NO143478B - Fremgangsmaate ved fremstilling av gamma-globuliner - Google Patents
Fremgangsmaate ved fremstilling av gamma-globuliner Download PDFInfo
- Publication number
- NO143478B NO143478B NO751295A NO751295A NO143478B NO 143478 B NO143478 B NO 143478B NO 751295 A NO751295 A NO 751295A NO 751295 A NO751295 A NO 751295A NO 143478 B NO143478 B NO 143478B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- globulins
- solution
- globulin
- precipitate
- incubation
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 34
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 36
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 33
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 25
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 23
- 230000003171 anti-complementary effect Effects 0.000 claims description 21
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 claims description 16
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 claims description 16
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 claims description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 14
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 11
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 8
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 8
- 239000001166 ammonium sulphate Substances 0.000 claims description 7
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 claims description 5
- IYLLULUTZPKQBW-UHFFFAOYSA-N Acrinol Chemical compound CC(O)C(O)=O.C1=C(N)C=CC2=C(N)C3=CC(OCC)=CC=C3N=C21 IYLLULUTZPKQBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 4
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 claims description 4
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 235000013905 glycine and its sodium salt Nutrition 0.000 claims 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 26
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 25
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 25
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 25
- 230000000963 caseinolytic effect Effects 0.000 description 14
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 9
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 7
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 5
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 5
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 4
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- 201000006082 Chickenpox Diseases 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 3
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 3
- 206010046980 Varicella Diseases 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000000306 component Substances 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 2
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 206010003497 Asphyxia Diseases 0.000 description 1
- 206010011703 Cyanosis Diseases 0.000 description 1
- 208000019758 Hypergammaglobulinemia Diseases 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 206010036590 Premature baby Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 1
- 239000010425 asbestos Substances 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 230000000803 paradoxical effect Effects 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 1
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 1
- 229910052895 riebeckite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/16—Blood plasma; Blood serum
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
- Y10S530/831—Cohn fractions
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/85—Reproductive organs or embryos
- Y10S530/851—Placenta; amniotic fluid
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Virology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte ved fremstilling av y-globuliner fra menneskeblod fra placenta. De fremstilte Y-globuliner kan anvendes direkte ved intravenøs administrasjon, eventuelt sammen med standard y-globuliner til hvilke de gir klinisk toleranse. Man kan således fremstille et intravenøst administrerbart Y-globulin fra placenta, ved anvendelse av en fraksjon av et placentaekstrakt som tidligere ble kastet.
Man vet at y-globulinene har en antistoff-virkning som gjør dem brukbare i terapi, f.eks. ved behandling eller forebyg-gelse av mikrobe-^ eller virus-inf eks joner, spesielt hos pasienter som lider av immunitetsmangel.
Y-globulinene fremstilles normalt av serum eller blod eks-trahert av placenta. Den hyppigst anvendte prosess av fraksjonering med alkohol.
Fremstillingen av Y-globuliner.fra.placenta er beskrevet av H.L. Taylor, J.AM.CHEM.SOC. 78, 1356 (1956).
Denne kjente prosess består i å behandle filtratet fra en saltholdig suspensjon av knust placenta slik at man får en etanolkonsentrasjon på 25 volum-%. Man samler opp det dannede bunnfall I og behandler det med 8 % etanol ved pH 4,8. Man fjerner bunnfallet og samler opp den ovenpåflytende
væske II. Ved tilsetning av alkohol til denne væske inntil man har en konsentrasjon på 25 volum-%, får man felling av en fraksjon III rik på y-globuliner. Bunnfallet III behandles med 17 % etanol ved pH 5,1. Man fjerner bunnfallet III-l og samler opp væsken III-l. Ved tilsetning av etanol til væsken til man har en konsentrasjon på 25 volum-%, får man et bunnfall III-2 av Y-globuliner tilsvarende dem man får ved fraksjonering av blodplasma.
Man vet at y-globulinpreparater oppnådd ved fraksjonering
med etanol (heretter kalt standard-y-globuliner) tåles godt når de tilføres intramuskulært. Derimot har man i blant
iaktatt meget alvorlige reaksjoner når de tilføres intrave-nøst.
Denne dårlige toleranse tilskrives en antikomplementærvirkning som skyldes tilstedeværelsen av aggregater som kan fiksere komplementet på samme måte som antigen-antistoff-kom-plekset .
Denne fiksering av komplementet tilsvarer en aktivering av flere enzymer hvis produkter er ansvarlige for de registrerte intoleransereaksjoner etter intravenøs injeksjon av standard-Y-globuliner.
Man kjenner forskjellige metoder til å fremstille Y-globuliner som kan injiseres intravenøst, nemlig ved inkubasjon av standard-Y-globulinet med plasmin, se M. Steinbuch m.fl., La Presse Medicale, 77 nr. 17 (1969).
Disse fremgangsmåter omfatter eksempelvis å underkaste standard-Y-globulin inkubasjon ved pH 4 og/eller enzymatisk omsetning eller nedbrytning med pepsin (se britisk patent nr. 1.001.013), papain eller plasmin, og de utgjør en sær-skilt behandling av standard-y-globulinet erholdt ved Taylor's fremgangsmåter, eller ved andre fremgangsmåter, eksempelvis fra blodserum.
