PE20191049A1 - Metodo para la construccion de una biblioteca de plasmidos, que permite la sintesis de oligopeptidos a partir de secuencias aleatorias en saccharomyces cerevisiae - Google Patents

Metodo para la construccion de una biblioteca de plasmidos, que permite la sintesis de oligopeptidos a partir de secuencias aleatorias en saccharomyces cerevisiae

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PE20191049A1
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oligopeptides
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saccharomyces cerevisiae
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Sugahara Ana Akemi Kitazono
Untiverios Giuliana Paola Chavez
Urteaga Raquel Merino
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Univ Nacional Agraria La Molina
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Abstract

La presente invencion proporciona un metodo alternativo para la produccion de una biblioteca de plasmidos para la sintesis de peptidos u oligopeptidos de secuencias aleatorias, mediante el uso como hospedero de la levadura Saccharomyces cerevisiae. El metodo comprende el diseno de los oligonucleotidos o iniciadores que incluyen los codones aleatorios, su amplificacion por PCR para la generacion de fragmentos que incluyen en sus extremos secuencias homologas al lugar de su inclusion en el plasmido, transformacion de la levadura con el plasmido linearizado y los insertos producidos por PCR; y recircularizacion de los plasmidos mediante el proceso de recombinacion homologa en la celula de la levadura. Mediante este proceso se puede lograr un numero ilimitado de colonias de transformantes de S. cerevisiae, cada una de las cuales posee un plasmido con un inserto de secuencia aleatoria, particular y unica. La coleccion de todos estos transformantes constituye la biblioteca genetica
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