MXPA01007043A - Factor que estimula el hueso. - Google Patents

Abstract

Polipeptidos que incrementan o promueven el crecimiento oseo de mamifero, secuencias de nucleotidos relacionadas, anticuerpos, equipos de diagnostico y tratamiento. Las subsecuencias del polipeptido Ile Lys Thr Thr Ser Gly Ile His Pro Lys Asn Ile Glu Ser han mostrado promover el crecimiento. Las subsecuencias incluyen Thr Thr Ser Gly Ile His Pro Lys.

Description

FACTOR QUE ESTIMULA EL HUESO DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Esta solicitud reclama la prioridad de la Solicitud de Patente Norteamericana No. de Serie 09/229,304, presentada el 13 de enero de 1999, cuya Solicitud de los Estados Unidos es una continuación en parte de la Solicitud de Patente de los Estados Unidos anterior No. de Serie 09/048,058 presentada el 26 de marzo de 1998, ambas solicitudes anteriores se incorporan en la presente para referencia. La presente invención se refiere a polipéptidos que estimulan el crecimiento óseo. El entendimiento de los temas relacionados al crecimiento y resistencia óseos ha progresado a lo largo de los años, proporcionándose un resumen en, por ejemplo, la solicitud de patente internacional No. PCT/CA 94/00144, publicada el 15 de septiembre, de 1994 bajo WO 94/20615, solicitud de patente internacional No. PCT/CA 96/00653, publicada el 3 de abril de 1997 bajo WO 97/12036, Patente de los Estados Unidos No. 5,320,970 y solicitud de patente Europea No. 92 302 446, publicada bajo 505 210 el 23 de septiembre de 1992, los contenidos de las cuales se incorporan en la presente para referencia. A manera de antecedente a la presente invención, descritos posteriormente, se han conocido durante algún tiempo el péptido que activa el neutrófilo (NAP-2; SEC. DE IDENT. N0..1) y una variante de NAP-2, aqui denominado "NAP- 2V" (SEC. DE IDENT. NO . : 2 ) (Walz, A., y M. Baggiolini, (1989) Biochem . Biophys . Res . Commun . 159:969). Patente Británica No. 2 231 872 (Patente Británica No. 2 231 872. Inventores: M Baggiolini, K.J. Clemetson, y A. Walz. Publicada el 14 de junio de 1990), describe la secuencia de aminoácidos de NAP-2 y tres variantes que ocurren aparentemente en forma natural, incluyendo NAP-2V. Las otras dos variantes tienen cuatro (SEC. DE IDENT. NO . : 3 ) y tres (SEC. DE IDENT. NO.:4) aminoácidos adicionales en el N-terminal de la secuencia NAP-2. NAP-2 es una subsecuencia de ß-tromboglobulina (ß-TG; SEC. DE IDENT. NO.:5) que tiene once aminoácidos adicionales en el extremo N-terminal. ß-TG es en si misma una subsecuencia de péptido que activa tejido conectivo (CTAP-III; SEC. DE IDENT. NO.: 6) que tiene cuatro aminoácidos adicionales en el N-terminal . CTAP-III es una subsecuencia de proteina básica de plaqueta (PBP; SEC. DE IDENT. NO.:7) que tiene nueve aminoácidos adicionales en el N-terminal. NAP-2 junto con interleucina-8 (IL-8 humana; SEC. DE IDENT. NO.:8; IL-8 porcina SEC. DE IDENT. NO.:9) y actividad que estimula el crecimiento de melanoma (MGSA) han sido asignados a una subfamilia conocida como las a-quimiocina. Las a-quimiocinas tienen en común entre si cuatros residuos de cisteina en posiciones altamente conservadas, que encierran la región de núcleo de las moléculas, como se describe por Brandt et al (Ehlert, J.E., F. Peterson, M.H.G. Kubbuta, J. Gerdes, H.-D. Fiad, y E. Brandt, (1995) J. Biol . Chem . 270:6338). Brandt et al . encontraron una variante de NAP-2 truncada en el C-terminal que ocurre aparentemente en forma natural, que carece de los últimos cuatro aminoácidos de NAP-2, que muestra incremento mejorado en potencia para estimular la desgranulación del neutrófilo. Brandt et al . también sintetizó variantes que carecen de los aminoácidos uno, dos, tres, cinco, y seis finales del C-terminal de NAP-2. Todos estos polipéptidos C-truncados presentan un incremento moderado en potencia sobre NAP-2 con la excepción de la secuencia que tiene solamente los primeros sesenta y cuatro aminoácidos de NAP-2. Brandt et al . discuten el posible significado de las modificaciones de secuencia con respecto a la estructura de NAP-2 y su función. El factor 4 de plaqueta (PF4; SEC. DE IDENT.

NO.:10) es un polipéptido de setenta aminoácidos (Hermodson, M., G. Schmer y K. Kurachi, (1977) J. Biol . Chem . 252:6276; Morgan, F.J., G.S. Begg, C.N. Chesterman, (1979) Thromb . Haemos t . 42:1652). PF4 ha mostrado inhibir la proliferación de dos lineas de células de osteosarcoma osteoblástico, Saos-2 y G292 (Patente de los Estados Unidos No. 5,304,542. Inventor: D.M. Tatakis. Expedida el 19 de abril de 1994). La indometacina aparentemente no afecto la inhibición inducida por PF4 de la proliferación celular. Los fragmentos particulares, PF4 (58-70), PF4 (47-70) y PF4de baja afinidad monomérica (LAPF4), que es 50% homólogo a PF4 y contiene un C-término de a-hélice también se sugirieron como útiles. PF4 y tales polipéptidos relacionados se describieron asi como siendo útiles en un método para inhibir la proliferación de osteoblastos, en entre otras cosas, humanos que sufren de osteoporosis . Los primeros 70 aminoácidos de NAP-2V y la secuencia de PF4 son aproximadamente 51% homólogos y las posiciones de los cuatros residuos de cisteina se conservan entre los dos polipéptidos. Se ha mostrado previamente que NAP-2, NAP-2V, asi como algunas subsecuencias de NAP-2V muestran efectos estimuladores óseos, mientras que algunas subsecuencias no muestran actividad estimuladora ósea. NAP-2V- ( 1-26) (SEC. DE IDENT. N0..11) y NAP-2V-(13-26; gln25-glu25) ( SEC . DE IDENT. NO.: 12) se encontró que incrementan la proporción de aposición ósea observada, el último de los dos siendo más potente que el anterior. NAP-2V- ( 10-26) (SEC . DE IDENT. NO.: 13) parece provocar un pequeño incremento en la proporción de aposición ósea observada, aunque la significancia estadística del incremento observado fue cuestionable. NAP-2V- ( 11-26) (SEC. DE IDENT. NO.: 14) y NAP-2V- (12-26) (SEC. DE IDENT." NO.:15) se encontró que no tienen efecto sobre la proporción de aposición mineral ósea observada . De acuerdo a la presente invención, versiones protegidas de NAP-2V- ( 1326; gln25-glu25) (SEC. DE IDENT.

N0..17) y de NAP-2V- ( 15-22 ) (SEC. DE IDENT. N0..18) se ha encontrado que tienen actividad estimuladora ósea. La invención incluye asi un polipéptido que comprend : Un fragmento polipeptidico que promueve el crecimiento óseo en mamíferos, conteniendo el fragmento hasta trece aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO.:12, SEC.

DE IDENT. NO.:19 o la variante conservativa de SEC. DE IDENT.

NO.:12 o SEC. DE IDENT. NO.:19. En otro aspecto, la invención es un polipéptido en donde el fragmento contiene hasta 12 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. N0..12, SEC. DE IDENT. N0..19 o una variante conservativa de SEC. DE IDENT. N0..12 o SEC. DE IDENT. NO. :19. Alternativamente, el fragmento contiene hasta 11, 10, 9 u 8 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT.

