niejonowymi analogami DNA, zawierającymi neutralne ugrupowania metanofosfonianowe, zastępujące w naturalnej cząsteczce DNA wiązania fosfodiestrowe. Wiązanie metanofosfonianowe jest całkowicie odporne na działanie nukleaz, ajego niejonowy charakter powoduje, że łańcuchy OligoMe mogą być wprowadzone w nienaruszonej postaci poprzez błonę komórkową do cytoplazmy (S.Agrawal, P.S.Sarin, M.ZamecnikP.C.Zamecnik, Cellular Uptake and Anti-HlV Activity of Oligonucleotides and their Analogs. W Gene Regulation. Biology of Antisense RNA and DNA, 1991, Vol. 1; Robert P.Erickson and Jonathan G.Izant eds., Reven Press, 273-284).
Szereg interesujących wyników wskazuje na efektywność użycia komplementarnych (antysensowych) fragmentów OligoMe do specyficznego zahamowania syntezy niepożądanych (szkodliwych) białek zarówno in vitro jak i in vivo. Krótkie fragmenty (7-12 merowe) OligoMe zastosowano z powodzeniem do zahamowania procesu dojrzewania pre-mRNA wirusa Herpes simplex (typ 1) C.C.Smith, L.Aurelian, M.P.Reddy, P.S.Miller, P.O.P.Ts'o, Antiviral Effect of an O1igo(nucleoside methylphosphonate) Complementary to the Splice Junction of Herpes simplex virus type 1 Immediate Early pre-mRNAs 4 and 5, 1986, Proc.Natl.Acad.Sci.,USA, 83, 2787), a także namnażania tego wirusa w oocytach żaby (Xeropus laevis) (C.Casenave, M.Chemer, T.T.Nauyen, C.Helene, Ratę of Degradation of and βOligodeoxynucleotides in Xenopus oocytes: Implications for Anti-messenger Strategies. Nucl.Acids.Res. 1987, 15, 10507). Analogicznie udało się zahamować ekspresję genu βglobiny w retikulocytach królika (K.Blake, A.Murakami, P.S.Miller, Inhibition of Rabbit Globin mRNA Translation a Seąuence - Specific Oligodeoxyribonucleotides, 1985, Biochemistry, 24, 132). Właściwości te wskazują na znaczące potencjalne możliwości wykorzystania oligoMe. Wynika stąd duże zainteresowanie syntezą i własnościami tej klasy związków w wielu laboratoriach badawczych i firmach biotechnologicznych (P.O.P.Ts'o, L.Aurelian, E.Chang, P.S.Miller, w Antisense Strategies, Annals of the New York Academy of Sciences, 1993, 660, 159).
Istotnym aspektem, a jednocześnie utrudnieniem badań nad OligoMe jest występowanie centrum asymetrii na atomie fosforu, wynikające z zamiany ligandu tlenowego na niejonową grupę metylową. Konsekwencją stereochemiczną jest występowanie w oligomerze o długości n par zasad - 2n-l izomerów powstających w rezultacie kolejnych niestereospecyficznych reakcji wzrostu łańcucha nukleotydowego. Stwierdzono, że łańcuchy homochiralne Rp i Sp,
184 377 tj. takie, których konfiguracja absolutna na wszystkich intemukleotydowych metanofosfonianowych atomach fosforu jest Rp lub Sp, oraz łańcuchy niestereoregulame, wykazują zróżnicowane własności fizykochemiczne, a także zróżnicowanie zdolności do tworzenia adduktów z oligonukleotydarni o komplementarnej sekwencji. Badania przeprowadzone na analogach tiofosforanowych dinukleotydów potwierdziły różnice w zachowaniu oligo-Rp i oligo-Sp, między innymi stereoselektywność w stosunku do nukleaz (B.Y.L.Potter, B.A. Connolly, F. Eckstein, Biochemistry, 22, 1983, 1369; F.R.Bryant, S.J.Benkovic, Biochemistry, 18, 1979, 2825).
W ostatnich latach wykazano, że okta(tymidylometanofosfoniany), w których sześć spośród siedmiu wiązań metylofosfonianowych ma ściśle zdefiniowaną konfigurację na atomie fosforu i wysoką czystość diastereomeryczną, otrzymane w wyniku kondensacji niestereospecyficznej odpowiednich diastereoizomerycznie czystych tetramerów, wykazują dramatyczne różnice w temperaturach mięknięcia Tm, świadczące o różnej trwałości kompleksów izomerycznych związków z matrycą kwasu pentadekadeoksyadenylowego (Z.J.Leśnikowski, M.Jaworska, W.J.Stec, Nuci.Acids Res., 18, 1990, 2109).
Wykorzystane w tych badaniach OligoMe o zdefiniowanej konfiguracji na atomie fosforu uzyskano w wyniku stereokontrolowanej reakcji pomiędzy aktywowaną za pomocą odczynnika Grignarda grupą 5'-hydroksylową nukleozydu i izomerycznie czystym pnitrofenylometylo-fosfonianem nukleozydu (J.Leśnikowski, M.Jaworska, W.J.Stec, 1990, Octa(thymidine methanephosphonates) of Partially Defined Stereochemistry: Synthesis and Effect of Chirality at Phosphorus on Binding to Pentadeca-deoxyriboadenylic Acid, Nucleic Acids Res., 18 1990, 2109; Z.J.Leśnikowski, M.Jaworska-MaślaNka, W.J.Stec, Stereospecific Synthesis of P-chiral Di(2'-O-Deoxyribonucleoside) methanephosphonates, Nucleosides & Nucleotides, 1991, 10, 733); Z. J.Leśnikowski, M.Jaworska, W.J.Stec, Sfereoselective Synthesis of P-homochiral Thymidine Methylphos-phonates. Nuci. Acid Res., 16,11675).
