NO750295L - - Google Patents
Info
- Publication number
- NO750295L NO750295L NO750295A NO750295A NO750295L NO 750295 L NO750295 L NO 750295L NO 750295 A NO750295 A NO 750295A NO 750295 A NO750295 A NO 750295A NO 750295 L NO750295 L NO 750295L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- virus
- strain
- atcc
- influenza type
- influenza
- Prior art date
Links
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 claims description 51
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 48
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 claims description 43
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 36
- 241000701076 Macacine alphaherpesvirus 1 Species 0.000 claims description 33
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 19
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 19
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 11
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 claims description 10
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 10
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000005215 recombination Methods 0.000 claims description 5
- 230000006798 recombination Effects 0.000 claims description 5
- 229940124873 Influenza virus vaccine Drugs 0.000 claims description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 4
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 claims description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 3
- POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N allantoin Chemical compound NC(=O)NC1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 50
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 26
- POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N Allantoin Natural products NC(=O)N[C@@H]1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N 0.000 description 25
- 229960000458 allantoin Drugs 0.000 description 25
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 24
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 16
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 11
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 11
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 11
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 10
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 10
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 10
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 10
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 10
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 10
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 10
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 7
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 7
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 6
- 241000282339 Mustela Species 0.000 description 5
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 5
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 5
- 229960003971 influenza vaccine Drugs 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 4
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 4
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 4
- 241000831652 Salinivibrio sharmensis Species 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 206010040102 Seroma Diseases 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 241000713196 Influenza B virus Species 0.000 description 2
- 210000001643 allantois Anatomy 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 210000000991 chicken egg Anatomy 0.000 description 2
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 2
- 238000009021 pre-vaccination Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 241000238876 Acari Species 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 241000353621 Eilat virus Species 0.000 description 1
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- 206010062106 Respiratory tract infection viral Diseases 0.000 description 1
- 208000036071 Rhinorrhea Diseases 0.000 description 1
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000027645 antigenic variation Effects 0.000 description 1
- 229940031416 bivalent vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 description 1
- 208000037798 influenza B Diseases 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 229960001226 live attenuated influenza Drugs 0.000 description 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 1
- 210000001989 nasopharynx Anatomy 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008024 pharmaceutical diluent Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 210000001533 respiratory mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000779 smoke Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
- A61K2039/541—Mucosal route
- A61K2039/543—Mucosal route intranasal
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16211—Influenzavirus B, i.e. influenza B virus
- C12N2760/16234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrorer fremstilling av vevende influensavirus-vaksiner for nasal tilforsel, idet vaksinene som aktiv bestanddel omfatter en svekket stabil type B influensavirus-stamme og eventuelt en svekket stabil type å influensavirus, som kan tilfores ad nasal vei.
Beskyttelse mot virus-respirasjonsinfeksjoner har vist seg å
ha en sammenheng. med nærvær av en lokal immunitet i respirasjons-slimhinnen. Dette forhold har Rossen et al. nylig redgjort for (Progr. Med. Virol. 1971, 1,3, 194).
I de senere år er det blitt gjort adskillige forsok på å
fremkalle immunitet overfor influensa ved nasal tilforsel av inaktiverte vaksiner (se f.eks.: Waldman et al. Natore, 1968,
218, 594s Jarna 1969, 207, 520*\ M0 Bull. 1969, 41, 543,). Resultatene var imidlertid usikre og dette kan muligens skyldes
den utilstrekkelige stimulering av iramunitetssysternet med det inaktiverte antigen (Tyrrell et al. J. Hyg. 1970, 68, 359).
Det kjennes levende influensa type B virusvaksirier, men disse
gir vidt forskjellige beskyttelsesgrader, og det er gjort tallrike forsok på å redusere virusets patogenieitet, f.eks. ved serieoverforsler til egg (se f.eks. A.A. Smorodintsev, Proe. Symposium onAcute respiratory Diseases, Zagreb 1969, 391-404) eller ved å anvende lavtemperaturmutanter (F. M Davenport et al. Proe. Symposium on Live Influenza Vaccines, Zagreb 1971, 105-113).
Rekombinasjon av influensa type B virusstammer er også nevnt i litteraturen (se f.eks.S&D« Kilbourne i Progr. Med. Virol. 5, 79-126, 1963).
Som angitt av f.eks. G.C. Schild et al. i Brit. Wed, J. 4, 127-131, 1973>er antigeniske variasjoner i dets overflate-antigener en av influensavirusets mest viktigste egenskaper dg en egenskap som gir mange problemer i forbindelse med influensa-kohtrollen ved vaksinasjon.
Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer svekkede stabile influensa type B virusstammer, som er verdifulle for vaksinasjons-anvendelse, ved hjelp av en fremgangsmåte som omfatter svekkelse av en virulent influensa type B virusstamme, inntil der fås en svekket og vaksinasjonsinfluensa type B virusstamme, rekombinering av nevnte svekkede og vaksinasjonsstamme med et influensa type B virusisolat og ved selektivt trykk isolering av en rekombinant med minst en for den svekkede moderstammes egenskaper, som ikke deles av den annen møderstamtea og den antigeniske sammensetning av den annen moderstamme*
Den svekkede type B influensastamrae 6g vaksinasjonsstamme er mer spesielt en stamme, som heri betegnes som Brigit-stammen (deponert i Amerivan Type Culture Collection, 12301 Parklawn Drive, Rockville Md 20852 under deponeringsnummer ATCC VR 786), og som er blitt oppnådd ved å overf6re influensa B/Russland/69 stammen (ATCC VR790) til allantoinhulen i befruktede honseegg
i nærvær av svineseraca• inntil der derfra isoleres en svekket og vaksinasjons-influensatype B virusstamme, sbms er fullstendig motstandsdyktig overfor serurainhibitorer, - har en positiv AOS (allantoic on shell) merkeegenskap (titrering på "allantoic raembrane on shell" er beskrevet av S. Pazekas de St. Groth og D. 0 White i J. Hyg. 56; 151-162, 1958).
er antigenisk uten bivirkninger på fritter (ildere).
