NO884985L - IMPROVED EVALUATION TECHNIQUE AND APPARATUS FOR SELECTING THIS. - Google Patents

Description

Foreliggende oppfinnelse angår undersøkelsesteknikker (assay techniques) hvor kvalitativ og/eller kvantitativ deteksjon av kjemiske, biokjemiske eller biologiske analytter i en prove kan bestemmes, og angår også et apparat som slike teknikker kan utøves med. The present invention relates to assay techniques where qualitative and/or quantitative detection of chemical, biochemical or biological analytes in a sample can be determined, and also relates to an apparatus with which such techniques can be performed.

Undersøkelsesteknikker som det her henvises til, er basert på affiniteten mellom den analytt som skal undersøkes eller testes, og et reseptivt materiale, f.eks. en ligand eller en spesifikk bindingspartner som er belagt på en spesiell type overflate. Det henvises til de internasjonale patentpublika-sjonene WO84/02578 og WO86/01901 når det gjelder beskrivelser av undersøkelsesteknikker som omfatter (a) belegging av minst en forutbestemt del av en overflate som har en relieff-profil som er tildannet på forhånd på et substrat, med en tynn film av et materiale som er i stand til å binde seg til det stoff som det skal undersøkes eller testes etter, idet overflatedelen er optisk aktiv når det gjelder stråling over minst ett forutbestemt bånd av bølgelengder, og (b) det at den belagte overflaten settes i kontakt med prøven og de optiske egenskapene til overflatedelen observeres for å bestemme en kvalitativ og/eller kvantitativ forandring i optiske egenskaper som et resultat av at stoffet er bundet til den tynne filmen av materiale på overflaten. Examination techniques referred to here are based on the affinity between the analyte to be examined or tested and a receptive material, e.g. a ligand or a specific binding partner that is coated on a particular type of surface. Reference is made to International Patent Publications WO84/02578 and WO86/01901 for descriptions of survey techniques comprising (a) coating at least a predetermined portion of a surface having a relief profile previously formed on a substrate, with a thin film of a material capable of binding to the substance to be examined or tested, the surface portion being optically active to radiation over at least one predetermined band of wavelengths, and (b) that it the coated surface is contacted with the sample and the optical properties of the surface portion are observed to determine a qualitative and/or quantitative change in optical properties as a result of the substance being bound to the thin film of material on the surface.

Som beskrevet i disse publikasjonene, har relieff-profilen som er dannet på forhånd, typisk form av et optisk gitter, som kan være et enkelt, eneste gitter eller to eller flere kryssede gittere, hvis ribber kan ha kvadratiske, sinusformede eller trekantede tverrsnitts-fasonger, og slik det anvendes her, er henvisninger til et gitter ment å innbefatte alle slike gittere. As described in these publications, the preformed relief profile typically takes the form of an optical grating, which may be a single, single grating or two or more crossed gratings, the ribs of which may have square, sinusoidal, or triangular cross-sectional shapes , and as used herein, references to a lattice are intended to include all such lattices.

I publikasjonen WO84/02578 frembringes endringen i gitterets optiske egenskaper, som resultat av bindingen av en analytt som skal undersøkes (slik som et spesifikt antigen i et blodserum), hovedsakelig som et resultat av (1) massen eller volumet av den bundne analytten og (2) dens dielektriske egenskaper. In the publication WO84/02578, the change in the optical properties of the grating, as a result of the binding of an analyte to be investigated (such as a specific antigen in a blood serum), is produced mainly as a result of (1) the mass or volume of the bound analyte and ( 2) its dielectric properties.

I publikasjonen WO86/01901 overvåkes bindings-forløpet ved hjelp av endringer i de fluorescerende egenskapene til en fargemerket bindingspartner som er knyttet til sensorens overflate. In publication WO86/01901, the binding process is monitored by means of changes in the fluorescent properties of a colour-labelled binding partner which is attached to the sensor's surface.

