MX2015002463A - Metodos de recubrimiento de semillas mediante el uso de composiciones que comprenden agonistas del receptor de rianodina. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere generalmente al control de plagas que causan daños a las plantas de cultivo. La invención se refiere a métodos y composiciones para mejorar la protección de una planta contra los invertebrados o para reducir el desarrollo de resistencia a las diamidas en invertebrados que comprenden el uso de agonistas del receptor de rianodina. En algunas modalidades, esta incluye métodos para el uso de mezclas de agonistas del receptor de rianodina con otros modos de resistencia a plagas, tales como otros compuestos pesticidas y/o plantas de cultivo transgénicas resistentes a plagas. Opcionalmente, pueden usarse inoculantes biológicos para mejorar la salud general de la planta.

Description

MÉTODOS DE RECUBRIMIENTO DE SEMILLAS MEDIANTE EL USO DE COMPOSICIONES QUE COMPRENDEN AGONISTAS DEL RECEPTOR DE RIANODINA CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a métodos para el control de plagas de invertebrados y el manejo de la resistencia a plagas de invertebrados en plantas de cultivo.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN El control de las plagas de invertebrados es extremadamente importante para lograr elevada eficiencia en los cultivos. Los daños por plagas de invertebrados a los cultivos agronómicos pueden causar una importante reducción en la productividad y de ese modo resultar en mayores costos para el consumidor.

Los invertebrados, tales como Lepidópteros, destruyen anualmente un estimado de 15 % de los cultivos agrícolas en los Estados Unidos y otros países. Anualmente, estas plagas ocasionan más de $100 mil millones de dólares en daños en cultivos solo en los Estados Unidos. En Sudamérica, los daños importantes a cultivos de campo, tales como la soja, son causados por la oruga de las leguminosas ( Anticarsia gemmatalis) y, además, por otros lepidópteros, tales como el gusano cogollero, el falso medidor de la soja y el barrenador menor del tallo del maíz.

Ref.253389 Una parte de este daño se produce en el suelo cuando los patógenos vegetales, invertebrados y otras plagas del suelo atacan la semilla después de la plantación. Otro daño se produce después de emerger el follaje de la planta y las plagas por encima del suelo, momento en el que las plagas por encima del suelo dañarán de manera importante el follaje de la planta, lo que limita de ese modo el rendimiento de la planta. El tipo y los mecanismos de ataque de las plagas en los cultivos agrícolas se describen de manera general, por ejemplo, en Metcalf (1962), in Destructive and Useful Insects, 4.°, ed. (McGraw-Hill Book Co., NY); y Agrios (1988), en Plant Pathology, 3.° ed. (Academic Press, NY).

En una batalla estacional en curso, los agricultores aplican billones de galones de pesticidas sintéticos para combatir estas plagas. Sin embargo, los pesticidas sintéticos plantean muchos problemas. Son caros, y le cuestan a los agricultores estadounidenses solos casi $8 mil millones de dólares por año. Estos fuerzan la emergencia de plagas resistentes a insecticidas, y pueden dañar el medio ambiente. Las aplicaciones de pesticidas posteriores a la siembra requieren pases a través del campo que usan combustibles fósiles y resultan en la compactación del suelo.

La preocupación por el impacto de los pesticidas en la salud pública y el medio ambiente ha llevado a realizar esfuerzos considerables para encontrar formas de reducir la cantidad de pesticidas químicos que se usan. Recientemente, buena parte de este esfuerzo se ha enfocado en el desarrollo de cultivos transgénicos que están diseñados genéticamente para expresar sustancias tóxicas derivadas de Bacillus thuringiensis así como también el desarrollo de la aplicación de pesticidas para el tratamiento de semilla. Si bien las aplicaciones para el tratamiento de semilla son útiles en las etapas tempranas del desarrollo de la planta, su eficacia típicamente disminuye apracimadamente en el momento en que las plagas por encima del suelo que se alimentan de las hojas emergen y se alimentan del follaje de la planta.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Se ha descubierto de manera sorprendente que los agonistas del receptor de rianodina proporcionan protección extendida a las plantas de frijol de soja mucho más allá del período de tiempo típicamente esperado, y proporcionan protección contra las plagas que se alimentan por encima del suelo bien dentro del ciclo de vida foliar de las plantas de frijol de soja. Se predice que estos resultados se aplicarán, además, a otras leguminosas, y/o otras plantas de raíces profundas. Se han diseñado programas de manejo de resistencia a insectos que utilizan este sorprendente resultado para mejorar la eficacia y la durabilidad de la resistencia de los cultivos a lepidópteros y otros invertebrados en el frijol de soja y otras leguminosas, y/o otras plantas de 'raíces profundas .

Los compuestos para usar en la presente invención comprenden diamidas, y más específicamente, diamidas antranílicas y/o diamidas itálicas. Estas incluyen un compuesto de la fórmula 1 o fórmula 2 como se proporcionan más abajo.

Fórmula 1: 1 en donde X es N, CF, CC1, CBr o Cl; R1 es CH3, Cl, Br o F; R2 es H, F, Cl, Br o ciano; R3 es F, Cl, Br, haloalquilo de C1-C4 haloalcoxi de C1-C4; R4a es H, alquilo de C1-C4, ciclopropilmetilo o 1-ciclopropiletilo; R4b es H o CH3; R5 es H, F, C1 o Br; y R6 es H, F, C1 o Br.

Fórmula 2 : 2 en donde R7 es CH3/ Cl, Br o I; R8 es CH3 O Cl; R9 es fluoroalquilo de C1-C3; R10 es H o CH3 ; R11 es H o CH3 ; R12 es alquilo de C1-C2 ; y n es 0 , 1 o 2 .

Estos compuestos y mezclas que comprenden estos compuestos se describen más específicamente y se describen en W02001/070671, W02003/015519, W02004/067528, W02006/007595, W02006/068669 y US6,603,044, los que se incorporan en la presente descripción como referencia. Las formulaciones específicas y métodos de uso se describen en 02003/015518, W02003/024222, W02007/081553, W02008/021152, W02008/069990 y US2012/0149567, los que se incorporan en la presente descripción como referencia. Otras formulaciones de diamidas antranílicas se conocen, tales como las reportadas en Dinter, y otros, "Clorantraniliprol (Rinaxipir): A novel DuPont™ insecticide with low toxicity and low risk for honcy bees (Apis mellifera) and bumble bees (Bo bus terrestris) providing excellent tools for uses in integrated pest management", Julius-Kühn-Archiv 423, 2009.

La invención se refiere a un método para mejorar la protección de una planta contra invertebrados o para reducir el desarrollo de resistencia a las diamidas en los invertebrados que comprende el uso de agonistas del receptor de rianodina. En algunas modalidades, esta incluye métodos para el uso de mezclas de agonistas del receptor de rianodina con otros modos de resistencia a plagas, tales como otros compuestos pesticidas y/o plantas de cultivo transgénicas resistentes a plagas. Las modalidades específicas incluyen el uso de diamidas antranílicas y/o diamidas ftálicas.

