MXPA06011425A - Memiticuerpos de peptido-1 similar a glucagon de humano, composiciones, metodos y usos. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a al menos un nuevo mimeticuerpo GLP-1 de humano o porcion especificada o variante, incluyendo acidos nucleicos aislados que codifican al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porcion especificada o variante, mimeticuerpo GLP-1 o porcion especificada o variantes, vectores, celulas hospederas, animales o plantas transgenicos, y metodos de elaboracion y uso de los mismos, incluyendo composiciones terapeuticas, metodos y dispositivos.

Description

MIMETICUERPOS DE PEPTIDO-1 SIMILAR A GLUCAGON DE HUMANO, COMPOSICIONES, MÉTODOS Y USOS CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a mimeticuerpos GLP-1 de mamífero, porciones especificadas y variantes de específicas para proteínas biológicamente activas, fragmento o ligandos, mimeticuerpo GLP-1 , ácidos nucleicos codificantes y complementarios, células hospederas, y métodos de elaboración y uso de los mismos, incluyendo formulaciones terapéuticas, administración y dispositivos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Las proteínas recombinantes son una clase emergente de agentes terapéuticas. Dichos terapéuticos recombinantes han producido avances en la formulación de proteínas y la modificación química. Dichas modificaciones pueden mejorar potencialmente la utilidad terapéutica de las proteínas terapéuticas, tal como al incrementar las vidas medias (por ejemplo, al bloquear su exposición a las enzimas proteolíticas), mejorando la actividad biológica, o reduciendo los efectos laterales no deseables. Una de dichas modificaciones es el uso de fragmentos de inmunoglobulina fusionados a las proteínas del receptor, tal como enteracept. Las proteínas terapéuticas han sido elaboradas utilizando el dominio Fe para intentar proveer una vida media más larga o para incorporar funciones tales como unión al receptor Fe, unión a la proteína A, y fijación al complemento. La diabetes es una epidemia en crecimiento que se estima que afectó de 300 millones de personas en el año 2025, por lo que falta una cura farmacéutica efectiva. La diabetes tipo 2 responde del 90-95% de todos los casos. Las complicaciones que resultan a partir de los elevados niveles de glucosa en plasma de manera sostenida incluyen enfermedad cardiovascular, nefropatía, neuropatía, y retinopatía. Además, las células ß del páncreas mueren y por lo tanto se detiene la secreción de insulina durante las últimas etapas de la diabetes tipo 2. Los tratamientos actuales para la diabetes se asocian con una variedad de efectos laterales deletéreos incluyendo hipoglicemia y ganancia de peso. Además, los tratamientos actuales para la diabetes tipo 2 no curan la enfermedad sino que simplemente prolongan el tiempo hasta que los pacientes requieren terapia de insulina. El péptido semejante a glucagon-1 (GLP-1 ) es un péptido de 37 aminoácido secretado a partir de las células L del intestino después de una prueba con glucosa oral. Una escisión endógena subsecuente entre la 6a y 7a posición produce el péptido GLP-1 (7-37) biológicamente activo. La secuencia del péptido GLP-1 (7-37) se puede dividir en 2 dominios estructurales. El dominio amino terminal del péptido participa en la señalización mientras que el péptido remanente parece unir las asas extracelulares del receptor de GLP-1 en una conformación helicoidal. En respuesta a la glucosa, el GLP-1 activo se une al receptor de GLP-1 en el páncreas y ocasiona un incremento en la secreción de insulina (acción insulinotrópica). Además, se ha mostrado que GLP-1 reduce el vaciado gástrico lo cual disminuye el bolo de glucosa que se libera hacia la circulación y puede reducir la ingesta de alimento. Estas acciones en combinación disminuyen los niveles de glucosa en sangre. También se ha mostrado que GLP-1 inhibe la apoptosis e incrementa la proliferación de las células ß en el páncreas. Por lo tanto, GLP-1 es un terapéutico atractivo para disminuir la glucosa en sangre y conservar a las células ß del páncreas de los pacientes diabéticos. Además, la actividad del GLP-1 se controla por los niveles de glucosa en sangre. Cuando los niveles de glucosa en sangre caen hasta un cierto nivel umbral, GLP-1 no es activo. Por lo tanto, no existe riesgo de hipoglicemia asociada con el tratamiento en el que participa GLP-1. La viabilidad de la terapia con GLP-1 ha sido demostrada en la clínica. Una infusión por seis semanas de GLP-1 disminuyó el la toma de alimento y los niveles medios de glucosa en plasma por 8 horas de manera efectiva en los pacientes diabéticos tipo 2. La terapia con GLP-1 también resulta en una mejoría en la función de la célula ß. La exenatida es un análogo del GLP-1 actualmente utilizado en ensayos clínicos. La exenatida se identificó inicialmente en la saliva del lagarto monstruo de gila, y es 53% idéntica al GLP-1. La exenatida se puede unir al receptor de GLP-1 e iniciar la cascada de transducción de la señal responsable de numerosas actividades que se han atribuido al GLP-1 (7-37). Hasta la fecha, se ha demostrado que reduce los niveles de HbAlc y los niveles de fructosamina en suero en pacientes con diabetes tipo 2. Además, retrasa el vaciado gástrico e inhibe una ingesta de alimento en voluntarios sanos. No obstante, GLP-1 se inactiva rápidamente in vivo por la proteasa dipeptidil-peptidasa IV (DPP-IV). Por lo tanto, la utilidad de la terapia en la que participan los péptidos de GLP-1 ha sido limitada por su rápida eliminación y cortas vidas medias. Por ejemplo, GLP-1 (7-37) tiene una vida media en suero de solamente 3 a 5 minutos. GLP-1 (7-36) amida tiene un tiempo de acción de aproximadamente 50 minutos cuando se administra subcutáneamente. Incluso los análogos y derivados que son resistentes a la escisión de la proteasa endógena, no tienen vidas medias lo suficientemente largas para evitar las administraciones repetidas durante un período de 24 horas. Por ejemplo, la exenatida es resistente a DPP-IV, aún cuando requiere dosificación preprandial dos veces al día debido a la vida media corta y variabilidad significativa en farmacocinéticas in vivo. NN2211 , otro compuesto actualmente utilizado en los ensayos clínicos, es un análogo del GLP-1 lipidado. Se espera que sea dosificado una vez al día. La rápida eliminación de un agente terapéutico es inconveniente en los casos en donde se desea mantener un elevado nivel en sangre del agente durante un período de tiempo prolongado, puesto que entonces serían necesarias repetidas administraciones. Además, un compuesto de larga acción es particularmente importante para pacientes diabéticos cuyo régimen de tratamiento pasado ha incluido solamente la toma oral de medicamentos.

Frecuentemente estos pacientes pasan por un tiempo extremadamente difícil al transitar hacia un régimen que incluye múltiples inyecciones del medicamento. Una terapia con GLP-1 que tenga una vida media incrementada podría tener una ventaja significativa en comparación con otros péptidos GLP- 1 y compuestos en desarrollo. Por consiguiente, existe una necesidad para proveer versiones mejoradas y/o modificadas de proteínas terapéuticas GLP-1 , las cuales superan uno más de estos y otros problemas conocidos en la técnica. La tecnología de mimeticuerpo provee una plataforma de administración novedosa para los péptidos terapéuticos. Un mimeticuerpo GLP-1 puede proveer un medio para la administración del péptido GLP-1 de manera sostenida, prometiendo una mejoría en comparación con los péptidos GLP-1 actualmente en desarrollo. Además, basándose en su estructura dimérica y en sus características de distribución tisular, un mimeticuerpo GLP-1 podría tener características diferenciables con respecto a la secreción de insulina, conservación de la célula ß, e ingesta de alimento.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención provee mimeticuerpos GLP-1 de humano, incluyendo inmunoglobulinas modificadas, producto de escisión y otras porciones especificadas y variantes de las mismas, así como composiciones de mimeticuerpo GLP-1 , ácidos nucleicos codificantes o complementarios, vectores, células hospederas, composiciones, formulaciones, dispositivos, animales transgénicos, plantas transgénicas, y métodos de elaboración y uso de los mismos, como se describe y/o capacita en la presente invención, en combinación con lo que se sabe en la técnica. La presente invención también provee al menos un mimeticuerpo GLP-1 aislado o porción especificada o variante como se describe en la presente invención y/o como se sabe en la técnica. El mimeticuerpo GLP-1 puede comprender opcionalmente al menos una región CH3 directamente asociada con al menos una región CH2 directamente asociada con al menos una porción de al menos una región de charnela o fragmento de la misma (H), directamente asociada con al menos una región variable parcial (V), directamente asociada con una secuencia enlazadora opcional (L), directamente asociada con al menos un péptido GLP-1 terapéutico (P). En una modalidad preferida un par de una secuencia de la región V parcial de CH3-CH2-charnela-enlazador-secuencia peptídica terapéutica, el par estando opcionalmente asociado mediante asociación o enlace covalente, tal como, pero no limitado a, al menos un enlace disulfuro Cys-Cys o al menos un CH4 u otra secuencia de inmunoglobulina. En una modalidad, un mimeticuerpo GLP-1 comprende la fórmula (I): a. (P(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t), en donde P es al menos un péptido GLP-1 bioactivo, variante o derivado, L es al menos una secuencia enlazadora, la cual puede ser un péptido que provee flexibilidad estructural al permitir que el mimeticuerpo tenga orientaciones alternativas y propiedades de unión, V es al menos una porción de un extremo C-terminal de una región variable de la inmunoglobulina, H es al menos una porción de una región de charnela variable de la inmunoglobulina, CH2 es al menos una porción de una región constante CH2 de la inmunoglobulina, CH3 es al menos una porción de una región constante CH3 de la inmunoglobulina, n es un entero de 1 a 10, y o, p, q, r, s, y t pueden ser independientemente un entero de 0 a 10, imitando diferentes tipos de moléculas de inmunoglobulina, por ejemplo, pero no limitadas a IgGI, lgG2, lgG3, lgG4, IgAl, lgA2, IgM, IgD, IgE, o cualquier subclase de las mismas, y las similares, o cualquier combinación de los mismos. La región variable de la secuencia del anticuerpo puede ser, pero no se limita a, al menos una porción de al menos una de SEQ ID NOS: 47-55, o fragmento de la misma como se describe en el cuadro 1 , que comprende opcionalmente de manera adicional, al menos una sustitución, inserción o deleción como se describe adicionalmente en las figuras 1-9 de la publicación PCT WO 05/05604 (PCT US04/19898) presentada el 24 de junio de 2004 y publicada el 20 de enero de 2005, con las SEQ ID NOS: 1-9 correspondientes. La región CH2, CH3 y de charnela puede ser, pero no se limita a, al menos una porción de al menos una de SEQ ID NOS: 56-64, o fragmento de las mismas como se describe en el cuadro 1 , que comprende opcionalmente de manera adicional al menos una sustitución, inserción o deleción como se describe adicionalmente en las figuras 32-40 de la publicación PCT WO 05/05604 (PCT US04/19898) presentada el 24 de junio de 2004 y publicada el 20 de enero de 2005, con las SEQ ID NOS: 32-40 correspondientes. Por lo tanto, un mimeticuerpo GLP-1 de la presente invención imita al menos una porción de un anticuerpo o estructura o función de la inmunoglobuiina con sus propiedades y funciones inherentes, a la vez que se provee un péptido GLP-1 terapéutico y sus propiedades o actividades inherentes o adquiridas in vitro, in vivo o in situ. Las diversas porciones del anticuerpo y porciones del péptido terapéutico del mimeticuerpo GLP-1 de la presente invención pueden variar como se describe en la presente invención en combinación con lo que se sabe en la técnica. La presente invención también provee al menos un mimeticuerpo GLP-1 aislado o porción especificada o variante que tiene al menos una actividad, tal como, pero no se limita a actividades biológicas conocidas de al menos un péptido GLP-1 bioactivo o polipéptido que corresponde a la porción P de la fórmula (I), como se describe en la presente invención o como se sabe en la técnica. En un aspecto, la presente invención provee al menos un mimeticuerpo GLP-1 aislado de humano que comprende al menos una secuencia polipeptídica de SEQ ID NO: 1 , u opcionalmente con una o más sustituciones, deleciones o inserciones como se describe en la presente invención o como se sabe en la técnica. En otro aspecto, al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la invención ¡mita la unión de al menos un péptido GLP-1 o polipéptido que corresponde a la porción P del mimeticuerpo en la fórmula (I), a al menos un epítope que comprende al menos 1-3, a la secuencia total del aminoácido de al menos un ligando, por ejemplo, pero no se limita a, un receptor GLP-1 , o fragmento del mismo, en donde el ligando se une a al menos una porción de SEQ ID NO: 1 , u opcionalmente con una o más sustituciones, deleciones o inserciones como se describe en la presente invención o como se sabe en la técnica. El al menos un mimeticuerpo GLP-1 se puede unir opcionalmente al receptor de GLP-1 con una afinidad de al menos 10"9 M, al menos 10"10 M, al menos 10~11, o al menos 10"12 M. Por lo tanto un mimeticuerpo GLP-1 se puede seleccionar para una actividad correspondiente de conformidad con los métodos conocidos, tal como, pero no limitada a la actividad de unión hacia un receptor o fragmento del mismo. La presente invención provee adicionalmente al menos un anticuerpo anti-idiotipo a al menos un mimeticuerpo GLP-1 de la presente invención. El anticuerpo anti-idiotipo o fragmento se une específicamente a al menos un mimeticuerpo GLP-1 de la presente invención. El anticuerpo anti-idiotipo incluye cualquier proteína o polipéptido que contiene la molécula que comprende al menos una porción de una molécula de ¡nmunoglobulina, tal como pero no se limita a al menos una región determinante de complementariedad (CDR) de una cadena pesada o ligera o una porción de unión al ligando de ta misma, una región variable de cadena pesada o de cadena ligera, una región constante de cadena pesada o de cadena ligera, una región de estructura base, o cualquier porción de la misma, que se une completamente a una región de unión al ligando de GLP-1 de al menos un mimeticuerpo GLP-1 de la presente invención. Dichos anticuerpos idiotipo de la invención pueden incluir o se pueden derivar a partir de cualquier mamífero, tales como pero no limitados a un humano, un ratón, un conejo, una rata, un roedor, un primate, y los similares. La presente invención provee, en un aspecto, moléculas aisladas de ácido nucleico que comprenden, moléculas complementarias que tienen identidad significativa o que hibridan con, un polinucleótido que codifica al menos un mimeticuerpo GLP-1 o anticuerpo anti-idiotipo del mimeticuerpo GLP-1 , o porciones especificadas o variantes de los mismos, que comprenden al menos una secuencia especificada, dominio porción o variante de la misma. La presente invención provee adicionalmente vectores recombinantes que comprenden al menos uno de dichos mimeticuerpo GLP-1 aislado o anticuerpo anti-idiotipo del mimeticuerpo GLP-1 que codifican moléculas de ácido nucleico, células hospederas que contienen dichos ácido nucleicos y/o vectores recombinantes, así como métodos de elaboración y/o uso de dichos ácido nucleicos de mimeticuerpo GLP-1 o anticuerpo anti-idiotipo de mimeticuerpo GLP-1 , vectores y/o células hospederas. También se provee un ácido nucleico aislado que codifica al menos un mimeticuerpo GLP-1 aislado de mamífero o anticuerpo anti-idiotipo de mimeticuerpo GLP-1 ; un vector de ácido nucleico aislado que comprende el ácido nucleico aislado, y/o una célula hospedera procarionte o eucarionte que comprende el ácido nucleico aislado. La célula hospedera se puede seleccionar opcionalmente al menos a partir de células COS-1 , COS-7, HEK293, BHK21 , CHO, BSC-1 , Hep G2, 653, SP2/0, 293, HeLa, de mieloma, 0 de linfoma, o cualquier derivado, célula inmortalizada o transformada de la misma. La presente invención también provee al menos un método para la expresión de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o anticuerpo anti-idiotipo del mimeticuerpo GLP-1 , o porción especificada o variante en una célula hospedera, que comprende cultivar una célula hospedera como se describe en la presente invención y/o como se sabe en la técnica bajo condiciones en donde al menos un mimeticuerpo GLP-1 o anticuerpo anti-idiotipo del mimeticuerpo GLP-1 , o porción especificada o variante se expresa en cantidades detectables y/o recuperables. También se provee un método para la producción de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o anticuerpo anti-idiotipo del mimeticuerpo GLP- , que comprende traducir el ácido nucleico que codifica el mimeficuerpo GLP-1 o anticuerpo anti-idiotipo del mimeticuerpo GLP-1 bajo condiciones in vitro, in vivo o in situ, de manera que el mimeticuerpo GLP-1 o anticuerpo anti-idiotipo del mimeticuerpo GLP-1 se expresa en cantidades detectables o recuperables. También se provee un método para la producción de al menos un mimeticuerpo GLP-1 aislado de humano o anticuerpo anti-idiotipo de GLP- 1 de la presente invención, que comprende proveer una célula hospedera o animal transgénico o planta transgénica capaz de expresar en cantidades recuperables el mimeticuerpo GLP-1 o anticuerpo anti-idiotipo de GLP-1.

Adicionalmente se provee en la presente invención al menos un mimeticuerpo GLP-1 producido por los métodos anteriormente mencionados. La presente invención también provee al menos una composición que comprende (a) un ácido nucleico aislado que codifica un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante y/o mimeticuerpo GLP- 1 como se describe en la presente invención; y (b) un vehículo o diluyente adecuado. El vehículo o diluyente opcionalmente puede ser farmacéuticamente aceptable, de conformidad con los métodos conocidos. La composición puede comprender adicionalmente de manera opcional al menos un compuesto adicional, proteína o composición. También se provee una composición que comprende al menos un mimeticuerpo GLP-1 aislado de humano y al menos un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable. La composición puede comprender adicionalmente de manera opcional una cantidad efectiva de al menos un compuesto o proteína seleccionada a partir de al menos uno de una marca detectable o reportero, un fármaco anti-infeccioso, un fármaco relacionado con la diabetes o con el metabolismo de la insulina, un fármaco para el sistema cardiovascular (CV), un fármaco para el sistema nervioso central (SNC), un fármaco para el sistema nervioso autónomo (SNA), un fármaco para el tracto respiratorio, un fármaco para el tracto gastrointestinal (Gl), un fármaco hormonal, un fármaco para balance de fluidos o de electrolitos, un fármaco hematológico, un antineoplactic, un fármaco para inmunomodulación, un oftálmico, fármaco ótico o nasal, un fármaco tópico, un fármaco nutricional, un antagonista de TNF, un antireumático, un relajante muscular, un narcótico, un fármaco anti-inflamatorio no esteroideo (NTHE), un analgésico, un anestésico, un sedante, un anestésico local, un bloqueador neuromuscular, un antimicrobiano, un antisoriático, un corticosteroide, un esteroide anabólico, una eritropoietina, una inmunización, una ¡nmunoglobulina, un inmunosupresor, una hormona de crecimiento, un fármaco para reemplazo hormonal, un radiofarmacéutico, un antidepresivo, un antipsicótico, un estimulante, un medicamento para el asma, un agonista beta, un esteroide inhalado, una epinefrina o análogo, una citoquina, o un antagonista de citoquina. La presente invención también provee al menos una composición, dispositivo y/o método para administración de una cantidad terapéuticamente o profilácticamente efectiva de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante, de conformidad con la presente invención. La presente invención provee adicionalmente al menos un método o composición de mimeticuerpo GLP-1 , para administrar una cantidad terapéuticamente efectiva para modular o tratar al menos una condición relacionada con GLP-1 en una célula, tejido, órgano, animal o paciente y/o, antes de, subsecuente a, o durante una condición relacionada, como se sabe en la técnica y/o como se describe en la presente invención. La presente invención provee adicionalmente al menos un mimeticuerpo GLP-1 , porción especificada o variante en un método o composición, cuando se administra en una cantidad terapéuticamente efectiva, para la modulación, para el tratamiento o para la reducción de los síntomas de, al menos una enfermedad metabólica, inmune, cardiovascular, infecciosa, maligna, y/o neurológica en una célula, tejido, órgano, animal o paciente y/o, como sea necesario en muchas condiciones diferentes, tales como pero no limitadas a, antes de, subsecuente a, o durante una enfermedad relacionada o condición para tratamiento, como se sabe en la técnica. La presente invención provee adicionalmente al menos un mimeticuerpo GLP-1 , porción especificada o variante en un método o composición, cuando se administra en una cantidad terapéuticamente efectiva, para la modulación, para el tratamiento o para reducir los síntomas de al menos uno de una diabetes o trastorno relacionado con el metabolismo de la insulina, un trastorno del hueso y de la articulación, un trastorno cardiovascular, un trastorno dental u oral, un trastorno dermatológico, un trastorno de oído, nariz o garganta, un trastorno endocrino o metabólico, un trastorno gastrointestinal, un trastorno ginecológico, un trastorno hepático o biliar, un trastorno obstétrico, un trastorno hematológico, un trastorno inmunológico o alérgico, una enfermedad infecciosa, un trastorno musculoesquelético, un trastorno oncológico, un trastorno neurológico, un trastorno nutricional, un trastorno oftalmológico, un trastorno pediátrico, un trastorno por envenenamiento, un trastorno siquiátrico, un trastorno renal, un trastorno pulmonar, o cualquier otro trastorno conocido, (Véase, por ejemplo, The Merck Manual, 17a edición, Merck Research Laboratories, Merck and Co., Whitehouse Station, NJ (1999), completamente incorporado en la presente invención como referencia), como sea necesario en muchas condiciones diferentes, tales como pero no limitadas a, antes de, subsecuente a, o durante una enfermedad relacionada o condición para tratamiento, como se sabe en la técnica. La presente invención también provee al menos una composición, dispositivo y/o método para administración, para diagnosticar condiciones relacionadas con GLP-1 , de al menos un mimeticuerpo GLP-1 , de conformidad con la presente invención. La presente invención provee adicionalmente al menos un método o composición del mimeticuerpo GLP-1 , para diagnosticar al menos una condición relacionada con GLP-1 en una célula, tejido, órgano, animal o paciente y/o, antes de, subsecuente a, o durante una condición relacionada, como se sabe en la técnica y/o como se describe en la presente invención. También se provee un método para el diagnóstico o tratamiento de una condición de enfermedad en una célula, tejido, órgano o animal, que comprende: (a) poner en contacto o administrar una composición que comprende una cantidad efectiva de al menos un mimeticuerpo GLP-1 aislado de humano de la invención con, o a, la célula, tejido, órgano o animal. El método puede comprender opcionalmente de manera adicional el uso de una cantidad efectiva de 0.001-50 mg/kilogramo de las células, tejido, órgano o animal por 0-24 horas, 1-7 días, 1-52 semanas, 1-24 meses, 1-30 años o cualquier intervalo o valor en éstos. El método puede comprender opcionalmente de manera adicional el uso del contacto o la administración mediante al menos un modo seleccionado a partir de administración parenteral, subcutánea, intramuscular, intravenosa, intrarticular, intrabronquial, intraabdominal, intracapsular, intracartilaginosa, intracavitaria, intracelial, intracerebelar, intracerebroventricular, intracóiico, intracervical, intragástrica, intrahepática, intramiocardial, intraosteal, intrapélvica, intrapericardiaca, intraperitoneal, intrapleural, intraprostática, intrapulmonar, intrarectal, intrarenal, intraretinal, intraespinal, ¡ntrasinovial, intratorácica, intrauterina, intravesical, en bolo, vaginal, rectal, bucal, sublingual, ¡ntranasal, o transdermal. El método puede comprender opcionalmente de manera adicional administrar, antes, concurrentemente o después del (a) contacto o de la administración de, al menos una composición que comprende una cantidad efectiva de al menos un compuesto o proteína seleccionada a partir de al menos una de una marca detectable o reportero, un fármaco antiinfeccioso, un fármaco relacionado con la diabetes o con el metabolismo de la insulina, un fármaco para el sistema cardiovascular (CV), un fármaco para el sistema nervioso central (SNC), un fármaco para el sistema nervioso autónomo (SNA), un fármaco para el tracto respiratorio, un fármaco para el tracto gastrointestinal (Gl), un fármaco hormonal, un fármaco para balance de fluidos o de electrolitos, un fármaco hematológico, un antineoplactic, un fármaco para inmunomodulación, un oftálmico, fármaco ótico o nasal, un fármaco tópico, un fármaco nutricional, un antagonista de TNF, un antireumático, un relajante muscular, un narcótico, un fármaco antiinflamatorio no esteroideo (NSAID), un analgésico, un anestésico, un sedante, un anestésico local, un bloqueador neuromuscular, un antimicrobiano, un antipsoriático, un corticosteroide, un esteroide anabólico, una eritropoietina, una inmunización, una inmunoglobulina, un inmunosupresor, una hormona de crecimiento, un fármaco para reemplazo hormonal, un radiofarmacéutico, un antidepresivo, un antipsicótico, un estimulante, un medicamento para el asma, un agonista beta, un esteroide inhalado, una epinefrina o análogo, una citoquina, o un antagonista de citoquina. También se provee un dispositivo médico, que comprende al menos un mimeticuerpo GLP-1 aislado de humano de la invención, en donde el dispositivo es adecuado para el contacto o para la administración de al menos un mimeticuerpo GLP-1 mediante al menos un modo seleccionado a partir de la administración parenteral, subcutánea, intramuscular, intravenosa, intrarticular, ¡ntrabronquial, intraabdominal, intracapsular, intracartilaginosa, intracavitaria, intracelial, intracerebelar, intracerebroventricular, intracólic, intracervical, intragástrica, intrahepática, intramiocardial, intraosteal, intrapélvica, intrapericardiaca, intraperitoneal, intrapleural, intraprostática, intrapulmonar, intrarectal, intrarenal, intraretinal, intraespinal, intrasinovial, intratorácica, intrauterina, intravesical, en bolo, vaginal, rectal, bucal, sublingual, intranasal, o transdermal. También se provee un artículo para elaboración de uso farmacéutico o diagnóstico en humano, que comprende material para empaquetamiento y un contenedor que comprende una solución o una forma liofilizada de al menos un mimeticuerpo GLP-1 aislado de humano de la presente invención. El artículo para elaboración puede comprender opcionalmente tener el contenedor como un componente de un dispositivo o sistema para administración parenteral, subcutánea, intramuscular, intravenosa, intrarticular, intrabronquial, ¡ntraabdominal, intracapsular, intracartilaginosa, intracavitaria, intracelial, intracerebelar, intracerebroventricular, intracólic, ¡ntracervical, intragástrica, intrahepática, intramiocardial, intraosteal, intrapélvica, intrapericardiaca, intraperitoneal, intrapleural, intraprostática, intrapulmonar, intrarectal, intrarenal, intraretinal, intraespinal, intrasinovial, intratorácica, intrauterina, intravesical, en bolo, vaginal, rectal, bucal, sublingual, intranasal, o transdermal. La presente invención provee adicionalmente cualquier invención descrita en la presente invención.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS Las figuras 1A-1B ilustran las secuencias nucleotídicas y peptídicas de MMB GLP-1 en andamio lgG1 mostrando dominios funcionales importantes. Las figuras 2A-2C ilustran ensayos de unión FACS de MMB GLP-1. La figura 2A muestra que MMB GLP-1 se une a células HEK293 que sobre-expresan el GLP-1 R. Área gris: MMB GLP-1 pero no secundario; línea gris: solamente secundario; línea punteada, MMB control negativo y secundario; línea negra: MMB GLP-1 y secundario. La figura 2B muestra que el MMB GLP-1 no se une a las células HEK293 control. Área gris: MMB GLP-1 pero no secundario; línea negra: solamente secundario; línea gris: MMB GLP- 1 y secundario. La figura 2C muestra que un análogo del péptido GLP-1 (A2S) es capaz de competir con MMB GLP-1 para la unión a las células HEK293 que sobre-expresan el GLP-1 R. Área gris: MMB GLP-1 pero no secundario; línea negra: MMB GLP-1 y secondario; linea de rompimiento: MMB GLP-1 , competidor 0.2 nM, secondario; línea punteada: MMB GLP-1 , competidor 20 nM, secundario; línea gris: MMB GLP-1 , competidor 100 nM, secundario). Las figuras 3A-3E ilustran los ensayos de AMPc de MMB GLP-1.

La figura 3A: MMB wt GLP-1 en andamio lgG1 ; la figura 3B: péptido GLP-1 ; la figura 3C: GLP-1 (A2G) MMB en lgG4 (Ala/Ala, Ser-> Pro) andamio; la figura 3D: GLP-1 (A2S) MMB en lgG4 (Ala/Ala, Ser-> Pro) andamio; la figura 3E: MMB wt GLP-1 en lgG4 (Ala/Ala, Ser-> Pro) andamio. La figura 4 ¡lustra la resistencia de MMB GLP-1 a la escisión por DPP-IV. La figura 5 muestra la estabilidad de MMB GLP-1 en suero. Las figuras 6A-6B demuestran que MMB GLP-1 s ocasiona secreción de insulina en células RINm. La figura 6A muestra que el péptido GLP-1 (7-36) y el péptido exendina-4 estimula la liberación de insulina en células RINm. La figura 6B muestra que GLP-1 (A2S) MMB en cualquier lgG1 o lgG4 (Ala/Ala, Ser-> Pro) andamio, o GLP-1 (A2G) MMB en lgG4 (Ala/Ala, Ser-> Pro) andamio son activos en la estimulación de la secreción de insulina en células RINm. Las figuras 7A-7B demuestran que MMB GLP-1 disminuye la glucosa como se observa en la figura 7A de manera dependiente de la dosis veáse la figura 7B. La figura 8 muestra el perfil farmacocinético de cuatro MMB GLP-1s (A2G, A2S, Ex-cap y de tipo silvestre) en mono cynomolgus. La figura 9 muestra los efectos de MMB GLP-1 durante una prueba de tolerancia a la glucosa oral en ratones diabéticos. La figura 10 muestra los efectos de MMB GLP-1 sobre la glucosa en sangre al ayunar y durante la dosificación crónica a los ratones diabéticos. La figura 11 muestra los efectos de MMB GLP-1 sobre la prueba de tolerancia a glucosa oral después de la dosificación crónica a los ratones diabéticos. La figura 12 muestra los efectos de MMB GLP-1 sobre la reducción de HbAlc después de la dosificación crónica a los ratones diabéticos. Las figuras 13A-13B muestran los efectos de MMB GLP-1 sobre los niveles de glucosa en sangre veáse la figura 13A y de insulina veáse la figura 13B en una prueba de tolerancia a la glucosa oral en monos cynomolgus normales. La figura 14 muestra los efectos de MMB GLP-1 sobre la tinción por insulina en isletas de ratones diabéticos después de una dosis particular.

La figura 15 demuestra que MMB GLP-1 retrasa el vaciado gástrico en perros normales. La figura 16 demuestra que MMB GLP-1 disminuye la glucosa en sangre después de una prueba de tolerancia a la glucosa oral en ratones obesos inducidos por dieta. Las figuras 17A-17B demuestran que MMB GLP-1 disminuye el nivel de glucosa en sangre veáse figura 17A y de insulina veáse figura 17B en una prueba de tolerancia a la glucosa intraperitoneal en ratones diabéticos.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención provee mimeticuerpos o porciones especificadas o variantes aisladas, recombinantes y/o sintéticas, así como composiciones y moléculas de ácido nucleico codificantes que comprende al menos un polinucleótido que codifica al menos un mimeticuerpo GLP-1. Dichos mimeticuerpos o porciones especificadas o variantes de la presente invención comprenden secuencias específicas de mimeticuerpo GLP-1 , dominios, fragmentos y variantes especificadas de los mismos, y métodos para la elaboración y uso de dichos ácido nucleicos y mimeticuerpos o porciones especificadas o variantes, incluyendo composiciones terapéuticas, métodos y dispositivos. La presente invención también provee al menos un mimeficuerpo GLP-1 aislado o porción especificada o variante como se describe en la presente invención y/o como se sabe en la técnica. El mimeticuerpo GLP-1 puede comprender opcionalmente al menos una región CH3 directamente asociada con al menos una región CH2 directamente asociada con al menos una región de charnela o fragmento de la misma (H), directamente asociada con al menos una región variable parcial (V), directamente asociada con una secuencia enlazadora opcional (L), directamente asociada con al menos un péptido GLP-1 terapéutico (P). En una modalidad preferida un mimeticuerpo GLP-1 comprende la fórmula (I): ((P(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t), en donde P es al menos un polipéptido GLP-1 bioactivo, L es al menos una secuencia enlazadora, la cual puede ser un péptido que provee flexibilidad estructural al permitir que el mimeticuerpo tenga orientaciones alternativas y propiedades de unión, V es al menos una porción de un extremo C-terminal de una región variable de la inmunoglobulina, H es al menos una porción de una región de charnela variable de la inmunoglobulina, CH2 es al menos una porción de una región constante CH2 de la inmunoglobulina, CH3 es al menos una porción de una región constante CH3 de la inmunoglobulina, m, n, o, p, q, r, s y t pueden ser independientemente un entero entre e incluyendo 0 y 10, imitando diferentes tipos de moléculas de inmunoglobulina, por ejemplo, pero no limitadas a lgG1 , lgG2, lgG3, lgG4, lgA1 , lgA2, IgM, IgD, IgE, o cualquier subclase de las mismas, y los similares, o cualquier combinación de los mismos.