- fremviser positiv hemagglutinin-termosensitivitet ved 60°C - fremviser ustabil hemagglutinasjon av rode blodceller fra sauer ved 30°C.
Ved den ovenfor beskrevne fremgangsmåte gjennpmfpres rekombinasjonstrinnet i et hvilket som helst i teknikken kjent substrat til å akseptere vefesten av influensa type B viitus, f.eks. befruktet honseegg-materiale eller okséfoster-nyrevev-kultur, spesielt allaftcfoin-hulrommet i befruktede hdnseegg. Rekombinasjonen ican gjeai.u>mfores med en hvilken som helst onsket type B virus isolat, spesielt et hittil ukjent isolat så som B/Song Kong/5/72 (ATCC VR791) isolatet eller B/Hong Kong/ 8/73 (ATCC VR792) isolatet.
De således oppnådde rekorabinatstammer kan naturligvis klones eller underkastes adskillige fortynningsoverfdrsler uten at
det vesentlige ved den foreliggende oppfinnelse derved modifiseres.
Rekombinantene oppnådd i henhold til.^oppfinnelsen fra Brigit-stammen (ATCC VR786) med enten B/S5I</5/72~ (ATCC VR 7 91) eller B/HK/8/73- (ATCC VR792) isolatet er blitt tilskrevet henhv. influensatypé B virus R 22 stamme- (ATCC VR788), R 5 stamme-
(ATCC VR787) og R 75 stamme- (ATCC VR789) betegnelsen.
Virusrelcombinantsts oppnådd ved fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen er'iiska patogene, immunogene og verdifulle for fremstilling av influensa type B levende virusvaksine, idet det for dette anvendes en hvilken som helst teknikk, som er kjent for fremstilling og/eller stabilisering av levende influensavirus-vaksine. Den foreliggende oppfinnelse angår fdlgelig fremstilling av svekkede influensa type B virusvaksiner som inneholder minst en slik influensa type B rekombinant.
Ved denne utforelsesform omfatter oppfinnelsen en fremgangsmåte for fremstilling av en svekket influensavirus-vaksine, hvor man lar en influensa type B virusstamme oppnådd ved hjelp av den ovenfor beskrevne fremgangsmåte utvikle seg i befruktede honseeggs allantoin-hulrom i et tidsrom som er tilstrekkelig til å tillate vekst av en stor mengde av nevnte virus, og hoster det resulterende virusmaterial.
De således oppnådde svekkede influensavirusvaksiner tilfores topisk.i nesesvelgromraet i en effektiv doseerihet (d.v.s. minst 10 7EH>50 virus), idet nevnte tilforsel eventuelt gjentas hvis og når det er nddvendig.
For vaksinasjonsbruk holdes viruset fortrinnsvis i frysetorret form, og vaksinen tilo^sedes på bestilling ved tilsetning av enten vann eller et annet farmasøytisk fortynningsmiddel eller produkt som kan anvendes for fremstilling av neaepreparater, såsom dråper eller sproytepreparater. I vaksinen kan naturligvis inngå et stabiliserende middel, som f.eks. pepton, sukrose eller andre kjente stabilisatorer..
Ved en annen utforelsesform for oppfinnelsen kan den ved den -ovenfor beskrevne fremgangsmåte oppnådde influensa type B virus stamme forenes med influensa type A virus vaksiner som kan tilfores ad nasal vei.
Den,foreliggende oppfinnelse vedrorer således en fremgangsmåte for fremstilling av en levende in^luensavirus-vaksine for nasal tilfdrsel, hvor den virksomme bestanddel omfatter minst en effektiv mengde av en svekket influensatypé B virusstamme rekombinant, hvor man i et substrat, som er kjént for å akseptere vekst av influensattype B virus, f.eks. embryonerte h5nseegg eller oksefoster-nyrevevskultur og•fortrinnsvis befruktede honseeggs allantoinhulrora, rekombinerer en svekket og vaksinestamme av influensa type B virus, f-røks. influensa type B virus Brigit-stamme (ATCC VR786), med et influensa type B virusisolat, f.eks. B/fcK/5/72 (ATCC VR791) isolatet eller B/HK/8/73 (ATCC VR792) isolatet, ved seléktivttrykk isolerer en rekombinant, f.eks. Influensa type B virus R 22 stammen (ATCC VR788) eller R 75 stai-vuen (ATCC VR789) eller R 5 stammen (ATCC VR787), med minst en asr den svekkede moderstammes raerke-egenskaper, som ikke deles av den annen raoderstamme, og den annen moderstammes antigeniske sammensetning tillater nevnte rekombinant å utfelle seg i befruktede honseeggs allantoin-hulrom, og om onsket dertil tilsetter én stabilisator, f.eks. pepton eller sukrose, og frysé*6rrer blandingen.
De følgende eksempler illustrer den foreliggende oppfinnelse.
EKSEMPEL 1.