NO.: 12, SEC. DE IDENT. NO.: 19 o una variante conservativa de SEC. DE IDENT. NO.:12 o SEC. DE IDENT. NO.:19. Se notará que la secuencia de aminoácidos ___________ identificada como SEC. DE IDENT. N0.:19 es una secuencia 14-mer que corresponde a SEC. DE IDENT. NO.:12, pero se basa directamente sobre la secuencia que ocurre naturalmente, es decir SEC. DE IDENT. NO . : 2. Preferiblemente, la secuencia de aminoácidos de la cual el polipéptido obtiene su actividad es al menos de 8 aminoácidos de longitud. Preferiblemente, la secuencia es una subsecuencia de SEC. DE IDENT. N0.:12 o SEC. DE IDENT. NO.:19 (o una versión N- y/o C-terminal protegida de la misma) , o una variante conservativamente sustituida de la misma. Más preferiblemente, la subsecuencia contiene SEC. DE IDENT. NO.: 18 (que se refiere aqui a la secuencia de aminoácidos per se) , o una variante conservativamente sustituida de la misma. Aún más preferiblemente, una subsecuencia es SEC. DE IDENT. NO. :18. En otro aspecto, la invención es un polipéptido que comprende : un fragmento polipeptidico que promueve el crecimiento óseo en mamíferos, conteniendo el fragmento hasta 13 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. N0..12 o SEC. DE IDENT. NO. : 19. El fragmento de tal polipéptido puede contener hasta 12 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. N0..12 o SEC. DE IDENT. N0..19, o hasta 11, 10, 9 u 8 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. N0.:12 o SEC. DE IDENT. NO. :19. Preferiblemente, el fragmento es al menos de ocho aminoácidos de longitud e incluye la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO..-18 o una variante conservativa de la misma. En otro aspecto, la invención es un polipéptido aislado que comprende un fragmento polipéptico que promueve el crecimiento óseo en mamíferos, teniendo el fragmento una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de la secuencia identificada como SEC. DE IDENT. N0.:18, o una variante conservativa de la misma. Más preferiblemente, el polipéptido aislado comprende un fragmento polipeptidico que promueve el crecimiento óseo en mamíferos, teniendo el fragmento una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de la secuencia identificada como SEC. DE IDENT. NO. : 18. Los polipéptidos de la presente invención pueden tener uno u otro o ambos del aminoácido N-terminal y el aminoácido C-terminal que llevan un grupo protector. En otro aspecto, la invención se define como un primer polipéptido que promueve el crecimiento óseo en mamíferos que comprende una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de hasta 13 aminoácidos y es suficientemente duplicativa de un segundo polipéptido, siendo el segundo polipéptido un fragmento polipeptidico descrito anteriormente, tal que el primer polipéptido se codifica por un ADN que se hibridiza bajo condiciones severas con ADN que codifica el segundo polipéptido. Un primer polipéptido puede consistir esencialmente de hasta 12, 11, 10, 9 u 8 aminoácidos, y es preferiblemente al menos de 8 aminoácidos de longitud. Preferiblemente, un polipéptido de la invención es sustancialmente puro y el polipéptido tiene un peso molecular en el rango de aproximadamente 1000 hasta aproximadamente 4000, o de aproximadamente 1200 a 3000 o de aproximadamente 1200 a 3000 o de aproximadamente 1800 o de aproximadamente 1200 a 1500. La invención incluye un agente para uso en la prevención y tratamiento de una enfermedad relacionada con la reducción ósea que comprende un polipéptido de la invención como se describió anteriormente. La invención incluye una composición farmacéutica para promover el crecimiento óseo, que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un polipéptido de la invención. La invención incluye un método para incrementar el crecimiento óseo de un mamífero al administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un polipéptido de la invención. La invención incluye el uso de un polipéptido de la invención para el tratamiento de osteoporosis. La invención incluye el uso de un polipéptido de la invención para promover el crecimiento óseo en un mamífero. La invención incluye el uso de un polipéptido de la invención en la preparación de un medicamento para uso para promover crecimiento óseo o el tratamiento de osteoporosis. La invención incluye un equipo de diagnóstico para determinar la presencia de un polipéptido de la invención, que comprende un anticuerpo para el polipéptido enlazado a un sistema reportero en donde el sistema reportero produce una respuesta detectable cuando una cantidad predeterminada del polipéptido y el anticuerpo se enlazan juntas. La invención incluye un fragmento de ADN aislado que codifica la expresión de cualquier polipéptido de la invenciór, y el ADN que difiere del fragmento debido a la degeneración del código genético. La invención incluye un vector que comprende una secuencia de ADN que expresamente codifica un polipéptido de la invención. La invención incluye un proceso para producir un polipéptido de la invención, cuyo proceso comprende: a) preparar un fragmento de ADN que contiene una secuencia de nucleótidos que codifica el polipéptido; b) incorporar el fragmento de ADN dentro de un vector de expresión para obtener un fragmento de ADN recombinante que contiene el fragmento de ADN y es capaz de sufrir réplica; c) transformar una célula huésped con el fragmento de ADN recombinante para aislar un transformante que puede expresar el polipéptido; y d) cultivar el transformante para permitir que el transformante produzca el polipéptido y recuperar el polipéptido de la mezcla cultivada resultante. La presente invención incluye un compuesto "derivado de" cualquier polipéptido de la invención. La presente invención incluye asi un polipéptido en donde la secuencia de aminoácidos consiste esencialmente de: (i) una secuencia de aminoácidos que corresponde a SEC. DE IDENT. NO. :18; (ii) una variante de un polipéptido de (i) que contiene una pluralidad de las secuencias de aminoácidos; o (iii) una variante conservativamente sustituida de un polipéptido de (i) o (ii) . La secuencia de ADN de NAP-2V descrita por Walz et al (Patente Británica No. 2 231 872. Inventores: M. Baggiolini, K.J. Clemetson, y A. Walz. Publicada el 14 de junio de 1990. Neutrophil-activating peptide-2 and processes for the production of NAP-2, B-TG, CTAP-III y PBP) se identifica aqui como SEC. DE IDENT. N0.:16. La frase "se hibridiza selectivamente a" se refiere a moléculas de ácido nucleico que, bajo condiciones de hibridización severas apropiadas, se hibridizan, doble o se enlazan esencialmente solamente entre si cuando las moléculas que tiene las secuencias predefinidas (es decir segundo polipéptido) están presentes en una preparación de ADN o ARN. Para discusiones del diseño de la molécula de ácido nucleico y las condiciones de templado, véase, por ejemplo, Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2nd ed.), Vols. 1-3, Cold Spring Harbor Laboratory, (1989) o Current Protocols in Molecular Biology, F. Ausubel et al., (ed) Greene Publishing and Wiley-Interscience, New York (1987) . "Condiciones de hibridización severas" asume su significado común para una persona experta en la técnica aqui . Las condiciones de severidad apropiadas que promueven la hibridización de ácido nucleico, por ejemplo, 6x cloruro de sodio/citrato de sodio (SSC) a aproximadamente 45°C son conocidas por aquellos expertos en la técnica. Los siguientes ejemplos se encuentran en Current Protocols in Moleular Biology, John Wiley & Sons, NY (1989), 6.3.1-6.3.6: Para 50 ml de una primera solución de hibridización adecuada, mezclar juntos 24 ml de formamida, 12 ml de 20x SSC, 0.5 ml de Tris-HCl 2M pH 7.6, 0.5 ml de solución de Denhardt lOOx, 2.5 ml de H20 desionizada, 10 ml de sulfato de dextrano al 50%, y 0.5 ml de SDS al 10%. Una segunda solución e hibridización adecuada puede ser 1% de BSA cristalino (fracción V), 1 mM de EDTA, Na2HPO„ 0.5 M pH 7.2, SDS al 7%. La concentración de sal en la etapa de lavado puede seleccionarse desde una baja severidad de aproximadamente 2x SSC a 50°C hasta una alta severidad de aproximadamente 0.2x SSC a 50°C. Ambas soluciones de lavado pueden contener SDS al 0.1%. Además, la temperatura en la etapa de lavado puede incrementarse desde condiciones de baja severidad a temperatura ambiente, aproximadamente 22°C hasta condiciones de alta severidad, a aproximadamente 65°C. La referencia citada da más detalles, pero la severidad de lavado apropiada depende del grado de homología y longitud de la sonda. Si la homología es 100%, puede usarse una alta temperatura (65°C a 75°C) . Si la homología es baja, deben usarse temperaturas de lavado más bajas. Sin embargo, si la sonda es muy corta (<100pb) , deben usarse temperaturas más bajas aún con 100% de homología. En general, uno inicia el lavado a bajas temperaturas (37°C a 40°C) , y eleva la temperatura en intervalos de 3-5°C hasta que el fondo es suficientemente bajo para no ser un factor principal en la autoradiografia . La invención incluye cualquier número de factores que estimulan el hueso quimérico hechos que tienen una secuencia de aminoácidos de polipéptidos de la presente invención . En otro aspecto, la invención es un agente para uso en la prevención y tratamiento de una enfermedad relacionada para reducción ósea que incluye cualquier polipéptido o polipéptidos de la presente invención como un ingrediente activo . La invención incluye el uso del polipéptido o polipéptidos en la preparación de un medicamento para uso para promover el crecimiento óseo o el tratamiento de osteoporosis . La invención incluye un anticuerpo sintetizado usando un polipéptido que consiste de una secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. N0.:11; SEC. DE IDENT. N0.:12 o SEC. DE IDENT. N0.:13 o una variante conservativamente sustituida de las mismas. BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Figura 1 ilustra gráficamente la proporción de aposición mineral ósea observada (µm por dia) para ratas inyectadas con polipéptidos químicamente sintetizados que tienen SEC. DE IDENT. NO.:17 (segunda barra), SEC. DE IDENT.

