NL8702446A

NL8702446A - Werkwijze ter bereiding van een veterinair- en humaanmedisch preparaat met antivirale en antitumorale werking, alsmede het in farmaceutisch toepasbare vorm gebrachte preparaat.

Info

Publication number: NL8702446A
Application number: NL8702446A
Authority: NL
Original assignee: Barend Willem Hak
Priority date: 1987-10-14
Filing date: 1987-10-14
Publication date: 1989-05-01
Also published as: EP0312132B1; ATE84418T1; CN1041695A; AU2366388A; IL87867A; DE3877499D1; NZ226360A; CA1338489C; ZA887181B; DE3877499T2; ES2042715T3; IE60506B1; EP0312132A2; GR3009556T3; AU619767B2; EP0312132A3; JPH01132525A; IL87867A0; DK574588D0; IE883116L

Description

-1-

Kenm.:87-22. Int.Class.: A'61 J

A 61 K.

Barend Willem Hak, te Giessen, en Erris van Duuren, te s’Gravenhage.

Werkwijze ter bereiding van een veterinair- en humaanmedisch preparaat met antivirale en antitumorale werking, alsmede het in farmaceutisch toepasbare vorm gebrachte preparaat.

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op een werkwijze ter bereiding van een veterinair- en humaanmedisch preparaat met antivirale en antitumorale werking.

Het preparaat volgens de uitvinding is een anorganisch zout van 2,6-5 diamino-3-fenylazopyridine (zie formule I).

De base van dit zout is bekend per se als azokleurstof in de textielindustrie en werd ook reeds onderzocht op haar antibacteriële eigenschappen als profylactisch en therapeutisch middel tegen infecties bij gevogelte en zoogdieren, echter alleen samen met de antibiotica chlor-10 amphenicol en terramycine, waarvan thans slechts een additieve werking wordt vermoed.Als. anorganisch zout wordt boraat, carbonaat, sulfaat en/of hydrochloride voorgesteld.

Guépin, Jason, Kruimel en Lorenzen schreven reeds in "Archiv für Hygiëne und Bakteriologie" (196D,nr. 145,88 e.v., dat het hydrochloride van 15 de base chemotherapeutische en profylactische werking ook tegen vira en zelfs tegen DNA- en RNA-vira zou hebben.

Er kon echter slechts het effect tegen influenza worden aangetoond. Guépin voerde daarna nog vele proeven uit op dit gebied, die echter niet werden gepubliceerd.

20 De aanvragers hebben deze onderzoekingen voortgezet en uitgebreid en farmacologische en analytische resultaten verkregen, die het vermoeden wettigen, dat de metabolieten van de base, die na de toediening in het lichaam worden gevormd, een veel bredere antivirale werking bij warm-bloedigen kunnen uitoefenen.

25 Dit kon na proeven in vitro ook in vivo worden aangetoond.

870244 6 4 -2-

Dierproeven toonden verrassenderwijs ook een antituraorale werking aan tegen virus-geïnitieerde sarcomen, waarvan de hematogene metastasering in vroege stadia gevreesd wordt.

De metabolieten, welke in urine en faeces konden worden gevonden, waren 5 o.a. producten van reducerende splitsing van de azobinding, en in het bijzonder de volgende N-heterocyclen, met algemene structuur volgens formule II:

Thymidine

Pyrimidine, TO Azidothymidine.

In deze formule geven en R^respectievelijk suikers, amino- en/of purinegroepen weer.

Deze N-heterocyclen kunnen als actief tegen de receptoren van diverse vira worden beschouwd.

15 Verdere metabolieten van de verbinding zijn N-acetylaminofenol, p-araino-fenol en aniline, waarvan een synergistisch effect wordt vermoed, doch nog niet kon worden bewezen.

Aangezien de celwand van mitochondriën een belangrijke informatiedrager is, zoals door Ashwell in Trends Biochem. Science, (1977), nr.2,76 e.v.

20 werd beschreven, en de meest gevaarlijke vira receptoren bezitten, die nagenoeg alleen met in vivo gevormde verbindingen, dus voornamelijk met metabolieten kunnen worden bestreden, wordt de toepassing van de base 2,6-diamino-3-fenylazopyridine in een geschikte vorm en concentratie bij virale infecties voor mens en dier van groot belang geacht, terwijl de 25 toepassing tegen viraal geïnitieerde tumoren en tegen metastasen in de toekomst wellicht ook uitkomst kan bieden bij de bestrijding van het HIV-II-virus, dat aids veroorzaakt, en van virus-Hepatitis (infectieuze Hepatitis en serum-Hepatitis).

