NO317420B1

NO317420B1 - Acylguanidine derivatives as inhibitors of bone resorption and as vitronectin receptor antagonists

Info

Publication number: NO317420B1
Application number: NO20003118A
Authority: NO
Inventors: Anuschirwan Peyman; Gerhard Breipohl; Jochen Knolle; Robert Mcdowell; Jean-Francois Gourvest; Robert Andrew Cuthbertson; Napoleane Ferrara; Denis Carniato; Thomas Richard Gadek; Sarah Catherine Bodary; Karl-Heinz Scheunemann
Original assignee: Aventis Pharma Gmbh; Genentech Inc
Priority date: 1997-12-19
Filing date: 2000-06-16
Publication date: 2004-10-25
Also published as: KR20010033281A; SI1042301T1; DE69809594T2; ZA9811571B; AR016437A1; US6492356B1; PT1042301E; CN1284950A; NO20003118D0; TR200001964T2; ATE228112T1; ID26248A; HRP20000412A2; CU23032A3; CN1205191C; IL136858A0; AU2270099A; MY122269A; BG104544A; HUP0104912A1

Description

Den foreliggende oppfinnelse angår acylguanidinderivater med den generelle formel I: The present invention relates to acylguanidine derivatives of the general formula I:

hvor R<1>, R<2>, R<4>, R<5>, R<6>, A, m og n har de nedenfor angitte betydninger, og deres fysiologisk tolererbare salter. Forbindelsene med formel I er verdifulle farmasøytisk aktive forbindelser. De er vitronektinreseptorantagonister og inhibitorer av benresorpsjon av osteoklaster og er for eksempel egnede for terapi og profylakse av sykdommer som, i det minste delvis, forårsakes av en uønsket grad av benresorpsjon, for eksempel osteoporose. Opprinnelsen angår videre en fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser med formel I, deres anvendelse, spesielt som farmasøytisk aktive ingredienser, og farmasøytiske preparater omfattende disse. where R<1>, R<2>, R<4>, R<5>, R<6>, A, m and n have the meanings given below, and their physiologically tolerable salts. The compounds of formula I are valuable pharmaceutically active compounds. They are vitronectin receptor antagonists and inhibitors of bone resorption by osteoclasts and are, for example, suitable for the therapy and prophylaxis of diseases caused, at least in part, by an undesirable degree of bone resorption, for example osteoporosis. The invention further relates to a method for the preparation of compounds of formula I, their use, in particular as pharmaceutically active ingredients, and pharmaceutical preparations comprising these.

Human bensubstans utsettes for en konstant dynamisk renovasjonsprosess som omfatter benresorpsjon og bendannelse. Disse prosesser kontrolleres av celletyper som er spesialisert for disse forhold. Benresorpsjon er basert på nedbrytning av benmatriks av osteoklaster. Majoriteten av bensykdommer er basert på en forstyrret likevekt mellom bendannelse og benresorpsjon. Osteoporose er en sykdom som er kjennetegnet ved lav benmasse og økt benskjørhet som resulterer i en økt risiko for brudd. Den resulterer fra en svikt i ny bendannelse i forhold til benresorpsjon under den pågående remodelleringsprosess. Konvensjonell osteoporosebehandling inkluderer for eksempel administrering av bifosfonater, østrogener, østrogen/progesteron (hormonerstatnings-terapi) eller HRT), østrogenagonister/antagonister (selektive østrogen reseptormodula-torer eller SERM), kalsitonin, vitamin D-analoger, paratyreoidhormon, veksthormon-utskillende midler eller natriumfJuorid (Jardine et al., Annual Reports in Medicinal Chemistry 1996,31,211). Human bone substance is exposed to a constant dynamic renovation process that includes bone resorption and bone formation. These processes are controlled by cell types that are specialized for these conditions. Bone resorption is based on the breakdown of bone matrix by osteoclasts. The majority of bone diseases are based on a disturbed balance between bone formation and bone resorption. Osteoporosis is a disease characterized by low bone mass and increased bone fragility, which results in an increased risk of fracture. It results from a failure in new bone formation in relation to bone resorption during the ongoing remodeling process. Conventional osteoporosis treatment includes, for example, the administration of bisphosphonates, estrogens, estrogen/progesterone (hormone replacement therapy) or HRT), estrogen agonists/antagonists (selective estrogen receptor modulators or SERMs), calcitonin, vitamin D analogues, parathyroid hormone, growth hormone secreting agents or sodium fluoride (Jardine et al., Annual Reports in Medicinal Chemistry 1996,31,211).

Aktiverte osteoklaster er polynukleære celler med en diameter på opptil Activated osteoclasts are polynuclear cells with a diameter of up to

400 um som fjerner benmatriks. Aktiverte osteoklasters blir bundet til overflaten av benmatriks og utskiller proteolytiske enzymer og syrer inn i den såkalte "forseglings-sone", området mellom deres cellemembran og benmatriks. Det sure miljø og pro-teasene forårsaker nedbrytningen av bensubstansen. Forbindelsene med formel I inhiberer benresorpsjon av osteoklaster. 400 um which removes bone matrix. Activated osteoclasts become bound to the surface of bone matrix and secrete proteolytic enzymes and acids into the so-called "sealing zone", the area between their cell membrane and bone matrix. The acidic environment and the proteases cause the breakdown of the bone substance. The compounds of formula I inhibit bone resorption by osteoclasts.

Undersøkelser har vist at bindingen av osteoklaster til bensubstans kontrolleres av integrinreseptorer på celleoverflaten av osteoklaster. Integriner er en superfamilie av reseptorer som inkluderer, inter alia, fibrinogenreseptoren ctnbp3 på blodplatene og vitronektinreseptoren 0^3. Vitronektinreseptoren ctvP3 er et membran-glykoprotein som uttrykkes på celleoverflaten av et antall celler, slik som endotel-celler, celler i den vaskulære, glatte muskulatur, osteoklaster og tumorceller. Vitronektinreseptoren ctvP3, som uttrykkes på osteoklastmembranen, kontrollerer prosessen med binding til bensubstansen og benresorpsjon og bidrar således til osteoporose. ctvp3 bindes i dette tilfellet til benmatriksproteiner, slik som osteopontin, ben-sialoprotein og trombospontin som inneholder tripeptidmotivet Arg-Gly-Asp (eller RGD). Studies have shown that the binding of osteoclasts to bone substance is controlled by integrin receptors on the cell surface of osteoclasts. Integrins are a superfamily of receptors that include, inter alia, the platelet fibrinogen receptor ctnbp3 and the vitronectin receptor 0^3. The vitronectin receptor ctvP3 is a membrane glycoprotein that is expressed on the cell surface of a number of cells, such as endothelial cells, cells in the vascular smooth muscle, osteoclasts and tumor cells. The vitronectin receptor ctvP3, which is expressed on the osteoclast membrane, controls the process of binding to the bone substance and bone resorption and thus contributes to osteoporosis. In this case, ctvp3 binds to bone matrix proteins, such as osteopontin, bone sialoprotein and thrombospontin, which contain the tripeptide motif Arg-Gly-Asp (or RGD).

Horton og medarbeidere beskriver RGD-peptider og et anti-vitronektin-reseptor-antistoff (23C6) som inhiberer tanndestruksjon av osteoklaster og migrasjon av osteoklaster (Horton et al., Exp. Cell. Res. 1991,195, 368) J. Cell Biol. 1990, 111,1713, Sato et al. beskriver echistatin, et RGD-peptid fra slangevenom, som en potent inhibitor av benresorpsjon i en vevskultur, og som en inhibitor av osteoklast-adhesjon til benene. Fisher et al. (Endocrinology 1993,132,1411) var i stand til å vise i rotter at echistatin også inhiberer benresorpsjon in vivo. Horton et al. describe RGD peptides and an anti-vitronectin receptor antibody (23C6) that inhibit osteoclast tooth destruction and osteoclast migration (Horton et al., Exp. Cell. Res. 1991, 195, 368) J. Cell Biol . 1990, 111, 1713, Sato et al. describe echistatin, an RGD peptide from snake venom, as a potent inhibitor of bone resorption in a tissue culture, and as an inhibitor of osteoclast adhesion to bone. Fisher et al. (Endocrinology 1993,132,1411) were able to show in rats that echistatin also inhibits bone resorption in vivo.

Det ble videre vist at vitronektinreseptoren 0^3 på humane celler i den vaskulære, glatte muskulatur i aorta stimulerer migrasjonen av disse celler inn i neointima som til sist fører til arterioskleose og restenose etter angioplasti (Brown et al., Cardio-vascular Res. 1994, 28, 1815) Yue et al. (Pharmacology Rewiews and Communi-cations 1998, 10, 9 - 18) viste inhibering av neointimadannelse ved anvendelse av en avpy antagonist. It was further shown that the vitronectin receptor 0^3 on human cells in the vascular smooth muscle of the aorta stimulates the migration of these cells into the neointima which ultimately leads to arteriosclerosis and restenosis after angioplasty (Brown et al., Cardio-vascular Res. 1994 , 28, 1815) Yue et al. (Pharmacology Reviews and Communications 1998, 10, 9 - 18) showed inhibition of neointima formation using an avpy antagonist.

Brooks et al. (Cell 1994, 79,1157) viste at antistoffer mot ctv<p>3 eller avp3-antagonister kan forårsake en krymping av tumorer ved å indusere apoptose av blod-karceller under angiogenese. Vitronektinreseptoren avp3 er også involvert i progre-sjonen av forskjellige andre typer av cancer og er overuttrykt i maligne melanomceller (Engleman et al., Annual Reports in medicinal Chemistry 1996, 31, 191). Melan-omenes invasjon korrelerte med denne overekspresjon (Stracke et al., Clinical Science 1996,91, 639) Carron et al (Cancer Res. 1998, 58,1930) beskriver inhibering av tumorvekst og inhibering av ondartet hyperkalsemi ved anvendelse av en avp3-antagonist. Brooks et al. (Cell 1994, 79,1157) showed that antibodies against ctv<p>3 or avp3 antagonists can cause a shrinkage of tumors by inducing apoptosis of blood vessel cells during angiogenesis. The vitronectin receptor avp3 is also involved in the progression of various other types of cancer and is overexpressed in malignant melanoma cells (Engleman et al., Annual Reports in medicinal Chemistry 1996, 31, 191). Melanoma invasion correlated with this overexpression (Stracke et al., Clinical Science 1996,91, 639) Carron et al (Cancer Res. 1998, 58,1930) describe inhibition of tumor growth and inhibition of malignant hypercalcemia using an avp3- antagonist.

Chreresh et al. (Science 1995,270,1500) beskriver anti-avP3-antistoffer eller avp3-antagonister som inhiberer de bFGF-induserte angiogeneseprosesser i rotteøye, en egenskap som kan anvendes terapeutisk ved behandling av retinopatier. Chreresh et al. (Science 1995,270,1500) describes anti-avP3 antibodies or avp3 antagonists which inhibit the bFGF-induced angiogenesis processes in the rat eye, a property that can be used therapeutically in the treatment of retinopathies.

Påvirkning av vitronektinreseptoren eller av interaksjonene som den er involvert i gir således mulighet til å påvirke forskjellige sykdomstilstander for hvilke det for terapi og profylakse fortsetter å eksistere et behov for egnede farmasøytisk aktive ingredienser. Patentsøknad WO-A-94/12181 beskriver substituerte aromatiske ringsystemer, og WO-A-94/08577 beskriver substituerte heterosykliske forbindelser som fibrinogenreseptorantagonister og inhibitorer av blodplateaggregering. EP-A-528 586 og EP-A-528 587 beskriver aminoalkylsubstituerte eller heterosyklylsubstituerte fenylalaninderivater. WO-A-95/32710 beskriver arylderivater som inhibitorer av benresorpsjon av osteoklaster. WO-A-96/00574 beskriver benzodiazepiner og WO-A-96/00730 beskriver fibrinogenreseptorantagonisttemplater, spesielt benzodiazepiner, som er bundet til en nitrogeninneholdende 5-leddet ring, som vitronektinreseptorantagonister. WO-A-97/21726 beskriver midler for å fremme bendannelse, hvilke midler tilhører forskjellige klasser av forbindelser, blant disse tyrosinderivater inneholdende en usubstituert guanidingruppe. Ytterligere undersøkelser har vist at acyl-guanidinene med formel I er spesielt sterke inhibitorer av vitronektinreseptoren og av benresorpsjon av osteoklaster. Influencing the vitronectin receptor or the interactions in which it is involved thus provides the opportunity to influence various disease states for which, for therapy and prophylaxis, there continues to be a need for suitable pharmaceutically active ingredients. Patent application WO-A-94/12181 describes substituted aromatic ring systems, and WO-A-94/08577 describes substituted heterocyclic compounds as fibrinogen receptor antagonists and inhibitors of platelet aggregation. EP-A-528 586 and EP-A-528 587 describe aminoalkyl-substituted or heterocyclyl-substituted phenylalanine derivatives. WO-A-95/32710 describes aryl derivatives as inhibitors of bone resorption by osteoclasts. WO-A-96/00574 describes benzodiazepines and WO-A-96/00730 describes fibrinogen receptor antagonist templates, particularly benzodiazepines, which are attached to a nitrogen-containing 5-membered ring, as vitronectin receptor antagonists. WO-A-97/21726 describes agents for promoting bone formation, which agents belong to different classes of compounds, among them tyrosine derivatives containing an unsubstituted guanidine group. Further investigations have shown that the acyl-guanidines of formula I are particularly strong inhibitors of the vitronectin receptor and of bone resorption by osteoclasts.

Med den foreliggende oppfinnelse tilveiebringes nye acylguanidinderivater med den generelle formel I: With the present invention, new acylguanidine derivatives of the general formula I are provided:

hvor radikalene R<1> og R<2> sammen er et mettet, bivalent (C2-C4)-alkylenradikal; where the radicals R<1> and R<2> together are a saturated, bivalent (C2-C4)-alkylene radical;

R<4> er hydrogen eller (Ci-C^-alkyl, R<4> is hydrogen or (C1-C4-alkyl,

R<5> erfenyl-(C,-C6)-alkyl, R<5> is phenyl-(C 1 -C 6 )-alkyl,

R<6> er hydrogen, R<6> is hydrogen,

A er CH2 eller O, A is CH2 or O,

m er 1,2 eller 3, m is 1,2 or 3,

n er 0 eller 1, n is 0 or 1,

i alle deres stereoisomere former og blandinger derav i alle forhold, samt deres fysiologisk tolererbare salter. in all their stereoisomeric forms and mixtures thereof in all proportions, as well as their physiologically tolerable salts.