I hver av de beskrevne teknikkene er hovedsakelig gitteroverflaten ugjennomsiktig, i det minste ved den strålingsbølge-lengde som benyttes til belysning, og gitteret kan derfor betraktes som et reflekterende diffraksjonsgitter. Endringer i gitterets egenskaper som oppstår som resultat av avsetning på gitteret av analytter eller andre materialer som resultat av undersøkelses- eller testteknikken, fremtrer som endringer i gitterets refleksjonsegenskaper (for WO84/02578) og fluorescens-emisjonsegenskaper (WO86/01901), på den måte som beskrives i de forannevnte publikasjonene. Imidlertid er vellykket gjennom-føring av slike undersøkelses- eller testteknikker avhengig av evnen til å belyse gitteroverflaten, og derfor vil alle andre materialer enn det som er bundet til overflaten gjennom en spesifikk bindingsreaksjon, avbryte lysgjennomgangen, og derfor har det vært vanskelig å finne ut hvordan en slik test kunne utføres "i det våte". "I det våte" betyr med en væske i kontakt med gitteroverflaten, og ved bruk av konvensjonell teknikk, er en undersøkelse av denne typen spesielt vanskelig dersom væsken absorberer eller sprer lys ved eksitasjons- eller observasj onsbølgelengden. In each of the described techniques, the grating surface is mainly opaque, at least at the radiation wavelength used for illumination, and the grating can therefore be regarded as a reflective diffraction grating. Changes in the grating properties that occur as a result of deposition on the grating of analytes or other materials as a result of the examination or testing technique appear as changes in the grating reflection properties (for WO84/02578) and fluorescence emission properties (WO86/01901), in that way which is described in the aforementioned publications. However, the successful implementation of such examination or testing techniques is dependent on the ability to illuminate the lattice surface, and therefore any material other than that bound to the surface through a specific binding reaction will interrupt light transmission, and therefore it has been difficult to determine how such a test could be carried out "in the wet". "In the wet" means with a liquid in contact with the grating surface, and using conventional techniques, an investigation of this type is particularly difficult if the liquid absorbs or scatters light at the excitation or observation wavelength.

Det er derfor et formål ved foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe en alternativ fremgangsmåte og apparat som en undersøkelses- eller testteknikk kan utføres med "i det våte", og til og med i nærvær av absorpsjon eller spredning fra partikler suspendert i væsken. It is therefore an object of the present invention to provide an alternative method and apparatus by which an examination or test technique can be carried out "in the wet", and even in the presence of absorption or scattering from particles suspended in the liquid.

Oppfinnelsen tilveiebringer således i sin videste forstand en fremgangsmåte for testing eller undersøkelse etter en ligandi i en prøve, hvilken fremgangsmåte omfatter å legge prøven i kontakt med en overflate av en optisk struktur som er i stand til å oppvise overflate-plasmonresonans, idet nevnte overflate har adsorbert på seg eller bundet til seg, enten direkte eller indirekte, en spesifikk bindingspartner for den ligand det er ønskelig å detektere; å bestråle den andre overflaten av den optiske strukturen med stråling med en passende bølgelengde; og å analysere den reflekterte strålingen for å bestemme om, og om ønskelig i hvilken grad og/eller med hvilken hastighet den optiske strukturens egenskaper i forbindelse med overflate-plasmonresonansen endres ved dannelse av et kompleks mellom liganden og den spesifikke bindingspartneren. The invention thus provides, in its broadest sense, a method for testing or examining for a ligand in a sample, which method comprises placing the sample in contact with a surface of an optical structure capable of exhibiting surface plasmon resonance, said surface having adsorbed on or bound to it, either directly or indirectly, a specific binding partner for the ligand it is desired to detect; irradiating the second surface of the optical structure with radiation of an appropriate wavelength; and analyzing the reflected radiation to determine if, and if desired to what extent and/or at what rate, the properties of the optical structure in connection with the surface plasmon resonance change upon formation of a complex between the ligand and the specific binding partner.

Fortrinnsvis er den optiske strukturen et diffraksjonsgitter av et klart plast- eller glassmateriale, og gitteret er belagt med et tynt metall- eller metall-lignende lag, som er delvis reflekterende og delvis transmitterende, i det minste ved den strålingsbølgelengde som skal benyttes for å belyse og observere gitteret av undersøkelsesformål. Preferably, the optical structure is a diffraction grating of a clear plastic or glass material, and the grating is coated with a thin metal or metal-like layer, which is partially reflective and partially transmitting, at least at the radiation wavelength to be used for illumination and observe the grid for survey purposes.

Fortrinnsvis vil den ligand som det testes etter, være et antistoff eller et antigen, og den spesifikke bindingspartner vil da være det komplementære antigen eller antistoff. Preferably, the ligand that is tested for will be an antibody or an antigen, and the specific binding partner will then be the complementary antigen or antibody.