Det har nå imidlertid vist seg, at såfremt man,underkaster bunnfallet III-l, som ifølge Taylor hovedsaklig består av a- og 3-globuliner, en passende behandling, er det mulig å utvinne en ytterligere fraksjon av Y-globuliner, som er rik på plasmin. Denne fraksjon, som kastes ved Taylors fremgangsmåte, har nemlig vist seg å kunne o<p>parbeides ved stan-dardmetoder, slik at den kan utnyttes ved intravenøs inngivelse av y-globuliner, hvori man har undertrykket eller nedsatt standard-y-globulins antikomplementære styrke, og det således behandlede preparat, kan også samtidig gjøres rikere på Y-globuliner ved iblanding av standard-y-globuliner erholdt fra f.eks. Taylormetoden, dvs. fra opparbeiding av overfasen III-l, som også lar seg inkubere med eget plasmin til nedsettelse av antikomplementæraktiviteten.
Herved tilveiebringes et i høy grad ønskelig nytt produkt ved en effektiv industriell fremgangsmåte, som lar seg utøve i direkte tilslutning til Taylors metode. Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er særpreget ved at man går ut fra<*> det fra Taylors fremgangsmåte ved fremstilling av y-globuliner ved fraksjonering av placentaekstrakter med alkohol erholdte bunnfall III-l, som fortynnes med'vann-, og behandler den oppnådde oppløsning med en oppløsning av 2-etoksy-6,9-di-aminoakridinlaktat (E.D.A.L.), fjerner det derved dannede bunnfall, filtratet tilsettes en vandig oppløsning av ammoniumsulfat av tilstrekkelig konsentrasjon for å oppnå et bunnfall, som består av y-globulin og plasmin, og som isoleres, hvoretter man underkaster en vandig, oppløsning•av dette .bunnfall som eventuelt kan iblandes én vandig oppløs-ning av standard-y-globulin, en inkubasjon ved en pH-verdi mellom 4 og 7 og ved en temperatur mellom 10 og.45°C, inntil antikomplementæraktiviteten er lavere enn den terskelverdi som tillater intravenøs injeksjon, hvoretter oppløsningen om nødvendig underkastes en adsorpsjonsbehandling med bentonitt for å fjerne resterende plasmin, og det således erholdte y-globulinpræparat om ønsket lyofiliseres, fortrinnsvis i nærværelse av glycocol. ;Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen utgjør således en stor forbedring av Taylors fremgangsmåte i den henseende at den tillater å utvinne eller opparbeide en del av y-globulinene, som ellers går-tapt ved Taylors fremgangsmåte, hvor bunnfallet III-l kastes. Men særlig tillater fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen å oppnå en fraksjon av y-globuliner, som er rik på plasmin, og som kan anvendes ved inkubasjon til å undertrykke y-globulin-standardens antikomplementærkraft, idet man samtidig kan foredle det således behandlede prepa-rats y-globulininnhold ved å tilsette standard-y-globuliner erholdt eller isolert ved ovenfor nevnte kjente teknikk. For øvrig er det fra tysk utlegningsskrift nr. 1.218.659 kjent at E.D.A.L. vil bunnfelle størstedelen av proteinene i humant serum med unntagelse av y-globulinene, hvilket vil si at det av tysk utlegningsskrift nr. 1.218.659 fremgår at man ved behandling av humant serum med E.D.A.L. feller albumin, nemlig a^- og o^-globulin, men når det tas hensyn til at det av den ovenfornevnte artikkel av Taylor fremgår at bunnfallet III-l formodes hovedsaklig å bestå av a- og 3-globuliner, må det dog regnes for meget overraskende når det med oppfinnelsen nå er påvist at man nettopp ved å gå ;ut fra dette bunnfall III-l og behandle en vandig op<p>løs-ning av dette med en oppløsning av nettopp E.D.A.L. får et filtrat som inneholder anvendelige bestanddeler til bruk ved intravenøs innføring av y-globuliner. ;Det må derfor konkluderes at den kjente litteratur ikke har antydet at bunnfallet fra Taylors fraksjon III-l nettopp skulle inneholde særlige y-globulinfraksjoner, akkurat som det heller ikke noen steder finnes antydning til at disse foreligger i blanding med plasmin, og at sistnevnte kompo-nent likeledes skullle være oppløselig under de samme betingelser som nettopp disse y-globuliner. ;Tvertimot må det fremheves, at de y-globulinfraksjoner som man arbeider videre med ved Taylorfraksjonen , finnes i filtratet III-l. Det er disse y-globuliner, som i foreliggende beskrivelse er betegnet som "standard-y-globuliner", og som om ønsket kan gjeninnføres i præparatet på et senere stadium av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen. Dette henger sammen med at det nå er påvist at de fra bunnfallet III-l isolerte y-globuliner i blanding med plasmin ved inkubasjon er i stand til å nedsette præparatets antikomplementærakti-vitet i meget vid utstrekning, og