Alkylradikalene som forekommer i substituentene, kan være rettkjedede eller forgrenede og kan være mettede eller mono-umettede eller poly-umettede. Dette gjelder også hvis de forekommer som substituenter på andre radikaler. Eksempler på egnede (Ci-CeValkylradikaler er metyl, etyl, propyl, butyl, pentyl, n-isomerene av disse radikaler, isopropyl, isobutyl, isopentyl, neopentyl, isoheksyl, 3-metylpentyl, sek-butyl, tert-butyl og tert-pentyl. Foretrukne alkylradikaler er metyl, etyl, n-propyl, isobutyl, n-butyl, isobutyl, sek-butyl og tert-butyl. The alkyl radicals occurring in the substituents may be straight-chain or branched and may be saturated or mono-unsaturated or poly-unsaturated. This also applies if they occur as substituents on other radicals. Examples of suitable (Ci-CeValkyl radicals are methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, the n-isomers of these radicals, isopropyl, isobutyl, isopentyl, neopentyl, isohexyl, 3-methylpentyl, sec-butyl, tert-butyl and tert-pentyl Preferred alkyl radicals are methyl, ethyl, n-propyl, isobutyl, n-butyl, isobutyl, sec-butyl and tert-butyl.

Umettede alkylradikaler er for eksempel alkenylradikaler, slik som vinyl, 1-propenyl, allyl, butenyl og 3-metyl-2-butenyl eller alkynylradikaler som etynyl, 1-propynyl eller propargyl. Umettede alkylenradikaler, det vil si alkenylenradikaler (= alkendiylradikaler) og alkynylenradikaler (= alkyndiylradikaler) kan likeledes være rettkjedede eller forgrenede. Eksempler på alkenylenradikaler er vinylen og propen-ylen, eksempler på alkynylenradikaler er etynylen og propynylen. Unsaturated alkyl radicals are, for example, alkenyl radicals, such as vinyl, 1-propenyl, allyl, butenyl and 3-methyl-2-butenyl or alkynyl radicals such as ethynyl, 1-propynyl or propargyl. Unsaturated alkylene radicals, i.e. alkenylene radicals (= alkenediyl radicals) and alkynylene radicals (= alkynediyl radicals) can likewise be straight-chained or branched. Examples of alkenylene radicals are vinylene and propenylene, examples of alkynylene radicals are ethynylene and propynylene.

Sykloalkylradikaler er spesielt syklopropyl, syklobutyl, syklopentyl og syklo-heksyl. Cycloalkyl radicals are especially cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl and cyclohexyl.

I monosubstituerte fenylradikaler kan substituenten være lokalisert i 2-posisjon, 3-posisjonen eller 4-posisjonen, idet 3- og 4-posisjonen er foretrukket. In monosubstituted phenyl radicals, the substituent can be located in the 2-position, the 3-position or the 4-position, with the 3- and 4-position being preferred.

De to radikaler R<1> og R<2> som sammen utgjør et bivalent, mettet (C2-C4)-alkylen-radikal, danner sammen med de to nitrogenatomer de er bundet til og det sentrale karbonatom i guanidingruppen som disse to nitrogenatomer er bundet til, en mono-syklisk 1,3-diazaheterosyklisk gruppe som er bundet til nitrogenatomet i gruppen (CH2)m-CO-NH via dens 2-posisjon. The two radicals R<1> and R<2>, which together constitute a bivalent, saturated (C2-C4)-alkylene radical, together with the two nitrogen atoms they are bound to and the central carbon atom in the guanidine group, which these two nitrogen atoms are attached to, a mono-cyclic 1,3-diazaheterocyclic group which is attached to the nitrogen atom of the group (CH2)m-CO-NH via its 2-position.

Optisk aktive karbonatomer inneholdt i forbindelsene med formel I kan uav-hengig av hverandre ha R-konfigurasjon eller S-konfigurasjon. Konfigurasjonene på forskjellige sentra kan være identiske eller forskjellige. Forbindelsene med formel I kan være til stede i form av rene enantiomerer eller diastereomerer, eller i form av enantiomerblandinger, for eksempel i form av racemater eller diastereomerblandinger. Foreliggende oppfinnelse angår både rene enantiomerer og enantiomerblandinger, for eksempel racemater og diastereomerer og diastereomerblandinger. Oppfinnelsen omfatter blandinger av to eller flere enn to stereoisomerer med formel I og alle forhold mellom stereoisomerene i blandingene. Forbindelsene med formel I kan eventuelt være til stede som E-isomerer eller Z-isomerer. Oppfinnelsen angår både rene E-isomerer og rene Z-isomerer og E/Z-blandinger i alle forhold. Oppfinnelsen omfatter også alle tautomere former av forbindelsene med formel I. Diastereomerer, inkludert E/Z-isomerer, kan separeres i de individuelle isomerer for eksempel kromatografi. Racemater kan separeres i de to enantiomerer ved hjelp av vanlige metoder, for eksempel ved kromatografi på kirale faser eller ved oppløsning. Stereokjemisk ensartede forbindelser kan også oppnås ved å benytte stereokjemisk ensartede startforbindelser, eller ved å anvende stereoselektive reaksjoner. Optically active carbon atoms contained in the compounds of formula I can independently have R-configuration or S-configuration. The configurations at different centers may be identical or different. The compounds of formula I can be present in the form of pure enantiomers or diastereomers, or in the form of enantiomeric mixtures, for example in the form of racemates or diastereomer mixtures. The present invention relates to both pure enantiomers and enantiomer mixtures, for example racemates and diastereomers and diastereomer mixtures. The invention encompasses mixtures of two or more than two stereoisomers of formula I and all ratios between the stereoisomers in the mixtures. The compounds of formula I may optionally be present as E-isomers or Z-isomers. The invention relates to both pure E isomers and pure Z isomers and E/Z mixtures in all ratios. The invention also encompasses all tautomeric forms of the compounds of formula I. Diastereomers, including E/Z isomers, can be separated into the individual isomers by, for example, chromatography. Racemates can be separated into the two enantiomers using common methods, for example by chromatography on chiral phases or by dissolution. Stereochemically uniform compounds can also be obtained by using stereochemically uniform starting compounds, or by using stereoselective reactions.

Fysiologisk tolererbare salter av forbindelsene med formel I er ikke-toksiske, fysiologisk akseptable, spesielt farmasøytisk anvendelige, salter. Slike salter av forbindelser med formel I som inneholder syregrupper, for eksempel karboksylsyre-grupper, er for eksempel alkalimetallsalter eller jordalkalimetallsalter, slik som for eksempel natriumsalter, kaliumsalter, magnesiumsalter og kalsiumsalter, og også salter med fysiologisk tolererbare kvarternære ammoniumioner og syreaddisjonssalter med ammoniakk og fysiologisk tolererbare organiske aminer, slik som for eksempel trietylamin, etanolamin eller tris-(2-hydroksyetyl)amin. Forbindelser med formel I som inneholder basiske grupper danner syreaddisjonssalter, for eksempel med uorganiske syrer som saltsyre, svovelsyre eller fosforsyre, eller med organiske karboksylsyrer og sulfonsyrer, slik som eddiksyre, sitronsyre, benzosyre, maleinsyre, fumarsyre, vinsyre, metansulfonsyre eller p-toluensulfonsyre. Forbindelser med formel I som inneholder en basisk gruppe og en syregruppe, for eksempel guanidingruppen og en karboksyl-gruppe, kan være til stede som zwitterioner (betainer) som likeledes er inkludert i foreliggende oppfinnelse. Physiologically tolerable salts of the compounds of formula I are non-toxic, physiologically acceptable, especially pharmaceutically usable, salts. Such salts of compounds of formula I containing acid groups, for example carboxylic acid groups, are for example alkali metal salts or alkaline earth metal salts, such as for example sodium salts, potassium salts, magnesium salts and calcium salts, and also salts with physiologically tolerable quaternary ammonium ions and acid addition salts with ammonia and physiologically tolerable organic amines, such as, for example, triethylamine, ethanolamine or tris-(2-hydroxyethyl)amine. Compounds of formula I containing basic groups form acid addition salts, for example with inorganic acids such as hydrochloric acid, sulfuric acid or phosphoric acid, or with organic carboxylic acids and sulphonic acids, such as acetic acid, citric acid, benzoic acid, maleic acid, fumaric acid, tartaric acid, methanesulphonic acid or p-toluenesulphonic acid. Compounds of formula I containing a basic group and an acid group, for example the guanidine group and a carboxyl group, may be present as zwitterions (betainers) which are likewise included in the present invention.

Salter av forbindelser med formel I kan fremstilles ved hjelp av vanlige metoder kjent for fagfolk, for eksempel ved å kombinere forbindelser med formel I med en uorganisk eller organisk syre eller base i et løsningsmiddel eller dispergeringsmiddel, eller fra andre salter ved kationutbytting eller anionutbytting. Foreliggende oppfinnelse inkluderer også at alle salter av forbindelsene med formel I som, på grunn av lav fysiologisk tolererbarhet, ikke er direkte egnet for anvendelse i farmasøytiske midler, men for eksempel er egnet som intermediater for utførelse av andre kjemiske modifika-sjoner av forbindelsene med formel I, eller som startmaterialer for fremstilling av fysiologisk tolererbare salter. Salts of compounds of formula I can be prepared by conventional methods known to those skilled in the art, for example by combining compounds of formula I with an inorganic or organic acid or base in a solvent or dispersant, or from other salts by cation exchange or anion exchange. The present invention also includes all salts of the compounds of formula I which, due to low physiological tolerability, are not directly suitable for use in pharmaceuticals, but are, for example, suitable as intermediates for carrying out other chemical modifications of the compounds of formula In, or as starting materials for the production of physiologically tolerable salts.

Foreliggende oppfinnelse inkluderer dessuten alle solvater av forbindelser med formel I, for eksempel hydrater eller addukter med alkoholer, og også derivater av forbindelsene med formel I, for eksempel estere og andre fysiologisk tolererbare derivater, så vel som aktive metabolitter av forbindelsene med formel I. The present invention also includes all solvates of compounds of formula I, for example hydrates or adducts with alcohols, and also derivatives of the compounds of formula I, for example esters and other physiologically tolerable derivatives, as well as active metabolites of the compounds of formula I.

I forbindelsene med formel I er radikalene R og R sammen et mettet, bivalent (C2-C4)-alkylenradikal, spesielt et (C2-C3)-alkylenradikal. In the compounds of formula I, the radicals R and R together are a saturated, bivalent (C2-C4)-alkylene radical, especially a (C2-C3)-alkylene radical.

Foretrukne forbindelser med formel I er de forbindelser hvor ett eller flere av radikalene har foretrukne betydninger eller en spesiell av de foretrukne betydninger. Alle kombinasjoner av slike foretrukne betydninger er omfattet av foreliggende oppfinnelse. Spesielt foretrukne forbindelser med formel I er forbindelsene hvor: Preferred compounds of formula I are those compounds in which one or more of the radicals have preferred meanings or a particular one of the preferred meanings. All combinations of such preferred meanings are covered by the present invention. Particularly preferred compounds of formula I are the compounds wherein:

R<1> og R2 sammen er et mettet, bivalent (C2-C4)-alkylenradikal, R<1> and R2 together are a saturated, bivalent (C2-C4)-alkylene radical,

R<4> er hydrogen eller (C i -C^-alkyl, R<4> is hydrogen or (C 1 -C 4 -alkyl,

R5 er benzyl, R 5 is benzyl,

R<6> er hydrogen, R<6> is hydrogen,

A er CH2 eller O, A is CH2 or O,

m er 1,2 eller 3, m is 1,2 or 3,

n er 0 eller 1, n is 0 or 1,

i alle deres stereoisomere fonner og blandinger derav i alle forhold, samt deres fysiologisk tolererbare salter. in all their stereoisomeric forms and mixtures thereof in all proportions, as well as their physiologically tolerable salts.

Særlig foretrukne forbindelser med formel I er de forbindelser hvor: Particularly preferred compounds of formula I are those compounds where:

R<1> og R<2> sammen er et mettet, bivalent (C2-C3)-alkylenradikal, R<1> and R<2> together are a saturated, bivalent (C2-C3)-alkylene radical,

R<4> er hydrogen eller (C|-C4)-alkyl, R<4> is hydrogen or (C1-C4)-alkyl,

R5 er benzyl, R 5 is benzyl,

R<6> er hydrogen, R<6> is hydrogen,

A er CH2, A is CH2,

m erl,og m erl, and

n er 1, n is 1,

Særlig foretrukne forbindelser med formel I er også de forbindelser hvor: Particularly preferred compounds of formula I are also those compounds where:

R<4> er hydrogen eller (C|-C4)-alkyl, R<4> is hydrogen or (C1-C4)-alkyl,

R<5> er benzyl, R<5> is benzyl,

R<6> er hydrogen, R<6> is hydrogen,

A er oksygen, A is oxygen,

m erl,og m erl, and

n er 1, n is 1,

Særlig foretrukne forbindelser med formel I er videre de forbindelser hvor: Particularly preferred compounds of formula I are furthermore those compounds where:

R 1 og R 0sammen er et mettet, bivalent (C2-C3)-alkylenradikal, R 1 and R 0 together are a saturated, bivalent (C2-C3)-alkylene radical,

R<4> er hydrogen eller (Q-C^-alkyl, R<4> is hydrogen or (C 1 -C 4 -alkyl,

R<5> er benzyl, R<5> is benzyl,

R<6> er hydrogen, R<6> is hydrogen,

A er oksygen, A is oxygen,

m er 3, og m is 3, and

n er 0, n is 0,

Oppfinnelsen angår også en fremgangsmåte for fremstilling av acylguanidin-derivatene med formel I. Forbindelsene kan generelt fremstilles, for eksempel ved en konvergent syntese, ved binding av to eller flere fragmenter som kan være avledet retrosyntetisk fra formel I. Ved fremstilling av forbindelsene med formel I kan det generelt være fordelaktig eller nødvendig at funksjonelle grupper som ville kunne føre til uønskede reaksjoner eller sidereaksjoner i det respektive syntesetrinn, innføres i form av forløpere som senere omdannes til de ønskede funksjonelle grupper, eller at funksjonelle grupper temporært blokkeres ved en beskyttelsesgruppestrategi som er egnet for synteseproblemet, og som vil være velkjent for fagfolk (Greene og Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, 1991). The invention also relates to a process for the preparation of the acylguanidine derivatives of formula I. The compounds can generally be prepared, for example by a convergent synthesis, by linking two or more fragments which can be derived retrosynthetically from formula I. In the preparation of the compounds of formula I can it generally be advantageous or necessary that functional groups that could lead to unwanted reactions or side reactions in the respective synthesis step are introduced in the form of precursors that are later converted into the desired functional groups, or that functional groups are temporarily blocked by a protecting group strategy that is suitable for the synthesis problem, and which will be well known to those skilled in the art (Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, 1991).