Por lo tanto, un mimeticuerpo GLP-1 de la presente invención imita una estructura del anticuerpo con sus propiedades y funciones inherentes, a la vez que se provee un péptido terapéutico y sus propiedades o actividades inherentes o adquiridas in vitro, in vivo o in situ. En una modalidad preferida en donde t=1 , el monómero CH3-CH2-charnela-secuencia J parcial-enlazador-péptido terapéutico se puede enlazar a otros monómeros mediante asociación o enlace covalente, tal como, pero no se limita a, un enlace disulfuro Cys-Cys. Las diversas porciones del anticuerpo y las porciones del péptido GLP-1 terapéutico de al menos un mimeticuerpo GLP-1 de la presente invención pueden variar como se describe en la presente invención en combinación con lo que se sabe en la técnica. La porción de CH3-CH2-chamela se puede modificar extensivamente para formar una variante de conformidad con esta invención, con la condición de que se mantenga la unión del receptor salvaje. En dichas variantes, uno puede remover uno o más sitios nativos que proveen características estructurales o actividad funcional no requeridas mediante las moléculas de fusión de esta invención. Uno puede remover estos sitios mediante, por ejemplo, la sustitución o deleción de residuos, insertando residuos dentro del sitio, o truncando las porciones que contienen el sitio. Los residuos insertados o sustituidos también pueden ser aminoácidos alterados, tales como peptidomiméticos o D-aminoácidos. Una variante de CH3-CH2-charnela puede carecer de uno o más sitios nativos o residuos que afectan o que participan en (1 ) la formación de enlace disulfuro, (2) la incompatibilidad con una célula hospedera seleccionada, (3) la heterogeneidad después de la expresión en una célula hospedera seleccionada, (4) la glicosilación, (5) la interacción con el complemento, (6) la unión a un receptor Fe diferente a un receptor salvaje, o (7) la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpo (ADCC). Las variantes CH3-CH2-charnela ejemplares incluyen moléculas y secuencias en las cuales: 1. Se remueven los sitios que participan en la formación del enlace disulfuro. Dicha remoción puede evitar la reacción con otras proteínas que contienen cisteína presentes en la célula hospedera utilizada para producir las moléculas de la invención. Para este propósito, los residuos de cisteína se pueden deletar o sustituir con otros aminoácidos (por ejemplo, alanil, seril). Incluso cuando los residuos de cisteína se remueven, los dominios de cadena particular CH3-CH2-charnela pueden formar un dominio dimérico CH3-CH2-charnela que se mantiene junto de manera no covalente; 2. La región CH3-CH2-chamela se modifica para hacerla más compatible con una célula hospedera seleccionada. Por ejemplo, cuando la molécula se expresa de manera recombinante en una célula bacteriana tal como E. coli, uno puede remover la secuencia PA en la charnela, la cual se puede reconocer por una enzima digestiva en E. coli tal como prolina iminopeptidasa; 3. Una porción de la región de charnela se deleta o sustituye con otros aminoácidos para prevenir la heterogeneidad cuando se expresa en una célula hospedera seleccionada; 4. Se remueven uno o más sitios de glicosilación. Los residuos que típicamente están glicosilados (por ejemplo, asparagina) pueden conferir una respuesta citolítica. Dichos residuos se pueden deletar o sustituir con residuos no glicosilados (por ejemplo, alanina); 5. Se remueven los sitios implicados en la interacción con el complemento, tal como el sitio de unión a C1q. El reclutamiento del complemento puede no ser ventajoso para las moléculas de esta invención y por lo tanto puede ser evitado con dicha variante; 6. Se remueven los sitios que afectan la unión a los receptores Fe diferente a un receptor salvaje. La región CH3-CH2-charnela puede tener sitios para interacción con ciertos leucocitos que no se requieren para las moléculas de fusión de la presente invención y por lo tanto se pueden remover; 7. Se remueve el sitio ADCC. Los sitios ADCC son como se conocen en la técnica; véase, por ejemplo, Molec. Immunol. 29 (5): 633-9 (1992) con respecto a los sitios ADCC en IgGI. Estos sitios, tampoco se requieren para las moléculas de fusión de la presente invención y por lo tanto se pueden remover. El polipéptido enlazador provee flexibilidad estructural al permitir que el mimeticuerpo tenga orientaciones alternativas y propiedades de unión. Cuando está presente, su estructura química no es crítica. Preferiblemente el enlazador se elabora de aminoácidos asociados juntos mediante enlaces peptídicos. Por lo tanto, en modalidades preferidas, el enlazador se elabora a partir de 1 a 20 aminoácidos asociados por enlaces peptídicos, en donde los aminoácidos se seleccionan a partir de los 20 aminoácidos que se presentan de manera natural. Algunos de estos aminoácidos pueden estar glicosilados, como se entiende bien por aquellos expertos en la técnica. En la modalidad más preferida, los 1 a 20 aminoácidos se seleccionan a partir de glicina, alanina, serina, prolina, asparagina, glutamina, y lisina. Incluso más preferiblemente, un enlazador se elabora de una mayoría de aminoácidos que están estéricamente no ocultos, tales como glicina y alanina. Por lo tanto, los enlazadores preferidos son poli(Gly-Ser), poliglicinas (particularmente (Gly)4, (Gly)5), poli(Gly-Ala), y polialaninas. Otros ejemplos específicos de enlazadores son: (Gly)3Lys(Gly)4 (SEQ ID NO: 65), (Gly)3AsnGlySer(Gly)2 (SEQ ID NO: 66), (Gly)3Cys(Gly)4 (SEQ ID NO: 67), y GlyProAsnGlyGly (SEQ ID NO: 68). Para explicar la nomenclatura anteriormente mencionada, por ejemplo, (Gly)3Lys(Gly)4 significa Gly-Gly-Gly-Lys-Gly-Gly-Gly-Gly. También se prefieren las combinaciones de Gly y Ala. Los enlazadores mostrados en la presente invención son ejemplares; los enlazadores dentro del alcance de esta invención pueden ser mucho más grandes y pueden incluir otros residuos. Los enlazadores no peptídicos también son posibles. Por ejemplo, se podrían utilizar enlazadores alquilo tales como -NH- (CH2)s-C(0)-, en donde s=2-20. Estos enlazadores alquilo adicionalmente pueden ser sustituidos por cualquier grupo no estéricamente no oculto tales como alquilo inferior (por ejemplo, C C6), acilo inferior, halógeno (por ejemplo, Cl, Br), CN, NH2, fenilo, etc. Un enlazador no peptídico ejemplar es un enlazador PEG el cual tiene un peso molecular de 100 a 5000 kD, preferiblemente 100 a 500 kD. Los enlazadores peptídicos se pueden alterar para formar derivados de la misma manera como se describe en la presente invención.

Como se utiliza en la presente invención, un "péptido GLP-1", o "péptido GLP-1 , variante, o derivado" puede ser al menos un pépfido GLP-1 , fragmento GLP-1 , homólogo GLP-1 , análogo GLP-1 , o derivado GLP-1. Un péptido GLP-1 tiene de aproximadamente veinticinco a aproximadamente cuarenta y cinco aminoácidos que se presentan de manera natural o que no se presentan de manera natural que tienen suficiente homología con respecto al GLP-1 nativo (7-37) de tal manera que exhiben actividad insulinotrópica mediante la unión receptor GLP-1 en las células ß en el páncreas. GLP-1 (7-37) tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 15: His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu- Gly-GIn-Ala-Ala- Lys-Glu-Phe-lle-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly. Un fragmento GLP-1 es un polipéptido obtenido después de la truncación de uno o más aminoácidos a partir del N-terminal y/o C-terminal de GLP-1 (7-37) o un análogo o derivado del mismo. Un homólogo GLP-1 es un péptido en el cual uno o más aminoácidos han sido añadidos al N-terminal y/o C-terminal de GLP-1 (7-37), o fragmentos o análogos de los mismos. Un análogo GLP-1 es un péptido en el cual uno o más aminoácidos de GLP-1 (7-37) han sido modificados y/o sustituidos. Un análogo GLP-1 tiene suficiente homología con respecto a GLP-1 (7-37) o un fragmento de GLP-1 (7-37) de tal manera que el análogo tiene actividad insulinotrópica. Un derivado GLP-1 se define como una molécula que tiene la secuencia de aminoácidos de un pépfido GLP-1 , un homólogo GLP-1 o un análogo GLP-1 , pero que adicionalmente tiene la modificación química de uno o más de sus grupos laterales del aminoácido, átomos de carbono a, grupo amino terminal, o grupo de ácido carboxílico terminal. Numerosos fragmentos GLP-1 activos, análogos y derivados son como se conocen en la técnica y cualesquiera de estos análogos y derivados también pueden ser parte del mimeticuerpo GLP-1 de la presente invención. Algunos análogos GLP-1 y fragmentos GLP-1 como se conoce en la técnica se describen en las Patentes de E.U.A. Nos. 5,118,666, 5,977,071 , y 5,545,618, y Adelhorst, et al., J. Biol. Chem. 269:6275 (1994). Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, GLP-1 (7-34), GLP-1 (7-35), GLP-1 (7-36), Gln9-GLP-1 (7-37), D-Gln9-GLP-1 (7-37), Thr16-Lys18-GLP-1 (7-37), y Lys18-GLP-1 (7-37). Un "mimeticuerpo GLP-1 ", "porción de mimeticuerpo GLP-1 ", o "fragmento de mimeticuerpo GLP-1 " y/o "variante de mimeticuerpo GLP-1" y los similares tiene, imita o estimula al menos una actividad biológica, tales como pero no se limitan a unión al ligando, in vitro, in situ y/o preferiblemente in vivo, de al menos un péptido GLP-1 , variante o derivado, tales como pero no se limitan a al menos una de SEQ ID NO: 1. Por ejemplo, un mimeticuerpo GLP-1 adecuado, porción especificada, o variante también puede modular, incrementar, modificar, activar, al menos una señalización del receptor GLP-1 u otra actividad mensurable o detectable. Los mimeticuerpos GLP-1 útiles en los métodos y composiciones de la presente invención se caracterizan por una afinidad de unión adecuada a los ligandos de proteína, por ejemplo, receptores GLP-1 , y opcionalmente y preferiblemente que tienen una baja toxicidad. En particular, un mimeticuerpo GLP-1 , en donde los componentes individuales, tales como la porción de región variable, región constante (sin una porción CH1 ) y estructura base, o cualquier porción de la misma (por ejemplo, una porción de las regiones J, D o V de la cadena variable pesada o ligera; al menos una porción de al menos un región de charnela, la cadena constante pesada o cadena ligera, y las similares) individualmente y/o colectivamente de manera opcional y preferiblemente posee una baja inmunogenicidad, es útil en la presente invención. Los mimeticuerpos que se pueden utilizar en la invención opcionalmente se caracterizan por su capacidad para tratar pacientes por períodos extendidos con alivio de síntomas de bueno a excelente y una baja toxicidad. La baja inmunogenicidad y/o alta afinidad, así como otras propiedades no definidas, pueden contribuir a los resultados terapéuticos logrados. La "baja inmunogenicidad" se define en la presente invención como la elevación significativa de las respuestas HAMA, HACA o HAHA en menos de aproximadamente 75%, o preferiblemente menos de aproximadamente 50, 45, 40, 35, 30, 35, 20, 15, 10, 9, 8, 7,6, 5, 4, 3, 2, y/o 1% de los pacientes tratados y/o la elevación de los títulos bajos en los pacientes tratados (menos de aproximadamente 300, preferiblemente menos de aproximadamente 100 medido con un inmunoensayo enzimático de doble antígeno) (véase, por ejemplo, Elliott et al., Lancet 344: 1125-1127 (1994)). Utilidad. Los ácido nucleicos aislados de la presente invención se pueden utilizar para la producción de al menos un mimeticuerpo GLP-1 , fragmento o variante especificada del mismo, el cual se puede utilizar para afectar en una célula, tejido, órgano o animal (incluyendo mamíferos y humanos), para modular, tratar, aliviar, ayudar a prevenir la incidencia de, o reducir los síntomas de, al menos una condición relacionada con la proteína, seleccionada a partir de, pero no limitada a, al menos uno de un trastorno relacionado con la diabetes, un trastorno relacionado con el metabolismo de la insulina, un trastorno o enfermedad inmune, un trastorno o enfermedad cardiovascular, un trastorno o enfermedad infecciosa, maligna, y/o neurológica, así como otras condiciones conocidas o relacionadas con una proteína especificada. Dicho método puede comprender administrar una cantidad efectiva de una composición o una composición farmacéutica que comprende al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante a una célula, tejido, órgano, animal o paciente que necesite de dicha modulación, tratamiento, alivio, prevención, o reducción en los síntomas, efectos o mecanismos. La cantidad efectiva puede comprender una cantidad de aproximadamente 0.0001 a 500 mg/kg por administración particular o múltiple, o para lograr una concentración en suero de 0.01-5000 g/ml de concentración en suero por administración particular o múltiple, o cualquier intervalo efectivo o valor en éste, como se realiza y determina utilizando métodos conocidos, como se describe en la presente invención o como se sabe en las técnicas relevantes.

Citas. Todas las publicaciones o patentes citadas en la presente invención se incorporan completamente aquí como referencias puesto que muestran el estado de la técnica en el momento de la presente invención y/o para proveer la descripción y capacita a la presente invención. Las publicaciones se refieren a cualesquiera publicaciones científicas o de patente, o cualquier otra información disponible en cualquier medio de formato, incluyendo todos los formatos que se pueden registrar, electrónicos o impresos. Las siguientes referencias se incorporan completamente en la presente invención como referencias: Ausubel, et al., ed., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Inc., NY, NY (1987-2003); Sambrook, et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2a Edición, Cold Spring Harbor, NY (1989); Harlow and Lañe, Anticuerpos, a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, NY (1989); Colligan, et al., eds., Current Protocols ¡n Immunology, John Wiley & Sons, Inc., NY (1994-2003); Colligan et al., Current Protocols in Protein Science, John Wiley & Sons, NY, NY, (1997-2003). Mimeticuerpos de la presente invención. El mimeticuerpo GLP-1 puede comprender adicionalmente al menos una región CH3 directamente enlazada con al menos una región CH2 directamente enlazada con al menos una porción de al menos un fragmento de la región de charnela (H), tales como la que comprende al menos un una región núcleo de charnela, directamente enlazada con al menos una región variable parcial (V), directamente asociada con una secuencia enlazadora opcional (L), directamente enlazada con al menos un péptido GLP-1 terapéutico (P). En una modalidad preferida, un par de un CH3-CH2-H-V-L-P se puede enlazar mediante asociación o enlace covalente, tal como, pero no limitado a, un enlace disulfuro Cys-Cys. Por lo tanto, un mimeticuerpo GLP-1 de la presente invención imita una estructura del anticuerpo con sus propiedades y funciones inherentes, a la vez que se provee un péptido terapéutico y sus propiedades o actividades inherentes o adquiridas in vitro, in vivo o ¡n situ. Las diversas porciones del anticuerpo y porciones del péptido terapéutico de al menos un mimeticuerpo GLP-1 de la presente invención pueden variar como se describe en la presente invención en combinación con lo que se sabe en la técnica. Por lo tanto los mimeticuerpos de la presente invención proveen al menos una propiedad adecuada en comparación con las proteínas conocidas, tales como, pero no limitadas a, al menos una de vida media incrementada, actividad incrementada, actividad más específica, avidez incrementada, velocidad de eliminación incrementada o disminuida, una subpoblación de actividades seleccionada o más adecuada, menos inmunogenicidad, calidad o duración incrementada de al menos un efecto terapéutico deseado, menos efectos laterales, y los similares. Los fragmentos de mimeticuerpos de conformidad con la fórmula (I) se pueden producir mediante escisión enzimática, técnicas sintéticas o recombinantes, como se sabe en la técnica y/o como se describe en la presente invención. Los mimeticuerpos también se pueden producir en una variedad de formas truncadas utilizando genes del anticuerpo en los cuales uno o más codones de paro han sido introducidos hacia el extremo 5' del sitio de paro natural. Las diversas porciones de los mimeticuerpos se pueden unir químicamente mediante técnicas convencionales, o se pueden preparar como una proteína contigua utilizando técnicas de ingeniería genética. Por ejemplo, un ácido nucleico que codifica al menos una de las regiones constantes de una cadena de anticuerpo de humano se puede expresar para producir una proteína contigua para uso en los mimeticuerpos de la presente invención. Véase, por ejemplo, Ladner et al., Patente de E.U.A. No. 4,946,778 y Bird, R. E. et al., Science, 242: 423-426 (1988), con respecto a los anticuerpos de cadena sencilla. Como se utiliza en la presente invención, el término "mimeticuerpo de humano" se refiere a un anticuerpo en el cual sustancialmente cada parte de la proteína (por ejemplo, péptido GLP-1, dominios CH (por ejemplo, CH2, CH3), charnela, V) se espera que sea sustancialmente no inmunogénico en humanos, solamente con cambios o variaciones menores en la secuencia. Dichos cambios o variaciones opcionalmente y preferiblemente retienen o reducen la inmunogenicidad en humanos en relación con los anticuerpos no modificados de humano, o mimeticuerpos de la presente invención. Por lo tanto, un anticuerpo de humano y mimeticuerpo GLP-1 correspondiente de la presente invención es distinto a partir de un anticuerpo quimérico o humanizado. Se señala que el mimeticuerpo GLP-1 se puede producir por un animal no humano o célula que es capaz de expresar genes de inmunoglobulinas de humano (por ejemplo, cadena pesada y/o cadena ligera).

Los mimeticuerpos de humano que son específicos para al menos un ligando de proteína de los mismos se puede diseñar en contra de un ligando apropiado, tales como un receptor GLP-1 aislado, o una porción del mismo (incluyendo moléculas sintéticas, tales como péptidos sintéticos). La preparación de dichos mimeticuerpos se lleva a cabo utilizando técnicas conocidas para identificar y caracterizar las regiones de unión al ligando o sequences de al menos una proteína o porción de la misma En una modalidad preferida, al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la presente invención se produce por al menos una línea celular, línea celular mezclada, célula inmortalizada o población clonal de células inmortalizadas y/o cultivadas. Las células inmortalizadas productoras de proteína se pueden producir utilizando métodos adecuados. Preferiblemente, el al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante se genera al proveer ácido nucleico o vectores que comprenden ADN derivado o que tienen sustancialmente una secuencia similar a, al menos un locus de inmunoglobulina de humano que está rearreglado funcionalmente, o el cual puede llevar a cabo rearreglo funcional, y el cual puede comprender una estructura de mimeticuerpo como se describe en la presente invención, por ejemplo, pero no se limita a la fórmula (I), en donde las porciones de las regiones variables C-terminal pueden ser utilizadas para las regiones V, de charnela para H, CH2 para CH2 y CH3 para CH3, como se sabe en la técnica.

El término "funcionalmente rearreglado", como se utiliza en la presente invención se refiere a un segmento de ácido nucleico a partir de un locus de inmunoglobulina que ha llevado a cabo recombinación en V(D)J, produciendo así un gen de inmunoglobulina que codifica una cadena de inmunoglobulina (por ejemplo, cadena pesada), o cualquier porción de la misma. Un gen de inmunoglobulina funcionalmente rearreglado se puede identificar directamente o indirectamente utilizando métodos adecuados, tales como, por ejemplo, secuenciación de nucleótidos, hibridación (por ejemplo, Southern blot, Northern blot) utilizando sondas que se pueden fusionar para codificar uniones entre los segmentos del gen o para la amplificación enzimática de genes de inmunoglobulina (por ejemplo, reacción en cadena de la polimerasa) con iniciadores que te pueden fijar para codificar uniones entre los segmentos del gen. También se puede determinar si una célula produce un mimeticuerpo GLP-1 o porción o variante que comprende una región variable particular o una región variable que comprende una secuencia particular (por ejemplo, al menos una secuencia P) utilizando métodos adecuados. Los mimeticuerpos, porciones especificadas y variantes de la presente invención también se pueden preparar utilizando al menos un ácido nucleico que codifica mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante para proveer animales transgénicos o mamíferos, tales como cabras, vacas, caballos, ovejas, y los similares, que producen dichos mimeticuerpos o porciones especificadas o variantes en su leche. Dichos animales se pueden proveer utilizando métodos conocidos como se aplica para las secuencias que codifican anticuerpo. Véase, por ejemplo, pero no se limita a, Patentes de E.U.A. Nos. 5,827,690; 5,849,992; 4,873,316; 5,849,992; 5,994,616; 5,565,362; 5,304,489, y los similares, cada uno de los cuales se incorpora completamente en la presente invención como referencia. Los mimeticuerpos, porciones especificadas y variantes de la presente invención se pueden preparar adicionalmente utilizando al menos un ácido nucleico que codifica mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante para proveer plantas transgénicas y células vegetales cultivadas (por ejemplo, pero no se limita a tabaco y maíz) que producen dichos mimeticuerpos, porciones especificadas o variantes en las partes vegetales o células cultivadas a partir de estas. Como un ejemplo no limitante, las hojas de tabaco transgénico que expresan proteínas recombinantes se han utilizado exitosamente para proveer grandes cantidades de proteínas recombinantes, por ejemplo, utilizando un promotor inducible. Véase, por ejemplo, Cramer et al., Curr. Top. Microbol. Immunol. 240: 95-118 (1999) y referencias citadas en la presente invención. También, maíz o maíz transgénicos han sido utilizados para expresar proteínas de mamíferos a niveles de producción comercial, con actividades biológicas equivalentes a aquéllas producidas en otros sistemas recombinantes o purificadas a partir de fuentes naturales. Véase, por ejemplo, Hood et al., Adv. Exp. Med. Biol. 464: 127-147 (1999) y referencias citadas en la presente invención. También se han producido anticuerpos en grandes cantidades a partir de semillas de plantas transgénicas incluyendo fragmentos de anticuerpo, tales como mimeticuerpos de cadena sencilla (scFv's), incluyendo semillas de tabaco y tubérculos de patata. Véase, por ejemplo, Conrad et al., Plant Mol. Biol. 38: 101-109 (1998) y referencias citadas en la presente invención. Por lo tanto, los mimeticuerpos, porciones especificadas y variantes de la presente invención también se pueden producir utilizando, plantas transgénicas, de conformidad con los métodos conocidos. Véase también, por ejemplo, Fischer et al., Biotechnol. Appl. Biochem. 30: 99-108 (Oct., 1999), Ma et al., Trends Biotechnol. 13: 522-7 (1995); Ma et al., Plant Physiol. 109: 341-6 (1995); Whitelam et al., Biochem. Soc. Trans. 22: 940-944 (1994); y referencias citadas en la presente invención. Las referencias anteriormente mencionadas se incorporan completamente en la presente invención como referencias. Los mimeticuerpos de la invención se pueden unir a ligandos de proteína de humano con un amplio intervalo de afinidades (KD). En una modalidad preferida, al menos un mimeticuerpo GLP-1 de humano de la presente invención se puede unir opcionalmente a al menos un ligando de proteína con alta afinidad. Por ejemplo, al menos un mimeticuerpo GLP-1 de la presente invención se puede unir a al menos un ligando de proteína con una KD igual a o menor de aproximadamente 10~7 M o, más preferiblemente, con una KD igual a o menor de aproximadamente 0.1-9.9 (o cualquier intervalo o valor en éste) x 10'7, 10'8, 10"9, 10"10, 10"11, 10"12, o 10"13 M, o cualquier intervalo o valor en éste.

La afinidad o avidez de un mimeticuerpo GLP-1 por al menos un ligando de proteína se puede determinar experimentalmente utilizando cualquier método adecuado, por ejemplo, como se utiliza para determinar la afinidad o avidez de la unión anticuerpo-antígeno. (Véase, por ejemplo, Berzofsky, et al., "Antibody-Antigen Interactions", En Fundamental Immunology, Paul, W. E., Ed., Raven Press: New York, NY (1984); Kuby, Janis Immunology, W. H. Freeman and Company: New York, NY (1992); y métodos descritos en la presente invención). La afinidad medida de una interacción particular mimeticuerpo GLP-1 -ligando puede variar si se mide bajo diferentes condiciones (por ejemplo, concentración de sal, pH). Por lo tanto, las mediciones de afinidad y otros parámetros de la unión al ligando (por ejemplo, KD, Ka, Kd) preferiblemente se elaboran con soluciones estandarizadas de mimeticuerpo GLP-1 y ligando, y un regulador de pH estandarizado, tal como el regulador de pH descrito en la presente invención o como se sabe en la técnica. Moléculas de ácido nucleico. Utilizando la información provista en la presente invención, tales como las secuencias de nucleótidos que codifican al menos 90-100% de los aminoácidos contiguos de al menos una de SEQ ID NOS: y 6, así como al menos una porción de un anticuerpo, en donde las secuencias anteriormente mencionadas se insertan como la secuencia P de fórmula (I) para proveer un mimeticuerpo GLP-1 de la presente invención, comprendiendo adicionalmente fragmentos especificados, variantes o secuencias consenso de los mismos, o un vector depositado que comprende al menos una de estas secuencias, una molécula de ácido nucleico de la presente invención que codifica al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante se puede obtener utilizando métodos descritos en la presente invención o como se sabe en la técnica. Las moléculas de ácido nucleico de la presente invención pueden estar en la forma de ARN, tales como ARNm, ARNhn, ARNt o cualquier otra forma, o en la forma de ADN, incluyendo, pero no limitada a, ADNC y ADN genómico obtenido mediante la clonación o producido sintéticamente, o cualquier combinación de los mismos. El ADN puede ser de cadena triple, de cadena doble o de cadena sencilla, o cualquier combinación de los mismos. Cualquier porción de al menos una cadena del ADN o ARN puede ser la cadena codificante, también conocida como la cadena sentido, o puede ser la cadena no codificante, también referida como la cadena antisentido. Las moléculas de ácido nucleico aislado de la presente invención pueden incluir moléculas de ácido nucleico que comprenden un marco de lectura abierto (ORF), opcionalmente con uno o más intrones, moléculas de ácido nucleico que comprenden la secuencia codificante para un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante; y moléculas de ácido nucleico las cuales comprenden una secuencia nucleotídica sustancialmente diferente a partir de aquéllas anteriormente descritas pero las cuales, debido a la degeneración del código genético, codifican aún al menos un mimeticuerpo GLP-1 como se describe en la presente invención y/o como se sabe en la técnica. Por supuesto, el código genético se conoce bien como se sabe en la técnica. Por lo tanto, podría ser rutinario para un experto en la técnica el generar dichas variantes degeneradas de ácido nucleico que codifican para un mimeticuerpo GLP-1 específico o porción especificada o variantes de la presente invención. Véase, por ejemplo, Ausubel, et al., anteriormente mencionado, y dichas variantes de ácido nucleico se incluyen en la presente invención. Como se indica en la presente invención, las moléculas de ácido nucleico de la presente invención las cuales comprenden un ácido nucleico que codifica un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante pueden incluir, pero no se limitan a, aquellas que codifican la secuencia de aminoácidos de un fragmento de mimeticuerpo GLP-1 , por sí mismas; la secuencia codificante para todo el mimeticuerpo GLP-1 o una porción del mismo; la secuencia codificante para un mimeticuerpo GLP-1 , fragmento o porción, así como secuencias adicionales, tales como la secuencia codificante de al menos una señal líder o péptido de fusión, con o sin las secuencias codificantes adicionales anteriormente mencionadas, tales como al menos un intrón, junto con secuencias no codificantes adicionales, incluyendo pero no limitadas a, secuencias 5' y 3' no codificantes, tales como las secuencias transcritas, no traducidas que desempeñan un papel en la transcripción, procesamiento de ARNm, incluyendo señales de procesamiento y de poliadenilación (por ejemplo - unión al ribosoma y estabilidad del ARNm); una secuencia codificante adicional que codifica para aminoácidos adicionales, tales como aquellos que proveen funcionalidades adicionales. Por lo tanto, la secuencia que codifica un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante se puede fusionar a una secuencia marcadora, tal como una secuencia que codifica un péptido que facilita la purificación del mimeficuerpo GLP-1 fusionado o porción especificada o variante que comprende un fragmento de mimeticuerpo GLP-1 o porción. Polinucleótidos los cuales se hibridan selectivamente con un polinucleótido como se describe en la presente invención. La presente invención provee ácidos nucleicos aislados que hibridan bajo condiciones de hibridación selectiva con un polinucleótido descrito en la presente invención, u otros descritos en la presente invención, incluyendo variantes especificadas o porciones de los mismos. Por lo tanto, los polinucleótidos de esta modalidad se pueden utilizar para aislamiento, detección, y/o cuantificación de ácidos nucleicos que comprenden dichos polinucleótidos. Las condiciones de hibridación por baja o moderada severidad típicamente, pero no exclusivamente, se emplean con las secuencias que tienen una identidad de secuencia reducida con relación a las secuencias complementarias. Las condiciones de severidad moderada y alta opcionalmente pueden ser empleadas para secuencias de mayor identidad. Las condiciones de severidad baja permiten la hibridación selectiva de secuencias que tienen aproximadamente 40-99% de identidad de secuencia y se pueden emplear para identificar secuencias ortólogas o parálogas.

Opcionalmente, los polinucleótidos de esta invención codificarán al menos una porción de un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante codificada por los polinucleótidos descritos en la presente invención. Los polinucleótidos de esta invención comprenden secuencias de ácidos nucleicos que se pueden emplear para la hibridación selectiva a un polinucleótido que codifica un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la presente invención. Véase, por ejemplo, Ausubel, anteriormente mencionado; Colligan, anteriormente mencionado, cada uno completamente incorporado en la presente invención como referencia. Construcción de ácidos nucleicos. Los ácidos nucleicos aislados de la presente invención se pueden elaborar utilizando (a) métodos recombinantes, (b) técnicas sintéticas, (c) técnicas de purificación, o combinaciones de los mismos, como se sabe bien en la técnica. Los ácidos nucleicos pueden comprender de manera conveniente secuencias en adición a un polinucleótido de la presente invención. Por ejemplo, se puede insertar dentro del ácido nucleico un sitio de clonación múltiple que comprende uno o más sitios para endonucleasa de restricción para ayudar en el aislamiento del polinucleótido. También, las secuencias que se pueden traducir pueden ser insertadas para ayudar en el aislamiento del polinucleótido traducido de la presente invención. Por ejemplo, una secuencia marcadora de hexa-histidina provee un medio conveniente para purificar las proteínas de la presente invención. El ácido nucleico de la presente invención - excluyendo la secuencia codificante - es opcionalmente un vector, adaptador, o enlazador para clonación y/o expresión de un polinucleótido de la presente invención. Se pueden añadir secuencias adicionales a dichas secuencias para clonación y/o expresión para optimizar su función en la clonación y/o expresión, para ayudar en el aislamiento del polinucleótido, o para mejorar la introducción del polinucleótido dentro de una célula. El uso de los vectores de clonación, vectores de expresión, adaptadores, y enlazadores se conoce bien en la técnica. Véase, por ejemplo, Ausubel, anteriormente mencionado; o Sambrook, anteriormente mencionado. Métodos recombinantes para la construcción de ácidos nucleicos. Las composiciones de ácido nucleico aislado de esta invención, tales como ARN, ADNc, ADN genómico, o cualquier combinación de los mismos, se pueden obtener a partir de fuentes biológicas utilizando cualquier número métodos de clonación conocidos por aquellos expertos en la técnica. En algunas modalidades, las sondas de oligonucleótidos que hibridan de manera selectiva, bajo condiciones adecuadas de severidad, con los polinucleótidos de la presente invención se utilizan para identificar la secuencia deseada en un ADNc o librería de ADN genómico. El aislamiento de ARN, y la construcción de ADNc y de librerías genómicas, se conoce bien por aquellos expertos en técnicas. (Véase, por ejemplo, Ausubel, anteriormente mencionado; o Sambrook, anteriormente mencionado). Métodos sintéticos para la construcción de ácidos nucleicos. Los ácidos nucleicos aislados de la presente invención también se pueden preparar mediante síntesis química directa mediante métodos conocidos (véase, por ejemplo, Ausubel, et al., anteriormente mencionado). La síntesis química generalmente produce un oligonucleótido de cadena sencilla, el cual se puede convertir hacia ADN de cadena doble mediante la hibridación con una secuencia complementaria, o mediante polimerización con una ADN polimerasa utilizando la cadena sencilla como un molde. Un experto en la técnica reconocerá que aunque la síntesis química de ADN puede ser limitada a las secuencias de aproximadamente 100 o más bases, se pueden obtener secuencias más largas mediante la ligación de secuencias más cortas. Cassettes para expresión recombinante. La presente invención provee adicionalmente cassettes para expresión recombinante que comprenden un ácido nucleico de la presente invención. Una secuencia de ácido nucleico de la presente invención, por ejemplo un ADNc o una secuencia genómica que codifica un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la presente invención, se puede utilizar para construir un cassette para expresión recombinante que se puede introducir dentro de al menos una célula hospedera deseada. Un cassette para expresión recombinante típicamente comprenderá un polinucleótido de la presente invención operativamente asociado con secuencias reguladoras del inicio de la transcripción que dirigirán la transcripción del polinucleótido en la célula hospedera pretendida. Tanto los promotores heterólogos como los no heterólogos (por ejemplo, endógenos) se pueden emplear para dirigir la expresión de los ácidos nucleicos de la presente invención.