Aangezien de verbinding volgens de onderhavige uitvinding slechts een 30 matige hepatoxische werking vertoont en reeds tegen bacteriële ontstekingen in geringe concentraties werd toegediend in de humane geneeskunde, zijn ook reeds klinische toepassingen in gevallen van viraal geïnitieerde sarcomen uitgevoerd en hebben duidelijke verbeteringen van het ziektebeeld getoond, die aan de metabolieten, althans aan een van de drie 35 eerstgenoemde, worden toegeschreven.

Gezien de reeds eerder bekende antibacteriële werking kan de onderhavige verbinding ook in een breedspectrum-geneesmiddel worden opgencmen- en tegen ziekten worden toegepast, waarvan de diagnose bijzonder moeilijk 8702 44 6 -Βίε, en waarvoor zich thans in tropische streken voorbeelden vertonen.

Het veterinair- en humaanmedisch preparaat met antibacteriële, anti-virale en antitumorale werking volgens de onderhavige uitvinding is gekenmerkt, door dat men voor orale toediening 2,6-diamino-3-fenylazo-5 pyridine-zout in een concentratie van 0.5 tot 10.0 gew.% in water oplost. Als zouten komen in aanmerking het hydrochloride, boraat en carbonaat. Voor intramusculaire toediening wordt een oplossing van 2,6-diamino-3-fenylazopyridine-boraat in een concentratie van 5 gew.% in een organisch oplosmiddel en in water in ampullen van 50 ml bereid.

10 Voor locale behandeling wordt een mengsel van 5 gew.% 2,6-diamino-3-fenylazopyridine-zout in unguentum-vaseline bereid.

De toediening van de preparaten aan zoogdieren en gevogelte ligt tussen 0.5 en 10 mg per kg lichaamsgewicht per dag.

De behandeling kan gedurende 2 tot 6 dagen zonder onderbreking worden 15 voortgezet.

Het onderzoek van de werking van het middel gaf in het algemeen bij warmbloedige dieren, die leden aan virusziekten en die daardoor kennelijk werden bedreigd, opvallend gunstige resultaten.

Ook werd opgemerkt, dat voor sarcomen gevoelige mannelijke witte Wistar-20 batten zowel p'rophylactisch als therapeutisch met succes konden worden behandeld.

Virus-mond- en klauwzeer bij rundvee en varkens en Newcastle-disease bij kippen gxüai tot nu toe als niet geneesbaar, en worden met de verbinding· volgens de uitvinding succesvol bestreden.

25 De eigenschappen van de verbinding voor farmacologische toepassing zijn als volgt:

Tabel I:

Uiterlijk: rood reukloos kristallijn poeder.

Smelttraject: 235-239° C.

30 Oplosbaarheid: ethylalcohol 3.5 mg/ml.

chloroform 0.A mg/ml.

diethylether 0.2 mg/ml.

2-propanol 2.1 mg/ml.

35 methylalcohol 2.7 mg/ml.

870244 6 -4- ligroïne 0.1 mg/ml water 3.2 mg/ml.

De verbinding kan worden bereid door condensatie uit fenazine en pyridine of door koppeling uit fenyldiazonium-chloride met OL ,^-diaminopyridine in waterbad onder terugstroomkoeling en oplossen van het verkregen product in boorzuur, azijnzuur of verdund zoutzuur.

Identificatie is o.m. mogelijk door UV-spectrometrie van een oplossing van 0.5 mg in 100 ml aangezuurde ethylalcohol, waarbij in het gebied 4 van 210-450 nm twee maxima worden gemeten bij 238-240 nm (£.=2.2x10 ) 4 en bij 390-392 nm (£=2.4x10 ), en drie minima optreden bij 220nm, 272 nm en 296 nm.

De resultaten van dierenbehandeling tegen uitsluitend virusziekten zijn weergegeven in de navolgende tabel: 870244 6 -5-

bO

•Η

P

KI

C

3 (DO O O O 00 MO I I I I I Oil OO

bO σ o o o σ σ ιιιι I oil oo «-«-«- 1111 I «- I I <- «- ·· Ό r—i Φ Ό c cd Λ (1) II o o <m n <r o in o o ιιιι ι oil oc^ Φ φ (\i in -T o <r ιιιι ι ιηιι c\i <r •η in «- o ι ι ι ι ι «-cm p «— «ο- α φ > φ u

Ou ti

♦H

+5 ra c „ 3 σ vo oo o o vo oooo cm o o o o oo <r M σ σ σ o o en oooo σι οοοοοοσ r- t— τ— ι— x— x— x— t— t— x— 3¾

C

Φ

N

Φ

C O CO ΙΛ O <f CM CO t- VO O N- o o n O O O

Φ c~- m <r o c— in «- «- «- cm o o «— o o o M cm σ n »— σ o «— cmcm «—no cm n <r uo ··