Med oppfinnelsen tilsveiebringes således også en fremgangsmåte for fremstilling av acylguanidinderivater med den generelle formel I: The invention thus also provides a method for the production of acylguanidine derivatives with the general formula I:

hvor radikalene R<1> og R<2> sammen er et mettet, bivalent (Cz-C^-alkylenradikal, where the radicals R<1> and R<2> together are a saturated, bivalent (Cz-C^-alkylene radical,

R<4> er hydrogen eller (CrC6)-alkyl, R<4> is hydrogen or (C1C6)-alkyl,

R<5> erfenyl-(C,-C6)-alkyl, R<5> is phenyl-(C 1 -C 6 )-alkyl,

R<6> er hydrogen, R<6> is hydrogen,

A er CH2 eller O, A is CH2 or O,

m er 1,2 eller 3, m is 1,2 or 3,

n er 0 eller 1, n is 0 or 1,

i alle deres stereoisomere former og blandinger derav i alle forhold, samt deres fysiologisk tolererbare salter, ved hvilken fremgangsmåte en karboksylsyre eller et karboksylsyrederivat med den generelle formel III: in all their stereoisomeric forms and mixtures thereof in all proportions, as well as their physiologically tolerable salts, by which method a carboxylic acid or a carboxylic acid derivative of the general formula III:

hvor R<4>, R<5>, A, n og m er som ovenfor angitt, eller alternativt funksjonelle grupper er til stede i form av forløpere eller i beskyttet form, og X er en nukleofilt substituerbar forlatende gruppe, omsettes med et guanidin eller guanidinderivat med den generelle formel IV: where R<4>, R<5>, A, n and m are as indicated above, or alternatively functional groups are present in the form of precursors or in protected form, and X is a nucleophilically substitutable leaving group, is reacted with a guanidine or guanidine derivative of the general formula IV:

hvor R<1>, R<2> og R<6> er som angitt, eller alternativt funksjonelle grupper er til stede i form av forløpere eller i beskyttet form, og det oppnådde acylguanidinderivat, om ønsket, overføres til et fysiologisk tolererbart salt. where R<1>, R<2> and R<6> are as indicated, or alternatively functional groups are present in the form of precursors or in protected form, and the acylguanidine derivative obtained is, if desired, transferred to a physiologically tolerable salt.

Gruppen COX i formel III er fortrinnsvis karboksylsyregruppen COOH eller et aktivert karboksylsyrederivat. X er for eksempel hydroksylsyrederivat. X er for eksempel hydroksyl eller halogen, spesielt klor eller brom, alkoksy, fortrinnsvis metoksy eller etoksy, aryloksy, for eksempel fenoksy, pentafluorfenoksy, fenyltio, metyltio, 2-pyridyltio eller et radikal av en nitrogen-heterosyklisk gruppe bundet via et nitrogenatom, spesielt av et azol, slik som for eksempel 1-imidazolyl. X kan videre for eksempel være (Ci-C4)-0-CO-0- eller tolylsulfonyloksy og det aktiverte syrederivat kan således være et blandet anhydrid. The group COX in formula III is preferably the carboxylic acid group COOH or an activated carboxylic acid derivative. X is, for example, a hydroxyl acid derivative. X is, for example, hydroxyl or halogen, especially chlorine or bromine, alkoxy, preferably methoxy or ethoxy, aryloxy, for example phenoxy, pentafluorophenoxy, phenylthio, methylthio, 2-pyridylthio or a radical of a nitrogen-heterocyclic group bound via a nitrogen atom, in particular of an azole, such as, for example, 1-imidazolyl. X can furthermore, for example, be (Ci-C4)-0-CO-0- or tolylsulfonyloxy and the activated acid derivative can thus be a mixed anhydride.

Hvis X er hydroksyl, det vil si hvis guanidinet med formel IV omsettes med en karboksylsyre, så blir karboksylsyren hensiktsmessig først aktivert. Aktiveringen kan for eksempel utføres med disykloheksylkarbodiimid (DCCI) eller med ((cyano(etoksy-karbonyl)-metylen)amino)-l,l,3,3-tetrametyluronium-tetrafluorbor (TOTU; Kønig et al. Proe. 2Ist Europ. Peptide Symp. 1990 (Eds. Giralt, Andreu), Escom, Leiden 1991, s 143) eller andre vanlige aktiveringsreagenser i peptidkjemien. If X is hydroxyl, that is to say if the guanidine of formula IV is reacted with a carboxylic acid, then the carboxylic acid is expediently activated first. The activation can, for example, be carried out with dicyclohexylcarbodiimide (DCCI) or with ((cyano(ethoxy-carbonyl)-methylene)amino)-1,1,3,3-tetramethyluronium-tetrafluoroboron (TOTU; Kønig et al. Proe. 2Ist Europ. Peptide Symp. 1990 (Eds. Giralt, Andreu), Escom, Leiden 1991, p 143) or other common activating reagents in peptide chemistry.

Foruten de frie guanidiner med formel IV, kan guanidinsalter også benyttes i reaksjonen med forbindelsene med formel III, fra hvilke de frie guanidiner deretter fremstilles in situ eller i et separat trinn ved hjelp av en base. Reaksjonen av et aktivert karboksylsyrederivat med formel III med guanidinet (derivat) med formel IV utføres fortrinnsvis på kjent måte i et protisk eller aprotisk, polart men inert, organisk løs-ningsmiddel. I dette tilfelle metanol isopropanol, tert-butanol, dimetylformamid eller tetrahydrofuran, ved temperaturer fra 0 °C opp til koketemperaturen for disse løs-ningsmidler har vist seg egnet for eksempel i reaksjonen av metylesterne (X = metoksy) eller etylesterne (X = etoksy) med guanidinene. Reaksjonene av forbindelsene av typen COX med saltfrie guanidiner utføres fordelaktig i aprotiske inerte løsningsmidler, slik som dimetylformamid, tetrahydrofuran, dimetoksyetan eller dioksan, hvis nødvendig med tilsetning av en base som for eksempel kalium-tert-butoksid eller natriummetoksid. Vann kan imidlertid også anvendes som løsnings-middel i reaksjonen av forbindelser med formel III med guanidiner, for eksempel når det anvendes en base som natriumhydoksid. Hvis X er klor utføres reaksjonen fordelaktig med tilsetning av et syrefjernende middel, for eksempel en tilsatt base eller i nærvær av overskudd av guanidin (derivat) for binding av den resulterende hydrohalo-gensyre. Reaksjonsblandingen opparbeides, og hvis ønskelig, renses deretter reak-sjonsproduktet ved hjelp av vanlige fremgangsmåter for fagfolk. Beskyttende grupper som eventuelt fremdeles er til sted i produktene oppnådd fra forbindelsene med formel III og IV fjernes deretter ved hjelp av standart prosesser, for eksempel blir tert-butyl-estergrupper omdannet til karboksylsyregruppene ved behandling av trifluoreddiksyre, benzylgrupper fjernes ved hydrogenering eller fluorenylmetoksykarbonylgrupper fjernes ved hjelp av sekundære aminer, og ytterligere reaksjoner utføres ved hjelp av standart prosesser, for eksempel acyleringsreaksjoner. Hvis ønskelig kan omdannelse ril fysiologisk tolererbare salter deretter utføres ved hjelp av kjente prosesser. Startkomponentene med formel III og IV, som sammenkobles for å gi acylguanidinderi-vatene med formel I, er kommersielt tilgjengelige eller kan fremstilles ved, eller analogt med, prosesser beskrevet i litteraturen. Fremstillingen av startkomponentene med formel III er illustrert som eksempel i de etterfølgende skjemaer, foreliggende oppfinnelse er ikke begrenset til disse synteser eller disse startkomponenter. Det medfører ingen problemer for fagfolk å utføre modifikasjonene av de viste synteser som nødvendig for fremstilling av andre forbindelser ifølge oppfinnelsen. Besides the free guanidines of formula IV, guanidine salts can also be used in the reaction with the compounds of formula III, from which the free guanidines are then prepared in situ or in a separate step with the aid of a base. The reaction of an activated carboxylic acid derivative of formula III with the guanidine (derivative) of formula IV is preferably carried out in a known manner in a protic or aprotic, polar but inert, organic solvent. In this case, methanol, isopropanol, tert-butanol, dimethylformamide or tetrahydrofuran, at temperatures from 0 °C up to the boiling temperature for these solvents have proven suitable, for example, in the reaction of the methyl esters (X = methoxy) or the ethyl esters (X = ethoxy) with the guanidines. The reactions of the compounds of the COX type with salt-free guanidines are advantageously carried out in aprotic inert solvents, such as dimethylformamide, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or dioxane, if necessary with the addition of a base such as potassium tert-butoxide or sodium methoxide. However, water can also be used as a solvent in the reaction of compounds of formula III with guanidines, for example when a base such as sodium hydroxide is used. If X is chlorine, the reaction is advantageously carried out with the addition of an acid scavenger, for example an added base or in the presence of an excess of guanidine (derivative) to bind the resulting hydrohalic acid. The reaction mixture is worked up, and if desired, the reaction product is then purified using usual methods for professionals. Protective groups which are possibly still present in the products obtained from the compounds of formula III and IV are then removed by means of standard processes, for example tert-butyl ester groups are converted to the carboxylic acid groups by treatment with trifluoroacetic acid, benzyl groups are removed by hydrogenation or fluorenylmethoxycarbonyl groups are removed by using secondary amines, and further reactions are carried out using standard processes, for example acylation reactions. If desired, conversion to physiologically tolerable salts can then be carried out using known processes. The starting components of formula III and IV, which are coupled to give the acylguanidine derivatives of formula I, are commercially available or can be prepared by, or analogously to, processes described in the literature. The production of the starting components with formula III is illustrated as an example in the following diagrams, the present invention is not limited to these syntheses or these starting components. It causes no problems for those skilled in the art to carry out the modifications of the shown syntheses as necessary for the production of other compounds according to the invention.

Karboksybenzaldehydet med formel V kan således for eksempel omsettes i nærvær av pyridin og piperidin, med malonsyreestersaltet med formel VI for å gi Thus, for example, the carboxybenzaldehyde of formula V can be reacted, in the presence of pyridine and piperidine, with the malonic acid ester salt of formula VI to give

kanelsyrederivatet med formel VII, som etter hydrogenering for eksempel i nærvær av palladium på karbon for å gi forbindelser med formel VIII og aktivering av karboksylsyregruppen, kan kondenseres med 2,3-diaminopropionsyrederivatet med formel VIIII for å gi forbindelsen med formel X (skjema 1). Kondensasjonen kan for eksempel ut-føres i nærvær av TOTU eller et annet vanlig aktiveringsmiddel for karboksylsyrer. I formel X er Z benzyloksykarbonylgruppen, men i istedenfor Z kan andre grupper være til stede på nitrogenatomet som enten kun temporært beskytter aminogruppen i 2-posisjonen, eller som også kan være til stede i forbindelsene med formel I ifølge oppfinnelsen og kan forbli i molekylet. Istedenfor tert-butylesteren kan likeledes andre estere være til stede som enten kun temporært beskytter syregruppen eller som også kan være til stede i forbindelsene med formel I ifølge oppfinnelsen, og kan forbli i molekylet. Forbindelser analoge med forbindelsen med formel VII kan også oppnås ved hjelp av andre prosesser for omdannelse av en karbonylgruppe til et alken, for eksempel ved en Wittig-reaksjon. the cinnamic acid derivative of formula VII, which after hydrogenation for example in the presence of palladium on carbon to give compounds of formula VIII and activation of the carboxylic acid group, can be condensed with the 2,3-diaminopropionic acid derivative of formula VIIII to give the compound of formula X (Scheme 1) . The condensation can, for example, be carried out in the presence of TOTU or another common activator for carboxylic acids. In formula X, Z is the benzyloxycarbonyl group, but instead of Z, other groups may be present on the nitrogen atom which either only temporarily protect the amino group in the 2-position, or which may also be present in the compounds of formula I according to the invention and may remain in the molecule. Instead of the tert-butyl ester, other esters can likewise be present which either only temporarily protect the acid group or which can also be present in the compounds of formula I according to the invention, and can remain in the molecule. Compounds analogous to the compound of formula VII can also be obtained by means of other processes for the conversion of a carbonyl group into an alkene, for example by a Wittig reaction.

p-hydroksybenzosyren med formel XI kan kondenseres med 2,3-diaminopropionsyrederivatet med formel VIIII for å gi forbindelsen med formel XII, forklår-ingene ovenfor gjelder for forbindelsen med formel VIIII og kondensasjonen. Forbindelsen med formel XII kan alkyleres med halogenkarboksylsyrederivater under standard betingelser, for eksempel med bromeddiksyreesteren med formel Xm, for å gi forbindelsen med formel XTV (skjema 2). p-aminobenzosyre og p-merkaptobenzosyre kan omsettes tilsvarende. The p-hydroxybenzoic acid of formula XI can be condensed with the 2,3-diaminopropionic acid derivative of formula VIIII to give the compound of formula XII, the above explanations apply to the compound of formula VIIII and the condensation. The compound of formula XII can be alkylated with halocarboxylic acid derivatives under standard conditions, for example with the bromoacetic acid ester of formula Xm, to give the compound of formula XTV (Scheme 2). p-aminobenzoic acid and p-mercaptobenzoic acid can be reacted similarly.

Tyrosinderivatet med formel XV kan alkyleres under standard betingelser med halogenkarboksylsyrederivater, for eksempel med bromsmørsyreesteren med formel XVI, for å gi forbindelsen med formel XVII (skjema 3). I formel XV er Z benzyloksykarbonylgruppen, men istedenfor Z kan andre grupper være til stede på nitrogenatomet som enten kun temporært beskytter aminogruppen eller som også kan være til stede i forbindelsene med formel I ifølge oppfinnelsen og kan forbli i molekylet. Istedenfor tert-butylesteren kan likeledes andre estere være til stede som enten kun temporært beskytter syregruppen eller som også kan være til stede i forbindelsene med formel I ifølge oppfinnelsen og kan forbli i molekylet. Analoger av forbindelsene med formel XVII kan fremstilles tilsvarende eller analogt med de ovenfor beskrevne fremstillings-prosesser. The tyrosine derivative of formula XV can be alkylated under standard conditions with halocarboxylic acid derivatives, for example with the bromobutyric acid ester of formula XVI, to give the compound of formula XVII (Scheme 3). In formula XV, Z is the benzyloxycarbonyl group, but instead of Z other groups may be present on the nitrogen atom which either only temporarily protect the amino group or which may also be present in the compounds of formula I according to the invention and may remain in the molecule. Instead of the tert-butyl ester, other esters can likewise be present which either only temporarily protect the acid group or which can also be present in the compounds of formula I according to the invention and can remain in the molecule. Analogues of the compounds of formula XVII can be prepared correspondingly or analogously to the above-described preparation processes.