Oppfinnelsen tilveiebringer videre et apparat for deteksjon av en eller flere ligander i en prøve, hvilket apparat omfatter et reservoar innrettet for å inneholde prøven som skal testes, idet minst en del av en innvendig overflate i nevnte reservoar omfatter en optisk struktur som er i stand til å oppvise overflate-plasmonresonans, og idet den overflaten av nevnte struktur som under bruk vil stå i kontakt med prøven, har adsorbert på seg eller bundet til seg, enten direkte eller indirekte, en spesifikk bindingspartner for den ligand det er ønskelig å detektere. The invention further provides an apparatus for the detection of one or more ligands in a sample, which apparatus comprises a reservoir arranged to contain the sample to be tested, with at least part of an internal surface in said reservoir comprising an optical structure capable of to exhibit surface plasmon resonance, and as the surface of said structure which during use will be in contact with the sample, has adsorbed on it or bound to it, either directly or indirectly, a specific binding partner for the ligand it is desired to detect.

En utførelse av apparatet ifølge oppfinnelsen omfatter videre en anordning for fra utsiden av reservoaret å bestråle den overflaten av den optiske strukturen som under bruk vil ligge fjernt fra prøven, og en innretning for å analysere den reflekterte strålingen for å bestemme om, og om ønskelig i hvilken grad og/eller med hvilken hastighet egenskapene til nevnte optiske struktur når det gjelder overflate-plasmonresonans endres ved dannelse av et kompleks mellom liganden og den spesifikke bindingspartner. An embodiment of the apparatus according to the invention further comprises a device for irradiating from the outside of the reservoir the surface of the optical structure which during use will be distant from the sample, and a device for analyzing the reflected radiation to determine whether, and if desired in to what extent and/or at what rate the properties of said optical structure in terms of surface plasmon resonance change upon formation of a complex between the ligand and the specific binding partner.

Typisk omfatter reservoaret et grunn brønn med en flatTypically, the reservoir comprises a shallow well with a flat

bunn som har et diffraksjonsgitter tildannet på sin øvre overflate inne i brønnen, og en delvis reflekterende, delvis transmitterende, tynn metall- eller metall-lignende film påført på gitteroverflaten. bottom having a diffraction grating formed on its upper surface inside the well, and a partially reflective, partially transmitting, thin metal or metal-like film applied to the grating surface.

Der hvor det er viktig å beskytte metallet fra væskenWhere it is important to protect the metal from the liquid

eller andre materialer som skal legges i reservoaret, belegges or other materials to be placed in the reservoir, coated

fortrinnsvis metallfilmen med en ytterligere film av et inert materiale som, selv om det muliggjør at diffraksjonsgitteret oppviser overflate-plasmonresonans når det aktiveres av lys med passende bølgelengde, ikke desto mindre forhindrer kjemisk vekselvirkning mellom metallet og reaktantene i reservoaret. preferably the metal film with an additional film of an inert material which, while enabling the diffraction grating to exhibit surface plasmon resonance when activated by light of appropriate wavelength, nevertheless prevents chemical interaction between the metal and the reactants in the reservoir.

Fordelen med oppfinnelsen er at undersøkelsesteknikken kan benyttes når man benytter prøver "i det våte", og i nærvær av spredende partikler i væskeprøven. The advantage of the invention is that the examination technique can be used when using samples "in the wet", and in the presence of scattering particles in the liquid sample.

En ytterligere fordel er at reaksjoner kan overvåkes mens de foregår, og derfor kan sluttpunktet for testen forutsis, og derved reduseres lengden av den tid det tar å utføre under-søkelsen. A further advantage is that reactions can be monitored while they are taking place, and therefore the end point of the test can be predicted, thereby reducing the length of time it takes to carry out the examination.

En tilleggs-fordel er at det ikke er nødvendig å adskille prøven fra sensoren før målingen. An additional advantage is that it is not necessary to separate the sample from the sensor before the measurement.

Oppfinnelsen er således velegnet til benyttelse med prøver av fullblod og andre biologiske prøver som inneholder lysspredende forbindelser eller partikkelformet materiale. The invention is thus suitable for use with samples of whole blood and other biological samples that contain light-scattering compounds or particulate material.