Metoda ta wymaga jednak długich czasów reakcji i do tej pory została sprawdzona jedynie w syntezie tetramerowych fragmentów homo-tymidylowych oraz heteromerycznych struktur heksamerowych.
Próby uzyskania diastereoizomerycznie czystych OligoMe w wyniku reakcji pomiędzy metylodichlorofosfmą i odpowiednimi zablokowanymi w pozycjach 5' lub 3'-nukleozydami prowadzone w niskich temperaturach (-80°C) pozwoliły na otrzymanie w przewadze (8:1) izomerów Rp odpowiednich metylofosfonianów dinukleozydów (T.Loschner, J.Engels, One Pot Rp-Diastereoselective Synthesis of Dinucleoside Methylphosphonates Using Methyldichlorophos-phine, Tetrahedron Lett., 1989, 30 (41), 5587; J.W.Engels, T.Loschner, A.Frauendorf, Diastereoselective Synthesis of Thymidine Methylphosphonate Dimers., Nucleosides & Nucleotides, 1991, 10, 347).
Metodą tą nie można jednak otrzymać dłuższych stereoregulamych łańcuchów, ponieważ tworzące się przejściowo w wyniku kolejnych reakcji kondensacji chlorometylofosfoniny 3'-O-nukleozydów są nawet w niskich temperaturach, konfiguracyjnie labilne.
Opisana ostatnio metoda polegająca na zastosowaniu jako monomerów 5'-DMT^(0nukleozydo-3'-O-(Se-metyloselenometano-fosfonianów) rozdzielonych na diastereoizomery pozwala na otrzymanie diastereomerycznie czystych oligoMe w roztworze (L.A. Woźniak, J. Pyzowski, M. Wieczorek,W.J.Stec, J. Org. Chemistry, 1994, 59, 5843). Katalizatorami tej reakcji są sole litu oraz 1,8-diazabicyklo[5.4.0]-undek-7-en (DBU).
Oligonukleotydy zawierające n-chiralnych wiązań intemukleotydowych występują w postaci 2n izomerów. Metody chromatograficzne pozwalają na efektywny rozdział krótkich fragmentów, zwłaszcza dimerów, które mogą być z powodzeniem wbudowane w postaci diastereomerycznie czystej do łańcuchów chimerycznych zawierających naprzemiennie wiązania metanofosfonianowe o zdefiniowanej konfiguracji na atomie fosforu [Rp] oraz wiązania fosfodiestrowe lub tiofosforanowe. Strategia taka została przedstawiona jako bardzo obiecująca, wobec wysokiego stopnia inhibicji uzyskanego w wyniku działania oligonukleotydów o budowie chimerycznej (L.Amold, First International Antisense Conference of Japan, Kyoto, Abs. #25, 1994).
184 377
Nowe pochodne fosforoorganiczne według wynalazku przedstawione są ogólnym wzorem 1, w którym X oznacza atom tlenu lub siarki, Y oznacza -NHPh, F lub grupę o wzorze X’R3, w którym X1 ma wyżej podane znaczenie dla X, a R3 oznacza grupę metylową, lub grupę o wzorze -CH2C6H4-R4, w którym R4 oznacza atom wodoru, chloru lub -NO2, R1 oznacza grupę blokującą, korzystnie 4'-dimetoksytrytylową (DMT) lub 9-fenyloksanten-9-ylową (Px), R2 oznacza atom wodoru lub grupę alkoksylową, korzystnie metoksylową, a B oznacza Nzablokowaną zasadę purynową lub pirymidynową, korzystnie wybraną z grupy obejmującej Tyminę, Uracyl, Adeninę, Cytozynę i Guaninę.
Sposób wytwarzania nowych pochodnych fosforoorganicznych o ogólnym, wzorze 1, w którym X oznacza atom siarki lub tlenu, Y oznacza -NHPh, Ri oznacza grupę blokującą, korzystnie 4'-dimetoksytrytylową (DMT) lub 9-fenyloksanten-9-ylową (Px), R2 oznacza atom wodoru lub grupę alkoksylową, korzystnie metoksylową, a B oznacza N-zablokowaną zasadę purynową lub pirymidynową, korzystnie wybraną z grupy obejmującej Tyminę, Uracyl, Adeninę, Cytozynę i Guaninę, według wynalazku polega na tym, że prowadzi się reakcję metylodichlorofosfiny w obecności odczynnika wiążącego chlorowodór, korzystnie aminy, zwłaszcza trietyloaminy z nukleozydem o wzorze 2, w którym Ri, R2i B mają wyżej podane znaczenie, następnie do mieszaniny dodaje się anilinę oraz siarkę elementarną, selen lub odczynnik utleniający, a po zakończeniu reakcji wyodrębnia się produkt w znany sposób.