NO.: 18 (tercera barra) comparados con un control (primera barra) . Las barras error son ± 1 S.E. La Figura 2 ilustra gráficamente la dependencia de dosis de la proporción de aposición mineral ósea (µm por dia) encontrada para ratas inyectadas con las cantidades indicadas de polipéptido que tiene SEC. DE IDENT. NO.:18. Las barras de error son ± S.E. La Figura 3 ilustra la secuencia de aminoácidos de los polipéptidos probados, que corresponden a aminoácidos alineados entre si, los péptidos activos siendo mostrados por arriba de la linea y las secuencias que no se encontraron para estimular el crecimiento óseo estando por debajo de la linea. Los pesos moleculares aproximados se muestran por debajo de los números de identificación de secuencia. MATERIALES, MÉTODOS Y RESULTADOS Los polipéptidos que tienen la secuencia que corresponde a cualquiera de las SEC. DE IDENT. NOs . : 1, 2, 11, 12 y 13 se ha encontrado previamente que estimulan el crecimiento óseo. Se han realizado experimentos que establecen que las secuencias polipeptidicas tienen las secuencias identificadas como SEC. DE IDENT. NOs.: 17 y 18 tienen actividad estimuladora ósea. Los polipéptidos se sintetizaron químicamente en forma directa conforme a métodos estándar conocidos por aquellos expertos en la técnica. Los polipéptidos que tienen la secuencia identificada como SEC. DE IDENT. NO.: 12 que previamente mostró tener actividad estimuladora ósea, tiene dos sitios susceptibles de desdoblamiento por la peptidasa plasmina, entre los residuos de lisina-treonina y licina-asparagina, respectivamente. Nueve ratas Sprague-Dawley hembras (peso promedio, aproximadamente 300 gm) se dividieron en tres grupos de tres. Cada una de las del primer grupo, el grupo control, se inyectó con 400 µl de una solución reguladora, 50 mM de acetato de sodio ajustada a pH 4.5 seguida inmediatamente por 200 µl de una solución de clorhidrato de tetraciclina 1 M. Cada solución se administró intramuscularmente dentro del gluteus maximus derecho. Las ratas del segundo grupo se inyectaron similarmente cada una con 400 µl de un regulador que contiene 100 nmoles de un polipéptido químicamente sintetizado que tiene la secuencia identificada como SEC. DE IDENT. NO.:17 seguido inmediatamente por 200 µl de una solución de clorhidrato de tetraciclina ÍM. Las ratas del tercer grupo se inyectaron cada una con 400 µl de un regulador que contiene 100 nmoles de un polipéptido químicamente sintetizado que tiene la secuencia identificada como SEC. DE IDENT. NO.:18 seguido inmediatamente por 200 µl de una solución de clorhidrato de tetraciclina ÍM. Después de aproximadamente 48 horas, se administró una segunda dosis de clorhidrato de tetraciclina a cada rata. Después de aproximadamente otras 24 horas, las ratas se sacrificaron por narcosis, con dióxido de carbono. Secciones de la metáfisis inferior del fémur derecho se usaron para la medición ósea de la proporción de aposición mineral ósea. Inmediatamente después de la disección, se fijo una muestra de hueso en solución de formaldehido al 10% a pH 7.4. Posteriormente el mismo dia, se intercambió una solución de H20-acetona 1:1 por la solución de formaldehído. Esta fue intercambiada dos veces el siguiente día con acetona. Esta fue intercambiada el siguiente dia por una solución de acetona-medio de Spurr 1:1, que se intercambió posteriormente el mismo dia con un medio de Spurr. El siguiente día, cada muestra se embebió en un cambio reciente de medio de Spurr y se curó a 60°C durante 24 horas, seguido por curado a 80°C durante 24 horas. Cada bloque curado se cortó en secciones de 400 µm de espesor usando un microtomo sierra Leits equipado con una hoja cargada de diamantes. Las secciones relativamente espesas se molieron entre dos placas de vidrio de molido previamente puestas ásperas con polvo de carbonuro a un espesor final de aproximadamente 10 µm, usándose agua como lubricante de pulimento. Las secciones delgadas se secaron y montaron sin teñir en un Permount ( Fisher ) . Se hicieron mediciones usando un microscopio fotómetro de barrido de luz Leitz MPV-CD amplificando las secciones 16X, como se describe en la solicitud de patente internacional No. PCT/CA94 /00144. Los resultados obtenidos se muestran en la Tabla Uno y Figura 1.

En otro conjunto de experimentos, se evaluó la dependencia de dosis de la proporción de aposición mineral ósea medida sobre la cantidad de polipéptido que tiene SEC. DE IDENT. NO.:18. Veintiocho ratas Sprague-Dawley hembras (peso promedio aproximadamente 300 gm) se dividieron en siete grupos de cuatro. Las ratas se trataron como se describió en el conjunto previo de experimentos excepto que la cantidad de polipépticlo de prueba varió como se sigue: 25, 50, 100, 200, 400 y 800 nmoles. Los resultados obtenidos se muestran en la Tabla Dos y Figura 2.

Como se ilustra gráficamente en la Figura 1, NAP- 2V- (15-22) que tiene sus términos amino y carboxi protegidos (SEC. DE IDENT. NO.:18) tiene mayor actividad estimuladora ósea que el similarmente protegido NAP-2V- ( 13-26; gln25- glu25) (SEC. DE IDENT. NO.:17). Ninguna de las secuencias NAP-2V- ( 15-22 ) o NAP-2V- (13-26; gln -glu ,25) retiene ninguno de los residuos cys 10 cys .1"2. Todas estas subsecuencias NAP-2V carecen de los residuos cys36 y cys52 presentes en el NAP-2V precursor. Puede ser que la actividad reducida de NAP-2V- ( 10-26) , NAP-2V-(11- 26) y NAP-2V- (12-26) previamente observada se daba al enlace espontáneo de disulfuro intermolecular que previene una interacción de polipéptido-receptor requerida para el efecto estimulador óseo, pero no se sabe por cierto. La secuencia de NAP-2V- ( 13-26; gln25-glu25) es diferente de la subsecuencia correspondiente de NAP-2V en la posición 25, estando presente un residuo de ácido glutámico en el lugar del residuo de glutamina. Desde luego se esperaría que la subsecuencia que tiene el residuo de glutamina como ocurre en NAP-2V también actuaría para estimular el crecimiento óseo en mamíferos. Se ha postulado que NAP-2 contiene dos enlaces disulfuro internos, entre Cys-5 y Cys-31, y Cys-7 y Cys-47, respectivamente (Baggiolini, M., Clemetson, K.J., Walz, A. Solicitud de Patente Internacional No. PCT/EP89/01389, publicada el 14 de junio de 1990 bajo WO90/06321.) Por extensión, las secuencias y subsecuencias descritas en la presente que contienen los residuos de cisteína correspondiente contendrían similarmente enlaces similares entre las mismas. Desde luego se entenderá, sin la intención de limitarse con eso que una diversidad de otras sustituciones de aminoácidos es posible preservando a la vez la estructura responsable del efecto estimulante óseo de las subsecuencias de NAP-2V descritas en la presente. Las sustituciones conservativas se describen en la literatura de patentes, como por ejemplo en la Patente Norteamericana No. 5,264,558. Se espera así, por ejemplo, que el intercambio entre aminoácidos neutros alifáticos no polares, glicina, alanina, prolina, valina e isoleucina seria posible. Igualmente, posiblemente podrían hacerse sustituciones entre los aminoácidos neutros alifáticos polares, serina, trionina, metionina, asparagina y glutamina. Probablemente podrían hacerse sustituciones entre los aminoácidos cargados ácidos, ácido aspártico y ácido glutámico como podrían ser sustituciones entre los aminoácidos básicos cargados, lisina y arginina. Las sustituciones entre los aminoácidos aromáticos, que incluyen fenilalanina, histidina, triptófano y tirosina también podrían probablemente hacerse. Estas clases de sustituciones e intercambios son bien conocidos por aquellos expertos en la técnica. Otras sustituciones podrían ser posibles. Un péptido que contiene una secuencia de aminoácidos que pueda alinearse con aquella de la secuencia SEC. DE IDENT. NO: 17 o NO.:18 o que tenga menos de 100% de homología con el mismo, puede retener al menos parte del efecto estimulador óseo del mismo. Desde luego, también sería posible que el porcentaje mayor de homología, digamos 70%, 80%, 90% o más, podría incrementar el grado de actividad estimulante ósea retenida. "Identidad de secuencia u homología", como se usa en la presente, se refiere a la similaridad de secuencia entre dos moléculas polipéptidicas o entre dos moléculas de ácido nucleico. Cuando una posición en ambas de las dos secuencias polipéptidicas comparadas, por ejemplo, está ocupada por el mismo aminoácido (por ejemplo, si una posición en cada una de las dos moléculas polipéptidicas es un residuo de alanina, entonces las moléculas son homologas o las secuencias son idénticas en esa posición. El porcentaje de homología entre dos moléculas o identidad de secuencia entre dos secuencias es una función del número de tales posiciones que ajustan compartidas por las dos secuencias divididas por 5 el número de posiciones comparadas por 100. Por ejemplo, si 6 de 10, de las posiciones en las dos secuencias son las mismas entonces las dos secuencias son 60% homologas o tienen 60% de identidad de secuencia. A manera de ejemplo, las secuencias polipépticlas METLIA y MPTWIF comparten 50% de homología o 10 identidad de secuencia. Generalmente, se hace una comparación cuando las dos secuencias se alinean para dar máxima homología . La comparación de secuencias y la determinación del porcentaje de homología entre las dos secuencias puede 15 lograrse usando un algoritmo matemático. La alineación puede realizarse conforme a dos métodos, el método Clustal y el método J. Hein. De estos, se prefiere el método Clustal. El algoritmo Clustal (como se aplica aqui usando software disponible de DNASTAR Inc., 1228 South Park Street, 20 Madison, Wisconsin, USA, 1994) se recomienda para alinear secuencias cuya similaridad no necesariamente podria ser evolutiva. El algoritmo se describe por Higgins, D.G. et al . 