En algunas modalidades, los ácidos nucleicos aislados que sirven como promotores, potenciadores, u otros elementos se pueden introducir en la posición apropiada (hacia el extremo 5', hacia el extremo 3' o en el intrón) de una forma no heteróloga de un polinucleótido de la presente invención de manera que sobre o sub regula la expresión de un polinucleótido de la presente invención. Por ejemplo, los promotores endógenos pueden ser alterados in vivo o in vitro mediante mutación, deleción y/o sustitución, como se sabe en la técnica. Un polinucleótido de la presente invención se puede expresar en cualquier orientación sentido o anti-sentido como se desee. Se apreciará que el control de la expresión del gen en cualquier orientación sentido o anti-sentido puede tener un impacto directo sobre las características observables. Otro método de supresión en la supresión sentido. Se ha mostrado que la introducción de ácido nucleico configurado en la orientación sentido es un medio efectivo por medio del cual se bloquea la transcripción de los genes blanco. Vectores y células hospederas. La presente invención también se relaciona a los vectores que incluyen moléculas aisladas de ácido nucleico de la presente invención, células hospederas que están diseñadas genéticamente con los vectores recombinantes, y la producción de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante mediante técnicas recombinantes, como se sabe bien en la técnica. Véase, por ejemplo, Sambrook, et al., anteriormente mencionado; Ausubel, et al., anteriormente mencionado, cada uno completamente incorporado en la presente invención como referencia. Los polinucleótidos se pueden unir opcionalmente a un vector que comprende un marcador de selección para la propagación en un hospedero. Generalmente, se introduce un vector plasmídico dentro de una célula utilizando métodos adecuados conocidos, tales como electroporación y los similares, otros métodos conocidos incluyen el uso del vector como un precipitado, tales como un precipitado de fosfato de calcio, o en un complejo con un lípido cargado. Si el vector es un virus, éste puede ser empaquetado in vitro utilizando una línea celular apropiada para empaquetamiento y luego se transduce dentro de células hospederas. El inserto de ADN debe estar operativamente asociado con promotor apropiado. Las construcciones de expresión contendrán de manera adicional sitios opcionalmente para al menos un inicio de la transcripción, terminación y, en la región transcrita, un sitio para unión al ribosoma para la traducción. La porción codificante de los transcritos maduros expresada por las construcciones preferiblemente incluirá un inicio para la producción en la parte inicial y un codón de término (por ejemplo, UAA, UGA o UAG) ubicado de manera adecuada en el extremo del ARNm a ser traducido, con UAA y UAG preferidos para expresión en célula de mamífero o célula eucarionte. Los vectores de expresión preferiblemente pero opcionalmente incluirán al menos un marcador de selección. Dichos marcadores incluyen, por ejemplo, pero no se limitan a, resistencia al metotrexato (MTX), dihidrofolato reductasa (DHFR, Patentes de E.U.A. Nos. 4,399,216; 4,634,665; 4,656,134; 4,956,288; 5,149,636; 5,179,017, ampicilina, neomicina (G418), ácido micofenólico, o glutamina sintetasa (GS, Patentes de E.U.A. Nos. 5,122,464; 5,770,359; 5,827,739) para el cultivo de célula eucarionte, y genes resistentes a tetraciclina o ampicilina para cultivo en E. coli y otras bacterias o procariontes (las patentes anteriormente mencionadas se incorporan completamente en la presente invención como referencias). Los medios de cultivo apropiados y condiciones para las células hospederas anteriormente descritas son como se sabe en la técnica. Los vectores adecuados fácilmente serán evidentes a un experto en la técnica. La introducción de una construcción del vector dentro de una célula hospedera se puede llevar a cabo mediante transfección con fosfato de calcio, transfección mediada por DEAE-dextrán, transfección mediada por lípido catiónico, electroporación, transducción, infección u otros métodos conocidos. Dichos métodos se describen en la técnica, tales como Sambrook, anteriormente mencionado, capítulos 1-4 y 16-18; Ausubel, anteriormente mencionado, capítulos 1, 9, 13, 15, 16. Al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la presente invención se puede expresar en una forma modificada, tales como una proteína de fusión, y puede incluir no solamente señales para secreción, sino también regiones funcionales heterólogas adicionales. Por ejemplo, una región adicional de aminoácidos, particularmente aminoácidos cargados, se puede añadir al N-terminal de un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante para mejorar la estabilidad y persistencia en la célula hospedera, durante la purificación, o durante el manejo y almacenamiento subsecuentes. También, las porciones peptídicas se pueden añadir a un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la presente invención para facilitar la purificación. Dichas regiones se pueden remover antes de la preparación final de un mimeticuerpo GLP-1 o al menos un fragmento del mismo. Dichos métodos se describen en muchos manuales estándares para laboratorio, tales como Sambrook, anteriormente mencionado, capítulos 17.29-17.42 y 18.1-18.74; Ausubel, anteriormente mencionado, capítulos 16, 17 y 18. Aquellos expertos en la técnica conocen numerosos sistemas de expresión disponibles para la expresión de un ácido nucleico que codifica una proteína de la presente invención. Las células de mamíferos son ilustrativas de las células cultivadas útiles para la producción de los mimeticuerpos, porciones especificadas o variantes de los mismos. Los sistemas de célula de mamífero frecuentemente estarán en la forma de monocapas de células aunque también se pueden utilizar las suspensiones de célula de mamífero o bioreactores. Se han desarrollado en la técnica numerosas líneas celulares hospederas adecuadas capaces de expresar proteínas glicosiladas, e incluyen las líneas celulares COS-1 (por ejemplo, ATCC CRL 1650), COS-7 (por ejemplo, ATCC CRL-1651), HEK293, BHK21 (por ejemplo, ATCCCRL-10), CHO (por ejemplo, ATCC CRL 1610, DG-44) y BSC-1 (por ejemplo, ATCC CRL-26), células hepG2, P3X63Ag8.653, SP2/0-Ag14, células 293, células HeLa y las similares, las cuales están fácilmente disponibles a partir de, por ejemplo, American Type Culture Collection, Manassas, Va. Las células hospederas preferidas incluyen células de origen linfoide tales como células de mieloma y de linfoma. Las células hospederas particularmente preferidas son las células P3X63Ag8.653 (Número de Acceso ATCC CRL-1580) y las células SP2/0-Ag14 (Número de Acceso ATCC CRL-1851 ). Los vectores de expresión para estas células pueden incluir una o más de las siguientes secuencias para el control de la expresión, tales como, pero no se limitadas a un origen de la replicación; un promotor (por ejemplo, promotores SV40 tempranos o tardíos, el promotor de CMV (por ejemplo, Patentes de E.U.A. Nos. 5,168,062; 5,385,839), un promotor HSV tk, un promotor pgk (fosfoglicerato cinasa), un promotor EF-1 alfa (por ejemplo, Patente de E.U.A. No. 5,266,491 ), al menos un promotor de inmunoglobulina de humano; un potenciador, y/o sitios para el procesamiento de la información, tales como sitios para unión al ribosoma, sitios para procesamiento del ARN, sitios de poliadenilación (por ejemplo, un sitio de poliadenilación T Ag de SV40 grande), y secuencias terminadoras de la transcripción. Véase, por ejemplo, Ausubel et al., anteriormente mencionado; Sambrook, et al., anteriormente mencionado. Otras células útiles para la producción de ácidos nucleicos o proteínas de la presente invención se conocen y/o están disponibles, por ejemplo, a partir del catálogo de líneas celulares y de hibridomas de the American Type Culture Collection (www. atcc.org) u otras fuentes conocidas o comerciales. Cuando se emplean las células hospederas eucariontes, típicamente las secuencias de poliadenilación o las secuencias terminadoras de la transcripción se incorporan dentro del vector. Un ejemplo de una secuencia terminadora es la secuencia para poliadenilación a partir del gen de la hormona de crecimiento de bovino. También se pueden incluir las secuencias para el procesamiento preciso del transcrito. Un ejemplo de una secuencia para procesamiento es el intrón VP a partir de SV40 (Sprague, et al., J. Virol. 45: 773-781 (1983)). Adicionalmente, las secuencias génicas para el control de la replicación en la célula hospedera pueden ser incorporadas dentro de vector, como se sabe en la técnica. Purificación de un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante del mismo. Un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante se puede recuperar y purificar a partir de cultivos de células recombinantes mediante métodos bien conocidos incluyendo, pero no limitados a, purificación de proteína A, precipitación con sulfato de amonio o con etanol, extracción acida, cromatografía por intercambio de aniones o de cationes, cromatografía en fosfocelulosa, cromatografía por interacción hidrófoba, cromatografía por afinidad, cromatografía en hidroxilapatita y cromatografía en lectina. La cromatografía líquida de alta resolución ("CLAR") también se puede emplear para la purificación. Véase, por ejemplo, Colligan, Current Protocols in Immunology, o Current Protocols in Protein Science, John Wiley & Sons, NY, NY, (1997-2003), por ejemplo, capítulos 1 , 4, 6, 8, 9, 10, cada uno completamente incorporado en la presente invención como referencia. Los mimeticuerpos o porciones especificadas o variantes de la presente invención incluyen productos naturalmente purificados, productos de procedimientos de química sintética, y productos producidos mediante técnicas recombinantes a partir de un hospedero eucarionte, incluyendo, por ejemplo, células de levadura, planta superior, insecto y mamífero. Dependiendo del hospedero empleado en un procedimiento de producción recombinante, el mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la presente invención puede ser glicosilado o puede ser no glicosilado, siendo preferida la forma glicosilada. Dichos métodos se describen en muchos manuales estándares para laboratorio, tales como Sambrook, anteriormente mencionado, secciones 17.37-17.42; Ausubel, anteriormente mencionado, capítulos 10, 12, 13, 16, 18 y 20, Colligan, Protein Science, anteriormente mencionado, capítulos 12-14, todos incorporados completamente en la presente invención como referencias. Mimeticuerpos, fragmentos especificados y/o variantes. Los mimeticuerpos aislados de la presente invención comprenden un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante codificada por cualesquiera de los polinucleótidos de la presente invención como se discute más completamente en la presente invención, o cualquier mimeticuerpo GLP-1 aislado o preparado o porción especificada o variante del mismo.

Preferiblemente, el mimeticuerpo GLP-1 o porción para unión al ligando o variante se une a al menos un ligando de proteína GLP-1 y provee así al menos una actividad GLP-1 biológica de la proteína correspondiente o un fragmento del mismo. Se conocen bien en la técnica diferentes proteínas terapéuticamente o diagnósticamente significativas y los ensayos adecuados o actividades biológicas de dichas proteínas también se conocen bien en la técnica. Los ejemplos no limitantes de péptidos GLP-1 adecuados, variantes y derivados para esta invención aparecen como SEQ ID NO: 1 : His-Xaa2-Xaa3-Gly-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Xaa10-Xaa11-Xaa12-Xaa13-Xaa 14-Xaa 15-Xaa 16-Xaa 17-Xaa 18-Xaa 19-Xaa20-Xaa21 -Phe-Xaa23-Xaa24-Xaa25-Xaa26-Xaa27-Xaa28-Xaa29-Xaa30-Xaa31 , en donde: Xaa2 es Ala, Gly, Ser, Thr, Leu, He, Val, Glu, Asp, o Lys; Xaa3 es Glu, Asp, o Lys; Xaa5 es Thr, Ala, Gly, Ser, Leu, lie, Val, Arg, His, Glu, Asp, o Lys; Xaa6 es Phe, His, Trp, o Tyr; Xaa7 es Thr o Asn; Xaa8 es Ser, Ala, Gly, Thr, Leu, lie, Val, Glu, Asp, o Lys; Xaa9 es Asp o Glu; Xaa10 es Val, Ala, Gly, Ser, Thr, Leu, lie, Met, Tyr, Trp, His, Phe, Glu, Asp, o Lys; Xaa11 es Ser, Val, Ala, Gly, Thr, Leu, lie, Glu, Asp, o Lys; Xaa12 es Ser, Val, Ala, Gly, Thr, Leu, lie, Glu, Asp o Lys; Xaa13 es Tyr, Phe, Trp, Glu, Asp o Lys; Xaa14 es Leu, Ala, Met, Gly, Ser, Thr, Leu, lie, Val, Glu, Asp o Lys; Xaa15 es Glu, Ala, Thr, Ser, Gly, Gln, Asp o Lys; Xaa16 es Gly, Ala, Ser, Thr, Leu, lie, Val, Gln, Asn, Arg, Cys, Glu, Asp o Lys; Xaa17 es Gln, Asn, Arg, His, Glu, Asp o Lys; Xaa18 es Ala, Gly, Ser, Thr, Leu, lie, Val, Arg, Glu, Asp o Lys; Xaa19 es Ala, Gly, Ser, Thr, Leu, lie, Val, Met, Glu, Asp o Lys; Xaa20 es Lys, Arg, His, Gln, Trp, Tyr, Phe, Glu o Asp; Xaa21 es Glu, Leu, Ala, His, Phe, Tyr, Trp, Arg, Gln, Thr, Ser, Gly, Asp o Lys; Xaa23 es He, Ala, Val, Leu o Glu; Xaa24 es Ala, Gly, Ser, Thr, Leu, He, Val, His, Glu, Asp o Lys; Xaa25 es Trp, Phe, Tyr, Glu, Asp o Lys; Xaa26 es Leu, Gly, Ala, Ser, Thr, He, Val, Glu, Asp o Lys; Xaa27 es Val, Leu, Gly, Ala, Ser, Thr, He, Arg, Glu, Asp o Lys; Xaa28 es Lys, Asn, Arg, His, Glu o Asp; Xaa29 es Gly, Ala, Ser, Thr, Leu, lie, Val, Arg, Trp, Tyr, Phe, Pro, His, Glu, Asp o Lys; Xaa30 es Arg, His, Thr, Ser, Trp, Tyr, Phe, Glu, Asp o Lys; y Xaa31 es Gly, Ala, Ser, Thr, Leu, lie, Val, Arg, Trp, Tyr, Phe, His, Glu, Asp, Lys. Otro grupo preferido de péptidos GLP-1 , variantes o derivados se simplifica en SEQ ID NO: 6: His-Xaa2-Xaa3-Gly-Thr-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Xaa10-Ser-Xaa12-Tyr-Xaa14-Glu-Xaa16-Xaa17-Xaa18-Xaa19-Lys-Xaa21 -Phe-Xaa23-Ala-Trp-Leu-Xaa27-Xaa28-Gly-Xaa30, en donde: Xaa2 es Ala, Gly, o Ser; Xaa3 es Glu o Asp; Xaad es Phe o Tyr; Xaa7 es Thr o Asn; Xaad es Ser, Thr o Ala; Xaa9 es Asp o Glu; Xaa10 es Val, Leu, Met o lie; Xaa12 es Ser o Lys; Xaa14 es Leu, Ala o Met; Xaa16 es Gly, Ala, Glu o Asp; Xaa17 es Gln o Glu; Xaa18 es Ala o Lys; Xaa19 es Ala, Val, lie, Leu o Met; Xaa21 es Glu o Leu; Xaa23 es lie, Ala, Val, Leu o Glu; Xaa27 es Val o Lys; Xaa28 es Lys o Asn; y Xaa30 es Arg o Glu. Estos péptidos se pueden preparar mediante métodos descritos y/o como se conocen en la técnica. Los Xaas en la secuencia (y a lo largo de esta especificación, a menos que se especifique de otra manera en un caso particular) incluyen residuos de aminoácidos específicos, derivados o aminoácidos modificados de los mismos. Debido a que la enzima, dipeptidil- peptidasa IV (DPP-IV), puede ser responsable de la rápida inactivación observada in vivo del GLP-1 administrado, se prefieren los péptidos GLP-1 , homólogos, análogos y derivados que son protegidos a partir de la actividad en la DPP-IV en el contexto del mimeticuerpo Un mimeticuerpo GLP-1 , o porción especificada o variante del mismo, que provee parcialmente o provee preferiblemente de manera sustancial al menos una actividad biológica de GLP-1 , se puede unir al ligando GLP-1 y proveer así al menos una actividad que de otra manera es mediada a través de la unión de GLP-1 a al menos un ligando, tales como un receptor de GLP-1 , o a través de otro mecanismo dependiente o mediado por proteínas. Como se utiliza en la presente invención, el término "actividad del mimeticuerpo GLP-1 " se refiere a un mimeticuerpo GLP-1 que puede modular u ocasionar al menos una actividad dependiente de GLP-1 en aproximadamente 20-10,000%, preferiblemente en al menos aproximadamente 60, 70, 80, 90, 91 , 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 2000, 3000, 4000, 5000, 6000, 7000, 8000, 9000 % o más, dependiendo del ensayo. La capacidad de un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante para proveer al menos una actividad dependiente de la proteína preferiblemente se ensaya en al menos un ensayo biológico adecuado de proteína, como se describe en la presente invención y/o como se sabe en la técnica. Un mimeticuerpo GLP-1 de humano o porción especificada o variante de la invención puede ser similar a cualquier clase (IgG, IgA, IgM, etc.) o isotipo y puede comprender al menos una porción de una cadena ligera kappa o lambda. En una modalidad, el mimeticuerpo GLP-1 de humano o porción especificada o variante comprende fragmentos variables de la cadena pesada de IgG, región de charnela, CH2 y CH3 de, al menos uno de los isotipos, por ejemplo, lgG 1 , lgG2, lgG3 o lgG4. Al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la invención se une a al menos un ligando, subunidad, fragmento, porción o cualquier combinación de ios mismos. El al menos un pépfido GLP-1 , variante o derivado de al menos un mimeticuerpo GLP-1 , porción especificada o variante de la presente invención se puede unir opcionalmente a al menos un epítope especificado del ligando. El epitope de unión puede comprender cualquier combinación de al menos una secuencia de aminoácidos de al menos 1-3 aminoácidos con respecto a toda la porción especificada de aminoácidos contiguos de las secuencias de un ligando de proteína, tales como un receptor de GLP-1 o porción del mismo. Dichos mimeticuerpos se pueden preparar mediante la unión de las diversas porciones de la fórmula (I) del mimeticuerpo GLP-1 utilizando técnicas conocidas, mediante la preparación y expresión de al menos una molécula de ácido nucleico que codifica el mimeticuerpo GLP-1 , utilizando técnicas conocidas de tecnología de ADN recombinante o mediante el uso de cualquier otro método adecuado, tales como síntesis química.

Los mimeticuerpos que se unen a los ligandos de GLP-1 de humano, tales como receptores, y que comprende una región variable definida de cadena pesada o de cadena ligera o porción de la misma, se pueden preparar utilizando métodos adecuados, tales como exhibición de fago (Katsube, Y., et al., Int J Mol. Med, 1 (5): 863-868 (1998)) o métodos que emplean animales transgénicos, como se sabe en la técnica. El mimeticuerpo GLP-1 , porción especificada o variante se puede expresar utilizando el ácido nucleico codificante o porción del mismo en una célula hospedera adecuada. La invención también se refiere a los mimeticuerpos, fragmentos para unión al ligando y cadenas de inmunoglobulina que comprenden aminoácidos en una secuencia que es sustancialmente la misma que una secuencia de aminoácidos descrita en la presente invención. Preferiblemente, dichos mimeticuerpos o fragmentos de los mismos para unión al ligando se puede unir a los ligandos de GLP-1 de humano, tales como receptores, con alta afinidad (por ejemplo, KD menor de o igual a aproximadamente 10"7 M). Las secuencias de aminoácidos que son sustancialmente las mismas a las secuencias descritas en la presente invención incluyen secuencias que comprenden sustituciones conservativas de aminoácidos, así como deleciones y/o inserciones de aminoácidos. Una sustitución conservativa de aminoácido se refiere al reemplazo de un primer aminoácido por un segundo aminoácido que tiene propiedades químicas y/o físicas (por ejemplo, carga, estructura, polaridad, hidrofobicidad/hidrofilicidad) que son similares a aquellas del primer aminoácido. Las sustituciones conservativas incluyen el reemplazo de un aminoácido por otro dentro de los siguientes grupos: lisina (K), arginina (R) e histidina (H); aspartato (D) y glutamato (E); asparagina (N), glutamina (Q), serina (S), treonina (T), tirosina (Y), K, R, H, D y E; alanina (A), valina (V), leucina (L), isoleucina (I), prolina (P), fenilalanina (F), triptofano (W), metionina (M), cisteína (C) y glicina (G); F, W y Y; C, S y T. Códigos de aminoácido. Los aminoácidos que elaboran mimeticuerpos o porciones especificadas o variantes de la presente invención frecuentemente están abreviados. Las designaciones de los aminoácidos que se pueden indicar mediante la designación del aminoácido por su código de una sola letra, su código de tres letras, nombre, o codón(es) de tres nucleótidos se entiende bien en la técnica (véase Alberts, B., et al., Molecular Biology of The Cell, Tercera Edición, Garland Publishing, Inc., New York, 1994).

Un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la presente invención puede incluir una o más sustituciones de aminoácidos, deleciones o adiciones, ya sea a partir de mutaciones naturales o, manipulación por humano, como se especifica en la presente invención. Dichas secuencias u otras que pueden ser utilizadas en la presente invención, incluyen, pero no se limita a las siguientes secuencias presentadas en el cuadro 1 , como se muestra en correspondencia a las porciones especificadas de SEQ ID NOS: 47-64, en donde la región variable parcial de la secuencia del anticuerpo puede ser, pero no se limita a, al menos una porción de al menos una de SEQ ID NOS: 47-55, o fragmento de la misma como se describe en el cuadro 1 , que comprende opcionalmente de manera adicional al menos una sustitución, inserción o deleción como se describe adicionalmente en las figuras 1-9 de la publicación PCT WO 05/05604 (PCT US04/19898) presentada el 24 de junio de 2004 y publicada el 20 de enero de 2005, con las correspondientes SEQ ID NOS: 1-9. Las regiones CH2, CH3 y región de charnela pueden ser, pero no se limitan a, al menos una porción de al menos una de SEQ ID NOs: 56-64, o fragmento de la misma como se describe en el cuadro 1 , que comprende opcionalmente de manera adicional al menos una sustitución, inserción o deleción como se describe adicionalmente en las figuras 32-40 de la publicación PCT WO 05/05604 (PCT US04/19898) presentada el 24 de junio de 2004 y publicada el 20 de enero de 2005, con las correspondientes SEQ ID NOS: 32-40. Por supuesto, el número de sustituciones de aminoácidos que un experto en la técnica podría elaborar depende de muchos factores, incluyendo aquellos anteriormente descritos. Generalmente hablando, el número de sustituciones de aminoácidos, inserciones o deleciones para al menos uno de un mimeticuerpo GLP-1 no serán más de 40, 30, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11 , 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 aminoácidos, tales como 1-30 o cualquier intervalo o valores en éste, como se especifica en la presente invención. En la fórmula I de la presente invención ((P(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t), las porciones V, H, CH2, CH3 de conformidad con la fórmula I pueden ser cualquier secuencia adecuada de humano o compatible con humano, por ejemplo, como se presenta en el cuadro 1 , en donde la región variable parcial de la secuencia del anticuerpo puede ser, pero no se limita a, al menos una porción de al menos una de SEQ ID NOS: 47-55, o fragmento de la misma como se describe en el cuadro 1 , que comprende opcionalmente de manera adicional al menos una sustitución, inserción o deleción como se describe adicionalmente en las figuras 1-9 de la publicación PCT WO 05/05604 (PCT US04/19898) presentada el 24 de junio de 2004 y publicada el 20 de enero de 2005, con las correspondientes SEQ ID NOS:1-9; y en donde las regiones CH2, CH3 y región de charnela pueden ser, pero no se limitan a, al menos una porción de al menos una de SEQ ID NOS: 56-64, o fragmento de la misma como se describe en el cuadro 1 , que comprende opcionalmente de manera adicional al menos una sustitución, inserción o deleción como se describe adicionalmente en las figuras 32-40 de la publicación PCT WO 05/05604 (PCT US04/19898) presentada el 24 de junio de 2004 y publicada el 20 de enero de 2005, con las correspondientes SEQ ID NOS: 32-40, o como se sabe en la técnica, o cualquier combinación o secuencia consenso de las mismas, o cualquier proteína de fusión de las mismas, preferiblemente de origen de humano o diseñadas para minimizar la inmunogenicidad cuando se administran a los humanos. La porción P puede comprender al menos un péptido GLP-1 terapéutico como se sabe en la técnica o como se describe en la presente invención, tales como, pero no limitados a aquellos presentados en SEQ ID NO: 1 , o cualquier combinación o secuencia consenso de los mismos, o cualquier proteína de fusión de los mismos. En una modalidad preferida, la porción P puede comprender al menos un péptido GLP-1 que tiene la secuencia de al menos una de SEQ ID NO: 6, o cualquier combinación o secuencia consenso de las mismas, o cualquier proteína de fusión de las mismas. La secuencia enlazadora opcional puede ser cualquier enlazador peptídico adecuado como se sabe en la técnica. Las secuencias preferidas incluyen cualquier combinación de G y S, por ejemplo, X1-X2-X3-X4-...-Xn, en donde X puede ser G o S, y n puede ser 5-30. Los ejemplos no limitantes incluyen GS, GGS, GGGS (SEQ ID NO: 16), GSGGGS (SEQ ID NO: 17), GGSGGGS (SEQ ID NO: 18), GGSGGGSGG (SEQ ID NO: 19) y GGGSGGGSGG (SEQ ID NO: 20); y los similares. Los aminoácidos en un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la presente invención que son esenciales para la función pueden ser identificados mediante los métodos como se conocen en la técnica, tales como mutagénesis sitio dirigida o mutagénesis para selección de alanina (por ejemplo, Ausubel, anteriormente mencionado, capítulos 8, 15; Cunningham y Wells, Science 244: 1081-1085 (1989)). El último procedimiento introduce mutaciones particulares de alanina en cada residuo de la molécula. Las moléculas mutantes resultantes se evalúan entonces para actividad biológica, tal como, pero no se limita a al menos una actividad relacionada con la proteína, como se especifica en la presente invención o como se sabe en la técnica. Los sitios que son críticos para el mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de unión también se puede identificar mediante análisis estructural tales como cristalización, resonancia magnética nuclear o marcado por fotoafinidad (Smith, et al., J. Mol. Biol. 224: 899-904 (1992) y de Vos, et al., Science 255: 306-312 (1992)). Los mimeticuerpos o porciones especificadas o variantes de la presente invención pueden comprender como la porción P de fórmula (I), por ejemplo, pero no se limitada a, al menos una porción de al menos un de SEQ ID NOs: 1 y 6. Un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante puede comprender opcionalmente de manera adicional al menos una porción funcional de al menos un polipéptido como la porción P de fórmula (I), al menos 90-100% de al menos SEQ ID NOs: 1 y 6. Las variantes no limitantes que pueden mejorar o mantener al menos una de las actividades anteriormente listadas incluyen, pero no se limitan a, cualquiera de los polipéptidos anteriormente mencionados, que comprenden adicionalmente al menos una mutación que corresponde a al menos una sustitución, inserción o deleción que no afecta significativamente las actividades biológicas adecuadas o funciones de dicho mimeticuerpo GLP-1. En una modalidad, la secuencia del aminoácido P, o porción de la misma, fiene aproximadamente 90-100% de identidad (por ejemplo, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100 o cualquier intervalo o valor en éste) con respecto a la secuencia de aminoácidos correspondientes de la porción correspondiente de al menos una de SEQ ID NOs: 1 y 6. Preferiblemente, se determina una identidad de aminoácidos del 90-100% (por ejemplo, 90, 91 , 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100 o cualquier intervalo o valor en éste) utilizando un algoritmo adecuado para computadora, como se sabe en la técnica. Los mimeticuerpos o porciones especificadas o variantes de la presente invención pueden comprender cualquier número de residuos de aminoácidos contiguos a partir de un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la presente invención, en donde ese número se selecciona a partir del grupo de enteros que consiste de 10-100% del número de residuos contiguos en un mimeticuerpo GLP-1. Opcionalmente, esta subsecuencia de aminoácidos contiguos es de al menos aproximadamente 2, 3, 4, 5, 6, 7,8, 9, 1 0, 11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250 o más aminoácidos en longitud, o cualquier intervalo o valor en éste. Además, el número de dichas subsecuencias puede ser cualquier entero seleccionado a partir del grupo que consiste de 1 a 20, tales como al menos 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, o más. Como aquellos expertos en la técnica apreciarán, la presente invención incluye al menos un mimeticuerpo GLP-1 biológicamente activo o porción especificada o variante de la presente invención. Los mimeticuerpos biológicamente activos o porciones especificadas o variantes fienen una actividad específica al menos 20%, 30%, o 40%, y preferiblemente al menos 50%, 60%, o 70%, y más preferiblemente al menos 80%, 90%, o 95%-1000% en comparación con aquella de la proteína o porción especificada o variante insertada o fusionada (no sintética), endógena o relacionada y conocida. Los métodos para el ensayo y cuantificación de las medidas de la actividad enzimática y especificidad del sustrato se conocen bien por aquéllos expertos en la técnica. En otro aspecto, la invención se refiere a mimeticuerpos de humano y fragmentos para unión al ligando, como se describe en la presente invención, los cuales se modifican mediante la unión covalente de una porción orgánica. Dicha modificación puede producir un mimeticuerpo GLP-1 o fragmento de unión al ligando con propiedades farmacocinéticas mejoradas (por ejemplo, vida media en suero incrementada in vivo). La porción orgánica puede ser un grupo polimérico hidrófilo lineal o ramificado, grupo de ácido graso, o grupo de éster ácido graso. En modalidades particulares, el grupo polimérico hidrófilo puede tener un peso molecular de aproximadamente 800 a aproximadamente 120,000 Daltones y puede ser un polialcano glicol (por ejemplo, polietilenglicol (PEG), polipropilenglicol (PPG)), polímero de carbohidrato, polímero de aminoácidos o polivinilpirrolidona, y el grupo de ácido graso o el éster de ácido graso puede comprender de aproximadamente ocho a aproximadamente cuarenta átomos de carbono. Los mimeticuerpos modificados y fragmentos para unión al ligando de la invención pueden comprender una o más porciones orgánicas que están covalentemente unidas, directamente o indirectamente, al mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante. Cada porción orgánica que se une a un mimeticuerpo GLP-1 o fragmento de unión al ligando de la invención puede ser independientemente un grupo polimérico hidrófilo, un grupo de ácido graso o grupo éster de ácido graso. Como se utiliza en la presente invención, el término "ácido graso" comprende ácidos mono-carboxílicos y ácidos di-carboxílicos. Un "grupo polimérico hidrófilo", como se utiliza el término en la presente invención, se refiere a un polímero orgánico que es más soluble en agua que en octano. Por ejemplo, la polilisina es más soluble en agua que en octano. Por lo tanto, un mimeticuerpo GLP-1 modificado mediante la unión covalente de polilisina se comprende por la invención. Los polímeros hidrófilos adecuados para la modificación de mimeticuerpos de la invención puede ser lineales o ramificados e incluyen, por ejemplo, polialcano glicoles (por ejemplo, PEG, monometoxi-polietilenglicol (mPEG), PPG y los similares), carbohidratos (por ejemplo, dextrán, celulosa, oligosacáridos, polisacáridos y los similares), polímeros de aminoácidos hidrófilos (por ejemplo, polilisina, poliarginina, poliaspartato y los similares), óxidos de polialcano (por ejemplo, óxido de polietileno, óxido de polipropileno y los similares) y polivinilpirrolidona. Preferiblemente, el polímero hidrófilo que modifica el mimeticuerpo GLP-1 de la invención tiene un peso molecular de aproximadamente 800 a aproximadamente 150,000 Daltones como una entidad molecular separada. Por ejemplo, se pueden utilizar PEG2 0o, PEG5000, PEG75oo> PEG9000, PEG10000, PEG?250o, PEG15ooo, y PEG20,ooo> en donde el subíndice es el peso molecular promedio del polímero en Daltones. El grupo polimérico hidrófilo se puede sustituir con uno a aproximadamente seis grupos alquilo, ácido graso o éster de ácido graso. Los polímeros hidrófilos que se sustituyen con un grupo de ácido graso o ester de ácido graso se pueden preparar mediante el empleo de métodos adecuados. Por ejemplo, un polímero que comprende un grupo de amina se puede acoplar a un carboxilato del ácido graso o éster de ácido graso, y con carboxilato activado (por ejemplo, activado con N,N-carbonil diimidazol) en un ácido graso o éster de ácido graso se puede acoplar a un grupo hidroxilo en un polímero.

