NO311361B1 - Peptidderivater, fremgangsmåte for fremstilling, farmasöytisk preparat og anvendelse av peptidderivatene - Google Patents

Peptidderivater, fremgangsmåte for fremstilling, farmasöytisk preparat og anvendelse av peptidderivatene Download PDF

Info

Publication number
NO311361B1
NO311361B1 NO19942066A NO942066A NO311361B1 NO 311361 B1 NO311361 B1 NO 311361B1 NO 19942066 A NO19942066 A NO 19942066A NO 942066 A NO942066 A NO 942066A NO 311361 B1 NO311361 B1 NO 311361B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
cha
pro
nag
hooc
pic
Prior art date
Application number
NO19942066A
Other languages
English (en)
Other versions
NO942066L (no
NO942066D0 (no
Inventor
Ann-Catrine Elis Teger-Nilsson
Ruth Elvy Bylund
Original Assignee
Astra Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Astra Ab filed Critical Astra Ab
Publication of NO942066L publication Critical patent/NO942066L/no
Publication of NO942066D0 publication Critical patent/NO942066D0/no
Publication of NO311361B1 publication Critical patent/NO311361B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C237/06—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C07C279/12—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/022—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2
    • C07K5/0222—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2 with the first amino acid being heterocyclic, e.g. Pro, Trp
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører nye konkurrerende - inhibitorer til trombin, fremstilling derav, farmasøytiske sammensetninger inneholdende forbindelser som aktive ingredienser og anvendelse av forbindelsene som antikoaguleringsmidler for profylakse og behandling av tromboemboliske sykdommer så som venøs trombose, lunge emboli, arteriell trombose, spesielt hjerte infarkt og cerebral trombose, generelle hyper koagulerbare tilstander og lokale hyperkoagulerbare tilstander, for eksempel etter angioplasti og coronare bypass operasjoner.
Oppfinnelsen vedrører også ny anvendelse av en forbindelse som et utgangsmateriale ved fremstilling av en serin protease inhibitor. Oppfinnelsen vedrører videre et nytt strukturelt fragment i en serin protease inhibitor.
Blodkoagulasjonen er hovedprosessen involvert i både haemostase (dvs. forhindring av blodtap fra et skadet kar) og trombose (dvs. patologisk okklusjon av et blodkar med en blodkoagel). Koagulasjon er resultatet av en omfattende serie enzymatiske reaksjoner hvor en av slutt trinnene er omdanning av proenzymet protrombin til det aktive enzymet trombin.
Trombin spiller en sentral rolle i koagulasjonen. Det aktiverer blodplater, omdanner fibrinogen til fibrinmonomerer som polymeriserer spontant til filamenter og aktiverer faktor XIII, som igjen kryssbinder polymeren til uoppløselig fibrin. Trombin aktiverer videre faktor V og faktor VIII i en positiv feed back reaksjon. Inhibitorer av trombin er derfor ventet å være effektive antikoaguleringsmidler ved inhibisjon av blodplater, fibrin dannelse og fibrin stabilisering. Ved inhibering av den positive feed back mekanismen er det ventet at de utviser inhibisjon tydelig i kjeden av hendelser som fører til koagulasjon og trombose.
Inhibitorer av trombin basert på aminosyresekvensen rundt spaltningssetet for fibrinogen Aa kjeden ble først rapportert av Blomback et al i J. Clin. Lab. Invest. 24, suppl 107, 59,
(1969) som foreslo sekvensen Phe-Val-Arg (P9-P2-P1, heri referert til som P3-P2-P1 sekvensen) som beste inhibitor.
I US-PS 4.346.078 (Richter Gedon Vegyeszeti Gyar R T, priority date 7.10.1980) og i Peptides 1983 til Walter de Gruyter & Co, Berlin, s. 643-647, S. Bajusz et al beskrev trombininhibitoren H-DPhe-Pro-Agm, et dipeptidylderivat med en aminoalkylguanidin i Pl-posisjonen.
S. Bajusz et al. rapporterte også i J. Med. Chem. 1990, 33, 1729-1735 og i EP-A20,185,390 (Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar R T) (prioritetsdato 21.12.84) at erstatning av agmatin med et arginin aldehyd ga en trombininhibitor som har mye høyere potens.
Grunnen for den økte aktiviteten til denne trombininhibitoren antas å være forårsaket av interaksjon av aldehydfunksjonen med Ser-OH i aktiveringssetet til enzymet som danner et hemiacetal. Det er ikke mulig å ha samme type interaksjon i dipeptidderivatet H-DPhe-Pro-Agm på grunn av at det ikke har et aminosyrederivat med en karbonylgruppe i Pl posisjonen.
I annet arbeid innen trombin inhibitor feltet innbefatter inhibitorer av serinproteaser som er basert på elektrofile ketoner i stedenfor aldehyder i Pl-posisjonen følgende: E. N. Shaw et al. (Research Corporation) US-4,318,904 (prioritetsdato 25.04.80) som beskriver peptid klor-metyl-ketoner for eksempel H-DPhe-Pro-Arg-CI^Cl. M. Szelke og D.M. Jones i EP-Al-0,118,280 (prioritetsdato 04.03.83) som beskriver forbindelser avledet fra P3 - P2' pentapeptidsekvensen til fibrinogenet Aa kjeden hvor den spaltbare P^ - Pj_' peptidbindingen ble erstattet med -C0-CH2-delen, som danner en ketonisoster til tilsvarende peptider. M. Kolb et al. (Merreil-Dow) EP-A2-0.195.212 (prioritetsdato 04.02.85) beskriver peptidyl a-ketonestere og amider.
B. Imperiali og R.H. Ables, Biochemistry 1986. 25. 3760 beskriver peptidylfluoralkylketoner. D. Schirlin et al. (Merrell-Dow) EP-Al-0.362.002 (prioritetsdato 01.09.88) beskriver fluoralkylamidketoner.
P. Bey et al., (Merrell-Dow) EP-A2-0,364,344 (prioritetsdato 01.09.88) beskriver a,<p>,S-triketo forbindelser.
Ueda et al., Biochem. J. 1990, 265, 539 beskriver også peptidylfluoralkylketoner.
Inhibitorer av trombin basert på C-terminale borsyrederivater av arginin og isotiouroniumanaloger derav er blitt beskrevet av A.D. kettner et al. (Du Pont) EP-A2-0,293,881 (prioritetsdato 05.06.87 og 06.04.88).
En hensikt ifølge foreliggende oppfinnelse er å tilveiebringe nye og potente trombininhibitorer som konkurrerende in-hibitorisk aktivitet mot deres enzym, dvs. forårsaker reversibel inhibisjon. En ytterligere hensikt er å oppnå inhibitorer som er oralt biotilgjengelige og selektive ved inhibering av trombin over andre serin proteaser. Stabilitet, virkningsvarighet og lav toksisitet ved terapeutiske doseringer er ogsp hensikter ifølge oppfinnelsen.
Forbindelser
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen vedrører peptidsekvensen til human fibrinogen Aa kjeden som representerer modifiserte sub-setene Pg, Pg og P^:
Ifølge oppfinnelsen er det blitt oppdaget at forbindelsene med generell formel I, enten slik eller i form av fysio-logiske akseptable salter og innbefattende stereoisomerer, er potente inhibitorer av trombin:
hvor:
A betyr en metylengruppe eller
A betyr etylengruppe og den resulterende 5-leddede ringen kan inneholde en eller to fluoratomer, en hydroksygruppe eller en oksogruppe i posisjon 4, eller er/er ikke umettet, eller
A betyr -CH2-0-, -CH2-S-, -CH2-S0-, med heteroatomfunksjo-naliteten i posisjon 4, eller
A betyr en n-propylengruppe og den resulterende 6-leddede ringen kan bære i posisjon 5 et fluoratom, en hydroksygruppe eller en okso gruppe, bærende to fluoratomer i en av posisjonene 4 eller 5 eller være umettet i posisjon 4 og 5, eller bærer i posisjon 4 en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer, eller
A betyr -CH2-0-CH2-, -CH2-S-CH2-, -CH2-S0-CH2;
R<1> betyr H, en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer, en hydroksyalkylgruppe med 2-3 karbonatomer eller R<1;1->OOC-alkyl-, hvor alkylgruppen har 1 til 4 karbonatomer og R<1-*-> er H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer eller en alkylen-gruppe med 2-3 karbonatomer intramolekylært bundet alfa til karbonylgruppe i R-*-, eller
R<1> betyr R1<2>00C-1,4-fenyl-CH2-, hvor R12 er H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer, eller
R<1> betyr R<13->NH-C0-alkyl-, hvor alkylgruppen har 1 til 4 karbonatomer og er muligens substituert alfa til karbonyl emd en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer og hvor R<*3> er H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer eller-CH2C00R1<2> hvor R*<2> er som definert ovenfor, eller
R<1> betyr -R<12>00C-CH2-00C-alkyl-, hvor alkylgruppen har 1 til 4 karbonatomer og er muligens substituert alfa til karbonyl med en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer og hvor R-'-2 er som definert ovenfor, eller
R1 betyr CH3S02-, eller
R<1> betyr R1<2>OC(0)C(0)- hvor R1<2> er som definert ovenfor, eller
R<1> betyr -CH2P0(0R21<4>)2, -CH2S03H eller -CH2-(5-(1H)-tetrazolyl) hvor R<14> er, individuelt ved hvert tilfelle, H, metyl eller etyl,
R<2> betyr H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer eller R<21>OOC-alkyl-, hvor alkylgruppen har 1 til 4 karbonatomer og er muligens substituert i posisjonen som er alfa til karbonylgruppen, og alfasubstituenten er en gruppe R<22->
(CH2)p-, hvor p = 0-2 og R2<2> er metyl, fenyl, OH, C00R<21> og R<21> er H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer;
m er 0, 1 eller 2, R<3> betyr en sykloheksylgruppe og R<4> betyr H, eller
m er 1 og R<3> betyr en sykloheksyl eller fenylgruppe og R<4 >danner et etylenbro sammen med R-^, eller
m er 1 og R<3> og R<4> er hver en sykloheksyl eller fenylgruppe;
r<5> betyr H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer;
n er et tall 2 til 6 og
B betyr -N(R6 )-C(NH)-NH2, hvor R<6> er H eller en metylgruppe, eller
B betyr -S-C(NH)-NH2, eller -C(NH)-NH2.
En alkylgruppe kan være lineær eller forgrenet dersom ikke annet er angitt. Alkylgrupper med 1 til 4 karbonatomer er metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, i-butyl, s-butyl og t-butyl.
Når ikke-metning blir referert til menes en karbon-karbon dobbelt binding. Forkortelsene er oppført i slutten av beskrivelsen.
Ifølge en foretrukket utførelsesform vedrører oppfinnelsen forbindelser med formel I, hvor R<1> betyr R^OOC-alkyl-, hvor alkylgruppen har 1 til 4 karbonatomer og R<*1> er H. Av disse forbindelsene er forbindelser hvor A er etylen og R^ er H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer, spesielt hvor R<5> er H foretrukket.
Av forbindelsen med formel I er forbindelser hvor R<3> er sykloheksyl, m er 1 eller 2, sepesielt m er 1 og R<4> er H en annen foretrukket subklasse.
En annen foretrukket gruppe av forbindelser er forbindelser hvor A er n-propylen og den resulterende 6-leddede ringen kan i posisjon bære en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer og R<5 >er H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer, spesielt de hvor R<5> er H.
Ifølge en annen foretrukket utførelsesform er n 3.
Forbindelser med formel I med S-konfigurasjon på a-aminosyren i P2-posisjonen er foretrukne og av de forbindelsene som også har R-konfigurasjon på a-aminosyren i P3-posisjonen er spesielt foretrukket. Foretrukne forbindelser ifølge oppfinnelsen er: Eller = el. Av disse forbindelsene er forbindelsene med eksempel nr. 4, 6, 9, 22, 30, 34, 59, 63, 67, 73, 80 og 82 spesielt foretrukne og de med følgende forbindelser er mest foretrukne:
I ovennevnte tabeller av forbindelsene refererer bokstavene /a, /b, /c og /d en vesentlig ren stereoisomer ved karbon-atomet angitt "RellerS". Stereoisomeren kan bli identifisert for hver forbindelse med referanse til den eksperimentelle delen heri. "R,S" refererer til en blanding av stereoisomerer.
Oppfinnelsen vedrører videre ny anvendelse av en forbindelse med formel: som et utgangsmateriale for fremstilling av en serinprotease inhibitor og spesielt for fremstilling av en trombininhibitor. Den kan bli anvendt slik eller kan ha guanidino-gruppen enten monobeskyttet ved S-nitrogen eller avspaltet ved §-nitrogenene eller \, S-nitrogenene, fortrinnsvis med en beskyttende gruppe så som benzyloksykarbonyl. Beskyttelse av noragmatinderivatene blir utført ifølge fremgangsmåten kjent innenfor fagområdet for guanidinoforbindelsene. Denne forbindelsen er betegnet "noragmatin" eller "Nag" heri. Forbindelsen er tidligere blitt beskrevet som en hår-blekingsaksellerator i GB 1,599,324 (Henkel, prioritetsdato 05.02.1977). Det strukturelle fragmentet med formel
har derimot ikke tidligere vært beskrevet som et strukturelt element i en farmasøytisk aktiv forbindelse. Som strukturelt element gir "noragmatin" fragmentet en serin protease inhibitor og spesielt en trombininhibitor.
Medisinsk og farmasøytisk anvendelse
Oppfinnelsen vedrører videre anvendelse av forbindelsene til behandling, av menneske eller dyreorganismer, tilstander hvor inhibisjon av trombin er nødvendig. Forbindelsene ifølge oppfinnelsen er ventet å være nyttige spesielt i dyr, inkludert mennesker for behandling eller profylakse av trombose og hyperkoagulabilitet i blod og vev. Det er videre ventet å være nyttig i situasjoner hvor det er et uønsket overskudd av trombin uten tegn på hyperkoagulabilitet. Sykdomstilstander hvor forbindelsene har en potensiell anvendbarhet er ved behandling og/eller profylakse, inkludert venøs trombose og lungeemboli, arteriell trombose, så som ved hjerteinfarkt, ustabil angina, trombose-basert slag og perifer arteriell trombose. Forbindelsene har ventet anvendbarhet ved profylakse av aterosklerotiske sykdommer så som coronar arteriell sykdom, cerebral arteriell sykdom og perifer arteriell sykdom. Forbindelsene er ventet å være nyttige sammen med trombolytiske midler i trombose sykdommer, spesielt hjerteinfarkt. Forbindelsene har videre ventet anvendbarhet i profylakse for reokklusjon etter trombolyse, perkutan trans-luminal angioplasti, (PTCA) og coronare bypass operasjoner. Forbindelsene har videre ventet anvendbarhet for forhindring av retrombose etter mikrokirurgi. Forbindelsene er ventet å være nyttige for antikoagulerings-behandling i sammenheng med kunstige organer og hjerte-klaffer. Forbindelsene har videre ventet anvendbarhet ved antikoaguleringsmiddel behandling i haemodialyse og dis-seminert intravaskulær koagulasjon.
En annen ventet anvendbarhet er ved skylling av kateteret av mekaniske innretninger anvendt i pasienter in vivo, og som et antikoaguleringsmiddel for konservering av blod, plasma og andre blodprodukter in vitro.
Farmasøytiske preparater
Forbindelsene med formel I vil normalt bli administrert oralt, rektalt, dermalt, nasalt eller parenteralt i form av farmasøytiske preparater omfattende det aktive ingredienset enten som en fri base eller et farmasøytisk akseptabelt ikke-toksisk syreaddisjonssalt, for eksempel hydroklorid, hydrobromid, laktat, acetat, sitrat, p-toluensulfonat, trifluoracetat og lignende i en farmasøytisk akseptabel doseringsform.
Doseringsformen kan være et fast, halvfast eller flytende preparat fremstilt ifølge kjente teknikker. Vanligvis vil den aktive forbindelsen utgjøre mellom 0,1 og 99 vekt-# av preparatet, mer spesifikt mellom 0,1 og 50 vekt-# for preparatet ment for parenteral administrering og mellom 0,2 og 75 vekt-# for preparatene egnet for oral administrering.
Egnede daglige doser av forbindelsene ifølge oppfinnelsen ved terapeutisk behandling av mennesker er omtrent 0,001-100 mg/kg kroppsvekt ved peroral administrering og 0,001-50 mg/kg kroppsvekt ved parenteral administrering.
Fremstilling
En annen hensikt ifølge oppfinnelsen er en fremgangsmåte for fremstilling av forbindelsene kjennetegnet ved å koble en N-terminalt beskyttet aminosyre eller dipeptid eller et fordannet, N-terminalt alkylert beskyttet dipeptid til en forbindelse
H2N-(C<H>2)n-X
hvor n er et tall 2-6 og X er en ubeskyttet eller beskyttet guanidinogruppe eller en beskyttet aminogruppe, eller en gruppe som kan overføres til en aminogruppe, hvor amino-
gruppen deretter blir overført til en guanidinogruppe, og om ønskelig dannes et fysiologisk akseptabelt salt, og i de tilfellene hvor reaksjonen resulterer i en blanding av stereoisomerer, blir disse eventuelt separert ved standard-kromatografiske eller rekrystalliseringsteknikker, og om ønskelig blir en enkel stereoisomer isolert.
Koblingen blir dermed utført ved en av følgende metoder:
Metode I
Kobling av et N-terminalt beskyttet dipeptid, fremstilt ifølge standard peptidkobling, med enten et beskyttet eller ubeskyttet aminoguanidin eller en rettkjedet alkylamin som bærer en beskyttet eller maskert aminogruppe ved den terminale enden av alkylkjeden ved anvendelse av standard peptid kobling, vist i formelen hvor R<3>, R<4>, R<5>, n, m og A er som definert i formel I, R^ er H eller alkyl, er en amino beskyttende gruppe så som tertiær metoksykarbonyl og benzyloksykarbonyl og X er -NH-C(NH)N<H>2, -NH-C(NH)NH-W2, -N(W2 )-C(NH)NH-W2, -NH-C(NW2 )NE-W2 eller -NH-W2, hvor W2 er en aminbeskyttende gruppe så som tertiær metoksykarbonyl eller benzyloksykarbonyl, eller X er en maskert aminogruppe så som azid, for å tilveiebringe det beskyttede peptidet. Sluttforbindelsene kan bli fremstilt på hvilke som helst av de følgende måtene, avhengig av naturen til X- gruppen som blir anvendt: fjerning av den beskyttende gruppen(ene) (når X= -NH-C(NH)NH2, -N(w2)-C(NH)NH-W2, -NH-C(Nw2)NH-W2 eller -NH-C(NH)NH-w2), eller en selektiv avspaltning av -gruppen (for eksempel når X= -NH-C(NH)NH-W2, -N(W2)-C(NH)NH-W2, -NH-C(NW2)NH-W2, w2 i dette tilfellet må være orthogonal for ) etterfulgt av alkylering av det N-terminale nitrogen og avspaltning eller en selektiv avspaltning/av-maskering av den terminale alkylaminofunksjonen (X=NH-W2, W2 må i dette tilfellet være orthogonalt for W 2 eller X= en maskert aminogruppe, så som azid) etterfulgt av en guanideringsreaksjon, ved anvendelse av standardmetoder, av det frie aminet og avspaltning av W^-gruppen.
Metode II
Kobling av en N-terminalt beskyttet aminosyre fremstilt ifølge standardmetoder, med enten et beskyttet eller avspaltet aminoguanidin eller et lineært alkylamin inneholdende en beskyttet eller maskert aminogruppe ved den terminale enden av alkylkjeden ved anvendelse av standardpeptidkobling vist i formelen hvor Wi, Å, R55 og X er som definert ovenfor etterfulgt av avspaltning av W^-gruppen og kobling med den N-terminale aminosyren, i en beskyttet form, som fører til det beskyttede peptidet beskrevet i fremgangsmåte I eller fremgangsmåte III, avhengig av valg av substitusjonspartneren på nitrogenet til den N-terminale aminosyren anvendt i koblingen. Syntesen blir deretter fortsatt ifølge metode I eller metode III for å tilveiebringe sluttpeptidene.
Metode III
Kobling av et fordannet N-terminalt alkylert og beskyttet dipeptid, fremstilt ved standardpeptidkobling, med enten et beskyttet eller ubeskyttet aminoguanidin eller en lineær kjede alkylamin som bærer en beskyttet eller maskert aminogruppe ved den terminale enden av alkylkjeden ved anvendelse av standardpeptid kobling, vist i formelen hvor R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, n, m, A og X er definert som ovenfor forutsatt at R<2> er forskjellig fra H og W3 er en acyl-beskyttende gruppe så som trifluoracyl.
Sluttforbindelsene kan bli fremstilt på hvilke som helst av følgende måter avhengig av naturen til X-gruppen som blir anvendt: fjerning av beskyttende grupper (når X = NH-C(NH)NH2> NH-C(NH)NH-W2, N(W2)-C(NH)NH-W2, NH-C(NW2)NH-W2 eller NH-W2) eller en selektiv avspaltnings/ikke-maskering av den terminale alkylamino funksjonen (X = NH-W2, W2 må i dette tilfellet være orthogonalt for V/3 eller X = en maskert aminogruppe så som azid) etterfulgt av en guaniderings-avspaltning av W3 gruppen.
Følgende beskrivelse skal illustrere aspektene ifølge oppfinnelsen.
Eksperimentell del
Fremstilling av forbindelsene ifølge oppfinnelsen er illustrert i skjemaene I til VI.
Generelle eksperimentelle prosedyrer
NMR og <13>C NMR målingene ble utført på BRUKER AC-P 300 og BRUKER AM 500 spektrometerene, i det førstnevnte blir drevet ved en ^-H frekvens på 500.14 MHz og en <13>C frekvens på 125.76 MHz og sistnevnte ved <*>H og <13>C frekvenser av henholdsvis 300.13 MHz og 75.46 MHz.
Prøvene inneholdt 10-50 mg løst opp i 0,6 ml av en av følgende oppløsningsmidler; CDCI3 (isotopisk renhet > 99,8$, Dr. Glaser AG Basel), CD3OD (isotopisk renhet > 99,95$, Dr. Glaser AG Basel) eller D20 (isotopisk renhet > 99,98$, Dr. Glaser AG Basel).
<*>H og <13>C kjemiske skiftverdier i CDCI3 og CD3OD er relativt til tetrametylsilan som en ytre standard. ^H kjemiske skift i D20 er relativt til natriumsaltet av 3-(trimetylsilyl)-d4~ propansyre og <13>C kjemiske skift i D20 blir referert relativt til 1,4-dioksan (67,3 ppm), begge som ytre standarder. Kalibrering med en ytre standard kan i noen tilfeller forårsake mindre skiftforskjeller sammenlignet med en indre standard, men forskjellen i ^-H kjemisk skift er mindre enn 0,02 ppm og i <13>C mindre enn 0,1 ppm. -'-H NMR spekteret til peptidsekvensene inneholdende en prolinrest utviser ofte to sett av resonanser. Dette tilsvarer til eksistensen av to bidragende konformeringer som med hensyn på rotasjon rundt amidbindingen var prolin i N-delen av amidbindingen. Formene blir betegnet cis og trans. I våre forbindelser gir sekvensene (R)Cha-Pro- og (R)Cha-Pic-ofte opphav til en cis-trans likevekt med en form som viktigste form (>90$). I de tilfellene blir bare ^H kjemiske skift av hovedrotamer rapportert.
Tynnsjiktskromatografi ble utført på kommersiell merck Silicagel 60F254 belagt glass eller aluminiumplater. Visualisering var ved en kombinasjon av UV-lys etterfulgt av spraying med en oppløsning dannet ved blanding av 372 ml EtOH (95$), 13,8 ml konsentrert H2S04, 4,2 ml konsentrert eddiksyre og 10,2 ml p-metoksybenzaldehyd eller fosfo-molybdensyrereagens (5-10 vekt-$ i EtOH (95$)) og oppvarming. Flammekromatografi ble utført på Merck Silicagel 60 (40-63 mm, 230-400 mesh) under Ng trykk.
Revers fase høy-ytelse væskekromatograf1 (i eksemplene referert til som RPLC) ble utført på et Waters M-590 instrument utstyrt med tre revers fase Kromasil 100, C8 kolonner (Eka-Nobel) med forskjellige dimensjoner for analytisk (4,6 mm x 250 mm), semipreparativ (1" x 250 mm) og preparativ (2" x 500 mm) kromatografi detektering ved 226 nm.
Frysetørking ble utført på en Leybold-Heraeus, modell Lyovac GT 2, apparatur.
Beskyttelsesprosedyrer
Boc-(R)Cha-0H
Til en oppløsning av H-(R)Cha-0H, 21,55 g (125,8 mmol) i 130 ml 1 M NaOH og 65 ml THF ble det tilsatt 30 g (137,5 mmol)
(Boc)20 og blandingen ble omrørt i 4,5 timer ved romtemperatur. THF ble avdampet og ytterligere 150 ml vann ble tilsatt. Den alkaliske vandige fasen ble vasket to ganger med EtOAc og deretter surgjort med 2 M KHSO4 og ekstrahert med 3 x 150 ml EtOAc. Den kombinerte organiske fasen ble vasket med vann, saltvann og tørket (Na2S04). Avdampning av oppløsnings-middelet ga 30,9 g (90,5 $) av tittelf orbindelsen som et hvitt fast stoff.