Oppfinnelsen muliggjør også utførelse av en konkurranse-undersøkelse i våt eller tørr tilstand, hvor et reagens-antigen fluorofor-merkes, eller utførelse av en lagvis undersøkelse (sandwich assay) hvor et andre antistoff fluorofor-merkes. The invention also enables the performance of a competition test in wet or dry conditions, where a reagent-antigen is fluorophore-labeled, or the performance of a layered test (sandwich assay) where a second antibody is fluorophore-labeled.

Bruken av fluorofor-merkede materialer er mulig under den forutsetning at deteksjonsmidlene er i stand til å skille mellom forskjellige lysbølgelengder som de mottar, og spesielt i stand til å bestemme om lys av en bølgelengde som tilsvarer den som frembringes av fluorofor-merkestoffet, er tilstede i det lys som gjenutstråles fra gitteret, eller ikke. The use of fluorophore-labeled materials is possible under the condition that the detection means are capable of distinguishing between different wavelengths of light that they receive, and in particular capable of determining whether light of a wavelength corresponding to that produced by the fluorophore-labeling substance is present in the light re-emitted from the grating, or not.

I et typisk apparat benyttes en monokromatisk eller kvasi-monokromatisk lyskilde som primær kilde for belysning av gitteret, og en laser benyttes typisk til dette formål, skjønt det må forstås at dette på ingen måte begrenser valget av lyskilde til en laser, og innfallsvinkelen for lyset varieres. Alternativt kan en polykromatisk lyskilde, dvs. hvitt lys, benyttes, innfallsvinkelen holdes konstant og bølgelengde-egenskapene til det reflekterte lyset blir analysert for å detektere virkninger av overflate-plasmonresonans. In a typical device, a monochromatic or quasi-monochromatic light source is used as the primary source for illuminating the grid, and a laser is typically used for this purpose, although it must be understood that this in no way limits the choice of light source for a laser, and the angle of incidence of the light is varied. Alternatively, a polychromatic light source, i.e. white light, can be used, the angle of incidence is kept constant and the wavelength properties of the reflected light are analyzed to detect effects of surface plasmon resonance.

Oppfinnelsen skal nå beskrives kort med henvisning til de medfølgende tegningene, hvor: The invention will now be described briefly with reference to the accompanying drawings, where:

Fig. 1 viser virkningen av overflate-plasmonresonansFig. 1 shows the effect of surface plasmon resonance

via bak-belysning av et diffraksjonsgitter, ogvia back-illumination of a diffraction grating, and

Fig. 2 illustrerer skjematisk et apparat som en undesøkelse kan utføres med i samsvar med oppfinnelsen, og som omfatter de foretrukne konstruksjonsmessige trekkene ifølge oppfinnelsen. Fig. 1 viser resultater oppnådd fra et sprøytestøpt diffraksjonsgitter som ble belagt med 50 nm av sølv ved vakuum-pådamping og avsøkt fra undersiden av gitteret med en helium-neonlaser (y=633 nm). Den reflekterte lysintensiteten ble overvåket med varierende innfallsvinkel (5). Fallet i reflek-tivitets-egenskapen for overflate-plasmonresonans ble observert over et spesifikt område av vinkler. Avsøking av et område av den metalliserte testanordningen uten gitteret gav ingen forandring i intensitet av reflektert lys over det vinkelområde som ble dekket. Fig. 2 schematically illustrates an apparatus with which an examination can be carried out in accordance with the invention, and which includes the preferred constructional features according to the invention. Fig. 1 shows results obtained from an injection-molded diffraction grating that was coated with 50 nm of silver by vacuum deposition and scanned from the underside of the grating with a helium-neon laser (y=633 nm). The reflected light intensity was monitored with varying angles of incidence (5). The drop in reflectivity property for surface plasmon resonance was observed over a specific range of angles. Scanning an area of the metallized test device without the grating produced no change in intensity of reflected light over the angular range covered.

I Fig. 2 er det dannet en grunn brønn 10 i et klart plastmateriale med en flat bunn 12, og på dennes øvre, innvendige overflate er det annet et diffraksjonsgitter 14 ved hjelp av en eller annen passende prosess, slik som trykk-støping (impression moulding), fresing eller på annen måte. In Fig. 2, a shallow well 10 is formed in a clear plastic material with a flat bottom 12, and on its upper, inner surface there is another diffraction grating 14 by means of some suitable process, such as pressure-molding (impression moulding), milling or otherwise.