Los ácidos grasos y esteres de ácido graso adecuados para la modificación de mimeticuerpos de la invención pueden estar saturados o pueden contener una o más unidades de ¡nsaturación. Los ácidos grasos que son adecuados para modificar mimeticuerpos de la invención incluyen, por ejemplo, n-dodecanoato (C-?2, laurato), n-tetradecanoato (C14, miristato), n-octadecanoato (C18, estearato), n-eicosanoato (C2o, araquidato), n-docosanoato (C22, behenato), n-triacontanoato (C30), n-tetracontanoato (C40), cis-?9-octadecanoato (C18, oleato), todos cis-?5,8,11 ,14-eicosatetraenoato (C20, araquidonato), ácido octanedióico, ácido tetradecanedióico, ácido octadecanedióico, ácido docosanedióico, y los similares. Los esteres de ácido graso adecuados incluyen monoésteres de ácidos dicarboxílicos que comprenden un grupo alquilo inferior lineal o ramificado. El grupo alquilo inferior puede comprender de uno a aproximadamente doce, preferiblemente de uno a aproximadamente seis, átomos de carbono. Los mimeticuerpos modificados de humano y fragmentos para unión al ligando se pueden preparar utilizando métodos adecuados, tales como mediante la reacción con uno o más agentes modificadores. Un "agente modificador" como el término se utiliza en la presente invención, se refiere a un grupo orgánico adecuado (por ejemplo, polímero hidrófilo, un ácido graso, un éster de ácido graso) que comprende un grupo activador. Un "grupo activador" es una porción química o grupo funcional que puede reaccionar, bajo condiciones adecuadas, con un segundo grupo químico formando así un enlace covalente entre el agente modificador y el segundo grupo químico. Por ejemplo, los grupos activadores reactivos a la amina incluyen grupos electrófilos tales como tosilato, mesilato, halo (cloro, bromo, fluoro, iodo), esteres de N-hidroxisuccinimidilo (NHS), y los similares. Los grupos activadores que pueden reaccionar con tioles incluyen, por ejemplo, maleimida, iodoacetilo, acrilolilo, disulfuros de piridilo, tiol del ácido 5-tiol-2- nitrobenzóico (TNB-tiol), y los similares. Un grupo funcional aldehido puede ser acoplado a las moléculas que contienen amina o hidrazida, y un grupo azida puede reaccionar con un grupo fosforoso trivalente para formar enlaces fosforamidato o fosforimida. Los métodos adecuados para introducir grupos activadores dentro de moléculas son como se conocen en la técnica (véase por ejemplo, Hermanson, G. T., Bioconjugate Techniques, Academic Press: San Diego, CA (1996)). Un grupo activador se puede unir directamente al grupo orgánico (por ejemplo, polímero hidrófilo, ácido graso, ester de ácido graso), o a través de una porción enlazadora, por ejemplo un grupo C C-?2 divalente en donde uno o más átomos de carbono pueden ser reemplazados por un heteroátomo tales como oxígeno, nitrógeno o azufre. Las porciones enlazadoras adecuadas incluyen, por ejemplo, tetraetilenglicol, -(CH2)3-, -NH-(CH2)6-NH-, -(CH2)2-NH- y -CH2-0-CH2-CH2-0-CH2-CH2-0-CH-NH-. Los agentes modificadores que comprenden una porción enlazadora se pueden producir, por ejemplo, mediante la reacción de una mono-Boc-alquildiamina (por ejemplo, mono-Boc-etilendiamina, mono-Boc-diaminohexano) con un ácido graso en la presencia de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC) para formar un enlace amida entre la amina libre y el carboxilato de ácido graso. El grupo protector Boc se puede remover a partir del producto mediante el tratamiento con ácido trifluoroacético (TFA) para exponer una amina primaria que puede ser acompañada a otro carboxilato como se describe, o se puede hacer reaccionar con anhídrido maléico y el producto resultante se forma en un ciclo para producir un derivado maleimido activado derivado a partir del ácido graso. (Véase, por ejemplo, Thompson, et al., WO 92/16221 las enseñanzas totales de los cuales se incorporan en la presente invención como referencias.) Los mimeticuerpos modificados de la invención se pueden producir mediante la reacción de un mimeticuerpo GLP-1 de humano o fragmento de unión al ligando con un agente modificador. Por ejemplo, las porciones orgánicas se pueden unir al mimeticuerpo GLP-1 de manera no sitio específica al emplear un modificador de agente reactivo a amina, por ejemplo, un éster NHS de PEG. Los mimeticuerpos modificados de humano o fragmentos para unión al ligando también se pueden preparar mediante la reducción de enlaces disulfuro (por ejemplo, enlaces disulfuro ¡ntra-cadena) de un mimeticuerpo GLP-1 o fragmento de unión al ligando. El mimeticuerpo GLP-1 reducido o fragmento de unión al ligando se puede hacer reaccionar entonces con un agente modificador reactivo a tiol para producir el mimeticuerpo GLP-1 modificado de la invención. Los mimeticuerpos modificados de humano y fragmentos para unión al ligando que comprenden una porción orgánica que está unida a los sitios específicos de un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la presente invención se pueden preparar utilizando métodos adecuados, tales como proteólisis reversa (Fisch et al., Bioconjugate Chem., 3: 147-153 (1992); Werlen et al., Bioconjugate Chem., 5: 411-417 (1994); Kumaran et al., Protein Sci. 6 (10): 2233-2241 (1997); Itoh et al., Bioorg. Chem., 24 (1 ): 59-68 (1996); Capellas et al., Biotechnol. Bioeng., 56 (4): 456-463 (1997)), y los métodos descritos en Hermanson, G. T., Bioconjugate Techniques, Academic Press: San Diego, CA (1996). Composiciones de mimeticuerpo GLP-1. La presente invención también provee al menos un mimeficuerpo GLP-1 o porción especificada o composición variante que comprende al menos uno, al menos dos, al menos tres, al menos cuatro, al menos cinco, al menos seis o más mimeticuerpos o porciones especificadas o variantes de los mismos, como se describe en la presente invención y/o como se sabe en la técnica que se proveen en una composición, mezcla o forma que no se presenta de manera natural. Dichos porcentajes de la composición se encuentran en peso, volumen, concentración, molaridad, o molalidad como soluciones líquidas o secas, mezclas, suspensión, emulsiones o coloides, como se sabe en la técnica o como se describe en la presente invención. Dichas composiciones pueden comprender 0.00001-99.9999 de porcentaje en peso, volumen, concentración, molaridad, o molalidad como soluciones, mezclas, suspensiones, emulsiones o coloides líquidos, gaseosos, o secos, como se sabe en la técnica o como se describe en la presente invención, en cualquier intervalo o valor en éste, tales como pero no limitados a 0.00001 , 0.00003, 0.00005, 0.00009, 0.0001 , 0.0003, 0.0005, 0.0009, 0.001 , 0.003, 0.005, 0.009, 0.01 , 0.02, 0.03, 0.05, 0.09, 0.1 , 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1.0, 1.1 , 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.1 , 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3.0, 3.1 , 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4.0, 4.3, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 71 , 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81 , 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91 , 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 99.1 , 99.2, 99.3, 99.4, 99.5, 99.6, 99.7, 99.8, 99.9 %. Dichas composiciones de la presente invención incluyen por lo tanto pero no se limitan a 0.00001-100 mg/ml y/o 0.00001-100 mg/g. La composición puede comprender adicionalmente de manera opcional una cantidad efectiva de al menos un compuesto o proteína seleccionada a partir de al menos uno de un fármaco relacionado con la diabetes o con el metabolismo de la insulina, un fármaco anti-infeccioso, un fármaco para el sistema cardiovascular (CV), un fármaco para el sistema nervioso central (SNC), un fármaco para el sistema nervioso autónomo (SNA), un fármaco para el tracto respiratorio, un fármaco para el tracto gastrointestinal (Gl), un fármaco hormonal, un fármaco para balance de fluidos o de electrolitos, un fármaco hematológico, un antineoplactic, un fármaco para inmunomodulación, un oftálmico, fármaco ótico o nasal, un fármaco tópico, un fármaco nutricional o los similares. Dichos fármacos se conocen bien en la técnica, incluyendo formulaciones, indicaciones, dosificación y administración para cada uno presentado en la presente invención (véase por ejemplo, Nursing 2001 Handbook of Drugs, 21a edición, Springhouse Corp., Springhouse, PA, 2001 ; Health Professional's Drug Guide 2001 , ed., Shannon, Wilson, Stang, Prentice-Hall, Inc, Upper Saddie River, NJ; Pharmcotherapy Handbook, Wells et al., ed., Appleton & Lange, Stamford, CT, cada uno completamente incorporado en la presente invención como referencia). En fármaco relacionado con la diabetes puede ser al menos uno de glitazonas, insulina y derivados, sulfonilureas, meglitinidas, biguanidas, inhibidores de la alfa-glucosidasa, proteína tirosinfosfastasa-IB, glicógeno sintasa cinasa 3, inhibidores de la gluconeogénesis, inhibidores de la piruvato deshidrogenasa cinasa (PDH), inhibidores de la lipólisis, inhibidores de la oxidación de grasa, inhibidores de la carnitina palmitoiltransferasa I y/o II, agonistas del beta-3 adrenoceptor, inhibidores del cotransportador de sodio y glucosa (SGLT), o compuestos que actúan sobre uno o más de al menos uno de: supresión autoinmune, regulación inmune, activación, proliferación, migración y/o supresor celular de la función de las células T, inhibición de la interacción del receptor de la célula T/péptido/MHC-ll, inducción de anergia de la célula T, deleción de células T auto-reactivas, reducción del tráfico a través de la barrera hematoencefálica, alteración del balance de citocinas pro-inflamatorias (Th1 ) e inmunomoduladoras (Th2), inhibición de los inhibidores de la metaproteasa de la matriz, neuroprotección, reducción de gliosis, promoción de re-mielinación. El fármaco anti-infeccioso puede ser al menos uno seleccionado a partir de amebicidas o antiprotozoos, anthelmínticos, antifungales, antimalariales, antituberculóticos o antilepróticos, aminoglicósidos, penicilinas, cefalosporinas, tetraciclinas, sulfonamidas, fluoroquinolonas, antivirales, macrólidos anti-infecciosos y anti-infecciosos misceláneos . El fármaco CV puede ser al menos uno seleccionado a partir de inotrópicos, antiarrítmicos, antianginales, antihipertensivos, antilipémicos y fármacos cardiovasculares misceláneos. El fármaco CNS puede ser al menos uno seleccionado a partir de analgésicos no narcóticos o al menos uno seleccionado a partir de antipiréticos, fármacos antiinflamatorios no esteroideos, analgésicos narcóticos u opioides, sedantes hipnóticos, anticonvulsivos, antidepresivos, fármacos antiansiedad, antipsicóticos, estimulantes del sistema nervioso central, antiparkinsonianos y fármacos misceláneos para el sistema nervioso central. El fármaco ANS puede ser al menos uno seleccionado a partir de bloqueadores colinérgicos (parasimpatomiméticos), anticolinérgicos, adrenérgicos (simpatomiméticos), bloqueadores adrenérgicos (simpatolíticos), relajantes del músculo esquelético y bloqueadores neuromusculares. El fármaco del tracto respiratorio puede ser al menos uno seleccionado a partir de antihistaminas, broncodiladores, expectorantes o antitusivos y fármacos respiratorios misceláneos. El fármaco del tracto Gl puede ser al menos uno seleccionado a partir de fármacos antiácidos, adsorbentes, antiflatulentos, enzimas digestivas, solubilizantes de cálculo biliar, antidiarréicos, laxantes, antieméticos y antiúlceras. El fármaco hormonal puede ser al menos uno seleccionado a partir de corticosteroides, andrógenos, esteroides anabólicos, estrógenos, progestinas, gonadotropinas, fármacos anti-diabéticos, al menos un glucagon, hormonas tiroideas, antagonistas de la hormona tiroidea, hormonas pituitarias y fármacos semejantes a la hormona paratiroide. El fármaco para el balance de fluidos y de electrolitos puede ser al menos uno seleccionado a partir de diuréticos, electrolitos, soluciones para reemplazo, acidificantes y alcalinizantes. El fármaco hematológico puede ser al menos uno seleccionado a partir de hematónicos, anficoagulantes, derivados sanguíneos y enzimas trombolíticas. Los antineoplásicos pueden ser al menos uno seleccionado a partir de fármacos alquilantes, antimetabolitos, antibióticos antineoplásicos, antineoplásicos que alteran el balance hormonal y antineoplásicos misceláneos. El fármaco para inmunomodulación puede ser al menos uno seleccionado a partir de inmunosupresores, vacunas, toxoides, antitoxinas, antiveninas, sueros inmunes y modificadores de la respuesta biológica. Los fármacos oftálmicos, óticos, y nasales pueden ser al menos uno seleccionado a partir de fármacos oftálmicos anti-infecciosos, antiinflamatorios oftálmicos, mitóticos, midriáticos, vasoconstrictores oftálmicos y oftálmicos misceláneos, óticos, nasales. El fármaco tópico puede ser al menos uno seleccionado a partir de anti-infecciosos locales, escabicidas, pediculicidas y corticosteroides tópicos. El fármaco nutricional puede ser al menos uno seleccionado a partir de vitaminas, minerales y calóricos. Véase, por ejemplo, los contenidos de Nursing 2001 Drug Handbook, anteriormente mencionado. El al menos un amebicida o antiprotozoos puede ser al menos uno seleccionado a partir de atovaquone, clorhidrato de cloroquina, fosfato de cloroquina, metronidazol, clorhidrato de metronidazol y isetionato de pentamidina. En al menos un anthelmíntico puede ser al menos uno seleccionado a partir de mebendazol, pirantel pamoate y tiabendazol. El al menos un antifungal puede ser al menos uno seleccionado a partir de amfotericina B, complejo de amfotericina B colesteril sulfato, complejo de amfotericina B lípido, amfotericina B liposomal, fluconazol, flucitosine, griseofulvina microtamaño, griseofulvina ultramicrotamaño, itraconazol, cetoconazol, nistatiano y clorhidrato de terbinafina. El al menos un antimalarial puede ser al menos uno seleccionado a partir de clorhidrato de cloroquina, fosfato de cloroquina, doxiciclina, sulfato de hidroxicloroquina, clorhidrato de mefloquina, fosfato de primaquina, pirimetamina y pirimetamina con sulfadoxina. El al menos un antituberculótico o antileprótico puede ser al menos uno seleccionado a partir de clofazimina, cicloserina, dapsona, clorhidrato de etambutol, isoniazida, pirazinamida, rifabutina, rifampina, rifapentina y sulfato de estreptomicina. El al menos un aminoglicósido puede ser al menos uno seleccionado a partir de sulfato de amicacina, sulfato de gentamicina, sulfato de neomicina, sulfato de estreptomicina y sulfato de tobramicina. La al menos una penicilina puede ser al menos una seleccionada a partir de amoxcilina/clavulanato potásico, trihidrato de amoxicilina, ampicilina, ampicilina sódica, trihidrato de ampicilina, ampicilina sódica/sulbactamo sódico, cloxacilina sódica, dicloxacilina sódica, mezlocilina sódica, nafcilina sódica, oxacilina sódica, penicilina G benzatina, penicilina G potásica, penicilina G procaína, penicilina G sódica, penicilina V potásica, piperacilina sódica, piperacilina sódica/tazobactamo sódico, ticarcilina disódica y ticarcilina disódica/clavulanato potásico. La al menos un cefalosporina puede ser al menos una seleccionada a partir de al menos uno de cefaclor, cefadroxil, cefazolina sódica, cefdinir, clorhidrato de cefepima, cefixima, cefinetazol sódico, cefonicid sódico, cefoperazona sódica, cefotaxima sódica, cefotetan disódico, cefoxitina sódica, cefpodoxima proxetil, cefprozil, ceftazidima, ceftibuten, ceftizoxima sódica, ceftriaxone sódica, cefuroxima axetil, cefuroxima sódica, clorhidrato de cefalexina, monohidrato de cefalexina, cefradina, loracarbef. La al menos una tetraciclina puede ser al menos una seleccionada a partir de clorhidrato de demeclociclina, doxiciclina calcica, hiclato de doxiciclina, clorhidrato de doxiciclina, monohidrato de doxiciclina, clorhidrato de minociclina, clorhidrato de tetraciclina. La al menos una sulfonamida puede ser al menos una seleccionada a partir de co-trimoxazol, sulfadiazina, sulfametoxazol, sulfisoxazol, sulfisoxazol acetilo. La al menos una fluoroquinolona puede ser al menos una seleccionada a partir de mesilato de alatrofloxacina, ciprofloxacina, enoxacina, levofloxacina, clorhidrato de lomefloxacina, ácido nalidíxico, norfloxacina, ofloxacina, esparfloxacina, mesilato de trovafloxacina. La al menos una fluoroquinolona puede ser al menos una seleccionada a partir de mesilato de alatrofloxacina, ciprofloxacina, enoxacina, levofloxacina, clorhidrato de lomefloxacina, ácido nalidíxico, norfloxacina, ofloxacina, esparfloxacina, mesilato de trovafloxacina. El al menos un antiviral puede ser al menos uno seleccionado a partir de sulfato de abacavir, aciclovir sódico, clorhidrato de amantadina, amprenavir, cidofovir, mesilato de delavirdina, didanosina, efavirenz, famciclovir, fomivirsen sódico, foscarnet sódico, ganciclovir, sulfato de indinavir, lamivudina, lamivudina/zidovudina, mesilato de nelfinavir, nevirapina, fosfato de oseltamivir, ribavirina, clorhidrato de rimantadina, ritonavir, saquinavir, mesilato de saquinavir, estavudina, clorhidrato de valaciclovir, zalcitabina, zanamivir, zidovudina. La al menos una macrolina anti-infecciosa puede ser al menos una seleccionada a partir de azitromicina, claritromicina, diritromicina, eritromicina base, estolato de eritromicina, etilsucinato de eritromicina, lactobionato de eritromicina, estearato de eritromicina. El al menos un misceláneo anti-infeccioso puede ser al menos uno seleccionado a partir de aztreonam, bacitracina, sucinato de cloramfenicol sódico, clorhidrato de clindamicina, clorhidrato de clindamicina palmitato, fosfato de clindamicina, imipenem y cilastatina sódica, meropenem, macrocristales de nitrofurantoína, microcristales de nitrofurantoína, quinupristina/dalfoprisfina, clorhidrato de espectinomicina, trimetoprima, clorhidrato de vancomicina. (Véase, por ejemplo, pp. 24-214 of Nursing 2001 Drug Handbook.) El al menos un inotrópico puede ser al menos uno seleccionado a partir de lactato de amrinona, digoxina, lactato de milrinona. El al menos un antiarrítmico puede ser al menos uno seleccionado a partir de adenosina, clorhidrato de amiodarona, sulfato de atropina, tosilato de bretilium, clorhidrato de diltiazem, disopiramida, fosfato de disopiramida, clorhidrato de esmolol, acetato de flecainida, fumarato de ibutilida, clorhidrato de lidocaína, clorhidrato de mexiletina, clorhidrato de moricizina, fenitoína, fenitoína sódica, clorhidrato de procainamida, clorhidrato de propafenona, clorhidrato de propranolol, bisulfato de quinidina, gluconato de quinidina, poligalacturonato de quinidina, sulfato de quinidina, sotalol, clorhidrato de tocainida, clorhidrato de verapamil. El al menos un antianginal puede ser al menos uno seleccionado a partir de besilato de amlodipidina, amil nitrito, clorhidrato de bepridil, clorhidrato de diltiazem, dinitrato de isosorbida, mononitrato de isosorbida, nadolol, clorhidrato de nicardipina, nifedipina, nitroglicerina, clorhidrato de propranolol, verapamil, clorhidrato de verapamil. El al menos un antihipertensivo puede ser al menos uno seleccionado a partir de clorhidrato de acebutolol, besilato de amlodipina, atenolol, clorhidrato de benazepril, clorhidrato de betaxolol, fumarato de bisoprolol, candesartan cilexetilo, captopril, clorhidrato de carteolol, carvedilol, clonidina, clorhidrato de clonidina, diazóxido, clorhidrato de diltiazem, mesilato de doxazosina, enalaprilat, maleato de enalapril, mesilato de eprosartan, felodipina, mesilato de fenoldopam, fosinopril sódico, acetato de guanabenz, sulfato de guanadrel, clorhidrato de guanfacina, clorhidrato de hidralazina, irbesartan, isradipina, clorhidrato de labetalol, lisinopril, losarían potásico, metildopa, clorhidrato de metildopato, succinato de metoprolol, tartrato de metoprolol, minoxidil, clorhidrato de moexipril, nadolol, clorhidrato de nicardipina, nifedipina, nisoldipina, nitroprúsida sódico, sulfato de penbutolol, perindopril erbumina, mesilato de fentolamina, pindolol, clorhidrato de prazosina, clorhidrato de propranolol, clorhidrato de quinapril, ramipril, telmisartan, clorhidrato de terazosina, maleato de timolol, trandolapril, valsarían, clorhidrato de verapamil. El al menos un antilipémico puede ser al menos uno seleccionado a partir de atorvastatina calcica, cerivastatin sódica, colestiramina, clorhidrato de colestipol, fenofibraío (micronizado), fluvasfatin sódica, gemfibrozil, lovastaíina, niacina, pravasíatina sódica, simvastatina. El al menos un fármaco CV misceláneo puede ser al menos uno seleccionado a partir de abciximab, alprosíadil, clorhidraío de arbuíamina, cilosíazol, bisulfaío de clopidogrel, dipiridamol, epfifibafida, clorhidraío de midodrina, pentoxifilina, clorhidrato de ticlopidina, clorhidrato de tirofiban. (Véase, por ejemplo, pp. 215-336 de Nursing 2001 Drug Handbook.) El al menos un analgésico no narcóíico o aníipirético puede ser al menos uno seleccionado a partir de acetaminofén, aspirina, írisalicilato colina de magnesio, diflunisal, salicilaío de magnesio. El al menos un fármaco aníiinflamalorio no esteroideo puede ser al menos uno seleccionado a partir de celecoxib, diclofenac potásico, diclofenac sódico, etodolac, fenoprofen calcico, flurbiprofen, ibuprofen, indometacina, indometacina sódica írihidralada, cetoprofen, cetorolac trometamina, nabumeíona, naproxen, naproxen sódico, oxaprozina, piroxicam, rofecoxib, sulindac. El al menos un analgésico narcóíico u opioide puede ser al menos uno seleccionado a partir de clorhidrato de alfentanil, clorhidrato de buprenorfina, tartrafo de buíorfanol, fosfato de codeína, sulfaío de codeína, curato de feníanilo, sisíema transdermal de fentanilo, fentanilo transmucosal, clorhidrato de hidromorfona, clorhidraío de meperidina, clorhidraío de metadona, clorhidrato de morfina, sulfato de morfina, faríraío de morfina, clorhidrato de nalbufina, clorhidrato de oxicodona, pectinato de oxicodona, clorhidrato de oximorfona, clorhidrato de pentazocina, clorhidrato de pentazocina y clorhidrato de naloxona, lactato de peníazocina, clorhidrato de propoxifeno, napsilaío de propoxifeno, clorhidrato de remifentanilo, citrato de sufentanilo, clorhidraío de íramadol. El al menos un sedante hipnótico puede ser al menos uno seleccionado a partir de hidrato de doral, estazolam, clorhidraío de flurazepam, peníobarbiíal, peníobarbiíal sódico, fenobarbiíal sódico, secobarbital sódico, temazepam, íriazolam, zaleplon, fartraío de zolpidem. El al menos un aníiconvulsivo puede ser al menos uno seleccionado a partir de acetazolamida sódica, carbamazepina, clonazepam, clorazepato dipotásico, diazepam, divalproex sódico, eíosuximida, fosfeniíoína sódica, gabapentina, lamotrigina, sulfato de magnesio, fenobarbital, fenobarbital sódico, fenitoína, fenitoína sódica, fenitoína sódica (extendida), primidona, clorhidrato de tiagabina, topiramato, valproato sódico, ácido valpróico. El al menos un antidepresivo puede ser al menos uno seleccionado a paríir de clorhidrato de amitripíilina, pamoato de amitriptilina, amoxapina, clorhidrato de bupropiona, bromhidrato de citalopram, clorhidrato de clomipramina, clorhidrato de desipramina, clorhidrato de doxepina, clorhidraío de fluoxetina, clorhidrato de imipramina, pamoato de imipramina, mirtazapina, clorhidraío de nefazodona, clorhidraío de nortriptilina, clorhidraío de paroxeíina, sulfaío de fenelzina, clorhidrato de serlralina, sulfato de íranilcipromina, maleato de írimipramina, clorhidrato de venlafaxina. El al menos un fármaco antiansiedad puede ser al menos uno seleccionado a partir de alprazolam, clorhidrato de buspirona, clordiazGLP-1xida, clorhidrato de clordiazGLP-1xida, clorazepato dipotásico, diazepam, clorhidrato de doxepina, embonato de hidroxizina, clorhidrato de hidroxizina, pamoato de hidroxizina, lorazepam, mefrobamaío, clorhidrato de midazolam, oxazepam. El al menos un fármaco antipsicótico puede ser al menos uno seleccionado a partir de clorhidrato de clorpromazina, clozapina, decanoato de flufenazina, enantaío de fluefenazina, clorhidraío de flufenazina, haloperidol, decanoaío de haloperidol, lacfaío de haloperidol, clorhidraío de loxapina, succinato de loxapina, besilato de mesoridazina, clorhidrato de molindona, olanzapina, perfenazina, pimozida, proclorperazina, fumarato de quetiapina, risperidona, clorhidrato de íioridazina, íiotixeno, clorhidrato de íioíixeno, clorhidrato de trifluoperazina. El al menos un estimulante del sistema nervioso ceníral puede ser al menos uno seleccionado a partir de sulfato de anfeíamina, cafeína, sulfato de dexíroanfelamina, clorhidrato de doxapram, clorhidrato de metanfeíamina, clorhidrato de meíilfenidafo, modafinil, pemolina, clorhidrato de fenfermina. El al menos un aníiparkinsoniano puede ser al menos uno seleccionado a partir de clorhidraío de amaníadina, mesilaío de benztropina, clorhidrato de biperideno, láclalo de biperideno, mesilafo de bromocriptina, carbidopa-levodopa, entacapona, levodopa, mesilato de pergolida, diclorhidrato de pramipexol, clorhidraío de ropinirol, clorhidrato de selegilina, tolcapona, clorhidrato de trihexifenidilo. El al menos un fármaco misceláneo del sistema nervioso central puede ser al menos uno seleccionado a partir de clorhidraío de bupropiona, clorhidraío de donepezíl, droperidol, maleato de fluvoxamina, carbonato de liíio, ciíraío de liíio, clorhidrato de naraíripfano, nicotina polacrilex, sistema transdermal de nicotina, propofol, benzoato de rizatripfan, monohidraío de clorhidrato de sibutramina, succinato de sumaíripían, clorhidraío de tacrina, zolmitriplan. (Véase, por ejemplo, pp. 337-530 de Nursing 2001 Drug Handbook.) El al menos un colinérgico (por ejemplo, parasimaíomimético) puede ser al menos uno seleccionado a partir de cloruro de betanecol, cloruro de edrofonio, bromuro de neostigmina, meíilsulfalo de neosfigmina, salicilato de fisostigmina, bromuro de piridostigmina. El al menos un anticolinérgico puede ser al menos uno seleccionado a partir de sulfato de atropina, clorhidrato de diciclomina, glicopirrolaío, hiosciamina, sulfaío de hiosciamina, bromuro de propanfelina, escopolamina, buíilbromuro de escopolamina, bromhidrato de escopolamina. El al menos un adrenérgico (simpaíomiméticos) puede ser al menos uno seleccionado a partir de clorhidrato de dobutamina, clorhidrato de dopamina, bitartralo de meíaraminol, biíartrato de norepinefrina, clorhidrato de fenilefrina, clorhidraío de pseudoefedrina, sulfato de pseudoefedrina. El al menos un bloqueador adrenérgico (simpaíolííico) puede ser al menos uno seleccionado a partir de mesilaío de dihidroergoíamina, lartrato de ergoíamina, maléalo de metisergida, clorhidrato de propranolol. El al menos un relajante del músculo esquelético puede ser al menos uno seleccionado a partir de baclofen, carisoprodol, clorzoxazona, clorhidrato de ciclobenzaprina, dantroleno sódico, metocarbamol, clorhidrato de tizanidina. El al menos un bloqueador neuromuscular puede ser al menos uno seleccionado a partir de besilalo de atracurio, besilato de cisatracurio, cloruro de doxacurio, cloruro de mivacurio, bromuro de pancuronio, bromuro de pipecuronio, bromuro de rapacuronio, bromuro de rocuronio, cloruro de succinilcolina, cloruro de tubocurarina, bromuro de vecuronio. (Véase, por ejemplo, pp. 531-84 de Nursing 2001 Drug Handbook.) La al menos una aníihisíamina puede ser al menos una seleccionada a partir de maleato de bromfeniramina, clorhidrato de cetirizina, maleato de clorfeniramina, fumarato de clemasíina, clorhidrato de ciprohepladina, clorhidrato de difenhidramina, clorhidrato de fexofenadina, loratadina, clorhidrato de prometazina, leoclaío de prometazina, clorhidrato de triprolidina. El al menos un broncodilatador puede ser al menos uno seleccionado a partir de albuterol, sulfato de albuterol, aminofilina, sulfato de atropina, sulfato de efedrina, epinefrina, bitartrato de epinefrina, clorhidrato de epinefrina, bromuro de ipratropio, isoproterenol, clorhidrato de ¡soproterenol, sulfato de isoproterenol, clorhidrato de levalbuferol, sulfato de mefaproíerenol, oxírifilina, acetato de pirbuterol, xinafoato de salmeterol, sulfato de lerbutalina, teofilina. El al menos un expectorante o antitusivo puede ser al menos uno seleccionado a partir de benzonatato, fosfato de codeína, sulfato de codeína, bromhidrato de dextrametorfan, clorhidrato de difenhidramina , guaifenesina, clorhidrato de hidromorfona. El al menos un fármaco respiratorio misceláneo puede ser al menos uno seleccionado a partir de aceíilcisfeína, dipropionaío de beclomefasona, beractant, budesonida, calfacíaní, cromolina sódica, domasa alfa, GLP-1prostenol sódico, flunisolida, propionato de fluticasona, montelukast sódico, nedocromil sódico, palivizumab, acetónido de triamcinolona, zafirlukast, zileuton. (Véase, por ejemplo, pp. 585-642 de Nursing 2001 Drug Handbook.) El al menos un antácido, adsorbente, o antiflatulento puede ser al menos uno seleccionado a partir de carbonalo de aluminio, hidróxido de aluminio, carbonato de calcio, magaldrato, hidróxido de magnesio, oxido de magnesio, simeticona, y bicarbonato de sodio. La al menos una enzima digestiva o solubilizante de cálculo biliar puede ser al menos uno seleccionado a partir de pancreatina, pancrelipasa, y ursodiol. El al menos un antidiarréico puede ser al menos uno seleccionado a partir de attapulgite, subsalicilato de bismuto, policarbofil calcico, clorhidrato de difenoxilato o sulfato de atropina , loperamida, acetato de octreótido, fintura de opio, tintura de opio (camforada). El al menos un laxante puede ser al menos uno seleccionado a partir de bisocodilo, policarbofilo calcico, cascara sagrada, cascara sagrada extracto fluido aromático, cascara sagrada extracto fluido, aceite de ricino, docusato calcico, docusato sódico, glicerina, lactulosa, citrato de magnesio, hidróxido de magnesio, sulfaío de magnesio, metilcelulosa, aceite mineral, polietilenglicol o solución de electrolitos; psilium, senna, fosfatos de sodio . - El al menos un antiemético puede ser al menos uno seleccionado a partir de clorhidrato de clorpromazina, dimenhidrinato, mesilato de dolasetron, dronabinol, clorhidrato de graniseíron, clorhidrato de meclizina, clorhidraío de meíocloproamida, clorhidrato de ondansetron, perfenazina, proclorperazina, edisilato de proclorperazina, maleato de proclorperazina, clorhidrato de prometazina, scopolamina, maleato de tietilperazina, clorhidrato de trimeíobenzamida. El al menos un fármaco antiúlcera puede ser al menos uno seleccionado a partir de cimetidina, clorhidrato de cimetidina, famoíidina, lansoprazol, misoprostol, nizatidina, omeprazol, rabeprozol sódico, citrato de rantidina bismuto, clorhidraío de raniíidina, sucralfato. (Véase, por ejemplo, pp. 643-95 de Nursing 2001 Drug Handbook.) El al menos un corticosteroide puede ser al menos uno seleccionado a partir de betametasona, acetato de betametasona o fosfato de betametasona sódica, fosfato de betametasona sódica, acetato de cortisona, dexametasona, aceíato de dexametasona, fosfato de dexametasona sódica, aceíaío de fludrocortisona, hidrocortisona, aceíato de hidrocortisona, cipionalo de hidrocortisona, fosfato de hidrocortisona sódica, succinato de hidrocortisona sódica, metilprednisolona, acetato de metilprednisolona, succinato de meíilprednisolona sódica, prednisolona, acetato de prednísolona, fosfato de prednisolona sódica, tebutato de prednisolona, prednisona, triamcinolona, acetónido de triamcinolona, diacetato de triamcinolona. El al menos un andrógeno o esleroide anabólico puede ser al menos uno seleccionado a partir de danazol, fluoximesterona, metiltestosterona, decanoato de nandrolona, fenpropionato de nandrolona, testosterona, cipionato de testosterona, enantato de testosterona, propionato de testosterona, sistema transdermal de tesíosíerona. El al menos un esírógeno o progesíina puede ser al menos una seleccionada a partir de estrógenos esterificados, esíradiol, cipionato de estradiol, sistema fransdermal de acetato de estradiol/noretindrona, valerato de estradiol, esírógenos (conjugados), estropipato, etinil esíradiol, eíinil esíradiol y desogestrel, etinil estradiol y diaceíaío de efinodiol, etinil esíradiol y desogesírel, etinil estradiol y diacefaío de etinodiol, etinil esíradiol y levonorgesírel, etinil estradiol y noreíindrona, etinil estradiol y aceíato de noretindrona, elinil esíradiol y norgesíimalo, elinil esfradiol y norgesírel, etinil estradiol y noretindrona y aceíato y fumaraío ferroso, levonorgesírel, acelaío de medroxiprogesíerona, mestranol y noretindrona, noretindrona, acetato de noretindrona, norgestrel, progesterona. La al menos un gonadoíropina puede ser al menos una seleccionada a partir de aceíaío de ganirelix, aceíaío de gonadorelina, acefaío de hisírelina, menolropinas. El al menos un aníidiabéíico o glucagon puede ser al menos uno seleccionado a partir de acarbosa, clorpropamida, glimepirida, glipizida, glucagon, gliburida, insulinas, clorhidraío de metformina, miglitol, clorhidrato de pioglitazona, repaglinida, maleato de rosigliíazona, írogliíazona. La al menos un hormona íiroidea puede ser al menos una seleccionada a partir de levoíiroxina sódica, liofironina sódica, liotrix, tiroide. El al menos un antagonista de la hormona tiroidea puede ser al menos uno seleccionado a partir de metimazol, yoduro de poíasio, yoduro de potasio (solución saturada), propilíiouracilo, yodo radioactivo (yoduro de sodio 3 l), solución de yodo fuerte. La al menos una hormona pituiíaria puede ser al menos una seleccionada a partir de corticoíropina, cosiniropina, aceíato de desmofresina, aceíafo de leuprolida, corticoíropina rGLP- Isiíoria, somatrem, somatropina, vasopresina. El al menos un fármaco semejante a la hormona paratiroidea puede ser al menos uno seleccionado a partir de calcifediol, calciíonina (de humano), calciíonina (de salmón), calciíriol, dihidroíaquisíerol, etidronato disódico. (Véase, por ejemplo, pp. 696-796 de Nursing 2001 Drug Handbook.) El al menos un diurético puede ser al menos uno seleccionado a partir de aceíazolamida, aceíazolamida sódica, clorhidrato de amilorida, bumetanida, clortalidona, etacrinato sódico, ácido etacrínico, furosemida, hidroclorotiazida, indapamida, manitol, metolazona, espironolacíona, torsemida, íriamíereno, urea. El al menos un electrolito o solución para reemplazo puede ser al menos una seleccionada a partir de aceíato de calcio, carbonato de calcio, cloruro de calcio, ciíraro de calcio, glubionaío de calcio, gluceptato de calcio, gluconalo de calcio, laclaío de calcio, fosfato de calcio (dibásico), fosfato de calcio (tribásico), dextrán (alto peso molecular), dextrán (bajo peso molecular), hetaalmidón, cloruro de magnesio, sulfaío de magnesio, acefaío de pofasio, bicarbonato de potasio, cloruro de potasio, gluconato de potasio, inyección de Ringer, inyección de Ringer (lactada), cloruro de sodio. El al menos un acidificante o alcalinizante puede ser al menos uno seleccionado a partir de bicarbonaío de sodio, lacíato de sodio, trometamina. (Véase, por ejemplo, , pp. 797-833 de Nursing 2001 Drug Handbook.) El al menos un hematínico puede ser al menos uno seleccionado a partir de fumarafo ferroso, gluconaío ferroso, sulfaío ferroso, sulfato ferroso (seco), hierro dexfrán, hierro sorbilol, complejo de polisacárido-hierro, complejo de gluconafo férrico de sodio. El al menos un aníicoagulante puede ser al menos uno seleccionado a partir de ardeparina sódica, dalteparina sódica, danaparoide sódico, enoxaparina sódica, heparina calcica, heparina sódica, warfarina sódica. El al menos un derivado de sangre puede ser al menos uno seleccionado a partir de albúmina al 5%, albúmina al 25%, factor de aníihemofílico, complejo anfi-inhibiíor coagulante, aníiírombina lll (de humano), factor IX (de humano), complejo IX de humano, fracciones de proteína plasmática. La al menos un enzima trombolítica puede ser al menos una seleccionada a partir de alíeplasa, anisíreplasa, reíeplasa (recombinaní)e, esfrepfoquinasa, uroquinasa. (Véase, por ejemplo, pp. 834-66 de Nursing 2001 Drug Handbook.) El al menos un fármaco alquilante puede ser al menos uno seleccionado a partir de busulfán, carboplaíina, carmusíina, clorambucil, cisplaíina, ciclofosfamida, ifosfamida, lomustina, clorhidrato de mecloretamina melfalan, clorhidrato de melfalan, estrepíozocina, íemozolomida, íioíepa. El al menos un antimetabolito puede ser al menos uno seleccionado a partir de capecilabina, cladribina, citarabina, floxuridina, fosfato de fludarabina, fluorouracilo, hidroxiurea, mercaptopurina, metotrexato, metotrexato sódico, tioguanina. El al menos un antibiótico antineoplásico puede ser al menos uno seleccionado a partir de sulfato de bleomicina, dactinomicina, citrato de daunorubicina liposomal, clorhidrato de daunorubicina, clorhidrato de doxorubicina, clorhidrato de doxorubicina liposomal, clorhidrato de epirubicina, clorhidraío de idarubicina, mitomicina, peníosfaíina, plicamicina, valrubicina. El al menos un antineoplásico que altera el balance hormonal puede ser al menos uno seleccionado a partir de anasírozol, bicalutamida, fosfato de estramustina sódica, exemestano, flutamida, acetato de goserelina, letrozol, acetato de leuprolida, acetaío de megestrol, nilutamida, citralo de íamoxifen, testolacíona, ciíraío de toremifeno. El al menos un antineoplásico mesceláneo puede ser al menos uno seleccionado a partir de asparaginasa, Calmette- Guerin de bacilo (BCG) (intravesical vivo), dacarbazina, docefaxel, etopósido, fosfato de eíopósido, clorhidrato de gemciíabina, clorhidraío de irinoíecano, miíofano, clorhidraío de miíoxanírona, pacliíaxel, pegaspargasa, porfimer sódico, clorhidrato de procarbazina, rifuximab, íenipósido, clorhidrato de topotecano, trastuzumab, treíinoína, sulfaío de vinblastina, sulfato de vincristina, tartraío de vinorelbina. (Véase, por ejemplo, pp. 867-963 de Nursing 2001 Drug Handbook.) El al menos un inmunosupresor puede ser al menos uno seleccionado a partir de azatioprina, basiliximab, ciclosporina, daclizumab, globulina inmune de linfocito, muromonab-CD3, mofetil micofenolato, clorhidrato de mofeíil micofenolato, sirolimus, tacrolimus. La al menos un vacuna o toxoide puede ser al menos una seleccionado a partir de vacuna de BCG, vacuna de cólera, difteria y íoxoides de íéíanos (adsorbido), difteria y toxoides de télanos y vacuna de pertussis acelular adsorbido, difteria y toxoides de tétanos y vacuna de pertussis en célula foíal, vacunas de conjugado de Haemophilius b, vacuna de hepatitis A (inactivada), vacuna de hepatitis B (recombinante), vacuna del virus de la influenza 1999-2000 trivalente tipos A & B (aníígeno purificado de la superficie), vacuna del virus de la influenza 1999-2000 trivaleníe tipos A & B (subvirión o subvirión purificado), vacuna del virus de influenza 1999-2000 trivalente tipos A & B (virión completo), vacuna del virus de la encefalitis japonesa (inactivado), vacuna para la enfermedad de Lyme (recombinantee OspA), vacuna del virus de sarampión y viruela y rubéola (vivo), vacuna del virus de sarampión y viruela y rubéola (vivo atenuado), vacuna del virus de sarampión (vivo atenuado), vacuna del polisacárido meningococcal, vacuna del virus de viruela (vivo), vacuna para la plaga, vacuna pneumococcal (polivalente), vacuna del virus de la polio (inactivado), vacuna del virus de la polio (vivo, oral, trivalente), vacuna de la rabia (adsorbido), vacuna de la rabia (célula diploide de humano), vacuna del virus de rubéola y viruela (vivo), vacuna del virus de rubéola (vivo, atenuado), toxoide del tétanos (adsorbido), toxoide del tétanos (fluido), vacuna de la tifoidea (oral), vacuna de la tifoidea (parenteral), vacuna del polisacárido Vi de la tifoidea, vacuna del virus de la varicela, vacuna de la fiebre amarilla. La al menos una antitoxina o antivenina puede ser al menos una seleccionado a partir de antivenina de la araña viuda negra, antiveneno de Crotalidae (polivalente), antitoxina de la difteria (equina), antivenina de Micrurus fulvius). El al menos un suero inmune puede ser al menos uno seleccionado a partir de globulina inmune de cytomegalovirus (intravenosa), globulina inmune de la hepatitis B (de humano), globulina inmune intramuscular, globulina inmune intravenosa, globulina inmune de la rabia (de humano), globulina inmune del virus respiratorio sincitial intravenoso (de humano), globulina Rh0 (D) (de humano), globulina Rh0 (D) intravenosa (de humano), globulina inmune del tétanos (de humano), globulina inmune de la varicela-zoster. El al menos un modificador de la respuesta biológica puede ser al menos uno seleccionado a partir de aldesleucina, GLP-letin alfa, filgrasíima, aceíaío de glaíiramer para inyección, interferón alfacon-1 , interferón alfa-2a (recombinanfe), inferferón alfa-2b (recombinante), interferón beta-la, interferón beta-Ib (recombinante), interferón gamma-16, clorhidrato de levamisol, oprelvecina, sargramostima. (Véase, por ejemplo, pp. 964-1040 de Nursing 2001 Drug Handbook.) El al menos un oftálmico anti-infeccioso se puede seleccionar a partir de baciíracina, cloramfenicol, clorhidrato de ciprofloxacina, eritromicina, sulfato de geníamicina, ofloxacina al 0.3%, sulfato de polimixina B, sulfacetamida sódica al 10%, sulfacetamida sódica al 15%, sulfacetamida sódica al 30%, tobramicina, vidarabina. El al menos un oftálmico anti-inflamatorio puede ser al menos uno seleccionado a partir de dexameíasona, fosfato de dexametasona sódica, diclofenac sódico al 0.1 %, fluorometolona, flurbiprofen sódico, cetorolac írometamina, acelaío de prednisolona (suspensión) fosfato de prednisolona sódica (solución). El al menos un mitótico puede ser al menos uno seleccionado a partir de cloruro de acetilcolina , carbacol (intraocular), carbacol (tópico), yoduro de ecotiofato, pilocarpina, clorhidrato de pilocarpina, nitrato de pilocarpina. El al menos un midriático puede ser al menos uno seleccionado a partir de sulfato de atropina, clorhidrato de ciclopentolato, clorhidraío de epinefrina, borato de epinefrilo, bromhidrato de homatropina, clorhidraío de fenilefrina, bromhidrato de escopolamina, tropicamida. El al menos un oftálmico vasoconstrictor puede ser al menos uno seleccionado a partir de clorhidrato de nafazolina, clorhidrato de oximetazolina, clorhidrato de tetrahidrozolina. El al menos un oftálmico misceláneo puede ser al menos uno seleccionado a partir de un clorhidrato de praclonidina, clorhidraío de beíaxolol, tartrafo de brimonidina, clorhidrato de carteolol, clorhidrato de dipivefrina, clorhidrato de dorzolamida, difumarato de emedasíina, fluoresceína sódica, fumaraío de cetoíifen, latanoprost, clorhidraío de levobunolol, clorhidrato de melipranolol, cloruro de sodio (hipertónico), maleaío de íimolol. El al menos un ótico puede ser al menos uno seleccionado a partir de ácido bórico, peróxido de carbamida, cloramfenicol, polipépíido írietanolamina oleato-condensado. El al menos un fármaco nasa! puede ser al menos uno seleccionado a partir de dipropionato de beclometasona, budesonida, sulfato de efedrina, clorhidrato de epinefrina, flunisolida, propionato de fluticasona, clorhidrato de nafazolina, clorhidrato de oximeíazolina, clorhidrato de fenilefrina, clorhidraío de íeírahidrozolina, acetonido de triamcinolona, clorhidrato de xilomeíazolina. (Véase, por ejemplo, pp. 1041-97 de Nursing 2001 Drug Handbook.) El al menos un anti-infeccioso local puede ser al menos uno seleccionado a partir de aciclovir, amfotericina B, crema del ácido azeláico, baciíracina, niíraío de buíoconazol, fosfato de clindamicina, cloírimazol, niíraío de econazol, eriíromicina, sulfaío de genfamicina, ceíoconazol, aceíaío de mafenida, meíronidazol (tópico), niírafo de miconazol, mupirocina, clorhidrato de naftifina, sulfaío de neomicina, niírofurazona, nisíafina, sulfadiazina de plata, clorhidrato de terbinafina, terconazol, clorhidrato de tetraciclina, tioconazol, tolnaftato. El al menos un escabicida o pediculicida puede ser al menos uno seleccionado a partir de croíamiíon, lindano, permetrina, y pireírinas. El al menos un corticosteroide tópico puede ser al menos uno seleccionado a partir de dipropionato de betamefasona, valeralo de belameíasona, propionaío de clobefasol, desonida, desoximeíasona, dexameíasona, fosfato de dexameíasona sódica, diacetato de diflorasona, acetónido de fluocinolona, fluocinonida, flurandrenolida, propionafo de fluticasona, halcionida, hidrocortisona, acéfalo de hidrocortisona, butirato de hidrocortisona, valerato de hidrocorisona, furcato de mometasona, acetónido de triamcinolona. (Véase, por ejemplo, pp. 1098-1136 de Nursing 2001 Drug Handbook.) La al menos un vitamina o mineral puede ser al menos uno seleccionado a partir de vitamina A, complejo de vitamina B, cianocobalamina, ácido fólico, hidroxocobalamina, leucovorina calcica, niacina, niacinamida, clorhidrato de piridoxina, riboflavina, clorhidrato de tiamina, vitamina C, vitamina D, colecalciferol, ergocalciferol, análogo de vitamina D, doxercalciferol, paricalcitol, vitamina E, análogo de vitamina K, fitonadiona, fluoruro de sodio, fluoruro de sodio (tópica), elementos íraza, cromio, cobre, yodo, manganeso, selenio, zinc. El al menos un calórico puede ser al menos uno seleccionado a partir de infusiones de aminoácido (cristalino), infusiones de aminoácido en dexírosa, infusiones de aminoácido con electrolitos, infusiones de aminoácido con elecírolifos en dexírosa, infusiones de aminoácido para insuficiencia hepática, infusiones de aminoácido para alio esírés metabólico, infusiones de aminoácido para insuficiencia renal, dextrosa, emulsiones de grasa, triglicéridos de cadena media. (Véase, por ejemplo, pp. 1137-63 de Nursing 2001 Drug Handbook.) La presente invención también provee al menos una de cualquier cantidad adecuada y/o efectiva de una composición o composición farmacéuíica que comprende al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante, opcionalmente comprende de manera adicional una cantidad efectiva de al menos un compuesío adicional, proíeína o composición seleccionado a partir de al menos un aníagonisía de TNF (por ejemplo, pero no se limita a un antagonisía TNF químico o proteína, aníicuerpo de TNF monoclonal o policlonal o fragmento, un receptor de TNF soluble (por ejemplo, p55, p70 o p85) o fragmento, polipépíidos de fusión de los mismos, o un anfagonista pequeño de la molécula de TNF, por ejemplo, proteína I o II de unión a TNF (TBP-1 o TBP-II), nerelimonmab, infliximab, enteracepí, CDP-571 , CDP-870, afelimomab, lenercepí, y los similares), un aníireumáíico (por ejemplo, meíoírexafo, auranofina, auroíioglucosa, azatioprina, etanercept, tiomalaíe sódico de oro, sulfaío de hidroxicloroquina, leflunomida, sulfasalzina), un relajante muscular, un narcótico, un fármaco inflamatorio no esteroideo (NSAID), un analgésico, un anestésico, un sedante, un anestésico local, un bloqueador neuromuscular, un anfimicrobiano (por ejemplo, aminoglicósido, un antifungal, un antiparasiíario, un aníiviral, un carbapenem, cefalosporina, una fluroroquinolona, un macrólido, una penicilina, una sulfonamida, una feíraciclina, oíro antimicrobiano), un antipsoriático, un corticosferoide, un esferoide anabólico, un agente relacionado con la diabetes, un mineral, un nulrilional, un agente tiroideo, una vifamina, una hormona relacionada con el calcio, un antidiarréico, un antilusivo, un antiemético, un aníiúlcera, un laxante, un anticoagulante, una eritropoieiíina (por ejemplo, epoeíina alfa), una filgrastima (por ejemplo, G-CSF, Neupogeno), una sargramostima (GM-CSF, Leuquina), una inmunización, una inmunoglobulina, un inmunosupresor (por ejemplo, basiliximab, ciclosporina, daclizumab), una hormona de crecimiento, un fármaco para reemplazo hormonal, un modulador del receptor de estrógeno, un midriático, un cicloplégico, un agente alquilante, un antimetaboliío, un inhibidor mitótico, un radiofarmacéutico, un antidepresivo, un agente aníimaníaco, un aníipsicóíico, un ansiolítico, un hipnótico, un simpaíomiméíico, un estimulante, donepezil, tacrina, un medicamento para el asma, un agonista beta, un esteroide inhalado, un inhibidor de leucotrieno, una metilxanfina, una cromolina, una epinefrina o análogo, domase alfa (Pulmozyme), una ciíoquina o un anfagonisfa de citoquina. Los ejemplos no limilaníes de dichas citoquinas incluyen, pero no se limiían a, cualquiera de IL-1 a IL-23. Las dosis adecuadas se conocen bien en la íécnica. Véase, por ejemplo, Wells el al., eds., Pharmacofherapy Handbook, 2a Edición, Appleton and Lange, Stamford, CT (2000); PDR Pharmacopoeia, Tarascón Pocket Pharmacopoeia 2000, Edición de lujo, Tarascón Publishing, Loma Linda, CA (2000), cada una de dichas referencias se incorporan completamente en la presente invención como referencias. Dichas composiciones también pueden incluir moléculas de toxina que están asociadas, unidas, co-formuladas o co-administradas con al menos un anticuerpo o polipéptido de la presente invención. La toxina puede actuar opcionalmente para eliminar selectivamente a la célula o tejido palogénicp. La célula patológica puede ser una célula cancerosa u otro tipo de célula. Dichas toxinas pueden ser, pero no se limitan a, toxina o fragmento de toxina purificado o recombinante que comprende al menos un dominio funcional citotóxico de toxina, por ejemplo, seleccionado a partir de al menos uno de ricina, toxina de difteria, una toxina de veneno, o a una toxina bacteriana. El término toxina también incluye íanfo endotoxinas como exoíoxinas producidas medianíe cualquier bacteria o virus que se presente de manera natural, muíante o recombinante los cuales pueden ocasionar cualquier condición patológica en humanos y otros mamíferos, incluyendo choque por toxina, lo cual puede resultar en la muerte. Dichas toxinas pueden incluir, pero no se limilan a, eníeroíoxina lábil al calor de E. coli eníeroíoxigénica (LT), enteroíoxina esfable al calor (ST), cifoíoxina de Shigella, eníeroíoxinas de Aeromonas, íoxina-1 del síndrome de choque por toxina (TSST-1), enterotoxina A estafilococcal (SEA), B (SEB), o C (SEC), eníeroíoxinas eslreplococcal y las similares. Dichas bacterias incluyen, pero no se limiten a, cepas de una especie de E. coli eníerotoxigénica (ETEC), E. coli eníerohemorrágica (por ejemplo, cepas de seroíipo 0157: H7), especies de Staphylococcus (por ejemplo, Staphylococcus aureus, Síaphylococcus pyogenes), especies de Shigella (por ejemplo, Shigella dyseníeriae, Shigella flexneri, Shigella boydii, y Shigella sonnei), especies de Salmonella (por ejemplo, Salmonella typhi, Salmonella cholera-suis, Salmonella enteritidis), especies de Clostridium (por ejemplo, Clostridium perfringens, Clostridium dificile, Clostridium bolulinum), especies de Camphylobacíer (por ejemplo, Camphylobacíer jejuni, Camphylobacíer fetus), especies de Helicobacter (por ejemplo, Helicobacíer pylori), especies de Aeromonas (por ejemplo, Aeromonas sobria, Aeromonas hydrophila, Aeromonas caviae), Pleisomonas shigelloides, Yersina eníerocoliíica, especies de Vibrios (por ejemplo Vibrios cholerae, Vibrios parahemolyíicus), especies de Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa, y Streptococci. Véase, por ejemplo, Stein, ed., Intemal Medicine, 3a edición, pp 1-13, Litíle, Brown and Co., Boston, (1990); Evans et al., Bacterial Infections of Humans: Epidemiology and Conírol, 2a edición, pp 239-254, Plenum Medical Brook Co., New York (1991 ); Mandell ef al., Principies and Practice of Infectious Diseases, 3a Edición, Churchill Livingsíone, New York (1990); Berkow eí al., eds., The Merck Manual, 16a edición, Merck and Co., Rahway, N.J., 992; Woods eí al, FEMS Microbiology Immunology, 76: 121-134 (1991 ); Marrack eí al, Science, 248: 705-711 (1990), los contenidos de dichas referencias se incorporan compleíamente en la presente invención como referencias. Las composiciones de mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la presente invención pueden comprender adicionalmente al menos uno de cualesquiera auxiliares adecuados, teles como, pero no limitados a, diluyente, aglutinante, estabilizante, reguladores de pH, sales, solventes lipófilos, conservadores, adjuvantes o los similares. Se prefieren los auxiliares farmacéuficameníe aceptables. Los ejemplos no limifaníes de, y méíodos para la preparación de dichas soluciones estériles se conocen bien en la técnica, tales como, pero no limitados a, Gennaro, Ed., Remingfon's Pharmaceufical Sciences, 18a Edición, Mack Publishing Co. (Easíon, PA) 1990. Los vehículos farmacéuíicameníe acepíables se pueden seleccionar de manera rufinaria de manera que sean adecuados para el modo de adminisíración, solubilidad y/o esíabilidad de la composición de mimeíicuerpo GLP-1 como se sabe en la lécnica o como se describe en la presente invención. Los excipientes y aditivos farmacéuticos útiles en la presente composición incluyen pero no se limitan a proteínas, péptidos, aminoácidos, lípidos, y carbohidratos (por ejemplo, azúcares, incluyendo monosacáridos, di-, tri-, tetra-, y oligosacáridos; derivados de azúcares tales como alditoles, ácidos aldónicos, azúcares especificadas y los similares; y polisacáridos o polímeros de azúcar), los cuales pueden estar presentes particularmente o en combinación, que comprenden solos o en combinación 1-99.99% en peso o volumen. Los excipientes de proteínas ejemplares incluyen albúmina de suero tales como albúmina de suero de humano (HSA), albúmina recombinante de humano (rHA), gelatina, caseína, y los similares. Los componentes representaíivos del aminoácido/mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante, los cuales también pueden funcionar en una capacidad para regulación de pH, incluyen alanina, glicina, arginina, betaína, histidina, ácido glufámico, ácido aspártico, cisteína, lisina, leucina, isoleucina, valina, metionina, fenilalanina, aspartame, y los similares. Un aminoácido preferido es la glicina.