Forbindelsene med formel X, XTV og XVII er eksempler på forbindelser med formel III hvori X er metoksy eller etoksy. Disse forbindelser og analoge forbindelser som oppnås fra syntesene beskrevet ovenfor inneholdende en gruppe som et aktivert karboksylsyrederivat, kan omsettes direkte med forbindelsene med formel IV. Forbindelsene oppnådd ved de ovenfor beskrevne synteser kan imidlertid også først omdannes under standardbetingelser ved spaltning av metylestergruppen eller etyl-estergruppen eller en annen estergruppe til stede i den aktuelle posisjon i forbindelsene med formler X, XIV og XVII til de tilsvarende karboksylsyrer som deretter omsettes med guanidinene med formel IV etter aktivering in situ, for eksempel med TOTU eller DCCI, eller etter omdannelse til et aktivert karboksylsyrederivat Hvis det som aktiverte syrederivater for eksempel er tilsiktet å fremstille karboksylsyrekloridene (formel Hl, X = Cl), kan dette for eksempel utføres ved anvendelse av tionylklorid. Hvis det for eksempel er tilsiktet å fremstille metylesterne (X = metoksy) fra karboksylsyrene kan dette utføres ved behandling med gassformig hydrogenklorid i metanol. Andre aktiverte syrederivater kan fremstilles på kjent måte fra karboksylsyrekloridene eller direkte fra karboksylsyrene som de er basert på (X =OH), for eksempel imidazolidene (X = 1-midazolyl) ved behandling av syrene med karbonyldiimidazol (se Staab, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1,351-367 (1962)) eller de blandede anhydrider, for eksempel ved reaksjon med klormaursyreestere, slik som, etylklorformiat, eller med tosylformid i nærvær av aminer, slik som trietylamin, i et inert løsningsmiddel. Et antall egnede metoder for fremstilling av aktiverte karboksylsyrederivater er angitt med litteraturkildedetaljer i J. March, Advanced Organic Chemistry, 3. utg., John Wiley & Sons, 1985, s 350. The compounds of formula X, XTV and XVII are examples of compounds of formula III in which X is methoxy or ethoxy. These compounds and analogous compounds obtained from the syntheses described above containing a group such as an activated carboxylic acid derivative can be reacted directly with the compounds of formula IV. However, the compounds obtained by the syntheses described above can also first be converted under standard conditions by cleavage of the methyl ester group or the ethyl ester group or another ester group present in the relevant position in the compounds of formulas X, XIV and XVII to the corresponding carboxylic acids which are then reacted with the guanidines with formula IV after activation in situ, for example with TOTU or DCCI, or after conversion to an activated carboxylic acid derivative If, for example, it is intended as activated acid derivatives to prepare the carboxylic acid chlorides (formula Hl, X = Cl), this can be carried out, for example, by using of thionyl chloride. If, for example, it is intended to produce the methyl esters (X = methoxy) from the carboxylic acids, this can be carried out by treatment with gaseous hydrogen chloride in methanol. Other activated acid derivatives can be prepared in a known manner from the carboxylic acid chlorides or directly from the carboxylic acids on which they are based (X =OH), for example the imidazolides (X = 1-midazolyl) by treating the acids with carbonyldiimidazole (see Staab, Angew. Chem. Int . Ed. Engl. 1,351-367 (1962)) or the mixed anhydrides, for example by reaction with chloroformate esters, such as ethyl chloroformate, or with tosylformide in the presence of amines, such as triethylamine, in an inert solvent. A number of suitable methods for the preparation of activated carboxylic acid derivatives are set out with reference details in J. March, Advanced Organic Chemistry, 3rd ed., John Wiley & Sons, 1985, p 350.

Forbindelsene med formel I er verdifulle farmasøytisk aktive ingredienser som for eksempel er egnet for terapi og profylakse av bensykdommer, tumorsykdommer eller kardiovaskulære sykdommer. Forbindelsene med formel I og deres fysiologisk tolererbare salter kan administreres til dyr, fortrinnsvis til pattedyr, og spesielt til mennesker, som farmasøytiske midler for terapi eller profylakse. De kan administreres alene, i blandinger med hverandre eller i form av farmasøytiske preparater som tillater enteral eller parenteral administrering og som inneholder, i tillegg til vanlige farma-søytisk uskadelige bærere og/eller additiver, en effektiv dose av minst én forbindelse med formel I og/eller dens fysiologisk tolererbare salter som aktiv bestanddel. The compounds of formula I are valuable pharmaceutically active ingredients which are, for example, suitable for the therapy and prophylaxis of bone diseases, tumor diseases or cardiovascular diseases. The compounds of formula I and their physiologically tolerable salts can be administered to animals, preferably to mammals, and especially to humans, as pharmaceutical agents for therapy or prophylaxis. They can be administered alone, in mixtures with each other or in the form of pharmaceutical preparations which allow enteral or parenteral administration and which contain, in addition to usual pharmaceutically harmless carriers and/or additives, an effective dose of at least one compound of formula I and /or its physiologically tolerable salts as active ingredient.

Foreliggende oppfinnelse angår derfor også forbindelser med formel I og/eller deres fysiologisk tolererbare salter, for anvendelse som farmasøytiske midler, anvendelse av forbindelsene med formel I og/eller deres fysiologisk tolererbare salter, for fremstilling av farmasøytiske midler for terapi og profylakse av sykdommene nevnt ovenfor eller nedenfor, for eksempel for terapi og profylakse av bensykdommer eller tumorsykdommer, og også anvendelse av forbindelsene med formel I og/eller deres fysiologisk tolererbare salter for terapi og profylakse av disse sykdommer. Foreliggende oppfinnelse angår videre farmasøytiske preparater som inneholder en effektiv mengde av minst en forbindelse med formel I og/eller dens fysiologisk tolererbare salter, sammen med en vanlig farmasøytisk uskadelig bærer. The present invention therefore also relates to compounds of formula I and/or their physiologically tolerable salts, for use as pharmaceutical agents, use of the compounds of formula I and/or their physiologically tolerable salts, for the production of pharmaceutical agents for therapy and prophylaxis of the diseases mentioned above or below, for example for the therapy and prophylaxis of bone diseases or tumor diseases, and also the use of the compounds of formula I and/or their physiologically tolerable salts for the therapy and prophylaxis of these diseases. The present invention further relates to pharmaceutical preparations which contain an effective amount of at least one compound of formula I and/or its physiologically tolerable salts, together with a common pharmaceutical innocuous carrier.

De farmasøytiske midler kan administreres oralt, for eksempel i form av piller, The pharmaceutical agents can be administered orally, for example in the form of pills,

tabletter, lakkerte tabletter, belagte tabletter, granuler, harde og myke gelatinkapsler, løsninger, siruper, emulsjoner, suspensjoner eller aerosolblandinger. Administreringen kan også utføres rektalt, for eksempel i form av suppositorier, eller parenteralt, for eksempel intravenøst, intramuskulært eller subkutant i form av injeksjonsløsninger eller infusjonsløsninger, mikrokapsler, implantater eller staver, eller perkutant eller topisk, for eksempel i form av salver, løsninger eller tinkturer, eller på andre måter, for eksempel i form av aerosoler eller nesesprayer. tablets, lacquered tablets, coated tablets, granules, hard and soft gelatin capsules, solutions, syrups, emulsions, suspensions or aerosol mixtures. The administration can also be carried out rectally, for example in the form of suppositories, or parenterally, for example intravenously, intramuscularly or subcutaneously in the form of injection solutions or infusion solutions, microcapsules, implants or rods, or percutaneously or topically, for example in the form of ointments, solutions or tinctures, or in other ways, for example in the form of aerosols or nasal sprays.

De farmasøytiske preparater ifølge foreliggende oppfinnelse fremstilles på kjent måte, én eller flere farmasøytisk inerte uorganiske og/eller organiske bærere anvendes i tillegg til forbindelsen (forbindelsene) med formel I og/eller deres fysiologisk tolererbare salter . For produksjon av piller, tabletter, belagte tabletter og harde gelatinkapsler, er det for eksempel mulig å anvende laktose, maisstivelse eller derivater derav, talkum, stearinsyre eller dens salter etc. Bærere for myke gelatinkapsler og suppositorier er for eksempel fettstoffer, vokser, halvfaste og flytende polyoler, naturlige eller herdede oljer etc. Egnede bærere for produksjon av løsninger, for eksempel injeksjonsløsninger, eller emulsjoner eller siruper er for eksempel vann, alkoholer, glyserol, polyoler, sukkrose, invertsukker, glukose, vegetabilske oljer etc. Egnede bærere for mikrokapsler, implantater eller staver er for eksempel kopolymerer av glykolsyre og melkesyre. De farmasøytiske preparater inneholder vanligvis ca 0,5 til 90 vekt% av forbindelsen (forbindelsene) med formel I og/eller deres fysiologisk tolererbare salter. Mengden av de aktive ingredienser med formel I og/eller deres fysiologisk tolererbare salter i de farmasøytiske preparater, er vanligvis 0,2 til 500 mg, fortrinnsvis 1 til 200 mg. The pharmaceutical preparations according to the present invention are prepared in a known manner, one or more pharmaceutically inert inorganic and/or organic carriers are used in addition to the compound(s) of formula I and/or their physiologically tolerable salts. For the production of pills, tablets, coated tablets and hard gelatin capsules, it is for example possible to use lactose, corn starch or derivatives thereof, talc, stearic acid or its salts, etc. Carriers for soft gelatin capsules and suppositories are, for example, fats, waxes, semi-solid and liquid polyols, natural or hardened oils etc. Suitable carriers for the production of solutions, for example injection solutions, or emulsions or syrups are for example water, alcohols, glycerol, polyols, sucrose, invert sugar, glucose, vegetable oils etc. Suitable carriers for microcapsules, implants or rods are, for example, copolymers of glycolic acid and lactic acid. The pharmaceutical preparations usually contain about 0.5 to 90% by weight of the compound(s) of formula I and/or their physiologically tolerable salts. The amount of the active ingredients of formula I and/or their physiologically tolerable salts in the pharmaceutical preparations is usually 0.2 to 500 mg, preferably 1 to 200 mg.

I tillegg til de aktive ingredienser og bærere kan de farmasøytiske preparater i tillegg inneholde ett eller flere additiver, slik som for eksempel fyllstoffer, desintegra-sjonsmidler, bindemidler, smøremidler, fuktemidler, stabilisatorer, emulgeringsmidler, konserveringsmidler, søtstoffer, fargestoffer, smaksstoffer eller aromastoffer, fortyk-ningsmidler, fortynningsmidler, bufferstoffer og også løsningsmidler eller midler for å oppnå en depoteffekt, og også salter for endring av det osmotiske trykk, overtrekks-midler eller antioksidanter. De kan også inneholde to eller flere forbindelser med formel I og/eller deres fysiologisk tolererbare salter. I tillegg til minst én forbindelse med formel I og/eller dens fysiologisk tolererbare salter, kan de også inneholde én eller flere andre terapeutisk eller profylaktisk aktive ingredienser. In addition to the active ingredients and carriers, the pharmaceutical preparations may also contain one or more additives, such as, for example, fillers, disintegrants, binders, lubricants, wetting agents, stabilizers, emulsifiers, preservatives, sweeteners, dyes, flavors or aromas, thickeners, diluents, buffer substances and also solvents or agents to achieve a depot effect, and also salts for changing the osmotic pressure, coating agents or antioxidants. They may also contain two or more compounds of formula I and/or their physiologically tolerable salts. In addition to at least one compound of formula I and/or its physiologically tolerable salts, they may also contain one or more other therapeutically or prophylactically active ingredients.

Forbindelsene med formel I er antagonister av vitronektinreseptoren og har for eksempel evnen til å inhibere bindingen av osteoklaster til benoverflaten og derved benresorpsjon av osteoklaster. Virkningen av forbindelsene med formel I kan for eksempel demonstreres i en analyse hvori inhiberingen av binding av vitronektin til celler som inneholder vitronektinreseptoren bestemmes. Detaljer for en slik analyse er gitt nedenfor. Som vitronektinreseptorenantagonister er forbindelsene med formel I og deres fysiologisk tolererbare salter, generelt egnet for terapi og profylakse av sykdommer som er basert på interaksjonen mellom vitronektinreseptorer og deres ligander i celle-celleinteraksjonsprosesser eller celle-matriks-interaksjonsprosesser, eller som kan påvirkes ved en inhibering av interaksjoner av denne type, eller for forebyggelse, lindring eller helbredelse er en inhibering av interaksjoner av denne type ønsket. Som forklart i begynnelsen spiller slike interaksjoner for eksempel en rolle ved benresorpsjon, i angiogenese eller i proliferasjon av celler fra den vaskulære glatte muskulatur. Forbindelsene med formel I og deres fysiologisk tolererbare salter er derfor for eksempel egnet for lindring eller helbredelse av sykdommer som i det minste delvis er forårsaket av en uønsket grad av benresorpsjon, angiogenese eller proliferasjon av celler fra den vaskulære glatte muskulatur. The compounds of formula I are antagonists of the vitronectin receptor and have, for example, the ability to inhibit the binding of osteoclasts to the bone surface and thereby bone resorption by osteoclasts. The effect of the compounds of formula I can be demonstrated, for example, in an assay in which the inhibition of binding of vitronectin to cells containing the vitronectin receptor is determined. Details of such an analysis are provided below. As vitronectin receptor antagonists, the compounds of formula I and their physiologically tolerable salts are generally suitable for the therapy and prophylaxis of diseases which are based on the interaction between vitronectin receptors and their ligands in cell-cell interaction processes or cell-matrix interaction processes, or which can be affected by an inhibition of interactions of this type, or for prevention, relief or cure, an inhibition of interactions of this type is desired. As explained at the beginning, such interactions for example play a role in bone resorption, in angiogenesis or in the proliferation of cells from the vascular smooth muscle. The compounds of formula I and their physiologically tolerable salts are therefore, for example, suitable for alleviating or curing diseases which are at least partly caused by an undesirable degree of bone resorption, angiogenesis or proliferation of cells from the vascular smooth muscle.