1989 CABIOS 5:151. El mismo programa de software proporciona secuencias de alineación conforme al método Jotun Hein, que 25 se recomienda para alinear secuencias de familias altamente ^H evolucionadas que tienen clara relación evolutiva. El algoritmo se describe por Hein, J. 1990. Methods in Enzymology 183:626. Se usan valores (parámetros estándar) de omisión del programa. En el caso de pesar residuos de aminoácidos basados en patrones de sustitución evolutivos, carga, similaridad estructural y química, se usa el valor PAM250 de omisión. Para alineaciones de proteinas, se usan los parámetros de alineación en forma de pases son Ktuple=l, sanción de intervalo=3, Ventana=5, y Diagonales Salvadas=5. En lo que se refiere como supresión de uno o más aminoácidos, es probable que las supresiones de un número pequeño de aminoácidos de cada extremo de cualquier secuencia podria ser posible, teniendo en mente la observación de que las supresiones para obtener SEC. DE IDENT. NO.:14 y 15 producen polipéptidos que no parecen mejorar el crecimiento óseo . Las adiciones de aminoácidos podrían muy probablemente hacerse en los extremos de la secuencia, y como con las supresiones, adiciones simétricas o caso simétricos a los carboxi y aminoterminales de una secuencia que presentan actividac estimuladora ósea son probablemente posibles. Un polipéptido de la presente invención pudiera mejorarse con respecto a la posible degradación, como pudiera ocurrir en el cuerpo en la presencia de una proteasa, por ejemplo por protección del C-término, el N-término, o ambos el C-térmmo y N-término del polipéptido. Como se usa en la presente, el grupo aminotérminal "protegido" se refiere a un grupo aminoterminal (N-término) acoplado con cualquiera de los diversos grupos protectores aminoterminal que puede emplearse en sintesis peptidicas. Ejemplos de grupos adecuados incluyen grupos protectores de acilo, por ejemplo, formilo, acetilo, benzoilo, trifluoroacetilo, succinilo y metoxisuccinilo; grupos que protegen uretano aromático, por ejemplo benciloxicarbonilo; y grupos que protegen uretano alifático, por ejemplo t-butoxicarbonilo o adamantiloxicarbonilo (Gross and Mienhofer, eds., The Peptides, vol 3, pp . 3 a 88 (Academic Press, New York, 1981) ) . Como se usa en la presente, el grupo carboxilo terminal "protegido" se refiere a un grupo carboxilo terminal (C-término) acoplado con cualquiera de diversos grupos protectores de carboxilo terminal . Como será fácilmente aparente para una persona experta en la técnica, grupos adecuados incluyen t-butilo, bencilo u otros grupos aceptables enlazados al grupo carboxilo terminal a través de un enlace éster o éter. Compuestos dentro del alcance de esta invención pueden sintetizarse químicamente por medios bien conocidos en la técnica tales como por ejemplo, sintesis peptidica de fase sólida. La síntesis se inicia desde el extremo carboxi '— - * -* *- •-*--- terminal del péptido usando un aminoácido a-aminoprotegido. Grupos protectores t-butiloxi carbonilo (Boc) , u otros grupos protectores adecuados, pueden usarse (Stewart et al . , "Solid- Phase Peptide Synthesis," W.H. Freeman Co . , San Francisco (1969); Merrifield, J. Am . Chem . Soc . 85:2149-2154 (1963); Vale et a l . , Science 213, 1394-1397 (1981) y Marke et al . J. Am . Chem . Sci . 103, 3178 (1981)). Métodos sintéticos también se describen en "Principies of Peptides Synthesis" M. Bodansky Ed. (Spring-Verlag 1984) . Estos y otros métodos de síntesis peptídica también se ejemplifican en las Patentes Norteamericanas Nos. 3,862,925, 3,842,067, 3,972,859, 4,105,602, 4,683,291, 4,244,946 y 4,305,872. Los compuestos también pueden sintetizarse usando técnicas manuales o automáticas, por ejemplo, un sintetizador peptidico Applied BioSystems 430A (Foster City, California) o un sintetizador peptídico automático Biosearch SAM 11 (Biosearch, Inc., San Rafael, California) . Un compuesto "derivado de" un polipéptido que tenga una secuencia de aminoácidos particular es cualquier entidad molecular que sea idéntica, sustancialmente homologa, o funcional o estructuralmente equivalente de otra forma a aquel polipéptido. Así, una molécula derivada de un polipéptido particular puede abarcar la secuencia de aminoácidos del polipéptido, cualquier porción de ese polipéptido, o cualquier entidad molecular que funcione para estimular el crecimiento óseo. Una molécula derivada de tal dominio de enlace imitará el polipéptido del cual se deriva. Tales entidades moleculares pueden incluir miméticos peptidiccs y similares. "Miméticos peptídicos" son estructuras que sirven como sustitutos para péptidos en interacciones con moléculas aceptoras (véase Morgan et al. (1989) Ann Reports Med. Chem . 24:243-252 para una revisión de miméticos péptídicos). Los miméticos peptídicos, como se usan en la presente, incluye estructuras sintéticas que pueden o pueden no contener aminoácidos y/o enlaces peptídicos, pero retienen características estructurales y funcionales de un péptido del cual se derivan. El término "miméticos péptidicos" también incluye peptoides y oligopeptoides, que son péptidos u holigómeros de aminoácidos N-sustituidos (Simón et al. (1972) Proc . Na ti . Acad . Sci . USA 89:9367-9371). Incluidos adicionalmente como miméticos peptidicos son las bibliotecas peptidicas, que son colecciones de péptidos diseñados para ser de una longitud de aminoácidos dada y representan todas las secuencias concebibles de aminoácidos que corresponden al mismo . Dos secuencias polipeptídicas son "sustancialmente homologas cuando al menos aproximadamente 85% (preferiblemente al menos aproximadamente 85% a 90% y de mayor preferencia al menos aproximadamente 95%) de los nucleótidos o aminoácidos ajustan sobre una longitud definida del polipéptido. Como se usa en la presente, sustancialmente homólogo también se refiere a secuencias que muestran identidad con la secuencia polipeptidica especificada. Los miméticos peptídicos que imitan estructural y funcionalmente los polipéptidos que tiene actividad estimuladora ósea descritos en la presente también encontraran uso en la presente y pueden generarse usando las siguientes estrategias y procedimientos. Generalmente, los miméticos se diseñan con base en la información obtenida por la reposición sistemática de L-aminoácidos por D-aminoácidos, reposición de porciones de cadena lateral por un grupo metilo o grupos pseudo isoestéricos con propiedades electrónicas diferentes (véase Hruby et al. (1990) Biochem , J. 268:249-262), y por la reposición sistemática de enlaces peptídicos en los inhibidores peptídicos descritos anteriormente con reposiciones de enlace amida. Por ejemplo, análogos que contienen sustitutos de enlace amida pueden usarse para investigar aspectos de estructura y función peptídica, tales como libertad rotacional en la estructura base, los patrones de enlace de hidrógeno, intra e intermoleculares, modificaciones de polaridad e hidrofobicidad local y total, y biodisponibilidad oral. También pueden introducirse restricciones conformacionales locales para determinar requerimientos conformacionales para actividad de un mimético peptidico potencial que tenga actividad estimuladora ósea. Por ejemplo, pueden usarse aminoácidos ß, ß-distribuidos para examinar los efectos de restricciones conformacionales sobre la actividad peptidica (véase, por ejemplo Manning et al. (1982) J. Med. Chem . 25:408-414; Mosberg et al. (1983) Proc . Na ti . Acad. Sci . USA 106:506-512; Pelton et al. (1985) Proc . Na ti . Acad. Sci . USA 82:236-239) . Los miméticos pueden incluir enlaces amida isoestéricos tales como ?[CH2S], ?[CH2NH], ?[CNH2], ?[NHCO], ?[COCH2] y ?(E) o (Z) CH==CH] véase, para revisión, Spatola (1983) en "Chemistry and Biochemistry of Amino Acids, Peptide and Proteins," Volume VII. (Weinstein ed.), Marcel Dekker, New York, 267-357). Las moléculas sintéticas también pueden incluir D-aminoácidos para estabilidad o promover conformaciones de vuelta inversa y para ayudar a estabilizar la molécula de degradación enzimática (véase, por ejemplo Freidinger et al (1985) en "Peptides: Structure and Function". (Deber et al. eds.), Pierce Chem. Co., Rockford, III., 549-552; Sawyer et al (1980) Proc . Na ti . Acad. Sci . USA 77:5754-5758; Torchiana et al (1978) Arch . In t . Pharmacol . Ther . 235:170-176). Pueden usarse análogos de aminoácidos cíclicos para restringir residuos de aminoácidos a estados conformacionales particulares, por ejemplo, aminoácidos cíclicos aa'- y ßß-sustituidos tales como ácido 1- aminociclopentancarboxílico (cicloleucina) y ácido ß,ß_ ciclopentametilen-ß-mercaptopropiónico (véase Hruby et al (1990) , supra) . Los miméticos también pueden incluir imitaciones de estructura secundaria polipeptidica-estructura que pueden modelar la orientación tridimensional de residuos de aminoácidos dentro de conformaciones secundarias conocidas de proteínas-que incluyen miméticos de vuelta ß, tales como el sistema de anillo fenoxantina, e imitaciones de lámina ß, tales como estructuras de epindolidiona . La sintesis de diseño y el análisis conformacional de una plantilla que induce a-hélice ha sido descrita (Kemp et al (1988) Tetrahedzon Let t . 29:4931; Kemp et al. (1988) Tetrahedron Let t . 