Los excipientes de carbohidrato adecuados para uso en la invención incluyen, por ejemplo, monosacáridos íales como fructosa, maltosa, galactosa, glucosa, D-manosa, sorbosa, y los similares; disacáridos, tales como lactosa, sacarosa, írehalosa, celobiosa, y las similares; polisacáridos, tales como rafinosa, melezitosa, maltodexlrinas, dexlranes, almidones, y los similares; y alditoles, tales como manitol, xilitol, maltitol, lactitol, xilitol sorbitol (glucitol), mioinositol y los similares. Los excipientes de carbohidratos preferidos para uso en la presente invención son manitol, trehalosa, y rafinosa. Las composiciones de mimeficuerpo GLP-1 íambién pueden incluir un regulador de pH o un ageníe para el ajuste de pH; lípicamente, el regulador de pH es una sal preparada a partir de un ácido o base orgánica. Los reguladores de pH representativos incluyen sales de ácidos orgánicos tales como salts de ácido cítrico, ácido ascórbico, ácido glucónico, ácido carbónico, ácido íartárico, ácido succínico, ácido acético, o ácido itálico; Tris, clorhidrato de tromethamina, o reguladores de pH de fosfato. Los reguladores de pH preferidos para uso en las presentes composiciones son sales de ácidos orgánicos íales como ciíraío. Adicionalmeníe, las composiciones de mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la invención pueden incluir excipientes poliméricos/adiíivos íales como polivinilpirrolidonas, ficoles (un azúcar polimérico), dexíraíos (por ejemplo, ciclodexírinas, íales como 2-hidroxipropil-(3-ciclodexírina), poliefilenglicoles, ageníes saborizaníes, agentes aníimicrobianos, edulcorantes, aníioxidanfes, ageníes aníiesíáíicos, ageníes íensioaclivos (por ejemplo, polisorbaíos íales como "TWEEN 20" y "TWEEN 80"), lípidos (por ejemplo, fosfolípidos, ácidos grasos), esteroides (por ejemplo, colesterol), y agentes quelaníes (por ejemplo, EDTA). Esíos excipientes y/o aditivos farmacéuticos conocidos y los adicionales adecuados para uso en las composiciones de mimeticuerpo GLP- 1 de conformidad con la invención son como se sabe en la técnica, por ejemplo, como se lisia en "Remingfon: The Science & Practice of Pharmacy", 19a edición, Williams & Williams, (1995), y en la "Physician's Desk Reference", 52a edición, Medical Economics, Monlvale, NJ (1998), las descripciones de los cuales se incorporan compleíameníe en la presente invención como referencias. Los materiales vehículos o excipientes preferidos son carbohidratos (por ejemplo, sacáridos y alditoles) y reguladores de pH (por ejemplo, citrato) o agentes poliméricos. Formulaciones. Como se mencionó anteriormente, la invención se provee para formulaciones esíables, las cuales preferiblemente pueden incluir un regulador de pH adecuado con solución salina o una sal elegida, así como soluciones conservadas opcionales y formulaciones que contienen un conservador así como formulaciones conservadas para múltiples usos adecuadas para uso farmacéutico o veterinario, que comprenden al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante en una formulación farmacéuticamente acepíable. Las formulaciones conservadas contienen al menos un conservador conocido u opcionalmente seleccionado a partir del grupo que consiste de al menos un fenol, m-cresol, p-cresol, o-cresol, clorocresol, bencil alcohol, nitrito fenilmercúrico, fenoxietanol, formaldehído, clorobutanol, cloruro de magnesio (por ejemplo, hexahidraíado), alquilparaben (metilo, eíilo, propilo, bufilo y los similares), cloruro de benzalconio, cloruro de benzetonio, dehidroacetato de sodio y timerosal, o mezclas de los mismos en un diluyente acuoso. Se puede uíilizar cualquier concenfración o mezcla adecuada como se sabe en la técnica, tales como 0.001-5%, o cualquier intervalo o valor en éste, fales como, pero no limiíados a 0.001, 0.003, 0.005, 0.009, 0.01 , 0.02, 0.03, 0.05, 0.09, 0.1 , 0.2, 0.3, O.4., 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1.0, 1.1 , 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.1 , 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3.0, 3.1 , 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4.0, 4.3, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, o cualquier intervalo o valor en éste. Los ejemplos no limitantes incluyen, sin conservador, 0.1-2% de m-cresol (por ejemplo, 0.2, 0.3. 0.4, 0.5, 0.9, 1.0%), 0.1-3% de bencil alcohol (por ejemplo, 0.5, 0.9, 1.1 , 1.5, 1.9, 2.0, 2.5%), 0.001-0.5% de timerosal (por ejemplo, 0.005, 0.01 ), 0.001-2.0% de fenol (por ejemplo, 0.05, 0.25, 0.28, 0.5, 0.9, 1.0%), 0.0005-1.0% de alquilparabeno(s) (por ejemplo, 0.00075, 0.0009, 0.001 , 0.002, 0.005, 0.0075, 0.009, 0.01 , 0.02, 0.05, 0.075, 0.09, 0.1 , 0.2, 0.3, 0.5, 0.75, 0.9, 1.0%), y los similares. Como se mencionó anteriormente, la invención provee un artículo de elaboración, que comprende material para empaquetamiento y al menos un vial que comprende una solución de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante con los reguladores de pH prescritos y/o conservadores, opcionalmente en un diluyente acuoso, en donde dicho maíerial para empaqueíamienío comprende una marca que indica que dicha solución puede ser mantenida durante un periodo de 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 9, 12, 18, 20, 24, 30, 36, 40, 48, 54, 60, 66, 72 horas o más. La invención comprende adicionalmente un artículo de elaboración, que comprende maíerial para empaquetamiento, un primer vial que comprende en forma liofilizado al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante, y un segundo vial que comprende un diluyente acuoso de regulador de pH prescritos o conservador, en donde dicho material para empaqueíamienío comprende un insfructivo que instruye al paciente para reconsíruir el al menos un mimeficuerpo GLP-1 o porción especificada o variante en el diluyente acuoso para formar una solución que se puede mantener durante un periodo de veinticuatro horas o mayor. El al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante utilizada de conformidad con la presente invención se puede producir mediante medios recombinantes, incluyendo a partir de preparaciones de célula de mamífero o preparaciones transgénicas, o se pueden purificar a partir de ofras fuentes biológicas, como se describe en la presente invención o como se sabe en la técnica. El intervalo de caníidades de al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante en el producto de la presente invención incluye cantidades producidas después de la reconstiíución, si se encueníran en un sistema húmedo/seco, concentraciones de aproximadamente 1.0 µg/ml a aproximadamente 1000 mg/ml, aunque concentraciones menores y mayores son operables y son dependientes del vehículo para administración pretendido, por ejemplo, las formulaciones en solución diferirán a partir los métodos del parche transdermal, pulmonar, transmucosal, u osmótico o micro bomba. Preferiblemente, el diluyente acuoso opcionalmente comprende adicionalmente un conservador farmacéuticamente aceptable. Los conservadores preferidos incluyen aquellos seleccionados a partir del grupo que consiste de fenol, m-cresol, p-cresol, o-cresol, clorocresol, bencil alcohol, alquilparaben (metilo, etilo, propilo, butilo y los similares), cloruro de benzalconio, cloruro de benzetonio, dehidroacetafo de sodio y íimerosal, o mezcla de los mismos. La concentración de conservadores utilizados en la formulación es una conceníración adecuada para producir un efecto antimicrobiano. Dichas concentraciones son dependientes del conservador seleccionado y se determinen fácilmente por el experto en la técnica. Otros excipientes, por ejemplo agenfes para isotonicidad, reguladores de pH, anfioxidaníes, mejoradores de la conservación, se pueden añadir opcionalmenle y preferiblemeníe al diluyente. Un agente para isotonicidad, tales como glicerina, comúnmente se utiliza a concentraciones conocidas. Un regulador de pH fisiológicamente tolerado preferiblemente se añade para proveer un control mejorado del pH. Las formulaciones pueden abarcar un amplio intervalo de pHs, tales como de aproximadamente pH 4 a aproximadamente pH 10, e intervalos preferidos de aproximadamente pH 5 a aproximadamente pH 9, y un intervalo más preferido de aproximadamente 6.0 a aproximadameníe 8.0. Preferiblemente las formulaciones de la preseníe invención tienen un pH eníre aproximadamente 6.8 y aproximadamente 7.8. Los reguladores de pH preferidos incluyen reguladores de pH de fosfato, más a preferiblemente de fosfato de sodio, particularmente solución salina con pH regulado con fosfato (PBS). Se pueden añadir otros aditivos, tales como solubilizantes farmacéuticamente aceptables semejantes a Tween 20 (monolaurato de polioxietilen (20) sorbiíano), Tween 40 (monopalmilafo de polioxieíilen (20) sorbiíano), Tween 80 (monooleato de polioxietilen (20) sorbiíano), Pluronic F68 (copolímeros en bloque de polioxieíileno polioxipropileno), y PEG (polietilenglicol) o agentes tensioactivos no iónicos tales como polisorbafo 20 o 80 o poloxámero 184 o 188, Pluronic® polils, oíros copolímeros en bloque, y quelantes tales como EDTA y EGTA se pueden añadir opcionalmeníe a las formulaciones o composiciones para reducir la agregación. Estos aditivos son particularmente útiles si se utiliza una bomba o un contenedor plástico para administrar la formulación. La presencia de agente tensioactivo farmacéuticamente aceptable mitiga la propensión de la profeína a agregarse. Las formulaciones de la presente invención se pueden preparar mediante un procedimienío el cual comprende la mezcla de al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante y un conservador seleccionado a partir del grupo que consiste de fenol, m-cresol, p-cresol, o-cresol, clorocresol, bencil alcohol, alquilparaben, (metilo, etilo, propilo, butilo y los similares), cloruro de benzalconio, cloruro de benzeíonio, dehidroaceíafo de sodio y íimerosal o mezclas de los mismos en un diluyeníe acuoso. La mezcla de al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante y un conservador en un diluyeníe acuoso se lleva a cabo uíilizando procedimientos convencionales de disolución y mezclado. Para preparar una formulación adecuada, por ejemplo, una canfidad medida de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante en solución con pH regulado se combinó con el conservador deseado en una solución con pH regulado en cantidades adecuadas para proveer la proteína y el conservador a las conceníraciones deseadas. Las variaciones de este procedimiento podrían ser reconocidas por un experto en la íécnica. Por ejemplo, el orden en que se añaden los componentes, si se utilizan aditivos adicionales, la temperaíura y pH a los cuales se prepara la formulación, son lodos factores que pueden ser optimizados para la concentración y medios de administración utilizados. Las formulaciones reclamadas se pueden proveer a pacientes como soluciones claras o como viales duales que comprenden un vial de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante liofilizada que se reconstituye con un segundo vial que contiene agua, un conservador y/o excipientes, preferiblemente un regulador de pH con fosfato y/o solución salina y una sal elegida, en un diluyente acuoso. Ya sea un vial con una solución particular o un vial dual que quiere reconstitución se puede reutilizar múltiples veces y puede ser suficiente para un ciclo particular o para múltiples ciclos de íraíamienío al paciente y por lo íanío puede proveer un régimen de tratamiento más conveniente que el acfualmeníe disponible. Los presentes artículos de elaboración reclamados son útiles para la administración durante un período de inmediatamente a veiníicuafro horas o mayor. Por consiguiente, los artículos de elaboración acíualmeníe reclamados ofrecen veníajas significativas al paciente. Las formulaciones de la invención se pueden almacenar opcionalmenfe de manera segura a temperaturas de aproximadamente 2 a aproximadamente 40°C y retienen ia actividad biológica de la proíeína por períodos de tiempo extendidos, por lo tanío, permitiendo que un instructivo en el empaque indique que la solución puede ser mantenida y/o utilizada duraníe un período de 6, 12, 18, 24, 36, 48, 72, o 96 horas o mayor. Si se utiliza un diluyente conservador, dicho instructivo puede incluir el uso por hasía al menos uno de 1-12 meses, medio, uno y medio, y/o dos años. Las soluciones de al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante en la invención se pueden preparar mediante un procedimiento que comprende la mezcla de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante en diluyente acuoso. La mezcla se lleva a cabo uíilizando procedimientos de disolución y mezclado convencionales. Para preparar un diluyeníe adecuado, por ejemplo, una caníidad medida de al menos un mimeficuerpo GLP-1 o porción especificada o variante en agua o en regulador de pH se combina en caníidades adecuadas para proveer la proíeína y opcionalmeníe un conservador o regulador de pH a las concentraciones deseadas. Las variaciones de este procedimiento se podrían reconocer por un experto en la íécnica. Por ejemplo, el orden en el que los componentes se añaden, si se utilizan aditivos adicionales, la temperatura y pH a los cuales se prepara la formulación, son todos factores que pueden ser opíimizados para la concentración y medios de administración utilizados. Los producios reclamados se pueden proveer a los pacientes como soluciones claras o como viales duales que comprenden un vial de al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante liofilizada que se reconstiíuye con un segundo vial que coníiene el diluyente acuoso. Ya sea un vial con una solución particular o un vial dual que quiere reconsfifución se puede reuíilizar múlíiples veces y puede ser adecuado para un ciclo particular o para múlíiples ciclos de tratamiento al paciente y por lo tanto provee un régimen de traíamienlo más convenieníe que el acíualmente disponible. Los productos reclamados se pueden proveer indirecíameníe los pacientes medianíe la provisión a las farmacias, clínicas, u otras de dichas instiíuciones e instalaciones, soluciones claras o viales duales que comprenden un vial de al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante liofilizada que se reconsíiíuye con un segundo vial que contiene el diluyente acuoso. La solución clara en este caso puede ser de hasta un litro o incluso mayor en tamaño, proveyendo un gran recipiente a partir del cual se pueden retirar porciones más pequeñas de al menos una solución de mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante una o múltiples veces para la transferencia dentro de viales más pequeños y se provee de la farmacia o clínica a sus clientes y/o pacientes. Los dispositivos reconocidos que comprenden estos sistemas de viales particulares incluyen aquellos dispositivos de inyectores en pluma para la administración de una solución tales como Humajecí®, NovoPen®, B- D®Pen, AuíoPen®, y Opíimen®. Los disposifivos reconocidos que comprenden un sistema vial dual incluyen aquellos sistemas inyectores en pluma para la reconstitución de un fármaco liofilizado en un cartucho para la adminisíración de la solución reconsíiíuida íales como el HumaíroPen®. Los productos actualmeníe reclamados incluyen materiales para empaquetamiento. El material para empaquetamiento provee, además de la información requerida por las agencias reguladoras, las condiciones bajo las cuales se puede uíilizar el producío. El maíerial para empaqueíamienío de la presente invención provee instrucciones al paciente para reconstiíuir el al menos un mimeficuerpo GLP-1 o porción especificada o variante en el diluyente acuoso para formar una solución y para uíilizar la solución durante un período de 2-24 horas o mayor para el segundo vial, peso/seco, producfo. Para el vial particular, producfo en solución, el instructivo indica que dicha solución se puede utilizar durante un período de 2-24 horas o mayor. Los productos actualmente reclamados son úíiles para el uso de un producto farmacéutico para humano. Las formulaciones de la presente invención se pueden preparar mediante un procedimiento que comprende la mezcla de al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante y un regulador de pH seleccionado, preferiblemente una solución salina que contiene regulador de pH de fosfato o una sal elegida. La mezcla de al menos un mimeticuerpo GLP- 1 o porción especificada o variante y el regulador de pH en un diluyente acuoso se lleva a cabo uíilizando procedimientos convencionales para disolución y mezclado. Para preparar una formulación adecuada, por ejemplo, una caníidad medida de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante en agua o en regulador de pH se combina con el agente regulador de pH deseado en agua en canfidades adecuadas para proveer la proíeína y el regulador de pH a las concentraciones deseadas. Las variaciones de este procedimiento podrían ser reconocidas por un experto en la técnica. Por ejemplo, el orden en que los componentes se añaden, si se utilizan aditivos adicionales, la íemperaíura y pH a los cuales se prepara la formulación, son todos factores que pueden ser optimizados para la conceníración y medios de adminisíración utilizados. Las formulaciones esíables o conservadas reclamadas se pueden proveer a pacientes como soluciones claras o como viales duales que comprenden un vial de al menos un mimeficuerpo GLP-1 o porción especificada o variante liofilizada que se reconstituye con un segundo vial que contiene un conservador o regulador de pH y excipientes en un diluyente acuoso. Ya sea un vial con una solución particular o un vial dual que quiere reconstiíución éste puede ser reulilizado múlíiples veces y puede ser adecuado para ciclos particulares o múltiples para fraíamienlo al paciente y por lo lanío provee un régimen de fratamiento más conveniente que el actualmente disponible. Al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante en cualesquiera formulaciones o soluciones estables o conservadas descritas en la preseníe invención, se pueden adminisírar a un paciente de conformidad con la presente invención vía una variedad de méíodos para adminisíración incluyendo inyección SC o IM; adminisíración transdermal, pulmonar, transmucosal, implante, bomba osmóíica, cartucho, micro bomba, u oíros medios apreciados por el experto en la tecnica, como se sabe en la lécnica. Aplicaciones terapéuticas. La presente invención para mimeficuerpos íambién provee un método para la modulación o el tratamiento de la diabetes, diabetes mellitus tipo I o íipo II, incluyendo diabetes de inicio en adulto o juvenil, dependiente de insulina, no dependiente de insulina, y las similares, incluyendo los signos y síntomas asociados, tales como pero no limitados a, resistencia a insulina, hipergiucemia, hipoglucemia, pancreatitis, síndrome de Sushing, acanthosis nigricans, diabetes lipoatrófica, relinopaíía, nefropaíía, polineuropaíía, mononeuropaíía, neuropaíía autonómica, úlceras, úlceras del pie, problemas con las articulaciones, infecciones (por ejemplo, fúngales o bacterianas), y los similares, en una célula, tejido, órgano, animal, o paciente. La preseníe invención íambién provee un méíodo para la modulación o tratamiento de al menos una enfermedad relacionada con el sistema inmune asociada con la diabetes, en una célula, íejido, órgano, animal, o paciente incluyendo, pero no limilado a, al menos una diabetes melliíus de íipo I o lipo II, incluyendo diabetes de inicio en adulto o juvenil, dependiente de insulina, no dependiente de insulina, y las similares, incluyendo los signos y síntomas asociados, tales como pero no limiíados a, resistencia a insulina, hipergiucemia, hipoglicemia, pancreatitis, síndrome de Sushing, acanthosis nigricans, diabetes lipoatrófica, retinopatía, nefropatía, polineuropatía, mononeuropalía, neuropatía autonómica, úlceras, úlceras del pie , problemas con las articulaciones, infecciones (por ejemplo, fúngales o bacterianas), y las similares. Véase, por ejemplo, the Merck Manual, ediciones 12a-17a, Merck & Company, Rahway, NJ (1972, 1977, 1982, 1987, 1992, 1999), Pharmacotherapy Handbook, Wells et al., eds., segunda edición, Appleton and Lange, Sfamford, Conn. (1998, 2001 ), cada una completamente incorporada como referencia. Dicho método puede comprender opcionalmente la adminisíración de una cantidad efecíiva de al menos una composición o composición farmacéutica que comprende al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante a una célula, íejido, órgano, animal o paciente que necesite de dicha modulación, traíamienío o íerapia. La presente invención lambién provee un méíodo para la modulación o tratamiento de al menos una enfermedad cardiovascular en una célula, tejido, órgano, animal, o paciente, incluyendo, pero no limifada a, al menos uno de síndrome de arresto cardiaco, infarto al miocardio, insuficiencia cardiaca congesíiva, accidente cerebrovascular, accidente cerebrovascular isquémico, hemorragia, arteriosclerosis, aíeroesclerosis, enfermedad arterioescleróíica diabéfica, hipertensión, hipertensión arterial, hipertensión renovascular, síncope, choque, sífilis del sistema cardiovascular, insuficiencia cardiaca, cor pulmonal, hipertensión pulmonar primaria, arriímias cardiacas, latidos ectópicos aíriales, reverberación atrial, fibrilación atrial (sostenida o paroxismal), taquicardia atrial caótica o multifocal, taquicardia QRS regular estrecha, arritmias específicas, fibrilación ventricular, arritmias del haz His, bloqueo atriovenfricular, bloqueo del haz en rama, frasíornos isquémicos miocardiales, enfermedad de la arteria coronaria, angina de pecho, infarto al miocardio, cardiomiopaíía, cardiomiopaíía congesfiva dilaíada, cardiomiopafía resíricíiva, enfermedades cardiacas valvulares, endocarditis, enfermedad pericardial, tumores cardiacos, aneurismas aórticos y periféricos, disección aórtica, inflamación de la aorta, oclusión de la aorta abdominal y sus ramificaciones, íraslomos vasculares periféricos, írasíornos arteriales oclusivos, enfermedad arteriosclerótica periférica, tromboangitis obliterans, trastornos arteriales periféricos funcionales, fenómeno y enfermedad de Raynaud, acrocianosis, eritromelalgia, enfermedades venosas, trombosis venosa, venas varicosas, físíula arteriovenosa, linfedema, lipedema, angina inesfable, lesión por reperfusión, síndrome posí bomba, lesión por reperfusión isquémica, y los similares. Dicho méíodo puede comprender opcionalmenfe la administración de una cantidad efectiva de una composición o composición farmacéuíica que comprende al menos un mimelicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante a una célula, tejido, órgano, animal o paciente que necesite de dicha modulación, frafamienío o íerapia. Cualquier método de la preseníe invención puede comprender la administración de una cantidad efectiva de una composición o composición farmacéutica que comprende al menos un mimelicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante a una célula, tejido, órgano, animal o paciente que necesite de dicha modulación, tratamiento o terapia. Dicho método puede comprender adicionalmente de manera opcional la co-administración o terapia de combinación para el íraíamienlo de dichas enfermedades inmunes, en donde la administración de dicho al menos un mimeticuerpo GLP-1 , porción especificada o variante del mismo, comprende adicionalmente la administración, antes, concurrentemente, y/o después, de al menos uno seleccionado a partir de al menos un anfagonisía de TNF (por ejemplo, pero no se limita a un anticuerpo o fragmento de TNF, un receptor TNF soluble o fragmento, proteínas de fusión de los mismos, o un aníagonista de TNF de molécula pequeña), un antireumático, un relajante muscular, un narcótico, un fármaco anti-inflamaíorio no esteroideo (NSAID), un analgésico, un anestésico, un sedante, un anestésico local, un bloqueador neuromuscular, un antimicrobiano (por ejemplo, aminoglicósido, un antifungal, un aníiparasiíario, un antiviral, un carbapenem, cefalosporina, una flurorquinolona, un macrólido, una penicilina, una sulfonamida, una íeíraciclina, oíro antimicrobiano), un aníipsoriáíico, un corticosíeroide, un esteroide anabólico, un agente relacionado con la diabetes, un mineral, un nutricional, un agente tiroideo, una vitamina, una hormona relacionada con el calcio, un antidiarréico, un antitusivo, un antiemético, un antiúlcera, un laxante, un anticoagulante, una erifropoieiíina (por ejemplo, GLP-leíin alfa), una filgrasíima (por ejemplo, G-CSF, Neupogen), una sargramostima (GM-CSF, Leuquina), una inmunización, una inmunoglobulina, un inmunosupresor (por ejemplo, basiliximab, ciclosporina, daclizumab), una hormona de crecimiento, un fármaco para reemplazo hormonal, un modulador del receptor de estrógeno, un midriático, a cicloplégico, un agente alquilante, un anlimeíaboliío, un inhibidor mitótico, un radiofarmacéutico, un antidepresivo, un agente antimaníaco, un aníipsicóíico, un ansiolííico, un hipnótico, un simpaíomimélico, un esíimulaníe, donepezil, tacrina, un medicamento para el asma, un agonista beía, un esteroide inhalado, un inhibidor de leucofrieno, una metilxantina, una cromolina, una epinefrina o análogo, dornasa alfa (Pulmozyme), una citoquina o un antagonisía de citoquina. Las dosis adecuadas se conocen bien en la técnica. Véase, por ejemplo, Wells et al., eds., Pharmacotherapy Handbook, 2a Edición, Appleíon y Lange, Síamford, CT (2000); PDR Pharmacopoeia, Tarascón Pocket Pharmacopoeia 2000, Edición de lujo, Tarascón Publishing, Loma Linda, CA (2000), cada una de dichas referencias se incorporan completamente en la preseníe invención como referencias. Los mimeticuerpos también se pueden uíilizar ex vivo, fales como en culíivos auíologous de médula. Brevemente, la médula ósea se remueve a partir de un paciente antes de la quimioterapia y se íraía con TPO y/o GLP-1 , opcionalmente en combinación con mimeticuerpos, opcionalmeníe en combinación con una o más ciloquinas adicionales. La médula trafada se regresa entonces al paciente después de la quimioíerapia para acelerar la recuperación de la médula. Además, TPO, solo y en combinación con mimeticuerpos GLP-1 y/o GLP-1 , también se puede utilizar para la expansión ex vivo de las células progenitoras de la médula o de la sangre periférica (PBPC). Antes del íratamiento con quimioterapia, la médula se puede estimular con el factor de célula madre (SCF) o G-CSF para liberar a las células progenitoras tempranas hacia la circulación periférica. Estos progenitores opcionalmente se recolectan y se concentran a partir de la sangre periférica y luego se íraian en cultivo con TPO y mimef ¡cuerpos, opcionalmeníe en combinación con una o más de otras citoquinas, incluyendo pero no limiíadas a SCF, G-CSF, IL-3, GM-CSF, IL-6 o IL-11 , para diferenciar y proliferar hacia cultivos de megacariociíos con alia densidad, los cuales se pueden regresar entonces opcionalmente al paciente después de una alta dosis de quimioterapia. Las dosis de TPO para el íralamienfo ex vivo de la médula ósea estarán en intervalo de 100 pg/ml a 10 ng/ml, preferiblemente de 500 pg/ml a 3 ng/ml. Las dosis de mimeticuerpos serán equivalentes en actividad a la GLP-1 la cual se puede utilizar a partir de 0.1 unidades/ml a 20 unidades/ml, preferiblemente de 0.5 unidades/ml a 2 unidades/ml, o cualquier intervalo o valor en éste. Los antagonistas de TNF adecuados para las composiciones, terapia de combinación, co-administraciones, dispositivos y/o métodos de la presente invención (comprenden adicionalmeníe al menos un anticuerpo, porción especificada y variante de los mismos, de la presente invención), incluyen, pero no se limiten a, anticuerpos aníi-TNF, fragmentos para unión al ligando de los mismos, y moléculas receptoras las cuales se unen específicamente a TNF; compuestos los cuales previenen y/o inhiben la síntesis de TNF, la liberación de TNF o su acción sobre las células blanco, lales como íalidomida, tenidap, inhibidores de la fosfodiesterasa (por ejemplo, pentoxifilina y rolipram), agonistas del receptor de A2b adenosina y potenciadores del receptor de A2b adenosina; compuestos que previenen y/o inhiben la señalización del receptor de TNF, tales como inhibidores de la proteína cinasa activada por mitógeno (MAP); compuestos que bloquean y/o inhiben la escisión del TNF en la membrana, tales como inhibidores de la metaloproteinasa; compuestos que bloquean y/o inhibe la actividad del TNF, tales como inhibidores de la enzima que convierte angiotensina (ACE) (por ejemplo, captopril); y compuestos que bloquean y/o inhiben la producción de TNF y/o la síntesis, tales como inhibidores de la MAP cinasa. Como se utiliza en la presente invención; un "anticuerpo al factor de necrosis tumoral", "anticuerpo de TNF", "anticuerpo de TNFa", o fragmento y los similares disminuye, bloquea, inhibe, elimina o interfiere con la actividad del TNFa ¡n vitro, ¡n situ y/o preferiblemente ¡n vivo. Por ejemplo, un anticuerpo adecuado de TNF de humano de la presente invención se puede unir a TNFa e incluye anticuerpos anti-TNF, fragmentos de los mismos para unión al antígeno, y mutantes especificados o dominios de los mismos que se unen específicamente al TNFa. Un anticuerpo TNF adecuado o fragmento también puede disminuir, bloquear, eliminar, interferir, prevenir y/o inhibir la síntesis de ARN, ADN o proteína de TNF, la liberación de TNF, la señalización del receptor de TNF, la escisión de TNF en la membrana, la actividad de TNF, la producción y/o síntesis de TNF . El anticuerpo cA2 quimérico consiste de la región variable para unión al antígeno del anticuerpo anti-TNFa IgG de humano neutralizante de ratón de alta afinidad, designado A2, y las regiones constantes de una lgG1 de humano, inmunoglobulina kappa. La región IgG 1 Fe de humano mejora la función del efector del anticuerpo alogenéico, incrementa la vida media en circulación y disminuye la inmunogenicidad del anticuerpo. La avidez y la especificidad del epítope del anticuerpo quimérico cA2 se derivan a partir de la región variable del anticuerpo A2 de murino. En una modalidad particular, una fuente preferida para ácidos nucleicos que codifican la región variable del anticuerpo A2 de murino en la línea celular de hibridoma A2. A2 quimérico (cA2) neulraliza el efecto citotóxico tanto del TNFa natural como recombinante de humano de manera dosis dependiente. A partir de los ensayos de unión del anticuerpo quimérico cA2 y del TNFa recombinante de humano, se calculó la consíaníe de afinidad del anticuerpo quimérico cA2 como de 1.04x1010M"1. Los méíodos preferidos para la determinación de la especificidad y afinidad del aníicuerpo monoclonal medianíe inhibición competitiva se pueden enconírar en Hariow, eí al., Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboraíory Press, Cold Spring Harbor, New York, 1988; Colligan eí al., eds., Currení Protocols in Immunology, Greene Publishing Assoc. and Wiley Interscience, New York, (1992-2003); Kozbor eí al., Immunol. Today, 4: 72-79 (1983); Ausubel et al., eds. Current Protocols in Molecular Biology, Wiley Interscience, New York (1987-2003); y Muller, Meth. Enzymol., 92: 589-601 (1983), dichas referencias se incorporan completamente en la presente invención como referencias. Los ejemplos adicionales de anticuerpos aníi-TNF monoclonales que se pueden uíilizar en la presente invención se describen en la técnica (véase, por ejemplo, Patente de E.U.A. No. 5,231 ,024; Moller, A. et al., Cytokine 2 (3): 162-169 (1990); Solicitud de E.U.A. No. 07/943,852 (presentada el 11 de septiembre de 1992); Raíhjen et al., Publicación Internacional No. WO 91/02078 (publicada el 21 de febrero de 1991); Rubin et al., GLP-1 Publicación de Patente No. 0 218 868 (publicada en 22 de abril de 1987); Yone eí al., GLP-1 Publicación de Patente No. 0 288 088 (ocíubre 26 de 1988); Liang, eí al., Biochem. Biofis. Res. Comm. 137: 847-854 (1986); Meager, ef al., Hybridoma 6: 305-311 (1987); Fendly et al., Hybridoma 6: 359-369 (1987); Bringman, eí al., Hybridoma 6: 489-507 (1987); e Hirai, eí al., J. Immunol. Meíh. 96: 57-62 (1987), dichas referencias se incorporan compleíamenfe en la presente invención como referencias). Moléculas del recepíor de TNF. Las moléculas preferidas del receptor de TNF útiles en la presente invención son aquellas que se unen a TNFa con alta afinidad (véase, por ejemplo, Feldmann et al., Publicación Internacional No. WO 92/07076 (publicada el 30 de abril de 1992); Schall et al., Cell 61 : 361-370 (1990); y Loetscher et al., Cell 61 : 351-359 (1990), dichas referencias se incorporan completamente en la presente invención como referencias) y opcionalmente poseen una baja inmunogeneicidad. En particular, los receptores de superficie celular a TNF de 55 kDa (p55 TNF-R) y de 75 kDa (p75 TNF-R) son útiles en la presente invención. Las formas truncadas de estos receptores, que comprenden los dominios exíracelulares (ECD) de los recepíores o porciones funcionales de los mismos (véase, por ejemplo, Corcoran el al., Eur. J. Biochem. 223: 831-840 (1994)), también son útiles en la presente invención. Las formas truncadas de los receptores de TNF, que comprenden los ECD, han sido detectadas en la orina y en el suero como proteínas de unión inhibidoras a TNFa de 30 kDa y 40 kDa (Engelmann, H. eí al., J. Biol. Chem. 265: 1531-1536 (1990)). Las moléculas muliiméricas del receptor de TNF y moléculas de fusión del ¡nmunoreceptor de TNF, y derivados y fragmentos o porciones de las mismas, son ejemplos adicionales de moléculas del receptor de TNF las cuales son útiles en los méíodos y composiciones de la preseníe invención. Las moléculas del receptor de TNF las cuales pueden ser utilizadas en la invención se caracterizan por su capacidad para el traíamiento de pacientes por períodos extendidos con alivio de síntomas de bueno a excelente y una baja toxicidad. La inmunogenicidad y/o alia afinidad, así como oirás propiedades no definidas, pueden contribuir a los resultados terapéuticos obtenidos. Las moléculas multiméricas del receptor de TNF útiles en la presente invención comprenden todos o una porción funcional de los ECD de dos o más receptores de TNF asociados vía uno o más enlazadores polipeptídicos u otros enlazadores no peptídicos, tales como polietilenglicol (PEG). Las moléculas multiméricas pueden comprender adicionalmente un péptido señal de una proteína secretada para dirigir la expresión de la molécula multimérica. Estas moléculas multiméricas y métodos para su producción han sido descritas en la Solicitud de E.U.A. No. 08/437,533 (presentada el 9 de mayo de 1995), el contenido de la cual se incorpora completamente en la presente invención como referencia. Las moléculas de fusión del inmunoreceptor de TNF útiles en los métodos y composiciones de la presente invención comprenden al menos una porción de una o más moléculas de inmunoglobulina y toda o una porción funcional de uno o más recepíores de TNF. Eslas moléculas de fusión del ¡nmunorecepíor se pueden ensamblar como monómeros, o como hetera- u homo-mulíímeros. Las moléculas de fusión del inmunoreceptor también pueden ser monovalentes o multivaleníes. Un ejemplo de dicha molécula de fusión del inmunoreceptor de TNF es la proteína de fusión del receptor de TNF/lgG. Las moléculas de fusión del ¡nmunoreceptor de TNF y métodos para su producción se han descriío en la técnica (Lesslauer et al., Eur. J Immunol. 21 : 2883-2886 (1991 ); Ashkenazi et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 88: 10535-10539 (1991 ); Peppel et al., J. Exp. Med. 174: 1483-1489 (1991 ); Kolls et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 91: 215-219 (1994); Butler et al., Cytokine 6 (6): 616- 623 (1994); Baker et al., Eur. J Immunol. 24: 2040-2048 (1994); Beutler et al., Patente de E.U.A. No. 5,447,851 ; y Soliciíud de E.U.A. No. 08/442,133 (presentada el 16 de mayo de 1995), cada una de dichas referencias se incorporan compleíameníe en la preseníe invención como referencias). Los méíodos para producción de moléculas de fusión del inmunorecepíor íambién se puede enconírar en Capón eí al., Patente de E.U.A. No. 5,116,964; Capón eí al., Patente de E.U.A. No. 5,225,538; y Capón et al., Naíure 337: 525-531 (1989), dichas referencias se incorporan complefameníe en la preseníe invención como referencias. Un equivalente funcional, derivado, fragmento o región de la molécula del recepíor de TNF se refiere a la porción de la molécula del receptor de TNF, o la porción de la secuencia de la molécula del receptor de TNF la cual codifica la molécula del receptor de TNF, que es de íamaño adecuado y las secuencias que se parecen funcionalmente a las moléculas del receptor de TNF que se pueden ufilizar en la presente invención (por ejemplo, se unen a TNFa con alia afinidad y poseen una baja inmunogeneicidad). Un equivalente funcional de la molécula del recepíor de TNF fambién ¡ncluye moléculas modificadas del recepíor de TNF que se parecen funcionalmeníe a las moléculas del receptor de TNF que se pueden uíilizar en la presente invención (por ejemplo, se unen a TNFa con alta afinidad y poseen una baja inmunogeneicidad). Por ejemplo, un equivalente funcional de la molécula receptora del TNF puede contener un codón "silencioso" o una o más sustituciones, deleciones o adiciones del aminoácido (por ejemplo, la sustiíución de un aminoácido ácido por otro aminoácido ácido; o la sustitución de un codón que codifica el mismo aminoácido o un aminoácido hidrófobo diferente por otro codón que codifica un aminoácido hidrófobo). Véase Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Assoc. and Wiley-lnterscience, New York (1987-2003). Las citoquinas incluyen, pero no se limitan a todas las citoquinas conocidas. Véase, por ejemplo, CopewithCylokines.com. Los aníagonisías de ciíoquina incluyen, pero no se limiían a, cualquier anticuerpo, fragmenío o mimético, cualquier receptor soluble, fragmenío o miméíico, cualquier aníagoniste de molécula pequeña, o cualquier combinación de los mismos. Cualquier método de la presente invención puede comprender un método para el íratamiento de un trastorno mediado por una proteína, que comprende adminisfrar una caníidad efectiva de una composición o composición farmacéutica que comprende al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante a una célula, tejido, órgano, animal o paciente que necesite de dicha modulación, fraíamienío o íerapia. Dicho méíodo puede comprender opcionalmeníe de manera adicional la co-adminisíración o íerapia de combinación para el íralamienío de dichas enfermedades inmunes, en donde la adminisíración de dicho al menos un mimeíicuerpo GLP-1 , porción especificada o variante del mismo, comprende adicionalmeníe adminisfrar, aníes concurrentemente, y/o después, al menos una seleccionada a partir de al menos oirás citoquinas tales como IL-3, -6 y -11 ; factor de célula madre; G-CSF y G M-CSF. Típicamente, el tratamiento de condiciones patológicas se lleva a cabo medianíe la adminisíración de una caníidad efecíiva o dosis de al menos una composición de mimeíicuerpo GLP-1 que en íoíal, en promedio, es un intervalo a partir de al menos aproximadamente 0.0001 a 500 miligramos de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante/kilogramo del paciente por dosis, y preferiblemente a partir de al menos aproximadamente 0.001 a 100 miligramos del mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante/kilogramo del paciente por administración particular o múlíiple, dependiendo de la acíividad específica contenida en la composición. Alternativamente, la concentración efectiva en suero puede comprender 0.001-5000 µg/ml de concentración en suero por administración particular o múltiple. Las dosis adecuadas se conocen por los médicos practicantes y dependerán, por supuesto, del esíado particular de la enfermedad, actividad específica de ia composición a ser administrada, y el paciente particular que se somete a fralamienío. En algunos casos, para lograr la caníidad terapéutica deseada, puede ser necesario proveer adminisíraciones repetidas, por ejemplo, administraciones individuales repetidas de una dosis particular monitoreada o medida, en donde las administraciones individuales se repiten hasta que se alcanza la dosis diaria o el efecto deseado. Las dosis preferidas pueden incluir opcionalmente 0.0001 , 0.0002, 0.0003, 0.0004, 0.0005. 0.0006, 0.0007, 0.0008, 00009, 0.001 , 0.002, 0.003, 0.004, 0.005, 0.006, 0.007, 0.008, 0.009, 0.01 , 0.02, 0.03, 0.04, 0.05. 0.06, 0.07, 0.08, 0.09, 0.1 , 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 , 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, y/o 30 mg/kg/administración, o cualquier intervalo, valor o fracción del mismo, o para lograr una conceníración en suero de 0.0001 , 0.0002, 0.0003, 0.0004, 0.0005. 0.0006, 0.0007, 0.0008, 00009, 0.001 , 0.002, 0.003, 0.004, 0.005, 0.006, 0.007, 0.008, 0.009, 0.01 , 0.02, 0.03, 0.04, 0.05. 0.06, 0.07, 0.08, 0.09, 0.1 , 0.5, 0.9, 1.0, 1.1 , 1.2, 1.5, 1.9, 2.0, 2.5, 2.9, 3.0, 3.5, 3.9, 4.0, 4.5, 4.9, 5.0, 5.5, 5.9, 6.0, 6.5, 6.9, 7.0, 7.5, 7.9, 8.0, 8.5, 8.9, 9.0, 9.5, 9.9, 10, 10.5, 10.9, 11 , 11.5, 11.9, 20, 12.5, 12.9, 13.0, 13.5, 13.9, 14.0, 14.5, 4.9, 5.0, 5.5., 5.9, 6.0, 6.5, 6.9, 7.0, 7.5, 7.9, 8.0, 8.5, 8.9, 9.0, 9.5, 9.9, 10, 10.5, 10.9, 11 , 11.5, 11.9, 12, 12.5, 12.9, 13.0, 13.5, 13.9, 14, 14.5, 15, 15.5, 15.9, 16, 16.5, 16.9, 17, 17.5, 17.9, 18, 18.5, 18.9, 19, 19.5, 19.9, 20, 20.5, 20.9, 21 , 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 96, 100, 200, 300, 400, y/o 500 µg/ml de concenfración en suero por adminisíración particular o múltiple, o cualquier intervalo, valor o fracción del mismo. Alternativamente, la dosis adminisírada puede variar dependiendo de factores conocidos, lales como las características farmacodinámicas del agente particular, y su modo y ruta de administración; edad, salud, y peso del recipiente; naturaleza y grado de los síntomas, clase del fraíamienfo concurrente, frecuencia del íraíamienío, y el efecto deseado. Usualmente una dosis de ingrediente acíivo puede ser aproximadameníe de 0.0001 a 100 miligramos por kilogramo de peso corporal. Ordinariamente de 0.001 a 10, y preferiblemente de 0.001 a 1 miligramos por kilogramo por administración o en forma de liberación sostenida es efectiva para obtener los resultados deseados.