La invención se refiere a un método para el control de una plaga de invertebrados capaz de dañar la planta de frijol de soja o para reducir el desarrollo de resistencia a una diamida antranílica y/o una diamida itálica, que comprende poner en contacto la plaga de invertebrados o su medio ambiente con una cantidad biológicamente eficaz de una diamida antranílica y/o una diamida ftálica, y opcionalmente con al menos un componente pesticida adicional que no se une a los receptores de rianodina del invertebrado. En algunas modalidades, esta incluye métodos para el uso de una mezcla de un agonista del receptor de rianodina con otros modos de resistencia a plagas, tales como otro compuesto pesticida y/o unas plantas de cultivo transgénicas resistentes a plagas.

Esta invención se refiere, además, a los métodos en donde la plaga de invertebrados o su medio ambiente se pone en contacto con una composición que comprende una cantidad biológicamente eficaz de un compuesto de Fórmula 1 o 2, un N-óxido, o una sal de este, y al menos un componente adicional seleccionado del grupo que consiste en tensioactivos, diluyentes sólidos y diluyentes líquidos, la composición que comprende, además, opcionalmente una cantidad biológicamente eficaz de al menos un compuesto o agente biológicamente activo adicional, siempre y cuando los métodos no sean métodos de tratamiento médico mediante terapia de un cuerpo humano o animal.

La invención se refiere, además, a una semilla que comprende resistencia a plagas, en donde la semilla tiene al menos dos, al menos tres, al menos cuatro o al menos cinco o más capas de tratamiento de semilla, y en donde al menos una capa comprende una diamida, tal como una diamida antranílica y/o una diamida itálica, con un primer modo de acción que comprende la unión a los receptores de rianodina del invertebrado. La semilla puede comprender resistencia transgénica a plagas. Opcionalmente, pueden usarse otros compuestos pesticidas para el tratamiento de semilla. En algunas modalidades, los compuestos pesticidas adicionales pueden estar presentes en la semilla en una capa posterior aplicada después de la aplicación de la primera capa que comprende el compuesto diamida.

La invención se refiere, además, a métodos de cultivo que usan el sorprendente resultado, tales como mediante la reducción del número de aplicaciones de insecticida foliar requeridas durante la temporada de cultivo. Por lo tanto, los métodos para cultivar un cultivo resistente a invertebrados que tratan la semilla de el cultivo con un compuesto diamida, que de ese modo resulta en la reducción del número de aplicaciones de insecticida foliar son, además, una modalidad de esta invención.

Los detalles adicionales con respecto a la invención descrita se proporcionarán en la siguiente descripción.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN En la siguiente descripción, varios términos son muy usados. Las definiciones siguientes se proporcionan para facilitar la comprensión de la invención.

Como se usa en la presente descripción, los términos "comprende", "que comprende", "incluye", "que incluyen", "tiene", "que tiene", "contiene", "que contiene", "caracterizado por" o cualquier otra variación de estos, se destina a cubrir una inclusión no exclusiva, sujeta a cualquier limitación indicada explícitamente. Por ejemplo, una composición, mezcla, proceso o método que comprende una lista de elementos no se limita necesariamente sólo a esos elementos sino que puede incluir otros elementos no enumerados expresamente o inherentes a la composición, mezcla, proceso o método.

La frase de transición "que consiste en" excluye cualquier elemento, etapa o ingrediente no especificado. Si está en la reivindicación, la frase cerrará la reivindicación a la inclusión de materiales distintos de los indicados a excepción de las impurezas normalmente asociadas con los mismos. Cuando la frase "que consiste en" aparece en una cláusula del cuerpo de una reivindicación, en lugar de seguir inmediatamente al preámbulo, esta limita sólo al elemento que se expone en esa cláusula; otros elementos no se excluyen de conformidad con la reivindicación en su conjunto.

La frase de transición "que consiste esencialmente en" se usa para definir una composición o un método que incluye materiales, etapas características, componentes o elementos, además de los descritos de manera literal, siempre y cuando estos materiales, etapas, características, componentes o elementos adicionales no afecten materialmente la(s) característica(s) básica(s) y novedosa(s) de la invención reivindicada. El término "que consiste esencialmente en" ocupa un nivel intermedio entre "qué comprende" y "que consiste en".

Cuando los solicitantes han definido una invención o una porción de esta con un término indefinido tal como "que comprende", debe comprenderse fácilmente que (a menos que se indique de otra manera) debe interpretarse que la descripción describe, además, la invención mediante el uso de los términos "que consiste esencialmente en" o "que consiste en".

Además, a menos que se indique expresamente lo contrario, "o" se refiere a un o inclusivo y no a un o exclusivo. Por ejemplo, una condición A o B se satisface mediante cualquiera de los siguientes: A es verdadero (o presente) y B es falso (o no presente), A es falso (o no presente) y B es verdadero (o presente), y tanto A como B son verdaderos (o presentes).

Además, los artículos indefinidos "un" y "una" que preceden a un elemento o componente de la invención están destinados a ser no restrictivos con respecto al número de casos (es decir ocurrencias) del elemento o componente. Por lo tanto debe leerse que "un" o "una" incluyen uno(a) o al menos uno(a), y la forma singular de la palabra del elemento o componente incluye, además, el plural a menos que el número esté obviamente en singular.

Como se refiere en esta descripción, el término "plaga de invertebrados" incluye artrópodos, gastrópodos, nemátodos y helmintos de importancia económica como plagas. El término "artrópodo" incluye insectos, ácaros, arañas, escorpiones, centípedos, milípedos, cochinillas y sínfilos. El término "gastrópodo" incluye caracoles, babosas y otros estilomatóforos. El término "nemátodo" incluye los miembros del phylum Nematoda, tales como nemátodos fitófagos y nemátodos helmintos que parasitan animales. El término "helminto" incluye todos los gusanos parásitos, tales como gusanos redondos (phylum Nematoda), gusanos del corazón (phylum Nematoda, clase Secernentea), tremátodos (phylum Platyhelminth.es, clase Tematoda), acantocefalanos (phylum Acanthocephala), y tenias (phylum Platyhelminthes, clase Cestoda). En el contexto de esta descripción "control de la plaga de invertebrados" significa la inhibición del desarrollo de la plaga de invertebrados (que incluye mortalidad, reducción de la alimentación, y/o interrupción del apareamiento), y las expresiones relacionadas se definen de forma análoga.

Una "parcela" se refiere a un área en donde se plantan cultivos de cualquier tamaño. como se usa en la presente descripción, el término "modo de acción" se refiere a los medios biológicos o bioquímicos por los que una estrategia o compuesto para el control de plagas inhibe la alimentación de plagas y / o aumenta la mortalidad de la plaga.

El ttéérrmmiinnoo "planta de cultivo transgénica resistente a plagas" se refiere a una planta o progenie de ella (que incluyen semillas) derivadas de una célula o protoplasto vegetal transformado, en donde el ADN de la planta contiene la introducción de una molécula de ADN heterólogo, no presente originalmente en una planta no transgénica natural de la misma cepa, que confiere resistencia a una o más plagas de invertebrados. El término se refiere al transformante original y a la progenie del transformante que incluye el ADN heterólogo, que incluye la progenie producida por un cruzamiento sexual entre el transformante y otra variedad que incluye el ADN heterólogo. Debe comprenderse además que pueden aparearse dos plantas transgénicas diferentes para producir descendientes que contienen independientemente dos o más genes heterólogos segregantes adicionados.