En prove av influensastammen B/Russland/69 (ATCC VR790) underkastes tre terminale fortynningsover for sier på spesifikke patogenfri egg til rensing. En prove fra den siste overførsel anvendes som basis for fremstillingen av en forsøksporsjon, som viser seg å vare fri for fugle- eller fj@rferepatogeniske mid&er, og folsomme overfor serumirihibitorer, og. sam fremviser restpatogenicitet overfor mennesker. «Forskjellige fortynninger 13 5 7 (d.v.s. 10"* , 10"* , 10" og 10*" ) av viruspodematerialet eller virusbasismaterialet i normalt saltvann blandes med forskjellige konsentrasjoner av sterilt normalt svineserum (ufortynnet, 25% og 5%), som på forhånd var holdt 15 minutter i et kokende vannbad, homogenisert og sentrifugert ved 2000 omdreininger pr. minutt i 30 minutter. Den overliggende væske anvendes til det ytterligere trinn, som består i å inkubere virus/serum-blandingene ved 37°C i 1 time for podning av 0,2 ml porsjoner av nevnte blanding i befruktede honseeggs allåntoænhulromå idet eggene på forhånd er inkubert i 8-11 dager ved 37°U og gjennom-lyst (kun overlevende egg podes).
Eggene inkuberes derpå ytterligere i et tidsrom fra 20-96 timer.
Etter avslutning av denne inkubasjonsperiode gjennomlyses eggene, og overlevende egg avkjøles til 4°C. Allantoinvaesken fra hver serie overlevende egg isoleres særskilt og avproves for nærvær av influensavirus ved hj^lp av hemagglutinasjonsmetoden. Det hostede virus dannet ved hjelp av podestoffet fra den høyesjte virusfortynning i nærvær av den høyeste serurakonsentrasjon, som viser hemagglutin«i4ajoasakti vi tet (d.v.s. virusf ortynning 106
og serurakonsentrasjon på 25%) anvendes til den annen overførsel gjennomført under de samme betingelser.
Det gjennomføres i alt 5 overførsler som beskrevet ovenfor.
Det etter 5 overfor sier hostede virus fremstilt ved hjelp av podestoffet fra den høyeste virusfortynning (d.v.s. IO"<6>) i nærvær av det ufortynnede serum, fremviste hemagglutinasjons-aktivitet og er motstandsdyktig overfor seruminhibitorer.
Tre ytterligere overførsler ved terminal fortynning gjennomføres i fravær av serum for å klone den oppnådde motstandsdyktige mutant og etterprøve stabiliteten aV motstandsdyktighetskarakteren. Det ved hver^av disse tre overførsler høstede virus er motstandsdyktig overfor normale seruminhibitorer. Viruset ved
den siste dverførselkonsentrasjon benevnt "Brigit" og deponert vedATCC under deponeringsnummeret VR 760 anvendes som podestoff ved fremstillingen av en viruspodnirx._, spor sjon. De høstede a3]antoénvæsker oppsamles derpå og forenes, sterilitet og sikkerhet bestemmes, hvoretter det blandésfmed peptosa til oppnåelse av en sluttkonsentrasjon på 5% pepton. 0,5 mi av virussuspensjonen fordeles i 3 ml prøveglass og frysetørres til oppnåelse av «Drigit-stammeporsjonen (ATCC VR786).
Egenskaper in vitro.;og vivojgor det modifiserte virus ( BrJgit- stammen).
1) Inhibi£ormotstandsdyktighet.
Por bestemmelse av motstandsdyktighet overfor de inhibitorer som finnes i normalt oppvarmet dyreserum (på forhånd oppvarmet til 75°C il time) ble serie-dobbeltfortynninger av de oppvarmede sera dannet med 4 hemagglutineringsenheter av moderstammen og det modifiserte virus. Etter 1 times inkubasjon ved rom- . temperatur ble rode blodceller fra høns tilsatt og resultatene notert. Resultatene viser en fullstendig motstandsdyktighet for podningsporsjonen og for forsøksporsjoner fremstilt ut fra denne podningsporsjon. I den foreliggende beskrivelse betegnes denne egenskap som "positiv".
2) Antigenicitet og fravær av bivirkninger.
En gruppe på 2 fritter ble podet nasalt med 10 7 - 10 8 EID50av Brigit-stammen (ATCC VR786). Dyrenes temperatur blé tatt daglig i 8 dagér.pd. Det ble ikke konstatert noen signifikafrt temperaturstigning (hoyeste temperatur 39,6°C). En annen gruppe
7 8'
på 2 fritter ble podet nasalt med 10 - 10 EID^q av B/Russlånd/69 modérstammen (ATCC VR790). To dager etter podingen hadde dyrene temperaturer på 40,2°C. Hemagglutinasjonsinhibisjoirsprdver godtgjorde at den modifiserte stamme induserte et antigenisk svar i frittenes 14 dager etter nasalpodingen var serumanti-/stoff-titerne meget hoyde blandt de podede dyr (titer: 1/256) i csotsetning til den upodede kontrollgruppe (titer: <^ 1/8).
3 ) _^Forholdet_EIDgg/j[AOs2 IDg- e-_(AOS_mer keegenskagl^
Det samme podestoff titreres på befruktede egg og på det såkalte "allantoic membrane on shell"-system (titrering på "allantoic membrane on shell" er beskrevet av S. Fazekas de St. Groth og. D. ?. White i J. Hyg. 56, 151-162, 1958). EID5Q/(AOS)ID50-forholdet for Brigit-stammen (ATCC VR 786) viste seg å væré ^10 '" f . I den foreliggende beskrivelse betegnes et forhold
y2 5
på 10 ' som "positivt".
4) Hemagglutinin-termosensitivitet.