Z-(R)Cha-0H
Samme prosedyre som beskrevet i Bodanszky M. og Bodanszky A. "The Practice of Peptide Synthesis", Springer-Verlag, 1984, s. 12, ble anvendt begynnende med H-(R)Cha-0H.
Boc-(Me)Phe-0H
Fremstilt på samme måte som Boc-(R )Cha-0H fra Me-(R)Phe-0H.
Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-OH
Til en godt omrørt oppløsning av 2,0 g (8,8 mmol, 1 ekv. ) H-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-0H x HC1 (fremstilt som beskrevet i J. Org. Chem., 55, s. 270-75, 1990 og J. Org. Chem., 39, 1710-1716, 1974), i 17,6 ml IN NaOH, 12 ml H20 og 12 ml THF ved +5°C ble det tilsatt 2,33 g (Boc)20 (10,7 mmol, 1,2 ekv.). Reaksjonen ble latt stå ved romtemperatur og omrøringen ble fortsatt i ytterligere 18 timer. Det organiske oppløsnings-middelet ble avdampet og 40 ml H20 ble tilsatt til resten. Den basiske vannfasen ble vasket med 2 x 50 ml EtOAc og surgjort med 2 M KHS04 (pH omtrent 1). Den sure vannfasen ble ekstrahert med 4 x 75 ml EtOAc og den kombinerte organiske fasen ble vasket med 1 x 40 ml H20, 1 x 40 ml saltvann og tørket (MgS04). Avdampning av oppløsningsmiddelet ga 2,0 g (78$) av det rene produktet som et hvitt fast stoff.
1H-NMR (CDCI3, 50 MHz, blanding av to rotamerer: S 1,4 og 1,5 (2s, 9H), 2,0-2,1 (m, 1H), 2,3-2,4 (m, 1H) , 3,45-3,88 (m, 3H), 4,3 og 4,45 (2d, 1H), 7,2-7,4 (m, 5H).
Boc-(R,S)Pro(3-Ph)-0H
Fremstilt som ovenfor begynnende fra en cis/trans blanding av H-(R,S)Pro(3-Ph)-0H.
Boc-(R)Dph-OH
Fremstilt ifølge samme fremgangsmåte som beskrevet for K. Hsich et al. i J. Med. Chem., 32. s. 898 (1989) fra H-(R)Dph-OH.
Boc-(R)Hop-0H
Fremstilt ifølge samme fremgangsmåte som beskrevet for Boc-(R)Cha-OH begynnende fra H-(R)Hop-0H.
%-NIVIR (300 MHz, CDC13): å 1,45 (s, 9H) , 2,00 (m, 1H) , 2,22 (m, 1H), 2,75 (bt, 2H), 4,36 (bs, 1H), 5,05 (bs, 1H), 7,15-7,33 (m, 5H).
Avspaltningsprosedyrer
(a) Det beskyttede peptidet ble løst opp i EtOH (95$) og hydrogenert over 5$ Pd/C ved atmosfærisk trykk i nærvær av et overskudd TFA eller HOAc (> 2 ekv.) i omtrent 1-4 timer. Katalysatoren ble filtrert ut, oppløsningsmiddelet avdampet og sluttpeptidet (TFA eller HOAc saltet) ble isolert som et hvitt pulver etter frysetørking (HgO) (b) samme som i (a) med unntagelse av at EtOH/HgO (ca 5:1) ble anvendt som oppløsningsmiddel. (c) Samme prosedyre som i (a), men MeOH ble anvendt som oppløsningsmiddel. (d) Samme prosedyre som i (a), men 2 M HC1 ble anvendt som syre for å gi HCl-saltet. (e) Hydrolyse av esterene, et illustrerende eksempel: Et00C-CH2-(R )Cha-Pro-Nag x 2 HOAc (0,4 mmol) ble løst opp i 1,5 ml MeOH og 1,2 ml (1,2 mmol) 1 M NaOH ble tilsatt ved romtemperatur. Etter 3 timer ble metanol avdampet og et overskudd HOAc ble tilsatt til resten og blandingen ble frysetørket og renset ifølge RPLC (CH3CN/0,1 M NH40Ac (70/30)). Det rene produktet ble oppnådd som et pulver i 73$ utbytte etter frysetørking fra vann. (f) Spaltning av t-butylestere, et illustrerende eksempel: t-butylester ble løst opp i et overskudd TFA. Etter omrøring i 2 timer ved romtemperatur ble TFA avdampet. Rensing ved behandling med aktivert trekull i vann-etanol ble etterfulgt
av frysetørking fra vann for å tilveiebringe de ønskede forbindelsene.
Fremstilling av utgangsmaterialene
H-Pic-OEt x HC1
L-pipecol insyre, 4,0 g (0,031 mol) ble oppslemmet i 100 ml abs. etanol og HC1 (g) ble forsiktig boblet gjennom helt til en klar oppløsning ble oppnådd. Den ble avkjølt i et isbad og 17 ml tionylklorid ble dråpevis tilsatt over 15 min. Isbadet ble fjernet og blandingen ble tilbakestrømmet i 2,5 timer. Oppløsningsmiddelet ble avdampet og produktet ble oppnådd som hydrokloridsaltet i et kvantitativt utbytte.
<i>H-NMR (300 MHz, D20): S 1,33 (t, 3H), 1,8-2,1 (m, 5H), 2,3-2,5 (m, 1H), 3,1-3,3 (m, 1H), 3,5-3,7 (m, 1H), 4,14 (dd, 1H), 4,44 (q, 2H).
H-Pic-OMe x HC1
Fremstilt på samme måte som beskrevet for H-Pic-OEt x HC1 ved erstatning av EtOH med MeOH.
H-Aze-OEt x HC1
Fremstilt på samme måte som beskrevet for H-Pic-OEt x HC1 fra H-Aza-OH.
H-Pic(4-(S)Me)-0Et x HC1
Fremstilt på samme måte som beskrevet for H-Pic-OEt x HC1 fra H-(R)Pic(4-(R)Me)0H (oppnådd fra Synthelec, Lund, Sverige).
H-(R)Dph-0H
Fremstilt ifølge den generelle metoden til A. Evans et al. 0 JACS, 112, 4011 (1990).
H-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-0Et
H-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-OH, 3,05 g (18,1 mmol) (fremstilt ifølge fremgangsmåten til Burgstahler et al. J. org. Chem. 25, 4, s. 489-92 (1960), ble løst opp i 75 ml EtOH/HCl (mettet) og blandingen ble tilbakestrømmet i 5 timer. Oppløsningsmiddelet ble avdampet og den gjenværende resten ble løst opp i vann, gjort alkalisk med natriumhydroksid (aq) og ekstrahert tre ganger med etylacetat. Tørking (NagSO^ og forsiktig avdampning ga 2,05 g (71$) av tittelforbindelsen.
^-NMR (CDC13): S 1,28 (t, 3H), 1,88 (bs, NH), 2,2-2,4 (m, 2H), 3,45 (bs, 2H), 3,57 (dd, 1H), 4,21 (q, 2H), 5,68-5,82 (m, 2H).
Boc-(R)Cgl-0H
Boc-(R)Pgl-0H ble hydrert over 5$ Rh/Al203 i MeOH ved 5 MPa. Filtrering og avdampning av oppløsningsmiddelet ga tittelforbindelsen som ble anvendt uten ytterligere rensning.
<1>H-NMR (300 MHz, CDCI3): 5 0,9-1,7 (m, 20H), 4,0-4,2 (m, 1H), 5,2 (d, 1H).
Boc-(R)Dch-0H
Boc-(R)Dph-0H, 0,75 g (2,2 mmol) ble løst opp i 25 ml MeOH og en katalytisk mengde 5$ Rh/Al203 ble tilsatt. Blandingen ble hydrert ved 5 MPa, 50°C i 40 timer, filtrert og avdampet til 0,72 g (93$) av tittelforbindelsen.
<1>H-NMR (CDCI3): å 0,9-2,0 (m, 32H), derav 1,45 (bs, 9H), 4,55 (bd) og 4,9 (bd), to rotamerer integrerte i totalt 1H, 5,7-6,1 (bred, NH).
H-(R)Pro(5-(S)Me)-OMe
Fremstilt ifølge fremgangsmåten til B. Gopalan et al. i J. Org. Chem., 51, 2405, (1986).
H-Mor-OH
Fremstilt ifølge fremgangsmåten til K. Nakajima et al. Bull. Chem. Soc. Jpn., 51 (5), 1577-78, 1978 og ibid 60, 2963-2965, 1987.
H-Mor-OEt x HC1
Fremstilt på samme måte som H-Pic-OEt x HC1 fra H-Mor-OH.
Boc-(R)Cha-0Su
Boc-(R)Cha-0H (1 ekv.), HOSu (1,1 ekv.) og DCC eller CME-CDI (1,1 ekv.) ble løst opp i acetonitril (omtrent 2,5 ml/mmol syre) og omrørt ved romtemperatur over natt. Presipitatet som ble dannet i løpet av reaksjonen ble filtrert ut, opp-løsningsmiddelet avdampet og produktet tørket i vakuum. (Når CME-CDI ble anvendt i reaksjonen ble resten etter avdampning av CH3CN løst opp i EtOAc og den organiske fasen vasket med vann og tørket. Avdampning av oppløsningsmiddelet ga tittelforbindelsen).
<X>H-NMR (500 MHz, CDC13, 2 rotamerer ca: 1:1 forhold) S 0,85-1,1 (m, 2H), 1,1-1,48 (m, 4H) , 1,5-1,98 (m, 16H, derav 1,55 (bs, 9H)), 2,82 (bs, 4H), 4,72 (bs, 1H, hoved rotamer), 4,85 (bs, 1H, mindre).
Boc-(Me)(R)Cha-0Su
(i) Boc-(Me)(R)Cha-0H
En oppløsning bestående av 11,9 g (42,6 mmol) Boc-(Me)(R)Phe-OH i 150 ml MeOH ble hydrogenert over 5$ Rh/Al203 ved 0,28 MPa i 24 timer. Filtrering av katalysatoren og avdampning av oppløsningsmiddelet ga produktet som et hvitt fast stoff (95$ utbytte) som ble anvendt i det følgende trinnet uten ytterligere rensning.
<1>H-NMR (500 MHz, CDC13, blanding av to rotamerer ca: 1/1). S 0,8-1,1 (m, 2H), 1,1-1,9 (m, 20H derav 1,47 og 1,45 (s, 9H), 2,82 og 2,79 (s, total 3H), 4,88 og 4,67 (m, total 1H).
(ii) Boc-(Me)(R)Cha-0Su
Fremstilt på samme måte som beskrevet for Boe-(R )Cha-0Su- fra Boc-(Me)(R)Cha-0H.
Boc-(R)Cha-Pro-0Su
(i) Boc-(R)Cha-Pro-0H
H-(S)Pro-0H (680 mmol) ble løst opp i 0,78M natriumhydroksid (750 ml). Boc-(R)Cha-0Su (170 mmol) løst opp i DMF (375 ml) og tilsatt dråpevis i løpet av 20 min. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 20 timer. Blandingen ble surgjort (2M KHSO4) og ekstrahert tre ganger med etylacetat. De organiske lagene ble kombinert og vasket tre ganger med vann og en gang med saltvann. Etter tørking over natriumsulfat og avdampning av oppløsningsmiddelet ble den sirup-holdige oljen løst opp i dietyleter, oppløsningsmiddelet avdampet og til slutt ble produktet tørket i vakuum for å tilveiebringe Boe-(R)Cha-Pro-0H som et hvitt pulver i et nesten kvantitativt utbytte.
^-H-NMR (500 MHz, CDCI3, mindre rotamer 10$) 5 0,8-1,05 (m, 2H), 1,05-1-55 (m, 15H, derav 1,5 (bs, 9H)), 1,55-1,8 (m, 5H), 1,8-2,15 (m, 3H), 2,47 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 3,89 (m,
1H), 4,55 (m, 2H), 5,06 (m, 1H), mindre rotamer signaler 2,27 (m, 1H), 3,58 (m, 1H), 4,33 (m, 1H), 5,0 (m, 1H)
(ii) Boc-(R)Cha-Pro-0Su
Fremstilt på samme måte som beskrevet for Boc-(R)Cha-0Su- fra Boe-(R)Cha-Pro-0H. -^H-NMR (500 MHz, CDC13, 2 rotamerer, 5:1 forhold) S 0,78-1,05 (m, 2H), 1,05-1,83 (m, 20H, derav 1,43 (bs, 9H) ), 1,83-2,26 (m, 3H), 2,32 (m, 1H), 2,72-2,9 (m, 4H), 3,2 (m, 1H), mindre rotamer), 3,52 (m, 1H hoved), 3,68 (m, 1H, mindre rotamer=, 3,89 (m, 1H hoved), 4,31 (bq, 1H, mindre rotamer), 4,56 (bq, 1H, hoved), 4,71 (bt, 1H, hoved rotamer), 4,93 (bt, 1H, mindre), 5,22 (bd, 1H, hoved rotamer), 5,44 (bd, 1H, mindre).
Z-(R)Cha-Pro-OSu
Fremstilt på samme måte som Boc-(R )Cha-Pro-Psu fra Z-(R)Cha-OH.
Boc-(R)Cha-Pic-0Su
(i) Boc-(R )Cha-Pic-0Et
Boc-(R)Cha-0H, 6,3 g (0,023 mol) ble løst opp i 150 ml CHgClg. Oppløsningen ble avkjølt i et isbad og 6,3 g (0,047 mol) N-hydroksybenzotriazol og 11,2 g (0,0265 mol) CME-CDI ble tilsatt. Isbadet ble fjernet etter 15 min. og reaksjonsblandingen ble omrørt i 4 timer ved romtemperatur. Opp-løsningsmiddelet ble avdampet og resten løst opp i 150 ml DMF og avkjølt i et isbad. H-Pic-OEtxHCl, 4,1 g (0,021 mol) ble tilsatt og pH justert til omtrent 9 ved tilsetning av N-metylmorfol in. Isbadet ble fjernet etter 15 min. og reaksjonsblandingen ble omrørt i 3 dager. Oppløsningsmiddelet ble avdampet og resten ble løst opp i etylacetat og vasket med fortynnet KHSO4 (aq), NaHCOs (aq) og vann. Det organiske laget ble tørket (NagSO^) og avdampet til 7,7 g (89$) Boc-(R)Cha-Pic-OEt som ble anvendt uten ytterligere rensning.
<1>H-NMR (500 MHz, CDC13, 2 rotamerer, 3:1 forhold) S 0,7-1,0 (m, 2H), 1,1-1,9 (m, 29H, derav 1,28 (t, 3H) ) , 1,45 (bs, 9H), 2,01 (bd, 1H, hoved rotamer), 2,31 (bd, 1H) , 2,88 (bt, 1H, mindre), 3,30 (bt, 1H, hoved), 3,80 (bd, 1H, hoved), 4,15-4,3 (m, 2H), 4,5-4,7 (m, 2H, mindre), 4,77 (bq, 1H, hoved), 4,90 (bd, 1H, mindre), 5,28 (bd, 1H, hoved), 5,33 (bd, 1H, hoved).
(ii) Boc-(R)Cha-Pic-OH
Boc-(R)Cha-Pic-OEt, 5,6 g (0,014 mol) blandet med 100 ml THF, 100 ml vann og 7 g LiOH. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur over natt. THF ble avdampet og den vandige oppløsningen ble surgjort med KHSO4 (aq) og ekstrahert tre ganger med etylacetat. Den kombinerte organiske fasen ble vasket med vann, tørket (^3804) og avdampet til 4,9 g (94$) Boe-(R )Cha-Pic-0H som ble anvendt uten ytterligere rensning. Forbindelsen kan bli krystallisert fra diisopropyl eter/- heksan.
1-H-NMR (500 MHz, CDCI3, 2 rotamerer, 2,5:1 forhold) S 0,8-1,1 (m, 2H), 1,1-2,1 (m, 27H; derav 1,43 (s, 9H, hoved rotamer), 1,46 (s, 9H, mindre)), 2,33 (bd, 1H), 2,80 (bt, 1H, mindre), 3,33 (bt, 1H, hoved), 3,85 (bd, 2H, hoved), 4,57 (bd, 1H mindre), 4,68 (m, 1H, mindre), 4,77 (bq, 1H, hoved), 5,03 (bs, 1H, mindre), 5,33 (bd, 1H, hoved), 5,56 (m, 1H, hoved).
(iii) Boc-(R)Cha-Pic-0Su
Boc-(R)Cha-Pic-OH (1 g, 2,6 mmol) ble løst opp i DMF (15 ml) ved romtemperatur og deretter avkjølt til -18°C, en temperatur som ble opprettholdt i løpet av tilsetning av reak-tantene. Hydroskysuccinimid (0,60 g, 5,2 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt i noen minutter helt til krystallene var oppløst. Disykloheksylkarbodiimid (0,56 g, 2,7 mmol) oppløst i DMF (10 ml) og foravkjølt og ble tilsatt dråpevis til reaksjonsblandingen. Etter noen få minutter ved -18" C ble reaksjonsblandingen plassert i et vannbad ved 20°C 1 2 timer under omrøring. Oppløsningsmiddelet ble avdampet, etylacetat (40 ml) ble tilsatt og presipitert urea ble filtrert ut. Den organiske fasen ble vasket en gang med vann, to ganger med 0,3 MKHSO4, to ganger med fortynnet NaHC03, en gang vann, en gang med saltvann og tørket (^3804). Opp-løsningsmiddelet ble avdampet og produktet tørket i vakuum for å tilveiebringe 1,16 g (93$) av produktet. Ifølge ^-H-NMR Inneholdt produktet to diastereomerer (epimerer i Pic, S/R) i et forhold på 95/5.
<i>H-NMR (300 MHz, CDC13, hoved diastereomer) S 0,7-2,0 (m, 27H, derav 1,46 (bs, 9H)), 2,29 (bd, 1H), 2,85 (bs, 4H), 3,40 (m, 1H), 4,5-4,8 (m, 1H), 5,1-5,4 (m, 1H), 5,70 (bd, 1H, hoved).
Boc-(R )Cha-Mor-0Su
Fremstilt på samme måte som Boc-(R)Cha-Pic-OSu fra H-Mor-OEt x HC1 med unntagelse av at CH3CN ble anvendt som oppløsnings-middel i stedenfor DMF ved dannelsen av OSu-esteren.
Boe-(Me)(R )Cha-Pro-0Su
Fremstilt på samme måte som Boc-(R)Cha-Pro-0Su fra Boc-(Me)-(R)Cha-OH.
Boc-(Me)(R)Cha-Pic-0Su
Fremstilt på samme måte som Boc-(R )Cha-Pic-OSu fra Boc-(Me)(R)Cha-0H.
Boc-(R,S)Pro(3-Ph)-Pro-0Su
Fremstilt på samme måte som Boc-(R)Cha-Pro-0su fra Boc-(R,S)Pro(3-Ph)-0H.
Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Osu
(i) Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-0Bn
Til en oppslemning av 1,0 g Boe-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-0H (3,43 mmol, 1 ekv.)- 1,04 g H-Pro-OBn x HC1 (4,29 mmol, 1,25 ekv.), 0,04 g HOBt (0,24 mmol, 0,07 ekv.) i 15 ml DMF ble tilsatt 1,83 g CME-CDI (4,29 mmol, 1,25 ekv.) og 0,525 ml NMM (4,73 mmol, 1,38 ekv.) ved romtemperatur. Etter omrøring i ytterligere 4 dager ble oppløsningsmiddelet avdampet og resten tatt opp i 200 ml EtOAc. Den organiske fasen ble vasket med 2x40 ml H20, 2x25 ml IM KHS04, 2x25 ml IM NaOH, 2x25 ml HgO og tørket (MgS04). Avdampning av oppløsnings-middel og flammekromatografi (CHgClg/MeOH, 97/3) ga det rene produktet (44$ utbytte) som en ca: 1:1 blanding av diastereomerer.
(ii) Boc-(R,S)Pro(3-(trans )Ph)-Pro-0H
Benzylester fra det tidligere trinnet ble fjernet ved hydrogenering over 5$ Pd/C i EtOH ved atmosfærisk trykk i 4 timer. Filtrering og avdampning ga det rene produktet som en ca: 1:1 blanding av diastereomerer i kvantitativt utbytte.
<1->H-NMR (CDCI3, 500 MHz, to diastereomerer hver bestående av to rotamerer: S 1,3-2,4 (m + 4s fra Boe gruppene, total 14H), 2,5-2,9 (m, total 1H) , 3,2-3,9 (m, total 5H), 4,3-4,65 (m, total 2H), 7,2-7,5 (m, 5H).
(iii) Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-0Su
Fremstilt ifølge fremgangsmåten beskrevet for Boc-(R)Cha-0Su fra Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-0H.
Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-0Su
(i ) Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-OH
Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-0H ble hydrogenert over 5$ RI1/AI2O3 i metanol sammen med en liten mengde HOAc i 7 dager ved 0,34 MPa. Filtrering av katalysatoren, avdampning av oppløsningsmiddelet og flammekromatografu (CHgClg/MeOH, 94/6 ga det rene produktet som et hvitt fast stoff (blanding av to diastereomerer).
(ii) Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-0Su
Fremstilt ifølge fremgangsmåten beskrevet for Boc-(R )Cha-0Su fra Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-0H.
Boc-(R)Hoc-Pro-0H
(i ) Boc-(R)Hoc-0H
Boc-(R)Hop-0H, 3,2 g (11,46 mmol) ble løst opp i metanol (75 ml). Rhodium på aktivert aluminiumoksid (Rh/Al203), 0,5 g ble tilsatt og blandingen omrørt i hydrogenatmosfære ved 0,41 MPa i 18 timer. Katalysatoren ble filtrert av gjennom celit og oppløsningsmiddelet avdampet og ga produktet i nesten kvantitativt utbytte.
<1>H-NMR (500 MHz, CDCI3): § 0,90 (m, 2H), 1,08-1,33 (m, 6H), 1,43 (s, 9H), 1,60-1,74 (m, 6H) , 1,88 (bs, 1H), 4,27 (bs, 1H) .
(ii) Boc-(R)Hoc-0Su
Fremstilt på samme måte som beskrevet for Boc-(R )Cha-0Su fra Boc-(R)Hoc-0H.
(iii) Boc-(R)Hoc-Pro-OH
Fremstilt på samme måte som beskrevet for Boc-(R )Cha-Pro-OH fra Boc-(R )Hoc-0Su.
<i>H-NMR (500 MHz, CDC13): S 0,80-0,94 (m, 2H), 1,05-1,36 (m, 7H), 1,36-1,48 (bs, 9H), 1,48-1,78 (m, 7H), 1,98-2,14 (m, 2H), 2,34 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,52 (bd, 1H), 5,26 (bd, 1H), signaler fra en mindre rotamer fremkom ved: S 1,92, 2,25, 3,58, 4,20 og 4,93.
Boc-(R)Hoc-Pic-OH
(i) Boc-(R)Hoc-Pic-0Me
Fremstilt på samme måte som beskrevet for Boc-(R)Cha-Pic-OEt fra Boc-(R )Hoc-0H og H-Pic-OMe x HC1-
(ii) Boc-(R)Hoc-Pic-OH
Fremstilt på samme måte som beskrevet for Boc-(R )Cha-Pic-0H fra Boc-(R)Hoc-Pic-0Me.
<i>H-NMR (500 MHz, CDCI3): § 0,82-0,97 (m, 2H), 1,10-1,36 (m, 7H), 1,36-1,50 (bs, 9H), 1,50-1,82 (m, 11H), 2,35 (bd, 1H), 3,28 (bt. 1H), 3,85 (bd, 1H), 4,63 (m, 1H), 5,33 (bs, 1H), 5,44 (bd, 1H), signaler fra en mindre rotamer fremkom ved: S 1,88, 2,80, 4,25, 4,55 og 4,97.
Boc-(R )Cha-Aze-0H
Fremstilt på samme måte som beskrevet for Boc-(R)Cha-Pic-0H fra H-Aze-OEt X HC1.
Boc-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-0H
Fremstilt på samme måte som beskrevet for Boc-(R)Cha-Pic-0H fra H-Pic(4-(S)Me)-0Et x HC1 med unntagelse av at CH2C12 ble anvendt som oppløsningsmiddel.
Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-0Su
(i) Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-0Et
Fremstilt på samme måte som beskrevet for Boc-(R)Cha-Pic-OEt fra H-(R)Pic(4-(R)Me)-0Et x HC1.
(ii )Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-0H
Fremstilt ved anvendelse av avspaltning (e) på produktet (i) ovenfor.
(iii ) Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)0Su
Fremstilt på samme måte som beskrevet for Boc-(R)Cha-Pic-OSu fra Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)]VIe)-0H.
Boe-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-0H
Fremstilt ifølge fremgangsmåten beskrevet for Boc-(R )Cha-Pic-OH fra H-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-0Et.
Boc-(R)Cgl-Pic-OH
(i) Boc-(R)Cgl-Pic-OMe
Pivaloylklorid (1.000 ml, 8,1 mmol) ble tilsatt til en oppløsning bestående av Boc-(R)Cgl-0H (2,086 g, 8,1 mmol) og trietylamin (1,13 ml, 8,1 mmol) i toluen (25 ml) og DMF (5 ml). En blanding av H-Pic-OMe x HC1 (1,46 g, 8,1 mmol) og trietylamin (1,13 ml, 8,1 mmol) i DMF (20 ml) ble deretter tilsatt ved isbad temperatur. Reaksjonsblandingen ble forsiktig oppvarmet til romtemperatur og etter 24 timer ble den fortynnet med vann og ekstrahert med toluen. Etter vasking med 0,3 M KSH04, 10$ NagC^ og saltvann ble opp-løsningsmiddelet fjernet i vakuum for å tilveiebringe 2,52 g
(81$) av en farveløa olje som ble anvendt uten ytterligere rensning. l-H-NMR (500 MHz, CDCI3, 2 rotamerer, 5:1 forhold) S 0,8-1,8 (m, 25H), 2,25 (d, 1H), 2,75 (t, 1H, mindre rotamer), 3,3 (t, 1H), 3,7 (S, 3H), 3,85 (s, 1H), 4,3 (t, 1H, mindre rotamer), 4,5-4,6 (m, 1H), 5,25 (s, 1H), 5,30 (d, 1H).
(ii) Boc-(R)Cgl-Pic-0H
Fremstilt ifølge fremgangsmåten for hydrolyse av Boc-(R)Cha-Pic-OEt ved anvendelse av produktet fra (i) ovenfor. Produktet ble krystallisert fra diisopropyleter og heksan. -'■H-NMR (500 MHz, CDCI3, 2 rotamerer, 5:1 forhold) S 0,8-1,8 (m, 25H), 2,3 (d, 1H), 2,8 (t, 1H, mindre rotamer), 3,3 (t, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,4 (t, 1H, mindre), 4,5-4,6 (m, 1H), 5,1 (s, 1H), mindre rotamer), 5,3 (d, 1H), 5,40 (d, 1H).
Boc-(R)Dph-Pic-OH
Fremstilt på samme måte som beskrevet for Boc-(R)Cha-Pic-0H fra Boc-(R)Dph-0H.
Boc-(R)Dch-Pic-OH
Fremstilt på samme måte som beskrevet for Boc-(R )Cha-Pic-0H fra Boc-(R)Dch-0H.
Boc-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-0H
Fremstilt på samme måte som beskrevt for Boc-(R)Cha-Pic-0H fra H-Pro(5-(S)Me )-0Me.
Boc-Nag(Z)
(i) N-benzyloksykarbonyl-O-metyl isourea
Til en omrørt oppløsning av konsentrert vandig naOH (2,8 1 50$ vekt/vekt, 19,1 M, 53 mol) og vann (32 1) ved 18°C ble tilsatt i to porsjoner 0-metylisourea hemisulfat (1,7 kg, 94$, 13,0 mol) og O-metylisoureahydrogensulfat (1,57 kg, 99$, 9,0 mol). Reaksjonsblandingen ble avkjølt til 3-5°c. Benzylklorformiat (3,88 kg, 92$, 20,9 mol) ble tilsatt over en periode på 20 minutter under avkjøling og omfattende omrøring. Reaksjonstemperaturen gikk fra 3-8°C i løpet av tilsetningen av Z-Cl. Trakten for tilsetning ble skylt med 5 liter vann som ble tilsatt til reaktoren. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0-3°C i 18 timer, filtrert og krystallene ble vasket med avkjølt (3°C) vann (10 1). Vakuumtørling 25°c, 10-20 mbar) i 48 timer ga 3,87 kg (89$) av tittelforbindelsen som et hvitt krystallinsk pulver.
(ii) Noc-Nag(Z)
Til en omrørt oppløsning av Boc-NH-(CHg^-NHg x HC1 (fremstilt ifølge Mattingly P.G., Synthesis, 367 (1990)) (3,9 kg, 18,5 mol) i iso-propanol (24 kg) ved 60-70°C ble det tilsatt i porsjoner over en 30 minutters periode KHCO3 (4,2 kg, 42 mol). En sakte utvikling av COg (g) oppstår. Blandingen ble omrørt i ytterligere 30 minutter etterfulgt av tilsetning i porsjoner over en 30 minutters periode N-benzyloksykarbonyl-O-metylisourea (3,74 kg, 18,0 mol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 65-70°C i 16 timer, avkjølt til 20°C og filtrert. Presipitatet ble vasket med isopropanol (10 + 5 1). Kombinerte filtrater ble konsentrert ved redusert trykk ved å holde varmekappen på en temperatur som ikke er varmere enn 65-70°C. Når omtrent 45 liter ble destillert ut ble EtOAc (90 1) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til 20-25°C, vasket med vann (10 og 5 1) og saltvann (5 1) og tørket med Na2S04 (2 kg). Etter omrøring ble reaksjonsblandingen filtrert og filterkaken ble vasket med EtOAc (11 og 7 1). De kombinerte filtratene ble konsentrert ved redusert trykk ved å holde varmekappen på ikke mer enn 40-50°C. Når omtrent 90 liter EtOAc var destillert av ble toluen (25 1) tilsatt og avdampningen fortsatt. Etter oppsamling av ytterligere 18 liter destillat ble toluen (20 1) tilsatt under omfattende omrøring og den resulterende blandingen ble avkjølt til -1 til 0°C og forsiktig omrørt over natt (17 timer). Krystall-oppslemningen ble filtrert og produktet ble vasket med avkjølt toluen (10 og 5 1).
Vakuumtørking (10-20 mbar, 40°C) i 24 timer ga 4,83 kg (13,8 mol, 76$) Boc-Nag(Z).
<i>H-NMR (300 MHz, CDC13): S 1,41 (s, 9H), 1,6-1,7 (m, 2H), 3,0-3,3 (m, 4H), 4,8-5,0 (bs, 1H), 5,10 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H) .
Boc-Agm(Z)
(i) Boc-Agm
Til en oppslemming av 14,95 g (65,5 mmol, lekv.) agmatin-sulfat (Aldrich), 13,7 ml Et3N (98.25 mmol, 1,5 ekv.), 165 ml H20 og 165 ml THF ble det tilsatt 21,5 g (98,25 mmol, 1,5 ekv.) (Boc)20 i løpet av 5 minutter ved romtemperatur. Blandingen ble omfattende omrørt over natt, avdampet til tørrhet og resten ble vasket med 2x100 ml Et20 for å tilveiebringe Boc-Agm som et hvitt pulver som ble anvendt uten ytterligere rensning i det nesete trinnet.
