NO135801B - - Google Patents
Download PDFInfo
- Publication number
- NO135801B NO135801B NO2721/72A NO272172A NO135801B NO 135801 B NO135801 B NO 135801B NO 2721/72 A NO2721/72 A NO 2721/72A NO 272172 A NO272172 A NO 272172A NO 135801 B NO135801 B NO 135801B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- antigen
- antibody
- serum
- australia
- suspension
- Prior art date
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 33
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 71
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 71
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 71
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 38
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 37
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 9
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 4
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 4
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 claims description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 4
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 3
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 claims description 3
- 239000000057 synthetic resin Substances 0.000 claims description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 21
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 21
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 18
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 18
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 18
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 12
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 12
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 12
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 9
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 9
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 4
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 230000028654 Type IV pili-dependent aggregation Effects 0.000 description 3
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 3
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 3
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 2
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M potassium bromide Chemical compound [K+].[Br-] IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000004925 Acrylic resin Substances 0.000 description 1
- 229920000178 Acrylic resin Polymers 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 238000005054 agglomeration Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 230000009830 antibody antigen interaction Effects 0.000 description 1
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N ethyl chloroformate Chemical compound CCOC(Cl)=O RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000012817 gel-diffusion technique Methods 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000000760 immunoelectrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/576—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for hepatitis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Diagnostisk reagens.Diagnostic reagent.
Description
Nærværende oppfinnelse vedrorer diagnostiske reagenser av den The present invention relates to diagnostic reagents thereof
art som er angitt i krav l's ingress. species specified in claim l's preamble.
Australia-antigenet som ble funnet av Blumberg et al., J.Amer. Med.Assoc, 191, 541 (1965)-, Ann.Int.Med. , 66, 924 (1967) er tilstede i blodet hos en meget liten del av befolkningen, men det å finne det ved hurtige og pålitelige midler er av storste betydning for å unngå bruken for transfusjonsformål av blod som inneholder antigenet, hvilket kan fremkalle såkalt serum-hepatitis hos mottageren. Slik hepatitis, som kan utvikle seg etter en lang inkubasjonsperiode, kan være alvorlig og også The Australia antigen found by Blumberg et al., J. Amer. Med.Assoc, 191, 541 (1965)-, Ann.Int.Med. , 66, 924 (1967) is present in the blood of a very small part of the population, but its detection by rapid and reliable means is of the greatest importance in order to avoid the use for transfusion purposes of blood containing the antigen, which may produce so-called serum -hepatitis in the recipient. Such hepatitis, which can develop after a long incubation period, can be severe and also
fatal i noen tilfeller. Det er også viktig å være i stand til å finne antilegemet til Australia-antigen hos personer eller dyr som kan ha vært infisert eller immunisert med Australia-antigen. fatal in some cases. It is also important to be able to find the antibody to Australia antigen in people or animals that may have been infected or immunized with Australia antigen.
Det er derfor et behov for diagnostiske provemetoder som er hurtige, folsomme og gir mulighet for rutinegjentagelse på et stort antall blodprover, bruk av en minimal mengde diagnostisk reagens og er pålitelige, dvs. er i stand til å fastslå nær- There is therefore a need for diagnostic test methods that are fast, sensitive and allow for routine repetition on a large number of blood samples, the use of a minimal amount of diagnostic reagent and are reliable, i.e. are able to determine near-
vær av antigenet (eller dets antilegeme) i enhver blodprove enten denne er totalt blod, serum eller plasma, som inneholder det og samtidig gir et minimalt antall av "falske positive" resul-tater, dvs. falske angivelser på nærværet av antigenet (eller antilegemet). presence of the antigen (or its antibody) in any blood sample, whether whole blood, serum or plasma, which contains it and at the same time gives a minimal number of "false positive" results, i.e. false indications of the presence of the antigen (or antibody ).
Det diagnostiske reagens for Australia-antigen eller antile- The diagnostic reagent for Australia antigen or anti-
gemet til dette består av en vandig suspensjon av findelte, syntetiske harpikspartikler av i det vesentlige ensartet form og storrelse som er overtrukket med antilegemet spesifikt for the agent for this consists of an aqueous suspension of finely divided synthetic resin particles of substantially uniform shape and size which are coated with the antibody specific for
Australia-antigen eller henholdsvis med Australia-antigenet som sådant. Fortrinnsvis er partiklene sfæriske polystyrenpartikler som har en diameter på ca. 0,16 pm, men partikler av poly-styren eller andre syntetiske harpikser, f.eks. akrylharpikser som har ensartete dimensjoner på fra 0,06-0,4 um, kan være egnet, og reagensen er særpreget ved det som er angitt i krav l's karakteriserende del. Australia antigen or respectively with the Australia antigen as such. Preferably, the particles are spherical polystyrene particles having a diameter of approx. 0.16 pm, but particles of polystyrene or other synthetic resins, e.g. acrylic resins having uniform dimensions of from 0.06-0.4 µm may be suitable, and the reagent is characterized by that set forth in the characterizing part of claim 1.