29:4935) . Un mimético potencial puede probarse o preseleccionarse, para actividad potencial como un compuesto que estimula hueso midiendo la afinidad del compuesto por un anticuerpo erigido en contra del polipéptido a partir del cual se deriva el mimético. Como se describe anteriormente para los polipéptidos, aquellos miméticos que reaccionan positivamente con el anticuerpo para el péptido ya conocido podrían entonces probarse por efectos estimulares óseos in vivo usando el sistema descrito en la presente para ratas, por ejemplo. Los anticuerpos erigidos en contra de un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO . : 9 serían particularmente útiles en este contexto. Los peptoides encuentran uso en la presente. Los peptoides son oligómeros de aminoácidos N-sustituidos (Simón et al (1972), supra), y pueden usarse como motivos para la generación de bibliotecas químicamente diversas de moléculas novedosas, que pueden entonces probarse por actividad estimuladora ósea y de enlace. Los monómeros pueden incorporar protección de cadena lateral basada en T-butilo y 9-fluorenilmetoxicarbonil a-amina. La oligomerización de los monómeros peptoides puede realizarse por ejemplo, por activación in si tu por hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris (pirrolidino) fosfonio o hexafluorofosfato de bromotris (pirrolidino) fosfonio . Otras etapas son idénticas a la sintesis péptidica convencional usando a-(9-fluorenilmetoxicarbonil) aminoácido . Pueden identificarse oligopeptoides que tengan afinidades comparables con los polipéptidos correspondientes y, así, son potencialmente útiles como agentes estimuladores óseos. Los compuestos de la presente invención y las composiciones que los contienen encuentran uso en numerosas aplicaciones terapéuticas y profilácticas en la prevención y tratamiento de reducción ósea relacionada con una enfermedad. Los compuestos pueden así usarse como tratamientos para promover el crecimiento óseo, en el tratamiento de osteoporosis, por ejemplo, por cualquier ruta adecuada. Las rutas preferidas son adecuadas para suministro de compuestos tipo polipéptido a la corriente sanguínea de un sujeto teniendo en mente condiciones de manejo y almacenamiento apropiadas requeridas para polipéptidos tales como aquellos descritos en la presente. Así la presente invención también proporciona composiciones que contienen una cantidad efectiva de compuestos de la presente invención, que incluyen las sales de adición no tóxicas, amidas y esteres de las mismas, que pueden, solas, servir para proporcionar los beneficios de tratamiento anteriormente descritos . Tales composiciones también pueden proporcionarse junto con diluyentes, adyuvantes y excipientes líquidos, en gel, o sólidos, fisiológicamente tolerables. En los ejemplos anteriores que involucran las subsecuencias de NAP-2V aproximadamente 75 nmoles del polipéptido por kg de peso corporal del animal se usó por administración. En la práctica, particularmente en lo que se refiere a sujetos humanos, la dosificación diaria puede estar entre 0.C1 y 300 mg o más por kg de peso corporal. Más preferiblemente, la dosificación estarla en los alrededores de aproximadamente 0.01 hasta aproximadamente 30 mg por kg de peso corporal. Puede ser que la frecuencia preferida de administración fuese mayor o menor que una vez por día dependiendo de la ruta de administración, conveniencia, y la variación de efectividad del tratamiento con la frecuencia de la cantidad usada por administración. La dosificación administrada también depende del sujeto y para que efecto tal administración se dará. La dosificación de alguno o más de los compuestos dependerá de muchos factores que incluyen el compuesto específico o combinación de compuestos utilizados, el modo de administración y el mamífero tratado. Las dosificaciones de un compuesto particular o combinación de compuestos puede determinarse usando consideraciones convencionales; por ejemplo, por la comparación acostumbrada de las actividades diferenciales de los compuestos objeto y aquel de un agente conocido, que es, por medio de un protocolo farmacológico apropiado en el cual, por ejemplo, se mide durante el tiempo la densidad ósea de los sujetos. Las preparaciones farmacéuticas incluyen cualquiera de los compuestos preparados como una solución inyectable, que incluye una solución inyectable preparada justo antes de usarse, para promover el crecimiento óseo y/o tratamiento de osteoporcsis . Un inyectable puede ser una solución o suspensión liquida; formas sólidas adecuadas para solución en o suspensión en, liquido antes de la inyección también pueden prepararse. La preparación también puede emulsificarse . El polipéptido activo se mezcla frecuentemente con diluyentes y excipientes que son fisiológicamente tolerables y compatibles con el polipéptido. Los diluyentes y excipientes adecuados son, por ejemplo agua, solución salina, dextrosa, glicerol o similares y combinaciones de los mismos. Además, si se desea, las composiciones pueden contener cantidades menores de sustancias auxiliares tales como agentes humectantes o emulsificadores, agentes estabilizadores o que regulan el pH, y similares. Las preparaciones farmacéuticas incluyen el empleo de los compuestos en mezcla con excipientes convencionales, esto es sustancias portadoras orgánicas o inorgánicas farmacéuticamente aceptables que no reaccionan adversamente con los compuestos, y que posiblemente mejoran la estabilidad de almacenamiento y manejo de los compuestos. El procedimiento preparativo puede incluir la esterilización de las preparaciones farmacéuticas. Los compuestos pueden mezclarse con agentes auxiliares tales como lubricantes, conservadores, estabilizadores, sales para influenciar la presión osmótica, etc., que no reaccionen adversamente con los compuestos . Las composiciones se administran convencional y parenteralmente, por inyección, por ejemplo subcutánea o intravenosamente. Las formulaciones adicionales que son adecuadas para otros modos de administración incluyen supositorios, aerosoles intranasales, y en algunos casos, formulaciones orales. Para los supositorios, aglutinantes y excipientes tradicionales pueden incluir, por ejemplo, polialquilenglicoles o triglicéridos; tales supositorios pueden formarse de mezclas que contengan el ingrediente activo en el rango de 0.5% a 10%, preferiblemente l%-2%. Las formulaciones orales incluyen tales excipientes normalmente empleados como, por ejemplo, calidad farmacéutica de manitol, lactosa, almidón, estearato de magnesio, sacarina de sodio, celulosa, carbonato de magnesio y similares. Estas composiciones toman la forma de soluciones, suspensiones, tabletas, pildoras, cápsulas, formulaciones de liberación prolongada o polvos, y contienen 10%-95% de ingrediente activo, preferiblemente 25%-70%. Estas formulaciones orales incluyen formulaciones diseñadas para proteger el péptido hasta que pueda absorberse. Las composiciones peptidicas pueden formularse dentro de las composiciones como formas neutras o de sal. Las sales no tóxicas farmacéuticamente aceptables incluyen las sales de adición acidas (formadas con los grupos amino libres) y que se forman con ácidos inorgánicos tales como, por ejemplo, ácido clorhídrico o fosfórico, o ácidos orgánicos tales como acético, oxálico, tartárico, mandélico y similares. Las sales formadas con los grupos carboxilo libres pueden derivarse de bases inorgánicas tales como, por ejemplo, hidróxidos de sodio, potasio, amonio, calcio o férricos, y tales bases orgánicas son isopropilamina, trimetilamina 2-etilaminoetanol, histidina, procaina y similares . Los compuestos de la invención pueden homopolimerizarse consigo mismo (es decir, (péptido) n) o, heteropolimerizarse entre si. Los compuestos también pueden conjugarse con compuestos poliméricos biocompatibles, tales como BIOPOL™ (WR Grace & Co..-Conn). Si se preparan usando técnicas recombinantes, una secuencia de ADN que codifica un polipéptido deseado de la presente invención se sintetiza usando técnicas automatizadas estándar o las secuencias que codifican o porciones de las mismas se retiran de ADNc o bibliotecas genómicas. Este ADN se liga dentro de vectores de expresión adecuados y estos vectores se transforman en huéspedes apropiados. Una diversidad de sistemas de expresión vector/célula huésped pueden usarse, que incluyen sistemas de cultivo procarióticos y eucarióticos . Los procariontes se representan más frecuentemente por diversas cepas de E. coli. Sin embargo, también pueden usarse otras cepas microbianas, tales como bacilus, por ejemplo ba cill us subtill is, diversas especies de Pseudomonas, u otras cepas bacterianas. En tales sistemas procarióticos, se usan vectores plásmidos que contienen orígenes de replicación, y secuencias de control derivadas de una especie compatible con el huésped. Por ejemplo, E. coli se transforma típicamente usando derivados de pBR322, un plásmido derivado de una especie de E. coli (Bolívar et al., (1977) Gene 2:95. Secuencias de control procarióticas comúnmente usadas, que se definen en la presente para incluir promotores para iniciación de transcripción, opcionalmente con un operador, junto con secuencias de sitio de enlace ribosoma, incluyen tales promotores comúnmente usados como la beta-lactamasa (penicilinasa) , sistemas promotores de lactosa (lnc) (Chang et al., (1977) Na ture 198:1056), el sistema promotor de triptófano (trp) (Goeddel et al., (1990) Nucleic Acids Res 8:4057), y el promotor PL lambda derivado y el sitio de enlace N-gen ribosoma (Shimatake et al., (1981) Na ture 292:128) . Sin embargo, cualquier sistema promotor disponible compatible con procariontes puede usarse. Los sistemas de expresión útiles en los sistemas eucarióticos de la invención comprenden promotores derivados de genes eucarióticos apropiados. Una clase de promotores útiles en levaduras, por ejemplo, incluyen promotores para sintesis de enzimas glicolíticas, que incluyen promotores de alcohol deshidrogenasa, promotor de gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (Holland & Holland, (1980) J Biol Chem 25:2596), promotor del factor alfa (Bitter et al., (1984) Proc