Como un ejemplo no limitante, se puede proveer el tratamiento de humanos o anímalos como una dosis en un momento o una dosis periódica de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la presente invención de 0.0001 a 100 mg/kg, tales como 0.0002, 0.0003, 0.0004, 0.0005, 0.0006, 0.0007, 0.0008, 00009, 0.001 , 0.002, 0.003, 0.004, 0.005, 0.006, 0.007, 0.008, 0.009, 0.01 , 0.02, 0.03, 0.04, 0.05. 0.06, 0.07, 0.08, 0.09, 0.1 , 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.9, 1.0, 1.1 , 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, o 10 mg/kg, por día, en al menos uno de día 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 , 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31 , 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, o 40, o alíernaíivameníe, al menos uno de semana 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 ó 20, o cualquier combinación de los mismos, ufilizando una infusión particular o dosis repetidas. Las formas de dosis (composiciones) adecuadas para administración interna generalmeníe coníienen de aproximadamente 0.0001 miligramos a aproximadameníe 500 miligramos del ingrediente activo por unidad o contenedor. En estas composiciones farmacéuticas el ingrediente acfivo ordinariamente estará presente en una cantidad de aproximadamente 0.5-99.999% en peso basándose en el peso total de la composición. Para administración parenteral, el mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante se puede formular como una solución, suspensión, emulsión o polvo liofilizado en asociación, o separadamente provisto, con un vehículo parenteral farmacéuticamente aceptable. Los ejemplos de dichos vehículos son agua, solución salina, solución de Ringer, solución de dexírosa, y 5% de albúmina de suero de humano. También se pueden utilizar los liposomas y vehículos no acuosos íales como aceites fijados. El vehículo o polvo liofilizado puede contener aditivos que mantienen la isotonicidad (por ejemplo, cloruro de sodio, manitol) y la esíabilidad química (por ejemplo, reguladores de pH y conservadores). La formulación se esteriliza mediante técnicas conocidas o adecuadas. Los vehículos farmacéuticos adecuados se describen en la edición más reciente de Remingíon's Pharmaceuíical Sciences, A. Osol, un texto de referencia estándar en este campo. Adminisíración terapéutica. Se pueden utilizar muchos modos conocidos y desarrollados para adminisírar cantidades farmacéuticamente efectivas de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de conformidad con la presente invención. Un mimeticuerpo GLP-1 de la presente invención se puede administrar en un vehículo, como una solución, emulsión, coloide, o suspensión, o como un polvo, utilizando cualquiera de una variedad de dispositivos y métodos adecuados para adminisíración mediante inhalación u oíros modos descritos en la presente invención o como se sabe en la técnica. Formulaciones parenterales y adminisíración. Las formulaciones para adminisíración parenleral pueden contener como excipientes comunes agua estéril o solución salina, polialquilen glicoles tales como polietilenglicol, aceites de origen vegefal, naftalenos hidrogenados y los similares. Las suspensiones acuosas u oleosas para inyección se pueden preparar mediante el uso de un emulsificante apropiado o humidificante y un agente para suspensión, de conformidad con los métodos conocidos. Los agentes para inyección pueden ser un agente diluyenfe no tóxico, que no se adminisíra oralmente tales como solución acuosa o una solución o suspensión inyectable estéril en un solvente. Como el vehículo o solvente a ser uíilizado se permite emplear, agua, solución de Ringer, solución salina isotónica, etc.; como un solvente ordinario, o solvente para suspensión, se pueden uíilizar aceite no volátil estéril. Para estos propósitos, se pueden utilizar cualquier tipo de aceite no volátil y ácido graso, incluyendo aceites grasos o ácidos grasos naturales o sintéticos o semisiníéíicos; mono- o di- o tri-glicéridos naturales o sintéticos o semisiníéficos. La administración parenteral es como se sabe en la técnica e incluye, pero no se limita a, medios convencionales para inyecciones, un dispositivo para inyección sin aguja con gas a presión como se describe en la Paíeníe de E.U.A. No. 5,851 ,198, y a un dispositivo perforador láser como se describe en la Patente de E.U.A. No. 5,839,446 completamente incorporada en la presente invención como referencia. Administración alternativa. La invención se refiere adicionalmente a la administración de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante por medios parenterales, subcutáneos, iníramusculares, intravenosos, en bolo, vaginales, rectales, bucales, sublinguales, intranasales, o íransdermales. Las composiciones de proteína, mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante se pueden preparar para uso para adminislración parenferal (subculánea, inframuscular o iníravenosa) particularmente en la forma de soluciones líquidas o suspensiones; para uso en la administración vaginal o recial particularmente formas semisólidas tales como cremas y supositorios; para adminislración bucal, o sublingual particularmente en la forma de tableías o cápsulas; o iníranasalmeníe particularmente en la forma de polvos, gofas nasales o aerosoles o ciertos agenfes; o transdermalmente particularmente en la forma de un gel, ungüento, loción, suspensión o sistema para adminisíración en parche con mejoradores químicos lales como dimeíil sulfóxido ya sea para modificar la esíructura de la piel o para incrementar la concentración del fármaco en el parche transdermal (Junginger, et al. En "Drug Permeation Enhancement"; Hsieh, D. S., Eds., pp. 59-90 (Marcel Dekker, Inc. New York 1994, complefamente incorporado en la presente invención como referencia), o con agentes para oxidación que permiten la aplicación de formulaciones que contienen proteínas y péptidos sobre la piel (W098/53847), o aplicaciones de campos elécíricos para crear rutas de transporte transitorias íal como elecíroporación, o para incremeníar la movilidad de los fármacos cargados a través de la piel tal como ioníoforesis, o a la aplicación de ulírasonido íal como sonoforesis (Patentes de E.U.A. Nos. 4,309,989 y 4,767,402) (las publicaciones anteriormente mencionadas y patentes siendo completamente incorporadas en la presente invención como referencias). Administración pulmonar/nasal. Para la administración pulmonar, preferiblemente al menos una composición del mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante se administra en un tamaño de partícula efectivo para alcanzar las vías aéreas bajas del pulmón o senos. De conformidad con la invención, al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante puede ser administrada mediante una variedad de dispositivos para inhalación o dispositivos nasales como se sabe en la técnica para la administración de un agente terapéutico mediante inhalación. Estos dispositivos capaces de aplicar formulaciones en aerosol de dGLP-1 en la cavidad del sinus o alveolos de un paciente incluyen inhaladores de dosis medida, nebulizadores, generadores de polvo seco, aspersores, y los similares. Otros dispositivos adecuados para dirigir la adminisíración pulmonar o nasal del mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variantes lambién son como se sabe en la técnica. Todos esos dispositivos pueden utilizar las formulaciones adecuadas para la administración para la dispersión del mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante en un aerosol. Dichos aerosoles pueden estar comprendidos ya sea de soluciones (tanto acuosas como no acuosas) o partículas sólidas. Los inhaladores de dosis medida como el inhalador de dosis medida Ventolín®, fípicameníe utiliza un gas propelente y requiere la acción durante la inspiración (Véase, por ejemplo, WO 94/16970, WO 98/35888). Los inhaladores de polvos seco como los Turbuhaler™ (Asirá), Rofahaler® (Glaxo), Diskus® (Glaxo), inhalador Spiros™ (Dura), dispositivos comercializados por Inhale Therapeuiics, y el inhalador de polvo Spinhaler® (Fisons), utiliza la acción de aspirar un polvo mezclado (US 4668218 Astra, EP 237507 Astra, WO 97/25086 Glaxo, WO 94/08552 Dura, US 5458135 Inhale, WO 94/06498 Fisons, complelamente incorporadas en la preseníe invención como referencias). Los nebulizadores semejaníes a AERx™ Aradigm, el nebulizador Ulíravent® (Mallinckrodt), y el nebulizador Acorn II® (Marquesí Medical Producís) (US 5404871 Aradigm, WO 97/22376), la referencias anteriormente mencionadas completamente incorporadas en la presente invención como referencias, producen aerosoles a partir de soluciones, mientras que los inhaladores de dosis medida, inhaladores de polvo seco, etc. generan partículas pequeñas en aerosoles. Estos ejemplos específicos de disposifivos para inhalación comercialmenfe disponibles se pretende que sean representativos de dispositivos específicos adecuados para la práctica de esía invención, y no se pretende que sean limitantes del alcance de la invención. Preferiblemente, una composición que comprende al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante se adminisfra medianíe un inhalador de polvo seco o un aspersor. Existen varias características deseables de un dispositivo para inhalación para adminisírar al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante de la presente invención. Por ejemplo, la administración mediante el dispositivo para inhalación es ventajosamente confiable, reproducible, y precisa. El dispositivo para inhalación puede administrar opcionalmenfe partículas secas pequeñas, por ejemplo menos de aproximadamente 10 µm, preferiblemente de aproximadamente 1-5 µm, para una buena capacidad de ser respiradas.

