NO331772B1 - Veterinaermedisinsk anvendelse av et pleuromutilinderivat - Google Patents

Description

Foreliggende søknad er avdelt fra norsk patentsøknad nr. 19986198.

Oppfinnelsen omhandler pleuromutilinderivater. Den angår den veterinærmedisinske anvendelsen av forbindelsen med formel I

dvs. 14-0-[l-[(R)-2-amino-3-metylbutyrylamino]-2-metylpropan-2-yltioacetyl]mutilin i form av den frie basen eller i veterinærmedisinsk akseptabel saltform, for fremstilling av et medikament for behandling av en veterinærmedisinsk sykdom som er assosiert med infeksjon med Pasteurella multocida.

Forbindelsen med formel I i form av fri base eller i form av et veterinærmedisinsk akseptabelt salt "Econor" blir i det følgende kort beskrevet som "midlet i oppfinnelsen". Foretrukket er saltformen, spesielt i form av et hydrokloridsalt. I denne formen er det kjent under det generiske navnet valnemulinhydroklorid.

Termen "behandling" skal forstås som anvendelse ved profylaktisk så vel som kurativ behandling.

Forbindelsen med formel I i form av fri base eller i form av kjemoterapeutisk- eller veterinært akseptabelt salt er kjent fra f.eks. EP 153 277 og tilsvarende, f.eks. USP 4 675 330, spesielt eksempel 12 deri.

Kjent derfra er videre,

- en inhiberende effekt ovenfor forskjellige bakterier in vitro, ved konsentrasjoner på ca. 0,008 til 25 ug/ml; - en inhiberende effekt in vitro ovenfor mykoplasmaer og klamydia generelt, ved konsentrasjoner på ca. 0,008 til 0,5 ug/ml; - en inhiberende effekt in vivo hos mus, ved bruk av forskjellige bakteriestammer, og på høner, ved bruk av mykoplasmastammer, ved en dosering på ca. 12 til 50 mg/kg kroppsvekt; - en antiparasitteffekt, spesielt in vivo ovenfor coccidia hos fjærkre, ved doseringer på 20-150 mg/kg av foret; og - vekstfremmende effekter hos høner og griser in vivo, ved doseringer på 10-50 mg/kg av for, og som således gjør forbindelsen brukbar som et antibakterielt aktivt antibiotika generelt, og som et veterinærmedisinsk middel, spesielt ved den kjemoterapeutiske behandlingen av coccodioser hos fjærkre så vel som en vekstfremmer hos høne og gris.

Overraskende har det nå blitt funnet at midlet som oppnås ved oppfinnelsen er spesielt effektivt ved behandling av veterinærsykdommer som gir seg forsterket uttrykk når buskapstettheten øker, slik som sekundær pneumonia hos svin i forbindelse med Pasteurella multocida.

Videre har det blitt funnet, enda mer overraskende, at induksjon av motstand ovenfor legemidlet er ekstremt lav.

Oppfinnelsen angår på denne måten den veterinærmedisinske anvendelsen som definert ovenfor.

Den angår også bruken av midlet ifølge oppfinnelsen til fremstilling av et medikament for bruk ved behandling av veterinærmedisinske sykdommer som gir seg forsterket uttrykk når buskapstettheten øker.

Den kan videre finne anvendelse i forbindelse med en fremgangsmåte for behandling av veterinærmedisinske sykdommer som gir seg forsterket uttrykk når buskapstettheten øker, innbefattende administrering av en terapeutisk effektiv mengde av midlet til et dyr som trenger slik behandling.

Ifølge oppfinnelsen kan det følgelig oppnås et veterinærmedisinsk middel for bruk ved behandling av veterinærmedisinske sykdommer som gir seg forsterket uttrykk når buskapstettheten øker, innbefattende forbindelsen med formelen I i form av fri base eller i form av et veterinærmedisinsk akseptabelt salt, sammen med i det minste en veterinærmedisinsk akseptabel bærer eller fortynningsmiddel.

Oppfinnelsen angår videre en fremgangsmåte for fremstilling av et medikament for behandling av en veterinærmedisinsk sykdom i dyr innbefattende sekundære infeksjoner grunnet forøket buskapsdensitet hvor den veterinærmedisinske sykdommen er assosiert med infeksjon ved Pasteurella multocida, hvor fremgangsmåten omfatter kombinasjon av en terapeutisk effektiv mengde av forbindelsen av formel I i fri form eller i en veterinærmedisinsk akseptabel form sammen med minst en veterinærmedisinsk akseptabel bærer eller et fortynningsmiddel.

Dyret som lider av veterinærmedisinske sykdommer som gir seg forsterket uttrykk når buskapstettheten øker, kan f.eks. ikke allerede være behandlet antibakterielt med midlet som fremstilles ved oppfinnelsen eller ikke allerede ha mottatt midlet for vekstfremming.