(ii) Boc-Agm(Z)
Til en kald (+5°C) oppslemning av urenset Boc-Agm fra det foregående trinnet (ca: 65,5 mmol) i 180 ml 4N NaOH og 165 ml THF ble det tilsatt 24 ml (169 mmol, 2,5 ekv. = benzylklor-format i løpet av 10 minutter. Etter omrøring ved romtemperatur i 4 timer ble metanol (150 ml) tilsatt og omrøringen ble fortsatt i ytterligere 20 timer ved romtemperatur. Det organiske oppløsningsmiddelet ble avdampet og 200 ml H20 ble tilsatt til resten. Den basiske vannfasen ble ekstrahert med 1x300 ml og 2x200 ml EtOAc. Kombinerte organiske faser ble vasket med H20 (2x100 ml), saltvann (1x100 ml) og tørket (MgSO^. Avdampning av oppløsnings-middelet og flammekromatografi (CH2Cl2/Me0H, en trinnvis gradient på 97/3, 95/5 og 9/1 ble anvendt) ga 14,63 g (58$) ren Boc-Agm(Z) som et hvitt pulver.
1-H-NMR (CDC13, 500 MHz): 5 1,35-1 ,40 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 1,5-1,6 (m, 2H), 3,0-3,2 (m, 4H), 4,65 (bs, 1H), 5,1 (s, 2H), 7,25-7,40 (m, 5H).
<13>C-NMR (CDCI3, 75,5 MHz): S 25,44, 27,36, 28,21, 65,83, 79,15, 127,47, 127,66, 128,14, 137,29, 156,47, 161,48, 163,30.
Boc-NH-(CH2)3-<N>3
Fremstilt ifølge metoden beskrevet av Mattingly P. G., i Synthesis 1990, 367.
Z-NH-(CH2)2-NH2
Til en kald oppløsning av 6 g etylendiamin (0,1 mol) og 22 ml trietylamin i 20 ml kloroform ble det tilsatt 2,5 g Z-OSu oppløst i 5 ml kloroform. Blandingen ble omsatt ved romtemperatur og latt stå over natt under omrøring. Filtrering, avdampning av oppløsningsmiddelet og flammekromatografi (CH2Cl2/MeOH(NH3-mettet), 95/5) ga 0,9 g (46$) av tittelforbindelsen. -'■H-NMR (300 MHz, CDClg): § 1,27 (s, 2H) , 2,85 (t, 2H), 3,24 (q, 2H), 5,14 (s, 2H), 7,22-7,40 (m, 5H).
Agm x HC1
Fremstilt fra Agm x H2S04 (Aldrich) ved utveksling av hydrogensulfationet med klorid på en ionebytte kolonne.
N-Nag(Z) x 2 HC1
Fremstilt ved bobling av HC1 (e) inn i en oppløsning av Boc-Nag(Z) i EtOAc etterfulgt av avdampning av oppløsnings-middelet .
Bn00C-CH2-NH-C0-CH2-Br
Til en oppløsning av pTsOH x H-Gly-OBn (5 mmol) og trietylamin (5 mmol) i 10 ml CH2C12 ble det tilsatt 2-bromeddiksyre (5 mmol) oppløst i 10 ml CH2C12 og disykloheksylkarbodiimid (5 mmol). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur over natt og filtrert. Den organiske fasen ble vasket to ganger med 0,2 M KHS04, 0,2 M NaOH, saltvann og tørket. Avdampning og flammekromatografi (CH2Cl2/MeOH, 95/5) ga et kvantitativt utbytte av den ønskede forbindelsen.
<i>H-NMR (300 MHz, CDCI3): S = 3,89 (s, 2H), 4,05-4,11 (s, 2H) , 5,19 (s, 2H), 7,06 (bs, 1H), 7,3-7,4 (m, 5H).
Bn00C-CH2-0C0-CH2-Br
En blanding av 2,8 g (0,020 mmol) bromeddiksyre, 4,2 g (0,020 mmol) benzylbromacetat og 2,0 g (0,020 mmol) trietylamin u 25 ml EtOAc ble tilbakestrømmet i 3 timer. Det ble fortynnet med ytterligere EtOAc og avkjølt. Oppløsningen ble vasket med fortynnet HC1 og deretter med NaHC03(aq) og til slutt med vann. Tørking (Na2S04) og avdampning etterfulgt av flamme-kromatograf i (heptan/etylacetat, 75/25) ga tittelforbindelsen i 26$ utbytte.
1-H-NMR (500 MHz, CDCI3) : S 3,95 (s, 2H) , 4,75 (s, 2H) , 5,23 (s, 2H), 7,35-7,45 (m, 5H).
Bn0-(CH2)3-0Tf
Propandiolmonobenzyleter (0,83 g, 5 mmol) ble løst opp i tørr pyridin (0,6 g, 7 mmol) og diklormetan (20 ml) og avkjølt til -15°C. Triflic anhydrid, foravkjølt til -15°C ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt i 45 minutter hvorpå temperaturen ble økt til 15°C. Oppløsningsmiddelet ble avdampet og produktet løst opp i heksan/etylacetat 4:1 (10 ml) og filtrert gjennom silika. Til slutt ble oppløsningsmiddelet avdampet og produktet tørket i vakuum for å tilveiebringe 0,95 g (64$) 1-benzyloksy 3-trifluormetansulfonylpropan som ble anvendt direkte (se eksempel 21).
<1>H-NMR (500 MHz, CDC13): S 2,12 (m, 2H), 3,6 (t, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,72 (t, 2H), 7,22-7,42 (m, 5H).
BnO-(CH2)2-CH0
Fremstilt ifølge Swern oksidasjon (beskrevet av D. Swern et al., J. Org. Chem., 1978, 2480-82) Bn0-(CH2 )3-0H.
<1->H-NMR (300 MHz, CDCI3): S 2,63 (dt, 2H) , 3,80 (t, 2H) , 4,51 (s, 2H), 7,30 (m, 5H), 9,76 (bt, 1H).
Br-(S)CH(CH20Bn)-C00Bn
(i) Br-(S)CH(CH20Bn)-C00H
O-benzylserin (3,9 g, 19 mmol) i vann (10 ml) ble tilsatt til en oppløsning av natriumbromid (11 g, 107 mmol) i vann (20 ml) og svovelsyre (2 g, 20 mmol). Reaksjonsblandingen ble avkjølt til -10°C og NaN02 (1,73 g, 25 mmol) ble tilsatt under omfattende omrøring. En ytterligere porsjon vann ble tilsatt til den tykke blandingen som etter noen få minutter ble etterfulgt av H2S04 (1 g, 10 mmol). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur over natt hvor på den ble ekstrahert to ganger med EtOAc (100 ml). Den kombinerte organiske fasen ble vasket to ganger med vann og en gang med saltvann og tørket (Na2S04). Avdampning av oppløsningsmiddelet ga 3,7 g
(75$) av tittelforbindelsen som en gul olje som var ren nok til å bli anvendt direkte i det neste trinnet.
(ii) Br-(S)CH(CH20Bn)-C00Bn
Til en oppløsning av råproduktet fra (i) ovenfor (2,6 g, 10 mmol) i tørr benzen (25 ml) ble det tilsatt oksalylklor id (2,6 g, 20,5 mmol) og molekylære sikter (4 Å, 1 g). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur under en argonatmosfære i 18 timer. Molekylære sikter ble fjernet ved filtrering og oppløsningsmiddelet avdampet. Resten som var svak gul ble løst opp i CH3CN (10 ml) og benzylalkohol (lg, 9,2 mmol) ble tilsatt. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 5 timer. Oppløsningsmiddelet ble avdampet og resten løst opp Et20 og vasket en gang med 1 M NaOH, vann, saltvann og tørket (Na2S04). Avdampning av oppløsningsmiddelet etterfulgt av flammekromatografu (CH2Cl2/MeOH, 95/5) ga 1,8 g (67 $) av den ønskede forbindelsen.
<1->H-NMR (500 MHz, CDCI3): å 3,82 (dd, 1H) , 3,99 (ss, 1H) , 4,38 (dd, 1H), 4,56 (s, 2H), 5,23 (s, 2H), 7,23-7,46 (m, 5H).
Arbeidseksempler
Eksempel 1
H-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HOAc
(i) Boc-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
Boe-(R)Cha-Pro-OSu (1,7 mmol) og agmatin dihydroklorid (2,0 mmol, 1,18 ekv.) ble løst opp i DMF/Hg 0 95:5 (35 ml). Trietylamin ble tilsatt for å justere pH til omtrent 10 og oppløsningen ble omrørt ved romtemperatur i 2 dager. Oppløsningen ble avdampet (5 mm Hg/60"C) helt til tørrhet og råproduktet ble renset ved RPLC (CH3CN/NH40Ac (0,1 M), 38:62). Den ønskede forbindelsen ble oppnådd som et hvitt pulver etter frysetørking.
<1->H-NMR (500 MHz, CDCl3/DMS0-d6 5:2, to rotamerer, 9:1 S (hoved rotamer): 0,75-0,90 (m, 2H) , 1,1-2,05 (m, 19H), 1,35 (s, 9H) 2,98-3,14 (m, 4H) , 3,37 (q, 1H) , 3,76 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,33 (dd, 1H), 6,30 (d, 1H), 7,05-7,80 (bredm, 5H), 8,67 (bred d, 1H).
Utvekslings brede signaler av mindre rotamer blir observert ved S 3,44 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 4,10 (m, 1H), 4,64 (m, 1H) , 5,56 (d, 1H), 9,08 (m, 1H).
(ii) H-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
En oppløsning av Boc-(R)Cha-Pro-Agm (0,2 mmol) i TFA (2 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 4,5 timer. Oppløsningsmiddelet ble avdampet og den gjenværende oljen ble utsatt for RPLC (CH3CN/NH4OAc (0,1 M), 25:75). Diacetatsaltet ble oppnådd som et hvitt pulver etter gjentatt frysetørking.
<*>H-NMR (500,13 MHz, D20): 5 0,80-0,95 (m, 2H), 1,00-1,21 (m, 3H), 1,32 (m, 1H), 1,40-1,78 (m, 12H), 1,83-2,00 (m, 2H) ,
1,90 (s, acetat-, 2,20 (m, 1H), 3,06-3,14 (m, 4H), 3,50 (m, 1H), 3,67 (m, 1H), 4,20-4,30 (m, 2H).
<13>C NMR (75,6 MHz, D20): guanidin: § 157,4, karbonylkarboner: S 169,9, 174,5.
Eksempel 2
Me-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HOAc
(i) Boc-(Me)(R) Cha-Pro-Agm
Til en oppløsning av 479,6 mg (1 mmol, 1 ekv.) Boc-(Me)(R)-Cha-Pro-OSu og 500 ml NMM i 16 ml DMF/Hg o (15/1) ble det tilsatt 166,5 mg (1,2 mmol, 1,2 ekv.) Agm x HC1 ved romtemperatur. Reaksjonen ble omrørt i ytterligere 70 timer og oppløsningsmiddelet ble avdampet for å tilveiebringe et råprodukt som en olje. Dette ble anvendt uten rensing i det neste trinnet.
(ii) Me-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HOAc
Den urensede oljen fra det foregående trinnet ble løst opp i 10 ml TFA/CHgClg (1:4) ved romtemperatur. Etter omrøring i 2 timer og 25 minutter ble oppløsningsmiddelet avdampet og råproduktet ble renset med RPLC (CH3CN/NH40Ac(0,IM), 35/65) for å tilveiebringe det ønskede produktet som et hvitt pulver etter frysetørking. -'-H-NMR (500 MHz, Dg=): S 0,93-1,05 (m, 2H) , 1,10-1,29 (m, 3H), 1,33-1,43 (m, 1H), 1,50-1,80 (m, 12H), 1,88-2,10 (m, 2H, 1,92 (s, acetat), 2,27-2,36 (m, 1H), 2,68 (s, 3H), 3,15-3,23 (m, 3H), 3,24-3,31 (m, 1H) , 3,57-3,66 (m, 1H) , 3,76-3,83 (m, 1H), 4,28 (t, 1H), 4,39 (dd, 1H).
<13>C-NMR /125.76 MHz, DgO): guanidin: S 157.24; karbonylkarboner: S 174,03, 168,24.
Eksempel 3
HO-(CH2)3-(R)-Cha-Pro-Agm x 2 HC1
(i) Boc-(R)-Cha-Pro-Agm(Z)
Boc-Agm(Z) (1 ekv.) ble løst opp i TFA/CH2C12 (1:4, ca: 6 ml/mmol) og omrørt ved romtemperatur i ca 2 timer. Opp-løsningsmiddelet ble avdampet og produktet løst opp sammen med Boc-(R )Cha-Pro-OSu (1 ekv.) i DMF (ca: 1 ml/mmol), pH justert med NMM til ca 9 og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 20 timer. Oppløsningsmiddelet ble avdampet i vakuum, råproduktet løst opp i CH2C12 og vasket tre ganger med vann og en gang med saltvann. Etter tørking (natriumsulfat) ble oppløsningsmiddelet avdampet og produktet flammekromatografert (CH2Cl2/MeOH) ifølge Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z) som et hvitt pulver.
(ii) H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
Bpc-(R)Cha-Pro-Agm(Z) ble løst opp i TFA/CH2C12 (1:4, ca 6 ml/mmol) og omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Oppløsnings-middelet ble avdampet, produktet løst opp i 0.2M NaOH (20 ml/mmol) og ekstrahert to ganger med diklormetan. De organiske lagene ble kombinert og vasket med saltvann, tørket (natriumsulfat) og oppløsningsmiddelet avdampet for å tilveiebringe H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) som et hvitt pulver.
(lii) Bn0-(C<H>2)3-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
H-(R )Cha-Pro-Agm(Z) (1 mmol) ble løst opp i metanol (10 ml). Trimetylammoniumhydroklorid (1 mmol), natriumcyanoborhydrid (0,7 mmol) og deretter BnO-(CH2)2-CH0 (1,05 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved romtemperatur over natt. Oppløsningsmiddel ble avdampet og råproduktet løst opp i etylacetat, vasket to ganger med vann, en gang med saltvann og tørket over natriumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble avdampet og råproduktet ble renset ved flammekromatografi (EtOAc(MeOH).
(iv) HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HC1
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (d) på produktet (lii) ovenfor.
<1>H-NMR (500 MHz, D20): S 0,72 (m, mindre rotamer), 0,84 (m, mindre rotamer), 0,87-1,03 (m, 2H) , 1,03-1-26 (m, 2H), 1,28-1,40 (bs, 1H), 1,44-1,80 (m, 11H), 1,80-1,95 (bs, 3H), 1,95-2,10 (bs, 2H), 2,28 (m, 1H), 3,04 (m, 1H), 3,08-3,27 (m, 5H), 3,58 (bs, 1H), 3,67 (bs, 2H), 3,78 (m, 1H), 4,12 (bd, mindre rotamer), 4,30 (m, 1H), 4,37 (m, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: 5 157,26, karbonylkarboner: S 174,06; 168,36.
Eksempel 4
H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
Generell prosedyre for alkylering av N-terminalen.
Denne prosedyren er beskrevet i mere generelle termer og vil bli referert til i eksemplene nedenfor sammen med alkyl-eringsmiddelet anvendt i hvert spesifikke eksempel.
Peptidet som skulle bli alkylert (1 ekv.) og alkylerings-mlddelet (1,1-1,2 ekv.) ble løst opp i acetonitril (ca 10 ml/mmol). Kaliumkarbonat (2,0-2,2 ekv.) ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved 50-60°C helt til utgangsmaterialet var konsumert (TLC, vanligvis 1-5 t.). Filtrering, avdampning av oppløsningsmiddelet og flammekromatografi (CH2Cl2/Me0H, CH2Cl2/Me0H(NH3-mettet) elelr EtOAc/MeOH, ca 9/1) ga det alkylerte produktet etter avdampning av oppløs-ningsmiddelet.
(i) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
Fremstilt fra H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (se eksempel 3) og Br-CH2C00Bn ifølge fremgangsmåten beskrevet ovenfor.
(ii) H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyre (b) på produktet (i) ovenfor.
<1>H-NMR (300 MHz, MeOD): S 0,9-1,1 (m, 2H), 1,1-2,3 (m, 19H) 1,95 (s, acetat), 3,1-3,2 (m, 4H), 3,2-3,65 (m, 3H), 3,85 (m, 1H), 4,0 (bt, 1H), 4,35 (dd, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: 5 157,55, karbonylkarboner: S 168,71, 171,37 og 174,3.
Eksempel 5
<ip>r-OOC-CHg-fRjCha-Pro-Agm x HOAc
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (se eksempel 3) og Br-CH2C00<ip>r etterfulgt av avsplatningsprosedyrem (b) ga tittelforbindelsen-
<1>H-NMR (500 MHz, MeOD), 5 0,85-1,05 (m, 2H), 1,1-1,35 (m, 9H, derav 1,23 (d, 3H) , 1,25 (d, 3H), 1,35-2,02 (m, 14H), 1,92 (s, acetat), 2,08 (m, 1H), 2,2 (m, 1H), 3,07-3,45 (m, 6H), 3,55 (m, 1H), 3,7-3,8 (m, 2H), 4,3 (dd, 1H), 5,05 (m, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: S 157,39, karbonylkarboner: S 171,10, 172,76 og 174,44.
Eksempel 6
H00C-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Agm x 2 TFA
(i) Me-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
Fremstilt fra Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu på samme måte som beskrevet for H-(R )Cha-Pro-Agm(Z) i eksempel 3.
(ii) HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Agm x 2 TFA
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av Me-(R)Cha-Pro-Agm(Z) og Br-CH2C00Bn etterfulgt av avspaltningsprosedyre (b) ga tittelforbindelsen.
<i>H-NMR (300 MHz, D20): § 0,9-1,35 (m, 6H), 1,5-2,2 (m, 14H), 2,25-2,45 (m, 1H), 3,12 (s, 3H), 3,15-3,35 (m, 4H), 3,6-3,75 (m, 1H), 3,8-3,95 (m, 1H), 4,22 (apparent bs, 2H), 4,45 (m, 1H), 4,6 (bt, 1H).
<13>C-NMR (75,47 MHz, D20): guanidin: § 157,52, karbonylkarboner: S 173,86, 168,79, 167,38.
Eksempel 7
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (se eksempel 3) og Br-CH(Me )C00Bn etterfulgt av avspaltningsprosedyre (a) ga tittelforbindelsen som en blanding av to diastereomerer.
Eksempel 8
HOOC-(RellerS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/a x HOAc
Oppnådd ved separering av diastereomerer dannet i eksempel 7 ved anvendelse av (CH3CN/NH4OAc (0.1M), 1/4). Denne diastereomeren kom først av de to ut av kolonnen.
<i>H-NMR (500 MHz, D20, 2 rotamerer ca: 5:1 forhold): S 0,74 (m, mindre rotamer), 1,01 (m, 2H), 1,10-1,33 (m. 3H), 1,48-1,88 (m, 15H), derav 1,51 (d, 3H), 1,92-2,12 (m, 3H), 1,96 (s, acetat), 2,30 (m, 1H), 3,20 (m, 3H), 3,38 (m, 1H), 3,47 (q, mindre rotamer), 3,53-3,68 (m, 2H), 3,73 (m, 1H), 4,20 (d, mindre rotamer), 4,33 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,51 (d, mindre rotamer).
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: å 157,38, karbonylkarboner: S 174,11, 173,45, 168, 64.
Eksempel 9
HOOC-(RellerS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/b x HOAc
Diastereomeren som kom ut etter den første fra kolonnen ved separeringen i eksempel 8 er tittelforbindelsen ovenfor. -'-H-NMR (500 MHz, D20, 2 rotamerer ca 9:1 forhold): S 0,88 (m, mindre rotamer), 1,05 (m, 2H), 1,12-1,33 (m, 3H), 1,42 (bs, 1H), 1,50-1,88 (m, 15H), derav 1,55 (d, 3H)), 1,93-2,13 (m, 3H), 1,95 (s, acetat), 2,30 (m, 1H), 2,40 (m, mindre rotamer), 3,22 (t, 2H), 3,28 (t, 2H), 3,64 (m, 1H), 3,70 (q, 1H), 3,98 (t, mindre rotamer), 4,35 (t, 1H), 4,41 (dd, 1H).
. Eksempel 10
HOOC-(RellerS)CH(nPr )-(R)Cha-Pro-Agm/a x HOAc
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (se eksempel 3) og Br-CH(<n>Pr)C00Et og avspaltningsprosedyre (e) etterfulgt av avspaltningsprosedyre (b) ga H00C-(R,S)CH(<n>Pr)-(R)Cha-Pro-Agm. Tittelforbindelsen ble oppnådd ved separering av diastereomerene ved RPLC (CH3CN/- NH4OAC (0,1 M), 1/4) og frysetørking (H20) etter avdampning av oppløsningsmiddelet. Denne diastereomeren kom først ut av de to fra kolonnen. •^•H-NMR (300 MHz, MeOD): 5 0,8-1,1 (m, 5H, derav 0,92 (t, 3H)), 1,1-2,1 (m, 22H) 1,95 (s, acetat), 2,2 (m, 1H), 3,1-3,35 (m, 5H), 3,48 (m, 1H), 3,88 (m, 1H), 4,0 (m, 1H), 4,4 (dd, 1H). <13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,50, karbonylkarboner: § 168,55 og 174,16.
Eksempel 11
HOOC-(RellerS)CH(<n>Pr)-(R)Cha-Pro-Agm/t> x HOAc
Den andre diastereomeren fra separeringen i eksempel 10 som kom ut etter den første fra kolonnen er tittelforbindelsen angitt ovenfor. -'-H-NMR (500 MHz, MeOD): S 0,85-1,05 (m, 5H, derav 0,95 (t, 3H)) 1,1-2,08 (m, 22H) 1,9 (S, acetat), 214 (m, 1H), 3,1-3,4 (m, 5H), 3,45 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 3,80 (m, 1H), 4,34 (dd, 1H). <13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: å 157,53, karboksykarboner: 5 169,01 og 174,27.
Eksempel 12
HOOC-(RellerS)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b x HOAc
(i) <t>BuOOC-(RellerS)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
En blanding av H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (se eksempel 3) (0,55 mmol), tert.butyl-(R,S)fenylbromacetat (0,66 mmol), K2CO3 (1,4 mmol) i CH3CN (10 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 28 timer og ytterligere 5 timer ved 60°C. Diastereomerblandingen (ca: 3:1, ifølge NMR) ble filtrert og avdampet. Den gjenværende oljen ble to ganger utsatt for flammekromatografi (CE2Cl2/Me0H, 92/8), som resulterte i en fullstendig separasjon av de to diastereomerene (Rf=0,36 (mindre isomer) og 0,27 (hoved isomer).
^H-NMR hoved isomer (500.13 MHz, CDCI3): S 0,79 (quart, 1H), 0,90 (quart, 1H), 1,06-1,70 (m, H), 1,37 (s, 9H), 1,85-2,03 (m, 3H), 2,20 (m, 1H) , 3,10-3,24 (m, 3H), 3,25-3,38, (m, 2H), 3,42 (m, 1H), 3,53 (m, 1H), 4,30 (s, 1H), 4,49 (dd, 1H), 5,08 (s, 2H), 7,19-7,40 (:n, 10H), brede NH signaler er observert i regionen 6,7-8,6.
(ii) HOOC-(RellerS)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b x HOAc
Hoved isomeren (50 mmol) og tioanisol (0,5 mmol) oppløst i TFA ble oppbevart ved romtemperatur i 8 timer. Etter avdampning (0,1 mm Hg) i 5 timer ble den gjenværende oljen renset på RPLC (CH3CN/NH4OAc (0,1 M), 2:3) for tilveiebringe tittelforbindelsen etter avdampning av oppløsningsmiddelet og f rysetørking.
<1>H-NMR (500,13 MHz, MeOD): S 0,84-1,01 (m, 2H), 1,13-1,38 (m, 4H), 1,53-2,05 (m, 14H), 1,92 (S, acetat) 2,18 (m, 1H), 3,08-3,26 (m, 3H), 3,32-3,45 (m, 2H), 3,64 (m, 1H), 3,93 (t, 1H), 4,37 (dd, 1H), 4,43 (s, 1H), 7,28-7,50 (m, 5H).
<13>C NMR (125,6 MHz, MeOD): guanidin: S 158,7, karbonylkarboner: 173,8, 174,7, 177,0.
Eksempel 13
H00C-(R,S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Ågin x HOAc
Alkylering som i eksempel 4 anvendelse av H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
(se eksempel 3) og Br-CH(CH2-CH2-Ph)C00Et og avspaltningsprosedyre (a) etterfulgt av avspaltningsprosedyre (e) ga H00C-(R,S)CH(CH2-CH2-Ph)-(R)Cha-Pro-Agm.
Eksempel 14
H00C-(RellerS)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/a x 2 TFA
Tittelforbindelsen ble oppnådd ved separering av diastereomerene oppnådd i eksempel 13 ved RPLC (CH3CN/NH3OAc (0,1 M), 2/3) og frysetørking (H20/TFA) etter avdampning av opp-løsningsmiddelet. Denne diastereomeren kom ut først av de to fra kolonnen og er tittelforbindelsen ovenfor.
<i>H-NMR (500 MHz, MeOD): S 0,93-1,11 (m, 2H) , 1,24 (m, 1H) , 1,29-1,40 (m, 2H), 1,52-1,85 (m, 11H), 1,89-2,11 (m, 4H), 2,14-2,32 (m, 3H), 2,83 (t, 2H), 3,14 (t, 2H), 3,24 (t, 2H), 3,50 (q, 1H), 3,70 (m, 1H), 4,00 (t, 1H), 4,36-4,42 (m, 2H), 7,17-7,31 (m, 5H).
<13>C-NMR (125 MHz, MeOD): guanidin: S 158,66, karbonylkarboner, å 168,08, 171,53, 174,16.
Eksempel 15
H00C-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
(i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
Benzylakrylat (1.1 ekv.) og H-(R )Cha-Pro-Agm( Z) (se eksempel 3) (1 ekv.) ble løst opp i etanol (20 ml/mmol) og omrørt ved romtemperatur i 20 timer. Oppløsningsmiddelet ble avdampet og råproduktet renset ved flammekromatografi (CH2Cl2/MeOH(NH3-mettet), 95/5). Til slutt ble oppløsningsmiddelet avdampet og produktet tørket i vakuum.
<1->H-NMR (500 MHz, CDC13): S 0,7-0,95 (m, 2H), 1,0-1,5 (m, 10H), 1,5-1,75 (m, 5H), 1,75-1,92 (m, 2H), 2,0 (m, 1H), 2,17 (bs, 1H), 2,45 (m, 2H), 2,63 (m, 1H), 2,79 (m, 1H), 2,97-3,25 (m, 4H), 3,33 (m, 2H), 3,52 (bt, 1H), 4,45 (bd, 1H), 4,95-5,12 (m, 4H), 7,13-7,4 (m, 10H).
(ii) H00C-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (a) på produktet (i) ovenfor.
^H-NMR (500 MHz, D20): S 0,88 (m, 2H) , 1,00-1,23 (m, 3H) , 1,33 (bs, 1H), 1,42-1,72 (m, 11H), 1,78-2,00 (m, 3H). 1,94 (s, acetat), 2,18 (m, 1H), 2,52 (m, 2H), 3,03-3,20 (m, 6H), 3,50 (m, 1H), 3,72 (m, 1H) , 4,23 (m, 1H), 4,30 (m, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: S 157,25, karbonylkarboner: S 178,07, 173,96, 168,24.
Eksempel 16
EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
(i) EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
Til en kald (-10°C) oppløsning av H-(R)Cha-Pro-Agm(z) (se eksempel 3) (0,46 g, 0,89 mmol og NMM (199 mg, 1,97 mmol) i 10 ml THF ble det tilsatt Cl-C0C00Et (134 mg, 0,98 mmol) oppløst i 3 ml THF. Blandingen ble oppbevart ved -10° C i 1 time og ble deretter omrørt ved romtemperatur i en ytterligere time. Oppløsningsmiddelet ble avdampet og resten ble løst opp i etylacetat. Den organiske fasen ble vasket to ganger med vann og tørket (NagSO^. Avdampning av opp-løsningsmiddelet og krystallisering fra EtOAc ga 0,275 g (50$) av tittelforbindelsen som hvite krystaller.
(ii) Et00C-C0-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (b) på produktet (i) ovenfor.
<X>H-NMR (300 MHz, MeOD): S 0,9-2,25 (m, 24H, derav 1,17 (t, 3H)), 1,90 (s, acetat), 3,1-3,25 (m, 4H), 3,5-3,65 (m, 3H, derav 3,59 (q,2H), 3,88 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,69 (dd, 1H).
<13>C-NMR (75,5 MHz, MeOD): guanidin: S 157,56 og karbonylkarboner: S 159,21, 160,74, 172, 81, 174,56.
Eksempel 17
(R,S)Bla-(R)Cha-Pro-Agm x 2 TFA
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (se eksempel 3) og a-brombutyrolakton etterfulgt av avspaltningsprosedyren (a) ga tittelforbindelsen som en blanding av to diastereomerer.
1-H-NMR (500 MHz, DgO, blanding av diastereomerer ca: 1/1): S 0,93-1,06 (m, 2H), 1,09-1,30 (m, 3H) , 1,37-1,49 (m, 1H) , 1,50-1,87 (m, 11H), 1,89-2,10 (m, 3H) , 2,24-2,36 (m, 1H), 2,44-2,56 (m, 1H), 2,72-2,85 (m, 1H), 3,10-3,30 (m, 4H), 356-3,65 (m, 1H), 3,75-3,84 (m, 1H) , 4,2-5,0 (m, 5H, delvis skjult av H-O-D signalet).
