USO DE NUEVOS ESTERES DE ETONOGESTREL
Campo de la Invención La presente invención se refiere al campo de la anticoncepción (femenina y masculina) y la terapia de reemplazo de hormonas (HRT) (femenina y masculina) y el tratamiento/prevención de enfermedades ginecológicas. Antecedentes de la Invención Los métodos anticonceptivos para hombres y mujeres son importantes para la salud reproductiva a nivel mundial. Sin embargo, hasta la fecha no se encuentran disponibles métodos efectivos y eficientes para la anticoncepción masculina. La anticoncepción masculina busca suprimir la espermatogénesis a través de la supresión de la hormona de luteinización de las gonadotropinas (LH) y la hormona estimulante de folículos (FSH). Esto da como resultado un agotamiento de la testosterona intratesticular, y el cese de la espermatogénesis. La administración del progestágeno da como resultado una supresión dependiente de la dosis de las gonadotropinas pituitarias y por consiguiente, una disminución de los niveles de testosterona y una inhibición reversible de la espermatogénesis. Se requiere un andrógeno exógeno para compensar los niveles reducidos de testosterona. Del mismo modo, la HRT masculina puede ser realizada, dando como resultado el reemplazo de la testosterona por un andrógeno exógeno, el cual es más seguro en la próstata que la testosterona endógena. El uso de los progestógenes junto con los andrógenos para utilizarlos como anticonceptivos masculinos es conocido (Guerin y Rollet (1988), International Journal of Andrology 11, páginas 187 a 199). Sin embargo, no ha sido sugerido el uso de ésteres específicos de etonogestrel para la anticoncepción masculina y el tratamiento HRT masculino. Además, es conocido el uso de los progestógenos junto con estrógenos para utilizarlos en la anticoncepción femenina (M. Tausk, J.H.H. Thijssen, Tj.B. van Wimersma Greidanus, "Pharmakologie der Hormone", Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1986). Los progestágenos son ampliamente utilizados en la anticoncepción femenina, y en el tratamiento HRT femenino. En la anticoncepción, la combinación de anticonceptivos orales de progestágenos-estrogenos son los más ampliamente utilizados. La administración de dicha combinación da como resultado un número de efectos: bloquea la ovulación, e interfiere con el desarrollo de las fases del endometrio, las cuales disminuyen la oportunidad de la implantación exitosa, y ocasiona que la mucosa cervical se vuelva tan viscosa que obstaculiza la penetración del esperma. La mayor parte de las pildoras que solamente contienen progestágenos (POP's) tienen como objetivo por lo menos solamente el último efecto mencionado. La terapia HRT femenina tiene como objetivo la su plementación del estrógeno endógeno para el tratamiento de padecimientos peri- y post-menopáusicos (bochornos, sequedad vaginal) y para la prevención de los síntomas de la deficiencia de estrógenos a largo plazo. Estos últimos incluyen la osteoporosis, la enfermedad de la arteria coronaria, incontinencia urogenital y posiblemente también, la enfermedad de Alzheimer y el cáncer colo-rectal. Una desventaja de la administración no opuesta de estrógenos a largo plazo, es el aumento asociado en la proliferación del endometrio, lo cual a su vez puede aumentar el riesgo de cáncer del endometrio. Por esa razón, los progestágenos son co-administrados en regímenes de largo plazo, debido a su capacidad para reducir la actividad proliferativa del epitelio del endometrio y para inducir la conversión secretoria. Sin embargo, no ha sido sugerido el uso de ésteres de etonogestrel