SEKUNDÆR INFEKSJON MED PASTEURELLA MULTOCIDA:

Sekundær infeksjon med Pasteurella multocida kan bli diagnostisert ved hjelp av vanlige fremgangsmåter, som f.eks. slik det er beskrevet i veterinærmedisinske lærebøker, slik som Taylor, D.J. i "Pigs Diseases", 6. utg. (1995), publ. D.J. Taylor, Glasgow, U.K. på s. 185-187; 188-194; og 194-197. Den fordelaktige effekten av midlet ifølge oppfinnelsen til dette bruket er bestemt f.eks. på følgende måte: Den minimale hemningskonsentrasjonen (MIC) av valnemulinhydroklorid ovenfor ferske isolater av Pasteurella multocida som stammer fra respirasjonsmateriale hos gris ble bestemt og sammenlignet med tiamulin. Kulturer av bakterielle isolater innbefattende 10 P. multocida ble brukt, isolert i løpet av de siste 5 årene etter at griser ble rammet av sykdom bestemt ved post-mortem undersøkelser. Tre av Pasteurella-isolatene var toksigene stammer av Pasteurella multocida. Angående P. multocida ble det på samme dag som testing inokulert en enkel "loopful" av hver av de rene kulturene i 10 ml av næringskraft nr. 2 (Unipath CM67) inneholdende 1% donorkalveserum. Hver av de fremstilte kraftkulturene ble inkubert i 18 timer ved 37°C i 10% CO2. Etter inkubering og på samme dag som testing ble de 23 kraftkulturene justert ned til IO5-IO6 organismer pr. ml i sterile fysiologiske saltoppløsninger for fremstilling for inokulering av MIC-dyrkningsmediet. For hver testforbindelse ble også standard kontrollkulturer av typen Oxford Staphylococcus aureus NCTC 6571 satt opp for å bekrefte gyldigheten av resultatene av MIC-testene. I hvert tilfelle ble kraftkulturer satt opp fra kontroll-organismene identisk med organismene som ble testet. Valnemulin er et hydroklorid, tiamulin ble brukt som hydrogenfumaratet. På dagene med testing ble det fremstilt forrådsløsninger av testforbindelsene inneholdende 3,2 mg/ml av aktiv ingrediens i sterilt destillert vann. Ni doble fortynninger ble videre fremstilt i sterilt destillert vann for å gi et område for hvert antibiotikum fra 320 ug ned til 1,25 ug pr. ml for innarbeidelse i MIC-mediet. Sensibilisert agar (Oxoid CM409) inneholdende lysert hesteblod (Oxoid SR50) ble fremstilt i henhold til produsentens anbefalinger og justert til pH 7,4, hvis nødvendig. 18 ml av smelteagar (50°C) ble blandet med 2 ml (fortynnet en til ti) av hver av de fremstilte fortynningene av testforbindelse i 90 mm Petri-skåler. Fire replikatorplater ble fremstilt for hver fortynning. For MIC-test ble også fire replikatorplater inneholdende 18 ml agar og 2 ml sterilt destillert vann fremstilt for å fungere som vekstindikatorer.

De tørkede MIC-platene ble inokulert med 0,2 ul av de fremstilte testorganismene, testorganismene blir inkubert med P. multocida i luft ved 37°C i 18 timer. Etter inokulering blir veksten av organismene undersøkt først med øye og deretter med mikroskopisk undersøkelse på et stereozoommikroskop. MIC-verdiene tas fira de laveste konsentrasjonene av testforbindelse hvorved det ikke kan observeres vekst ved punktet for inokulasjon på alle fire platene ved hjelp av mikroskopisk undersøkelse.

Resultatene oppnådd er de som fremgår fra tabell 10:

Fra dette fremkommer det at valnemulin sammenlignet med tiamulin hadde gjennomsnittlige to og en halv ganger økning i aktivitet overfor P. multocida.

Midlet ifølge oppfinnelsen er derfor nyttig i terapien av sekundær pneumonia hos svin tilknyttet Pasteurella multocida. For denne bruken vil den effektive dosen selvfølgelig variere avhengig av det spesielle saltet som anvendes, administrasjonsmåten, størrelsen og alderen på dyret og den ønskede effekt; f.eks. for profylaktisk behandling vil relativt lave doser bli administrert over en lang tidsperiode. Imidlertid vil det generelt oppnås tilfredsstillende resultater når midlet blir administrert i en daglig dose fra ca. 5 mg/kg til ca. 15 mg/kg dyrekroppsvekt, passende gitt ad libitium i vann eller for, eller i oppdelte doser to eller fire ganger daglig, eller i vedvarende avgivelsesform. For de fleste dyr er den totale daglige dose fra ca. 100 mg til ca. 1000 mg, foretrukket fra c. 100 mg til ca. 500 mg, gitt en eller to ganger daglig.