Hemagglutinasjonsbestemmelse ble gjennomfort på infisert; allantoinvssske inkubert i 1 time ved 60°C. Etter en slik behandling føadde Brigit-stammen (ATCC VR786) fullstendig mistet sin hemagglutineringsegenskap. Denne termosensitivitet betegnes heri som "positiv". 5) lemagglutinasjonsprove_med rode blodceller fra sauer ved3J°C.
En hemagglutinasjonsprove ble gjennomfort ved rode blodceller fra sauer ved 4°C og 30°C. Hemagglutinasjonsmonsteret ved 4°C var normalt, mens det ved 30°C var en hurtig elusjon, slik at
i
det ikke ble iakttatt noen avgrenset hemagglutinasjon. Ved undersøkelse 20 timer etter forsøkets begynnelse var hemagglutina-sjonen fullstendig forsvunnet. Det ved egenskaper betegnes heri som "ustabil".
ÉKSEMBBL 2 .
En prove type B influensavirus-stamme B/HK/5/72 ATCCVR791),
hvis hemagglutinasjon er forskjellig fra Brigit-stammens
(ATCC VR786), podes i 10-11 dager gamle befruktede eggs ailantoin hulrom (podestoffs 0,2 ml/egg), og underkastes 3 overførsler for å oppnå en vesentlig virusmengde. Etter den tredje overførsels avslutning fås en Virussuspensjon hvis titer er 10 8EID50/ml. Porsjoner (0,2 ml) av den ufortynnede suspensjon podes i spesifikke patogenfri (SPF) befruktede eggs
ailantoin hulrom. Etter inkubasjon i 2 timer ved 33°C podes porsjoner (0,2 inl) av en suspensjon av Brigit-stamme (ATCC VR786) med en titer på 10 7 ' 5EID50/ml i de samme egg. Eggene inkuberes deretter i 16 timer ved 33°C og allantoinvæskene høstes »
Porsjoner (0,25 ml) av anti-Briglt-stamme serum type kaninserum, på forhånd oppvarmet til 56°C i 1 time, blandes med det samme : volum normalt serum. Porsjoner (0,25 ml) av denne serumblanding tilsettfes til de høstede allantoinvæsker. Denne blanding holdes derpå i 1 time ved 37°C. Embryonerte egg podes med 0,2 ml av den inkuberte blanding (2 egg til hver blanding) og inkuberes i 48 timer ved 33°C. Allantoinvæskene fra hvert podet egg høstes, overføres til befruktede egg (0,2 ml pr. egg) og inkuberes i
72 timer ved 33°C, idet det anvendes 2 egg til hver prøve. Etter 72 timers inkubasjonsperiode hostes de positive allantoin-vsesker og disse undersøkes på: - Hemagglutinasjon av røde blodceller fra sauer
- serotype modi anti-Brigit-serum og mot anti-B/i5K/5/72-serura.
- motstandsdyktighet overfor ikke-spesifikke seruminhibitorer
- vekst i egg og på & 0S°(allantoic on shell).
En av de således oppnådde virussuepensjoner, som angitt i den følgende tabell I, bar serotypen av en moderstamme (B/HK/5/72), og infeksjonsmønsteret i AOS-systemet og seruminhibitormerke-egenskapen av Brigit-stammen, tilskrives betegnelsen "R 22"
(ATCC VR788) og underkastes 2 overførsler på befruktede hønse-egg for å oppnå en vesentlig mengde R 22 rekombinantvirus, og den høstede allantoihvæske suppleres med pepton inntil en sluttkonsentrasjon på 5% og frystetørres.
EKSEMPEL 3.
Like stor.e volum av en suspensjon av influensavirus-stammen type B "Brigit" (ATCC VR786) og stammen B/Hong Kbng/8/73 (ATCC VR792)
7 5
(hvis titer hver er 10 ' EID50/ml) blandes og forinkuberes i 72 timer ved 4°C. Blandingen podes derpå i to SPF befruktede eggs ailantoin hulrom (0,2 ml prå egg). Etter en inkubasjonsperiode på 16 timer ved 33°C høstes allantoinvæskene og det foretas lydbehandling (30 sekunder).
-1 De høstede væsker i ufortynnet tilstand og fortynnet til 10 og 1Q~<2>får lov til å reagere i 1 time ved 37°C med forskjellige oppløsninger av anti-Brigit-stamme serotype kaninserum, forut
oppvarmet til 56°C i 30 minutter. De resulterende blandinger podes på "allantoic on shell"-system og inkuberes i 72 timer ved 37 C. Provene fira den siste positive virus for tynning (10"" )
ble nummerert 1 til 7.
Infeksjonstitere og nøytralisering ved hjelp, av anti-Brigit-serum
i AOS-systemet sammenlignes derpå for de 7 prøver og for de to moderstammer.
Prøvene, som ikke nøytraliseres ved hjelp av anti-Brigit-serum,
og som fremviser en (AOS)lDgQtiter, som er minst lik med Brig^t-stammens (ATCC VR786), høstes ved den høgeste positive fortynning.
Disse forskjellige porsjoner fortynnes til 10 og overføres en gang i SPF-egg.
Sn av disse virussuspensjoner, som viser serotypen og B/Hong Kbng/8/73-stammens hemagglutininterraosénsitivitet og Brigit-stammens EID50/(AOS)ID5Q-forhold, får betegnelsen "R 5" (ATCC VR787).
I den følgende tabell II er sammenfattet egenskapene av rekombinanten R 5, og det sammenlignes med egenskapene for Brigit (ATCC VR786) og B/aK/8/73 (ATCC VR792) moderstammene.
R 5-rekombinanten underkastes to begrensede fortynhin<g>soverførsler„'
(i SPF befruktede hønseegg) for å eliminere eventuelt fugle-eller fjærkre-adentivmiddel til sist og, ett ytterligere over-førsel for å oppnå en vesentlig mengde R 5 rek<p>mbinantvirus.