at de likeledes er i stand til å nedsette antikomplementæraktiviteten i en viss iblanding av standard-y-globulin, slik at totalresultatet like-vel blir et intravenøst injiserbart præparat. ;Oppfinnelsen bygger på den ide at man samtidig kan utvinne ovenfor nevnte y-globulinrest og plasmin ved å gå ut fra bunnfallet III-l og rense og isolere disse komponenter sammen ved oppløseliggjørelse ved hjelp av E.D.A.L. ("Rivanol")' ;og at nettoppp denne blanding med hell lar seg utnytte til opparbeiding av y-globuliner som kan injiseres via intra-venøs vei. ;Ytterligere har det lenge vært kjent å anvende ammoniiøtsulfat,, på samme måte som anført i foreliggende beskrivelse. Nettopp ammoniumsulfatfellinger blir jo benyttet til å definere globulinene (idet disse pr. definisjon er de proteiner som er uoppløselige i vandig ammoniumsulfatoppløsning tilsvarende 50 %'s metning, hvilket vil si ca. 300 g pr. liter). ;Britisk patentskrift nr. 1.011.013 vedrører anvendelsen ;av humant globulin, hvor man går ut direkte fra humant serum, som fortynnes med destillert vann og ved pH 7,0 felles/ med ammoniumsulfatoppløsning. Ved dette'fås en rå y-globulin-fraksjon, som isoleres ved sentrifugering og gjenoppløses i destillert vann. Etter innstilling til pH 4,0 med, eddik- . syre tilsettes 90 000 enheter pepsin pr. 100 g protein, og globulinene underkastes proteolyttisk innvirkning fra det. fremmede enzym pepsin. Dette er en helt annen metode -enn den nå anviste, ifølge hvilken det benyttes en ganske bestemt fraksjon fra placentaserum og hvor inkubasjonen ikke gjennomføres i nærvær, av fremmed enzym, men tvertimot bygger på en ny erkjennelse av at den spesielle ovenfor nevnte fraksjon III-l inneholder det egne enzym plasmin, ;som muligens er ansvarelig for resultatene>ived denne inkubasjon . ;Fra US-patentskrift nr. 3.449.416 er det kjent å anvende fraksjonert felling med E.D.A.L. og metanol ved fremstilling av y-globuliner, men det benyttes en annen fraksjonerings-sekvens og en annen alkohol enn den beskrevet av Taylor. Prinsippet ved fraksjonert felling er således velkjent, men det skal fremheves at sekvensen er annerledes enn den som nå er beskrevet, og dette er av avgjørende betydning for fremgangsmåtens heldige gjennomførelse. Ytterligere kan det bemerkes at den behandling med bentonitt som er avgjørende for fremgangsmåten omtalt i US-patentskriftet kun er en fak-ultativ sekundær behandling ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen og f .eks. utmerket kan erstattes med en filtrering på asbest. ;Ytterligere har man nå funnet det ønskelig å benytte en terskelverdi for antikomplementæraktiviteten i de fremstilte Y-globuliner som er bestemt ved gjeldende normer som eventuelt kan endres ved senere innførte strengere bestemmelser. Det som er viktig er imidlertid at fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen gjennomføres slik at man ved å utføre inkuba-sjonstrinnet tilstrekkelig lenge kan nå til en arbitær terskelverdi for antikomplementæraktivitét. Derfor benyttes uttrykket "terskelverdi, som tillater intravenøs injeksjon", idet dette uttrykk defineres nærmere nedenfor ved angivelse av den aktuelle aksepterte terskelverdi. ;Etter en foretrukket fremgangsmåte utføres behandlingen med 2-etoksy-6,9-diamino-akridin-laktat (E.D.A.L.) ved alkalisk pH. For dette setter man en base til proteinløsningen før tilsetning av E.D.A.L. Denne base er f.eks. et hydroksyd av et alkalimetall som Na. E.D.A.L. tilsettes i tilstrekkelig mengde til å gi en slik E.D.A.L.-konsentrasjon at vekten av E.D.A.L. utgjør omtrent 1/20 til 1/4 av vekten av tilstedeværende proteiner i løsningen. Proteininnholdet i den løsning som skal behandles, ligger som regel mellom 5 og 30 g/liter og er fortrinnsivs ca. 20.g/liter. Tar man som eksempel et proteininnhold på 20 g/liter, passer det altså å tilsette E.D.A.L. i tilstrekkelig mengde til å gi en endelig E.D.A.L.-konsentrasjon mellom 0,1 og 0,5 ;Det bunnfall som fås etter tilsetning av E.D.A.L. fjernes ved sentrifugering. Man tilsetter så til filtratet en vandig, halvmettet løsning av ammoniumsulfat, dvs. en løs-ning som inneholder omtrent 300 g ammoniumsulfat pr. liter. Man isolerer ved filtrering det dannede bunnfall av proteinprodukt. ;Dette sluttprodukt inneholder et proteolytisk enzym (plasmin) hvis mengde defineres ved hjelp av en "kaseinolytisk enhet". ;Den kaseinolytiske enhet defineres som den mengde plasmin som på et substrat på 3% kasein gir--en. økning på 4 50 ug tyro-sin løselig i trikloreddiksyre i løpet av 1 time ved 37°C. ;Se "The preparation of human fibrinolysein", Scouris et Coll, Vox Sanguinis (1960), 5, (4), side 357-376. ;Vanligvis inneholder det erholdte sluttprodukt fra 10 til ;100 kaseinolytiske enheter pr. gram protein, men dette inn-hold kan være lavere enn 10 enheter. ;Det erholdte prcteinprodukt kan om ønsket renses ved å bringe det i vandig oppløsning og dialysere denne. ;Etter en foretrukket fremgangsmåte utfører man før- trinnet med E.D.A.L.