Sposób wytwarzania nowych pochodnych fosforoorganicznych o ogólnym wzorze 1, w którym X oznacza atom tlenu, a Y oznacza grupę o wzorze -X3R3, w którym Xi oznacza atom siarki, a R3 oznacza grupę metylową, lub grupę o wzorze -CH2C6H4-R4, w którym R* oznacza atom wodoru, atom chloru lub grupę -NO2, Ri oznacza grupę blokującą, korzystnie 4'-dimetoksytrytylową (DMT) lub 9-fenyloksanten-9-ylową (Px), R2 oznacza atom wodoru lub grupę alkoksylową, korzystnie metoksylową, a B oznacza N-zablokowaną zasadę purynową lub pirymidynową, korzystnie wybraną z grupy obejmującej Tyminę, Uracyl, Adeninę, Cytozynę i Guaninę, według wynalazku polega na tym, że prowadzi się reakcję metylodichlorofosfiny w obecności odczynnika wiążącego chlorowodór, korzystnie aminy, zwłaszcza trietyloaminy z nukleozydem o wzorze 2, w którym R1 R2 i B mają wyżej podane znaczenie, następnie do mieszaniny dodaje się anilinę oraz siarkę, elementarną, a otrzymaną mieszaninę diastereoizomerów nukleozydo 3'-0-metanofosfonotioanilidu o wzorze ogólnym 1, w którym X oznacza atom siarki, R1 R2 i B mają podane wyżej znaczenie, a Y oznacza -NHPh, poddaje się reakcji z wodorkiem sodowym lub DBU oraz dwutlenkiem węgla, a otrzymany przejściowo kwas nukleozydo 3'-O-metanotiofosfonowy (sól sodowa lub DBU-niowa) alkiluje się za pomocą odczynnika alkilującego o wzorze R3Z, w którym R3 ma wyżej podane znaczenie, a Z oznacza atom chloru, bromu lub jodu.
Sposób wytwarzania nowych pochodnych fosforoorganicznych o ogólnym wzorze 1, w którym X oznacza atom tlenu, Y oznacza grupę -NHPh, R1 oznacza grupę blokującą, korzystnie 4'-dimetoksytrytylową (DMT) lub 9-fenyloksanten-9-ylową (Px), R2 oznacza atom wodoru lub grupę alkoksylową, korzystnie metoksylową, a B oznacza N-zablokowaną zasadę purynową lub pirymidynową, korzystnie wybraną z grupy obejmującej Tyminę, Uracyl, Adeninę, Cytozynę i Guaninę, według wynalazku polega na tym, że prowadzi się reakcję metylodichlorofosfiny w obecności odczynnika wiążącego chlorowodór, korzystnie aminy, zwłaszcza trietyloaminy z nukleozydem o wzorze 2, w którym R\ R2 i B mają wyżej podane znaczenie, następnie do mieszaniny dodaje się anilinę oraz siarkę elementarną, a otrzymaną mieszaninę diastereoizomerów nukleozydo 3'-0-metanofosfonotioanilidu o wzorze ogólnym 1, w którym R1 R2 i B mają podane wyżej znaczenie, a X oznacza atom siarki poddaje się reakcji utlenienia za pomocą znanych środków utleniających, korzystnie za pomocą peroksymonosiarczanu potasowego lub nadtlenku wodoru.
Sposób wytwarzania nowych pochodnych fosforoorganicznych o ogólnym wzorze 1, w którym X oznacza atom tlenu, a Y oznacza grupę o wzorze -X‘R3, w którym X1 oznacza tlen lub siarkę, a R3 oznacza grupę metylową, lub grupę o wzorze -CH2C6H4-R4, w którym R4 oznacza atom wodoru, atom chloru lub grupę -NO2, R1 oznacza grupę blokującą, korzystnie 4'-dimetoksytrytylową (DMT) lub 9-fenyloksanten-9-ylową (Px), R2 oznacza atom wodoru lub grupę alkoksylową, korzystnie metoksylową, a B oznacza N-zablokowaną zasadę purynową
184 377 lub pirymidynową, korzystnie wybraną z grupy obejmującej Tyminę, Uracyl, Adeninę, Cytozynę i Guaninę, według wynalazku polega na tym, że prowadzi się reakcję metylodlchlorofosfiny w obecności odczynnika wiążącego chlorowodór, korzystnie aminy, zwłaszcza trietyloaminy z nukleozydem o wzorze 2, w którym R1, R2 i B mają wyżej podane znaczenie, następnie do mieszaniny dodaje się anilinę oraz siarkę elementarną a otrzymaną mieszaninę dlastereoizomerów nukleozydo 3'-O-metanofosfonotioanilidu o wzorze ogólnym 1, w którym X oznacza atom siarki, R1, R2 i B mają podane wyżej znaczenie, a Y oznacza -NHPh, poddaje się reakcji utlenienia za pomocą znanych środków utleniających, korzystnie za pomocą peroksymonosiarczanu potasowego lub nadtlenku wodoru, po czym otrzymany związek poddaje się reakcji z wodorkiem sodowym lub DBU oraz z dlsiarczkiem węgla, a otrzymany przejściowo kwas nukleozydo 3'-O-metanotiofosfonowy (sól sodowa lub DBU-niowa) alkiluje się za pomocą odczynnika alkilującego o wzorze R3Z, w którym R3 ma wyżej podane znaczenie, a Z oznacza atom chloru, bromu lub jodu.
Sposób wytwarzania nowych pochodnych fosforoorganicznych o ogólnym wzorze 1, w którym X oznacza atom siarki lub tlenu, Y oznacza F, Ri oznacza grupę blokującą, korzystnie 4'-dlmetoksytrytylową (DMT) lub 9-fenyloksanten-9-ylową (Px), r2 oznacza atom wodoru lub grupę alkoksylową korzystnie metoksylową, a B oznacza N-zablokowaną zasadę purynową lub pirymidynową, korzystnie wybraną z grupy obejmującej Tyminę, Uracyl, Adeninę, Cytozynę i Guaninę, według wynalazku polega na tym, że prowadzi się reakcję metylodlchlorofosfmy w obecności odczynnika wiążącego chlorowodór, korzystnie aminy, zwłaszcza trietyloaminy z nukleozydem o wzorze 2, w którym Ri, R2 i B mają wyżej podane znaczenie, następnie do mieszaniny dodaje się anilinę oraz siarkę elementarną lub środek utleniający, otrzymaną mieszaninę diastereolzomerów nukleozydo 3'-O-metanofosfonoanilidu o wzorze ogólnym 1, w którym X oznacza atom tlenu lub siarki, Ri, R2 i B mają podane wyżej znaczenie, a Y oznacza -NHPh, poddaje się reakcji z wodorkiem sodowym lub DBU oraz dwutlenkiem lub dwusiarczkiem węgla, a otrzymaną mieszaninę diastereoizomerów nukleozydo 3'-Ometanofosfonotloloester o wzorze ogólnym 1, w którym X, R1, R2 iB mają podane wyżej znaczenie, a Y oznacza S, poddaje się reakcji z odczynnikiem fluorującym o wzorze MF, gdzie M oznacza Ag, -NEt4, -NEt3H, a otrzymany produkt wyodrębnia się w znany sposób.