Fra U.S. patent nr. 3.551.555 er det kjent å anvende et indifferent protein til stabilisering av partiklene, eksempelvis okse-serum-albumin, imidlertid er det indifferente protein adsorbert på bærepartiklene for partiklene påfbres antigenet. Hensikten med å påfore bærepartiklene et belegg av et indifferent protein, for antigenet påfbres, er å forhindre forandringer i antigenets struktur, eller å fylle porene i bærepartiklene, som ellers ville bli fylt med antigenet. Antigen i slike porer vil ikke være tilgjengelige for en agglutineringsreaksjon, hvilket fremgår av patentets kolonne 3, linjene 46 - 62. Partikler som på for-hånd er belagt med et inert protein er angitt å være mere folsomme. From the U.S. patent no. 3,551,555, it is known to use an indifferent protein to stabilize the particles, for example ox serum albumin, however, the indifferent protein is adsorbed on the carrier particles for the antigen applied to the particles. The purpose of coating the carrier particles with an indifferent protein, before the antigen is applied, is to prevent changes in the antigen's structure, or to fill the pores in the carrier particles, which would otherwise be filled with the antigen. Antigen in such pores will not be available for an agglutination reaction, which is evident from the patent's column 3, lines 46 - 62. Particles that are pre-coated with an inert protein are stated to be more sensitive.
Det fremgår av patentet at med et indifferent protein menes It appears from the patent that an indifferent protein is meant
.et protein som ikke tar del i den immunokjemiske reaksjon etc. .a protein that does not take part in the immunochemical reaction etc.
Det er et vesentlig trekk ved reagenset ifolge foreliggende oppfinnelse at det inneholder normalt serum, som således kommer i kontakt med blodproven som skal undersokes. Ifolge det nevnte U.S. patentskrift vil proteinet, som ikke kan be-tegnes som "normalt serum", foreligge i form av et indre belegg som ikke kommer i kontakt med blodproven, men utgjor kun et mellomliggende lag mellom bærepartiklene og laget av det påforte antigen. It is an essential feature of the reagent according to the present invention that it contains normal serum, which thus comes into contact with the blood sample to be examined. According to the aforementioned U.S. patent, the protein, which cannot be described as "normal serum", is present in the form of an inner coating that does not come into contact with the blood sample, but only forms an intermediate layer between the carrier particles and the layer of the applied antigen.
Det "normale serum" som er tilstede i foreliggende reagens er ikke indifferent, men tar aktivt del i prosessen og vil fun-gere til å minimalisere antallet av "falske positive" reaksjoner . The "normal serum" present in the present reagent is not indifferent, but takes an active part in the process and will serve to minimize the number of "false positive" reactions.
Antilegemet spesifikt for Australia-antigenet er fortrinnsvis utvunnet fra serum som oppnås fra pattedyr, f.eks. mennesker, får, geiter eller marsvin som inneholder antilegemet eller er blitt immunisert med sterkt renset Australia-antigen fra men-neskeblod. Anti-serumet renses for å fjerne fra dette gjenværende antilegemer for menneskelige serum-proteiner eller andre stoffer som ville gripe forstyrrende inn ved bruken av den diagnostiske reagens for fastslåelse av nærværet av Australia-antigenet . The antibody specific for the Australia antigen is preferably recovered from serum obtained from mammals, e.g. humans, sheep, goats or guinea pigs that contain the antibody or have been immunized with highly purified Australia antigen from human blood. The anti-serum is purified to remove from it residual antibodies to human serum proteins or other substances that would interfere with the use of the diagnostic reagent to determine the presence of the Australia antigen.
Australia-antigenet som sådant fremstilles fra serum som erholdes fra mennesker hvis blod inneholder antigenet. Antigenet ekstra-heres fra serumet og renses slik at ingen påvisbare serumpro-teiner eller andre komponenter blir tilbake som ville gripe forstyrrende inn ved bruken av diagnostisk reagens for å fastslå nærværet av antilegemet for Australia-antigen. The Australia antigen as such is prepared from serum obtained from humans whose blood contains the antigen. The antigen is extracted from the serum and purified so that no detectable serum proteins or other components remain that would interfere with the use of the diagnostic reagent to determine the presence of the antibody to Australia antigen.
Den vandige suspensjon inneholder fortrinnsvis ca. 0,5 g/100 ml av harpikspartiklene, men kan inneholde fra 0,1-3 g/100 ml av harpikspartiklene. For fremstillingen av diagnostisk reagens for Australia-antigen inneholder suspensjonen fortrinnsvis ca. 0,05 g/100 ml av antilegemet for dette, adsorbert på harpikspartiklene, men dette kan også varieres i overensstemmelse med partiklenes konsentrasjon. Mengden av antilegeme skal være akkurat tilstrekkelig for å forhindre auto-aggregasjon av harpikspartiklene. For sfæriske polystyrenpartikler (0,16 um i diameter) er dette ca. 1/10 av vekten av partiklene. En mengde mindre enn 1/20 av vekten av 0,16 um harpikspartikler er blitt funnet å forårsake auto-aggregasjon. Mengder over 1/10 forer til nedsatt folsomhet av den diagnostiske reagens når det an-vendes for å bestemme nærværet av antigen, skjont mengder opp til det dobbelte av vekten av 0,16 um harpikspartikler kan brukes. The aqueous suspension preferably contains approx. 0.5 g/100 ml of the resin particles, but may contain from 0.1-3 g/100 ml of the resin particles. For the preparation of diagnostic reagent for Australia antigen, the suspension preferably contains approx. 0.05 g/100 ml of the antibody for this, adsorbed on the resin particles, but this can also be varied in accordance with the concentration of the particles. The amount of antibody should be just sufficient to prevent auto-aggregation of the resin particles. For spherical polystyrene particles (0.16 µm in diameter) this is approx. 1/10 of the weight of the particles. An amount of less than 1/20 of the weight of 0.16 µm resin particles has been found to cause auto-aggregation. Amounts above 1/10 lead to reduced sensitivity of the diagnostic reagent when used to determine the presence of antigen, although amounts up to twice the weight of 0.16 µm resin particles may be used.