-behandling, et forberedende trinn som består i å elmininere den fraksjon som er uløselig ved pH .4 ,'8 t 0,2 , især ved pH 4,8 - 5/0. For dette tilsetter.man- en syre som saltsyre til løsningen av bunnfall III-l.- Deretter/fjerner man, f .eks. ved sentrif ugering det dannede- bunnfall-; Dette forberedende trinn, som ikke er obligatorisk, letter den påfølgende behandling med E.D.A.L. Dets funksjon er å eliminere lipoproteiner som finnes i løsningen. ;Alle trinn i den ovenfor beskrevne prosess kan utføres ved temperaturer mellom 0 og 25°C. ;De ved fremgangsmåten fremstilte Y-globuliner. som kan brukes intravenøst, erholdes ved at man underkaster en vandig løsning av det nevnte proteinprodukt, eventuelt i blanding med en vandig løsning av standard-Y~globuliner, en inkubasjon inntil den antikomplementære virkning forsvinner. Etter overens-komst regner man at antikomplementærvirkningen'er forsvunnet når en løsning på 50 mg/ml ikke nøytraliserer (ikke fikserer) 2 enheter av komplement a 50 % (2 enheter C 50 %); med andre ord man regner at antikomplementærvirkningen er forsvunnet når det kreves en konsentrasjon over 50 mg/ml for å fiksere 2 enheter komplement a 50 %. (Public Health Monograph n° 74, 1965, U.S.A.: Standard Diagnostic Comple-ment fixation method and adaptation to microtest). ;Løsningen som er underkastet inkubasjon kan inneholde f.eks. fra 50 til 160 g/liter proteiner. Titeren i kaseinolytiske enheter i løsningen etter inkubasjon ligger mellom 1,25 ;og 10 kaseinolytiske enheter pr. gram protein, fortrinnsvis mellom 4 og 6 kaseinolytiske enheter pr. gram protein. ;Inkubasjonen utføres ved pH mellom 4 og 7. Inkubasjons-temperaturen ligger mellom 10 og 4 5°C, inkubasjonstem-peraturen er fortrinnsvis 37°C . Inkubasjonstiden avhenger på en gang av pH, av temperaturen, av utgangsblandingens titer i kaseinolytiske enheter og av den valgte maksimale endelige antikomplementærvirkning. ;Inkubasjonens varighet avtar når pH avtar og når temperaturen stiger. ;Når man utfører inkubasjonen ved 37°C og pH 7 kreves det vanligvis fra 14 til 28 døgn for å nå en tilfredsstillende antikomplementærvirkning. ;Når man arbeider ved 37°C og pH 4, er det tilstrekkelig med 18 timers inkubasjon, eller for sikkerhets skyld fra 24 til ;4 8 timer. ;For å eliminere rester av proteolytisk enzym underkastes Y-globulinløsningen etter inkubasjonen den adsorberende virkning av bentonitt. Man kan for eksempel tilsette en 4 % bentonittsuspensjon, sterilisert i autoklav, så at det inn-føres ca. 5 g bentonitt pr. 100 g proteiner i løsningen. Man justerer pH mellom 4 og 8, f.eks. til ca. 5,5 og ryster noen timer ved temperatur mellom ca. 2 0 og 37°C, f.eks. 2 timer ved romtemperatur (20 til 25°C). Til.slutt fjerner man bentonitt f.eks. ved sentrifugering. ;Når innholdet av kaseinolytiske enheter er lavt (f.eks. ;under 2 kaseinolytiske enheter pr. gram protein) kan dog bentonittbehandlingen sløyfes. ;Når den løsning man får etter inkubasjon inneholder pyrogener eller fargestoffer, er det hensiktsmessig å underkaste den f.eks. den adsorberende virkning av alumina-gel (gel fremstilt etter Willstatter's metode i vandig miljø). For dette tilsetter man en mengde alumina-gel mellom 0,2 5 og 1 ;gang vekten av de proteiner som finnes i løsningen. Denne behandling utføres ved pH 5,5 - 0,5, ved temperatur mellom 2 0 og 4 5°C. Man ryster noen timer, f.eks. 3 timer ved 45°C. Aluminagelen fjernes deretter ved sentrifugering. ;Det slik oppnådde Y-globulin skiller seg fra standard-y-globulinet især ved ultrasentrifugerings- og gelfiltrerings-egenskaper, og også ved mangel på antikomplementærvirkning (idet mangelen på anti-komplementærvirkning etter overens-komst er definert ved hjelp av den ovenfor angitt maksimums-terskel). Kliniske forsøk har vist at y-globulin fremstilt i henhold til oppfinnelsen kan tilføres intravenøst også ;hos personer som ikke tåler standard-y-globulinet i blodårene. ;For å konservere Y-globulinet etter inkubasjon og etter behandling med bentonitt eller med alumina, underkaster man det en lyofilisering. Slik får man et y-globulin-preparat som kan brukes intravenøst