Poniżej przedstawiono przykłady wykonania wynalazku, nie ograniczające jego zakresu.
Przykład I. Ogólny przepis na przygotowanie związku o wzorze 1 (X=S, Y=-NHPh).
Do roztworu metylodichlorofosfiny (0,29 g, 2,5 mmol) w THF i trietyloaminy (0,55 g, 55 mmol), schłodzonego do 40°C, wkroplono roztwór odpowiedniego nukleozydu (1 mmol) w THF (10 ml). Po 30 minutach temperaturę reakcji podniesiono do pokojowej. Do tej mieszaniny dodano anilinę (0,28 g, 3 mmol) oraz siarkę elementarną. Po zakończeniu reakcji mieszaninę reakcyjną (rozcieńczoną chloroformem) ekstrahowano za pomocą buforu węglanowego 1 oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem.
Przykład II. [Rp,Sp]-3'-O-metanofosfonotioanil1d 5'-O-DMT-tym1dylowy wzór 1 (B=tym1na, X=S, Y=-NHPh)
Otrzymany z 5'-O-DMT-tymidyny (0,540 g, 1 mmol) jak w przykładzie 1. Ciało stałe o konsystencji zestalonej bezbarwnej piany; wydajność 93% (0.66 g); 3‘P NMR: 79,44; 79, 58 ppm; FAB-MS [M-H]: 712,4.
Przykład IIL [Rp,Sp]-3'-O-metanofosfonotioanilid 5'-O-DMT-N4-benzoilo-2'-Odeoksycytydylowy i (X=S, Y=-NHPh). Otrzymany z 5'-O-DMT-N4-benzoilo-2'-Odeoksycytydyny (0,633 g, 1 mmol) jak w przykładzie I. Mieszanina diastereoizomerów w postaci bezbarwnego szkliwa. Wydajność 7θ% (0,56 g). 3‘P NMR(CH2Cl2/C6D6): 79,38; 79,74 ppm.
Przykład IV. [Rp,Sp]-3'-O-metanofosfonotioanil1d 5'-O-DMT-N6-Benzoilo-2'-Odeoksyadenylowy 1 (X=S, Y=-NHPh). Otrzymany z 5'-O-DMT-N6-Benzoilo-2'-Odeoksyadenozyny (0,657 g, 1 mmol) jak w przykładzie I. Mieszanina diastereoizomerów otrzymana jako bezbarwne ciało stałe o strukturze zestalonej piany; wydajność 75%; 3’P NMR: 79,21; 79,60 ppm.
184 377
Przykład V. [Rp,Sp]p3'-O-metano0os0onetie^ilid 5'pO-DMT-N2-izobutyrylo-2'-Odeeksyguanylowy 1 (X=S, Y=-NHPH):
Otrzymany z 5'-O-DMT-N2-izobutyryle-2'-O-deoksyguanozyny (0,640 g; 1 mmol) jak w przykładzie 1. Wyodrębniony w postaci mieszaniny diastereoizomerów jako bezbarwne szkliwo. Wydajność 98%(0,71 g). 3'p NMR: 79,65; 79,72 ppm.
Przykła d VI. [Rp,Sp]-5'pO-DMT 3'-O-metano0os0ono-tioanilid '-O-metyleurydylewy 1 (X=S, Y=-NHPH):
Otrzymany z 5'-OpDMT-2'-O-metylo urydyny (0,560 g, 1 mmol) jak w przykładzie 1. Wyodrębniony w postaci mieszaniny diasternoizemerów w postaci szkliwa bezbarwnego. Wydajność 85% (0.68 g). 3‘P NMR: 81.96 (SLOW-wzór la); 81.38 (FAST-wzór 1b)ppm.
Przykład VII. Rozdział na diastereeizsmery FAST i SLOW przeprowadzano na zelu krzemionkowym, stosując jako eluent celoro0erm z dodatkiem 10-20% Heptanu.
Czystość diastereomeryczną rozdzielenycH izomerów FAST i SLOW sprawdzano metedą3lP NMR.
Tabela 1
| Nr przykładu | B: | Diastereoigomer* | 3'PNMR (ppm) |
| II | B=tymina | FAST | 79.44 |
| SLOW | 79.58 | ||
| III | B=cytozyna | FAST | 79.38 |
| SLOW | 79.74 | ||
| IV | B=adenina | FAST | 79.21 |
| SLOW | 79 60 | ||
| V | B=guanina | FAST | 79.65 |
| SLOW | 79.72 | ||
| VI | B=uracyl | FAST | 81.38 |
| SLOW | 81.96 |
* mobilność na żelu (Kieselgel 60, 240-400 mesh) w układzie rozwijającym CHCl3/MeOH (95.5 v/v).
Przykład VIII. Metoda ogólna syntezy 3-O-(Spbenzylo metanotio0os0onianów) 5'-ODMT-(N-blokowanyce) nuklnozydów wzór 1 (X=O, Y=SCHPH).