Gitterets 14 øvre overflate er belagt med en halvreflek-terende metall- eller metall-lignende film, f.eks. av sølv, aluminium, kopper eller gull, og dersom et mellomliggende, The upper surface of the grid 14 is coated with a semi-reflective metal or metal-like film, e.g. of silver, aluminium, copper or gold, and if an intermediate,

inert lag er nødvendig mellom den metalliske filmen og reagensene som skal plasseres i brønnen, belegges selve overflaten med et lag av et passende buffermateriale, slik som et oksyd av silisium. inert layer is necessary between the metallic film and the reagents to be placed in the well, the surface itself is coated with a layer of a suitable buffer material, such as an oxide of silicon.

Gitteret er belagt med en tynn film av materiale som omfatter spesifikke antigener, antistoffer eller andre bindingspartnere, som kan være merket med en fluorescerende forbindelse, og brønnen er nå klar til å motta en væske som inneholder det spesifikke antistoff eller antigen eller de komplementære bindingspartnere som skal testes. The grid is coated with a thin film of material comprising specific antigens, antibodies or other binding partners, which may be labeled with a fluorescent compound, and the well is now ready to receive a liquid containing the specific antibody or antigen or the complementary binding partners which must be tested.

Artikkelen som inneholder brønnen, settes inn i et apparat som er vist skjematisk med henvisningstall 16, og omfatter en laser-lyskilde 18, som lys projiseres fra idet passende, ikke viste optiske innretninger benyttes, slik at lyset faller inn mot undersiden av brønnen med en passende innfallsvinkel for å danne overflate-plasmonresonans i diffraksjonsgitteret. En bølgelengde-følsom lysdetektor 20 er også plassert inne i huset 16, og utgangssignalet fra detektoren 20 føres til et apparat for elektrisk behandling og fremvisning slik som 22, som kan, men ikke trenger å være innbefattet i huset. The article containing the well is inserted into an apparatus which is shown schematically with reference numeral 16, and comprises a laser light source 18, from which light is projected by using suitable optical devices, not shown, so that the light falls towards the underside of the well with a suitable angle of incidence to form surface plasmon resonance in the diffraction grating. A wavelength-sensitive light detector 20 is also located inside the housing 16, and the output signal from the detector 20 is fed to an electrical processing and display device such as 22, which may or may not be contained within the housing.

Justeringer utføres på detektoren 20 og på behandlings- og displaykretsene 22 for å frembringe en første avlesning når brønnen er i posisjon og belyses og inneholder en væske som ikke inneholder noen ligand. Adjustments are made on the detector 20 and on the processing and display circuits 22 to produce a first reading when the well is in position and illuminated and contains a liquid containing no ligand.

En prøve som kan inneholde, men ikke nødvendigvis inneholder en ligand, tilføres så til brønnen på en passende måte, og utgangssignalet fra detektoren 20, slik det fremvises av apparatet 22, overvåkes for å bestemme om noen forandring stejer. A sample, which may or may not contain a ligand, is then added to the well in an appropriate manner, and the output signal from the detector 20, as displayed by the apparatus 22, is monitored to determine if any changes occur.

Dersom det benyttes en fluorescens-undersøkelsesteknikk, kan detektoren innstilles for å bestemme om noe lys med bølgelengden til den fluorescerende merkingen i testen kan detekteres eller ikke. If a fluorescence screening technique is used, the detector can be set to determine whether or not any light with the wavelength of the fluorescent label in the test can be detected.

Man kan se at dersom væskeprøven som i tegningen er gitt referansetall 24, inneholder lysspredende partikler, vil disse innvirke på lystransmisjonen gjennom væsken, og således til og fra diffraksjonsgitteret, og vil gjøre en observasjon av diffraksjonsgitteret gjennom væsken upraktisk. Imidlertid når den belysningsmetode benyttes som er illustrert, vil overflate-plasmonresonanseffekten, slik den bestemmes av detektoren 20, ikke bli påvirket av nærvær av lysspredende partikler i væsken, og undersøkelsesteknikken kan utføres "i det våte". It can be seen that if the liquid sample given the reference number 24 in the drawing contains light-scattering particles, these will affect the light transmission through the liquid, and thus to and from the diffraction grating, and will make an observation of the diffraction grating through the liquid impractical. However, when the illumination method illustrated is used, the surface plasmon resonance effect, as determined by detector 20, will not be affected by the presence of light-scattering particles in the liquid, and the examination technique can be performed "in the wet".