Administración de composiciones del mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante como una aspersión. Una aspersión que incluye una composición de proteína de mimelicuerpo GLP-1 o porción especificada o varianíe se puede producir al forzar a una suspensión o solución de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante a través de una boquilla bajo presión. El tamaño de la boquilla y configuración, la presión aplicada, y la velocidad de alimentación del líquido se pueden elegir para lograr un resulfado deseado y tamaño de partícula. Una electroaspersión se puede producir, por ejemplo, mediante un campo eléctrico en conexión con un capilar o boquilla de alimenlación. De manera ventajosa, las partículas de al menos una composición de proíeína del mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o varianíe se adminisíra medianíe un aspersor que liene un íamaño de partícula menor de aproximadamente 10 µm, preferiblemente en el intervalo de aproximadamente 1 µm a aproximadamente 5 µm, y más preferiblemente de aproximadamente 2 µm a aproximadamente 3 µm. Las formulaciones de al menos una composición de proteína de un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante adecuada para uso con un aspersor típicamente incluye una composición de proteína de mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante en una solución acuosa a una concentración de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 20 mg de al menos una composición de proteína de mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante por ml de solución. La formulación puede incluir agentes tales como un excipiente, un regulador de pH, un ageníe para isoíonicidad, un conservador, un ageníe íensioacíivo, y, preferiblemeníe, zinc. La formulación también puede incluir un excipiente o agente para la estabilización de la composición de proíeína del mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante, íales como un regulador de pH, un ageníe reducíor, una proíeína voluminosa, o un carbohidrato. Las proteínas voluminosas úíiles en la formulación de la composición de profeína del mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante incluyen albúmina, protamina, o las similares. Los carbohidratos típicos útiles para la formulación de la composición de proteína del mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante incluyen sacarosa, manifol, lactosa, frehalosa, glucosa, o los similares. La formulación de la composición de proíeína del mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante también pueden incluir un agente tensioactivo, el cual puede reducir o prevenir la agregación de la composición de proteína del mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante inducida en la superficie ocasionada por la atomización de la solución en la formación de un aerosol. Se pueden emplear varios ageníes íensioactivos convencionales, tales como esteres de ácido graso de polioxietileno y alcoholes, y esteres de ácido graso de polioxietilensorbitol. Las caníidades generalmente tendrán un intervalo eníre 0.001 y 14% en peso de la formulación. Los agentes tensioactivos especialmente preferidos para propósitos de esta invención son monoolealo de polioxieíilensorbiíano, polisorbaío 80, polisorbalo 20, o los similares. También se pueden incluir en la formulación los agentes adicionales como se sabe en la técnica para la formulación de una proteína tales como mimeticuerpos, o porciones específicas o variantes. La administración de composiciones de mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante mediante un nebulizador. La composición de profeína de mimelicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante se puede administrar mediante un nebulizador, tales como nebulizador a chorro o un nebulizador ultrasónico. Típicamente, en un nebulizador a chorro, se utiliza una fuente de aire comprimido para crear un chorro de aire a alta velocidad a través de un orificio. Conforme el gas se expande más allá de la boquilla, se crea una región de baja presión, lo cual produce una solución de la composición de proteína de mimeficuerpo GLP-1 o porción especificada o variante a íravés de un íubo capilar coneclado a un reservorio líquido. La corriente de líquido a partir del íubo capilar se divide hacia filamentos inestables y hacia góíites conforme sale del tubo, creando el aerosol. Se puede emplear un intervalo de configuraciones, relaciones del flujo, y tipos de desviación para activar las características de desempeño deseadas a partir de un nebulizador a chorro dado. En un nebulizador ultrasónico, se utiliza energía eléctrica a alta frecuencia para crear vibración, energía mecánica, típicameníe empleando un íransducfor piezoelécírica. Esía energía se transmite a la formulación de la composición de proteína del mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante ya sea directamente o a través de un fluido para acoplamiento, creando un aerosol que incluye la composición de proteína del mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante. De manera ventajosa, la composición de proteína en las partículas de mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante se adminisíra medianíe un nebulizador que íiene un tamaño de partículas menor de aproximadamente 10 µm, preferiblemente en el intervalo de aproximadamente 1 µm a aproximadameníe 5 µm, y más preferiblemente de aproximadameníe 2 µm a aproximadamente 3 µm. Las formulaciones de al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o varianíe, adecuadas para uso con un nebulizador, ya sea aa chorro o ulfrasónico, íípicamenfe incluyen la composición de proteína del mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o varianíe en una solución acuosa a una conceníración de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 20 mg de al menos una proteína del mimeficuerpo GLP-1 o porción especificada o variante por ml de solución. La formulación puede incluir agentes íales como un excipiente, un regulador de pH, un agente para isoíonicidad, un conservador, un agente íensioaclivo, y, preferiblemeníe, zinc. La formulación íambién pueden incluir un excipiente o agente para estabilización de al menos una composición de proíeína del mimeficuerpo GLP-1 o porción especificada o variante, tales como un regulador de pH, un agente reductor, una proteína voluminosa, o un carbohidrato. Las proteínas voluminosas úíiles en la formulación incluyendo al menos una composición de proíeína del mimeficuerpo GLP-1 o porción especificada o variante incluyen albúmina, protamina, o los similares. Los carbohidratos típicos útiles para la formulación de al menos un mimeficuerpo GLP-1 o porción especificada o variante incluyen sacarosa, manitol, lactosa, írehalosa, glucosa, o los similares. La al menos una formulación del mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante también pueden incluir un agente íensioacíivo, el cual puede reducir a prevenir la agregación de al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante inducida por la superficie ocasionada por la atomización de la solución en la formación de un aerosol. Se pueden emplear varios agentes tensioactivos convencionales, tales como esteres de ácido graso de polioxiefileno y alcoholes, y esteres de ácido graso de polioxieíilensorbital. Las cantidades generalmeníe tendrán un intervalos entre 0.001 y 4% en peso de la formulación. Los agentes lensioacíivos especialmente preferidos para propósitos de esía invención son mono-olealo de polioxieíilensorbiíano, polisorbaío 80, polisorbaío 20, o los similares. Los agenles adicionales como se sabe en la técnica para la formulación de una proteína tales como al menos una proteína de mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante también se pueden incluir en la formulación. Administración de composiciones de mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante mediante un inhalador de dosis medida. En un inhalador de dosis medida (MDI), un propelente, al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante, y cualesquiera excipientes u oíros aditivos están contenidos en un recipiente como una mezcla incluyendo un gas comprimido licuado. La activación de la válvula medidora libera la mezcla en forma de un aerosol, preferiblemeníe conteniendo partículas en el intervalo de tamaño de menos de aproximadameníe 10 µm, preferiblemeníe de aproximadamente 1 m a aproximadamente 5 m, y más a preferiblemeníe de aproximadamente 2 pm a aproximadameníe 3 m. El tamaño de partículas deseado de aerosol se puede obíener medianíe el empleo de una formulación de composición de proteína de mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante producida mediante diversos métodos conocidos por aquellos expertos en la íécnica, incluyendo molido a chorro, secado medianíe aspersión, condensación en punto crítico, o los similares. Los inhaladores de dosis medida preferidos incluyen aquellos elaborados por 3M o Glaxo y que emplear un propelente de hidrofluorocarbono. Las formulaciones de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante para uso con un dispositivo inhalador de dosis medida generalmente incluirán un polvo finamente dividido que contiene al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o varianíe como una suspensión en un medio no acuoso, por ejemplo, suspendido en un propeleníe con la ayuda de un ageníe íensioacíivo. El propelente puede ser cualquier material convencional empleado para este propósito, tales como clorofluorocarbono, un hidroclorofluorocarbono, un hidrofluorocarbono, o un hidrocarburo, incluyendo triclorofluorometano, diclorodifluorometano, diclorotetrafluoroefanol y 1 ,1 ,1 ,2-íefrafluoroeíano, HFA-134a (hidrofluroalcano- 134a), HFA-227 (hidrofluroalcano-227), o los similares. Preferiblemente el propelente es un hidrofluorocarbono. El agente íensioaclivo se puede elegir para estabilizar el al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante como una suspensión en el propelenfe, para proíeger al agente activo en coníra de la degradación química, y los similares. Los ageníes tensioactivos adecuados incluyen triolealo de sorbiíano, lecitina de soya, ácido oléico, o los similares. En algunos casos se prefieren los aerosoles en solución utilizando solveníes tales como etanol. Se pueden incluir en la formulación de agentes adicionales como se sabe en la técnica para la formulación de una proteína tal como proteína. Un experto en la lécnica reconocerá que los méíodos de la presente invención se pueden lograr mediante la administración pulmonar de al menos una composición de mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante vía dispositivos no descritos en la presente invención. Formulaciones mucosales y administración. Para la absorción a través de las superficies mucosas, las composiciones y métodos para la administración de al menos un mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante incluyen una emulsión que comprende una pluralidad de partículas en tamaños menores a la miera, una macromolécula mucoadhesiva, un péptido bioactivo, y una fase continua acuosa, la cual promueve la absorción a través de las superficies mucosales al permitir la mucoadhesión de las partículas de la emulsión (Patentes de E.U.A. Nos. 5,514,670). Las superficies mucosas adecuadas para la aplicación de las emulsiones de la presente invención pueden incluir rutas de administración corneal, conjunctival, bucal, sublingual, nasal, vaginal, pulmonar, estomacal, intestinal, y rectal. Las formulaciones para administración vaginal o rectal, por ejemplo supositorios, pueden contener como excipientes, por ejemplo, polialquilenglicoles, vaseline, mantequilla de cocoa, y los similares. Las formulaciones para administración intranasal pueden ser sólidos y contener como excipientes, por ejemplo, lactosa o pueden ser soluciones acuosas u oleosas de gotas nasales. Para administración bucal los excipientes incluyen azúcares, estearato de calcio, estearato de magnesio, almidón pregelatinizado, y los similares (Patentes de E.U.A. Nos. 5,849,695). Formulaciones orales y administración. Las formulaciones para aplicación oral en la co-administración de adjuvantes (por ejemplo, resorcinoles y agentes tensioactivos no iónicos tales como éter de polioxietilenoleil y éter de n-hexadecilpolietileno) para incrementar artificialmente la permeabilidad de las paredes intestinales, así como la coadministración de inhibidores enzimáticos (por ejemplo, inhibidores de la tripsina pancreática, diisopropilfluorofosfato (DFF) y trasilol) para inhibir la degradación enzimática. El compuesto constituyente activo de la forma de dosis tipo sólido para administración oral se puede mezclar con al menos un aditivo, incluyendo sacarosa, lactosa, celulosa, manitol, írehalosa, rafinosa, malíifol, dexírán, almidones, agar, arginatos, quilinas, quiíosanes, pectinas, goma tragacanto, goma arábiga, gelatina, colágena, caseína, albúmina, polímero sintético o semisintéíico, y glicérido. Las formas de dosis íambién pueden contener otro tipo(s) de aditivos, por ejemplo, ageníe diluyeníe inactivo, lubricante íales como esíearaío de magnesio, paraben, agente conservador íales como ácido sórbico, ácido ascórbico, alfa-tocoferol, antioxidante tales como cisteína, desintegrante, agluíinaníe, espesante, agente regulador de pH, agente edulcorante, ageníe saborizanfe, agente perfumante, efe. Las tabletas y pildoras se pueden procesar adicionalmente hacia preparaciones con revestimientos entérico. Las preparaciones líquidas para administración oral incluyen preparaciones en emulsión, jarabe, elixir, suspensión y solución que se permiten para uso médico. Estas preparaciones pueden contener agentes diluyentes inactivos ordinariamente utilizados en dicho campo, por ejemplo, agua. También se han descrito los liposomas como sistemas para adminisf ración de fármaco para insulina y heparina (Patente de E.U.A. No. 4,239,754). Más recientemente, la microesferas de polímeros artificiales de aminoácidos mezclados (proíeinoides) han sido uíilizadas para la adminisfración de elementos farmacéuticos (Patente de E.U.A. No. 4,925,673). Además, los compuesíos vehículos descritos en la Paíeníe de E.U.A. No. 5,879,681 y en la Patente de E.U.A. No. 5,5,871 ,753 se utilizan para adminisírar oralmente agenfes biológicamente acíivos como se sabe en la técnica. Formulaciones transdermales y adminisíración. Para la adminisíración íransdermal, el al menos un mimeíicuerpo GLP-1 o porción especificada o variante se encapsula en un dispositivo para adminisíración íales como un liposoma o nanopartículas poliméricas, micropartículas, microcápsula, o microesferas (referidas colectivamente como micropartículas a menos que se establezca de otra manera). Se conocen numerosos dispositivos adecuados, incluyendo micropartículas elaboradas de polímeros sintéticos tales como polihidroxi ácidos tales como ácido poliláctico, ácido poliglicólico y copolímeros de los mismos, poliortoésteres, polianhídridos, y polifosfazenos, y polímeros naturales íales como colágena, poliaminoácidos, albúmina y oirás proteínas, alginato y otros polisacáridos, y combinaciones de los mismos (Patentes de E.U.A. Nos. 5,814,599). Administración prolongada y formulaciones. Algunas veces puede ser deseable adminisírar los compuesíos de la presente invención al sujeto duraníe períodos de tiempo prolongados, por ejemplo, por períodos de una semana a un año a partir de una administración particular. Se pueden utilizar diversas formas de dosis de liberación lenta, dGLP-1 o implante. Por ejemplo, una forma de dosis puede contener una sal farmacéuticamente aceptable no tóxica de los compuesíos que tiene un bajo grado de solubilidad en los fluidos corporales, por ejemplo, (a) una sal de adición acida con un ácido polibásico tales como ácido fosfórico, ácido sulfúrico, ácido cíírico, ácido tartárico, ácido tánico, ácido pamóico, ácido algínico, ácido poliglutámico, ácidos naftalen mono- o di-sulfónicos, ácido poligalacturónico, y los similares; (b) una sal con un catión de metal polivalente íales como zinc, calcio, bismuto, bario, magnesio, aluminio, cobre, cobalto, níquel, cadmio y los similares, o con un catión orgánico formado a partir de por ejemplo, N.N'-dibencil-etilendiamina o etilendiamina; o (c) combinaciones de (a) y (b) por ejemplo una sal de tannato de zinc. Adicionalmeníe, los compuesíos de la presente invención o, preferiblemente, una sal relativamente insoluble tales como aquellas recientemente descritas, se pueden formular en un gel, por ejemplo, un gel de monoestearato de aluminio con, por ejemplo aceite de ajonjolí, adecuado para infección. Las sales particularmente preferidas son sales de zinc, sales de tannaío de zinc, sales de pamoafo, y las similares. Otro tipo de formulación para infección de liberación lenta GLP-1 podría contener el compuesto o sal dispersada para ser encapsulada en un polímero de degradación lenta, no tóxico, no antigénico tales como un polímero de ácido polilácíico/ácido poliglicólico por ejemplo como se describe en la Patente de E.U.A. No. 3,773,919. Los compuestos o, preferiblemente, sales relativamente insolubles tales como aquellas anteriormente descritas también se pueden formular en concentrados de colesíerol de en matriz de silastic, particularmente para uso en animales. Las formulaciones adicionales para liberación lenta, dGLP-1 o implante, por ejemplo liposomas con gas o líquido se conocen en la literaíura (Patentes de E.U.A. Nos. 5,770,222 y "Sustained and Conírolled Reléase Drug Delivery Systems", J. R. Robinson ed., Marcel Dekker, Inc., N.Y., 1978). Habiendo descriío generalmeníe la invención, la misma se entenderá más fácilmente con referencia a los siguientes ejemplos, los cuales se proveen a manera de ilusíración y no se pretende que sean limitantes de la misma.

EJEMPLO 1 Clonación y expresión de un mimeticuerpo GLP-1 en mamífero Células. Un vector de expresión típico de mamífero contiene al menos un elemento promotor, el cual media el inicio de la transcripción del ARNm, la secuencia codificante del mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o varianíe, y las señales requeridas para la terminación de la transcripción y la poliadenilación del transcrito. Los elementos adicionales incluyen polenciadores, secuencias Kozak y secuencias interventoras flanqueadas por los sitios donantes y acepíores para el procesamiento del ARN. La transcripción altamente eficiente se puede lograr con los promotores tempranos y tardíos a partir de SV40, los repeíidos terminales largos (LTRS) a partir de Retrovirus, por ejemplo, RSV, HTLVI, HIVI y el promotor temprano del citomegalovirus (CMV). No obstante, también se pueden utilizar los elementos celulares (por ejemplo, el promotor de acíina de humano). Los vectores de expresión adecuados para uso en la práclica de la presente invención incluyen, por ejemplo, vectores tales como pIRES Ineo, pReíro-Off, pRetro-On, PLXSN, o pLNCX (Clonetech Labs, Palo Alio, CA), pcDNA3.1 (+/), pcDNA/Zeo (+/-) o pcDNA3.1/Hygro (+/-) (Inviírogen), PSVL y PMSG (Pharmacia, Uppsala, Suecia), pRSVcaí (ATCC 37152), pSV2dhfr (ATCC 37146) y pBC12MI (ATCC 67109). Las células hospederas de mamífero que podrían ser uíilizadas incluyen las células Hela de humano, células 293, H9 y Jurkaí, NIH3T3 de ratón y las células C127, Cosí , Cos 7 y CV 1 , células QC1-3 codorniz, células L de ratón y células del ovario de hámster chino (CHO). Alternativamente, el gen se puede expresar en líneas celulares estables que coníienen el gen integrado denlro de un cromosoma. La co-fransfección con marcador de selección íales como dhfr, gpt, neomicina, o higromicina permite la identificación y aislamiento de las células transfecfadas. El gen íransfectado también se puede amplificar para expresar grandes cantidades del mimeticuerpo GLP-1 codificado o porción especificada o variante. El marcador DHFR (dihidrofolaío reducíasa) es úfil para desarrollar líneas celulares que portan varios cientos o incluso miles de copias del gen de interés. Otro marcador de selección útil es la enzima glutamina sintasa (GS) (Murfi, et al., Biochem. J. 227: 277-279 (1991); Bebbington, et al., Bio/Technology 10: 169-175 (1992)). Utilizando esíos marcadores, las células de mamíferos se crecen en medio selecíivo y se seleccionan las células con mayor resisíencia. Estas líneas celulares contienen el gen(es) amplificado(s) dentro de un cromosoma. Las células del ovario de hámster chino (CHO) y NSO frecuentemente se utilizan para la producción del mimeíicuerpo GLP-1 o de la porción especificada o variantes. Los vectores de expresión pCI y pC4 coníienen el promotor fuerte (LTR) de virus del sarcoma de Rous (Cuiten, et al., Molec. Cell. Biol. 5: 438-447 (1985)) más un fragmento del potenciador CMV (Boshart, ef al., Cell 41 : 521-530 (1985)). Los múltiples sitios de clonación, por ejemplo, con los sitios para la escisión de la enzima de resíricción BamHI, Xbal y Asp718, facilitan la clonación del gen de interés. Los vectores coníienen además el intrón 3', la señal de poliadenilación y de terminación del gen de la preproinsulina de rata. Clonación y expresión en células CHO. El vector pC4 se utiliza para la expresión del mimeticuerpo GLP-1 o porción especificada o variante. El plásmido pC4 es un derivado del plásmido pSV2-dhfr (ATCC No. de Acceso 37146). El plásmido contiene el gen DHFR de ratón bajo el control del promotor íemprano de SV40. Se pueden seleccionar las células de ovario de hámster chino u oirás células que carecen de la acíividad de dihidrofolato que están transfectadas con estos plásmidos mediante el crecimiento de las células en un medio para selección (por ejemplo, alfa minus MEM, Life Technologies, Gaiíhersburg, MD) suplementado con el agente quimioterapéuíico metoírexato. La amplificación de los genes DHFR en las células resistentes al meíoírexaío (MTX) ha sido bien documentada (véase, por ejemplo, F. W. Alí, ef al., J. Biol. Chem. 253: 1357-1370 (1978); J. L Hamiin y C. Ma, Biochem. et Biofis. Acta 1097: 107-143 (1990); y M. J. Page y M. A. Sydenham, Biotechnology 9: 64-68 (1991 )). Las células que crecen en conceníraciones en incremento de MTX desarrollan resistencia al fármaco mediante la sobreproducción de la enzima blanco, DHFR, como un resultado de la amplificación del gen DHFR. Si un segundo gen se asocia al gen DHFR, éste usualmenfe es co-amplificado y sobre-expresado. Así es como se sabe en la técnica que esté método puede ser utilizado para desarrollar líneas celulares que portan más de 1 ,000 copias del gen(es) amplificado(s). Cuando se retira el meíoírexalo, se obíienen las líneas celulares que contienen el gen amplificado integrado deníro de uno o más cromosomas de la célula hospedera. El plásmido pC4 coníiene la expresión del gen de interés del promotor fuerte del repetido terminal largo (LTR) del virus del sarcoma de Rous (Cuiten, et al., Molec. Cell. Biol. 5: 438-447 (1985)) más un fragmento aislado a partir de poíenciador del gen inmediato íemprano de citomegalovirus humano (CMV) (Boshart, et al., Cell 41 : 521-530 (1985)). Hacia el exíremo 3* del promoíor se encueníran los sitios para escisión de enzimas de restricción BamHI, Xbal, y Asp718 que permiten la integración de los genes. Defrás de estos sitios de clonación el plásmido coníiene el sitio del inírón 3' intron y el sitio de poliadenilación del gen de preproinsulina de rata. Otros promotores altamente eficientes también se pueden utilizar para la expresión, por ejemplo, el promotor de la b-actina de humano, los promotores tempranos o tardíos de SV40 o los repetidos terminales largos a partir de otros retrovirus, por ejemplo, HIV y HTLVI. Los sistemas de expresión del gen de Clonfech's Tet-Off y Tet-On y sistemas similares se pueden uíilizar para expresar la GLP-1 de manera regulada en células de mamífero (M. Gossen, y H. Bujard, Proc. Nati. Acad. Sci. USA 89: 5547-5551 (1992)). Para la poliadenilación del ARNm también se pueden uíilizar oirás señales, por ejemplo, a partir de los genes de la hormona de crecimiento de humano o de los genes de globina. Las líneas celulares estables que portan un gen de interés integrado dentro de los cromosomas también se pueden seleccionar después de la co-transfección con un marcador de selección tales como gpt, G418 o higromicina. Es ventajoso utilizar más de un marcador de selección en el inicio, por ejemplo, G418 más metotrexato. El plásmido pC4 se digiere con enzimas de restricción y luego se defosforila utilizando fosfatasa intestinal de ternera mediante procedimientos como se sabe en la técnica. Luego se aisla el vector a partir de un gen de agarosa al 1 %. Se utiliza la secuencia de ADN que codifica el mimeticuerpo GLP-1 complemento o porción especificada o variante, que corresponde a las regiones variables HC y LC de un mimeticuerpo GLP-1 de la preseníe invención, de conformidad con pasos del méíodo conocido. El ácido nucleicos aislado que codifica una región constante adecuada de humano (por ejemplo, las regiones HC y LC) íambién se uíiliza en esta consírucción. El ADN aislado que codifica la región variable y la región constante y el vector desfosforilado se ligan entonces con T4 DNA ligasa. Las células E. coli HB101 o XL-1 Blue se transforman entonces y se identifican las bacterias que contienen el fragmento insertado denfro de plásmido pC4 uíilizando, por ejemplo, el análisis de la enzima de reslricción. Las células de ovario de hámster chino (CHO) que carecen de un gen DHFR activo se utilizan para la íransfección. Se cotransfecían 5 g del plásmido de expresión pC4 con 0.5 g de plásmido pSV2-neo utilizando lipofecfina. En plásmido pSV2neo coníiene un marcador de selección dominante, el gen neo a partir de la región Tn5 que codifica una enzima que confiere resistencia a un grupo de antibióticos incluyendo G418. Las células se siembran en alfa minus MEM suplementado con 1 µg/ml de G418. Después de 2 días, las células se tripsinizan y se siembran en placas para clonación de hibridoma (Greiner, Alemania) en alfa minus MEM suplemeníado con 10, 25, o 50 ng/ml de metotrexato más 1 µg/ml de G418. Después de aproximadamente 10-14 días se tripsinizan las clonas particulares y luego se siembran en platos de Petri de 6 pozos o en botellas de 10 ml uíilizando diferentes concentraciones de metotrexato (50 nM, 100 nM, 200 nM, 400 nM, 800 nM). Las clonas que crecen a las concentraciones mayores de metotrexafo se fransfieren entonces a nuevas placas de 6 pozos que confienen incluso concentraciones mayores de metoírexaío (1 mM, 2 mM, 5 mM, 10 mM, 20 mM). El mismo procedimiento se repite hasta que se obtienen las clonas que crecen a una conceníración de 100 - 200 mM. Se analiza la expresión del produelo del gen deseado, por ejemplo, mediante SDS-PAGE y Western blot o mediante análisis de CLAR en fase reversa.

EJEMPLO 2 Ejemplo no limitante de un mimeticuerpo GLP-1 de la invención GLP-1 es un pépfido de 37-aminoácidos secretado a partir de las células L del intestino después de una prueba con glucosa oral. Se espera que una construcción del mimeticuerpo que incorpora un péptido GLP-1 (7-37) biológicamente activo, variante o derivado prolongue el tiempo de vida in vivo del péptido y provee una terapia novedosa para la disminución de la glucosa en sangre para disminuir la glucosa en sangre en pacientes diabéticos tipo 2. Los péptidos que codifican el péptido GLP-1 nativo (7-37) o un análogo resistente DPP-IV se pueden incorporar dentro del andamio del mimeticuerpo. Se han elaborado varias de estas moléculas, y los mimeticuerpos resultantes han demostrado actividad en los ensayos funcionales basados en célula ¡n vitro. Se debe mencionar que diferentes ensayos in vitro y modelos in vivo pueden ser utilizados en estos estudios y las potencias pueden no ser comparables entre sí o con respecto a los resultados presentados en la presente invención. Para generar variantes del mimeticuerpo GLP-1 , el péptido GLP-1 , el enlazador, la charnela, o las secuencias CH2 y CH3 en el mimeticuerpo pueden ser deletadas, añadidas, sustituidas, mutadas o modificadas para mejorar la expresión, potencia, estabilidad, o funciones efectoras. La secuencia de GLP-1 de tipo silvestre así como las variantes GLP-1 resistentes a DPP-IV, tales como GLP-1 (A2S) o GLP-1 (A2G) se pueden incorporar dentro de un andamio del mimeficuerpo. Las mutaciones del péptido se pueden elaborar para mejorar las propiedades de un mimeticuerpo GLP-1. Por ejemplo las mutaciones en los residuos amino terminal pueden mejorar la señalización mientras que las mutaciones en dominio helicoidal pueden estabilizar la hélice y por lo tanto mejorar la unión al receptor y/o estabilizar el mimeticuerpo. La longitud y composición del enlazador se puede mutar para variar la flexibilidad o estabilidad de la unión entre el péptido GLP-1 y la región Fe región. Se pueden incorporar diferentes isotipos dentro de la región de charnela de la molécula. Además, se pueden realizar mutaciones dentro de la región de charnela del mimeticuerpo para estabilizar la molécula. Por ejemplo, la charnela lgG4 de humano puede ser mutada para elaborar la variante Ser228->Pro, para estabilizar los enlaces disulfuro intercadena en el mimeticuerpo. Las variaciones dentro de la porción Fe del mimeticuerpo se pueden realizar para mejorar la estabilidad de la molécula y para cambiar las funciones efectoras tales como la unión a FcR. Por ejemplo, uno podría utilizar isotipos de humano o de murino (o variaciones de estas moléculas) tales como lgG4 con las mutaciones de Ala/Ala. Mimeticuerpo GLP-1 de la presente invención. Un ejemplo específico, no limitante de esta invención es la construcción del mimeficuerpo GLP-1 (SEQ ID NO: 2) de conformidad con la fórmula (I): ((P(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t), en donde P es una copia particular de un péptido GLP-1 (7-36) bioactivo, L es un repetido en tándem de cualquier enlazador Gly-Ser o Gly-Gly-Gly-Ser flexible, V es el C-terminal de la secuencia VH, por ejemplo, la región J de una IgG que se presenta de manera natural, H es la región de charnela completa de IgG y CH2 y CH3 son las clases de isotipos IgGI. Se espera que la vida mediante esta construcción sea varias veces aquélla del péptido GLP-1 solo o su variante o derivado y similar a aquella de una IgG. Además de la estructura básica anteriormente descrita, se describen las variantes con características biológicas potencialmente favorables. Estas incluyen construcciones que pueden tener una tendencia disminuida a la auto-asociación, funciones efectoras inmunes reducidas o inmunogenicidad disminuida. Otras modificaciones que confieren características deseadas tales como conformación mejorada del péptido biológicamente aclivo, y transferencia a través de la barrera hematoencefálica son consideradas. Las variantes y modificaciones propuestas se pueden combinar en cualquier manera para producir construcciones con actividades deseadas. Utilizando los métodos de ADN recombinante, el péptido GLP-1 se insertó dentro de vector intermedio entre un péptido señal de la inmunoglobulina y una secuencia J de humano. Esto se realizó utilizando oligonucleótidos complementarios sintéticos con extremos compatibles con los siíios de resíricción presentes en el vector. Estos oligonucleótidos comprenden secuencias codificantes para el pépíido GLP-1 , y con enlazador flexible compuesto de dos repetidos GGGS. Luego se transfirió un fragmento de restricción que contenía los elementos funcionales anteriormente mencionados deníro de un vector de expresión. Este vector contenía el promoíor aníi-CD4 de la inmunoglobulina y el potenciador, y la secuencia codificante para la secuencia de charnela de la lgG1 , región constante CH2 (CH2) y la región constante 3 (CH3) así como los elementos necesarios para la replicación del plásmido y la selección en bacterias y la selección para poderse expresar de manera establemente en células de mamífero. Este plásmido se infrodujo deníro de las células HEK293E y se se logró la expresión de MMB wíGLP-1 en células transfectadas de manera transitoria. Se logró la purificación de MMB GLP-1 mediante la proíeína A esíándar y la cromaíografía por afinidad Superase 12, produciendo aproximadamente 1.5 mg/L de células transfectadas. Esta proteína fue el material básico para los experimentos descritos a continuación. La secuencia de aminoácidos del mimeficuerpo GLP-1 se muestra en las figuras 1A-1 B. Los dominios funcionales están anotados arriba de la secuencia codificante del pépíido. Se piensa que la secuencia J proveerá incluso una mayor flexibilidad para permitir que el dímero GLP-1 asuma la conformación adecuada, y permitirá que el dímero protruya a partir de la eslrucíura globular de la ¡nmunoglobulina y peneíre denlro de la hendidura eníre ios dos recepíores GLP-1. Existen Ires cisteínas en la región de charnela de la lgG1. La primera se podría aparear normalmente con la cadena ligera de la immunoglobulina (LC) y las ofras dos participan en los enlaces iníercadena eníre las dos HCs. Las regiones CH2 y CH3 consíiíuyen la parte más voluminosa de la proíeína. Una de las razones por las que se cree que las inmunoglobulinas tienen una vida media larga en suero es su capacidad para unirse a FcRn el cual extiende la vida media en suero por el regreso mediante pinocitosis de la inmunoglobulina de vuelta al espacio extracelular. El sitio de unión de FcRn se superpone con la unión de las regiones CH2 y CH3 (Sheilds eí al, 2001 , J. Biol. Chem., vol. 276 (9), 6591-6604). Se sabe bien que dos cadenas pesadas de IgG se ensamblan duranle el procesamiento celular vía enlaces disulfuro entre las cisteínas localizadas en la región de charnela para formar un homodímero. Se espera que esto también ocurrirá entre los péptidos modificados para formar la construcción ensamblada del mimeticuerpo GLP-1. Además, se espera que el enlace disulfuro intracadena entre las dos cisteínas en el péptido GLP-1 también se formarán. La estructura esperada del mimeticuerpo GLP-1 contiene dos péptidos GLP-1. El arreglo espacial de los péptidos en el N-terminal junio con la flexibilidad de las secuencias anexas deben permitir que los péptidos formen el dímero bioactivo.

EJEMPLO 3 Ensayo de unión FACS. La acíividad del mimeticuerpo GLP-1 se ensayo en un ensayo de uniónFACS in vilro. Para deíerminar si MMB GLP-1 se une al GLP-1 R, las células HEK293 (1x106 células) que sobre-expresan el GLP-1 R se incubaron con MMB GLP-1 (20 nM) por 2 horas a 4°C. Las células se lavaron, y se añadió un anticuerpo para detección secundario marcado de manera fluorescente (1 µg/mL IgG de cabra anti-humano, específico a Fe gamma) por 30 minutos a 4°C. La intensidad de la fluorescencia de las células se moniíoreó vía ciíomelría de flujo. La figura 2A muesfra que MMB GLP-1 se une a las células HEK293 que sobre-expresan el GLP-1 R (gris, MMB GLP-1 pero no secundario; negro, solameníe secundario; rojo, MMB control negativo y secundario; azul, MMB GLP-1 y secundario). La figura 2B muestra que el MMB GLP-1 no se une a las células HEK293 control (gris, GLP-1 MMB pero no secundario; negro, solamente secundario; azul, MMB GLP-1 y secundario). La figura 2C muestra que un análogo del péptido GLP-1 (A2S) es capaz de competir con MMB GLP-1 para la unión a las células HEK293 que sobre-expresan el GLP-1R (gris, MMB GLP-1 pero no secundario; negro, MMB GLP-1 y secundario; naranja, MMB GLP-1 , 0.2 nM de competidor, secundario; azul, MMB GLP-1 , 20 nM de competidor, secundario; rojo, MMB GLP-1 , 100 nM de competidor, secundario).

EJEMPLO 4 Ensayo de AMPc. GLP-1 se une a su receptor, un receptor acoplado a la proteína G, resultando en un incremento dosis dependiente en la molécula de señalización, AMP 3',5'-cíclico (AMPc). El AMPc se puede medir con un ensayo in vitro en células que expresan el GLP-1 R (Applied Biosysfems). Brevemente, las células Rinm (100,000 células) se incubaron con concenfraciones en incremento del péptido GLP-1 (0-30 nM) o MMB GLP-1 (0-100 nM). Las células de usaron, y la cantidad de AMPc se determinó utilizando un ensayo competitivo que emplea un conjugado de AMPc marcado con fosfaíasa alcalina y un susíralo quimioluminiscenfe (Tropix@CDPD@). La actividad de AMPc dependiente de la conceníración para el MMB wt GLP-1 (figura 3A) es comparable con el péptido GLP-1 (figura 3B) (EC50=1 nM coníra 0.4 nM, respecfivamente). En un experimento similar, MMB GLP-1 (A2G) en andamio de lgG4 (figura 3C) y GLP-1 (A2S) MMB en andamio de lgG4 (figura 3D) incremento ambos niveles de AMPc en células Rinm hasta un nivel significativamente mayor que el MMB wt GLP-1 en andamio de lgG4 EJEMPLO 5 Ensayo de escisión con DPP-IV. Puesto que GLP-1 se inactiva rápidamente por DPP-IV, se estableció un ensayo in viíro para cuantificar MMB GLP-1 intacto (por ejemplo no escindido). Brevemeníe, MMB GLP-1 o el pépíido (1.2 nM) se incubó a íemperaíura ambienfe con DPP-IV (1 µg/mL, R&D Systems). Después de varios tiempos (0, 5, 10, 15, 20, 30, 40 minutos), se añadió un inhibidor de DPP-IV (100 M, Lineo) para detener la reacción. La cantidad del MMB GLP-1 intacto o del péptido se emitió utilizando el ELISA de GLP-1 activo (Lineo) y el MMB GLP-1 o los péptidos para las curvas estándares respectivas. La figura 4 muestra que el MMB GLP-1 fue significativamente más resistente a la escisión por DPP-IV, con relación al pépfido GLP-1.

EJEMPLO 6 Ensayo de estabilidad en suero de humano. La estabilidad del MMB GLP-1 en suero también se midió para asegurar que otras proteasas en suero no eran capaces de escindir e inacíivar el MMB GLP-1. Brevemente, el péptido GLP1 o el MMB GLP1 (30 nM) se incubó en suero de humano a 37°C. Después de varios tiempos, las reacciones se detuvieron con un inhibidor DPP-IV (100 M, Lineo), y las muestras se analizaron uíilizando el ELISA GLP-1 acíivo a partir de Lineo. La figura 5 muesíra que el MMB GLP-1 es estable en el suero de humano por 24 horas mientras que el péptido decayó rápidamente.