Suspensjonen inneholder fortrinnsvis et inert protein som stabiliseringsmiddel f.eks. serum albumin som tilsettes'etter ad-sor.pejon av antigenet eller antilegemet på partiklene i en konsentrasjon på f.eks. 0,1 g/100 ml. Et konserveringsmiddel, f.eks. natriumazid, i en konsentrasjon av 0,1 g/100 ml kan også The suspension preferably contains an inert protein as stabilizer, e.g. serum albumin which is added after adsorption of the antigen or antibody on the particles in a concentration of e.g. 0.1 g/100 ml. A preservative, e.g. sodium azide, in a concentration of 0.1 g/100 ml can also
være tilstede. be present.
Ifolge oppfinnelsen inneholder den diagnostiske reagens som nevnt også normalt serum (dvs. serum som ikke inneholder verken antilegemet spesifikt for Australia-antigen, eller Australia-antigen som sådant) som oppnås fra de samme arter av pattedyr som de According to the invention, the diagnostic reagent as mentioned also contains normal serum (ie serum which does not contain either the antibody specific for Australia antigen, or Australia antigen as such) which is obtained from the same species of mammals as the
fra hvilket serumet som inneholder antilegemet eller antigenet, ble oppnådd. Nærværet av slikt normalt serum reduserer vesentlig mengden "falske positive" indikasjoner når den diagnostiske reagens brukes for å fastslå nærværet av Autstralia-antigen (eller antilegeme) i blodprover. Fortrinnsvis innfores ca. 1 del normalt serum pr. 20-50, f.eks. 35, volumdeler av den vandige suspensjon av harpikspartikler som er overtrukket med antilegemet eller antigenet. from which the serum containing the antibody or antigen was obtained. The presence of such normal serum greatly reduces the amount of "false positive" indications when the diagnostic reagent is used to determine the presence of Australia antigen (or antibody) in blood samples. Preferably, approx. 1 part normal serum per 20-50, e.g. 35, parts by volume of the aqueous suspension of resin particles coated with the antibody or antigen.
Den diagnostiske reagens for Australia-antigen eller antilegeme ifolge foreliggende oppfinnelse kan fremstilles ved å tilsette en suspensjon av harpikspartiklene, passende fortynnet og filtrert hvis nodvendig, til en passende fortynnet opplbsning eller suspensjon av det rensede antilegeme eller antigen og rores om ved romtemperatur inntil adsorpsjon av antilegemet eller antigenet på partiklene er fullfort. Normalt serum fra pattedy rar tene fra hvilke antilegemet eller antigenet ble oppnådd, fortynnet The diagnostic reagent for Australia antigen or antibody of the present invention may be prepared by adding a suspension of the resin particles, suitably diluted and filtered if necessary, to a suitably diluted solution or suspension of the purified antibody or antigen and stirred at room temperature until adsorption of the antibody or antigen on the particles is complete. Normal serum from pattedy rar ten from which the antibody or antigen was obtained, diluted
"om nodvendig, tilsettes serum-albumin og eventuelt t^.lui.Ti"irl, or. derpå tilsettes i egnede mengder. Det er spesielt; viktig å tilsette suspensjonen av harpikspartikler til opplosningen eller suspensjonen av antilegeme eller antigen i stedet for den omvendte måte, da sistnevnte kan forårsake irreversibel auto-aggregasjon av harpikspartiklene. "if necessary, add serum albumin and possibly t^.lui.Ti"irl, or. then added in suitable quantities. It is special; important to add the suspension of resin particles to the solution or suspension of antibody or antigen instead of the reverse way, as the latter may cause irreversible auto-aggregation of the resin particles.
For påvisning av nærvær av Australia-antigen eller dettes antilegeme blandes en forsoksprove av serum, plasma eller normalt blod, eventuelt blandet med et vandig fortynningsmidde1, med et egnet (f.eks. likt) volum diagnostisk reagens ifolge oppfinnelsen for Australia-antigen henholdsvis antilegeme, og blandingen fortsettes i minst 2 minutter, fortrinnsvis fra 5-10 minutter. Hvis Australia-antigen eller dettes antilegeme er tilstede i forsoksprbven inntreffer agglutinering av harpiks-, f.eks. poly-styren, partiklene under dannelse av synlige agglomerater. To detect the presence of Australia antigen or its antibody, a test sample of serum, plasma or normal blood, optionally mixed with an aqueous diluent1, is mixed with a suitable (e.g. equal) volume of diagnostic reagent according to the invention for Australia antigen or antibody , and the mixing is continued for at least 2 minutes, preferably from 5-10 minutes. If Australia antigen or its antibody is present in the test sample, agglutination of the resin, e.g. polystyrene, the particles forming visible agglomerates.
Hvis ingen agglomerater fremkommer innen 5 minutter, angir dette fraværet av Australia-antigenet eller dettes antilegeme i forsoksproven. If no agglomerates appear within 5 minutes, this indicates the absence of the Australia antigen or its antibody in the test sample.