M

H

* « Η Ό Φ . rH XI Φ CÜ Ό

Η C

cd X! Φ X) x: υ ra

•H

-P

3 φ o o in o <r o co c- mo o o^inonooo o. o o m o c— o in «- ^- «- <rcoo«-ooo cd no η «- σ cm «- φ cm cm «- oo o u cm «- n o. <r t- φ o. «— x: ή h ^ m •h c φ c Φ p cd

O M

S-, C Φ -H

φ Φ ·Η -P Φ φ φ N ü bO Φ

N N C Φ OP

5 Φ Cm > isi

3 Φ 3 Ό C —' Φ C

CdP.M Cd C ·Η P Φ ·ΗΦ iHWÜ P O W P ·· B N .id φι^φοκι ω cc ra φ .id φ ·η ε .id ra ·· ·η ο. a ·η ·· ·η ο m φ ρ ra cd ο ρ Μ33ΜΒΡΦ3··ΙΡΧ!·Η ·Η .Η Ο .id Ο. Ρ aoracc-nrarac ·η p ρ ·· ν φ χ: φ c ·η cd φ ε ν φ φ c > » Φ'ΦΡΦΡπα&ΟΡΞΦί-ΝΟ ··.id3,Ö.id.idΦΌ'ÖΌS^cdCCΦΦO·H3l¾Φί>5 ΦCΦCt,CPCCCSJO,C·HPP>CcΰD.PC05 ρcdC0cdcdC300cdΦΦx:ppΦt^ρ·HC0 cd cdOOCQb^EdOO φ ^ id •Η · · · ·

NI < CQ O Q W

870244 6 -6- ··

bO

•Η

+J

CO I I I I

c I I I I

3 11 I I

bO

·· •a

rH

a) •o c cd s

CD

S>

Cw

0) I I I I

•Η 1 I I I

4-J I I I I

c ω >

CD

U

a, «·

bO

•H

CO O O'* o o C o cr\ ο o 3 <- <- bo ·· c ω

n o in o CM

CD CM lO in

C vO

CD bO

; -ο I—I

<D

•D

c

«J

M £

H CD

XI

iH

CD Si λ υ ο η o cm cd co cm in

£-4 *H vO

4-> bO 3

H <D

o a > Id £. £r

CD CD

> X! E-ι -> a

CD

c •“5 CD ·Η

CO C

id 3 $ £

•H

Q C

I CD

CD £. cd

rH CD ·· N

X> -H C C

Μ Ό Cd CD CD

Cd X bO N TO 3

υ cd cd >> £< rH

cd 5 U cd £. co <*-< xs cd cd c o cd c

55 2 bd O Pu H

CD

•H * *

CM fu O

(Conclusies): $79244 6

Claims

1. Werkwijze ter bereiding van een veterinair- en humaanmedisch preparaat met antivirale en antitumorale werking, met het kenmerk, dat men 2,6-diamino-3-fenylazopyridine als anorganisch zout oplost in een organisch oplosmiddel en water in een concentratie van 0.5 tot 10.0 gew/gew.%.

2. Werkwijze ter bereiding van een veterinair- en humaanmedisch preparaat met antivirale en antitumorale werking, met het kenmerk, dat men 2.6- diamino-3-fenylazopyridine voor parenterale toediening als anorganisch zout in een concentratie van 5.0 gew./gew.% in een organisch oplosmiddel en water in steriele ampullen brengt.

3. Werkwijze ter bereiding van een veterinair- en humaanmedisch preparaat . met antivirale en antitumorale werking, met het kenmerk, dat men 2.6- diamino-3-fenylazopyridine voor orale toediening als anorganisch zout in een concentratie van 2.0 tot 10.0 gew.% mengt met melksuiker, zetmeel en/of calciumcarbonaat en het mengsel tot tabletten, capsules 15 en/of siroop verwerkt.

4. Werkwijze ter bereiding van een veterinair- en humaanmedisch preparaat . met antivirale en antitumorale werking,· met het kenmerk, dat men voor locale toepassing 2,6-diamino-3-fenylazopyridine als anorganisch zout in unguentumvorm met vaseline mengt in een concentratie van 20 2.0 tot 10.0 gew./gew.%.

5. Werkwijze volgens een der conclusies 1 t/m 4, met het kenmerk, dat men als anorganisch zout het boraat, het sulfaat, het carbonaat en/of het hydrochloride verwerkt.

6. Farmacologisch preparaat, bereid met behulp van de werkwijze volgens 25 een der conclusies 1-4. (Formuleblad). 6702446