etter ny oppløsning i vann. ;Man har oppdaget at man etter lyofilisering får et pulver ;med bedre løselighet og stabilitet når lyofiliseringen skjer i nærvær av glykokoll, i forholdet 1 g glykokoll til 2,5 g proteiner omtrent. Følgende eksempler illustrerer oppfinnelsen . ;EKSEMPEL 1 ;Man løser bunnfall III-l, fremstilt etter den av H.L. Taylor og Coll. beskrevne metode, i en og en halv gang sin vekt av en vandig løsning av natriumklorid, 8 gram pr. liter avkjølt til 0°C. Man underkaster løsningen en dialyse under ren-nende vann ved 4°C i 3 til 4 dager, og fortynner så den dialyserte væske med vann (10 ganger vekten av det opprinne-lige bunnfall). Man justerer om nødvendig pH til 4,8 ved å tilsette en normal, saltsyreløsning. Man underkaster den-. fortynnede væske en sentrifugering og fjerner det dannede bunnfall. ;Man justerer den overliggende væskes pH til 7,7 ved tilsetning av en normal løsning av natriumhydroksyd, og tilsetter så natriumklorid i forholdet 2 g pr. 1 000. Man tilsetter E.D;A.L. (i form av en 1 % løsning). For å oppnå en god felling, dvs. et sediment på minst 50 % og en fullstendig klar overliggende væske, må man som regel tilsette E.D.A.L. slik at man får en konsentrasjon på 1 til 5 gram pr. 1 000 g av oppløsningen. Den optimale E.D.A.L.-mengde kan lett bestemmes på uttatte prøver som tilsettes progressivt stigende mengder E.D.A.L. ;Man lar sedimentere minst to timer, fjerner bunnfallet ved sentrifugering, og tilsetter natriumklorid til væsken for å krystallisere overskudd av E.D.A.L. Det dannede bunnfall fjernes ved filtrering. ;Man tilsetter ammoniumsulfat til filtratet i forholdet 300 gram pr. liter filtrat. Man ryster for å løse ammoniumsul-fatet fullstendig, og kontrollerer pH som skal være mellom 6 og 7. Man samler opp det dannede bunnfall ved filtrering. Man dialyserer. ;Man tilsetter glykokoll for å få en konsentrasjon på 1 %, ;og pH justeres til 7,0. Man filtrerer sterilt. ;Man får på denne måte en løsning som heretter betegnes med A. ;Man titrerer den anti-komplementære virkning hos løsningen ;A. Man inkuberer om nødvendig ved 37°C inntil antikomplementærvirkningen er tilfredsstillende, dvs. at over 50 mg/ml fikserer 2 enheter C<*> 50 %.
Når dette resultat er nådd, stoppes inkubasjonen. Man bestemmer proteinene og bestemmer innholdet av kaseinolytiske enheter. Hvis denne er ovér 0,2 enheter pr. milliliter for en løsning med 100 gram protein pr. liter, foretar man en bentonittbehandling. For dette tilsetter man en 4 % bento-nittløsning, behandlet i autoklav, i tilstrekkelig mengde til å gi 5 gram bentonitt pr. 100 gram proteiner. Man justerer pH til 5,5 ved tilsetning av en normal saltsyreløsning, og ryster 2 timer ved romtemperatur. Man fjerner bento-nitten ved sentrifugering. Hvis innholdet av kaseinolytiske enheter fremdeles er høyere enn den ovenfor angitte terskel, må man begynne bentonittbehandlingen om igjen.
Man foretar en behandling med aluminagel. I forhold til innholdet av pyrogener og farge tilsetter man en mengde alumina-gel mellom 1 gang og 0,25 ganger vekten av de tilstedeværende proteiner. I det siterte eksempel har man tilsatt 0,5 ganger vekten av de tilstedeværende proteiner. Man justerer pH til 5,5 og ryster 3 timer ved 4 5°C. Man fjerner aluminagelen ved sentrifugering.
Proteinenes doseringsstyrke innstilles, idet pH justeres til
7 ved tilsetning av en normal natriumhydroksydløsning, og tilsettes destillert vann for å justere proteininnholdet til 52 gram pr. liter. Man tilsetter natriumklorid for å få en konsentrasjon på 1 gram pr. liter og glykokoll for å få
en konsentrasjon på 20 gram pr. liter. Man filtrerer sterilt.
Den oppnådde løsning underkastes en lyofilisering. Man får på denne måte et y-globulin-preparat som kan brukes intrave-nøst etter ny, steril oppløsning i vann.
EKSEMPEL 2
Man tilsetter løsningen A, slik som man fikk den i eksempel 1 før inkubasjon,til en løsning av standard-y-globuliner for å justere innholdet til 5 kaseinolytiske enheter pr.gram proteiner.
Hvis man for eksempel ønsker å behandle 10 liter standard-Y-globuliner som inneholder 154 gram proteiner pr. liter må man tilsette X liter av en løsning A slik som man fikk i eksempel 1, som inneholder 12 5 gram proteiner pr. liter og 2 000 kaseinolytiske enheter pr. liter.
X bestemmes lett på følgende måte:
dvs.
eller omtrent 5,6 liter.
Etter at man har forsikret seg om blandingens sterilitet,
inkuberes den ved 37°C og pH 7. Man kontrollerer regelmessig på en uttatt prøve, f.eks. hver 8. dag, den antikomplementære virkning helt til den er forsvunnet.