Ved en alternativ undersokelsesmetode for å fastslå nærvær av antilegemet til Australia-antigenet rores forsoksproven om med et standard volum av en renset opplosning eller suspensjon av Australia-antigen som er utvunnet fra menneskeblodplasma, den diagnostiske reagens for Australia-antigen tilsettes og blandingen rores om over en lignende periode. Agglutinering av harpikspartiklene viser da fraværet av antilegeme i forsoksproven. Hvis harpikspartiklene ikke agglutinerer i lopet av 5 minutter angir dette nærværet av antilegeme i forsoksproven, og slikt antilegeme har reagert med det tilsatte antigen og således hem-met etterfblgende agglutinering av harpikspartiklene ved antigenet . In an alternative test method for determining the presence of the antibody to Australia antigen, the test sample is agitated with a standard volume of a purified solution or suspension of Australia antigen extracted from human blood plasma, the diagnostic reagent for Australia antigen is added and the mixture is agitated a similar period. Agglutination of the resin particles then shows the absence of antibody in the test sample. If the resin particles do not agglutinate within 5 minutes, this indicates the presence of antibody in the test sample, and such antibody has reacted with the added antigen and thus inhibited subsequent agglutination of the resin particles by the antigen.
Som nevnt foran innfores normalt serum fra samme pattedyrarter som fra hvilke antilegemet eller antigenet ble avledet i den diagnostiske reagens for antigen henholdsvis antilegeme. Dette er særlig viktig ved utforelse av prbven på antigen for å redusere opptreden av "falske positive" reaksjoner. F.eks. hvis normalt marsvin-serum ikke innarbeides i diagnostisk reagens som inneholder antilegeme avledet fra marsvin-antiserum, finner en at ca. 10% av menneskesera, som ikke inneholder Australia-antigen, agglutinerer harpikspartiklene som har antilegemet til Australia-antigen adsorbert på seg. As mentioned above, serum from the same mammalian species from which the antibody or antigen was derived is normally introduced into the diagnostic reagent for antigen or antibody. This is particularly important when carrying out the test for antigen in order to reduce the occurrence of "false positive" reactions. E.g. if normal guinea pig serum is not incorporated into a diagnostic reagent containing antibody derived from guinea pig antiserum, one finds that approx. 10% of human sera, which do not contain Australia antigen, agglutinate the resin particles which have the antibody to Australia antigen adsorbed on them.
Dette skyldes muligvis nærvær av stoffer i slike menneskesera This is possibly due to the presence of substances in such human sera
som reagerer med andre bestanddeler som stammer fra marsvin-antiserum fra hvilket antilegemet til Australia-antigen ble oppnådd. Når det normale marsvin-serum imidlertid innarbeides finner en at bare 1 - 3% av menneskesera vil agglutinere harpikspartiklene i fravær av Australia-antigen fra sera. Dette kan skyldes bestanddeler i det normale marsvin-serum som er i stand til å reagere med slike bestanddeler i menneskelige sera og således hindrer dem fra å forårsake agglutinering av harpikspartiklene . which reacts with other components derived from the guinea-pig antiserum from which the antibody to Australia antigen was obtained. When the normal guinea pig serum is incorporated, however, one finds that only 1 - 3% of human sera will agglutinate the resin particles in the absence of Australia antigen from sera. This may be due to constituents in the normal guinea pig serum which are able to react with such constituents in human sera and thus prevent them from causing agglutination of the resin particles.
Hvis forsoksproven er normalt blod, må den forst behandles for If the test sample is normal blood, it must first be treated for
å opplose cellene i det å forebygge koagulering for det under-søkes på nærvær av et Australia-antigen eller dettes antilegeme. For dette formål kan det behandles med et vandig fortynningsmiddel som inneholder et ikke-ionisk overflateaktivt middel av poly-oksyetylert alkylfenol-type, f.eks. iso-oktyl-fenoksy-polyoksy-etyl-etanol ("Triton X-100", Rohm & Haas Co.) og natriumcitrat. to dissolve the cells in preventing coagulation because it is examined for the presence of an Australia antigen or its antibody. For this purpose it can be treated with an aqueous diluent containing a nonionic surfactant of the polyoxyethylated alkylphenol type, e.g. iso-octyl-phenoxy-polyoxy-ethyl-ethanol ("Triton X-100", Rohm & Haas Co.) and sodium citrate.
Hvis forsoksproven er blodplasma,' må den inneholde et anti-koaguleringsmiddel, f.eks. ethvert av standard-antikoaguler-ringsmidlene, slik som natriumcitrat, og med fordel behandles det også med det samme vandige fortynningsmiddel (som inneholder et ikke-ionisk overflateaktivt midde]) som normalt blod for å lose opp eventuelt gjenværende celler som er tilstede i proven. If the test sample is blood plasma, it must contain an anti-coagulant, e.g. any of the standard anticoagulants, such as sodium citrate, and advantageously it is also treated with the same aqueous diluent (containing a non-ionic surfactant) as normal blood to dissolve any remaining cells present in the sample.
De folgende eksempler illustrerer oppfinnelsen. The following examples illustrate the invention.