Bensykdommer for hvilke forbindelser med formel I ifølge foreliggende oppfinnelse kan anvendes for behandling og forebyggelse, er spesielt osteoporose, hyper-kasemi, osteopeni, for eksempel forårsaket av metastaser, tannsykdommer, hyperpara-tyreoidisme, periartikulære erosjoner i reumatoidartritt og Pagets sykdom. Forbindelsene med formel I kan dessuten anvendes for lindring, unngåelse eller terapi av bensykdommer som er forårsaket av et glukokortikoid, steroid eller kortikosteroidterapi, eller av en mangel på kjønnshormoner. Alle disse sykdommer er kjennetegnet ved bentap, som er basert på mangelen på likevekt mellom bendannelse og bendestruksjon, og som kan påvirkes gunstig ved inhibering av benresorpsjon av osteoklaster. Forbindelsene med formel I og/eller deres fysiologisk tolererbare salter, kan også med fordel anvendes som inhibitor av benresorpsjon, for eksempel terapien eller profylaksen av osteoporose, i kombinasjon med konvensjonelle osteoporosebehandlinger, for eksempel i kombinasjon med bifosfonater, østrogener, østrogen/progesteron, østrogen-agonister/antagonister, kalsitonin, vitamin D-analoger, paratyreoidhormon, vekst-hormonutskillende midler eller natriumfluorid. Administrering av forbindelsene med formel I og/eller deres fysiologisk tolererbare salter, og av andre aktive ingredienser som er effektive ved behandling eller profylakse av osteoporose slik som de oppført ovenfor, kan finne sted samtidig eller sekvensielt, i enhver rekkefølge og sammen eller separat. For anvendelse i en slik kombinasjonsbehandling eller profylakse kan forbindelsene med formel I og/eller deres fysiologisk tolererbare salter og én eller flere andre aktive ingredienser, slik som de oppført ovenfor, sammen være til stede i et enkelt farmasøytisk preparat, for eksempel tabletter eller granuler, eller de kan være til stede i to eller flere separate farmasøytiske preparater som kan være inneholdt i en enkel pakning eller to eller flere separate pakninger. Anvendelsen av forbindelsene med formel og/eller deres fysiologisk tolererbare salter i en slik kombinasjonsterapi eller profylakse, og deres anvendelse ved produksjon av farmasøytiske midler for en slik kombinasjonsterapi eller profylakse, er også omfattet av foreliggende oppfinnelse. Foreliggende oppfinnelse angår dessuten farmasøytiske preparater som omfatter effektive mengder av minst en forbindelse med formel I og/eller deres fysiologisk tolererbare salter, sammen med minst én annen aktiv ingrediens som er effektiv ved behandling eller profylakse av osteoporose eller inhibering av benresorpsjon, slik som de oppført ovenfor, sammen med vanlig farmasøytisk uskadelig bærer. Forklaringene ovenfor om farmasøytiske preparater gjelder tilsvarende for slike farmasøytiske kom-binasj onspreparater. Bone diseases for which compounds of formula I according to the present invention can be used for treatment and prevention are in particular osteoporosis, hypercalcemia, osteopenia, for example caused by metastases, dental diseases, hyperparathyroidism, periarticular erosions in rheumatoid arthritis and Paget's disease. The compounds of formula I can also be used for the relief, prevention or therapy of bone diseases which are caused by a glucocorticoid, steroid or corticosteroid therapy, or by a lack of sex hormones. All of these diseases are characterized by bone loss, which is based on the lack of balance between bone formation and bone destruction, and which can be beneficially affected by inhibition of bone resorption by osteoclasts. The compounds of formula I and/or their physiologically tolerable salts can also be advantageously used as inhibitors of bone resorption, for example the therapy or prophylaxis of osteoporosis, in combination with conventional osteoporosis treatments, for example in combination with bisphosphonates, estrogens, estrogen/progesterone, estrogen -agonists/antagonists, calcitonin, vitamin D analogues, parathyroid hormone, growth hormone secreting agents or sodium fluoride. Administration of the compounds of formula I and/or their physiologically tolerable salts, and of other active ingredients effective in the treatment or prophylaxis of osteoporosis as listed above, may take place simultaneously or sequentially, in any order and together or separately. For use in such combination treatment or prophylaxis, the compounds of formula I and/or their physiologically tolerable salts and one or more other active ingredients, such as those listed above, may be present together in a single pharmaceutical preparation, for example tablets or granules, or they may be present in two or more separate pharmaceutical preparations which may be contained in a single package or two or more separate packages. The use of the compounds of formula and/or their physiologically tolerable salts in such combination therapy or prophylaxis, and their use in the production of pharmaceutical agents for such combination therapy or prophylaxis, is also covered by the present invention. The present invention also relates to pharmaceutical preparations comprising effective amounts of at least one compound of formula I and/or their physiologically tolerable salts, together with at least one other active ingredient which is effective in the treatment or prophylaxis of osteoporosis or inhibition of bone resorption, such as those listed above, together with the usual pharmaceutically innocuous carrier. The explanations above about pharmaceutical preparations apply correspondingly to such pharmaceutical combination preparations.

Foruten anvendelse som inhibitorer av benresorpsjon av osteoklaster, anvendes forbindelsene med formel I og/eller deres fysiologisk tolererbare salter som inhibitorer av tumorvekst og tumormetastase, som antiinflammatoriske midler, for terapi eller profylakse av kardiovaskulære forstyrrelser, slik som arteriosklerose eller restenose, eller for terapi eller profylakse av nefropatier eller retinopatier, slik som for eksempel diabetisk retinopati. Som inhibitorer av tumorvekst eller tumormetastase kan forbindelsene med formel I og/eller deres fysiologisk tolererbare salter, også med fordel anvendes i kombinasjon med konvensjonell cancerterapi. Eksempler på konvensjonell cancerterapi er gitt i Bertino (red.), Encyclopedia of Cancer, Academic Press, 1997. Alle angivelser ovenfor som angår anvendelse av forbindelsene med formel I i kombinasjon med konvensjonell osteoporoseterapi, slik som for eksempel mulige administrasjonsmåler og farmasøytiske kombinasjonspreparater, gjelder tilsvarende for anvendelse av forbindelsene med formel I i kombinasjon med konvensjonell cancerterapi. Besides use as inhibitors of bone resorption by osteoclasts, the compounds of formula I and/or their physiologically tolerable salts are used as inhibitors of tumor growth and tumor metastasis, as anti-inflammatory agents, for therapy or prophylaxis of cardiovascular disorders, such as arteriosclerosis or restenosis, or for therapy or prophylaxis of nephropathies or retinopathies, such as, for example, diabetic retinopathy. As inhibitors of tumor growth or tumor metastasis, the compounds of formula I and/or their physiologically tolerable salts can also advantageously be used in combination with conventional cancer therapy. Examples of conventional cancer therapy are given in Bertino (ed.), Encyclopedia of Cancer, Academic Press, 1997. All above statements relating to the use of the compounds of formula I in combination with conventional osteoporosis therapy, such as for example possible administration meters and pharmaceutical combination preparations, apply similarly for the use of the compounds of formula I in combination with conventional cancer therapy.

Ved anvendelse av forbindelsene med formel I kan dosen variere innen brede grenser og må, hvilket er vanlig, tilpasses de inividuelle tilstander i hvert individuelt tilfelle. Den avhenger for eksempel av den anvendte forbindelse, eller av beskaffen-heten og alvorligheten av sykdommen som skal behandles, eller av hvorvidt en akutt eller kronisk tilstand behandles, eller hvorvidt profylakse utføres. Ved oral administrering er den daglige dose generelt 0,01 til 100 mg/kg, fortrinnsvis 0,1 til 50 mg/kg, spesielt 0,1 til 5 mg/kg, for eksempel 0,3 til 0,5 mg/kg for å oppnå effektive resultater hos en voksen person med vekt ca 75 kg (i hvert tilfelle i mg pr kg kroppsvekt). Også ved intravenøs administrering er den daglige dose generelt ca 0,01 til 100 mg/kg, fortrinnsvis 0,05 til 10 mg/kg (i hvert tilfelle pr kg kroppsvekt). Den daglige dose kan deles, spesielt ved administrering av relativt store mengder, i flere, for eksempel 2,3 eller 4, deladministreringer. Hvis ønskelig, avhengig av individuell adferd, kan det være nødvendig å avvike oppover eller nedover fra den daglige angitte dose. When using the compounds of formula I, the dose can vary within wide limits and must, as is usual, be adapted to the individual conditions in each individual case. It depends, for example, on the compound used, or on the nature and severity of the disease to be treated, or on whether an acute or chronic condition is treated, or whether prophylaxis is carried out. When administered orally, the daily dose is generally 0.01 to 100 mg/kg, preferably 0.1 to 50 mg/kg, especially 0.1 to 5 mg/kg, for example 0.3 to 0.5 mg/kg for to achieve effective results in an adult weighing approximately 75 kg (in each case in mg per kg body weight). Also with intravenous administration, the daily dose is generally about 0.01 to 100 mg/kg, preferably 0.05 to 10 mg/kg (in each case per kg of body weight). The daily dose can be divided, especially when relatively large amounts are administered, into several, for example 2, 3 or 4, partial administrations. If desired, depending on individual behavior, it may be necessary to deviate upwards or downwards from the daily indicated dose.

Foruten anvendelse som farmasøytisk aktive ingredienser kan forbindelsene med formel I også anvendes som vehikler eller bærere av aktive ingredienser for å transportere den aktive ingrediens spesifikt til virkningsstedet (= legemiddelmålretting; se for eksempel Targeted Drug Delivery, R. C. Juliano, Handbook of Experimental Pharmacology, Vol. 100, Red. Born, G. V. R. et al, Springer Verlag). De aktive ingredienser som skal transporteres er spesielt de som kan anvendes for behandling av de ovennevnte sykdommer. Besides use as pharmaceutically active ingredients, the compounds of formula I can also be used as vehicles or carriers of active ingredients to transport the active ingredient specifically to the site of action (= drug targeting; see for example Targeted Drug Delivery, R. C. Juliano, Handbook of Experimental Pharmacology, Vol. 100, Ed. Born, G. V. R. et al, Springer Verlag). The active ingredients to be transported are especially those that can be used for the treatment of the above-mentioned diseases.

Forbindelsene med formel I og dere salter kan videre anvendes for diagnost-iske formål, for eksempel ved in vz/rø-diagnoser av celle- eller vevsprøver, og som hjelpemidler ved biokjemiske undersøkelser der blokkering av vitronektinreseptoren eller påvirkning av celle-celle- eller celle-matriksinteraksjoner er ønsket. De kan dessuten anvendes som mellomprodukter for fremstilling av andre forbindelser, spesielt av andre farmasøytisk aktive ingredienser som kan fremstilles fra forbindelsene med formel I, for eksempel ved modifikasjon eller innføring av substituenter eller funksjonelle grupper. The compounds of formula I and their salts can further be used for diagnostic purposes, for example in invz/rø diagnosis of cell or tissue samples, and as aids in biochemical investigations where blocking of the vitronectin receptor or influence of cell-cell or cell -matrix interactions are desired. They can also be used as intermediates for the production of other compounds, especially of other pharmaceutically active ingredients that can be produced from the compounds of formula I, for example by modification or introduction of substituents or functional groups.

Eksempler Examples

Produktene ble identifisert via massespektra (MS) og/eller NMR-spektra. Forbindelser som ble renset ved kromatografi ved anvendelse av et elueringsmiddel som for eksempel inneholdt eddiksyre eller trifluoreddiksyre, og deretter ble fryse-tørket, eller der for eksempel trifluoreddiksyre ble anvendt i det siste syntesetrinn for å fjerne en tert-butyl-beskyttende gruppe, inneholdt i noen tilfeller fremdeles, avhengig av hvordan frysetørkingen ble utført, syren som stammet fra elueringsmiddelet eller det siste syntesetrinn, og ble oppnådd, delvis eller fullstendig, i form av et salt av den anvendte syre, for eksempel i form av eddiksyresaltet eller trifluoreddiksyresaltet The products were identified via mass spectra (MS) and/or NMR spectra. Compounds that were purified by chromatography using an eluent containing, for example, acetic acid or trifluoroacetic acid, and then freeze-dried, or where, for example, trifluoroacetic acid was used in the final synthesis step to remove a tert-butyl protecting group, contained in in some cases still, depending on how the freeze-drying was carried out, the acid derived from the eluent or the last synthesis step, and was obtained, partially or completely, in the form of a salt of the acid used, for example in the form of the acetic acid salt or the trifluoroacetic acid salt

Eksempel 1 Example 1

(2S)-2-berizyloksykarbonylamino-3-(4-(3-( 1,4,5,6-tetrahydopyrimidin-2-ylkarba-moyl)propyloksy)fenyl)propionsyre (2S)-2-beryzyloxycarbonylamino-3-(4-(3-(1,4,5,6-tetrahydopyrimidin-2-ylcarbamoyl)propyloxy)phenyl)propionic acid

a) tert-butyl-(2S)-2-bOTzyloksykarb^ oksy)fenyl)propionat a) tert-butyl-(2S)-2-bOTzyloxycarb^oxy)phenyl)propionate

7,42 g (0,02 mol) N-benzyloksykarbonyl-L-tyrosin-tetr-butylester ble tilbake-løpskokt i 6 timer sammen med 9,77 g (0,03mol) cesiumkarbonat og 3,9 g (0,02 mol) etyl-4-brombutyrat, i ca 60 ml aceton. Etter avkjøling av reaksjonsblandingen ble løsningsmiddelet fjernet i vakuum. Resten ble delt mellom etylacetat og vann (1/1). Etter separasjon av fasene ble den organiske fase vasket to ganger med vann og mettet natriumkloridløsning, tørket over natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Det olje-aktige råprodukt ble renset ved flashkromatografi på kiselgel (diklormetan/acetonitril, 25/1). Utbytte: 9,4 g (97 %) av en viskøs olje. 7.42 g (0.02 mol) of N-benzyloxycarbonyl-L-tyrosine-tetra-butyl ester was refluxed for 6 hours together with 9.77 g (0.03 mol) of cesium carbonate and 3.9 g (0.02 mol ) ethyl 4-bromobutyrate, in about 60 ml of acetone. After cooling the reaction mixture, the solvent was removed in vacuo. The residue was partitioned between ethyl acetate and water (1/1). After separation of the phases, the organic phase was washed twice with water and saturated sodium chloride solution, dried over sodium sulfate and concentrated in vacuo. The oily crude product was purified by flash chromatography on silica gel (dichloromethane/acetonitrile, 25/1). Yield: 9.4 g (97%) of a viscous oil.