Den høstede allantoinvæske suppleres med pepton inntil en sluttkonsentrasjon på 5% og fry^etosresv
EKSEMPEL 4.
Med de frysetørrede materialer oppnådd i eksempel 1 (d.v.s.
Brigit-stammeiaATeO tfK786) som podestoffporsjon til vaksineproduksjon i stor målestokk gjennomføres en ytterligere overførsel i allantoinvæsken fra den annen gruppe befruktede hønseegg, som inkuberes ved 35°C i 3 dager.
Allantoinvæskene høstes, forenes, sterilitet og sikkerhet av-,
prøves, blandes med pepton som stabilisator for å oppnå en sluttkonåaniirasjon på 5% pepton og fordeles i 3 ral glass for å •7
oppnå en dosejrihgsenhet (d.v.s. minst 10 EID^) av virus.
Produktet frycétørres deretter- og glassene lukkes tett.
Denne ^overførselskonsantrasjon anvendes som vaksinecharge: Til vaksinetilførsel fortynnes innholdet i et glass ved å tilsette 0,5 ml vann eller saltvann eller en 5% sukroseopplosning og tilførselen skjer som dråper i neseborene.
Alternativt distribueres peptonpreparatet av allantoinvæskene i et større glass for å oppnå virusdoséringsenhetsmengden flere ganger til fremstilling av tilsvarende multi-dose-vaksine-preparåter..
Vaksinasjon med den svekkede type B ( Brigit- stamme) influensavirus.
Kliniske undersøkelser ble foretatt på 46 frivillige méd en
prevaksinasjon HI-titer feemagglutinasjonsinhibering) under eller tilsvarende 32 mot influensa B virus. Hver av de frivillige fikk to intranasaltilførsler med 8 eller 14 dagers mellomrom. Ved hver tilførsel fikk personene en viruskonsentrasjon på 10 7 '5 EIDcjq av Brigit-stammen (i hvert nesebor 5 dråper av den på
bestilling fremstilte vaksine i 5% sukroseoppløsning i vann). Seroomdanneise ble iakttatt hos 40 aV personene (d.v.s. 87%). Kun milde ]cliniske reaksjoner (d.v.s. snue eller tilstoppet nese i 1 eller 2 dager) ble konstatert. Ved undersøkelsene, hvor der var en kontrollgruppe, ble det ikke konstatert noen overførsel av influensavaksinevirus. Virusisolering ble forsøkt fra nese. og svelg-vattpinner» men prøvene forble neagative etter tj blindoverførsler i befruktede egg*
EKSEMPEL 5.
Med den frysetørrede R 22 stamme (ATCC VR788) oppnådd i eksempel 2 som podningsporsjon til vaksineproduksjon i stor . målestokk gjennomføres en ytterligere overførsel i allantoinvæsken av et ytterligere sett befruktede hønseegg, som inkuberes ved 35°C i 3 dager.
Allantoinvæskene hostes, forenes, sterilitet, og sikkerhet avprøves, blandes med.pepton som stabilisator for å oppnå en sluttkonsentrasjon på 5% pepton og fordelest 3 ral glass for å oppnå en doseringsenhet (d.v.s. minst 10 7 EID5Qvirus). Produktet frysetørres og glassene lukkes eller feålstoppes tett.
Dette overførselsnivå anvendes som va&åinecharge. Til vaksine-tilførsel tilberedes Innholdet av $ glass ved å tilsette 0,5 ml vann eller saltvann eller en 5% sukroseoppløsning og tilførselen skjer som dråper i.neseborene.
Alternativt distribueres peptonpreparatet med allantoinvæskene
i større glass for å oppnå virusdoseringsenhetsmengden flere ganger for fremstilling av tilsvarende raultidose-vaksine-preparater.
Vaksinasjon med den svekkede type B influensavaksine R 22 stamme.
Materiale_og metoder.
Seks frivillige med HI antistofftiter på under eller lik 32 ble valgt til forsøket. To personer ble uttatt til kontroll. De seks persoøer fikk med 11 til 14 dagers mellomrom 2 tilførsler av den på bestilling fremstilte vaksine R 22 stamme.- Til hver tilførsel fikk alle personer 5 dråper av vaksinen pr. nesebor-de)7'5EID5Q).
Blodprøver til antistoffbestemmelse ble tatt på vaksinasjons-dagen pg på tiende til fjortende dag etter den første podning og på deri fjortende dag etter den annen tilførsel. Keseyaskev-væsker til lokal antistoffbestemmelse ble uttatt den fjortende dag etter den annen podning.
Kliniske symtomer.
Det ble ikke konstatert symtomsr.
Virusisolering.
Heseprover ble samlet på dag 3 og 6 hos de seks personer. Alle prøver forble negative etter to blindoverførsler i befruktede egg.
Serologiske resultater og lokalantistoffer.
Fem av seks frivillige utviklet enten et serum eller nasalsvar eller begge deler
Resultatene er sammenfattet i den følgende tabell III.
EKSEMPEL 6..
Med det fryseteorredematerial oppnådd i eksempel 3 (R 5 stamme, ATCC VR787) som podestof f pors jon til produksjon av vaksine i stor målestokk ble en ytterligere overførsel gjennomfort i allantoinvæsken fra en annen porsjon befruktede hønseegg, som Inkuberes ved 35 o C i 3 dager.