Vanligvis tar det 14 til 28 dager. Man regner at antikomplementærvirkningen er forsvunnet når den er over 50 mg/ml for å fiksere 2 enheter C 50 %. Man stopper inkubasjonen og man behandler med bentonitt og aluminagel under de samme betingelser som i eksempel 1.
EKSEMPEL 3
Man arbeider på tilsvarende måte til den som er beskrevet i eksempel 2, men man tilsetter løsning A slik som man fikk den i eksempel 1, under andre betingelser for pH og enzymatisk konsentrasjon.
Den enzymatiske konsentrasjon justeres til 1,25 kaseino-lystiske enheter pr. gram proteiner. Inkubasjonen utføres ved pH 4 i 18 timer ved temperatur 37°C. Man arbeider videre som i eksempel 1, men man sløyfer bentonittbehandlingen.
Man får et y-globulinpreparat som kan brukes intravenøst
etter oppløsning i vann.
Kliniske undersøkelser
De foreliggende undersøkelser er gjennomført på forskjellige hospitaler og omfatter i alt 119 syke, derav 20. voksne og 99 barn.
y-globuliner fremstilt ved fremgangsmåten ifølge oppfinnel-
sen innføres via intravenøs vei, idet degjeldendé <p>reparater hver gang injiseres langsomt i en til to timer, slik at hver dose fortynnes i 100 ml fysiologisk serum inneholdende 5 g natriumklorid pr. liter, og idet man hver gang benytter mindre volum til nyfødte. De injiserte doser av y-globuliner innføres i en enkelt dose og varieres mellom 250 mg til nyfødte eller for tidlig fødte og 9 g til voksne.
Rytmen ved injeksjonene varieres i henhold til sykdomsår-
saken: hver annen dag ved alvorlige infeksjoner, hver 15. dag til 3 uker som profylakse ved a-y-globulinæmi.
I flertallet av tilfeller er de behandlede sykdommer meget alvorlige:
malign blodsykdommer og tumorer .(50)
infeksjoner (7)
alvorlige infeksjoner (10)
a-y-globulinæmi (7)
virussykdommer (43)
infeksjoner hos nyfødte (6)
diverse (3).
Toleranse
Toleransen er perfekt hos 116 syke av 119, hvorav flere personer har mottatt adskillige injeksjoner.
En lege har hos en enkelt av sine pasienter konstatert en følelse av trykk for brystet og kvelningsfornemmelse. Men pasientens almene tilstand og spesielt lungetilstand var slik at det var vanskeLig å tilskrive disse sykdomstegn til innvirkningen som fulgte innførelsen av Y-globuliner via intravenøs vei. En ny injeksjon noen dager senere har ikke medført vanskeligheter hos denne pasient.
En annen lege har hos to pasienter (av 37} som har mottatt
i alt 55 injeksjoner konstatert visse reaksjoner som er van-skelige å fortolke. Et barn på 13 måneder viser etter å
ha mottatt en dose på 5 mg "tegn på mildt sjokk med cyanose, kuldegysninger i ekstremitetene uten spenningsfall, idet disse tegn dog er hurtig vikende, og idet det bemerkes at de følgende injeksjoner mottas fullstendig perfekt hos denne pasient".
Et barn på 4 år har ved innføring av en dose på 2 g og i to tilfelle mellom to injeksjoner, som forøvrig ble mottatt fint, utvist febertilstand med 40°, dog av kort varighet.
Det må imidlertid konstateres, at toleransen har vært fin og til og med fremragende, dog med unntagelse av de ovenfor 3 anførte tilfeller, hvis fortolkning forøvrig er vanskelig med hensyn til de alvorlige sykdomstilfeller som herved er behandlet.
Kliniske resultater
For ordens skyld bemerkes det først at det har vært umulig
å bedømme de prøvde produkter og deres virkning under total objektivitet, fordi de først og fremst har vært prøvet på pasienter som lider av meget alvorlige sykdommer. I nesten
halvparten av tilfellene var det tale om cancer eller malign hæmopatier. Til visse eldre pasienter som lider av infeksjoner har behandlingen kun vært benyttet i sykdommens slutt-stadium. Hertil kommer også at andre tefcapeutika kan ha vært benyttet parallelt med de her innførte y-globuliner, især antibiotika.
Det er letteæå bedømme den térapeutiske effektivitet ved inngivelse av de gjeldende y-globuliner i de.7 tilfeller som vedrører syke med a-y-globulinæmi, samt i forløpet av visse virusinfeksjoner, i hvilke tilfeller man ikke har benyttet antibiotika. Således har man hos 14 personer, som lider av maligne hæmopati og av infeksjoner av viral opprinnelse
(2 virale pneumopaties, 3 hepatitt, 3 zonas (helvetesild)
og 6 brennkoppertilfeller), oppnådd fremragende resultater i alle tilfeller. Forøvrig har 4 barn som var underkastet en behandling med corticosurenale hormoner under en hospital-epidemi med brennkopper mottatt y-globulinene intravenøst, da risikoen for maligne brennkopper er velkjent hos barn, som mottar corticoterapi. Skjønt de vanlige isolasjonsfor-anstaltninger ikke har forhindret om-seg-gripen og oppduk- . ning av nye tilfeller har dog ingen av barnene som har mottatt y-globulinene intravenøst fått brennkopper. Denne kjensgjerning er så mye mer bemerkelsesverdig, som standard y-globuliner kun har hatt liten virkning med hensyn til å hindre brennkoppertilfeller. Det dreier seg således her om en særlig interessant preventiv virkning.