Rf = 0,36 (kiselgel, diklormetan/metanol, 99/1). Rf = 0.36 (silica gel, dichloromethane/methanol, 99/1).

b) tert-butyl-(2S)-2-beiizyloksykarbonylai^ ylkarbamoyl)propyloksy)fenyl)propionat b) tert-butyl-(2S)-2-butyloxycarbonyl(ylcarbamoyl)propyloxy)phenyl)propionate

6,72 g (0,06 mol) kalium-tert-butoksid ble tilsatt til en oppløsning av 8,13 g (0,06 mol) l-aniino-l,4,5,64eti^ydropyrimidin-hydrokloridi 100 ml absolutt dimetylformamid. Etter omrøring ved romtemperatur i 30 minutter ble 7,2 g (0,015 mol) tert-butyl-(2S)-2-benzyloksykaftonyla pyloksy)fenyl)propionat tilsatt til denne løsning og den ble omrørt ved romtemperatur i 12 timer. Etter fjerning av løsningsmiddelet i vakuum ble resten behandlet med 300 ml etylacetat og 100 ml vann og den organiske fase ble separert, vasket 2 ganger med mettet natriumkloirdløsning, tørket over natriumsulfat og konsentrert. Det således 6.72 g (0.06 mol) of potassium tert-butoxide was added to a solution of 8.13 g (0.06 mol) of 1-amino-1,4,5,64-ethylhydropyrimidine hydrochloride in 100 ml of absolute dimethylformamide . After stirring at room temperature for 30 minutes, 7.2 g (0.015 mol) of tert-butyl-(2S)-2-benzyloxycaftonyl pyloxy)phenyl)propionate was added to this solution and it was stirred at room temperature for 12 hours. After removal of the solvent in vacuo, the residue was treated with 300 ml of ethyl acetate and 100 ml of water and the organic phase was separated, washed twice with saturated sodium chloride solution, dried over sodium sulfate and concentrated. It thus

oppnådde råprodukt ble umiddelbart kromatografert på kiselgel (diklormetan/metan-ol/iseddik, 100/5/1). 5,4 g (60,6 %) amorft produkt ble oppnådd. obtained crude product was immediately chromatographed on silica gel (dichloromethane/methanol/glacial vinegar, 100/5/1). 5.4 g (60.6%) of amorphous product was obtained.

c) (2S)-2-benzyloksykarbonylaniino-3-(4-(3-(l ,4,5,6^tetrahydropyrinMdin-2-ylkarba-moyl)propyloksy)fenyl)propionsyre c) (2S)-2-benzyloxycarbonylaniline-3-(4-(3-(1,4,5,6^tetrahydropyrin-2-ylcarbamoyl)propyloxy)phenyl)propionic acid

5,4 g (0,009 mol) tert-butyl-(2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(3-(1,4,5,6-tetrahydropyrirmdm^ ble oppløst i 20 ml trifluoreddiksyre/vann (95/5) og løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 30 minutter. Reaksjonsløsningen ble deretter konsentrert i vakuum. Resten ble oppløst i vann og løsningen ble frysetørket. Utbytte: 5,2 g (98 %). 5.4 g (0.009 mol) of tert-butyl-(2S)-2-benzyloxycarbonylamino-3-(4-(3-(1,4,5,6-tetrahydropyrimidine) were dissolved in 20 ml of trifluoroacetic acid/water (95/ 5) and the solution was stirred at room temperature for 30 minutes. The reaction solution was then concentrated in vacuo. The residue was dissolved in water and the solution was freeze-dried. Yield: 5.2 g (98%).

MS (ES<4>): m/e = 483,3 (M + H+, 100 %). MS (ES<4>): m/e = 483.3 (M + H+, 100%).

Eksempel 2 Example 2

(2S)-2-benzyloksykarbonylanuno-3-(4-2-(lA^ moyl)propyloksy)fenyl)propionsyre (2S)-2-Benzyloxycarbonylanuno-3-(4-2-(1α-moyl)propyloxy)phenyl)propionic acid

a) 4-(2-metoksykarbonylvinyl)benzosyre a) 4-(2-methoxycarbonylvinyl)benzoic acid

18,74 g (0,12 mol) monometylmalonat-kaliumsalt ble suspendert i 18 ml pyridin. 15,01 g (0,1 mol) 4-karboksybenzaldehyd og 0,85 g (0,01 mol) piperidin, ble tilsatt ved romtemperatur under omrøring. Blandingen ble tilbakeløpskokt inntil utvik-lingen av C02 var fullstendig (ca 2 timer), deretter ble ytterligere 60 ml pyridin tilsatt og blandingen ble tilbakeløpskokt i ytterligere 1 time. Reaksjonsblandingen ble behandlet under omrøring med 500 ml is og 110 ml konsentrert saltsyre. Etter at tilset-ningen var fullført ble blandingen omrørt i ytterligere 20 minutter og produktet ble avfiltrert med sug, vasket med vann og rekrystallisert fra isopropanol. Utbytte: 12,85 g (62 %). 18.74 g (0.12 mol) of monomethylmalonate potassium salt was suspended in 18 ml of pyridine. 15.01 g (0.1 mol) of 4-carboxybenzaldehyde and 0.85 g (0.01 mol) of piperidine were added at room temperature with stirring. The mixture was refluxed until the evolution of CO 2 was complete (about 2 hours), then a further 60 ml of pyridine was added and the mixture was refluxed for a further 1 hour. The reaction mixture was treated with stirring with 500 ml of ice and 110 ml of concentrated hydrochloric acid. After the addition was complete, the mixture was stirred for a further 20 minutes and the product was filtered off with suction, washed with water and recrystallized from isopropanol. Yield: 12.85 g (62%).

H-NMR (200 MHz dVDMSO): 5 = 3,75 (s, 3H, OCH3); 6,76 (d, j = 15 Hz, 1H, CHCOOCH3); 7,73 (d, J = 15 HZ, 1H, Ar-CH); 7,84 (d, j = 9 Hz, 2H, Ar-H); 7,98 (d, J = 9 HZ, 2H, Ar-H); 13,11 (s, bred, 1H, COOH) H-NMR (200 MHz dVDMSO): δ = 3.75 (s, 3H, OCH 3 ); 6.76 (d, j = 15 Hz, 1H, CHCOOCH 3 ); 7.73 (d, J = 15 HZ, 1H, Ar-CH); 7.84 (d, j = 9 Hz, 2H, Ar-H); 7.98 (d, J = 9 HZ, 2H, Ar-H); 13.11 (s, broad, 1H, COOH)

MS (Cl<4>): m/e = 207,2 (M+H<+>,100 %). MS (Cl<4>): m/e = 207.2 (M+H<+>,100%).

HPLC: RP18, nukleofil 300-5-C18,250 x 4 mm; buffer A: H20,0,1 % trifluoreddiksyre (TFA); buffer B: acetonitril (80 vol%)H20 (20 vol%), 0,1 % TFA; gradient: først 5 minutter, 90 buffer A/10 % buffer B, deretter i 20 minutter til 90 % buffer B, deretter 5 minutter 90 % buffer B; strømningshastighet 1 ml/min; Rt = 18,05 min. HPLC: RP18, nucleophile 300-5-C18, 250 x 4 mm; buffer A: H 2 O, 0.1% trifluoroacetic acid (TFA); buffer B: acetonitrile (80 vol%) H 2 O (20 vol%), 0.1% TFA; gradient: first 5 min, 90 buffer A/10% buffer B, then for 20 min to 90% buffer B, then 5 min 90% buffer B; flow rate 1 ml/min; Rt = 18.05 min.

b) 4-(2-metoksykarbonyletyl)benzosyre. b) 4-(2-methoxycarbonylethyl)benzoic acid.

8 g (38,8 mmol) 4-(2-metoksykarbonylvinyl)benzosyre ble suspendert i 8 g (38.8 mmol) of 4-(2-methoxycarbonylvinyl)benzoic acid was suspended in

200 ml dioksan og hydrogenert i 7 timer ved romtemperatur over Pd/C (10 % styrke) ved et trykk på 1 bar hydrogen. Blandingen ble filtrert og løsningsmiddelet ble fjernet i vakuum. Utbytte: 8,05 g (100 %). 200 ml dioxane and hydrogenated for 7 hours at room temperature over Pd/C (10% strength) at a pressure of 1 bar hydrogen. The mixture was filtered and the solvent was removed in vacuo. Yield: 8.05 g (100%).

'H-NMR (200 MHz, de-DMSO) : 8 = 2,67 (t, J = 8 Hz, 2H, Clfc-COOCHj); 2,93 (t, J = 8 HZ, 2H, Ar-CHs); 3,59 (s, 3H, OCH3; 7,35 (d, 2H, Ar-H); 7,86 (d, J = 1H-NMR (200 MHz, d-DMSO): δ = 2.67 (t, J = 8 Hz, 2H, Clfc-COOCHj); 2.93 (t, J = 8 HZ, 2H, Ar-CH 2 ); 3.59 (s, 3H, OCH3; 7.35 (d, 2H, Ar-H); 7.86 (d, J =

9 Hz, 2H, Ar-H); 12,80 (s, bred, 1H, COOH). 9 Hz, 2H, Ar-H); 12.80 (s, broad, 1H, COOH).

MS (Cl<4>): m/e = 209,2 (M + H+, 100 %). MS (Cl<4>): m/e = 209.2 (M + H+, 100%).

HPLC: RP18, nukleofil 300-5-C18, 250 x 4 mm; buffer A: H20,0,1 % TFA; buffer B: acetonitril (80 vol%)/H20 (20 vol%), 0,1 % TFA; gradient: først 5 minutter 90 % buffer A, 10 % buffer B, deretter i 20 minutter til 90 % buffer B, deretter 5 minutter 90 % buffer B; HPLC: RP18, nucleophile 300-5-C18, 250 x 4 mm; buffer A: H 2 O, 0.1% TFA; buffer B: acetonitrile (80 vol%)/H 2 O (20 vol%), 0.1% TFA; gradient: first 5 min 90% buffer A, 10% buffer B, then for 20 min to 90% buffer B, then 5 min 90% buffer B;

c) tert-butyl-(2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(2-metoksykarbonyletyl)benzoyl-amino)propionat c) tert-butyl-(2S)-2-benzyloxycarbonylamino-3-(4-(2-methoxycarbonylethyl)benzoylamino)propionate

354 mg (1,7 mmol) 4-(2-metoksykarbonyletyl)benzosyre og 500 mg 354 mg (1.7 mmol) 4-(2-methoxycarbonylethyl)benzoic acid and 500 mg

(1,7 mmol) tert-butyl-(2S)-3-amino-2-benzyloksykarbonylaminopropionatble oppløst i 3 ml dimetylformamid og behandlet med 557 mg (1,7 mmol) av 0-((cyano(etoksy-karbonyl)-metyliden)amino)-1,1,3,3-tetrametyluronium-tetrafluorbor (TOTU) og 204 mg (1,7 mmol) diisopropyletylamin, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 7 timer ved pH 7-8. Løsningsmiddelet ble fjernet i vakuum, resten ble oppløst i etylacetat og løsningen ble vasket 3 ganger med KHSCvløsning og NaHCCvløsning inntil den var nøytral. Den organiske fase ble separert og tørket, og løsningsmiddelet ble fjernet ved destillasjon i vakuum. Utbytte: 770 mg (93 %). (1.7 mmol) tert-butyl-(2S)-3-amino-2-benzyloxycarbonylaminopropionate was dissolved in 3 mL of dimethylformamide and treated with 557 mg (1.7 mmol) of 0-((cyano(ethoxycarbonyl)-methylidene )amino)-1,1,3,3-tetramethyluronium-tetrafluoroboron (TOTU) and 204 mg (1.7 mmol) of diisopropylethylamine, and the mixture was stirred at room temperature for 7 hours at pH 7-8. The solvent was removed in vacuo, the residue was dissolved in ethyl acetate and the solution was washed 3 times with KHSO solution and NaHCO solution until neutral. The organic phase was separated and dried, and the solvent was removed by distillation in vacuo. Yield: 770 mg (93%).

MS (ES<+>): m/e = 485,2 (M+H<+>, 100 %). MS (ES<+>): m/e = 485.2 (M+H<+>, 100%).

d) tert-butyl-(2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(2-( 1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-ylkarbamoyl)etyl)benzoylamino)propionat. 1,25 g (9,2 mmol) 2-amino-l,4,5,6-tetrahydropyrimidin-hydroklorid og 1,03 g (9,2 mmol) kalium-tert-butoksid, ble oppløst i 3 ml absolutt dimetylformamid og omrørt ved romtemperatur i 30 minutter. 740 mg (1,53 mmol) av tert-butyl-(2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(2-metoksykarbonyletyl)benzoylamino)propionat i 1 ml dimetylformamid ble deretter tilsatt og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 4 timer. pH ble justert til 4 ved anvendelse av iseddik, løsningsmiddelet ble fjernet i vakuum og resten ble kromatografert på kiselgel ved anvendelse av diklormetan/metanol/iseddiWvann (9/1/0,1/0,1). Utbytte: 190 mg (38 %). d) tert-butyl-(2S)-2-benzyloxycarbonylamino-3-(4-(2-(1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-ylcarbamoyl)ethyl)benzoylamino)propionate. 1.25 g (9.2 mmol) of 2-amino-1,4,5,6-tetrahydropyrimidine hydrochloride and 1.03 g (9.2 mmol) of potassium tert-butoxide were dissolved in 3 ml of absolute dimethylformamide and stirred at room temperature for 30 minutes. 740 mg (1.53 mmol) of tert-butyl-(2S)-2-benzyloxycarbonylamino-3-(4-(2-methoxycarbonylethyl)benzoylamino)propionate in 1 mL of dimethylformamide was then added and the mixture was stirred at room temperature for 4 hours . The pH was adjusted to 4 using glacial acetic acid, the solvent was removed in vacuo and the residue was chromatographed on silica gel using dichloromethane/methanol/glacial acetic water (9/1/0.1/0.1). Yield: 190 mg (38%).

MS (ES4): m/e = 552,3 (M + H+, 100 %). e) (2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(2-(l,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-ylkarba-moyI)etyl)benzoylamino)propionsyre. MS (ES4): m/e = 552.3 (M + H + , 100%). e) (2S)-2-benzyloxycarbonylamino-3-(4-(2-(1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-ylcarbamoyl)ethyl)benzoylamino)propionic acid.

190 mg (0,34 mmol) tert-butyl-(2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(2-(l,4,5,6-tetrahydropyrirnidin-2-ylkarbamoyl)etyl)benzoylamino)propionat ble oppløst i 5 ml 95 % trifluoreddiksyre og omrørt ved romtemperatur i 1 time. Trifluoreddiksyren ble fjernet ved destillasjon i vakuum og avdampet sammen med toluen, og resten ble oppløst i iseddik, fortynnet med vann og frysetørket. Utbytte: 170 mg (100 %). 190 mg (0.34 mmol) of tert-butyl-(2S)-2-benzyloxycarbonylamino-3-(4-(2-(1,4,5,6-tetrahydropyrrinidin-2-ylcarbamoyl)ethyl)benzoylamino)propionate was dissolved in 5 ml of 95% trifluoroacetic acid and stirred at room temperature for 1 hour. The trifluoroacetic acid was removed by vacuum distillation and evaporated together with toluene, and the residue was dissolved in glacial acetic acid, diluted with water and freeze-dried. Yield: 170 mg (100%).

MS (ES<4>): m/e = 496,3 (M+H4,100 %). MS (ES<4>): m/e = 496.3 (M+H4.100%).