<13>C-NMR (125,76 MHz, D20) guanidin: S 157.34 (topper som overlapper), karbonylkarboner: § 174,34, 173,90, 173,62, 167,88, 167,58 (to topper som overlapper).
Eksempel 18
H00C-(RellerS)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b x 2 TFA
Tittelforbindelsen ble oppnådd ved behandling av diastereomeren i eksempel 13 på samme måte som beskrevet i eksempel 14. Denne diastereomeren kom ut etter den første fra kolonnen. •^H-NMR (500 MHz, MeOD): S 0,95-1,06 (m, 2H), 1,14-1,40 (m, 4H), 1,48-1,84 (m, 11H), 1,87-2,30 (m, 6H), 2,72-2,90 (m, 2H), 3,12-3,32 (m, 4H), 3,52 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 4,04 (dd, 1H), 4,27 (t, 1H), 4,37 (dd, 1H), 7,17-7,32 (m, 5H) .
<13>C-NMR (125 MHz, MeOD): guanidin: § 158,68; karbonylkarboner: S 168,14, 171,46, 174,03.
Eksempel 19
H-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc
(i) Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-<N>H(Boc)
Til en oppløsning av Z-(R)Cha-Pro-0Su (1 mmol) i 1 ml DMF ved 0°C ble det tilsatt H2N-(CH22 )3-NH(Boc) (se fremstilling av utgangsmaterialet) oppløst i 1 ml DMF og pH ble justert til ca: 9 med NMM. Reaksjonen ble omrørt ved romtemperatur i 3 dager hvoretter den ble helt ut på vann. Den vandige fasen ble ekstrahert 4 ganger med EtOAc. Den kombinerte organiske fasen ble vasket to ganger med 0,3 M KSH04, 0,2 M NaOH, saltvann og tørket. Avdampning og flammekromatografi (EtOAc/petroleumeter, 4/1) ga tittelforbindelsen i 59$ utbytte.
(ii) Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2
Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH(Boc) (0,6 mmol) ble løst opp i CH2C12 (8 ml). TFA (2 ml) ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time. Oppløsningsmiddelet ble avdampet og resten ble løst opp i CH2C12, vasket to ganger med 0,2 TVI NaOH og tørket (Na2S04). Avdampning av oppløsningsmiddelet ga aminet i 93$ utbytte.
1-H-NMR (500 MHz, CDC13): S 0,79-1,03 (m, 2H), 1,05-1,75 (m, 15H), 1,84-2,08 (m, 4H), 2,36 (m, 1H), 2,66 (m, 2H)» 3,25 (m, 2H), 3,43 (q, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,56 (d, 1H) 5,09 (m, 2H), 5,35 (d, 1H) , 7,30-7,45 (m, 5H).
(iii) Z-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2 (0,55 mmol, 1 ekv.) ble løst opp i DMF (2 ml) og pH justert med trietylamin til 8-9. 3,5-dimetyl-l-pyrazolylformamidiniumnitrat (0,55 mmol, 1 ekv.) løst opp i DMF (1 ml) ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved romtemperatur i 3 dager. Oppløsningsmiddelet ble avdampet, råproduktet fryse-tørket (H20) og renset med RPLC (CH3CN/NH4OAC (0.1M), 4/6 for å tilveiebringe tittelforbindelsen i 93$ utbytte etter avdampning av oppløsnings-middelet og frysetørking (H20).
(iv) H-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (a) på produktet (iii) ovenfor.
<!>h-NMR (500 MHz, D20) : S 0,82-1,03 (m, 2H), 1,03-1,28 (m, 3H), 1,35 (m, 1H), 1,53-1,82 (m, 9H), 1,82-2,05 (m, 3H), 1,89 s, acetat), 2,24 (m, 1H) , 3,15 (t, 2H), 3,23 (q, 2H) , 3,55 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 4,27-4,34 (m, 2H).
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: S 157,37, karbonylkarboner: § 169,81, 174,52.
Eksempel 20
<n>Bu-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc
(i) H-(R)Cha-Pro-Nag(Z).
Fremstilt fra Boc-(R )Cha-Pro-0Su og Boc-Nag(Z) på samme måte som beskrevet for H-(R )Cha-Pro-Agm(Z) i eksempel 3. l-H-NMR (500 MHz, CDC13): 5 0,8-1,03 (m, 2H), 1,10-1,50 (m, 6H), 1,60-1,83 (m, 8H), 1,87-2,20 (m, 3H), 3,15 (m, 1H), 3,25 (m, 2H), 3,42 (m, 2H), 3,63 (dd, 1H), 3,70 (m, 1H), 4,36 (bs, 1H), 5,07 (s, 2H), 7,22-7,43 (m, 5H).
(ii) <n>Bu-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
H-(R )Cha-Pro-Nag(Z) (0,5 g, 1 mmol) ble løst opp i metanol (10 ml). Trietylammoniumhydroklorid (0,1 g, 1 mmol), natriumcyanoborhydrid (44 mg, 0,7 mmol) og deretter ble smøresyrealdehyd (76 mg, 1,05 mmol) tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved romtemperatur i 20 timer. Oppløsnings-middelet ble avdampet og råproduktet løst opp i etylacetat, vasket to ganger med vann, en gang med saltvann og tørket over natriumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble avdampet og råproduktet renset ved flammekromatografi EtOAc/EtOH/Et3N, 88/10/2). Til slutt ble oppløsningsmiddelet avdampet og produktet tørket i vakuum for å tilveiebringe 0,22 g (40$) <n>Bu-(R)Cha-Pro-Nag(Z).
<!>h-NMR (500 MHz, CDC13): S 0,82-1,0 (m, 5H, derav 0,88 (t, 3H)), 1,08-1,49 (m, 10H), 1,58-1,8 (m, 7H), 1,88-2,22 (m. 3H), 2,4 (m, 1H), 2,5 (m, 1H), 3,05 (bs, 1H), 3,3 (m, 1H), 3,4-3,53 (m, 3H), 3,73 (m, 1H), 4,42 (bs, 1H) , 5,1 (s, 2H) , 7,25-7,43 (m, 5H).
(iii) <n>Bu-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (a) på produktet (ii) ovenfor.
1-H-NMR (300 MHz, D20): S 0,94 (t, 2H) , 1,10-1,31 (m, 3H) , 1,38 (m, 3H), 1,55-1,88 (m, 11H), 1,88-2,15 (m, 3H), 1,95 (s, acetat), 2,34 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 3,08 (m, 1H) , 3,24 (t, 2H), 3,30 (m, 2H), 3,66 (m, 1H), 3,82 (m, 1H), 4,32 (t, 1H), 4,41 (dd, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: 5 1,57,40, karbonylkarboner: å 180,39, 174,28, 168,55.
Eksempel 21
H0-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
(i) Bn0-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
1-benzyloksy 3-trifluormetansulfonylpropan (se fremstilling av utgangsmaterialene) (0,5 g, 1 mmol) og H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
(se eksempel 20) ble løst opp i tetrahydrofuran (10 ml). Kaliumkarbonat (0,28 g, 2mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Opp-løsningsmiddelet ble avdampet og råproduktet ekstrahert med etylacetat/vann. Den organiske fasen ble vasket en gang med vandig nat r iumhydrogenkarbonat, en gang med vann og en gang med saltvann. Etter tørking overnatriumsulfat ble oppløs-ningsmiddelet avdampet og råproduktet flammekromatografert (CH2CH2/MeOH(NH3-mettet), 95:5). Til slutt ble oppløsnings-middelet avdampet og produktet tørket i vakuum for å tilveiebringe 0,29 g (45$) av tittelforbindelsen.
1-H-NMR (500 MHz, CDC13): S 0,77-1,03 (m, 2H) , 1,03-2,18 (m, 19H), 2,52 (m, 1H), 2,64 (m, 1H), 3,03 (bs, 1H), 3,1-3,6 (m, 7H), 3,66 (m, 1H) , 4,41 (bs, 1H), 4,46 (s, 2H), 5,08 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H), 7,55 (m, 1H).
(ii) H0-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (a) på produktet (i) ovenfor.
<X>H-NMR (500 Mhz, D20): 5 1,00 (bs, 2H) , 1,10-1,32 (m, 3H) , 1,40 (bs, 1H), 1,55-2,15 (m, 14H), 2,30 (m, 1H) , 3,05-3,35 (m, 6H), 3,57-3,75 (m, 3H), 3,81 (bs, 1H) , 4,35 (bs, 1H), 4,42 (bs, 1H).
Eksempel 22
H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
(i) H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3
Fremstilt på samme måte som H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (se eksempel 3) begynnende fra Boc-(R)Cha-Pro-0Su og Boc-NH-(CH2)3-N3 (for erstatning av Boc-Agm(Z)).
(ii) Et00C-CH2-(R)Cha-Pro-NE-(CH2)3-NH2 x HOAc
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3 og EtOOC-CH2-Br etterfulgt av avspaltningsprosedyren (a) for å redusere azidet ga tittelforbindelsen.
(iii) EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Den samme prosedyren som beskrevet i eksempel 19 (iii) for Z-(R)Cha-Pro-Nag ble anvendt for å oppnå guanidering av amindet fra (ii) ovenfor. Tittelforbindelsen ble oppnådd i en ren form etter RPLC (CH3CN/NH4OAc (0,1 M), 3/7 avdampning av oppløsningsmiddelet og frysetørking (H20).
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc.
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (e) på produktet (iii) ovenfor.
<1->H NMR (500 MHz, D20): S 0,99 (m, 2H) , 1,09-1,30 (m, 3H) , 1,44 (m, 1H), 1,59-2,09 (m, 12H), 1,92 (s, acetat), 2,29 (m, 1H), 3,20 (t, 2H), 3,28 (m, 2H), 3,52-3,63 (m, 3H), 3,76 (m, 1H), 4,38 (dd, 1H), 4,42 (t, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: S 175,43; karbonylkarboner: S 168,72, 171,36, 174,35.
Eksempel 23
EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Fremstilt ifølge eksempel 22 (iii).
■^H-NMR (300 MHz, D20): S 1,07 (m, 2H) , 1,17-1,59 (m, 7H); derav 1,38 (t, 3H), 1,60-2,24 (m, 12H), 2,04 (s, acetat), 2,39 (m, 1H), 3,31 (t, 2H); 3,39 (t, 2H), 3,63-3,90 (m, 4H), 4,12 (t, 1H), 4,36 (q, 2H), 4,46 (dd, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,37; karbonylkarboner: S 173,73, 175,09, 175,70.
Eksempel 24
<i>PrOOC-CH2(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20) og Br-CH2C00<i>Pr etterfulgt av avspaltningsprosedyren (b) ga tittelforbindelsen.
<1->H-NMR (500 MHz, MeOD): 5 0,85-1,05 (m, 2H), 1,1-2,15 (m, 22H); derav 1,23 (d, 3H), 1,25 (d, 3H)), 1,92 (s, acetat), 2,2 (m, 1H), 3,10-3,35 (m, 5H), 3,4 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,65-3,8 (m, 2H) , 4,28 (dd, 1H), 5,03 (m, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: 5 157,39; karbonylkarboner: § 170,40, 172,00 og 174,50.
Eksempel 25
tBuOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R )Cha-Pro~ Nag(Z) (se eksempel 20) og Br-CHgCOO<t>Bu etterfulgt av avspaltningsprosedyre (b) ga tittelforbindelsen.
^H-NMR (300 MHz, MeOD): 5 0,9-1,15 (m, 2H), 1,15-2,15 (m, 25H; derav 1,55 (bs, 9H) ) , 2,3 (m, 1H), 3,15-3,45 (m, 4H), 3,55 '(m, 1H), 3,7-3,95 (m, 3H), 4,3-4,4 (m, 2H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,55; karbonylkarboner: S 166,55, 168,13 og 174,33.
Eksempel 26
H00C-CH2-00C-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
(i) BnOOC-CH2-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20), 0,20 g (0,40 mmol) ble blandet med 0,115 g (0,40 mmol) benzyloksykarbonylmetylbrom-acetat, 55 mg K2C03 (0,40 mmol) og 5 ml CH3CN. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 6 timer. Oppløsningsmidlet ble avdampet og råproduktet kromatografert (CH2Cl2/MeOH, 9/1) for å tilveiebringe 0,20 g (71 $) av den ønskede forbindelsen etter avdampning av oppløsningsmidlet.
(ii) H00C-CH2-00C-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (a) på produktet (i) ovenfor.
<i>H-NMR (500 MHz, MeOD): § 0,85-1,1 (m, 2H), 1,1-1,6 (m, 8H), 1,6-2,15 (m, 10H) 1,99, (s, acetat), 2,23 (m, 1H), 3,1-3,4 (m, 4H), 3,45-3,65 (m, 4H) , 3,7-3,9 (m, 3H), 4,34 (m, 1H) , 4,48 (dd, 2H).
<13>C-NMR (125 MHz, MeOD), guanidin: S 158,8, karbonylkarboner: S 176,1, 175,2, 174,9, 173,1.
Eksempel 27
H2N-C0-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R )Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20) og C1-CH2C0NH2, i nærvær av en katalyttisk (10 mol-$) mengde Kl i reaksjonen, etterfulgt av avspaltningsprosedyre (a) ga tittelforbindeslen.
<1>H-NMR (500 MHz, D20): S 1,02 (m, 2H) , 1,12-1,34 (m, 3H) , 1.46 (m, 1H), 1,61-2,13 (m, 9H), 1,99 (s, acetat), 2,34 (m, 1H), 3,25 (t, 2H), 3,33 (t, 2H), 3,60-3,82 (m, 4H), 4,22 (t, 1H), 4,41 (dd, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,5; karbonylkarboner S 168,94, 169,40, 174,43.
Eksempel 28
HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20) og Br-CH2C0NHCH2C00Bn (se prep. av utgangsmaterialene) etterfulgt av avspaltningsprosedyren (a) ga tittelforbindelsen.
<1->H-NMR (500 MHz, MeOD): S 1,01 (m, 2H); 1,15-1,38 (m, 3H) , 1.47 (m, 1H), 1,64-2,13 (m, 12H), 2,27 (m, 1H), 3,17-3,26 (m,
3H), 3,37 (m, 1H), 3,51 (m, 1H), 3,83 (m, 1H), 3,88 (s, 2H), 3,94-4,06 (m, 2H) , 4,35-4,45 (m, 2H).
<13>C-NMR (75 MHz, MeOD): guanidin: S 158,71; karbonylkarboner: å 166,94, 168,35, 172,44, 174,17.
Eksempel 29
(H00C-CH2)2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
(i) (Et00C-CH2)2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2 x HOAc
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3 (se eksempel 22) og Br-CH2C00Et (10 ekv. ble anvendt for å oppnå dialkylering) ettefulgt av avspaltningsprosedyre (a) ga tittelforbindelsen.
(ii) (EtOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Den samme prosedyren som beskrevet i eksempel 19 (iii) for Z-(R )Cha-Pro-Nag ble anvendt for å oppnå guanidering av aminet angitt ovenfor. Rensing av forbindelsen ble utført med RPLC (CH3CH/NH40Ac (0,1 M), 4:6)
(iii) (H00C-CH2)2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Hydrolyse av estergruppene ble utført ifølge avspaltningsprosedyre (e) ved anvendelse av en dobbelt mengde NaOH. Sluttforbindelsen ble oppnådd ren etter RPLC (CH3CN/NH4OAc (0,1 M), 2:8), avdampning av oppløsningsmidlet og fryse-tørking (H20).
<1>H-NMR (300 MHz, D20) : S 0,92-1,49 (m, 6H) , 1,60-2,54 (m, 10H), 2,05 (s, acetat), 3,25-3,50 (m, 4H), 3,65-4,03 (m, 6H; derav 3,95 (s, 4H)), 4,49 (m, 1H), 4,71 (m, 1H; delvis skjult av H-O-D-toppen).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,64; karbonylkarboner: § 168,62, 171,39 174,30.
Eksempel 30
H00C-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
(i) Me-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
Fremstilt fra Boe-(Me)(R)Cha-Pro-0Su og Boc-Nag(Z) på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) i eksempel 3.
(ii) H00C-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av Me-(R )Cha-Pro-Nag(Z) og Br-CH2C00Bn etterfulgt av avspaltningsprosedyre (b) ga tittelforbindelsen.
1-H-NMR (500 MHz, D20): S 0,8-1,06 (m, 2H) , 1,08-1,27 (m, 4H), 1,55-2,10 (m, 12H), 2,30 (m, 1H), 3,04 (s, 3H), 3,14-3,33 (m, 4H), 3,63 (m, 1H) , 3,81 (m, 1H), 4,13 (tilsynelatende bs, 2H), 4,38 (br.dd, 1H), 4,56 (bt, 1H).
<13>C-NMR (125,76 MHz, D20): guanidin: S 157,40; karbonylkarboner: S 174,05, 168,83, 167,44
Eksempel 31
HOOC-CH2-(<n>Bu)(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av <n>Bu-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20) og Br-CH2C00Bn etterfulgt av avspaltningsprosedyren (a) ga tittelforbindelsen.
<1>H-NMR (500 MHzm D20): S 0,78-0,88 (m, 3H), 0,88-1,02 (m, 2H), 1,02-1,23 (m, 4H), 1,23-1,38 (m, 2H) , 1,45-1,84 (m, 11H), 1,84-2,10 (m, 3H), 2,24 (m, 1H) , 3,05-3,18 (m, 3H),
3,18-3,38 (m, 3H) , 3,57 (m, 1H), 3,77 (m, 1H), 4,05-4,25 (m, 2H), 4,32 (m, 1H), 4,50 (m, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: S 159,17; karbonylkarboner: S 175,66, 171,13, 169,31.
Eksempel 32
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av (H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20) og Br-CH(Me)C00Bn fulgt av avspaltningsprosedyren (a) ga tittelforbindelsen som en blanding av to diastereomerer.
Eksempel 33
HOC-(RellerS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/a x HOAc
Oppnådd ved separering av diastereomerene dannet i eksempel 32 ved anvendelse av RPLC (CH3CN/NH4OAc (0,1 M), 1/4) etterfulgt av avdampning av oppløsningsmidlet. Denne diastereomeren kom ut først av de to fra kolonnen.
1-H-NMR (300 MHz, D20, 2 rotamerer ca: 9:1 forhold): 5 0,78 (m, mindre rotamer), 1,07 (m, 2H), 1,17-1,42 (m, 3H), 1,48-1,64 (m, 4H); derav 1,56 (d, 3H)), 1,64-1,95 (m, 9H), 1,95-2,20 (m, 3H), 2,00 (s, acetat), 2,37 (m, 1H), 3,28 (t, 2H), 3,38 (t, 2H), 3,53 (m, mindre rotamer), 3,63 (m, 2H), 3,77 (m, 1H), 4,24 (d, mindre rotamer), 4,35-4,50 (m, 2H), 4,60 (d, mindre rotamer).
Eksempel 34
HOOC-(RellerS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/b x HOAc
Tittelforbindelsen ble oppnådd ved anvendelse av samme prosedyre som beskrevet i eksempel 33 på forbindelsen dannet i eksempel 32. Diastereomeren kom ut etter den første fra kolonnen.
<i>H-NMR (300 MHz, D20, 2 rotamerer ca: 9:1 forhold): S 0,95 (m, mindre rotamer), 1,12 (m, 2H), 1,22-1,40 (m, 3H), 1,40-1,67 (m, 4H; derav 1,60 (d, 3H)), 1,67-2,00 (m, 9H), 2,00-2,25 (m, 3H), 2,03 (s, acetat), 2,40 (m, 1H), 3,25-3,48 (m, 4H), 3,66-3,84 (m, 2H), 3,93 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,93 (m, mindre rotamer).
<13>C-NMR (75,5 MHz, D20): S 157,42; karbonylkarboner: S 168,05, 171,99, 174,04.
Eksempel 35
EtOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Fremstilt på samme måte som beskrevet for eksempel 22 ved anvendelse av EtOOC-CH(Me)-Br i stenden for Br-CH2-C00Et i alkyleringen. -'-H-NMR (500 MHz, MeOD, 2 diastereomerer ca: 2,5:1 forhold og 4 rotamerer): S 0,88-2,43 (m, 25H), 3,1-4,55 (m, 11H). <13>C-NMR (75 MHz, MeOD): guanidin: S 158,65; karbonylkarboner: 5 174,33, 170,66, 168,20.
Eksempel 36
HOOC-(RellerS )CH(nPr )-(R)Cha-Pro-Nag/a x HOAc
Alkylering som beskrevet i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R )Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20) og Br-CH(<n>Pr)C00Et og avspaltningsprosedyren (e) etterfulgt av avspaltningsprosedyren (b) ga H00C-(R,S)CH(<n>Pr)-(R)Cha-Pro-Agm. Tittelforbindelsen ble oppnådd ved separering av diastereomerene (denne diastereomeren kom ut først av de to fra kolonnen) ved RPLC (CH3CH/NH40Ac (0,1 M), 1/4) og frysetørking (H20) etter avdampning av oppløsningsmidlet.
1-H-NMR (500 MHz, MeOD): S 0,85-1,05 (m, 5H; derav 0,95 (t, 3H)); 1,1-2,05 (m, 20H); 1,95 (s, acetat), 2,18 (m, 1H), 3,15-3,3 (m, 4H), 3,35 (m, 1H), 3,46 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,04 (m, 1H), 4,38 (dd, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, MeOD): guanidin: S 158,73; karbonylkarboner: § 171,63, 174,43 og 176,78.
Eksempel 37
HOOC-(R)CH(CH2-OH)-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)-Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20) og Br-(S)CH(CH2-0Bn)-C00Bn etterfulgt av avspaltningsprosedyren (a) ga tittelforbindelsen.
Eksempel 38
HOOC-(R,S)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20) og Br-CH(Ph)C00<t>Bu og avspaltningsprosedyren (a) etterfulgt av (f) ga tittelforbindelsen som en blanding av to diastereomerer.
<i>H-NMR (300 MHz, MeOD): S 0,8-1,1 (m, 2H), 1,1-2,18 (m, 16H), 2,26 (m, 1H), 3,04-3,35 (m, 5H), 3,45 (m, 1H), 3,7 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,85 (s, 1H, en isomer), 5,05 (s, 1H, den andre isomeren), 7,4-7,6 (m, 5H), 7,75 (bt, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 158,68; karbonylkarboner: S 174,39, 174,15 og 170,5, 170,06 og 168,32, 167,78.
Eksempel 39
HOOC-(S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Alkylering som i eksempel 21 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20) og Tf0-(R)(CH(CH2CH2Ph)-C00Et og avspaltningsprosedyre (e) etterfulgt av (a) ga tittelforbindelsen .
<!>h-NMR (300 MHz, MeOD): å 0,77-1 ,05 (m, 2H), 1,05-1,35 (m, 5H), 1,35-2,16 (m, 14H), 1,88 (s, acetat), 2,71 (t, 2H) , 3,07-3,52 (m, 7H), 3,73 (m, 1H), 4,32 (m, 1H), 7,03-7,25 (m, 5H) .
<13>C-NMR (75 MHz, MeOD): guanidin: S 158,71; karbonylkarboner: § 174,15, 177,31, 182,61.
Eksempel 40
H00C-(R)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20) og Br-CH(CH2CH2Ph)C00Et etterfulgt av avspaltningsprosedyren (a) og (e) ga H00C-(R,S)CH(CH2-CH2-Ph)-(R)Cha-Pro-Nag. Tittelforbindelsen ble oppnådd ved separering av de to diastereomerene med RPLC (CH3CN/NH4OAC (0,1 M), 2/3) og frysetørking (H20 etter avdampning av oppløsningsmidlet.
^H-NMR (300 MHz, MeOD): S 0,97 (m, 2H) , 1,10-1,41 (m, 3H) , 1,42-2,30 (m, 16H), 1,96 (s, acetat), 2,70 (m, 2H), 3,06-3,26 (m, 3H), 3,28-3,66 (ni, 3H) , 3,84 (m, 1H) , 4,14 (bt, 1H), 4,39 (dd, 1H), 7,11-7,28 (m, 5H).
<13>C-NMR (75 MHz, MeOD): guanidin: S 158,66.
Eksempel 41
H00C-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
(i) Et00C-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2-
Alkylering som beskrevet i eksempel 15 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH3 i steden for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) etterfulgt av avspaltningsprosedyren (a) ga tittelforbindelsen.
. (ii) Et-OOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Guanidering av aminet ovenfor på samme måte som beskrevet i eksempel 19 for Z-(R)Cha-Pro-Nag ga tittelforbindelsen (ii).
(iii) H00C-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (e) på produktet (ii) ovenfor.
1-H-NMR (500 MHz, D2): S 1,12 (m, 2H), 1,22-1,48 (m, 3H) , 1,54 (bs, 1H), 1,70-2,37 (m, 12H), 2,14 (s, acetat), 2,53 (m, 1H), 2,70 (bs, 2H), 3,15 (t, 1H), 3,25-3,55 (m, 5H), 3,75 (m, 1H), 3,93 (m, 1H), 4,43 (t, 1H), 4,52 (m, 1H).
Eksempel 42
EtOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Fremstilt ifølge eksempel 41 (ii).
-^H-NMR (500 MHz, D20): § 0,97 (m, 2H) , 1,11-1,39 (m, 7H; derav 1,30 (t, 3H)), 1,50 (t, 2H), 1,62-1,76 (m, 5H), 1,76-2,14 (m, 5H), 1,93 (s, acetat), 2,29 (m, 1H), 2,62 (t, 2H), 2,77-2,94 (m, 2H), 3,23 (t, 2H), 3,32 (t, 2H), 3,60-3,87 (m, 3H), 4,20 (q, 2H), 4,36 (dd, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin; S 157,39; karbonylkarboner: 5 182,05, 175,13, 175,02.
Eksempel 43
H00C-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc
(i) Et-00C-CH=CH-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20) (1 ekv.) og etyl-3-bromkrotonat (1,1 ekv.) ble oppløst i acetonitril (15 ml/mmol). Kaliumkarbonat ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Etter filtrering og avdampning av oppløsningsmidlet ble råproduktet renset ved flammekromatografi (CH2Cl2/MeOH). Til slutt ble oppløsnings-midlet avdampet og produktet tørket i vakuum.
<1->H-NMR (500 MHz, CDC13): S 0,73-1,0 (m, 2H) , 1,0-1,4 (m, 8H; derav 1,33 (t, 3H)), 1,43-2,15 (m, 12H), 2,96 (bs, 1H), 3,12 (dd, 1H), 3,16-3,48 (m, 6H), 3,56 (m, 1H), 4,15 (q, 2H), 4,35 (bs, 1H), 5,03 (s, 1H), 6,0 (d, 1H), 6,85 (dt, 1H), 7,05 (bs, 1H), 7,17-7,37 (m, 5H), 7,5 (bs, 1H).
(ii) Et00C-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Fremstilt ved anvendelse avspaltningsprosedyren (a) på produktet (i) ovenfor.
(iii) H00C-(CH2 )3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc
Fremstilt ved avnendelse av avspaltningsprosedyren (e) på produktet (ii) ovenfor.
%-NMR (500 MHz, D20): 5 1,02 (bs, 2H); 1,08-1,32 (m, 3H), 1,42 (bs, 1H), 1,55-2,15 (m, 14H), 1,93 (s, acetat), 2,33 (bs, 3H), 3,00 (bs, 1H), 3,07 (bs, 1H), 3,18-3,40 (m, 4H), 3,62 (bs, 1H), 3,82 (bs, 1H), 4,33 (bs, 1H), 4,40 (bs, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: S 157,42; karbonylkarboner: S 181,87, 174,34, 168,64.
Eksempel 44
EtOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Fremstilt ifølge eksempel 43 (ii).
<1>H-NMR (300 MHz, MeOD/D20): S 0,63-1,30 (m, 9H; derav 1,02 (t, 3H)), 1,30-1,97 (m, 14H, 2,06 (bs, 1H), 2,28 (m, 2H), 2,72-3,20 (m, 6H), 3,36 (m, 1H), 3,60 (m, 1H), 3,94 (m, 2H), 4,06 (m, 1H), 4,17 (m, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, MeOD/D20): guanidin: 5 158,10; karbonylkarboner: S 175,40, 174,23, 168,54.
Eksempel 45
HOOC-CO(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
(i) EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-NagU)