específicos para la anticoncepción femenina, la terapia HRT femenina y el tratamiento/prevención de las enfermedades ginecológicas. La presente invención describe ésteres de etonogestrel con una longitud de cadena de grasa de C7 a C15, preferentemente de C10 a C12, los cuales tienen un buen perfil de farmacocinética y permiten una administración de una sola dosis de un progestágeno con una duración larga de la acción. Sumario de la Invención La presente invención proporciona un equipo anticonceptivo masculino y femenino, y/o para tratamiento HRT que comprende una cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva de un éster de etonogestrel de acción prolongada con una longitud de cadena de grasa de C7 a C15, preferentemente de C10 a C12. Además, también está contemplado, el uso de estos ésteres para el tratamiento y prevención de enfermedades ginecológicas femeninas, tales como endometriosis, menorragia, meno-metrorragia, síndrome pre-menstrual y dismenorrea. Breve Descripción de los Dibujos Fig ura 1. Estructuras químicas del heptanoato de etonogestrel (enantato de etonogestrel), nonanoato de etonogestrel, decanoato de etonogestrel, undecanoato de etonogestrel, dodecanoato de etonogestrel, tridecanoato de etonogestrel, y pentadecanoato de etonogestrel. Figura 2a. El efecto de una inyección intramuscular (IM) de etonogestrel, heptanoato de etonogestrel, (enantato de etonogestrel), nonanoato de etonogestrel y undecanoato de etonogestrel en los niveles de etonogestrel en el plasma en conejos machos intactos. Promedios y SEM de N = 3. Figura 2b. Efecto de una inyección intramuscular (IM) heptanoato de etonogestrel, (enantato de etonogestrel), nonanoato de etonogestrel decanoato de etonogestrel, undecanoato de etonogestrel, dodecanoato de etonogestrel, tridecanoato de etonogestrel en los niveles de etonogestrel en el plasma en conejos machos intactos. Promedios y SEM de N = 3. Figura 3 Estructura química del undecanoato de MENT, buciclato de MENT, heptanoato de testosterona (enantato de testosterona) y undecanoato de testosterona. Figura 4 Efectos dependientes del tiempo de una inyección s.c. de 20 mg/kg de undecanoato de MENT (MENT-U) y buciclato de MENT (MENT-B), heptanoato de testosterona (enantato de testosterona TE) y undecanoato de testosterona (TU) en conejos machos castrados en los niveles de MENT o testosterona (T) en el suero. Los resultados son promedios de N = 3. Figura 5 Farmacocinética del enantato de testosterona, undecanoato de testosterona y buciclato de testosterona después de 1M inyectado en los hombres hipogonadales machos con las dosis indicadas en los niveles de testosterona en el suero del plasma. El rango normal de la testosterona en el suero está indicado con una línea punteada. Los derivados a partir de E. Nieschlag y H. M. Behre. Terapia de Testosterona en: "Andrología, salud y disfunción reproductiva masculina" (Andrology, Male reproductive health and dysfunction), editado por E. Nieschlag y H. M. Behre, Berlín, Heidelberg and New York: Springer-Verlag, 1997, páginas 297 a 309. Descripción Detallada de la Invención La presente invención proporciona un equipo anticonceptivo y/o para tratamiento HRT que comprende una cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva de un éster de etonogestrel de acción prolongada con una longitud de cadena de grasas de C7 a C15, preferentemente de C10 a C12. En una modalidad, el equipo comprende además una cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva de un éster de andrógeno, preferentemente undecanoato de MENT. En otra modalidad, el equipo comprende además una cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva de un estrógeno, tal como mestranol, etinilestradiol, sulfonato de etinilestradiol, estradiol, valerato de estradiol, estriol, succinato de estriol, quinestrol, estropipato, sulfato de estrona sódico o sulfato de equilina sódico. La presente invención contempla además un uso de una cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva de un éster de etonogestrel de acción prolongada con una longitud de cadena de grasa de C7 a C15, preferentemente de C10 a C12, para la preparación de un medicamento para la anticoncepción y/o el tratamiento HRT. En una modalidad, el éster de etonogestrel utilizado en conjunto con una cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva de un éster de andrógeno de acción prolongada para la preparación de un medicamento para la anticoncepción masculina y/o el tratamiento HRT masculino. El éster de andrógeno de acción prolongada de preferencia es undecanoato de ENT. En otra modalidad, el éster de etonogestrel es utilizado en conjunto con una cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva de un estrógeno para la preparación de un medicamento para la anticoncepción femenina y/o el tratamiento HRT femenino, y/o para el tratamiento y/o prevención de una enfermedad ginecológica femenina, tal como la endometriosis, menorragia, meno-metrorragia, el síndrome pre-menstrual y la dismenorrea. La presente invención comprende también un método anticonceptivo y/o de tratamiento HRT que comprende la administración a un sujeto de una cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva de un éster de etonogestrel de acción prolongada con una longitud de cadena de grasa de C7 a C15, preferentemente de C10 a C12. En una modalidad, una cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva de un éster de andrógeno de acción prolongada, preferentemente undecanoato de MENT, es administrada en conjunto con el éster de etonogestrel. En otra modalidad, una cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva de un estrógeno es administrada en conjunto con el éster de etonogestrel. La presente invención proporciona además un método de tratamiento y/o prevención de una enfermedad ginecológica femenina que comprende la administración al sujeto femenino de una cantidad terapéuticamente efectiva de un éster de etonogestrel de acción prolongada con una longitud de cadena de grasa de C7 a C15, preferentemente de C10 a C12, la cual es efectiva para tratar y/o prevenir la enfermedad. En los aspectos anteriores de la presente invención, la cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva de undecanoato de MENT es de 50 a 400 mg y la cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva del éster de etonogestrel es de 25 a 200 mg.
En una modalidad preferida, la cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva de undecanoato de MENT es de 50 a 200 mg y la cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva del éster de etonogestrel es de 50 a 100 mg. En una modalidad específicamente preferida, la cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva del undecanoato de MENT es de 100 mg y la cantidad anticonceptivamente y/o terapéuticamente efectiva del éster de etonogestrel es de 50 mg. Los ésteres de los progestágenos y testosterona pueden ser preparados disolviéndolos en una cantidad adecuada de un medio aceitoso, tal como aceite de maní, ácido oleico, aceite de cártamo, undecanoato de etilo, aceite de almendra, aceite de sésamo, aceite de coco, aceite de oliva, aceite de fríjol soya triglicerizado (purificado), ésteres de propilénglicol, oleato