Como se usa en la presente descripción, el término "frijol de soja" se refiere a Glycine max, incluidas las subespecies que se usan para la producción de grano comercial. En una modalidad, los métodos descritos son útiles para el control de la resistencia en una parcela de frijol de soja transgénico resistente a plagas.

Como se usa en la presente descripción, los términos "pesticida", "actividad pesticida" y "compuesto pesticida" se usan como sinónimos para referirse a la actividad de un organismo o de una sustancia (tal como, por ejemplo, una proteína o compuesto pesticida) que puede medirse, a manera de un ejemplo no limitante, por la mortalidad de la plaga, pérdida de peso de la plaga, repelencia de la plaga, reducción de la defoliación de la planta, y otros cambios de comportamiento y físicos de una plaga o después de la alimentación y de la exposición durante un periodo de tiempo adecuado. Las plagas incluyen pero no se limitan a plagas de invertebrados, insectos, patógenos fúngicos y patógenos bacterianos. De esta manera, la actividad pesticidal afecta, frecuentemente, al menos un parámetro medible de la aptitud de las plagas. Por ejemplo, el pesticida puede ser un polipéptido para disminuir o inhibir la alimentación del invertebrado para incrementar la mortalidad del insecto después de la ingestión del polipéptido. Los ensayos para evaluar la actividad pesticida son muy conocidos en la materia. Los términos "insecticida", "actividad insecticida" y "compuesto insecticida" se usan de forma sinónima para referirse a pesticida(s) con actividad principalmente dirigida hacia plagas de invertebrados. Los pesticidas e insecticidas adecuados para usar como parte de la invención se conocen y enumeran, por ejemplo, en The Pesticide Manual , 11.° ed., (1997) ed. C. D. S. Tomlin (British Crop Protection Council, Farnham, Surrcy, Reino Unido). Cuando un compuesto se describe en la presente descripción, debe comprenderse que la descripción pretende incluir las formas de sales así como también cualquier forma isomérica y/o tautomérica que exhibe el mismo tipo de actividad. El término "pesticida" se usa para referirse a un efecto tóxico contra una plaga ( por ejemplo, anticarsia), e incluye actividad de cualquiera, o ambos de un pesticida suministrado externamente y/o un agente que es producido por las plantas de cultivo. El término "insecticidal" se refiere a pesticidas con actividad dirigida principalmente hacia las plagas de invertebrados.

Como se usa en la presente descripción, "el término" gen pesticida" o polinucleótido pesticida se refiere a una secuencia de nucleótidos que codifica un polipéptido que exhibe actividad pesticida. Como se usa en la presente descripción, los términos "polipéptido pesticida", "proteína pesticida", o "toxina pesticida" están previstos para referirse a una proteína que tiene actividad pesticida.

Como se usa en la presente descripción, el término "tratamiento de semilla" se refiere al tratamiento de la semilla o propágulos usados para la generación o regeneración de la planta. Para el frijol de soja el tratamiento se, típicamente, producirá antes de la plantación a través de recubrimiento de semillas, aunque dependiendo de la dosis, momento y el método de aplicación; el tratamiento puede, además, ocurrir en el surco a la siembra. El tratamiento de semilla antes de la siembra puede producirse antes de la venta, y la capa adicional de tratamiento de semilla puede producirse más cerca del momento de la siembra, como es a veces el caso cuando los microbios o sus esporas se aplican a la semilla como un recubrimiento para el tratamiento de semilla. Como se usa en la presente descripción, el tratamiento de semilla incluye todos los tratamientos de semilla aplicados a la semilla, independientemente de si los compuestos se aplican en combinación o secuencialmente. Los compuestos aplicados secuencialmente resultan en dos o más capas de compuestos para el tratamiento de semilla que se aplican a la semilla. Típicamente, pero no necesariamente, se permitirá que la capa más externa se seque completamente o parcialmente antes de aplicar la siguiente capa.

Como se usa en la presente descripción, el término "transgénico" incluye cualquier célula, línea celular, callo, tejido, parte de una planta o planta cuyo genotipo ha sido alterado por la presencia de ácidos nucleicos heterólogos que incluyen los transgénicos alterados inicialmente de este modo, así como los creados por cruces sexuales o propagación asexual a partir del evento transgénico inicial. Como se usa en la presente descripción, el término "transgénico" no abarca la alteración del genoma (cromosómico o extracromosómico) por métodos convencionales de cultivo de plantas o por eventos de origen natural, tales como fertilización cruzada aleatoria, infección viral no recombinante, transformación bacterial no recombinante, transposición no recombinante o mutación espontánea.

Como se usa en la presente descripción/invención, el término "ug ai/semilla" se refiere a microgramos de ingrediente activo por semilla.

Como se usa en la presente descripción, el término "planta" incluye la referencia a plantas completas, órganos de la planta (por ejemplo, hojas, tallos, raíces, etc.), semillas, células vegetales, protoplastos vegetales, cultivos de tejidos de células vegetales a partir de los que pueden regenerarse las plantas, callos de la planta, masas vegetales, y células vegetales que están intactas en plantas o partes de plantas y la progenie de las mismas. Debe comprenderse que las partes de plantas que están dentro del alcance de la invención comprenden, por ejemplo, células vegetales, protoplastos, tejidos, callos, embriones así como también flores, polen, óvulos, semillas, ramas, granos, espigas, mazorcas, vainas, tallos, vástagos, frutos, hojas, raíces, ápices radiculares, anteras, y similares. Grano se refiere a la semilla madura producida por agricultores comerciales con otros propósitos aparte del cultivo o reproducción de especies.

Como se usa en la presente descripción, el término "célula vegetal" incluye, sin limitarse a, células de una planta, que incluyen sin limitarse a células a partir de semillas, cultivos en suspensión, embriones, regiones meristemáticas, tejido de callos, hojas, raíces, brotes, gametofitos, esporofitos, polen y microsporas. Las células vegetales regenerables son células vegetales que, cuando se aíslan, pueden regenerarse en una planta viva completa. Las células vegetales no regenerables son células vegetales que no se regeneran en una planta viva completa. La invención descrita en la presente descripción puede aplicarse a las células vegetales no regenerables. Por ejemplo, la Anticarsia puede alimentarse del follaje de una planta que no es capaz de regenerarse, especialmente en el medio ambiente de una parcela destinada a la producción de granos, y las células maceradas o ingeridas como resultado de la alimentación del invertebrado no son capaces de regenerarse. Un aspecto de la invención es la mejora de la duración de la resistencia en las células no regenerables de las que la plaga de la planta se ha alimentado o puede alimentarse. Otro aspecto es la mejora de la durabilidad del rasgo en esos tipos de células en general.