EJEMPLO 7 MMB GLP-1 ocasiona la secreción de insulina en células RINm. Para evaluar el efecío de MMB GLP-1 en la secreción de insulina, las células RINm se íraíaron con concenlraciones en incremento de GLP-1 (7-36) péptido (0-5 nM), péptido de exendina-4 (0-5 nM), o varios mimeíicuerpos GLP-1 (5 o 50 nM) y se midió la caníidad de la insulina secreíada vía ELISA. Todos los MMBs GLP-1 evaluados íuvieron actividades en la estimulación de la secreción de insulina en las células RINm (figura 6). A 50 nM, los MMBs tuvieron actividades comparables con aquellas del péptido GLP-1 de tipo silvesíre (7-36).

EJEMPLO 8 MMB GLP-1 disminuye el nivel de glucosa en ratones db/db. Los ratones db/db de seis semanas de edad se someíieron a ayuno por dos horas y luego se dosificaron intravenosamente con el vehículo, el péptido GLP-1 , o el MMB GLP-1 (A2S). La glucosa en sangre se moniíoreó 0.5, 1, 2, 3, y 4 horas después de la dosificación. El péptido GLP-1 disminuyó la glucosa en sangre a los 30 minutos, pero a los 60 minutos, el nivel de glucosa en sangre empezó a incrementar de nuevo probablemente debido a la vida media corta del péptido GLP-1. En comparación, MMB GLP-1 (A2S) a una dosis 100 veces menor que el pépíido GLP-1 indujo una disminución en la glucosa en sangre a lo largo de un período íoíal de 4 horas (figura 7A). Además, la disminución de la glucosa en sangre fue dosis dependiente (figura 7B).

EJEMPLO 9 Farmacocinéticas de MMBs GLP-1 en ratones y en monos cynomolgus. Para medirlas farmacocinéticas de cuatro mimeíicuerpos GLP-1 (A2G, A2S, exedina-cap, y wí), los ratones C57/B16 se dosificaron intravenosamente con 1 mg/kg de los MMBs. El plasma se obtuvo vía punción cardiaca después de sacrificar a los ratones en diferentes puntos de tiempo. Se uíilizaron diversos ELISAs para medir Fe, MMB total, MMB activo, y péptido activo conforme fueron metabolizados en el animal. MMB activo refleja el N-terminal intacto del péptido aún unido a la región Fe del mimeticuerpo. La sustitución del segundo aminoácido en el péptido (alanina) con cualesquiera serina o glicina prolongó el tiempo de vida del MMB acíivo en circulación. Los monos cynomolgus fueron inyectados iníravenosameníe con 1.0 mg/kg de cuafro diferentes construcciones de MMB GLP-1 y se tomaron las muestras de suero a diferentes puntos de tiempo a partir de 10 minutos hasía 5 días después de la dosificación. Las muestras de suero se evaluaron mediante ELISA para cuantificar el MMB intacto. Como se ilusíra en la figura 8, los cuafro MMBs exhibieron una rápida fase de distribución, seguida por una fase de eliminación más lenta. Las constantes farmacocinéíicas se calcularon para cada una de las conslrucciones para indicar un T de aproximadameníe 3 días con similar exposición determinada por AUC a partir de T = 0 a T = 120 horas.

EJEMPLO 10 Efectos del MMB GLP-1 duraníe una prueba de tolerancia a la glucosa oral en ratones diabólicos. Los ratones db/db diabéticos de ocho semanas de edad o fueron sometidos a ayuno por seis horas antes de una inyección subcutánea del MMB GLP-1 (0.02 a 2 mg/kg). Después de la dosificación, los ratones fueron sometidos a ayuno por seis horas adicionales y se midió una línea basal para la glucosa en sangre durante ayuno. A t = 0, a los ratones se les proporcionó una cebadura oral de 1.0 mg/g de glucosa, y se midieron los niveles de glucosa en sangre a varios tiempos. Los resultados que se muestran en la figura 9 indican que el MMB GLP-1 fue efectiva en la disminución de la glucosa en sangre durante una prueba de tolerancia a la glucosa oral en todas las dosis evaluadas.

EJEMPLO 11 Efectos del MMB GLP-1 sobre la glucosa en sangre durante ayuno después de la dosificación crónica a los raíones diabéíicos. Los ratones db/db diabéticos de diez semanas de edad fueron dosificados subcutáneamente diariamente con el vehículo o con MMB GLP-1 (1 mg/kg) por seis semanas. Los niveles de glucosa en sangre duranle ayuno se midieron dos veces por semana duraníe el curso del esíudio. El nivel de glucosa en sangre durante ayuno se redujo en los animales tratados en relación con los animales control a lo largo del estudio (figura 10), y a las seis semanas, la diferencia fue mayor de 200 mg/dL (466 contra 221 mg/dL, control y animales tratados respectivamente).

EJEMPLO 12 Efectos del MMB GLP-1 sobre la prueba de tolerancia a glucosa oral después de la dosificación crónica a los ratones diabéticos. Como en el ejemplo 11 , los raíones db/db diabéíicos de diez semanas de la fueron dosificados diariamente con el vehículo o con MMB GLP-1 (1 mg/kg) por seis semanas. Después de 40 días de dosificación, a los ratones se les realizó una prueba de tolerancia a glucosa oral. Brevemeníe, a t = 0, a los ratones se les proporcionó una cebadura oral de 1.0 mg/g de glucosa, y se midió la glucosa en sangre a varios tiempos. Los resultados que se muestran en la figura 11 indican que el MMB GLP-1 fue efecíiva para disminuir la glucosa duraníe una prueba de tolerancia a la glucosa oral sugiriendo que los raíones tratados crónicamente con MMB GLP-1 son capaces de eliminar una carga de glucosa de manera más eficiente en relación con los animales conírol.

EJEMPLO 13 Efectos del MMB GLP-1 sobre la reducción de HbAlc después de la dosificación crónica a los raíones diabéticos. Como en los ejemplos 11 y 12, los ratones db/db diabéticos de diez semanas de edad fueron dosificados diariamente con el vehículo o con MMB GLP-1 (1 mg/kg) por seis semanas. Antes y después de las seis semanas de dosificación, se tomaron las muestras de sangre completa y se analizaron para el porcentaje de HbAlc. Como se muestra en la figura 12, el HbAlc de los animales tratados con GLP-1 se incrementó en un 109 por cienío duraníe el período de seis semanas mieníras que en los animales control se incrementó en un 142 por ciento. Estos datos sugieren que los animales íratados son más capaces de regular sus niveles de glucosa duraníe un período crónico en relación con los confroles.

EJEMPLO 14 Efecíos del MMB GLP-1 sobre una prueba de íolerancia a la glucosa oral en monos cynomolgus normales. Se realizó una prueba de tolerancia a la glucosa oral (OGTT) en monos cynomolgus normales antes de y seis días después de una dosis particular del MMB GLP-1 (1 mg/kg). Brevemeníe, a í = 0, a los monos se les proporcionó una cebadura oral de 2.0 mg/g de glucosa, y se midió la glucosa en sangre a varios íiempos. Los niveles de glucosa en sangre se redujeron significaíivameníe a los seis días con OGTT después de la dosificación (figura 13A), y los niveles de insulina se incrementaron significativamente (figura 13B). Esto sugiere que MMB GLP-1 ocasiona secreción de insulina a partir del páncreas a concentraciones elevadas de glucosa.

EJEMPL0 15 Efectos del MMB GLP-1 sobre la tinción por insulina en ¡sietes de raíones diabéíicos (db/db) después de una dosis particular. Los ratones (db/db) diabéíicos de doce semanas de edad fueron íraíados con una dosis particular subcuíánea del MMB GLP-1 (1.5 mg/kg), y se cosecharon los páncreas cuaíro semanas después. Los páncreas fueron seccionados y se tiñeron para la presencia de insulina. Como se muestra en la figura 14, se presentó una tinción más significativa de insulina en los animales tratados en relación con los animales control.

EJEMPLO 16 MMB GLP-1 reírasa el vaciado gáslrico en perros normales. Se implantó quirúrgicamente una cánula gásfrica deníro de perras beagle (10-15 kg) bajo anestesia general y se dejaron recuperar por al menos 2 semanas. Las perras se sometieron a ayuno por 24 horas después de lo cual se les proporcionó agua de manera libre. La cánula gástrica se abrió y se removieron jugo gástrico y permanentes de comida con 40-50 ml de agua lukewarm. Se dosificados grupos de seis perras subcuíáneamenfe con lidamidina, un agonisfa alfa2 (0.63 mg/kg), 60 minuíos aníes de la comida, un conírol positivo para el retraso del vaciado drástico. Las peras dosificados con el vehículo control o con MMB GLP-1 (0.1 mg/kg) fueron dosificadas intravenosamente en la vena cefálica 15 minutos antes de la comida. Minuíos aníes de la comida, la cánula gásírica se abrió para determinar la cantidad de fluido presente en el estómago para el valor de línea basal y el fluido se reintrodujo rápidamente. Luego se administró una comida que consistía de 250 ml de una solución de glucosa (5 g/l) vía la cánula y se dejó permanecer en el estómago por 30 minutos. Los contenidos gásíricos se drenaron a partir del estómago para medir el volumen loíal después de 30 minuíos. Un ml de los contenidos gástricos se retuvo para análisis y el volumen remanente se reintrodujo deníro del estómago vía la cánula. La evaluación del volumen del contenido gásírico y el retiro de las muestras se repitió a los 60, 90, y 120 minutos. Se evaluaron las concenlraciones de glucosa para las muesíras recolecíadas y se utilizaron para determinar la cantidad absoluta de la glucosa remanente en el estómago en cada punto de íiempo. El porcentaje de glucosa retenida en el estómago se determinó a partir del valor inicial y ia concentración de glucose en cada punto de tiempo se gráfico como una función del tiempo. El tiempo en el cual se tuvieron 50% de los contenidos gástricos se determinó medianíe el ajuste de las curvas a un exponencial particular. Como se muestra en la figura 15, el 50% de los contenidos gástricos se vaciaron en las perras dosificadas con el vehículo en 12.35±3.69 minuíos siguiendo el conlrol positivo a lidamidina y las perras dosificadas con MMB GLP-1 mostraron un retraso significativo en el vaciado gástrico (30.60±6.47 y 59.23+14.46, respectivamente).

EJEMPLO 17 MMB GLP-1 disminuye la glucosa en sangre después de una prueba de tolerancia a la glucosa oral (OGTT) en ratones obesos inducidos por dieta. Para desarrollar un modelo de murino de obesidad inducida por dieta, los ratones se mantuvieron en una dieta con alio contenido de grasas por al menos 27 semanas. Los ratones se volvieron obesos y se determinaron diabéticos cuando los valores de glucosa en sangre durante el ayuno excedieron 120 mg/dl. Para evaluar el efecto de la íerapia con MMB GLP-1 sobre los niveles de glucosa en sangre posíprandial, los ratones obesos inducidos por dieta fueron someíidos a ayuno durante toda la noche y se dosificaron subcutáneamente con 0.02, 0.2, o 2 mg/kg de MMB GLP-1 o con el vehículo control. Seis horas después de la dosificación, a los ratones se les proporcionaron 1.5 mg/g por cebadura gástrica de glucose. Los niveles de glucosa en sangre se determinaron antes de la dosificación de MMB a t = 0, 15, 30, 60, 90, 120, 150, y 180 minutos uíilizando sangre de la vena de la cola. Como se muesfra en la figura 16, MMB GLP-1 disminuyó de manera dependiente de la dosis los valores de glucosa en sangre durante ayuno como se observa a f = 0 y en todos los punios de íiempo subsecuentes. Se calcularon las áreas bajo las curvas entre t = 0 y t = 180 demostrando una disminución significativa en eliminación de glucosa en todas las dosis.

EJEMPLO 18 MMB GLP-1 disminuye la glucosa en sangre en una prueba de tolerancia a la glucosa intraperitoneal (IPGTT) en ratones db/db. Los ratones db/db de aproximadamente 13-15 semanas de edad fueron separados al azar en grupos de tratamiento de seis ratones basándose en los niveles de glucosa en sangre durante ayuno.

Los ratones fueron dosificados ya sea con 0.02 mg/kg o con 0.1 mg/kg de MMB GLP-1 o con 0.1 mg/kg de MMB control negativo seis a horas antes de la prueba de tolerancia a la glucosa. Cinco minutos antes de la prueba de tolerancia a la glucosa, se llevó a cabo una medición de la glucosa con un glucómetro de mano a partir de la sangre de la vena de la cola. Luego los ratones fueron dosificados intraperitonealmente con 1 mg/g de D-glucosa y se monitorearon los niveles de glucosa en sangre a 10 minuíos, 20 minuíos, 30 minutos, 60 minutos, 90 minutos, 120 minutos, 150 minutos, y 180 minuíos. Como se ilustra en la figura 17A, los niveles de glucosa en sangre disminuyeron significativamente en ambos grupos tratados con MMB GLP-1 durante todo el curso de tratamiento. Los grupos adicionales de animales tratados de la misma manera fueron sacrificados para la medición de los niveles de insulina a t = 10 minutos. Existe un incremento dependiente de la dosis en la cantidad de insulina liberada a los 10 minutos después de la dosificación con MMB GLP-1. Ventajas: el uso de esía molécula novedosa como un íerapéuíico para tratar la diabetes íipo 2 provee varias ventajas en comparación con otros análogos GLP-1. Por ejemplo, es probable prolongar la vida media del péptido GLP-1. También, el péptido GLP-1 de tipo silvesfre en el andamio mimeticuerpo es resistente a la degradación por profeasa, específicamente DPP-IV. Esío puede permiíir íraíamiento con el péptido GLP-1 de íipo silvestre en lugar de con un péptido mutante. Puesto que GLP-1 es un pépíido nativo, que puede ser menos inmune a los pacientes tratados con un mimeticuerpo GLP-1 que en pacientes fratados con un análogo GLP-1 mutado. Además, el gran tamaño del GLP-1 MMB puede impediar al atravesar la barrera hematoencefálica. Esto puede pfrecer ventajas puesto que la náusea y ansiedad han sido asociadas con GLP-1 comprometiendo al GLP-1 R en el cerebro. Además, la plataforma del mimecuerpo resulta en la expresión de dos péptidos en cada molécula de mimeticuerpo. Esío permiíe que los péptidos GLP-1 interactúen entre sí, formando un Igando dimérico que puede incrementar la afinidad a la superficie celular de GLP-1. Será evidente que la invención la invención puede ser practicada de otra manera a como se describe particularmente en las descripciones y ejemplos precedentes. Numerosas modificaciones y variaciones de la presente invención son posibles a la luz de las enseñanzas anteriormente mencionadas. Por lo tanto, se encuentran deníro del alcance de la presente invención.

CUADRO 1 CUADRO 1 (continuación!

Claims (37)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Al menos un ácido nucleico de mimeíicuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende al menos un polinucleóíido que codifica la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NOs: 2 ó 4, o un polinucleólido complementario al mismo.

2.- Al menos un ácido nucleico de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende al menos un polinucleótido que codifica la secuencia de aminoácidos que comprende al menos una seleccionada a parfir de SEQ ID NOs: 7-14, o un polinucleótido complementario al mismo.

3.- Al menos un ácido nucleico de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende al menos un polinucleótido que codifica un polipéptido de conformidad con la fórmula (I): (Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(l), en donde P es al menos un pépfido GLP-1 bioactivo, variante o derivado, L es al menos una secuencia enlazadora, la cual puede ser un péptido que provee flexibilidad estrucíural al permitir que el mimeficuerpo tenga orientaciones alíemaíivas y propiedades de unión, V es al menos una porción de un C-ferminal de una región variable de la inmunoglobulina, H es al menos una porción de una región de charnela variable de la inmunoglobulina, CH2 es al menos una porción de una región constante CH2 de la inmunoglobulina, CH3 es al menos una porción de una región constante CH3 de la inmunoglobulina, n es un entero de 1 a 10, y o, p, q, r, s, y t pueden ser independientemente un entero de 0 a 10. 4.- Al menos un polipépíido de mimeficuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende iodos los aminoácidos contiguos de SEQ ID NOs: 2 ó

4.

5.- Al menos un polipéptido de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende iodos los aminoácidos contiguos de al menos una de SEQ ID NOs: 7-14.

6.- Al menos un polipéptido de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende un polipépíido de conformidad con la fórmula (I): (Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(í), en donde P es al menos un péptido GLP-1 bioacfivo seleccionado a partir de SEQ ID NO: y 6, L se selecciona a partir de GS, GGS, GGGS (SEQ ID NO: 16), GSGGGS (SEQ ID NO: 17), GGSGGGS (SEQ ID NO: 18), GGSGGGSGG (SEQ ID NO: 19) y GGGSGGGSGG (SEQ ID NO: 20); V se selecciona a partir de GTLVTVSS (SEQ ID NO: 21), GTLVAVSS (SEQ ID NO: 22), GTAVTVSS (SEQ ID NO: 23), TVSS (SEQ ID NO: 24), y AVSS (SEQ ID NO: 25); H isEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGP (SEQ ID NO: 26), CH2 es SVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTK PREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK (SEQ ID NO: 43), CH3 es GQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLS LSPGK (SEQ ID NO: 44), n es un entero de 1 a 10, y o, p, q, r, s, y t pueden ser independientemente un entero de 0 a 10.

7.- Al menos un polipéptido de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende un polipéptido de conformidad con la fórmula (I): (Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t), en donde P es al menos un pépíido GLP-1 bioacfivo de SEQ ID NO: 6, L se selecciona a partir de GS, GGS, GGGS (SEQ ID NO: 16), GSGGGS (SEQ ID NO: 17), GGSGGGS (SEQ ID NO: 18), GGSGGGSGG (SEQ ID NO: 19) y GGGSGGGSGG (SEQ ID NO: 20); V se selecciona a partir de GTLVTVSS (SEQ ID NO: 21 ), GTLVAVSS (SEQ ID NO: 22), GTAVTVSS (SEQ ID NO: 23), TVSS (SEQ ID NO: 24), y AVSS (SEQ ID NO: 25); H es ESKYGPPCPSCPAPEFLGGP (SEQ ID NO: 27), CH2 es SVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTK PREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAK (SEQ ID NO: 45), CH3 es GQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLS LSLGK (SEQ ID NO: 46), n es un entero de 1 a 10, y o, p, q, r, s, y t pueden ser independientemente un entero de 0 a 10.

8.- Al menos un polipéptido de mimeíicuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende un polipéptido de conformidad con la fórmula (I): (Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t), en donde P es al menos un péptido GLP-1 bioactivo de SEQ ID NO: 6, L se selecciona a paríir de GS, GGS, GGGS (SEQ ID NO: 16), GSGGGS (SEQ ID NO: 17), GGSGGGS (SEQ ID NO: 18), GGSGGGSGG (SEQ ID NO: 19) y GGGSGGGSGG (SEQ ID NO: 20); V se selecciona a partir de GTLVTVSS (SEQ ID NO: 21 ), GTLVAVSS (SEQ ID NO: 22), GTAVTVSS (SEQ ID NO: 23), TVSS (SEQ ID NO: 24), y AVSS (SEQ ID NO: 25); H es ESKYGPPCPPCPAPEAAGGP (SEQ ID NO: 28), CH2 es SVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKT KPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAK (SEQ ID NO: 45), CH3 es GQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLS LSLGK (SEQ ID NO: 46), n es un entero de 1 a 10, y o, p, q, r, s, y í pueden ser independientemente un entero de 0 a 10.

9.- Al menos un polipépíido de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende un polipéptido de conformidad con la fórmula (I): (Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t), en donde P es al menos un péptido GLP-1 bioactivo, variante o derivado, L es al menos una secuencia enlazadora, la cual puede ser un péptido que provee flexibilidad esíruclural al permifir que el mimeficuerpo tenga orientaciones aiíernaíivas y propiedades de unión, V es al menos una porción de un C-íerminal de una región variable de la inmunoglobulina, H es al menos una porción de una región de charnela variable de la inmunoglobulina, CH2 es SVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTK PREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK (SEQ ID NO: 43), CH3 es GQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLS LSPGK (SEQ ID NO: 44), n es un eníero de 1 a 10, y o, p, q, r, s, y t pueden ser independientemente un eníero de 0 a 10. 10.- Al menos un polipéptido de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende un polipéptido de conformidad con la fórmula (I): (Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t), en donde P es al menos un pépíido GLP-1 bioactivo, variante o derivado, L es al menos una secuencia enlazadora, la cual puede ser un péptido que provee flexibilidad esírucfural al permitir que el mimeticuerpo tenga orientaciones alternativas y propiedades de unión, V es al menos una porción de un C-íerminal de una región variable de la inmunoglobulina, H es al menos una porción de una región de charnela variable de la inmunoglobulina, CH2 es SVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKT KPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAK (SEQ ID NO: 45), CH3 es GQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLS LSLGK (SEQ ID NO: 46), n es un eníero de 1 a 10, y o, p, q, r, s, y t pueden ser independientemente un eníero de 0 a

10.

11.- Al menos un polipépíido de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende un polipépíido de conformidad con la fórmula (I): (Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(í), en donde P es al menos un pépíido GLP-1 bioactivo de SEQ ID NO: 6, L es al menos una secuencia enlazadora, la cual puede ser un péptido que provee flexibilidad estructural al permitir que el mimeticuerpo tenga orientaciones alternativas y propiedades de unión, V es al menos una porción de un C-terminal de una región variable de la inmunoglobulina, H es al menos una porción de una región de charnela variable de la inmunoglobulina, CH2 es al menos una porción de una región constante CH2 de la inmunoglobulina, CH3 es al menos una porción de una región constante CH3 de la inmunoglobulina, n es un entero de 1 a 10, y o, p, q, r, s, y t puede ser independientemente un entero de 0 a 10.

12.- Al menos un polipépíido de mimelicuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende un polipépíido de conformidad con la fórmula (I): (Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(í), en donde P es al menos un péptido GLP-1 bioactivo, varianíe o derivado, L se selecciona a partir de GS, GGS, GGGS (SEQ ID NO: 16), GSGGGS (SEQ ID NO: 17), GGSGGGS (SEQ IDNO: 18), GGSGGGSGG (SEQ ID NO: 19) y GGGSGGGSGG (SEQ ID NO: 20); V es al menos una porción de un extremo C-terminal de una región variable de la inmunoglobulina, H es al menos una porción de una región de charnela variable de la inmunoglobulina, CH2 es al menos una porción de una región constante CH2 de la inmunoglobulina, CH3 es al menos una porción de una región constante CH3 de la inmunoglobulina, n es un entero de 1 a 10, y o, p, q, r, s, y t pueden ser independientemente un eníero de 0 a 10.

13.- Al menos un polipéptido de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende un polipéptido de conformidad con la fórmula (I): (Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t), en donde P es al menos un péptido GLP-1 bioactivo, varianíe o derivado; L es al menos una secuencia enlazadora, la cual puede ser un péplido que provee flexibilidad esírucfural al permitir que el mimeticuerpo tenga orientaciones alternativas y propiedades de unión; V se selecciona a partir de GTLVTVSS (SEQ ID NO: 21 ), GTLVAVSS (SEQ ID NO: 22), GTAVTVSS (SEQ ID NO: 23), TVSS (SEQ ID NO: 24), y AVSS (SEQ ID NO: 25); H es al menos una porción de una región de chamela variable de la inmunoglobulina; CH2 es al menos una porción de una región constante CH2 de la inmunoglobulina; CH3 es al menos una porción de una región constante CH3 de la inmunoglobulina; n es un eníero de 1 a 10, y o, p, q, r, s, y í pueden ser independientemente un entero de 0 a 10.

14.- Al menos un polipéptido de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende un polipéptido de conformidad con la fórmula (I): (Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t), en donde P es al menos un péptido GLP-1 bioactivo, variante o derivado, L es al menos una secuencia enlazadora, la cual puede ser un péptido que provee flexibilidad estructural al permitir que el mimeticuerpo tenga orientaciones alternativas y propiedades de unión, V es al menos una porción de un C-terminal de una región variable de la inmunoglobulina, H se selecciona a partir de EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGP (SEQ ID NO: 26), ESKYGPPCPSCPAPEFLGGP (SEQ ID NO: 27), y ESKYGPPCPPCPAPEAAGGP (SEQ ID NO: 28), CH2 es al menos una porción de una región constante CH2 de la inmunoglobulina, CH3 es al menos una porción de una región consíaníe CH3 de la ¡nmunoglobulina, n es un entero de 1 a 10, y o, p, q, r, s, y í pueden ser independientemente un entero de O a 10.

15.- Al menos un polipéptido de mimeíicuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende un polipépíido de conformidad con la fórmula (I): (Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t), en donde P es al menos un péptido GLP-1 bioactivo, variante o derivado, L es al menos una secuencia enlazadora, la cual puede ser un péptido que provee flexibilidad esírucfural al permitir que el mimelicuerpo tenga orientaciones alternativas y propiedades de unión, V es al menos una porción de un C-terminal de una región variable de la inmunoglobulina, H se selecciona a partir de EPKSADKTHTCPPCPAPEAAGGP (SEQ ID NO: 29), EPKSADKTHTCPPCPAPELAGGP (SEQ ID NO: 30), EPKSADKTHTCPPCPAPEALGGP (SEQ ID NO: 31), EPKSADKTHTCPPCPAPELEGGP (SEQ ID NO: 32), EPKSSDKTHTCPPCPAPEFLGGP (SEQ ID NO: 33), EPKSADKTHACPPCPAPELLGGP (SEQ ID NO: 34), EPKSADKAHTCPPCPAPELLGGP (SEQ ID NO: 35), y EPKSADKTHTCPPCPAPELLGGP (SEQ ID NO: 36), ADKTHTCPPCPAPELLGGP (SEQ ID NO: 37), THTCPPCPAPELLGGP (SEQ ID NO: 38), ESKYGPPCPSCPAPEAAGGP (SEQ ID NO: 39), ESKYGPPCPPCPAPELLGGP (SEQ ID NO: 40), CPPCPAPELLGGP (SEQ ID NO: 41 ), y CPPCPAPEAAGGP (SEQ ID NO: 42), CH2 es al menos una porción de una región consíaníe CH2 de la inmunoglobulina, CH3 es al menos una porción de una región constante CH3 de la inmunoglobulina, n es un entero de 1 a 10, y o, p, q, r, s, y t pueden ser independientemente un entero de O a 10.

16.- Al menos un polipéptido de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido de conformidad con la fórmula (I): (Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t), en donde P es al menos un péptido GLP-1 bioactivo, variante o derivado, L es al menos una secuencia enlazadora, la cual puede ser un péptido que provee flexibilidad estructural al permitir que el mimeticuerpo tenga orientaciones alternativas y propiedades de unión, V es al menos una porción de un C-terminal de una región variable de la inmunoglobulina, H es al menos una porción de una región de charnela variable de la inmunoglobulina, CH2 es al menos una porción de una región constante CH2 de la inmunoglobulina, CH3 es al menos una porción de una región constante CH3 de la inmunoglobulina, n es un entero de 1 a 10, y o, p, q, r, s, y t pueden ser independientemente un entero de 0 a 10.

17.- El ácido nucleico de mimeíicuerpo GLP-1 CH1 suprimido o polipéptido de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1-16, caracterizado además porque dicho polipéptido tiene al menos una acíividad de al menos un polipéptido P.

18.- Un anticuerpo monoclonal o policlonal anti-idiotipo, proteína de fusión, o fragmento de la misma, que se une específicamente a al menos un polipéptido de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 4-16.

19.- El ácido nucleico de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1-3, o que codifica al menos un polipéptido de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido o anticuerpo de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 4-18 o un polinucleótido complementario al mismo.

20.- Un vector de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido que comprende al menos un ácido nucleico aislado de conformidad con la reivindicación 19.

21.- Una célula hospedera de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido que comprende un ácido nucleico aislado de conformidad con la reivindicación 19.

22.- La célula hospedera de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido de conformidad con la reivindicación 21 , caracterizada además porque dicha células hospedera es al menos una seleccionada a partir de células COS-1 , COS-7, HEK293, BHK21 , CHO, BSC-1 , Hep G2, 653, SP2/0, 293, NSO, DG44 CHO, CHO K1 , HeLa, de mieloma, o de linfoma, o cualquier célula derivada, inmortalizada o transformada de las mismas.

23.- Un método para la producción de al menos un polipéptido de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido o anticuerpo de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, que comprende traducir un ácido nucleico de conformidad con la reivindicación 19 bajo condiciones in vitro, in vivo o in situ, de tal manera que el mimeicuerpo GLP-1 CH1 deletado o anticuerpo se expresa en cantidades detectables o recuperables.

24.- Una composición que comprende al menos un ácido nucleico de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, polipéptido de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, o anticuerpo de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1-19.

25.- La composición de conformidad con la reivindicación 24, caracterizada además porque dicha composición comprende adicionalmente al menos un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

26.- La composición de conformidad con la reivindicación 24, caracterizada además porque comprende al menos una composición que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un compuesto, composición o polipéptido seleccionado a partir de al menos uno de un fármaco relacionado con la diabetes o con el metabolismo de la insulina, una marca delectable o reportero, un antagonista de TNF, un fármaco anti-infeccioso, un fármaco para el sistema cardiovascular (CV), un fármaco para el sistema nervioso cenfral (SNC), un fármaco para el sistema nervioso autónomo (SNA), un fármaco para el tracto respiratorio, un fármaco para el tracto gastrointestinal (Gl), un fármaco hormonal, un fármaco para balance de fluidos o de electrolitos, un fármaco hematológico, un antineoplacíico, un fármaco para inmunomodulación, un oftálmico, fármaco ótico o nasal, un fármaco tópico, un fármaco nutricional, una citoquina, o un antagonista de citoquina.

27.- La composición de conformidad con la reivindicación 24, caracterizada además porque está en una forma de al menos una seleccionada a partir de una solución, emulsión o coloide, una preparación liofilizada, o un polvo en forma líquida, gaseosa o seca.

28.- El uso de al menos un ácido nucleico, polipéptido o anticuerpo de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1-19 en la elaboración de una composición farmacéutica para el diagnóstico o tratamiento de una condición relacionada con GLP-1 en una célula, tejido, órgano o animal.

29.- El uso que se reclama en la reivindicación 28, en donde la condición relacionada con GLP-1 es diabetes o insuficiencia cardiaca congestiva.

30.- El uso que se reclama en la reivindicación 28, en donde la composición farmacéutica comprende 0.0001-50 mg de anticuerpo de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido; 0.1-500 mg de dicho mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido; o 0.0001-100 µg de dicho ácido nucleico de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido por kilogramo de dichas células, tejido, órgano o animal.

31.- El uso que se reclama en la reivindicación 28, en donde dicha composición farmacéutica es administrable por al menos un modo seleccionado a partir de adminisíración pareníeral, subcufánea, intramuscular, intravenosa, intrarticular, inírabronquial, intraabdominal, intracapsular, intracartilaginosa, i ntraca vitaría, inlracelial, intracerebelar, ¡ntracerebroventricular, intracolico, iníracervical, intragásírica, intrahepática, intramiocardial, intraosteal, intrapélvica, intrapericardiaca, intraperitoneal, intrapleural, intraprosíática, inírapulmonar, inírarecíal, inírarenal, intraretinal, intraespinal, intrasinovial, intraíorácica, intrauterina, intravesical, intralesional, en bolo, vaginal, rectal, bucal, sublingual, intranasal, o transdermal.

32.- El uso que se reclama en la reivindicación 28, en donde la composición farmacéutica es administrada antes, concurrentemente o después, al menos una composición que comprende al menos un compuesto o polipéptido seleccionado a partir de al menos uno de un fármaco relacionado con el metabolismo de la diabetes o de la insulina, una marca detecíable o reportero, un antagonista de TNF, un fármaco anti-infeccioso, un fármaco para el sistema cardiovascular (CV), un fármaco para el sistema nervioso central (SNC), un fármaco para el sistema nervioso autónomo (SNA), un fármaco para el tracto respiratorio, un fármaco para el fracío gasíroiníesíinal (Gl), un fármaco hormonal, un fármaco para balance de fluidos o de electrolitos, un fármaco hematológico, un aníineoplacíico, un fármaco para inmunomodulación, un oftálmico, fármaco ótico o nasal, un fármaco tópico, un fármaco nutricional, una citoquina, o un antagonista de citoquina es administrable adicionalmente a dicha célula, tejido, órgano o animal.

33.- Un dispositivo, que comprende al menos un polipéptido, anticuerpo o ácido nucleico aislado de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1-19, caracterizado además porque dicho dispositivo es adecuado para poner en contacto o administrar dicho al menos uno de dichos polipéptido, anticuerpo o ácido nucleico de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, mediante al menos un modo seleccionado a paríir de adminisíración parenteral, subcutánea, iníramuscular, iníravenosa, inírarticular, intrabronquial, intraabdominal, intracapsular, iníracartilaginosa, iníracaviíaria, intracelial, intracerebelar, iníracerebroveníricular, iníracolico, intracervical, intragásírica, intrahepática, ¡ntramiocardial, iníraosfeal, inlrapélvica, intrapericardiaca, ¡ntxaperifoneal, inlrapleural, iníraprostática, inírapulmonar, intrarectal, intrarenal, inírarefinal, iníraespinal, inírasinovial, infraforácica, inírauíerina, iníravesical, intralesional, en bolo, vaginal, rectal, bucal, sublingual, intranasal, o íransdermal.

34.- Un artículo para elaboración de uso farmacéutico o diagnóstico en humano, que comprende material para empaquetamiento y un contenedor que comprende al menos un polipéptido, anticuerpo o ácido nucleico aislado de mimeticuerpo GLP-1 CH1 suprimido, de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1-19.

35.- El artículo para elaboración de conformidad con la reivindicación 34, caracterizado además porque dicho contenedor es un componente de un dispositivo o sistema de adminisíración pareníeral, subculánea, iníramuscular, intravenosa, intrarticular, inírabronquial, infraabdominal, iníracapsular, iníracartilaginosa, intracavitaria, intracelial, intracerebelar, ¡ntracerebroventricular, intracolico, intracervical, intragástrica, intrahepática, intramiocardial, intraosíeal, inírapélvica, inírapericardiaca, ¡níraperifoneal, ¡nírapleural, iníraprosíáíica, infrapulmonar, infrarecíal, inírarenal, infrareíinal, infraespinal, intrasinovial, intraforácica, inírauíerina, infravesical, iníralesional, en bolo, vaginal, recial, bucal, sublingual, intranasal, o transdermal.

36.- Un método para la producción de al menos un polipépfido, anticuerpo o ácido nucleico de mimeficuerpo GLP- CH1 suprimido de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1-19, que comprende proveer al menos una célula hospedera, animal íransgénico, planta transgénica, célula vegetal capaz de expresar en caníidades deíecíables o recuperables dicho polipéptido, anticuerpo o ácido nucleico.

37.- Al menos un polipéptido, anticuerpo o ácido nucleico de mimeíicuerpo GLP-1 CH1 suprimido, producido por un méíodo de conformidad con la reivindicación 36.