de etilo y similares, incluyendo mezclas de aceites. La cantidad de los ésteres que puede ser disuelta difiere de acuerdo con el medio seleccionado, pero generalmente se encontrará en un rango de 100 a 400 mg. El aceite preferido es el aceite de maní o el undecanoato de etilo. Si así se desea, se pueden agregar a la solución aditivos comunes para los fluidos de inyección. Los aditivos adecuados son conocidos para los expertos en la técnica. Los aditivos posibles incluyen líquidos que sirven para disminuir la viscosidad de la formulación, por ejemplo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propionato de bencilo, oleato de etilo o undecanoato de etilo. Los compuestos de la presente invención pueden ser administrados principalmente por medio de cualquier ruta de administración adecuada y disponible para aquellos expertos en la técnica. En el caso de la administración oral, está contemplada una unidad de dosificación sólida, tal como una tableta o una cápsula. Los compuestos de la presente invención pueden ser formulados con un vehículo farmacéuticamente aceptable, tal y como se describe en la referencia estándar de Gennaro et al, "Remmington: La Ciencia y Práctica de la Farmacia", (Remmington: The Science and Practice of Pharmacy) (20a ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2000, ver espacialmente la Parte 5: Fabricación Farmacéutica). Los compuestos de la presente invención, y el vehículo farmacéuticamente aceptable puede ser comprimidos en unidades de dosificación sólidas, tales como pildoras, tabletas, o ser procesados en cápsulas o supositorios. Usando medios líquidos farmacéuticamente adecuados, los compuestos pueden ser aplicados en la forma de una preparación de inyección como una solución, suspensión, emulsión o un rocío, por ejemplo, un rocío nasal. Para la fabricación de unidades de dosificación, por ejemplo, las tabletas, está contemplado el uso de aditivos convencionales tales como rellenadores, colorantes, enlazadores poliméricos, lubricantes, mejoradores de flujo, deslizantes y similares. En general, se puede utilizar cualquier aditivo farmacéuticamente aceptable el cual no interfiera con la función de los compuestos activos. Los compuestos de la presente invención pueden estar incluidos también en un implante, un anillo vaginal, un parche, un gel, y similares. Los vehículos adecuados con los cuales pueden ser administradas las composiciones incluyen lactosa, almidón, derivados de celulosa y similares o mezclas de los mismos utilizados en cantidades adecuadas. La dosis y el régimen de administración de los compuestos de la presente invención, o una composición farmacéutica de los mismos, que va a ser administrada dependerá del efecto terapéutico que va a ser logrado, y variará con la vía de administración y la edad y condición del individuo a quien le va a ser administrado el medicamento, y/o el régimen anticonceptivo o tratamiento HRT particular en el cual es utilizado. Las cantidades típicas de dosificación son de 0.001 a 5 mg por kg de peso corporal. La presente invención es descrita adicionalmente en los ejemplos siguientes, los cuales no son limitativos de manera alguna del alcance de la presente invención, tal y como está reivindicada. EJEMPLOS