A. Fremstilling av diagnostiske reagenser A. Preparation of diagnostic reagents
Eksempel 1 Example 1
En 40 g/100 ml suspensjon av 0,16 um polystyrenkuler, (Styrene Products Limited ("Product No. 24016")) fortynnes til 5% med glycin-pufret saltopplosning og steriliseres ved tilsetning av (3-propiolakton under pH kontroll. Det tilsettes derpå til 9 volumdeler av egnet fortynnet, renset marsvin-serum fra dyr ' A 40 g/100 ml suspension of 0.16 µm polystyrene beads, (Styrene Products Limited ("Product No. 24016")) is diluted to 5% with glycine-buffered saline and sterilized by addition of (3-propiolactone under pH control. is then added to 9 parts by volume of suitably diluted, purified guinea pig serum from animals'
som er immunisert med Australia-antigen. Polystyrensuspensjonen tilsettes langsomt under omroring og omroringen fortsettes i 30 minutter. Polystyrenkulene sentrifugeres, vaskes straks på sentrifugen med pufret saltopplosning og gjensuspenderes til det opprinnelige volum i pufret saltopplosning. Okseserum-albumin (1 g/100 ml) tilsettes for å stabilisere suspensjonen av polystyrenkuler og omroringen fortsettes i 30 minutter. En fortynnet oppløsning av normalt serum fra ikke-immuniserte marsvin (fortynnet 1:3,5 med glycin-pufret saltopplosning) ble tilsatt i-en mengde på 1/10 av volumet av suspensjonen og blandingen rores igjen om i 30 minutter. Til slutt rystes blandingen kraftig for å dispergere enhver agglomerering av partikler. who are immunized with Australia antigen. The polystyrene suspension is added slowly while stirring and the stirring is continued for 30 minutes. The polystyrene balls are centrifuged, immediately washed on the centrifuge with buffered saline solution and resuspended to the original volume in buffered saline solution. Bovine serum albumin (1 g/100 ml) is added to stabilize the suspension of polystyrene beads and stirring is continued for 30 minutes. A dilute solution of normal serum from non-immunized guinea pigs (diluted 1:3.5 with glycine-buffered saline) was added in an amount of 1/10 of the volume of the suspension and the mixture was again stirred for 30 minutes. Finally, the mixture is shaken vigorously to disperse any agglomeration of particles.
Alle opplosninger som brukes steriliseres ved filtrering og inneholder 0,1% natriumazid som konserveringsmiddel. Produktet holdes ved 4°C, ved hvilken temperatur det er stabilt i minst 3 måneder. All solutions used are sterilized by filtration and contain 0.1% sodium azide as a preservative. The product is kept at 4°C, at which temperature it is stable for at least 3 months.
Virkningen av en sats av diagnostisk reagens undersokes ved å proves mot et panel på minst 50 menneskesera som inneholder forskjellige kjente titere av Australia-antigen. Denne virkning sammenlignes med virkningen av standardprover for Australia-antigen (geldiffusjon og kontra-immunoelektroforese) mot panelet og skulle gi i det minste lik folsomhet. Selektiviteten undersokes mot minst 100 menneskesera og blodprover kjent for ikke å inneholde-Australia-antigen når ikke mere enn 3% The performance of a batch of diagnostic reagent is examined by testing against a panel of at least 50 human sera containing various known titers of Australia antigen. This performance is compared to the performance of standard samples for Australia antigen (gel diffusion and counter-immunoelectrophoresis) against the panel and should give at least equal sensitivity. The selectivity is investigated against at least 100 human sera and blood samples known not to contain the Australia antigen does not reach more than 3%
av provene skulle gi en reaksjon. of the sample should give a reaction.
Det rensede marsvin-antiserum som ble anvendt fremstilles som folger: c The purified guinea pig antiserum used is prepared as follows: c
Marsvin immuniseres med Australia-antigen som er renset, fra prover av menneskeplasma ved isopyknisk behandling i en cesium-klorid- eller kaliumbromid-gradient i en sonesentrifuge fulgt av sonesentrifugering i en sukrosegradient. En primær immuni-sering med antigen med Freund's komplette hjelpemiddel i fot-putene folges av to intraperitoneale inokuleringer av antigen uten hjelpemiddel. Etter oppsamling av sera samlet opp fra marsvin fjernes gjenværende antilegeme til menneskeserumproteiner hvis nodvendig ved å bringe antiserumet i kontakt med normalt menneskeserum polymerisert med etylkloroformat. Serumet ren- Guinea pigs are immunized with Australia antigen purified from samples of human plasma by isopycnic treatment in a cesium chloride or potassium bromide gradient in a zone centrifuge followed by zone centrifugation in a sucrose gradient. A primary immunization with antigen with Freund's complete adjuvant in the footpads is followed by two intraperitoneal inoculations of antigen without adjuvant. After collection of sera collected from guinea pigs, residual antibody to human serum proteins is removed if necessary by contacting the antiserum with normal human serum polymerized with ethyl chloroformate. The serum clean-
ses derpå ved utfelling med 14% vandig natriumsulfat, dialy-seres mot vandig fosfat pufret med saltopplosning og kan opp-varmes ved 56 oC i 30 minutter hvis onsket for a odelegge komple-ment. Natriumazid (0,1%) tilsettes derpå som konserveringsmiddel. For bruk ved fremstilling av den diagnostiske reagens fortynnes antiserumet hensiktsmessig. Den optimale fortynning velges ved å fremstille små satser av den diagnostiske reagens med forskjellige fortynninger av antiserumet og prove disse mot et panel av mennsekesera kjent for å inneholde Australia-antigen. Fortynningen som gir den beste virkning mot panelet når overtrukket på harpikspartikler, velges for fremstilling av den diagnostiske reagens. Normalt ligger den optimale fortynning mellom 1:20 og 1:100. is then seen by precipitation with 14% aqueous sodium sulfate, dialyzed against aqueous phosphate buffered with salt solution and can be heated at 56 oC for 30 minutes if desired to destroy complement. Sodium azide (0.1%) is then added as a preservative. For use in the preparation of the diagnostic reagent, the antiserum is diluted appropriately. The optimal dilution is selected by preparing small batches of the diagnostic reagent with various dilutions of the antiserum and testing these against a panel of human caesareans known to contain Australia antigen. The dilution which gives the best effect against the panel when coated on resin particles is selected for the preparation of the diagnostic reagent. Normally, the optimal dilution is between 1:20 and 1:100.