Na ti Acad Sci 81:5330), el promotor gal (Johnston & David (1984) Mol Cel ' Biol 4:1440) aquellos para 3-fosfoglicerato cinasa (Hitzeman et al., (1980) J. Biol Chem 256:1385) o el gen Leu2 obtenido de Yepl3 (Broach, J et al., (1978) Gene 8 :121) . Los promotores de mamífero adecuado incluyen los primeros y últimos promotores de SV40 (Fiers et al-, (1978) Na ture 273:113) u otros promotores virales tales como aquellos derivados de polioma, adenovirus II, virus de papiloma bovino o virus de sarcoma avícola. Mejoradores mamífero y virales adecuados se citan anteriormente. En el caso de que se usen células vegetales como un sistema de expresión, el promotor de síntesis de nopalina es apropiado (Depicker, A., et al., (1982) J Mol Appl Gen 1:56). Los sistemas de expresión se incluyen sobre vectores de duplicación o se provoca que se integren dentro del cromosoma de un huésped recombinante. Para los sistemas en donde los vectores incluyen un sistema de duplicación, estos pueden ser de bajo o alto número de copias, teniendo normalmente números de copia de menos de aproximadamente 1000, aunque en algunas situaciones, pueden emplearse vectores de fuga. Sea que se proporcione sobre un vector intentado para integración o en un sistema de duplicación, la secuencia que codifica un polipéptido de la invención puede ligarse en tándem con un gen amplificador tal como dihidrofolato reductasa, metalotioneinas, timidin cinasa, o similares. En sistemas procarióticos, el gen amplificador y el gen objetivo pueden estar por debajo de la regulación de las mismas regiones reguladoras de transcripción y de traducción . Normalmente, el vector incluirá un marcador que permitirá la selección de células huésped que contengan el sistema de expresión; la naturaleza de estos marcadores depende del huésped y es entendido en la técnica. Además de los reguladores requeridos tales como promotores, también pueden emplearse secuencias adicionales tales como mejoradores para mejorar el nivel de transcripción. Si el polipéptido se secretara, una secuencia hacia el extremo 5' que codifica el péptido de señal tales como aquellas descritas en las Patentes Norteamericanas Nos. 4,336,336; 4,338,397; y 4,546,082 pueden emplearse. Las secuencia de señal se desdobla enzimáticamente conforme el producto polipéptidico se secreta. Dependiendo de la célula huésped usada, se hace la transformación usando técnicas estándar apropiadas para tales células. El tratamiento de calcio empleando cloruro de calcio, como se describe por Cohén, S.N., (1972) Proc Na ti Acad Sci USA 69:2110; o el método RbCl descrito en Maniatis et al., Molecular Cloning: A Labora tory Manual (1982) Cold Spring Harbor Press, p 254 se usa para procariontes u otras células que contienen barreras de pared celular sustanciales. La infección con Agrobacterium Tumefa ciens (Shaw, C.H., (1938) et al., Gene 23:315) se usa para algunas células vegetales. Para células de mamífero sin tales paredes celulares, el método de precipitación de fosfato de calcio de Graham y van der Eb, (1978) Virology 52:2:546 se prefiere. Las transformaciones en levadura se llevan a cabo, por ejemplo, conforme al método de Van Solingen, P. et al., (1977) J Bacter 130:946; y Hsiao, C.L., et al., (1979) Proc Na ti Acad Sci USA 76:3829. En general, después de la construcción de un sistema de expresión adecuado, el sistema se transfecta dentro del huésped apropiado y los transformantes exitosos se seleccionan por marcadores contenidos sobre los vectores de expresión. Las colonias exitosamente transformadas se cultivan después para producir el polipéptido deseado. Se prefiere algunas veces que un promotor que puede controlarse regulando las condiciones en el ambiente se use para que las células puedan crecer bajo condiciones en donde el gen que codifica el polipéptido deseado de la invención no se exprese, y entonces la producción del polipéptido se induzca por la manipulación apropiada de las condiciones. Por ejemplo, si el promotor trp se usa en E. coli, las células se cultivan en la presencia de triptófano y la expresión se induce después por la disminución de la concentración de triptófano o por la adición de un análogo de triptófano tal como ácido indolacético . Si el gen esta por debajo del control del promotor PL, las células se cultivan a temperatura relativamente baja, tal como a aproximadamente 35°C, hasta una densidad celular adecuada, la temperatura se eleva después para activar este promotor. Si se produce en huéspedes bacterianos como un polipéptido intracelular maduro, la metionina N-terminal puede o puede no desdoblarse. En sistemas de mamífero, por ejemplo, el uso del promotor de metalotioneina permiten la inducción por adición de metales pesados o glucocorticoides . Este protocolo se prefiere para prevenir la acumulación prematura del polipéptido que pudiera ser perjudicial al crecimiento de la célula. El polipéptido puede producirse intracelularmente, o en un forma secretada por la construcción de vectores en los cuales el péptido está precedido por un péptido señal viable en el huésped apropiado. El polipéptido se recupera del medio o de las células usando técnicas adecuadas generalmente conocidas en el arte, y purificado por, por ejemplo, cromatografía de intercambio iónico, precipitación con sulfato de amonio, cromatografía de permeación en gel, etc. Los polipéptidos que se hacen disponibles por la invención descrita en la presente pueden usarse para obtener antisueros de los mismos. (Stites, D.P. y A.l. Terr. 1991. In Basic & Clinical Immunology, 7th Ed. Appleton and Lange, Norwalk, Connecticut and San Matea California) . La metodología y los productos pueden desarrollarse usando un anticuerpo para un polipéptido para uso en la detección del polipéptido con el cual el anticuerpo se enlaza. Habiendo sido aparentemente logrado esto al menos para el polipéptido que tiene la secuencia de CTAP-III (SEC. DE IDENT. NO.:3) (Baggiolmi, M., Clemetson, K.J., Walz, A. Solicitud de Patente Internacional No. PCT/EP89/01389, publicada el 14 de junio de 1999 bajo WO90/06321) . La metodología y los productos pueden desarrollarse usando un anticuerpo para un polipéptido para uso en la detección del polipéptido con el cual el anticuerpo se enlaza. Por ejemplo, un anticuerpo puede enlazarse o conjugarse con un sistema reportero que se establece para indicar el enlace positivo del polipéptido al anticuerpo. Los sistemas reportero bien conocidos incluyen radio inmunoensayos (RIAs) o ensayos inmunoradiométricos (IRMAs). Alternativamente, una prueba inmunosorbente enlazada a enzima (ELISA) tendría en común con las RIAs e IRMAs un grado relativamente alto de sensibilidad, pero generalmente no confiarla en el uso de radioisótopos. Una sustancia visualmente detectable puede producirse o al menos una detectable en un espectrofotómetro. Una prueba que confia en la fluorescencia de una sustancia enlazada por la enzima siendo probada podría usarse. Se apreciará que existe un número de sistemas reporteros que pueden usarse conforme a la presente invención para detectar la presencia de un polipéptido particular. Con la recolección y tratamiento de la muestra estandarizada, la presencia polipeptídica arriba de una cantidad de umbral en el suero sanguíneo podría determinarse bien. Tal sistema reportero enlazado al anticuerpo podría usarse en un método para determinar si el suero sanguíneo de un sujeto contiene una cantidad deficiente de polipéptido. Dada una concentración de umbral normal de tal polipéptido en suero sanguíneo de un tipo dado de sujeto, los equipos de prueba podrían así desarrollarse. Una ventaja adicional puede obtenerse a través de formas quiméricas de la proteina, como se conoce en la técnica. Una secuencia de ADN que codifica la proteina completa, o una porción de la proteina, podria así enlazarse con una secuencia que codifica para la porción C-terminal de E . col i ß-galactosidasa para producir una proteína fusionada, por ejemplo. Un sistema de expresión para glicoproteína F y G de virus de sincitio respiratorio humano se describe en la Patente Norteamericana No. 5,288,630 expedida el 22 de febrero de 1994 y referencias citadas en el mismo, por ejemplo. Todas las referencias citadas en esta especificación se incorporan en la presente para referencia, incluyendo la Solicitud de Patente Provisional Norteamericana No. de Serie 004,314 presentada el 26 de septiembre de 1995. 