Como se usa en la presente descripción, el término "mejorar la resistencia a invertebrados" pretende referirse a que la planta tiene mayor resistencia a una o más plagas de invertebrados con relación a una planta que tiene un componente genético similar a excepción de la modificación genética y/o los tratamientos pesticidas descritos en la presente descripción. Las plantas modificadas genéticamente de la presente invención son capaces de expresar al menos una proteína insecticida, tal como pero sin limitarse a una proteína insecticida de Bt, que protege a una planta de una plaga de invertebrados. "Protege una planta de una plaga de invertebrados" pretende referirse a la limitación o eliminación del daño relacionado con una plaga de invertebrados a una planta, por ejemplo, mediante la inhibición de la capacidad de la plaga de invertebrados para crecer, alimentarse y/o reproducirse o al destruir la plaga de invertebrados. Como se usa en la presente descripción, "impactar una plaga de invertebrados de una planta" incluye, pero no se limita a, impedir que la plaga de invertebrados se siga alimentando de la planta, dañar la plaga de invertebrados, por ejemplo, al inhibir la capacidad de los invertebrados para crecer, alimentarse y/o reproducirse, o destruir la plaga de invertebrados.

Como se usa en la presente descripción, el término "proteína insecticida" o "polipéptido insecticida" se usa en su sentido más amplio e incluye, pero no se limita a, un polipéptido con efectos tóxicos o inhibidores en invertebrados, tales como cualquier miembro de la familia de proteínas de Bacillus thuringiensis descritos en la presente descripción y conocidos en la materia, e incluye, por ejemplo, las proteínas insecticidas vegetativas y las d-endotoxinas o toxinas cry. Por lo tanto, como se describe en la presente descripción, la resistencia a invertebrados puede conferirse a un organismo mediante la introducción de una secuencia de nucleótidos que codifica una proteína insecticida o mediante la aplicación de una sustancia insecticida, que incluye, pero no se limita a, una proteína insecticida, a un organismo (por ejemplo, una planta o parte de la planta de estos). Un "frijol de soja Bt" se refiere a una planta de frijol de soja que expresa un compuesto insecticida cuya secuencia se derivó en su totalidad o en parte de una proteína de Bacillus thuringiensis.

Aquellos con experiencia en la materia reconocerán que no todos los compuestos son igualmente eficaces contra todas las plagas. Los compuestos de las modalidades exhiben actividad contra plagas de invertebrados, que pueden incluir agronómicos económicamente importante, bosques, invernaderos, viveros, plantas ornamentales, de alimentos y fibras, para la salud pública y la sanidad animal, la estructura doméstica y comercial, el hogar y las plagas de productos almacenados.

Un "agente pesticida" es un pesticida^ que se suministra externamente a la planta de cultivo, o una semilla de la planta de cultivo. El término "agente insecticida" tiene el mismo significado que el agente pesticida, excepto que su uso se destina a aquellos casos en donde el agente pesticida se dirige principalmente hacia la plaga de invertebrados.

Como se usa en la presente descripción, el término "reducir el desarrollo de resistencia" significa que cuando se observa en una base poblacional en el tiempo (años), la frecuencia de genes de resistencia que se acumulan en la población será de una frecuencia inferior que si no se hubieran realizado las etapas para minimizar la propagación de tales genes de resistencia a través de la población.

El término "diamida" significa un compuesto que comprende dos grupos amido.

El término "receptor de rianodina" se refiere a una clase de canales de calcio intracelulares en células de invertebrados que muestran, típicamente, elevada afinidad por el alcaloide vegetal rianodina como uno de muchos compuestos que se unirán al receptor. Los compuestos antagonistas reducirán o bloquearán la actividad del canal de calcio. Los compuestos agonistas o activadores mejorarán la actividad del canal de calcio.

La siguiente tabla ayudará al lector con los acrónimos para las plagas de invertebrados. Note que la tabla enumera las plagas más comunes que son el objetivo de las estrategias de resistencia a plagas, pero la invención no se limita sólo a estas plagas.

Tabla 1. Plaga de invertebrados Lepidópteros Larvas del orden Lepidópteros incluyen, pero no se limitan a, orugas militares, gusanos cortadores, orugas medidoras, y heliotinas de la familia Noctuidae, Spodoptera frugiperda JE Smith (gusano cogollero); S. exigua Hübner (gusano soldado del betabel); S. litura Fabricius (gusano gris del tabaco, cluster de oruga); Mamestra configurata Walker (gusano soldado); M. brassicae Linnaeus (polilla de la col); Agrotis Ípsilon Hufnagel (gusano trozador); A. orthogonia Morrison (gusano cortador occidental) ; A. subterránea Fabricius (gusano cortador granular); Alabama argillacea Hübner (gusano de la hoja de algodón); Trichoplusia ni Hübner (gusano falso medidor de la col); Pseudoplusia includens Walker (falso medidor de la soja); Anticarsia gemmatalis (oruga de las leguminosas) Hypena scabra Fabricius (gusano verde del trébol); Heliothis virescens Fabricius (gusano bellotero del algodonero); Pseudaletia unipuncta Haworth (gusano soldado); Athetis mindara Barnes y McDunnough (gusano cortador rugoso de la piel); Euxoa messoria Harris (oruga cortadora oscura); Earias insulana Boisduval (oruga espinosa del algodonero); E. vittella Fabricius (gusano moteado); Helicoverpa arm gera Hübner (oruga del tomate); H. zea Boddie (gusano de la mazorca u oruga bolillera); Melanchra picta Harris (oruga cebra); Egira (Xylomyges) curialis Grote (gusano cortador de cítricos); barrenadores, taladrillos, gusanos tejedores, gusanos de las bellotas del pino y gusanos esqueletizadores de la familia Pyralidae, Ostrinia nubilalis Hübner (barrenador europeo del maíz); Amyelois transitella Walker (gusano de la naranja navel); Anagasta kuehniella Zeller (polilla mediterránea de la harina); Cadra cautella Walker (polilla de la almendra); Chilo suppressalis Walker (barrenador del tallo del arroz); C. partellus , (barrenador del sorgo); Corcyra cephalonica Stainton (polilla del arroz); Crambus caliginosellus Clemens (oruga tejedora de la raíz del maíz); C. tet errellus Zincken (gusanos tejedores del pasto); Cnaphalocrocis medinalis Guenée (enrollador de hojas de arroz); Desmia funeralis Hübner (gusano enrollador de la uva); Diaphania hyalinata Linnaeus (gusano del melón); D. nitidalis Stoll (gusano del pepino); Diatraea grandiosella Dyar (barrenador del tallo del maíz), D. saccharalis Fabricius (barrenador de la caña de azúcar); Eoreuma loftini Dyar (taladrador mexicano del arroz); Ephestia elutella Hübner (polilla del tabaco (cacao) ) ; Gallería mellonella Linnaeus (polilla mayor de la cera); Herpetogramma licarsisalis Walker (gusano tejedor de césped); Homoeosoma electellum Hulst (gusano del girasol); Elasmopálpus lignosellus Zeller (taladrador menor del tallo del maíz); Achroia grisella Fabricius (polilla menor de la cera); Loxostege sticticalis Linnaeus (gusano tejedor de la remolacha); Orthaga thyrisalis Walker (gusano tejedor del árbol del té); Maruca testulalis Gcyer (barrenador de la vaina); Plodia interpunctella Hübner (polilla india de la harina); Udea rubigalis Guenée (gusano de la hoja del apio); y enrolladores de hojas, gusanos del capullo, gusanos de semilla y gusanos de frutos en la familia Tortricidae, Acleris gloverana Walsingham (gusano occidental de cabeza negra); A. variana Fernald (gusano de los capullos de cabeza negra oriental); Archips argyrospila Walker (enrollador de hojas de los frutos); A. rosana Linnaeus (enrollador de hojas europeo); y otras especies Archips, Adoxophyes orana Fischer von Rósslerstamm (oruga de la piel de los frutos); Cochylis hospes Walsingham (polilla de bandas del girasol); Cydia latiferreana Walsingham (gusano de la avellana); C. pomonella Linnaeus (polilla de la manzana); Platynota flavedana Clemens (enrollador de la hoja variegada); P. stultana Walsingham (enrollador de hojas omnívoro); Lobesia botrana Denis & Schiffermüller (polilla europea de la uva); Spilonota ocellana Denis & Schiffermüller (polilla del capullo de ojo moteado); Endopiza viteana Clemens (polilla de la baya); Eupoecilia ambiguella Hübner (polilla de la vid); Bonagota salubricola Mcyrick (enrollador de la manzana brasileña); Grapholita molesta Busck (polilla oriental del fruto); Suleima helianthana Riley (polilla del brote del girasol); Argyrotaenia spp. ; Choristoneura spp.