Hos syke som lider av a-y-globulinæmi, er de mengder som skal injiseres via intramuskulær vei når man benytter standard-y-globuliner slik at de som uomgjengelig, følge innebærer smertefenomener. Intoleransereaksjonene i løpet av gjen-tatte behandlinger med standard y-globulinene er forholds-vis hyppige hos disse a-y-globulinæmitilfeller. De fore-kom således hos 2 pasienter og gjorde praktisk behandling umulig hos den ene av disse. Skjønt det kan forekomme para-doksalt, har behandlingen via intravenøs vei vært bedre fundert og har ikke medført anafylaktiske reaksjoner. I de a-Y-globulinæmitilfeller som har vært iaktatt har man ikke konstatert noe tilfelle av intoleranse hittil, dvs. inntil den foreliggende rapport over de kliniske forsøk skrives etter behandlingstider, som strekkes seg over nesten 17 måneder.
Claims (1)
- Fremgangsmåte ved fremstilling av Y-globuliner, som kan inn-føres via intravenøs vei, karakterisert ved at man går ut fra det fra Taylors fremgangsmåte ved frem- . stilling av Y-globuliner ved fraksjonering av placentaékstrak-ter med alkohol erholdte bunnfall III-l, som fortynnes med vann og behandler den oppnådde oppløsning med en oppløsning av 2-etoksy-6,9-diaminoakridinlaktat, fjerner det derved dannede bunnfall, tilsetter filtratet en vandig oppløsning av ammoniumsulfat av tilstrekkelig konsentrasjon til å oppnå et bunnfall som består av Y~globulin og plasmin,. og som isoleres, hvoretter man underkaster en vandig oppløsning av dette bunnfall som eventuelt kan iblandes en vandig oppløsning av standard-Y-globulin, en inkubasjon ved en pH-verdi méllom 4 og 7 og ved en temperatur mellom 10 og 4 5°C, inntil antikomplementæraktiviteten er lavere enn den terskelverdi som tillater intravenøs injeksjon, hvoretter oppløsningen om nødvendig underkastes en adsorpsjonsbehandling med bentonitt for å fjerne resterende plasmin, og det således erholdte Y-globulinpreparat om ønsket lyofiliseres, fortrinnsvis i nærvær av glykokoll.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR7413019A FR2267115B1 (no) | 1974-04-12 | 1974-04-12 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO751295L NO751295L (no) | 1975-10-14 |
NO143478B true NO143478B (no) | 1980-11-17 |
NO143478C NO143478C (no) | 1981-02-25 |
Family
ID=9137624
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO751295A NO143478C (no) | 1974-04-12 | 1975-04-11 | Fremgangsmaate ved fremstilling av gamma-globuliner |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4137222A (no) |
JP (1) | JPS5529053B2 (no) |
AR (1) | AR205926A1 (no) |
BE (1) | BE827852A (no) |
BR (1) | BR7502230A (no) |
CA (1) | CA1050885A (no) |
DE (1) | DE2515666C3 (no) |
DK (1) | DK139659B (no) |
ES (1) | ES436525A1 (no) |
FR (1) | FR2267115B1 (no) |
GB (1) | GB1469908A (no) |
LU (1) | LU72273A1 (no) |
NL (1) | NL7504365A (no) |
NO (1) | NO143478C (no) |
SE (1) | SE403705B (no) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4124576A (en) * | 1976-12-03 | 1978-11-07 | Coval M L | Method of producing intravenously injectable gamma globulin |
DE2837168A1 (de) * | 1978-08-25 | 1980-03-06 | Blutspendedienst Dt Rote Kreuz | Verfahren zur herstellung einer fuer die intravenoese anwendung geeigneten immunglobulinloesung |
US4439421A (en) * | 1982-08-30 | 1984-03-27 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Stabilized gamma globulin concentrate |
FR2556219B1 (fr) * | 1983-12-07 | 1987-06-26 | Merieux Inst | Nouveau medicament immunomodulateur, a base de fragments fc d'igg humaines |
IL149687A0 (en) * | 2002-05-15 | 2002-11-10 | Alexander Condrea | Cervical dilator |
US20090123560A1 (en) * | 2005-09-16 | 2009-05-14 | Kenji Yoshida | Hematopoietic Stem Cell Proliferation Inducing Agent |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DK79841C (da) * | 1952-08-04 | 1955-09-12 | Behringwerke Ag | Fremgangsmåde til fremstilling af stabile γ-globulinpræparater. |
US2922745A (en) * | 1958-01-10 | 1960-01-26 | Ortho Pharma Corp | Purification of profibrinolysin |
NL286954A (no) * | 1962-01-03 | |||
US3382227A (en) * | 1967-01-30 | 1968-05-07 | Pentex Inc | Blood protein fractionation employing 2-ethoxy-6, 9-diamino-acridine-lactate |
BE789523A (fr) * | 1971-09-29 | 1973-03-29 | Behringwerke Ag | B1-glycoproteine specifique de la grossesse et son procede d'isolement |