1/6 LISTA DE SECUENCIA <110> O?TEOPHARM INC. <120> FACTOR QUE EST: <130> 46913/00102 <140> <141> 2000-01-13 <150> US 09/229,304 <151> 1999-01-13 <160> 19 <170> ordperfect 6.1 <210> 1 <211> 70 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Ala Glu Leu Arg Cys Met Cys He Lys Thr Thr Ser Gly He His Pro 1 5 10 15 Lys Asn He Gln Ser Leu Glu Val He Gly Lys Gly Thr His Cys Asn 20 25 30 Gln Val Glu Val He Ala Thr Leu Lys Asp Gly Arg Lys He Cys Leu 35 40 45 Asp Pro Asp ALa Pro Arg He Lys Lys He Val Gln Lys Lys Leu Ala 50 55 60 Gly Asp Glu Ser Ala Asp 65 70 <210> 2 <211> 75 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Asp Ser Asp Leu Tyr Ala Glu Leu Arg Cys Met Cys He Lys Thr Thr 1 5 10 15 Ser Gly He His Pro Lys Asn He Gln Ser Leu Glu Val He Gly Lys 20 25 30 Gly Thr His Cys Asn Gln Val Glu Val He Ala Thr Leu Lys Asp Gly 35 40 45 Arg Lys He Cys Leu Asp Pro Asp Ala Pro Arg He Lys Lys He Val 50 55 60 Gln Lys Lys Leu Ala Gly Asp Glu Ser Ala Asp 65 70 75 2/6 <210> 3 <211> 74 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 3 Ser Asp Leu Tyr Ala Glu Leu Arg Cys Met Cys He Lys Thr Thr Ser 1 5 10 15 Gly He His Pro Lys Asn He Gln Ser Leu Glu Val He Gly Lys Gly 20 25 30 Thr His Cys Asn Gln Val Glu Val He Ala Thr Leu Lys Asp Gly Arg 35 40 45 Lys He Cys Leu Asp Pro Asp Ala Pro Arg He Lys Lys He Val Gln 50 55 60 Lys Lys Leu Ala Gly Asp Glu Ser Ala Asp 65 70 <210> 4 <211> 73 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 Asp Leu Tyr Ala Glu Leu Arg Cys Met Cys He Lys Thr Thr Ser Gly 1 5 10 15 He His Pro Lys Asn He Gln Ser Leu Glu Val He Gly Lys Gly Thr 20 25 30 His Cys Asn Gln Val Glu Val He Ala Thr Leu Lys Asp Gly Arg Lys 35 40 45 He Cys Leu Asp Pro Asp Ala Pro Arg He Lys Lys He Val Gln Lys 50 55 60 Lys Leu Ala Gly Asp Glu Ser Ala Asp 65 70 <210> 5 <211> 81 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 5 Gly Lys Glu Glu Ser Leu Asp Ser Asp Leu Tyr Ala Glu Leu Arg Cys 1 5 10 15 Met Cys He Lys Thr Thr Ser Gly He His Pro Lys Asn He Gln Ser 20 25 30 Leu Glu Val lie Gly Lys Gly Thr His Cys Asn Gln Val Glu Val He 35 40 45 Ala Thr Leu Lys Asp Gly Arg Lys He Cys Leu Asp Pro Asp Ala Pro 50 55 60 3/6 Arg He Lys Lys He Val Gln Lys Lys Leu Ala Gly Asp Glu Ser Ala 65 70 75 80 Asp <210> 6 <211> 85 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 6 Asn Leu Ala Lys Gly Lys Glu Glu Ser Leu Asp Ser Asp Leu Tyr Ala 1 5 10 15 Glu Leu Arg Cys Met Cys He Lys Thr Thr Ser Gly He His Pro Lys 20 25 30 Asn He Gln Ser Leu Glu Val He Gly Lys Gly Thr His Cys Asn Gln 35 40 45 Val Glu Val He Ala Thr Leu Lys Asp Gly Arg Lys He Cys Leu Asp 50 55 60 Pro Asp Ala Pro Arg He Lys Lys He Val Gln Lys Lys Leu Ala Gly 65 70 75 80 Asp Glu Ser Ala Asp 85 <210> 7 <211> 94 <212> PRT <213> Homo Sapiens <400> 7 Ser Ser Thr Lys Gly Gln Thr Lys Art A=n Leu Ala Lys Gly Lys Glu 1 5 10 15 Glu Ser Leu Asp Ser Asp Leu Tyr Ala Glu Leu Arg Cys Met Cys He 20 25 30 Lys Thr Thr Ser Gly He His Pro Lys Asn He Gln Ser Leu Glu Val 35 40 45 He Gly Lys Gly Thr His Cys Asn Gln Val Glu Val He Ala Thr Leu 50 55 60 Lys Asp Gly Arg Lys He Cys Leu Asp Pro Asp Ala Pro Arg He Lys 65 70 75 80 Lys He Val G-ln Lys Lys Leu Ala Gly Asp Glu Ser Ala Asp 85 90 <210> 8 <211> 79 <212> PRT <213> Homo saoiens <400> 8 Glu Gly Ala Val Leu Pro Arg Ser Ala Lys Glu Leu Arg Cys Gln Cys 1 5 10 15 He Lys Thr Tyr Ser Lys Pro Phe His Pro Lys Phe He Lys Glu Leu 20 25 30 Arg Val He Glu Ser Gly Pro His Cys Ala Asn Thr Glu He He Val 35 40 45 Lys Leu Ser Asp Gly Arg Glu Leu Cys Leu Asp Pro Lys Glu Asn Trp 50 55 60 Val Gln Arg Val Val Glu Lys Phe Leu Lys Arg Ala Glu Asn Ser 65 70 75 <210> 9 <211> 103 <212> PRT <213> Porcine <400> 9 Met Thr Ser Lys Leu Ala Val Ala Phe Leu Ala Val Phe Leu Leu Ser 1 5 10 15 Ala Ala Leu Cys Glu Ala Asp Val Leu Ala Arg Val Ser Ala Glu Leu 20 25 30 Arg Cys Gln Cys He Asn Thr His Ser Thr Pro Phe His Pro Lys Phe 35 40 45 He Lys Gle Leu Arg Val He Gle Ser Gly Phe His Cys Glu Asn Ser 50 55 60 Glu He He Val Lys Leu Val Asn Gly Lys Glu Val Cys Leu Asp Pro 65 70 75 80 Lys Glu Lys Trp Val Gln Lys Val Val Gln He Phe Leu Lys Arg Thr 85 90 95 Glu Lys Gln Gln Gln Gln Gln 100 <210> 10 <211> 70 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 10 Glu Ala Glu Glu Asp Gly Asp Leu Gln Cys Leu Cys Val Lys Thr Thr 1 5 10 15 Ser Gln Val Arg Pro Arg His He Thr Ser Leu Glu Val He Lys Ala 20 25 ' 30 Gly Pro His Cys Pro Thr Ala Gln Leu He Ala Thr Leu Lys Asn Gly 35 40 45 Arg Lys He Cys Leu Asp Leu Glu Ala Pro Leu Tyr Lys Lys He He 50 55 60 Lys Lys Leu Leu Glu Ser 65 70 5/6 <210> 11 <211> 26 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 11 Asp Ser Asp Leu Tyr Ala Glu Leu Arg Cys Met Cys He Lys Thr Thr 1 5 10 15 Ser Gly He His Pro Lys Asn He Gln Ser 20 25 <210> 12 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <400> 12 He Lys Thr Thr Ser Gly He His Pro Lys Asn He Glu Ser 1 5 10 <210> 13 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 13 Cys Met Cys He Lys Thr Thr Ser Gly He His Pro Lys Asn He Gln 1 5 10 15 Ser <210> 14 <211> 16 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 14 Met Cys He Cys Thr Thr Ser Gly He His Pro Lys Asn He Gln Ser 1 5 10 15 <210> 15 <211> 15 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 15 Cys He Lys "hr Thr Ser Gly He His Pro Lys Asn He Gln Ser 1 5 10 15 <210> 16 <211> 228 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 16 gac agt gac ttg tat gct gaa ctc cgc tgc atg tgt ata aag aca acc 48 Asp ser Asp Leu Tyr Ala Glu Leu Arg Cys Met Cys He Lys Thr Thr 1 5 10 15 tet gga att cat ccc aaa aac ate caa agt ttg gaa gtg ate ggg aaa 96 Ser Gly He His Pro Lys Asn He Gln Ser Leu Glu Val He Gly Lys 20 25 30 __«__«___•___ 6/6 gga acc cat tgc aac caa gtc gaa gtc ata gcc aca ctg aag gat ggg 146 Gly Thr His Cys Asn Gln Val Glu Val He Ala Thr Leu Lys Asp Gly 35 40 45 agg aaa ate tgc ctg gac cea gat gct ccc aga ate aag aaa att gta 192 Arg Lys He ys Leu Asp Pro Asp Ala Pro Arg He Lys Lys He Val 50 55 60 cag aaa aaa ttg gca ggt gat gaa tet gct gat taa 228 Gln Lys Lys Leu Ala Gly Asp Glu Ser Ala Asp TER 65 70 75 <210> 17 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> Modified site <222> ...2 <223> /note= "Xaa is N-acetyl is <220> <221> Modified site <222> 14... <223> /note= "Xaa is serinamide" <400> 17 Xaa Lys Thr Thr Ser Gly He His Pro Lys Asn He Glu Xaa 1 5 10 <210> 18 <211> 8 <212> PRT <213> Ho o sapiens <220> <221> Modified site <222> ...2 <223> /note= "Xaa is N-acetyl th <220> <221> Modified site <222> 14... <223> /note= "Xaa is lysinamide" <400> 18 Xaa Thr Ser Gly He His Pro Xaa 1 5 <210> 19 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 19 He Lys Thr Thr Ser Gly He His Pro Lys Asn He Gln Ser 1 5 10

Claims (1)

1. 42 REIVINDICACIONES 1. Un polipéptido caracterizado porque comprende: un fragmento polipeptídico que promueve el crecimiento óseo en mamíferos, conteniendo el fragmento hasta 13 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. N0.:12, SEC. DE IDENT. N0.:19 o una variante conservativa de SEC. DE IDENT. N0..12 o SEC. DE IDENT. N0..19. 2. El polipéptido de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el fragmento contiene hasta 12 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO.:12, SEC. DE IDENT. NO.:19 o la variante conservativa de SEC. DE IDENT. NO.: 12 o SEC. DE IDENT. NO.: 19. 3. El polipéptido de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el fragmento contiene hasta 11 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO.:12, SEC. DE IDENT. NO.:19 o una variante conservativa de SEC. DE IDENT. NO.:12 ó SEC. DE IDENT. NO . : 19. 4. El polipéptido de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el fragmento contiene hasta 10 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO..-12, SEC. DE IDENT. NO.:19 o una variante conservativa de 43 SEC. DE IDENT. N0..12 ó SEC. DE IDENT. N0..19. 5. El polipéptido de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el fragmento contiene hasta 9 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO.:12, SEC. DE IDENT. NO.:19 o una variante conservativa de SEC. DE IDENT. NO.: 12 ó SEC. DE IDENT. N0..19. 6. El polipéptido de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque el fragmento contiene hasta 8 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO.: 12, o una variante conservativa del mismo. 7. El polipéptido de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 3, 4, 5 ó 6, caracterizado porque el fragmento es al menos ocho aminoácidos de longitud e incluye la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO.:18 o una variante conservativa del mismo. 8. Un polipéptido caracterizado porque comprende: un fragmento polipeptídico que promueve el crecimiento óseo en mamíferos, conteniendo el fragmento hasta 13 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. N0..12 o SEC. DE IDENT. NO. : 19. 9. El polipéptido de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el fragmento contiene 44 hasta 12 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. N0.:12 o SEC. DE IDENT. NO.:19. 10. El polipéptido de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque el fragmento contiene hasta 11 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO.:12 o SEC. DE IDENT. NO.:19. 11. El polipéptido de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque el fragmento contiene hasta 10 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO.:12 o SEC. DE IDENT. NO.:19. 12. El polipéptido de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el fragmento contiene hasta 9 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO.:12 o SEC. DE IDENT. NO.:19. 13. El polipéptido de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque el fragmento contiene hasta 8 aminoácidos consecutivos seleccionados de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO.:12 o SEC. DE IDENT. NO.:19. 14. Un polipéptido de cualquiera de las reivindicaciones 8, 9, 10, 11, 12 ó 13, caracterizado porque 45 el fragmento es al menos de ocho aminoácidos de longitud e incluye la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO. 18 o una variante conservativa de la misma. 15. Un polipéptido aislado caracterizado porque comprende un fragmento polipeptídico que promueve el crecimiento óseo en mamíferos, teniendo el fragmento una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de la secuencia identificada como SEC. DE IDENT. N0.:18 o una variante conservativa de la misma. 16. Un polipéptido aislado caracterizado porque comprende un fragmento polipeptídico que promueve el crecimiento óseo en mamíferos, teniendo el fragmento una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de la secuencia identificada como SEC. DE IDENT. NO.: 18. 17. El polipéptido de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque uno u otro o ambos aminoácidos N-terminal y el aminoácido C-terminal incluyen un grupo protector. 18. El primer polipéptido que promueve el crecimiento óseo en mamíferos caracterizado porque comprende una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de hasta 13 aminoácidos y es suficientemente duplicativo de un segundo polipéptido, siendo el segundo polipéptido un fragmento polipeptídico definido de conformidad con la reivindicación 1, tal que el primer polipéptido se codifica 46 por un ADN que se hibridiza bajo condiciones severas con ADN que codifica el segundo polipéptido. 