Selv om det viste eksemplet bare viser én brønn, kan selvfølgelig lyskilden 18 benyttes til belysning av flere brønner samtidig, og enten kan tilsvarende mange detektorer benyttes, eller et detektor-sett som avsøker hver brønn i rekkefølge, slik at en undersøkelse eller test av et stort antall forskjellige prøver kan utføres relativt hurtig. Although the example shown only shows one well, of course the light source 18 can be used to illuminate several wells at the same time, and either a corresponding number of detectors can be used, or a detector set that scans each well in sequence, so that an examination or test of a large number of different tests can be performed relatively quickly.

Alternativt kan et antall definerte områder på overflaten av én enkelt brønn ha forskjellige bindingspartnere på seg, og disse kan benyttes til enten å måle et antall forskjellige analyttér samtidig, eller å tilveiebringe et mål på den ikke-spesifikke binding, ved sammenligning med "kontroll"-områder som f.eks. kan ha en bindingspartner som ikke selv er spesifikk for noen ligand som kan være tilstede i prøven som skal testes. Alternatively, a number of defined areas on the surface of a single well can have different binding partners on them, and these can be used to either measure a number of different analytes simultaneously, or to provide a measure of the non-specific binding, by comparison with "control" -areas such as may have a binding partner that is not itself specific for any ligand that may be present in the sample to be tested.

Claims (14)