Otras plagas agronómicas seleccionadas del orden Lepidoptera incluyen, pero no se limitan a, Alsophila pometaria Harris (gusano del otoño); Anarsia lineatella Zeller (minadora del melocotonero); Anisota senatoria J.E. Smith (gusano del roble de rayas naranjas); Antheraea pernyi Guérin-Méneville (polilla de seda del roble de china) ; Bombyx mori Linnaeus (gusano de seda); Bucculatrix thurberiella Busck (perforador de la hoja del algodón); Colias eurytheme Boisduval (oruga de la alfalfa); Datana integerrima Grote & Robinson (oruga de la nuez); Dendrolimus sibiricus Tschetwerikov (polilla de seda siberiana) , Ennomos subsignaria Hübner (gusano del olmo); Erannis tiliaria Harris (gusano falso medidor del tilo); Euproctis chrysorrhoea Linnaeus (polilla de cola marrona); Harrisina americana Guérin-Méneville (esqueletizador de la hoja de uva); Hemileuca oliviae Cockrell (polillas de Cryan) ; Hyphantria cunea Drury (gusano tejedor del otoño); Kei feria lycopersicella Walsingham (gusano alfiler del tomate) ; Lambdina fiscellaria fiscellaria Hulst (falso medidor del abeto oriental); L. fiscellaria lugubrosa Hulst (falso medidor del abeto occidental); Leucoma salicis Linnaeus (polilla satinada); Lymantria dispar Linnaeus (polilla gitana); Manduca quinquemaculata Haworth (polilla de cinco manchas, gusano del cuerno del tomate); M. sexta Haworth (gusano cornudo del tomate, gusano cornudo del tabaco); Operophtera brumata Linnaeus (polilla de invierno); Paleacrita vernata Peck (gusano falso medidor de primavera); Papilio cresphontes Cramer (cola de golondrina gigante, perro naranja); Phryganidia cali fornica Packard (gusano del roble de california) ; Phyllocnistis citrella Stainton (minador de cítricos); Phyllonoryc ter blancardella Fabricius (minador tentiforme manchado) ; Pieris brassicae Linnaeus (mariposa blanca grande de la col); P. rapae Linnaeus (mariposa blanca pequeña de la col); P. napi Linnaeus (mariposa blanca verde-veteada) ; Platyptilia carduidactyla Rilcy (polilla de penacho de alcachofa) ; Plutella xylostella Linnaeus (polilla de dorso de diamante); Pectinophora gossypiella Saunders (oruga rosada); Pontia protodice Boisduval & Leconte (gusano de la col del sur); Sabulodes aegrotata Guenée (falso medidor omnívoro); Schizura concinna J.E. S ith (oruga roja jorobada); Sitotroga cerealella Olivier (polilla del grano de Angoumois); Thaumetopoea pityocampa Schiffermuller (oruga procesionaria de pino) ; Tineola bisselliella Hummel (polilla tejedora de la ropa); Tuta absoluta Meyrick (polilla minadora del tomate); Yponomeuta padella Linnaeus (polilla de armiño); Heliothis subflexa Guenée; Malacosoma spp . y Orgyia spp.

Ejemplo 1 - dosis 120 ug ai/semilla Las semillas de frijol de soja se trataron con clorantraniliprol a un índice de 120 ug ai/semilla. Las semillas se sembraron en campos de lecho de suelo con un tamaño de 6 metros de longitud y 4 hileras de 40 cm de ancho. Se recolectaron muestras de hojas en la etapa de crecimiento del frijol de soja de la 3.° a la 7.° hoja trifoliada y se llevaron al laboratorio. Se realizó el bioensayo de laboratorio-campo (LBF) de la hoja para cada etapa del crecimiento del frijol de soja mediante el uso de la oruga de las leguminosas (VBC) ( Anticarsia gemmatalis ) exponiendo las hojas a la etapa de larva de 2.° instar. Cada grupo de tratamiento se replicó 4 veces, y los resultados (Tabla 2) están expresados como % de mortalidad larval. A los 43 días después de la siembra, la tasa de mortalidad larval de VBC fue 88 %.

Ejemplo 2 - dosis 100 ug ai/semilla (área 1) Las semillas de frijol de soja se trataron con clorantraniliprol a un índice de 100 ug ai/semilla. Las semillas se sembraron en campos de lecho de suelo (área 1) con un tamaño de 8 metros por 8 metros, con un área de 64 m2. Las parcelas se replicaron 4 veces. La evaluación se basó en el número total de larvas de oruga de las leguminosas (VBC) (Anticarsia gemmatalis) por metro de 37 a 63 días después de la siembra (DAP), y se convirtió a % de reducción del conteo de larvas en comparación con las no tratadas (Tabla 3).50 días después de la siembra, la reducción de larvas de VBC aún era 73 %, y después de 63 días tenían actividad al 35 %.

Ejemplo 3 - dosis 100 ai (área 2) Las semillas de frijol de soja se trataron con clorantraniliprol a un índice de 100 ug ai/semilla. Las semillas se sembraron en campos de lecho de suelo (área 2) con un tamaño de 8 metros por 8 metros, con un área de 64 m2. Las parcelas se replicaron 4 veces. La evaluación se basó en el número total de larvas de oruga de las leguminosas (VBC) ( Anticarsia gemmatalis) por metro de 37 a 63 días después de la siembra (DAP), y se convirtió a % de reducción del conteo de larvas en comparación con las no tratadas. Sorprendentemente, la reducción de larvas aumentó entre 50 a 63 días después de la siembra, con una reducción de larvas a 43 % después de 63 días (Tabla 4).