19. El primer polipéptido que promueve el crecimiento óseo en mamíferos caracterizado porque comprende una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de hasta 12 aminoácidos y es suficientemente duplicativo de un segundo polipéptido, siendo el segundo polipéptido un fragmento polipeptidico definido de conformidad con la reivindicación 2, tal que el primer polipéptido se codifica por un ADN que se hibridiza bajo condiciones severas con ADN que codifica el segundo polipéptido. 20. Un primer polipéptido que promueve el crecimiento óseo en mamíferos caracterizado porque comprende una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de hasta 11 aminoácidos y es suficientemente duplicativo de un segundo polipéptido, siendo el segundo polipéptido un fragmento polipeptidico definido conforme a la reivindicación 3, tal que el primer polipéptido se codifica por un ADN que se hibridiza bajo condiciones severas con ADN que codifica el segundo polipéptido. 21. El primer polipéptido que promueve el crecimiento óseo en mamíferos caracterizado porque comprende una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de hasta 10 aminoácidos y es suficientemente duplicativo de un segundo polipéptido, siendo el segundo polipéptido un 47 fragmento polipeptídico definido de conformidad con la reivindicación 4, tal que el primer polipéptido se codifica por un ADN que se hibridiza bajo condiciones severas con ADN que codifica el segundo polipéptido. 22. El primer polipéptido que promueve el crecimiento óseo en mamíferos que comprende una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de hasta 9 aminoácidos y es suficientemente duplicativo de un segundo polipéptido, siendo el segundo polipéptido un fragmento polipeptidico definido de conformidad con la reivindicación 5, tal que el primer polipéptido se codifica por un ADN que se hibridiza bajo condiciones severas con ADN que codifica el segundo polipéptido . 23. El primer polipéptido que promueve el crecimiento óseo en mamíferos caracterizado porque comprende una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de hasta 8 aminoácidos y es suficientemente duplicativo de un segundo polipéptido, siendo el segundo polipéptido un fragmento polipeptídico definido de conformidad con la reivindicación 6, tal que el primer polipéptido se codifica por un ADN que se hibridiza bajo condiciones severas con ADN que codifica el segundo polipéptido. 24. El primer polipéptido de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 18 a 23, caracterizado porque el primer polipéptido es al menos de 8 aminoácidos de 48 longitud. 25. El primer polipéptido que promueve el crecimiento óseo en mamíferos caracterizado porque comprende una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de hasta 13 aminoácidos y es suficientemente duplicativo de un segundo polipéptido, siendo el segundo polipéptido un fragmento polipeptidico definido de conformidad con la reivindicación 8, tal que el primer polipéptido se codifica por un ADN que se hibridiza bajo condiciones severas con ADN que codifica el segundo polipéptido. 26. El primer polipéptido que promueve el crecimiento óseo en mamíferos caracterizado porque comprende una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de hasta 12 aminoácidos y es suficientemente duplicativo de un segundo polipéptido, siendo el segundo polipéptido un fragmento polipeptidico definido de conformidad con la reivindicación 9, tal que el primer polipéptido se codifica por un ADN que se hibridiza bajo condiciones severas con ADN que codifica el segundo polipéptido. 27. El primer polipéptido que promueve el crecimiento óseo en mamíferos caracterizado porque comprende una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de hasta 11 aminoácidos y es suficientemente duplicativo de un segundo polipéptido, siendo el segundo polipéptido un fragmento polipeptidico definido de conformidad con la 49 reivindicación 10, tal que el primer polipéptido se codifica por un ADN que se hibridiza bajo condiciones severas con ADN que codifica el segundo polipéptido. 28. El primer polipéptido que promueve el crecimiento óseo en mamíferos caracterizado porque comprende una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de hasta 10 aminoácidos y es suficientemente duplicativo de un segundo polipéptido, siendo el . segundo polipéptido un fragmento polipeptídico definido de conformidad con la reivindicación 11, tal que el primer polipéptido se codifica por un ADN que se hibridiza bajo condiciones severas con ADN que codifica el segundo polipéptido. 29. El primer polipéptido que promueve el crecimiento óseo en mamíferos caracterizado porque comprende una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de hasta 9 aminoácidos y es suficientemente duplicativo de un segundo polipéptido, siendo el segundo polipéptido un fragmento polipeptídico definido de conformidad con la reivindicación 12, tal que el primer polipéptido se codifica por un ADN que se hibridiza bajo condiciones severas con ADN que codifica el segundo polipéptido. 30. El primer polipéptido que promueve el crecimiento óseo en mamíferos caracterizado porque comprende una secuencia de aminoácidos que consiste esencialmente de hasta 8 aminoácidos y es suficientemente duplicativo de un 50 segundo polipéptido, siendo el segundo polipéptido un fragmento polipeptídico definido de conformidad con la reivindicación 13, tal que el primer polipéptido se codifica por un ADN que se hibridiza bajo condiciones severas con ADN que codifica el segundo polipéptido. 31. El polipéptido de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 30, caracterizado porque el polipéptido es sustancialmente puro y el polipéptido tiene un peso molecular en el rango de aproximadamente 1000 hasta aproximadamente 4000, o de aproximadamente 1200 a 3000 o de aproximadamente 1200 a 3000 o de aproximadamente 1800, o de aproximadamente 1200 a 1500. 32. El agente para uso en la prevención y tratamiento de una enfermedad relacionada a reducción ósea caracterizado porque comprende un polipéptido de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31, como un ingrediente activo. 33. La composición farmacéutica para promover crecimiento óseo, caracterizada porque comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un polipéptido de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31. 34. El método para incrementar el crecimiento óseo en un mamífero al administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un polipéptido caracterizado porque tiene una secuencia de aminoácidos de un polipéptido definido de 51 conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31. 35. El uso de un polipéptido de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31 para el tratamiento de osteoporosis. 36. El uso de un polipéptido de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31 para promover el crecimiento óseo en un mamífero. 37. El uso de un polipéptido de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31, en la preparación de un medicamento para uso para promover el crecimiento óseo o el tratamiento de osteoporosis. 38. El equipo de diagnóstico para determinar la presencia de un polipéptido de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31, caracterizado porque comprende un anticuerpo para el polipéptido enlazado a un sistema reportero en donde el sistema reportero produce una respuesta detectable cuando una cantidad predeterminada del polipéptido y el anticuerpo se unen juntos. 39. El fragmento de ADN aislado caracterizado porque codifica la expresión de cualquiera de los polipéptidos de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31, y ADN que difiere del fragmento debido a la degeneración del código genético. 40. El vector caracterizado porque comprende una secuencia de ADN que codifica la expresión de cualquiera de 52 los polipéptidos de conformidad con las reivindicaciones 1 a 31. 41. El vector caracterizado porque comprende una secuencia de ADN heterólogo que comprende un fragmento de ADN de conformidad con la reivindicación 39. 42. El proceso para producir un polipéptido de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31, caracterizado porque comprende: a) preparar un fragmento de ADN que contiene una secuencia de nucleótidos que codifica el polipéptido; b) incorporar el fragmento de ADN dentro de un vector de expresión para obtener un fragmento de ADN recombinante que contiene el fragmento de ADN y es capaz de sufrir duplicación; d) transformar una célula huésped con el fragmento de ADN recombinante para aislar un transformante que puede expresar el polipéptido; y d) cultivar el transformante para permitir que el transformante produzca el polipéptido y recuperar el polipéptido de la mezcla cultivada resultante. 43. Un polipéptido aislado que consiste de la secuencia de aminoácidos identificada como SEC. DE IDENT. NO. : 18. 44. La composición farmacéutica para promover el crecimierto óseo, caracterizada porque comprende una cantidad 53 terapéuticamente efectiva del polipéptido de conformidad con la reivindicación 43. 45. El uso de un polipéptido de conformidad con la reivindicación 43, para el tratamiento de osteoporosis. 46. El uso de un polipéptido de conformidad con la reivindicación 43, para promover el crecimiento óseo en un mamífero . 47. El uso de un polipéptido de conformidad con la reivindicación 43, para la preparación de un medicamento para uso para promover el crecimiento óseo o el tratamiento de osteoporosis .