1. Fremgangsmåte for å teste etter en ligand i en prøve, karakterisert ved at prøven legges i kontakt med en overflate av en optisk struktur som er i stand til å oppvise overflate-plasmonresonans, hvilken overflate har adsorbert på seg eller bundet til seg, enten direkte eller indirekte, en spesifikk bindingspartner for den ligand det er ønskelig å detektere, at den optiske strukturens andre overflate bestråles med stråling som har en passende bølgelengde, og at den reflekterte strålingen analyseres for å fastlegge om, og om ønskelig i hvilken grad og/eller med hvilken hastighet, egenskapene til den optiske strukturen angående overflate-plasmonresonans blir endret ved dannelse av et kompleks mellom liganden og den spesifikke bindingspartner.1. Method for testing for a ligand in a sample, characterized in that the sample is placed in contact with a surface of an optical structure capable of exhibiting surface plasmon resonance, which surface has adsorbed on it or bound to it, either directly or indirectly, a specific binding partner for the ligand it is desired to detect, that the second surface of the optical structure is irradiated with radiation that has a suitable wavelength, and that the reflected radiation is analyzed to determine whether, and if desired to what extent and/ or at what rate the surface plasmon resonance properties of the optical structure are altered by complex formation between the ligand and the specific binding partner. 2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at den optiske strukturen er et diffraksjonsgitter.2. Method according to claim 1, characterized in that the optical structure is a diffraction grating. 3. Fremgangsmåte ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved at den spesifikke bindingspartner er et antigen eller et antistoff.3. Method according to claim 1 or 2, characterized in that the specific binding partner is an antigen or an antibody. 4. Fremgangsmåte ifølge et av de foregående krav, karakterisert ved at den optiske strukturen er belagt med et tynt metall- eller metall-lignende lag som er delvis reflekterende og delvis transmitterende ved den strålings-bølgelengde som benyttes.4. Method according to one of the preceding claims, characterized in that the optical structure is coated with a thin metal or metal-like layer which is partly reflective and partly transmitting at the radiation wavelength used. 5. Apparat for deteksjon av en eller flere ligander i en prøve, karakterisert ved at det omfatter et reservoar for å inneholde den prøve som skal testes, idet minst endel av en innvendig overflate i nevnte reservoar omfatter en optisk struktur som er i stand til å oppvise overflate-plasmonresonans, og idet den overflate av nevnte struktur som i bruk vil stå i kontakt med prøven, har adsorbert på seg eller bundet til seg, enten direkte eller indirekte, en spesifikk bindingspartner for den ligand det er ønskelig å detektere.5. Apparatus for the detection of one or more ligands in a sample, characterized in that it comprises a reservoir to contain the sample to be tested, with at least part of an internal surface in said reservoir comprising an optical structure which is able to exhibit surface plasmon resonance, and as the surface of said structure which in use will be in contact with the sample, has adsorbed on it or bound to it, either directly or indirectly, a specific binding partner for the ligand it is desired to detect. 6. Apparat ifølge krav 5, karakterisert ved at det omfatter en anordning for fra reservoarets utside å bestråle den overflate av den optiske strukturen, som i bruk vil ligge fjernt fra prøven, og en innretning for å analysere den reflekterte strålingen for å bestemme om, og om ønskelig i hvilken grad og/eller med hvilken hastighet egenskapene til den optiske strukturen hva angår overflate-plasmonresonans blir endret ved dannelse av et kompleks mellom liganden og den spesifikke bindingspartner.6. Apparatus according to claim 5, characterized in that it includes a device for irradiating from the outside of the reservoir the surface of the optical structure, which in use will be located far from the sample, and a device for analyzing the reflected radiation to determine whether, and if desired to what extent and /or the rate at which the properties of the optical structure in terms of surface plasmon resonance are changed by the formation of a complex between the ligand and the specific binding partner. 7. Apparat ifølge krav 5 for deteksjon av flere ligander i en prøve, karakterisert ved at det omfatter et reservoar med flere diskrete områder, idet hvert diskrete område omfatter en optisk struktur slik den er definert i krav 5, og idet den overflaten på hver optisk struktur som i bruk vil stå i kontakt med prøven, har en forskjellig spesifikk bindingspartner adsorbert på seg eller bundet til seg.7. Apparatus according to claim 5 for the detection of several ligands in a sample, characterized in that it comprises a reservoir with several discrete areas, each discrete area comprising an optical structure as defined in claim 5, and in that the surface of each optical structure which in use will be in contact with the sample has a different specific binding partner adsorbed on it or bound to it. 8. Apparat ifølge krav 5, karakterisert ved at det omfatter flere reservoarer som definert i krav 5.8. Apparatus according to claim 5, characterized in that it includes several reservoirs as defined in claim 5. 9. Apparat ifølge krav 7 eller 8, karakterisert ved at det omfatter en anordning for fra utsiden av reservoaret å bestråle den overflaten av den optiske strukturen som i bruk vil ligge fjernt fra prøven og flere innretninger for å analysere den reflekterte strålingen eller én enkelt innretning for å analysere den reflekterte strålingen som er i stand til å avsøke hvert diskret område eller reservoar i rekkefølge for å bestemme om, og om ønskelig i hvilken grad og/eller med hvilken hastighet den optiske strukturens egenskaper hva angår overflate-plasmonresonans blir endret ved dannelse av et kompleks mellom liganden og den spesifikke bindingspartner.9. Apparatus according to claim 7 or 8, characterized in that it comprises a device for irradiating from the outside of the reservoir the surface of the optical structure which in use will be far from the sample and several devices for analyzing the reflected radiation or a single device to analyze the reflected radiation capable of scanning each discrete region or reservoir in sequence to determine if, and if desired to what extent and/or at what rate, the surface plasmon resonance properties of the optical structure are altered upon formation of a complex between the ligand and the specific binding partner. 10. Apparat ifølge et av kravene 5-9, karakterisert ved at den optiske strukturen er et diffraksjonsgitter.10. Apparatus according to one of claims 5-9, characterized in that the optical structure is a diffraction grating. 11. Apparat ifølge et av kravene 5-10, karakterisert ved at den spesifikke bindingspartner er et antigen eller et antistoff.11. Apparatus according to one of claims 5-10, characterized in that the specific binding partner is an antigen or an antibody. 12. Apparat ifølge et av kravene 5-11, karakterisert ved at den optiske strukturen er belagt med et tynt metall- eller metall-lignende lag som er delvis reflekterende og delvis transmitterende ved den strålings-bølgelengde som benyttes.12. Apparatus according to one of claims 5-11, characterized in that the optical structure is coated with a thin metal or metal-like layer which is partly reflective and partly transmitting at the radiation wavelength used. 13. Apparat ifølge et av kravene 5-12, karakterisert ved at bestrålingsanordningen er en monokromatisk eller kvasi-monokromatisk lyskilde.13. Apparatus according to one of claims 5-12, characterized in that the irradiation device is a monochromatic or quasi-monochromatic light source. 14. Apparat ifølge krav 13, karakterisert ved at lyskilden er en laser.14. Apparatus according to claim 13, characterized in that the light source is a laser.