Do roztworu związku o wzorze 1 (X=S, Y=-NHPH) (1 mmol) w sucHym DMF (10 ml) dodane NaH (1,2 mmola). Roztwór mieszane de czasu, aż zakończyło się wydzielanie gazowego wodoru. Przez tak otrzymaną zawiesinę przepuszczone osuszony gazowy CO2. Przebieg reakcji kontrolowano TLC. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodano bromek benzylu (5 mmoli). Pe zakończeniu reakcji alkilowania rozpuszczalniki i nadmiar bromku benzylu oddestylowano pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczeno w celers0ormie. Roztwór ekstraHowano bu0orem węglanowym i po zatężeniu i osuszeniu warstwy organicznej produkt eczyszczane metodą cHromategra0ii na żelu krzemionkowym.
Jeśli substratem do reakcji jest mieszanina diastereoizomerów wówczas podczas oczyszczania na krzemionkowym następuje również rozdział na diastereoizomery la (FAST) i lb (SLOW) (X=O, Y=SCH2PH). Eluent: cHlere0orm z dodatkiem etanolu (0-5%).
Przykład IX. 3-O-(Spbenzylo metanetio0os0onian) 5'-O-DMT-Tymidylowy, 1 (B=tymina, X=O, Y=SCH2PH): Otrzymany z 1 (B=tymina, X=S, Y=-NHPH) (0,712 g; 1 mmola) jak w przykładzie VlII. Wydajność całkowita: 86% (0,55 g); 3’P NMR: 56,44:55,94 ppm.
184 377
Przykład X. 3'-O-(S-benzylo metanotiofosfonian) 5'-O-DMT-N4-Benzoi1o-2'-Odeoksycytydylowy 1a, (B=cytozyna, X=O, Y=SCH2Ph): Otrzymany z 1, (B=cytozyna, X=S, Y=-NHPh) (1 mmol) jak w przykładzie vlll. Wydajność całkowita 82%; 3IP NMR (CDC13): 55,41; 55,21 ppm.
Przykład XI. 3'-O-(S-benzy1o metanotiofosfonian) 5'-O-DMT-N6-Benzoi1o-2'-Odeoksyadenylowy, la (B=adenina, X=O, Y=SCH2Ph): Otrzymany z 1, (B=adenina, X=S, Y=-NHPh) (1 mmol) jak w przykładzie VIII; wydajność 75%; 31P NMR (CH2C12/C6D6): 55,80; 55,53 ppm.
Przykład XII. 3'-O-(S-benzy1o metanotiofosfonian) 5'-O-DMT-N4-Isobutyryio-2'O-deoksyguanidylowy 1a, (B=guanina, X=O, Y=SCH2Ph): Otrzymany z 1, (B=guanina, X=S, Y=-NHPh) (1 mmol); wydajność 75%; 31P NMR (CDC13): 56,01; 55,85 ppm.
Przy kład XIII. Reakcja utlenienia 3'-O-metanofosfonotioani1idu 5'-O-DMTtymidylowego 1 (B=tymina, X=S, Y=-NHPh) do 3'-O-metanofosfonoaniiidu 5'-O-DMTtymidylowego 1, (B=tymina, X=-O, Y=-NHPh) z zastosowaniem peroksymonosiarczanu potasowego.
Związek FAST - wzór 1 (B=tymina, X=S, Y=-NHPh) (0,072 g; 1 mmola) rozpuszczono w mieszaninie metanolu i tetrahydrofuranu i dodano wodny roztwór peroksymonosiarczanu potasowego (pH 6,7-7) (2 mmole). Po 10 minutach dodano 10% tiosiarczan sodowy i produkt ekstrahowano z mieszaniny reakcyjnej za pomocą chloroformu.
Produkt 1 a (B=tymina, X=O, Y=-NHPh) oczyszczano metodą chromatografii na żelu krzemionkowym. Otrzymano diastereomerycznie czysty FAST 1 z wydajnością 73% (0,047 g); 3’P NMR (CDC13): 30,1 ppm. Spektroskopia masowa: FAB MS: 696,4.
Przykład XlV. Analogicznie jak w przykładzie XIII przeprowadzono konwersję SLOW - wzór 1b (B=ymina, X=S, Y=-NHPh) do SLOW - 1b (B=tymina, X=O, Y=-NHPh)) z wydajnością 70%; 31P NMR (CDCI3): 29,89 ppm.
Przykład XV. Konwersja 3'-O-metanofosfonoani1idów 5'-O-DMT-tymidy1owych wzór 1, (B=tymina, X=O, Y=-NHPh) do 3'-O-(S-benzy1ometanotiofosfonianów) tymidylowych 1, (B=tymina, X=O, Y=SCH2Ph). Związki 1 (B=tymina, X=O, Y=-NHPh) (FAST lub SLOW) (50 mg) osuszono i rozpuszczono wTHF (2mi) z dodatkiem 1,8-diazabicyk1o[5.4.0]undek-7-en (DBU) (0.02 ml). Kontynuowano mieszanie przez 45 min. w temperaturze pokojowej, a następnie dodano disiarczek węgla (1 ml). Po 20 minutach dodano bromek benzylu (5 równoważników).
Produkt oczyszczano w wyniku ekstrakcji (chloroform-woda) i chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym. Ze związku FAST 1a (B=tymina, X=O,Y=-NHPh) otrzymano produkt FAST la (B=tymina, X=O,Y=SCH2Ph) z wydajnością 65% (0,036 g). 31P NMR (CDC13): 56,85 ppm. Związek SLOW -1b (B=tymina, X=O, Y=-NHPh) przeprowadzono w SLOW -1b (B-tymina, X=O, Y=SCH2Ph z wydajnością 70% (0,039 g). flP NMR (CDC13): 55,38 ppm.