Eksempel 3 Example 3

(2S)-2-benzylolcsykarbonylammo-3-(4-((l,4,5,6-tefra^ metyloksy)benzoylamino)propionsyre. (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-3-(4-((1,4,5,6-tetramethyloxy)benzoylamino)propionic acid.

a) Benzyl 4-(metoksykarbonylmetyloksy)benzoat a) Benzyl 4-(methoxycarbonylmethyloxy)benzoate

4,5 g (0,02 mol) benzyl-hydroksybenzoat ble suspendert i 60 ml aceton 4.5 g (0.02 mol) of benzyl hydroxybenzoate was suspended in 60 ml of acetone

sammen med 9,7 g (0,03 mol) cesiumkarbonat og behandlet med 2,3 ml (0,025 mol) etylbromacetat. Blandingen ble deretter tilbakeløpskokt inntil reaksjonen var fullstendig. For opparbeidelse ble reaksjonsløsningen filtrert gjennom et klaringslag og filtratet ble konsentrert til tørrhet. Resten ble oppløst i etylacetat og blandingen ble vasket 3 ganger med 10 % sitronsyreløsning og mettet NaCl-løsning. Den organiske fase ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert. Resten ble rekrystallisert fra diisopropyleter/heptan. Utbytte: 5,5 g. together with 9.7 g (0.03 mol) of cesium carbonate and treated with 2.3 ml (0.025 mol) of ethyl bromoacetate. The mixture was then refluxed until the reaction was complete. For workup, the reaction solution was filtered through a clarification layer and the filtrate was concentrated to dryness. The residue was dissolved in ethyl acetate and the mixture was washed 3 times with 10% citric acid solution and saturated NaCl solution. The organic phase was dried over sodium sulfate, filtered and concentrated. The residue was recrystallized from diisopropyl ether/heptane. Yield: 5.5 g.

b) 4-(metoksykarbonylmetyloksy)benzosyre b) 4-(methoxycarbonylmethyloxy)benzoic acid

5 g benzyl-4-(metoksykarbonylmetyloksy)benzoat ble oppløst i metanol/etylacetat og hydrogenert i nærvær av 600 ml katalysator (Pd/C, 10 % styrke). Etter gjennomstrømning med inert gass ble katalysatoren filtrert fra og filtratet ble konsen- 5 g of benzyl 4-(methoxycarbonylmethyloxy)benzoate was dissolved in methanol/ethyl acetate and hydrogenated in the presence of 600 ml of catalyst (Pd/C, 10% strength). After flowing through with inert gas, the catalyst was filtered off and the filtrate was concentrated

trert i vakuum. Resten ble flnpulverisert med diisopropyleter/heptan (9/1) og filtrert fra med avsuging. Utbytte: 3,3 g. c) tert-butyl-(2S)-2-benzyloksykarbonylamino)-3-(4-metoksykarbonylmetyIoksy)-benzoylamino)propionat. 420 mg (0,002 mol) 4-(metoksykarbonylmetyloksy)benzosyre, 270 mg (0,002 mol) 1-hydroksybenzotriazol og 588 mg (0,002 mol) tert-butyl-(2S)-3-amino-2-benzyloksykarbonylaminopropionat ble oppløst i 5 ml dimetylformamid. Løsningen ble avkjølt til 0 °C og behandlet med 453 g (0,0022 mol) N,N -disykloheksylkarbodiimid og deretter omrørt ved 0 °C i 10 minutter og ved romtemperatur i 2 timer. For opparbeidelse ble urea filtrert fra og filtratet ble konsentrert til tørrhet. Den rene forbindelse ble oppnådd ved kromatografi av råproduktet på kiselgel (diklormetan/acetonitril 20/1). Utbytte: 820 mg. d) tert-butyl-(2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(( 1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-ylkarbamoyl)metyloksy)benzoylamino)propionat. dried in vacuum. The residue was pulverized with diisopropyl ether/heptane (9/1) and filtered off with suction. Yield: 3.3 g. c) tert-butyl-(2S)-2-benzyloxycarbonylamino)-3-(4-methoxycarbonylmethyloxy)-benzoylamino)propionate. 420 mg (0.002 mol) of 4-(methoxycarbonylmethyloxy)benzoic acid, 270 mg (0.002 mol) of 1-hydroxybenzotriazole and 588 mg (0.002 mol) of tert-butyl-(2S)-3-amino-2-benzyloxycarbonylaminopropionate were dissolved in 5 ml of dimethylformamide . The solution was cooled to 0 °C and treated with 453 g (0.0022 mol) of N,N -dicyclohexylcarbodiimide and then stirred at 0 °C for 10 minutes and at room temperature for 2 hours. For work-up, urea was filtered off and the filtrate was concentrated to dryness. The pure compound was obtained by chromatography of the crude product on silica gel (dichloromethane/acetonitrile 20/1). Yield: 820 mg. d) tert-butyl-(2S)-2-benzyloxycarbonylamino-3-(4-((1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-ylcarbamoyl)methyloxy)benzoylamino)propionate.

438 mg av tert-butyl-(2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(metoksykarbon-ylmetyloksy)benzoylamino)propionat 606 mg kalium-tert-butoksid og 732 mg 2-amino-l,4,5,6-tetrahydropyrimidin-hydroklorid, ble oppløst i 10 ml absolutt dimetylformamid og løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 14 timer og deretter konsentrert til tørrhet i vakuum. Resten ble oppløst i etylacetat og løsningen ble ekstrahert med vann. Den organiske fase ble tørket og konsentrert i vakuum og råproduktet ble renset ved kromatografi på kiselgel. 438 mg of tert-butyl-(2S)-2-benzyloxycarbonylamino-3-(4-(methoxycarbonylmethyloxy)benzoylamino)propionate 606 mg of potassium tert-butoxide and 732 mg of 2-amino-1,4,5,6- tetrahydropyrimidine hydrochloride, was dissolved in 10 ml of absolute dimethylformamide and the solution was stirred at room temperature for 14 hours and then concentrated to dryness in vacuo. The residue was dissolved in ethyl acetate and the solution was extracted with water. The organic phase was dried and concentrated in vacuo and the crude product was purified by chromatography on silica gel.

(diklormetan/metanol 100/7,5). Utbytte: 370 mg. (dichloromethane/methanol 100/7.5). Yield: 370 mg.

e) (2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(( 1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-ylkarba-moyl)metyloksy)benzoylamino)propionsyre. 87 mg av tert-butylesteren fra trinn d) ble omrørt ved romtemperatur i 15 minutter i 2 ml 95 % trifluoreddiksyre. Etter konsentrering i vakuum ble blandingen finpulverisert med eter, og resten ble filtrert fra og tørket. Utbytte: 79 mg. e) (2S)-2-benzyloxycarbonylamino-3-(4-((1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-ylcarbamoyl)methyloxy)benzoylamino)propionic acid. 87 mg of the tert-butyl ester from step d) was stirred at room temperature for 15 minutes in 2 ml of 95% trifluoroacetic acid. After concentration in vacuo, the mixture was finely pulverized with ether, and the residue was filtered off and dried. Yield: 79 mg.

MS (ES4): m/e = 498,2 (M+H)<+>. MS (ES4): m/e = 498.2 (M+H)<+>.

Eksempel 4 Example 4

Iscpropyl-(2S)-2-bei^loksykariK)nylamino-3-(4-ylkarbamoyl)propyloksy)fenyl)propionathydrokloricl Isopropyl-(2S)-2-butyloxycaryl)nylamino-3-(4-ylcarbamoyl)propyloxy)phenyl)propionate hydrochloride

23,88 g (0,04 mol) av forbindelsen fra eksempel 1 (som trifiuoreddiksyresalt) ble suspendert i 400 ml isopropanol. Til denne suspensjon ble det tilsatt, ved -15 °C under en inert gassatmosfære, en tidligere preparert løsning av tionylklorid i isopropanol (for prepareringen av denne løsning ble 10,4 tionylklorid tilsatt dråpevis ved -10 til -15 °C og under en inert gasatmosfære innen 5 minutter, til 160 ml isopropanol og blandingen ble omrørt ved -10 °C i ytterligere 20 minutter). Etter fullførelse av tilset-ningen steg temperaturen innen 30 minutter til romtemperatur. Den i mellomtiden klare løsning ble deretter oppvarmet ved 60 °C under omrøring i 7 timer. Omrøringen ble fortsatt uten oppvarming over natten. Ved kontroll ved hjelp av TLC viste reaksjonen seg å være fullstendig. Løsningsmidler ble fjernet ved rotasj onsdestd Hasj on i vakuum. Resten ble suspendert i 100 ml isopropanol og isopropanolen ble fjernet i vakuum. Den faste rest ble finpulverisert med dietyleter og separert ved sugefiltrering. Råproduktet ble suspendert i 120 ml isopropanol, tilbakeløpskokt med 2,4 aktivt karbon og filtrert. Etter avkjøling ble det fargeløse produkt separert ved filtrering. Ubytte: 16,2 g av et gråhvitt, fast materiale. 23.88 g (0.04 mol) of the compound from Example 1 (as trifluoroacetic acid salt) was suspended in 400 ml of isopropanol. To this suspension was added, at -15 °C under an inert gas atmosphere, a previously prepared solution of thionyl chloride in isopropanol (for the preparation of this solution, 10.4 thionyl chloride was added dropwise at -10 to -15 °C and under an inert gas atmosphere within 5 minutes, to 160 ml of isopropanol and the mixture was stirred at -10 °C for a further 20 minutes). After completion of the addition, the temperature rose to room temperature within 30 minutes. The meanwhile clear solution was then heated at 60 °C with stirring for 7 hours. Stirring was continued without heating overnight. When checked by TLC, the reaction was found to be complete. Solvents were removed by rotation ondestd Hasj on in vacuum. The residue was suspended in 100 ml of isopropanol and the isopropanol was removed in vacuo. The solid residue was finely pulverized with diethyl ether and separated by suction filtration. The crude product was suspended in 120 ml of isopropanol, refluxed with 2.4 activated carbon and filtered. After cooling, the colorless product was separated by filtration. Yield: 16.2 g of an off-white, solid material.

MS (ES<4>): m/e = 525 (M + H<4>, 100 %). MS (ES<4>): m/e = 525 (M + H<4>, 100%).

H-NMR (200 MHz, dVDMSO): 8 = 1,1 (dd, 6H, J = 7 Hz), 1,8,1,95 og 2,5 (m, hver 2H), 2,85 (m, 2H), 3,35 (t, 4H, J = 3 - 4 Hz), 3,95 (t, 2H, J = 3 - 4 Hz), 4,15 (m, 1H), 4,9 (sep, 1H, J = 7 Hz), 5,0 (s, 2H,), 6,9 og 7,1 (d, hver 2H, J = 7 Hz), 7,3 (m, 5H), 7,7 (d, 1H,J = HZ). H-NMR (200 MHz, dVDMSO): δ = 1.1 (dd, 6H, J = 7 Hz), 1.8, 1.95 and 2.5 (m, each 2H), 2.85 (m, 2H), 3.35 (t, 4H, J = 3 - 4 Hz), 3.95 (t, 2H, J = 3 - 4 Hz), 4.15 (m, 1H), 4.9 (sep, 1H, J = 7 Hz), 5.0 (s, 2H,), 6.9 and 7.1 (d, each 2H, J = 7 Hz), 7.3 (m, 5H), 7.7 ( d, 1H,J = HZ).

Eksempel 5 Example 5

Etyl-(2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(3-( 1,4,5,6-tetrahydropyriraidin-2-ylkar-bamoyl)propyloksy)fenyl)propioriathydroklorid. Ethyl-(2S)-2-benzyloxycarbonylamino-3-(4-(3-(1,4,5,6-tetrahydropyriradin-2-ylcarbamoyl)propyloxy)phenyl)propiorate hydrochloride.

0,14 ml (1,15 ekvivalenter) tionylklorid ble tilsatt ved -10 °C til 5 ml etanol og omrørt i 10 minutter ved denne temperatur. 1 g (1,66 mmol) av forbindelsen fra eksempel 1 ble deretter tilsatt som en suspensjon i 10 ml etanol. Under omrøring ble blandingen oppvarmet til romtemperatur og omrørt i ytterligere 5 timer. Løsningen, som i mellomtiden var blitt klar, ble avdampet i vakuum, resten ble oppløst i vann og, etter filtrering, lyofilisert. Utbytte: 0,85 g av et fargeløst, amorft fast stoff. 0.14 ml (1.15 equivalents) of thionyl chloride was added at -10°C to 5 ml of ethanol and stirred for 10 minutes at this temperature. 1 g (1.66 mmol) of the compound from Example 1 was then added as a suspension in 10 ml of ethanol. While stirring, the mixture was warmed to room temperature and stirred for an additional 5 hours. The solution, which had meanwhile become clear, was evaporated in vacuo, the residue was dissolved in water and, after filtration, lyophilized. Yield: 0.85 g of a colorless, amorphous solid.

MS (ES<4>): m/e = 511 (M+H<4>,100 %). MS (ES<4>): m/e = 511 (M+H<4>,100%).

Eksempel 6 Example 6

(2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(3-(4,5-dm^ propyloksy)fenyl)propionsyre (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-3-(4-(3-(4,5-dm^propyloxy)phenyl)propionic acid

340 mg 4,5-dmydro-lH-imidazol-2-ylamin, 13,6 mg imidazol og 26,8 mg litiumjodid ble tilsatt til en oppløsning av 970 mg tert-butyl(2S)-2-benzyloksykarbon- 340 mg of 4,5-dihydro-1H-imidazol-2-ylamine, 13.6 mg of imidazole and 26.8 mg of lithium iodide were added to a solution of 970 mg of tert-butyl(2S)-2-benzyloxycarbon-

ylamino-3-(4-(3-etoksykarbonylpropyloksy)fenyl)propionat (eksempel la) i 5 ml absolutt dimetylformamid. Løsningen ble omrørt ved 40 °C i 4 timer, ytterligere 170 mg 4,5-dihydro-lH-imidazol-2-ylamin ble tilsatt og løsningen ble omrørt ved 55 °C i ytterligere 3 timer. Etter fjerning av løsningen i vakuum, ble resten behandlet med etylacetat, filtrert, ekstrahert med 10 % vandig KHC03-løsning, tørket over MgSCv filtrert, konsentrert i vakuum og utfelt med diisopropyleter. Råproduktet ble renset ved kiselgelkromatografi (diklormetan/metanol/iseddik 90/10/1). 250 mg av et amorft produkt ble oppnådd. ylamino-3-(4-(3-ethoxycarbonylpropyloxy)phenyl)propionate (Example 1a) in 5 ml of absolute dimethylformamide. The solution was stirred at 40°C for 4 hours, a further 170 mg of 4,5-dihydro-1H-imidazol-2-ylamine was added and the solution was stirred at 55°C for a further 3 hours. After removal of the solution in vacuo, the residue was treated with ethyl acetate, filtered, extracted with 10% aqueous KHCO 3 solution, dried over MgSO 3 , filtered, concentrated in vacuo and precipitated with diisopropyl ether. The crude product was purified by silica gel chromatography (dichloromethane/methanol/glacial acetic acid 90/10/1). 250 mg of an amorphous product was obtained.