H-(R )Cha-Pro-Nag(Z), 0,50 g (0,97 mmol) ble oppløst i 0,54 ml trietylamin og 8 ml CH2C12. Etyloksalylklorid, 0,146 g (1,07 mmol) oppløst i 2 ml CH2C12 ble tilsatt mens temperaturen økte fra 22-28°C og reaksjonen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Den organiske fasen ble vasket to ganger med vann tørket (Na2S04) og f lammekromatografert (EtOAc/EtOH
(99 %) , 9/1) for å tilveiebringe 92 mg (15 %) av tittelforbindelsen .
(ii) HOOC-CO-(R)-Cha-Pro-Nag x HOAc
Ved anvendelse av avspaltningsprosedyre (b) etterfulgt av (e) ble tittelforbindelsen oppnådd.
<1->H-NMR (300 MHz, MeOD): S 0,88-1,14 (m, 2H), 1,15-1,5 (m, 4H), 1,5-2,3 (m, 13H); 1,9 (s, acetat), 3,1-3,43 (m, 4H), 3,6 (m, 1H), 4,05 (m, 1H), 4,43 (dd, 1H), 4,5 (m, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,57; karbonylkarboner: § 165,94, 173,95, 174,85 og 181,22.
Eksempel 46
MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
(i) MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
Metylester ble oppnådd ved transforestring av Et00C-C0-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 45) på kolonnen iløpet av flammekromatografi når EtOAc/MeOH (9:1) ble anvendt som elueringsmiddel. Utbytte 55 $.
(ii) MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyre (b) på produktet (i) ovenfor.
^H-NMR (300 MHz, MeOD): S 0,9-1,1 (m, 1H), 1,1-2,3 (m, 17H), 1,9 (s, acetat), 3,12-3,4 (m, 4H), 3,52-3,67 (m, 2H), 3,9 (s, 3H), 4,35 (m, 1H) , 4,65 (m, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,52; karbonylkarboner: 5 159,11, 161,20, 173,17 og 174,90.
Eksempel 47
(R,S)Bla-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R )Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20) og a-brombutyrolakon etterfulgt av avspaltningsprosedyre (a) ga tittelforbindelsen som en blanding av to diastereomerer.
<1>H-NIMR (300 MHz, D20, blanding av diastereomerer): S 1,0-1,43 (m, 5H), 1,45-1,60 (br.s, 1H), 1,64-2,28 (m, 12H), 2,31-2,50 (m, 1H), 2,80-2,98 (m, 1H), 3,23-3,46 (m, 4H), 3,66-3,79 (m, 1H), 3,82-3,96 (m, 1H), 4,33-5,08 (m, 5H, delvis skjult av H-O-D-signalet).
Eksempel 48
HOOC-(R,S)CH(CH2COO)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
i) BnOOC-(R,S)CH(CH2COOBn)-(R)CHa-Pro-Nag(Z)
H-(R )Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20), 0,21 g (0,42 mmol) og 0,12 g (0,42 mmol) dibenzylmaleat ble løst opp i 10 ml CH3CN. Blandingen ble tilbakestrømmet over natt, avdampet og flammekromatografert (CH2Cl2/MeOH, 94/6). Avdampning av oppløsningsmidlet ga den ønskede forbindelsen i 22 % utbytte.
(ii) H00C-(R,S)CH(CH2C00H)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyre (a) på produktet (i) ovenfor.
^H-NMR (500 MHz, MeOD): S 0,9-2,4 (m, 19H), 2,00 (s, acetat), 2,7-3,0 (m, 2H), 3,1-3,6 (m, 5H), 3,75-3,9 (m, 2H), 4,2-4,5 (m, 2H).
Eksempel 4 9
Me00C-(R,S)CH(CH2C00Me)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
(i) MeOOC-(R,S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20), 0,21 g (0,42 mmol) og 0,24 g (1,7 mmol) dimetylmaleat ble løst opp i 15 ml MeOH. Blandingen ble tilbakestrømmet over natt, avdampet og flammekromatografert (CH2Cl2/MeOH, 9/1). Avdampning av oppløsningsmidlet ga den ønskede forbindelsen i 45 $ utbytte.
(ii) MeOOC-(R,S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyre (c) på produktet (i) ovenfor.
<i>H-NMR (500 MHz, MeOD): S 0,85-1,1 (m, 2H) , 1,15-2,3 (m,
17H), 1,91 (s, acetat), 2,6-2,8 (m, 2H), 3,1-3,5 (m, 5H) , 3,5-3,8 (m, 10H, derav 4 singletter 3,66, 3,68, 3,71, 3,73), 4,29 (m, 1H).
Eksempel 50
H00C-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
(i) <t>Bu00C-Ph-4-C<H>2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3
H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3 (se eksempel 22), 0,39 g (1,1 mmol) og 0,33 g (1,2 mmol) tertiarybutyl-p-brommetylbenzoat ble oppløst i 10 ml CH3CH og 0,19 g (2,4 mmol) K2C03 ble tilsatt. Blandingen ble tilbakestrømmet over natt og avdampet. Råproduktet ble flammekromatografert (CH2Cl2/MeOH, 92:8) for oppnåelse av 0,50 g (84 K>) av tittelforbindelsen.
(ii) <t>Bu00C-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2
Til en oppløsning av 0,60 g (1,8 mmol) bis-fenyltiostannan, 0,20 g (1,8 mmol) tiofenol og 0,18 g (1,8 mmol) trietylamin i 50 ml CH2C12 ved 0°C ble det tilsatt 0,50 g (0,92 mmol) <t>Bu00C-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3. Blandingen ble omrørt ved 0°C i 30 min og ved romtemperatur i 4 timer. Den ble deretter fortynnet med CH2C12 og vasket med vandig natriumbikarbonat og deretter tre ganger med 2 % H202. Det organiske laget ble ekstrahert med fortynnet HC1. Den kombinerte sure vannfasen ble vasket med EtOAc og deretter gjort alkalisk med NaOH(aq). Det vandige laget ble ekstrahert to ganger med etylacetat. Det kombinerte organiske laget ble tørket (Na2S04) og avdampet. Flammekromatografi (CH2Cl2/MeOH (NH3-mettet), 8:2) ga 0,12 g (26 %) av tittelforbindelsen.
(iii) HOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Guanidering av amino ovenfor på samme måte som beskrevet i eksempel 19 for Z-(R)Cha-Pro-Nag etterfulgt av avspaltningsprosedyre (f) ga tittelforbindelsen. •^H-NMR (500 MHz, MeCD): S 0,9-1,5 (m, 7H), 1,4-1,9 (m, 9H), 1,95-2,1 (m, 2H), 2,16 (m, 1H), 2,32 (m, 1H), 3,2-3,3 (m, 3H), 3,42 (pentet, 1H), 3,53 (m, 1H), 3,77 (m, 1H), 4,2-4,3 (m, 3H), 4,42 (dd, 1H), 7,15 (d, 2H), 8,10 (d, 2H).
<13>C-NMR (125 MHz, MeOD), guanidin: 5 160,8; karbonylkarboner: § 174,3, 168,9, 168,2.
Eksempel 51
(HO)2P(0)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
(Et0)2P0-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 53), 60 mg (92 mmol) ble oppløst i 3 ml CH3CN. Trimetylsilylbromid, 0,15 ml ble tilsatt og blandingen ble latt stå ved romtemperatur i 21 timer. Etter avdampning og NMR analyse ble det oppdaget at noe ester var igjen. Råmaterialet ble på ny løst opp i 3 ml
CH3CN og 0,15 ml trimetylsilylbromid ble tilsatt. Etter 5 timer ble blandingen avdampet og renset med RPLC (CH3CN/NH4-OAc (0,1 M), 30:70) for å tilveiebringe sluttforbindelsen etter filtrering, avdampning og frysetørking i et 8 % utbytte.
<1->H-NMR (500 MHz, MeOD): S 0,8-1,1 (m, 2H), 1,15-1,4 (m, 4H), 1,5-1,9 (m, 10H), 1,9-2,1 (m, 4H), 1,96 (s, acetat), 2,20 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 3,0-3,2 (m, 3H), 3,4-3,5 (m, 2H), 4,09 (m, 1H), 4,39 (bd, 1H), 4,59 (m, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, MeOD): guanidin: 5 158,6; karbonylkarboner: S 174,2, 170,6.
Eksempel 52
EtO(HO)P(0)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc
(i) (Et0)(H0)P0-CH2-(R)Cna-Pro-Nag(Z)
(Et0)2P0-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 53), 50 mg (77 mmol) ble løst opp i 2 ml EtOH og 2 ml 2 M NaOH. Blandingen ble omrørt over natt og avdampet. Råmaterialet ble renset med RPLC (CH3CN/NH4OAc (0,1 M), 30:70) for å tilveiebringe tittelforbindelsen etter filtrering og avdampning av oppløsningsmidlet.
(ii) (EtO)(H0)PO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (c) på produktet (i) ovenfor.
^H-NMR (500 MHz, MeOD): S 0,9-1,1 (m, 2H), 1,15-1,35 (m, 6H; derav 1,28 (t, 3H)), 1,35-1,5 (m, 2H), 1,5-1,6 (m, 1H), 1,65-1,8 (m, 6H), 1,9-2,1 (m, 3H), 1,91, (s, acetat), 2,19 (m, 1H), 2,8-3,0 (m, 2H) , 3,1-3,25 (m, 2H), 3,27 (m, 1H), 3,36 (m, 1H), 3,48 (m, 1H) , 3,9-4,05 (m, 4H), 4,36 (bd, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, MeOD): guanidin: S 158,6; karbonylkarboner: § 157,0, 174,7.
Eksempel 53
(EtO)2P(0)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
(i) (EtO)2PO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (se eksempel 20), 0,2 g (0,40 mmol) ble oppløst i 5 ml THF og 0,11 g (0,80 mmol) kaliumkarbonat og 0,12 g (0,40 mmol) dietyltriflylmetylfosfonat ble tilsatt. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonen ble opparbeidet med vann og ekstrahering av det vandige laget tre ganger med EtOAc. Det kombinerte organiske laget ble tørket (Na2S04) og avdampet for å tilveiebringe 0,14 g (53 %) av tittelforbindelsen.
(ii) (Et0)2P0-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (c) på produktet (i) ovenfor.
<1>H-NMR (500 MHz, MeOD): S 0,85-1,05 (m, 2H) , 1,15-1,3 (m, 5H), 1,34 (t, 6H), 1,5-1,85 (m, 8H), 1,9-2,05 (m, 3H), 1,91 (s, acetat), 2,10 (m, 1H), 2,22 (m, 1H), 2,90 (dd, 1H), 3,05 (dd, 1H), 3,1-3,3 (m, 3H), 3,42 (m, 1H), 3,53 (m, 1H), 3,71 (dd, 1H), 3,82 (m, 1H), 4,1-4,2 (m, 4H), 4,28 (dd, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, MeOD), guanidin: å 158,7; karbonylkarboner: 5 176,1, 175,1.
Eksempel 54
H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Mag x HOAc
(i) H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)2-NH(Z)
Fremstilt fra Boc-(R)Cha-Pro-OSu og H2N-CH2)2-NH(Z) på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) i eksempel 3.
(ii) EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)2-NH2 x HOAc
Alkylering som i eksempel 4 etterfulgt av avspaltningsprosedyren (a) ga tittelforbindelsen.
(iii) H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Mag x HOAc
Guanidering av aminet ovenfor på samme måte som beskrevet i eksempel 19 for Z-(R)Cha-Pro-Nag etterfulgt av avspaltningsprosedyre (e) ga tittelforbindelsen etter rensing ved RPLC (CH2CN/NH4AOc (0,1 M), 1/4) og frysetørking (H20).
<i>H-NMR (300 MHz, D20): S 0,90-1,18 (m, 2H) , 1,19-1,43 (m, 3H), 1,52 (m, 1H), 1,63-2,20 (m, 10H), 2,06 (s, acetat), 2,31-2,47 (m, 1H), 3,44 (m,2H), 3,50 (m, 2H), 2,60-3,75 (m, 3H), 3,85 (m, 1H), 4,46-4,54 (m, 2H) .
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157-82; karbonylkarboner: S 168,80, 171,42, 174,81.
Eksempel 55
H-(R,S)Pro(3-Ph)-Pro-Agm x 2 TFA
Fremstilt fra Boc-(R,S )Pro(3-Ph)-Pro-0Su (se fremstilling av utgangsmaterialene) på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) i eksempel 3 etterfulgt av avspaltningsprosedyre (b).
^H-NMR (500 MHz, D2O, blanding av to diastereomerer med ukjent relativ stereokjemi): § 1,0-1,8 (m, 7H), 2,0-2,5 (m, 3H), 2,8-4,3 (m, 10H), 4,56 (d, 1H, hoved), 4,90 (d, 1H, hoved), 7,2-7,5 (m, 5H).
<13>C-NMR (125,76 MHz, D20): guanidin: 157,36 (mindre og hoved); karbonylkarboner; § 174,1 (hoved), 174,0 (mindre), 167,8 (hoved), 167,0 (mindre).
Eksempel 56
H-(R,S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-Agm x 2 TFA
Fremstilt fra Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-0su (se fremstilling av utgangsmaterialer) på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) i eksempel 3 etterfulgt av avspaltningsprosedyre (b).
^H-NMR (500 MHz, D20, blanding av to diastereomerer, forhold, 1,8/1): S 0,95-1,32 (m, 5H), 1,35-1,46 (m, 1H), 1,50-1,92 (m, 10H), 1,93-2,15 (m, 4H), 2,23-2,43 (m, 2H) , 3,15-3,30 (m, 4H), 3,35-3,50 (m, 2H), 3,57-3,68 (m, 1H), 3,74-3,82 (m, 1H) , 4,34-4,41 (m, 1H), 4,51 (d, 1H, mindre), 4,48 (d, 1H, hoved).
<13>C-NMR (125,76 MHz, D20): guanidin: S 157,36 (mindre og hoved), karbonylkarboner: S 174,34 (hoved), 174,07 (mindre), 168,94 (mindre og hoved).
Eksempel 57
H00C-CH2-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Agm x 2 TFA
(i) H-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Agm(Z)
Fremstilt fra Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-0Su (se fremstilling av utgangsmaterialene) og Boc-Nag(Z) på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) i eksempel 3.
(ii) H00C-CH2-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Nag x 2 TFA
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av Br-CH2CIIBn etterfulgt av avspaltnignsprosedyre (b) ga tittelforbindelsen som en blanding av to diastereomerer.
^H-NMR (500 MHz, MeOD, blanding av to diastereomerer, forhold ca: 1,5/1): § 1,40-1,85 (m, 4H), 1,90-2,00 (m, 1H) , 2,10-2,30 (m, 1H), 2,45-2,70 (m, 2H) , 3,08-3,46 (m, 6H) , 3,57-3,70 (m, 2H), 3,90-4,0 (m, 1H), 4,32-4,40 (m, 1H), 4,04 og 4,29 (AB-kvartett, 2H hoved), 4,60 (d, 1H, hoved), 4,64 (d, 1H, mindre), 7,3-7,6 (m, 5H).
<13>C-NMR (125,76 MHz, D20): guanidin: S 157,48 (begge isomerer); karbonylkarboner: å 173,90, 173,71, 169,01, 168,94, 167,07 (begge isomerer).
Eksempel 59
H00C-CH2-(R)Cha-Pic-Agm x 2 TFA
(i) H-(R)Cha-Pic-Agm(Z)
Fremstilt fra Boe-(R)Cha-Pic-OSu (se fremstilling av utgangsmaterialer) på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) i eksempel 3.
(ii) HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Agm x 2 TFA
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av Br-CH2C00Bn etterfulgt av avspaltningsprosedyre (a) ga tittelforbindelsen .
<!>h-NMR (300 MHz, MeOD): S 1,02 (m, 2H), 1,13-2,00 (m, 20H), 2,24 (bd, 1H), 3,12-3,45 (m, 5H) , 3,71 (bd, 1H) , 3,87 (s, 2H), 4,65 (bt, 1H), 5,06 (m, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,47; karbonylkarboner: S 169,42, 170,03, 172,71.
Eksempel 60
H00C-CH2-(Me)(R)Cha-(R,S)Pic-Agm x HOAc
(1) Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Agm(Z)
Fremstilt fra Boc-(Me)(R)Cha-Pic-OSu på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) i eksempel 3.
(ii) H00C-CH2-(Me)(R)Cha-(R,S)Pic-Agm x HOAc
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av Br-CH2C00Bn etterfulgt av avspaltningsprosedyre (b) ga tittelforbindelsen .
Kommentar: En epimerisering av Pic oppsto i løpet av syntesen.
^H-NMR spekteret er komplekset bestående av to diastereomerer ca 1:1 forhold og rotamerer derav.
1-H-NMR (500 MHz, MeOD): 5 0,75-2,15 (flere m, 20H), 1,95 (bs, acetat), 2,2-2,7 (6H, to bestemte sett av signaler blir observert i forholdet ca 1:1; derav 2,35 og 2,55 (s, 3H)), 3,0-3,5 (m, 6H), 3,9-4,17 (m, 2H; derav 4,14 (dd)), 4,4-4,5 (m, 1H), 4,97-5,15 (to bdd, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,50: karbonylkarboner: S 169,65, 170,01, 170,54, 172,67, 172,89.
Eksempel 61
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm x TFA
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pic-Agm(Z) (se eksempel 59) og Br-CH(Me)C00Bn etterfulgt av avspaltnignsproseydre (a) ga tittelforbindelsen som en blanding av to diastereomerer.
Eksempel 62
HOOC-(RellerS)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/a x 2 TFA
Oppnådd ved separering av diastereomerene dannet i eksempel 61 ved avnendelse av RPLC (CH3CN/NH4OAc (0,1 M), 1/3) etterfulgt av avdampning av oppløsningsmidlet og frysetørking fra HgO/TFA. Denne diastereomeren kom ut først av de to fra kolonnen.
^H-NMR (300 MHz, D20, 2 rotamerer ca: 5:1 forhold): S 0,70 (m, mindre rotamer), 0,75-1,0 (m, 2H), 1,0-1,28 (m, 3H), 1,29-1,83 (m, 20H; derav 1,57 (d, 3H) ), 2,14 (bd, 1H) , 2,92 (t, mindre rotamer), 3,03-3,32 (m, 5H), 3,59 (bd, 1H), 3,85 (q, mindre rotamer), 3,98 (q, 1H), 4,30-4,50 (m, mindre rotamer), 4,54 (m, 1H), 4,95 (s, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,39; karbonylkarboner: S 172,26 (2 karboner), 169,92.
Eksempel 63
HOOC-(RellerS)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/b x 2 TFA
Tittelforbindelsen ble oppnådd ved anvendelse av samme prosedyre som beskrevet i eksempel 62 på forbindelsen dannet i eksempel 61. Denne diastereomeren kom ut etter den første fra kolonnen.
^H-NMR (500 MHz, D20, 2 rotamerer ca: 5:1 forhold): S 0,72 (m, mindre rotamer), 0,82 (m, mindre rotamer), 0,97 (m, 2H), 1,0-1,23 (m, 3H), 1,23-1,40 (m, 2H), 1,40-1,83 (m, 18H; derav 1,63 (d, 3H)), 2,11-1,40 (m, 2H), 2,17 (d, mindre rotamer), 2,92 (t, mindre rotamer), 3,05-3,25 (m, 4H), 3,29 (t, 1H),
3,74 (d, 1H), 4,02 (q, 1H) , 4,34 (d, mindre rotamer), 4,41 (dd, mindre rotamer), 4,52 (t, 1H), 4,95 (s, 1H).
<13>C-NMR (135 MHz, D20): guanidin: S 154,68; karbonylkarboner; 5 169,60, 167,36.
Eksempel 64
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Ågm x 2 TFA
Fremstilt fra H-(R)Cha-Pic-Agm(Z) (se eksempel 59) på samme måte som beskrevet for H00C-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm i eksempel 15 ved anvendelse av 1,2 ekv benzylkarylat i stedet for 1,1 ekv.
^H-NMR (500 MHz, D20, 2 rotamerer ca: 4:1 forhold): S 0,70-0,90 (m, mindre rotamer), 0.90-1,0 (m, 2H), 1,05-1,25 (m, 3H), 1,30-1,45 (m, 2H), 1,45-1,85 (m, 15H), 2,1 (bd, 1H), 2,2 (bd, mindre rotamer), 2,75 (t, 2H), 2,95 (t, mindre rotamer), 3,1-3,4 (m, 7H), 3,75 (bd, 1H), 4,55 (t, 1H), 4,95 (m, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20):. guanidin: S 157,48; karbonylkarboner: § 170,10, 172,58, 174,75.
Eksempel 65
H-(R)Cha-Pic-Nag x 2 TFA
(i) Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z)
(la) Fremstilt ved å begynne fra Boc-(R)Cha-Pic-OSu ved anvendelse av den samme prosedyre som beskrevet for Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z ) i eksempel 3.
(ib) Fremstilt ved å begynne fra Bov-(R)Cha-Pic-0H
Difenylfosforylazid (0,432 ml, 2 mmol) ble tilsatt til en omrørt oppløsning av Boc-(R)Cha-Pic-0H (765 mg, 2 mmol) i 5 mL DHF ved -10°C. Etter 10 min. ble H-Nag(Z) x 2 HC1 (600 mg, 2,1 mmol), se fremstilling av utgangsmaterialet) i 5 ml DMF og trimetylamin (615 mg, 4,4 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppbevart i et isbad i 3 timer og deretter ved romtemperatur i 12 timer og ble deretter helt ut i vann. Ekstrahering av vannfasen med EtOAc etterfulgt av tørking (MgSO/^) av den organiske fasen og avdampning av oppløsnings-midlet i vakuum ga 1,18 g (96 %) av produktet som en blanding av diastereomerer (epimerer i Pic) i et forhold på 97:3
(RS/RR).
(ic) Begynnende fra Boc-(R)Cha-Pic-0H
EDC hydroklorid (4,2 g, 21,9 mmol) ble tilsatt ved -15°C til en omrørt oppløsning av Boc-(R )Cha-Pic-0H (8 g, 20,9 mmol) DMAP (10,6 g, 88 mmol) og H-Nag-(Z) x 2 HC1 (6,3 g, 19,5 mmol, se fremstilling av utgangsmaterialet) i acetonitril. Reaksjonsblandingen ble varmet opp til +15°C i løpet av 16 timer. Oppløsningsmidlet ble fjernet i vakuum og resten ble løst opp i etylacetat. Vasking med vann, 0,3 M KHS04, 0,3 M NaHC03, vann og saltvann etterfulgt av tørking (NagSO^j) og avdampning av oppløsningsmidlet ga 11,9 g (92,5 $) av produktet som en blanding av diastereomerer (epimerer i Pic) i et forhold på 98/2 (RS/RR).
<i>H-NMR (500 MHz, CDCI3): S 0,85-2,0 (m, 29H; derav, 1,40 (bs, 9H)), 2,46 (bd, 1H) , 3,1-3,4 (m, 5H) , 3,92 (bd, 1H) , 4,53 (bq, 1H), 5,10 (s, 2H), 5,22 (bs, 1H) , 5,29 (bd, 1H), 6,7-7,2 (b, 3H), 7,25-7,45 (m, 5H).
<13>C-NMR (125 MHz, CDCI3): guanidin 5 156,9; karbonylkarboner: § 173,6, 170,3, 163,7, 161,7.
(ii) H-(R)Cha-Pic-Nag(Z)
Fremstilt på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) i eksempel 3, begynnende fra Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z).
^H-NMR (500 MHz, CDC13) S 0,8-2,0 (m, 22H), 2,24 (bd, 1H) , 3,1-3,4 (m, 5H), 3,72 (bd, 1H), 3,84 (bq, 1H), 5,05 (bd, 1H), 5,08 (s, 2H), 7,3-7,5 (m, 5H).
(iii) H-(R)Cha-Pic-Nag x 2 TFA
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (a) på produktet (ii) ovenfor.
1-H-NMR (500 MHz, MeOD): S 0,9-1,1 (m, 2H), 1,2-2,0 (m, 18H), 2,32 (bd, 1H), 3,20 (t, 2H), 3,30 (t, 2H), 3,36 (m, 1H), 3,69 (bd, 1H), 4,49 (dd, 1H), 5,05 (bd, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, MeOD): guanidin: 5 158,7; karbonylkarboner: S 172,7, 171,4.
Eksempel 66
Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag x 2 TFA
(i) Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag(Z)
Fremstilt på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) i eksempel 3 begynnende fra Boe-(Me)(R)Cha-Pic-OSu og Boc-Nag(Z). En epimeri sering av Pic oppsto i løpet av syntesen og produktet ble oppnådd som blanding av to diastereomerer.
(ii) Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag x 2 TFA
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (b). -NMR spekteret er omfattende bestående av to diastereomere ca: 4:1 forhold og rotamerer derav.
<1->H-NMR (500 MHz, MeOD): § 0,8-1,08 (m, 2H), 1,15-2,4 (flere m, 19H), 2,6-2,75 og 2,9-2,95 (flere s, 3H9 3,1-3,6 (flere m, 5H), 3,75-4,1 (flere m, 1H), 4,4-4,7 (flere m, 1H), 5,05-5,15 (to dd, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: S 154,84; karbonylkarboner: S 167,60 og 169,99.
Eksempel 67
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag
(i) Bn00C-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(Z)
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (se eksempel 65) og Br-CH2C00Bn ga tittelforbindelsen.
<i>H-NRM (500 MHz, CDC13): S 0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,7 (m, 19H), 1,79 (bd, 1H), 2,3-2,5 (m, 2H; derav 2,38 (bd, 1H)), 3,00 (bt, 1H), 3,1-3,4 (m, 5H; derav 3,38 (d, 1H);;, 3,58 (d, 1H), 3.6- 3,7 (m, 2H), 5,06 (dd, 2H), 5,07 (s, 2H), 5,16 (bs, 1H) , 6.7- 7,1 (b, 1H), 7,15 (bs, 1H), 7,2-7,4 (m, 10H).
<13>C-NMR (125 MHz, CDC12) guanidin og karbonylkarboner: S 176,0, 173,6, 170,8, 163,8, 161,7.
(iia) H00C-CH2-(R)Cha-Pic-Nag x 2 HC1
Avspaltningsprosedyre (a) etterfulgt av rensing med RPLC ved anvendelse av C^CN/O.l M NH40Ac , 1/3 som euleringsmiddel, avdampning ved 40-50°C og frysetørking ga tittelforbindelsen som acetat. Behandling med et 20-ganger overskudd av saltsyre, avdampning og fornyet frysetørking ga bis-hydro-kloridet av den ønskede forbindelsen.
1-H-NMR (500 MHz, D20): guanidin S: 157,4; karbonylkarboner: S 169,9, 170,2, 173,0.
(iib) H00C-CH2-(R)Cha-Pic-Nag x 2 HBr
BnOOC-Ch2-(R)Cha-Pic-Nag(Z) ble løst opp i <i>Pr-0H/H20 (95/5) og hydrert over 5 $ Pd/C ved atmosfærisk trykk i nærvær av HBr (2,2 ekv.). Katalysatoren ble filtrert ut og oppløsnings-midlet avdampet til en gul olje. (Alternativt kan syren ble tilsatt etter hydrering og filtrering). Krystallisering fra <ip>r-OH (eller EtOH)/EtOAc (1/1) ga tittelforbindelsen som et hvitt krystallinsk pulver.
<i>H-NMR.^OO MHz, D20, blandinger av to rotamerer): 5 1,15-2,0 (m, 20H), 2,30 (bd, 1H) , 3,30 (m, 2H) , 3,40-3,50 (m, 3H) , 3,85-3,90 (m, 1H), 3,95 (tilsynelatende s, 2H), 4,75-4,85 (m, 1H, delvis skjult av H-O-D-linjen), 5,10 (bs, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: S 157,6; karbonylkarboner: S 169,7, 170,2, 173,0.
Eksempel 68
MeOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag x 2 TFA
Metylester MeOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(Z) ble oppnådd ved transforestring av <i>PrOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (se eksempel 69) på kolonnen i løpet av flammekromatografi når CH2Cl2/MeOH ble anvendt som elueringsmiddel. Tittelforbindelsen ble oppnådd ved avspaltningsprosedyren (a).
1-H-NMR (500 MHz, MeOD): S 0,95-1,15 (m, 2H), 1,2-1,6 (m, 6H), 1,65-2,0 (m, 13H), 2,25 (bd, 1H), 3,21 (t, 2H), 3,30 (t, 2H), 3,37 (m, 1H), 3,71 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,97 (dd, 2H), 4,67 (bt, 1H), 5,05 (bs, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, MeOD), guanidin: S 158,0; karbonylkarboner: 5 173,0, 171,1 168,3.
Eksempel 69
iprOOC-CH^RjCha-Pic-Nag x 2 TFA
Alkylering som beskrevet i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (se eksempel 65) og Br-CHg-COO<ip>r etterfulgt av avspaltningsprosedyren (a) ga tittelforbindelsen.