Przykład XVI. Do roztworu związku o wzorze 1 (X=O, Y=XRs) (1 mmol) w acetonitrylu (75 ml) dodano AgF (25 % roztwór wodny) (1.25 równoważnika). Po zakończeniu reakcji produkt 1 (X=O, Y=F) ekstrahowano z układu CHC13-nasycona solanka. Suszono za pomocą MgSO4 i wytrącono czysty produkt z układu CHC13-eter naftowy.
Własności spektroskopowe substratów i produktów zawiera Tabela 2.
184 377
Tabela 2
| Substrat (X=O,Y=CH2pH) | Produkt (X=O, Y=F) | |||
| B | 3P nmr* | 3IP NMR | J1P-F | FAB-MS |
| T | 56.83 | 30.7 | 1060 | 623.4 |
| 30.6 | 1059 | |||
| CB2 | 56.10 | 30.3 | 1060 | 712.2 |
| 30.2 | 1059 | |||
| AB2 | 55.85 | 30.6 | 1057 | 736.2 |
| 30.3 | 1059 | |||
| G'bu | 56.58 | 31.3 | 1058 | 718.2 |
| 30.9 | 1060 |
* widma wykonane w C6D6
184 377
184 377
Wzór 1
Wzór la Wzór 1b
Wzór 2
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz. Cena 4,00 zł.
Claims (6)
- Zastrzeżenia patentowe1. Nowe pochodne fosforoorganiczne przedstawione ogólnym wzorem 1, w którym X oznacza atom tlenu lub siarki Y oznacza -NHPh, F lub grupę o wzorze -X'R3, w którym X ma wyżej podane znaczenie a R3 oznacza grupę metylową, lub grupę o wzorze -CH2C6H4-R4, w którym R4 oznacza atom wodoru, atom chloru lub grupę -NO2, R1 oznacza grupę blokującą, korzystnie 4'-dimetoksytrytylową (DMT) lub 9-fenyloksanten-9-ylową (Px), R2 oznacza atom wodoru lub grupę alkoksyIową, korzystnie metoksylową a B oznacza N-zablokowaną zasadę purynowąlub pirymidynową, korzystnie wybraną z grupy obejmującej Tyminę, Uracyl, Adeninę, Cytozynę. i Guaninę.
- 2. Sposób wytwarzania nowych pochodnych fosforoorganicznych o ogólnym wzorze 1, w którym X oznacza atom siarki lub tlenu, Y oznacza -NHPh, Ri oznacza grupę blokującą, korzystnie 4'-dimetoksytrytylową (DMT) lub 9-fenyloksanten-9-ylową (Px), R2 oznacza atom wodoru lub grupę alkoksylową, korzystnie metoksylową a B oznacza N-zablokowaną zasadę purynową lub pirymidynową, korzystnie wybraną z grupy obejmującej Tyminę, Uracyl, Adeninę, Cytozynę i Guaninę, znamienny tym, że prowadzi się reakcję metylodichlorofosfmy w obecności odczynnika wiążącego chlorowodór, korzystnie aminy, zwłaszcza trietyloaminy z nukleozydem o wzorze 2, w którym Ri, R2 i B mają wyżej podane znaczenie, następnie do mieszaniny dodaje się anilinę oraz siarkę elementarną, a po zakończeniu reakcji wydziela się produkt w znany sposób.
- 3. Sposób wytwarzania nowych pochodnych fosforoorganicznych o ogólnym wzorze 1, w którym X oznacza atom tlenu, Y grupę o wzorze -X'R3, w którym Xi ma wyżej podane znaczenie a R3 oznacza grupę metylową, lub grupę o wzorze -CH2C6H|-R4, w którym R4 oznacza atom wodoru, atom chloru lub grupę -NO2, oznacza Ri oznacza grupę blokującą, korzystnie 4'-dimetoksytry tyłową (DMT) lub 9-fenyloksanten-9-ylową (Px), R2 oznacza atom wodoru lub grupę alkoksylową, korzystnie metoksylową, a B oznacza N-zablokowaną zasadę purynowąlub pirymidynową, korzystnie wybraną z grupy obejmującej Tyminę, Uracyl, Adeninę, Cytozynę i Guaninę, znamienny tym, że prowadzi się reakcję metylodichlorofosfmy w obecności odczynnika wiążącego chlorowodór, korzystnie aminy, zwłaszcza trietyloaminy z nukleozydem o wzorze 2, w którym Ri, R2 i B mają wyżej podane znaczenie, następnie do mieszaniny dodaje się anilinę oraz siarkę elementarną, a otrzymaną mieszaninę diastereoizomerów nukleozydo 3'-O-metanofosfonotioanilidu o wzorze ogólnym 1, w którym R\ R2 iB mają podane wyżej znaczenie, a Y oznacza -NHPh, poddaje się reakcji z wodorkiem sodowym lub DBU oraz dwutlenkiem węgla, a otrzymany przejściowo kwas nukleozydo 3'-Ometanotiofosfonowy (sól sodowa lub DBU-niowa) alkiluje się za pomocą odczynnika alkilującego o wzorze R3Z, w którym R3 ma wyżej podane znaczenie, a Z oznacza atom chloru, bromu lub jodu.