EJEMPLOS - Cinéticas de los ésteres C7, C9, C10, C11, C12 y C13 de etonogestrel en conejos Se prepararon los siguientes ésteres de etonogestrel y se probaron en conejos: • Heptanoato de etonogestrel • Nonanoato de etonogestrel • Decanoato de etonogestrel • Undecanoato de etonogestrel • Dodecanoato de etonogestrel • Tridecanoato de etonogestrel También se preparó el pentadecanoato de etonogestrel. La figura 1 muestra la estructura química de estos compuestos. Como una referencia, también se incluyó el etonogestrel. Preparación de ésteres de etonogestrel. La metodología general para la preparación de ésteres a partir de alcoholes, por ejemplo, se puede encontrar en el libro de Greene, T.W. et al, "Grupos protectores en síntesis orgánica" ("Protective groups in organic syntesis"). John Wiley & Sons, NY, 1999 (tercera edición). La preparación de ésteres a partir de alcoholes terciarios (como el etonogestrel) puede ser realizada mediante varias técnicas, por ejemplo: 1) alcohol terciario, ácido carboxílico, anhídrido de ácido trifluoroacético, Patente Europea DE 1013284 (1956); 2) alcohol terciario, cloruro ácido, piridina, Watson, T.G. et al, Steroids 41, página 255 (1983); 3) alcohol terciario, cloruro ácido, TIOEt, Shafiee, A. et al, Steroids 41, página 349 (1983); 4) alcohol terciario, anhídrido de ácido carboxílico, TsOH, benceno, Johnson, A.L., Steroids, 20, página 263 (1972); y 5) alcohol terciario, anhídrido de ácido carboxílico, DMAP, CH2CI2, Shafiee, A. et al, Steroids 41, página 349 (1983). Preparación de (17a)-13 - et i I - 11 -metilen-17-[[(1 -oxononil )oxi]-18,19-d¡norpregn-4-en-20-in-3-ona (nonanoato de etonogestrel). a) Se enfrió una solución de ácido nonanoico (1.95 g), en tolueno seco (8 mi) a una temperatura de 0°C, y se trató con anhídrido de ácido trifluoroacético (2.6 g). Después de 30 minutos de agitación, se agregó (17a)- 13-etil-17-hidrox¡-11 - metilen-18,19-dinorp re gn -4 -en-20- in-3-ona (etonogestrel, 2.0 g) en tolueno seco (15 mi) y la mezcla de reacción fue agitada durante 17 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue lavada con agua, una solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno de sodio, agua y presión reducida. El residuo fue purificado mediante cromatografía de columna (tolueno/acetato de etilo 95:5). El producto (2.08 g) fue disuelto en acetato de etilo (40 mi), enfriado a una temperatura de 0°C, y agitado con hidróxido de sodio acuoso (1 M, 13 mi) durante 2 horas. La mezcla fue extractada con acetato de etilo; las fases orgánicas combinadas fueron lavadas con hidróxido de sodio acuoso helado (1 M), agua y salmuera, secado y concentrado bajo presión reducida. La cromatografía de columna produjo (17a)- 13-Etil-11 -metilen-17-[[(1 -oxononil)oxi]-18, 19- dinorpregn-4-en-20-in-3-ona (1.25 g). RMN1H (CDCI3): d 5.89 (m, 1H), 5.08 (bs, 1H), 4.85 (bs, 1H), 2.82 (ddd, 1H, J = 14.8, 9.5 y 6.3 Hz), 2.73 (d, 1H, J = 12.8 Hz), 2.69-2.19 (m), 2.63 (s, 1H), 2.11 (m, 1?), 1.90-1.21 (m), 1.15 (m, 1H), 1.05 (t, 3H, J = 7.5 Hz), 0.88 (t, 3H, J = 7.1 Hz). Masa medida [M + H]+ 465.3358. Masa calculada [M + H]+ 465.3363. De una manera análoga al procedimiento descrito anteriormente, se prepararon el heptanoato de etonogestrel, decanoato de etonogestrel, undecanoato de etonogestrel, dodecanoato de etonogestrel, tridecanoato de etonogestrel, y pentadecanoato de etonogestrel: b) (17a)-13-Etil-11 -metilen-17-[[(1-oxoheptil)oxi]-18,19- dinorpregn-4-en-20-in-3-ona (heptanoato de etonogestrel). RMN1H (CDCI3): d 5.89 (m, 1H), 5.08 (bs, 1H), 4.85 (bs, 1H), 4.85 (bs, 1H), 2.82 (ddd, 1H, J = 14.8, 9.5 y 6.3 Hz), 2.73 (d, 1H, J = 12.6 Hz), 2.68-2.19 (m), 2.63 (s, 1H), 2.11 (m, 1H), 1.90-1.24 (m), 1.15 (m, 1H), 1.05 (t, 3H, J = 7.5 Hz), 0.89 (t, 3H, J = 7.1 Hz). Masa medida [M + H] + 437.3027. Masa calculada [M + H]+ 437.3050. (17a)- 13-Etil- 11 -metilen-17-[[(1 -oxodec¡l)oxi]-18, 19-dinorpregn-4-en-20-¡n-3-ona (decanoato de etonogestrel). RMN1H (CDCI3): d 5.89 (bs, 1H), 