Det kan med fordel bli administrert som eneste behandling.

Foretrukne doser i drikkevann er fra 0,01 til 0,05% volumvekt, særlig 0,01 til 0,025%, og i for fira 100 til 400 ppm (g/metrisk tonn), særlig 100 til 200 ppm.

Midlet ifølge oppfinnelsen kan bli administrert oralt, lokalt eller parentalt og innblandet vanlige kjemoterapeutisk akseptable fortynningsmidler og bærere og, hvis ønskelig, andre tilsetninger og administrert i form av tabletter, kapsler eller injiserbare sammensetninger. Det danner også et svært godt additiv for forblandinger (som forblanding) eller for drikkevann.

Foretrukne veterinærmedisinsk akseptable bærere inkluderer f.eks. vanlig brukte farmasøytiske tilsetningsstoffer slik som sukker, maisstivelse, laktose, cellulose så vel som kornbæresystemer og kornbiprodukter slik som malte risbelger, annensorterings hvete og soyamel; videre faste tilsetningsstoffer som malt kalksten, natriumsulfat, kalsiumkarbonat og kaolin, eller flytende substanser som veterinærmedisinsk akseptable oljer (vegetabilske oljer eller mineralsk olje), propylenglykol og polyetylenglykol. Passende administrering til dyret av disse sammensetningene er oralt, foretrukket blandet i for i form av medisinert måltidsfor eller medisinerte pellets.

For anvendelse i drikkevann blir det brukt oppløsninger i vann med eller uten løsemiddel slik som etanol, propylenglykol, polyetylenglykol, godkjente flytende surfaktanter og sorbitol.

For f.eks. intramuskulær injeksjon blir sammensetningen typisk fremstilt som en løsning i vann som kan inneholde løsemidler slik som etanol eller propylenglykol, eller i en veterinærmedisinsk akseptabel olje. Eksempler på akseptable oljer er sesamolje, triglycerider med middels kjedelengde (f.eks. Miglyol), isopropylmyristat og etyloleat. Formuleringen kan inneholde konserveringsmidler, buffere og andre vanlige innholdsstoffer.

Veterinærmedisinske formuleringer for bruk i forbindelse med den foreliggende oppfinnelsen kan bli fremstilt ved blanding av ingrediensene i de angitte andelene. Formuleringen blir deretter pakket i en passende beholder ferdig til administrering.

Det følgende eksempelet illustrerer oppfinnelsen:

Midlet ifølge oppfinnelsen er godt tolerert. Den akutte toksisiteten hos for eksempel rotter av forbindelsen med formel I i form av hydrokloridsalt ble bestemt med enkle doser på 1000 mg/kg og 2000 mg/kg oralt administrert til 5 hann- og 5 hunnrotter pr. dosegruppe. Død inntraff innen 1-8 dager. Den oppnådde LD5o-verdien er > 1000 mg/kg p.o.

Claims (6)

1. Anvendelse av forbindelse av formel I

i form av den frie basen eller i veterinærmedisinsk akseptabel saltform for fremstilling av et medikament for behandling av en veterinærmedisinsk sykdom som er assosiert med infeksjon med Pasteurella multocida.

2. Anvendelse ifølge krav 1, hvor forbindelsen av formel I administreres til svin som har behov for slik behandling.

3. Anvendelse ifølge krav 1, hvor forbindelsen av formel I anvendes sammen med minst én veterinærmedisinsk akseptabel bærer eller fortynningsmiddel.

4. Anvendelse ifølge krav 1, hvor forbindelsen av formel I anvendes i form av den frie basen eller i veterinærmedisinsk akseptabel saltform for fremstilling av et medikament for svin for behandling av sekundær pneumoni i svin assosiert med Pasteurella multocida infeksjon.

5. Anvendelse ifølge krav 1, hvor forbindelsen av formel I anvendes i form av hydrokloridsyreaddisjonssalt.

6. Fremgangsmåte for fremstilling av et medikament for behandling av en veterinærmedisinsk sykdom i dyr innbefattende sekundære infeksjoner grunnet forøket buskapsdensitet hvor den veterinærmedisinske sykdommen er assosiert med infeksjon ved Pasteurella multocida, hvor fremgangsmåten omfatter kombinasjon av en terapeutisk effektiv mengde av forbindelsen av formel I

i form av den frie basen eller i en veterinærmedisinsk akseptabel form sammen med minst én veterinærmedisinsk akseptabel bærer eller fortynningsmiddel.