MS (ES<*>): m/e = 525,2 (uH, 100 %). ;b) (2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(3-(4,5-dihydro-1 H-imidazol-2-ylkarba-moyl)propyl)propionsyre ;200 mg tert-butyl-(2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(4,5-dihydro- 1H-imidazol-2-ylkarbamoyl)-propoksy(fenyl)propionat ble oppløst i 5 ml trifluoreddiksyre/vann (95/5) og løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 15 min. Reaksjonsløs-ningen ble deretter konsentrert i vakuum. Resten ble oppløst i vann og løsningen ble frysetørket. Utbytte: 100 %. ;MS (ES<*>): m/e = 469,2 (M+H<+>, 100 %). MS (ES<*>): m/e = 525.2 (uH, 100%). ;b) (2S)-2-benzyloxycarbonylamino-3-(4-(3-(4,5-dihydro-1H-imidazol-2-ylcarbamoyl)propyl)propionic acid; 200 mg tert-butyl-(2S) -2-Benzyloxycarbonylamino-3-(4-(4,5-dihydro-1H-imidazol-2-ylcarbamoyl)-propoxy(phenyl)propionate was dissolved in 5 ml of trifluoroacetic acid/water (95/5) and the solution was stirred at room temperature for 15 min. The reaction solution was then concentrated in vacuo. The residue was dissolved in water and the solution was freeze-dried. Yield: 100%. ;MS (ES<*>): m/e = 469.2 (M+H<+ >, 100%).

Farmakologisk testing Pharmacological testing

Inhibering av benresorpsjon med forbindelsene i foreliggende oppfinnelse kan f eks bestemmes ved hjelp av en osteoklastresorpsjonstest ("PIT ASSAY"), f eks analogt med WO-A-95/32710. Inhibition of bone resorption with the compounds of the present invention can, for example, be determined by means of an osteoclast resorption test ("PIT ASSAY"), for example analogous to WO-A-95/32710.

Den inhibitoriske virkning av forbindelsene ifølge oppfinnelsen mot vitronektinreseptoren ctvp3 kan f eks bestemmes som beskrevet nedenfor. The inhibitory effect of the compounds according to the invention against the vitronectin receptor ctvp3 can, for example, be determined as described below.

Test for måling av inhiberingen av binding av 293-celler til humant vitronektin Test for measuring the inhibition of binding of 293 cells to human vitronectin

(Vn/293-celletest) (Vn/293 cell test)

1. Rensing av humant vitronektin 1. Purification of human vitronectin

Humant vitronektin isoleres fra humant plasma og renses ved affinitetskroma-tografi i overensstemmelse med metoden ifølge Yatohyo et al., Cell Structure and Function, 1988,23, 281-292. Human vitronectin is isolated from human plasma and purified by affinity chromatography in accordance with the method according to Yatohyo et al., Cell Structure and Function, 1988, 23, 281-292.

2. Celletest 2. Cell test

293-celler, en human embryonisk nyrecellelinje, som er kotransfektert med DNA-sekvenser for av- og p3-subenhetene av vitronektinreseptoren avp3, utvelges for en høy ekspresjonshastighet (mer enn 500.000 avp3-reseptorer/celle) i overensstemmelse med FACS-metoden. De utvalgte celler dyrkes og sorteres på nytt ved hjelp av 293 cells, a human embryonic kidney cell line, cotransfected with DNA sequences for the av and p3 subunits of the vitronectin receptor avp3 are selected for a high expression rate (more than 500,000 avp3 receptors/cell) according to the FACS method. The selected cells are cultured and re-sorted using

FACS for å oppnå en stabil cellelinje (15 D) med ekspresjonsmengder høyere enn 1.000.000 kopier av avp3 per celle. FACS to obtain a stable cell line (15 D) with expression levels higher than 1,000,000 copies of avp3 per cell.

En Linbro 96-brønners vevskulturplate med flat bunn belegges over natten ved 4 °C med humant vitronektin (0,01 mg/ml, 0,05 ml/brønn) i fosfatbufret saltløsning (PBS) og blokkeres med 0,5 % BSA (bovint serumalbumin). Oppløsninger av test-stoffene fra IO"<10> mol/l til 2 x 10° mol/l i glukoseinneholdende DMEM-medium pre-pareres og 0,05 ml/brønn av løsningen tilsettes til platen i hvert tilfelle. Cellene som uttrykker høye nivåer av ocvP3 (f eks 15 D) suspenderes i glukoseinneholdende DMEM-medium og suspensjonen justeres til et innhold på 25.000 celler/0,05 ml medium. 0,05 ml av cellesuspensjonen tilsettes til hver brønn og platen inkuberes ved 37 °C i 90 min. Platen vaskes tre ganger med varm PBS for å fjerne ubundne celler. De bundne celler lyseres i sitratbuffer (25 mM, pH 5,0) som inneholder 0,25 % Triton X-100. Heksoseamidasesubstratet p-nitrofenyl-N-acetyl-p-D-glukosaminid tilsettes deretter og platen inkuberes ved 37 °C i 90 min. Reaksjonen stanses med en glysin (50 mM)EDTA (5mM) buffer (pH 10,4) og absorpsjonen i hver brønn måles ved 405-650 mM. Data analyseres i overensstemmelse med standard prosesser. A Linbro 96-well flat-bottom tissue culture plate is coated overnight at 4 °C with human vitronectin (0.01 mg/ml, 0.05 ml/well) in phosphate-buffered saline (PBS) and blocked with 0.5% BSA (bovine serum albumin). Solutions of the test substances from 10"<10> mol/l to 2 x 10° mol/l in glucose-containing DMEM medium are prepared and 0.05 ml/well of the solution is added to the plate in each case. The cells expressing high levels of ocvP3 (e.g. 15 D) is suspended in glucose-containing DMEM medium and the suspension is adjusted to a content of 25,000 cells/0.05 ml medium. 0.05 ml of the cell suspension is added to each well and the plate is incubated at 37 °C for 90 min . The plate is washed three times with warm PBS to remove unbound cells. The bound cells are lysed in citrate buffer (25 mM, pH 5.0) containing 0.25% Triton X-100. The hexoseamidase substrate p-nitrophenyl-N-acetyl-p-D -glucosaminide is then added and the plate is incubated at 37 °C for 90 min. The reaction is stopped with a glycine (50 mM) EDTA (5 mM) buffer (pH 10.4) and the absorbance in each well is measured at 405-650 mM. Data are analyzed in compliance with standard processes.

De følgende testresultater ble oppnådd: The following test results were obtained:

Claims

1. Acylguanidinderivat, karakterisert ved at det har den generelle formel I: hvor radikalene R<1> og R<2> sammen er et mettet, bivalent (C2-C4)-alkylenradikal; R<4> er hydrogen eller (CrC6)-alkyl, R<5> erfenyl-(CrC6)-alkyl, R<6> er hydrogen, A er CH2 eller O, m er 1,2 eller 3, n er 0 eller 1, i alle dets stereoisomere former og blandinger derav i alle forhold, samt dets fysiologisk tolererbare salter.1. Acylguanidine derivative, characterized in that it has the general formula I: where the radicals R<1> and R<2> together are a saturated, bivalent (C2-C4)-alkylene radical; R<4> is hydrogen or (C1C6)-alkyl, R<5> is phenyl-(C1C6)-alkyl, R<6> is hydrogen, A is CH2 or O, m is 1,2 or 3, n is 0 or 1, in all its stereoisomeric forms and mixtures thereof in all proportions, as well as its physiologically tolerable salts.

2. Acylguanidinderivat ifølge krav 1, - karakterisert ved at R<4> er hydrogen eller (C|-C4)-alkyl, og R5 er benzyl.2. Acylguanidine derivative according to claim 1, - characterized in that R<4> is hydrogen or (C1-C4)-alkyl, and R 5 is benzyl.

3. Acylguanidinderivat ifølge kravene 1 eller 2, karakterisert ved at R og R sammen er et mettet, bivalent (C2-C3)-alkylenradikal, R<4> er hydrogen eller (Ci-C4)-alkyl, og R<5> er benzyl, A er CH2, m er 1, og n er 1.3. Acylguanidine derivative according to claims 1 or 2, characterized in that R and R together are a saturated, bivalent (C2-C3)-alkylene radical, R<4> is hydrogen or (C1-C4)-alkyl, and R<5> is benzyl, A is CH2, m is 1, and n is 1.

4. Acylguanidinderivat ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved at R<1> og R<2> sammen er et mettet, bivalent (C2-C3)-alkylenradikal, R<4> er hydrogen eller (Ci-C4)-alkyl, R5 er benzyl, A er oksygen, m er 1, og n er 1.4. Acylguanidine derivative according to claim 1 or 2, characterized in that R<1> and R<2> together are a saturated, bivalent (C2-C3)-alkylene radical, R<4> is hydrogen or (C1-C4)-alkyl, R 5 is benzyl, A is oxygen, m is 1, and n is 1.

5. Acylguanidinderivat ifølge kravene 1 eller 2, karakterisert ved at R og R sammen er et mettet, bivalent (C2-C3)-alkylenradikal, R<4> er hydrogen eller (CpC^-alkyl, R5 er benzyl, A er oksygen, m er 3, og n er 0.5. Acylguanidine derivative according to claims 1 or 2, characterized by that R and R together are a saturated, bivalent (C2-C3)-alkylene radical, R<4> is hydrogen or (CpC4-alkyl, R 5 is benzyl, A is oxygen, m is 3, and n is 0.

6. (2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(3-(l ,4,5,6-tetrahydropyirmidin-2-ylkarbamoyl)propyloksy)fenyl)propionsyre og dens fysiologisk tolererbare salter.6. (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-3-(4-(3-(1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-ylcarbamoyl)propyloxy)phenyl)propionic acid and its physiologically tolerable salts.

7. (2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(2-( 1,4,5,6-tetrahydropyirmidin-2-ylkarbamoyl)etyl)benzoylamino) propionsyre og dens fysiologisk tolererbare salter.7. (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-3-(4-(2-(1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-ylcarbamoyl)ethyl)benzoylamino)propionic acid and its physiologically tolerable salts.

8. (2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-( (1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-ylkarbamoyl)metyloksy)benzoylamino)propionsyre og dens fysiologisk tolererbare salter.8. (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-3-(4-((1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-ylcarbamoyl)methyloxy)benzoylamino)propionic acid and its physiologically tolerable salts.

9. (2S)-2-benzyloksykarbonylamino-3-(4-(3-(4,5-dihydro-1 H-imidazol-2-ylkarbamoyl)propyloksy)fenyl)propionsyre og dens fysiologisk tolererbare salter.9. (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-3-(4-(3-(4,5-dihydro-1H-imidazol-2-ylcarbamoyl)propyloxy)phenyl)propionic acid and its physiologically tolerable salts.

10. Fremgangsmåte for fremstilling av acylguanidinderivater med den generelle formell: hvor radikalene R<1> og R<2> sammen er et mettet, bivalent (C2-C4)-alkylenradikal, R<4> er hydrogen eller (C|-CeValkyl, R<5> erfenyl-(CrC6)-alkyl, R<6> er hydrogen, A er CH2 eller O, m er 1,2 eller 3, n er 0 eller 1, i alle deres stereoisomere former og blandinger derav i alle forhold, samt deres fysiologisk tolererbare salter, karakterisert ved at en karboksylsyre eller et karboksylsyrederivat med den generelle formel III: hvor R<4>, R<5>, A, n og m er som ovenfor angitt, eller alternativt funksjonelle grupper er til stede i form av forløpere eller i beskyttet form, og X er en nukleofilt substituerbar forlatende gruppe, omsettes med et guanidin eller guanidinderivat med den generelle formel IV: hvor R<1>, R<2> og R<6> er som angitt, eller alternativt funksjonelle grupper er til stede i form av forløpere eller i beskyttet form, og at det oppnådde acylguanidinderivat, om ønsket, overføres til et fysiologisk tolererbart salt.10. Process for the preparation of acylguanidine derivatives with the general formula: where the radicals R<1> and R<2> together are a saturated, bivalent (C2-C4)-alkylene radical, R<4> is hydrogen or (C1-C6Valkyl, R<5> is phenyl-(C1C6)-alkyl, R<6> is hydrogen, A is CH2 or O, m is 1,2 or 3, n is 0 or 1, in all their stereoisomeric forms and mixtures thereof in all proportions, as well as their physiologically tolerable salts, characterized in that a carboxylic acid or a carboxylic acid derivative with the general formula III: where R<4>, R<5>, A, n and m are as indicated above, or alternatively functional groups are present in the form of precursors or in protected form, and X is a nucleophilically substitutable leaving group, is reacted with a guanidine or guanidine derivative of the general formula IV: where R<1>, R<2> and R<6> are as indicated, or alternatively functional groups are present in the form of precursors or in protected form, and that the acylguanidine derivative obtained is, if desired, transferred to a physiologically tolerable salt .

11. Acylguanidinderivat ifølge ett eller flere av kravene 1-9, og/eller dets fysiologisk tolererbare salter, for anvendelse som et farmasøytisk middel.11. Acylguanidine derivative according to one or more of claims 1-9, and/or its physiologically tolerable salts, for use as a pharmaceutical agent.

12. Farmasøytisk preparat, karakterisert ved at ved at det omfatter minst ett acylguanidinderivat ifølge ett eller flere av kravene 1-9, og/eller dets fysiologisk tolererbare salter, sammen med en farmasøytisk aksepterbar bærer.12. Pharmaceutical preparation, characterized in that it comprises at least one acylguanidine derivative according to one or more of claims 1-9, and/or its physiologically tolerable salts, together with a pharmaceutically acceptable carrier.

13. Forbindelse ifølge krav 11, for anvendelse som en vitronektinreseptorantagon-ist.13. Compound according to claim 11, for use as a vitronectin receptor antagonist.

14. Forbindelse ifølge krav 11, for anvendelse som inhibitor av benresorpsjon for terapi eller profylakse av osteoporose.14. Compound according to claim 11, for use as an inhibitor of bone resorption for the therapy or prophylaxis of osteoporosis.

15. Forbindelse ifølge krav 11, for anvendelse som inhibitor av tumorvekst eller tumormetastase.15. Compound according to claim 11, for use as an inhibitor of tumor growth or tumor metastasis.

16. Forbindelse ifølge krav 11, for anvendelse som et antiinflammatorisk middel eller for terapi eller profylakse av kardiovaskulære forstyrrelser, restenose, arteriosklerose, nefropatier eller retinopatier.16. Compound according to claim 11, for use as an anti-inflammatory agent or for therapy or prophylaxis of cardiovascular disorders, restenosis, arteriosclerosis, nephropathies or retinopathies.