5.08 (bs, 1H), 4.84 (bs, 1H), 2.82 (m, 1H), 2.73 (d, 1H, J = 12.6 Hz), 2.67-2.18 (m), 2.63 (s, 1H), 2.11 (m, 1H), 1.90-1.21 (m), 1.15 (m, 1H), 1.06 (t, 3H, J = 7.5 Hz), 0.88 (t, 3H, J = 7.1 Hz). Masa medida [M + H] + 479.3508. Masa calculada [M + H]+ 479.3519. (17a)- 13-Etil- 11 -metilen-17-[[(1 - oxoundecil)oxi]-18,19-dinorpregn-4-en-20-in-3-ona (undecanoato de etonogestrel).' R N1H (CDCI3): d 5.89 (m, 1H), 5.08 (bs, 1H), 4.85 (bs, 1H), 2.82 (ddd, 1H, J = 14.8, 9.5 y 6.3 Hz), 2.73 (d, 1H, J = 12.6 Hz), 2.68-2.18 (m), 2.63 (s, 1H), 2.11 (m, 1H), 1.90-1.21 (m), 1.06 (t, 3H, J = 7.5 Hz), 0.88 (t, 3H, J = 7.1 Hz). Masa medida [M + H] + 493.3664. Masa calculada [M + H]+ 493.3676. (17a)- 13-Etil- 11 -metilen-17-[[( 1 -oxododecil)oxi]- 18 , 19-dinorpregn-4-en-20-in-3-ona (dodecanoato de etonogestrel). RMN1H (CDCI3): d 5.89 (bs, 1H), 5.08 (bs, 1H), 4.85 (bs, 1H), 2.82 (m, 1H), 2.73 (d, 1H, J = 12.6 Hz), 2.65-2.18 (m), 2.64 (s, 1H), 2.11 (m, 1H), 1.90-1.20 (m), 1.15 (m, 1H), 1.06 (t, 3H, J = 7.5 Hz), 0.88 (t, 3H, J = 7.1 Hz). Masa medida [M + H] + 507.3829. Masa calculada [M + H]+ 507.3832. f) (17a)-13-Etil-11 -metilen-17-[[(1 -oxotridecil)oxi]-18, 19- dinorpregn-4-en-20-in-3-ona (tridecanoato de etonogestrel). RMN1H (CDCI3): d 5.89 (bs, 1H), 5.08 (bs, 1H), 4.85 (bs, 1H), 2.82 (m, 1H), 2.73 (d, 1H, J = 12.6 Hz), 2.65-2.18 (m), 2.64 (s, 1H), 2.11 (m, 1H), 1.90-1.20 (m), 1.15 (m, 1H), 1.06 (t, 3H, J = 7.5 Hz), 0.89 (t, 3H, J = 7.1 Hz). Masa medida [M + H] + 521.4007. Masa calculada [M + H]+ 521.3989. g) (17a)-13-Etil-11-metilen-17-[[(1-oxopentadecil)oxi]- 18, 19-dinorpregn-4-en-20-in-3-ona (pentadecanoato de etonogestrel). RMN1H (CDCI3): d 5.89 (bs, 1H), 5.08 (bs, 1H), 4.85 (bs, 1H), 2.82 (m, 1H), 2.73 (d, 1H, J = 12.6 Hz), 2.65-2.19 (m), 2.63 (s, 1H), 2.11 (m, 1H), 1.90-1.20 (m), 1.15 (m, 1H), 1.06 (t, 3H, J = 7.5 Hz), 0.89 (t, 3H, J = 7.1 Hz). Masa medida [M + H] + 549.4278. Masa calculada [M + H]+ 549.4302. Estudio de farmacocinética en conejos Para la determinación del perfil de farmacocinética de los diferentes ésteres de etonogestrel después de la aplicación parenteral, intramuscular, se seleccionó un modelo de conejo castrado en vez de s.c. Brevemente, los conejos fueron inyectados una vez (día 1) con los esteres de etonogestrel indicados, en una cantidad de 20 mg/kg en aceite de maní (con una concentración de 40 mg/ml). En los días 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 10, 12, 14, 21, 28, 35, 49, 63, 77, 92, 106, 120 y 133 se recolectó sangre de la arteria de la oreja, en tubos con un contenido de EDTA. Se preparó el plasma de EDTA (1500g, 15 min.) y fue almacenado a una temperatura de -20°C. Con el LC-MSMS fue determinada la cantidad del compuesto de origen (etonogestrel) en estas muestras. El limite inferior de este nuevo ensayo es de 0.5 nmol/l, de 0 a 250 nmol/l, y se obtuvo una curva lineal con un coeficiente de correlación de 0,9998. Tal y como se muestra en la figura 2a, el etonogestrel mismo dio como resultado niveles picos muy altos (200 nmol/l), los cuales declinaron en 28 días a niveles de etonogestrel inferiores a 1 nmol/l. El heptanoato de etonogestrel también originó niveles pico altos iniciales de etonogestrel (120 nmol/l). El nonanoato de etonogestrel obtuvo niveles pico más bajos y extendió la duración con niveles en el suero de etonogestrel superiores a 1 nmol/l. Comparados con los otros dos esteres de la figura 2a, el undecanoato de etonogestrel obtuvo el equilibrio óptimo entre los niveles pico iniciales (máximo de 13 nmol/l después de ocho días) y la duración de la acción (más de 92 días arriba de 1 nmol/l).