- 4. Sposób wytwarzania nowych pochodnych kwasów fosforu o ogólnym wzorze 1, w którym X oznacza atom tlenu, Y oznacza -NHPh, R1 oznacza grupę blokujący korzystnie 4'-dimetoksytrytylową (DMT) lub 9-fenyloksanten-9-ylową (Px), IU oznacza atom wodoru lub grupę alkoksylową korzystnie metoksylową, a B oznacza N-zablokowaną zasadę purynową lub pirymidynowaą korzystnie wybraną z grupy obejmującej Tyminę, Uracyl, Adeninę, Cytozynę i Guaninę, znamienny tym, że prowadzi się reakcję metylodichlorofosfmy w obecności odczynnika wiążącego chlorowodór, korzystnie aminy, zwłaszcza trietyloaminy z nukleozydem o wzorze 2, w którym R1 R2 i B mają wyżej podane znaczenie następnie do mieszaniny dodaje się anilinę oraz siarkę elementarną a otrzymaną mieszaninę diastereoizomerów nukleozydo 3'-O-metanofosfonotioanilidu o wzorze ogólnym 1, w którym R1, R2 iB mają podane wyżej znaczenie, a X oznacza atom siarki poddaje się reakcji utlenienia za pomocą znanych środków utleniających, korzystnie za pomocą peroksymonosiarczanu potasowego lub nadtlenku wodoru.184 377
- 5. Sposób wytwarzania nowych pochodnych fosforoorganicznych o ogólnym wzorze 1, w którym X oznacza atom tlenu, a Y oznacza grupę o wzorze -X’R3, w którym X1 oznacza tlen lub siarkę, a R3 oznacza grupę metylową, lub grupę o wzorze - -CH2CĆH4-R4, w którym R4 oznacza atom wodoru, atom chloru lub grupę -NO2, R? oznacza grupę blokującą, korzystnie 4'-dimetoksytrytylową (DMT) lub 9-fenyloksanten-9-ylową (Px), R2 oznacza atom wodoru lub grupę alkoksylową, korzystnie metoksylową, a B oznacza N-zablokowaną zasadę purynową lub pirymidynową, korzystnie wybraną z grupy obejmującej Tyminę, Uracyl, Adeninę, Cytozynę i Guaninę, znamienny tym, że prowadzi się reakcję metylodichlorofosfiny w obecności odczynnika wiążącego chlorowodór, korzystnie aminy, zwłaszcza trietyloaminy z nukleozydem o wzorze 2, w którym Ri, R2 i B mają wyżej podane znaczenie, następnie do mieszaniny dodaje się anilinę oraz siarkę elementarną, a otrzymaną mieszaninę diastereoizomerów nukleozydo 3'-O-metanofosfonotioanilidu o wzorze ogólnym 1, w którym X oznacza atom siarki, R1 R2i B mają podane wyżej znaczenie, a Y oznacza -NHPh, poddaje się reakcji utlenienia za pomocą znanych środków utleniających, korzystnie za pomocą peroksymonosiarczanu potasowego lub nadtlenku wodoru, po czym otrzymany związek poddaje się reakcji z wodorkiem sodowym lub DBU oraz z disiarczkiem węgla, a otrzymany przejściowo kwas nukleozydo 3'-O-metanotiofosfonowy (sól sodowa lub DBU-niowa) alkiluje się za pomocą odczynnika alkilującego o wzorze R3Z, w którym R3 ma wyżej podane znaczenie, a Z oznacza atom chloru, bromu lub jodu.
- 6. Sposób wytwarzania nowych pochodnych fosforoorganicznych o ogólnym wzorze 1, w którym X oznacza atom siarki lub tlenu, Y oznacza F, Ri oznacza grupę blokującą korzystnie 4'-dimetoksytrytylową (DMT) lub 9-fenyloksanten-9-ylową (Px), r2 oznacza atom wodoru lub grupę alkoksylową, korzystnie metoksylową, a B oznacza N-zablokowaną zasadę purynową lub pirymidynową, korzystnie wybraną z grupy obejmującej Tyminę, Uracyl, Adeninę, Cytozynę i Guaninę, znamienny tym, że prowadzi się reakcję metylodichlorofosfiny w obecności odczynnika wiążącego chlorowodór, korzystnie aminy, zwłaszcza trietyloaminy z nukleozydem o wzorze 2, w którym Rl R2 i B mają wyżej podane znaczenie, następnie do mieszaniny dodaje się anilinę oraz siarkę elementarną lub środek utleniający, otrzymaną mieszaninę diastereoizomerów nukleozydo 3'-O-metanofosfonoanilidu o wzorze ogólnym 1, w którym X oznacza atom tlenu lub siarki, R\ R2 i B mają podane wyżej znaczenie, a Y oznacza -NHPh, poddaje się reakcji z wodorkiem sodowym lub DBU oraz dwutlenkiem lub dwusiarczkiem węgla, a otrzymaną mieszaninę diastereoizomerów nukleozydo 3-0metanofosfonotioloester o wzorze ogólnym 1, w którym X, R\ R2 i B mają podane wyżej znaczenie, a Y oznacza S lub -SeR3, poddaje się reakcji z odczynnikiem fluorującym o wzorze MF, gdzie M oznacza Ag, -NEt4, -NEt3H, a otrzymany produkt wyodrębnia się w znany sposób.