<1>H-NMR (500 MHz, MeOD): S 0,95-1,1 (m, 2H), 1,15-1,6 (m, 12H; derav 1,25 (d, 3H), 1,28 (d, 3H)), 1,65-1,95 (m, 12H), 2,28 (bd, 1H), 3,21 (t, 2H), 3,30 (t, 2H), 3,36 (m, 1H) , 3,93 (dd, 2H), 4,67 (t, 1H), 5,04 (bs, 1H), 5,11 (pentet, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, MeOD): guanidin: å 157,9; karbonylkarboner: 5 173,1, 171,0, 168,3.
Eksempel 70
HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-(RellerS)Plc-Nag/b x 2 TFA
Alkylering som beskrevet i eksempel 4 ved avnendelse av Me(R )Cha-(R,S)Pic-Nag(Z) (se eksempel 66) og Br-CH2C00Bn etterfulgt av avspaltningsprosedyre (b) ga H00C-CH2-(Me)(R)-Cha-(R,S)Pic-Nag. De to diastereomerene ble separert ved RPLC (CH3CN/NH4OAC, 1:3) etterfulgt av frysetørking fra H20/TFA. Denne diastereomeren kom ut sist av de to fra kolonnen.
1-H-NMR (500 MHz, MeOD): S 0,9-1,1 (m, 2H) , 1,15-1,35 (m, 4H) , 1,4-1,55 (m, 2H), 1,6-1,85 (m, 12H), 2,3 (m, 1H), 2,85 (s, 3H), 3,15-3,45 (m, 5H), 3,65 (bs, 2H), 4,0 (m, 1H), 4,65 (m, 1H), 5,08 (dd, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,65; karbonylkarboner: S 169,86 og 172,48.
Eksempel 71
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag x 2 TFA
Alkylering som beskrevet i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (se eksempel 65) og Br-CH(Me)-COOBn etterfulgt av avspaltningsprosedyre (a) ga tittelforbindelsen som en blanding av fire diastereomerer.
Eksempel 72
HOOC-(RellerS)CH(Me)-(R)Cha-(RellerS)Pic-Nag/c x 2 TFA
Oppnådd ved separering av diastereomerene dannet i eksempel 71 ved anvendelse av av RPLC (CH3CN/NH4OAc (0,1 M), 1/4) etterfulgt av avdampning og frysetørking fra H20/TFA. Denne diastereomeren kom ut som nr 3 av de fire fra kolonnen.
1-H-NMR (300 MHz, D20, rotamerer ca: 5:1 forhold): S 0,88 (m, mindre rotamer), 0,98-1,63 (m, 7H), 1,63-2,02 (m, 16H; derav 1,68 (d, 3H), 2,28 (m, 1H), 3,10 (t, mindre rotamer), 3,25-3,50 (m, 5H; derav 3,33 (t, 2H) og 3,43 (t, 2H)), 3,82 (bd, 1H), 4,02 (q, 1H), 4,55 (d, mindre rotamer), 4,65 (t, mindre rotamer), 4,72 (m, 1H), 5,10 (m, 1H).
Eksempel 73
HOOC-(RellerS)-CH(Me)-(R)Cha-(RellerS)Pic-Nag/d x 2 TFA
Oppnådd ved separering av diastereomerene dannet i eksempel 71 ved anvendelse av RPLC (CH3CN/NH40Ac (0,1 M), 1:4) etterfulgt av avdampning og frysetørking fra HgO/TFA. Denne diastereomeren kom ut sist av de fire diastereomerene fra kolonnen.
1-H-NMR (500 MHz, D20, 2 rotamerer ca: 5:1 forhold): 5 0,80 (m, mindre rotamer), 0,90 (m, mindre rotamer), 1,03 (m, 2H),
1,10-1,33 (m, 3H), 1,42 (m, 2H) , 1,51-1,92 (m, 16H, derav 1,57 (d, 3H)), 2,18 (d, 1H), 2,24 (d, mindre rotamer), 2,98 (t, mindre rotamer), 3,21 (t, 2H), 3,28-3,40 (m, 3H, derav 3.44 (t, 2H)), 3,82 (d, 1H), 4,02 (q, 1H), 4,42 (d, mindre rotamer), 4,50 (t, mindre rotamer), 4,62 (t, 1H), 4,67 (s, mindre rotamer), 5,03 (s, 1H).
Eksempel 74
H00C-CH2-CH2-(R)Cna-Pic-Nag x 2 TFA
Fremstilt fra H-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (se eksempel 65) på samme måte som beskrevet for H00C-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm i eksempel 15 ved anvendelse av 1,2 ekv. benzylakrylat i stedenfor 1,1 ekv.
1H-NMR (500 MHz, D20, 2 rotamerer ca: 4:1 forhold): S 0,7-0,9 (m, mindre rotamer), 0,9-1,0 (m, 2H), 1,05-1,3 (m, 3H), 1,3-1.45 (m, 2H), 1,5-1,8 (m, 13H), 2,10 (d, 1H), 2,20 (s, mindre rotamer), 2,75 (t, 2H), 2,95 (t, mindre rotamer), 3,15 (t, 2H), 3,2-3,35 (m, 5H), 3,75 (d, 1H), 4,55 (t, 1H), 4,95 (m, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: § 157,57, karbonylkarboner 5 170,16, 172,82, 174,75.
Eksempel 75
H00C-CH2-(R)Cha-(R,S)Mor-Agm x 2 TFA
(i) H-(R)Cha-Mor-Agm(Z)
Fremstilt fra Boc-(R)Cha-Mor-0Su (se fremstilling av utgangsmaterialet) på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) i eksempel 3.
(ii) H00C-CH-(R)Cha-(R,S)Mor-Agm x 2 TFA
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av Br-CHgCOOBn etterfulgt av avsplatningsprosedyre (b) ga tittelforbindelse. En epimerisering av Mor var oppstått et eller annet sted i løpet av syntesen og en blanding av omtrent 9:1 av to diastereomerer ble observert i sluttproduktet.
1-H-NMPv (300 MHz, MeOD): S 0,92-1,95 (m, 17H), 3,12-3,39 (m, 4H), 3,44-4,05 (m, 7H) , 4,37 (s, 1H), 4,63 (m, 1H) , 4,79 (bd, 1H).
<13>C-NMR (75,47 MHz, MeOD): guanidin: S 158,63, karbonylkarboner: 5 170,87, 170,82, 169,08 andre: S 69,06, 67,01 (C-0-C ).
Eksempel 76
HOOC-CH2-(R)Cha-(RellerS)Mor-Nag x 2 TFA
(i) H-(R)Cha-Mor-Nag(Z)
Fremstilt fra Boc-(R)Cha-Mor-0Su (se fremstilling av utgangsmaterialet) og Boc-Nag(Z) på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) i eksempel 3.
(ii) HOOC-CH2-(R)Cha-(RellerS)Mor-Nag x 2 TFA
Alkylering som beskrevet i eksempel 4 ved anvendelse av Br-CHgCOOBn etterfulgt av avspaltningsprosedyre (b) ga tittelforbindelsen .
<!>h-NMR (300 MHz, MeOD): S 0,92-1,13 (m, 2H), 1,15-1,42 (m, 3H), 1,50 (br.s, 1H), 1,62-1,95 (m, 9H) , 3,14-3,40 (m, 4H), 3,46-4,13 (m, 7H), 4,41 (s, 1H), 4,63 (m, 1H), 4,80 (br. d, 1H).
<13>C-NMR (75,47 MHz, MeOD): guanidin: S 158,68, karbonyl-
karboner: S 171,19, 170,90, 169,46. andre: S 68,81, 67,00 (C-0-C).
Eksempel 77
H-(R)Cha-Aze-Nag x 2 HOAc
(i) Boc-(R)Cha-Aze-Nag(Z)
Fremstilt fra Boe-(R )Cha-Aze-OH på samme måte som beskrevet for Boe-(R )Cha-Pic-Nag( Z ) ifølge eksempel 65 (ic).
(ii) H-(R)Cha-Aze-Nag(Z)
Fremstilt på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
(se eksempel 3).
(iii) H-(R)Cha-Aze-Nag x 2 HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyre (a) på produktet (ii) ovenfor.
^H-NMR (300 MHz, D20): S 0,85-1,10 (m, 2H) , 1,10-2,04 (m, 13H) 1,95 (s, acetat), 2,20-2,37 (m, 1H) , 2,60-2,82 (m, 1H), 3,15-3,40 (m, 4H), 3,96-4,15 (m, 2H), 4,18-4,30 (m, 1H), 4,30-4,42 (m, 1H), signaler til en mindre rotamer fremkom ved: § 0,70, 3,90 og 5,10.
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: 5 157,39 og karbonylkarboner: S 170,22 og 172, 38.
Eksempel 78
H00C-CH2(R)Cha-Aze-Nag x HOAc
(i) BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Nag(Z)
Fremstilt fra H-(R)Cha-Aze-Nag(Z) (se eksempel 77) ifølge fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4.
(ii) H00C-CH2-(R)Cha-Aze-Nag x HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltning (a) på produktet (i) ovenfor.
<1>H-NMR (500 MHz, MeOD): S 0,90-1,10 (m, 2H), 1,15-2,00 (m, 13H), 1,95 (s, acetat), 2,20-2,30 (m, 1H), 2,58-2,70 (m, 1H), 3,17-3,30 (m, 4H) , 3,35-3,50 (m, 2H) , 3,55-3,68 (m, 1H) , 4,10-4,20 (m, 1H), 4,30-4,38 (m, 1H) , 4,65-4,77 (m, 1H) , signaler til mindre rotamer fremkom ved: S 3,75, 3,98, 4,03 og 5,08.
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: 5 157,40 og karbonylkarboner: S 169,16, 171,92 og 172,13.
Eksempel 79
H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag x 2 HC1
(i) Boc-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag(Z)
Samme prosedyre som beskrevet for koblingen mellom Boc-(R)Cha-OH og H-Pic-OEt x HC1 (se fremstilling av utgangsmaterialet) ble anvendt for å oppnå koblingen mellom Boc-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-0H og H-Nag(Z) x 2 HC1.
(ii) H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag(Z)
Samme prosedyre som beskrevet for syntese av H-(R)-Cgl-Pic-Nag(Z) (se eksempel 84 (ii) ble anvendt.
(iii) H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag x 2 HC1
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyre (d) på produktet (ii) ovenfor.
<i>H-NMR (300 MHz, D20): § 1,0-2,3 (m, 21H), derav 1,47 (s, 3H), 2,4-2,55 (m, 1H) , 3,3-3,6 (m, 4H), 4,30 (bt, 1H) , 4,38(dd, 1H), 4,47 (bt, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,6 karbonylkarboner: S 174,6, 169,6.
Eksempel 80
H00C-CH2-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag x HOAc
Alkylering som i eksempel 4 ved anvendelse av H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag(Z) (se eksempel 79) og Br-CH2-C00Bn etterfulgt av avspaltningsprosedyre (a) ga tittelforbindelsen .
<1->H-NMR (300 MHz, D20) , S 0,9-1,9 (m, 19H), derav 1,34 (bd, 3H), 1,93 (s, acetat), 2,0-2,2 (m, 3H), 2,34 (m, 1H), 3,1-3,5 (m, 7H), 3,97 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,31 (bt, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D2u): guanidin: S 157,4.
Eksempel 81
H00C-CH2-(R)Cha-(RellerS)Pic(4,5-dehydro)-Nag/b x HOAc
(i) Boc-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-Nag(Z)
Fremstilt fra Boc-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-0H på samme måte som beskrevet for Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (se eksempel 65 (ic)).
(ii) H-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-Nag(Z)
Fremstilt på samme måte beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (se eksempel 3).
( iii) Bn00C-CH2-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-Nag(Z )
Fremstilt fra H-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-Nag(Z) ifølge fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4.
(iv) H00C-CH-(R)Cha-(RellerS)Pic(4,5-dehydro)-Nag/b x HOAc
En blanding av 356 mg (0,539 mmol) Bn00C-CH2-(R)Cha-(R,S)Pic-(4,5-dehydro)-Nag(Z), 10,8 ml trifluoreddiksyre og 3,4 ml tioanisol ble omrørt ved romtemperatur i 3,5 timer. Vann ble tilsatt og blandingen ble vasket to ganger med CH2C12 avdampning av oppløsningsmiddelet ga H00C-CH2-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-Nag. Tittelforbindelsen ble oppnådd evd separering av diastereomerene ved RPLC (CH3CN/NH4OAC (0,1 M), 3/7) og frysetørking (H20) etter avdampning av oppløsnings-middelet. Diastereomeren kom ut sist av de to fra kolonnen.
<i>H-NMR (300 MHz, D20) S 0,85-1,95 (m, 15H), 2,50-2,80 (m, 2H), 3,25 (t, 2H), 3,35 (t, 2H), 3,55 (bs, 2H), 3,85-4,6 (m, 3H), 4,92 (mindre rotamer), 5,30 (d, 1H), 5,85-6,1 (m, 2H),
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,59, karbonylkarboner: S 171,46, 172,58, 173.03.
Eksempel 82
H00C-CH2-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag x 2 HC1
(i ) Boc-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag(Z)
Fremstilt fra Boc-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-0H på samme måte som beskrevet for Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) ifølge fremgangsmåten (ic) i eksempel 65.
(ii ) H-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag(Z)
Fremstilt på samme måte beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (se eksempel 3).
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag(Z)
Fremstilt fra H-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag(Z) ifølge fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4.
(iv) H00C-CH2-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag x 2 HC1
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (d) på produkt (iii) ovenfor.
iH-NMR (500 MHz, D20): S 0,95-2,05 (m, 22H, derav 1,05 (d, 3H)), 2,30-2,38 (bd, 1H) , 3,28-2,36 (m, 2H), 3,36-3,50 (m, 3H), 3,85-3,95 (m, 1H) , 3,98 (s, 2H) , 4,70-4,90 (m, 1H, delvis gjemt bak HOD signalet), 5,22-5,27 (d, 1H) , signalet til en mindre rotamer fremkommer ved S 0,93. 3,13 og 4,57
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: S 157,58; karbonylkarboner: S 170,12, 170,32 og 172,82.
Eksempel 83
H00C-CH2-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag x 2 HC1
(i) Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag(Z)
Fremstilt fra Boe-(R)Cha-(R )Pic(4-(R)Me)-0Su og Boc-Nag(Z) på samme måte som beskrevet for Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (se eksempel 3).
(ii) H-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag(Z)
Fremstilt på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
(se eksempel 3).
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag(Z)
Fremstilt fra H-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag(Z) ifølge fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4.
(iv) H00C-CH2-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag x 2 HC1
Dannet ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (d) på produktet (iii) ovenfor.
<1>H-NMR (500 MHz, D20): 5 1,00-2,05 (m, 22H), 2,18-2,26 (bd, 1H), 3,28-3,36 (m, 2H), 3,36-3,55 (m, 3H), 3,85-4,05 (m, 3H), 4,70-4,90 (m, 1H, delvis gjemt bak HOD signalet), 5,35-5,30 (d, 1H), signaler til mindre rotamer fremkommer ved: 5 2,40, 2,90, 4,10, 4,42, 4,55 og 5,23.
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: S 157,56; karbonylkarboner: S 169,69, 169,84 og 173.20.
Eksempel 84
HOOC-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag x 2 HC1
(i) Boc-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)
Fremstilt fra Boc-(R)Cgl-Pic-0H på samme måte som beskrevet for Boe-(R)Cha-Pic-Nag(Z) ifølge fremgangsmåten (ic) i eksempel 65.
<i>H-NMR (300 MHz, CDC13): S 0,9-1,8 (m, 27H), 2,4 (d, 1H), 3,1-3,3 (m, 5H), 3,9 (d, 1H), 4,2 (t, 1H), 5,1 (s, 2H), 5,2 (bd, 2H), 6,7-7,4 (m, 9H).
(ii) H-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)
gassformig hydrogenklorid ble boblet gjennom en oppløsning av Boc-(R)Cgl-pic-Nag(Z) (1,38 g, 2,22 mol) i etylacetat (25 ml). Etter 10 minutter ble oppløsninsmiddelet avdampet og resten ble løst opp i etylacetat og 10% Na2C03. Den organiske fasen ble separert, vasket med saltvann og tørket (MgSO^.
Avdampning av oppløsningsmiddelet ga 1,02 g (92$) av tittelforbindelsen.
<i>H-NMR (300 MHz, MeOD): S 1,0-1,9 (m, 18H), 2,2-2,3 (m, 1H) , 3,2-3,3 (m, 5H), 3,6 (s, 1H), 3,8-3,9 (bd, 1H), 4,2 (t, 1H), 4,7-4,8 (bs, 5H), 5,1 (s, 2H), 5,2 (s, 1H), 7,2-7,3 (m, 5H).
(iii) Bn00C-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)
En oppløsning av triflatester av benzylglycolat (291 mg, 0,98 mmol) i CH2C12 (2 ml) ble tilsatt ved -25° C til en omrørt blanding av H-(R )Cgl-Pic-Nag(Z) (0,52 g, 1,04 mmol) og K2C03 (494 mg, 3,58 mmol) i acetonitril (5 ml) og CH2C12 (1 ml). Temperaturen ble latt nå romtemperatur i løpet av noen timer og etter 5 dager ble reaksjonsblandingen fortynnet med vann og ekstrahert med EtOAc og toluen. Tørking av den organiske fasen (MgS04) og konsentrer ing av oppløsningen ga 319 mg (47$) farveløse krystaller.
<i>H-NMR (500 MHz, CDC13): § 1,0-1,1 (m, 1H), 1,1-1,3 (m, 4H) , 1,35-1,6 (m, 5H), 1,6-1,85 (m, 8H), 1,8-2,2 (bs, 1H), 2,23-2,5 (m, 2H), 2,9 (t, 1H) , 3,1-3,5 (m, 6H), 3,6-3,7 (m, 2H), 5,0-5,1 (m, 4H), 5,2 (s, 1H), 6,5-7,4 (m, 13H).
(iv) H00C-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag x 2 HC1
Bn00C-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag(Z) (319 mg, 0,49 mmol) ble løst opp ved oppvarming i isopropanol (50 ml) og vann (5 ml) og hydrogenert i 24 timer over 10$ Pd/C (228 mg). Etter filtrering og avdampning av oppløsningsmiddelet og påfølgende oppløsning i fortynnet saltsyre etterfulgt av frysetørking ble peptidet (223 mg, 91$) isolert som et hvitt pulver.
1-H-NMR (500 MHz, D20): S 1,1-2,1 (m, 18H) 2,3 (d, 1H) , 3,3 (t, 2H), 3,4 (t, 3H), 3,85-4,05 (m, 3H), 4,6 (d, 1H), 5,15 (s, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,43 karbonylkarboner: S 169,2, 172,94.
Eksempel 85
H-(R)Hoc-Pro-Nag x 2 TFA
(i) Boc-(R)Hoc-Pro-Nag(Z)
Fremstilt fra Boe-(R)Hoc-Pro-OH på samme måte som beskrevet for Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) ifølge eksempel 65 (ic).
(ii) H-(R)Hoc-Pro-Nag(Z)
Fremstilt på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
(se eksempel 3).
(iii) H-(R)Hoc-Pro-Nag x TFA
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyre (a) på produktet (ii) ovenfor.
^■H-NMR (300 MHz, D20): 5 0,90-1,05 (m, 2H) , 1,16-1,48 (m, 6H), 1,48-1,84 (m, 6H), 1,84-2,24 (m, 6H), 2,40 (m, 1H) , 3,25-3,45 (m, 4H), 3,74 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,51 (m, 1H).
Eksempel 86
HOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-Nag x HOAc
(i) BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-Nag(Z)
Fremstilt fra H-(R )Hoc-Pro-Nag(Z) (se eksempel 85) ifølge prosedyren beskrevet i eksempel 4.
(ii) HOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-Nag x HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyre (a) på produktet (i) ovenfor.
1-H-NMR (300 MHz, D20): S 0,76-0,97 (m, 2H), 1,00-1,37 (m, 6H), 1,50-2,12 (m, 12H), 1,89 (s, acetat), 2,27 (m, 1H) , 3,10-3,33 (m, 4H), 3,41 (bs, 2H), 3,61 (m, 1H), 3,77 (m, 1H), 4,12 (m, 1H), 4,37 (m, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: S 157,4, karbonylkarboner: S 170,8, 173,9, 174,5.
Eksempel 87
H00C-CH2-(R)Hoc-Pic-Nag x HOAc
(i) Boc-(R)Hoc-Pic-Nag(Z)
Fremstilt fra Boc-(R)Hoc-Pic-0H på samme måte som beskrevet for Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) ifølge fremgangsmåte(ic) i eksempel 65 .
(ii) H-(R)Hoc-Pic-Nag(Z)
Fremstilt på samme måte som beskrevet for H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
(se eksempel 3).
(iii) Bn00C-CH2-(R)Hoc-Pic-Nag(Z)
Fremstilt ifølge fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4.
(iv) H00C-CH2-(R)Hoc-Pic-Nag x HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyre (a) på produktet (iii) ovenfor.
<i>H-NMR (300 MHz, D20): S 0,75.0,95 (m, 2H), 1,00-1,30 (m, 6H), 1,30.1,50 (m, 2H), 1,50-1,82 (m, 12H), 1,82-1,95 (bs,
acetat), 2,23 (bd, 1H), 3,08-3,32 (m, 6H), 3,52 (bs, 2H), 3,77 (bd, 1H), 4,50 (bs, 1H), 5,00 (bs, 1H).
Eksempel 88
H00C-CH2-(R)Dph-Pic-Nag x 2 HC1
(i) Boc-(R)Dph-Pic-Nag(Z)
Fremstilt fra Boc-(R)Dph-Pic-OH på samme måte som beskrevet for Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (se eksempel 65 (ic)).
(ii) H-(R)Dph-Pic-Nag(Z)
Fremstilt på samme måte som beskrevet for H-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)
(se eksempel 84 (ii)).
(iii ) BnOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nag(Z)
Fremstilt fra H-(R)Dph-Pic-Nag(Z) ifølge fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4.
(iv) HOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nag x 2 HC1
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyre (d) på produktet (iii) ovenfor.
1-H-NMR (500 MHz, D20): S 0,46 (m, 1H) , 1,2-1,35 (m, 2H), 1,45 (m, 1H), 1,53 (m, 1H), 1,89 (pentet, 2H), 2,03 (bd, 1H), 3,24 (bt, 1H9, 3,29 (t, 2H), 3,38 (t, 2H), 3,72 (d, 1H), 3,78 (d, 1H), 3,79 (m, lh), 4,68 (d, 1H), 4,89 (m, 1H), 5,73 (d, 1H), 7,4-7,6 (m, 6H), 7,65 (t, 2H), 7,81 (s, 2H).
Eksempel 89
H00C-CH2-(r)Dch-Pic-Nag x HOAc
(i) Boc-(R)Dch-Pic-Nag(Z)
Fremstilt fra Boc-(R)Dch-Pic-OH på samme måte som beskrevet for Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (i eksempel 65 (ic).
(ii) H-(R)Dch-Pic-Nag(Z)
Fremstilt på samme måte som beskrevet for H-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)
(i eksempel 84 (ii).
(iii) BnOOC-CH2-(R)Dch-Pic-Nag(Z)
Fremstilt fra H-(R)Dch-Pic-Nag(Z) ifølge fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4.
(iv) HOOC-CH2-(R)Dch-Pic-Nag x HOAc
Fremstilt ved anvendelse av avspaltningsprosedyren (a) på produktet (iii) ovenfor.
<1>H-NMR (500 MHz, D20): 5 1,2-2,0 (m, 30H), 2,09 (s, acetat), 2,30 (bd, 1H), 3,32 (t, 2H), 3,4-3,5 (m, 3H), 3,65 (d, 1H) , 3,70 (d, 1H), 3,86 (bd, 1H), 4,86 (m, 1H), 5,09 (m, 1H).
<13>C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: S 159,4, karbonylkarboner: å 172,5, 173,3, 174,9.
Eksempel Pl
Oppløsning for parenteral administrering
En oppløsning blir dannet fra følgende ingredienser:
Den aktive substituenten, natriumklorid og eddiksyre blir løst opp i vann. pH blir justert med 2 M NaOH til pH 3-7. Oppløsningen blir filtrert gjennom et sterilt 0,2 pm filter og blir aseptisk fylt inn i sterile ampuller.
Eksempel P2
Tabletter for oral administrering
1000 tabletter blir dannet fra følgende ingredienser:
Den aktive konstituenten og laktose ble blandet med en vandig oppløsning av polyvinyl pyrrolidon. Blandingen blir tørket og malt for å danne granuler. Mikrokrystallinsk cellulose og deretter magnesiumstearat blir blandet sammen. Blandingen blir deretter komprimert i en tablettmaskin til 1000
tabletter hver inneholdende 100 mg aktiv konstituent.
Biologi
Bestemmelse av trombinkoaguleringstiden og IC5Q TT:
Human trombin (T 6769, Sigma Chem Co) i bufferoppløsning, pH 7,4, 100 pl og inhibitor oppløsning, 100 pl, ble inkubert i 1 min. Sammenslått normal sitrat humant plasma, 100 pl ble deretter tilsatt og koaguleringstiden målt i en automatisk innretning (KC 10, Amelung).
Koaguleringstiden i sekundet ble plottet mot inhibitor-konsentrasjon og IC5QTT ble bestemt ved interpolasjon. IC50TT er konsentrasjon av inhibitor som dobler trombinkoaguleringstiden for humant plasma. pICsgTT er -log 10 til IC50TT i mol/l. Foretrukne forbindelser ifølge oppfinnelsen har pIC50TT i området 6,6 - 8,2-
Bestemmelse av aktivert partielt tromboplastintid ( APTT)
APTT ble bestemt i sammenslått normalt humant sitrat behandlet plasma med reagenset PTT automatisert 5 fra Stago. Inhibitorene ble tilsatt til plasmaet (10 pl inhibitor oppløsning til 90 pl plasma) og APTT ble bestemt i blandingen ved anvendelse av koagulasjonsanalysator KC10 (Amelung) ifølge instruksjonene til reagensprodusenten. Koaguleringstiden i sekunder ble plottet mot inhibitor konsentrasjonen i plasmaet og IC50APTT ble bestemt ved interpolasjon.
IC50APTT er definert som konsentrasjonen av inhibtor i plasma som doblet den aktiverte partielle tromboplastin tiden. pIC50APTT er -log 10 til IC50APTT i mol/l. De foretrukne forbindelsene ifølge oppfinnelsen som ble testet viste en pIC50APTT på 5,1-6,4.
FORKORTELSER
Agm = agamatin
Agm(Z) = a)-N-benzyloksykarbonylagamatin AA-L = aminosyre 1
AAg = aminosyre 2
Aze = (S )-azetidin2-karboksylsyre Bla = a-substituert butyrolakton Boe = tertiær butoksykarbonyl
Brine = mettet vann/NaCl oppløsning Bu = butyl
Bn = benzyl
Cgl = (S )-cykloheksylglycin
Ch = cykloheksyl
Cha = (S)-e-cykloheksylalanin CME-CDI = l-cykloheksyl-3-(2-morfolinoetyl) karbodi-imid-meto-p-toluensulfonat DDC = dicykloheksylkarbodiimid
Dch = (S)-dicykloheksylalanin
DMAP = N,N-dimetylaminopyridin
DMF = dimetylformamid
DMSO = dimetylsulfoksyd
Dph = (S)-difenylalanin
EDC = l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid-hydroklorid
Et = etyl
EtOAc = etylacetat
HOAc = eddiksyre
HOBt = N-hydroksybenzotriazol Hoc = (S)-homocykloheksylalanin
Hop = (S)-homofenylalanin HOSu = N-hydroksysuksinimid
Mag = miniagmatin
Me = metyl
Mor = (S)-morfolin-2-karboksylsyre MPa = mega pascal
Nag = noragmatin
Nag(Z ) S-N-benzyloksykarbonyl-noragmatin
NMM = N-metylmorfolin
Pgl = (S)-fenylglycin
Ph = fenyl
Phe = (S )-fenylalanin
Pic = pipecolin syre
Pr = propyl
Pro = (S)-prolin
RPLC = revers fase høy-ytelse væskekromatografi Tf = trifluormetylsulfonyl
TFA = trifluoreddiksyre
THF = tetrahydrofuran
p-TsOH = para-toluensulfonsyre
Val = (S)-valin
Z = benzyloksykarbonyl
Prefiksen n, s, i og t har de vanlige betydningene: normal, iso, sec og tertiær.