Como se muestra en la figura 2b, el decanoato de etonogestrel tuvo un nivel pico inicial de 24 nmol/l después de 5 días mientras que el dodecanoato de etonogestrel tuvo un nivel pico inicial de 9 nmol/l después de 8 días. Con el tridecanoato de etonogestrel, no se observaron niveles iniciales de etonogestrel. Por las figuras 2a y 2b, se puede apreciar que los ésteres preferidos de etonogestrel son el decanoato de etonogestrel, undecanoato de etonogestrel, y dodecanoato de etonogestrel. EJEMPLO 2-Cinéticas de 2 ésteres de MENT en conejos El perfil farmacocinético del undecanoato de MENT y el buciclato de MENT fue comparado con el enantato de testosterona y el undecanoato de testosterona. La figura 3 muestra las estructuras químicas de estos ésteres de androgenos. Se preparó el undecanoato de Ment esencialmente tal y como se describe en el documento WO 99/67271. El buciclato de MENT fue preparado tal y como se describe en el documento WO 99/67270. El enantato de testosterona y el undecanoato fueron obtenidos comercialmente de Diosynth, Oss, Holanda. Estudios farmacocinéticos en los conejos Para la determinación del perfil farmacocinético de los diferentes ésteres de androgenos después de una aplicación s.c, se seleccionó un modelo de conejo castrado como el modelo el cual es el más similar a los humanos. Brevemente, los conejos fueron inyectados una vez (día 1) con los ésteres de andrógeno indicados en una cantidad de 20 mg/kg en aceite de maní (con una concentración de 100 mg/ml). En los días 2, 3, 4, 5, 8, 15, 22, 36, 44 y 58 se recolectó la sangre de la artería de la oreja, en tubos que contenían EDTA. Se preparó el plasma de EDTA (1500g, 15 min) y fue almacenado a una temperatura de 20°C. Con el LC-MSMS, fue determinada la cantidad del compuesto de origen (testosterona o MENT) en estas muestras. El límite inferior de este nuevo ensayo es de 2 nmol/l, de 0 a 500 nmol/l, una curva lineal fue obtenida con un coeficiente de correlación de 0.9998. Tal y como se muestra en la figura 4, con el undecanoato de MENT y el buciclato de MENT, se encontró un perfil farmacocinético del MENT liberado, el cual es similar al del compuesto de referencia de undecanoato de testosterona con respecto a la testosterona liberada. El enantato de testosterona dio como resultado un pico alto de testosterona 2 días después de la inyección. Por lo tanto, en los conejos, no se observó un aumento inicial de MENT con ambos ésteres de MENT, por una parte, y por otra parte, se observó una liberación prolongada de MENT, lo que sugiere un comportamiento farmacocinético mejorado que el enantato de testosterona estándar actual. En los humanos, se obtuvieron las farmacocinéticas óptimas con el undecanoato de testosterona: una liberación inicial baja y niveles de condición estable de larga duración (figura 5). Como en los conejos, el perfil farmacoci nético de los dos ésteres de MENT fue muy similar al del undecanoato de testosterona (figura 4), se esperaba una farmacoci nética óptima con ambos ésteres de MENT en los humanos. EJEMPLO 3- Solubilidad y viscosidad del undecanoato de MENT y el undecanoato de etonogestrel en diferentes solventes Para determinar la solubilidad y viscosidad del undecanoato de MENT y el undecanoato de etonogestrel, se utilizaron cuatro solventes diferentes: • undecanoato de etilo • undecanoato de etilo + 50% de benzoato de bencilo • aceite de maní • aceite de maní + benzoato de bencilo al 50%. Usando estos solventes, se prepararon las siguientes soluciones: • 100 mg/ml de undecanoato de etonogestrel en diferentes solventes • 50 mg/ml de undecanoato de etonogestrel en diferentes solventes • 200 mg/ml de undecanoato de MENT en diferentes solventes • 100 mg/ml de undecanoato de MENT en diferentes solventes · 50 mg/ml de undecanoato de etonogestrel + 100 mg/ml de undecanoato de MENT en diferentes solventes. Los dos solventes combinados fueron preparados mediante la adición de 50 gramos de undecanoato de etilo o aceite de maní a 50 gramos de benzoato de bencilo. El undecanoato de etilo + la solución de benzoato de bencilo al 50% fue filtrada en un filtro Durapore de 0.22 µ?? para obtener una solución clara incolora. El aceite de maní. + la solución de benzoato de bencilo al 50% no fue filtrada. La solubilidad de los compuestos en los solventes fue determinada visualmente. La viscosidad fue determinada utilizando un aparato Brookfield modelo DV-lll. La densidad de las soluciones fue determinada utilizando un medidor de densidad Mettler Toledo DA-100M.