B. Provemetoder for å fastslå nærværet av Australia- antigen. B. Test methods for determining the presence of Australia antigen.
Eksempel 2 Example 2
En dråpe (40 ul) av forsoksproven av menneskeserum anbringes A drop (40 µl) of the test sample of human serum is placed
på en sort glass- (eller plastisk) plate. En dråpe av diagnostisk reagens fremstilt som i eksempel 1 tilsettes og blandingen rores om med en apoteker-trepinne inntil dråpens diameter er ca. 2 cm. Platen rystes svakt frem og tilbake i 5 minutter. Etter denne tid viser en serumprove som inneholder Australia-anitgen avgjort agglutinering; skjont en sterkt positiv prove vil agglutinere polystyrenpartiklene i lbpet av 15 - 30 sekunder. Negative sera gir ingen synlig agglutinering i lopet av 5 minutter. on a black glass (or plastic) plate. A drop of diagnostic reagent prepared as in example 1 is added and the mixture is stirred with a wooden apothecary stick until the diameter of the drop is approx. 2 cm. The plate is gently shaken back and forth for 5 minutes. After this time a serum sample containing Australia antigen shows definite agglutination; although a strongly positive sample will agglutinate the polystyrene particles within 15 - 30 seconds. Negative sera give no visible agglutination within 5 minutes.
Eksempel 3 Example 3
En dråpe (tilnærmet 4 ul) av venost eller fingerkapillarblod A drop (approximately 4 ul) of venous or finger capillary blood
fra mennesker tilsettes til et ror som inneholder 200 ul av en from humans is added to a tube containing 200 µl of one
fortynnet opplosning med fblgende sammensetning: 0,1% trinatrium-citrat, 0,1% natriumazid og 0,02% av et ikke-ionisk overflateaktivt middel (iso-oktylfenoksy-polyetoksyetanol, "Triton X-100", Rohm & Haas Co.) i destillert vann. Etter blanding ved svak rystning og henstand i 10 minutter for å lose cellene i blodet anbringes 2 dråper av blandingen sammen på en sort glass- eller plast-plate og en dråpe av den diagnostiske reagens fremstilt som i eksempel 1 tilsettes, og proven utfores som i eksempel 2. diluted solution with the following composition: 0.1% trisodium citrate, 0.1% sodium azide and 0.02% of a nonionic surfactant (iso-octylphenoxy-polyethoxyethanol, "Triton X-100", Rohm & Haas Co. ) in distilled water. After mixing by gentle shaking and resting for 10 minutes to loosen the cells in the blood, 2 drops of the mixture are placed together on a black glass or plastic plate and one drop of the diagnostic reagent prepared as in example 1 is added, and the sample is carried out as in example 2.
Eksempel 4 Example 4
20 ul blod (venost eller kapillarblod) tilsettes til tilnærmet 50 ul av en fortynnet opplosning med sammensetning som i eksempel 3 på en sort glass- eller plast-plate. Blodet og fortyn-ningsmidlet rores om med en apoteker-trepinne, og blandingen får henstå mellom 5 og 10 minutter for å sikre fullstendig losning av blodcellene. En dråpe diagnostisk reagens fremstilt som i eksempel 1 tilsettes og proven utfores som i eksempel 2. 20 ul of blood (venous or capillary blood) is added to approximately 50 ul of a diluted solution with composition as in example 3 on a black glass or plastic plate. The blood and the diluent are stirred with a wooden apothecary stick, and the mixture is allowed to stand for between 5 and 10 minutes to ensure complete loosening of the blood cells. A drop of diagnostic reagent prepared as in example 1 is added and the test is carried out as in example 2.
Eksempel 5 Example 5
Blod som inneholder ethvert av standard-antikoaguleringsmid-lene slik som citrat sentrifugeres for å fjerne hovedparten av cellene. Det resulterende plasma skilles fra de sammenpak-kede cellene og undersokes derpå på Australia-antigen ved en av metodene i eksemplene 3 eller 4, noyaktig som for normalt blod. Blood containing any of the standard anticoagulants such as citrate is centrifuged to remove most of the cells. The resulting plasma is separated from the packed cells and then examined for Australia antigen by one of the methods in Examples 3 or 4, exactly as for normal blood.
Det er fordelaktig når man utforer en rekke prover ifolge noen av eksemplene 2 - 5 å inkludere et kjent "positivt" eller "negativt" serum i hver serie for sammenligningsformål. It is advantageous when performing a series of tests according to any of Examples 2 - 5 to include a known "positive" or "negative" serum in each series for comparison purposes.
C. Provemetode for å fastslå nærværet av Australia-antigenfets C. Test method for determining the presence of Australia antigenfets
antilegeme. antibody.