US3763135A (en) * | 1971-11-08 | 1973-10-02 | Baxter Laboratories Inc | Gamma globulin production from cohn fraction iii using polyethylene glycol |
US3808124A (en) * | 1972-04-14 | 1974-04-30 | American Cyanamid Co | Purification of human plasminogen |
US3943245A (en) * | 1974-02-14 | 1976-03-09 | Armour Pharmaceutical Company | Purification of plasminogen |
-
1974
- 1974-04-12 FR FR7413019A patent/FR2267115B1/fr not_active Expired
-
1975
- 1975-01-01 AR AR258335A patent/AR205926A1/es active
- 1975-04-10 DE DE2515666A patent/DE2515666C3/de not_active Expired
- 1975-04-11 BE BE155338A patent/BE827852A/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-04-11 GB GB1507475A patent/GB1469908A/en not_active Expired
- 1975-04-11 BR BR2837/75A patent/BR7502230A/pt unknown
- 1975-04-11 CA CA224,575A patent/CA1050885A/fr not_active Expired
- 1975-04-11 SE SE7504196A patent/SE403705B/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-04-11 JP JP4343875A patent/JPS5529053B2/ja not_active Expired
- 1975-04-11 NO NO751295A patent/NO143478C/no unknown
- 1975-04-11 LU LU72273A patent/LU72273A1/xx unknown
- 1975-04-11 DK DK158075AA patent/DK139659B/da not_active IP Right Cessation
- 1975-04-11 NL NL7504365A patent/NL7504365A/xx not_active Application Discontinuation
- 1975-04-11 ES ES436525A patent/ES436525A1/es not_active Expired
- 1975-04-11 US US05/567,403 patent/US4137222A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AR205926A1 (es) | 1976-06-15 |
FR2267115B1 (no) | 1977-11-10 |
NO751295L (no) | 1975-10-14 |
DK158075A (no) | 1975-10-13 |
US4137222A (en) | 1979-01-30 |
JPS5529053B2 (no) | 1980-07-31 |
CA1050885A (fr) | 1979-03-20 |
JPS50145517A (no) | 1975-11-21 |
SE403705B (sv) | 1978-09-04 |
BR7502230A (pt) | 1976-02-10 |
ES436525A1 (es) | 1977-01-01 |
DK139659B (da) | 1979-03-26 |
GB1469908A (en) | 1977-04-06 |
DE2515666C3 (de) | 1980-06-26 |
LU72273A1 (no) | 1975-08-20 |
SE7504196L (sv) | 1975-10-13 |
FR2267115A1 (no) | 1975-11-07 |
NO143478C (no) | 1981-02-25 |
DE2515666B2 (de) | 1979-10-18 |
BE827852A (fr) | 1975-10-13 |
DE2515666A1 (de) | 1975-10-23 |
NL7504365A (nl) | 1975-10-14 |
DK139659C (no) | 1979-09-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Sjostrom et al. | A comparison of ovine and equine antivenoms | |
Russell | Snake venom immunology: historical and practical considerations | |
AU2003202093B2 (en) | Treatment of MS with goat serum | |
NO143478B (no) | Fremgangsmaate ved fremstilling av gamma-globuliner | |
JPS63277634A (ja) | アレルギーの治療およびそのための組成物 | |
KR20000035446A (ko) | 세포접착분자 발현억제제 | |
US7771725B2 (en) | Medicinal concentrate of arbovirus specific immunoglobulins and F(ab)'2 and/or Fab fragments | |
Klein et al. | Investigations on the nature of haemopoietin, the anti-anaemic substance in hog's stomach: The production of a thermostable haemopoietically active substance similar to or identical with the anti-anaemic principle of liver by the action of the thermolabile haemopoietin on beef | |
US20080219969A1 (en) | Concentrate of Chikungunya-Specific Immunoglobulins as a Medicinal Product | |
KR20000035445A (ko) | 항부종제 | |
Steigleman et al. | Optic neuropathy following an altitude exposure | |
JP2672303B2 (ja) | 馬用感染予防治療剤 | |
BARONDESS | Special Reviews: The Present Status of Gamma Globulin | |
MORSY et al. | Principle management of snake bites with reference to Egypt | |
EP0213072B1 (en) | Treatment of chronic imflammatory disease | |
EP0012774A1 (en) | Vegetative stigmata therapeutic agent | |
Cullumbine | Leukotaxine and histamine | |
Reid | Snakebite Part 2. Treatment | |
RU2141826C1 (ru) | Средство для профилактики и лечения клещевого энцефалита "йодантипирин" | |
Karelitz | Globulin Extract of Immune Adult Serum in Prophylaxis of Measles. | |
Trinca et al. | Prevention of tetanus by antitoxin of bovine origin | |
Moore et al. | Cavernous Sinus Thrombophlebitis: Cure with Sulfathiazole | |
Solis-Cohen et al. | On the Toxic Substances from Virulent Pneumococci and Pneumonic Lungs and the Influence Thereon of Quinin and Urea Hydrochlorid, Ethylhydrocuprein Hydrochlorid, and Other Cinchona Derivatives: Studies in Pneumonia, VI | |
RIGGS | Some nervous symptoms of pernicious anemia | |
JPH03163029A (ja) | 新生児溶血性黄疸治療剤 |