Tabla 1: Apariencia, viscosidad y densidad de los solventes
El undecanoato de etilo, undecanoato de etilo + benzoato de bencilo al 50% y el aceite de maní + las soluciones de benzoato de bencilo al 50%, no necesitaron ser calentadas. Fue necesario el calentamiento a una temperatura aproximada de 50°C para disolver 200 mg/ml de undecanoato de MENT en aceite de maní. Las concentraciones probadas fueron de 100 mg/ml de undecanoato de etonogestrel , 200 mg/ml de undecanoato de MENT y 50 mg/ml de undecanoato de etonogestrel + 100 mg/ml de undecanoato de MENT en diferentes solventes. Los resultados se resumen en la tabla 2.
Tabla 2: Apariencia, viscosidad y densidad de las soluciones finales
La combinación de undecanoato de etonogestrel y undecanoato de MENT fue disuelta visualmente en una concentración deseada de 50 mg/ml, de undecanoato de etonogestrel, y 100 mg/ml de undecanoato de MENT en todos los cuatro solventes probados. Ambos el undecanoato de etonogestrel y el undecanoato de MENT podrían ser disueltos al doble de la concentración deseada en todos los cuatro solventes probados. No ocurrió precipitación a temperatura ambiente cuando se disolvieron 50 mg/ml de undecanoato de etonogestrel y 100 mg/ml de undecanoato de MENT en todos los cuatro solventes. La viscosidad del undecanoato de etilo y el undecanoato de etilo + el benzoato de bencilo al 50% fue significativamente inferior a la viscosidad del aceite de maní y aceite de maní + benzoato de bencilo al 50%. La viscosidad de la formulación deseada en 50 mg/ml de undecanoato de etonogestrel + 100 mg/ml de undecanoato de MENT en los cuatro solventes diferentes fue la más baja (4 cps) para la solución de undecanoato de etilo, seguida por la solución de undecanoato de etilo + benzoato de bencilo al 50% (7 cps) y la solución de aceite de maní + benzoato de bencilo al 50% (39 cps). La viscosidad de la solución de aceite de maní fue significativamente más alta que la viscosidad de las otras soluciones (100 cps). EJEMPLO 4 - Acción farmacológica de los ésteres de etonogestrel en los machos La acción farmacológica de los ésteres de etonogestrel en los machos es evaluada para determinar la actividad de supresión de la testosterona endógena en los conejos, tal y como lo describen Wu, F. C, Balasubramanian, R., Mulders, T. M. y Coelingh-Bennink H. J., en Oral progestogen combined with testosterone as a potential male contraceptive: additive effects between desogestrel and testosterone enanthate in suppression of spermatogenesis, pituitary-testicular axis, and lipid metabolism, J. Clin. Endocrinol Metab 84 (1): páginas 112 a 122, 1999. Brevemente, el efecto de una inyección sc/im de los diferentes ésteres de etonogestrel en la testosterona en el suero, en el 7 día en los conejos machos maduros será monitoreado. EJEMPLO 5 - La acción farmacológica de los ésteres de etonogestrel en las hembras La acción farmacológica de los ésteres de etonogestrel en las hembras fue probada en la prueba clásica de Clauberg. Brevemente, los conejos hembra inmaduros, preparados con estradiol durante 8 días, son tratados una vez sc/im con los ésteres de etonogestrel diferentes (día 8 en la tarde). La autopsia se llevó a cabo en la tarde del día 13 y la actividad progestagénica fue evaluada en las secciones del útero de acuerdo con la publicación de McPhail et al., The assay of progestin. J. of Physiology, 1934, 83: páginas 145 a 156.