Allantoinvæskene høstes> forenes, sterilitet og sikkerhet avprøves, blandes med pepton som stabilisator for å oppnå en sluttkonsentrasjon på 5% pepton og fordeles i 3 ml glass for å oppnå en doseringsenhet (d.v.s. minst 10 7EID5Q) av virus. Blandingen frysetørres deretter og glassene lukkes eller tilstoppes tett.
Dette overførselsnivå anvendes som vaksinecharge. Til vaksine-tilførsel fortynnes innholdet i et glass ved å tilsette 0,5 ml vann eller saltvann eller en 5% sukroseoppløsning, og tilførselen skjer som dråper i neseborene.
Alternativt distribueres allantoinvæske/peptonpreparatet i større glass for å oppnå virusdoseringsenhetsmengden flere rr<p>mrr ganger for fremstilling av tilsvarende multidosevaksine-preparater.
EKSEMPEL 7.
Doseringsenhet av den frysetorrede influensa type B virusvaksine (Brigit-stamme, ATCC VR786) fremstilt som angitt i eksempel 4 tilsettes en doseringsenhet levende svekket type A influensavirus (Alice-stamme, ATCC VR776) i 0,5 ml av en 5% sukrose-oppløsning i vann. Den således oppnådde kå valente vaksine tilfores som dråper i neseborene og tilførselen gjentas 14 dager senere.
De kliniske undersøkelser ble gjennomført på 22 frivillige personer med en prevaksinasjon HI (hemagglutinasjon Inhibering) titer på under eller lik 64 mot influensa A eller B virus. Hver frivillig fikk to nasal-til førsler (107'5 EID,.-, av Brigit-7 5 3u
stammen og 10 ' E^°5oav Alice-stammen) med 8.til 14 dagers mellomrom.
Seroomdannelse ble iakttatt hos 80% av personene mot influensa type A virus og 73% mot influensa type B virus.
Det ble kun iakttatt milde kliniske reaksjoner. Det ble ikke iakttatt overførsel av influensavaksinevirus.
EKSEMPEL 8.
Til en doseringsenhet (10 7 .' 5 EIDgQ) av den frysetorrede influensa B virusvaksine (R 22 stamme, ATCC VR788) fremstilt som angitt
i eksempel 5 tilsettes en doseringsenhet (10 7 ' 5 EID5Q) levende svekket type A influensavirus (Alice-stamme, ATCC VR776) i 0,5 ml av en 5% sukroseoppløsning.
Den således oppnådde bivalente vaksine xbilføres som dråper i neseborene og tilførselen gjentas 14 dager senane. Seroomdannelse for begge komponenter (type B og type A) iakttas 16 dager etter den annen tilførsel.
EKSEMPEL 9.
En prove av influensa type B virusstamme B/HK/5/72 (ATCC VR791), hvis hemagglutinasjon er forskjellig fra Brigit-stammens, podes i 10 til 11 dager gamle befruktede honseeggs allantoinhulrom (podéstoff: 0,2 ml/egg), og underkastes tre overførsler for å oppnå en vesentlig virusmengde. Etter den tredje overførsel oppnås en virussuspensjon, hvis titer er 10 8EID50/ml. Porsjoner (0,2 ml) av den ufortynnede suspensjon podes i SPF (spesifikke patbgenfri) befruktede eggsallantoinhulrom. Etter inkubasjon i 2 timer ved 33°C podes i de samme egg.porsjoner (0,2 ml) av en suspensjon av Brigit-stamme (oppnådd i eksempel 1) med en titer på 10 7 ' 5EID50/ml. Eggene inkuberes deretter i 16 timer ved 33°C, og ållantoinvaøkeae høstes. ■
PSrsjoner (0,25 ml) av anti-Brigit-starame serotype kaninserum forut oppvarmet i 1 time til 56°C blandes med porsjoner (0,25 ml) av den høstede allantoinvæske. Blandingen holdes deretter i 1 time ved 37°C. Spesifikke patogenfri befruktede egg podes med 0,2 ral av blandingen og inkuberes i 48 timer ved 33°C. Allantoinvæskene fra"hvert podet egg hostes, overføres i spesifikkepatogenfri befruktede egg (0,2 ml pr. egg) og inkuberes i 72 timer ved 33°C under anvendelse av to egg pr. prøve.
Etter de 72 timers inkubasjonsperiode høstes de positive allantoinvassker og det undersøkes pås
- hemagglutinasjon av røde blodceller fra sauer
- serotype mot anti-Brigit-serum og mot anti-B/HK/5/72 serum
- vekst i egg og på AOS (allantoic on shell).
En av de således oppnådde virussuspansjoner, som viser serotypen av B/HK/72 utgangsstammen og infeksjonsraønsteret for Brigit-utgangsstammeniiAOS-systemet, kalles R 75 (ATCC VR789).. Reliombinant R 75 underkastes to overførsler i spesifikke patogenfri befruktede hønseegg for oppnåelse av én vesentlig mengde R 75 rekombinant.
I den følgende tabell IV er rekorabinantens egenskaper sammenfattet og sammenlignet med Brigit- og B/HK/5/72-utgangsstammene.
EKSEMPEL 10.
De forenede allantoinvæslcer oppnådd i eksempel 9 sterilitet- og sikkerhets-prøves, blande<s med pepton som stabilisator for å oppnå en sluttkonsentrasjon på 5% pepton og fordeles i 3 ml glass for å oppnå en doseringsenhet (d.v.s. minst 10 EIDgQ) av virus. Blandingen frysetørres deretter og glassene lukkes eller tilstoppes tett.
Dette overførselsnivå anvendes som vaksinecharge. Til vaksine-tilførsel tilberedesj innholdet av ett glass ved å tilsettte . 0,5 ral vann eller saltvann eller en 5% sukroseoppløsning, og tilførselen skjer som dråper i neseborene.