Serier av dobbelte fortynninger av kjent Australia-antigenhol-dig menneskelig serum fremstilles ved å bruke normalt menneskeserum (dvs. fritt for Australia-antigen eller dettes antilegeme) som et fortynningsmiddel. En dråpe av hver av fortynningene undersokes med diagnostisk reagens som i eksempel 2 og den hoyeste fortynning ved hvilken en maksimal agglutingeringsreak- Serial two-fold dilutions of known Australia antigen-containing human serum are prepared using normal human serum (ie free of Australia antigen or its antibody) as a diluent. A drop of each of the dilutions is examined with diagnostic reagent as in example 2 and the highest dilution at which a maximum agglutination reaction
sjon ennå inntrer tegnes opp. Denne fortynning velges som for- tion yet to occur is drawn up. This dilution is chosen as the
tynning for bruk ved hver prove. En dråpe (40 ul) av den ut- dilution for use with each sample. A drop (40 ul) of the out-
valgte fortynning av antigen-holdig serum tilsettes til en dråpe (40 ul) av en forsbksprove av menneskeserum på en sort glass- selected dilution of antigen-containing serum is added to a drop (40 µl) of a test sample of human serum on a black glass
(eller plast-) plate og de to blandes med en engangs apoteker-trepinne. Etter henstand i 5 minutter for å tillate at antigen-antilegeme-innvirkning inntrer tilsettes en dråpe (40 ul) av diagnostisk reagens fremstilt som i eksempel 2 og blandes kort med en trepinne. Platen rystes derpå svakt frem og tilbake i 5 (or plastic) plate and the two are mixed with a disposable wooden apothecary stick. After standing for 5 minutes to allow antigen-antibody interaction to occur, a drop (40 µl) of diagnostic reagent prepared as in Example 2 is added and mixed briefly with a wooden stick. The plate is then gently shaken back and forth for 5
minutter. Etter denne tid vil agglutinering ha inntruffet med ethvert proveserum som ikke inneholder antilegeme. Hvor agglutinering ikke inntrer viser dette nærværet av antilegeme i proveserumet. For sammenligning skal en samtidig prove som anvender en dråpe av et serum kjent for å være fritt for Australia-antigen eller dettes antilegeme utfores. Her er en sterk agglutineringsreaksjon å vente. minutes. After this time, agglutination will have occurred with any sample serum that does not contain antibody. Where agglutination does not occur, this shows the presence of antibody in the sample serum. For comparison, a simultaneous test using a drop of a serum known to be free of Australia antigen or its antibody should be performed. A strong agglutination reaction is to be expected here.
Titeret for antilegeme i ethvert proveserum kan fastlegges ved The titer of antibody in any sample serum can be determined by
å utfore proven som foran på dobbelte fortynninger av prove- to carry out the test as before on double dilutions of sample
serumet i normalt serum. Sluttpunktet er den hbyeste fortyn- the serum in normal serum. The endpoint is the highest dilution
ning av proveserumet som ikke gir agglutinering med den diag- ing of the sample serum that does not give agglutination with the diag-
nostiske reagens ved proven som er beskrevet i eksempel C. nostic reagent in the test described in example C.
Claims (2)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB3609771A GB1390617A (en) | 1971-07-31 | 1971-07-31 | Diagnostic reagents test method and pack |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO135801B true NO135801B (en) | 1977-02-21 |
| NO135801C NO135801C (en) | 1977-06-08 |
Family
ID=10384922
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO2721/72A NO135801C (en) | 1971-07-31 | 1972-07-28 | |
| NO3782/72A NO138394C (en) | 1971-07-31 | 1972-10-20 | PROCEDURE FOR AA DETERMINING THE PRESENCE OF AUSTRALIA ANTIGEN IN A BLOOD TEST |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO3782/72A NO138394C (en) | 1971-07-31 | 1972-10-20 | PROCEDURE FOR AA DETERMINING THE PRESENCE OF AUSTRALIA ANTIGEN IN A BLOOD TEST |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS4829487A (en) |
| AR (1) | AR192962A1 (en) |
| AT (1) | AT316752B (en) |
| AU (1) | AU472607B2 (en) |
| BE (1) | BE787014A (en) |
| BR (1) | BR7205058D0 (en) |
| CH (1) | CH572621A5 (en) |
| DK (1) | DK144988C (en) |
| ES (2) | ES405387A1 (en) |
| FI (1) | FI55408C (en) |
| FR (1) | FR2148081B1 (en) |
| GB (1) | GB1390617A (en) |
| IE (1) | IE36589B1 (en) |
| IL (1) | IL39991A0 (en) |
| IT (1) | IT963332B (en) |
| NL (1) | NL163877C (en) |
| NO (2) | NO135801C (en) |
| SE (1) | SE410768B (en) |
| ZA (1) | ZA725257B (en) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3992517A (en) * | 1975-02-19 | 1976-11-16 | Pfizer Inc. | Detection of hepatitis B surface antigen by latex agglutination |
| US4642285A (en) * | 1975-09-29 | 1987-02-10 | Diamedix Corporation | Sandwich EIA for antigen |