Claims (1)

1.
Forbindelse, karakterisert ved at den har
den generelle formelen
hvor: A er en metylengruppe, eller A er en metylengruppe og den resulterende 5-leddede ringen kan bære en eller to fluoratomer, en hydroksygruppe eller en oksogruppe i posisjon 4, eller kan være umettet, eller A betyr -CH2-0-, -CH2-S-, -CH2-S0-, med heteroatomfunksjona-liteten i posisjon 4, eller A betyr en n-propylengruppe og den resulterende 6-led'dede ringen kan bære i posisjon 5 et fluoratom, en hydroksygruppe eller en oksogruppe, bære to fluoratomer i en av posisjonene 4 eller 5 eller være umettet i posisjon 4 og 5, eller bære i posisjon 4 en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer, eller A betyr -CH2-0-CH2-, -CH2-S-CE2-, -CH2-SO-CH2-;
R<1> betyr H, en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer, en hydroksyalkylgruppe med 2-3 karbonatomer eller R<1:L>OOC-alkyl-, hvor alkylgruppen har 1 til 4 karbonatomer og R<*> er H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer eller en alkylen-gruppe med 2-3 karbonatomer intramolekylært bundet alfa til karbonylgruppen i R<1>, eller
R<1> betyr R1<2>00C-1,4-fenyl-CH2-, hvor R12 er H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer, eller
R<1> betyr R<13->NH-C0-alkyl-, hvor alkylgruppen har 1 til 4 karbonatomer og er muligens substituert alfa til karbonyl med en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer og hvor R<13> er H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer eller-CH2COOR<12>, hvor R12 er som definert ovenfor, eller
R<1> representerer R<12>00C-CH2-00C-alkyl- hvor alkylgruppen har 1 til 4 karbonatomer og er muligens substituert alfa til karbonyl med en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer og hvor R<12> er som definert ovenfor, eller
R<1> er CH3S02-, eller
R<1> er R120C(0 )C(0)- hvor R<12> er som definert ovenfor eller R<1> er -CH2PO(OR14 )2f -CH2S03H eller - CH2-(5-(lH)-tetrazolyl) hvor R<14> er, individuelt ved hver forekomst, H, metyl eller etyl;
R<2> er H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer eller R<2l>00C-alkyl-, hvor alkylgruppen har 1 til 4 karbonatomer og er muligens substituert i posisjonen som er alfa for karbonylgruppen, og alfasubstituenten er en gruppe R<22->(CH2)p-, hvor p = 0-2 og R2<2> er metyl, fenyl, OH, COOR<21> og R<21> er H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer;
m er 0, 1 eller 2, R<3> er en sykloheksylgruppe og
R<4> er H, eller
m er 1 og R<3> er en sykloheksyl eller fenylgruppe og R<4> danner en etylenbro sammen med R<1>, eller
m er 1 og R<3> og R<4> er hver en sykloheksyl eller fenylgruppe; R<5> er H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer;
n er et tall 2 til 6; og
B er -N(R6 )-C(NH)-NH2, hvor R<6> er H eller en metylgruppe, eller
B er -S-C(NH)-NH2, eller -C(NH)-NH2,
enten selve forbindelsen eller i form av et fysiologisk akseptabelt salt og inkluderer stereoisomerer.;2.
Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R^- er R<1:1->OOC-alkyl-, hvor alkylgruppen har 1 til 4 karbonatomer og R-^ er H.;3.
Forbindelse ifølge krav 2, karakterisert ved at A er etylen og R^ er H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer.;4 .
Forbindelse ifølge krav 2, karakterisert ved at A er n-propylen og den resulterende 6-leddede ringen kan bære i posisjon 5 på alkylgruppen med 1 til 4 karbonatomer og R 5 er H eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer.;5 .
Forbindelse ifølge et eller flere av de foregående kravene, karakterisert ved at R<3> er sykloheksyl, m er 1, 2 og R<4> er H.;6.
Forbindelse ifølge et eller flere av de foregående kravene, karakterisert ved at ner3.;7.
Forbindelse ifølge et eller flere av de foregående kravene, karakterisert ved at den har S-konfigurasjon på a-aminosyren i P2 posisjonen.;8.
Forbindelse ifølge krav 7, karakterisert ved at den har R-konf igurasjon på a-aminosyren i P3 posisjonen.;9.
Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er valgt fra
H-(R)Cha-Pro-Agm
Me-(R)Cha-Pro-Agm
HO-(C<H>2)3-(R)Cha-Pro-Agm iPrOOC-CH2- (R)Cha-Pro-Agm HOOC- (R, S)CH (Me) - (R)Cha-Pro-Agm HOOC- (Rel.S)CH(Me) - (R)Cha-Pro-Agm/a
HOOC - {Rel:S )CH(nPr)-(R)Cha-Pro - Agm/ a i HOOC-(RéL S)CH(nPr) - (R)Cha-Pro-Agm/b
HOOC - (Rel.S) CH (Ph) - (R) Cha - P r o - Agm/ b HOOC- (R, S)CH(CH2CH2Ph) - (R) Cha-Pro-Agm HOOC-(Rel;S)CH(CH2CH2Ph) - (R)Cha-Pro-Agm/a HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm
EtOOC-CO- (R) Cha-Pro-Agm
(R, S)Bla-(R)Cha-Pro-Agm
HOOC- (RsJ..S)CH(CH2CH2Ph) - (R)Cha-Pro-Agm/b H-(R)Cha-Pro-Nag
nBu- (R)Cha-Pro-Nag HO- (CH:.) 3 - (R)Cha-Pro-Nag EtOOC-CH2- (R)Cha-Pro-Nag iPrOOC-CH2- (R)Cha-Pro-Nag c BuOOC -CH2 - (R) Cha - Pro -Nag HOOC-CH2-OOC-CH2- (R)Cha-Pro-Nag H2N-CO-CH2- (R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-NH-CO-CH2- (R)Cha-Pro-Nag (KOOC-C<H>2) 2" (R) Cha-Pro-Mag HOOC-CH2-(nBu) (R)Cha-Pro-Nag HOOC-(R.S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC- (Rel. S)CH(Me) - (R)Cha-Pro-Nag/a EtOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-(Rel.S)CH(nPr) - (R)Cha-Pro-Nag/a HOOC-(R)CH(CH2~OH)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC- (R, S)CH(Ph) - (R)Cha-Pro-Nag HOOC -{S)CH(CH2CH2 Ph)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-(R)CH(CH2CH2Ph) - (R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-CH2-( R) Cha-Pro-Nag . EtOOC-CH2-CH2- (R)Cha-Pro-Nag HOOC - (CH2) 3 - (R) Cha - Pro-Nag EtOOC- (CH2) 3- (R) Cha -Pro-Nag HOOC-CO- (R)Cha-Pro-Nag MeOOC-CO- (R)Cha-Pro-Nag (R, S) Bla- (R)Cha-Pro-Nag HOOC - (R, S) CH (CH2COOH) - (R) Cha - Pro -Nag MeOOC- (R,S)CH(CH2COOMe) - (R)Cha-Pro-Nag HOOC-Ph-4-CH2- (R)Cha-Pro-Nag (HO) 2P(0) -CH2- (R)Cha-Pro-Nag EtO(HO) P(0) -CH2-(R)Cha-Pro-Nag (EtO)2P(0) -CH2-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2- (R)Cha-Pro-Mag H- (R,S) Pro(3-Ph) -Pro-Agm H- (R,S) Pro (3-(trans)Ch) -Pro-Agm HOOC-CH2- (R,S) Pro(3-(trans) Ph) -Pro-Agm HOOC-CH2 - (R, S) Pro (3 - (t rans) Ph) - Pro-Nag HOOC-CH2- (Me) (R)Cha- (R, S) Pic-Agm
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm i HOOC- (Rel.S)CH(Me) - (R)Cha-Pic-Agm/a HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Agm
H-(R)Cha-Pic-Nag Me- (R)Cha-(R,S)Pic-Nag MeOOC -CH2 - (R) Cha - P i c -Nag <1>PrOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag HOOC-CH2- (Me) (R)Cha - (RéLS) Pic-Nag/b HOOC - (R, S)CH(Me) - (R) Cha - (R, S) Pic-Nag HOOC- (Rel-S)CH(Me) - (R)Cha- (Rel.S) Pic-Nag/c HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Nag HOOC-CH2 - (R) Cha- (R, S) Mor-Agm HOOC -CH2-(R)Cha-( Rel. S) Mor -Nag H-(R)Cha-Aze-Nag HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Nag H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag HOOC-CH2-( R) Cha - (RaLS) Pic (4, 5-dehydro) -Nag/b HOOC-CH2-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag HOOC-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag H-(R)Hoc-Pro-Nag HOOC-CH2 - (R) Hoc - Pro-Nag HOOC-CH2 - (R) Hoc-Pic-Nag
HOOC-CH2-(R) Dph-Pic-Nag HOOC-CH2 - (R) Dch-Pic-Nag HOOC -CH2-(R)Cha-Pro(5-(R,S)Me)-Nag HOOC-CH2-(R)Cha-Pic(4-(R)Me) -Nag H- (R)Cha-Pic(4-(R)Me)-Nag HOOC-CH2-(R)Cha-Pic(6-(S)Me)-Nag
enten som dette eller 1 form av et fysiologisk akseptabelt salt og inkludert stereoisomerer.;10.
Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er valgt fra
H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Agm
H00C-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Agm HOOC-(RellerS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/b H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Agm HOOC-(RellerS)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/b HOOC-(RellerS)CH(Me)-(R)Cha-(RellerS(Pic-Nag/d H00C-CH2-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag H00C-CH2-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag
enten slik eller i form av et fysiologisk akseptabelt salt og inkludert stereoisomerer.;11.
Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er H00C-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Nag, enten slik eller i form av et fysiologisk akseptabelt salt og inkluderer stereoisomerer.;12.
Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er H00C-(RellerS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/b, enten slik eller i form av et fysiologisk akseptabelt salt og inkluderer stereoisomerer.;13.
Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er H00C-CH2-(R)Cha-Pic-Nag, enten slik eller i form av et fysiologisk akseptabelt salt og inkluderer stereoisomerer.;14 .
Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1-13, karakter i-sert ved å koble en N-terminalt beskyttet aminosyre eller dipeptid eller et fordannet, N-terminalt alkylert beskyttet dipeptid til en forbindelse
H2N-(C<H>2)n-X
hvor n er et tall 2-6 og X er en ubeskyttet eller beskyttet guanidinogruppe eller en beskyttet aminogruppe, eller en gruppe som kan overføres til en aminogruppe, hvor amino-gruppen deretter blir overført til en guanidino gruppe, og om ønskelig dannes et fysiologisk akseptabelt salt, og i de tilfellene hvor reaksjonen resulterer i en blanding av stereoisomerer, blir disse eventuelt separert ved standard-kromatografiske eller rekrystalliseringsteknlkker, og om ønskelig blir en enkel stereoisomer isolert.;15 .
Fremgangsmåte ifølge krav 14 for fremstilling av en forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 13, karakterisert ved at den omfatter: a) (metode I) kobling av et N-terminalt dipeptid med enten en beskyttet- eller ubeskyttet aminoguanidin eller et lineært alkylamin som bærer en beskyttet eller maskert aminogruppe ved den terminale enden av alkylkjeden, ved anvendelse av standardpeptidkobling som vist i formelen:
hvor R<3>, R<4> og R<5>, n, m og A er som definert i formel I, R<6 >er H eller alkyl, er en aminobeskyttende gruppe så som tertiærbutoksykarbonyl og benzyloksykarbonyl og X er -NH-C(NH)NH2> -NH-C(NH)NH-<W>2, -N(W2)-C(NH)NH-W2, -NH-C(NW2)-NHW2 eller -NH-W2, hvor W2 er en amin beskyttende gruppe så som tertiærbutoksykarbonyl eller benzyloksykarbonyl, eller X er en maskert aminogruppe så som azid, som gir det beskyttede peptidet, eller
b) (metode II) kobling av en N-terminalt beskyttet aminosyre, med enten en beskyttet- eller ubeskyttet aminoguanidin eller en lineær alkylamin som bærer en beskyttet eller maskert aminogruppe ved den terminale enden av alkylkjeden, ved anvendelse av standardpeptidkobling, som vist i formelen 'hvor W-£, Å, K<5> og X er som definert ovenfor etterfulgt av avspaltning av W^-gruppen og kobling med den N-terminale aminosyren, i en beskyttet form, eller c) (metode III) kobling av et fordannet N-terminalt alkylert og beskyttet dipeptid, fremstilt ved standard peptidkobling, med enten et beskyttet eller ubeskyttet aminoguanidin eller et lineært alkylamin som bærer en beskyttet eller maskert aminogruppe ved den terminale enden av alkylkjeden, ved
! anvendelse av standard peptidkobling, som vist i formelen hvor R22 , R<3>, R<4>, R<5>, n, m, A og X er definert som ovenfor forutsatt at R<2> er forskjellig fra H og W3 er en acylgruppe så som trifluoracyl,
hvor den endelige forbindelsen blir dannet på hvilke som helst av følgende måter, avhengig av naturen til den anvendte X-gruppen: fjerning av den beskyttende gruppen (ene) (når X= -NH-C(NH)NH2, NH-C(NH)NH-W2. -N(W2 )-C(NH)NH-W2, -NH-C(NW2)NH-W2) eller en selektiv avspaltning av W^- gruppen (for eksempel når X= -NH-C(NH)NH-W2, -N(W2)-C(NH)NH-W2, -NH-C(NW2)NH-W2, W2 må i dette tilfellet være ortogonal for ) etterfulgt av alkylering av N-terminal nitrogen og avspaltning eller en selektiv avspaltning/demaskering av den terminale alkylaminofunksjonen (X= NH-W2, V/2 må i dette tilfellet være ortogonal for og W3, eller X = en maskert aminogruppe, så som azid) etterfulgt av en guanideringsreaksjon, ved anvendelse av standardmetoder, av det frie amidet og avspaltning av W^- eller W3 gruppen,
og om ønskelig danne et fysiologisk akseptabelt salt, og i de tilfellene hvor reaksjonen resulterer i en blanding av stereoisomerer, disse blir eventuelt separert ved standard-kromatografiske eller rekrystalliseringsteknikker, og om ønskelig blir en enkel stereoisomer isolert.;16.
Forbindelse, karakterisert ved at den er S-N-benzyloksykarbonyl-noragmatin enten slik eller i form av et salt, eller med ytterligere beskyttelse ved S-nitrogen eller "y-nitrogen.;17.
Forbindelse ifølge krav 16, karakterisert ved at den er S-N-benzyloksykarbonyl-noragmatin.;18.
Forbindelse ifølge krav 16, karakterisert ved at den er a-N-tert.butyloksykarbonyl-S-N-benzyloksykarbonyl-noragmatin enten slik eller i form av et salt, eller med beskyttelse ved S-nitrogen eller y-nitrogen.;19.
Forbindelse ifølge krav 18, karakterisert ved at den er a-N-tert.butyloksykarbonyl-S-N-benzyloksykarbonyl-noragmatin.;20.
Anvendelse av en forbindelse med formel:
enten slik eller i form av et salt, og slik eller med guandiniogruppen enten monobeskyttet ved S-nitrogen eller dibeskyttet S-nitrogen eller 7, S-nitrogener, som et utgangsmateriale for syntese av en serinproteaseinhibitor, og spesielt ved syntese av en trombin inhibitor.;21 .
Anvendelse ifølge krav 20, hvor forbindelsen er S-N-benzyloksykarbonyl-noragmatin enten slik eller i form av et salt, eller med beskyttelse ved S-nitrogen eller "y-nitrogen.;22 .
Anvendelse ifølge krav 21, hvor forbindelsen er a-N-tert.-butyloksykarbonyl-S-N-benzyloksykarbonyl-noragmatin enten slik eller i form av et salt, eller ved beskyttelse ved S-nitrogen eller -y-nitrogen.;23.
Anvendelse ifølge krav 20, 21 og 22, hvor serinprotease inhibitoren er en peptidisk forbindelse.;24 .
Farmasøytisk preparat, karakterisert ved at det omfatter en effektiv mengde av en forbindelse ifølge kravene 1-13 sammen med en eller flere farmasøytiske bærere.;25.
Farmasøytisk preparat ifølge krav 24, karakterisert ved at det skal anvendes som et antikoagu-lerings- eller antitrombotisk middel.;26.
Anvendelse av forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1-13 som et aktivt ingrediens for fremstilling av et farmasøytisk preparat for inhibisjon av trombin i et menneske eller i en dyreorganisme.*
NO19942066A 1991-12-04 1994-06-03 Peptidderivater, fremgangsmåte for fremstilling, farmasöytisk preparat og anvendelse av peptidderivatene NO311361B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE9103612A SE9103612D0 (sv) 1991-12-04 1991-12-04 New peptide derivatives
PCT/SE1992/000832 WO1993011152A1 (en) 1991-12-04 1992-12-01 New peptide derivatives