Priority Applications (20)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL96312934A PL184377B1 (pl) | 1996-02-26 | 1996-02-26 | Nowe pochodne fosforoorganiczne i sposób ich wytwarzania |
| PCT/US1996/007639 WO1996037503A1 (en) | 1995-05-26 | 1996-05-24 | Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives |
| DK96917829T DK0828749T3 (da) | 1995-05-26 | 1996-05-24 | Fremgangsmåder til syntese af organophosphorderivater |
| AT96917829T ATE245161T1 (de) | 1995-05-26 | 1996-05-24 | Verfahren zur synthese von phosphororganischen verbindungen |
| ES96917829T ES2202447T3 (es) | 1995-05-26 | 1996-05-24 | Metodos de sintesis de derivados organofosforados. |
| EP03001247A EP1323727A3 (en) | 1995-05-26 | 1996-05-24 | Composition and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives |
| CA002222048A CA2222048A1 (en) | 1995-05-26 | 1996-05-24 | Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives |
| DE69629112T DE69629112T2 (de) | 1995-05-26 | 1996-05-24 | Verfahren zur synthese von phosphororganischen verbindungen |
| EP96917829A EP0828749B1 (en) | 1995-05-26 | 1996-05-24 | Methods for the synthesis of organophosphorus derivatives |
| PT96917829T PT828749E (pt) | 1995-05-26 | 1996-05-24 | Composicoes e metodos para a sintese de derivados de organofosforo |
| AU60240/96A AU707369B2 (en) | 1995-05-26 | 1996-05-24 | Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives |
| JP53589596A JP2002500617A (ja) | 1995-05-26 | 1996-05-24 | 有機リン誘導体の合成方法および組成物 |
| CA002233460A CA2233460A1 (en) | 1995-09-01 | 1996-08-29 | Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives |
| AT96927149T ATE221079T1 (de) | 1995-09-01 | 1996-08-29 | Zusammensetzungen und verfahrenen zur synthese von organophosphorus derivaten |
| DE69622571T DE69622571T2 (de) | 1995-09-01 | 1996-08-29 | Zusammensetzungen und verfahrenen zur synthese von organophosphorus derivaten |
| EP96927149A EP0850248B1 (en) | 1995-09-01 | 1996-08-29 | Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives |
| PCT/IB1996/000867 WO1997009340A1 (en) | 1995-09-01 | 1996-08-29 | Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives |
| NZ315384A NZ315384A (en) | 1995-09-01 | 1996-08-29 | Organophosphorous mono and di nucleoside derivatives with p-chirality and their method of synthesis |
| DK96927149T DK0850248T3 (da) | 1995-09-01 | 1996-08-29 | Sammensætninger og fremgangsmåder til syntese af organophosphorderivater |
| AU67079/96A AU707093B2 (en) | 1995-09-01 | 1996-08-29 | Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL96312934A PL184377B1 (pl) | 1996-02-26 | 1996-02-26 | Nowe pochodne fosforoorganiczne i sposób ich wytwarzania |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL312934A1 PL312934A1 (en) | 1997-09-01 |
| PL184377B1 true PL184377B1 (pl) | 2002-10-31 |
Family
ID=20066950
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL96312934A PL184377B1 (pl) | 1995-05-26 | 1996-02-26 | Nowe pochodne fosforoorganiczne i sposób ich wytwarzania |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL184377B1 (pl) |
-
1996
- 1996-02-26 PL PL96312934A patent/PL184377B1/pl not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL312934A1 (en) | 1997-09-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN100558739C (zh) | 合成被保护的3’-氨基核苷单体 | |
| WO2000055179A1 (en) | Novel phosphate and thiophosphate protecting groups | |
| US5856465A (en) | Compositions and methods for the synthesis of chirally pure organophosphorus nucleoside derivatives | |
| JP2000507928A (ja) | ホスホトリエステルオリゴヌクレオチド、アミダイト、およびそれらの調製法 | |
| EP0753002A1 (en) | Modified oligonucleotides and intermediates useful in nucleic acid therapeutics | |
| US5936080A (en) | Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives | |
| JP3893057B2 (ja) | 新規な核酸塩基対 | |
| JP3781879B2 (ja) | 新規ヌクレオチド類縁体 | |
| EP0290583B1 (fr) | OLIGONUCLEOTIDES $g(a) | |
| CA2370478A1 (en) | N-acylphosphoramidites and their use in oligonucleotide synthesis | |
| Hancox et al. | Synthesis and properties of oligodeoxynucleotides containing the analogue 2′-deoxy-4′-thiothemidine | |
| WO2002079216A1 (en) | Labeled oligonucleotides, methods for making same, and compounds useful therefor | |
| US5864031A (en) | Process for preparing 5-dithio-modified oligonucleotides | |
| WO1997029116A1 (en) | Sulphur containing dinucleotide phosphoramidites | |
| Robles et al. | Synthesis of modified oligonucleotides containing 4-guanidino-2-pyrimidinone nucleobases | |
| Potier et al. | Synthesis and Hybridization Properties of Oligonucleotides Containing Polyamines at the C‐2 Position of Purines: A Pre‐synthetic Approach for the Incorporation of Spermine into Oligodeoxynucleotides Containing 2‐(4, 9, 13‐Triazatridecyl)‐2′‐deoxyguanosine | |
| PL184377B1 (pl) | Nowe pochodne fosforoorganiczne i sposób ich wytwarzania | |
| AU707369B2 (en) | Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives | |
| EP0850248B1 (en) | Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives | |
| Schweitzer et al. | Sequence specific hybridization properties of methylphosphonate oligodeoxynucleotides | |
| US20030078414A1 (en) | Oligonucleotides having alkylphosphonate linkages and methods for their preparation | |
| PL181682B1 (pl) | Sposób wytwarzania modyfikowanych P-chiralnych analogów nukleotydów | |
| CA2078256A1 (en) | Synthesis of sulfide-linked di-or oligonucleotide analogs and incorporation into antisense dna or rna | |
| PL181746B1 (pl) | Sposób wytwarzania modyfikowanych P-chiralnych analogów nukleotydów | |
| JPH10204097A (ja) | Ｈ−ホスホネートオリゴヌクレオチド誘導体、及び該誘導体の製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20090226 |