Kliniske forsøk ble gjennomført med 24 frivillige personer. Hver frivillig person fikk med 11 til 14 dagers- mellomrom 2 nasaltilførsler av den på bestilling fremstilte vaksine R 75-stamme (ATCC VR789). Ved hver tilførsel fikk hver person en viruskonsentrasjon på 10 7 ' &EID^0 av den fremstilte vaksine i saltoppl6sning (5 dråper i hvert nesebor).
De serologiske resultater er sammenfattet i den folgende tabeil V. Serooradannelse (fire ganger forøkelse av HI titer) ble iakttatt hos 75% av personene, som viser en prevaksinal HI titer på 16.
EKSEMPEL 11.
Suspensjoner av influensa type B R 75 stammen (ATCC VR789) og av influensa type A "Alice" stammen (ATCC VR776) blandes, pepton tilsettes som stabilisator for å oppnå en sluttkonsentrasjon på 5% pepton, og blandiogen fordeles i 3 ml hetteglass for å få
minst $.0 7 EID5Q •av hvert virus. Blandingen frysetorres og
glassene lukkes eller tilstoppes tett. For vaksinetilforsel tilberedes innholdet av ett glass ved å tilsette 0,5 ml vann eller saltvann eller en 5% sukroseopplosning og tilførselen skjer som dråper i neseborene.
Claims (9)
1. Fremgangsmåte for fremstilling av en levende influensa virus-vaksine til nasal tilforsel og hvis virksomme bestanddel
-omfatter minst en effektiv mengde av en svekket influensa type B virus-stamme rekombinant, karakterisert ved at man i et substrat, som i teknikken er kjent for å akseptere vekst av influensa type B virus, rekombinerer eh svekket og vaksine-.
stamme av influensa type B virus med eia influensa type B virus
isolat og ved selektivt trykk isolerer en rékombinat med minst en av den svekkede moderstammes merkeegenskaper, som ikke deles av den annen moderstamme, og den annen moderstammes antigeniske sammensetning, idet man lar nevnte rekombinant utvikle seg i befruktede høn&eeggs ailantoin hulrom, hoster viruset og om
ønsket dertil tilsetter en stabilisator og frysetørre blandingen.
2. Fremgangsmåte som angitt i krav 1,
karakterisert ved at det som svekket eller seaksinestamme av influensa type B virus anvendes influensa type B virus Brigit-stammen (ATCC VR786).
3. Fremgangsmåte som angitt i krav 2,
karakterisert ved at rekombinasjonen gjennomføres i befruktede honseeggs ailantoin hulrom.
4. Fremgangsmåte som angitt i krav 3,
karakterisert ved at det som isolat anvendes B/HK/8/73 (ATCC VR792) isolatet og at det som rekombinant anvendes influensa type B virus R 5 stammen (ATCC VR 787).
5. Fremgangsmåte som angitt i krav 3,
karakterisert v e fl at det som isolat anvendes B/HK/5/72 (ATCC VR791) isolatet og at det som rekombinant anvendes influensa type B virus R 22 stammen (ATCC v ; VR788).
6. Fremgangsmåte som angitt i krav 3,
karaicteriser-t v -. <& d at det som isolat anvendes B/HK/5/72 (ATCC VR791) isolatet <p> g at .det som rekplribinant anvendes influensa type B virus R 75 stammen (A TCC VR789).
7. Fremgangsmåte som angitt i krav 1-6,
karakterisert ved at det som
stabilisator anvendes pepton eller sukker. "
8. Fremgangsmåte som angitt i krav 1-7,
karakterisert ved at den aktive bestanddel også omfatter en effektiv mengde av en svekket influensa type A virusvaksine, som tilsettes etterhhosting av influensa type B virus rekorabinanten.
9. Fremgangsmåte som angitt i krav 8,
karakterisert ved at den svekkede influensa type A virus er influensa type A virus Alice-stammen (ATCC VR776).