| US4474878A (en) * | 1975-09-29 | 1984-10-02 | Cordis Laboratories, Inc. | Sandwich EIA for antigen associated with hepatitis |
| CA1100037A (en) * | 1977-03-11 | 1981-04-28 | Chung-Mei Ling | Hb.sub.c ag coated on solid phase |
| JP2572035B2 (en) * | 1986-02-12 | 1997-01-16 | ユニチカ株式会社 | Multifilament yarn |
-
0
- BE BE787014D patent/BE787014A/en not_active IP Right Cessation
-
1971
- 1971-07-31 GB GB3609771A patent/GB1390617A/en not_active Expired
-
1972
- 1972-07-24 IE IE1035/72A patent/IE36589B1/en unknown
- 1972-07-25 IL IL39991A patent/IL39991A0/en unknown
- 1972-07-25 SE SE7209728A patent/SE410768B/en unknown
- 1972-07-25 IT IT27383/72A patent/IT963332B/en active
- 1972-07-26 AU AU45020/72A patent/AU472607B2/en not_active Expired
- 1972-07-27 AT AT648072A patent/AT316752B/en not_active IP Right Cessation
- 1972-07-27 FI FI2104/72A patent/FI55408C/en active
- 1972-07-27 DK DK373072A patent/DK144988C/en active
- 1972-07-28 FR FR7227335A patent/FR2148081B1/fr not_active Expired
- 1972-07-28 BR BR5058/72A patent/BR7205058D0/en unknown
- 1972-07-28 NO NO2721/72A patent/NO135801C/no unknown
- 1972-07-31 ZA ZA725257A patent/ZA725257B/en unknown
- 1972-07-31 JP JP47076027A patent/JPS4829487A/ja active Pending
- 1972-07-31 ES ES405387A patent/ES405387A1/en not_active Expired
- 1972-07-31 AR AR243342A patent/AR192962A1/en active
- 1972-07-31 ES ES405388A patent/ES405388A1/en not_active Expired
- 1972-07-31 CH CH1134472A patent/CH572621A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1972-07-31 NL NL7210503.A patent/NL163877C/en not_active IP Right Cessation
- 1972-10-20 NO NO3782/72A patent/NO138394C/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AR192962A1 (en) | 1973-03-21 |
| IL39991A0 (en) | 1972-09-28 |
| NO138394B (en) | 1978-05-16 |
| DE2237204B2 (en) | 1977-04-07 |
| BR7205058D0 (en) | 1973-11-01 |
| FI55408C (en) | 1979-07-10 |
| NO135801C (en) | 1977-06-08 |
| SE410768B (en) | 1979-10-29 |
| ES405387A1 (en) | 1975-07-01 |
| NO138394C (en) | 1978-08-23 |
| GB1390617A (en) | 1975-04-16 |
| NL163877B (en) | 1980-05-16 |
| IT963332B (en) | 1974-01-10 |
| AT316752B (en) | 1974-07-25 |
| BE787014A (en) | 1973-01-31 |
| ZA725257B (en) | 1973-04-25 |
| FI55408B (en) | 1979-03-30 |
| AU472607B2 (en) | 1976-05-27 |
| CH572621A5 (en) | 1976-02-13 |
| DE2237204A1 (en) | 1973-02-08 |
| IE36589L (en) | 1973-01-31 |
| NL163877C (en) | 1980-10-15 |
| JPS4829487A (en) | 1973-04-19 |
| NL7210503A (en) | 1973-02-02 |
| IE36589B1 (en) | 1976-12-08 |
| DK144988B (en) | 1982-07-19 |
| AU4502072A (en) | 1974-02-07 |
| FR2148081A1 (en) | 1973-03-11 |
| FR2148081B1 (en) | 1977-08-26 |
| ES405388A1 (en) | 1975-07-01 |
| DK144988C (en) | 1982-12-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3088875A (en) | Immunological diagnostics utilizing polystyrene latex particles of 0.15 to 0.25 micron | |
| JP3551678B2 (en) | Method and kit for measuring hemoglobin A1c | |
| JPS6243138B2 (en) | ||
| US4711841A (en) | Method for determining one or more antigens in a sample | |
| US3992517A (en) | Detection of hepatitis B surface antigen by latex agglutination | |
| US4588681A (en) | Process for producing adult T cell leukemia associated antigen | |
| US4313927A (en) | Immunoassay method for detecting viral antibodies in whole blood samples | |
| US5043289A (en) | Method and device for assaying immunologically reactive substances of clinical interest | |
| NO135801B (en) | ||
| JPH05310849A (en) | Multifunctional, hydrophilic, spherical microparticle preparation and use thereof | |
| KR100896396B1 (en) | Method of Removing Adhesive Microvesicles | |
| McArthur et al. | A rapid micro-method for screening eel sera for antibodies against the digenean Telogaster opisthorchis Macfarlane, 1945. | |
| JPS6224745B2 (en) | ||
| NO875198L (en) | SOLID PHASE - METHOD OF ANALYSIS. | |
| Walls et al. | Evaluation of a hemagglutination test for amebiasis, using a commercial antigen | |
| JP3328053B2 (en) | Determination of antibody or antigen concentration by immunoagglutination | |
| US3497319A (en) | Diagnostic reagent | |
| JP3048306B2 (en) | Fibrin degradation product and / or fibrinogen degradation product measuring reagent and method for quantifying the same | |
| JPS6153569A (en) | Antirubella virus antisensitized latex and measurement of antirubella virus antibody using the same | |
| JPH09502263A (en) | Hydrazine-derivatized cells | |
| O'neill et al. | Evaluation of a modified FTA-ABS test multispot FTA-ABS. | |
| NO173297B (en) | PROCEDURE FOR DETECTING OR DETERMINING AN ANALYST | |
| WO1995002186A1 (en) | New diagnostic assay for detection of syphilis | |
| JP3936678B2 (en) | Anti-syphilis treponema antibody measurement reagent and anti-syphilis treponema antibody measurement method | |
| Hebeka et al. | Automated procedure for measuring antigenicity of extracted and intact influenza virus |