Ejemplo 4 - Modelo A la luz de la sorprendente duración extendida de la eficacia observada en frijoles de soja con aplicación de agentes de unión al receptor de rianodina para el tratamiento de semilla, se modelaron y diseñaron novedosas estrategias para el manejo de la resistencia a invertebrados que se anticipa que resulten en un aumento en la actividad insecticida en una planta y en una reducción del desarrollo de resistencia a los agentes pesticidas por los invertebrados. La modelación se produjo por medio de la simulación computarizada basada en los datos del Ejemplo 1 proporcionado anteriormente.

Parámetros y suposiciones del modelo Los componentes del sistema de modelación fueron los siguientes: (1) una formulación para el tratamiento de semilla que comprende un agente de unión al receptor de rianodina conocido como clorantraniliprol, (2) un insecticida foliar, donde se asumió que los insecticidas foliares causan la mortalidad de chinches y lepidópteros pero cuya mortalidad no seleccionó para la resistencia al insecticida foliar, (3) uno o dos rasgos de Bt en frijol de soja transgénico usados que seleccionaron para la resistencia, y (4) la presencia de una o más orugas de las leguminosas (Anticarsia gemmatalis). Los insecticidas foliares se incluyeron en el modelo porque el manejo de chinches para proteger las vainas y semillas en desarrollo es una práctica estándar en Brasil, y algunas de las aspersiones foliares pueden tener actividad contra los lepidópteros.

El modelo siguió los cambios en las frecuencias genotípicas. Se asumió que el invertebrado tenía un gen principal para la resistencia a cada protector de la planta, y que cada locus era autosómico y dialélico, sin vínculo entre los loci. Se asumió, además, que no se produjeron mutaciones después del inicio de la simulación, no hubo costos de aptitud debido a la resistencia, no hubo resistencia cruzada entre los genes de resistencia, y la supervivencia a múltiples toxinas fue el producto de las proporciones de supervivencia a cada toxina sola.

Se usó para el modelo un paisaje brasileño. El paisaje se representó por dos parcelas de frijol de soja: bloque de refugio de frijol de soja sin insecticida y bloques de frijol de soja cón insecticidas. Los insecticidas son la formulación de clorantraniliprol para el tratamiento de semilla, el frijol de soja Bt transgénico de un solo rasgo o el frijol de soja Bt transgénico tratado con la formulación de clorantraniliprol.

La literatura indicó que el período de huevo a pupa de Anticarsia gemmatalis dura aproximadamente 25 días. Los datos sugieren, además, que los cultivares de frijol de soja típicos empiezan a amarillear y a perder las hojas aproximadamente 125 días después de la germinación. Por lo tanto, el modelo asumió que hubo 5 generaciones de insectos distintas por temporada de cultivo del frijol de soja de igual longitud, y que los insecticidas foliares afectarían las tres últimas generaciones de insectos en los bloques de refugio.

Las polillas de Anticarsia gemmatalis son voladores fuertes, de manera que se espera la dispersión entre campos y parcelas. El modelo asumió que el apareamiento es aleatorio en todas las parcelas y campos de frijol de soja y, además, asumió que los huevos están uniformemente distribuidos en toda la región, de tal manera que la probabilidad de las larvas de estar en cada parcela es igual a la proporción del paisaje compuesto de cada parcela.

El modelo asumió que la dosis de Bt en la planta de frijol de soja no disminuye entre generaciones dentro de un año. La supervivencia de los heterocigóticos se basa en la expresión de la resistencia como recesiva o cercana a recesiva. Se usan tres curvas para la supervivencia en el tiempo para los homocigóticos susceptibles (SS), los heterocigóticos con un gen de resistencia (RS) y los homocigóticos recesivos con dos genes de resistencia (RR). Se asumieron las tasas de supervivencia multiplicativas para cada toxina/gen. El modelo calculó una función de supervivencia de los neonatos o larvas como una función de la dosis en el día de la infestación y otra función para la dosis como una función del tiempo desde la germinación del frijol de soja. La toxicidad del tratamiento de semilla se basa en el decaimiento exponencial de la dosis desde el inicio de la generación 1 de invertebrados, exp[-r(G-l)] donde G es la generación y r es la velocidad de decaimiento. La siguiente función se usó para predecir la supervivencia basada en la dosis al inicio de la generación.

Supervivencia (dosis) = 1/(l+eA(b+m·ln (dosis))) El modelo asumió, además, que 0.001 y 0.05 son las tasas de supervivencia de las larvas homocigóticas susceptibles (SS) en las generaciones uno y dos. Con la resistencia recesiva incompleta a la formulación de clorantraniliprol para el tratamiento de semilla, el modelo asumió que 0.01 y 0.36 son las tasas de supervivencia asociadas para los heterocigóticos (RS). La supervivencia de las larvas homocigóticas resistentes (RR) es siempre 1. Por lo tanto, el modelo asumió b=6.907 para SS y b=4.5951 para RS y b=-1000 para individuos RR. Se usó m=8 para todas las simulaciones y genotipos. Se evaluó una velocidad de decaimiento, r = -0.5, para la formulación de clorantraniliprol para el tratamiento de semilla en frijol de soja basado en los resultados del Ejemplo 1 (Tabla 2). En las tres últimas generaciones de insectos, el tratamiento de semilla destruye 25 %, 1 %, y 0 % de los SS y 3 %, 0 %, y 0 % de los RS.

Condiciones iniciales y análisis del modelo El modelo comenzó con cada alelo de resistencia en equilibrio Hardy-Weinberg y con una frecuencia de 0.001. La frecuencia inicial de cada genotipo se determinó asumiendo loci independientes.

El modelo se registró entonces cuando la población superó el 50 % de la frecuencia del alelo R para cada alelo de resistencia y evaluó 1 %, 5 %, o 20 % de los bloques de refugio para todos los insecticidas que incluyen el tratamiento de semilla.

Simulaciones de valores iniciales para los productos de frijol de soja Como se señaló anteriormente, el criterio del modelo para la durabilidad fue la frecuencia alelica que supera el 50 % para todos los alelos de resistencia. Las siguientes tablas reportan los años (y generaciones para los años menores que 15) durante los que la frecuencia alélica se modeló para superar el 50 %. La Tabla 5 presenta los resultados de las simulaciones con frijol de soja Bt. Como se esperaba, los refugios más grandes prolongan la durabilidad. Además, si el invertebrado tiene alelos de resistencia que son completamente recesivos, la evolución es más lenta. Los resultados de la formulación de clorantraniliprol para el tratamiento de semilla por sí sola se presentan en la Tabla Tabla 5. Tiempo requerido para que la frecuencia de los alelos de resistencia supere el 50 % cuando el frijol de soja Bt se despliega por sí solo, bajo las aptitudes relativas asumidas*.

Refugio Dominancia* Años Generaciones 1 % rec. incomp 2 8 5 % rec. incomp 5 22 20 % rec. incomp 17 1 % recesivo 4 18 5 % recesivo 13 62 20 % recesivo 53 * La supervivencia de los heterocigóticos es 0.01 para la resistencia recesiva incompleta y 0.003 para la condición recesiva.