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO942066L NO942066L (no) 1994-06-03
NO942066D0 NO942066D0 (no) 1994-06-03
NO311361B1 true NO311361B1 (no) 2001-11-19

Family

ID=20384531

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO19942066A NO311361B1 (no) 1991-12-04 1994-06-03 Peptidderivater, fremgangsmåte for fremstilling, farmasöytisk preparat og anvendelse av peptidderivatene

Country Status (27)

Country Link
US (4) US5614499A (no)
EP (1) EP0618926B1 (no)
JP (1) JP3306826B2 (no)
CN (1) CN1076199A (no)
AP (1) AP353A (no)
AT (1) ATE190066T1 (no)
AU (2) AU670052B2 (no)
CA (1) CA2125175C (no)
CZ (2) CZ333895A3 (no)
DE (1) DE69230727T2 (no)
EE (1) EE9400455A (no)
FI (1) FI115770B (no)
HU (1) HUT70431A (no)
IL (1) IL103910A0 (no)
IS (1) IS3954A (no)
MA (1) MA22729A1 (no)
MX (1) MX9206938A (no)
NO (1) NO311361B1 (no)
NZ (2) NZ246106A (no)
SE (1) SE9103612D0 (no)
SI (1) SI9200363A (no)
SK (1) SK63194A3 (no)
TN (1) TNSN92109A1 (no)
TW (1) TW223078B (no)
WO (1) WO1993011152A1 (no)
YU (1) YU104592A (no)
ZA (1) ZA929099B (no)

Families Citing this family (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6534536B1 (en) 1994-03-16 2003-03-18 Bristol-Myers Squibb Company Alkylsulfonamido heterocyclic thrombin inhibitors
US5583146A (en) * 1992-12-02 1996-12-10 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic thrombin inhibitors
SE9301916D0 (sv) * 1993-06-03 1993-06-03 Ab Astra New peptides derivatives
US6984627B1 (en) 1993-06-03 2006-01-10 Astrazeneca Ab Peptide derivatives
SE9900043D0 (sv) * 1999-01-11 1999-01-11 Astra Ab New use
EP0648780A1 (en) * 1993-08-26 1995-04-19 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic thrombin inhibitors
GB9318637D0 (en) * 1993-09-08 1993-10-27 Ferring Res Ltd Enzyme inhibitors
US5488037A (en) * 1994-03-04 1996-01-30 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5885967A (en) * 1994-03-04 1999-03-23 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5484772A (en) * 1994-03-04 1996-01-16 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5707966A (en) * 1994-03-04 1998-01-13 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5726159A (en) * 1994-03-04 1998-03-10 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5602101A (en) * 1994-03-04 1997-02-11 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5705487A (en) * 1994-03-04 1998-01-06 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
ZA951618B (en) * 1994-03-04 1996-08-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents
IL112795A (en) * 1994-03-04 2001-01-28 Astrazeneca Ab Derivatives of peptides as antithrombotic drugs, their preparation, and pharmaceutical preparations containing them
US5439888A (en) * 1994-03-04 1995-08-08 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5691356A (en) * 1994-03-21 1997-11-25 Bristol-Myers Squibb Company Disubstituted heterocyclic thrombin inhibitors
US5681844A (en) * 1994-04-18 1997-10-28 Corvas International, Inc. Methionine sulfone and s-substituted cysteine sulfone derivatives as enzyme inhibitors
US5561146A (en) * 1994-06-10 1996-10-01 Bristol-Myers Squibb Company Modified guanidino and amidino thrombin inhibitors
DE4421052A1 (de) 1994-06-17 1995-12-21 Basf Ag Neue Thrombininhibitoren, ihre Herstellung und Verwendung
DE4436772A1 (de) * 1994-10-14 1996-04-18 Boehringer Mannheim Gmbh Neues Dipeptid-Derivat, Verfahren zu seiner Herstellung sowie diese Verbindung enthaltende Arzneimittel
SE504185C2 (sv) * 1994-11-08 1996-12-02 Astra Ab Lagringsstabil vattenlösning för infusion av trombininhibitorer
SE9404196D0 (sv) * 1994-12-02 1994-12-02 Astra Ab New antithrombotic formulation
DE4443390A1 (de) * 1994-12-06 1996-06-13 Basf Ag Neue dipeptidische p-Amidinobenzylamide mit N-terminalen Sulfonyl- bzw. Aminosulfonylresten
JPH11500120A (ja) * 1995-02-17 1999-01-06 ビーエーエスエフ アクチェンゲゼルシャフト 新規なトロンビンインヒビター
US5914319A (en) * 1995-02-27 1999-06-22 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5710130A (en) * 1995-02-27 1998-01-20 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
DE19512484A1 (de) 1995-04-04 1996-10-17 Bayer Ag Kohlenhydratmodifizierte Cytostatika
SA96170106A (ar) 1995-07-06 2005-12-03 أسترا أكتيبولاج مشتقات حامض أميني جديدة
TWI238827B (en) 1995-12-21 2005-09-01 Astrazeneca Ab Prodrugs of thrombin inhibitors
SE9600216D0 (sv) * 1996-01-18 1996-01-18 Hans Arne Hansson Styrning av läkningsprocesser
US5811402A (en) * 1996-03-22 1998-09-22 Eli Lilly And Company Antithrombotic diamides
CA2200163A1 (en) * 1996-03-22 1997-09-22 Michael Robert Wiley Antithrombotic diamides
SE9602263D0 (sv) 1996-06-07 1996-06-07 Astra Ab New amino acid derivatives
US5863929A (en) * 1996-06-25 1999-01-26 Eli Lilly And Company Anticoagulant agents
US6200967B1 (en) 1996-06-25 2001-03-13 Eli Lilly And Company Anticoagulant agents
SE9602646D0 (sv) 1996-07-04 1996-07-04 Astra Ab Pharmaceutically-useful compounds
SE9603724D0 (sv) * 1996-10-11 1996-10-11 Astra Ab New pharmaceutical parenteral formulation of a thrombin inhibitor
US5877156A (en) * 1997-04-24 1999-03-02 Akzo Nobel, N.V. Thrombin inhibitors
AR013084A1 (es) 1997-06-19 2000-12-13 Astrazeneca Ab Derivados de amidino utiles como inhibidores de la trombina, composicion farmaceutica, utilizacion de dichos compuestos para la preparacion demedicamentos y proceso para la preparacion de los compuestos mencionados
SE9704543D0 (sv) 1997-12-05 1997-12-05 Astra Ab New compounds
WO1999037668A1 (de) 1998-01-26 1999-07-29 Basf Aktiengesellschaft Thrombininhibitoren
US6417161B1 (en) * 1998-04-24 2002-07-09 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Amino acid amidinohydrazones, alkoxyguanidines and aminoguanidines as protease inhibitors
SE9802938D0 (sv) * 1998-09-01 1998-09-01 Astra Ab Improved stability for injection solutions
SE9802973D0 (sv) 1998-09-03 1998-09-03 Astra Ab Immediate release tablet
SE9804313D0 (sv) 1998-12-14 1998-12-14 Astra Ab New compounds
DE60037183T2 (de) 1999-01-13 2008-10-09 Astrazeneca Ab Neue amidinbenzylamin-derivate und ihre verwendung als thrombin-inhibitoren
KR20000060566A (ko) * 1999-03-17 2000-10-16 이경하 치환된 방향족 아미딘 유도체 및 이를 함유하는 의약조성물
AR023510A1 (es) 1999-04-21 2002-09-04 Astrazeneca Ab Un equipo de partes, formulacion farmaceutica y uso de un inhibidor de trombina.
AR023819A1 (es) * 1999-05-03 2002-09-04 Astrazeneca Ab FORMULACIoN FARMACEUTICA, KIT DE PARTES Y UTILIZACION DE DICHA FORMULACION
US6290662B1 (en) * 1999-05-28 2001-09-18 John K. Morris Portable, self-contained apparatus for deep vein thrombosis (DVT) prophylaxis
SE9902202D0 (sv) 1999-06-10 1999-06-10 Astra Ab Production of aggregates
SE0001803D0 (sv) 2000-05-16 2000-05-16 Astrazeneca Ab New compounds i
US6433186B1 (en) 2000-08-16 2002-08-13 Astrazeneca Ab Amidino derivatives and their use as thormbin inhibitors
JP2002155086A (ja) * 2000-11-16 2002-05-28 Ube Ind Ltd ７ａ−アルコキシ−４Ｈ−ピラノ［３，２−ｄ］−オキサゾール−２（３Ｈ）−オン類、及びその製造法
US7129233B2 (en) 2000-12-01 2006-10-31 Astrazeneca Ab Mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
AR035216A1 (es) 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
AR034517A1 (es) 2001-06-21 2004-02-25 Astrazeneca Ab Formulacion farmaceutica
SE0201661D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab New salts
SE0201659D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
US7332227B2 (en) * 2003-03-14 2008-02-19 Becton, Dickinson And Company Non-volatile lubricant system for medical devices
WO2004091463A2 (en) 2003-04-11 2004-10-28 Hill-Rom Services, Inc. System for compression therapy
US7795205B2 (en) 2004-04-12 2010-09-14 Canyon Pharmaceuticals, Inc. Methods for effecting regression of tumor mass and size in a metastasized pancreatic tumor
GB0507577D0 (en) 2005-04-14 2005-05-18 Novartis Ag Organic compounds
WO2007044278A2 (en) * 2005-10-05 2007-04-19 Gurbel Paul A The detection of restenosis risk in patients receiving a stent
TW200827336A (en) 2006-12-06 2008-07-01 Astrazeneca Ab New crystalline forms
CN102924567B (zh) * 2008-10-28 2014-06-04 上海医药工业研究院 一类肽化合物、其制备方法及用途
CN102464701B (zh) 2010-11-08 2015-10-21 上海医药工业研究院 一类新型化合物、其制备方法及用途
US20140128572A1 (en) * 2011-06-16 2014-05-08 Lonza Braine S.A. Process For Extraction Of Peptides And Its Application In Liquid Phase Peptide Synthesis
US9737454B2 (en) 2012-03-02 2017-08-22 Hill-Rom Services, Inc. Sequential compression therapy compliance monitoring systems and methods
EP3207911B1 (en) 2016-02-18 2019-04-03 Hill-Rom Services, Inc. Patient support apparatus having an integrated limb compression device
RU2712194C1 (ru) * 2019-10-02 2020-01-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Национального исследовательского центра "Курчатовский институт" (НИЦ "Курчатовский институт" - ГосНИИгенетика) Антикоагулянтное лекарственное средство, представляющее собой синтетический дипептид Ac-Trp-Arg-Pip ⋅HCl, фармацевтическая композиция, включающая это антикоагулянтное лекарственное средство

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HU178398B (en) * 1979-06-12 1982-04-28 Gyogyszerkutato Intezet Process for producing new agmatine derivatives of activity against haemagglutination
US4568636A (en) * 1981-03-25 1986-02-04 Pentapharm Ag Tripeptide derivatives
US4395401A (en) * 1981-09-09 1983-07-26 Smithkline Beckman Corporation Renally active dipeptides
DE3505555A1 (de) * 1985-02-18 1986-09-11 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Neue oligopeptidylargininolderivate und deren homologe, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel
US4906659A (en) * 1985-06-18 1990-03-06 Takeda Chemical Industries, Ltd. Antibiotic tan-749, its derivatives, production and use thereof
DE3606480A1 (de) * 1986-02-28 1987-09-03 Behringwerke Ag Oligopeptidylnitrilderivate, diese enthaltende mittel, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
US5187157A (en) * 1987-06-05 1993-02-16 Du Pont Merck Pharmaceutical Company Peptide boronic acid inhibitors of trypsin-like proteases
US5110812A (en) * 1990-06-04 1992-05-05 Bristol-Myers Squibb Co. Azetidin-2-one derivatives as serine protease inhibitors
US5037819A (en) * 1990-06-04 1991-08-06 Bristol-Myers Squibb Company Azetidin-2-one derivatives as serine protease inhibitors
TW201303B (no) * 1990-07-05 1993-03-01 Hoffmann La Roche
GB9019558D0 (en) * 1990-09-07 1990-10-24 Szelke Michael Enzyme inhibitors
GB9024129D0 (en) * 1990-11-06 1990-12-19 Thrombosis Research Trust Inhibitors and substrates of thrombin
EP0503203A1 (en) * 1991-03-15 1992-09-16 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Novel thrombin inhibitors
SE9102462D0 (sv) * 1991-08-28 1991-08-28 Astra Ab New isosteric peptides
CZ333492A3 (en) * 1991-11-12 1993-09-15 Lilly Co Eli Dipeptide of l-azetidine-2-carboxylic acids and l-argininaldehyde, process of its preparation and pharmaceutical preparation in which said dipeptide is comprised

Also Published As

Publication number Publication date
US5747460A (en) 1998-05-05
FI115770B (fi) 2005-07-15
US5614499A (en) 1997-03-25
NZ246106A (en) 1996-07-26
NO942066L (no) 1994-06-03
EP0618926B1 (en) 2000-03-01
US5955433A (en) 1999-09-21
CA2125175A1 (en) 1993-06-10
DE69230727T2 (de) 2000-08-03
AP353A (en) 1994-08-14
US5736521A (en) 1998-04-07
SK63194A3 (en) 1994-12-07
HUT70431A (en) 1995-10-30
FI942645A (fi) 1994-06-03
IS3954A (is) 1993-06-05
AU683793B2 (en) 1997-11-20
WO1993011152A1 (en) 1993-06-10
EP0618926A1 (en) 1994-10-12
SE9103612D0 (sv) 1991-12-04
EE9400455A (et) 1996-06-17
YU104592A (sh) 1995-12-04
JP3306826B2 (ja) 2002-07-24
TW223078B (no) 1994-05-01
FI942645A0 (fi) 1994-06-03
SI9200363A (en) 1993-06-30
AU5061696A (en) 1996-08-01
MX9206938A (es) 1993-06-01
IL103910A0 (en) 1993-04-04
ATE190066T1 (de) 2000-03-15
JPH09500356A (ja) 1997-01-14
MA22729A1 (fr) 1993-07-01
NO942066D0 (no) 1994-06-03
TNSN92109A1 (fr) 1993-06-08
AU670052B2 (en) 1996-07-04
CZ129694A3 (en) 1994-12-15
DE69230727D1 (de) 2000-04-06
CA2125175C (en) 2001-09-11
CZ333895A3 (en) 1996-04-17
AP9200457A0 (en) 1993-01-31
AU3120993A (en) 1993-06-28
HU9401474D0 (en) 1994-08-29
ZA929099B (en) 1993-06-07
NZ280762A (en) 1998-08-26
CN1076199A (zh) 1993-09-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO311361B1 (no) Peptidderivater, fremgangsmåte for fremstilling, farmasöytisk preparat og anvendelse av peptidderivatene
FI119812B (fi) Menetelmä uusien, terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidijohdannaisten valmistamiseksi
DE3878991T2 (de) Peptide boronsaeure-hemmungsstoffe von trypsintyp-proteasen.
US5110797A (en) Peptide compound and a pharmaceutically acceptable salt thereof
US5780631A (en) Starting materials in the synthesis of thrombin and kininogenase inhibitors
JP2627262B2 (ja) 新規トリペプチド化合物
AU684086C (en) New peptide derivatives

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Lapsed by not paying the annual fees