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US43917674A | 1974-02-04 | 1974-02-04 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO750295L true NO750295L (no) | 1975-09-01 |
Family
ID=23743623
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO750295A NO750295L (no) | 1974-02-04 | 1975-01-30 |
Country Status (21)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS50107122A (no) |
AT (1) | AT338416B (no) |
BE (1) | BE824970A (no) |
CA (1) | CA1047922A (no) |
CH (1) | CH596316A5 (no) |
CS (1) | CS202545B2 (no) |
DD (1) | DD116474A5 (no) |
DE (1) | DE2504373A1 (no) |
DK (1) | DK141926B (no) |
ES (1) | ES434384A1 (no) |
FI (1) | FI750260A (no) |
FR (1) | FR2259616B1 (no) |
GB (1) | GB1439742A (no) |
HU (1) | HU170522B (no) |
IE (1) | IE42043B1 (no) |
IL (1) | IL46446A (no) |
LU (1) | LU71784A1 (no) |
NL (1) | NL7501028A (no) |
NO (1) | NO750295L (no) |
SE (1) | SE424503B (no) |
ZA (1) | ZA75248B (no) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2588918A (en) * | 1947-11-07 | 1952-03-11 | William T Graham | Mechanism for raising and lowering plow frames relative to the ground wheels |
JPS6042209B2 (ja) * | 1974-05-31 | 1985-09-20 | 北里研究所(社団法人) | インフルエンザウイルスの新鮮分離株を発育鶏卵へ短期間で順化させる方法 |
-
1975
- 1975-01-14 ZA ZA00750248A patent/ZA75248B/xx unknown
- 1975-01-16 DK DK9775AA patent/DK141926B/da not_active IP Right Cessation
- 1975-01-16 IL IL46446A patent/IL46446A/xx unknown
- 1975-01-20 SE SE7500549A patent/SE424503B/xx unknown
- 1975-01-23 CA CA218,508A patent/CA1047922A/en not_active Expired
- 1975-01-24 FR FR7502331A patent/FR2259616B1/fr not_active Expired
- 1975-01-27 IE IE160/75A patent/IE42043B1/en unknown
- 1975-01-29 NL NL7501028A patent/NL7501028A/xx not_active Application Discontinuation
- 1975-01-30 NO NO750295A patent/NO750295L/no unknown
- 1975-01-30 BE BE152864A patent/BE824970A/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-01-31 FI FI750260A patent/FI750260A/fi not_active Application Discontinuation
- 1975-02-01 ES ES434384A patent/ES434384A1/es not_active Expired
- 1975-02-03 JP JP50014790A patent/JPS50107122A/ja active Pending
- 1975-02-03 AT AT76675A patent/AT338416B/de not_active IP Right Cessation
- 1975-02-03 DE DE19752504373 patent/DE2504373A1/de not_active Withdrawn
- 1975-02-03 CS CS75669A patent/CS202545B2/cs unknown
- 1975-02-03 CH CH124275A patent/CH596316A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-02-03 HU HUTE805A patent/HU170522B/hu unknown
- 1975-02-03 LU LU71784A patent/LU71784A1/xx unknown
- 1975-02-03 GB GB453575A patent/GB1439742A/en not_active Expired
- 1975-02-03 DD DD183973A patent/DD116474A5/xx unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
IE42043L (en) | 1975-08-04 |
IE42043B1 (en) | 1980-05-21 |
ATA76675A (de) | 1976-12-15 |
ES434384A1 (es) | 1976-12-01 |
BE824970A (fr) | 1975-07-30 |
CH596316A5 (no) | 1978-03-15 |
DK141926C (no) | 1981-01-19 |
SE7500549L (no) | 1975-08-05 |
SE424503B (sv) | 1982-07-26 |
AT338416B (de) | 1977-08-25 |
LU71784A1 (no) | 1975-06-24 |
IL46446A0 (en) | 1975-04-25 |
ZA75248B (en) | 1976-01-28 |
DK9775A (no) | 1975-09-29 |
FI750260A (no) | 1975-08-05 |
FR2259616A1 (no) | 1975-08-29 |
CS202545B2 (en) | 1981-01-30 |
CA1047922A (en) | 1979-02-06 |
DD116474A5 (no) | 1975-11-20 |
FR2259616B1 (no) | 1980-01-04 |
DK141926B (da) | 1980-07-21 |
HU170522B (no) | 1977-06-28 |
AU7734675A (en) | 1976-07-15 |
DE2504373A1 (de) | 1975-08-07 |
JPS50107122A (no) | 1975-08-23 |
NL7501028A (nl) | 1975-08-06 |
GB1439742A (en) | 1976-06-16 |
IL46446A (en) | 1978-01-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Saito et al. | Characterization of a human H9N2 influenza virus isolated in Hong Kong | |
AU770923B2 (en) | Inactivated influenza virus vaccine for nasal or oral administration | |
Ruben et al. | A new subunit influenza vaccine: acceptability compared with standard vaccines and effect of dose on antigenicity | |
Kendal | Cold-adapted live attenuated influenza vaccines developed in Russia: can they contribute to meeting the needs for influenza control in other countries? | |
PERKINS et al. | Evidence for protective effect of an inactivated rhinovirus vaccine administered by the nasal route | |
US4552758A (en) | Human use of avian-human reassortants as vaccines for influenza A virus | |
US4009258A (en) | Influenza vaccine containing a recombinant, antigenically hybridized virus and method of using the same | |
US4338296A (en) | Influenza virus and process of producing a vaccine therefrom | |
US5162112A (en) | Influenza vaccine | |
Gorse et al. | Superiority of live attenuated compared with inactivated influenza A virus vaccines in older, chronically III adults | |
Mostow et al. | Studies on inactivated influenza vaccines: II. Effect of increasing dosage on antibody response and adverse reactions in man | |
Kilbourne et al. | Influenza vaccines: Summary of influenza workshop V | |
US4318903A (en) | Live influenza virus vaccine and the preparation thereof | |
WO1992000097A1 (en) | Method of using cold-adapted live influenza virus vaccine as an antiviral agent against influenza | |
US20130315951A1 (en) | Compositions and methods for stimulating an immune response against infectious agents | |
US3953592A (en) | Live influenza virus vaccines and preparation thereof | |
US3961046A (en) | Mumps vaccine and preparation thereof | |
Rimmelzwaan et al. | Influenza virus subtype cross-reactivities of haemagglutination inhibiting and virus neutralising serum antibodies induced by infection or vaccination with an ISCOM-based vaccine | |
Butterworth et al. | Replication of rhinoviruses | |
US3962423A (en) | Live influenza type B virus vaccines and preparation thereof | |
Romanova et al. | Interference between cold-adapted (ca) influenza A and B vaccine reassortants or between ca reassortants and wild-type strains in eggs and mice | |
NO750295L (no) | ||
Morris et al. | Antigenic relationship of 1961–1963 A2 influenza viruses to prototype A2 1957 strain | |
CN111481663B (zh) | 一种流感病毒活疫苗及其制备方法 | |
Clements et al. | Comparison of the virologic and immunologic responses of volunteers to live avian-human influenza A H3N2 reassortant virus vaccines derived from two different avian influenza virus donors |