Tabla 6. Tiempo requerido para que la frecuencia de los alelos de resistencia supere el 50 % cuando la formulación de clorantraniliprol para el tratamiento de semilla se despliega por sí sola, bajo la aptitud relativa asumida dependiente de la generación.

Refugio Años Generaciones 1.% 3 11 5 % 4 16 20 % 7 31 Simulaciones que demuestran el valor del tratamiento de semilla en la prolongación de la durabilidad del rasgo de Bt En todos los escenarios explorados las combinaciones de frijol de soja Bt más la formulación de clorantraniliprol para el tratamiento de semilla (Tabla 7) fueron más duraderas que el despliegue de frijol de soja Bt solo (Tabla 5) o la formulación de clorantraniliprol para el tratamiento de semilla sola (Tabla 6). Otra opción a considerar es el despliegue secuencial donde el segundo producto se despliega sólo después que la frecuencia del gen de resistencia para el primer producto supera el 50 %. Se espera que el despliegue de las combinaciones del frijol de soja Bt y la formulación de clorantraniliprol para el tratamiento de semilla retrase el tiempo de resistencia en función del despliegue secuencial de cada producto particularmente a niveles de refugio mayores y cuando la resistencia a Bt es completamente recesiva (Tabla 7).

Tabla 7. Años requeridos para que ambas frecuencias de los alelos de resistencia superen el 50 % cuando el frijol de soja Bt se despliega en combinación con una formulación de clorantraniliprol para el tratamiento de semilla, en comparación con el despliegue secuencial de cada producto.

Refugio Dominancia* Combinación Secuencial 1 % rec. incomp. 5 5 5 % rec. mcomp. 11 9 20 % rec. incomp. 36 24 1 % recesivo 9 7 5 % recesivo 25 17 20 % recesivo 100 60 * Para el frijol de soja Bt, la supervivencia de los heterocigóticos es 0.01 para la resistencia recesiva incompleta y 0.003 para la condición recesiva.

Como demuestra el modelo, pueden obtenerse beneficios al combinar el compuesto diamida con otros insecticidas con modos de acción diferentes, tales como, pero no se limitan a: (1) Clorantraniliprol 625 g/1 (25 ug ai/semilla) con Fipronil 250 g/1 (50 ug ai/semilla), Piraclostrobina 25 g/1 (5 ug ai/semilla), y tiofanato-metilo 225 g/1 (45 ug ai/semilla); (2) Clorantraniliprol 625 g/1 (25 ug ai/semilla) con Tiametoxam 350 g/1 (87.5 ug ai/semilla), Fludioxonil 25 g/1 (2.5 ug ai/semilla), Metalaxil-M 20 g/1(2 ug ai/semilla), y TBZ 150 g/1(15 ug ai/semilla); (3) Clorantraniliprol 625 g/1. (25 ug ai/semilla) con Tiametoxam 350 g/1 (87.5 ug ai/semilla), Abamectina 500 g/1 (50 ug ai/semilla), Fludioxonil 25 g/1 (2.5 ug ai/semilla), Metalaxil-M 20 g/1(2 ug ai/semilla), y TBZ 150 g/1(15 ug ai/semilla); y (4) Clorantraniliprol 625 g/1 (25 ug ai/semilla) con Clotianidina 600 g/1(60 ug ai/semilla).

Además, los mismos métodos pueden emplearse para múltiples plagas en la misma parcela. Ya que pueden usarse múltiples mecanismos de control de invertebrados en relación con un único tipo de semilla, es posible, por lo tanto, que los métodos descritos se usen contra múltiples plagas objetivo.

Aunque la invención se describe predominantemente con el uso de ejemplos de plagas que afectan el frijol de soja, la invención puede funcionar para otros cultivos donde se probó y observó el efecto extendido de la diamida. Tales cultivos pueden incluir otras leguminosas y cultivos con estructuras radiculares y sistemas vasculares de manera que la eficacia extendida de la diamida funcionará de manera similar a cómo funciona en los frijoles de soja.

Todas las publicaciones y solicitudes de patentes mencionadas en la descripción son indicativas del nivel de aquellos con experiencia en la materia a quienes se dirige la presente invención. Todas las publicaciones y solicitudes de patentes se incorporan en la presente descripción como referencia con el mismo alcance como si cada publicación o solicitud de patente individual se indicara específica e individualmente para incorporarla como referencia.

Aunque la presente invención se ha descrito detalladamente a modo de ilustración y ejemplo para los fines de claridad de comprensión, resultará obvio que es posible practicar ciertos cambios y modificaciones dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (40)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones:

1. Un método para mejorar la protección contra invertebrados de una planta de frijol de soja, o reducir el desarrollo de resistencia a las diamidas en una población de invertebrados, caracterizado porque comprende tratar la semilla de frijol de soja con al menos dos compuestos pesticidas, en donde al menos un compuesto pesticida es un insecticida de diamida que inhibe los receptores de rianodina del invertebrado presentes en una cantidad suficiente para conferir protección contra invertebrados al tejido por encima del suelo de la planta de frijol de soja por al menos 45 días después de la germinación de la semilla, y en donde al menos un compuesto pesticida no se une a los receptores de rianodina del invertebrado y está presente en una cantidad suficiente para conferir protección contra invertebrados a la planta de frijol de soja.

2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el invertebrado es una especie de Lepidópteros.

3. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el invertebrado es gusano cogollero, oruga de las leguminosas, falso medidor de la soja o barrenador menor del tallo del maíz.

4. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el invertebrado es Anticarsia.

5. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el insecticida de diamida comprende una diamida antranílica o una diamida ftálica.

6. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el insecticida de diamida es una diamida antranílica.

7. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el insecticida de diamida es seleccionado del grupo que consiste en clorantraniliprol y ciantraniliprol.

8. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la diamida es parte de una composición que comprende en peso basado en el peso total de la composición: (a) de aproximadamente 9 a aproximadamente 91 % de uno o más insecticidas de diamida; y (b) de aproximadamente 9 a aproximadamente 91 % de un componente copolímero estrella basado en acrilato/metacrilato que tiene una solubilidad en agua de al menos aproximadamente 5 % en peso a 20 °C., un valor de equilibrio hidrófilo-lipófilo de al menos aproximadamente 3, y un peso molecular promedio en el intervalo de aproximadamente 1,500 a aproximadamente 150,000 daltons; en donde la relación del componente (b) al componente (a) es aproximadamente 1:10 a aproximadamente 10:1 en peso.

9. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el índice de aplicación del insecticida de diamida es 25 ug ai/semilla, 50 ug ai/semilla, 100 ug ai/semilla, o mayor que 100 ug ai/semilla.

10. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el índice de aplicación del insecticida de diamida es 50 ug ai/semilla o menos.

11. El método de conformidad con la reivindicación I, caracterizado porque el compuesto pesticida que no se une a los receptores de rianodina del invertebrado es un polipéptido insecticida transgénico.

12. El método de conformidad con la reivindicación II, caracterizado porque el polipéptido insecticida es un polipéptido de Bacillus thuringiensis .

13. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto pesticida que no se une a los receptores de rianodina del invertebrado es seleccionado del grupo que consiste en un insecticida, un acaricida, un nematicida, un fungicida, un bactericida, o una combinación de estos.

14. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto pesticida que no se une a los receptores de rianodina del invertebrado es un inoculante biológico con actividad pesticida.

15. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto pesticida que no se une a los receptores de rianodina del invertebrado comprende uno o más compuestos seleccionados del grupo que consiste en abamectina, acetamiprid, avermectina, clotianidina, dinotefuran, fipronil, fludioxonil, imidacloprid, indoxacarb, lambda-cihalotrina, metalaxil, metalaxil-m, piraclostrobina, pimetrozina, espinosad, TBZ, tiacloprid, tiametoxam y tiofanato-metilo.

16. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende obtener una semilla tratada seca que comprende un insecticida de diamida, y posteriormente tratar la semilla con un compuesto pesticida que no se une a los receptores de rianodina del invertebrado.

17. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende las etapas de tratar una semilla con un insecticida de diamida, secar la semilla, y posteriormente tratar la semilla con un compuesto pesticida que no se une a los receptores de rianodina del invertebrado.

18. Un método para mejorar la protección contra invertebrados de una planta de frijol de soja o reducir el desarrollo de la resistencia a insecticidas de diamida en poblaciones de invertebrados, caracterizado porque comprende: (a) Obtener una semilla del cultivo que comprende un primer modo de acción de resistencia pesticida que no consiste en la unión de los receptores de rianodina, y (b) Tratar la semilla con un tratamiento de semilla que comprende un insecticida de diamida con un segundo modo de acción que comprende la unión a los receptores de rianodina del invertebrado, en donde la cantidad eficaz de el insecticida de diamida es suficiente para conferir protección contra los invertebrados a la planta de frijol de soja por al menos 45 días después de la germinación de la semilla.

19. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque el invertebrado es una especie de Lepidópteros.

20. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque el invertebrado es gusano cogollero, oruga de las leguminosas, falso medidor de la soja o barrenador menor del tallo del maíz.

21. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque el invertebrado es Anticarsia.

22. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque el insecticida de diamida comprende una diamida antranílica o una diamida itálica.

23. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque el insecticida de diamida es una diamida antranílica.

24. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque el insecticida de diamida es seleccionado del grupo que consiste en clorantraniliprol y ciantraniliprol.

25. El método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque la diamida es parte de una composición que comprende en peso basado en el peso total de la composición: (a) de aproximadamente 9 a aproximadamente 91 % de uno o más insecticidas de diamida; y (b) de aproximadamente 9 a aproximadamente 91 % de un componente copolímero estrella basado en acrilato/metacrilato que tiene una solubilidad en agua de al menos aproximadamente 5 % en peso a 20 °C., un valor de equilibrio hidrófilo-lipófilo de al menos aproximadamente 3, y un peso molecular promedio en el intervalo de aproximadamente 1,500 a aproximadamente 150,000 daltons; en donde la relación del componente (b) al componente (a) es aproximadamente 1:10 a aproximadamente 10:1 en peso.

26. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque el índice de aplicación del insecticida de diamida es 25 ug ai/semilla, 50 ug ai/semilla, 100 ug ai/semilla, o mayor que 100 ug ai/semilla.

27. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque el índice de aplicación del insecticida de diamida es 50 ai/semilla o menos.

28. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque el primer modo de acción de resistencia al pesticida que no consiste en la unión a los receptores de rianodina es un polipéptido insecticida transgénico.

29. El método de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque el polipéptido insecticida es un polipéptido de Bacillus thuringiensis .

30. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque el primer modo de acción de resistencia al pesticida que no consiste en la unión a los receptores de rianodina es seleccionado del grupo que consiste en un insecticida, un acaricida, un nematicida, un fungicida, un bactericida, o una combinación de estos.

31. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque el primer modo de acción de resistencia al pesticida que no consiste en la unión a los receptores de rianodina comprende uno o más compuestos seleccionados del grupo que consiste en abamectina, acetamiprid, avermectina, clotianidina, dinotefuran, fipronil, fludioxonil, imidacloprid, indoxacarb, lambda-cihalotrina, metalaxil, metalaxil-m, piraclostrobina, pimetrozina, espinosad, TBZ , tiacloprid, tiametoxam y tiofanato-metilo.

32. Semilla caracterizada porque comprende dos o más capas de tratamiento de semilla, en donde la primera capa comprende un insecticida de diamida que se une a los receptores de rianodina del invertebrado, y la segunda capa comprende un compuesto pesticida que no se une a los receptores de rianodina del invertebrado. 5

33. La semilla de conformidad con la reivindicación 32, caracterizada además porque el insecticida de diamida comprende una diamida antranílica o una diamida ftálica.

34. La semilla de conformidad con la reivindicación 32, caracterizada además porque el insecticida de diamida es ío una diamida antranílica.

35. La semilla de conformidad con la reivindicación 33, caracterizada además porque el insecticida de diamida es parte de una composición que comprende en peso basado en el peso total de la composición: (a) de aproximadamente 9 a 15 aproximadamente 91 % de uno o más insecticidas de diamida; y (b) de aproximadamente 9 a aproximadamente 91 % de un componente copolímero estrella basado en acrilato/metacrilato que tiene una solubilidad en agua de al menos aproximadamente 5 % en peso a 20 °C., un valor de equilibrio hidrófilo-20 lipófilo de al menos aproximadamente 3, y un peso molecular promedio en el intervalo de aproximadamente 1,500 a aproximadamente 150,000 daltons; en donde la relación del componente (b) al componente (a) es aproximadamente 1:10 a aproximadamente 10:1 en peso. 25

36. La semilla de conformidad con la reivindicación 32, caracterizada además porque el índice de aplicación del insecticida de diamida es 25 ug ai/semilla, 50 ug ai/semilla, 100 ug ai/semilla, o mayor que 100 ug ai/semilla.

37. La semilla de conformidad con la reivindicación 32, caracterizada además porque el índice de aplicación del insecticida de diamida es 50 ug ai/semilla o menos.

38. La semilla de conformidad con la reivindicación 32, caracterizada además porque el compuesto pesticida que no se une a los receptores de rianodina del invertebrado es seleccionado del grupo que consiste en un insecticida, un acaricida, un nematicida, un fungicida, un bactericida, o una combinación de estos.

39. La semilla de conformidad con la reivindicación 32, caracterizada además porque el compuesto pesticida que no se une a los receptores de rianodina del invertebrado es un inoculante biológico con actividad pesticida.

40. La semilla de conformidad con la reivindicación 32, caracterizada además porque el compuesto pesticida que no se une a los receptores de rianodina del invertebrado comprende uno o más compuestos seleccionados del grupo que consiste en abamectina, acetamiprid, avermectina, clotianidina, dinotefuran, fipronil, fludioxonil, imidacloprid, indoxacarb, lambda-cihalotrina, metalaxil, metalaxil-m, piraclostrobina, pimetrozina, espinosad, TBZ, tiacloprid, tiametoxam y tiofanato-metilo.